WO2013083025A1

WO2013083025A1 - 一种用于制备抗脑血管疾病药物的组合物

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Publication number: WO2013083025A1
Application number: PCT/CN2012/085815
Authority: WO
Inventors: 姜水湜; 包玉胜; 陈敏; 晁阳; 叶海; 顾传虎; 李正海; 姚洛芫
Original assignee: 南京优科生物医药研究有限公司; 南京优科生物医药有限公司; 南京优科制药有限公司
Priority date: 2011-12-08
Filing date: 2012-12-04
Publication date: 2013-06-13
Also published as: CN102526035A; CN102526035B

Abstract

本发明公开了一种用于制备治疗脑血管疾病特别是缺血性脑血管疾病的药物组合物，该药物组合物由3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸以及药学上可接受的辅料或载体组成。该药物组合物中的3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与2-氨基乙磺酸具有协同作用，可以增加药效、降低毒副作用，十分适用于临床用药。

Description

一种用于制备抗脑血管疾病药物的组合物技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种含 3 甲基 1 苯基 2 吡唑琳 δ 酮和 2-氨基乙磺酸的药物组合物，以及该药物组合物在制备预防或治疗脑血管疾病药物中的用途。

背景技术

脑血管疾病是发生在脑部血管，因颅内血液循环障碍而造成脑组织损害的一组疾病。脑血管疾病一般分为两类：缺血性脑血管疾病和出血性脑血管疾病。缺血性脑血管疾病是由于脑血管中血液流动减少甚至断流而造成，而出血性脑血管疾病则是由脑血管破裂而造成。缺血性脑血管疾病是发病率、致残率和死亡率最高的常见病之一，我国现在每年新发病约 200 万人，死亡超 100万人，现存患者 700余万人，严 S危害人们的生命健康。

Η本的三菱化学公司 (Mitsubishi Chemical Inc) 于 1985年开发出 -一种白由基清除剂，并在 JP1987] 08814、 EP208874, US4857542等专利中披露了该种自由基清除剂的化学结构、制各工艺和药物组合物。该种自由基清除剂的通用名为依达拉奉（Edararone) , 化学名为 3- 甲基— 1—苯基— 2吡唑啉 -5酮， CAS No. ; 89-25-8 , 具有 "式 ί所示的化学结构。

！

3-甲基 -1-苯基- 2-吡唑琳 -5-酮具很强的自由基清除及抗过氧化物作用，用于治疗急性脑梗死，改善急性脑梗死的神经症状，恢复身体机能，减轻患者活动障碍。该药物最先于 2001 年 6月在日本以注射剂的剂型上市，规格为 20ml/30mg，商品名为 Radicut; 该药是临床上第一个用于治疗急性脑梗死的自由基清除剂。研究结果表明，单独使用此药存在一定的副作用，比如肾功能衰竭、急性过敏反应、肝功能障碍、血小板减少等不良反应 ο« Cardiovascular Drug Discover).', 2006, 1, 85-93 )□

2-氨基乙磺酸是一种含硫的非蛋白氨基酸，最早由牛黄中分离出来，故又称牛磺酸 ( Taurine) o 2-氨基乙磺酸的 CAS No. : 107-35-7 , 具有下式 Π所示的化学结构。

研究结果表明，牛磺酸具有抗兴奋性神经毒性（fl/driss A ei a/. lVeiTOSC , 1ft 9459-68_r 1999.； Saransaari P, et ai. Amino Acids, 19_f 509-526, 2000.) ,抗氧化应激和炎症反应、保护细胞膜和骨架稳定、调节细胞内钙离子平衡（CTcifiss A etal, Ad Exp Med BioI_r 526, 527-536, 2003, JM wade lP_f et al. I Neumc em. 51 740-745, 1988.),抗凋亡等多靶标作用，是一种天然的内源性细胞保护剂和内稳定物质，能作用 Τ·脑缺血的多个病理生理环节，保护缺血大脑。

但迄今为止，在治疗缺血性脑血管疾病所致的神经症状、运动能力和功能障碍方面，尚未发现有关 3-甲基- 1-苯基- 2-吡唑啉 -5-酮与 2-氨基乙磺酸联合用药的报道。

发明内容

本发明人首次发现 3-甲基- 1-苯基- 2-吡唑琳 -5-酮和 2-氨基乙磺酸在治疗脑血管疾病方面具^协同作用。

本发明的目的是提供一种用于制备预防或治疗脑血管疾病药物的组合物，由 3-甲基- 1- 苯基 2-吡唑琳 -5-酮和 2-氨基乙磺酸以及药学上可接受的辅料或载体组成。

术语"药学上可接受" 指在合理医学判断范围内适用于与哺乳动物特别是人的组织接触而无过度毒性、剌激、过敏反应等并与合理的效益 /风险比相称。

进一步地，所述的药物组合物巾， 3-甲基- 1-苯基- 2-吡唑啉 -5-酮和 2-氨基乙磺酸的重量比为 1 : 5〜120。进一步优选地， 3 甲基 -1苯基 2-吡唑啦 -5-酮和 2氨基乙磺酸的重量比为 1 ; 5〜50。

本发明的技术方案还包括，所述的药物组合物的适合人体使用的注射剂、粉针剂、乳剂、混悬剂、溶胶剂、膏剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂或气雾剂的形式。

本发明的药物组合物可做成注射剂形式，可以采用注射用水、橄榄油、丙二醇、油酸乙酯其中的一种或几种作为载体。

较优地，注射或输液用的溶液可含有注射用水作为载体，必要时，可釆用无菌的等渗盐水溶液，也可以含有必耍的抗氧化剂、稳定剂、助溶剂、 ρΗ调节剂、渗透压调节剂等。其中抗氧化剂可以为氮基酸或其盐、亚硫酸盐、硫代硫酸盐，以及其中的一种或几种。更具体地，上述的氨基酸为 L™半胱氨酸、 L精氨酸、谷氨酸或 L 组氨酸其中的一种或几种；上述的亚硫酸盐为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸铀中的一种或几种；上述的硫代硫酸盐为硫代硫酸钠。其中 ρΗ调节剂可以选自磷酸、乳酸、盐酸、枸橼酸以及氫氧化钠或氣氧化钾中的一种或几种。渗透压调节剂则可以是氯化钠或葡萄糖。因此，一种较优的选择是，所述的注射剂由 3-甲基- 1-苯基 -2-吡唑啉5-酮、 2氨基乙磺酸、注射用水、抗氧化剂、 pH调节剂和渗透压调节剂组成。进一歩优选地，所述的抗氧化剂为 L-半胱氨酸或其盐、 L-精氨酸或其盐、 L-谷氨酸或其盐、 L-组氨酸或其盐、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的一种或几种，并 ft上述的氨基酸的盐优选其盐酸盐；所述的 pH 调节剂为磷酸、乳酸、盐酸、枸橼酸、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或几种；渗透压调节剂为氯化钠、葡萄糖或者二者的混合物。

木发明的药物组合物的悬剂或乳剂可含有例如天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙醇作为载体。

本发明的药物组合物也可以配制含有必要的载体、释放剂、润滑剂、崩解剂、泡腾混合物、着色剂、甜味剂、湿润剂和- 般在药物配方中使用的非毒性以及药理学不活泼的物质的固体制剂。如果需要，释放剂可以选用乳糖、右旋糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或铃薯淀粉；润滑剂可以选用二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或钙、硬脂酸富马酸鈉或钙；粘合剂可以选用淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或聚乙烯吡咯垸酮；崩解剂可以选用交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羟丙基纤维素、淀粉、藻酸、藻酸盐或羧甲基淀粉钠；湿润剂可以选用水、乙醇、卵磷脂、聚山梨酸酯或硫酸月桂酯。上述的药物制剂可用已知的生产方式生产，例如通过混合、造粒、压片、糖包衣或膜包衣工艺。

本发明还提供所述的药物组合物在制备预防或治疗脑血管疾病药物中的应用；优选地，上述的脑血管疾病为缺血性脑血管疾病；进一步地优选地，上述的脑血管疾病是脑梗塞、短暂性脑缺血发作、腔隙性栓塞或脑动脉盗血综合征。

实验结果表明， 3-甲基 -1-苯基- 2-吡哇啉 -5-酮和 2-氨基乙磺酸在预防或治疗缺血性脑血管疾病方面具有协同作用效果；二者做成复方用药时，不仅仅能提高治疗效果、降低依达拉奉的给药剂量，同时也能减轻依达拉奉的毒副反应。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明的方案作进一歩描述。为表述方便，述及的化合物用其通用名表示。

实施例 1 依达拉奉注射液

在配制容器中加入 80%注射用水，加入适量磷酸（调节 pH在 2.0左右）搅匀，依次加入 0.5gL-半胱氨酸盐酸盐一水合物和 L5g依达拉奉，再加入 LOg亚硫酸氢钠和 6.75g氯化钠，搅拌使全部溶解，再用 2.5M NaOH调节 pH4.0〜4.5，补水至 1000ml, 即得。

实施例 2 牛磺酸注射液 , 取牛磺酸 40g，用 0.9%生理盐水溶解至 1000ml, 即得。

实施例 3 依达拉奉 /牛磺酸 (1:5)注射液

取依达拉奉 1.5g，牛磺酸 7.5g，参照实施例 1所述的方法，配成注射液 lOOOml, 即得。实施例 4 依达拉奉磺酸 20)注射液

取依达拉奉 1.5g，牛磺酸 30g，参照实施例 1所述的方法，配成注射液 1000ml, 即得。实施例 5 依达拉奉 /牛磺酸 0 :30)注射液

取依达拉奉 1.5g，牛磺酸 45g，参照实施例 1所述的方法，配成注射液 1000ml, 即得。实施例 6 依达拉奉 /牛磺酸 (1 :60)注射液

取依达拉奉 1.5g，牛磺酸 90g, 参照实施例〗所述的方法，配成注射液 1000ml，即得。实施例 7 依达拉奉 /牛磺酸 (1 :120)注射液

取依达拉奉 1.5g，牛磺酸 180g，参照实施例 1所述的方法，配成注射液 1000ml, 即得。实施例 8 用药效果对比试验

1 材料与方法

1.1 动物；雄性 Sprague Dawley (SD) 大鼠， 7周龄'，体重 200〜260g。

1.2药品与试剂；实施例 1 的依达拉奉注射液（1.5mg/ml )，实施例 2 的牛磺酸注射液

(40mg/ml), 不同比例的依达拉奉 +牛磺酸注射液。

1.3方法

1.3.1 .W灶性脑缺血（middle cerebral artery occlusion MACO) 再灌注模型

主要歩骤：动物用 10% 水合三氯乙醛（4.0ml/kg) 麻醉，分离、结扎并切断右侧颈外动脉，由颈外动脉残端沿颈总和颈内动脉缓慢插入头端膨大的尼龙栓线（约 20mm)，阻塞大脑中动脉入 U造成缺血。缺血 2小时后拔除栓线进行 24小时再灌注；假乎术组栓线只分离血管，其他步骤相同。动物苏醒后出现 Homer征和对侧肢体运动障碍即为模型制备成功。

1.3.2 动物分组与给药

实验动物随机分为 6组，即模型组、假手术组和不同的药物组。实验动物于再灌注时立即静脉注射（i.v.) 给药 1次， 24小时评价指标。

1.3 神经缺陷评分、脑梗死面积的测定

1.3.3.1神经缺陷症状：按照 LongaS分制评分标准（0分，无神经损伤症状； 1分，不能伸展对侧前爪； 2分，向外侧转圈； 3分, 向对侧倾倒； 4分, 不能自发行走，意识丧失） I"再灌注后 24小时进行行为学评分。

1.3.3.2脑梗死面积：动物经末次神经功能缺损评分后，大鼠用 10%水合三氯乙醛麻醉后断头取脑。剔除嗅脑、低位脑干及小脑，在冰上将脑沿冠状面切成厚度基本相同的 5片，于 37Ό 红四氮唑染料中温浴 30min，正常脑组织呈玫瑰红，梗死区呈现白色。然后将脑片置 10%的甲醛中固定。拍照并输入计算机，用 AUTOCAD 图像处理软件计算梗死面积（粉红色区为正常脑组织区，白色区为梗死区）。 X 100

2. 结果

2.1 对缺血再灌注后脑梗死面积和祌经缺陷评分的影响

表 1 对缺血再灌注后脑梗死面积和神经缺陷评分的影响（平均值土标准差）

平均值土标准差， n=15;

*表示 P (显著性水平） <0.05 , 即与模型组比较，具 · '显著性差异； **表示 P<0.01 , 与模型组比较，具有非常显著性差异。

从上表中结果，可以看出：

(1) .依达拉奉组 (3.0mg/kg) 与模型组相比，能显著性地 (P<0.05 ) 降低脑梗死面积，但是不能显著地降低神经缺陷性评分；而牛磺酸组（40nig/kg)与模型组相比，未见显著地降低脑梗死面积和神经缺陷评分的结果；

(2) .依达拉奉给药量减半（1.5mg/kg)、牛磺酸低剂量（7.5mg/kg) 的组合物给药组 I与模型组相比，能显著性地（P<0.05 ) 降低脑梗死面积和神经缺陷性评分；

(3) .在维持依达拉奉量不变（1.5mg/kg)、增大牛磺酸给药量（例如组合物给药组 II和组合物给药组 III〉时：组合物给药组 II与模型组相比，能非常显著性（P<0.01 ) 降低在脑梗死面积，同时能显著性（P<0.05) 降低神经缺陷性评分；组合物给药组 ΠΪ与模型组相比，能显著性降低（P<0.05) 脑梗死面积和神经缺陷性评分。

h述结果表明，依达拉奉和牛磺酸做成复方一起给药时，与两者分别单独给药相比，具有增效或协同作用；即使在各自的低剂量组合时，也能够表现出显著的药效，这样可以显著降低依达拉奉和牛磺酸的给药剂量，从而减轻临床用药的毒副作用。

实施例 9 依达拉奉牛磺酸注射液

处方;

依达拉奉 100.0 g

牛磺酸 1000.0g

L 半胱氨酸盐酸盐 15, 0g

亚硫酸铀 30.0g

氯化钠 500.0 g

注射用水加至 100.0L

制成 10000 支

(1) 在配制容器中加入 80%注射用水（65°C〜75°C) 并保温，加入适量磷酸（使 pH在 2,0 左右）搅匀，依次加入处方量的 L半胱氨酸盐酸盐和牛磺酸、依达拉奉，搅拌 6— 10分钟左右使全溶，冷却至 25〜35°C;

(2) 加入处方厫的亚硫酸铀和氯化铀，搅拌使全部溶解；用 2.5M NaOH调节 ρΗ3,0〜4,5，加水足量；

(3) 加入 0,05%(_g./ml)活性炭，搅抨 15min, 脱碳后依次过过 0, 45 μ m和 0.22μπι膜过滤;

(4) 取样测定中间体含量，合格后灌封；

(5) 蒸汽热压 115°C灭菌，检漏、灯检，包装。

实施例 10 依达拉奉牛磺酸注射液

处方；

依达拉奉 100, 0 g

牛磺酸 3000.0g

L-半胱氨酸盐酸盐 30.0 g

焦亚硫酸氢钠 50, 0g

氯化钠 680, 0 g

注射用水加至 100.0L 制成 10000 支

工艺;

(1) 在配制容器中加入 80¾)注射用水（65Ό〜7δΌ) 并保温，加入适量磷酸（使 pl 在 2.0 左右）搅匀，依次加入处方量的 L-半胱氨酸盐酸盐和磺酸、依达拉奉，搅拌 6〜10分钟左右使全溶，冷却至 25〜35°C;

(2)加入处方量的焦亚硫酸氢钠和氯化钠，搅拌使全部溶解；用 2, 5M: NaOH调节 ρ:Η3, ()〜4, 5, 加水至足量；

(3) 加入 ()，05%(g/ml)活性炭，搅拌 15min，脱碳后依次过过 (λ 45 μ m和 0.22μηι膜过滤;

(4) 取样测定中间体含量，合格后灌封；

(5) 蒸汽热压 115Ό灭菌，检漏、灯检，包装。

实施例 11 依达拉奉牛磺酸注射液

处方：

依达拉奉 100.0 g

牛磺酸 4000, 0g

L-组氨酸盐酸盐 40,0 g

亚硫酸鈉 50, 0g

氯化钠 675.0g

注射用水加至 100, 0L

制成 10000 支

工艺;

(1) 在配制容器屮加入 80%注射用水 (65。C〜75。C) 并保温，加入适：最盐酸 (使 pH在 2.0 左右）搅匀，依次加入处方量的 L-组氨酸盐酸盐和磺酸、依达拉奉，搅拌 6〜10分钟左右使全溶，冷却至 2δ〜3δΌ;

(2) 加入处方量的亚硫酸钠和氯化钠，搅拌使全部溶解；用 2.5Μ NaOH调节 ρΗ3,0〜4.5，加水至足量；

(4) 取样测定中间体含量，合格后灌封；

(5) 蒸汽热压 121Ό灭菌，检漏、灯检，包装。

实施例 12 依达拉奉 4:磺酸注射液

处方：

依达拉奉 100.0 g 牛磺酸 5()()(λ 0g

精氨酸盐酸盐 40.0 g

亚硫酸钠 50, 0g

氯化钠 700.0g

注射用水加至 100, 0L

制成 10000 支

工艺；

(1) 在配制容器屮加入 80%注射用水 (65。C〜75。C) 并保温，加入适：最乳酸 (使 pH在 2.0 左右）搅匀，依次加入处方量的 L-精氨酸盐酸盐和磺酸、依达拉奉，搅拌 6〜10分钟左右使全溶，冷却至 2δ〜3δΌ;

(2) 加入处方量的亚硫酸钠和氯化钠，搅拌使全部溶解；用 2,5M Na()H调节 ρΗ3,()〜4,5，加水至足量；

(3) 加入 0.05%(g/ml)活性炭，搅拌 Ιδπύη, 脱碳后依次过过 0.45 μ m和 0.22μιη膜过滤;

(4) 取样测定中间体含量，合格后灌封；

(δ) 蒸汽热压 121Γ灭膚，检漏、灯检，包装。

实施例 13 体内 /外实验模¾评价复方的药效

1体外实验材料与方法

1.1试验动物

雄性 Sprague Dawley (SD) 大鼠，两周龄

1.2 方法

采用离体大鼠海马切片，在培养液屮暂时去除氧气和葡萄糖（OGD: oxygen and glucose deprivation), 诱导脑片损伤，模拟脑缺血体外模型。测定培养液中 UIH水平，评价脑损伤程

層抑制率％ = 100x ( 賺对照组匪活性给繊議活'性）

阳性对照组 LDH活性 -阴性对照组 LDH活性

1.3结果

LDH抑制率结果见下表:

模型组 35.41 ±7.07 一

牛磺酸组 29.46 ± 1.75 22.36** 依达拉奉组 27.23 ±2.86 30,75**

1/5 29.98 ±0.97 20,41*

复方

1/10 27,71 ±4.41 28,93**

组（俄

达拉奉 / 1/20 23.23 ±2.29 41,99**

牛磺酸） 1/40 30.02±3.52

N=5 , *P < 0.05_S **P < 0,01 _o

由上表结果可得，依达拉奉与牛磺酸复方的各比例与牛磺酸组及依达拉奉组比较均能抑制 LDH释放，结果在体外模型中依达拉奉与牛磺酸复方的各比例均能抑制 LDH释放，约在 1:20比例时，抑制率最髙。

2体内实验材料与方法

2,1动物：雄性 Sprague Dawley (SD)大鼠， 7周龄，体重 200〜260g。

2.2药品与试剂实施例制备的依达拉奉牛磺酸复方注射液

2.3方法

o

2.3.1 局灶性脑缺血（middle cerebral artery occluskm ACO) 再灌注模型

主要步骤：动物用 10%水合三氯乙醛（4.0ml/kg)麻醉，分离、结扎并切断右侧颈外动脉，由颈外动脉残端沿颈总和颈内动.脉缓慢插入头端膨大的尼龙栓线（约 20mm)，阻塞大脑中动脉入口造成缺血。缺血 2小时后拔除栓线进行 24小时再灌注；假手术组栓线只分离血管，其他步骤相同。动物苏醒后出现 Homer征和对侧肢体运动障碍即为模型制备成功。

2.3.2动物分组与给药

实验动物随机分为 6组，即模型组、假手术组和不同的药物组（依达拉奉 +牛磺酸总剂量为 4.5mg/kg)。实验动物制备脑缺血模型后，将动物按机率均等单盲分配至各组。亍缺血后立即给药 1次，以后分别于 2、 4、 12小时给药一次，共给药 4次。模型组: 给大鼠尾静脉注射等体积的生理盐水。假手术组给大鼠尾静脉注射等体积的生理盐水。依达拉奉阳性对照组于脑缺血后立即给药 1次，之后于 12小时给药一次，共给药 2次，总量共计为 3mg/kg。

再灌流时间：缺血 2小时后，再灌流。

评价时间：于再灌流 24小时后，处死动物，以脑缺血面积评价。

2.3.3神经缺陷评分、脑梗死面积的测定

2.33.1神经缺陷症状：按照 L_0nga5分制评分标准（0分，无神经损伤症状； 1分，不能伸展对侧前爪； 2分，向外侧转圈； 3分，向对侧倾倒； 4分，不能自发行走，意识丧失）于再灌注后 24小时进行行为学评分。

2,33,2脑梗死面积：动物经末次神经功能缺损评分后，大鼠用 10%水合 :氯乙醛麻醉后断头取脑。剔除嗅脑、低位脑干及小脑，在冰上将脑沿冠状面切成厚度基本相同的 5片，于 37°C 红四氮唑染料中温浴 30min, 正常脑组织呈玫瑰红，梗死区呈现白色。然后将脑片置 10%的甲醛屮固定。拍照并输入计算机，用 AUTO-CAD图像处理软件计算梗死面积（粉红色区为正常脑组织区， G色区为梗死区）。梗麵謂

2.4 结果

2.4.1 对神经缺陷评分的影响

神经缺陷评分见下表，依达拉奉与牛磺酸复方的各比例与牛磺酸组与模型组比较均能显著改善神经缺陷症状。结果表明，依达拉奉与牛磺酸复方用药能显著改善神经缺陷症状。

表；依达拉奉（Α) 与牛磺酸（Β) 复方用药对神经缺陷症状的影响

X士 SD, n=12_; *P < 0,05 , 与模型组比较。

2.4.2 对脑梗死面积的影响

各组脑梗死面积见下表，依达拉奉与牛磺酸 1 : 15， 1 :20, 1 :40复方，和依达拉奉组与模型组比较，能显著缩小脑梗死面积，依达拉奉与牛磺酸复方的 1 :5 比例组与模型组比较具 W 缩小脑梗死面积的趋势。

表：依达拉奉（A) 与牛磺酸（B ) 复方用药对脑梗死面积的影响

X ± S:D， n=12_; *P < 0.05, 与模型组比较。

实施例 14 依达拉奉牛磺刺激性评价

1. 试验方法及材料

动物： Beagle犬，普通级， 40只，雌雄各半_£ 试验分组- 溶媒对照组（0.9%的氯化钠溶液）

依达拉奉 ⁶0mg/kg

复方依达拉奉.牛磺酸（1 :5 ) 注射液 360_mg/kg

复方依达拉奉牛磺酸（1 :5 ) 注射液 180mg/kg

2. 试验方法：

取比格（Beagle) 犬 40雌雄各半，按照体重随机分 5组。试验前先驯养观察及适应 1 周，试验期间，每天上午同一时间给药一次，给药方式为静脉给药，连续给药 30天，并随体重增加调整给药量。观察注射给药部位的刺激程度、并进行肾脏、注射部位及各组织病珲.学检查，综合评价复方依达拉奉的毒性情况。

3. 试验结果：

3.1局部剌激性：病理检查结果显不部分动物给药部位血管周围组织出血，伴或不伃有炎性细胞浸润。各组动物病变发生率及病变程度无明. M差异，提示以上病变出现与给药无关，可能与给药过程中操作有关。

3.2肾脏毒性；部分试验动物出现了肾脏病变，表现为不同部位间质单核细胞浸润、肉芽肿形成。比较病变发生率及病变轻重程度，各组无明显差异，同时考虑到以上病变大部分仅累及单侧器官，因此推断，本实验中动物出现的肾脏病变，与给药无关。在给药后 30分钟〜 2小时，依达拉奉 60mg/kg剂量组出现血尿为 100%» 复方依达拉奉 360mg/kg剂量组出现血尿为 60%

4. 试验结论

在本试验剂量条件下： 1 )、局部刺激性：复方依达拉奉与依达拉奉对犬注射给药部位的刺激作用，二者基本相似； 2)、肾脏毒性；复方依达拉奉的肾脏毒性小于依达拉奉。

应当说明的是，以 h所述仅为木发明的较佳实施例而已，并不用于限制木发明的范闱，凡在本发明的精神和原则之内所作出的任何修改、等同的替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims

1. 一种药物组合物，由 3-甲基 -1-苯基 -2-吡唑啉 -5-酮和 2-氨基乙磺酸以及药学上可接受的辅料或载体组成。

2. 根据权利要求 1所述的药物组合物，其特征在于，所述的 3-甲基 -1-苯基 -2-吡唑啉 -5-酮和

2-氨基乙磺酸的重量比为 1 : 5〜120。

3. 根据权利要求 2所述的药物组合物，其特征在于，所述的 3-甲基 -1-苯基 -2-吡唑啉 -5-酮和

2-氨基乙磺酸的重量比为 1 : 5〜50。

4. 根据权利要求 1〜3中任一项所述的药物组合物，其特征在于可以是适合人体使用的注射剂、粉针剂、乳剂、混悬剂、溶胶剂、膏剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂或气雾剂的形式。

5. 根据权利要求 4所述的药物组合物，其特征在于，所述的注射剂由 3-甲基 -1-苯基 -2-吡唑啉 -5-酮、 2-氨基乙磺酸、注射用水、抗氧化剂、 pH调节剂和渗透压调节剂组成。

6. 根据权利要求 5所述的药物组合物，其特征在于，所述的抗氧化剂为 L-半胱氨酸或其盐、

L-精氨酸或其盐、 L-谷氨酸或其盐、 L-组氨酸或其盐、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的一种或几种，所述的 _PH调节剂为磷酸、乳酸、盐酸、枸橼酸、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或几种，渗透压调节剂为氯化钠。

7. 权利要求 1〜6中任一项所述的药物组合物在制备预防或治疗脑血管疾病药物中的应用。

8. 根据权利要求 7所述的应用，其特征在于所述脑血管疾病为缺血性脑血管疾病。

9. 根据权利要求 8所述的应用，其特征在于所述脑血管疾病是脑梗塞、短暂性脑缺血发作、腔隙性栓塞或脑动脉盗血综合征。