CN102526035B - 一种用于制备抗脑血管疾病药物的组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种用于制备治疗脑血管疾病特别是缺血性脑血管疾病的药物组合物，该药物组合物由3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸以及药学上可接受的辅料或载体组成。该药物组合物中的3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与2-氨基乙磺酸具有协同作用，可以增加药效、降低毒副作用，十分适用于临床用药。

Description

一种用于制备抗脑血管疾病药物的组合物

技术领域

本发明涉及医药领域，具体涉及一种含有3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸的药物组合物，以及该药物组合物在制备预防或治疗脑血管疾病药物中的用途。

背景技术

脑血管疾病是发生在脑部血管，因颅内血液循环障碍而造成脑组织损害的一组疾病。脑血管疾病一般分为两类：缺血性脑血管疾病和出血性脑血管疾病。缺血性脑血管疾病是由于脑血管中血液流动减少甚至断流而造成，而出血性脑血管疾病则是由脑血管破裂而造成。缺血性脑血管疾病是发病率、致残率和死亡率最高的常见病之一，我国现在每年新发病约200万人，死亡超100万人，现存患者700余万人，严重危害人们的生命健康。

日本的三菱化学公司（Mitsubishi Chemical Inc.）于1985年开发出一种自由基清除剂，并在JP1987108814、EP208874、US4857542等专利中披露了该种自由基清除剂的化学结构、制备工艺和药物组合物。该种自由基清除剂的通用名为依达拉奉（Edararone），化学名为3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮，CAS No.: 89-25-8，具有下式                                                所示的化学结构。

 。

3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮具有很强的自由基清除及抗过氧化物作用，用于治疗急性脑梗死，改善急性脑梗死的神经症状，恢复身体机能，减轻患者活动障碍。该药物最先于2001年6月在日本以注射剂的剂型上市，规格为20ml/30mg，商品名为Radicut；该药是临床上第一个用于治疗急性脑梗死的自由基清除剂。研究结果表明，单独使用此药存在一定的副作用，比如肾功能衰竭、急性过敏反应、肝功能障碍、血小板减少等不良反应（Recent Patents on Cardiovascular Drug Discovery, 2006, 1, 85-93）。

2-氨基乙磺酸是一种含硫的非蛋白氨基酸，最早由牛黄中分离出来，故又称牛磺酸（Taurine）。2-氨基乙磺酸的CAS No.: 107-35-7，具有下式所示的化学结构。

 。

研究结果表明，牛磺酸具有抗兴奋性神经毒性（ElIdrissi A, et al. J Neurosci, 19, 9459-68, 1999.；Saransaari P, et al. Amino Acids, 19, 509-526, 2000.）、抗氧化应激和炎症反应、保护细胞膜和骨架稳定、调节细胞内钙离子平衡（ElIdrissi A, et al. Adv Exp Med Biol, 526, 527-536, 2003.；J.V. wade J.P, et al. J. Neurochem. 51, 740-745, 1988.）、抗凋亡等多靶标作用，是一种天然的内源性细胞保护剂和内稳定物质，能作用于脑缺血的多个病理生理环节，保护缺血大脑。

     但迄今为止，在治疗缺血性脑血管疾病所致的神经症状、运动能力和功能障碍方面，尚未发现有关3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮与2-氨基乙磺酸联合用药的报道。

发明内容

本发明人首次发现3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸在治疗脑血管疾病方面具有协同作用。

本发明的目的是提供一种用于制备预防或治疗脑血管疾病药物的组合物，由3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸以及药学上可接受的辅料或载体组成。

术语“药学上可接受” 指在合理医学判断范围内适用于与哺乳动物特别是人的组织接触而无过度毒性、刺激、过敏反应等并与合理的效益/风险比相称。

进一步地，所述的药物组合物中，3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸的重量比为1：5～120。

本发明的技术方案还包括，所述的药物组合物的适合人体使用的注射剂、粉针剂、乳剂、混悬剂、溶胶剂、膏剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂或气雾剂的形式。

本发明的药物组合物可做成注射剂形式，可以采用注射用水、橄榄油、丙二醇、油酸乙酯其中的一种或几种作为载体。

较优地，注射或输液用的溶液可含有注射用水作为载体，必要时，可采用无菌的等渗盐水溶液，也可以含有必要的抗氧化剂、稳定剂、助溶剂、pH调节剂、渗透压调节剂等。其中抗氧化剂可以为氨基酸或其盐、亚硫酸盐、硫代硫酸盐，以及其中的一种或几种。更具体地，上述的氨基酸为L-半胱氨酸、L-精氨酸、L-谷氨酸或L-组氨酸其中的一种或几种；上述的亚硫酸盐为亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的一种或几种；上述的硫代硫酸盐为硫代硫酸钠。其中pH调节剂可以选自磷酸、乳酸、盐酸、枸橼酸以及氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或几种。渗透压调节剂则可以是氯化钠或葡萄糖。

因此，一种较优的选择是，所述的注射剂由3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮、2-氨基乙磺酸、注射用水、抗氧化剂、pH调节剂和渗透压调节剂组成。进一步优选地，所述的抗氧化剂为L-半胱氨酸或其盐、L-精氨酸或其盐、L-谷氨酸或其盐、L-组氨酸或其盐、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、焦亚硫酸钠中的一种或几种，并且上述的氨基酸的盐优选其盐酸盐；所述的pH调节剂为磷酸、乳酸、盐酸、枸橼酸、氢氧化钠或氢氧化钾中的一种或几种；渗透压调节剂为氯化钠、葡萄糖或者二者的混合物。

本发明的药物组合物的悬剂或乳剂可含有例如天然树胶、琼脂、藻酸钠、果胶、甲基纤维素、羧甲基纤维素或聚乙醇作为载体。

本发明的药物组合物也可以配制含有必要的载体、释放剂、润滑剂、崩解剂、泡腾混合物、着色剂、甜味剂、湿润剂和一般在药物配方中使用的非毒性以及药理学不活泼的物质的固体制剂。如果需要，释放剂可以选用乳糖、右旋糖、蔗糖、纤维素、玉米淀粉或马铃薯淀粉；润滑剂可以选用二氧化硅、滑石粉、硬脂酸、硬脂酸镁或钙、硬脂酸富马酸钠或钙；粘合剂可以选用淀粉、阿拉伯胶、明胶、甲基纤维素、羟丙甲基纤维素、羧甲基纤维素钠或聚乙烯吡咯烷酮；崩解剂可以选用交联羧甲基纤维素钠、交联聚维酮、羟丙基纤维素、淀粉、藻酸、藻酸盐或羧甲基淀粉钠；湿润剂可以选用水、乙醇、卵磷脂、聚山梨酸酯或硫酸月桂酯。上述的药物制剂可用已知的生产方式生产，例如通过混合、造粒、压片、糖包衣或膜包衣工艺。

本发明还提供所述的药物组合物在制备预防或治疗脑血管疾病药物中的应用；优选地，上述的脑血管疾病为缺血性脑血管疾病；进一步地优选地，上述的脑血管疾病是脑梗塞、短暂性脑缺血发作、腔隙性栓塞或脑动脉盗血综合征。

实验数据表明，3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮和2-氨基乙磺酸在预防或治疗缺血性脑血管疾病方面具有协同作用效果；二者复合用药时，不仅仅能提高治疗效果、降低依达拉奉的给药剂量，同时也能减轻依达拉奉的毒副反应。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明的方案作进一步描述。为表述方便，述及的化合物用其通用名表示。

实施例1  依达拉奉注射液

在配制容器中加入80%注射用水，加入适量磷酸（调节pH在2.0左右）搅匀，依次加入0.5gL-半胱氨酸盐酸盐一水合物和1.5g依达拉奉，再加入1.0g亚硫酸氢钠和6.75g氯化钠，搅拌使全部溶解，再用2.5M NaOH调节pH4.0～4.5，补水至1000ml，即得。

实施例2  牛磺酸注射液

    取牛磺酸40g，用0.9%生理盐水溶解至1000ml，即得。

实施例3  依达拉奉/牛磺酸(1:5)注射液

取依达拉奉1.5g，牛磺酸7.5g，参照实施例1所述的方法，配成注射液1000ml，即得。

实施例4 依达拉奉/牛磺酸(1:20)注射液

取依达拉奉1.5g，牛磺酸30g，参照实施例1所述的方法，配成注射液1000ml，即得。

实施例5 依达拉奉/牛磺酸(1:30)注射液

取依达拉奉1.5g，牛磺酸45g，参照实施例1所述的方法，配成注射液1000ml，即得。

实施例6 依达拉奉/牛磺酸(1:60)注射液

取依达拉奉1.5g，牛磺酸90g，参照实施例1所述的方法，配成注射液1000ml，即得。

实施例7 依达拉奉/牛磺酸(1:120)注射液

    取依达拉奉1.5g，牛磺酸180g，参照实施例1所述的方法，配成注射液1000ml，即得。

实施例8  用药效果对比试验

1 材料与方法

1.1    动物：雄性Sprague Dawley （SD）大鼠，7周龄，体重200～260g。

1.2    药品与试剂：实施例1的依达拉奉注射液（1.5mg/ml），实施例2的牛磺酸注射液（40mg/ml），不同比例的依达拉奉+牛磺酸注射液。

1.3    方法

1.3.1 局灶性脑缺血（middle cerebral artery occlusion，MACO）再灌注模型

主要步骤：动物用10% 水合三氯乙醛（4.0ml/kg）麻醉，分离、结扎并切断右侧颈外动脉，由颈外动脉残端沿颈总和颈内动脉缓慢插入头端膨大的尼龙栓线（约20mm），阻塞大脑中动脉入口造成缺血。缺血2小时后拔除栓线进行24小时再灌注；假手术组栓线只分离血管，其他步骤相同。动物苏醒后出现Homer征和对侧肢体运动障碍即为模型制备成功。

1.3.2 动物分组与给药

实验动物随机分为6组，即模型组、假手术组和不同的药物组。实验动物于再灌注时立即静脉注射（i.v.）给药1次，24小时评价指标。

1.3.3 神经缺陷评分、脑梗死面积的测定

1.3.3.1神经缺陷症状：按照Longa5分制评分标准（0分，无神经损伤症状；1分，不能伸展对侧前爪；2分，向外侧转圈；3分，向对侧倾倒；4分，不能自发行走，意识丧失）于再灌注后24小时进行行为学评分。

1.3.3.2脑梗死面积：动物经末次神经功能缺损评分后，大鼠用10%水合三氯乙醛麻醉后断头取脑。剔除嗅脑、低位脑干及小脑，在冰上将脑沿冠状面切成厚度基本相同的5片，于37℃红四氮唑染料中温浴30min，正常脑组织呈玫瑰红，梗死区呈现白色。然后将脑片置10%的甲醛中固定。拍照并输入计算机，用AUTO-CAD图像处理软件计算梗死面积（粉红色区为正常脑组织区，白色区为梗死区）。

梗死面积% = ×100

2. 结果

2.1 对缺血再灌注后脑梗死面积和神经缺陷评分的影响

表1 对缺血再灌注后脑梗死面积和神经缺陷评分的影响（平均值±标准差）

组别	脑梗死面积（%）	神经缺陷评分（分）
			模型组	34.7 ± 4.91	2.9 ± 1.02
依达拉奉组（3.0mg/kg）	21.2 ± 5.28*	2.3± 1.05
			牛磺酸组（40mg/kg ）	25.4 ± 4.85	2.4± 1.01
组合物给药组（1.5mg/kg依达拉奉+7.5mg/kg牛磺酸 ）	22.5 ± 4.41*	1.8 ± 0.78 *
			组合物给药组（1.5mg/kg依达拉奉+20mg/kg 牛磺酸）	18.4 ± 3.41**	1.5± 0.59*
组合物给药组（1.5mg/kg依达拉奉+180mg/kg 牛磺酸）	21.6 ± 3.12*	2.2 ± 0.89*

平均值±标准差，n=15；

*表示P（显著性水平）＜0.05 ，即与模型组比较，具有显著性差异；**表示 P＜0.01，与模型组比较，具有非常显著性差异。

从上表中结果，可以看出：

.依达拉奉组（3.0mg/kg）与模型组相比，能显著性地（P＜0.05）降低脑梗死面积，但是不能显著地降低神经缺陷性评分；而牛磺酸组（40mg/kg）与模型组相比，未见显著地降低脑梗死面积和神经缺陷评分的结果；

.依达拉奉给药量减半（1.5mg/kg）、牛磺酸低剂量（7.5mg/kg）的组合物给药组与模型组相比，能显著性地（P＜0.05）降低脑梗死面积和神经缺陷性评分；

.在维持依达拉奉量不变（1.5mg/kg）、增大牛磺酸给药量（例如组合物给药组和组合物给药组）时：组合物给药组与模型组相比，能非常显著性（P＜0.01）降低在脑梗死面积，同时能显著性（P＜0.05）降低神经缺陷性评分；组合物给药组与模型组相比，能显著性降低（P＜0.05）脑梗死面积和神经缺陷性评分。

上述结果表明， 依达拉奉和牛磺酸做成复方一起给药时，与两者分别单独给药相比，具有增效或协同作用；即使在各自的低剂量组合时，也能够表现出显著的药效，这样可以显著降低依达拉奉和牛磺酸的给药剂量，从而减轻临床用药的毒副作用。

应当说明的是，以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用于限制本发明的范围，凡在本发明的精神和原则之内所作出的任何修改、等同的替换和改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (4)

1.一种依达拉奉牛磺酸注射剂，其特征在于，该注射剂由3-甲基-1-苯基-2-吡唑啉-5-酮(即依达拉奉)，2-氨基乙磺酸(即牛磺酸)，注射用水，抗氧化剂，pH调节剂和渗透压调节剂组成；其中，依达拉奉：牛磺酸的重量比为1:5。

2.根据权利要求1所述的注射剂，其特征在于，所述抗氧化剂为L-半胱氨酸盐酸盐一水合物或亚硫酸氢钠中的一种或两种，所述pH调节剂为氢氧化钠，所述渗透压调节剂为氯化钠。

3.一种制备如权利要求1或2所述的注射剂的制备方法，其特征在于，该方法包含如下步骤：在配制容器中加入80％注射用水，加入适量磷酸，调节pH为2.0，搅匀，依次加入L-半胱氨酸盐酸盐一水合物0.5g，依达拉奉1.5g，牛磺酸7.5g，再加入亚硫酸氢钠1.0g，氯化钠6.75g，搅拌使全部溶解，再用2.5M NaOH调节pH4.0-4.5，补水至1000mL，即得。

4.权利要求1或2所述的注射剂在制备预防或治疗缺血性脑血管疾病中的应用。