WO2008058514A1 - Zubereitungen enthaltend boswelliasäuren zur hemmung der prostaglandin e2 synthese - Google Patents

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Definitions

  • Prostaglandin biosynthesis is initiated by the initial steps of converting arachidonic acid to prostaglandin (PG) H 2 through cyclooxygenase (COX) -1 or -2 ( Figure 1).
  • Certain PGs, including PGE 2 are mediators in inflammation (especially rheumatoid arthritis), pain and fever, and are also involved in cancers (lung, colon, endometrium) while others fulfill important physiological functions [1].
  • Inhibitors of COX-1 and -2 thus prevent the synthesis of all PGs and have considerable side effects (stomach, kidney) due to the lack of physiologically important PGs [2].
  • the object of the present invention is therefore to circumvent the disadvantages of the known processes (use of inhibitors of COX enzymes such as the globally approved antirheumatic indomethacin), and to identify active substances, in particular natural substances, and pharmaceutical preparations which are capable of selectively inhibit the mPGES-1.
  • These agents are to be provided for the therapeutic treatment of PGE 2 -mediated diseases, especially rheumatoid arthritis, to have low side effects at a high efficiency.
  • pentacyclic triterpenic acids bind to the mPGES-1 ( Figure 3) and inhibit the catalytic activity (conversion of PGH 2 to PGE 2 ) ( Figure 4). Also, pentacyclic triterpenic acids inhibit the biosynthesis of PGE 2 in intact A549 cells ( Figure 5) and in LPS-stimulated human blood ( Figure 6). Thus, pentacyclic triterpenic acids and their derivatives are direct inhibitors of mPGES-1 or
  • the invention further includes the use of pentacyclic triterpenic acids or their derivatives for the manufacture of a medicament for the treatment of PGE 2 -mediated diseases.
  • the PGE 2 -mediated diseases are, in particular, inflammations and cancers.
  • the medicament may further contain a pharmaceutical carrier material.
  • plasma concentrations of about 0.1-15 ⁇ M, in particular 1-10 ⁇ M pentacyclic triterpenic acid are desirable, which could be about the po dose of about 100-1000 mg / day.
  • the invention can be used to treat all forms of diseases associated with increased production of PGE 2 . These are primarily inflammatory diseases (especially rheumatoid arthritis), feverish and painful conditions, as well as cancers in which PGE 2 plays a role.
  • FIG. 1 Biosynthetic pathway of PGE2
  • FIG. 3 Selective binding of mPGES-1 to immobilized boswellic acids.
  • the arrow indicates the position of the mPGES-1 (16 kDa, Western blot detection).
  • FIG. 4 Inhibition of the mPGES-1-mediated synthesis of PGE 2 (percentage activity compared to the control with DMSO as solvent) in the microsomal
  • 11-keto-BA was converted to the half ester with glutaric anhydride at the C3-OH group, the second glutaric acid carboxy group was then treated with the primary Amino group of EAH-Sepharose linked so as to obtain immobilized BAs (KBA-Seph).
  • centrifugation supernatants (16,000 g, 10 min) of the lysates (detergent lysis with 1% Triton X-100 and 0.5% NP-40) of interleukin-1-stimulated A549 cells were used as the protein source.
  • EAH Sepharose without ligand (Seph) served as a control for non-specific binding.
  • Heparin tube (20 U / ml) collected. Aliquots (0.8 ml) were filled to 1 ml with sample buffer (10 mM potassium phosphate buffer pH 7.4, 3 mM KCl, 140 mM NaCl and 6 mM D-glucose). After pretreatment with the test substances (boswellic acids,
  • ⁇ -BA is the most potent compound and inhibits almost 50% at a concentration of 10 ⁇ M.
  • a ⁇ -BA and KBA (in each case ⁇ M ⁇ ) give here 25% inhibition and AKBA reduces the PGE 2 level only at a concentration of 100 ⁇ M.
  • Higher concentrations (100 ⁇ M) of ⁇ -BA, A ⁇ -BA or KBA lead to no appreciable increase in inhibition.

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Abstract

Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Zubereitungen mit pentazyklischen Triterpensäuren und deren strukturellen Derivaten, insbesondere Boswelliasäuren aus Boswellia-Arten (wie B. serrata, B. carterii, B. sacra), zur Hemmung der induzierbaren mitochondrialen Prostaglandin E2 Synthase-1. Ferner betrifft die Erfindung Verwendung von pentazyklischen Triterpensäuren und deren Derivaten zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von PGE2-vermittelter Erkrankungen.

Description

ZUBEREITUNGEN ENTHALTEND BOSWELLIASÄUREN ZUR HEMMUNG DER PROSTAGLANDIN E2 SYNTHESE
Beschreibung
Die vorliegende Erfindung betrifft die Verwendung von Zubereitungen mit pentazyklischen Triterpensäuren oder deren strukturellen Derivaten, insbesondere von Boswelliasäuren aus Boswellia-Arten (wie B. serrata, B. carterii, B. sacra etc.), zur Hemmung der induzierbaren mitochondrialen Prostaglandin E2 Synthase-1. Ferner betrifft die Erfindung die Verwendung von pentazyklischen Triterpensäuren und deren Derivaten zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von PGE2- vermittelter Erkrankungen.
Die Prostaglandinbiosynthese wird durch die initialen Schritte der Umwandlung von Arachidonsäure zu Prostaglandin (PG)H2 durch die Cyclooxygenase(COX)-1 oder -2 eingeleitet (Fig. 1). Gewisse PGs, dazu gehörend das PGE2, sind Mediatorstoffe bei Entzündungen (v.a. rheumatoide Arthritis), Schmerz und Fieber, und sind des Weiteren bei Krebserkrankungen (Lunge, Kolon, Endometrium) beteiligt, andere dagegen erfüllen wichtige physiologischen Funktionen [1]. Hemmstoffe der COX-1 und -2 unterbinden damit die Synthese aller PGs und weisen aufgrund des Mangels physiologisch wichtiger PGs beträchtliche Nebenwirkungen (Magen, Niere) auf [2]. Die induzierbare mitochondriale Prostaglandin E2 Synthase-1 (mPGES-1) ist Mitglied der MAPEG Familie und katalysiert die Umwandlung von PGH2 zu PGE2 [3]. Das PGE2 weist im Gegensatz zu den physiologisch notwendigen PGs ausgeprägte pathophysiologische Eigenschaften (Entzündung, Schmerz, Fieber, Krebserkrankungen, Angiogenese) auf. Seit Entdeckung der mPGES-1 im Jahre 1999 ist man deshalb bestrebt, potente und selektive Hemmstoffe gegen die mPGES zu entwickeln, um die PGE2 Synthese selektiv zu inhibieren, ohne dabei die Bildung der physiologisch wichtigen PGs zu unterdrücken. Dies macht die mPGES-1 zu einem interessanten Arzneistoff-Target v.a. bei chronisch entzündlichen Erkrankungen (rheumatoide Arthritis), die mit Schmerz oder auch mit Fieber einhergehen, aber auch bei diversen Krebserkrankungen. Allerdings ist bislang kein Inhibitor der mPGES-1 als Arzneimittel zur Therapie zugelassen, und die Anzahl verfügbarer Hemmstoffe (wie z.B. MK886) ist derzeit noch äußerst gering und die Substanzen befinden sich noch in klinischer Prüfung. Die Motivation der pharmazeutischen Forschung sichere und selektive Hemmstoffe der mPGES-1 zu finden ist enorm. Die Aufgabe der vorliegenden Erfindung ist es daher, die Nachteile der bekannten Verfahren (Einsatz von Hemmstoffen der COX Enzyme wie z.B. des weltweit zugelassenen Antirheumatikums Indometacin) zu umgehen, und Wirkstoffe, insbesondere Naturstoffe, und pharmazeutische Zubereitungen zu identifizieren, die in der Lage sind, die mPGES-1 selektiv zu hemmen. Diese Wirkstoffe sollen zur therapeutischen Behandlung von PGE2-vermittelten Erkrankungen, insbesondere rheumatoide Arthritis, bereitgestellt werden, um bei einer hohen Effizienz geringe Nebenwirkungen aufzuweisen.
Diese Aufgabe wird durch die Verwendung von pentazyklischen Triterpenen und ihren strukturellen Derivate gelöst, wie es im Anspruch 1 beschrieben ist. Bevorzugte Ausführungen sind in den abhängigen Ansprüchen 2 bis 8 genannt.
Boswelliasäuren (BAs) sind pentazyklische Triterpensäuren und kommen natürlich im Weihrauchharz aus der Pflanze Boswellia serrata (B. serrata) vor. Ergebnisse aus Untersuchungen an Tiermodellen und an Patienten mit rheumatoider Arthritis, chronischer Colitis, ulcerativer Colitis, Morbus Crohn, bronchialem Asthma [4] und peritumoralen Gehirnödemen [5, 6] weisen auf pharmakologische Aktivitäten der Boswellia serrate-Extrakte in vivo hin. Weder die Wirkstoffe noch die molekularen Zielstrukturen von Boswellia serrata Extrakten sind jedoch bislang geklärt. So wurden die 5-Lipoxygenase [7], die Elastase [8], Topoisomerasen [9] und IKB Kinasen [10] aufgrund der Ergebnisse aus biochemisch-pharmakologischen Experimenten als Targets postuliert.
In der vorliegenden Erfindung konnte zum ersten Mal gezeigt werden, dass pentazyklische Triterpensäuren an die mPGES-1 binden (Fig. 3) und die katalytische Aktivität (Umwandlung von PGH2 zu PGE2) hemmen (Fig. 4). Auch hemmen pentazyklische Triterpensäuren die Biosynthese von PGE2 in intakten A549 Zellen (Fig. 5) und im LPS-stimulierten Humanblut (Fig. 6). Damit sind pentazyklische Triterpensäuren und deren Derivate direkte Hemmstoffe der mPGES-1 bzw.
Hemmstoffe der PGE2 Synthese. Bislang sind keine pentazyklischen Triterpensäuren als Hemmstoffe der PGE2 beschrieben worden. Fig. 2 zeigt einige Beispiele von pentazyklischen Triterpensäuren.
In einer Ausführung der Erfindung werden gereinigte pentazyklische Triterpensäuren verwendet, wobei insbesondere BAs geeignet sind. In einer bevorzugten Ausführung der Erfindung wird die gereinigte ß-Boswelliasäure (ß-BA) verwendet. Diese kann z.B. nach dem Verfahren von Jauch et al. [11] aus Weihrauchharzen halbsynthetisch gewonnen werden. In einer weiteren Ausführung werden andere pentazyklische Triterpensäuren verwendet, die eine vergleichbare oder bessere Hemmwirkung auf die mPGES-1- Aktivität haben.
Die Erfindung umfasst ferner die Verwendung von pentazyklischen Triterpensäuren oder ihren Derivaten zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung von PGE2- vermittelten Erkrankungen. Bei den PGE2-vermittelten Erkrankungen handelt es sich insbesondere um Entzündungen und Krebserkrankungen. Das Arzneimittel kann ferner ein pharmazeutisches Trägermaterial enthalten.
Zur therapeutischen Behandlung von PGE2-vermittelten Erkrankungen sind Plasmakonzentrationen von ca. 0,1 - 15 μM, insbesondere 1-10 μM pentazyklische Triterpensäure erstrebenswert, das könnte etwa die p.o. Gabe von etwa 100-1000 mg/Tag sein.
Die Verabreichung von pentazyklischen Triterpensäuren und deren Derivaten oder diese enthaltenden pharmazeutischen Zusammensetzungen zur Behandlung von Erkrankungen kann oral oder parenteral erfolgen.
Der Vorteil der vorliegenden Erfindung liegt darin, dass für das Arzneistofftarget mPGES-1 mit den pentazyklischen Triterpensäuren Grundstrukturen identifiziert wurden, die zur selektiven Hemmung der Aktivität der mPGES-1 führen. Damit kann nun selektiv die Synthese des PGE2 gehemmt werden, ohne dabei, wie bislang mittels Inhibitoren der COX-1 und -2, auch die Synthese anderer (physiologisch wichtiger) PGs zu hemmen. Dies hat zur Folge, dass die Therapie PGE2-vermittelter Erkrankungen mittels pentazyklischer Triterpensäuren im Vergleich zu COX-1/2 Inhibitoren weniger Nebenwirkungen aufweisen dürfte. Des weiteren kann durch die Verwendung von pentazyklischen Triterpensäuren der Einsatz bzw. die Dosis von nicht-steroidalen Antiphlogistika (Cyclooxygenaseinhibitoren) reduziert und die Dauer der Einnahme verkürzt werden, die wegen ihrer unspezifischen Blockade der Synthese aller Prostaglandine zu erheblichen Nebenwirkungen führen.
Die Erfindung kann genutzt werden, um alle Formen von Erkrankungen, die mit einer erhöhten Produktion von PGE2 einhergehen, zu behandeln. Dabei handelt es sich primär um entzündliche Erkrankungen (v.a. rheumatoide Arthritis), fiebrige und schmerzhafte Zustände, sowie Krebserkrankungen, bei denen PGE2 eine Rolle spielt.
Weitere Vorteile, Merkmale und Anwendungsmöglichkeiten der Erfindung werden nachstehend anhand der Ausführungsbeispiele mit Bezug auf die Zeichnungen beschrieben. In den Zeichnungen zeigen: Figur 1 : Biosyntheseweg des PGE2
Figur 2: Strukturen von pentazyklischen Triterpensäuren. ß-BA = ß-Boswelliasäure; Aß-BA = 3-O-Acetyl-ß-Boswelliasäure; KBA = 11-Keto-ß-Boswelliasäure; AKBA = 3- O-Acetyl-11-Keto-ß-Boswelliasäure; α-BA = α-Boswelliasäure; ursolic acid = Ursolsäure; 3-oxo-TA = 3-Oxo-Triucallinsäure.
Figur 3: Selektive Bindung von mPGES-1 an immobilisierte Boswelliasäuren. US = Überstand; P = Präzipitat; 1 = EAH-Sepharose-Beads ohne Ligand als Kontrolle; 2 = 11-Keto-Boswelliasäure immobilisiert an EAH-Sepahrose Beads; 3 = Lysat von lnterleukin-1 -stimulierten A549 Zellen mit endogener mPGES-1). Der Pfeil kennzeichnet die Position der mPGES-1 (16 kDa, Detektion mittels Western-Blot).
Figur 4: Hemmung der mPGES-1 -vermittelten Synthese von PGE2 (Prozentuale Aktivität gegenüber der Kontrolle mit DMSO als Solvent) in der mikrosomalen
Fraktion von lnterleukin-1 -stimulierten A549 Zellen (Mittelwerte, n = 2-4). 1 - 5 = 3-O- Acetly-11-Keto-Boswelliasäure (1 , 3, 10, 30, 100 μM); 6 - 10 = 11-Keto- Boswelliasäure (1 , 3, 10, 30, 100 μM); 11 - 15 = ß-Boswelliasäure (1 , 3, 10, 30, 100 μM); 16 - 20 = 3-O-Acetly-ß-Boswelliasäure (1 , 3, 10, 30, 100 μM).
Figur 5: Hemmung der mPGES-1 -vermittelten Synthese von PGE2 in intakten lonophor/Arachidonsäure-stimulierten A549 Zellen (Prozentuale Aktivität gegenüber der Kontrolle mit DMSO als Solvent; Mittelwert n = 2). 1 = Positivkontrolle; 2 = 20 μM Indometacin; 3 = 30 μM MK-886; 4 = 10 μM 3-O-Acetly-H-Keto-Boswelliasäure; 5 = 10 μM 11-Keto-Boswelliasäure; 6 = 10 μM ß-Boswelliasäure; 7 = 10 μM 3-O-Acetly- ß-Boswelliasäure.
Figur 6: Hemmung der mPGES-1 -vermittelten Synthese von PGE2 in LPS- stimuliertem humanen Vollblut (Prozentuale Aktivität gegenüber der Kontrolle mit DMSO als Solvent; Mittelwert + Standardfehler, n = 3). 1 = Positivkontrolle; 2 = 20 μM Indometacin; 3 = 10 μM 3-O-Acetly-11-Keto-Boswelliasäure; 4 = 100 μM 3-O- Acetly-11-Keto-Boswelliasäure; 5 = 10 μM 11-Keto-Boswelliasäure; 6 = 100 μM Keto-Boswelliasäure; 7 = 10 μM ß-Boswelliasäure; 8 = 100 μM ß-Boswelliasäure; 9 = 10 μM 3-O-Acetly-ß-Boswelliasäure; 10 = 100 μM 3-O-Acetly-ß-Boswelliasäure.
Ausführunpsbeispiele
Bindung von mPGES-1 an immobilisierte Boswelliasäuren
11-Keto-BA wurde an der C3-OH Gruppe mit Glutarsäureanhydrid zum Halbester umgesetzt, die zweite Glutarsäure-Carboxygruppe wurde dann mit der primären Aminogruppe der EAH-Sepharose verknüpft um so immobilisierte BAs (KBA-Seph) zu erhalten. Für Protein-Fishing-Experimente wurden als Proteinquelle Zentrifugationsüberstände (16.000g, 10 min) der Lysate (Detergenzlyse mit 1 % Triton X-100 und 0,5 % NP-40) von lnterleukin-1 -stimulierten A549 Zellen verwendet. EAH-Sepharose ohne Ligand (Seph) diente zur Kontrolle für unspezifische Bindung. Die Sepharosen wurden mit den Überständen über Nacht bei 4°C unter stringenten Bedingungen (1% Triton X-100, 0,5 % NP-40) inkubiert und anschließend dreimal mit dem Inkubationspuffer gewaschen. Die so gewonnenen Protein-Präzipitate wurden mit Denaturierungspuffer behandelt um die gebundenen Proteine abzutrennen. Daneben wurde ein Aliquot der verbleibenden Überstände nach der Inkubation mit den Sepharosen als Probe entnommen. Sowohl Proteine des Präzipitats als auch der verbleibenden Überstände wurden dann mittels SDS-PAGE aufgetrennt, auf Nitrocellulosemembran geblottet und mit Hilfe eines spezifischen Antikörpers gegen humane mPGES-1 in einer Antikörperreaktion (Western-Blot) analysiert (Figur 3).
Die Analyse der so gefärbten Proteine zeigt, dass im Präzipitat mittels KBA-Seph reichlich mPGES-1 vorhanden ist, die Kontrollpräzipitation mit Seph (ohne Ligand) jedoch kaum mPGES-1 aufweist. Passend dazu, findet man im verbleibenden Überstand nach Kß/\-Sep/7-Behandlung keine mPGES-1 , während in den Überständen mit SepΛ-Behandlung reichlich mPGES-1 zurück bleibt (Fig. 3). Daraus folgt, dass mPGES-1 selektiv an KBA-Seph, nicht aber an Seph ohne Ligand bindet.
Einfluss von Boswelliasäuren auf die Aktivität der mPGES-1 in mikrosomaler Fraktion von A549 Zellen
A549 Zellen wurden mit lnterleukin-1 (1 ng/ml) für 72 Stunden inkubiert. Nach Ernte und Zellzahlbestimmung wurden die pelletierten Zellen auf Trockeneis/Ethanol schockgefroren, durch Zugabe von 1 ml Homogensisierungspuffer (4 0C) wieder aufgetaut und mittels Ultraschall homogenisiert. Nach Zentrifugation 10.000g für 10 min bei 4 0C wurde der erhaltene Überstand bei 174.000 g und 4 0C für 1 h Stunde zentrifugiert um Mitochondrien zu gewinnen. Das Pellet (Mitochondrien) wurde im Homogensierungspuffer gelöst und mit den Testsubstanzen (Boswelliasäuren bzw. DMSO) für 10 min bei 4°C in 96-well Platten vorinkubiert. Dann wurde PGH2 als Substrat zugegeben und die Reaktion nach 1 min bei 4 0C mittels Stopplösung (enthält u.a. Fe2+, Citronensäure und 11-B-PGE2 als Standard) beendet. Nach
Festphasenextraktion (RP-18-Säulen und Aceton als Elutionsmittel) wurde die Probe mittels HPLC (RP-18, UV-Detektion bei 190 nm) analysiert.
Es zeigt sich, dass die Vorinkubation der mitochondrialen Fraktion von lnterleukin-1 - stimulierten A549 Zellen zu einer potenten Hemmung der mGPES-1 Aktivität führt, indem AKBA, KBA, ß-BA oder Aß-BA die PGE2-Synthese aus PGH2 mit IC50 Werten zwischen ca. 5 und 20 μM konzentrationsabhängig hemmen (Fig. 4). Die Potenzen der einzelnen BAs ist in etwa vergleichbar.
Einfluss von Boswelliasäuren auf die Aktivität der mPGES-1 in intakten A549 Zellen
IL-1ß-stimulierte A549 Zellen (48 h) wurden mit den Testsubstanzen (Boswelliasäuren, Indometacin, MK-886 oder DMSO als Negativkontrolle) bei 37°C für 10 min vorinkubiert. Dann wurde die Bildung von PGE2 durch Zugabe von lonophor A23187 (2.5 μM), Arachidonsäure (1 μM) und [3H]Arachidonsäure (18.4 kBq) gestartet. Die Reaktion wurde nach 15 min abgestoppt und die Proben auf Eis gekühlt. Nach Zentrifugation (800 g, 5 min, 4°C), wurde der pH des Überstandes durch Citronensäure (20 μl, 2 M) auf 3 eingestellt. 3H-Radioaktiv markiertes PGE2 wurde extrahiert und mittels RP-HPLC unter Verwendung von 11ß-PGE2 als internen Standard aufgetrennt. Fraktionen (zu 30 sec) wurden gesammelt und in einem LKB Wallac 1209 Rackbeta Liquid Scintillation Counter quantifiziert.
Interessanterweise hemmen die BAs die PGE2 Synthese auch in intakten A549 Zellen, die mit lonophor und Arachidonsäure stimuliert wurden (Fig. 5). Bei einer Konzentration von 10 μM hemmt ß-BA zu mehr als 50%, auch 10 μM Aß-BA und KBA hemmen zu fast 50%, wohingegen 10 μM AKBA nur ca. 20% Hemmung verursachen. Man beachte, dass für die 50%-ige Hemmung der PGE2 Synthese durch MK-886 fast 30 μM Substanz notwendig sind. Lediglich der COX Inhibitor Indometacin hemmt bereits bei einer Konz. von 20 μM zu fast 75%. Damit ist ß-BA hinsichtlich Hemmung der PGE2 Bilding potenter als der bereits bekannte mPGES-1 Inhibitor MK-886.
Einfluss von Boswelliasäuren auf die Aktivität der mPGES-1 im humanen Vollblut
Venös entnommenes humanes peripheres Blut gesunder, erwachsener Spender, die 14 Tage vor Blutabnahme keine Medikamente zu sich nahmen, wurde in
Heparinröhrchen (20 U/ml) gesammelt. Aliquote (0.8 ml) wurden mit Probenpuffer (10 mM Kaliumphosphat Puffer pH 7.4, 3 mM KCl, 140 mM NaCI und 6 mM D-Glucose) auf 1 ml gefüllt. Nach Vorbehandlung mit den Testsubstanzen (Boswelliasäuren,
Indometacin, MK-886 oder DMSO als Negativkontrolle) bei RT für 5 min, wurden die Proben mit LPS (10 μg/ml) für 5 hrs bei 37°C inkubiert. Die dabei stattfindende PGE2
Bildung wurde abgestoppt (Eiskühlung), die Proben wurden zentrifugiert (2300χg, 10 min, 4°C) und zum Überstand wurde Citronensäure (30 μl, 2 M) gegeben. Nach weiterer Zentrifugation (2300χg, 10 min, 4°C), erfolgte die Festphasenextraktion und
HPLC Analyse des PGE2. Der PGE2 Peak (3 ml), wurde durch die Koelution mit authentischem externen Standard festgelegt, das Eluat wurde gesammelt und
Acetonitril unter einem Stickstoffstrom entfernt. Der pH wurde durch Zugabe von 10 x
PBS buffer pH 7.2 (230 μl) auf 7.2 gestellt bevor der PGE2 Gehalt mittels PGE2 High Sensitivity EIA Kit (Assay Designs, Michigan, Ml) nach Angaben des Herstellers bestimmt wurde.
Auch im Vollblut ist eine deutliche Hemmung der PGE2 Bildung durch BAs erkennbar (Fig. 6). Wiederum ist ß-BA die potenteste Verbindung und hemmt bei einer Konz. von 10 μM zu fast 50%. Aß-BA und KBA QeweilsiO μM) ergeben hier 25%-ige Hemmung und AKBA reduziert die PGE2 Level erst bei einer Konz. von 100 μM. Höhere Konz. (100 μM) an ß-BA, Aß-BA oder KBA führen zu keiner nennenswerten Steigerung der Hemmung. Für die 50%-ige Hemmung der PGE2 Synthese durch MK- 886 sind mehr als 30 μM Substanz notwendig sind und der COX Inhibitor
Indometacin hemmt bereits bei einer Konz. von 20 μM zu fast 50%, das heißt, 10 μM ß-BA führen zur gleichen Hemmung wie 20 μM Indometacin und ist zusammenfassend potenter als Indometacin und MK-886.
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Claims

Patentansprüche
1) Verwendung von pentacyclischen Triterpensäuren, ihren Derivaten und / oder diese enthaltenden Zubereitungen zur Hemmung der PGE2 Synthese, insbesondere zur Hemmung der mPGES-1.
2) Verwendung nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass die pentacyclischen Triterpensäuren natürlich vorkommende oder künstlich synthetisierte Boswelliasäuren oder / und eines ihrer Derivate sind.
3) Verwendung nach einem der vorgehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die pentazyklischen Triterpensäuren aus Boswellia- Arten gewonnen wurden.
4) Verwendung nach einem der vorgehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die pentacyclischen Triterpensäuren, ihre Derivate und / oder diese enthaltende Zubereitungen mit einem geeigneten pharmazeutischen Trägermaterial vorliegt.
5) Verwendung nach einem der vorgehenden Ansprüche zur Herstellung eines
Arzneimittels zur Behandlung von PGE2-vermittelter Erkrankungen.
6) Verwendung nach einem der vorgehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die PGE2-vermittelten Erkrankungen insbesondere entzündliche Erkrankungen, z.B. rheumatoide Arthritis, fiebrige und schmerzhafte Zustände, sowie Krebserkrankungen sind.
7) Verwendung nach einem der vorgehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass eine wirksame Menge von pentacyclischen Triterpensäuren, ihren Derivaten und / oder diese enthaltenden Zubereitungen appliziert wird.
8) Verwendung nach einem der vorgehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, dass die Plasmakonzentrationen von pentacyclischen Triterpensäuren oder / und ihrer Derivaten nach der Applikation etwa 0,1 - 15 μM, insbesondere 1 - 10 μM beträgt.
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