WO2004089409A2 - Mittel für die photodynamische diagnostik und therapie von bösartigen tumoren - Google Patents

Mittel für die photodynamische diagnostik und therapie von bösartigen tumoren Download PDF

Info

Publication number
WO2004089409A2
WO2004089409A2 PCT/EP2004/003809 EP2004003809W WO2004089409A2 WO 2004089409 A2 WO2004089409 A2 WO 2004089409A2 EP 2004003809 W EP2004003809 W EP 2004003809W WO 2004089409 A2 WO2004089409 A2 WO 2004089409A2
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
chlorin
polyvinylpyrrolidone
therapy
agent
chlorine
Prior art date
Application number
PCT/EP2004/003809
Other languages
English (en)
French (fr)
Other versions
WO2004089409A3 (de
Inventor
Peter Petrov
Tatsiana Trukhacheva
Henadz Isakau
Mikhail Haurylau
Mikhail Kaplan
Original Assignee
Haemato-Science Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Haemato-Science Gmbh filed Critical Haemato-Science Gmbh
Priority to EP04726487A priority Critical patent/EP1610821A2/de
Publication of WO2004089409A2 publication Critical patent/WO2004089409A2/de
Publication of WO2004089409A3 publication Critical patent/WO2004089409A3/de

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A61K41/0071—PDT with porphyrins having exactly 20 ring atoms, i.e. based on the non-expanded tetrapyrrolic ring system, e.g. bacteriochlorin, chlorin-e6, or phthalocyanines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/32—Macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. carbomers, poly(meth)acrylates, or polyvinyl pyrrolidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Definitions

  • the invention relates to an agent for the photodynamic diagnosis and therapy of oncological diseases based on chlorine E 6 compounds, as well as new medical uses of chlorine E 6 compounds.
  • Russian Patent No. 2152790 discloses an agent for the photodynamic diagnosis and therapy of oncological diseases which consists of 40 to 90% by weight of Chlorin E 6 and 60 to 10% by weight of polyvinylpyrrolidone.
  • Photosensitizers are required for photodynamic cancer therapy. These sensitizers are injected and accumulate predominantly in the cancerous cells. The production of cytostatic substances in the cancer cells that contain the photosensitizer is induced by targeted laser exposure at a certain wavelength. This leads to tumor necrosis.
  • sensitizers for this purpose are hematoporphyrins, phthalolocyanins and naphthalocyanins.
  • the sensitizers based on porphyrin have proven themselves due to their low phototoxicity and suitable sensitivity for the lasers to be used.
  • Chlorin E 6 has intense adsorption bands in the 660 ⁇ 10 spectral range nm, which is of particular importance for photodynamic therapy. However, the extinction coefficient for the hematoporphyrins is relatively low. For a successful photodynamic therapy, a higher concentration of this sensitizer must therefore be brought into the cancer cell. Since some of the porphyrins have phototoxicity, the advantage of chlorin E 6 is that they are rapidly excreted after administration. 24 hours after administration, only 4 to 6% of the amount administered can be detected in the human organism.
  • Chlorin E 6 and its salts are, however, relatively unstable, both in solution and in the lyophilized state at room temperature.
  • the invention is therefore based on the object of eliminating the above disadvantage and of providing an agent based on chlorine E 6 for photodynamic therapy which not only has a stability which is well suited for handling, even in solution, but also a substantially improved enrichment factor in the cancerous tissue compared to healthy tissue.
  • Another object of the invention is to provide further medical uses of Chlorin E 6 .
  • an agent for photodynamic therapy based on chlorin E 6 and its derivatives and polyvinylpyrrolidone which is characterized in that it contains chlorine E 6 and polyvinylpyrrolidone in a weight ratio of 1 :(> 1.5) or consists thereof ,
  • a weight ratio of chlorine E 6 to polyvinylpyrrolidone of 1: (> 1.5 to 25), preferably of 1: 2 is preferred preferably 1: 3, more preferably 1: 5, even more preferably 1:10, even more preferably 1:15, even more preferably 1:25.
  • the weight ratio is in the range of about 1: (5 to 25), preferably 1: (10 to 25), more preferably 1: (15 to 25), more preferably 1: (15 to 20).
  • Chlorin E 6 and polyvinylpyrrolidone are preferably present as a complex.
  • polyvinylpyrrolidone is expediently dissolved in an aqueous base suitable for injection and then, with constant stirring, chlorine E 6 in the amount of more than 1.5 and up to 25 parts by weight of PVP per 1 to achieve the desired composition Part by weight of chlorine E 6 is added and the mixture is stirred until a completely homogeneous mixture has formed.
  • the solution obtained can be sterile filtered and can be freeze-dried and stored in this form at normal temperature.
  • the formulation can also be prepared in such a way that it is suitable for the systemic and / or local action through parenteral, enteral and / or topical administration.
  • a preparation with 6 to 12 kDa is preferred as polyvinylpyrrolidone.
  • the derivatives of chlorin E 6 (13-carboxy-17- [2-carboxyethyl] -15-carboxymethyl-17, 18-transdihydro-3-vinyl-8-ethyl-2,7,12, 18-tetramethylporphine), such as
  • the corresponding 15-carboxyethoxymethyl or 15-formyl compounds, all of which naturally occur as accompanying substances of chlorin E 6 are suitable in the same way.
  • mixtures of chlorine E 6 with its derivatives can also be present in the complex according to the invention.
  • the agent according to the invention is normally administered in the form of an injectable solution.
  • incorporation into ointments or liniments for direct application to the skin is also possible.
  • a dosage of 0.5 to 10 mg / kg, preferably 1 to 7 mg / kg is recommended.
  • agent according to the invention in liquid or semi-solid pharmaceutical formulations.
  • chlorin E 6 is suitable for the production of medicaments for uses other than for tumor diseases.
  • chlorin E 6 shows good effectiveness on the skin, so that skin diseases can be treated well with chlorin E 6 and PVP-containing agents, both as preventive measures and for therapy.
  • Chlorin E 6 -PVP is particularly effective in fungal diseases, as well as in psoriasis and similar skin diseases. It is effective against dermatophytes, mold and yeast.
  • chlorin E 6 is surprisingly suitable for epilation, ie for hair removal.
  • the present invention thus furthermore relates to an agent for the prophylactic or therapeutic or cosmetic treatment of the skin, in particular for the treatment of fungal diseases of the skin, psoriasis or for hair removal, the agent comprising chlorin E 6 and PVP in any mixing ratio.
  • the weight ratios of the two components can include an excess of chlorine E 6 or an excess of PVP.
  • Weight ratios of chlorin E 6 to PVP of about 1: 0.1 to a considerable excess of polyvinylpyrrolidone compared to chlorin E 6 , in particular up to 1:25, are particularly suitable.
  • Weight ratios of 1: 1 are particularly preferred. But ratios of 1: (> 1, 5), 1: 5 or 1: 10 or 1: 1 5 are also suitable for the applications mentioned.
  • the following examples illustrate the effectiveness of the agent according to the invention in comparison with a known agent according to Russian chemical patent no. 21 52790 regarding tumor activity, and the effectiveness of chlorin E 6 for the treatment of the skin.
  • the accumulation dynamics of the photolon or the agent according to the invention were determined in the tumor tissues of the rats (lymphosarcoma pliss) and the healthy tissues (in the opposite skin of the thigh) with the aid of computer-controlled fluorescence spectrophotometry using the analyzer "LESA-6" (diagnostic laser “LGH 633 -25 “( Figure 1) observed.
  • Tables 1 to 4 show the individual and mean enrichment data for the preparation in the 1 2 rats.
  • Table 1 Accumulation dynamics of the Fotolon in the healthy tissues in rats with Pliss lymphosarcoma
  • Table 2 Accumulation dynamics of the Fotolon in the tumor tissue in the rats with lymphosarcoma Pliss.
  • Table 3 Dynamics of accumulation of the agent according to the invention in the healthy tissue of the rats with lymphosarcoma pliss
  • Table 4 Dynamics of accumulation of the agent according to the invention in the tumor tissue of the rats with lymphosarcoma pliss
  • the HET-CAM (Chorio-Allantois-Membrane) bioassay is important for the evaluation of effects on vessels and transplanted tumors in the context of photodynamic therapy.
  • the assay offers the advantage over animal models of qualitatively and quantitatively recording non-invasively in vivo morphological changes in the vessels and changes in blood perfusion / circulation.
  • the test approach In order to investigate the effect of phototoxic substances on the incubated chicken egg, there are numerous possibilities for the test approach with regard to the location of the application, the time of application and the criteria for the assessment and evaluation.
  • the CAM was selected as part of the extra embyronal vascular system as the application site.
  • the CAM is highly vascularized, transparent and develops very dynamically between days 3 and 12.
  • Chlorin E 6 was applied in a gel topically to the corresponding skin areas of a patient and left under occlusion for 30 minutes to act.
  • the irradiation was carried out with a laser at a wavelength of 662 nm for 3 to 5 minutes and in a dose of 36 to 60 J / cm 2 .
  • UVB radiation (without the addition of a medication) was carried out on skin areas damaged by psoriasis. The first result is a faster healing of the skin areas treated with PDT.
  • a small amount of the fungal tissue is taken from patients with fungal disease for pathological determination. A part of this is transferred to a nutrient medium. The resulting colonies are separated and separately subjected to photodynamic therapy (PDT).
  • PDT photodynamic therapy
  • the individual fungal colonies are overlaid with a photosensitizer solution.
  • concentration of the photosensitizer in the solution varies (including 5, 10, 20% and without a photosensitizer solution as a control) to determine the concentration range in which the photosensitizer acts.
  • irradiation is carried out. Among other things, examines the frequency with which the radiation must be repeated and to what extent in order to achieve sufficient effectiveness.
  • Photodynamic therapy showed the greatest influence in the treatment of dermatophytes. The best results were obtained from the mushroom culture doors Trichophyton mentagrophytes and Trichophyton rubrum. In contrast, the PDT had no significant influence on the fungal culture Microsporum gypseum.
  • Chlorin E 6 Treatment of a patient with athlete's foot ( ⁇ spergillus fumigatus) by chlorin E 6 followed by radiation showed that the fungus regressed.
  • Treatment of a patient does not provide any reliable information on the actual effectiveness of Chlorin E 6 .
  • Treatments with Fotolon in different compositions (1: 1, 1:10) involve a larger number of patients.
  • the epilation of hair was carried out on different areas of hair on the patient.
  • the chlorin E 6 was incorporated into a commercially available gel at 0.1% and 0.2% and applied to the corresponding skin areas. After 30 minutes of exposure, the hairy surface was lasered for 3 to 5 minutes and an energy dose of 36 J / cm 2 or 60 J / cm 2 irradiated. The hair was then removed (razor, pincer). The thorax, groin, upper lip and lower abdomen were chosen as the hair surface. The radiation was repeated once a week within 2 to 4 weeks depending on the success of the treatment.
  • Chest most hair has not grown back, the hair that has grown back is very fine

Abstract

Die Erfindung betrifft ein Mittel für die photodynamische Diagnostik und Therapie von onkologischen Krankheiten auf Basis von Chlorin E6-Verbindungen, sowie neue medizinische Verwendungen von Chlorin E6-Verbin­dungen.

Description

Mittel für die photodynamische Diagnostik und Therapie von bösartigen Tumoren
Beschreibung
Die Erfindung betrifft ein Mittel für die photodynamische Diagnostik und Therapie von onkologischen Krankheiten auf Basis von Chlorin E6-Verbin- dungen, sowie neue medizinische Verwendungen von Chlorin E6-Verbin- düngen.
Im russischen Patent Nr. 2152790 wird ein Mittel für die photodynamische Diagnostik und Therapie von onkologischen Krankheiten offenbart, welches aus 40 bis 90 Gew.-% Chlorin E6 und 60 bis 10 Gew.-% Polyvinylpyrroli- don besteht.
Für die photodynamische Krebstherapie sind Photosensibilisatoren erforderlich. Dabei werden diese Sensibilatoren injiziert und reichern sich vorwiegend in den vom Krebs befallenen Zellen an. Durch gezielte Lasereinwir- kung mit bestimmter Wellenlänge wird die Produktion von cytostatischen Stoffen in den Krebszellen, welche den Photosensibilisator enthalten, induziert. Dies führt zu einer Tumornekrose.
Bekannte Sensibilisatoren für diesen Zweck sind Hämatoporphyrine, Phtha- lozyanine und Naphthalozyanine. In der Praxis haben sich dabei die Sensibilisatoren auf Porphyrinbasis aufgrund geringer Phototoxizität und geeigneter Empfindlichkeit für die zur Anwendung in Betracht kommenden Laser bewährt.
Besonders geeignet erwies sich das oben definierte Kombinationspräparat aus dem Komplex von Chlorin E6 und Polyvinylpyrrolidon (PVP). Das Chlorin E6 besitzt intensive Adsorptionsbanden im Spektralbereich 660 ± 10 nm, der für die photodynamische Therapie von besonderer Bedeutung ist. Jedoch ist für die Hämatoporphyrine der Extinktionskoeffizient relativ gering. Für eine erfolgreiche photodynamische Therapie muss daher eine höhere Konzentration dieses Sensibilisators in die Krebszelle gebracht werden. Da die Porphyrine zum Teil Phototoxizität aufweisen, besteht der Vorteil von Chlorin E6 in einer raschen Ausscheidung nach Verabreichung. 24 Stunden nach der Verabreichung sind nur noch 4 bis 6 % der verabreichten Menge im menschlichen Organismus nachzuweisen.
Chlorin E6 und seine Salze sind jedoch relativ unstabil und zwar sowohl in Lösung als auch in lyophilisiertem Zustand bei Zimmertemperatur.
Der oben beschriebene Komplex von Chlorin E6 mit Polyvinylpyrrolidon in der angegebenen Zusammensetzung weist eine deutlich verbesserte Stabilit t auf und ermöglicht daher eine wesentlich bessere Anwendung in der Praxis. Die Anreicherung in Krebsgewebe im Vergleich zum gesunden Gewebe ist jedoch immer noch nicht ganz zufriedenstellend.
Der Erfindung liegt daher die Aufgabe zugrunde, den obigen Nachteil zu beseitigen und ein Mittel auf Basis von Chlorin E6 für die photodynamische Therapie bereitzustellen, welches nicht nur eine für die Handhabung gut geeignete Stabilität auch in Lösung aufweist, sondern einen wesentlich verbesserten Anreicherungsfaktor im Krebsgewebe im Vergleich zum gesunden Gewebe besitzt. Eine weitere Aufgabe der Erfindung ist die Bereitstellung von weiteren medizinischen Verwendungen von Chlorin E6.
Gelöst wird diese Aufgabe erfindungsgemäß durch ein Mittel für die photodynamische Therapie auf Basis von Chlorin E6 und seinen Derivaten und Polyvinylpyrrolidon, welches dadurch gekennzeichnet ist, dass es Chlorin E6 und Polyvinylpyrrolidon im Gewichtsverhältnis 1 :( > 1 ,5) enthält oder daraus besteht. Bevorzugt ist ein Gewichtsverhältnis von Chlorin E6 zu Polyvinylpyrrolidon von 1 : ( > 1 ,5 bis 25), vorzugsweise von 1 :2, stärker bevorzugt 1 :3, stärker bevorzugt 1 :5, noch stärker bevorzugt 1 : 10, noch stärker bevorzugt 1 : 15, noch stärker bevorzugt 1 :25.
Vorzugsweise liegt also das Gewichtsverhältnis im Bereich von etwa 1 :(5 bis 25), vorzugsweise 1 :(10 bis 25), stärker bevorzugt 1 : (15 bis 25), stärker bevorzugt 1 : (15 bis 20). Vorzugsweise liegen das Chlorin E6 und das Polyvinylpyrrolidon als Komplex vor.
Überraschenderweise wird bei einem Mittel der vorstehend angegebenen Zusammensetzung eine um ein mehrfaches bessere Selektivität für die Anreicherung des Chlorin E6 im Krebsgewebe gegenüber dem gesunden Gewebe erzielt. Diese wesentlich erhöhte Anreicherung gestattet nicht nur die Verwendung einer geringeren Dosis des Mittels, sondern ermöglicht auch eine vertiefte Wirksamkeit der Laserbehandlung, die von bisher etwa 1 cm Eindringtiefe durch die Haut in das Gewebe bis zum Doppelten gesteigert werden kann.
Zur Herstellung des erfindungsgemäßen Mittels wird zweckmäßig Polyvinylpyrrolidon in einer für die Injektion geeigneten wässrigen Basis gelöst und dann unter ständigem Umrühren Chlorin E6 in der zur Er∑ielung der angestrebten Zusammensetzung mehr als 1 ,5 und bis zu 25 Gew. -Teile PVP auf 1 Gew. -Teil Chlorin E6 erforderlichen Menge zugesetzt und gerührt, bis eine völlig homogene Mischung entstanden ist. Die erhaltene Lösung kann steril filtriert werden und lässt sich gefriertrocknen und in dieser Form bei Nor- maltemperatur aufbewahren. Die Formulierung kann auch so hergestellt werden, dass sie für die systemische und/oder lokale Wirkung durch paren- terale, enterale und/oder topische Verabreichung geeignet ist.
Die erzielte überlegene Wirksamkeit des erfindungsgemäßen Mittels ist überraschend, da im oben erwähnten russischen Patent ausdrücklich vor der Verwendung von mehr als 60 Gew.-% Polyvinylpyrrolidon gewarnt wird, da überschüssige Mengen nicht mehr mit Chlorin E6 reagieren und unnötigen Ballast darstellen. Dieses Vorurteil wird durch die Erfindung überwunden und eine um ein mehrfaches höhere Anreicherung erzielt, ohne die Beständigkeit des Komplexes hierbei zu verringern.
Als Polyvinylpyrrolidon wird ein Präparat mit 6 bis 12 kDa bevorzugt.
Im Tierversuch wurde bei einer Dosierung des erfindungsgemäßen Mittels von 1 bis 5 mg/kg und Laserbestrahlung mit einer Wellenlänge von 660 nm, Energieexposition 50 J/cm2 eine vollständige Tumomekrose bis zu einer Tiefe von 20 mm beobachtet. Mit dem bekannten Komplex werden bei sonst gleichen Bedingungen Nekrosen nur bis zu einer Tiefe von 16 mm beobachtet, mit der entsprechenden Dosis von Chlorin E6 allein ergab sich nur eine partielle Tumomekrose bis 7 mm Tiefe. Die Toxizität wurde als LD50 mit weniger als 140 mg/kg bestimmt. Das Chlorin E6 wird zweckmä- ßig in Form eines Alkalisalzes eingesetzt. Auch die Derivate des Chlorin E6 (13-Carboxy-17-[2-carboxyethyl]-15-carboxymethyl-17, 18-transdihydro-3- vinyl-8-ethyl-2,7,12, 18-tetramethylporphin), wie z.B. die entsprechenden 15-Carboxyethoxymethyl oder 15-Formylverbindungen, die alle natürlich als Begleitstoffe des Chlorin E6 vorkommen, sind in gleicher Weise geeig- net. Insbesondere können auch Mischungen des Chlorins E6 mit seinen Derivaten im erfindungsgemäßen Komplex enthalten sein.
Das erfindungsgemäße Mittel wird normalerweise in Form einer injizierbaren Lösung verabreicht. Es ist jedoch auch eine Einarbeitung in Salben oder Liniments zur direkten Aufbringung auf die Haut möglich. Als Dosierung wird eine Menge von 0,5 bis 10 mg/kg, vorzugsweise 1 bis 7 mg/kg empfohlen.
Es ist auch möglich, das erfindungsgemäße Mittel in flüssigen oder halbfesten pharmazeutischen Formulierungen zuzubereiten. Besonders bevorzugt sind Formulierungen zur topischen, intravenösen und/oder systemischen Verabreichung, insbesondere für systemische und/oder lokale Wirkung.
Im Zusammenhang mit der vorliegenden Erfindung wurde auch gefunden, dass sich Chlorin E6 zur Herstellung von Arzneimitteln für andere Anwendungen als bei Tumorerkrankungen eignet.
Überraschenderweise hat sich gezeigt, dass Chlorin E6 eine gute Wirksamkeit auf der Haut zeigt, sodass mit Chlorin E6- und PVP-haltigen Mitteln Hauterkrankungen gut behandelt werden könnnen, sowohl als Präventionsmaßnahmen, als auch zur Therapie. Insbesondere wirkt Chlorin E6-PVP bei Pilzerkrankungen, sowie bei Psoriasis und ähnlichen Hauterkrankungen. Es ist wirksam gegen Dermatophyten, Schimmelpilze und Hefen.
Des Weiteren hat sich auch gezeigt, dass Chlorin E6 überraschenderweise zur Epilierung, d.h. zur Haarentfernung geeignet ist.
Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist somit ein Mittel zur prophylaktischen oder therapeutischen oder kosmetischen Behandlung der Haut, insbesondere zur Behandlung von Pilzerkrankungen der Haut, Psoriasis oder zur Haarentfernung, wobei das Mittel Chlorin E6 und PVP in einem beliebigen Mischungsverhältnis umfasst. Die Gewichtsverhältnisse der beiden Komponenten können einen Überschuss von Chlorin E6 oder auch einen Überschuss von PVP umfassen. Geeignet sind insbesondere Ge- wichtsverhältnisse von Chlorin E6 zu PVP von etwa 1 : 0, 1 bis zu einem beträchtlichen Überschuss von Polyvinylpyrrolidon im Vergleich zu Chlorin E6, insbesondere bis zu 1 :25. Besonders bevorzugt sind Gewichtsverhältnisse von 1 : 1 . Aber auch Verhältnisse von 1 : ( > 1 ,5), 1 : 5 oder 1 : 10 oder 1 : 1 5 sind geeignet für die genannten Anwendungen. Die nachstehenden Beispiele erläutern die Wirksamkeit des erfindungsgemäßen Mittels im Vergleich mit einem bekannten Mittel gemäß russi- schem Patent Nr. 21 52790 bezüglich Tumorwirksamkeit, sowie die Wirksamkeit von Chlorin E6 zur Behandlung der Haut.
Beispiel 1
Es wurde untersucht ein als Fotolon bezeichnetes Mittel gemäß russischem Patent Nr. 2152790 mit der Zusammensetzung Chlorin E6 : Polyvinylpyrrolidon im Gewichtsverhältnis 1 : 1 und ein erfindungsgemäßes Mittel in der Zusammensetzung Chlorin E6 : Polyvinylpyrrolidon im Gewichtsverhältnis 1 : 10.
Die Untersuchungen wurden an 1 2 weißen rasselosen Ratten mit einem Gewicht von 1 50 bis 1 80 g mit intraabdominal transplantierten Lymphosar- kom Pliss durchgeführt. Am 5. Tag nach der Tumortransplantation wurden allen 4 Tiergruppen (3 Ratten in jeder Gruppe pro Präparat) intravenös Fotolon bzw. das erfindungsgemäße Mittel in einer Dosierung von 5,0 mg/kg Körpergewicht verabreicht.
Die Anreicherungsdynamik des Fotolons bzw. des erfindungsgemäßen Mittels, wurde in den Tumorgeweben der Ratten (Lymphosarkom Pliss) und den gesunden Geweben (in der gegenüberliegenden Haut des Oberschenkels) mit Hilfe computergesteuerter Fluoreszenzspektrophotometrie mit dem Analysator "LESA-6" (diagnostischer Laser "LGH 633-25" (Figur 1 ) beobachtet.
Die Messungen wurden jede Stunde im Laufe von 8 Stunden nach der Verabreichung der Präparate und nach 24 Stunden durchgeführt.
In den Tabellen 1 bis 4 sind die individuellen und mittleren Anreicherungsdaten des Präparates bei den 1 2 Ratten dargestellt. Tabelle 1 : Anreicherungsdynamik des Fotolon in den gesunden Geweben bei Ratten mit Lymphosarkom Pliss
Figure imgf000008_0001
Tabelle 2: Anreicherungsdynamik des Fotolon in dem Tumorgewebe bei den Ratten mit Lymphosarkom Pliss.
Figure imgf000009_0001
Tabelle 3: Anreicherungsdynamik des Mittels gemäß der Erfindung im gesunden Gewebe der Ratten mit Lymphosarkom Pliss
Figure imgf000010_0001
Tabelle 4: Anreicherungsdynamik des Mittels gemäß der Erfindung im Tumorgewebe der Ratten mit Lymphosarkom Pliss
Figure imgf000011_0001
Die Analyse der erhaltenen Ergebnisse bestätigt, dass eine wesentlich verbesserte selektive Speicherung im Tumorgewebe der Ratten beim Mittel gemäß Erfindung zu beobachten ist - siehe Figur 1 und 2 der Zeichnungen.
Tabelle 5: Koeffizient der Anreicherungsselektivität des Fotolon
Figure imgf000011_0002
Tabelle 6: Koeffizient der Anreicherungsselektivität des Mittels gemäß Erfindung
Figure imgf000012_0001
Beispiel 2 Tumoruntersuchungen
- präklinische Untersuchungen von Fotolon (Chlorin E6 - PVP 1 : 10) bezüglich Phototoxizität im HET-CAM-Assay
Der HET-CAM (Chorio-Allantois-Membran)-Bioassay ist von Bedeutung für die Evaluierung von Effekten auf Gefäße und transplantierte Tumore im Rahmen der photodynamischen Therapie. Der Assay bietet den Vorteil gegenüber Tiermodellen, nicht-invasiv in vivo morphologische Gefäßveränderungen und Veränderungen in der Blutperfusion/Zirkulation qualitativ und quantitativ zu erfassen. Zur Untersuchung der Wirkung von phototoxischen Substanzen am bebrüteten Hühnerei bestehen zahlreiche Möglichkeiten des Versuchsansatzes bezüglich der Applikationslokalisation, des Applikationszeitpunktes und der Kriterien bei der Befunderhebung und Auswertung.
Als Applikationsort wurde die CAM als ein Teil des extraembyronalen Gefäßsystems ausgewählt. Die CAM ist stark vaskularisiert, transparent und entwickelt sich sehr dynamisch zwischen Tag 3 und 12.
Es wurde in den ersten Untersuchungen ein Vergleich zwischen Photosan-3 (Hämatophorphyrinderivat), Firma Seehofer Laboratorium GmbH und Foto- lon (Chlorin E6 - PVP 1 :10) bezüglich Toxizität ohne Bestrahlung, variabler Lichtdosis und variabler Photosensitizerkonzentration durchgeführt.
Als Ergebnisse konnten bisher festgestellt werden:
bei Fotolon tritt keine Toxizität ohne Bestrahlung auf es wurde eine dosisabhängige Phototoxreaktion in Abhängigkeit von der Fotolonkonzentration und der Lichtdosis bei gleicher Leistungsdichte festgestellt.
Beispiel 3
Anwendungserweiternde Untersuchungen
Um die bessere Wirksamkeit des Fotolons (als Kombination von Chlorin E6 und PVP in verschiedenen Zusammensetzungen, u.a. 1 : 1 , 1 : 10) im Ver- gleich zu reinem Chlorin E6 zu bestimmen, wurden erst einmal Untersuchungen mit reinem Chlorin E6, ohne Zusatz von PVP, durchgeführt. Dazu zählen:
1 . die Behandlung von Psoriasis 2. die Behandlung von humanen Pilzerkrankungen in vitro und in vivo (Fußpilz) und 3. die Epilierung von Haaren.
Die Behandlung von Psoriasis:
Das Chlorin E6 wurde in einem Gel topisch auf die entsprechenden Hautflächen eines Patienten aufgetragen und 30 Minuten unter Okklusion, zum Einwirken, belassen. Die Bestrahlung erfolgte mit einem Laser bei einer Wellenlänge von 662 nm für 3 bis 5 Minuten und in einer Dosis von 36 bis 60 J/cm2. Im Vergleich dazu wurde eine UVB-Bestrahlung (ohne weiteren Zusatz eines Medikaments) von Psoriasis-geschädigten Hautflächen durchgeführt. Als erstes Ergebnis kann eine schnellere Abheilung der mittels PDT behandelten Hautflächen genannt werden.
Die Untersuchungen zur Behandlung humaner Pilzerkrankungen laufen vereinfacht folgendermaßen ab:
Patienten mit einer Pilzerkrankung wird eine kleine Menge des Pilzgewebes zur pathologischen Bestimmung entnommen. Davon wird ein Teil in ein Nährmedium übertragen. Die daraus entstehenden Kolonien werden getrennt und separat einer photodynamischen Therapie (PDT) unterzogen.
Zur Vorbereitung der PDT werden die einzelnen Pilzkolonien mit einer Photosensibilisatorlösung überschichtet. Dabei variiert die Konzentration des Photosensibilisators in der Lösung (u.a. 5, 10, 20 % und ohne Photosensibilisatorlösung als Kontrolle), zur Feststellung des Konzentrations- bereiches in dem der Photosensibilisator wirkt. Nach 30 Minuten, in denen die Photosensibilisatorlösung auf die Pilzkulturen eingewirkt hat, wird bestrahlt. Es wird u.a. untersucht, mit welcher Häufigkeit man die Bestrahlung in welcher Stärke wiederholen muss, um eine ausreichende Wirksamkeit zu erreichen.
Es wurden bisher folgende Pilzarten in die PDT mit Chlorin E6 einbe∑ogen:
Schimmelpilze: Äspergillus niger, Äspergillus f umigatus, Penicillium species, Mucor species Hefen: Candida albϊcans, Candida glabrata
Dermatophyten: Trichophyton rubrum, Microsporum gypseum, Trichophy- ton mentagrophytes
Die Ergebnisse können folgendermaßen bewertet werden:
Die photodynamische Therapie zeigte den größten Einfluss bei der Behandlung von Dermatophyten. Die besten Ergebnisse erhielt man bei den Pilzkul- turen Trichophyton mentagrophytes und Trichophyton rubrum. Auf die Pilzkultur Microsporum gypseum hatte hingegen die PDT keinen wesentlichen Einfluss.
Unter den verschiedenen Schimmelpilzen, kann man eine sichtbare Wirksamkeit der photodynamischen Therapie auf die Pilzkulturen Penicillium species, Äspergillus fumigatus und Äspergillus niger beobachten. Die Pilzart Mucor species war hingegen empfindlich gegen PDT.
Verschiedene Ergebnisse erhielt man auch bei den Hefen. Bei der Behandlung von Candida albicans hatte die PDT einen großen Einfluss (die bestrahlten Kolonien sind vollständig abgestorben). Die Pilzkultur Candida glabrata waren jedoch bis zum Ende der Therapie unempfindlich gegen PDT.
Die Behandlung eines Patienten mit Fußpilz (Äspergillus fumigatus) durch Chlorin E6 mit anschließender Bestrahlung zeigte eine Rückbildung des Pilzes. Das Chlorin E6 wurde in ein handelsübliches Gel eingearbeitet und topisch appliziert. Weitere Parameter der Therapie waren: Chlorin E6-Kon- zentration = 0,2 %, als Lichtquelle diente ein Laser mit einer Bestrahlungswellenlänge von 662 nm und einer Leistung von 200 mW, die Anzahl der Bestrahlungen war 6, die Wiederholung der Bestrahlung erfolgte wöchentlich, Bestrahlungszeit: die ersten zwei Bestrahlungen 3 Minuten, die darauffolgenden vier Bestrahlungen 5 Minuten.
Jedoch bringt die Behandlung eines Patienten keine sicheren Aussagen zur tatsächlichen Wirksamkeit des Chlorin E6. In den Behandlungen mit Fotolon in unterschiedlichen Zusammensetzungen (1 :1 , 1 :10) wird eine größere Patientenzahl in die Behandlung einbezogen. Die Epilierung von Haaren:
Die Epilierung von Haaren erfolgte an unterschiedlichen Behaarungsflächen am Patienten. Das Chlorin E6 wurde in ein handelsübliches Gel zu 0,1 % und 0,2 % eingearbeitet und auf die entsprechenden Hautpartien aufgetra- gen. Nach 30 Minuten Einwirkzeit wurde die behaarte Oberfläche mit einem Laser für 3 bis 5 Minuten und einer Energiedosis von 36 J/cm2 oder 60 J/cm2 bestrahlt. Die Haare wurden daraufhin entfernt (Rasierapparat, Pinzelle). Als Behaarungsfläche wurden der Brustkorb, die Leiste, die Oberlippe und der Unterbauch gewählt. Die Bestrahlung wurde in Abhängigkeit vom Behandlungserfolg einmal wöchentlich innerhalb von 2 bis 4 Wochen wiederholt.
Folgende Ergebnisse wurden festgestellt:
Brustkorb: die meisten Haare sind nicht nachgewachsen, die Haare, die nachgewachsen sind, sind sehr fein
Leiste: die meisten Haare sind nicht nachgewachsen, die Haare, die nachgewachsen sind, sind sehr fein Oberlippe: die Haare sind nicht nachgewachsen Unterbauch: die Haare sind nicht nachgewachsen
Diese Ergebnisse zeigen die Wirksamkeit von Chlorin E6 bei der Behandlung von Psoriasis, einzelner Pilzerkrankungen und der Epilierung.

Claims

Ansprüche
1. Mittel für die photodynamische Diagnostik und Therapie von Tumo- ren auf Basis von Porphyrinverbindungen und Polyvinylpyrrolidon, d ad u rc h g e ken n zeic h n et, dass der Anteil an Chlorin E6 oder eines Derivats desselben im Verhältnis zu Polyvinylpyrrolidon 1 : (> 1,5) beträgt.
2. Mittel nach Anspruch 1, d a d u rc h g eken nzeich net, dass das Gewichtsverhältnis von Chlorin E6 oder dessen Derivat zu
Polyvinylpyrrolidon 1 : (5 bis 25) beträgt.
3. Mittel nach Anspruch 1 oder 2, d a d u rch g eken n zeic h n et, dass das Gewichtsverhältnis Chlorin E6 oder dessen Derivat zu Polyvinylpyrrolidon 1: (15 bis 25) beträgt.
4. Mittel nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dad u rch gekennzeichnet, dass das Polyvinylpyrrolidon 6 bis 12 kDa aufweist.
5. Verwendung von Chlorin E6 und Polyvinylpyrrolidon zur Herstellung eines Mittels zur Therapie und/oder prophylaktischen und/oder kosmetischen Behandlung von der Haut.
6. Verwendung nach Anspruch 5 zur Therapie oder prophylaktischen Behandlung von Pilzerkrankungen der Haut, insbesondere von Er- krankungen, die durch Dermatophyten, Schimmelpilze und Hefen hervorgerufen werden.
7. Verwendung nach Anspruch 5 oder 6 zur Therapie oder prophylaktischen Behandlung von Psoriasis.
8. Verwendung nach Anspruch 5 zur Entfernung von Haaren.
9. Mittel zur prophylaktischen oder therapeutischen oder kosmetischen Behandlung der Haut, umfassend Chlorin E6 und Polyvinylpyrrolidon.
10. Mittel nach Anspruch 9, umfassen Chlorin E6 und Polyvinylpyrrolidon in einem Gewichtsverhältnis von 1 : (0, 1 bis 25).
1 1 . Mittel nach Anspruch 9 oder 10, wobei das Gewichtsverhältnis von Chlorin E6 und Polyvinylpyrrolidon im Bereich von 1 : (1 bis 25) liegt.
PCT/EP2004/003809 2003-04-10 2004-04-08 Mittel für die photodynamische diagnostik und therapie von bösartigen tumoren WO2004089409A2 (de)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP04726487A EP1610821A2 (de) 2003-04-10 2004-04-08 Mittel f r die photodynamische diagnostik und therapie von bösartigen tumoren

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE10316566A DE10316566A1 (de) 2003-04-10 2003-04-10 Mittel für die photodynamische Diagnostik und Therapie von bösartigen Tumoren
DE10316566.5 2003-04-10

Publications (2)

Publication Number Publication Date
WO2004089409A2 true WO2004089409A2 (de) 2004-10-21
WO2004089409A3 WO2004089409A3 (de) 2005-01-13

Family

ID=33038992

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/EP2004/003809 WO2004089409A2 (de) 2003-04-10 2004-04-08 Mittel für die photodynamische diagnostik und therapie von bösartigen tumoren

Country Status (3)

Country Link
EP (1) EP1610821A2 (de)
DE (1) DE10316566A1 (de)
WO (1) WO2004089409A2 (de)

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006106383A1 (en) * 2005-04-07 2006-10-12 Photo Diagnostic Devices (Pdd) Ltd Photosensitizers and mri enhancers
EP1983965A2 (de) * 2006-01-18 2008-10-29 Ceramoptec Industries, Inc. Fotodynamisches kosmetikverfahren und heilungsverfahren

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997028784A1 (en) * 1996-02-08 1997-08-14 Estee Lauder Inc. Compositions useful in the phototherapeutic treatment of proliferative skin disorders
WO1998030242A2 (en) * 1997-01-10 1998-07-16 Photocure As Photochemotherapeutic compositions
RU2152790C1 (ru) * 1999-05-12 2000-07-20 Мещерякова Аделия Леонидовна Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний
WO2003086460A2 (en) * 2002-04-05 2003-10-23 Candela Corporation High fluence rate activation of photosensitizers for dermatological applications

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1997028784A1 (en) * 1996-02-08 1997-08-14 Estee Lauder Inc. Compositions useful in the phototherapeutic treatment of proliferative skin disorders
WO1998030242A2 (en) * 1997-01-10 1998-07-16 Photocure As Photochemotherapeutic compositions
RU2152790C1 (ru) * 1999-05-12 2000-07-20 Мещерякова Аделия Леонидовна Средство для фотодинамической диагностики и терапии онкологических заболеваний
WO2003086460A2 (en) * 2002-04-05 2003-10-23 Candela Corporation High fluence rate activation of photosensitizers for dermatological applications

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2006106383A1 (en) * 2005-04-07 2006-10-12 Photo Diagnostic Devices (Pdd) Ltd Photosensitizers and mri enhancers
JP2008534670A (ja) * 2005-04-07 2008-08-28 フォト・ダイアグノスティック・デバイシィズ・（ピーディーディー）・リミテッド 光増感剤とｍｒｉ増感剤
EP1983965A2 (de) * 2006-01-18 2008-10-29 Ceramoptec Industries, Inc. Fotodynamisches kosmetikverfahren und heilungsverfahren
EP1983965A4 (de) * 2006-01-18 2009-06-24 Ceramoptec Gmbh Fotodynamisches kosmetikverfahren und heilungsverfahren

Also Published As

Publication number Publication date
EP1610821A2 (de) 2006-01-04
WO2004089409A3 (de) 2005-01-13
DE10316566A1 (de) 2004-10-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP1128812B1 (de) 5-aminolävulinsäure-nanoemulsion
DE60032543T2 (de) Topisch verabreichbare Zinkzusammensetzungen
DE69532160T2 (de) Verfahren zur phototherapeutischen behandlung von proliferativen hauterkrankungen
EP1272201B1 (de) Verwendung von kompatiblen soluten als substanzen mit radikalfangenden eigenschaften
DE69909794T2 (de) Verwendung eines dipeptids für wiederherstellungsprozesse
DE3032481A1 (de) Praeparat zur therapeutischen und/oder kosmetischen anwendung an lebewesen
EP1711190A1 (de) Mittel zur behandlung von entz ndlichen erkrankungen
DE69725843T2 (de) Mittel zur verwendung in der phototherapeutischen behandlung proliferativer hautstörungen
DE1804801C3 (de) Mittel zur Aknebehandlung
WO2003077941A1 (de) Verwendung eines oder mehrerer von plasma und zellwandbestandteilen befreiten natürlichen oder modifizierten sauerstoffbinder zur externen behandlung offener, insbesondere chronischer wunden
DE69829838T2 (de) Verfahren zur stabilisierung von linksdrehender ascorbinsäure (laa) und stabile zusammensetzungen von laa
DE60204067T2 (de) Verwendung von Xanthenon-4-Essigsäure zur Herstellung eines Medikaments für die Behandlung von hyperproliferativer Störungen
EP0245669B1 (de) Pharmazeutisches Präparat zur Verhütung der Schädigung lebender Zellen durch freie Radikale, beziehungsweise zur Erhöhung der Wirksamkeit von organischen Schwefelverbindungen und Verfahren zur Erhöhung der Lebensdauer isolierter Organe
DE2748399A1 (de) Antimikrobielles mittel zur oertlichen anwendung
WO2004089409A2 (de) Mittel für die photodynamische diagnostik und therapie von bösartigen tumoren
DE4315866C1 (de) Äußerliche Zubereitungen zur Therapie von Hauterkrankungen mit Photosensibilisatoren
DE4236346A1 (de) Wirkstoffgruppe, Verfahren zu ihrer Herstellung sowie ihre Verwendung
DE60120159T2 (de) Hautpflegemittel
DE4300969A1 (de)
EP0040604B1 (de) Kosmetische zubereitung
EP1131101B1 (de) Khellin-zubereitung und deren verwendung zur topischen therapie
DE10222738A1 (de) Ketoprofen-enthaltende Arzneiformulierungen zur Anwendung für die Photodynamische Therapie
DE2729903A1 (de) Antithrombosemittel
DD259351A1 (de) Verfahren zur herstellung eines arzneimittels fuer die thermische behandlung von tumoroesem gewebe
DE19744811A1 (de) Verwendung von delta-Aminolävulinsäure zur Herstellung eines topischen Arzneimittels zur integralen Diagnose und/oder Therapie von Tumoren in Hohlorganen

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): AE AG AL AM AT AU AZ BA BB BG BR BW BY BZ CA CH CN CO CR CU CZ DE DK DM DZ EC EE EG ES FI GB GD GE GH GM HR HU ID IL IN IS JP KE KG KP KR KZ LC LK LR LS LT LU LV MA MD MG MK MN MW MX MZ NA NI NO NZ OM PG PH PL PT RO RU SC SD SE SG SK SL SY TJ TM TN TR TT TZ UA UG US UZ VC VN YU ZA ZM ZW

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A2

Designated state(s): BW GH GM KE LS MW MZ SD SL SZ TZ UG ZM ZW AM AZ BY KG KZ MD RU TJ TM AT BE BG CH CY CZ DE DK EE ES FI FR GB GR HU IE IT LU MC NL PL PT RO SE SI SK TR BF BJ CF CG CI CM GA GN GQ GW ML MR NE SN TD TG

121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application
WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2004726487

Country of ref document: EP

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 2004726487

Country of ref document: EP

WWW Wipo information: withdrawn in national office

Ref document number: 2004726487

Country of ref document: EP