WO2009151091A1 - アルツハイマー病の検査方法 - Google Patents

アルツハイマー病の検査方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2009151091A1
WO2009151091A1 PCT/JP2009/060655 JP2009060655W WO2009151091A1 WO 2009151091 A1 WO2009151091 A1 WO 2009151091A1 JP 2009060655 W JP2009060655 W JP 2009060655W WO 2009151091 A1 WO2009151091 A1 WO 2009151091A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
lidocaine
alzheimer
disease
cerebrospinal fluid
subject
Prior art date
Application number
PCT/JP2009/060655
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
タン ミン キン
吉哉 小田
直樹 浅井
Original Assignee
エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社 filed Critical エーザイ・アール・アンド・ディー・マネジメント株式会社
Priority to US12/992,309 priority Critical patent/US20110065202A1/en
Priority to EP20090762521 priority patent/EP2287604A4/en
Priority to JP2010516875A priority patent/JP5106631B2/ja
Publication of WO2009151091A1 publication Critical patent/WO2009151091A1/ja

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
    • G01N33/9453—Cardioregulators, e.g. antihypotensives, antiarrhythmics
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/94—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving narcotics or drugs or pharmaceuticals, neurotransmitters or associated receptors
    • G01N33/9486—Analgesics, e.g. opiates, aspirine
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G01N2800/2821—Alzheimer
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10T—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER US CLASSIFICATION
    • Y10T436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10T436/17—Nitrogen containing
    • Y10T436/173845—Amine and quaternary ammonium
    • Y10T436/174614—Tertiary amine

Definitions

  • the present invention relates to a test method for Alzheimer's disease.
  • AD Alzheimer's disease
  • neurofibrillary tangles and neurotic (Or aged) is characterized by pathological accumulation of congo red affinity filamentous material, which occurs as plaques, and deposition of beta amyloid protein.
  • the core of senile plaques is a peptide of about 39-42 residues called beta amyloid, which has been excised from amyloid precursor protein.
  • Diagnosis of AD is centered on clinical symptoms and interviews, and is confirmed by cerebral atrophy with an electroencephalogram or CT scan.
  • Tau protein, phosphorylated tau protein, soluble beta amyloid, etc. in cerebrospinal fluid are also used as indicators, but the accuracy (sensitivity and specificity) of diagnosis is still inadequate and has not been widely used.
  • Patent Documents 1 to 5 are also used as indicators, but the accuracy (sensitivity and specificity) of diagnosis is still inadequate and has not been widely used.
  • An object of the present invention is to provide an AD inspection method that uses cerebrospinal fluid and is excellent in sensitivity and specificity.
  • the present inventor searched for substances found in the cerebrospinal fluid of AD patients, and found that lidocaine was detected at a low concentration specific to AD patients, thereby completing the present invention.
  • the inspection method according to [1] wherein the measurement step is performed by gas chromatography, liquid chromatography, immunoassay, or capillary electrophoresis.
  • the measurement step is performed by mass spectrometry.
  • the test method of the present invention comprises a measuring step for measuring the amount of lidocaine or a metabolite thereof in cerebrospinal fluid derived from a subject to whom lidocaine has been administered, preferably a human, and the subject based on the measured amount. And a determination step of determining whether or not it is AD.
  • the cerebrospinal fluid derived from the subject may be collected by a known method such as lumbar puncture.
  • Administration of lidocaine may be similar to that performed for epidural anesthesia during cerebrospinal fluid collection.
  • lidocaine anesthesia is adopted for epidural anesthesia for collecting cerebrospinal fluid
  • administration of lidocaine for the anesthesia is sufficient.
  • 200 mg of lidocaine hydrochloride is administered epidurally.
  • the cerebrospinal fluid is collected during anesthesia and is generally performed immediately after administration of lidocaine or within 10 minutes.
  • Lidocaine in cerebrospinal fluid is a substance known as a local anesthetic.
  • the lidocaine metabolite in the cerebrospinal fluid is not particularly limited as long as it exists in the cerebrospinal fluid, and is, for example, monoethylglycinexylidide (MEGX).
  • the method for measuring lidocaine or its metabolite in cerebrospinal fluid is not particularly limited, and a known method can be used.
  • a measurement or analysis device suitable for performing the measurement can be used. Specifically, gas chromatography (Tsai PS et al., Anesth Analg. 1998 Sep; 87 (3): 601-4, Hattori H et al., J Chromatogr. 1991 Mar 8; 564 (1): 278- 82) and liquid chromatography (Chen L et al., J Pharm Biomed Anal. 2007 Apr 11; 43 (5): 1757-62. Epub 2006 Dec 30, Marttila E et al., Eur J Clin Pharmacol.
  • Preferred methods include a method (LC-MS) combining liquid chromatography (LC) and mass spectrometry (MS) (Chik Z, Lee TD, Holt DW, Johnston A, Tucker AT., J Chromatogr Sci. 2006; 44 (5): 262-5, Kawano S, Murakita H, Yamamoto E, Asakawa N., J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2003; 792 (1): 49-54.).
  • LC-MS liquid chromatography
  • MS mass spectrometry
  • Cerebrospinal fluid can be pretreated such as protein removal or desalting depending on the measurement method.
  • Whether or not it is AD is determined by using the amount of lidocaine or its metabolite in the cerebrospinal fluid as an index. For example, when the value of lidocaine or its metabolite is lower than the value (normal value) in a healthy person, it can be determined as AD.
  • a normal value lower limit (cutoff value) may be set (for example, the average value of the concentration of the healthy subject control group minus the standard deviation), and the presence or absence of AD may be determined by comparison with it.
  • the present invention relates to an AD test kit for use in the test method of the present invention, comprising a reagent and / or device for quantifying lidocaine or a metabolite thereof in cerebrospinal fluid. .
  • the reagent and / or apparatus for quantifying lidocaine or its metabolite in the cerebrospinal fluid is appropriately selected according to the measurement principle of the measurement process.
  • reagents and / or devices are necessary for pretreatment of cerebrospinal fluid.
  • a reagent and / or apparatus include an ultrafiltration filter for removing protein components, a desalting column, a buffer solution, and an internal standard substance.
  • an antibody against lidocaine or a metabolite thereof is included.
  • a secondary antibody, lidocaine standard solution, diluent, washing solution, substrate for detection and the like may be included.
  • LC / MS conditions The packing material for LC column is Primelep A (particle size 5 micrometer, pore size 100 angstrom) resin from SIELC Technologies (Prospect Heights, IL), and the tip is preliminarily applied by Laser Puller P-2000 (Sutter) A fused silica capillary with an inner diameter of 150 micrometers tapered about 8 micrometers (with inner wall treated with TC-WAX) (manufactured by GL Sciences, catalog number 1010-27012), nitrogen gas pressure, 15 centimeters at approximately 7 MPa The packed one was used as a column.
  • Mobile phase A was 50% methanol containing 0.1% formic acid
  • mobile phase B was 90% methanol containing 2% trifluoroacetic acid in 0.1% formic acid.
  • the concentration gradient of mobile phase B is 0 minutes (0%)-5 minutes (0%)-25 minutes (25%)-25.1 minutes (50%)-50 minutes (100%)-60 minutes (100 %)
  • the flow rate was set at 1 microliter per minute.
  • the internal standard substance valine elutes for 5-25 minutes and lysine elutes for 25-50 minutes. Therefore, when quantifying each substance, the internal standard substance was selected according to the elution time.
  • the mass spectrometer used Qstar Pulsar i manufactured by Applied Biosystems in positive ion detection mode with an applied voltage of 2400 volts, a DP value of 10 to improve sensitivity, an IP value of 100, and a scan range of 50 to 700 amu. .
  • Table 1 shows the measured values of lidocaine and MEXG in AD patients and healthy individuals.
  • lidocaine and its metabolite MEXG were detected at low concentrations specific to AD patients.
  • the peak intensity ratio of lidocaine to lysine for example, if 0.6 or less is judged as Alzheimer's disease and 0.9 or more as normal, the sensitivity can be detected in 15 of Alzheimer's disease patients, so the specificity is 88.2%, and the specificity is normal. It was confirmed that it was 82.4% because 14 persons could be judged as normal. It was clarified that AD can be diagnosed by measuring lidocaine and MEGX in cerebrospinal fluid.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

（１）リドカインが投与された被験者に由来する脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物の量を測定する測定工程と、（２）測定された量に基いて、被験者がアルツハイマー病であるか否かを判定する判定工程とを含む、アルツハイマー病の検査方法。

Description

アルツハイマー病の検査方法
　本発明は、アルツハイマー病の検査方法に関する。
　アルツハイマー病（以下、ADと称す）は、脳に老人斑の出現や神経原線維変化を伴う神経変性疾患であり、病理学的にはニューロン細胞体内の神経原線維のもつれ、及び神経炎性（又は老年）斑として生じるコンゴレッド親和性の繊維状物質の病的な蓄積、そしてベータアミロイドタンパク質の沈着を特徴としている。老人斑の中核をなすのは、このベータアミロイドと呼ばれる39－42残基程度のペプチドであり、アミロイド前駆体タンパク質から切り出されてきたものである。
　ADの診断は臨床症状と問診が中心であり、脳波やCTスキャンでの大脳萎縮により確認される。脳脊髄液中のタウタンパク質やリン酸化タウタンパク質、可溶性ベータアミロイドなども指標として用いられているが、診断の精度（感度や特異性）は未だ不十分であり、広く用いられるに至っていない（非特許文献１～５）。
Clark CM, Davatzikos C, Borthakur A, Newberg A, Leight S, Lee VM, Trojanowski JQ. Biomarkers for early detection of Alzheimer pathology. Neurosignals. 2008; 16(1):11-8. Reijn TS, Rikkert MO, van Geel WJ, de Jong D, Verbeek MM. Diagnostic accuracy of ELISA and xMAP technology for analysis of amyloid beta(42) and tau proteins. Clin Chem. 2007; 53(5):859-65. Ramani A, Jensen JH, Helpern JA. Quantitative MR imaging in Alzheimer disease. Radiology. 2006; 241(1):26-44. Azzazy HM, Mansour MM, Kazmierczak SC. Nanodiagnostics: a new frontier for clinical laboratory medicine. Clin Chem. 2006; 52(7):1238-46. Sunderland T, Gur RE, Arnold SE. The use of biomarkers in the elderly: current and future challenges. Biol Psychiatry. 2005 Aug 15; 58(4):272-6.
　本発明の課題は、脳脊髄液を用いた感度・特異性に優れるADの検査方法を提供することにある。
　本発明者は、AD患者の脳脊髄液中に見出される物質を探索し、リドカインが、AD患者特異的に低い濃度で検出されることを見出し、本発明を完成するに至った。
　すなわち、前記課題を解決するための具体的手段は以下の通りである。
［１］（１）リドカインが投与された被験者に由来する脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物の量を測定する測定工程と、
（２）測定された量に基いて、被験者がアルツハイマー病であるか否かを判定する判定工程と、
を含む、アルツハイマー病の検査方法。
［２］測定工程が、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、イムノアッセイ、又は、キャピラリー電気泳動により行われる［１］に記載の検査方法。
［３］測定工程が、質量分析により行われる［１］に記載の検査方法。
［４］測定工程が、液体クロマトグラフィーと質量分析により行われる［１］に記載の検査方法。
［５］リドカインを定量するための試薬及び／又は装置を含む、［１］～［４］のいずれかに記載の検査方法に使用するための、アルツハイマー病用検査キット。
　感度・特異性に優れるADの検査方法が提供される。
　本発明の検査方法は、リドカインが投与された被験者、好ましくはヒト、に由来する脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物の量を測定する測定工程と、測定された量に基づいて、被験者がADであるか否かを判定する判定工程とを含む。
　被験者に由来する脳脊髄液は、腰椎穿刺等の公知の方法により採取されたものでよい。リドカインの投与は、脳脊髄液の採取の際の硬膜外麻酔のために行われるものと同様でよい。脳脊髄液の採取のための硬膜外麻酔にリドカイン麻酔を採用した場合には、その麻酔のためのリドカインの投与で十分である。一般には、リドカイン塩酸塩として200mgが硬膜外に投与される。脳脊髄液の採取時期は、麻酔が持続している間であり、一般には、リドカイン投与後直ちに又は１０分以内に行われる。
　脳脊髄液中のリドカインは、局所麻酔薬として知られている物質である。また、脳脊髄液中のリドカイン代謝物は、脳脊髄液中に存在するものであれば特に制限されず、例えば、モノエチルグリシンキシリジド(monoethylglycinexylidide; MEGX)である。
　脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物を測定する方法については特に制限はなく、公知の方法を用いることができる。また、その測定の実施に適した測定又は分析用の装置を用いることができる。具体的には、ガスクロマトグラフィー（Tsai PS et al., Anesth Analg. 1998 Sep;87(3):601-4、Hattori H et al., J Chromatogr. 1991 Mar 8;564(1):278-82）及び液体クロマトグラフィー（Chen L et al., J Pharm Biomed Anal. 2007 Apr 11;43(5):1757-62. Epub 2006 Dec 30, Marttila E et al., Eur J Clin Pharmacol. 1983;25(5):639-41）などのクロマトグラフィー、並びにラジオイムノアッセイ（Calvo B et al., J Clin Pharmacol. 1995 Apr;35(4):426-31）、エンザイムイムノアッセイ及び蛍光イムノアッセイなどのイムノアッセイ、キャピラリー電気泳動（Anderson MS et al., Rapid Commun Mass Spectrom. 2004;18(22):2612-8、Vera-Candioti L et al., Anal Chim Acta. 2007 Jul 9;595(1-2):310-8）が挙げられる。また、質量分析によって測定を行うことができる（Kadioglu Y, Atila A.,  Biomed Chromatogr. 2007;  21(10):1077-82、Maes A, Weiland L, Sandersen C, Gasthuys F, De Backer P, Croubels S., J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2007; 852(1-2):180-7）。
　好ましい方法として、液体クロマトグラフィー（LC）と質量分析（MS）とを組み合わせた方法（LC-MS）が挙げられる（Chik Z, Lee TD, Holt DW, Johnston A, Tucker AT., J Chromatogr Sci. 2006; 44(5):262-5、Kawano S, Murakita H, Yamamoto E, Asakawa N., J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2003; 792(1):49-54.）。
　脳脊髄液は、測定方法に応じて、タンパク質除去処理や脱塩などの前処理をすることができる。
　脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物の量を指標として用いることにより、ADであるか否かが判定される。例えばリドカイン又はその代謝物の値が、健常者における値（正常値）と比較して低値であるときに、ADと判定することができる。また、正常値下限（カットオフ値）を設定し（例えば、健常者コントロール群の濃度の平均値－標準偏差）、それとの比較でADの有無を判定してもよい。
　さらに本発明は、本発明の検査方法に用いるためのAD検査キットであって、脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物を定量するための試薬及び／又は装置を含むことを特徴とするキットに関する。
　脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物を定量するための試薬及び／又は装置は、測定工程の測定原理に応じて適宜選択される。
　例えば、クロマトグラフィーによる場合には、脳脊髄液の前処理に必要は試薬及び／又は装置が含まれる。このような試薬及び／又は装置としては、タンパク質成分を除去するための限外ろ過フィルター、脱塩カラム、緩衝液、内部標準物質などが挙げられる。また、イムノアッセイによる場合には、リドカイン又はその代謝物に対する抗体が含まれる。この場合には、この抗体の他に、二次抗体、リドカイン標準液、希釈液、洗浄液、検出用の基質などが含まれてもよい。
　以下に、本発明を実施例により具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
１．サンプルの前処理
　アルツハイマー病患者17名（男性10名、女性7名、いずれも白人）の脳脊髄液、及び年齢と性別、人種をあわせた17名の健常者の脳脊髄液をサンプルとして使用した。サンプル採取は、リドカインによる硬膜外麻酔下に行った（穿刺箇所にリドカイン塩酸塩（基準用量200mg）を皮下投与した）。各脳脊髄液150マイクロリットルから5000NMWLの限外ろ過フィルター（ミリポア社製、Ultrafree-MC BIOMAX-5, UFC3BCC00）によってタンパク質成分を除去した。そこに内部標準物質としてL-Valine-13C5,15NとL-Lysine-13C5,15Nを含む溶液（0.1％ギ酸、50％メタノール溶媒）25マイクロリットルと0.15％の塩酸溶液800マイクロリットルを加えた。このサンプル溶液をWaters社製の固相抽出カラムOasisのMCX(10mg)に負荷した。まず１ｍLの水で洗浄し、続いて１ｍLの0.1％ギ酸を含む50％メタノール溶媒、続いて１ｍLの水、そして１ｍLのメタノールで洗浄した。その後１ｍLの25% アンモニア水とメタノール混液（2: 3, v/v)で溶出させて、溶出物を乾燥後、25マイクロリットルの50％メタノールで再溶解して、ポアサイズが0.22マイクロメートルのPVDF膜フィルターで不要物を除去しLC/MS用サンプルとした。
２．LC/MS条件
　LCカラムの充填剤はSIELC Technologies社（Prospect Heights, IL）のPrimesep A（粒子サイズ5マイクロメートル、ポアサイズ100オングストローム）樹脂を、予めレーザープラーP-2000（サッター社製）によって先端を約8マイクロメートルと先細にした内径150マイクロメートルのフューズドシリカキャピラリー（内壁をTC-WAX処理したもの）（ジーエルサイエンス社製、カタログ番号1010-27012）に窒素ガス圧、約7MPaにて15センチほど充填したものをカラムとして使用した。移動相Aは0.1%ギ酸を含む50%メタノール、移動相Bは0.1%のギ酸に2%のトリフルオロ酢酸を含む90%メタノールを使用した。移動相Bの濃度勾配は、開始時から0分（0%）－5分（0%）－25分（25%）－25.1分（50%）－50分（100%）－60分（100%）とし、流速は毎分1マイクロリットルに設定した。なお内部標準物質のバリンは5－25分の間、リジンは25－50分の間に溶出するので、各物質の定量を行う際には溶出時間によって内部標準物質を使い分けることにした。質量分析計はアプライドバイオシステムズ社製のQstar パルサーiを正イオン検出モードで印加電圧2400ボルト、感度向上のためにDP値を10、IP値を100とし、スキャン範囲50から700amuで測定を行った。
３．データ解析
　１サンプルあたり数百から千数百のピークから目視にて選別を行い、約30分に溶出するm/z235.17及び約25分に溶出するm/z207.15の２つのピークが健常者には多く、アルツハイマー病患者には極めて少ないことを見つけた。そしてMS/MS測定によって、前者からはプロダクトイオンとしてm/z86.08、後者からはm/z58.06を得た。前者はリドカイン、後者はリドカインの代謝物であるMEGXであると推定された。そこでこれらの標品を入手して同じLC/MS条件で測定した結果、保持時間とマススペクトルが一致し、これらのピークがリドカイン及びMEXGであることが確認された。
　表１にAD患者及び健常人でのリドカイン及びMEXGの測定値を示した。表１から明らかなように、脳脊髄液では、リドカイン及びその代謝物であるMEXGが、AD患者特異的に低い濃度で検出された。また、リジンに対するリドカインのピーク強度比から、例えば、0.6以下をアルツハイマー病、0.9以上を正常として判断すると、感度はアルツハイマー病患者のうち15名を検出できるため88.2％、特異性は正常者のうち14名を正常であると判定できるため82.4％となることが確認された。脳脊髄液中のリドカイン及びMEGXを測定することにより、ADの診断が可能であることが明らかとなった。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　ADの検査方法及びそのためのキットが提供される。

Claims (5)

  1. （１）リドカインが投与された被験者に由来する脳脊髄液中のリドカイン又はその代謝物の量を測定する測定工程と、
    （２）測定された量に基いて、被験者がアルツハイマー病であるか否かを判定する判定工程と、
    を含む、アルツハイマー病の検査方法。
  2. 測定工程が、ガスクロマトグラフィー、液体クロマトグラフィー、イムノアッセイ、又は、キャピラリー電気泳動により行われる請求項１に記載の検査方法。
  3. 測定工程が、質量分析により行われる請求項１に記載の検査方法。
  4. 測定工程が、液体クロマトグラフィーと質量分析により行われる請求項１に記載の検査方法。
  5. リドカインを定量するための試薬及び／又は装置を含む、請求項１～４のいずれか１項に記載の検査方法に使用するための、アルツハイマー病用検査キット。
PCT/JP2009/060655 2008-06-13 2009-06-11 アルツハイマー病の検査方法 WO2009151091A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US12/992,309 US20110065202A1 (en) 2008-06-13 2009-06-11 Method for Examination of Alzheimer's Disease
EP20090762521 EP2287604A4 (en) 2008-06-13 2009-06-11 METHOD FOR THE STUDY OF MORBUS ALZHEIMER
JP2010516875A JP5106631B2 (ja) 2008-06-13 2009-06-11 アルツハイマー病の検査方法

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2008-155433 2008-06-13
JP2008155433 2008-06-13

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2009151091A1 true WO2009151091A1 (ja) 2009-12-17

Family

ID=41416795

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2009/060655 WO2009151091A1 (ja) 2008-06-13 2009-06-11 アルツハイマー病の検査方法

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20110065202A1 (ja)
EP (1) EP2287604A4 (ja)
JP (1) JP5106631B2 (ja)
WO (1) WO2009151091A1 (ja)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016171182A1 (ja) * 2015-04-24 2016-10-27 株式会社資生堂 分析方法及び内部標準物質

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP6101385B2 (ja) * 2015-04-24 2017-03-22 株式会社 資生堂 分析方法
CN106248819A (zh) * 2016-07-13 2016-12-21 浙江景嘉医疗科技有限公司 一种医用交联透明质酸钠凝胶中盐酸利多卡因含量的检测方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7161034B2 (en) * 2004-04-20 2007-01-09 Dade Behring Inc. Lidocaine analogs and methods of making and using same
WO2007139777A2 (en) * 2006-05-26 2007-12-06 Merck & Co., Inc. Methods for the diagnosis and prognosis of alzheimer's disease using csf protein profiling

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
C.M.CLARK ET AL.: "Biomarkers for Early Detection of Alzheimer Pathology", NEUROSIGNALS, vol. 16, no. 1, 2008, pages 11 - 18, XP003027626 *
DEBORAH J.CAMERON: "Isolation of Two Unique Fractions from the Cerebrospinal Fluid of Alzheimer Disease Patients", THE JAPANESE JOURNAL OF EXPEROMENTAL MEDICINE, vol. 55, no. 5, October 1985 (1985-10-01), pages 177 - 183, XP009147330 *
HASSAN M.E. AZZAZY ET AL.: "Nanodiagnostics: A New Frontier for Clinical Laboratory Medicine", CLINICAL CHEMISTRY, vol. 52, no. 7, July 2006 (2006-07-01), pages 1238 - 1246, XP002569698 *
PAAVO RIEKKINEN SR. ET AL.: "The Role of Beta-Endorphin and Related Peptides in the Pathogenesis and Treatment of Alzheimer's Disease", DRUG DEVELOPMENT RESEARCH, vol. 20, no. 4, 1990, pages 445 - 451, XP003027627 *
THIERRY S.M.REIJN ET AL.: "Diagnostic Accuracy of ELISA and xMAP Technology for Analysis of Amyloid P42 and Tau Proteins", CLINICAL CHEMISTRY, vol. 53, no. 5, May 2007 (2007-05-01), pages 859 - 865, XP003027628 *
TOSHIO IKEDA ET AL.: "Alzheimer- gata Chiho Kanja ni Okeru Nosekizui Ekichu Acetylcholine Dotai ni Tsuite", ANNUAL REPORT OF PHARMACOPSYCHIATRY RESEARCH, no. 21, 1989, pages 40 - 46, XP008137513 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016171182A1 (ja) * 2015-04-24 2016-10-27 株式会社資生堂 分析方法及び内部標準物質

Also Published As

Publication number Publication date
US20110065202A1 (en) 2011-03-17
EP2287604A4 (en) 2011-06-08
JP5106631B2 (ja) 2012-12-26
EP2287604A1 (en) 2011-02-23
JPWO2009151091A1 (ja) 2011-11-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Zhang et al. A comprehensive map and functional annotation of the normal human cerebrospinal fluid proteome
Chan et al. Ultra-sensitive detection of protein biomarkers for diagnosis of Alzheimer’s disease
EP3540442A1 (en) Surrogate biomarker for evaluating intracerebral amyloid beta peptide accumulation and method for analysis thereof
US20120196300A1 (en) Neurodegenerative Markers for Psychiatric Conditions
Füzéry et al. A rapid and reliable method for the quantitation of hydroxychloroquine in serum using turbulent flow liquid chromatography-tandem mass spectrometry
JP6293802B2 (ja) 血中アミロイドベータ代謝回転の測定方法
EP2052255A2 (en) Methods of determining levels of free amino acids and dipeptides and diagnosing alzheimer's diseases
US20080171394A1 (en) Method For Diagnosing Multiple Sclerosis
CN112630311B (zh) 用于检测情感障碍的代谢标记物和试剂盒及使用方法
Yoshida et al. Distinguishing mild cognitive impairment from Alzheimer's disease with acrolein metabolites and creatinine in urine
Zhang et al. Dysregulated urinary arginine metabolism in older adults with amnestic mild cognitive impairment
EP2756311B1 (en) Method for diagnosing alzheimer's disease
JP5106631B2 (ja) アルツハイマー病の検査方法
Liu et al. Development of a high-sensitivity method for the measurement of human nasal Aβ 42, Tau, and phosphorylated Tau
EP2451466B1 (en) Apolipoprotein ciii in pre- and type 2 diabetes
CN113624868A (zh) 用于预测或评估双相情感障碍患者认知功能的生物标志物组合及其应用
US20150031054A1 (en) Method and system for diagnosing alzheimer's disease
JP7194926B2 (ja) ３大神経変性疾患の診断補助方法
EP2451465B1 (en) Phenotypic ratio of serum amyloid in pre- and type 2 diabetes
WO2024108603A1 (zh) 基于粪便代谢物的神经退行性疾病标志物及其应用
CN114544821B (zh) 检测血浆中磷脂酰乙醇胺（36:4）的试剂在制备抑郁症检测试剂盒中的用途
CN112305089B (zh) 一种慢性肾病诊断生物标记物及其应用
CN114544822B (zh) 检测血浆中溶血磷脂酰胆碱(22:0)的试剂在制备抑郁症检测试剂盒中的用途
US20240241136A1 (en) Diagnostic assays for movement disorders
WO2024109767A1 (zh) 基于粪便代谢物的阿尔兹海默症标志物及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 09762521

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2010516875

Country of ref document: JP

Ref document number: 2009762521

Country of ref document: EP

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 12992309

Country of ref document: US

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE