WO2005082373A1

WO2005082373A1 - ユージストミン誘導体医薬組成物

Info

Publication number: WO2005082373A1
Application number: PCT/JP2005/003106
Authority: WO
Inventors: Tohru Fukuyama; Hidetoshi Tokuyama; Ryoichi Ando; Yusaku Amano; Seima Itami
Original assignee: Mitsubishi Pharma Corporation
Priority date: 2004-02-27
Filing date: 2005-02-25
Publication date: 2005-09-09

Abstract

下記一般式（Ｉ）　【化1】（式中、Ｒは水酸基、アリルオキシ基、メチルスルホニルオキシ基又ｐ−メトキシフェニル基を表わす。）で示されるユージストミン誘導体若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物を含有することを特徴とする医薬組成物。

Description

ユージストミン誘導体医薬組成物技術分野

[0001] 本発明は、抗腫瘍剤ゃ抗ウィルス剤として有用な医薬組成物に関するものである。

背景技術

[0002] テトラヒドロ— β一カルボリン環とォキサチアゼパン環とが縮合した骨格を有するユージストミン類は、強い抗腫瘍活性ゃ抗ウィルス活性を示すことが知られている（非特許明

文献 1、 2及び特許文献 1参照)。

田

[0003] [化 1]

[0004] ユージストミン類は、上記一般式 (Π)で示されるような、 6_5_6_7員環が縮合し、し力、も 7員環部分には Ν— 0_C— S結合が有する特異な構造を有しているために、数種類の天然物及びその誘導体の合成例が報告されているにすぎない（非特許文献 3、 4及び特許文献 2、 3参照)。

非特許文献 1 : Journal of American Chemical Society, 109, 3378 (1987)

非特許文献 2 Australian Journal of Chemistry, 42, 1201 (1989)

非特許文献 3 : Journal of Medicinal Chemistry, 35， 3223 (1992)

非特許文献 4 : Bioorganic & Medicinal Chemistry, 5, 955 (1997)

特許文献 1 :特開昭 60 - 100576号公報

特許文献 2：特開平 3 - 68582号公報

特許文献 3 :特開 2002— 363180号公報

発明の開示発明が解決しょうとする課題

[0005] 本発明者らは、先に、特許文献 3により天然ユージストミン類にはない置換基を有するユージストミン誘導体の合成について報告した。し力ながら、それらが有する生理活性は、これまで知られていない。

課題を解決するための手段

[0006] 本発明者らは、特許文献 3に記載されたユージストミン誘導体が有する生理活性について、鋭意、検討したところ、これらのユージストミン誘導体が抗腫瘍活性及び抗ゥィルス活性を有することを見出し、本発明に到達した。

[0007] すなわち、本発明の要旨は、下記一般式 (I)

[0008] [化 2]

[0009] (式中、 Rは水酸基、ァリルォキシ基、メチルスルホニルォキシ基又 p—メトキシフエ二ル基を表わす。 )

で示されるユージストミン誘導体若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物を含有することを特徴とする医薬組成物に存する。

[0010] 以下、本発明について詳細に説明する。

[0011] ユージストミン誘導体の塩としては、例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩等の鉱酸塩；メタンスルホン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、パラトルエンスルホン酸塩等のスルホン酸塩；酢酸塩、プロピオン酸塩、酒石酸塩、フマール酸塩、マレイン酸塩、リンゴ酸塩、シユウ酸塩、コハク酸塩、クェン酸塩、安息香酸塩、マンデル酸塩、ケィ皮酸塩、乳酸塩等のカルボン酸塩などが挙げられる。また、上記ユージストミン誘導体又はその塩が水和物又は溶媒和物として存在するときには、それらも本発明の範囲に包含される。

[0012] なお、一般式 (I)で表わされるユージストミン誘導体は、特許文献 3に記載されている方法、またはそれに準じた方法により製造することができる。また、その塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物は、ユージストミン誘導体力公知の方法により製造すればよい。

[0013] 一般式 (I)で表されるユージストミン誘導体は後述するように、抗腫瘍活性及び抗ゥィルス活性を有するので、抗腫瘍剤又は抗ウィルス剤として用いることができる。 [0014] 本発明におけるユージストミン誘導体は強い抗腫瘍活性を有するので、抗腫瘍剤として用いることができる。対象となる癌種としては、乳癌、肺癌、胃癌、大腸癌、膝臓、脳腫瘍等の固形癌；白血病等の血液癌を挙げることができる。

[0015] 本発明におけるユージストミン誘導体は強い抗ウィルス活性を有するので、抗ウイノレス剤として用いることができる。対象となるウィルスとしては、ヘルぺスウィルス、サイトメガロウィルス、パピローマウィルス等の抗 DNAウィルス； C型肝炎ウィルス、インフルェンザウィルス、コロナウィルス、重症急性呼吸器症候群ウィルス、狂犬病ウィルス、ノロウィルス等の抗 RNAウィルスを挙げることができる。

[0016] 本発明に係る医薬組成物は、一般式 (I)で表されるユージストミン誘導体若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物と慣用の製剤担体とを、適当な比率で混合した後、常法により処理することにより調製することができる。

[0017] 製剤担体としては、例えば、ブドウ糖、乳糖、 D—マンニトール、デンプン又は結晶セルロース等の賦形剤；カルボキシメチルセルロース、デンプン又はカルボキシメチルセルロースカルシウム等の崩壊剤又は崩壊補助剤；ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビエルピロリドン又はゼラチン等の結合剤；ステアリン酸マグネシウム又はタルク等の滑沢剤；ヒドロキシプロピルメチルセルロース、白糖、ポリエチレングリコール又は酸化チタン等のコーティング剤；ワセリン、流動パラフィン、ポリエチレングリコーノレ、ゼラチン、カオリン、グリセリン、精製水又はハードフアット等の基剤；注射用蒸留水、生理食塩水若しくはプロピレングリコール等の水性又は用時溶解型注射剤を調製することができる溶解剤又は溶解補助剤;ブドウ糖、塩化ナトリウム、 D-マンニトール、又はグリセリン等の等張化剤；無機酸、有機酸、無機塩基又は有機塩基等の pH調節剤；色素；希釈剤；安定化剤；噴射剤及び粘着剤などが挙げられる。

[0018] また、本発明に係る医薬組成物を含有する製剤は、投与方法に応じて、適宜、選択すればよぐ例えば、経口投与の場合には錠剤、顆粒剤、細粒剤、散剤、硬カプセノレ剤、軟カプセル剤、シロップ剤、液剤、乳剤、懸濁剤及びエリキシル剤等が挙げられ、非経口投与の場合には注射剤、点眼剤、点鼻剤、軟膏剤、眼軟膏剤及び坐剤等が挙げられる。 [0019] 本発明に係る医薬組成物の有効成分である一般式 (I)で表されるユージストミン誘導体若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物の投与量は、患者の年齢、健康状態、体重等の条件に応じて、適宜、定めればよい。通常は、経口投与の場合、成人に対し 1曰あたり 0. 01— lOOOmg、好まし <は 0. 1— 500mgを、 1回で又は複数回に分けて投与する。また、非経口投与の場合、成人に対し 1日あたり 0. 0 01— lOOmg、好ましくは好ましくは 0. 01 50mgを、 1回で若しくは複数回に分けて又は連続して投与する。

実施例

[0020] 以下、実施例を用いて本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。

[0021] 実施例 1一 4、比較例 1 抗腫瘍活性の測定

10%ゥシ胎児血清（No. F9423、シグマ社製）を含む D—MEM (No. D6046、シダマ社製）で調製したヒト乳癌細胞株 MDA— MB-157を 96ゥヱルプレート（旭テクノグラス社製）に 1ウエノレ当たり 2000個、 0. 05 mLの割合で播種した。翌日、被験物質の DMSO溶解液を 10%ゥシ胎児血清を含む D— MEMで最終濃度の 2倍に希釈し、前日播種した細胞に 1ゥヱル当たり 0. 05mLの割合で添加した。 3日後 Cell Counting Kit試薬（No.345-06463，同仁化学研究所社製）を 1ゥヱル当たり 0. OlmL の割合で添加した。 3時間培養した後、プレートリーダー（TECAN、和光純薬社製）を用いて吸光度（測定波長 405nm、参照波長 620nm)を測定した。被験物質を添カロしないゥヱルの吸光度の値を 100%、細胞を播種せず、 Cell Counting Kit試薬を添カロしたゥエルの値を 0%として、増殖抑制率を被験物質の 50%阻害濃度（IC )で求

50 めた。

[0022] 本実施例で用いた細胞の信頼性を確認するために、アドリアマイシン (比較例 1)の 5 0%阻害濃度（IC )につレ、ても同時に検討した。アドリアマイシンは、抗腫瘍剤として

50

使用されている薬剤であるが、細胞毒性が強いことが知られており、副作用の発現率も高いことが知られている薬剤である。

[0023] 結果を表 1に示す。

[0024] [表 1] 表 1

[0025] この結果より、本実施例で用いた細胞の信頼性は高いことが明らかになった。さらに、本発明の化合物は従来の抗腫瘍剤と比べて、同等もしくはそれ以上の抗腫瘍活性を示すことが明らかになった。

[0026] 実施例 5 抗 C型肝炎ウィルス活性の測定

文献（Science 285， 110 (1999))記載の方法で作成したレプリコン細胞（Huh7 R印 licon細胞 #5-15 (ReBLikon GmbHより購入））を用いて活性測定を行った。

[0027] 10%ゥシ胎児血清を含むダルベッコイーグル MEM培地（シグマ社製）に、レプリコン細胞を懸濁し、 5 X 10³/100 /i L/wellとなるよう 96ゥエルプレートに播種した (day0)。

[0028] 5%C02ガス下、 37°Cの湿式インキュベーター内で一昼夜培養後、ヒト組換えインタ一フエロン a (IFN a ) (Cat. No.11105-1 , lot No.#2122, BIOMEDICAL

LABORATORIES社製）および被験化合物（上記実施例 1の化合物）を含む溶液を各ゥエルに 100 ずつ添加した。 IFN aの最終濃度は、 0、 3、 10、 30、 100国際単位 (IU)/mL、被験化合物の最終濃度は、 0、 1、 10、 100(nM)とし、全ゥエルが 200 μ Lとなるよう調製した (dayl)。 72時間培養後、各ゥヱルより totalRNAを ABI-PRIZM 6100 Nucleic Acid PrepStation (アプライドバイオシステム社製）により抽出した。抽出方法は装置の操作手引書に従った。抽出した RNA溶液は _80°Cに保管した（Day4)。

[0029] RNAサンプルを解凍後、定量 PCR (Polymerase chain reaction)法により、

HCV-repliconの RNA量を定量した。装置は ABI PRISM7900 (アプライドバイオシステム社製）を用レ、、竹内らの方法 (Gastroenterology 116， 636 (1999》に従い定量を行つた。

[0030] T7 promoter下流に HCV MKC- 1A株の遺伝子 (Genbank accession No.D45172)をつないだベクターを用いて T7 RiboMAX Express Large Scale RNA production System (プロメガ社製)で in vitro transcriptionを行い調製した後フエノールクロロフォルム抽出およびエタノール沈殿を行った RNAを、定量 PCRのための標準曲線用 RNA として用いた。上記定量 PCRにおいて 10²-10⁸にかけて直線性が得られることを確認した。

[0031] IC は、それぞれ IFN aが 4.8 (IU/mL),被検化合物は 8.4 (nM)であった。

[0032] この結果より、本発明の化合物は強力な抗ウィルス活性を示すことが明らかになつた。

産業上の利用可能性

[0033] 本発明に係る医薬組成物は、抗腫瘍活性及び抗ウィルス活性を示すので、抗腫瘍剤又は抗ウィルス剤として用いることができる。

[0034] なお本出願は、 2004年 2月 27日付で出願された日本特許出願（特願 2004—054

701号）に基づいており、その全体が引用により援用される。

Claims

請求の範囲下記一般式 (I)

[化 1]

( I )

(式中、 Rは水酸基、ァリルォキシ基、メチルスルホニルォキシ基又 p—メトキシフエ二ル基を表わす。 )

で示されるユージストミン誘導体若しくはその塩、又はそれらの水和物若しくは溶媒和物を含有することを特徴とする医薬組成物。

[2] 抗腫瘍剤として用いることを特徴とする請求項 1記載の医薬組成物。

[3] 抗腫瘍剤が、乳癌治療剤、肺癌治療剤、胃癌治療剤、大腸癌治療剤、瞎臓癌治療剤、脳腫瘍治療剤であることを特徴とする請求項 2記載の医薬組成物。

[4] 抗ウィルス剤として用いることを特徴とする請求項 1記載の医薬組成物。

[5] 抗ウィルス剤が、抗 C型肝炎ウィルス剤であることを特徴とする請求項 4記載の医薬組成物。