WO2015044348A1 - Prevention et/ou traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes - Google Patents

Prevention et/ou traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes Download PDF

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WO2015044348A1
WO2015044348A1 PCT/EP2014/070625 EP2014070625W WO2015044348A1 WO 2015044348 A1 WO2015044348 A1 WO 2015044348A1 EP 2014070625 W EP2014070625 W EP 2014070625W WO 2015044348 A1 WO2015044348 A1 WO 2015044348A1
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alkyl
alkenyl
aryl
compounds
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Cécile ENGUEHARD-GUEIFFIER
Simon GRAS
Mohamed ABARBRI
Jérôme THIBONNET
Anne SILVESTRE
Laurence SILPA
Julien PETRIGNET
Fabien BROSSIER
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Institut National de la Recherche Agronomique INRA
Universite de Tours
Original Assignee
Institut National de la Recherche Agronomique INRA
Universite Francois Rabelais de Tours
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    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Definitions

  • the present invention relates to the field of the prevention and / or treatment of parasitosis induced by parasites belonging to the phylum apicomplexes. More particularly, the present invention aims to provide novel compounds useful in the prevention and / or treatment of coccidiosis (Eimeria spp. Infections). The compounds of the present invention are also useful in the prevention and / or treatment of cryptosporidiosis (Cryptosporidium spp. Infections), toxoplasmosis (Toxoplasma gondii infections), neosporosis (infections induced by Neospora caninum). and / or malaria (Plasmodium spp. infections).
  • Coccidiosis of the genus Eimeria are parasitic diseases affecting many species such as sheep, pigs, cattle, rabbits, birds and poultry.
  • the parasites responsible for these pathologies are diverse and each affects a specific species.
  • avian coccidiosis the most common parasitic diseases in poultry, can take many forms and is caused by parasites of the genus Eimeria, such as E. coli. acervulina, E. necatrix, E. maxima, E. brunetti, E. tenella, E. mitis, E. praecox.
  • the parasites responsible for coccidiosis belong to the phylum apicomplexes, to which belong also the parasites responsible for human pathologies such as malaria or malaria (eg Plasmodium falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale, P. knowlesi), toxoplasmosis (eg Toxoplasma gondii) or cryptosporidiosis (eg Cryptosporidium hominis).
  • malaria or malaria eg Plasmodium falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale, P. knowlesi
  • toxoplasmosis eg Toxoplasma gondii
  • cryptosporidiosis eg Cryptosporidium hominis
  • the control of avian coccidiosis usually involves prophylactic treatment of herds including the administration of anticoccidials and / or vaccination.
  • the high cost of vaccines obtained from attenuated strains hampers the use of this method of treatment in broiler flocks. Thus, breeders very often choose to use anticoccidials.
  • the present invention relates to compounds of formula (I)
  • R 1 representing an alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cycloalkyl group
  • said alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cycloalkyl group possibly being substituted, or not, with one or more hydroxyl group (s), halogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, ester and / or ketone;
  • Y represents a nitrogen atom substituted or not by a group R 2 with R 2 representing a hydrogen atom, an alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl or heteroarylcarbonyl group;
  • Z represents a carbon or nitrogen atom
  • W represents a carbon or nitrogen atom, provided that when W is a nitrogen atom, Z is a nitrogen atom and V is a carbon atom substituted by
  • n represents the integer 0 or 1;
  • V represents a carbon or sulfur atom, with the proviso that when V is a sulfur atom, n is 0, Z is a nitrogen atom and W is a carbon atom;
  • R 3 represents hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryl, heteroaryl, amino or halogen;
  • the present invention also relates to pharmaceutical or veterinary compositions comprising at least one compound of the present invention and at least one acceptable excipient.
  • the present invention relates to combinations comprising at least one compound of the present invention and at least one antiparasitic agent.
  • Figure 1 shows fluorescence microscopy images of E. cleella infected MDBKs cells in the presence of the C1 compound compared to a control (A: Schizonts, B: Sporozoites)
  • FIG. 2 represents a graph illustrating the dose-dependent inhibition of the development of Eimeria tenella parasites by compound C1.
  • the 0s illustrate the percentage of invasion relative to the DMSO control as a function of the C1 compound concentration.
  • the ⁇ illustrate the percentage of development relative to the control DMSO as a function of the concentration of compound C1.
  • Figure 3A is a graph illustrating the effects of compounds C1, C2, C3 and C4 on invasion and development of Eimeria tenella parasites.
  • the left bar represents the percentage of invading parasites compared to the control and the right bar represents the percentage of development compared to the control.
  • Figure 3B shows the absence of cytotoxic effects of compounds C1, C2, C3 and C4 and C5 on cells compared to control (DMSO).
  • FIG. 4A represents a graph illustrating the dose dependent decrease in the surface area of lyses as a function of increasing concentrations of C1 compound.
  • FIG. 4B represents photonic microscopy images (objective x4).
  • FIG. 5 represents a graph illustrating the dose-dependent inhibition of the growth of
  • the inventors have discovered that the development of parasites belonging to the phylum apicomplexes can be blocked by compounds belonging to the class of pyranones. These compounds, hereby designated by the term "compound (s) of the present invention", are thus of interest in the prevention and / or treatment of parasitoses induced by parasites belonging to the phylum apicomplexes.
  • Examples of parasites induced by parasites belonging to the phylum apicomplex include coccidiosis (infections induced by Eimeria spp.), Malaria (infections induced by Plasmodium spp.), Toxoplasmosis (infections induced by Toxoplasma gondii), neosporosis (infections induced by Neospora caninum) or cryptosporidiosis (infections induced by Cryptosporidium spp.).
  • the inventors have shown that the development of the parasites of the genus Eimeria tenella, Plasmodium falciparum and Toxoplasma gondii can be blocked by the compounds of the present invention.
  • the compounds of the present invention thus have a particular interest in the prevention and / or treatment of coccidiosis, malaria and / or toxoplasmosis.
  • the inventors have demonstrated that the compounds of the present invention inhibit or reduce the activity of at least one protease belonging to the family of aminopeptidases N, proteases essential for the development of parasites and present in the majority of parasites belonging to to the phylum apicomplexes.
  • the compounds of the present invention inhibit or reduce the activity of the EtApNI protease in Eimeria tenella.
  • the compounds of the present invention block parasite development without inhibiting invasion. The maintenance of the invasion allows an activation of the immune system of the animals, allowing ultimately to limit the use of complementary treatments to treat parasitic diseases, especially coccidiosis.
  • the compounds of the present invention are active at lower doses than the known commercial inhibitors of cell-permeable aminopeptidases, such as 1,10-ortho-phenanthroline and bestatin hydrochloride.
  • Doses may be 10-fold lower (decreased NC50 for Eimeria in vitro compared to bestatin hydrochloride).
  • compound C1 (see below) has been found to inhibit the activity of EtApNI protease in a parasite lysate at a 20-fold concentration. less than 1,10-ortho-phenanthroline and bestatin hydrochloride.
  • the compounds of the present invention do not exhibit toxicity in vitro.
  • the compounds of the present invention useful in the prevention and / or treatment of parasites induced by parasites belonging to the phylum of apicomplexes, have the general formula (I):
  • R 1 representing an alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyanoalkyl group
  • said alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyanoalkyl group possibly being substituted, or not, with one or more hydroxyl or halogen groups, alkyl, alkenyl, alkynyl, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, ester and / or ketone;
  • Y represents a nitrogen atom substituted or not by a group R 2 with R 2 representing a hydrogen atom, an alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl or heteroarylcarbonyl group;
  • Z represents a carbon or nitrogen atom
  • W represents a carbon or nitrogen atom, provided that when W is a nitrogen atom, Z is a nitrogen atom and V is a carbon atom substituted by R 3 , preferably R 3 is a halogen;
  • n the integer 0 or 1;
  • V represents a carbon or sulfur atom, with the proviso that when V is a sulfur atom, n is 0, Z is a nitrogen atom and W is a carbon atom;
  • R 3 is hydrogen, alkyl, alkenyl, alkynyl, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryl, heteroaryl, amino or halogen.
  • alkyl as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1, R 2 and R 3 , denotes a linear or branched hydrocarbon chain, preferably comprising from 1 to 12 carbon atoms. .
  • alkyl group examples include, but are not limited to, methyl, ethyl, propyl, butyl, pentyl, hexyl, heptyl, octyl, nonyl, decyl, undecyl, dodecyl, isobutyl, isopropyl, t-butyl and 1, 1-dimethylpropyl.
  • R 1, R 2 and R 3 independently of one another represent an alkyl group having 1 to 6 carbon atoms.
  • alkenyl as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1 and R 3 , denotes a hydrocarbon chain of at least two carbon atoms, linear or branched, comprising at least one carbon-carbon double bond, preferably comprising at most 12 carbon atoms.
  • alkenyl groups include, but are not limited to, ethenyl, propenyl and butenyl.
  • alkynyl as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1 and R 3 , denotes a hydrocarbon chain of at least two carbon atoms, linear or branched, comprising at least one triple carbon-carbon bond, preferably comprising at most 12 carbon atoms.
  • alkynyl groups include, but are not limited to, ethynyl, propynyl, butynyl, pentynyl and hexynyl.
  • arylalkyl as used in the description of the present invention, in particular in the definition of the substituent R 2 , denotes an alkyl group as defined above linked to an "aryl” group as defined below. .
  • An example of an "arylalkyl” group includes the benzyl group.
  • R 2 advantageously denotes a benzyl or methyl group.
  • aryl refers to an aromatic ring system.
  • aryl groups include, but are not limited to, aromatic carbocycles comprising 5, 6, 7 or 8 members, such as phenyl.
  • aryl such as used in the description of the present invention also includes polycyclic systems comprising at least one aromatic ring fused to at least one other ring which may be aromatic or nonaromatic.
  • heteroaryl as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1, R 2 and R 3 , denotes an aromatic ring comprising from 5 to 8 ring members and containing one or more heteroatoms chosen from oxygen, sulfur or nitrogen, such as 2 or 3 heteroatoms.
  • heteroaryl as used in the description of the present invention also includes polycyclic systems comprising at least one 5- to 8-membered aromatic ring and containing one or more heteroatoms selected from oxygen, sulfur or the like. nitrogen.
  • heteroaryl groups include, but are not limited to, thiophene, pyrrole, benzofuran, indole, pyridine, imidazole and pyrazine moieties.
  • alkyloxy as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1 and R 3 , denotes a monovalent radical of formula RO - in which R denotes a hydrocarbon chain, linear or branched, of preferably comprising from 1 to 12 carbon atoms.
  • alkyloxy include, but are not limited to, methoxy, ethoxy, propoxy, prop-2-oxy, butoxy, but-2-oxy, 1-methylethyloxy, pentoxy or hexyloxy.
  • aryloxy as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituent R 3 , denotes a monovalent radical of formula R'-O- in which R 'denotes an "aryl" group such as defined above.
  • cycloalkyl as used in the description of the present invention, in particular in the definition of the substituent R-1, denotes a non-aromatic hydrocarbon ring comprising at least 3 members and preferably at most 7 members.
  • substituent R-1 denotes a non-aromatic hydrocarbon ring comprising at least 3 members and preferably at most 7 members.
  • Examples of “cycloalkyl” groups include, but are not limited to, cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl or cyclohexyl.
  • amino as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1 and R 3 , denotes an amino group substituted or not by one or two groups selected from alkyl, alkenyl, alkynyl and / or aryl groups.
  • alkyl, alkenyl, alkynyl and aryl groups are as defined above.
  • halogen as used in the description of the present invention, particularly in the definition of the substituent R 3 , refers to the elements fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • alkylthio as used in the description of the present invention, in particular in the definition of the substituent R 3 , denotes a sulfur atom attached to an "alkyl” group, the alkyl group being as defined above. .
  • arylthio as used in the description of the present invention, in particular in the definition of the substituent R 3 , denotes a sulfur atom attached to an "aryl” group, the aryl group being as defined above .
  • esters as used in the description of the present invention, in particular in the definitions of the substituents R 1, denotes a group -CO-OR in which R denotes a hydrocarbon chain, linear or branched, preferably comprising from 1 to at 12 carbon atoms.
  • the compounds of the present invention have the formula (I), (II) or (II I) wherein Y represents a nitrogen atom substituted by a group R 2 with R 2 representing an alkyl group aryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl or heteroarylcarbonyl and V, W, Z, R 1, R 3 , X and n are as defined above.
  • the compounds of the present invention have formula (I), (II) or (III) wherein V, W and Z represent a carbon atom, Y represents a nitrogen atom substituted with a group R 2 as defined above, n is 1 and R 1 R 3 and X are as defined above.
  • X is an oxygen atom and / or R 2 represents an alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl or heteroarylcarbonyl group.
  • R 1 represents an alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyalkalkyl group, said alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyanoalkyl group possibly being substituted, or not, by one or more hydroxyl, halogen, alkyl group (s); alkenyl, alkynyl, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, ester and / or ketone;
  • R 2 represents an alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl or heteroarylcarbonyl group;
  • R 3 represents a hydrogen, an alkyl, alkenyl, alkynyl, arylthio, alkylthio, aryloxy, alkyloxy, aryl, heteroaryl, amino or a halogen group.
  • the compounds of the present invention have the following formula (V):
  • R 1 represents an alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyalkalkyl group, said alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyanoalkyl group possibly being substituted, or not, by one or more hydroxyl, halogen, alkyl group (s); , alkenyl, alkynyl, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyl, aryl, heteroaryl, ester and / or ketone;
  • R 2 represents an alkyl, aryl, arylalkyl, heteroaryl, alkylcarbonyl, arylcarbonyl or heteroarylcarbonyl group;
  • R 3 represents a hydrogen, an alkyl, alkenyl, alkynyl, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryl, heteroaryl, amino or a halogen group.
  • the compounds of the present invention may have the formula (I), (I I), (III), (IV) or (V) wherein:
  • alkyl or alkenyl group comprising from 1 to 6 carbon atoms, substituted or not by one or more hydroxyl, alkyloxy, ester, alkyne and / or cycloalkyl group (s);
  • R 2 represents a benzyl or methyl group
  • R 3 represents a hydrogen
  • the group R 1 may especially be chosen from the following groups
  • the compounds according to the present invention are characterized in that the said I):
  • R 1 representing an alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cycloalkyl group
  • said alkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl or cyanoalkyl group possibly being substituted, or not, with one or more hydroxyl group (s), alkyl, alkenyl, alkynyl, alkyloxy, cycloalkyl, aryl, heteroaryl and / or ester
  • Y represents a nitrogen atom substituted or not by a group R 2 with R 2 representing an alkyl or arylalkyl group
  • Z represents a carbon or nitrogen atom.
  • -AB- represents the compounds of the present invention have the following general formula (V ⁇ ) wherein Y, Z, and R 1 are as defined above:
  • the compounds of the present invention have the formula (VI), (VIa) or (VIb) in which Y represents a nitrogen atom substituted by a group R 2 with R 2 representing an alkyl group, arylalkyl and Z, and R 1 are as defined above.
  • the compounds of the present invention have formula (VI), (VIa) or (VIb) in which Z represents a nitrogen or carbon atom, Y represents a substituted or unsubstituted nitrogen atom. by a group R 2 as defined above and Ri, is as defined above.
  • R 2 represents an alkyl or arylalkyl group,
  • the compounds according to the present invention are characterized that said compounds
  • R 1 represents an alkyl, alkenyl, aryl or heteroaryl group, said alkyl, alkenyl or aryl group, which may or may not be substituted by one or more alkyl, alkenyl, alkynyl, alkyloxy, cycloalkyl and / or ester groups.
  • R 1 represents an alkyl, alkenyl, aryl or heteroaryl group, said alkyl, alkenyl or aryl group, which may or may not be substituted by one or more hydroxyl, alkyl, alkenyl, alkynyl, alkyloxy, cycloalkyl or aryl groups; heteroaryl and / or ester; and
  • R 2 represents an alkyl or arylalkyl group.
  • the compounds according to the present invention are characterized in that said compounds have the formula (IX):
  • R 1 represents an alkyl, alkenyl or cycloalkyl group, said alkyl or alkenyl group possibly being substituted, or not, with one or more alkyl, alkenyl, alkyloxy, cycloalkyl and / or ester groups;
  • the compounds of the present invention may have formula (VI), (VIa), (VIb), (VII), (VIII) or (IX) wherein:
  • alkyl or alkenyl group comprising from 1 to 6 carbon atoms, substituted or not by one or more hydroxyl, alkyloxy, ester, alkyne and / or cycloalkyl group (s);
  • the compounds of the present invention have the following structures:
  • the compounds of the present invention may be prepared according to methods known to those skilled in the art and which may be as described in J. Org. Chem. , 201 1, 76, 8347-8354 and in Org. Organic. Mol.2011, 9, 1212-1218.
  • the compounds of the presen may be prepared according to methods known to those skilled in the art and which may be as described in J. Org. Chem. , 201 1, 76, 8347-8354 and in Org. Organic. Mol.2011, 9, 1212-1218.
  • the compounds of the present invention are used to prevent and / or treat parasitic infections induced by parasites belonging to the phylum apicomplexes.
  • they can be used to prevent and / or treat coccidiosis, such as avian, bovine, porcine or ovine coccidiosis.
  • the compounds of the present invention may also be used to prevent and / or treat malaria (Plasmodium spp. Infections), toxoplasmosis (Toxoplasma gondii infections), neosporosis (Neospora caninum infections) and / or cryptosporidiosis, by ruminants and humans (infections with Cryptosporidium parvum and hominis).
  • the compounds of the present invention may be administered alone or in combination with acceptable excipients in a pharmaceutical and / or veterinary composition.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical or veterinary composition comprising at least one compound of the present invention and at least one acceptable excipient.
  • the pharmaceutical or veterinary composition can be used to prevent and / or treat parasitic infections induced by parasites belonging to the phylum of apicomplexes, such as coccidiosis, malaria, toxoplasmosis, neosporosis and / or cryptosporidiosis.
  • the pharmaceutical or veterinary composition can be used to prevent and / or treat coccidiosis, malaria and / or toxoplasmosis.
  • examples of acceptable excipients include solvents, glidants, suspending agents, solubilizers, stabilizers, preservatives.
  • the compounds of the present invention may be administered in combination with other agents useful in the treatment of parasitic (antiparasitic agents).
  • the present invention also relates to a combination comprising at least one compound of the present invention as described above and at least one other agent useful in the treatment of parasitoses (pest control agent).
  • the antiparasitic agents may be synthetic chemicals that alter the metabolism of the parasites (decoquinate, diclazuril, halofuginone, nicarbazine and robenidine) and / or ionophores derived therefrom.
  • microbial fermentation which inhibit ion transport across the parasite membrane (lasalocid, maduramicin, narasin, salinomycin, semduramicin and monensin).
  • the combination can thus be used to prevent and / or treat parasitic diseases induced by parasites belonging to the phylum apicomplexes, such as coccidiosis, malaria, toxoplasmosis, neosporosis and / or cryptosporidiosis, preferably coccidiosis, malaria and / or toxoplasmosis.
  • parasitic diseases induced by parasites belonging to the phylum apicomplexes such as coccidiosis, malaria, toxoplasmosis, neosporosis and / or cryptosporidiosis, preferably coccidiosis, malaria and / or toxoplasmosis.
  • Individual compounds of such a combination may be administered separately at different times during treatment or concomitantly in combined or separate forms.
  • the combination of the present invention may be for use in combined or separate form.
  • the present invention also relates to a pharmaceutical or veterinary composition
  • a pharmaceutical or veterinary composition comprising at least one compound of the present invention as described above, at least one antiparasitic agent and at least one acceptable excipient that can be used in the prevention and / or treatment parasitic infections induced by parasites belonging to the phylum of apicomplexes, such as coccidiosis, malaria, toxoplasmosis, neosporosis and / or cryptosporidiosis, preferably coccidiosis, malaria and / or toxoplasmosis.
  • compositions of the present invention for use in the treatment of humans can be administered orally or parenterally, including intravenous, intramuscular, intraperitoneal, subcutaneous, rectal or topical administrations.
  • the compositions are then presented in all appropriate forms according to the desired modes of administration.
  • the pharmaceutical compositions may be in the form of powder, lyophilisate, cachet, capsule, pill, granule, tablet, gel, ointment, cream, syrup, solution for injection, spray, patch.
  • compositions of the present invention intended for the treatment of animals may be administered according to any route of administration well known in the art and adapted to the treatment of each of the animals. Preferably, they are administered orally and parenterally.
  • the compositions are then presented in all appropriate forms according to the desired modes of administration. They can therefore be in the form of a solution or an oral or injectable liquid suspension, or in solid or semi-solid form, powders, tablets, capsules, granules, dragees, capsules, sprays, pills, pills, tablets, or pasta. In the case of oral formulations, these can be administered directly to the animals or mixed with the food.
  • the present invention also relates to the compounds of the present invention for their use in therapy.
  • the present invention also relates to a method of prevention and / or treatment of parasites induced by parasites belonging to the phylum of apicomplexes comprising administering to a subject an effective dose of at least one compound of the present invention as described above or a composition comprising at least one compound of the present invention as described above and at least one acceptable excipient.
  • the subject can be a human or an animal. In particular, the animal may be selected from poultry and ruminants.
  • the present invention finally relates to the use of at least one compound of the present invention as described above for the preparation of a medicament for preventing and / or treating parasitic infections induced by parasites belonging to the phylum apicomplexes such as coccidiosis, malaria, toxoplasmosis, neosporosis or cryptosporidiosis.
  • the compounds C1 to C12 are prepared according to the method described in J.Org.Chem. 201 1, 76, 8347-8354.
  • the mixture is then cooled to room temperature and hydrolysed at 0 ° C with a saturated aqueous solution of NH 4 Cl (15 mL); 50 ml of ether are added to the Schlenk tube and the mixture is filtered through Celite®. Celite® is then washed with 50 mL of ether. The aqueous phase is removed and the organic phase is washed three times with water (3 x 15 mL). The organic phase is dried over MgSO 4 and concentrated in vacuo. The residue obtained is purified by flash chromatography on silica gel to give the desired indolopyranones.
  • MDBK cells (Madin-Darby bovine kidney) are cultured in 24-well plate containing glass slides, 24 hours before the experiment. The concentration used is 1x10 5 cells per well, in Ham's F12 medium with 5% FCS, 2mM glutamine, 10 IU / mL penicillin and 1 g / mL streptomycin.
  • the cells are then placed in an oven at 41 ° C. in an atmosphere containing 5% of C0 2.
  • YFP Yellow Fluorescent Protein
  • the sporulated oocysts are milled mechanically using 0.5 mm glass beads.
  • the parasites are centrifuged at 800G, 5 min, 20 ° C and washed 3 times in PBS to remove wall debris.
  • the sporocysts are then incubated in an excystation medium (Bile Salts 0.5%, 0.25% Trypsin diluted in PBS pH 7.6) at 41 ° C for 75 minutes.
  • the sporozoites are purified by two filtration steps, the first one on cotton and then on a 5 ⁇ polycarbonate filter (GE Water & ProcessTechnology). Preparation of the compounds:
  • the compounds C1, C2, C3, C4 and C5 are dissolved in DMSO (Dimethylsulfoxide) at a concentration of 10 mM.
  • the parasites (2x10 5 ) are placed in contact with the cells (1x10 5 ) at the same time as the test compound (C1, C2, C3, C4 and C5) in a final volume of 500 ⁇ per well.
  • the test is performed in duplicate in 2 different wells.
  • One control (duplicate in 2 wells) serves as a development control. It consists of parasites and cells without addition of test compound.
  • Another control (also in duplicate) is used to test the toxicity of DMSO in which the test compounds are dissolved. It consists of cells, parasites and solvent (DMSO) at the maximum concentration used for the experiment.
  • the cells are then placed in an oven at 41 ° C. in an atmosphere containing 5% CO 2.
  • the culture medium is changed twice a day from 16:00 pm (post-infection), the inhibitors are renewed at the same time as the middle.
  • the cells are washed and fixed fixed Antigen at 48h Pl.
  • the slides are then brought into contact with mounting medium (Vectashield) containing DAPI before being saddled.
  • the percentage of invasion is calculated. Three counts are performed to determine the number of cells and the total parasite number (sporozoites + schizonts).
  • FIG. 2 shows a dose-dependent inhibition of the development of parasites by compound C1. It can be observed that compound C1 does not inhibit invasion but strongly inhibits sporozoite differentiation into schizonts.
  • the culture medium is removed, 1 ml of fresh complete medium is added to the cells as well as 200 ⁇ l of MTT (Dimethyl thiazol-diphenyl tetrazolium bromide, 5 mg / mL).
  • MTT Dimethyl thiazol-diphenyl tetrazolium bromide, 5 mg / mL.
  • the cells are placed at 41 ° C. for 2 hours in an atmosphere containing 5% CO 2 .
  • the culture medium is removed, and 200 ⁇ l of extraction buffer (4 mM HCI isopropanol) are added.
  • the cells are incubated for 10 minutes at 37 ° C. in an atmosphere containing 5% of C0 2 .
  • the extraction buffer is removed, centrifuged for 5 minutes at 1400 rpm to remove cell debris.
  • the supernatant is transferred to plate P96, and the optical density (OD) is read at 570 nm. Intensity is proportional to the amount of living cells. The percentage reduction
  • Figure 3A shows the effects of compounds C1, C2, C3, C4 and C5 on invasion and development versus control. It can be observed that each of the compounds tested strongly inhibits sporozoite differentiation into schizonts without influencing the invasion.
  • Figure 3B shows the absence of cytotoxic effects of compounds C1, C2, C3, C4 and C5 on cells compared to control (DMSO).
  • HFF Human Foreskin Fibroblast
  • the cells are then placed in an oven at 37 ° C. in an atmosphere containing 5% of C0 2.
  • Tachizoites of Toxoplasma gondii are routinely maintained on HFF cultures grown in DMEM (see above). Before contacting on HFF cells the parasites are filtered with a 5 ⁇ polycarbonate filter (GE Water & Process Technology)
  • the compounds to be tested are dissolved in DMSO (dimethylsulfoxide) at a concentration of 10 mM.
  • the parasites (1x10 4 / well) are deposited on the confluent cells at the same time as the test compound in a final volume of 3 ml per well.
  • the test is performed in duplicate in two different wells.
  • a control without compound (made in duplicate in 2 different wells) serves as a development control. It is only composed of cells and parasites.
  • Another control (also duplicate) is tested to verify the absence of adverse effect of DMSO on development. It consists of cells, parasites and solvent (DMSO) at the maximum concentration used for the experiment. After addition of parasites and compounds, the cells are placed in an oven at 41 ° C in an atmosphere containing 5% C0 2 .
  • the culture medium should not be changed and the plate should not be moved for the duration of the infection
  • HFFs Marking of HFFs and revelation of lyses: The cells are fixed in cold methanol (stored at -20 ° C.) for 5 minutes. The cells are then washed with PBS before being stained with Crystal Violet for 1 to 5 minutes. The plates are washed thoroughly to remove excess dye and are air dried. The lysis ranges reflecting the development of Toxoplasma will appear as clear beaches on the purple background of HFFs. A decrease in the development of the parasite leads to a decrease in the number of beaches observed and their areas.
  • the area of the lysis ranges is calculated by the use of microscopy image processing software (Zeiss Axiovision).
  • the average area is calculated for each condition and is expressed as the percentage of the average of a condition relative to the control without inhibitor with its standard deviation.
  • FIGS. 4A and 4B show the dose-dependent decrease in the surface of the lysine plaques illustrating the development of the parasite Toxoplasma gondii.
  • Compound C1 was dissolved in DMSO (dimethylsulfoxide). The final concentration of DMSO never exceeds 0.25%.
  • the radioactivity background is obtained by incubating uninfected cells under the same conditions as above.
  • the antiparasitic effect is expressed as riC 50 , dose at which the drug causes a 50% inhibition of parasite development.
  • the results are shown in Figure 5.
  • the IC 5 o of the C1 compound against the growth of Plasmodium falciparum after 48 h of contact (one cycle time) is 14 micromolar.
  • the antiparasitic activity is confirmed by examination of Giemsa stained smear.

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Abstract

La présente invention concerne des composés appartenant à la classe des pyranones utiles dans la prévention et/ou le traitement des coccidioses (infections par Eimeria spp.). Ces composés s'avèrent également utiles dans la prévention et/ou le traitement de la cryptosporidiose (infections par Cryptosporidiumspp.),de la toxoplasmose (infections par Toxoplasma gondii), de la néosporose (infectionsinduitespar Neospora caninum)et/ou de la malaria (infections par Plasmodium spp.).

Description

PREVENTION ET/OU TRAITEMENT DES PARASITOSES INDUITES PAR DES PARASITES APPARTENANT AU PHYLUM DES APICOMPLEXES
DOMAINE DE L'INVENTION
La présente invention concerne le domaine de la prévention et/ou du traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes. Plus particulièrement, la présente invention vise à fournir de nouveaux composés utiles dans la prévention et/ou le traitement des coccidioses (infections par Eimeria spp.). Les composés de la présente invention s'avèrent également utiles dans la prévention et/ou le traitement de la cryptosporidiose (infections par Cryptosporidium spp.), de la toxoplasmose (infections par Toxoplasma gondii), de la néosporose (infections induites par Neospora caninum) et/ou de la malaria (infections par Plasmodium spp.).
ARRIERE PLAN DE L'INVENTION
Les coccidioses du genre Eimeria sont des maladies parasitaires touchant de nombreuses espèces telles que les ovins, porcins, bovins, lapins, oiseaux et volailles. Les parasites responsables de ces pathologies sont divers et touchent chacun une espèce propre. Par exemple, les coccidioses aviaires, maladies parasitaires les plus fréquentes chez les volailles, peuvent prendre de nombreuses formes et sont causées par des parasites du genre Eimeria, tels qu'E. acervulina, E. necatrix, E. maxima, E. brunetti, E. tenella, E. mitis, E. praecox.
D'une manière générale, les parasites responsables des coccidioses appartiennent au phylum des apicomplexes, auquel appartiennent également les parasites responsables de pathologies humaines telles que la malaria ou paludisme (ex : Plasmodium falciparum, P. vivax, P. malariae, P.ovale, P. knowlesi), la toxoplasmose (ex : Toxoplasma gondii) ou la cryptosporidiose (ex : Cryptosporidium hominis).
Sur le plan vétérinaire, la lutte contre les coccidioses aviaires passe généralement par un traitement prophylactique des élevages comprenant l'administration d'anticoccidiens et/ou la vaccination. Le coût élevé des vaccins obtenus à partir de souches atténuées freine le recours à ce mode de traitement dans les élevages de poulets de chair. Ainsi, les éleveurs choisissent très souvent d'avoir recours à des anticoccidiens.
Si les agents anticoccidiens disponibles à ce jour s'avèrent efficaces, les éleveurs doivent cependant faire face à un problème majeur : l'apparition croissante de phénomène de résistance des parasites aux agents anticoccidiens, essentiellement liée à leur utilisation massive.
Un besoin existe donc pour la mise à disposition de nouveaux agents permettant de prévenir et/ou traiter les parasitoses induites par les parasites appartenant au phylum des apicomplexes, en particulier les coccidioses induites par Eimeria.
BREVE DESCRIPTION DE L'INVENTION
La présente invention concerne des composés de formule (I)
dans laquelle :
- -A-B- représente
Figure imgf000003_0001
o avec X représentant un atome d'oxygène ou d'azote ;
o avec Ri représentant un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycloalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycloalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
- Y représente un atome d'azote substitué, ou non, par un groupement R2 avec R2 représentant un atome d'hydrogène, un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
- Z représente un atome de carbone ou d'azote ;
- W représente un atome de carbone ou d'azote, à la condition que lorsque W est un atome d'azote, Z est un atome d'azote et V est un atome de carbone substitué par
R3;
n représente le nombre entier 0 ou 1 ; - V représente un atome de carbone ou de soufre, à la condition que lorsque V est un atome de soufre, n est égal à 0, Z est un atome d'azote et W est atome de carbone ;
R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène ;
pour utilisation dans la prévention et/ou le traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes.
La présente invention concerne également des compositions pharmaceutiques ou vétérinaires comprenant au moins un composé de la présente invention et au moins un excipient acceptable.
Enfin, la présente invention concerne des combinaisons comprenant au moins un composé de la présente invention et au moins un agent antiparasitaire.
BREVE DESCRIPTION DES DESSINS
La figure 1 représente des images de microscopie à fluorescence de cellules MDBKs infectées par E. tenella en présence du composé C1 comparées à un contrôle (A : Schizontes ; B : Sporozoites)
La figure 2 représente un graphique illustrant l'inhibition dose dépendante du développement des parasites Eimeria tenella par le composé C1 . Les 0 illustrent le pourcentage d'invasion par rapport au témoin DMSO en fonction de de la concentration en composé C1. Les□ illustrent le pourcentage de développement par rapport au témoin DMSO en fonction de la concentration en composé C1 .
La figure 3A représente un graphique illustrant les effets des composés C1 , C2, C3 et C4 sur l'invasion et le développement des parasites Eimeria tenella. Pour chaque essai, la barre de gauche représente le pourcentage de parasites ayant envahi comparé au contrôle et la barre de droite représente le pourcentage de développement comparé au contrôle.
La figure 3B présente l'absence d'effets cytotoxiques des composés C1 , C2, C3 et C4 et C5 sur les cellules par rapport au contrôle (DMSO).
La figure 4A représente un graphique illustrant la diminution dose dépendante de la surface des plages de lyses en fonction des concentrations croissantes en composé C1.
La figure 4B représente des images de microscopie photonique (objectif x4).
La figure 5 représente un graphique illustrant l'inhibition dose dépendante de la croissance de
P. falciparum en fonction des concentrations croissantes en composé C1. DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION
Les inventeurs ont découvert que le développement des parasites appartenant au phylum des apicomplexes peut être bloqué par des composés appartenant à la classe des pyranones. Ces composés, ici désignés par le terme « composé(s) de la présente invention », présentent ainsi un intérêt dans la prévention et/ou le traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes. Des exemples de parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes incluent les coccidioses (infections induites par Eimeria spp.), la malaria (infections induites par Plasmodium spp.), la toxoplasmose (infections induites par Toxoplasma gondii), la néosporose (infections induites par Neospora caninum) ou la cryptosporidiose (infections induites par Cryptosporidium spp.).
En particulier, les inventeurs ont montré que le développement des parasites du genre Eimeria tenella, Plasmodium falciparum et Toxoplasma gondii peut être bloqué par les composés de la présente invention. Les composés de la présente invention présentent ainsi tout particulièrement un intérêt dans la prévention et/ou le traitement des coccidioses, de la malaria et/ou de la toxoplasmose.
Plus spécifiquement, les inventeurs ont mis en évidence que les composés de la présente invention inhibent ou diminuent l'activité d'au moins une protéase appartenant à la famille des aminopeptidases N, protéases essentielles au développement des parasites et présentes chez la majorité des parasites appartenant au phylum des apicomplexes. Ainsi, les inventeurs ont mis en évidence que les composés de la présente invention inhibent ou diminuent l'activité de la protéase EtApNI chez Eimeria tenella. De manière avantageuse, les composés de la présente invention bloquent le développement parasitaire sans inhiber l'invasion. Le maintien de l'invasion permet une activation du système immunitaire des animaux, permettant in fine de limiter le recours à des traitements complémentaires pour traiter les parasitoses, en particulier les coccidioses.
De manière avantageuse, les composés de la présente invention sont actifs à des doses inférieures aux inhibiteurs commerciaux connus d'aminopeptidases perméables aux cellules, tels que le 1 ,10-ortho-phenanthroline et l'hydrochlorure de bestatine. Les doses peuvent être inférieures d'un facteur 10 (diminution de NC50 pour Eimeria in vitro par rapport à l'hydrochlorure de bestatine). En particulier, le composé C1 (voir ci-dessous) s'est avéré inhiber l'activité de la protéase EtApNI dans un lysat parasitaire à une concentration 20 fois inférieure à celle du 1 ,10-ortho-phenanthroline et de l'hydrochlorure de bestatine. Par ailleurs, les composés de la présente invention ne présentent pas de toxicité in vitro.
Les composés de la présente invention, utiles dans la prévention et/ou le traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes, présentent la formule générale (I):
dans laquelle :
- -A-B- représente
Figure imgf000006_0001
o avec X représentant un atome d'oxygène ou d'azote ;
o avec Ri représentant un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
- Y représente un atome d'azote substitué, ou non, par un groupement R2 avec R2 représentant un atome d'hydrogène, un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
- Z représente un atome de carbone ou d'azote ;
- W représente un atome de carbone ou d'azote, à la condition que lorsque W est un atome d'azote, Z est un atome d'azote et V est un atome de carbone substitué par R3, de préférence R3 est un halogène ;
n représente le nombre entier 0 ou 1 ;
- V représente un atome de carbone ou de soufre, à la condition que lorsque V est un atome de soufre, n est égal à 0, Z est un atome d'azote et W est un atome de carbone ;
R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène. Le terme « alkyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants R-i, R2 et R3, désigne une chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée, de préférence comprenant de 1 à 12 atomes de carbone. Des exemples de groupement « alkyle » incluent, de manière non limitative, les groupements méthyle, éthyle, propyle, butyle, pentyle, hexyle, heptyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, dodécyle, isobutyle, isopropyle, t-butyle et 1 ,1-diméthylpropyle. Dans des modes de réalisation particuliers de la présente invention, R-i, R2 et R3 représentent indépendamment l'un de l'autre un groupement alkyle comprenant de 1 à 6 atomes de carbone.
Le terme « alcényle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants Ri et R3, désigne une chaîne hydrocarbonée d'au moins deux atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, comprenant au moins une double liaison carbone-carbone, de préférence comprenant au plus 12 atomes de carbone. Des exemples de groupement « alcényle » incluent, de manière non limitative, les groupements éthényle, propényle et butényle.
Le terme « alcynyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants Ri et R3, désigne une chaîne hydrocarbonée d'au moins deux atomes de carbone, linéaire ou ramifiée, comprenant au moins une triple liaison carbone- carbone, de préférence comprenant au plus 12 atomes de carbone. Des exemples de groupement « alcynyle» incluent, de manière non limitative, les groupements éthynyle, propynyle, butynyle, pentynyle et hexynyle. Le terme « arylalkyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R2, désigne un groupement alkyle tel que défini ci-dessus lié à un groupement « aryle » tel que défini ci-dessous. Un exemple de groupement « arylalkyle » inclut le groupement benzyle. R2 désigne de manière avantageuse un groupement benzyle ou méthyle.
Le terme « aryle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants R-i, R2 et R3, désigne un système cyclique aromatique. Des exemples de groupement « aryle » incluent, de manière non limitative, les carbocycles aromatiques comprenant 5, 6, 7 ou 8 chaînons, tels que le phényle. Le terme « aryle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention inclut également les systèmes polycycliques comprenant au moins un cycle aromatique fusionné à au moins un autre cycle qui peut être aromatique ou non aromatique. Le terme « hétéroaryle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants R-i, R2 et R3, désigne un cycle aromatique comprenant de 5 à 8 chaînons et contenant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi l'oxygène, le soufre ou l'azote, tels que 2 ou 3 hétéroatomes. Le terme « hétéroaryle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention inclut également les systèmes polycycliques comprenant au moins un cycle aromatique comprenant de 5 à 8 chaînons et contenant un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi l'oxygène, le soufre ou l'azote. Des exemples de groupement « hétéroaryle » incluent, de manière non limitative, les groupements dérivants du thiophène, pyrrole, benzofurane, indole, pyridine, imidazole et pyrazine. Le terme « alkyloxy » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants Ri et R3, désigne un radical monovalent de formule R-O- dans laquelle R désigne une chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, de préférence comprenant de 1 à 12 atomes de carbone. Des exemples de groupement « alkyloxy» incluent, de manière non limitative, les groupements méthoxy, éthoxy, propoxy, prop-2-oxy, butoxy, but- 2-oxy, 1-méthyléthyle-oxy, pentoxy ou hexyloxy.
Le terme « aryloxy » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions du substituant R3, désigne un radical monovalent de formule R'-O- dans laquelle R' désigne un groupement « aryle » tel que défini ci-dessus.
Le terme « cycloalkyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R-i, désigne un cycle hydrocarboné non aromatique comprenant au moins 3 chaînons et de préférence au plus 7 chaînons. Des exemples de groupement « cycloalkyle» incluent, de manière non limitative, les groupements cyclopropyle, cyclobutyle, cyclopentyle ou cyclohexyle.
Le terme « amino» tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants Ri et R3, désigne un groupement aminé substitué, ou non, par un ou deux groupements choisis parmi les groupements alkyle, alcényle, alcynyle et/ou aryle. Les groupements alkyle, alcényle, alcynyle et aryle sont tels que définis ci-dessus.
Le terme « halogène » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R3, désigne les éléments fluor, chlore, brome et iode.
Le terme « alkylcarbonyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R2, désigne un groupement carbonyle (C=0) attaché à un groupement alkyle, le groupement alkyle étant tel que défini ci-dessus.
Le terme « arylcarbonyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R2, désigne un groupement carbonyle (C=0) attaché à un groupement aryle, le groupement aryle étant tel que défini ci-dessus. Le terme « hétéroarylcarbonyle » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R2, désigne un groupement carbonyle (C=0) attaché à un groupement hétéroaryle, le groupement hétéroaryle étant tel que défini ci-dessus.
Le terme « alkylthio » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R3, désigne un atome de soufre attaché à un groupement «alkyle », le groupement alkyle étant tel que défini ci-dessus.
Le terme « arylthio » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans la définition du substituant R3, désigne un atome de soufre attaché à un groupement «aryle », le groupement aryle étant tel que défini ci-dessus.
Le terme « ester » tel qu'utilisé dans la description de la présente invention, en particulier dans les définitions des substituants R-i, désigne un groupement -CO-O-R dans laquelle R désigne une chaîne hydrocarbonée, linéaire ou ramifiée, de préférence comprenant de 1 à 12 atomes de carbone.
En particulier, lorsque -A-B- représente
Figure imgf000009_0001
les composés de la présente invention présentent la formule générale (II) suivante dans laquelle V, W, Y, Z, R-i et R3 et n sont tels que définis ci-dessus :
Figure imgf000010_0001
Lorsque -A-B- représente
Figure imgf000010_0002
les composés de la présente invention présentent la formule générale (I II) suivante dans laquelle V, W, X, Y, Z, R-i et R3 et n sont tels que définis ci-dessus :
Figure imgf000010_0003
Dans des modes de réalisations particuliers, les composés de la présente invention présentent la formule (I), (II) ou (II I) dans laquelle Y représente un atome d'azote substitué par un groupement R2 avec R2 représentant un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle et V, W, Z, R-i , R3, X et n sont tels que définis ci-dessus.
Dans des modes de réalisations particuliers, les composés de la présente invention présentent la formule (I), (II) ou (III) dans laquelle V, W et Z représentent un atome de carbone, Y représente un atome d'azote substitué par un groupement R2 tel que défini ci-dessus, n est égal à 1 et R^ R3 et X sont tels que définis ci-dessus. De préférence, dans ces modes de réalisations, X est un atome d'oxygène et/ou R2 représente un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle.
Ainsi, dans des modes de réalisations particuliers, lorsque que -A-B- représente
les composés de la présente invention présentent la formule (IV) suivante :
Figure imgf000011_0001
(IV)
dans laquelle :
- Ri représente un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
- R2 représente un groupement alkyle, aryle, arylakyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
- R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, arylthio, alkylthio, aryloxy, alkyloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène.
Dans d'autres modes de réalisations particuliers, les composés de la présente invention présentent la formule (V) suivante :
Figure imgf000011_0002
dans laquelle :
- Ri représente un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
- R2 représente un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
- R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène.
En particulier, les composés de la présente invention peuvent présenter la formule (I), (I I), (III), (IV) ou (V) dans laquelle :
- Ri représente :
- un groupement alkyle ou alcényle comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyloxy, ester, alcyne et/ou cycloalkyle ;
- un groupement phényle ;
- un groupement phényle substitué en ortho, méta ou para par un groupement alkyle comprenant de 1 à 3 atomes de carbone, halogène, alkyloxy, alkylthio, nitro ou amino ; ou
- un groupement thiophène ou pyridine ; et/ou
- R2 représente un groupement benzyle ou méthyle; et/ou
- R3 représente un hydrogène.
Le groupement Ri peut tout particulièrement être choisi parmi les groupements suivants
Figure imgf000013_0001
Dans un mode de réalisation particulier, les composés selon la présente invention sont caractérisés en ce que lesdit I):
dans laquelle :
- -A-B- représente
Figure imgf000013_0002
o avec Ri représentant un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycloalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle et/ou ester; Y représente un atome d'azote substitué, ou non, par un groupement R2 avec R2 représentant un groupement alkyle ou arylalkyle ; et
Z représente un atome de carbone ou d'azote. En particulier, lorsque -A-B- représente
Figure imgf000014_0001
les composés de la présente invention présentent la formule générale (Via) suivante dans laquelle Y, Z, et Ri sont tels que définis ci- dessus :
Figure imgf000014_0002
Lorsque -A-B- représente -C=CRi-0-CO-, les composés de la présente invention présentent la formule générale (III) suivante dans laquelle Y, Z, et Ri sont tels que définis ci-dessus :
Figure imgf000014_0003
Dans des modes de réalisations particuliers, les composés de la présente invention présentent la formule (VI), (Via) ou (VIb) dans laquelle Y représente un atome d'azote substitué par un groupement R2 avec R2 représentant un groupement alkyle, arylalkyle et Z, et Ri sont tels que définis ci-dessus.
Dans des modes de réalisations particuliers, les composés de la présente invention présentent la formule (VI), (Via) ou (VIb) dans laquelle Z représente un atome d'azote ou de carbone, Y représente un atome d'azote substitué ou non par un groupement R2 tel que défini ci-dessus et R-i , est tel que défini ci-dessus. De préférence, dans ces modes de réalisations, R2 représente un groupement alkyle ou arylalkyle,
De manière avantageuse, les composés selon la présente invention sont caractérisés que lesdits composés prés
Figure imgf000015_0001
Ri représente un groupement alkyle, alcényle, aryle ou hétéroaryle, ledit groupement alkyle, alcényle, ou aryle, pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, cycloalkyle et/ou ester.
De manière également avantageuse, les composés selon la présente invention sont caractérisés en ce que lesdi I):
Figure imgf000015_0002
dans laquelle Ri représente un groupement alkyle, alcényle, aryle, ou hétéroaryle, ledit groupement alkyle, alcényle, ou aryle, pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle et/ou ester ; et
R2 représente un groupement alkyle ou arylalkyle.
De manière tout aussi avantageuse, les composés selon la présente invention sont caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (IX):
Figure imgf000016_0001
dans laquelle :
Ri représente un groupement alkyle, alcényle ou cycloalkyle, ledit groupement alkyle ou alcényle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) alkyle, alcényle, alkyloxy, cycloalkyle et/ou ester;
En particulier, les composés de la présente invention peuvent présenter la formule (VI), (Via), (Vlb), (VII), (VIII) ou (IX) dans laquelle :
- Ri représente le cas échéant :
- un groupement alkyle ou alcényle comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyloxy, ester, alcyne et/ou cycloalkyle ;
- un groupement phényle ;
- un groupement phényle substitué en ortho, méta ou para par un groupement alkyle comprenant de 1 à 3 atomes de carbone, halogène, alkyloxy, alkylthio, nitro ou amino ; ou
- un groupement thiophène ou pyridine.
Dans des modes de réalisations particuliers, les composés de la présente invention présentent les structures suivantes :
Figure imgf000017_0001
Figure imgf000018_0001
C13 C14
Figure imgf000018_0002
C15 C16
Les composés de la présente invention peuvent être préparés selon des méthodes connues de l'homme du métier et qui peuvent être telles que décrites dans J.Org.Chem. , 201 1 , 76, 8347-8354 et dans Org. Bio. Mol.2011, 9, 1212-1218. En particulier, les composés de la présen
Figure imgf000018_0003
Les composés de la présente invention sont utilisés pour prévenir et/ou traiter les parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes. En particulier, ils peuvent être utilisés pour prévenir et/ou traiter les coccidioses, telles que les coccidioses aviaires, bovines, porcines ou ovines. Les composés de la présente invention peuvent également être utilisés pour prévenir et/ou traiter la malaria (infections par Plasmodium spp.), la toxoplasmose (infections par Toxoplasma gondii), la néosporose (infections par Néospora caninum) et/ou la cryptosporidiose, en particulier des ruminants et de l'homme (infections par Cryptosporidium parvum et hominis).
Les composés de la présente invention peuvent être administrés seuls ou en combinaison avec des excipients acceptables dans une composition pharmaceutique et/ou vétérinaire. Ainsi, la présente invention concerne également une composition pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé de la présente invention et au moins un excipient acceptable. La composition pharmaceutique ou vétérinaire peut être utilisée pour prévenir et/ou traiter les parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes, telles que les coccidioses, la malaria, la toxoplasmose, la néosporose et/ou la cryptosporidiose. De préférence, la composition pharmaceutique ou vétérinaire peut être utilisée pour prévenir et/ou traiter les coccidioses, la malaria et/ou la toxoplasmose.
De manière non limitative, des exemples d'excipients acceptables incluent les solvants, agents d'écoulement, agents de mise en suspension, agents de solubilisation, stabilisants, conservateurs. Dans certains modes de réalisations, les composés de la présente invention peuvent être administrés en combinaison avec d'autres agents utiles dans le traitement des parasitoses (agents antiparasitaires). Ainsi, la présente invention concerne également une combinaison comprenant au moins un composé de la présente invention tel que décrit ci-dessus et au moins un autre agent utile dans le traitement des parasitoses (agent antiparasitaire).
Par exemple, dans le cadre de la prévention et/ou du traitement des coccidioses, les agents antiparasitaires peuvent être des produits chimiques de synthèse qui altèrent le métabolisme des parasites (décoquinate, diclazuril, halofuginone, nicarbazine et robénidine) et/ou des ionophores dérivés de la fermentation microbienne, qui inhibent le transport des ions à travers la membrane du parasite (lasalocid, maduramicine, narasin, salinomycine, semduramicine et monensin).
La combinaison peut ainsi être utilisée pour prévenir et/ou traiter les parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes, telles que les coccidioses, la malaria, la toxoplasmose, la néosporose et/ou la cryptosporidiose, de préférence les coccidioses, la malaria et/ou la toxoplasmose. Les composés individuels d'une telle combinaison peuvent être administrés séparément à différents moments au cours du traitement ou de manière concomitante dans des formes combinées ou séparées. Ainsi, la combinaison de la présente invention peut être destinée à une utilisation sous forme combinée ou séparée.
La combinaison décrite ci-dessus peut également être présente au sein d'une composition pharmaceutique et/ou vétérinaire. Ainsi, la présente invention concerne également une composition pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé de la présente invention tel que décrit ci-dessus, au moins un agent antiparasitaire et au moins un excipient acceptable pouvant être utilisée dans la prévention et/ou le traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes, telles que les coccidioses, la malaria, la toxoplasmose, la néosporose et/oula cryptosporidiose, de préférence les coccidioses, la malaria et/ou la toxoplasmose.
Les composés ou compositions de la présente invention destiné(e)s au traitement des humains peuvent être administrés par voie orale ou par voie parentérale, incluant les administrations intraveineuses, intramusculaires, intrapéritonéales, subcutanées, rectales ou topiques. Les compositions se présentent alors sous toutes formes appropriées selon les modes d'administration souhaités. En particulier, les compositions pharmaceutiques peuvent se présenter sous forme de poudre, lyophilisât, cachet, gélule, pilule, granule, comprimé, gel, pommade, crème, sirop, solution injectable, spray, patch.
Les composés ou compositions de la présente invention destiné(e)s au traitement des animaux peuvent être administrées selon toutes voies d'administration bien connues dans le domaine et adaptées au traitement de chacun des animaux. De préférence, elles sont administrées par voies orale et parentérale. Les compositions se présentent alors sous toutes formes appropriées selon les modes d'administration souhaités. Elles peuvent donc être sous la forme d'une solution ou d'une suspension liquide orale ou injectable, ou sous la forme solide ou semi-solide, de poudres, de comprimés, de capsules, de granules, de dragées, de gélules, de sprays, de cachets, de pilules, de tablettes, ou de pâtes. Par ailleurs dans le cas de formulations orales, celles-ci peuvent être administrées directement aux animaux ou bien mélangées à la nourriture.
La présente invention concerne également les composés de la présente invention pour leur utilisation en thérapie. Ainsi, la présente invention concerne également une méthode de prévention et/ou traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes comprenant l'administration à un sujet d'une dose efficace d'au moins un composé de la présente invention tel que décrit ci-dessus ou d'une composition comprenant au moins un composé de la présente invention tel que décrit ci-dessus et au moins un excipient acceptable. Le sujet peut être un humain ou un animal. En particulier, l'animal peut être choisi parmi les volailles et les ruminants.
La présente invention concerne, enfin, l'utilisation d'au moins un composé de la présente invention tel que décrit ci-dessus pour la préparation d'un médicament pour prévenir et/ou traiter les parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes, telles que les coccidioses, la malaria, la toxoplasmose, la néosporose ou la cryptosporidiose.
EXEMPLES
Préparation des composés C1 à C12
Figure imgf000022_0001
Les composés C1 à C12 sont préparés selon la méthode décrite dans J.Org.Chem. 201 1 , 76, 8347-8354.
Figure imgf000023_0001
Procédure générale d'obtention du noyau indolopyran-1 -one :
Dans un tube de Schlenk équipé d'un barreau aimanté, sont introduits 552 mg de K2C03 (4 mmol, 2 équivalents) et 750 mg d'acide iodoindolylcarboxylique (2 mmol, 1 équivalent), ainsi que 15 mL de DMF anhydre. La suspension est agitée pendant 15 minutes puis dégazée sous vide à -80°C et mise sous argon. Après avoir atteint la température ambiante, l'alcyne (4 mmol, 2 équivalents) est ajouté ainsi que 381 mg de Cul (2 mmol, 1 équivalent). Le tube de Schlenk est placé et agité dans un bain d'huile préchauffé à 1 10-120°C pendant 24-48h. Le mélange est ensuite refroidi à température ambiante et hydrolysé à 0°C avec une solution aqueuse saturée de NH4CI (15 mL) ; 50 mL d'éther sont ajoutés dans le tube de Schlenk et le mélange est filtré sur Celite®. La Celite® est ensuite lavée avec 50 mL d'éther. La phase aqueuse est éliminée et la phase organique est lavée trois fois avec de l'eau (3 x 15 mL). La phase organique est séchée sur MgS04 et concentrée sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie flash sur gel de silice pour donner les indolopyranones désirées.
2-[(9-Benzyl-1 ,9-dihydro-1 -oxopyrano[3,4-b]indol-3-yl)methyl]-2-(prop-2ynyl)malonate de diéthyle (C1)
Rendement: 30%; solide blanc. Mp: 165-166 °C. IR (KBr): 3256, 1735, 1709, 1628.
RMN H (300MHz,CDCI3): 1.31 (t, 6H, J = 7.1 ), 2.15 (t, 1 H, J = 2.5), 2.87 (d, 2H,J = 2.5), 3.44 (s, 2H), 4.25-4.37 (m, 4H), 5.89 (s, 2H), 6.90 (s, 1 H),7.01-7.34 (m, 6H), 7.40-7.50 (m, 2H), 7.89 (d, 1 H, J = 8.0).
RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 14.1 , 22.9, 36.3, 48.1 , 56.3, 62.3, 72.2, 79.0, 102.0, 1 1 1.5, 121.2, 121.3, 121.8, 125.6, 126.4, 127.1 , 127.6, 128.1 , 128.8, 137.5, 140.9, 151.2, 156.7, 169.3. MS (70 eV, El) m/z (%) = 485 (Μ·+, 19), 441 (40), 368 (17), 367 (33), 294 (1 1 ), 288 (17), 91 (100).
HRMS (ESI): calcul anal, pour Czgh NOe (M+H) 486.191 1 , mesuré 486.1914. 5-Benzyl-3-pentylpyrano[4,3-ft]indol-1(5W)-one (C2)
Rendement: 76%; solide incolore. Mp: 123-125 °C. IR (KBr): 3155, 3034-2872, 1713, 1626, 1608.
RMN H (300 MHz, CDCI3): 0.88 (t, 3H, J = 6.4), 1 .27-1.35 (m, 4H), 1.65-1.80 (m, 2H), 2.57 (t, 2H, J = 7.9), 5.38 (s, 2H), 6.29 (s, 1 H), 7.03-7.12 (m, 3H), 7.27-7.35 (m, 6H), 7.97-8.03 (m, 1 H). RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 14.1 , 22.5, 27.1 , 31.3, 34.6, 47.7, 92.7, 99.6, 109.9, 121.4, 122.8, 124.5, 126.3, 128.2, 129.2, 135.7, 138.4, 146.7, 160.2, 164.5.
LRMS (ESI) 346 (M+H).
HRMS (ESI): calcul anal, pour C23H23NO2 (M+H) 346.1729, mesuré 346.1736. 9-Benzyl-3-methoxymethylpyrano[3,4-b]indol-1(9H)-one (C3)
Rendement : 77%; solide incolore. Mp: 121-122 °C.
IR (KBr): 3069, 1714, 1626, 1615, 1212, 1084.
RMN H (300MHz, CDCI3): 3.50 (s, 3H), 4.36 (d, 2H, J = 0.7), 5.90 (s,2H), 7.00 (s,1 H), 7.20- 7.32 (m, 6H), 7.45 - 7.50 (m, 2H), 7.90 (d, 1 H, J = 8.0).
RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 48.0, 58.9, 71.0, 99.9, 1 1 1.5, 120.7, 121.3, 121.4, 121.7, 125.4, 127.1 , 127.6, 128.1 , 128.7, 137.4, 140.8, 152.3, 156.9.
MS (70 eV, El) m/z (%) = 319 (M*+,68), 288 (27), 260 (8), 168 (11 ), 91 (100).
HRMS (ESI): calcul anal, pour C2oH17N03 (M+H) 320.1281 , mesuré 320.1276. 5-Benzyl-3-hydroxypropylpyran[4,3-ft]indol-1(5W)-one (C4)
Rendement: 63%; solide orange. Mp: 149-151 °C.
IR (KBr): 3413, 2930-2860, 1713, 1559.
RMN H (300 MHz, CDCI3): 1.71 (bs, 1 H), 1.92-2.05 (m, 2H), 2.73 (t, 2H, J = 7.3), 3.71 (t, 2H, J = 6.1 ), 5.38 (s, 2H), 6.36 (s, 1 H), 7.03-7.10 (m, 2H), 7.23-7.39 (m, 6H), 8.18-8.26 (m, 1 H). RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 30.3, 31.0, 47.3, 61.7, 93.2, 99.7, 1 10.0, 121.4, 122.9, 124.5, 124.7, 126.4, 128.2, 129.2, 135.7, 138.5, 146.6, 160.2, 163.6.
LRMS (ESI) 333 (M+H), 356 (M+Na); 372 (M+K).
HRMS (ESI): calcul anal, pour C2i H19N03 (M+H) 333.1365, mesuré 333.1367. 2-((9-benzyl-1 -oxo-1 ,9-dihydropyrano[3,4-b]indol-3-yl)methyl)-2-methylmalonate de diéthyle (C5)
Rendement: 65%; solide beige. IR (neat) :3050, 2984, 2957, 1720, 1708, 1628, 1468, 1244, 1 149, 738.
RMN H (300 MHz, CDCI3) : 1.28 (t, 6H, J = 7.1 Hz), 1.51 (s, 3H), 3.25 (s, 2H), 4.21 ^1.32 (m, 4H), 5.90 (s, 2H), 6.80 (s, 1 H), 7.18-7.29 (m, 6H), 7.42-7.50 (m, 2H), 7.86 (d, 1 H, J = 8.0 Hz). RMN 3C (75 MHz, CDCI3) : 14.0, 19.1 , 39.3, 47.9, 53.5, 61.7, 101.6, 1 1 1.4, 121.1 , 121.2,
125.5, 127.0, 127.5, 128.0, 128.6, 137.4, 140.8, 151.9, 156.8, 171.3.
HRMS (ESI) : calcul anal, pour C27H28N06 (M+H) 462.19166, mesuré 462.19072.
2-((9-benzyl-1 -oxo-1 ,9-dihydropyrano[3,4-b]indol-3-yl)methyl)-2-methylmalonate de diisopropyle (C6)
Rendement: 35%. Solide beige. Mp: .IR (neat): 3264, 2982, 1725, 1707, 1628, 1 195, 1099, 739.
RMN H (300 MHz, CDCI3) : 1.26 (d, 6H, J = 6.2 Hz), 1.33 (d, 6H, J = 6.2 Hz), 2, 13 (t, 1 H, J = 2.6 Hz), 2.85 (d, 2H, J = 2.6 Hz), 3.40 (s, 2H), 2.06-5.28 (m, 1 H), 5.89 (s, 2H), 6.89 (s, 1 H), 7.16-7.29 (m, 6H), 7.42-7.50 (m, 2H), 7.88 (d, 1 H, J = 8.0 Hz).
RMN 3C (75 MHz, CDCI3) : 21 .6 (2C), 27.7, 35.9, 48.0, 56.2, 69.8, 72.0, 79.0, 101.9, 1 1 1.4,
120.6, 121.1 , 121.2, 121.6, 125.4, 127.0, 127.5, 128.0, 128.7, 137,4, 140.8, 151.3, 156.7, 168.6.
HRMS (ESI): calcul anal, pour C31 H32N06 (M+H) 514.22296, mesuré 514.22267.
2-((9-benzyl-1 -oxo-1 ,9-dihydropyrano[3,4-b]indol-3-yl)methyl)-2-methylmalonate de dibenzyle (C7)
Rendement: 28%. Solide jaune. IR (neat): 3290, 2958, 1806, 1715, 1628, 1628, 1612, 1455, 1 173, 739, 695.
RMN H (300 MHz, CDCI3) : 2.13 (t, 1 H, J = 2.6 Hz), 2.96 (d, 2H, J = 2.6 Hz), 3.49 (s, 2H), 5.25 (s, 4H), 5.91 (s, 2H), 6.87 (s, 1 H), 7.20-7.39 (m, 16H), 7.44-7.52 (m, 2H), 7.88 (d, 1 H, J = 8.0 Hz).
RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 22.9, 36.3, 48.0, 56.5, 67.9, 72.4, 76.6, 78.6, 85.8, 102.0, 1 10.1 , 1 1 1.4, 121.1 , 121.7, 127.0, 127.3, 127.6, 128.0, 128.3, 128.4, 128.5, 128.56, 128.6, 128.7, 129.0, 135.1 , 137.3, 140.8, 150.8, 168.9.
HRMS (ESI): calcul anal, pour C39H32N06 (M+H) 610.22296, mesuré 610.22255. 9-benzyl-3-(pyridin-2-yl)pyrano[3,4-b]indol-1 (9H)-one (C8)
Rendement : 75%. Solide blanc. Mp = 183-184 °C. IR (KBr): 3033; 1717; 1616; 1582; 1526; 1204; 1073; 1060; 789; 735.
RMN H (200 MHz, CDCI3) : 5.98 (s, 2H), 7.22-7.36 (m, 7H), 7.49 (m, 2H), 7.84 (t, 1 H, J = 7.7 Hz), 8.05 (t, 2H, J = 7.6 Hz), 8.19 (s, 1 H), 8.68 (d, 1 H, J = 4.6 Hz).
RMN 3C (50 MHz, CDCI3): 48.2, 100.0, 1 1 1.6, 1 19.9, 121.7, 121.8, 122.1 , 123.6, 126.3, 127.2, 127.7, 128.4, 128.8, 137.4, 141.2, 149.5, 150.0, 151.3, 156.4.
SM (70 eV, El) m/z (%) = 352 (M + , 100), 261 (51 ), 233 (26), 204 (10), 106 (10), 91 (54), 78 (19).
HRMS (ESI): calcul anal, pour C23H16N202 (M+H) 353.1285, mesuré 353.1273 9-benzyl-3-p-tolylpyrano[3,4-b]indol-1(9H)-one (C9)
Rendement: 60%. Solide blanc. Mp = 184-185 °C. IR (KBr): 3087; 3061 ; 3032; 1712; 1615; 1515; 1206; 1073; 816; 742.
RMN H (200 MHz, CDCI3) : 2.45 (s, 3H), 6.0 (s, 2H), 7.28-7.33 (m, 8H), 7.4 (s, 1 H), 7.51-7.54 (m, 2H), 7.85 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 8.01 (d, 1 H, J = 8.0 Hz).
RMN 3C (50 MHz, CDCI3): 21.5, 48.1 , 96.5, 1 1 1.6, 120.8, 121.2, 121.8, 125.0, 126.7, 127.2, 127.6, 128.2, 128.8, 129.6, 129.9, 137.5, 139.5, 141.1 , 153.2, 156.9.
SM (70 eV, El) m/z (%) = 365 (M , 100), 274 (63), 246 (21 ), 218 (27), 119 (12), 91 (44), 65 (12). HRMS (ESI): calcul anal, pour C25H19N02 (M+H) 366.1489, mesuré 366.1485.
3-(methoxymethyl)-9-methylpyrano[3,4-b]indol-1 (9H)-one (C10)
Rendement : 80%. Solide blanc. Mp = 80-82°C. IR (neat): 3056, 2946, 2829, 1733, 1701 , 1631 , 1461 , 1 195, 1055, 736.
RMN H (300 MHz; CDCI3) : 3.50 (s, 3H), 4.21 (s, 3H ), 4.37 (d, 2H, J = 0.6 Hz,), 6.70 (t, 1 H, J = 0.6 Hz), 7.25-7.31 (m, 1 H), 7.45-7.47 (m, 2H), 7.88 (ddd, 1 H; J = 8.1 , 1.2, 0.8 Hz).
RMN 3C (75 MHz; CDCI3) : 31.2, 58,7, 70.8, 99.8, 1 10.5, 120.9, 121.5, 124.7, 127.8, 141.2, 151.9, 157.1.
HRMS (ESI): calcul anal, pour C14H14N03 (M+H) 244.09737, mesuré 244.09656. 9-benzyl-3-phenylpyrano[3,4-b]indol-1(9H)-one (C11)
Rendement: 40%; solide jaune. Mp: 160-161 °C. IR (KBr): 3025, 2939, 1716, 1616, 1605, RMN H (300MHz, CDCI3): 5.97 (s, 2H), 7.20-7.53 (m, 12H), 7.92-8.00 (m, 3H).
RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 48.2, 97.3, 100.1, 111.6, 121.0, 121.4, 121.8, 125.1, 126.5, 127.2,
127.7, 128.3, 128.8, 129.0, 129.3, 132.7, 137.5, 141.2, 153.0, 156.8.
MS (70 eV, El) m/z (%) = 351 (M +, 100), 260 (59), 232 (23), 204 (18), 105 (12), 91, 45, 77 (14).
HRMS (ESI): calcul anal pour C24H17N02 (M+H) 352.1332, mesuré 352.1322.
(E)-9-benzyl-3-(2-(2,6,6-trimethylcyclohex-2-enyl)vinyl)pyrano[3,4-ft]indol-1(9H)-one (C12)
Rendement: 70%; solide orange. Mp: 86-88 °C. IR (KBr): 3060, 3031, 1710, 1640, 1593.
RMN H (300 MHz, CDCI3): 0.92 (s, 3H), 0.97 (s, 3H), 1.20-1.28 (m, 1H), 1.49-1.60 (m, 1H), 1.65 (d, 3H, J=1.3 Hz), 2.02-2.12 (m, 2H), 2.30 (d, 1H, J= 9.5 Hz), 5.50 (bs, 1H), 5.92 (s, 2H), 6.12 (d, 1H, J= 15.4 Hz), 6.46 (dd, 1H, J= 15.4, 9.5 Hz), 6.76 (s, 1H), 7.24-7.30 (m, 6H), 7.45- 7.53 (m, 2H), 7.87 (d, 1H, J= 8.0 Hz).
RMN 3C (75 MHz, CDCI3): 23.2, 23.2, 27.1, 28.1, 31.4, 32.8, 48.1, 54.8, 99.3, 111.5, 120.8, 121.2, 121.6, 121.8, 121.9, 123.3, 126.6, 127.2, 127.6, 128.1, 128.8, 133.3, 135.8, 137.6, 141.0, 152.0, 156.9.
MS (70 eV, El) m/z (%) = 423 (M +, 41), 368 (12), 367 (40), 331 (24), 301 (20), 289 (10), 288 (39), 91 (100).
HRMS (ESI): calcul anal pour C29H29NO2 (M+H) 424.2271, mesuré 424.2279.
Préparation des composés C13 à C16
Figure imgf000028_0001
C13 C14
Figure imgf000028_0002
Procédure générale d'obtention du noyau imidazo[1 ,2-a]pyridinpyran-1 -one :
Dans un tube de Schlenk équipé d'un barreau aimanté, sont introduits 478 mg de K2C03 (3.46 mmol, 2 équivalents) et 500 mg d'acide 3-iodoimidazo[1 ,2-a]pyridin-2-oïque (1 .73 mmol, 1 équivalent), ainsi que 10 mL de DMF anhydre. La suspension est agitée pendant 15 minutes puis dégazée sous vide à -80°C et mise sous argon. Après avoir atteint la température ambiante, l'alcyne (2.59 mmol, 1.5 équivalents) est ajouté ainsi que 330 mg de Cul (1.73 mmol, 1 équivalent). Le tube de Schlenk est placé et agité dans un bain d'huile préchauffé à 1 10- 120°C pendant 24-48h. Le mélange est ensuite refroidi à température ambiante et hydrolysé à 0°C avec une solution aqueuse saturée de NH4CI (15 mL) ; 50 mL d'éther sont ajoutés dans le tube de Schlenk et le mélange est filtré sur Celite®. La Celite® est ensuite lavée avec 50 mL d'éther. La phase aqueuse est éliminée et la phase organique est lavée trois fois avec de l'eau (3 x 15 mL). La phase organique est séchée sur MgS04 et concentrée sous vide. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie flash sur gel de silice pour donner les indolopyranones désirées. 3-[Cyclopropyl]pyrano[3',4':4,5]imidazo[1,2-a]pyridin-1-one (C13)
Rendement: 62%. Solide jaune. Mp = 150-152 °C. IR (KBr) : 3091, 2918, 1739, 1621, 1516, 1037.
RMN H (200 MHz; CDCI3) : 0.99-1.03 (m, 2H), 1.14-1,18 (m, 2H), 1.91-1,97 (m, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.96 (t, 1H, J = 6.6 Hz), 7.35 (dd, 1H, J = 9.4, 6.6 Hz), 7.71 (d, 1H, J = 9.4 Hz) ,8.12 (1H, d, J = 6.6Hz).
RMN 3C (50 MHz; CDCI3) : 7.5, 14.2, 89.5, 113.2, 119.1, 124, 126.4, 127.4, 132.2, 146.4, 158.2, 160.0.
SM (El) 226 (100), 197 (30), 184 (26), 169 (93), 155 (16), 129 (26), 78 (93), 51 (34) and 39 (14).
HRMS: calcul anal, pour C13H10N2O2 (M+): 226.0742, mesuré 226.0747.
3-(Diethoxymethyl)pyrano[3',4':4,5] imidazo[1,2-a]pyridin-1-one (C14)
Rendement : 43%. Solide jaune. Mp: 168-170 °C; IR (KBr) : 3059, 2974, 1734, 1685, 1636, 1506.
RMN H (200 MHz; CDCI3) : 1.30 (t, 6H, J = 7.0 Hz), 3.66-3.79 (m, 4H), 5.36 (s, 1H), 7.01 (t, 1H, J = 6.6, Hz), 7.16 (s, 1H), 7.40-7.43 (m, 1H), 7.74-7.76 (m, 1H), 8.18-8.21 (m, 1H).
RMN 3C (50 MHz; CDCI3) : 15.6 (2C), 63.0 (2C), 91.7, 98.0, 114.7, 120.3, 125.4, 128.8, 155.1, 158.7.
MS (El) 288 (M, 70), 260 (54), 243 (62), 231 (39), 215 (100), 185 (46), 78 (72), 75 (49), 47 (68). HRMS calcul anal, pour C15H16N2O4 (M+): 288.1110, mesuré 288.1119.
(E)-3-[2-(2,6,6-Trimethylcyclhex-2^nyl)vinyl]pyrano[3 4':4,5]imidazo[1,2-a]pyridin-1-one (C15).
Rendement: 60%. Solide jaune. Mp: 125-127 °C IR (KBr) : 3065, 2926, 1732, 1637, 1508, 1262, 1035.
RMN H (200 MHz; DMSO) : 0.85 (s, 3H), 0.91 (s, 3H), 1.50-1.53 (m, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.99- 2.02 (m, 2H), 2.36-2.40 (m, 1H), 5.48 (bs, 1H), 6.20-6.24 (m, 2H), 7.33 (t, 1H, J =6.4 Hz), 7.46 (s, 1 H), 7.53 (dd, 1 H, J = 9.0, 6.4 Hz), 7.72 (d, 1 H, J = 9.0 Hz), 8.74 (d, 1 H, J = 6.4, Hz); RMN 3C (50 MHz; DMSO) : 22.7, 26.6, 27.7, 30.8, 32.8, 53.5, 94.0, 1 13.8, 1 18.4, 121.6, 123.4, 126.7, 127.3, 129.3, 132.7, 132.8, 135.5, 135.7, 146.8, 152.2, 157.6.
MS (El) 334 (M+, 99), 278 (100), 249 (54), 213 (96), 149 (49) and 39 (34);
HRMS calcul anal, pour C21 H22N2O2 (M+):. 334.1681 , mesuré 334.1687. pyrano[3',4':4,5]imidazo[1,2-a]pyridin-1 -one (C16)
Rendement: 2%. Solide marron. Mp: 172-174 °C IR (ATR) : 3081 , 2925, 2853, 1727, 1096, 757, 740.
RMN H (300 MHz; CDCI3) : 1.29 (t, 6H, J = 7.1 Hz), 1.53 (s, 3H), 3.27 (s, 2H), 4.27 (q, 4H, J = 7.1 Hz) , 6.83 (s, 1 H), 7.01 (ddd, 1 H, J = 1.1 , 6.9 Hz), 7.43 (ddd, 1 H, J = 1.1 , 6.9, 9.2 Hz), 7.80 (ddd, 1 H, J = 1.1 , 9.2 Hz), 8.19 (ddd, 1 H, J = 1.1 , 6.9 Hz).
RMN 3C (75 MHz; CDCI3) : 14.0, 201.1 , 29.7, 39.8, 53.6, 61.9, 95.3, 1 14.0, 1 19.8, 124.7, 128.0, 136.3, 155.0, 171.1.
HRMS calcul anal, pour C19H21 N2O6 (M+H):. 373.13996 mesuré 373.1391 1
Inhibition du développement d'Eimeria tenella
L'effet des 15 composés dérivés du C1 (et en particulier C2, C3 et C5) sur le développement du parasite Eimeira tenella est déterminé en observant leur incidence sur la différenciation des sporozoites en schizontes, qui constitue une étape clef du développement des parasites.
Préparation des cellules :
Des cellules MDBK (Madin-Darby bovine kidney) sont mises en culture en plaque 24 puits contenant des lamelles de verres, 24h avant l'expérience. La concentration utilisée est de 1x105 cellules par puits, dans du milieu Ham's F12 avec 5% de SVF, 2mM glutamine, 10UI/mL pénicilline et ^g/mL streptomycine.
Les cellules sont ensuite placées dans une étuve à 41 °C en atmosphère contenant 5% de C02.
Préparation des parasites :
Des parasites exprimant le gène de la Yellow Fluorescent Protein (YFP) sont purifiés à partir d'oocystes comme décrit par Rieux et al, Plos One 2012.
Les oocystes sporulés sont broyés mécaniquement à l'aide de billes de verre de 0,5 mm. Les parasites sont centrifugés à 800G, 5 min, 20°C et lavés 3 fois en PBS pour éliminer les débris de parois. Les sporocystes sont ensuite incubés dans un milieu d'excystation (Sels biliaires 0,5%, Trypsine 0,25% dilué en PBS pH 7,6) à 41 °C pendant 75 minutes. Les sporozoïtes sont purifiés par deux étapes de filtration, la première sur du coton puis sur un filtre de polycarbonate de 5μΜ (GE Water &ProcessTechnology). Préparation des composés :
Les composés C1 , C2, C3, C4 et C5 sont dissous dans du DMSO (Diméthylsulfoxyde) à une concentration de 10mM.
Infection des cellules :
Les parasites (2x105) sont mis au contact des cellules (1x105) en même temps que le composé à tester (C1 , C2, C3, C4 et C5) dans un volume final de 500μί par puits. Pour chaque composé testé, le test est réalisé en double dans 2 puits différents. Un témoin (réalisés en double dans 2 puits) sert de témoin de développement. Il est constitué des parasites et des cellules sans ajout de composé à tester. Un autre témoin (également en double) est utilisé pour tester la toxicité du DMSO dans lequel sont dissouts les composés à tester. Il est constitué des cellules, des parasites et du solvant (DMSO) à la concentration maximale utilisée pour l'expérimentation.
Les cellules sont ensuite placées dans une étuve à 41 °C en atmosphère contenant 5% de C02. Le milieu de culture est changé deux fois par jour à partir de 16h PI (Post-infection), les inhibiteurs sont renouvelés en même temps que le milieu.
Observation des parasites en absence et en présence du composé C1 :
Les cellules sont lavées et fixées à l'Antigène fixe à 48h Pl. Les lamelles sont ensuite mises en contact avec du milieu de montage (Vectashield) contenant du DAPI avant d'être sellées.
Les résultats sont présentés à la figure 1 . Il peut être observé qu'en présence du composé C1 , le nombre de schizontes observés (B) est plus faible.
Calcul du pourcentage d'invasion:
Dans un premier temps, le pourcentage d'invasion est calculé. Trois comptages sont effectués pour déterminer le nombre de cellules et le nombre de parasite total (sporozoites + schizontes).
Formule : (Nb parasites / Nb cellules) * 100
Calcul du pourcentage de développement : Pour déterminer le pourcentage de développement, il est nécessaire de comparer le nombre de parasite total et le nombre de schizontes présents.
Formule : (Nb schizontes / Nb parasites) * 100
Les effets des composés sur l'invasion et le développement des parasites sont présentés aux figures 2 et 3.
La figure 2 met en évidence une inhibition dose dépendante du développement des parasites par le composé C1. Il peut être observé que le composé C1 n'inhibe pas l'invasion mais inhibe fortement la différenciation des sporozoïtes en schizontes.
Test de cytotoxicité au MTT :
Après incubation des cellules en présence de 20 μΜ des composés pendant 1 heure, le milieu de culture est éliminé, 1 mL de milieu complet frais est ajouté aux cellules ainsi que 200 μί de MTT (Dimethyl thiazol-diphenyl-tetrazolium bromide, à 5 mg/mL). Les cellules sont placées à 41 °C pendant 2 heures en atmosphère contenant 5% de C02. Le milieu de culture est éliminé, et 200 μί de tampon d'extraction (HCI 4 mM en isopropanol) sont ajoutés. Les cellules sont incubées 10 minutes à 37°C en atmosphère contenant 5% de C02. Le tampon d'extraction est prélevé, centrifugé 5 minutes à 1400 rpm pour éliminer les débris cellulaires. Le surnageant est transféré en plaque P96, et la densité optique (DO) est lue à 570 nm. L'intensité est proportionnelle à la quantité de cellules vivantes. Le pourcentage de réduction de la DO est calculé :
Formule : (DOCOmposé / DODMSO ) * 100
La figure 3A présente les effets des composés C1 , C2, C3, C4 et C5 sur l'invasion et le développement par rapport au contrôle. Il peut être observé que chacun des composés testés inhibe fortement la différenciation des sporozoïtes en schizontes sans influencer l'invasion. La figure 3B présente l'absence d'effets cytotoxiques des composés C1 , C2, C3, C4 et C5 sur les cellules par rapport au contrôle (DMSO).
Inhibition du développement de Toxoplasma gondii L'effet de composés chimiques sur le développement du parasite Toxoplasma gondii est déterminé en observant leur incidence sur la formation de plages de lyses qui illustre la multiplication de parasite sur un tapis cellulaire. Préparation des cellules :
Des cellules HFF (Human Foreskin Fibroblast) sont mises en culture en plaque 6 puits pour être à confluence au moment de l'expérimentation. Les cellules sont dans du milieu DMEM avec 10% de SVF, 2mM glutamine, 10U/mL péniciline et ^g/mL de streptomycine.
Les cellules sont ensuite placées dans une étuve à 37°C en atmosphère contenant 5% de C02
Préparation des parasites :
Les tachizoites de Toxoplasma gondii sont maintenus en routine sur des cultures de HFF cultivées dans du milieu DMEM (voir ci-dessus). Avant la mise en contact sur les cellules HFF les parasites sont filtrés avec un filtre de polycarbonate de 5μΜ (GE Water & Process Technology)
Préparation des composés :
Les composés à tester sont dissous dans du DMSO (Diméthylsulfoxyde) à une concentration de 10mM.
Infection des cellules :
Les parasites (1x104/puit) sont déposés sur les cellules à confluence en même temps que le composé à tester dans un volume final de 3mL par puits. Pour chaque composé, le test est réalisé en double dans deux puits différents. Un contrôle sans composé (réalisé en double dans 2 puits différents) sert de témoin de développement. Il est uniquement composé des cellules et des parasites. Un autre témoin (également en double) est testé pour vérifier l'absence d'effet néfaste du DMSO sur le développement. Il est constitué des cellules, des parasites et du solvant (DMSO) à la concentration maximale utilisée pour l'expérimentation. Après ajout des parasites et des composés, les cellules sont placées dans une étuve à 41 °C en atmosphère contenant 5% de C02.
Le milieu de culture ne doit pas être changé et la plaque ne doit pas être déplacée pendant toute la durée de l'infection
Marquage des HFFs et révélation des plages de lyses : Les cellules sont fixées au méthanol froid (conservé à -20°C) pendant 5 minutes. Les cellules sont ensuite lavées au PBS avant d'être colorées au Crystal Violet pendant 1 à 5 minutes. Les plaques sont lavées abondamment pour enlever l'excédent de colorant et sont séchées à l'air libre. Les plages de lyses reflétant le développement de Toxoplasma vont apparaître comme des plages claires sur le fond violet des HFFs. Une diminution du développement du parasite entraine une diminution du nombre de plages observées et de leurs superficies.
Calcul de la superficie des plages de lyses :
La superficie des plages de lyses est calculée par l'utilisation d'un logiciel de traitement d'image de microscopie (Zeiss Axiovision). La superficie moyenne est calculée pour chaque condition et est exprimée comme le pourcentage de la moyenne d'une condition par rapport au contrôle sans inhibiteur avec son écart type.
Les résultats sont présentés aux figures 4A et 4B qui mettent en évidence la diminution dose dépendante de la surface des plages de lyses illustrant le développement du parasite Toxoplasma gondii.
Inhibition du développement de Plasmodium falciparum
Les travaux sur P. falciparum ont été réalisés par Henri Vial et son équipe (UMR 5235, Dynamique des Interactions Membranaires Normales et Pathologiques, CNRS Université Montpellier II, Case 107, Place Eugène Bataillon, 34095 Montpellier, Cedex 05, France). L'effet des composés chimiques sur le développement du parasite Plasmodium falciparum est déterminé in vitro en évaluant leur activité contre ce parasite après 48h de culture de contact (soit le temps d'un cycle de P. falciparum). Cette activité pharmacologique est évaluée par incorporation par le parasite d'hypoxanthine tritiée et est confirmée par microscopie optique après coloration au Giemsa.
Préparation des parasites et des cellules :
L'effet du composé C1 sur la croissance in vitro de Plasmodium falciparum est mesuré sur des érythrocytes en suspension infectés par la souche P. falciparum 3D7 (1 ,5% d'hématocrite finale et 0,6% de parasitémie) en micro-plaques 96 puits comme décrits par Desjardins et al (Dejardins, 1979). Le volume de chaque puit est de 200μί final de milieu de culture complet CM (RPMI 1640 25 mM Hepes + 10% de sérum humain AB) sans (Contrôle) ou en présence du composé C1 . La culture est mise en étuve pendant 48h à 37°C. Préparation des composés :
Le composé C1 a été dissous dans du DMSO (Diméthylsulfoxyde). La concentration finale de DMSO ne dépasse jamais 0,25%.
Evaluation des effets anti-malaria :
Après les 48h de cultures, 30μί de milieu complet contenant Ο,θμθί [3H]-hypoxanthine sont ajoutés dans chaque puits. Les plaques sont incubées pendant 18h à 37°C. Les cellules sont ensuite lysées et les macromolécules parasitaires, incluant les acides nucléiques radioactifs sont récupérés avec des filtres de fibre de verre. Un cocktail de scintillation est ajouté et la radioactivité des filtres est évaluée en phase liquide par un spectromètre de scintillation.
Le bruit de fond de radioactivité est obtenu par l'incubation de cellules non infectée dans les mêmes conditions que précédemment. L'effet antiparasitaire est exprimé comme riC50, dose à laquelle la drogue entraine une inhibition de 50% du développement parasitaire. Les résultats sont présentés à la figure 5. L'IC5o du composé C1 contre la croissance de Plasmodium falciparum après 48 h de contact (un temps de cycle) est de 14 micromolaires.
L'activité antiparasitaire est confirmée par examen de frottis colorié au Giemsa.

Claims

REVENDICATIONS
1. Composés de formule (I)
Figure imgf000036_0001
-A-B- représente
Figure imgf000036_0002
o avec X représentant un atome d'oxygène ou d'azote ;
o avec Ri représentant un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycloalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycloalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
Y représente un atome d'azote substitué, ou non, par un groupement R2 avec R2 représentant un atome d'hydrogène, un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
Z représente un atome de carbone ou d'azote ;
W représente un atome de carbone ou d'azote, à la condition que lorsque W est un atome d'azote, Z est un atome d'azote et V est un atome de carbone substitué par R3;
n représente le nombre entier 0 ou 1 ;
V représente un atome de carbone ou de soufre, à la condition que lorsque V est un atome de soufre, n est égal à 0, Z est un atome d'azote et W est atome de carbone ;
R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, alkylthio, arylthio, alkyloxy, aryloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène, de préférence R3 représente un hydrogène ; pour utilisation dans la prévention et/ou le traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes.
2. Composés pour utilisation selon la revendication 1 dans laquelle les parasitoses sont choisies parmi les coccidioses, telles que les coccidioses aviaires, bovines, porcines ou ovines, la malaria, la toxoplasmose, la néosporose ou la cryptosporidiose.
3. Composés pour utilisation selon la revendication 1 ou 2, caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (I) dans laquelle V, W et Z représentent un atome de carbone, Y représente un atome d'azote substitué par un groupement R2 et n est égal à 1.
4. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (IV) :
Figure imgf000037_0001
(IV) dans laquelle :
- Ri représente un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
- R2 représente un groupement alkyle, aryle, arylakyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
- R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, arylthio, alkylthio, aryloxy, alkyloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène, de préférence R3 représente un hydrogène.
5. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (V) :
Figure imgf000038_0001
dans laquelle :
- Ri représente un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, halogène, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, alkylthio, amino, nitro, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, ester et/ou cétone ;
- R2 représente un groupement alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, alkylcarbonyle, arylcarbonyle ou hétéroarylcarbonyle ;
- R3 représente un hydrogène, un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, alkylthio, alkyloxy, aryle, hétéroaryle, amino ou un halogène, de préférence R3 représente un hydrogène.
6. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (I), (IV) ou (V) dans laquelle Ri représente :
- un groupement alkyle ou alcényle comprenant de 1 à 6 atomes de carbone, substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyloxy, ester, alcyne et/ou cycloalkyle ;
- un groupement phényle ;
- un groupement phényle substitué en ortho, méta ou para par un groupement alkyle comprenant de 1 à 3 atomes de carbone, halogène, alkyloxy, alkylthio, nitro, amino ; ou
- un groupement thiophène ou pyridine.
7. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (I), (IV) ou (V) dans laquelle R2 représente un groupement benzyle ou méthyle.
8. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, caractérisés en ce que lesdits composés prése
Figure imgf000039_0001
(VI)
dans laquelle :
- -A-B- représente
Figure imgf000039_0002
o avec Ri représentant un groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycloalkyle, ledit groupement alkyle, alcényle, alcynyle, aryle, hétéroaryle ou cycolalkyle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle et/ou ester;
- Y représente un atome d'azote substitué, ou non, par un groupement R2 avec R2 représentant un groupement alkyle ou arylalkyle ; et
- Z représente un atome de carbone ou d'azote.
9. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 8, caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (VII):
Figure imgf000040_0001
Ri représente un groupement alkyle, alcényle, aryle ou hétéroaryle, ledit groupement alkyle, alcényle, ou aryle, pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, cycloalkyle et/ou ester.
10. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3 et 8, caractérisés en ce que lesdit le (VIII):
Figure imgf000040_0002
(VIII)
dans laquelle :
Ri représente un groupement alkyle, alcényle, aryle, ou hétéroaryle, ledit groupement alkyle, alcényle, ou aryle, pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) hydroxyle, alkyle, alcényle, alcynyle, alkyloxy, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle et/ou ester ; et
R2 représente un groupement alkyle ou arylalkyle, préférentiellement benzyle ou méthyle.
1 1 . Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, et 8 caractérisés en ce que lesdits composés présentent la formule (IX):
Figure imgf000041_0001
dans laquelle :
Ri représente un groupement alkyle, alcényle ou cycloalkyle, ledit groupement alkyle ou alcényle pouvant être substitué, ou non, par un ou plusieurs groupement(s) alkyle, alcényle, alkyloxy, cycloalkyle et/ou ester;
12. Composés pour utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes choisis parmi :
Figure imgf000042_0001
Figure imgf000042_0002
Figure imgf000043_0001
C13 C14
Figure imgf000043_0002
C15 C16
13. Composition pharmaceutique ou vétérinaire comprenant au moins un composé de formule (I) tel que décrit dans l'une quelconque des revendications 1 à 12 et au moins un excipient acceptable.
14. Composition pharmaceutique ou vétérinaire selon la revendication 13 pour utilisation dans la prévention et/ou le traitement des parasitoses induites par des parasites appartenant au phylum des apicomplexes.
15. Composition pharmaceutique ou vétérinaire selon la revendication 13 ou 14 comprenant en outre un agent antiparasitaire.
16. Composition pharmaceutique ou vétérinaire selon l'une quelconque des revendications 13 à 15 destinée à être administrée par voie orale.
17. Combinaison comprenant au moins un composé de formule (I) tel que décrit dans l'une des revendications 1 à 12 et au moins un agent antiparasitaire.
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