WO2010131691A1 - ポリケチド化合物 - Google Patents

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WO2010131691A1
WO2010131691A1 PCT/JP2010/058076 JP2010058076W WO2010131691A1 WO 2010131691 A1 WO2010131691 A1 WO 2010131691A1 JP 2010058076 W JP2010058076 W JP 2010058076W WO 2010131691 A1 WO2010131691 A1 WO 2010131691A1
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salt
ringworm
formula
capnodiaceae
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PCT/JP2010/058076
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恵介 大隅
照久 正木
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アステラス製薬株式会社
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    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi

Definitions

  • the present invention relates to a pharmaceutical composition, particularly a cyclic compound useful as an active ingredient of a pharmaceutical composition for treating ringworm, protozoal infection, and / or Pneumocystis pneumonia.
  • onychomycosis is caused by infecting the nails with ringworm fungus (aquatic fungus). Since tinea pedis, a so-called athlete's foot, has been left untreated, it often develops due to the migration of ringworm bacteria from the skin of the foot into the nail, and the main symptoms are clouding and thickening of the nail.
  • ringworm fungus aquatic fungus
  • tinea pedis a so-called athlete's foot
  • Terbinafine has been reported to have weak activity against dormant bacteria present in the vicinity of the infection (Mycoses, 46, pp.506-510, 2003). Long-term administration of drugs is essential to treat onychomycosis. In the nail of onychomycosis, bacteria that are growing, that is, mycelial elongation, and bacteria that are dormant, that is, spores and mycelial growth are stopped are mixed. In the nail penetrated by Terbinafine, the growing fungus is killed, so the ringworm does not infect the newly created nail. Since dormant bacteria are not sterilized by Terbinafine, the cure of onychomycosis requires administration for about 6 months until the nail changes. Therefore, if a dormant bacterium can be sterilized, it can be sterilized before the nail grows, so that it can be expected to shorten the treatment period and show a high cure rate.
  • the compound having a 4-hydroxy-2-one skeleton for example, Funiculosin (formula D, however, wherein --- is a double bond), Tetrahydrofuniculosin (formula D, In the formula, - - is a single bond), there is Ilicicolin H (formula E) or the like.
  • Funiculosin is an antifungal active substance isolated from a culture solution of Penicillium funiculosum (Non-Patent Documents 1, 2, etc.), and Tetrahydrofuniculosin is a compound semi-synthesized from Funiculosin (Patent Document 1, Non-Patent Documents 3 and 4).
  • Ilicicolin H is an antifungal active substance isolated from the culture solution of the incomplete bacterium Cylindrocladium iliciola MFC-870 (Non-patent Documents 5 and 6).
  • a compound useful as an active ingredient of a pharmaceutical composition a pharmaceutical composition for treating ringworm, protozoal infection, and / or Pneumocystis pneumonia.
  • Capnodiaceae strain No. 339855 Capnodiaceae strain ⁇ ⁇ No. 339855
  • the present inventors have succeeded in isolating this polyketide compound having an excellent antibacterial action from the culture solution of this strain, and completed the present invention.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition comprising a compound of formula (I) or a salt thereof, and a compound of formula (I) or a salt thereof, and an excipient, in particular, ringworm, protozoal infection, and
  • the present invention relates to a pharmaceutical composition that is a preventive or therapeutic agent for Pneumocystis pneumonia.
  • the invention provides a compound of formula (I) or a salt thereof for use in the prevention or treatment of ringworm, protozoal infection, and / or Pneumocystis pneumonia, ) Or a salt thereof, and a method for the treatment of ringworm, protozoan infection, and Pneumocystis pneumonia.
  • the present invention also includes culturing Capnodiaceae microorganisms having the ability to produce the compound of formula (I), preferably Capnodiaceae strain No. 339855 (Capnodiaceae strain No. 339855) or mutants thereof. And a method for producing a compound of (I) or a salt thereof, comprising isolating the compound of formula (I) or a salt thereof from the culture.
  • the present invention relates to a capnody deposited as NITE BP-735, a deposit number, NITE BP-735, which is a novel microorganism having the ability to produce the compound of formula (I), which is the National Institute for Product Evaluation Technology Patent Microorganism Depositary. It also relates to Aceae strain No.339855 (Capnodiaceae strain No.339855) or its mutants.
  • the compound of formula (I) or a salt thereof may be used to treat ringworm, such as ringworm granuloma, onychomycosis, hand / foot ringworm, body ringworm, hip ringworm, hairy coat ringworm, head Ringworm, Celsus pressure ulcer, tinea dermatosis, acute hairy deep tinea, and / or acute hairy deep tinea, etc.), protozoal infections (eg, malaria, toxoplasmosis), And / or can be used as a preventive and / or therapeutic agent for Pneumocystis pneumonia (formerly Carini pneumonia).
  • ringworm such as ringworm granuloma, onychomycosis, hand / foot ringworm, body ringworm, hip ringworm, hairy coat ringworm, head Ringworm, Celsus pressure ulcer, tinea dermatosis, acute hairy deep tinea, and / or acute hairy deep tinea, etc.
  • protozoal infections
  • FIG. 1 is a diagram showing the 1 H-NMR spectrum (measurement solvent: CDCl 3 ) of Compound A.
  • FIG. 2 is a diagram showing a 13 C-NMR spectrum (measurement solvent: CDCl 3 ) of Compound A.
  • FIG. 3 is a diagram showing the 1 H-NMR spectrum (measurement solvent: CDCl 3 ) of Compound B.
  • FIG. 4 is a diagram showing a 13 C-NMR spectrum of Compound B (measuring solvent: CDCl 3 ).
  • the compound of the present invention may form a salt with a base.
  • Specific examples of such salts include inorganic bases such as sodium, potassium, magnesium and calcium.
  • the salt in the present invention includes so-called complex salts and chelate compounds.
  • the compound of the formula (I) has 7 or 8 asymmetric carbon atoms, and optical isomers based on this can exist.
  • the present invention encompasses both compounds of formula (I) isolated as a single optical isomer or compounds of formula (I) obtained as a mixture of isomers.
  • the present invention includes pharmaceutically acceptable prodrugs of the compound of formula (I).
  • Pharmaceutically acceptable prodrugs are for example those skilled in the art that one or more —OH possessed by a compound of formula (I) can be converted to the original —OH by solvolysis or under physiological conditions. Prodrugs that are chemically modified with well-known groups.
  • the present invention also includes various hydrates and solvates of the compound of formula (I) and salts thereof, and crystalline polymorphic substances.
  • the present invention also includes compounds labeled with various radioactive or non-radioactive isotopes.
  • Capnodiaceae strain No.339855 Capnodiaceae strain No.339855
  • a type of fungus was isolated from the fallen leaves of zelkova collected in Yoro Valley, Otaki-cho, Isumi-gun, Chiba Prefecture, by the wet chamber method. It was done.
  • This strain has been deposited in Japan with the National Institute for Product Evaluation Technology Patent Microorganisms Deposit Center (2-5-8 Kazusa-Kamashita, Kisarazu City, Chiba Prefecture, 292-0818, Japan) with the accession number NITE P-735 (date of access: 2009) April 16).
  • NITE P-735 date of access: 2009
  • the growth temperature of this bacterium was 12 ° C to 30 ° C, and the optimal growth temperature was 20 ° C to 25 ° C. These growth temperature data were measured on potato dextrose agar (Difco 2010). The growth possible pH was 2.02 to 11.46, and the optimum growth pH was 5.45 to 6.15. The viable pH was measured with YM broth (Difco).
  • Morphological features were determined based on culture on corn meal agar.
  • the vegetative mycelium was brown and the thickness was 2.3 to 4.0 ⁇ m. No thick film spores were observed.
  • the conidial pattern was not branched and formed a determinate synnemata.
  • the total length was 200 to 260 mm, and the thickness was 8 to 10 mm.
  • the base of the synnema spread to form a stroma, and the width was 30-40 ⁇ m.
  • the morphology is similar to the genus Graphium, but the mycelial bundle was slightly swollen at the top of the synnema and narrowed again at the tip. Furthermore, several setae (about 20 ⁇ m) were formed so as to surround the tip.
  • Colorless conidia were formed in the narrowed tip, and dropped into the upper part of the cinema.
  • the conidia were elliptical to cylindrical and had a size of (3.2 to 3.6) ⁇ (1.7 to 1.76) ⁇ m.
  • the surface was smooth with an optical microscope (400 ⁇ ).
  • This bacterium formed a cinema and the tip (upper part) swelled. Furthermore, several short setas characteristic of this bacterium were formed at the swollen tip. Since this bacterium is morphologically similar to the genus Graphium, homology search was performed using 28S rDNA. As a result, the present bacterium was close to the genus Capnodium, and the result was that it was different from the multiple strains of the genus Graphium. At present, this bacterium has been identified as one strain of Capnodiaceae (Capnodiaceae) and named as Capnodiaceae strain (No.339855).
  • Potato dextrose agar medium Sabouraud dextrose agar medium, oatmeal agar medium, malt extract agar medium, Czapek's agar medium, and MY20 agar medium showed almost similar properties. Therefore, the characteristics of potato dextrose agar medium as described above (2 ). In addition, since spore formation was confirmed only on the corn meal agar medium, the culture characteristics on the corn meal agar medium were also described in (2) above as a characteristic medium.
  • Capnodiaceae strain No. 339855 Capnodiaceae strain No. 339855 used in the present invention is not only a microorganism isolated from nature, This includes those artificially mutated with ultraviolet rays, radiation, chemical agents, etc., and natural mutants thereof.
  • the compound of the present invention is obtained by culturing a microorganism of the family Capnodiaceae having the ability to produce the compound of the present invention, preferably Capnodiaceae strain No. 339855 (Capnodiaceae strain No. 339855) or a mutant thereof. It is obtained by isolating the compound of the present invention from The culture is performed according to a general microorganism culture method.
  • the medium may be any medium containing a nutrient source used by Capnodiaceae strain No. 339855 (capnodiaceae strain No. 339855), and a synthetic medium, semi-synthetic medium or natural medium is used.
  • the composition of the medium is, for example, L-arabinose, D-xylose, D-glucose, D-fructose, sucrose, inositol, L-rhamnose, raffinose, D-mannitol, mannose, melibiose, lactose, D- Galactose, maltose, trehalose, salicin, xanthine, chitin, starch, glucose, dextrin, glycerin, vegetable oil, etc., as nitrogen sources are meat extract, peptone, gluten meal, cottonseed meal, soy flour, peanut flour, fish meal, corn steep Liquor, dry yeast, yeast extract, ammonium chloride, ammonium sulfate,
  • metal salts such as sodium, potassium, magnesium, calcium, zinc and cobalt, nitrates, carbonates, phosphates and the like are added as necessary. Furthermore, if necessary, a production promoting substance or an antifoaming agent such as methionine, cysteine, cystine, thiosulfate, methyl oleate, lard oil, silicone oil, and surfactant can be added.
  • the culture conditions it is generally advantageous to culture under aerobic conditions, and the culture temperature is in the range of 12 ° C to 30 ° C, preferably in the vicinity of 20 ° C to 25 ° C.
  • the culture period is appropriately set according to the composition of the medium and temperature conditions, but is usually about 1 to 30 days, preferably about 2 to 7 days.
  • a method of purifying and isolating a physiologically active substance from a normal microorganism culture is applied. That is, the culture is extracted with a suitable organic solvent, and the active substance is isolated from the extract by purification. That is, it is separated and purified by means used for the production of a general physiologically active substance using the difference in solubility and solubility in an appropriate solvent using antifungal activity as an index. These methods can be used alone as needed, or can be combined and repeated in any order.
  • Other purification methods include removing the cells by culturing the culture as it is, or centrifuging or filtering, and then the difference in solubility and solubility in an appropriate solvent, the difference in the precipitation rate from the solution, and various adsorbents.
  • a method using a difference in adsorption affinity, a difference in distribution between two liquid phases, and the like can be applied. Specifically, for example, a method of purifying the compound by bringing the culture solution into contact with an appropriate carrier to adsorb the compound and then eluting with an appropriate solvent can be mentioned. These methods can be used alone as needed, or can be combined and repeated in any order.
  • the compound of the formula (I) or a salt thereof of the present invention can be obtained by a conventional method from a culture in which the substance-producing microorganism is cultured in a nutrient medium and the compound is accumulated.
  • Any microorganism can be used as long as it is a microorganism belonging to the Capnodiaceae family and capable of producing the compound.
  • Capnodiaceae strain No. 339855 (Capnodiaceae strain No. 339855) deposited internationally as NITE BP-735 can be used.
  • a pharmaceutical composition containing one or more of the compounds of formula (I) or a salt thereof as an active ingredient is an excipient usually used in the art, that is, a pharmaceutical excipient or a pharmaceutical carrier. Can be prepared by a commonly used method.
  • Administration is orally by tablets, pills, capsules, granules, powders, liquids, etc., or injections such as intra-articular, intravenous, intramuscular, suppositories, eye drops, ophthalmic ointments, transdermal solutions, Any form of parenteral administration such as an ointment, a transdermal patch, a transmucosal liquid, a transmucosal patch, and an inhalant may be used.
  • Tablets, powders, granules, etc. are used as solid compositions for oral administration.
  • one or more active ingredients are combined with at least one inert excipient such as lactose, mannitol, glucose, hydroxypropylcellulose, microcrystalline cellulose, starch, polyvinylpyrrolidone. And / or mixed with magnesium aluminate metasilicate.
  • the composition may contain an inert additive, for example, a lubricant such as magnesium stearate, a disintegrant such as sodium carboxymethyl starch, a stabilizer, or a solubilizing agent according to a conventional method. .
  • tablets or pills may be coated with a sugar coating or a film of a gastric or enteric substance.
  • Liquid compositions for oral administration include pharmaceutically acceptable emulsions, solutions, suspensions, syrups or elixirs and the like, and commonly used inert diluents such as purified water. Or contains ethanol.
  • the liquid composition may contain solubilizers, wetting agents, auxiliaries such as suspending agents, sweeteners, flavors, fragrances and preservatives in addition to the inert diluent.
  • the injection for parenteral administration contains a sterile aqueous or non-aqueous solution, suspension or emulsion.
  • aqueous solvent include distilled water for injection or physiological saline.
  • non-aqueous solvents include propylene glycol, polyethylene glycol or vegetable oils such as olive oil, alcohols such as ethanol, or polysorbate 80 (a pharmacopeia name).
  • Such compositions may further contain isotonic agents, preservatives, wetting agents, emulsifying agents, dispersing agents, stabilizing agents, or solubilizing agents. These are sterilized by, for example, filtration through a bacteria-retaining filter, blending with a bactericide or irradiation. These can also be used by producing a sterile solid composition and dissolving or suspending it in sterile water or a sterile solvent for injection before use.
  • External preparations include ointments, plasters, creams, jellies, poultices, sprays, lotions, eye drops, eye ointments and the like.
  • ointment bases include commonly used ointment bases, lotion bases, aqueous or non-aqueous solutions, suspensions, emulsions, and the like.
  • ointment or lotion bases include polyethylene glycol, propylene glycol, white petrolatum, white beeswax, polyoxyethylene hydrogenated castor oil, glyceryl monostearate, stearyl alcohol, cetyl alcohol, lauromacrogol, sorbitan sesquioleate, etc. Can be mentioned.
  • a transmucosal agent such as an inhalant or a nasal agent
  • a solid, liquid or semi-solid agent is used and can be produced according to a conventionally known method.
  • known excipients and further pH adjusters, preservatives, surfactants, lubricants, stabilizers, thickeners and the like may be added as appropriate.
  • an appropriate device for inhalation or insufflation can be used.
  • a known device such as a metered dose inhalation device or a nebulizer
  • the compound is administered alone or as a powder in a formulated mixture or as a solution or suspension in combination with a pharmaceutically acceptable carrier. be able to.
  • the dry powder inhaler or the like may be for single or multiple administrations, and a dry powder or a powder-containing capsule can be used. Alternatively, it may be in the form of a pressurized aerosol spray using a suitable propellant, for example, a suitable gas such as chlorofluoroalkane, hydrofluoroalkane or carbon dioxide.
  • a suitable propellant for example, a suitable gas such as chlorofluoroalkane, hydrofluoroalkane or carbon dioxide.
  • the daily dose is about 0.01 to 100 mg / kg per body weight, preferably 0.1 to 10 mg / kg. Administer in divided doses.
  • the daily dose is suitably about 0.01 to 100 mg / kg per body weight, and is administered once to several times a day. The dose is appropriately determined according to individual cases in consideration of symptoms, age, sex, and the like.
  • the compound of the formula (I) can be used in combination with various therapeutic agents or preventive agents for diseases for which the compound of the formula (I) is considered to be effective.
  • the combination may be administered simultaneously, separately separately, or at desired time intervals.
  • the simultaneous administration preparation may be a compounding agent or may be separately formulated.
  • the manufacturing method of the compound of Formula (I) is demonstrated in detail.
  • this invention is not limited to the compound as described in the following Example.
  • the production method of the compound of the formula (I) is not limited to the production methods of the specific examples shown below, and the compound of the formula (I) may be a combination of these production methods or a person skilled in the art. It can also be produced by methods that are self-evident.
  • MeCN acetonitrile
  • MeOH methanol
  • MgSO 4 .7H 2 O magnesium sulfate heptahydrate
  • t-BuOH tert-butyl alcohol
  • TFA trifluoroacetic acid
  • HR ESI MS high resolution electrospray mass spectrometry
  • Example 1 (Culture production of Compound A and Compound B) Dispense seed medium (30 mL; 2% corn starch, 1% glycerin, 1% sucrose, 1% pharmame media, 1% gluten meal, 0.2% Tween 80) into Erlenmeyer flask (size: 100 mL) And sterilized in an autoclave (121 ° C., 30 minutes). Slope culture (slant culture) of Capnodiaceae strain No.339855 (Caprantiace strain No.339855) is inoculated aseptically into this seed medium and aseptically inoculated on a rotary shaker at 25 ° C for 4 days. Shake culture (220 rpm).
  • production medium ⁇ 20 mL; 4% glucose, 6% soluble starch (manufactured by Nacalai Tesque), 2% yeast extract (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 0.02% KCl, 0.02% MgSO 4. 7H 2 O, 1% K 2 HPO 4 , 1% ⁇ -cyclodextrin and 2% agar) were sterilized by an autoclave and dispensed into a petri dish (diameter 9 cm). A seed culture (2 mL) was aseptically applied to the petri dish and cultured at 25 ° C. for 10 days.
  • Example 2 The antifungal activity of the compound of the present invention was confirmed by the following method.
  • the antifungal activity against the following test bacteria was measured using a micro liquid dilution method (by Kume Mitsuko, Toshikazu Yamazaki, Clinical and Microbiology, Vol. 21, No. 5, pp. 573-580, 1994).
  • Compound A exhibited the activity shown below.
  • Table 1 shows the minimum inhibitory concentration (MIC) of Compound A.
  • ringworm specifically, for example, ringworm granuloma, onychomycosis, tinea pedis, body ringworm, hip ringworm, hairy hair ringworm, head ringworm, Celsus acne It has been shown to be useful for the treatment of trichodermatosis, acute hairy deep tinea, and / or acute hairy deep tinea.
  • Example 3 (Complex III inhibitory activity assay) Medium (0.1% glucose, 0.2% bactotryptone, 0.2% K 2 HPO 4 , 0.005% MgSO 4 .7H 2 O, 0.005% CaCl 2 .2H 2 O) in an Erlenmeyer flask The aliquot was sterilized by autoclaving. Trichophyton mentagrophytes FP2103 conidia were inoculated into this medium and cultured with shaking on a rotary shaker at 30 ° C. for 40 hours.
  • the bacterial cells are collected from this culture solution, and the bacterial cells are lysed with cell wall lysing enzyme solution ⁇ 1M KCl, 25 mM CaCl 2 ⁇ 2H 2 O, 10 mM MgCl 2 ⁇ 6H 2 O, 5 mg / mL zymolyce 100T ) 1 mg / mL chitinase (manufactured by Sigma), 5 mg / mL driselase (manufactured by Sigma) ⁇ and shaken at 30 ° C. for 4 hours.
  • the enzyme-treated solution was filtered through a funnel packed with gauze to obtain a protoplast.
  • Mitochondrial fraction was prepared from protoplasts using Mitochondria Isolation Kit (BioChain Institute, Inc.). Complex III inhibitory activity was measured by ubiquinol-cytochrome c reductase assay using the adjusted mitochondrial fraction (The Journal of Biological Chemistry, 279, pp. 8708-8714, 2004). As a result, Compound A inhibited complex III at 0.9 ng / mL.
  • the compound of the formula (I) or a salt thereof has a complex III inhibitory action. Therefore, it was suggested that it can be used for the treatment of protozoan infections (for example, malaria, toxoplasmosis) and / or Pneumocystis pneumonia.
  • protozoan infections for example, malaria, toxoplasmosis
  • Pneumocystis pneumonia for example, malaria, toxoplasmosis
  • Example 4 Cytotoxicity
  • EL-4 cells a mouse T lymphoma cell line
  • test drugs for cytotoxicity, EL-4 cells, a mouse T lymphoma cell line, were added with test drugs at various concentrations, cultured at 37 ° C for 72 hours in a CO 2 incubator, and then cell counting kit (manufactured by Wako Pure Chemical Industries, Ltd.). ), The number of cells was measured, and the IC 50 value was calculated and evaluated.
  • Compound A showed an IC 50 value of 6.2 ⁇ g / mL against EL-4 cells, and showed no cytotoxicity at a concentration of 3.1 ⁇ g / mL or less.
  • the compound of formula (I) or a salt thereof may be used to treat ringworm, such as ringworm granuloma, onychomycosis, hand / foot ringworm, body ringworm, hip ringworm, hairy coat ringworm, head Ringworm, quercus acne, tinea variola, acute hairy deep tinea, and / or acute hairy deep tinea, etc.), protozoal infections (eg, malaria, toxoplasma), and It can be used as a preventive and / or therapeutic agent for Pneumocystis pneumonia (formerly Carini pneumonia).
  • ringworm such as ringworm granuloma, onychomycosis, hand / foot ringworm, body ringworm, hip ringworm, hairy coat ringworm, head Ringworm, quercus acne, tinea variola, acute hairy deep tinea, and / or acute hairy deep tinea, etc.
  • protozoal infections eg, malaria, tox

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Abstract

【課題】白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎治療剤として有用な化合物を提供する。 【解決手段】カプノディアセアエ　ストレインＮｏ．３３９８５５（Ｃａｐｎｏｄｉａｃｅａｅ　ｓｔｒａｉｎ　Ｎｏ．３３９８５５）を採取し、その培養液からポリケチド化合物を単離した。当該ポリケチド化合物またはその塩は良好な抗白癬菌活性を有しており、医薬、殊に、白癬症の治療剤として有用であることを確認し、本発明を完成した。本発明の環状化合物またはその塩は、白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎（旧名カリニ肺炎）等の予防あるいは治療剤として使用しうる。

Description

ポリケチド化合物
　本発明は医薬組成物、特に、白癬症、原虫感染症、及び／又はニューモシスチス肺炎の治療用医薬組成物の有効成分として有用な環状化合物に関する。
　白癬症のうち、例えば、爪白癬症は白癬菌（水虫菌）が爪へ感染することにより生じる。足白癬、いわゆる水虫を治療せずに放置した為に、白癬菌が足の皮膚から爪の中に移行することによって発症することが多く、主たる症状としては爪の混濁と肥厚である。
　爪白癬症の治療薬としては、スクワレンエポキシダーゼ阻害作用を有するTerbinafine（下記式Ａ）、微小管の機能を阻害するGriseofulvin（下記式Ｂ）、チトクロームP450阻害作用を有するItraconazole（下記式Ｃ）が用いられている。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000002
　Terbinafineは、感染周辺部に存在する休眠中の菌に対する活性が弱いことが報告されている（Mycoses、46、pp.506-510、2003年）。爪白癬症を治療するには、薬物の長期投与が必須とされている。爪白癬症の爪の中には、生育中、すなわち菌糸伸長中の菌と、休眠中、すなわち胞子や菌糸伸長停止中の菌が混在している。Terbinafineが浸透した爪では、生育中の菌が死滅するため、白癬菌は新しくできる爪には感染しない。休眠中の菌は Terbinafine で殺菌されない為、爪白癬の根治には、爪が生え変わるまでの約６ヶ月間の投与が必要とされている。従って、休眠菌も殺菌可能な薬剤であれば、爪が生え変わる前に殺菌できるので、治療期間を短縮し、高い完治率を示すことが期待できる。
　４－ヒドロキシピリジン－２－オン骨格を有する化合物としては、例えば、Funiculosin（下記式Ｄ、但し、式中、---は二重結合）、Tetrahydrofuniculosin（下記式Ｄ、但し、式中、---は単結合）、Ilicicolin H（下記式Ｅ）等が存在する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000003
 　
　Funiculosinは、Penicillium funiculosum の培養液から単離された抗真菌活性物質であり（非特許文献１、２等）、TetrahydrofuniculosinはFuniculosinから半合成した化合物である（特許文献１、非特許文献３，４）。また、Ilicicolin Hは、不完全菌Cylindrocladium iliciola MFC-870の培養液から単離された抗真菌活性物質である（非特許文献５，６）。
特開53-121767
Journal of Antibiotics、31、pp.533-538、1978年 Tetrahedron Letters、41、pp.9397-9402、2000年 Acta Crystallographica,Section C: Crystal Structure Communications、 C46(3)、 pp.515-517、1990年 Journal of Antibiotics、31(6)、pp.533-538、1978年 Tetrahedron Letters、17、pp.3827-3830、1976年 Tetrahedron Letters、46、pp.8009-8010、2005年
医薬組成物、白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎治療用医薬組成物の有効成分として有用な化合物を提供する。
　本発明者らは、天然に存在する微生物が生産する白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎を治療できる化合物について鋭意検討した結果、本発明者らが見出した新規な真菌である、カプノディアセアエ　ストレイン No.339855（Capnodiaceae strain No.339855）の培養液中に、白癬菌に対して優れた抗菌作用を有し、complex IIIを阻害する物質の存在を知見し、さらに、鋭意検討した結果、本菌株の培養液からこの優れた抗菌作用を有するポリケチド化合物を単離することに成功し、本発明を完成させた。
　即ち、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその塩、並びに、式（Ｉ）の化合物またはその塩、および賦形剤を含有する医薬組成物、殊に、白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎の予防もしくは治療剤である医薬組成物に関する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000004
　別の態様としては、本発明は白癬症、原虫感染症、及び／又はニューモシスチス肺炎の予防もしくは治療における使用のための式（Ｉ）の化合物またはその塩、更に別の態様としては、式（Ｉ）の化合物またはその塩の有効量を患者に投与することを含む白癬症、原虫感染症、及びニューモシスチス肺炎の治療方法に関する。
　また、本発明は、式（Ｉ）の化合物の生産能を有するカプノディア科（Capnodiaceae）の微生物、好ましくは、カプノディアセアエ　ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）もしくはその変異株を培養し、その培養物から式（Ｉ）の化合物またはその塩を単離することを含む（Ｉ）の化合物またはその塩の製造方法に関する。
　更に、本発明は、式（Ｉ）の化合物の生産能を有する新規な微生物である、独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センターに受託番号、NITE BP-735として寄託された、カプノディアセアエ　ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）もしくはその変異株にも関する。
　式（Ｉ）の化合物またはその塩は、白癬症、（例えば、白癬性肉芽腫、爪白癬症、手・足白癬症、体部白癬症、股部白癬症、生毛部白癬症、頭部白癬症、ケルスス禿瘡、白癬性毛瘡、生毛部急性深在性白癬症、及び／又は硬毛部急性深在性白癬症等）、原虫感染症、（例えば、マラリア、トキソプラズマ症）、及び／又はニューモシスチス肺炎（旧名カリニ肺炎）等の予防及び／又は治療剤として使用できる。
図１は化合物Ａの1H-NMRスペクトル（測定溶媒：CDCl3）を示す図である。 図２は化合物Ａの13C-NMRスペクトル（測定溶媒：CDCl3）を示す図である。 図３は化合物Ｂの1H-NMRスペクトル（測定溶媒：CDCl3）を示す図である。 図４は化合物Ｂの13C-NMRスペクトル（測定溶媒：CDCl3）を示す図である。
　以下、本発明を詳細に説明する。
　本発明化合物は、塩基との塩を形成する場合もある。かかる塩としては、具体的には、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム等の無機塩基等が挙げられる。また、本発明における塩は、いわゆる錯塩やキレート化合物も包含する。
　式（Ｉ）の化合物は、7個もしくは8個の不斉炭素原子を有しており、これに基づく光学異性体が存在しうる。本発明は、単一の光学異性体として単離された式（Ｉ）の化合物、あるいは複数の異性体の混合物として得られた式（Ｉ）の化合物のいずれをも包含する。
　さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物の製薬学的に許容されるプロドラッグも包含する。製薬学的に許容されるプロドラッグとは、例えば、式（I)の化合物が有する1以上の－ＯＨが、加溶媒分解によりまたは生理学的条件下で元の－ＯＨに変換されうる当業者に良く知られた基により、化学修飾されたプロドラッグである。
　さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物およびその塩の各種の水和物や溶媒和物、および結晶多形の物質も包含する。また、本発明は、種々の放射性または非放射性同位体でラベルされた化合物も包含する。
　次に、式（Ｉ）の化合物を産生する微生物の菌学的性質を以下に示す。
（１）生産菌の由来
　真菌の一種である、カプノディアセアエ　ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）は千葉県夷隅郡大多喜町の養老渓谷で採集したケヤキの落葉から湿室法により分離された。本菌株は独立行政法人製品評価技術基盤機構特許微生物寄託センター（〒292-0818 千葉県木更津市かずさ鎌足２－５－８）に国内寄託し、受託番号NITE P-735（受託日：２００９年４月１６日）が付与された。さらに、２０１０年１月２９日（移管日）にブダペスト条約に基づく国際寄託への移管請求が受領され、受託番号NITE BP-735が付与された（受託日：２００９年４月１６日）。
（２）生産菌の形態学的性質
　ポテトデキストロース寒天培地（Difco社製 2010）上での生育は良好で、２５℃で２週間後の直径は２３～２６ ｍｍであった。集落表面はフェルト状（felty）で、部分的に羊毛状（floccose）であった。集落周縁は円状（entire）であり、中央部から周縁部に数本の放射状の溝を生じた。集落の色はフェルト状の部分が灰緑色（grayish green, 30F8）で羊毛状の部分が薄灰緑色（grayish green, 29E4）であった。集落裏面の色は全体的に濃灰緑色（grayish green, 28F4）であった。３０℃での２週間後の集落の直径は６～７ ｍｍであった。５℃と３７℃では生育は認められなかった。色調の記載はMethuen Handbook of Colour（Kornerup, A. and J.H. Wanscher, 3rd ed., pp.252, Methuen, London, 1987年）に従った。
　コーンミール寒天培地（Difco社製 0386）上での生育も良好で、２週間後の直径は２２～２４ mmであった。集落表面はビロード状（velvety）であった。集落周縁は円状（entire）で集落に溝は生じなかった。集落の色は灰緑色（grayish green 29F8-29F4）であった。集落は起伏が無く平坦であった。集落上にドロップ状の分生子の形成が見られた。集落裏面の色は全体的に濃灰緑色（grayish green、28F4）であった。３０℃での２週間後の集落の直径は６～９ mmであった。５℃と３７℃での生育は認められなかった。色調の記載はMethuen Handbook of Colour （Kornerup, A. and J.H. Wanscher, 3rd ed., pp.252, Methuen, London, 1987年）に従った。
　本菌の生育温度は１２℃～３０℃で、最適生育温度は２０℃～２５℃であった。これらの生育温度に関するデータはポテトデキストロース寒天培地（Difco社製2010）上で測定した。生育可能ｐＨは、２．０２～１１．４６で、最適生育pHは、５．４５～６．１５であった。生育可能ｐＨはＹＭブロス（Difco社製）で測定した。
　形態的特長はコーンミール寒天培地上での培養をもとに決定した。栄養菌糸は褐色で太さは２．３～４．０ μmであった。厚膜胞子は観察されなかった。分生子柄は分枝せずシンネマ（determinate synnemata）を形成した。全長は２００～２６０ μmであり、太さは８～１０ μmであった。シンネマの基部はストローマを形成して広がり、幅は３０～４０ μmであった。形態的にはGraphium属に似るがシンネマの上部で菌糸束がやや膨潤し、先端部分で再び狭くなっていた。更に先端部を取り囲むように２０ μm程の数本のセタ（setae）が形成された。狭まった先端部分内で無色の分生子が形成され、シンネマの上部でドロップ状になった。分生子は楕円形～円筒形で大きさは（３．２～３．６）x（１．７～１．７６）μmであった。表面は光学顕微鏡（４００倍）では滑面であった。
　本菌はシンネマを形成し、先端部（上部）が膨潤した。更に膨潤した先端部に本菌の特徴である数本の短いセタが形成された。本菌は形態的にGraphium属に類似しているため、28SrDNAで相同性検索を実施した。その結果、本菌はCapnodium属に近い菌であり、複数あるGraphium属の系統とは異なるという結果を得た。現時点では本菌をカプノディア科（Capnodiaceae）の一菌株であると同定し、カプノディアセアエ ストレイン No.339855（Capnodiaceae strain No.339855）と命名した。
（３）培養特性
　培養特性は、市販の培地、および文献に記載された組成で調製した培地で判定した。ポテトデキストロース寒天培地はDifco社 2010、サブローデキストロース寒天培地はDifco社 0109、Emerson YpSs寒天培地はDifco社0739、コーンミール寒天培地はDifco社0386、オートミール寒天培地はDifco社 0552をそれぞれ購入した。麦芽抽出寒天培地、ツァペック氏液寒天培地、MY20寒天培地の組成は、JCMカタログ（Japan Collection of Microorganisms, the Institute of Physical and Chemical Research, Saitama, Nakase,T. 6th ed. ,pp.617,1995年）に従った。
　ポテトデキストロース寒天培地、サブローデキストロース寒天培地、オートミール寒天培地、麦芽抽出寒天培地、ツァペック氏液寒天培地、MY20寒天培地ではほぼ類似の性状を示したので代表としてポテトデキストロース寒天培地での特徴を上記（２）に記載した。また、唯一コーンミール寒天培地でのみ胞子形成が確認できたので、特徴のある培地として、コーンミール寒天培地での培養特性も上記（２）に記載した。
　なお、本菌株は人工的にまたは自然に変異を起こすこともあり、本発明において用いられるカプノディアセアエ　ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）は、天然から分離された微生物の他に、これに紫外線、放射線、化学薬剤などで人工的に変異させたものおよびそれらの天然変異株についても包含する。
（生産方法）
　本発明化合物は、本発明化合物の生産能を有するカプノディアセアエ科の微生物、好ましくは、カプノディアセアエ　ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）もしくはその変異体を培養し、その培養物から本発明化合物を単離することによって得られる。培養は、一般微生物の培養方法に準じて行われる。
　培地としては、カプノディアセアエ　ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）が利用する栄養源を含有する培地であればよく、合成培地、半合成培地または天然培地が用いられる。培地の組成は、例えば炭素源としては、Ｌ－アラビノース、Ｄ－キシロース、Ｄ－グルコース、Ｄ－フラクトース、シュークロース、イノシトール、Ｌ－ラムノース、ラフィノース、Ｄ－マンニトール、マンノース、メリビオース、ラクトース、Ｄ－ガラクトース、マルトース、トレハロース、サリシン、キサンチン、キチン、デンプン、ブドウ糖、デキストリン、グリセリン、植物油等が、窒素源としては肉エキス、ペプトン、グルテンミール、綿実粕、大豆粉、落花生粉、魚粉、コーンスチープリカー、乾燥酵母、酵母エキス、塩化アンモニウム、硫酸アンモニウム、硝酸アンモニウム、尿酸その他の有機、無機の窒素源が用いられる。また、金属塩としては、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム、亜鉛、コバルトなどの硫酸塩、硝酸塩、炭酸塩、リン酸塩などが必要に応じて添加される。さらに、必要に応じてメチオニン、システイン、シスチン、チオ硫酸塩、オレイン酸メチル、ラード油、シリコン油、界面活性剤などの生成促進物質または消泡剤を添加することもできる。
　培養条件としては、好気的条件下で培養するのが一般的に有利で、培養温度は１２℃～３０℃の範囲、好ましくは２０℃～２５℃付近で行われる。培養期間は培地の組成、温度条件に応じて適宜設定されるが、通常１～３０日程度、好ましくは２～７日程度である。
　培養物から本発明化合物を精製して単離するには、通常の微生物の培養物から生理活性物質を精製して単離する方法が適用される。即ち、培養物から適当な有機溶媒で抽出し、その抽出物から、精製して有効物質を単離する。すなわち、抗真菌活性を指標として、適当な溶剤に対する溶解性および溶解度の差等を利用する一般の生理活性物質の製造に用いられる手段によって、分離、精製される。これらの方法は必要に応じて単独に用いられ、または任意の順序に組合せ、反復して適用できる。その他に精製法としては、培養物をそのまま、あるいは遠心分離またはろ過して菌体を除去した後、適当な溶剤に対する溶解性および溶解度の差、溶液からの析出速度の差、種々の吸着剤に対する吸着親和性の差、２種の液相間における分配の差等を利用する方法を適用することができる。具体的には例えば、培養液を適宜の担体に接触させて該化合物を吸着させ、ついで適当な溶媒で溶出することにより該化合物を精製する方法を挙げることができる。これらの方法は必要に応じて単独に用いられ、または任意の順序に組合せ、反復して適用できる。
　本発明の式（Ｉ）の化合物またはその塩は、該物質生産菌を栄養培地にて培養し、該化合物を蓄積させた培養物から常法によって得られる。該化合物の製造方法において使用する微生物は、カプノディア科（Capnodiaceae）に属し、該化合物の生産能を有する微生物であればいずれも用いることができる。好適には、寄託番号がNITE BP-735として国際寄託されているカプノディアセアエ ストレイン No.339855（Capnodiaceae strain No.339855）を用いることができる。
　式（Ｉ）の化合物またはその塩の１種または２種以上を有効成分として含有する医薬組成物は、当分野において通常用いられている賦形剤、即ち、薬剤用賦形剤や薬剤用担体等を用いて、通常使用されている方法によって調製することができる。
　投与は錠剤、丸剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、液剤等による経口投与、または、関節内、静脈内、筋肉内等の注射剤、坐剤、点眼剤、眼軟膏、経皮用液剤、軟膏剤、経皮用貼付剤、経粘膜液剤、経粘膜貼付剤、吸入剤等による非経口投与のいずれの形態であってもよい。
　経口投与のための固体組成物としては、錠剤、散剤、顆粒剤等が用いられる。このような固体組成物においては、１種または２種以上の有効成分を、少なくとも１種の不活性な賦形剤、例えば乳糖、マンニトール、ブドウ糖、ヒドロキシプロピルセルロース、微結晶セルロース、デンプン、ポリビニルピロリドン、及び／又は、メタケイ酸アルミン酸マグネシウム等と混合される。組成物は、常法に従って、不活性な添加剤、例えばステアリン酸マグネシウムのような滑沢剤やカルボキシメチルスターチナトリウム等のような崩壊剤、安定化剤、溶解補助剤を含有していてもよい。錠剤または丸剤は必要により糖衣または胃溶性若しくは腸溶性物質のフィルムで被膜してもよい。
　経口投与のための液体組成物は、薬剤的に許容される乳濁剤、溶液剤、懸濁剤、シロップ剤またはエリキシル剤等を含み、一般的に用いられる不活性な希釈剤、例えば精製水またはエタノールを含む。当該液体組成物は不活性な希釈剤以外に可溶化剤、湿潤剤、懸濁剤のような補助剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、防腐剤を含有していてもよい。
　非経口投与のための注射剤は、無菌の水性または非水性の溶液剤、懸濁剤または乳濁剤を含有する。水性の溶剤としては、例えば注射用蒸留水または生理食塩液が含まれる。非水性の溶剤としては、例えばプロピレングリコール、ポリエチレングリコールまたはオリーブ油のような植物油、エタノールのようなアルコール類、またはポリソルベート80（局方名）等がある。このような組成物は、さらに等張化剤、防腐剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、または溶解補助剤を含んでもよい。これらは例えばバクテリア保留フィルターを通す濾過、殺菌剤の配合または照射によって無菌化される。また、これらは無菌の固体組成物を製造し、使用前に無菌水または無菌の注射用溶媒に溶解または懸濁して使用することもできる。
　外用剤としては、軟膏剤、硬膏剤、クリーム剤、ゼリー剤、パップ剤、噴霧剤、ローション剤、点眼剤、眼軟膏等を包含する。一般に用いられる軟膏基剤、ローション基剤、水性または非水性の液剤、懸濁剤、乳剤等を含有する。例えば、軟膏またはローション基剤としては、ポリエチレングリコール、プロピレングリコール、白色ワセリン、サラシミツロウ、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、モノステアリン酸グリセリン、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ラウロマクロゴール、セスキオレイン酸ソルビタン等が挙げられる。
　吸入剤や経鼻剤等の経粘膜剤は固体、液体または半固体状のものが用いられ、従来公知の方法に従って製造することができる。例えば公知の賦形剤や、更に、ｐＨ調製剤、防腐剤、界面活性剤、滑沢剤、安定剤や増粘剤等が適宜添加されていてもよい。投与は、適当な吸入または吹送のためのデバイスを使用することができる。例えば、計量投与吸入デバイス等の公知のデバイスや噴霧器を使用して、化合物を単独でまたは処方された混合物の粉末として、もしくは医薬的に許容し得る担体と組み合わせて溶液または懸濁液として投与することができる。乾燥粉末吸入器等は、単回または多数回の投与用のものであってもよく、乾燥粉末または粉末含有カプセルを利用することができる。あるいは、適当な駆出剤、例えば、クロロフルオロアルカン、ヒドロフルオロアルカンまたは二酸化炭素等の好適な気体を使用した加圧エアゾールスプレー等の形態であってもよい。
　通常経口投与の場合、１日の投与量は、体重当たり約０．０１～１００ mg/kg、好ましくは０．１～１０ mg/kgが適当であり、これを１回であるいは２回～４回に分けて投与する。静脈内投与される場合は、１日の投与量は、体重当たり約０．０１～１００ mg/kgが適当で、１日１回～複数回に分けて投与する。投与量は症状、年令、性別等を考慮して個々の場合に応じて適宜決定される。
　式（Ｉ）の化合物は、前述の式（Ｉ）の化合物が有効性を示すと考えられる疾患の種々の治療剤または予防剤と併用することができる。当該併用は、同時投与、或いは別個に連続して、若しくは所望の時間間隔をおいて投与してもよい。同時投与製剤は、配合剤であっても別個に製剤化されていてもよい。
　以下、実施例に基づき、式（Ｉ）の化合物の製造法をさらに詳細に説明する。なお、本発明は、下記実施例に記載の化合物に限定されるものではない。また、式（Ｉ）の化合物の製造法は、以下に示される具体的実施例の製造法のみに限定されるものではなく、式（Ｉ）の化合物はこれらの製造法の組み合わせ、あるいは当業者に自明である方法によっても製造されうる。
また、本明細書中において、以下の略号を用いることがある。
MeCN=アセトニトリル、MeOH=メタノール、MgSO4・7H2O=硫酸マグネシウム７水和物、t-BuOH=tert-ブチルアルコール、TFA=トリフルオロ酢酸、HR ESI MS=高分解能エレクトロスプレー法質量分析
実施例１
（化合物Ａおよび化合物Ｂの培養生産）
　種培地（３０ ｍＬ；２％ コーンスターチ、１％ グリセリン、１％ シュークロース、１％ ファーマメディア、１％ グルテンミール、０．２％ Tween 80を含有）を三角フラスコ（サイズ：１００ ｍＬ）に分注し、オートクレーブで滅菌した（１２１℃、３０分）。この種培地にカプノディアセアエ ストレインNo.339855（Capnodiaceae strain No.339855）の斜面培養物（スラント培養物）を一白金耳分、無菌的に植菌し、２５℃で４日間、ロータリーシェーカーで振盪培養した（２２０　ｒｐｍ）。次に、生産培地｛２０ mL；４％ グルコース、６％ 可溶性デンプン（ナカライテスク社製）、２％ 酵母エキス（和光純薬工業社製）、０．０２％ KCl、０．０２％ MgSO4・7H2O、１％ K2HPO4、１％　β‐サイクロデキストリン、２％　寒天を含有）をオートクレーブで滅菌し、シャーレ（直径９ cm）に分注した。このシャーレに種培養物（２ mL）を無菌的に塗布し、２５℃で１０日間培養した。
（化合物Ａおよび化合物Ｂの単離精製）
　上記の培養方法で得られた培養物（１．８ L）をアセトン（２ L）の中に浸し、１時間撹拌後、ろ過した。ろ液に等量の水を加え、Diaion HP20カラム（１００×１６ mm I.D.、サイズ：２０ mL、三菱ケミカル社製）に通液し、混合溶媒｛アセトン：水＝６０：４０(v/v)、１００ mL｝で溶出した。溶出液に水（１００ mL）を加え、Daisogel SP-120-ODS-Bカラム（サイズ：１８０ mL、２５０×３０mm I.D.DAISO社製）に通液し、混合溶媒｛MeCN：水＝５０：５０(v/v)（０．０５％ TFAを含む）｝を移動相として、化合物Ａと化合物Ｂを含むフラクションを各々分取した。化合物Ａを含むフラクションに等量の水を加え、OASIS HLB 固相抽出カートリッジ（サイズ：６g/３５cc、Waters社製）に通液し、MeCN（１００ mL）で溶出した。溶出液を減圧濃縮し、t-BuOHを添加し、凍結乾燥することで、化合物Ａ（２６５ mg）を粉末として得た。
　化合物Ｂを含むフラクションに等量の水を加え、OASIS HLBカートリッジ（サイズ：６ g/３５cc、Waters社製）に通液し、MeCN（１００ mL）で溶出した。この溶出液を減圧濃縮し、少量のMeOHに溶解し、分取ＨＰＬＣ｛カラム：Mightysil RP-18 GP（２５０×２０mm I.D.）関東化学株式会社製、移動相；ＭｅＣＮ：水＝５０：５０(v/v)、流速＝１０ mL/分｝で精製した。溶出時間が約３０分のピークを分取した。この溶出液を減圧濃縮し、t-BuOHを添加し、凍結乾燥することにより、化合物Ｂ（５ mg）を粉末として得た。
上記の手法で精製単離した化合物Ａは、以下の物理化学的性質を示した。
（化合物Ａの物理化学的性質）
色および形状 = 白色粉末
旋光度 = [α]D 25 -120°(c 0.5,MeOH)
分子式 = C25H41NO7
HR ESI MS(m/z) = Calcd for C25H42N1O7 [M+H]+468.2961, Found 468.2965
UV = λMeOHnm (ε):233(sh), 290.5(6,100)
1H-NMRスペクトラム = 図１に示した。
13C-NMRスペクトラム = 図２に示した。
　化合物Ａの物理化学的性質から、化合物Ａの構造を以下に決定した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000005
（化合物Ｂの物理化学的性質）
色および形状 = 白色粉末
分子式 = C25H41NO6
HR ESI MS(m/z) = Calcd for C25H42N1O6 [M+H]+452.3012,Found 452.3011
1H-NMRスペクトラム = 図3に示した。
13C-NMRスペクトラム = 図4に示した。
　化合物Ｂの物理化学的データから、化合物Ｂの構造を以下に決定した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-C000006
実施例２
（抗真菌活性）
　本発明化合物の抗真菌活性は以下の方法で確認した。
　下記検定菌に対する抗真菌活性は、微量液体希釈法（久米光、山崎敏和著、臨床と微生物、21巻5号、pp.573-580、1994年）を用いて測定した。例えば、化合物Ａは以下に示す活性を示した。表１に化合物Ａの最小生育阻止濃度（MIC）を示す。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000007
　上記試験の結果より、式（Ｉ）の化合物は、抗真菌作用を有することが確認された。従って、白癬症、具体的には例えば、白癬性肉芽腫、爪白癬症、手・足白癬症、体部白癬症、股部白癬症、生毛部白癬症、頭部白癬症、ケルスス禿瘡、白癬性毛瘡、生毛部急性深在性白癬症、及び／又は硬毛部急性深在性白癬症等の治療に有用であることが示された。
実施例３
（Complex III 阻害活性測定法）
　培地（０．１％　グルコース、０．２％　バクトトリプトン、０．２％ K2HPO4、０．００５％ MgSO4・7H2O、０．００５％ CaCl2・2H2O）を三角フラスコに分注し、オートクレーブで滅菌した。この培地にTrichophyton mentagrophytes FP2103の分生子を植菌し、３０℃で４０時間、ロータリーシェーカーで振盪培養した。この培養液から菌体を回収し、菌体を細胞壁溶解酵素液｛１M KCl、２５mM CaCl2・2H2O、１０mM MgCl2・6H2O、５mg/mL ザイモリエイス-100T（生化学工業株式会社製）、１mg/mL chitinase（Sigma社製）、５mg/mL driselase（Sigma社製）｝に浸し、３０℃で４時間振盪した。この酵素処理液を、ガーゼを詰めたロートでろ過してプロトプラストを得た。Mitochondria Isolation Kit（BioChain Institute, Inc.）を用いてプロトプラストからミトコンドリア画分を調整した。Complex III阻害活性は調整したミトコンドリア画分を用いてubiquinol-cytochrome c reductase assayにより測定した（The Journal of Biological Chemistry,279,pp.8708-8714,2004年）。その結果、化合物Ａはcomplex IIIを0.9 ng/mLで阻害した。
　上記試験の結果より、式（Ｉ）の化合物又はその塩がcomplex III阻害作用を有することが確認された。従って、原虫感染症（例えば、マラリア、トキソプラズマ症）、及び／又は、ニューモシスチス肺炎等の治療に使用できることが示唆された。
実施例４
（細胞傷害性）
　細胞障害性は、マウスＴリンパ腫細胞株であるEL-4細胞に試験薬剤を各種濃度で添加し、CO2インキュベーターで37℃、72時間培養した後、セルカウンティングキット（和光純薬工業株式会社製）で細胞数を測定し、IC50値を算出して評価した。その結果、例えば、化合物Ａは、EL-4細胞に対して、IC50値は、６．２ μg/mLであり、３．１ μg/mL以下の濃度において細胞障害性は示さなかった。
　上記試験の結果から、式（Ｉ）の化合物又はその塩は、細胞障害性が高くなく、副作用が少ない可能性が示唆された。
　式（Ｉ）の化合物またはその塩は、白癬症、（例えば、白癬性肉芽腫、爪白癬症、手・足白癬症、体部白癬症、股部白癬症、生毛部白癬症、頭部白癬症、ケルスス禿瘡、白癬性毛瘡、生毛部急性深在性白癬症、及び／又は硬毛部急性深在性白癬症等）、原虫感染症、（例えば、マラリア、トキソプラズマ）、及び／又はニューモシスチス肺炎（旧名カリニ肺炎）等の予防及び／又は治療剤として使用できる。

Claims (10)

  1. 式（Ｉ）の化合物またはその塩。
    Figure JPOXMLDOC01-appb-C000001
    （式中、Ｒは、Ｈ又はＯＨを示す。）
  2. ＲがＯＨである、請求項１に記載の化合物又はその塩。
  3. ＲがＨである、請求項１に記載の化合物又はその塩。
  4. 請求項１に記載の化合物またはその塩、および製薬学的に許容される賦形剤を含有する医薬組成物。
  5. 白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎の予防若しくは治療剤である請求項４記載の医薬組成物。
  6. 白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎の予防若しくは治療における使用のための請求項１に記載の化合物またはその塩。
  7. 請求項１に記載の化合物またはその塩の有効量を患者に投与することからなる白癬症、原虫感染症、及び／又は、ニューモシスチス肺炎の予防若しくは治療方法。
  8. 受託番号がＮＩＴＥ　ＢＰ－７３５であるカプノディアセアエ　ストレインＮｏ．３３９８５５（Ｃａｐｎｏｄｉａｃｅａｅ　ｓｔｒａｉｎ　Ｎｏ．３３９８５５）もしくはその変異株。
  9. 請求項１に記載の化合物の産生能を有するカプノディアセアエ科（Ｃａｐｎｏｄｉａｃｅａｅ）の微生物を培養し、その培養物から請求項１の化合物又はその塩を単離することを含む、請求項１に記載の化合物またはその塩の製造方法。
  10. 微生物が請求項８記載の微生物である請求項９記載の製造方法。
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