WO2013102728A1 - Extrait polaire de kniphofia uvaria, composition cosmetique ou dermatologique en contenant, et ses utilisations. - Google Patents

Extrait polaire de kniphofia uvaria, composition cosmetique ou dermatologique en contenant, et ses utilisations. Download PDF

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WO2013102728A1
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extract
cosmetic
skin
composition
plant
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PCT/FR2013/050002
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Inventor
Virginie Pecher
Isabelle Renimel
Virginie Leplanquais
Kristell Lazou
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Lvmh Recherche
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    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations

Definitions

  • the invention relates to a polar extract of the plant Kniphofia uvaria, a cosmetic or dermatological composition comprising said extract, and its use as anti-aging agent or anti-inflammatory agent.
  • Kniphofia uvaria is a perennial rhizomatous species of the family Liliaceae (classical classification) and Asphodelaceae (phylogenetic classification). This hardy species has narrow, drooping leaves up to 1 meter long. The inflorescences form an ear composed of many tubular flowers with flamboyant colors.
  • nectar The flowers produce a large quantity of nectar for two months of the year, which contains mainly water, amino acids, glucose, fructose, mineral salts and trace elements.
  • This nectar contains superoxydismutase (SOD), an enzyme that fights oxidative stress that can cause membrane lipid peroxidation or protein oxidation.
  • SOD superoxydismutase
  • nectar of the flowers of Kniphofia uvaria is particularly adapted to the care of the dry skins to nourish them in depth and to revitalize them, and it has already been incorporated in a regenerating and revitalizing cosmetic care. It has also been proposed in another cosmetic treatment in combination with anti-aging active ingredients which it completes the action.
  • an extract of the plant Kniphofia uvaria in particular an extract of stems, advantageously picked green then dried, obtained with a hydroalcoholic solvent, is itself endowed with an activity. anti-aging.
  • Kniphofia uvaria by contacting the plant with a polar solvent has been described. It is therefore particularly surprising to have demonstrated that such an extract of the plant Kniphofia uvaria has a cosmetic activity.
  • pro-Matrix MetalloProteinase type 1 pro-Matrix MetalloProteinase type 1
  • an extract of the invention significantly inhibits the expression of Cathepsin K in normal human fibroblasts treated with said extract, and that it is thus possible to limit the degradation of elastin. intracellular by this protease, at the time of UV exposure.
  • the main object of the invention is to provide a new plant extract, in particular that can be used as an active agent in cosmetic or dermatological compositions, in particular intended to prevent or delay the appearance of the signs of skin aging or to slow down or attenuate them. effects.
  • the invention also aims to provide a cosmetic care method using these cosmetic compositions.
  • the invention finally aims to solve all technical problems by a simple solution, relatively inexpensive and usable on an industrial scale, particularly in the cosmetics industry. DESCRIPTION OF THE INVENTION
  • the invention relates to an extract of the plant Kniphofia uvaria, obtained by extraction of the plant material by means of a polar solvent acceptable from a cosmetic or dermatological point of view.
  • the plant material used may be the whole plant or part of the plant such as leaves, stems, flowers, seeds or roots.
  • the polar plant extract is preferably obtained from a plant material selected from the stem, seeds and mixtures thereof.
  • the plant material Prior to the extraction stage itself, the plant material may have been dried and / or milled.
  • An alternative is to dry the plant and then harvest the interesting part.
  • the plant material is dried after harvesting the plant.
  • the extract of the invention can be prepared by various extraction methods known to those skilled in the art.
  • polar plant extract is understood to mean an extract obtained by contacting a plant material with a polar solvent
  • polar solvent means a liquid whose dipole moment is not no, more particularly a compound comprising at least one covalent bond between two atoms whose electronegativity difference ⁇ ⁇ is greater than 0.4 and less than 1.7 (0.4 ⁇ ⁇ ⁇ 1.7) according to the Pauling scale (J. Am. Chem. Soc. f 1932, 54 (9), 3570-3582).
  • Preferred polar solvents are those consisting of a compound comprising at least one polar covalent bond of OH type.
  • the polar solvent is selected from water; a mono-alcohol in QQ, for example ethanol; a C 2 -C 6 glycol, preferably chosen from glycerol, butylene glycol and propylene glycol; and any of their mixtures.
  • the plant material is extracted using a polar solvent consisting of a hydroalcoholic mixture, advantageously a mixture of water and ethanol.
  • the plant material can be extracted with a solvent consisting of water and ethanol, the ethanol representing from 50% v / v to 99% v / v of the water / ethanol mixture.
  • the extraction can be carried out hot by reflux or by maceration at room temperature (between 20 and 25 ° C). Ultrasound during extraction is advantageously used in order to improve the mass yield of said extraction.
  • the extraction process may also comprise at least one step selected from a bleaching step, a purification step, a delipidation step, and combinations thereof.
  • This additional step may for example correspond to
  • the extraction process may further be completed by a step of partially or completely removing the extraction solvent.
  • the extract is concentrated until an aqueous concentrate is obtained which does not contain a significant quantity of organic solvents.
  • the solvent is removed until a dry residue is obtained.
  • the extract obtained at the end of the extraction step can be lyophilized or atomized to be in the form of a powder.
  • the plant extract as described above may be used in a cosmetic or dermatological composition in the form of a powder or in the form of a solution or a suspension of said powder in at least one cosmetically or dermatologically acceptable solvent , which may be the same as or different from the one used for extraction.
  • a second object of the present invention is a cosmetic or dermatological composition
  • a cosmetic or dermatological composition comprising a Kniphofia Uvar extract / a te that defined above and at least one cosmetically or dermatologically acceptable excipient.
  • the composition of the invention comprises at least one excipient that is acceptable from a cosmetic or dermatological point of view that can be chosen from pigments, dyes, polymers, surfactants, rheology agents, perfumes, electrolytes , pH adjusters, antioxidants, preservatives, and any of their mixtures.
  • the cosmetic composition comprises an effective amount of said extract to obtain the desired effect.
  • the composition thus preferably comprises from 0.0001% to 2% by weight of said extract by dry weight, preferably from 0.01% to 1% by weight, relative to the total weight of the composition.
  • compositions in which the extract of the invention is combined with other cosmetic or dermatological active agents, in the form of purified molecules and and / or extracts, in particular plant extracts, having cosmetic effects similar to and / or complementary to those of said extract of the invention.
  • Said composition may thus also comprise, as active agents, molecules or extracts chosen from substances having a lightening activity of the skin; substances with slimming activity; substances with moisturizing activity; substances having calming, soothing or relaxing activity; the substances having an activity stimulating cutaneous microcirculation to improve the radiance of the complexion, in particular of the face; substances having a sebo-regulating activity for the care of oily skin; substances intended to clean or purify the skin; substances with anti-radical activity; substances intended to attenuate or delay the effects of aging of the skin, in particular the formation of wrinkles, by an activity intended to promote the maintenance of the structure of the skin and / or to limit the degradation of the extracellular matrix of the superficial layers dermis and epidermis and / or to obtain a protective, corrective or restructuring effect of the skin; substances with anti-inflammatory activity.
  • substances having a lightening activity of the skin substances with slimming activity; substances with moisturizing activity; substances having calming, soothing or relaxing activity; the substances having an activity stimulating cutaneous micro
  • the composition may be, for example, a serum, a lotion, a cream, an oil-in-water or water-in-oil emulsion, a hydrogel, a face mask, an anhydrous composition, or it may be in the form of a stick, a patch, or a makeup product such as lipstick, mascara or foundation.
  • the extract and the composition of the invention exhibit a particularly desired effect for preventing or delaying the appearance of the signs of skin aging, or for slowing down or attenuating the effects thereof.
  • Another subject of the invention is the use, in a cosmetic composition, of an extract as described above,
  • the extract may also be used, in a cosmetic composition, as an active agent for preserving or improving the elasticity and firmness of the skin, in order to increase the production of collagen, in particular of -collagen I, to increase the production of fibronectin, to slow the degradation of the extracellular matrix, to increase the production of fibers of the extracellular matrix, or for the maintenance of the structure of the skin.
  • the extract may also be used in a cosmetic composition as an active agent for
  • the invention relates to the dermatological composition or the extract described above for their use in the treatment or prevention of inflammatory conditions of the skin of a patient.
  • the cosmetic or dermatological composition or the extract described above can also be used for the treatment or prevention of skin aging, or to increase cellular or tissue longevity.
  • Another object of the invention is a cosmetic care method comprising the application to at least a portion of the skin of the face or of the body that may exhibit signs of aging such as wrinkles or sagging, an effective amount of a composition or an extract as defined above, in particular to prevent or delay the appearance of the signs of skin aging or to slow down or reduce the effects thereof.
  • the cosmetic composition is applied to an area of skin of the body or face having at least one visible sign of aging selected from the presence of wrinkles or fine lines, a loss of radiance of the complexion, a loss of elasticity and / or or flexibility, decreased skin thickness, and increased dryness or skin roughness.
  • the extract and the composition to which the uses of the invention refer are preferably as defined above or below.
  • Other objects, features and advantages of the invention will become apparent in light of the following explanatory description made with reference to examples of extract preparation and tests showing the properties of the extract and to examples of cosmetic composition using such an extract, which are given by way of illustration of the invention without limiting its scope.
  • Example 1 Preparation of extracts of Kn ' hofia uvaria.
  • a first extract was prepared using the stems of the plant Kniphofia uvaria. These were harvested green then dried.
  • This plant material in the dry and ground state, was subjected to a 90/10 v / v Ethanol / water hydroalcoholic extraction at reflux for 30 min.
  • the vegetable solvent ratio was 1/15 (w / v).
  • the vegetable residue was removed by filtration and then washed with 1/3 of the volume of the extraction solvent.
  • the plant material used consisted of leaves of the plant Kniphofia uvaria. These were dried after harvest.
  • This plant material in the dry and ground state, was subjected to a 90/10 v / v Ethanol / water hydroalcoholic extraction at reflux for 30 min.
  • the mass yield of dry extract expressed by weight relative to the weight of starting vegetable material was 11%.
  • the plant material consisted of seeds of the plant Kniphofia uvaria. These were dried after harvest.
  • This plant material in the dry and ground state, was subjected to a 90/10 v / v Ethanol / water hydroalcoholic extraction at reflux for 30 min.
  • the mass yield of dry extract expressed by weight relative to the weight of starting vegetable material was 23.9%.
  • EXTRACT 4 Preparation of a stem extract (EXTRACT 4)
  • the plant material consisted of stems of the plant Kniphofia uvaria. These were dried after harvest.
  • This plant material in the dry state and ground, was subjected to a hydroalcoholic extraction (Ethanol / water 70/30 v / v) at reflux for 5 min, assisted by ultrasound.
  • the vegetable / solvent ratio is 1/15 m / v.
  • the solid residue obtained is subjected to further extraction under the same conditions, including ultrasonic assistance, as the first, in order to completely deplete the plant.
  • Example 2 For the cosmetic activity tests below, a stock solution was prepared for each extract prepared in Example 1, in which a dry extract of the invention was solubilized in DMSO at a concentration of 12.5. ; 25 or 50 mg of extract per ml of solvent.
  • the stock solution is diluted 1/1000 in the culture medium to reach the desired concentration.
  • Prostaglandin E2 (PGE 2 ) is the major mediator of inflammatory response phenomena during tissue damage. Many pharmacological agents can inhibit the release of PGE 2 by cultured keratinocytes, such as indomethacin or molecules derived from plants.
  • HaCaT cells (genetically modified keratinocyte line) were inoculated at a rate of 10,000 cells / well (KSFM culture medium supplemented, Gibco) in a 96-well microplate. The plate was placed in an oven (37 ° C and 5% CO2) for 24 hours.
  • the extracts were placed in the presence of the cells after dilution to 1/1000 in culture medium.
  • One column was treated with a positive control (indomethacin (Sigma) at 1 ⁇ g / mL) and another untreated column was challenged with DMSO.
  • the extracts, the positive control (indomethacin in DMSO) and the control without treatment (DMSO), were evaluated on 4 cell wells (HaCaT).
  • the culture supernatants were removed and stored at -20 ° C.
  • the assay was performed according to the protocol described in the PGE 2 assay kit (R & D Systems). This immunoenzymatic test makes it possible to determine, by spectrophotometric measurement at 450 nm, the amount of PGE 2 present in the supernatants which is inversely proportional to the measured absorbance. 2) Maintaining the structure of the skin
  • the tests were made on normal human fibroblasts (FHN), cells of the dermis favoring the maintenance of the structure of the skin.
  • FHN normal human fibroblasts
  • the fibers of the extracellular matrix are essential for the good maintenance of the skin. Different factors, intrinsic or extrinsic, can modulate the rate of these fibers, thus playing on the elasticity of the skin.
  • the extracts were placed in the presence of the cells after adequate dilution in culture medium.
  • One column was treated with a positive control (Ascorbic acid (Sigma) 0.1 ⁇ l), and a column was brought into contact with the solubilizing solvent DMSO (control).
  • a positive control Ascorbic acid (Sigma) 0.1 ⁇ l
  • a column was brought into contact with the solubilizing solvent DMSO (control).
  • Each extract, the positive control (ascorbic acid in DMSO) and the control without treatment (solvent control DMSO) were evaluated on 4 wells of FHN (normal human fibroblasts).
  • the culture supernatants were removed and stored at -20 ° C.
  • the assay was performed according to the protocols described in the Takara EIA kits. These two tests use an immunoenzymatic technique for determining, by spectrophotometric measurement at 450 nm, the amount of collagen and fibronectin fibers present in the supernatants.
  • MMP-1 is a major enzyme involved in the degradation of the extracellular matrix.
  • the production of MMP-1 is governed by the transcription factor AP-1 which is directly influenced by environmental stresses, such as UV radiation, which lead to the acceleration of skin aging.
  • FHNs were seeded at the density of 5000 cells / well and 200 ⁇ l / well of MEM culture medium (Gibco Invitrogen) supplemented with glutamine (Gibco Invitrogen, final concentration 2 mM) and 10% FCS (fetal calf serum). ), in a 96-well microplate (Falcon). The culture plate was placed in an oven for 24 hours to obtain 80% cell confluence.
  • MEM culture medium Gibco Invitrogen
  • glutamine Gibco Invitrogen, final concentration 2 mM
  • FCS fetal calf serum
  • the extracts were placed in the presence of the cells after adequate dilution in culture medium.
  • Cells were treated with a positive control (Anogeissus leiocarpus 25 ⁇ g / mL) and a solvent control (DMSO).
  • the extract, the positive control and the solvent control were each evaluated on 4 wells of NHS.
  • the pro MMP-1 assay was performed according to the protocol described in the Quantikine kit (R & D Systems). This test according to the immunoenzymatic "sandwich" technique makes it possible to determine the amount of pro MMP-1 in the supernatants by spectrophotometric measurement at 450 nm.
  • T DMSO solubilizer solvent control, (DMSO)
  • T + positive control of the test (anogellin l
  • Pro-MMPl Pro-Matrix MetalloProteinase Type 1
  • the values of the table are expressed as a percentage relative to the activity of the solvent control whose activity is normalized to 100%.
  • a value positive reflects a stimulation of the production of the marker by the cutaneous cells, under the effect of the treatment with the extract tested.
  • a negative value characterizes an inhibition effect on the production of the marker in question.
  • the three extracts inhibited the production of PGE 2 . They thus have an anti-inflammatory potential which makes them usable as an active agent in cosmetic or dermatological compositions.
  • the polar plant extract of greatest interest is that obtained from Knip ' hofia uvaria stems. This extract acts on all the markers tested, firstly by significantly increasing the production of two types of fibers of the extracellular matrix, pro-collagen I and fibronectin, a marker of firmness of the skin, on the other hand. decreasing the production of pro-MMPl, the enzyme responsible for the degradation of the extracellular matrix, more particularly related to photo-induced aging.
  • EXAMPLE 3 Effect of treatment with an extract of the invention on normal human fibroblasts.
  • Cathepsin K is a protease that is expressed at high levels under certain pathological conditions. It has been hypothesized that this protein, responsible for the intracellular degradation of elastin (SD Gan, J. Invest Dermatol., 2009, S37), is particularly expressed by fibroblasts in the case of the skin with solar radiation. This elastase thus plays an important role in the degradation of elastin participating in photoaging of the skin ⁇ Codriansky et al., Photochem. Photobiol. ; 2009, 85 (6): 1356-63) 1. Materials and Methods
  • HHN wells Three HHN wells were seeded by culture condition. 24 hours before the treatment, at confluence, the cells were depleted in fetal calf serum (medium 2) of composition below:
  • the cell culture medium was removed, and 250 of RLT lysis buffer (provided in the Nucleospin RNA trace kit) was added.
  • the cells were scraped using a Cell Scraper and then the cell lysate, recovered in a deep ell 1.2 mL (provided in the kit).
  • Total RNAs were extracted using Epimotion 5075 (Eppendorf) with the Nucleospin RNA trace kit (Macherey Nagel).
  • RNA solutions obtained were assayed and their quality verified, using Bioanalyzer 2100 (Agilent Technologies). This device was connected to a computer with the specific software for analyzing the results (2100 expert software). The technique required a 12-well micro-plate (RNA 6000 NanoChips) and a reagent kit (RNA 6000 Nano Reagents & Supplies), specific for total eukaryotic RNA assay. 3.2 Synthesis of complementary DNAs
  • RT reverse transcription kit
  • APPLIED BUIOSYTEMS High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit
  • each RT 50 ⁇ l of each RT were taken and mixed with 50 ⁇ l of Taqman Gene Expression master mix. After homogenization, the 100 ⁇ L were deposited on the microfluidic cards, the latter were centrifuged and then sealed.
  • PCR was performed according to the protocol provided by Applied Biosystems in the ABI Prism 7900HT Sequence Detection System. The qPCR steps were 2 min at 50 ° C, 10 min at 94.5 ° C then 30 sec at 97 ° C and 1 min at 59.7 ° C for 40 cycles.
  • the treatment of the FHN with the extract of the invention induces a significant (-31%) inhibition of the expression of Cathepsin K by the CTSK 1 gene compared with the control.
  • the effect of the extract of the invention on the expression of the Cathepsin K gene is therefore particularly advantageous for preventing or slowing the degradation of elastin, especially at the time of exposure of the skin to UVs. It is thus possible to fight effectively against skin aging, and more particularly on photoaging of the skin by acting on the inhibition of this gene with the aid of the extract of the invention.
  • the stem extract of Kniphofia uvaria used as an active agent in this cosmetic composition was obtained according to Example 1 (EXTRACT 4).
  • the dry extract was dissolved in 2% w / w in a 60/40 v / v glycerol / water mixture.
  • Phase A Phase A
  • phase B The compounds of phase B were heated to 85 ° C to form a homogeneous phase.
  • Phase A was emulsified in phase B using a mixer
  • phase C The oil-in-water emulsion thus obtained was finally neutralized with a 0.04% w / w aqueous sodium hydroxide solution (phase C) and then cooled.
  • composition obtained was an anti-aging cream intended to be applied to all or part of the face and / or Vietnamese Vietnamese taste.
  • the extract confers on the composition properties that promote the maintenance of the firmness of the skin on which the composition is applied and helps to reduce the signs of cutaneous aging, especially photoinduced.

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Abstract

L'invention concerne un extrait de Kniphofia uvaria obtenu au moyen d'un solvant polaire acceptable d'un point de vue cosmétique ou dermatologique, ainsi qu'une composition cosmétique ou dermatologique comprenant cet extrait. L'invention concerne l'utilisation de cet extrait dans une composition cosmétique en tant qu'agent actif, pour lutter contre le vieillissement cutanée intrinsèque ou actinique, et pour lutter le relâchement cutané. Elle concerne également son utilisation dans une composition dermatologique pour lutter contre les états inflammatoires de la peau.

Description

Extrait polaire de Kniphofia u varia, composition cosmétique ou dermatologique en contenant, et ses utilisations
L'invention concerne un extrait polaire de la plante Kniphofia uvaria, une composition cosmétique ou dermatologique comprenant ledit extrait, et son utilisation comme agent anti-âge ou agent anti-inflammatoire.
ETAT DE LA TECHNIQUE La plante Kniphofia uvaria est une espèce rhizomateuse vivace de la famille des Liliaceae (classification classique) et des Asphodelaceae (classification phylogénétique). Cette espèce rustique possède des feuilles étroites et retombantes, pouvant atteindre 1 mètre de long. Les inflorescences forment un épi composé de nombreuses fleurs tubulaires aux couleurs flamboyantes.
Les fleurs produisent pendant deux mois de l'année une grande quantité de nectar, lequel contient essentiellement de l'eau, des acides aminés, du glucose, du fructose, des sels minéraux et des oligo-éléments. Ce nectar contient de la superoxydismutase (SOD), une enzyme luttant contre le stress oxydant pouvant entraîner la peroxydation des lipides membranaires ou l'oxydation des protéines.
Compte-tenu de sa composition, le nectar des fleurs de Kniphofia uvaria est particulièrement adapté au soin des peaux sèches pour les nourrir en profondeur et les revitaliser, et il a déjà été incorporé dans un soin cosmétique régénérant et revitalisant. Il a également été proposé dans un autre soin cosmétique en combinaison avec des actifs anti-âge dont il complète l'action.
La demanderesse a mis en évidence de façon tout à fait surprenante qu'un extrait de la plante Kniphofia uvaria, en particulier un extrait de tiges, avantageusement cueillies vertes puis séchées, obtenu avec un solvant hydroalcoolique, est lui-même doté d'une activité anti-âge.
A ce jour, aucun procédé d'extraction mettant en œuvre la plante
Kniphofia uvaria par mise en contact de la plante avec un solvant polaire n'a été décrit. Il est donc particulièrement surprenant d'avoir mis en évidence qu'un tel extrait de la plante Kniphofia uvaria présente une activité cosmétique.
Les inventeurs de la présente invention ont également mis en évidence que des extraits végétaux de l'espèce Kniphofia uvaria obtenu par extraction à l'aide de solvants polaires présentent une activité anti-inflammatoire en inhibant notamment de façon significative la production de prostaglandine de type E2 (PGE2). Les inventeurs ont encore trouvé que ces extraits augmentent significativement la production de deux types de fibres de la matrice extracellulaire, le pro-collagène I et la fibronectine.
Les inventeurs ont aussi trouvé que ces extraits diminuent la production de pro-Matrix MetalloProtéinase de type 1 (pro-MMPl), enzyme clé responsable de la dégradation de la matrice extracellulaire, laquelle dégradation est particulièrement accélérée par les rayonnements UV.
Enfin, il a été mis en évidence qu'un extrait de l'invention inhibe significativement l'expression de Cathepsin K dans des fibroblastes humains normaux, traités par ledit extrait, et qu'il est ainsi possible de limiter la dégradation de l'élastine intracellulaire par cette protéase, au moment d'une exposition aux UV.
De part leur activité sur de nombreuses cibles, ces extraits présentent un intérêt pour une utilisation en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques, notamment destinées à lutter contre le vieillissement cutanée intrinsèque, le vieillissement cutané photo-induit, le relâchement cutané, les dégradations de la structure de la peau induites par les UV, ou les états inflammatoires. BUTS DE L'INVENTION
L'invention a pour but principal de fournir un nouvel extrait végétal, notamment utilisable en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques, notamment destinées à prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou à en ralentir ou atténuer les effets.
L'invention a aussi pour but de fournir un nouvel extrait d'origine végétale ayant pour effet de lutter contre l'inflammation et les effets induits par l'exposition aux UV tels que la dégradation de la matrice métallo-protéique, ou bien encore de contribuer au maintien de la fermeté de la peau.
L'invention a également pour but de fournir une méthode de soin cosmétique utilisant ces compositions cosmétiques.
L'invention a enfin pour but de résoudre l'ensemble des problèmes techniques par une solution simple, relativement peu coûteuse et utilisable à l'échelle industrielle, en particulier dans l'industrie cosmétique. DESCRIPTION DE L'INVENTION
Ainsi, selon un premier objet, l'invention concerne un extrait de la plante Kniphofia uvaria, obtenu par extraction du matériel végétal au moyen d'un solvant polaire acceptable d'un point de vue cosmétique ou dermatologique.
Le matériel végétal utilisé peut être la plante entière ou une partie de la plante telle que les feuilles, la tige, les fleurs, les graines ou les racines.
L'extrait végétal polaire est préférentiellement obtenu à partir d'un matériel végétal choisi parmi la tige, les graines et leurs mélanges.
Préalablement à l'étape d'extraction elle-même, le matériel végétal peut avoir été séché et/ou broyé.
Une alternative consiste à faire sécher la plante sur pied et à récolter ensuite la partie intéressante. Selon un mode préféré, le matériel végétal est séché après récolte de la plante.
L'extrait de l'invention peut être préparé par différents procédés d'extraction connus de l'homme du métier.
Au sens de l'invention, on entend par « extrait végétal polaire » un extrait obtenu par mise en contact d'un matériel végétal avec un solvant polaire, et l'on entend par « solvant polaire » un liquide dont le moment dipolaire est non nul, plus particulièrement un composé comprenant au moins une liaison covalente entre deux atomes dont la différence d'électronégativité ΔΕη est supérieure à 0,4 et inférieure à 1,7 (0,4 < ΔΕη < 1,7) selon l'échelle de Pauling (J. Am. Chem. Soc.f 1932, 54 (9), 3570-3582).
Les solvants polaires préférés sont ceux constitués d'un composé comprenant au moins une liaison covalente polaire de type OH.
A titre de solvant polaire particulièrement préféré, le solvant polaire est choisi parmi l'eau ; un mono-alcool en Q-Q, par exemple l'éthanol ; un glycol en C2-C6, choisi préférentiellement parmi le glycérol, le butylène glycol et le propylène glycol ; et l'un quelconque de leurs mélanges.
Selon une mise en œuvre préférée, on extrait le matériel végétal à l'aide d'un solvant polaire constitué d'un mélange hydroalcoolique, avantageusement un mélange d'eau et d'éthanol. En particulier, on peut extraire le matériel végétal à l'aide d'un solvant constitué d'eau et d'éthanol, l'éthanol représentant de 50% v/v à 99% v/v du mélange eau/éthanol.
L'extraction peut être menée à chaud par reflux ou bien par macération à température ambiante (comprise entre 20 et 25°C). On utilise avantageusement les ultrasons en cours d'extraction afin d'améliorer le rendement massique de ladite extraction.
Le procédé d'extraction peut également comprendre au moins une étape choisie parmi une étape de décoloration, une étape de purification, une étape de délipidation, et leurs combinaisons. Cette étape supplémentaire peut par exemple correspondre à
- un traitement de l'extrait par une solution d'au moins un solvant polaire en présence de particules de charbon actif, ou à
- un traitement de l'extrait à l'aide d'un solvant apolaire acceptable d'un point de vue cosmétique ou dermatologique, notamment un alcane en C6-C7 ou le C02 à l'état supercritique.
Le procédé d'extraction peut en outre être complété par une étape d'élimination partielle ou totale du solvant d'extraction.
Selon une variante, on concentre l'extrait jusqu'à obtenir un concentré aqueux dépourvu d'une quantité significative de solvants organiques. Dans une autre variante, on élimine le solvant jusqu'à obtenir un résidu sec.
L'extrait obtenu à l'issu de l'étape d'extraction peut être lyophilisé ou atomisé pour se présenter sous la forme d'une poudre.
L'extrait végétal tel que décrit précédemment peut être utilisé dans une composition cosmétique ou dermatologique sous la forme d'une poudre ou bien sous la forme d'une solution ou d'une suspension de ladite poudre dans au moins un solvant cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable, qui peut être identique ou différent de celui ayant servi à l'extraction.
Un deuxième objet de la présente invention vise une composition cosmétique ou dermatologique comprenant un extrait de Kniphofia Uvar/a té que défini précédemment et au moins un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable.
Avantageusement, la composition de l'invention comprend au moins un excipient acceptable d'un point de vue cosmétique ou dermatologique pouvant être choisi parmi des pigments, des colorants, des polymères, des agents tensioactifs, des agents de rhéologie, des parfums, des électrolytes, des ajusteurs de pH, des agents anti-oxydants, des conservateurs, et l'un quelconque de leurs mélanges. La composition cosmétique comprend une quantité efficace dudit extrait pour obtenir l'effet recherché.
La composition comprend ainsi préférentiellement de 0,0001% à 2% en poids dudit extrait en poids sec, de préférence de 0,01% à 1% en poids, par rapport au poids total de la composition.
Les propriétés de l'extrait de l'invention peuvent être également complétées ou améliorées dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques, dans lesquelles l'extrait de l'invention est associé avec d'autres agents actifs cosmétiques ou dermatologiques, sous forme de molécules purifiées et/ou d'extraits, notamment d'extraits végétaux, présentant des effets cosmétiques similaires et/ou complémentaires de ceux dudit extrait de l'invention. Ladite composition peut ainsi également comprendre à titre d'agents actifs, des molécules ou extraits choisies parmi les substances ayant une activité éclaircissante de la peau ; les substances ayant une activité amincissante ; les substances ayant une activité hydratante ; les substances ayant une activité calmante, apaisante ou relaxante ; les substances ayant une activité stimulant la microcirculation cutanée pour améliorer l'éclat du teint, en particulier du visage ; les substances ayant une activité sébo-régulatrice pour le soin des peaux grasses ; les substances destinées à nettoyer ou purifier la peau ; les substances ayant une activité anti-radicalaire ; les substances destinées à atténuer ou retarder les effets du vieillissement de la peau, en particulier la formation de rides, par une activité visant à favoriser le maintien de la structure de la peau et/ou à limiter la dégradation de la matrice extracellulaire des couches superficielles du derme et de l'épiderme et/ou à obtenir un effet protecteur, correcteur ou restructurant de la peau ; les substances ayant une activité anti-inflammatoire. La composition peut être par exemple un sérum, une lotion, une crème, une émulsion huile-dans-eau ou eau-dans-huile, un hydrogel, un masque pour le visage, une composition anhydre, ou encore se présenter sous la forme d'un stick, d'un patch, ou d'un produit de maquillage de type rouge-à-lèvres, mascara ou fond de teint.
L'extrait et la composition de l'invention présentent un effet particulièrement recherché pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané, ou pour en ralentir ou atténuer les effets. Un autre objet de l'invention vise l'utilisation, dans une composition cosmétique, d'un extrait tel que décrit précédemment,
- comme agent actif destiné à prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou à en ralentir ou atténuer les effets, et/ou
- comme agent actif destiné à favoriser la longévité cellulaire ou tissulaire.
Selon un autre objet de l'invention, l'extrait peut être également utilisé, dans une composition cosmétique, comme agent actif pour conserver ou améliorer l'élasticité et la fermeté de la peau, pour augmenter la production de collagène, en particulier de pro-collagène I, pour augmenter la production de fibronectine, pour ralentir la dégradation de la matrice extracellulaire, pour augmenter la production de fibres de la matrice extracellulaire, ou pour le maintien de la structure de la peau.
L'extrait peut encore être utilisé dans une composition cosmétique comme agent actif destiné à
- apaiser une peau irritée par les radicaux libres endogènes ou produits par les rayons UV, et/ou
- à inhiber la production de prostaglandine E2, et/ou
- apaiser une peau irritée par l'utilisation d'alpha hydroxy-acides, par exemple au cours d'un soin de gommage ou un peeling.
Selon un autre de ses aspects, l'invention concerne la composition dermatologique ou l'extrait décrits précédemment pour leur utilisation dans le traitement ou la prévention des états inflammatoires de la peau d'un patient.
La composition cosmétique ou dermatologique ou l'extrait décrits précédemment peut également être utilisée pour le traitement ou la prévention du vieillissement cutané, ou bien encore pour augmenter la longévité cellulaire ou tissulaire.
Un autre objet de l'invention vise une méthode de soin cosmétique comprenant l'application sur au moins une partie de la peau du visage ou du corps pouvant présenter des signes du vieillissement comme des rides ou un relâchement, d'une quantité efficace d'une composition ou d'un extrait tels que définis précédemment, notamment pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané ou à en ralentir ou atténuer les effets. Avantageusement, la composition cosmétique est appliquée sur une zone de peau du corps ou du visage présentant au moins un signe visible de vieillissement choisi parmi la présence de rides ou de ridules, une perte d'éclat du teint, une perte d'élasticité et/ou de souplesse, une diminution de l'épaisseur de la peau, et une augmentation de la sécheresse ou de la rugosité cutanée.
Avantageusement, l'extrait et la composition auxquels les utilisations de l'invention font référence sont de préférence tels que définis précédemment ou ci-après. D'autres buts, caractéristiques et avantages de l'invention apparaîtront clairement à la lumière de la description explicative qui va suivre faite en référence à des exemples de préparation d'extrait et de tests mettant en évidence les propriétés de l'extrait et à des exemples de composition cosmétique utilisant un tel extrait, qui sont donnés à titre d'illustration de l'invention sans pour autant en limiter la portée.
Dans les exemples, tous les pourcentages sont donnés en poids, la température est en degrés Celsius, la pression est la pression atmosphérique, sauf indication contraire.
EXEMPLES
Exemple 1 : Préparation d'extraits de Kn' hofia uvaria.
1) Préparation d'un extrait de tiges (EXTRAIT 1)
On a préparé un premier extrait en utilisant les tiges de la plante Kniphofia uvaria. Celles-ci ont été récoltées vertes puis séchées.
Cette matière végétale, à l'état sec et broyé, a subi une extraction hydroalcoolique Ethanol/eau 90/10 v/v à reflux pendant 30 min.
Le ratio végétal solvant était de 1/15 (p/v).
Le résidu végétal a été éliminé par flltration, puis lavé avec 1/3 du volume du solvant d'extraction.
Le solvant a ensuite été éliminé pour obtenir un extrait sec.
Le rendement massique en extrait sec exprimé en poids par rapport au poids de matière végétale de départ était de 3,3%. 2) Préparation d'un extrait de feuilles (EXTRAIT 2)
La matière végétale utilisée était constituée de feuilles de la plante Kniphofia uvaria. Celles-ci ont été séchées après récolte.
Cette matière végétale, à l'état sec et broyé, a subi une extraction hydroalcoolique Ethanol/eau 90/10 v/v à reflux pendant 30 min.
Le procédé mis en œuvre était conforme à celui décrit pour l'extraction des tiges.
Le rendement massique en extrait sec exprimé en poids par rapport au poids de matière végétale de départ était de 11%.
3) Préparation d'un extrait de graines (EXTRAIT 3)
La matière végétale était constituée de graines de la plante Kniphofia uvaria. Celles-ci ont été séchées après récolte.
Cette matière végétale, à l'état sec et broyé, a subi une extraction hydroalcoolique Ethanol/eau 90/10 v/v à reflux pendant 30 min.
Le procédé mis en œuvre était conforme à celui décrit pour l'extraction des tiges.
Le rendement massique en extrait sec exprimé en poids par rapport au poids de matière végétale de départ était de 23,9%.
4) Préparation d'un extrait de tiges (EXTRAIT 4) La matière végétale était constituée de tiges de la plante Kniphofia uvaria. Celles-ci ont été séchées après récolte.
Cette matière végétale, à l'état sec et broyé, a subi une extraction hydroalcoolique (Ethanol/eau 70/30 v/v) à reflux pendant 5 min, assisté d'ultrasons. Le ratio végétal/solvant est de 1/15 m/v.
L'utilisation d'ultrasons permet d'améliorer significativement le rendement massique d'extraction obtenu avec cette partie de plante, si on compare le rendement de l'EXTRAIT 4 avec celui de l'EXTRAIT 1.
Après séparation solide/liquide par filtration, on soumet le résidu solide obtenu à une nouvelle extraction dans les mêmes conditions, incluant l'assistance d'ultrasons, que la première, afin d'épuiser complètement le végétal.
Le rendement massique en extrait sec exprimé en poids par rapport au poids de matière végétale de départ était de 13%. Exemple 2 - Tests d'activité des extraits de l'invention
Pour les tests d'activité cosmétique ci-dessous, on a préparé une solution-mère pour chaque extrait préparé à l'exemple 1, dans laquelle un extrait sec de l'invention a été solubilisé dans du DMSO à la concentration de 12,5 ; 25 ou 50 mg d'extrait par ml_ de solvant.
Au moment du traitement des cellules par l'extrait de l'invention, la solution-mère est diluée au l/1000ème dans le milieu de culture pour atteindre la concentration souhaitée.
1) Marqueurs de l'inflammation (PGEZ)
La prostaglandine E2 (PGE2) est le médiateur majeur des phénomènes de réponses inflammatoires lors de dommages tissulaires. De nombreux agents pharmacologiques peuvent inhiber la libération de PGE2 par des kératinocytes en culture, tel llndométhacine ou encore des molécules issues de plantes.
Protocole du dosage de PGE2
Des cellules HaCaT (lignée kératinocytaire génétiquement modifiée) ont été ensemencées à raison de 10000 cellules/puits (milieu de culture KSFM complémenté, Gibco) dans une microplaque 96 puits. La plaque a été placée à l'étuve (37°C et 5% C02) pour 24 heures.
Les extraits ont été mis en présence des cellules après dilution au l/1000eme dans du milieu de culture. Une colonne a été traitée avec un témoin positif (indométhacine (Sigma) à 1 pg/mL) et une autre colonne non traitée a été mise en présence du DMSO. Les extraits, le témoin positif (indométhacine dans le DMSO) et le témoin sans traitement (DMSO), ont été évalués sur 4 puits de cellules (HaCaT).
Après 24 heures de traitement, les surnageants de culture ont été prélevés et stockés à -20°C. Le dosage a été effectué selon le protocole décrit dans le kit de dosage PGE2 (R&D Systems). Ce test immunoenzymatique permet de doser, par mesure spectrophotométrique à 450 nm, la quantité de PGE2 présente dans les surnageants qui est inversement proportionnelle à l'absorbance mesurée. 2) Maintien de la structure de la peau
Les tests ont été faits sur fibroblastes humains normaux (FHN), cellules du derme favorisant le maintien de la structure de la peau.
Les fibres de la matrice extracellulaire sont indispensables au bon maintien de la peau. Différents facteurs, intrinsèques ou extrinsèques, peuvent moduler le taux de ces fibres, jouant ainsi sur l'élasticité de la peau.
Protocole du dosage des fibres de pro-collagène I et fibronectine Les FHN ont été ensemencés à la densité de 5000 cellules/puits et
200 pL/puits de milieu de culture MEM (Gibco Invitrogen) complété avec de la glutamine (Gibco Invitrogen, concentration finale 2mM) et 10% de SVF (sérum de veau fœtal), dans une microplaque 96 puits (Falcon). La plaque de culture a été placée à l'étuve pendant 24 heures afin d'obtenir 80% de confluence cellulaire.
Les extraits ont été mis en présence des cellules après dilution adéquate dans du milieu de culture. Une colonne a été traitée avec un témoin positif (Acide ascorbique (Sigma) 0.1 μΜ), et une colonne a été mise en présence du solvant de solubilisation DMSO (témoin). Chaque extrait, le témoin positif (acide ascorbique dans le DMSO) et le témoin sans traitement (Témoin solvant DMSO), ont été évalués sur 4 puits de FHN (Fibroblastes Humains Normaux).
Après 48 heures de traitement, les surnageants de culture ont été prélevés et stockés à -20°C. Le dosage a été effectué selon les protocoles décrits dans les kits EIA de Takara. Ces deux tests utilisent une technique immunoenzymatique permettant de doser respectivement, par mesure spectrophotométrique à 450 nm, la quantité de fibres de collagène et fibronectine présentes dans les surnageants.
3) Marqueur du vieillissement cutané
Ce test a permis d'évaluer le vieillissement cellulaire. La MMP-1 est une enzyme majeure impliquée dans la dégradation de la matrice extracellulaire. La production de MMP-1 est gouvernée par le facteur de transcription AP-1 qui est directement influencé par des stress environnementaux, comme les rayonnements UV, qui aboutissent à l'accélération du vieillissement cutané. Protocole de dosage de la pro-MMP-1
Ce test a été réalisé sur fibroblastes humains normaux (FHN).
Ces FHN ont été ensemencés à la densité de 5000 cellules/puits et 200 pL/puits de milieu de culture MEM (Gibco Invitrogen) complété avec de la glutamine (Gibco Invitrogen, concentration finale 2mM) et 10% de SVF (sérum de veau fœtal), dans une microplaque 96 puits (Falcon). La plaque de culture a été placée à l'étuve pendant 24 heures afin d'obtenir 80% de confluence cellulaire.
Les extraits ont été mis en présence des cellules après dilution adéquate dans du milieu de culture. On a traité les cellules avec un témoin positif (Anogeissus leiocarpus 25 pg/mL) et un témoin solvant (DMSO).
L'extrait, le témoin positif et le témoin solvant, ont chacun été évalués sur 4 puits de FHN.
Après 48 heures de traitement, les surnageants de culture ont été prélevés et stockés à -20°C. Le dosage de pro MMP-1 a été effectué selon le protocole décrit dans le kit Quantikine (R&D Systems). Ce test selon la technique immunoenzymatique du « sandwich » permet de doser la quantité de pro MMP-1 dans les surnageants par mesure spectrophotométrique à 450 nm.
Résultats
Le tableau ci-dessous résume les données obtenues pour chaque extrait (dose d'utilisation non cytotoxique en pg/mL).
Figure imgf000012_0001
Légendes du tableau :
T DMSO = témoin solvant de solubilisât/on, (DMSO),
T+ = témoin positif du test (anogelline l
12,5 μα /mL ;25 ua/mL et 50 μα/mL = doses testées de léxtrait de Kniphofia
- PGE : prostaglandine type E2
- Pro-col. I : pro-collagène I
- Pro-MMPl : pro-Matrix MetalloProtéinase de type 1
Les valeurs du tableau sont exprimées en pourcentage par rapport à l'activité du témoin solvant dont l'activité est normalisée à 100%. Une valeur positive traduit une stimulation de la production du marqueur par les cellules cutanées, sous l'effet du traitement par l'extrait testé. Une valeur négative caractérise un effet d'inhibition sur la production du marqueur considéré.
Les trois extraits ont inhibé la production de PGE2. Ils ont ainsi un potentiel anti-inflammatoire qui les rend utilisables en tant qu'agent actif dans des compositions cosmétiques ou dermatologiques.
L'extrait végétal polaire présentant le plus grand intérêt est celui obtenu à partir de tiges de Knip' hofia uvaria. Cet extrait agit sur tous les marqueurs testés, d'une part en augmentant significativement la production de deux types de fibres de la matrice extracellulaire, le pro-collagène I et la fibronectine, marqueur de la fermeté de la peau, d'autre part en diminuant la production de la pro-MMPl, enzyme responsable de la dégradation de la matrice extracellulaire, plus particulièrement liée au vieillissement photo-induit.
Exemple 3 -Effet du traitement par un extrait de l'invention sur des fibroblastes Humains Normaux.
On étudie ici l'activité biologique in vitro d'un extrait de l'invention sur des fibroblastes humains normaux (FHN) cultivés en monocouche. L'étude a été réalisée à l'aide de la technologie TLDA pour Taqman Low density Array. On a étudié la modulation de l'expression du gène codant pour la Cathepsin K, en réponse à un traitement d'une durée de 24h par l'EXTRAIT 4 de l'exemple 1.
La cathepsin K est une protéase qui est exprimée à des hauts niveaux dans certaines conditions pathologiques. Il a été formulé l'hypothèse que cette protéine, responsable de la dégradation intracellulaire de l'élastine (SD Gan, J. Invest. Dermatol., 2009, S37), est particulièrement exprimée par les fibroblastes dans le cas d'une exposition de la peau au rayonnement solaire. Cette élastase jouerait ainsi un rôle important dans la dégradation de l'élastine participant au photovieillissement de la peau {Codriansky et ai., Photochem. Photobiol. ; 2009, 85(6): 1356-63) 1. Matériels et Méthodes
Culture cellulaire
Les fibroblastes humains normaux (FHN), issus d'un donneur adulte caucasien, ont été ensemencés en plaque 6 puits, à raison de 2.5.104 cellules/puits dans du milieu 1 de composition ci-dessous :
Milieu 1
Fournisseur Concentration finale
SVF Biowest 10%
DMEM Fisher qs
Trois puits de FHN ont été ensemencés par condition de culture. 24 heures avant le traitement, à confluence, les cellules ont été déplétées en sérum de veau fœtal (milieu 2) de composition ci-dessous :
Milieu 2
Fournisseur
DMEM Fisher
2. Traitement
Après 24 heures de culture sans sérum de veau fœtal, les cellules ont été traitées par un extrait de l'invention selon l'exemple 1, à 0,1% en poids dans du milieu 2. Après 24 heures de traitement, les cellules ont été récupérées afin d'en extraire les AR1M totaux. Un témoin non traité est également réalisé dans les mêmes conditions. 3. PCR Taqman Lo Density Array
3.1 Obtention des ARN totaux
Le milieu de culture des cellules a été éliminé, et 250 pL de tampon de lyse RLT (fourni dans le kit Nucleospin RNA trace) ont été ajoutés. Les cellules ont été raclées à l'aide d'un Cell Scraper puis le lysat cellulaire, récupéré dans une deep ell 1,2 mL (fourni dans le kit). Les ARN totaux ont été extraits à l'aide d'un Epimotion 5075 (Eppendorf) avec le kit Nucleospin RNA trace (Macherey Nagel).
Les solutions d'ARN totaux obtenues ont été dosées et leur qualité vérifiée, à l'aide du Bioanalyseur 2100 (Agilent Technologies). Cet appareil était relié à un ordinateur possédant le logiciel spécifique d'analyse des résultats (logiciel 2100 expert). La technique a nécessité une micro-plaque de 12 puits (RNA 6000 NanoChips) et un kit de réactifs (RNA 6000 Nano Reagents & Supplies), spécifiques du dosage des ARN totaux eucaryotes 3.2 Synthèse des ADN complémentaires
Le kit de reverse transcription (RT) utilisé était le High Capacity cDNA Reverse Transcription Kit (APPLIED BUIOSYTEMS). 100 ng d'ARN totaux, ont été dilués dans de l'eau pour un volume final de 50 pL. Ils ont été ensuite incubés pendant 10 minutes à 25°C puis 2 heures à 37°C avec 50 pL de mélange réactionnel de High capacity reverse transcription kit 2X préalablement préparé comme indiqué ci dessous.
Réactifs volume
RTbuffer 10 μί
dNTPbuffer 4 μί.
Random primer 10 μί.
RNAse out 1 μί
RT 5μί
H20 20 μί
3.3 PCR Taqman Low Density Array
50 pL de chaque RT ont été prélevés et mélangés à 50 pL de « Taqman Gene Expression master mix ». Après homogénéisation, les 100 pL ont été déposés sur les cartes microfluidiques, ces dernières ont été centrifugées puis scellées.
On a utilisé des gènes contrôles pour la normalisation des résultats. La PCR a été réalisée selon le protocole fourni par Applied Biosystems dans l'appareil ABI Prism 7900HT Séquence détection System. Les étapes de la qPCR ont été 2 min à 50°C, 10 min à 94,5°C puis 30 s à 97°C et 1 min à 59,7°C pour 40 cycles.
3.4 Analyse des résultats
Dans la méthode de RT-PCR TLDA, la quantification est effectuée en utilisant la méthode comparative de ACt Cette méthode détermine le nombre de cyles (Ct) de chaque gène de la carte en utilisant le logiciel RQ Manager qui prend en compte du bruit de fond pour chaque gène. Ce nombre de cycles (Ct) a été normalisé par rapport au Ct d'un gène de ménage GAPDH invariant dans les cellules.
4. Résultats
Le traitement des FHN par l'extrait de l'invention induit une inhibition significative (- 31%) de l'expression de Cathepsin K par le gène CTSK 1 par rapport au témoin. L'effet de l'extrait de l'invention sur l'expression du gène Cathepsin K est donc particulièrement intéressant pour prévenir ou ralentir la dégradation de l'élastine, notamment au moment d'une exposition de la peau aux UVs. Il est ainsi possible de lutter efficacement contre le vieillissement cutané, et plus particulièrement sur le photovieillissement de la peau en agissant sur l'inhibition de ce gène à l'aide de l'extrait de l'invention.
Exemple 3 - Crème anti-vieillissement pour le visage
L'extrait de tiges de Kniphofia uvaria utilisé à titre d'agent actif dans cette composition cosmétique, a été obtenu selon l'exemple 1 (EXTRAIT 4).
L'extrait sec a été mis en solution à 2% p/p dans un mélange glycérol/eau 60/40 v/v.
Cette solution d'extrait a été utilisée à titre d'agent actif pour la préparation de la composition cosmétique ci-dessous (% exprimé en poids par rapport à la composition finale) : Phase A
Solution à 2% en extrait de Kniphofia uvaria 1
Phénoxyéthanol 0,5
Gomme xanthane 0,2
Acrylates/C20-30 alkylacrylate crospolymères 0,2
EDTA tétrasodique 0,1
Eau qs qs : quantité suffisante pour solubiliser les composés de la phase A.
Phase B
Polyisobutène hydrogéné 4 Squalane 3 Capry!ique/caprique triglycérides 3
Pentylène glycol 3
Glycéryl stéarate 3
PEG-100 stéarate 2,5
Cire d'abeilles 1,5
Dicaprylyl carbonate 1,5
Cétyl alcool 1
Stéaryl alcool 1
Diméthicone 1 Phase C
Hydroxyde de sodium 0,04
Eau qs 100 qs 100 : quantité suffisante pour 100% de la composition finale On a dispersé les excipients de la phase A dans l'eau, puis on a chauffé à 80°C, avant de solubiliser tous les autres composés y compris la solution hydroglycolique d'extrait de Kniphofia uvaria.
Les composés de la phase B ont été chauffés à 85°C pour former une phase homogène.
On a émulsionné la phase A dans la phase B à l'aide d'un mélangeur
Ystral.
L'émulsion huile-dans-eau ainsi obtenue a finalement été neutralisée à l'aide d'une solution aqueuse d'hydroxyde de sodium 0,04 % p/p (phase C), puis refroidie.
La composition obtenue était une crème anti-âge destinée à être appliquée sur tout ou partie du visage et/ou du décolleté.
L'extrait confère à la composition des propriétés qui favorisent le maintien de la fermeté de la peau sur laquelle la composition est appliquée et permet d'atténuer les signes de vieillissement cutané, notamment photo-induit.

Claims

REVENDICATIONS
1. Extrait de la plante Kniphofîa uvaria, obtenu par extraction de la tige du matériel végétal, au moyen d'un solvant polaire acceptable d'un point de vue cosmétique ou dermatologique.
2. Extrait selon la revendication 1, caractérisé en ce que le matériel végétal est séché après récolte de la plante.
3. Extrait selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le solvant polaire est choisi parmi l'eau, un mono-alcool en Q-Q, un glycol en C2-Q, et l'un quelconque de leurs mélanges.
4. Extrait selon l'une des revendications précédentes, caractérisé en ce que le solvant polaire est un mélange d'eau et d'éthanol, l'éthanol représentant de 50% v/v à 99% v/v du mélange.
5. Composition cosmétique ou dermatologique comprenant - un extrait de la plante Kniphofia uvaria, obtenu par extraction du matériel végétal au moyen d'un solvant polaire acceptable d'un point de vue cosmétique ou dermatologique, et
- au moins un excipient cosmétiquement ou dermatologiquement acceptable choisi parmi des pigments, des colorants, des polymères, des agents tensioactifs, des agents de rhéologie, des parfums, des électrolytes, et l'un quelconque de leurs mélanges.
6. Composition selon la revendication 5, caractérisée en ce que la matériel végétal est la tige.
7. Composition cosmétique ou dermatologique selon la revendication précédente, caractérisé en ce qu'elle comprend 0,0001% à 10% en poids dudit extrait en poids sec, de préférence de 0,01% à 1% en poids, par rapport au poids total de la composition.
FEUILLE RECTIFIÉE (RÈGLE 91) ISA/EP
8. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'un extrait selon l'une des revendications 1 à 4, comme agent actif destiné à prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement cutané, et/ou comme agent destiné à favoriser la longévité cellulaire ou tissulaire.
9. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'un extrait tel que défini à l'une des revendications 1 à 4 comme agent actif pour conserver ou améliorer l'élasticité et la fermeté de la peau, pour augmenter la production de collagène, en particulier de pro-collagène I, pour augmenter la production de fibronectine, pour ralentir la dégradation de la matrice extracellulaire, pour augmenter la production de fibres de la matrice extracellulaire, ou pour le maintien de la structure de la peau.
10. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'un extrait tel que défini à l'une des revendications 1 à 4, comme agent actif destiné à apaiser une peau irritée par les radicaux libres endogènes ou produits par les rayons UV, et/ou pour inhiber la production de prostaglandine E2.
11. Utilisation, dans une composition cosmétique, d'un extrait tel que défini à l'une des revendications 1 à 4, comme agent actif destiné à apaiser une peau irritée par l'utilisation d'alpha hydroxy-acides.
12. Composition cosmétique ou dermatologique selon l'une des revendications 5 à 7 ou extrait selon l'une des revendications 1 à 4 pour leur utilisation dans le traitement ou la prévention des états inflammatoires de la peau d'un patient.
13. Composition cosmétique ou dermatologique selon l'une des revendications 5 à 7 ou extrait selon l'une des revendications 1 à 4 pour leur utilisation dans le traitement des signes du vieillissement cutané comme des rides ou un relâchement.
FEUILLE RECTIFIÉE (RÈGLE 91) ISA/EP
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