WO2014173029A1 - 氮芥衍生物及其制备方法和肿瘤治疗应用 - Google Patents

氮芥衍生物及其制备方法和肿瘤治疗应用 Download PDF

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WO2014173029A1
WO2014173029A1 PCT/CN2013/080404 CN2013080404W WO2014173029A1 WO 2014173029 A1 WO2014173029 A1 WO 2014173029A1 CN 2013080404 W CN2013080404 W CN 2013080404W WO 2014173029 A1 WO2014173029 A1 WO 2014173029A1
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nitrogen mustard
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
route
derivative
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齐传民
李石磊
王潇
常进
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北京师范大学
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    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/86—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in position 4
    • C07D239/94—Nitrogen atoms

Definitions

  • Nitrogen mustard derivative preparation method thereof and tumor treatment application
  • the present invention relates to novel nitrogen mustard derivatives, processes for their preparation and use as therapeutic agents for tumors. Background technique:
  • Nitrogen mustard is the earliest clinical anti-tumor deuteration agent. Since its inception, the development of new nitrogen mustard drugs has been enduring. In the development of nitrogen mustard drugs, how to improve the therapeutic index by introducing new drug carriers to reduce the toxicity of drugs and increase the selectivity of tumors is the common direction of scientists from all countries. At present, research based on this idea mainly focuses on the following three directions: introduction of sugars and their derivatives into drug molecules, introduction of amino acids or small peptides into drug molecules, and introduction of tumor-tolerant heterocycles in drug molecules. Among the three directions, the most research on the third direction is also considered to be the most promising.
  • heterocyclic molecules which have been reported to have good effects mainly include benzimidazole, acridine and the like, and the introduced heterocyclic molecules often have certain antitumor activities.
  • quinazoline derivatives have also been gradually applied to the development of novel nitrogen mustard drugs.
  • quinazoline derivatives As an important class of heterocyclic compounds, quinazoline derivatives have been widely used in the development of novel anticancer drugs in recent years. Among them, gefitinib is used in the treatment of clinical cancer, and the research of new quinazoline derivatives as anticancer drugs is still in progress. Among these drugs, most of the drugs have a 4-phenyl, 6,7-substituted quinazoline parent ring structure.
  • the present invention provides a novel nitrogen mustard derivative of the formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof having a better antitumor effect, and has great potential for becoming an antitumor drug: Wherein R is N(CH 2 CH 2 C1) 2 .
  • the present invention provides a derivative of formula II or a pharmaceutically acceptable salt thereof having a better antitumor effect:
  • R1 N(CH2CH2C1)2.
  • R2 H
  • R1 H
  • R2 N(CH2CH2C1)2
  • Route D wherein 6,7-dimethoxy-3H-quinazolin-4-one is synthesized as follows (route C1):
  • the present invention provides a nitrogen mustard derivative of formula A or a pharmaceutically acceptable salt thereof having a better antitumor effect:
  • a method for preparing a nitrogen mustard derivative of the formula A or a pharmaceutically acceptable salt thereof is provided, which is characterized by the following compound synthesis route: Synthesis of 4-chloro-substituted quinolin from 3,4-dimercaptobenzoic acid The oxazoline parent ring, synthesizing aniline mustard from m-nitroaniline, and obtaining the intermediate compound by refluxing the obtained two kinds of compounds in isopropanol, and then by hydrolysis and with 3-chloropropyl morphine The reaction gave A.
  • the present invention provides a nitrogen mustard derivative of formula B or a pharmaceutically acceptable salt thereof having a better antitumor effect:
  • a method for preparing a nitrogen mustard derivative of the formula B or a pharmaceutically acceptable salt thereof which is characterized in that the compound is synthesized: a 4-chloro-substituted quinazoline is synthesized from 3,4-dimercaptobenzoic acid.
  • the porphyrin parent ring synthesizing aniline mustard with p-chloronitrobenzene as a raw material, and obtaining the intermediate compound by refluxing the obtained two kinds of compounds in isopropanol, and then by hydrolysis and with 3-chloropropyl morphine The reaction gives B.
  • the invention provides a pharmaceutical composition
  • a pharmaceutical composition comprising the nitrogen mustard derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof, and comprising a pharmaceutically acceptable carrier.
  • the present invention provides the use of the nitrogen mustard derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof for the preparation of a therapeutic agent for tumors.
  • the present invention provides the nitrogen mustard derivative or a pharmaceutically acceptable salt thereof for use in the preparation of a therapeutic
  • the ruthenium, ruthenium-bis(2-chloroethyl)nitroaniline 1.04 g (4 mmol) was dissolved in 5 mL of methanol, and O.lg palladium on carbon (10%) was used for catalytic hydrogenation. After lh, the TLC followed the reaction completely, and the palladium carbon was removed by suction filtration, and the solvent was quickly spun off and the next reaction was directly carried out.
  • R! H.
  • R 2 N(CH 2 CH2CI) 2 , route c synthesis steps:
  • 6-acetoxy-7-methoxyquinazolin-4-one (4 g, 0.017 mol), phosphorus oxychloride (30 mL), DMF (1 mL) were added to a 100 mL single-neck round bottom flask, and the temperature was slowly raised to three. The chlorophosphorus chloride was refluxed, refluxed for 8 h, cooled, and the phosphorus oxychloride was evaporated under reduced pressure.
  • the target compound of the present invention the synthesis step has a high yield and is easy to produce.
  • the toxicity of the target compound in the present invention is relatively small, and is a characteristic which is not possessed by a general nitrogen mustard compound.
  • Figure 1 is a graph showing tumor growth curves of four groups of tumor-bearing nude mice based on experimental data.
  • Figure 2 is a graph showing the change in mean body weight of each group of mice over time based on experimental data.
  • Example A Inhibition of five common tumor cells Tumor cells (HepG2, SY5Y, MCF-7, A549, DU145) in logarithmic growth phase were digested with 0.25% trypsin, and then diluted with culture medium (DMEM + 10% FBS or PRMI 1640 + 10% FBS) The cells were suspended in a single cell suspension, and the cell density was adjusted to 1.0 ⁇ 10 4 cells/mL. Each well was added to a 96-well plate by adding ⁇ , and cultured in a 37 ° C, saturated humidity, 5% carbon dioxide incubator for 24 hours.
  • DMEM + 10% FBS or PRMI 1640 + 10% FBS culture medium
  • RPMI1640 medium containing 10% fetal bovine serum, penicillin 100 U/mL, streptomycin 100 g/mL was added to HepG2 cells, cultured in a single layer and incubated in an incubator of 5% C0 2 , saturated humidity, 37 ° C, The culture medium was changed once every 3 days. After the cells cover 80%-90% of the culture flask wall, subculture is carried out as described above. When the cells were grown to a sufficient number to make the model, digest with 0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA solution, wash the cells twice with PBS; centrifuge at 1000 rpm for 5 min, collect the cells; suspend the cells with 0.9% saline. To a volume of 5 X 107/mL cell suspension, 0.2 mL of cell suspension was injected into the right forelimb of the right forelimb of each nude mouse.
  • mice with tumor size and body weight were selected from the obtained HepG2 tumor-bearing nude mice. Twenty nude mice were randomly divided into four groups. One group is the drug group to be tested (1), one group is the drug group to be tested (2), one group is a positive control group, and one group is a negative control group.
  • Figure 1 shows the tumor growth curves of four groups of tumor-bearing nude mice based on experimental data.
  • the compound has better antitumor activity than sorafenib in HepG2 tumor-bearing nude mice, and the growth rate of HepG2 tumor-bearing mice after treatment with sorafenib is obvious. It is slower than the growth rate of tumors in the negative control group, and there is a significant dose-effect relationship between the inhibitory effects on tumors at different doses.
  • Figure 3 is a graph showing the ratio of each cell cycle obtained by flow cytometry analysis of HepG2 cells treated with different concentrations of the above compounds, showing a strong G2/M cycle inhibition effect, demonstrating that the anticancer mechanism of the compounds contains nitrogen.
  • the ruthenium, ruthenium-bis(2-chloroethyl)-3-nitroaniline 1.04 g (4 mmol) was dissolved in 5 mL of methanol, and O. lg palladium carbon (10%) was used for catalytic hydrogenation. After lh, the TLC followed the reaction completely, and the palladium carbon was removed by suction filtration, and the solvent was quickly spun off and the next reaction was directly carried out.
  • N ⁇ N 1 -bis(2-chloroethyl)-N3-(7-methoxy-6-hydroxy-quinazolin-4-yl)p-phenylenediamine (0.12 mmol, 50mg)
  • potassium carbonate (0.24mmol, 33.2mg)
  • 1.60mL DMF 1.60mL DMF
  • IR (KBr pellet, cm-1): 3385, 3264, 3076, 2945, 2812, 2766, 2371, 1624, 1582, 151 6, 1435, 1248, 1117, 993, 862, 814, 745, 619, 546.

Abstract

新的式I的氮芥衍生物或其可药用盐，其中 R是 N(CH2CH2Cl)2。实验表明，该类化合物能抑制细胞周期于G2/M期，是一种双功能烷化剂。体内抗肿瘤活性实验表明，该类化合物具有较好的活性。不仅如此，该类化合物还具有氮芥类药物所没有的优势，即毒性较小。同时，该类化合物易于合成，总产率较高。种种优势，显示此类化合物具有成为肿瘤治疗药物的巨大潜力。

Description

氮芥衍生物及其制备方法和肿瘤治疗应用 技术领域：
本发明涉及新的氮芥衍生物及其制备方法和作为肿瘤治疗药物的应用。 背景技术：
肿瘤是严重威胁人类健康的一种疾病。 多年来， 各国科学家进行了不懈的 努力， 一直试图寻找出更适合的肿瘤化疗药物进行肿瘤的治疗。
氮芥类药物是最早应用于临床的抗肿瘤垸化剂， 自问世以来， 对新型氮芥 类药物的开发一直经久不衰。 在氮芥类药物的开发过程中， 如何通过引入新的 药物载体使得药物的毒性降低、 对肿瘤的选择性升高， 从而提高治疗指数， 这 是各国科学家共同的努力方向。 目前， 基于这种思路的研究主要集中在以下三 个方向： 在药物分子中引入糖及其衍生物， 在药物分子中引入氨基酸或小肽以 及在药物分子中引入亲肿瘤的杂环。 在这三个方向中， 关于第三个方向的研究 最多， 也被认为最有前景。
目前， 经文献报道的效果较好的杂环分子主要有苯并咪唑、 吖啶等等， 所 引入的这些杂环分子往往也具有一定的抗肿瘤活性。 喹唑啉衍生物作为一类被 广泛研究的抗肿瘤化合物， 也逐渐被应用于了新型氮芥类药物的开发中。
作为一类重要的杂环化合物， 喹唑啉衍生物近年来在新型抗癌药物开发过 程中得到了广泛的应用。 其中， 吉非替尼被应用于临床癌症的治疗， 而新型的 喹唑啉类衍生物作为抗癌药物的研究还在不断的进行中。 在这些药物中， 绝大 部分的药物均具有 4-苯基、 6,7-取代的喹唑啉母环结构。
因此， 尝试将氮芥官能团直接引入到吉非替尼的 4-苯环上， 寻找出一条合 适的合成路线， 或能开发出一种性能优异的抗肿瘤药物。 至今， 关于以喹唑啉 衍生物为载体的氮芥类化合物作为抗肿瘤药物的研究只有为数不多的报道， 未 能完全挖掘出这类化合物作为抗肿瘤药物的潜力。 这也使得这一发明具有较高 的创新性。 发明内容：
本发明提供了新的具有较好抗肿瘤效果的式 I的氮芥衍生物或其可药用盐， 具有成为抗肿瘤药物的巨大潜力：
Figure imgf000004_0001
其中， R是 N(CH2CH2C1)2。
在优选的实施方案中， 本发明提供了具有较好的抗肿瘤效果的式 II的 衍生物或其可药用盐：
Figure imgf000004_0002
式 II
其中 RfNCHsCHsCl^, R2=H， 或者 R^H, R2=N(CH2CH2C1):
其具体合成步骤包括三部分， 路线如下：
苯胺氮芥合成路线如下 (路线 B
Figure imgf000004_0003
Y - 3- or -HH2 R = N(CH2CH2CI)2, R2 =H, or DBA - Diet sfioSat!iirie R! =H, R2 = N(CH2CH2CI}2, 路线 B 喹唑啉母环合成路线如下 (路线 C):
Figure imgf000005_0001
路线 c 目标化合物合成路线如下 (路线 D):
Figure imgf000005_0002
R1=N(CH2CH2C1)2. R2=H
R1=H, R2=N(CH2CH2C1)2
路线 D 其中， 6,7-二甲氧基 -3H-喹唑啉 -4-酮的合成如下 (路线 C1):
丫 H 。
10 c 、 Ύ圃 HC Hs
Figure imgf000005_0003
路线 CI 在优选的实施方案中， 本发明提供了具有较好的抗肿瘤效果的式 A的氮芥 衍生物或其可药用盐：
Figure imgf000006_0001
式 A
相应地， 提供了式 A的氮芥衍生物或其可药用盐的制备方法， 其特征在于 如下的化合物合成路线： 以 3,4-二垸基苯甲酸为原料合成 4-氯取代的喹唑啉母 环， 以间硝基苯胺为原料合成苯胺氮芥， 通过将所得的两类化合物在异丙醇中 回流的方法得到中间体化合物， 然后再通过水解以及跟 3-氯丙基吗琳反应得到 A。
在优选的实施方案中， 本发明提供了具有较好的抗肿瘤效果的式 B的氮芥 衍生物或其可药用盐：
Figure imgf000006_0002
式 B
相应地， 提供了式 B的氮芥衍生物或其可药用盐的制备方法， 其特征在于化 合物的合成路线： 以 3,4-二垸基苯甲酸为原料合成 4-氯取代的喹唑啉母环， 以对 氯硝基苯为原料合成苯胺氮芥， 通过将所得的两类化合物在异丙醇中回流的方 法得到中间体化合物， 然后再通过水解以及跟 3-氯丙基吗琳反应得到 B。
在另一方面， 本发明提供了包含所述氮芥衍生物或其可药用盐并且包含可 药用载体的药物组合物。
在另一方面， 本发明提供了所述氮芥衍生物或其药用盐在制备肿瘤治疗药 物中的应用。
在另一方面， 本发明提供了所述氮芥衍生物或其可药用盐在制备用于治疗
HepG2, SY5Y, MCF-7, A549, DU 145肿瘤细胞的药物中的应用。 路线 B合成步骤：
1 ) Ν,Ν-二 (2-羟乙基 )-4-硝基苯胺的合成
取 4-氯硝基苯 6.32g (0.04mol)、 二乙醇胺 8.46g (0.08mol)于 lOOmL圆底烧瓶 中， 混合均匀， 115〜120°C搅拌 6h， 趁热倒入热水中， 充分搅拌。 趁热过滤， 静置后滤液析出固体， 抽滤， 固体 3.25g， 产率 36%。
Figure imgf000007_0001
2) Ν,Ν-二 (2-羟乙基 )-3-硝基苯胺的合成
取 3-硝基苯胺 5.52g (0.04moi:)， 加入 80mL 25%的醋酸水溶液中， 冰浴下滴 加环氧乙垸 10mL。 升温至室温， 搅拌 72h， 抽滤， 水洗涤滤饼， 烘干得黄橙色 固体 8.02g， 产率 88%。
Figure imgf000007_0002
3 ) Ν,Ν-二 (2-甲磺酸酯乙基)硝基苯胺的合成
取 Ν,Ν-二 (2-羟乙基)硝基苯胺 2.26g (O.Olmol),加入 30mL重蒸二氯甲垸中， 冰浴下， 加入 3.32mL (0.025mol)三乙胺， 后加入甲磺酰氯 1.93mL (0.025mol)。 lOmin后 TLC跟踪至反应完全， 反应液依次用饱和碳酸氢钠溶液、 饱和氯化钠 水溶液洗涤后， 分出有机相， 用无水硫酸钠干燥。 旋去溶剂得橙色固体， 产率 90-98%。
Figure imgf000007_0003
Ν,Ν-二 (2-氯乙基)硝基苯胺的合成
取 Ν,Ν-二 (2-甲磺酸酯乙基)硝基苯胺将 1 58g (4.98mmol)溶于 3mL DMF中， 加入氯化锂 0.423g(10mmol)， 加热至 110°C。 lOmin后 TLC跟踪至反应完全， 冷却，向反应液中加入 45mL水，二氯甲垸萃取。有机相用饱和食盐水洗涤两次， 无水硫酸钠干燥。 旋去溶剂得黄色固体。 产率 90-95%
Figure imgf000008_0001
5 ) N,N-二 (2-氯乙基)苯二胺的合成
取 Ν,Ν-二 (2-氯乙基)硝基苯胺 1.04g (4mmol)溶于 5mL甲醇， 加入 O.lg钯碳 (10%)催化氢化。 lh后 TLC跟踪反应完全， 抽滤除去钯碳， 迅速旋去溶剂并直接 进行下一步反应。
C
Figure imgf000008_0002
R = N(CH2CH2CI)2, R2 =H, or
R! = H. R2 = N(CH2CH2CI)2 , 路线 c合成步骤：
1 ) 6-羟基 -7-甲氧基 -3H喹唑啉 -4-酮的合成
在 50mL单口圆底烧瓶中， 加入 5g (0.024mol) 6,7-二甲氧基 -3H喹唑啉 -4- 酮、 甲磺酸 (30mL)和 L-蛋磺酸 (5g， 0.033mol), 缓慢加热升温至 120°C， 该条件 下反应 6h。 反应液中加入适量冰水， 然后用 40% NaOH溶液调节 pH=7， 有大 量白色沉淀生成， 抽滤， 冰水洗涤， 得白色固体， 晾干， 产率 90%。
Figure imgf000008_0003
2) 6-乙酰氧基 -7-甲氧基喹唑啉 -4-酮的合成
在 50mL单口圆底烧瓶中，加入 4g(0.021mol) 6-羟基 -7-甲氧基 -3H喹唑啉 -4- 酮、 30mL乙酸酐、 5mL吡啶、 10mg DMAP, 搅拌加热至 100°C， 反应 4h， 加 入冰水， 抽滤， 冰水洗涤， 得白色粉末状固体， 产率 60%。
Figure imgf000009_0001
3 ) 6-乙酰氧基 -4-氯 -7-甲氧基喹唑啉的合成
在 lOOmL 单口圆底烧瓶中加入 6-乙酰氧基 -7-甲氧基喹唑啉 -4-酮 (4g， 0.017mol)、 三氯氧磷 (30mL)、 DMF(lmL), 缓慢升温至三氯氧磷回流， 回流反应 8h， 冷却， 减压蒸掉三氯氧磷， 用甲苯重结晶， 得白色固体， 即为目标化合物 的盐酸盐， 产率 85.4%。
Figure imgf000009_0002
路线 D合成步骤：
1 ) N 1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-乙酰氧基-喹唑啉 -4-基)苯二胺的合成
将还原所得的 Ν,Ν-二 (2-氯乙基)苯二胺 2mmol溶于 20mL异丙醇中， 加入 6-乙酰氧基 -4-氯 -7-甲氧基喹唑啉 2mmol，加热回流，有固体析出。 l-1.5h后 TLC 检测反应完全。 冷却静置反应液 抽滤， 得黄色 1%。
Figure imgf000009_0003
2) Ν^Ν1-二 (2-氯乙基) -Ν3-(7-甲氧基 -6-羟基-喹唑啉 -4-基)苯二胺的合成
在 25mL单口圆底烧瓶中加入 lOOmg N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-乙 酰氧基-喹唑啉 -4-基)苯二胺、 2mL 5mol/L的 NaOH溶液、 2mL甲醇， 40°C下搅 拌反应， TLC监测反应， 待反应完成后， 冷却， 用稀盐酸 (lmol/L)调节溶液 PH 至 5-6， 析 5%。
Figure imgf000009_0004
合成
在 10mL单口圆底烧瓶中加入 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-羟基 -喹唑 啉 -4-基)苯二胺 (45mg， 0.11mmol)、 K2C03 (30mg， 0.24mmol)、 DMF (1.44mL)， 40°C下搅拌 20min， 然后加入 2(^L 4-(3-氯丙基:)吗啉， 氮气保护条件下， 升温 至 80°C反应 12h， 反应完后将反应液倒入冰水中， 乙酸乙酯萃取， 无水硫酸钠 干燥， 真空旋干溶剂， 通过硅胶柱层析得到目标产物， 产率 45.8%。
Figure imgf000010_0001
R1=N(CH2CH2C1)2, R2=H
R I =H, 2=N(CH2CH2C1)2 本发明的优势：
1 ) 本发明中目标化合: 的合成步骤产率较高， 易于制得。
2) 本发明中目标化合 的体内体外活性测试均表明该类化合物具有较好的 抗肿瘤和抗癌活性 t
3 ) 本发明中目标化合 的毒性相对较小， 是一般氮芥类化合物所不具备的 特点。 附图说明：
图 1是根据实验数据所做出的四组荷瘤裸鼠的肿瘤生长曲线图。
图 2是根据实验数据将各组小鼠的平均体重变化随时间作图。
图 3为 氢且 R2=氮芥的式 A化合物对 HepG2细胞作用之后流式细胞仪 分析所得各个细胞周期的比例图。 具体实施方式：
以下通过具体实施方式可以使本发明得到更清楚的说明， 但本发明并不局 限于以下实施例。 生物学实施例
实施例 A. 对五种常见的肿瘤细胞的抑制 将处于对数生长期的肿瘤细胞 (HepG2、 SY5Y、 MCF-7、 A549、 DU145)用 0.25%胰酶消化，然后用培养液 (DMEM+10%FBS或者 PRMI 1640+10%FBS)将细 胞稀释悬浮成单细胞悬液， 调整细胞密度为 1.0 X 104个 /mL， 每孔加入 ΙΟΟμΙ^接 种于 96孔板中， 在 37°C、 饱和湿度、 5%二氧化碳的培养箱中培养 24h后， 按 实验设计分别加入 1μΜ、 5μΜ、 10μΜ、 20μΜ、 30μΜ、 40μΜ、 50μΜ、 75μΜ、 ΙΟΟμΜ的式 Α或式 Β化合物， 每个浓度平行 3个复孔， 并分别设置有实验组和 对照组， 继续孵育 72h后， 向每孔加入 ΙΟμΙ^ ΜΤΤ溶液 (5mg/mL)， 然后 37°C下 孵育 4h， 再向每孔中加入 ΙΟΟμ 细胞裂解液 (10%SDS+0.1%NH4C1)， 避光孵育 过夜。 次日用酶标仪测定各孔在 570nm处的吸光度 (OD)值。 根据吸光度值计算 细胞生长抑制率： 抑制率 (100%)=[1- (实验组 OD均值-空白组 OD均值 y (对照组 OD均值-空白组 OD均值： )]*100%。以药物浓度为横坐标，细胞抑制率为纵坐标， 绘制细胞生长抑制曲线。 上述实验重复 3次。 用 IBM SPSS™ Statistics 20统计 软件中的 Probit模块， 概率单位回归法， 计算 IC5。值。
下表 1显示了其中取代基 氢且 R2=氮芥的式 A化合物和其中 氮芥且 R2=氢的式 B化合物对五种常见细胞的 IC5。：
表 1 :
compd. IC5o (μηιοΙ/L)
HepG2 SY5Y MCF-7 A549 DU145
式 A 3.06 8.60 10.54 6.71 20.04 式 B 12.19 20.72 54.95 27.71 16.95 由上表可以看出， 该类化合物对以上五种肿瘤细胞具有很好的抑制效果， 且对肝癌细胞的抑制效果最好。 实施例 B. 体内抗肿瘤活性
针对实施例 A的结果， 对当取代基 氢且 R2=氮芥的式 A化合物的体内 抗肿瘤活性进行了测定， 并平行测定了临床药物在该评价体系的抗肿瘤活性。 实验在 HepG2 (肝肿瘤:)荷瘤裸鼠中开展。
B.1 荷人肝癌肿瘤裸鼠模型的建立
向 HepG2细胞加入含 10%胎牛血清、 青霉素 100U/mL、 链霉素 lOO g/mL 的 RPMI1640培养液， 单层培养和孵化于 5% C02、饱和湿度、 37°C的培养箱中， 每 3天更换培养液一次。 待细胞覆盖培养瓶壁 80%-90%以后， 按上述方法进行 传代培养。 当细胞生长至足够制造模型数量时， 用 0.25% (w/v) Trypsin-0.53 mM EDTA溶液消化， PBS洗细胞两次； 1000转 /min离心 5min， 收集细胞； 用 0.9% 的生理盐水悬浮细胞， 定容， 制成 5 X 107/mL细胞悬液， 向每只裸鼠的右前肢 腋窝下注射 0.2mL细胞悬液。
B.2 体内抗肿瘤实验
1.从所得 HepG2荷瘤裸鼠中挑选出 20只肿瘤大小、 体重均接近的裸鼠进 行实验。 将 20只裸鼠随机分为四组。 一组为待测药物组 （1 ) ， 一组为待测药 物组 （2 ) ， 一组为阳性对照组， 一组为阴性对照组。
2.依照设定剂量， 从待测药品溶液中取出相应体积的溶液， 隔天对待测药 物组小鼠进行静脉注射， 并用游标卡尺量取肿瘤的长宽， 电子天平对小鼠称重， 记录数据。 小鼠肿瘤体积依照公式体积 = (长 X宽 2) /2计算。
3.阳性对照组注射阳性对照药品溶液， 步骤同上。
4.阴性对照组注射同体积参比溶液， 步骤同上。
图 1 是根据实验数据所做出的四组荷瘤裸鼠的肿瘤生长曲线。 总体看来， 在相同给药剂量下， 该化合物比索拉菲尼在 HepG2荷瘤裸鼠中的抗肿瘤活性要 好， 经该化合物与索拉菲尼治疗后的 HepG2荷瘤鼠肿瘤生长速度要明显慢于阴 性对照组肿瘤的生长速度， 且在不同给药剂量下， 对肿瘤的抑制效果有明显的 量效关系存在。
我们将各组小鼠的平均体重增长值随时间作图得到曲线图 2。可以看出， 相 同给药剂量情况下， 该化合物治疗组的小鼠平均体重的变化趋势与临床用药索 拉菲尼组类似。 这个结果显示该化合物跟索拉菲尼一样， 具有非常小的体内毒 性。
不仅如此， 我们还对该类化合物的机理进行了一些探索。 图 3为 HepG2细 胞被不同浓度上述化合物作用之后流式细胞仪分析所得各个细胞周期的比例 图，显示出了较强的 G2/M周期抑制效果，证明了该类化合物的抗癌机理中包含 氮芥类化合物的经典抗癌机理。
综上所述， 通过对上述药物生物活性数据的分析， 可以看出， 本发明中取 代基 氢、 R2=氮芥的化合物相对于临床用抗肿瘤药物索拉菲尼具有更好的抗 肿瘤活性和相当的毒性， 是一类新型的抗肿瘤垸化剂。 同时由于较高的合成产 率， 使得该类化合物具有较好的应用前景， 有望成为一种新的抗肿瘤药物。 实施例 1：
按照以下步骤制备的是式 A的取代基 氢， R2=氮芥的化合物。
1.1 Ν,Ν-二 (2-羟乙基 )-3-硝基苯胺的合成
取 3-硝基苯胺 5.52g (0.04moi:)， 加入 80mL 25%的醋酸水溶液中， 冰浴下滴 加环氧乙垸 10mL。 升温至室温， 搅拌 72h， 抽滤， 水洗涤滤饼， 烘干得黄橙色 固体 8.02g， 产率 88%。 mp 94-96。C, ¾ NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H， ArH), 7.48 (s, 1H， ArH), 7.33 (t, / = 8.2 Hz, 1H， ArH), 6.97 (dd, / = 8.4, 2.2 Hz, 1H， ArH), 3.89 (t, J = 4.8 Hz, 4H, -NCH2CH2-), 3.65 (t, J = 4.8 Hz, 4H, -CH2CH2OH). 13C NMR (100 MHz, CDC13) δ 149.43, 148.63, 129.84, 1 18.10, 1 1 1.34, 106.48, 60.35, 55.06. MS (ESI+) m/z: 227.3 (M + H+). IR (KBr pellet, cm ： 3265, 3173, 2959, 2863, , 1040.
Figure imgf000013_0001
1.2 Ν,Ν-二 (2-甲磺酸酯乙基 )-3-硝基苯胺的合成
取 Ν,Ν-二 (2-羟乙基 )-3-硝基苯胺 2.26g (O.Olmol), 加入 30mL重蒸二氯甲垸 中，冰浴下，加入 3.32mL (0.025mol)三乙胺，后加入甲磺酰氯 1.93mL (0.025mol)。 lOmin后 TLC跟踪至反应完全， 反应液依次用饱和碳酸氢钠溶液， 饱和氯化钠 水溶液洗涤后， 分出有机相， 用无水硫酸钠干燥。 旋去溶剂得橙色固体 3.66g， 产率 96%。 mp 120-121。C， ¾ NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.58 (ά, J = 8.0 Hz, 1H, Ar ), 7.54 (d, J = 2.2 Hz, 1H, Ar ), 7.40 (t, / = 8.2 Hz, 1H, Ar ), 7.06 (dd, / = 8.4, 2.5 Hz, 1H, ArH), 4.41 (t, J = 5.6 Hz, 1H, -CH2CH2OH), 3.86 (t, J = 5.6 Hz, 1H, -NCH2CH2-), 3.03 (s, 1H). 13C NMR (101 MHz, CDC13) δ 149.53, 147.41, 130.44, 1 18.02, 1 12.41, 106.46, 66.09, 50.65, 37.48, 37.47. MS (ESI+) m/z: 383.3 (M + H+). IR (KBr pellet, cm 344 1 178, 982, 952.
Figure imgf000013_0002
1.3 N,N-二 (2-氯乙基 )-3-硝基苯胺的合成
取 Ν,Ν-二 (2-甲磺酸酯乙基 )-3-硝基苯胺将 1.58g (4.98mmol)溶于 3mL DMF 中， 加入氯化锂 0.423g (lOmmol) , 加热至 1 10°C。 lOmin后 TLC跟踪至反应完 全， 冷却， 向反应液中加入 45mL水， 二氯甲垸萃取。 有机相用饱和食盐水洗涤 两次， 无水硫酸钠干燥。旋去溶剂得黄色固体 1.17g。产率 92%。 mp l08-1 10°C， ¾ NMR (400 MHz, CDC13) δ 7.60 (dd, J = 8.0, 1.5 Hz, IH, ArH), 7.50 (t, J = 2.4 Hz: IH, ArH), 7.39 (t, / = 8.2 Hz, IH, ArH), 6.99 (dd, / = 8.3, 2.6 Hz, IH, ArH), 3.83 (t, J = 6.8 Hz, 4H, -NCH2CH2-), 3.68 (t, J = 6.7 Hz, 4H, -CH2CH2C1). 13C NMR (101 MHz, CDC13) δ 149.69, 147.06, 130.37, 1 17.54, 1 12.22, 106.18, 53.38, 40.13. MS (ESI+) m/z: 263.2 (M + H+). IR (KBr pellet, cm 3083, 2963, 1618, 1533, 1491, 1393, 1345, 1255, 1 196.
Figure imgf000014_0001
1.4 N,N-二 (2-氯乙基)间苯二胺的合成
取 Ν,Ν-二 (2-氯乙基 )-3-硝基苯胺 1.04g (4mmol)溶于 5mL甲醇， 加入 O. lg钯碳 (10%)催化氢化。 lh后 TLC跟踪反应完全， 抽滤除去钯碳， 迅速旋去溶剂并直接 进行下一步反应。
Figure imgf000014_0002
1.5 N 1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-乙酰氧基-喹唑啉 -4-基)间苯二胺的合成 将还原所得的 Ν,Ν-二 (2-氯乙基)间苯二胺 2mmol溶于 20mL异丙醇中， 加 入 6-乙酰氧基 -4-氯 -7-甲氧基喹唑啉 2mmol， 加热回流， 有固体析出。 l-1.5h后 TLC检测反应完全。 冷却静置反应液， 抽滤， 得黄色固体产品。 产率 51%。 mp 236-238°C. IH NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1 1.24 (s, IH, -NH), 8.84 (s, IH, ArH), 8.69 (s, IH, ArH), 7.49 (s, IH, ArH), 7.27 (t, J = 7.6 Hz, IH, ArH), 7.05 (m, 2H, ArH), 6.69 (d, J = 7.3 Hz, IH, ArH), 3.99 (s, 3H, CH3CO-), 3.75 (s, 8H, -CH2CH2-), 2.37 (s, 3H, -OCH3). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 173.64, 163.94, 162.65, 155.77, 151.92, 145.43, 144.30, 142.96, 134.75, 123.76, 1 18.14, 1 15.34, 1 13.37, 1 12.20, 106.32, 62.21, 57.47, 46.30, 25.36. MS (ESI+) m/z: 448.7 [M-Cl-]+. IR (KBr pellet, cm-1): 3412, 3208, 3017, 2949, 2662, 2361, 2344, 1769, 1638, 157
Figure imgf000015_0001
1.6 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-羟基-喹唑啉 -4-基)间苯二胺的合成
在 25mL单口圆底烧瓶中加入 lOOmg N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-乙 酰氧基-喹唑啉 -4-基)间苯二胺、 2mL 5mol/L的 NaOH溶液、 2mL甲醇， 40°C下 搅拌反应， TLC 监测反应， 待反应完成后， 冷却， 用稀盐酸 (lmol/L)调节溶液 PH至 5-6，析出淡黄色固体，抽滤，烘干，产率 91%,碳化温度： 231°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.68 (s, IH, -NH), 9.19 (s, IH, -OH), 8.39 (s, IH, ArH), 7.77 (s, IH, ArH), 7.31 (s, IH, ArH), 7.26 (d, J = 7.6 Hz, IH, ArH), 7.15 (t, J = 7.6 Hz, 2H, ArH), 6.45 (d, J = 7.6 Hz, IH, ArH), 3.95 (s, 3H, -OCH3), 3.74 (m, 8H, -CH2CH2-). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 156.23, 153.70, 152.09, 146.51, 146.37, 146.01, 140.89, 129.16, 110.52, 109.72, 107.02, 106.78, 105.37, 55.82, 52.38， 40.98. MS (ESI+) m/z: 406.9 [M-Cl-]+. IR (KBr pellet, cm-1): 3389, 2963, 2359, 2335 1616, 1576, 1501, 1429, 1352, 1232, 1148, 1009.
Figure imgf000015_0002
1.7 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉代丙氧基)-喹唑啉 -4-基)间苯二 胺的合成
在 10mL单口圆底烧瓶中加入 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-羟基 -喹唑 啉 -4-基)间苯二胺 (45mg， O.l lmmol), K2CO3(30mg， 0.24mmol)、 DMF(1.44mL)， 40°C下搅拌 20min， 然后加入 20 4-(3-氯丙基:)吗啉， 氮气保护条件下， 升温 至 80°C反应 12h， 反应完后将反应液倒入冰水中， 乙酸乙酯萃取， 无水硫酸钠 干燥，真空旋干溶剂，通过硅胶柱层析得到目标产物，产率 46%。 mp 178-179°C. IH NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.37 (s, IH, -NH), 8.42 (s, IH, -ArH), 7.83 (s, IR ArH), 7.35 (s, IH, ArH), 7.20 (m, 2H, ArH), 7.04 (d, J = 8.0 Hz, IH, ArH), 6.53 (dd, Jl = 8.0 Hz, J2 = 2.0 Hz, IH, ArH), 4.19 (t, J = 6.3 Hz, 2H, -CH2-), 3.93 (s, 3H, -OCH3), 3.77 (m, 8H, -CH2CH2-), 3.58 (t, J = 4.5 Hz, 4H, -CH2-), 2.50 (t, J = 7.0 Hz, 2H, -CH2-), 2.40 (s, 4H, -CH2-), 1.99 (q, J = 6.4 Hz, 2H, -CH2-) . 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 156.48, 154.35, 152.75, 148.11, 146.92, 146.41, 140.53 129.15, 111.25, 109.01, 107.27, 106.40, 103.02, 67.22, 66.13, 55.78, 54.93, 53.38 52.35, 41.00, 25.86. MS (ESI+) m/z: 534 [M-Cl-]+. IR (KBr pellet, cm-1): 3341
Figure imgf000016_0001
实施例 2:
按照以下步骤制备的是式 B的取代基 氮芥， R2=氢的化合物。
2.1 Ν,Ν-二 (2-羟乙基 )-4-硝基苯胺的合成
在 25mL 圆底烧瓶中加入对硝基氯苯 1.58g (10mmol)、 二乙醇胺 2.12g
(20mmol), 然后加热至 115-120°C条件下反应， TCL检测反应过程， 7h反应基 本完全， 停止反应， 将整个反应体系趁热倒入 90°C热水中并剧烈搅拌， 产品以 油状物的形式析出， 然后用乙酸乙酯萃取出油状物， 水洗、 干燥， 通过柱层析 方式 (洗脱剂为石油醚： 乙酸乙酯 =1 : 1)分离纯化得到紫红色的油状物。 产率约 为 39%。 所得谱图与文献报 一致。
Figure imgf000016_0002
2.2 Ν,Ν-二 (2-甲磺酸酯乙基 )-4-硝基苯胺的合成
将 400mg Ν,Ν-二 (2-羟乙基 )-4-硝基苯胺溶进 13.25mL THF/CH2C12 = 1： 3的 溶剂中， 冰浴冷却至 0°C以下， 然后加入 500mg三乙胺， 再慢慢加入 675mg甲 磺酰氯， TLC检测反应， 5min后反应完成， 然后加入二氯甲垸稀释反应体系， 用饱和碳酸氢钠溶液洗剂至少三次 (保证甲磺酰氯被完全洗涤掉：)，然后用无水硫 酸钠干燥有机相， 旋干得褐色油状物为化合物。 产率约为 90%。 所得谱图与文 献报道的一致。 MsCI, Et3N
CHpCl , 0°C
2.3 N,N-二 (2-氯乙基 )-4-硝基苯胺的合成
首先按照理论反应物质的量 1 : 1制备干燥 LiCl固体， 然后加入 5.63mL溶 有 676mg Ν,Ν-二 (2-甲磺酸酯乙基 )-4-硝基苯胺的 DMF, 迅速升温至 110°C， 然 后保持在该温度条件下反应， TLC检测反应进程， 20min后反应完毕， 停止加 热， 冷却， 加入 45mL水稀释， 用乙酸乙酯萃取有机相， 然后用饱和氯化钠溶液 洗剂， 无水硫酸钠干燥， 抽滤， 旋干， 柱层析分离 (洗脱剂： 石油醚：)， 最后得到 黄色油状液体。 产率约为 一致。
Figure imgf000017_0001
2.4 Ν,Ν-二 (2-氯乙基)对苯二胺的合成
将 Ν,Ν-二 (2-氯乙基 )-4-硝基苯胺 (132mg, 0.57mmol)溶于 5mL甲醇中， 加入 13mg Pd/C(10%)催化剂， 抽真空， 通入氢气， 40°C条件下反应， TLC检测反应 进程， 待反应完毕后， 滤出 Pd/C， 减压旋蒸掉甲醇溶剂， 得油状产物， 该化合 物容易被氧化， 须立即投 一步反应。
Figure imgf000017_0002
2.5 N 1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-乙酰氧基-喹唑啉 -4-基)对苯二胺的合成 在 25mL圆底烧瓶中加入 Ν,Ν-二 (2-氯乙基)对苯二胺 (0.46mmol, 107mg)、 6- 乙酰氧基 -4-氯 -7-甲氧基喹唑啉 (0.46mmol, 116mg)和 5mL异丙醇，在氮气保护条 件下将反应体系加热至回流， 回流条件下反应 lh， 反应完成后将反应体系冷却 至室温， 有大量固体从体系中析出， 过滤并用异丙醇洗涤， 干燥， 得到淡黄色 固体即为化合物（196mg, 71%).碳化温度： 142°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.30 (s, IH, -NH), 8.81 (s, IH, ArH),8.71 (s, IH, ArH), 7.52 (d, J = 8.0 Hz, 3H, ArH), 6.84 (d, J = 8.0 Hz, 2H, ArH), 3.99 (s, 3H,CH3CO-), 3.77 (s, 8H, -CH2CH2-), 2.38 (s, 3H, -OCH3). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 168.35, 157.99, 157.14, 150.43, 144.94, 140.00, 138.66, 126.09, 125.74, 118.52, 111.61, 106.85, 100.91, 56.87, 52.06, 41.10, 20.11. MS (ESI+) m/z: 448.7 [M-Cl-]+. IR (KBr pellet, cm-1): 3397, 3003, 2967, 2776, 2367, 2345, 1769, 1638, 1614, 1518, 1439, 1369, 1182, 1148, 1067, 1013, 918,816.
Figure imgf000018_0001
2.6 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-羟基-喹唑啉 -4-基)对苯二胺的合成
在 10mL圆底烧瓶中加入 2mL甲醇、 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-乙 酰氧基-喹唑啉 -4-基)对苯二胺 (0.2 lmmol, lOOmg), 0.2mL 5mol/L的氢氧化钠溶 液， 将体系加热至 40°C反应， TLC检测反应过程， 2h后反应完毕停止反应， 冷 却至室温， 然后用 lmol/L盐酸调节体系 PH至 5-6， 有大量淡黄色固体从体系中 析出，过滤，冰水洗涤，干燥，得到淡黄色固体即为目标化合物 (82mg, 81°/c . mp: 196°C. IH NMR(400 MHz, DMSO-d6): δ 9.63 (s, IH, -OH), 9.32 (s, IH, -NH), 8.34 (s, IH, ArH), 7.78 (s, ΙΗ,ΑΓΗ), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H, ArH), 7.15 (s, IH, ArH), 6.77 (d, J = 8.8 Hz, 2H, ArH), 3.96 (s, 3H,-OCH3), 3.74 (m, 8H, -CH2CH2-). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 156.50, 153.64, 152.00,146.42, 144.80, 142.84, 129.44, 124.29, 111.89, 109.27, 106.41, 105.67, 55.81, 52.34, 41.24. MS(ESI+) m/z: 406.8 [M+H] +. IR (KBr pellet, cm-1): 3491, 3389, 3067, 2959, 2882, 2363, 1616, 1516, 1431, 1248, 1204, 1180, 1003, 920, 856, 814.
Figure imgf000018_0002
2.7 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-(3-吗啉代丙氧基)-喹唑啉 -4-基)对苯二 胺的合成
在 5mL圆底烧瓶中加入 N^N1-二 (2-氯乙基) -N3-(7-甲氧基 -6-羟基-喹唑啉 -4- 基)对苯二胺 (0.12mmol, 50mg)、碳酸钾 (0.24mmol, 33.2mg)以及 1.60mLDMF， 搅 拌使其形成溶液， 氮气保护条件下加热至 40 °C， 反应 20min后， 滴加加入 4-(3- 氯丙基)吗啉 (2(^L， 17.7mg), 然后升温至 80°C并在该温度条件下反应， TLC检 测结果表明 5h后反应完成， 停止反应， 通过柱层析 (洗脱剂： 乙酸乙酯： 石油醚 =1： 2)分离得到淡黄色目标化合物 22c(38mg, 60%产率). mp: 192°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.33 (s, 1H, -NH), 8.34 (s, 1H, ArH), 7.81 (s, 1H, ArH), 7.52 (d, J = 8.4 Hz, 2H,ArH), 7.14 (s, 1H, ArH), 6.80 (d, J = 8.6 Hz, 2H, ArH), 4.17 (d, J = 5.6 Hz, 2H, -CH2-), 3.92 (s,3H, -OCH3), 3.75 (s, 8H, -CH2CH2-), 3.58 (s, 4H -CH2-), 2.47 (m, 2H, -CH2-), 2.30 (s, 4H, -CH2-),1.99 (s, 2H, -CH2-). 13C NMR (100 MHz, DMSO-d6): δ 156.61, 153.99, 153.01, 147.85, 146.49, 142.95, 129.05, 124.73, 111.76, 108.61, 107.09, 102.75, 67.00, 66.06, 55.66, 54.87, 53.31, 52.24, 41.15, 25.76. MS (ESI+) m/z: 533.7. [M+H] +. IR (KBr pellet, cm-1): 3385, 3264, 3076, 2945, 2812, 2766, 2371, 1624, 1582, 1516, 1435, 1248, 1117, 993, 862, 814, 745, 619, 546.
Figure imgf000019_0001

Claims

权利要求
Figure imgf000020_0001
式 I
其中， R是 N(CH2CH2C1)2。
2. 根据权利要求 1所述的; ：芥衍生物或其可药用盐，其中所述氮芥衍生 具有如下式 II：
Figure imgf000020_0002
式 II
其中 RfN CHsCHsCl , R2=H， 或者 RfH, R2=N(CH2CH2C1)2。
3. 根据权利要求 1所述的氮芥衍生物或其可药用盐，其中所述氮芥衍生 具有如下式 A:
Figure imgf000020_0003
式 Ac
4. 根据权利要求 1所述的氮芥衍生物或其可药用盐，其中所述氮芥衍生 具有如下式 B:
Figure imgf000020_0004
式^
5. 权利要求 3所述的氮芥衍生物或其可药用盐的制备方法，其特征在于如 下的合成路线： 以 3,4-二垸基苯甲酸为原料合成 4-氯取代的喹唑啉母环， 以间硝 基苯胺为原料合成苯胺氮芥， 通过将所得的两类化合物在异丙醇中回流的方法 得到中间体化合物， 然后再通过水解以及跟 3-氯丙基吗琳反应得到 A。
6. 权利要求 4所述的氮芥衍生物或其可药用盐的制备方法，其特征在于如 下的合成路线： 以 3,4-二垸基苯甲酸为原料合成 4-氯取代的喹唑啉母环， 以对氯 硝基苯为原料合成苯胺氮芥， 通过将所得的两类化合物在异丙醇中回流的方法 得到中间体化合物， 然后再通过水解以及跟 3-氯丙基吗琳反应得到 B。
7. 权利要求 2所述的氮芥衍生物或其可药用盐的制备方法，其特征在于合 成路线包括如下三部分：
苯
Figure imgf000021_0001
Y = 3- or -NH2 R』 = N(CH2CH2CI)2, R2 =H, or DEA - Diet anoSamine F¾ = H, R2 = N(CH2CH2CI)2 , 路线 B
喹唑啉母环合成路线如下: yridine/DMAP
Figure imgf000021_0002
路线 c 目标化合物合成
Figure imgf000022_0001
R1=N(CH2CH2CI)2, R2=H
R1=H, R2=N(CH2CH2CI)2
路线 D。
8. 药物组合物， 包含权利要求 1-4任一项所述的氮芥衍生物或其可药用盐 并且包含可药用载体。
9. 权利要求 1-4任一项所述的氮芥衍生物或其可药用盐在制备肿瘤治疗药 物中的应用。
10.权利要求 1-4 任一项所述的氮芥衍生物或其可药用盐在制备用于治疗 HepG2、 SY5Y、 MCF-7、 A549、 DU145肿瘤细胞的药物中的应用。
PCT/CN2013/080404 2013-04-27 2013-07-30 氮芥衍生物及其制备方法和肿瘤治疗应用 WO2014173029A1 (zh)

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