WO2012091625A1 - N, ν'-замещенные пиперазины, обладающие сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью и способ их получения - Google Patents

N, ν'-замещенные пиперазины, обладающие сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью и способ их получения Download PDF

Info

Publication number
WO2012091625A1
WO2012091625A1 PCT/RU2011/000866 RU2011000866W WO2012091625A1 WO 2012091625 A1 WO2012091625 A1 WO 2012091625A1 RU 2011000866 W RU2011000866 W RU 2011000866W WO 2012091625 A1 WO2012091625 A1 WO 2012091625A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
substituted piperazines
temperature
substituted
linear
producing
Prior art date
Application number
PCT/RU2011/000866
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Ольга Сергеевна ВЕСЕЛКИНА
Николай Борисович ВИКТОРОВ
Николай Николаевич ПЕТРИЩЕВ
Юлия Вячеславовна ПОПЛАВСКАЯ
Original Assignee
Закрытое Акционерное Общество "Вертекс"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Закрытое Акционерное Общество "Вертекс" filed Critical Закрытое Акционерное Общество "Вертекс"
Priority to US13/976,544 priority Critical patent/US9249115B2/en
Publication of WO2012091625A1 publication Critical patent/WO2012091625A1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/096—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms separated by carbocyclic rings or by carbon chains interrupted by carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/08—Vasodilators for multiple indications
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/14—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/16—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms
    • C07D295/18—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms acylated on ring nitrogen atoms by radicals derived from carboxylic acids, or sulfur or nitrogen analogues thereof
    • C07D295/195—Radicals derived from nitrogen analogues of carboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/22—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with hetero atoms directly attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/26—Sulfur atoms

Definitions

  • the invention relates to the field of pharmaceutical chemistry, namely, to new organic compounds affecting the hemostatic system, exhibiting antiplatelet, anticoagulant and vasodilatory properties and a method for their preparation.
  • the invention relates to ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines having combined antiplatelet, anticoagulant and vasodilatory effects on the organism of general formula (I):
  • Prescribing antithrombotic drugs reduces the total risk of developing cardiovascular events by a quarter, nonfatal myocardial infarction - by a third, nonfatal stroke - by a quarter, vascular death - by one sixth [McConnel N. // Br. Med. J. 2002. V.324. P.71-86].
  • the main directions of antithrombotic therapy are: inhibition of platelet aggregation, targeted action on the blood coagulation system, decrease in platelet activity of endothelium.
  • acetylsalicylic acid ASA
  • thienopyridines ticlopidine , clopidogrel, prasugrel
  • platelet glycoprotein receptor blockers Aspirin (acetylsalicylic acid - ASA) is considered as practically the only drug used for the primary prevention of cardiovascular diseases [ANN Intern. Med. 2002. V.136. P.161-172], the effectiveness and safety of which is confirmed by the results of numerous studies [Circulation. 2004. V. software. R. 2361-2367; 30 th International Stroke Conference. 2005, Abstr. P87].
  • ASA ASA-induced gastropathy
  • Dipyridamole a phosphodiesterase inhibitor
  • ASA phosphodiesterase inhibitor
  • the use of dipyridamole can cause unwanted side effects. So, with stenotic atherosclerosis of the arteries and the presence of a significant amount of collaterals, the drug can cause the development of a robbery syndrome. Therefore, the appointment of Dipyridamole in acute coronary syndrome and myocardial infarction is contraindicated [Int. Med. J. 2008. V. l. Nl. P.8-14].
  • thienopyridine group in the series of antiplatelet agents are Ticlopidine, Clopidogrel and Prasugrel.
  • Preparations are medications, that is, a therapeutic effect is achieved due to the pharmacological action of their active metabolites.
  • Ticlopidine is a 20% reduction in the likelihood of a stroke, 10% - adverse outcomes, cerebral ischemia, or vascular death [Ann. Intern. Med. 1998. V.129. N5. P.394-405].
  • the disadvantages of this drug are low tolerance and frequently occurring skin (4-15%) and gastrointestinal (up to 20%) reactions are the reasons for stopping treatment with ticlopidine.
  • Clopidogrel according to CAPRIE [Lancet. 1996. V.348. P.1329-39] in many cases is more effective than aspirin for prolonged use in patients with a high risk of ischemic events.
  • the advantages may include: better tolerance than ticlopidine, including a lower frequency of hematological complications, a more rapid onset of the therapeutic effect when using loading doses (300 and 600 mg), compatibility with most drugs used in cardiology.
  • the disadvantages of clopidogrel are resistance (up to 14% of the population) in patients with CYP450 polymorphism, in particular 2C19 [JACC. 2007. V. 49. R. 1505; FDA Drug Safety Communication.
  • the drug Ticagrelor is characterized by a relatively rapid onset of therapeutic effect, expressed as an inhibition of platelet aggregation activity.
  • Treatment with ticagrelor compared with clopidogrel, reduces the frequency of death from vascular pathologies, heart attack myocardium, stroke without an increase in the overall frequency of major bleeding, but with an increase in the frequency of bleeding that is not associated with invasive procedures, which is a significant drawback of this drug, limiting its use [N. Engl. J. Med. 2009. V. 361. Ni l. P.1045-57].
  • Dabigatran demonstrates a reduction in the risk of stroke, including hemorrhagic, bleeding, including life-threatening and intracranial, as well as a decrease in death from vascular events. Drug therapy does not require monitoring [N. Engl. J. Med. 2009. V.361. N12. P. l 139-1151].
  • Significant disadvantages of this group are hepatotoxicity and intragastric bleeding [NHS. 2009. N8], as well as the lack of combined antiplatelet, anticoagulant and vasodilatory effects on the body.
  • G is a low molecular weight organic or mineral acid, sodium, potassium, ammonium or water cations.
  • organic acids with a carbon chain length of C 2 -C 4 such as acetic, succinic, fumaric and the like, are used.
  • the nature of the organic acid does not significantly affect the basic pharmacological properties of compound (1).
  • substituted nitrogen-containing heterocyclic compounds are known as drugs promising for antiplatelet therapy.
  • R CF 3 , OH, N 0 2 , halogen, alkyl or alkoxy; R ': H, CF 3 , halogen, alkyl or alkoxy substituent; R ": H or alkoxy substituents.
  • halogen, phenylthio, and at least one of the indicated radicals is H as substances with a hypotensive effect.
  • the last of the compounds is obtained by adding S-methylisothiourea sulfate to a boiling solution of the compound
  • the compounds obtained are subdivided in their structure into two groups of substances of the general formula (I) and (III).
  • the first option includes ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines of the general formula (II):
  • G is a low molecular weight organic or mineral acid.
  • R 1 , R 2 linear or branched alkyl linear or branched alkoxy halogen
  • carboxamidizing agents a substance from the group can be used: 1 // - pyrazole-1-carboxamidine or dicyandiamide, for example, 1 ⁇ -benzotriazole-1-carboxamidine, 1 ⁇ -pyrazole-1-carboxamidine, 3,5-dimethyl-1 N-pyrazole-1-carboxamidine, dicyndiamide or substances forming these compounds during hydrolysis, for example, salts of dicyandiamide, salts of salt 1 // - pyrazole-1-carboxamidine.
  • 1 // - pyrazole-1-carboxamidine or dicyandiamide for example, 1 ⁇ -benzotriazole-1-carboxamidine, 1 ⁇ -pyrazole-1-carboxamidine, 3,5-dimethyl-1 N-pyrazole-1-carboxamidine, dicyndiamide or substances forming these compounds during hydrolysis, for example, salts of dicyandiamide, salts of salt 1 // - pyrazole-1-carboxamidine
  • organic solvents lower aliphatic alcohols, acetonitrile, tetrahydrofuran, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, dichloromethane or a mixture thereof, or sodium or potassium hydroxide, their carbonates or hydrocarbonates can be used. It is advisable to carry out the reaction at a pH of not higher than 9 ⁇ 0.5, in order to achieve the optimal yield of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines of formula I;
  • the second group of compounds (option 2) includes ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines of the general formula III):
  • G is a low molecular weight organic or mineral acid, sodium, potassium, ammonium or water cations. Instead of these compounds, hydrates or pharmaceutically acceptable salts thereof may be used for the same purpose.
  • R 1 linear or branched alkyl
  • haloalkyl sulfonic acids or their salts in organic solvents or water in the presence of bases.
  • the process is carried out at room or elevated temperature.
  • haloalkyl sulfonic acids 2-bromoethanesulfonic acid, 2-hydroxy-3-chloropropane-sulfonic acid or their salts can be used.
  • organic solvents lower aliphatic alcohols, acetonitrile, tetrahydrofuran, dimethylformamide, dimethyl sulfoxide, dichloromethane or mixtures thereof can be used, as bases sodium or potassium hydroxide, their carbonates or hydrocarbons, triethylamine. It is advisable to carry out the reaction at a pH no higher than 9 ⁇ 0.5, in order to achieve the optimal yield of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines of formula III.
  • the final product is isolated from the reaction mixture using traditional methods of organic synthesis, which are selected depending on the composition of the mixture — distillation of the solvent, recrystallization, reprecipitation, chromatography, etc.
  • the purity of the obtained compounds according to RP HPLC was not less than 98%.
  • ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines can be introduced into the body as a part of compositions containing a mixture of physiologically active (active) substances with excipients.
  • excipients substances permitted by the Pharmacopoeia are used that improve the conditions for the preparation, storage or use of a medicinal product, for example, solvents, fillers, flavorings, flavoring agents, stabilizers, and the like.
  • the solution is filtered, evaporated to dryness, in vacuum at a temperature of 50 + 60 ° C.
  • 100 ml of abs. ethanol is heated to boiling with stirring.
  • the mixture is cooled to a temperature of 20 ° C, filtered.
  • the mother liquor is evaporated to dryness in a vacuum of ⁇ 20 mm Hg. and a temperature of 50 + 60 ° C, add 100 ml of acetone and mix on a magnetic stirrer for 30 minutes at a temperature of 40 + 50 ° C.
  • the precipitate is filtered off, washed twice with 50 ml of acetone and dried for 12 hours at a temperature of 40 ° C.
  • the residue is treated with 100 ml of abs. ethanol and refluxed for 0.5 hours with stirring.
  • the hot solution is filtered from inorganic salts and incubated for a day.
  • the white precipitate is filtered off and dried at a temperature of 45 ° C for 2 days.
  • the product - a white precipitate - is filtered off, the filtrate is evaporated in vacuum at a temperature of 50- ⁇ 80 ° C to half the volume. An additional amount of product is isolated, which is filtered off and attached to the first. The product is dried at a temperature of 45 ° C for 2 days.
  • the synthesis is carried out in an argon atmosphere.
  • 1.1 g (5.9 mM) of N-Boc-piperazine and 1.40 g (5.9 mM) of 2,3,4-triethoxybenzaldehyde are mixed in 25 ml of dry dichloromethane.
  • 2 drops of acetic acid are added, 2.12 g (10 mM) of NaBH (OAc) 3 are added to this mixture and stirred for 12 hours at 20 ° C.
  • 10 ml of a 5% aqueous solution of NaHC0 3 are carefully added dropwise to the reaction mass.
  • the organic layer was separated, washed with a 5% solution of Na 2 CO 3, dried over sodium sulfate. volume, filtered and evaporated in vacuum at a temperature of 50 to 80 ° C.
  • the residue - 2.2 g of a yellowish oil is used in the next step.
  • the solution was evaporated in vacuo at a temperature of 50 + 80 ° C to a volume of 2 ml, 7 ml of acetone was added and heated to boiling. Upon cooling, white crystals of the product precipitate from the solution. They are filtered off and dried at a temperature of 40 ° C.
  • the synthesis is carried out in an argon atmosphere.
  • 2 g (10.7 mmol) of N-Boc-piperazine and 2.06 g (10.7 mmol) of 3-yl /? E / - butyl-4-methoxybenzaldehyde are mixed in 30 ml of dry dichloromethane.
  • 2 drops of acetic acid are added, 4.24 g (20 mM) of NaBH (OAc) 3 are added to this mixture and stirred for 12 hours at 20 ° C.
  • 20 ml of a 5% aqueous solution of NaHC0 3 are carefully added dropwise to the reaction mass.
  • the synthesis is carried out in an argon atmosphere. 2.2 g (11.8 mM) of N-Boc-piperazine and 2.5 g (1 1.8 mM) of 3,5-dimethoxy-4-ethoxybenzaldehyde are mixed in 50 ml of dry dichloromethane. After dissolution, 2 drops of acetic acid are added, 4.25 g (20 mM) of NaBH (OAc) 3 are added and stirred for 12 hours at a temperature of 20 ° C. To the reaction mass, 20 ml of a 5% solution of NaHC0 3 are carefully added dropwise.
  • the residue was treated with 300 ml (750 mmol) of 2.5 N HCl while cooling with ice, and stirred for 15 minutes.
  • the solution is filtered, the mother liquor is evaporated to dryness in vacuo at -20 mm Hg. and temperature 50 + 60 ° ⁇ .
  • the residue is taken up in 100 ml of absolute ethanol and heated to boiling with stirring. The mixture is cooled to a temperature of 20 ° C and filtered.
  • the mother liquor is evaporated to dryness in a vacuum of -20 mm Hg. and temperature 50 + 60 ° ⁇ .
  • 100 ml of acetone is added to the residue and stirred on a magnetic stirrer for 30 min at a temperature of 40 + 50 ° C.
  • the white precipitate is filtered off, washed twice with 50 ml of acetone, dried for 12 hours at a temperature of 40 ° C.
  • the product is a white powder - (4- (2-methylpropyloxy) -3-methoxybenzyl) piperazine dihydrochloride weighing 2.2 g.
  • the reaction mixture was poured into a separatory funnel with 0.4 L of water, and the organic layer was separated. It is washed with 2 * 150 ml of 5% Na-HCO3 solution, then 100 ml of water.
  • the solution in dichloromethane was dried with Na 2 S0 4 , filtered and the solvent was evaporated in vacuo ⁇ 20 mm Hg. when heated nii in a water bath (temp. 50-60 C).
  • a solution of 0.5 mol of HC1 in 200 ml of methanol obtained separately by carefully adding 40 g (-0.5 mol) of acetyl chloride to 200 ml of methanol at a temperature of +10 - +15 ° C) is added to the obtained residue.
  • the mixture is stirred and refluxed. 5 hours with a refrigerator, a white crystalline precipitate precipitates, and the mixture is left overnight at room temperature.
  • the reaction mixture was evaporated in vacuo -20 mm Hg. when heated in a water bath (temp. 50-60 ° C). 200 ml of water and 50 ml of 20% HC1 are added to the residue, stirred for 1 hour. The insoluble gray powder is filtered off. The acidic aqueous solution is evaporated in vacuum -20 mm Hg. when heated in a water bath (temp. 50-60 ° C). 200 ml of ethanol was added to the residue and refluxed for 30 minutes. The white precipitate was filtered off (piperazine dihydrochloride according to PMR). The solution is cooled with ice for 2 hours - small white crystals precipitate. The precipitate is filtered off, dried in air. 35.1 g of 1 - (2,4,5-trichlorophenylsulfonyl) piperazine hydrochloride are obtained in the form of a white powder. The yield is 48%.
  • the insoluble white precipitate was filtered off and refluxed with 80 ml of abs. alcohol under reflux for 20 minutes
  • the insoluble white precipitate is filtered off (inorganic salts).
  • the combined alcohol solution was evaporated in vacuo -20 mm Hg. when heated nii in a water bath (temp. 50-60 ° C). 100 ml of acetone was added to the residue and refluxed for 1 hour with stirring on a magnetic stirrer. The hot mixture is filtered, the white precipitate is washed with 20 ml of hot acetone.
  • the resulting white powder was dissolved in 100 ml of boiling ethanol, filtered. After cooling to room temperature, the solution is cooled at 0 ° C. for 2 hours. The precipitated crystals are filtered off and dried in air.
  • the mixture is filtered hot.
  • the filtrate was evaporated in vacuo at about ⁇ 20 mm. Hg. Art. up to VA volume.
  • the precipitate is filtered off, washed twice with 50 ml of acetone, the white powder is dried for 12 hours at a temperature of 40 ° C.
  • Ci9H29N 2 0 8 SNa * H 2 0, 2-acetoxy-3- (4 - ((2,3,4-trimethoxyphenyl) methyl) piperazin-1-yl) propan-1-sulfonic acid sodium salt of the monohydrate - 2.9 g (60%). Elemental analysis of Ci9H 2 9N 2 0 8 SNa * H 2 0. Calculated,%: C 46.91; H 6.42; N, 5.76. Found,%: C 46.85; H 6.40; N, 5.79.
  • Example 16 The study of antiplatelet and anticoagulant properties of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines on the example of human donor blood
  • Blood was obtained by puncture of the elbow vein of the donor with a dry, sharp needle without a syringe. 7-5-10 days before the study, the administration of drugs that affect platelet function was canceled.
  • platelet-rich plasma stabilized blood was centrifuged for 8 min at room temperature and 1000 rpm (150 g). By repeated centrifugation of blood for 20 min at 3200 rpm (2300 g) and 22 ° C, platelet-poor plasma was obtained.
  • the study of anticoagulant activity was carried out for 2 hours after receiving platelet-rich plasma. Plasma was standardized to a platelet concentration of 200-250x10 9 / L by adding platelet free plasma. Platelet concentration was determined on a SOLAR AR 21 10 analyzer.
  • the maximum aggregation amplitude (MA) was taken as the main characteristic of platelet aggregation activity — the maximum value of the transmittance of the sample after the addition of the aggregating agent, in% of the transmission of platelet-free plasma.
  • the reaction was recorded in a straight section of the rise of the aggregation curve for 16 seconds.
  • 0.5 ml of a solution of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazine was introduced into the cuvette, standardized platelet plasma (0.4 ml) was added, mixed, incubated at 37 ° C for 5 min.
  • the cuvette was placed in an aggregometer, 0.05 ml of aggregation inducer solution (ADP, or collagen, or ristocetin) was added, and platelet aggregation was recorded for 3 minutes.
  • ADP aggregation inducer solution
  • the CHRONO-PAR COLLAGEN reagent (CHRONO-LOG, USA) was diluted with buffer to a collagen concentration of 10 ⁇ g / ml.
  • CHRONO-PAR RISTOCETIN reagent CHRONO-LOG, USA
  • CHRONO-LOG a concentration of ristocetin of 12 mg / ml.
  • the amplitude of platelet aggregation was measured 60 seconds after the start of the reaction.
  • APTT activated partial thromboplastin time
  • Example 17 The study of antiplatelet and anticoagulant
  • Intravenous administration 1 ml of a solution of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazine or 1 ml of a solution of the reference preparation was heated bolus injected into the tail vein of non-anesthetized rats.
  • Oral administration (w / w): 0.2 g of a composition containing ⁇ , ⁇ '-substituted piperazine, or the reference drug was heated (Table 6), mixed with 1.5 ml of water, the suspension was injected w / w with a rigid metal probe. The dose of the active substance was calculated in mm per 1 kg of rat mass. In the control, saline (1.5 ml) was similarly administered.
  • Heparin-stabilized blood sampling 50 units / ml was carried out over 40 NZO from the femoral vein under anesthesia (thiopental sodium, 50 mg / kg ip, in 1 ml of physiological saline). The ratio of blood to stabilizer was 9: 1. Blood was placed in siliconized tubes and gently mixed.
  • rat whole blood 0.55 ml of rat whole blood was placed in a cuvette with a magnetic stirrer and preincubation was performed at 37 ° C for 2-3 min in an incubator. Then a sensor was placed in a cuvette, transferred to a special chamber of the device, and after stirring was switched on, an aggregation inductor — a solution of ADP disodium salt with a concentration of 0.25 mM — was introduced. The ratio of the volumes of the aggregation inductor and the whole blood sample was 1: 12. The aggregation intensity was determined by the impedance method 5 minutes after the inductor was introduced (Table 7).
  • a study of the effect of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines on the fibrinolytic activity of rat blood was evaluated by the time of spontaneous lysis of the clot obtained from the euglobulin fraction of plasma.
  • the method is one of the integral methods for assessing the state of the fibrinolytic system.
  • Blood stabilized with sodium citrate (3.2%) was taken under anesthesia (thiopental sodium 50 mg / kg, intraperitoneally in 1 ml of saline) for 60 s from the femoral vein.
  • the ratio of blood to stabilizer was 9: 1. Stabilized blood was centrifuged for 10 min at a speed of 1200g. We studied platelet-poor plasma with a reagent for studying spontaneous euglobulin fibrinolysis by Tekhnologiya Standart LLC (Barnaul, Russia). Before determination, the reagents were diluted with distilled water to a concentration of reagents: calcium chloride — 0.277%, acetic acid — 1%.
  • a plasma euglobin fraction 8 ml of d / i water, 0.18 ml of 1% acetic acid and 0.5 ml of plasma were successively mixed in a test tube. The mixture was incubated at a temperature of 4- ⁇ 8 ° C for 30 minutes, centrifuged at 600 g for 5 minutes. The supernatant was drained, the tube was knocked over on filter paper for 1 min. The sediment of euglobulins remaining at the bottom of the tube was diluted in 0.5 ml of working buffer.
  • Example 18 The study of the influence of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines on the hemostatic system. Model experimental thrombosis
  • Thrombosis modeling 50 min after injection of the drug into the left femoral vein, 1 ml of Bengal pink A photosensitizer solution (Acros Organic, USA) was injected at a dose of 17 mg / kg [Boselli 2007, Petrishchev 2009], an incision was made in length about 2 cm on the inner surface of the animal's right thigh. A portion of the femoral artery about 5 mm long was freed from surrounding tissues, isolated from the neurovascular bundle. A strip of opaque black plastic 3 mm wide was placed under this section of the artery, thereby isolating the vein and surrounding tissues from radiation. Irradiation was carried out using a DPSS laser diode laser (Diode Pumpd Solid State Laser, South Korea).
  • the wavelength is 532 nm
  • the power is 60 mW
  • the irradiation area is 1 mm
  • the irradiation duration is 40 minutes.
  • Blood flow in the femoral artery was measured using high-frequency ultrasound Dopplerography (Minimax-Doppler-K instrument, sensor frequency 20 MHz). The change in blood flow velocity during artery irradiation was measured (Table 9).
  • vasodilatory properties of ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines were evaluated by their effect on the vascular reactivity of the microvasculature.
  • vascular studies of the microvasculature were carried out on the basis of the LUMAM I1 microscope (LOMO, Russia). Using a video camera (Optics and Electronics ISTA Ltd), data was recorded on a personal computer; the results were processed using the Video-Test 4.0 program (ISTA Ltd., Russia). The following parameters were determined: diameter of the vascular wall (D, ⁇ m) before and after the application of norepinephrine, the time of the onset of deceleration of blood flow in the vessels under the influence of norepinephrine (observation was performed for 1 min after application).
  • compositions based on ⁇ , ⁇ '-substituted piperazines have a positive effect on the restoration of the hemostatic system.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Low-Molecular Organic Synthesis Reactions Using Catalysts (AREA)

Abstract

Изобретение относится к производным Ν,Ν'-замещенных пиперазинов общей формулы: где R1, R2 означает линейный или разветвленный алкил (C1÷C4), линейный или разветвленный алкокси (C1÷C4), СН3С(=О)О, галоген; п = 1÷5; m = 0÷3; Z означает СН2, С=О, SО2; X означает C(=NH)NH2, C(=NH)NHC(=NH)NH2, CH2(CHR3)pCH2SО3H, где R3 означает Н, ОН, CH3C(=О)О; HOSО2О, р = 0÷1; G означает низкомолекулярную, органическую или минеральную кислоту, катионы натрия, калия, аммония или воду, проявляющим антиагрегантные, антикоагулянтные и вазодилаторные свойства и к способу их получения взаимодействием Ν-замещенных пиперазинов либо с карбоксамидамидирующими агентами или их солями, либо с галогеналкилсульфокислотами или их солями в органических растворителях или в воде в присутствии оснований. Соединения могут быть использованы для профилактики и лечения заболеваний системы гемостаза.

Description

N, Ν'-ЗАМЕЩЕННЫЕ ПИПЕРАЗИНЫ, ОБЛАДАЮЩИЕ СОЧЕТАННОЙ АНТИАГРЕГАНТНОЙ, АНТИКОАГУЛЯНТНОЙ И
ВАЗОДИЛАТОРНОЙ АКТИВНОСТЬЮ И СПОСОБ ИХ ПОЛУЧЕНИЯ
Область техники
Изобретение относится к области фармацевтической химии, а именно, к новым органическим соединениям, влияющим на систему гемостаза, про- являющим антиагрегантные, антикоагулянтные и вазодилаторные свойства и способу их получения.
В частности, изобретение относится к Ν,Ν' -замещенным пиперазинам, обладающих сочетанным антиагрегантным, антикоагулянтным и вазодила- торным воздействием на о ганизм общей формулы (I):
Figure imgf000003_0001
R 1 , R 2 : линейный или разветвленный алкил (С2- И4), линейный или раз- ветвленный алкокси (C1- D4), СН3С(=0)0, галоген;
n=l-5; m=0-3; Z=CH2, СО, S02; X: C(=NH)NH2, C(=NH)NHC(=NH)NH2,
CH2(CHR3)pCH2S03H, где R3= H, OH, CH3C(=0)0; OS03H; p=0-l G - низкомолекулярная (C C4) органическая или минеральная кислота, катионы натрия, калия, аммония или вода.
Предшествующий уровень техники
Заболевания системы гемостаза, в частности тромбозы, вазоконстрик- ция являются ключевым звеном в патогенезе нарушений коронарного и моз- гового кровообращения, что делает лечение указанных заболеваний доста- точно актуальным. Успехи в лечении и профилактике нарушений гемостаза, во многом связаны с применением лекарственных средств на основе физио- логически активных соединений различной химической природы и меха- низма фармакологического действия.
Назначение антитромботических лекарственных средств снижает сум- марный риск развития сердечно-сосудистых событий на четверть, нефаталь- ного инфаркта миокарда - на треть, нефатального инсульта - на четверть, со- судистой смерти - на одну шестую [McConnel Н. // Br. Med. J. 2002. V.324. P.71-86]. При этом основными направлениями антитромботической терапии являются: ингибирование агрегации тромбоцитов, целенаправленное воздей- ствие на систему гемокоагуляции, уменьшение тромбоцитной активности эн- дотелия. Несмотря на большое количество препаратов, обладающих способ- ностью подавлять активность и агрегационную способность тромбоцитов, их клиническая эффективность при заболеваниях сердечно-сосудистой системы, требующих антиагрегантной терапии, доказана только в отношении трех групп средств- ацетилсалициловой кислоты (АСК), тиенопиридинов (тикло- пидин, клопидогрель, прасугрел) и блокаторов гликопротеиновых рецепто- ров тромбоцитов. Аспирин (ацетилсалициловая кислота - АСК) рассматривается как практически единственный препарат, применяющийся в целях первичной профилактики сердечно-сосудистых заболеваний [ANN Intern. Med. 2002. V.136. P.161-172], эффективность и безопасность которого подтверждена ре- зультатами многочисленных исследований [Circulation. 2004. V. ПО. Р. 2361- 2367; 30th International Stroke Conference. 2005, Abstr. Р87].
К недостаткам АСК следует отнести подавление синтеза простацикли- нов, риск кровотечений, АСК-индуцированную гастропатию, ухудшающую переносимость и снижающую приверженность больных лечению, резистен- стность больных к препарату [J. Thromb. Haemost. 2003. Nl . P. 1710-1713; BMJ 2004. V.328. P.477-479; Brit. J. Clin. Pharmacol. 2008. V.66. N2. P.222- 232].
Известно применение ингибитора фосфодиэстеразы - Дипиридамола для снижения частоты развития ишемических транзиторных атак, инсультов и летальности при цереброваскулярной патологии. Дипиридамол близок по терапевтическому эффекту к АСК; при совместном их применении результа- тивность лечения повышается [Future Medicine. 2005. V. l . Nl . P.19-26]. Од- нако, применение Дипиридамола может вызывать нежелательные побочные эффекты. Так, при стенозирующем атеросклерозе артерий и наличии значи- тельного количества коллатералей препарат может вызвать развитие синдро- ма обкрадывания. Поэтому назначение Дипиридамола при остром коронар- ном синдроме и инфаркте миокарда противопоказано [Int. Med. J. 2008. V. l . Nl . P.8-14].
Представителями группы тиенопиридинов в ряду антиагрегантов яв- ляются Тиклопидин, Клопидогрель и Прасугрель. Препататы являются про- лекарствами, то есть терапевтический эффект достигается за счет фармаколо- гического действия их активных метаболитов. Достоинствами препарата Тиклопидин является снижение на 20 % вероятности инсульта, на 10 % - его неблагоприятных исходов, ишемии мозга или сосудистой смерти [Ann. Intern. Med. 1998. V.129. N5. Р.394-405]. Недостатками этого препарата явля- ются низкая переносимость и часто возникающие кожные (4-15 %) и желу- дочно-кишечные (до 20 %) реакции являются причинами прекращения лече- ния тиклопидином. Кроме того, известны случаи тромбоцитопенической пурпуры со смертельным исходом [Bennett С, Weinberg P., Rozenberg-Ben- Dror К., et al. Thrombocytopenic purpura associated with ticlopidine. Ann Intern Med 1998; 128: 541-44].
Препарат Клопидогрель, по данным CAPRIE [Lancet. 1996. V.348. P.1329-39] во многих случаях эффективнее аспирина при длительном приме- нении у больных с высоким риском ишемических событий. К достоинствам могут быть отнесены: лучшая, чем у тиклопидина, переносимость, включая меньшую частоту гематологических осложнений, более быстрое наступление терапевтического эффекта при использовании нагрузочных доз (300 и 600 мг), совместимость с большинством лекарственных средств, используемых в кардиологии. Недостатками препарата Клопидогрель являются резистент- ность (до 14 % популяции) у пациентов с полиморфизмом CYP450, в особен- ности 2С19 [JACC. 2007. V. 49. Р. 1505; FDA Drug Safety Communication. March 12, 2010]; существенное снижение эффективности при совместном приеме с ингибиторами протонной помпы - Омепразолом, Рабепразолом [FDA Public-health advisory: Updated safety information about a drug interaction between clopidogrel bisulfate (marketed as Plavix) and omeprazole (marketed as Prilosec and Prilosec OTC). November 17, 2009], субоптимальная реакция на препарат при наличии острого коронарного синдрома, у больных диабетом, а также у пациентов с метаболическим синдромом [JACC. 2007. V. 49. Р. 1505].
Препарат Тикагрелор характеризуется относительно быстрым наступ- лением терапевтического эффекта, выраженным ингибированием агрегаци- онной активности тромбоцитов. Лечение тикагрелором, по сравнению с Кло- пидогрелом, снижает частоту смерти от сосудистых патологий, инфаркта миокарда, инсульта без увеличения общей частоты крупных крово- течений, но с увеличением частоты кровотечений, не связанных с инвазив- ными процедурами, что является существенным недостатком данного препа- рата, ограничивающим его применения [N. Engl. J. Med. 2009. V. 361. Ni l . Р.1045-57].
В лечебной практике применяются также прямые ингибиторы тромби- на - гатраны [Am. Heart J. 2009. V.157. Р.805-810]. Так, Дабигатран демонст- рирует снижение риска инсульта, в т.ч. геморрагического, кровотечений, в т.ч. жизнеугрожающих и внутричерепных, а также снижение смерти от сосу- дистых событий. Терапия препаратом не требует мониторинга [N. Engl. J. Med. 2009. V.361. N12. P. l 139-1151]. Существенными недостатками предста- вителей данной группы являются гепатотоксичность и внутрижелудочные кровотечения [NHS. 2009. N8], а также отсутствие сочетанного антиагре- гантного, антикоагулянтного и вазодилаторного воздействия на организм.
Наиболее близкими по достигаемому эффекту к заявляемому изобрете- нию являются препараты - блокаторы тромбоксана - Ридогрел, Озагрел, Пирмагрел, которые обладают антигипертензивными и вазодилатирующими свойствами. Препараты безопасны и эффективны при инфаркте миокарда, [Cardiovascular Drug Reviews. 2008. VI 8. N3. Р.222-231], способны снимать бронхоспазм [Life Scinece. 1997. V.60. N18. Р.1583-88].
Недостатками данной группы препаратов являются невысокая эффек- тивность при пероральном применении.
Задачей, решаемой авторами, являлось создание более эффективных и более безопасных препаратов, обладающих сочетанным антиагрегантным, антикоагулянтным и вазодилаторным воздействием на организм.
Сущность изобретения
Технический результат был достигнут путем применения в качестве средства, обладающего сочетанной антиагрегантной, антитромболитической и вазодилаторной активностью Ν,Ν'- замещенных пиперазинов общей фор- мулы:
Figure imgf000008_0001
1 2
где R , R : Н, линейный или разветвленный алкил (С^С линейный или разветвленный алкокси (С^С СН3С(=0)0, галоген;
n=K5; m=0-3; Z=CH2, С=0, S02;
X: C(=NH)NH2, C(=NH)NHC(=NH)NH2, CH2(CHR3)pCH2S03H, где R3= H, OH, CH3C(=0)0; HO-S02-0, р=(Ь-1
G - низкомолекулярная органическая или минеральная кислота, катио- ны натрия, калия, аммония или вода.
В качестве низкомолекулярной органической кислоты используют, как правило, органические кислоты с длиной углеродной цепи С2-С4, такие как уксусная, янтарная, фумаровая и т.п. Природа органической кислота на ос- новные фармакологические свойства соединения (1) существенного значения не оказывает.
Указанные соединения могут использоваться как в чистом виде, так и в виде сольватов или фармацевтически приемлемых солей.
В настоящее время замещенные азотсодержащие гетероциклические соединения известны в качестве препаратов, перспективных для антитром- боцитарной терапии.
Так, в патенте США Ν» 4,370,330 предложены для стимуляции цирку- ляции крови новые Ν-триметокси-бензилпиперазины и их фармацевтически приемлемые соли общей формулы:
Figure imgf000008_0002
R: CF3, OH, N02, галоген, алкил- или алкокси-; R' : Н, CF3, галоген, алкил- или алкокси-заместитель; R" : Н или алкокси- заместители.
В патенте США 4,574,156 защищены в качестве средств, улучшаю- щих циркуляцию крови, производные полиметоксибензилпиперазина общей формулы:
Figure imgf000009_0001
где R: Н; ОМе; п=2-5.
Патент США N° 4,368,199 предлагается использовать для лечения со- судистой и сердечной недостаточности производные 3,4,5-триметоксицинна- моилпиперазина общей формулы:
Figure imgf000009_0002
где X: -(СН2)П, п=1- З или -СН2-СО-, п=1, 2; Аг: замещенный фенил- или фе- нилдиоксоаланил - радикалы и др. В европейском патенте N° 284 359 описаны 1 ,4-дизамещенные пипера- зины общей формулы:
Figure imgf000009_0003
где А: пенталенил-, инденил-, инданил-, нафтил-, азу- ленил- и др. радикалы; R: фенил-радикал, замещенный на К5 алкокси- груп- пы; X: СН2, СО или тиокарбонил; -2, 3 и их соли. Главным образом опи- саны замещенные 3,4,5-триметоксибензил- и 3,4,5- триметоксибензоилпиперазины и метод их получения, заключающийся во взаимодействии промежуточных соединений с кислотой общей формулы А- СООН или галогенангидридом общей формулы A-COW, где А: как указано выше, W: галоген. Соединения или их соли в составе фармацевтических ком- позиций могут использоваться для ингибирования фактора активации тромбоцитов, как антиагреганты.
Ν,Ν' -замещенные пиперазины общей формулы:
Figure imgf000010_0001
где AL: Н, ОН, галоген, CN, алколкси и др.; η=0-^-2; Υ: С, Ν, О; X: Н, алкил, COOR и др.;
для лечения или профилактики сосудистых воспаления и тромбозов (Евро- пейский патент Ν° 1 783 1 15).
Замещенные Ν-бензилпиперидинамиды, их фармацевтически приемле- мые соли или гидраты используются для регуляции сердечного ритма (Ев- ропейский патент Ν° 416 581 , патент США Ν° 5,210,090):
Figure imgf000010_0002
где R1 : бензофуранил-радикал; пИНЮ; R2: Н, алкил, О; R3: Н, карбоксиал- кил: X: Н, пиридинил, фенил (моно- и полизамещенный на алкил, галоген, ал кокси -заместитель).
Известны соединения (М. Protiva et all. Collection Czechoslov. Chem. Com- mun. Vol.41, p. 1035-1041 (1976); CS 151752. 15.01.1974), соединения общей форм лы
Figure imgf000010_0003
галоген, фенилтио-, причем как минимум один из указанных радикалов - Н в качестве веществ с гипотензивным действием. Последнее из соединений получают прибавлением сульфат S - метилизотиомочевины к кипящему раствору соединения
Figure imgf000011_0001
, где X, R 1 , R 2 3 же, что и в целевом соединении.
Общим недостатков вышеописанных соединений является ограниченный спектр воздействия на организм, т.к. в литературе отсутствуют сведения, что подобные соединения обладают сочетанными антиагрегантными, антикоагу- лянтными и вазодилаторными свойствами.
Наиболее близким по структуре к заявляемым соединениям является ( М. Protiva et all. Collection Czechoslov. Chem. Commun. Vol.40, p. 3904- 3923(1975) соединение общей фо мулы:
Figure imgf000011_0002
Однако при существенном отличии в структуре с заявляемыми соединения- ми, для данного вещества отмечен узкий спектр возможного применения - в качестве вещества с гипотензивным действием.
Приведенный анализ литературы показал наличие широкого спектра биологической активности, присущего Ν,Ν' -замещенным пиперазинам, а так- же то, что соединения, оказывающие влияние на систему гемостаза изучены недостаточно, в связи с чем более углубленное исследование производных Ν,Ν' -замещенных пиперазинов является актуальным.
В этой связи, а также с целью разработки эффективных и безопасных препаратов, представляет интерес синтез новых производных Ν,Ν'- замещенных пиперазинов, обладающих сочетанной антиагрегантной, вазоди- латорной и антитромботической активностью, высокой безопасностью, пер- спективных для терапии заболеваний системы гемостаза. Варианты осуществления изобретения
Для решения данной задачи были синтезированы новые Ν,Ν'- замещен- ные пиперазины, биологические испытания которых продемонстрировали их высокую эффективность.
Полученные соединения подразделяются по своей структуре на две группы веществ общей формулы (И) и (III).
К первому варианту относятся Ν,Ν'- замещенные пиперазины общей фор- мулы (II):
Figure imgf000012_0001
где R 1 , R 2 : линейный или разветвленный алкил
Figure imgf000012_0005
линейный или раз- ветвленный алкокси
Figure imgf000012_0002
СН3С(=0)0, галоген;
Figure imgf000012_0004
X: C(=NH)NH2, C(=NH)NHC(=NH)NH2,
G - низкомолекулярная органическая или минеральная кислота.
Вместо указанных соединений для тех же целей могут использоваться их гидраты или фармацевтически приемлемые соли.
Данные вещества получают путем взаимодействия Ν-замещенных пиперази- нов общей формулы (IV)
Figure imgf000012_0003
где R1, R2: линейный или разветвленный алкил
Figure imgf000012_0007
линейный или раз- ветвленный алкокси галоген;
Figure imgf000012_0006
n=K5; m=(H3; Z=CH2, C=0, S02;
с карбоксамидирующими агентами или их солями в органических раствори- телях или воде в присутствии оснований. Процесс проводят при комнатной или повышенной температуре. В качестве карбоксамидирующих агентов мо- жет быть использовано вещество из группы: 1//-пиразол-1 -карбоксамидин или дициандиамид, например, 1Н-бензотриазол-1-карбоксамидин, 1Н- пиразол- 1 -карбоксамидин, 3,5-диметил- 1 Н-пиразол- 1 -карбоксамидин, дици- андиамид или вещества, образующие эти соединения при гидролизе, напри- мер, соли дициандиамида, соли соли 1//-пиразол-1-карбоксамидина. В каче- стве органических растворителей могут быть использованы низшие алифати- ческие спирты, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диметилформамид, диметил- сульфоксид, дихлорметан или их смеси, в качестве оснований - натрия или калия гидроксид, их карбонаты или гидрокарбонаты. Реакцию целесообразно проводить при рН не выше 9±0.5, для достижения оптимального выхода Ν,Ν'- замещеных пиперазинов формулы И;
Ко второй группе соединений (вариант 2) относятся Ν,Ν'- замещенные пи- перазины общей формулы III):
Figure imgf000013_0001
где R1, R2: линейный или разветвленный алкил (Сг- ^), линейный или раз- ветвленный алкокси (Ci+C4), СНзС(=0)0, галоген;
n=K5; m=0-3; Z=CH2, С=0, S02;
X: CH2(CHR3)pCH2S03H, где R3= Н, ОН, CH3C(=0)0; OS03H; р=( 1
G - низкомолекулярная органическая или минеральная кислота, катио- ны натрия, калия, аммония или вода. Вместо указанных соединений для тех же целей могут использоваться их гидраты или фармацевтически приемлемые соли.
Способ их получения заключается во взаимодействии Ν-замещенных пи- перазинов общей формулы (V а также их гидратов или солей:
Figure imgf000014_0001
где R 1 , R 2 : линейный или разветвленный алкил ,
Figure imgf000014_0004
линейный или раз- ветвленный алкокси
Figure imgf000014_0002
СН3С(=0)0, галоген;
Figure imgf000014_0003
с галогеналкилсульфокислотами или их солями в органических растворите- лях или воде в присутствии оснований.
Процесс проводят при комнатной или повышенной температуре. В каче- стве галогеналкилсульфокислот могут быть использованы 2- бромэтансульфо-кислота, 2-гидрокси-З-хлорпропан-сульфокислота или их соли.
В качестве органических растворителей могут быть использованы низшие алифатические спирты, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диметилформамид, диметилсульфоксид, дихлорметан или их смеси, в качестве оснований - на- трия или калия гидроксид, их карбонаты или гидрокарбонаты, триэтиламин. Реакцию целесообразно проводить при рН не выше 9±0.5, для достижения оптимального выхода Ν,Ν'- замещенные пиперазины формулы III.
После окончания реакции выделение конечного продукта из реакцион- ной смеси осуществляется с помощью традиционных методов органического синтеза, выбираемых в зависимости от состава смеси - отгонкой растворите- ля, перекристаллизацией, переосаждением, хроматографией и т.п. Чистота полученных соединений по данным ОФ ВЭЖХ была не менее 98 %. Контроль за ходом реакции, а также оценка чистоты конечных продуктов проведены методом ОФ ВЭЖХ на хроматографе Alliance (Waters), колонка Zorbax Eclipse С18, 3.5 мкм, 3* 100 мм (Agilent Technologies), под- вижная фаза - смесь буферного раствора, содержащего 0.01 М натрия октан- сульфоната и 0.02 М натрия дигидрофосфата (рН=3.0) с ацетонитрилом, де- тектирование - при 230 нм.
Структура полученных соединений подтверждена данными ЯМР спек-
1 13
троскопии Н, lJC, Масс -спектрометрии, элементного анализа. Элементный анализ выполнен на С, Н, N, S-анализаторе Leco-932 (Leco Corporation).
Определение молекулярной массы проведено Масс- спектрометрическим методом на времяпролетном масс-рефлектроне МХ- 5303 с источником ионов типа «Электроспрей».
В ходе фармако-биологических исследований было показано, что син- тезированные Ν,Ν' -замещенные пиперазины обладают хорошей растворимо- стью в воде, по сравнению с известными аналогами - производными азот- содержащих гетероциклических соединений и аспирином - более широким терапевтическим интервалом и высокой безопасностью, что позволяет широ- ко использовать их в качестве антиагрегантов и препаратов, влияющих на систему гемостаза.
В частности, при терапии патологий системы гемостаза, как показали проведенные исследования, введение Ν,Ν' -замещенных пиперазинов в орга- низм в дозе 0.005 мМ/кг и более приводит к уменьшению патологической аг- регации тромбоцитов, положительное воздействует на систему фибринолиза, обеспечивает вазодилатацию сосудов.
Ν,Ν' -замещенные пиперазины могут вводиться в организм в составе композиций, содержащих смесь физиологически-активного (действующего) вещества со вспомогательными веществами. В качестве вспомогательных веществ используются разрешенные Фармакопеей вещества, улучшающие условия получения, хранения или применения лекарственного средства, на- пример, растворители, наполнители, ароматизаторы, вкусовые добавки, стабилизаторы и т.п.
Антиагрегантные, антитромботические свойства Ν,Ν' -замещенных пи- перазинов подтверждены ниже изложенными примерами.
Промышленная применимость
Пример 1. Синтез 4-(3, 4, 5-триметоксибензош)пиперазин-1- карбоксимидамид фумарата гемигидрата.
Figure imgf000016_0001
1) Синтез 3,4,5-триметоксибензоил хлорида.
В одногорлую колбу вместимостью 100 мл, снабженную обратным хо- лодильником с газоотводящей трубкой, погружённой в раствор NaOH, по- мещают 20 г (94 мМ) 3,4,5-триметоксибензойной кислоты и 45 мл абсолют- ного бензола. Затем прибавляют 0.5 мл ДМФА и 10.8 мл (150 мМ) тионил хлорида. После прекращения выделения газа смесь кипятят с обратным хо- лодильником в течение 2 ч. Раствор охлаждают до температуры 20 °С, выли- вают в стакан с 50 мл гексана. Выпавшие белые кристаллы продукта от- фильтровывают, фильтрат упаривают до 1/3 объёма в вакууме при темпера- туре 50 °С. При охлаждении выделяется вторая порция продукта, которую отфильтровывают и объединяют с первой. Продукт сушат в вакууме при температуре 50-НЗО °С в течение 1 ч.
Выход 3,4,5-триметоксибензоил хлорида - 19.6 г (90 %), т. пл. 77 °С.
2) Синтез 1 -(3,4,5-триметоксибензоил )пиперазин гидрохлорида. В трёхгорлую колбу вместимостью 500 мл, снабженную механической мешалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 20.0 г (232 мМ) пиперазина, 50 мл уксусной кислоты и 60 мл воды. К смеси прикапывают раствор 13 г (56 мМ) 3,4,5-триметоксибензоил хлорида в 15 мл ТГФ в течение 20 мин, поддерживая температуру реакционной смеси в диа- пазоне 10-45 °С, затем перемешивают в течение 1 ч и оставляют на ночь. Раствор фильтруют, упаривают досуха, в вакууме при температуре 50+60 °С. К остатку прибавляют 100 мл абс. этанола, нагревают до кипения при перемешивании. Смесь охлаждают до температуры 20 °С, отфильтровывают. Маточник упаривают досуха в вакууме ~20 мм.рт.ст. и температуре 50+60 °С, прибавляют 100 мл ацетона и перемешивают на магнитной мешалке 30 мин при температуре 40+50 °С. Осадок отфильтровывают, промывают дважды по 50 мл ацетона и сушат в течение 12 час при температуре 40 °С.
Выход 1-(3,4,5-триметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида - 7.8 г (44 %).
ПМР-спектр 1-(3,4,5-триметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида (Brucker 400MHz; раствор в DMSO-d6): 3.35 уш.с. ( 4Н; пиперазиновое коль- цо); 3.58 - 3.78 уш. (4Н; пиперазиновое кольцо); 3.69 с. ( ЗН; СН30 ); 3.81 с. ( 6Н; две СН30 ); 6.75 с. ( 2Н; ароматич.); 9.57 уш.с. ( 2Н; NH2+).
За) Синтез 4-(3,4,5-триметоксибензоил)пиперазин-1 -карбоксимидамида фумарата при рН реакционной смеси 9±0.5.
К 4.5 г (14.2 мМ) 1-(3,4,5-триметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида прибавляют 1.7 г (16 мМ) Na2C03, 40 мл воды, 2.1 г (14.3 мМ) 1 -Пиразол-1- карбоксамидин моногидрохлорида, рН реакционной смеси составляет 9±0.5. Смесь перемешивают при температуре 20 °С в течение 24 ч. Раствор упари- вают в вакууме при нагревании на водяной бане и температуре 50+80 °С. К остатку прибавляют 60 мл абс. спирта и кипятят с обратным холодильником в течение 20 мин. Раствор фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме при температуре 50+80 °С. Остаток растирают в ступке с 50 мл диэтилового эфи- pa, затем с 50 мл ацетона, затем с 50 мл дихлорметана, растворяют в 50 мл 1 М NaOH, экстрагируют дважды по 50 мл дихлорметана. Объединенные ор- ганические вытяжки сушат над сульфатом натрия, упаривают в вакууме при комнатной температуре, растворяют в 100 мл этанола, прибавляют 1.65 г (14.2 мМ) фумаровой кислоты, кипятят в течение 2-х час, горячий раствор фильтруют, упаривают до 1/4 объема, выдерживают при температуре 4 °С в течение 3 ч, продукт отделяют фильтрацией, высушивают в вакууме при температуре 40 °С до постоянной массы, перекристаллизовывают из изопро- панола и высушивают в вакууме при температуре 40 °С до постоянной мас- сы.
Выход Ci5H22N4O4*C4H4O4*0.5H2O, 4-(3,4,5-триметоксибензоил)- пиперазин-1-карбоксимидамида фумарата гемигидрата - 2.3 г (35 %). Эле- ментный анализ Ci5H22N4O4*C4H4O4*0.5H2O. Вычислено, %: С 51.00; Н 6.08; N 12.52. Найдено, %: С 51.08; Н 6.18; N 12.44. Масс-спектр, основание, най- дено: m/z 322.32. Вычислено: М 322.36
36) Синтез 4-(3 ,4, 5 -триметоксибензошрпиперазин- 1 -карбоксимидамида фумарата при рН реакционной смеси 12±0.5
К 4.5 г (14.2 мМ) 1-(3,4,5-триметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида прибавляют 2.07 г (37 мМ) КОН, 40 мл воды, 2.1 г (14.3 мМ) 1#-Пиразол-1- карбоксамидин моногидрохлорида, рН реакционной смеси составляет 12±0.5. Смесь перемешивают при температуре 20 °С в течение 24 ч. Раствор упари- вают в вакууме при нагревании на водяной бане и температуре 50^-80 °С. К остатку прибавляют 60 мл абс. спирта и кипятят с обратным холодильником в течение 20 мин. Раствор фильтруют, фильтрат упаривают в вакууме при температуре 50-^80 °С. Остаток растирают в ступке с 50 мл диэтилового эфи- ра, затем с 50 мл ацетона, затем с 50 мл дихлорметана, растворяют в 50 мл 1 М NaOH, экстрагируют дважды по 50 мл дихлорметана. Объединенные орга- нические вытяжки сушат над сульфатом натрия, упаривают в вакууме при комнатной температуре, растворяют в 100 мл этанола, прибавляют 1.65 г (14.2 мМ) фумаровой кислоты, кипятят в течение 2-х час, горячий раствор фильтруют, упаривают до 1/4 объема, выдерживают при температуре 4 °С в течение 3 ч, продукт отделяют фильтрацией, высушивают в вакууме при температуре 40 °С до постоянной массы, перекристаллизовывают из изо- пропанола и высушивают в вакууме при температуре 40 °С до постоянной массы.
Выход С15Н22^О4*С4Н4О4*0.5Н2О, 4-(3,4,5-триметоксибензоил)- пиперазин-1-карбоксимидамида фумарата гемигидрата - 1.4 г (21 %). Масс- спектр, основание, найдено: m/z 322.32. Вычислено: М 322.36
Пример 2. Синтез -карбамидоил-4-(2, 3, 4-триметоксибензоил)пиперазин- 1 - карбоксимидамид гидрохлорида
Figure imgf000019_0001
1) Синтез 2,3,4-триметоксибензоил хлорида.
В одногорлую колбу вместимостью 100 мл, снабженную обратным хо- лодильником с газоотводящей трубкой, погружённой в раствор NaOH, по- мещают 25 г (118 мМ) 2,3,4-триметоксибензойной кислоты и 50 мл абсолют- ного бензола, прибавляют 0.5 мл ДМФА и 10.8 мл (150 мМ) тионил хлорида. После прекращения выделения газа смесь кипятят с обратным холодильни- ком в течение 2 ч. Раствор охлаждают до температуры 20 °С, выливают в стакан с 50 мл гексана. Осадок отфильтровывают, фильтрат упаривают до 1/3 объёма в вакууме при температуре 50-^80 °С. При охлаждении выделяется вторая порция продукта, которую отфильтровывают и объединяют с первой. Продукт, белый порошок, сушат в вакууме при температуре 50 60 °С в тече- ние 1 ч.
Выход 2,3,4-триметоксибензоил хлорида - 23.1 г (85 %), т.пл. 42 °С. 2 Синтез 1 -(2,3,4- триметоксибензоил пиперазин гидро- хлорида.
В трёхгорлую колбу вместимостью 500 мл, снабженную механической мешалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 30.0 г (348 мМ) пиперазина, 75 мл уксусной кислоты и 90 мл воды. К смеси прикапывают раствор 19.5 г (85 мМ) 2,3,4-триметоксибензоил хлорида в 25 мл ТГФ в тече- ние 30 мин, поддерживая температуру реакционной массы в диапазоне 10+15 °С. Далее перемешивают 1 ч и оставляют на ночь. Светло-жёлтый рас- твор упаривают досуха в вакууме при температуре 50+60 °С. Остаток обраба- тывают 450 мл 2.5 н НС1 (1.125 моль) при охлаждении льдом и перемешива- ют 15 мин. Раствор фильтруют. Фильтрат упаривают досуха в вакууме ~20 мм.рт.ст. и температуре 50 60 °С. Остаток обрабатывают 150 мл абс. этанола и нагревают до кипения при перемешивании. Смесь охлаждают до темпера- туры 20 °С и отфильтровывают осадок пиперазина дигидрохлорида. Маточ- ник упаривают досуха в вакууме ~20 мм.рт.ст. и температуре 50+60 °С. К ос- татку прибавляют 150 мл ацетона и перемешивают на магнитной мешалке 30 мин при температуре 40+50 °С. Осадок отфильтровывают, дважды промыва- ют ацетоном по 50 мл, сушат в течение 12 ч при температуре 40 °С.
Выход 1 -(2,3,4- •·триметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида - 12.1 г (45 %).
3) Синтез Ы-карбамимидоил-4-(2,3,4-триметоксибензоил пиперазин-1-карбо- ксимидамида гидрохлорида.
В одногорлую колбу вместимостью 100 мл помещают 6.3 г (20 мМ) 1-(2,3,4-триметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида, 1.77 г (21 мМ) дициан- диамида и 50 мл 1-бутанола. Смесь кипятят с обратным холодильником в те- чение 10 ч, упаривают в вакууме при температуре 50+80 °С. К остатку при- бавляют 100 мл этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 0.5 ч. Горячую смесь фильтруют, осадок сушат при температуре 45 °С в тече- ние 2 сут. Выход C16H24N604*HC1, N- карбамимидоил-4-(2,3 ,4- триметоксибен-зоил)пиперазин-1-карбоксимидамида гидрохлорида - 4.3 г (53 %). Элементный анализ Ci6H24N604 * НС1. Вычислено, %: С 47.94; Н 6.29; N 20.96. Найдено, %: С 48.63; Н 6.47; N 21.03. Масс-спектр, основание, найде- но: m/z 364.38. Вычислено: М 364.40.
ПМР-спектр К-карбамимидоил-4-(2,3,4-триметоксибензоил)пипер- азин-1-карбоксимидамида гидрохлорида (Brucker 400MHz; раствор в DMSO- d6): 3.17 - 3.70 уш.синглеты ( 8Н; пиперазиновое кольцо); 3.75 с. ( ЗН; СН30 ); 3.76 с. ( ЗН; СН30 ); 3.80 с. ( ЗН; СН30 ); 6.83 с. и 6.91 с. ( Ш и 1Н; ароматич.); 6.98 уш.с. и 7.38 уш.с. (4Н и 2Н; 2NH, NH2(+), NH2).
Пример 3. Синтез 3-(1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-4-ил)-2-гидрокси-
1 -пропа-нсульфоновой кислоты натриевой соли
1 ). Синтез 3-(1 -(2,3 ,4-триметоксибензил пиперазин-4-ил )-2-гидрокси- 1 - пропа-нсульфоновой кислоты натриевой соли при рН реакционной смеси 9±0.5.
Figure imgf000021_0001
В одногорлую колбу вместимостью 100 мл помещают 6.8 г (20 мМ) 1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазина дигидрохлорида и 30 мл воды, при- бавляют порциями 5.5 г (65 мМ) NaHC03. После прекращения выделения га- за, прибавляют раствор 4.10 г (20 мМ) 2-гидрокси-З- хлорпропансульфокислоты в 30 мл воды и 0.1 г йодистого калия, рН реакци- онной смеси составляет 9±0.5.
Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Раствор упари- вают досуха в вакууме при ~20 мм.рт.ст. и температуре 50- ОС. Остаток обрабатывают 100 мл абс. этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 0.5 ч при перемешивании. Горячий раствор отфильтровывают от не- органических солей и выдерживают в течение суток. Белый осадок
отфильтровывают и сушат при температуре 45 оС в течение 2 сут.
Выход Ci7H27N2Na07S, натриевой соли 3-(1-(2,3,4-триметоксибензил)- пиперазин-4-ил)-2-гидрокси-1-пропансульфоновой кислоты 5.2 г (61 %).
Элементный анализ Ci7H27N2Na07S. Вычислено, %: С 47.88; Н 6.38; N
6.57. Найдено, %: С 47.89; Н 6.1 1 ; N 6.28. Масс-спектр, найдено: m/z 426.41.
Вычислено: М 426.46.
ПМР-спектр натриевой соли 3-(1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-4- ил)-2-гидрокси-1-пропансульфоновой кислоты (Brucker 400MHz; раствор в DMSO-d6): 2.20 - 2.44 м. и 2.69 д. ( ЮН; пиперазиновое кольцо + CH2S03);
3.29 - 3.39 два с. (4Н; две CH2N); 3.69 - 3.79 три с. ( 9Н; три СНэО); 3.94 м.
(Ш; СН); 4.80 с. (1Н; ОН); 6.73 д. и 6.93 д. (1Н и 1Н; бензольного кольца).
2). Синтез 3-( 1 -(2,3 ,4-триметоксибензил)пиперазин-4-ил -2-гидрокси- 1 - пропан-сульфоновой кислоты натриевой соли при рН реакционной смеси 12±0.5.
В одногорлую колбу вместимостью 100 мл помещают раствор 2.6 г (65 мМ) NaOH в 30 мл воды к нему добавляют 6.8 г (20 мМ) 1-(2,3,4- триметоксибензил)пиперазина дигидрохлорида и прибавляют раствор 4.10 г (20 мМ) 2-гидрокси-З-хлорпропансульфокислоты в 30 мл воды и 0.1 г иоди- стого калия, рН реакционной смеси составляет 12±0.5. Смесь кипятят с об- ратным холодильником в течение 5 ч. Раствор упаривают досуха в вакууме при -20 мм.рт.ст. и температуре 50- °С. Остаток обрабатывают 100 мл абс. этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 0.5 часа при пе- ремешивании. Горячий раствор отфильтровывают от неорганических солей и выдерживают в течение суток. Белый осадок отфильтровывают и сушат при температуре 45 °С в течение 2 сут.
Выход Ci7H27N2Na07S, натриевой соли 3-(1-(2,3,4-триметоксибензил)- пиперазин-4-ил)-2-гидрокси-1-пропансульфоновой кислоты 2.7 г (32 %).
Масс-спектр, найдено: m/z 426.41. Вычислено: М 426.46. ПМР-спектр натриевой соли 3- ( 1 -(2,3,4- триметоксибензил)пиперазин-4-ил)-2-гидрокси- 1 -пропансульфоновой кисло- ты (Bmcker 400MHz; раствор в DMSO-d6): 2.20 - 2.44 м. и 2.69 д. ( ЮН; пипе- разиновое кольцо + CH2S03); 3.29 - 3.39 два с. (4Н; две CH2N); 3.69 - 3.79 три с. ( 9Н; три СН30); 3.94 м. (Ш; СН); 4.80 с. (1Н; ОН); 6.73 д. и 6.93 д. (1Н и Ш; бензольного кольца).
Пример 4. Синтез М-карбамимидоил-4-(2, 3, 4-триметоксибензил)пиперазин-
1-карбоксимидамида гидрохлорида
Figure imgf000023_0001
В одногорлую колбу вместимостью 100 мл помещают 5.05 г (15 мМ) 1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазина моногидрата, 1.51 г (18 мМ) дициан- диамида и 50 мл 1-бутанола. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 10 ч, упаривают в вакууме при температуре 50-^-80 °С. К остатку прибавляют 100 мл этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 0.5 ч. Горячую смесь фильтруют, фильтрат выдерживают ночь при темпера- туре 15 °С. Продукт - белый осадок - отфильтровывают, фильтрат упаривают в вакууме при температуре 50-^80 °С до половины объёма. Выделяется до- полнительное количество продукта, который отфильтровывают и присоеди- няют к первому. Продукт сушат при температуре 45 °С в течение 2 сут.
Выход М-карбамимидоил-4-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин кар- боксимидамида - 2.5 г (48 %). Элементный анализ Ci6H26N603 * НС1. Вычис- лено, %: С 49.68; Н 7.04; N 21.71. Найдено, %: С 49.71 ; Н 7.05; N 21.40. Масс- спектр, основание, найдено: m/z 350.48. Вычислено: М 350.42.
Пример 5. Синтез 4-(2, 3, 4-триэтоксибензил)пиперазин-1-карбоксимидамид гидрохлорида
Figure imgf000024_0001
1) . Синтез 2,3,4-триэтоксибензальдегида.
В трёхгорлую колбу вместимостью 250 мл, снабженную обратным хо- лодильником, механической мешалкой, в токе аргона помещают 13.9 г (90 мМ) 2,3,4-тригидроксибензальдегида, 5.6 г (100 мМ) КОН и 100 мл сухо- го диметилформамида. Перемешивают 20 мин. в атмосфере аргона, прибав- ляют 84 г, 43.5 мл (540 мМ) этилиодида. Смесь кипятят при температуре 70-^-100 °С с обратным холодильником при перемешивании в атмосфере арго- на в течение 20 ч. Затем смесь упаривают в вакууме при температуре 50-^80 °С практически досуха. К остатку прибавляют 200 мл воды, смесь экс- трагируют дихлорметаном - четырежды по 100 мл. Объединенную органиче- скую фракцию промывают 7 %-ным раствором NaOH, сушат над магния сульфатом, фильтруют, растворитель упаривают в вакууме при температуре 50-^80 °С. Остаток перегоняют в вакууме, собирая фракцию с т. кип. 1 15-120 °С (0.5 мм.рт.ст.).
Выход 2,3,4-триэтоксибензальдегида - 7.4 г (34 %).
2) . Синтез К-(тр^т-бутилоксикарбонил -К'-(2,3,4-триэтоксибензил) пипера- зина.
Синтез ведут в атмосфере аргона. Смешивают 1.1 г (5.9 мМ) N-Boc- пиперазина и 1.40 г (5.9 мМ) 2,3,4-триэтоксибензальдегида в 25 мл сухого дихлорметана. После растворения прибавляют 2 капли уксусной кислоты, к этой смеси прибавляют 2.12 г (10 мМ) NaBH(OAc)3 и перемешивают в тече- ние 12 ч при температуре 20 °С. Затем к реакционной массе осторожно при- капывают 10 мл 5 %-ного водного раствора NaHC03. Органический слой от- деляют, промывают 5 %-ным раствором Ыа2СОз, сушат над натрия сульфа- том, фильтруют и упаривают в вакууме при температуре 50 80 °С. Остаток - 2.2 г желтоватого масла используют на следующей стадии.
3) . Синтез Ы-(2,3,4-триэтоксибензил)пиперазин дигидрохлорида.
К 2.2 г -(трвт-бутилоксикарбонил)-К'-(2,3,4-триэтоксибензил) пипе- разина прибавляют 20 мл 10 %-ной НС1 и 5 мл этанола, смесь перемешивают в течение 5 ч при температуре 20 °С, упаривают досуха в вакууме при тем- пературе 50+80 °С. К остатку прибавляют 20 мл сухого ацетона, кипятят при перемешивании в течение 20 мин, охлаждают до температуры 10 °С. Через 1 ч продукт отфильтровывают, промывают 10 мл ацетона и сушат на воздухе.
Выход 1-(2,3,4-триэтоксибензил)пиперазин дигидрохлорида 1.2 г (53 %).
4) . Синтез 4-(2 ,3 ,4-триэтоксибензил пиперазин- 1 -карбоксимидамид гидро- хлорида.
К 1.2 г (3.15 мМ) 1-(2,3,4-триэтоксибензил)пиперазин дигидрохлорида прибавляют 0.67 г (6.3 мМ) Na2C03 и 20 мл воды. Затем прибавляют 0.48 г (3.3 мМ) 1#-пиразол-1-карбоксамидин моногидрохлорида и перемешивают при температуре 50 °С в течение 8 ч. Раствор упаривают в вакууме при тем- пературе 50+80 °С. К остатку прибавляют 60 мл дихлорметана и кипятят с обратным холодильником 20 мин. Нерастворившийся белый осадок отфильт- ровывают. Раствор упаривают в вакууме при температуре 50+80 °С до объёма 2 мл, прибавляют 7 мл ацетона и нагревают до кипения. При охлаждении из раствора выпадают белые кристаллы продукта. Их отфильтровывают и сушат при температуре 40 °С.
Выход С 18H3oN403*HCl, 4-(2,3 ,4-триэтоксибензил)пиперазин- 1 -карбо- ксимидамид гидрохлорида - 0.6 г (52 %). Ci8H3oN403 * НС1. Элементный анализ Ci8H30N4O3*HCl. Вычислено, %: С 55.87; Н 8.08; N 14.48. Найдено, %: С 55.63; Н 8.06; N 14.34. Масс-спектр, основание, найдено: m/z 350.52. Вы- числено: М 350.46.
Пример 6. Синтез 2-(1-(2, 3, 4-триметоксибензил)пиперазин-4-ил- этансульфоновой кислоты натриевой соли
Figure imgf000026_0001
В одногорлую колбу вместимостью 200 мл помещают 8.5 г (25 мМ) 1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазина дигидрохлорида и 30 мл воды. К по- лученному раствору порциями прибавляют 10 мл (70 мМ) триэтиламина, раствор 5.25 г (25 мМ) натриевой соли 2-бромэтансульфокислоты в 20 мл во- ды. Смесь кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Раствор упари- вают досуха в вакууме при температуре 50 80 °С. Остаток - белый порошок - высушивают в вакууме при температуре 50+60 °С, прибавляют 80 мл абсо- лютного этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 15 мин. Го- рячий раствор отфильтровывают, маточник оставляют на ночь при комнат- ной температуре. Выпавший продукт отфильтровывают и перекристаллизо- вывают из 30 мл абсолютного этанола, вновь отфильтровывают, сушат при температуре 50 °С в течение суток.
Выход Ci6H25N2Na06S, 2-(1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-4-ил- этансульфонат натрия - 5.9 г (60 %). Элементный анализ C]6H25N2Na06S. Вычислено, %: С 48.48; Н 6.36; N 7.07. Найдено, %: С 48.40; Н 6.34; N 7.10. Масс-спектр, найдено: m/z 396.14. Вычислено: М 396.43.
ПМР-спектр 2-(1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-4-илэтансуль- фоната натрия (Brucker 400MHz; раствор в DMSO-d6): 2.32 м. (ЮН), пипера- зиновое кольцо; 2.50-2.60, мультиплет -N-CH2CH2-S03; 3.33, синглет - три группы СН2; 3.36, синглет - 4 протона пиперазинового кольца; 3.71, 3.74, 3.76 синглеты - СН30; 6.72, дублет - СН; 6.93 дублет - две СН. 6.73 д. и 6.93 д. (1Н и 1Н; бензольного кольца). Пример 7. Синтез 4-(2, 3, 4-триметоксибензил)пиперазин-1-карбоксимида- мида моногидрата
Figure imgf000027_0001
В одногорлую плоскодонную колбу вместимостью 100 мл помещают
8.5 г (25 мМ) 1-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазина дигидрохлорида и 50 мл воды, при перемешивании порциями прибавляют 5.3 г (50 мМ) Na2C03, на- блюдая слабое выделение газа.
К прозрачному раствору прибавляют в один приём 3.75 г (25.5 мМ) 1-Н- пиразол- 1 -карбоксамидина гидрохлорида, суспензию перемешивают при комнатной температуре в течение 2 ч. Жёлтый раствор выдерживают при температуре 10 °С в течение 3 суток, упаривают досуха в вакууме при темпе- ратуре 50-Н °С. К остатку прибавляют 100 мл метиленхлорида и кипятят с обратным холодильником в течение 30 мин. Выпавший белый кристалл иче- ский осадок отфильтровывают и отбрасывают (неорганические соли). Рас- твор сушат над сульфатом натрия, фильтруют и упаривают в вакууме при температуре 50^-80 °С. Остаток - вязкое масло - выдерживают в вакууме 10 мм.рт.ст. при температуре 60 °С в течение 1 ч, прибавляют 50 мл горя- чего сухого ацетона и кипятят с обратным холодильником на водяной бане в течение 20 мин. Выпавший белый осадок отфильтровывают, фильтрат и ос- таток вязкого масла продолжают кипятить при перемешивании, с обратным холодильником на водяной бане в течение 20 мин. Выпавший повторно оса- док отфильтровывают и объединяют с первой частью.
Полученный продукт обрабатывают 40 мл 1 М раствора Na2C03, экстра- гируют хлороформом (трижды по 20 мл). Хлороформный раствор промыва- ют 20 мл воды, сушат над безводным натрия сульфатом, упаривают в вакуу- ме при температуре 35 °С. Выход C15H24N403*H20, 4-(2,3,4- триметоксибензил)пиперазин- 1 - карбо-ксимидамида моногидрата - 6.1 г (73 %).
Элементный анализ Ci5H24N403*H20. Вычислено, %: С 55.20; Н 8.03; N 17.17. Найдено, %: С 55.1 1 ; Н 8.06; N 17.21. Масс-спектр, основание, найде- но: m/z 308.42. Вычислено: М 308.38.
Пример 8. Синтез 4-(2, 3, 4-триметоксибензил)пиперазин-1-карбоксимид- амид фумарата.
Figure imgf000028_0001
5.2 г (15 мМ) 4-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-1 -карбоксимидамид гидрохлорида растворяют в 50 мл 1 М NaOH, экстрагируют дважды по 50 мл дихлорметана. Объединенные органические вытяжки сушат над сульфатом натрия, упаривают в вакууме при комнатной температуре, растворяют в 100 мл этанола, прибавляют 1.7 г (15 мМ) фумаровой кислоты, кипятят в те- чение 2-х час, горячий раствор фильтруют, упаривают до 1/4 объема, выдер- живают при температуре 4 °С в течение 3 ч, Продукт отделяют фильтрацией, высушивают в вакууме при температуре 40 °С до постоянной массы, пере- кристаллизовывают из изопропанола и высушивают в вакууме при темпера- туре 40 °С до постоянной массы.
Выход Ci5H24N403 * С4Н404, 4-(2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-1- карбоксимидамид фумарата - 2.2 г (35 %). Элементный анализ C 15H24N4O3 * С4Н404. Вычислено, %: С 53.77; Н 6.65; N 13.20. Найдено, %: С 53.52; Н 6.63; N 13.25. Масс-спектр, основание, найдено: m/z 308.42. Вычислено: М 308.38. ПМР-спектр (Brucker 400MHz; раствор в CDCI3, мд:: 2.47, уширенный синг- лет - 4 протона пиперазинового кольца; 3.42, синглет - ЗСН2; 3.51, уширен- ный синглет - 4 протона пиперазинового кольца; 3.79, Синглет - СН30; 3.80, Синглет - 2СН30; 6.58, дублет - СН; 6.89, дублет - 2СН; 7.27-7.37,уширенный синглет - 4МН+5>Щ2+вода. Пример 9. Синтез калиевой соли 3-(1-(3-трет-бутил-4- метоксибензил)пиперазин-4-ил)-2-гидрокси-1-пропансулъфоновой кислоты
Figure imgf000029_0001
1 ). Синтез М-(трет-бутилоксикарбонил)-К'-(3-трвт-бутил-4-метокси- бензил)-пиперазина.
Синтез ведут в атмосфере аргона. Смешивают 2 г (10.7 мМ) N-Boc- пиперазина и 2.06 г (10.7 мМ) 3-яг/?е/«-бутил-4-метоксибензальдегида в 30 мл сухого дихлорметана. После растворения прибавляют 2 капли уксусной ки- слоты, к этой смеси прибавляют 4.24 г (20 мМ) NaBH(OAc)3 и перемешивают в течение 12 ч при температуре 20 °С. Затем к реакционной массе осторожно прикапывают 20 мл 5 %-ного водного раствора NaHC03. Органический слой отделяют, промывают 5 %-ным раствором Na2C03, сушат над натрия сульфа- том, фильтруют и упаривают в вакууме при температуре 50+-80 °С. Остаток - 3.5 г жёлтого масла используют на следующей стадии.
2) . Синтез (3-трет-бутил-4-метоксибензил)пиперазина дигидрохлорида.
К 3.5 г М-(трет-бутилокси-карбонил)-Ы'-(3-трет-бутил-4-метокси- бензил)пиперазина прибавляют 30 мл 10 %-ной НС1 и 5 мл этанола, смесь перемешивают в течение 5 ч при температуре 20 °С, упаривают досуха в ва- кууме при температуре 50^-80 °С. К остатку прибавляют 20 мл сухого ацето- на, кипятят при перемешивании в течение 20 мин, охлаждают до температу- ры 10 °С. Через 1 ч продукт отфильтровывают, промывают 10 мл ацетона и сушат на воздухе. Выход (3-т/?егабутил-4-метоксибензил)пиперазин дигид- рохлорида 2.2 г (68 %).
3) . Синтез калиевой соли 3-(1-(3-трет-бутил-4-метоксибензил)пиперазин-4- ил)-2-гидрокси- 1-пропансульфоновой кислоты В одногорлую колбу вместимостью 100 мл помещают 2.2 г (6.6 мМ) (3-ди ?еАи-бутил-4-метоксибензил)пиперазин дигидрохлорида и 30 мл воды, прибавляют порциями 5 г КНС03. После прекращения выделения газа, прибавляют раствор 1.4 г (6.6 мМ) натриевой соли 2-гидрокси-З- хлорпропансульфокислоты в 30 мл воды и 0.1 г йодистого калия. Смесь ки- пятят с обратным холодильником в течение 5 ч. Раствор упаривают досуха в вакууме при -20 мм.рт.ст. и температуре 50 60 °С. Остаток обрабатывают 50 мл абс. этанола и кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч при перемешивании. Горячий раствор отфильтровывают от неорганических со- лей и выдерживают в течение суток. Белый осадок отфильтровывают и сушат при температуре 45 °С в течение 2 сут.
Выход C19H31KN2O5S, калиевой соли (З-тр га-бутил-4-метоксибензил)- пиперазин-4-ил)-2-гидрокси-1-пропансульфоновой кислоты - 1.3 г (45 %).
Элементный анализ C19H31KN2O5S. Вычислено, %: С 52,03; Н 7.12; N 6.39. Найдено, %: С 51.91 ; Н 7.11 ; N 6.41. Масс-спектр, найдено: m/z 438.54. Вычислено: М 438.40.
Пример 10. Синтез 4-(3, 5-диметокси-4-этоксибензил)пиперазин-1- ка боксгшидамид гидрохлорида
Figure imgf000030_0001
1). Синтез 3,5-диметокси-4-этоксибензальдегида.
В трёхгорлую колбу вместимостью 250 мл, снабженную обратным хо- лодильником, механической мешалкой, в токе аргона помещают 18.2 г (100 мМ) 3,5-диметокси-4-гидроксибензальдегида, 28 г (200 мМ) сухого К2СОз и 100 мл сухого диметилформамида. Смесь перемешивают в течение 20 мин. в атмосфере аргона, прибавляют 42 г (21.7 мл, 270 мМ) этилиодида, кипятят 20 ч при температуре 70+100 °С с обратным холодильником при пе- ремешивании, в атмосфере аргона, и упаривают в вакууме при температуре 50-80 UC практически досуха. К остатку прибавляют 200 мл воды, экстрагируют метиленхлоридом - четырежды по 100 мл. Объединенную ор- ганическую фракцию промывают 7 %-ным раствором NaOH, сушат над маг- ния сульфатом, фильтруют, упаривают в вакууме при температуре 50 80 °С. Остаток - 20 г масла - используют на следующей стадии без очистки.
2) . Синтез -(трет-бутилоксикарбонил - ,-(3,5-диметокси-4-этоксибензил)- пиперазина.
Синтез ведут в атмосфере аргона. Смешивают 2.2 г (11.8 мМ) N-Boc- пиперазина и 2.5 г (1 1.8 мМ) 3,5-диметокси-4-этоксибензальдегида в 50 мл сухого дихлорметана. После растворения прибавляют 2 капли уксусной ки- слоты, прибавляют 4.25 г (20 мМ) NaBH(OAc)3 и перемешивают в течение 12 ч при температуре 20 °С. К реакционной массе осторожно прикапывают 20 мл 5 %-ного раствора NaHC03. Органический слой отделяют, промывают 5 %-ным раствором Na2C03, сушат над натрия сульфатом, фильтруют, упа- ривают в вакууме при температуре 50+80 °С. Остаток - 4.1 г масла - исполь- зуют на следующей стадии.
3) . Синтез 1 -(3,5-диметокси-4-этоксибензил)пиперазин дигидрохлорида.
К 4.1 г Ы-(т ?ет-бутилоксикарбонил)-Н'-(3,5-диметокси-4-этокси- бензил)пиперазина прибавляют 40 мл 10 %-ной НС1 и 10 мл этанола, пере- мешивают в течение 5 ч при температуре 20 °С. Смесь упаривают досуха в вакууме при температуре 50+80 °С. К остатку прибавляют 30 мл сухого аце- тона, кипятят при перемешивании в течение 20 мин, охлаждают до темпера- туры 10 °С. Через 1 ч отфильтровывают белый осадок, промывают 10 мл аце- тона и сушат на воздухе. Продукт (2 г) используют на следующей стадии без дополнительной очистки.
4) . Синтез 4-(3 ,5-диметокси-4-этоксибензил пиперазин- 1 -карбоксимида-мид гидрохлорида.
К 1.3 г (3.15 мМ) -(3,5-диметокси-4-этоксибензил)пиперазин дигид- рохлорида прибавляют 0.67 г (6.3 мМ) Na2C03 и 20 мл воды, 0.48 г (3.3 мМ) 1 /-пиразол- 1-карбоксамидин моногидрохлорида и перемешивают при температуре 20 °С в течение 24 ч. Раствор упаривают в вакууме при тем- пературе 50-^80 °С. К остатку прибавляют 60 мл метиленхлорида, кипятят с обратным холодильником 20 мин. Раствор фильтруют, упаривают до объёма 2 мл, в вакууме при температуре 50-^80 °С. Прибавляют 7 мл ацетона и нагре- вают до кипения. При охлаждении из раствора выпадают белые кристаллы целевого продукта. Продукт отфильтровывают и сушат при температуре 40 °С.
Выход Ci6H26N403*HCl, 4-(3,5-диметокси-4-этоксибензил)пиперазин- 1-карбоксимидамид гидрохлорида - 0.8 г (56 %). Элементный анализ С16Н2бК40з*НС1. Вычислено, %: С 53.55; Н 7.58; N 15.61. Найдено, %: С 53.52; Н 7.46; N 15.69. Масс-спектр, основание, найдено: m/z 322.38. Вычис- лено: М 322.40.
Пример 11. Синтез 4-(4-Ацетилокси-3, 5-диметоксибензоил)пиперазин-1- карбоксимидамид гидрохлорида
Figure imgf000032_0001
1). Синтез 1-(4-ацетилокси-3,5-диметоксибензоил пиперазин гидрохлорида.
В трёхгорлую колбу вместимостью 500 мл, снабженную механической мешалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 20.0 г (232 мМ) пиперазина, 50 мл уксусной кислоты и 60 мл воды, прикапывают раствор 13 г (50 мМ) 4- ацетилокси-3,5- диметоксибензоил хлорида в 15 мл ТГФ в течение 20 мин, поддерживая температуру реакционной среды в диа- пазоне 10+15 °С, перемешивают в течение 1 ч, оставляют на ночь. Раствор упаривают досуха в вакууме при температуре 50+60 °С. Остаток обрабаты- вают 300 мл (750 мМ) 2.5 н НС1 при охлаждении льдом, перемешивают 15 мин. Раствор фильтруют, маточник упаривают досуха в вакууме при -20 мм.рт.ст. и температуре 50+60 °С. Остаток обрабатывают 100 мл абсолютно- го этанола и нагревают до кипения при перемешивании. Смесь охлаждают до температуры 20 °С и отфильтровывают. Маточник упаривают досуха в ва- кууме -20 мм.рт.ст. и температуре 50+60 °С. К остатку прибавляют 100 мл ацетона и перемешивают на магнитной мешалке 30 мин при температуре 40+50 °С. Белый осадок отфильтровывают, промывают дважды по 50 мл аце- тона, сушат в течение 12 ч при температуре 40 °С.
Выход 1 -(4-ацетилокси-3,5-диметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида - 7.6 г (44 %).
2). Синтез 4-(4-ацетилокси-3,5-диметоксибензоил)пиперазин- 1 -карбокс- имидамид гидрохлорида.
К 4.52 г (13.1 мМ) 1-(4-ацетилокси-3,5-диметоксибензоил)пиперазин гидрохлорида прибавляют 1.6 г (14.8 мМ) Na2C03 и 40 мл воды, 1.92 г (13.1 мМ) 1 -Пиразол-1-карбоксамидин гидрохлорида. Смесь перемешивают при температуре 30 °С в течение 24 ч. Раствор упаривают в вакууме при тем- пературе 50+80 °С. К остатку прибавляют 60 мл изопропанола и кипятят с обратным холодильником в течение 20 мин. Раствор фильтруют, маточник упаривают в вакууме при температуре 50+80 °С. Остаток растирают в ступке с 50 мл диэтилового эфира, затем - с 50 мл ацетона, затем растирают с 50 мл дихлорметана и высушивают. Полученный продукт - белый порошок - пере- кристаллизовывают из изопропанола, сушат в течение 12 ч при температуре 40 °С. Выход Ci6H22N405*HCl, 4-(4- ацетокси-3,5-диметоксибензоил) пиперазин-1-карбоксимидамида гидрохлорида - 2.0 г (35 %). Элементный анализ Ci6H22N405*HCl. Вычислено, %: С 49.68; Н 5.99; N 14.48. Найдено, %: С 49.79; Н 5.86; N 14.43. Масс-спектр, основание, найдено: m/z 350.42. Вы- числено: М 350.36.
Пример 12. Синтез 4-(4-(2-метилпропилокси)-3-метоксибензил)пиперазин-1- карбоксимидамид гидрохлорида
Figure imgf000034_0001
1). Синтез 4-(2-метилпропилокси -3-метоксибензальдегида.
В трёхгорлую колбу вместимостью 250 мл, снабженную обратным хо- лодильником, механической мешалкой, в токе аргона помещают 30.4 г (200 мМ) ванилина, 28 г (200 мМ) сухого К2С03 и 150 мл абс. диметилфор- мамида. Смесь перемешивают в течение 20 мин. в атмосфере аргона, прибав- ляют 34.3 г (250 мМ) изобутилбромида, нагревают в течение 20 ч. при тем- пературе 90-400 °С с обратным холодильником, при перемешивании, в атмо- сфере аргона, далее упаривают в вакууме при температуре 50-^80 °С практи- чески досуха. К остатку прибавляют 200 мл воды, экстрагируют дихлормета- ном - четырежды по 100 мл. Объединенную органическую фракцию промы- вают 7 %-ным раствором NaOH, сушат над магния сульфатом, фильтруют, упаривают в вакууме при температуре 50^-80 °С. Остаток - 15 г коричневого масла - сырой 4-(2-метилпропилокси)-3-метоксибензальдегид используют на следующей стадии без очистки.
2). Синтез -(трбт-бутилоксикарбонил -Н'-(4-(2-метилпропилокси)-3- метоксибензил пиперазина. Синтез ведут в атмосфере аргона. Смешивают 2.2 г (1 1.8 мМ) Ν-Вос-пиперазина и 2.5 г (примерно 12 мМ) сырого 4-(2-метилпропилокси)- 3-метоксибензальдегида а в 50 мл сухого дихлорметана. После растворения добавляют 2 капли уксусной кислоты, добавляют 4.25 г (20 мМ) NaBH(OAc)3 и перемешивают в течение 12 ч при температуре 20 °С. Далее к реакционной массе осторожно прикапывают 20 мл 5 %-ного раствора NaHC03. Органиче- ский слой отделяют, промывают 5 %-ным раствором агСОз, сушат над на- трия сульфатом, фильтруют, упаривают в вакууме при температуре 50-80 °С. Остаток - 3.3 г масла - сырой К-(т/?ет-бутилоксикарбонил)-1ЧР-(4-(2- метилпропилокси)-3-метоксибензил)пиперазин. Его используют на следую- щей стадии без очистки.
3) . Синтез -(4-(2-метилпропилокси -3-метоксибензил)пиперазин диги- дрохлорида.
К 3.2 г сырого М-(трет-бутилоксикарбонил)-> -(4-(2-метилпропило- кси)-3-метоксибензил)пиперазина добавляют 40 мл 20 %-ной НС1 и 10 мл этанола, перемешивают в течение 5 ч при температуре 20 °С. Смесь упари- вают досуха в вакууме при температуре 50-80 °С. К остатку добавляют 30 мл абс. ацетона, кипятят при перемешивании в течение 20 мин, охлаждают до температуры 10 °С. Через 1 ч отфильтровывают белый осадок, промывают 10 мл ацетона и сушат на воздухе.
Продукт - белый порошок -(4-(2-метилпро-пилокси)-3-метокси- бензил)пиперазин дигидрохлорида массой 2.2 г.
4) . Синтез 4-(4-(2-метилпропилокси)-3-метоксибензил пиперазин- 1 - карбоксимидамид гидрохлорида.
К 1.5 г (4.3 мМ) -(4-(2-метилпропилокси)-3-метоксибензил)пиперазин дигидрохлорида добавляют 0.91 г (8.6 мМ) Na2C03 и 20 мл воды, 0.67 г (4.6 мМ) 1#-пиразол-1-карбоксамидин моногидрохлорида и перемешивают при температуре 20 °С в течение 24 ч. Раствор упаривают в вакууме при тем- пературе 50-80 °С. К остатку добавляют 60 мл дихлорметана и кипятят с об- ратным холодильником 20 мин. Раствор фильтруют и упаривают до объёма 2 мл в вакууме при температуре 50 80 °С. Добавляют 10 мл ацетона и нагревают до кипения. При охлаждении из раствора выпадают белые кри- сталлы целевого продукта. Продукт отфильтровывают и сушат при темпера- туре 40 °С.
Выход Ci7H28N402*HCl, 4-(4-(2-метилпропилокси)-3-метокси- бензил)пиперазин-1-карбоксимидамид гидрохлорида - 0.7 г (46 %). Элемент- ный анализ Cn^s^C HCl. Вычислено, %: С 57.21 ; Н 7.98; N 15.70. Найде- но, %: С 57.31 ; Н 7.92; N 15.67. Масс-спектр, основание, найдено: m/z 320.48. Вычислено: М 320.43.
Пример 13. Синтез 4-(2,4,5-трихлорфенилсулъфонил)пиперазин -1- ка боксимидамид гидрохлорида
Figure imgf000036_0001
1). Синтез 1-(2,4,5-трихлорфенилсульфонил)пиперазин гидрохлорида.
В трёхгорлую колбу на 500 мл, снабженную магнитной мешалкой, ка- пельной воронкой и термометром, помещают 22.8 г (200 мМ) N- формилпиперазина, 25 г - 34 мл (250 мМ) триэтиламина и 100 мл дихлорме- тана. К этому раствору при перемешивании прикапывают раствор 14.0 г (200 мМ) 2,4,5-трихлорфенилсульфонил хлорида в 100 мл дихлорметана за 1 ч, поддерживая внутреннюю температуру реакционной среды в диапазоне 10 - 15 °С (охлаждение вода-лёд). Затем перемешивают 1 ч и оставляют на ночь при комнатной температуре.
Реакционную смесь выливают в делительную воронку с 0.4 л воды, от- деляют органический слой. Его промывают 2* 150 мл 5%-ным раствором Na- НСОз, затем 100 мл воды. Раствор в дихлорметане высушивают Na2S04, фильтруют и упаривают растворитель в вакууме ~20 мм.рт.ст. при нагрева- нии на водяной бане ( темп. 50-60 С). К полученному остатку добавляют раствор 0.5 моль НС1 в 200 мл метанола ( получен отдельно осторожным при- бавлением 40 г (-0.5 моль) ацетил хлорида к 200 мл метанола при темпера- туре +10 - +15 °С. Смесь перемешивают и кипятят с обратным холодильни- ком 5 час. Выпадает белый кристаллический осадок. Смесь оставляют на ночь при комнатной температуре.
Реакционную смесь упаривают в вакууме -20 мм.рт.ст. при нагревании на водяной бане ( темп. 50-60 °С). К остатку добавляют 200 мл воды и 50 мл 20%-ной НС1, перемешивали 1 час. Не растворившийся серый порошок от- фильтровывают. Кислый водный раствор упаривают в вакууме -20 мм.рт.ст. при нагревании на водяной бане ( темп. 50-60 °С). К остатку добавляют 200 мл этанола и кипятят с обратным холодильником 30 мин. Белый осадок от- фильтровывают (пиперазин дигидрохлорид по данным ПМР). Раствор охла- ждают льдом 2 час - выпадают мелкие белые кристаллы. Осадок отфильтро- вывают, сушат на воздухе. Получают 35.1 г 1 -(2,4,5- трихлорфенилсульфонил)пиперазин гидрохлорида в виде белого порошка. Выход - 48%.
2). Синтез 4-(2,4,5-трихлорфенилсульфонил)пиперазин- 1 -карбокси-мидамид гидрохлорида
К 4.94 г (13.5 мМ) 1-(2,4,5-трихлорфенилсульфонил)пиперазин гидро- хлорида добавляют 1.6 г (14.8 мМ) Na2C03 и 40 мл воды, 2.05 г (14.0 мМ) 1Я- пиразол-1-карбоксамидин моногидрохлорида. Смесь перемешивают при тем- пературе 20 °С в течение 48 час. Раствор упаривают в вакууме -20 мм.рт.ст. при нагревании на водяной бане (темп. 50-60 °С). Остаток - светло-жёлтая масса. К ней добавляют 100 мл абс. спирта и кипятят с обратным холодиль- ником 20 мин. Не растворившийся белый осадок отфильтровывают и снова кипятят с 80 мл абс. спирта с обратным холодильником 20 мин. Не раство- рившийся белый осадок отфильтровывают (неорганические соли). Объеди- нённый спиртовой раствор упаривают в вакууме -20 мм.рт.ст. при нагрева- нии на водяной бане ( темп. 50-60 °С). К остатку добавляют 100 мл ацетона и кипятят при перемешивании на магнитной мешалке с обратным холодильником 1 час. Горячую смесь отфильтровывают, белый осадок про- мывают 20 мл горячего ацетона. Полученный белый порошок растворяют в 100 мл кипящего этанола, отфильтровывают. После охлаждения до комнат- ной температуры раствор охлаждают при 0 °С 2 час. Выпавшие кристаллы отфильтровывают, сушат на воздухе.
Выход CnH13Cl3N402S*HCl, 4-(2,4,5-трихлорфенилсульфонил)пипе- разин-1-карбоксимидамид гидрохлорида - 2.1 г (42 %). Масс-спектр, основа- ние, найдено: m/z 371.52. Вычислено: М 371.67 .
Пример 14. Синтез 2-сулъфоокси-3-(4-( (2, 3, 4-триметоксифенил)- метил)пиперазин-1 -ил) пропан- 1-сульфокислоты динатриевой соли моногид- рата.
Figure imgf000038_0001
В трёхгорлую колбу вместимостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 4.3 г (10 мМ) 3-(1- (2,3 ,4-триметоксибензил)пиперазин-4-ил)-2-гидрокси- 1 -пропансульфоновой кислоты натриевой соли (полученной как описано в Примере 3) и 60 мл ди- хлорметана. При комнатной температуре прикапывают 1.5 г (15 мМ) триэти- ламина, охлаждают смесь льдом и прикапывают раствор 2.4 г (15 мМ) пири- дин-триоксид серы комплекса в 20 мл дихлорметана в течение 20 мин, под- держивая температуру реакционной среды в диапазоне 10-^15 °С. Перемеши- вают в течение 2 ч при 20 °С. При охлаждении льдом прикапывают 5 мл 3 М раствора Na2C03 (15 мМ). Смесь упаривают досуха в вакууме при темпера- туре 50+-60 °С. Остаток обрабатывают 100 мл этанола и кипятят с обратным холодильником при перемешивании в течение 0.5 ч. Смесь отфильтровывают горячей. Фильтрат упаривают в вакууме около ~20 мм. рт. ст. до VA объёма. Осадок отфильтровывают, промывают дважды по 50 мл аце- тона, белый порошок сушат в течение 12 ч при температуре 40 °С.
Выход C17H26N2OioS2Na2*H20, 2-сульфоокси-3-(4-((2,3,4-триметокси- фенил)метил)пиперазин- 1 -ил)пропан- 1 -сульфокислоты динатриевой соли моногидрата - 2.4 г (44 %). Элементный анализ Ci7H26N2OioS2Na2*H20. Вы- числено, %: С 37.36; Н 5.16; N 5.13. Найдено, %: С 37.40; Н 5.18; N 5.1 1.
Масс-спектр, найдено: m/z 528.3. Вычислено: М 528.50.
Пример 15. Синтез 2-ацетокси-3-(4-((2, 3, 4-триметоксифенил) метил) - пиперазин-1-ил)пропан-1 -сульфокислоты натриевой соли моногидрата.
Figure imgf000039_0001
В трёхгорлую колбу вместимостью 250 мл, снабженную магнитной мешалкой, капельной воронкой и термометром, помещают 4.3 г (10 мМ) 3-(1- (2,3,4-триметоксибензил)пиперазин-4-ил)-2-гидрокси-1-пропансульфоновой кислоты натриевой соли (из Примера 3) и 60 мл дихлорметана. При комнат- ной температуре прикапывают раствор 1.5 г (15 мМ) триэтиламина, охлаж- дают смесь льдом и прикапывают раствор 1.23 г (10 мМ) ацетилбромида в 20 мл дихлорметана в течение 20 мин, поддерживая температуру реактион- ной среды в диапазоне 10-^-15 °С. Перемешивают в течение 1 ч при 20 °С. Смесь упаривают досуха в вакууме при температуре 50-Н ОС. Остаток обра- батывают 100 мл этанола и кипятят с обратным холодильником при переме- шивании в течение 0.5 ч. Смесь отфильтровывают горячей. Фильтрат упари- вают в вакууме при -20 мм.рт.ст. до 1А объёма. Осадок отфильтровывают, промывают дважды по 50 мл ацетона, белый порошок сушат в течение 12 ч при температуре 40 °С.
Выход Ci9H29N208SNa*H20, 2-ацетокси-3-(4-((2,3,4-триметоксифенил)- метил)пиперазин-1-ил)пропан-1-сульфокислоты натриевой соли моногидрата - 2.9 г (60 %). Элементный анализ Ci9H29N208SNa*H20. Вычислено, %: С 46.91 ; Н 6,42; N 5.76. Найдено, %: С 46.85; Н 6,40; N 5.79 .
Масс-спектр, найдено: m/z 468.55. Вычислено: М 468.50.
Пример 16. Исследование антиагрегантных и антикоагулянтных свойств Ν,Ν '-замещенных пиперазинов на примере донорской крови человека
Кровь получали путем пункции локтевой вены донора сухой острой иг- лой без шприца. За 7-5-10 дней до исследования отменяли прием препаратов, влияющих на функцию тромбоцитов.
В пластиковую мерную центрифужную пробирку помещали 1 мл 3.8 % раствора трехзамещенного основного цитрата натрия с рН=7.4. Пунктирова- ли локтевую вену, собирали свободно вытекающую кровь до метки 10 мл, смесь немедленно перемешивали, не допуская образования воздушных пузы- рей. Полученную стабилизированную кровь разливали в 2 пробирки, по 5 мл в каждую.
Для получения богатой тромбоцитами плазмы, стабилизированную кровь центрифугировали 8 мин при комнатной температуре и 1000 об/мин (150g). Повторным центрифугированием крови в течение 20 мин при 3200 об/мин (2300 g) и 22 °С получали бедную тромбоцитами плазму.
Исследование антикоагулянтной активности проводилось в течение 2 ч после получения богатой тромбоцитами плазмы. Плазму стандартизовали до получения концентрации тромбоцитов 200-250x109/л, добавляя бестромбо- цитарную плазму. Концентрацию тромбоцитов определяли на анализаторе СОЛАР АР 21 10. Антиагрегантные свойства Ν,Ν'- замещенных пиперазинов оценивали по их влиянию на агрегацию тромбоцитов в тестах с АДФ-, коллаген- и рис- тоцетин- индуцированной агрегации. Для растворения Ν,Ν' -замещенных пиперазинов и разведения реагентов использовали Трис-НС1-буфер, рН=7.4.
В качестве основной характеристикой агрегационной активности тром- боцитов принята максимальная амплитуда агрегации (МА) - максимальное значение коэффициента пропускания пробы после внесения агрегирующего агента, в % к пропусканию бестромбоцитарной плазмы. Реакция фиксирова- лась на прямолинейном участке подъема кривой агрегации в течение 16 сек.
Измерения проводили на 4-х канальном анализаторе CHRONO-LOG
490-4D (CHRONO-LOG, США). Температура в ячейке - 37 °С, скорость вра- щения магнитной мешалки - 1200 об/мин.
0.5 мл раствора Ν,Ν' -замещенного пиперазина вносили в кювету, добав- ляли стандартизованную тромбоцитарную плазму (0.4 мл), перемешивали, инкубировали при 37 °С в течение 5 мин. Кювету помещали в агрегометр, добавляли 0.05 мл раствора индуктора агрегации (АДФ, или коллаген, или ристоцетин), и регистрировали агрегацию тромбоцитов в течение 3-х минут.
В тесте АДФ-индуцированной обратимой агрегации тромбоцитов ис- пользовался реактив CHRONO-PAR ADP REAGENT (CHRONO-LOG, США) с концентрацией 10 мкМ. Первичную (обратимую) агрегацию тромбоцитов оценивали по реакции на добавление к плазме пороговой дозы АДФ (кон- центрация АДФ - 1 мкМ).
В тесте коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов реактив CHRONO-PAR COLLAGEN (CHRONO-LOG, США) разводили буфером до концентрации коллагена 10 мкг/мл.
Для исследования ристоцетин-индуцированной агрегации тромбоцитов реактив CHRONO-PAR RISTOCETIN (CHRONO-LOG, США) разводили бу- фером до концентрации ристоцетина 12 мг/мл. Измеряли амплитуду агре- гации тромбоцитов через 60 сек после начала реакции. Изучение антиагрегантных свойства Ν,Ν' -замещенных пиперазинов с индуктором арахидоновой кислотой (CHRONO-LOG, США): к 450 мкл тромбоцитарной плазмы добавляли 50 мкл раствора Ν,Ν'- замещенного пиперазина, инкубировали в течение 15 мин при 36 °С в кюве- те агрегометра CHRONO-LOG. Концентрация арахидоновой кислоты в про- бе - 0.2 мМ, Ν,Ν' -замещенных пиперазинов, препарата сравнения аспирина - 4+5 мМ/л.
Было показано, что Ν,Ν' -замещенные пиперазины имеют выраженную аспирино-подобную активностью, ингибируя агрегацию тромбоцитов, инду- цируемую арахидоновой кислотой (таблица 5).
Для исследования антикоагулянтных свойств Ν,Ν' -замещенных пипе- разинов определяли активированное парциальное тромбопластиновое время (АПТВ) - способность Ν,Ν' -замещенных пиперазинов удлинять время свер- тывания бедной тромбоцитами плазмы по сравнению с контролем. Исполь- зовали набор реагентов для определения АПТВ (РосНИИГТ МЗ РФ по ТУ 9398-214-01966456-99) и коагулометр COAG-A-MATE ® ХМ (ORGANON ΤΕΚΝΙΚΑ, США).
Растворы Ν,Ν' -замещенных пиперазинов смешивали с бедной тромбо- цитами плазмой в соотношении 1 : 1 , прибавляли 0.1 мл реактива АПТВ, смесь инкубировали в кювете при 37 °С 5 мин, добавляли 0.1 мл 0.277 % СаС12. Определяли время свертывания, в сек.
Результаты исследования свойств Ν,Ν' -замещенных пиперазинов представ- лены в таблицах 1-5 (приложение). Как следует из этих данных, Ν,Ν'- замещенные пиперазины - это соединения с селективным влиянием на фак- торы коагуляционного каскада и высокой антиагрегантной и антикоагулянт- ной активностью. Антиагрегантная и антикоагулянтная активность соедине- ний по настоящему изобретению превышает активность препаратов
Figure imgf000043_0001
Figure imgf000044_0001
Figure imgf000045_0001
Figure imgf000046_0001
Figure imgf000047_0001
Figure imgf000048_0001
Figure imgf000049_0001
Пример 17. Исследование антиагрегантных и антикоагулянтных
Ν,Ν '-замещенных пиперазинов in vivo
Figure imgf000050_0001
Figure imgf000051_0001
Исследования Ν,Ν' -замещенных пиперазинов in vivo выполнялись на крысах-самцах линии Вистар массой 300 ± 30 г (возраст 15-25 недель). Жи- вотные содержались на неограниченном потреблении корма и воды.
Изучалось влияние Ν,Ν' -замещенных пиперазинов на показатели АДФ- индуцированной агрегации тромбоцитов и фибринолитическую активность крови.
Внутривенное введение (в/в): 1 мл раствора Ν,Ν' -замещенного пипера- зина или 1 мл раствора препарата сравнения озагрела вводили болюсно в хвостовую вену ненаркотизированных крыс.
Пероралъное введение (в/ж): 0.2 г композиции, содержащей Ν,Ν'- замещенный пиперазин, или препарат сравнения озагрел (Таблица 6), смешивали с 1.5 мл воды, суспензию вводили в/ж жестким металличе- ским зондом. Дозу действующего вещества рассчитывали в мМ на 1 кг массы крысы. В контроле аналогично вводили физиологический раствор (1.5 мл).
Сразу после введения препаратов животных помещали в отдельные стандартные клетки для наблюдения.
Забор крови, стабилизированной гепарином (50 ед/мл), осуществляли в течение 40-НЗО с из бедреной вены под наркозом (тиопентал-натрий, 50 мг/кг внутрибрюшинно, в 1 мл физиологического раствора). Соотношение крови и стабилизатора составляло 9: 1. Кровь помещали в силиконизированные про- бирки и осторожно перемешивали.
Исследование агрегационной активности тромбоцитов производили в цельной крови через 30 мин от момента забора крови.
Определение проводилось на импедансном агрегометре АИ-300 (НПО им. Коминтерна совместно с НИИ кардиологии МЗ РФ им. В.А. Алмазова) проводили при температуре 37 °С и постоянной скорости перемешивания (1 100 об/мин) в интактной среде (Иванов В. И. и др.; Авторское свидетельст- во SU 1504591 А1, 1989, бюл. N32). Электроды датчиков при соприкоснове- нии с перемешиваемой кровью покрываются сначала тромбоцитами в один слой. При внесении индуктора развивается агрегация тромбоцитов, в резуль- тате количество тромбоцитов на электродах увеличивается. Утолщение по- крывающего электроды слоя при агрегации тромбоцитов приводит к увели- чению импеданса между электродами.
В кювету с магнитной мешалкой помещали 0.55 мл цельной крови крыс и проводили прединкубацию при 37 °С в течение 2-3 мин в термостате. Затем в кювету помещали датчик, переносили в специальную камеру прибора и после включения перемешивания вносили индуктор агрегации - раствор ди- натриевой соли АДФ с концентрацией 0.25 мМ. Соотношение объемов ин- дуктора агрегации и пробы цельной крови составляло 1 : 12. Определение ин- тенсивности агрегации производили импедансным методом через 5 мин от момента ввода индуктора (Таблица 7).
Figure imgf000053_0001
Исследование влияния Ν,Ν' -замещенных пиперазинов на фибриноли- тическую активность крови крыс оценивали по времени спонтанного лизиса сгустка, получаемого из эуглобулиновой фракции плазмы. Метод является одним из интегральных методов оценки состояния фибринолитической сис- темы. Отбор стабилизированной цитратом натрия (3.2 %) крови осуществляли под наркозом (тиопентал-натрий 50 мг/кг, внутрибрюшинно в 1 мл физиологического раствора), в течение 60 с из бедренной вены.
Соотношение крови и стабилизатора составляло 9: 1. Стабилизирован- ную кровь центрифугировали в течение 10 мин при скорости 1200g. Иссле- довали бедную тромбоцитами плазму с реагентом для исследования спон- танного эуглобулинового фибринолиза фирмы ООО «Технология-стандарт» (Россия, Барнаул). Перед определением реагенты разводили дистиллирован- ной водой до концентрации реагентов: кальция хлорид - 0.277 %, уксусная кислота - 1 %.
Для получения эуглобиновой фракции плазмы в пробирке последова- тельно смешивали 8 мл воды д/и, 0.18 мл 1 % уксусной кислоты и 0.5 мл плазмы. Смесь инкубировали при температуре 4-^8 °С в течение 30 мину, центрифугировали при 600 g в течение 5 мин. Надосадочную жидкость сли- вали, пробирку опрокидывали на фильтровальную бумагу на 1 мин. Остав- шийся на дне пробирки осадок эуглобулинов разводили в 0.5 мл рабочего буфера.
К 0.5 мл раствора эуглобулинов в пробирке добавляли 5 мл 0.277 % раствора СаС12, осторожно перемешивали, избегая встряхивания, инкубиро- вали на водяной бане при температуре 37 °С.
Регистрировали время (мин) от момента добавления раствора СаС12 до полного растворения сгустка. В норме у здоровых крыс время спонтанного лизиса эуглобулинов составляет 90-180 минут. Укорочение времени лизиса свидетельствует об активации, а удлинение - об угнетении фибринолиза (Таблица 8).
Figure imgf000055_0001
Пример 18. Исследование влияния Ν,Ν '-замещенных пиперазинов на систему гемостаза. Модель экспериментального тромбоза
Исследования выполнялись на крысах-самцах линии Вистар массой 230±30 г (питомник лабораторных животных «Рапполово», РАМН). Живот- ные содержались на неограниченном потреблении корма (стандартный ра- цион для лабораторных крыс К- 120 фирмы «Информ-корм», Россия) и воды. Препарат вводили болюсно в хвостовую вену ненаркотизированным животным. В контроле вводили физраствор (5 мл/кг). Сразу после введения животных помещали в отдельные стандартные клетки для наблюдения.
Моделирование тромбоза: через 50 мин после введения препарата в ле- вую бедренную вену вводили 1 мл раствора фотосенсибилизатора Бенгаль- ский розовый A (Acros Organic, США) в дозе 17 мг/кг [Boselli 2007, Петри- щев 2009], производили разрез длиной около 2 см на внутренней поверхно- сти правого бедра животного. Участок бедренной артерии длиной около 5 мм освобождали от окружающих тканей, выделяли из сосудисто-нервного пучка. Под данный участок артерии подводили полоску непрозрачного чер- ного пластика шириной 3 мм, изолируя тем самым вену и окружающие ткани от облучения. Облучение проводили при помощи диодного лазера «DPSS- лазер» (Diode Pumpd Solid State Laser, Южная Корея). Длина волны 532 нм, мощность 60 мВт, площадь облучения - 1 мм , продолжительность облуче- ния - 40 минут. Кровоток в бедренной артерии измеряли при помощи высо- кочастотной ультразвуковой допплерографии (прибор «Минимакс-Допплер- К», частота датчика 20 мГц). Измеряли изменение скорости кровотока в про- цессе облучения артерии (Таблица 9).
Figure imgf000056_0001
Figure imgf000057_0001
Пример 19. Исследование ёазодилаторных свойств Ν,Ν '-замещенных пипера- зинов
Вазодилаторные свойства Ν,Ν' -замещенных пиперазинов оценилились по их влиянию на реактивность сосудов микроциркуляторного русла.
Исследования выполнялись на крысах-самцах линии Вистар массой 300±30 г (питомник лабораторных животных «Рапполово» РАМН). Живот- ные содержались на неограниченном потреблении корма (стандартный раци- он для лабораторных крыс К- 120 фирмы «Информ-корм», Россия) и воды.
Растворы Ν,Ν' -замещенных пиперазинов и физраствор (контроль) вво- дили болюсно, в течение 1 мин в хвостовую вену ненаркотизированных животных из расчета 5,0 мл на 1 кг. Сразу после введения раствора животных помещали в отдельные стандартные клетки для наблюдения.
Через 30 мин после введения животных наркотизировали (тиопентал- натрий, 60 мг/кг подкожно). Через нижнесрединный доступ извлекали петлю тонкой кишки, примыкающей к мезоаппендиксу для исследования микро- циркуляции в венулах и артериолах брыжейки в проходящем свете и поме- щали крысу на термостатируемый предметный столик микроскопа. Аппли- кацию раствора норадреналина (Агетан, 2 мг/мл, Laboratoire AGUETTANT, Франция) производили непосредственно на брыжейку
(Furness J.B., Marshall J.M., 1974; Янтарева Л.И., 2004).
Изучения сосудов микроциркуляторного русла проводили на базе микроскопа ЛЮМАМ И1 (ЛОМО, Россия). С помощью видеокамеры (Optics and Electronics ISTA Ltd) производили видеозапись данных на персональный компьютер, обработку резельтатов осуществляли по программе Video-Test 4.0 (ISTA Ltd., Россия). Определяли: диаметр сосудистой стенки (D, мкм) до и после аппликации норадреналина, время начала замедления кровотока в сосудах под действием норадреналина (наблюдение производились в течение 1 мин после аппликации).
Figure imgf000058_0001
Figure imgf000059_0001
Проведенные фармако-биологические испытания показали, что Ν,Ν'- замещенные пиперазины обладают антиагрегантными, антикоагулянтными и вазодилатирующими свойствами. Композиции на основе Ν,Ν' -замещенных пиперазинов положительно влияют на восстановление системы гемостаза.

Claims

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. N, Ν'-замещенные пиперазины общей формулы:
Figure imgf000060_0001
1 2
где R , R : линейный или разветвленный алкил (С^С линейный или разветвленный алкокси (С^С СН3С(=0)0, галоген;
n=l-5; m=(H3; Z=CH2, С=0, S02;
X: C(=NH)NH2, C(=NH)NHC(=NH)NH2, CH2(CHR3)pCH2S03H, где R3= H, OH, CH3C(=0)0; HO-S02-0, р=0-1 ;
G - низкомолекулярная органическая или минеральная кислота, ка- тионы натрия, калия, аммония или вода,
обладающие сочетанной антиагрегантной, антитромболитической и ва- зодилаторной активностью.
2. N, N' -замещенные пипе азины общей формулы (И):
Figure imgf000060_0002
где R , R : линейный или разветвленный алкил (Ci-^-C4), линейный или разветвленный алкокси (Ci^C4), СН3С(=0)0, галоген;
n=l-5; m=0-3; Z=CH2, С=0, S02;
X: C(=NH)NH2, C(=NH)NHC(=NH)NH2,
G - низкомолекулярная органическая или минеральная кислота.
3. Способ получения Ν, Ν'- замещенных пиперазинов по п.
2 путем взаимодействия Ν-замещенных пиперазинов общей формулы
Figure imgf000061_0001
1 2
где R , R : линейный или разветвленный алкил (С^С линейный или разветвленный алкокси (d+C4), СН3С(=О)0, галоген;
п=1+5; m=0-3; Z=CH2, С=0, S02;
с карбоксамидирующими реагентами в органических растворителях или воде при температуре 10 - 50 °С в присутствии оснований.
4. Способ получения N, Ν'-замещенных пиперазинов по п.З, отличающий- ся тем, что в качестве Ν-замещенных пиперазинов используют их гид- раты.
5. Способ получения N, Ν'-замещенных пиперазинов по п.З, отличающий- ся тем, что в качестве Ν-замещенных пиперазинов используют их соли.
6. Способ получения Ν,Ν' -замещённых пиперазинов по п. 3, отличающий- ся тем, что в качестве карбоксамидирующих реагентов используют \Н- пиразол-1-карбоксамидин, дициандиамид и их соли.
7. Способ получения Ν,Ν' -замещённых пиперазинов по п. 3, отличающий- ся тем, что в качестве оснований используют гидроксиды или карбонаты щелочных металлов, а так же их органические основания.
8. Способ получения Ν,Ν' -замещенных пиперазинов по п. 3 отличающий- ся тем, что в качестве органических растворителей используют низшие алифатические спирты, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диметилформа- мид, диметилсульфоксид, дихлорметан или их смеси.
9. Ν, Ν'-замещенные пипе азины общей формулы
Figure imgf000061_0002
Figure imgf000062_0002
линейный или разветвленный алкил (С^С4), линейный или разветвленный алкокси (С1+С4), СН3С(=0)0, галоген; n=l-5; m=0-3; Z=CH2, СЮ, S02;
X: CH2(CHR3)pCH2S03H, где R3= Н, ОН, СН3С(Ю)0; HO-S02-0,
Р=0Н ;
G - низкомолекулярная органическая или минеральная кислота, ка- тионы натрия, калия, аммония или вода.
10. Способ получения N, N' -замещенных пиперазинов по п. 9 путем взаи- модействия Ν-замещенных пипе азинов общей формулы
Figure imgf000062_0001
'у
где R , R : линейный или разветвленный алкил (Ci^C4), линейный или разветвленный алкокси (С1+С4), СН3С(Ю)0, галоген;
n=K5; m=0-3; Z=CH2, СЮ, S02;
с галогеналкилсульфокислотами или их солями в органических раство- рителях или воде при температуре 10 - 100 °С в присутствии оснований.
1 1. Способ получения N, Ν'-замещенных пиперазинов по п.10, отличаю- щийся тем, что в качестве Ν-замещенных пиперазинов используют их гидраты.
12. Способ получения N, Ν'-замещенных пиперазинов по п.10, отличаю- щийся тем, что в качестве Ν-замещенных пиперазинов используют их соли.
13. Способ получения N, Ν'-замещенных пиперазинов по п. 10, отличаю- щийся тем, что в качестве органических растворителей используют низшие алифатические спирты, ацетонитрил, тетрагидрофуран, диме- тилформамид, диметилсульфоксид, дихлорметан, хлороформ или их смеси.
14. Способ получения Ν, Ν'- замещенных пиперазинов по п. 10, отличающийся тем, что в качестве галогеналкилсульфокислот или их солей используют 2-бромэтансульфокислоту, 2-гидрокси-З- хлорпропансульфокислоту или их натриевые соли.
15. Способ получения Ν, Ν'-замещенных пиперазинов по п. 10, отличаю- щийся тем, что в качестве оснований используют аммиак, натрия гидро- ксид, или калия гидроксид, или карбонат натрия, или гидрокарбонат на- трия, или карбонат калия, или гидрокарбонат калия.
PCT/RU2011/000866 2010-12-30 2011-11-08 N, ν'-замещенные пиперазины, обладающие сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью и способ их получения WO2012091625A1 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US13/976,544 US9249115B2 (en) 2010-12-30 2011-11-08 N,N1 substituted piperazines having combined antiaggregant, anticoagulant and vasodilatory activity, and method for producing same

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2010154824 2010-12-30
RU2010154824/04A RU2469029C2 (ru) 2010-12-30 2010-12-30 Вещество, обладающее сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью, n,n'-замещенные пиперазины и способ их получения (варианты)

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2012091625A1 true WO2012091625A1 (ru) 2012-07-05

Family

ID=46383377

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2011/000866 WO2012091625A1 (ru) 2010-12-30 2011-11-08 N, ν'-замещенные пиперазины, обладающие сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью и способ их получения

Country Status (3)

Country Link
US (1) US9249115B2 (ru)
RU (1) RU2469029C2 (ru)
WO (1) WO2012091625A1 (ru)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2577039C2 (ru) * 2014-02-28 2016-03-10 Закрытое Акционерное Общество "Вертекс" Вещество, обладающее сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью, и способ получения n, n'-замещенных пиперазинов
CA2974894A1 (en) * 2015-01-27 2016-08-04 Astrazeneca Ab Method of treating or prevention of atherothrombotic events in patients with history of myocardial infarction
WO2023235297A1 (en) * 2022-06-03 2023-12-07 Imbria Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods for increasing efficiency of cardiac metabolism

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS151752B1 (ru) * 1971-04-13 1973-11-19

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0927035A4 (en) * 1996-09-13 2002-11-13 Merck & Co Inc THROMBIN INHIBITORS
RU2320661C2 (ru) * 2006-03-15 2008-03-27 Государственное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Пермская государственная фармацевтическая академия Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию Российской Федерации" (ГОУ ВПО ПГФА Росздрава) 1,4,5,6-тетрагидро-6-оксо-5-(2-пиперазиноэтил)-4-фенил-3-(4-хлорфенил)пирроло[3, 4-с]пиразола дигидрохлорид, проявляющий гипотензивную и антикоагулянтную активности

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CS151752B1 (ru) * 1971-04-13 1973-11-19

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DATABASE CA "compounds with RN 21730-57-4P", accession no. STN Database accession no. 70:87848 *
PROTIVA, M. ET AL.: "1-(2, 4, 6-Trimethylbenzyl)piperazine and some of its 4- substituted derivatives: Synthesis and pharmacological screening", COLLECTION OF CZECHOSLOVAK CHEMICAL COMMUNICATIONS, vol. 41, no. 4, 1976, pages 1035 - 1041 *
PROTIVA, M. ET AL.: "1-Aryl- and I-(arylmethyl)-4-guanylpiperazines and other heterocyclic and alicyclic guanidine derivatives", COLLECTION OF CZECHOSLOVAK CHEMICAL COMMUNICATIONS, vol. 40, no. 12, 1975, pages 3904 - 3923 *
SOUTH WICK P.L. ET AL.: "The synthesis of I-amidino-4-aroylpiperazines", ORGANIC PREPARATIONS AND PROCEDURES INTERNATIONAL, vol. 8, no. 5, 1976, pages 205 - 210 *

Also Published As

Publication number Publication date
RU2469029C2 (ru) 2012-12-10
US20130267707A1 (en) 2013-10-10
US9249115B2 (en) 2016-02-02
RU2010154824A (ru) 2012-07-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2126791C1 (ru) Производные гидроксамовой кислоты, способ их получения и фармацевтическая или ветеринарная композиция на их основе
JP6533159B2 (ja) ニトロキシル供与体を含む医薬組成物
AU2013235729B2 (en) Compositions and methods for inhibition of cathepsins
DK155003B (da) Analogifremgangsmaade til fremstilling af amidin-derivater eller farmaceutisk acceptable syreadditionssalte deraf
JP2000507975A (ja) Ｎ−ヒドロキシ−β−スルホニルプロピオンアミド誘導体類及びそれらのマトリックスメタロプロテイナーゼ阻害薬としての使用
BRPI0612309B1 (pt) compostos e composições farmacêuticas antivirais
CA2570694A1 (en) Amido compounds and their use as pharmaceuticals
US20230100458A1 (en) Novel anthranilic amides and the use thereof
JP2011514364A (ja) 置換されたピロリジン及びピペリジン化合物、その誘導体、並びに疼痛を治療するための方法
TWI594975B (zh) 二羧酸化合物
JP5345213B2 (ja) ２−メチル−５Ｈ−ベンゾ［ｄ］ピラゾロ［５，１−ｂ］［１，３］オキサジン−５−イミン化合物及びその調製方法並びに使用
CN115381827B (zh) 苯骈三氮唑烷基衍生物在制备治疗或预防心血管疾病的药物中的应用
WO2012091625A1 (ru) N, ν'-замещенные пиперазины, обладающие сочетанной антиагрегантной, антикоагулянтной и вазодилаторной активностью и способ их получения
JP6134731B2 (ja) 抗凝固剤拮抗剤
CN103420980A (zh) 达比加群衍生物
CN103524559B (zh) 多取代4-甲氨基苯甲脒的酯衍生物及其制备方法和用途
JPS609716B2 (ja) １，２―ベンズインチアゾリン―３―オン類、それらの製造法および医薬としての使用
EA020915B1 (ru) Новые соединения, обладающие функцией антикоагулянтов, фармацевтические композиции на их основе для лечения тромботических состояний и плазмозамещающий раствор для коррекции гиперкоагуляционных нарушений при гемодилюции
RU2641030C2 (ru) Комплексные соединения трехвалентного железа для лечения и профилактики симптомов дефицита железа и железодефицитных анемий
JP2011213718A (ja) アミノ酸誘導体を含有する医薬及び該誘導体の製造方法
JP2014510765A (ja) 新規抗血小板化合物の付加塩
CZ300158B6 (cs) Benzoylguanidinové deriváty
CN108997230A (zh) 具有基质金属蛋白酶抑制活性的喹喔啉衍生物及其制备方法和应用
CN116375685B (zh) 一种法舒地尔衍生物及其制备方法和应用
CN104447484B (zh) 含烷氧苯基和二烯金刚烷结构的化合物、其制备方法和用途

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 11854272

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 13976544

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 11854272

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1