WO2004057324A2 - Mikrostrukturierte anordnung zur behandlung mindestens eines fluids - Google Patents

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WO2004057324A2
WO2004057324A2 PCT/DE2003/004207 DE0304207W WO2004057324A2 WO 2004057324 A2 WO2004057324 A2 WO 2004057324A2 DE 0304207 W DE0304207 W DE 0304207W WO 2004057324 A2 WO2004057324 A2 WO 2004057324A2
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reservoirs
channel system
electrode
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Inventor
Markus Pfister
Steve Reichel
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Siemens Aktiengesellschaft
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    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
    • G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
    • G01N27/416—Systems
    • G01N27/447—Systems using electrophoresis
    • G01N27/44756—Apparatus specially adapted therefor
    • G01N27/44791—Microapparatus

Definitions

  • the invention relates to a microstructured arrangement for the treatment of at least one fluid according to the preamble of claim 1.
  • Treatment means the implementation of reactions, but in particular the analysis, for example by capillary electrophoresis.
  • a microchip laboratory system has a plurality of reservoirs which are formed in a substrate together with a channel system in a micromechanical way. Some of the reservoirs contain fluids to be processed, here a sample fluid and a buffer fluid, which after processing, here the analysis of the buffered sample fluid by capillary electrophoresis, are collected as waste products in other reservoirs.
  • fluids to be processed here a sample fluid and a buffer fluid, which after processing, here the analysis of the buffered sample fluid by capillary electrophoresis, are collected as waste products in other reservoirs.
  • Fluids through the channel system take place electrokinetically by applying an electrical voltage between the relevant reservoirs, for which purpose electrodes are arranged in these which can be connected to a voltage source.
  • the reservoirs with the electrodes and the channel system have been formed on a substrate, the reservoirs being filled with the fluids intermittently, as is customary in laboratory operation.
  • the object of the invention is to improve the microstructured arrangement of the type specified at the outset with regard to its practical usability and, in particular, to improve it for use in industrial or other process operation.
  • the object is achieved by the arrangement specified in claim 1, of which advantageous developments are specified in the subclaims.
  • the structures for the fluid treatment and the structures for the fluidic and electrical supply are decoupled from one another and implemented on different support plates, so that in particular the support plate with the structures for the fluid treatment, which are generally much finer and thus more susceptible to malfunction and wear, are in particular can be manufactured as a structurally simple and inexpensive replacement part.
  • the electrodes used for the electro-kinetic conveyance of the fluid are no longer applied, as was previously customary, in thin-film technology on the substrate with the structures for fluid treatment, but are arranged on the carrier plate with the structures for fluidic and electrical supply, where they are essential more robust, for example made of solid material.
  • the reservoirs and the channel system can be implemented in different ways as microfluidic structures, wherein they are preferably designed in the form of trench-shaped depressions on each side of the two carrier plates and the two carrier plates are connected to one another on these sides.
  • the connection of the two carrier plates can take place directly or indirectly with the interposition of a connecting plate which contains fluid passages for the fluidic connection of the reservoirs to the channel system and, moreover, covers the depressions in the two carrier plates in a fluid-tight manner.
  • the carrier plates are preferably covered on their sides containing the trench-shaped depressions with cover plates, the fluid passages for fluid connection of the reservoirs with the sewer system.
  • the reservoir used to hold the fluid before its treatment advantageously has two fluid connections for the continuous supply and discharge of the fluid into and from the reservoir, the electrode being arranged in a flow path of the fluid between the two fluid connections and the Point at which the reservoir can be connected to the channel system, in relation to the direction of flow of the fluid, lies in front of the electrode in the reservoir.
  • the fluid flows through the reservoir, which fluid can be continuously removed from an industrial or other process and conveyed through the reservoir in a pressure-driven manner.
  • the residence time of the fluid from the time of its removal from the process to the time at which a part of it is electro-kinetically branched off from the reservoir for treatment in the channel system and conveyed into the channel system is therefore due to a correspondingly high volume flow the reservoir of flowing fluid is very short and independent of the time or times of the branch. Since the branching of the fluid from the reservoir into the channel system, as seen in the direction of the flow of the fluid through the reservoir, takes place in front of the electrode, gas bubbles formed on the electrode cannot get into the channel system and block it. Since only part of it is branched from the reservoir into the channel system each time for the treatment of the fluid, the flow cross section of the reservoir is larger than that of the channel system. In any case, the cross-section of the channel system is small enough to allow electrokinetic delivery of the fluid at all.
  • connection between the reservoir in the first carrier plate and the channel system in the second carrier plate preferably takes place via a branch channel formed in the first carrier plate and branching off from the reservoir. whose flow cross-section is smaller than that of the reservoir and enables an electrokinetic delivery of the fluid.
  • the stub channel as viewed from the electrode, preferably branches off from the reservoir at an angle ⁇ 90 °, so that the fluid which flows through the reservoir in a pressure-driven manner is not pressed into the stub channel.
  • Fluid is removed from the reservoir and disposed of if necessary.
  • the electrodes are preferably arranged such that they each protrude into the flow path of the fluid through the respective reservoir and the fluid flows around it. This makes it possible to design the electrodes as robust wire electrodes that are degraded less quickly by electrolysis than, for example, thin-film electrodes. So that the flow of the fluid through the electrodes is not disturbed, the interior of the reservoir can be widened in the region of the protruding electrode, so that the flow cross section of the reservoir remains at least approximately constant.
  • Figure 1 shows an embodiment of the microstructured arrangement according to the invention with fluid reservoirs and electrodes on one first carrier plate and a channel system for fluid analysis on a second carrier plate, the
  • Figures 2 and 3 an example of the second support plate with the channel system and support plate in side view and top view, the
  • FIGS. 4 to 6 show an example of the first carrier plate with the reservoirs and electrodes and the carrier plate lying thereon in plan view, side view and bottom view,
  • Figure 7 shows an example of the cover plate connected to the first carrier plate in plan view
  • FIGS. 8 and 9 show an example of the fluidic connection of a reservoir in the first carrier plate with the channel system in the second carrier plate in two different sectional views
  • FIGS. 10 and 11 show an example of a reservoir through which the fluid flows and with a branch channel branching off from it in two different sectional views.
  • Figure 1 shows a microstructured arrangement for the treatment of fluids, with reservoirs 2, 3, 4 and 5 for receiving the fluids before or after their treatment and with a channel system 6, which connects the reservoirs 2 to 5 with each other and in which the treatment of Fluids takes place.
  • the channel system 6 consists of four channels 7, 8, 9 and 10, each branching off from one of the four reservoirs 2 to 5 and at an intersection 11 are interconnected.
  • Electrodes 12, 13, 14 and 15 are arranged in the reservoirs 2 to 5 and are connected to a four-pole voltage source 16, by means of which different high voltages can be set between the electrodes 12 to 15.
  • fluids from predeterminable reservoirs, here 2 and 3 are conveyed electrokinetically via the channel system 6 into other reservoirs, here 4 and 5.
  • a buffer fluid is first drawn from the reservoir 3 via the channels
  • the sample fluid at the crossing point 11 is then introduced into the channel 9 for a predetermined time and thus in a predetermined amount, before it is subsequently redirected into the channel 10 , That in the channel
  • Sample fluid introduced and subsequently conveyed through the channel 9 through the subsequent buffer fluid is electrophoretically separated into its components there, which are detected by means of a detector device 17; an evaluation device 18 arranged downstream of the detector device 17 determines the detected components of the sample fluid qualitatively and quantitatively.
  • a sample fluid can first be conveyed from the reservoir 3 via the channels 8 and 10 and a buffer fluid from the reservoir 2 via the channels 7 and 10 into the reservoir 5.
  • the buffer fluid at the crossing point 11 is diverted into the channel 9 and thereby injects the sample fluid located in the area of the crossing point 11 into the channel 9.
  • the sample is Fluid electrophoretically separated into its components, which are detected by means of the detector device 17.
  • the amount of sample fluid injected into channel 9 corresponds to the volume of the intersection 11 and can be increased by the fact that the channel 10 opens into the channel 9 offset from the channel 8 in the direction towards the detector device 17.
  • the reservoirs 2 to 5 are designed in the form of further channels with fluid connections 19, 20, 21, 22, 23 and 24.
  • the reservoirs 2 and 3 used to feed the fluid into the channel system 6 each have two fluid connections 19 and 20 or 21 and 22, the channels 7 and 8 each in the area between the two fluid connections 19 and 20 or 21 and 22 are connected to the reservoirs 2 and 3.
  • the sample fluid 25 is taken continuously from an industrial process, here a pipeline 26, and after preparation, for example filtering and buffering, in a sample preparation device 27 by a pump or the like, pressure-driven via the fluid supply. closure 19 fed into the reservoir 2.
  • the sample fluid 25 flows through the reservoir 2 and is disposed of via the fluid connection 20.
  • the reservoirs 2 to 5 with the electrodes 12 to 15 are formed on a first carrier plate, indicated here with 28, and the channel system 6 in a further carrier plate, indicated here with 29, both carrier plates 28 and 29 are releasably connected to one another to produce fluid-tight connections between the reservoirs 2 to 5 and the channel system 6.
  • FIGS. 2 and 3 show the second carrier plate 29 in a side view or with a view of the side 30 of the carrier plate 29 on which the channel system 6 is designed in the form of trench-shaped depressions. These are covered by a cover plate 53, which contains fluid passages (not shown here) at the ends of the four channels 7 to 10.
  • the carrier plate 29 also has contacts 32 of the detector device 17 (not shown here) for connection to the evaluation device 18.
  • FIG. 4 shows the first carrier plate 28 with a view of its side 33, on which the reservoirs 2 to 5, also in the form of trench-shaped depressions, are formed. As with the carrier plate 29 shown in FIGS. 2 and 3, these are covered with a cover plate 54 containing fluid passages.
  • Figures 5 and 6 show the first carrier plate 28 with its cover plate 54 in side and bottom views;
  • FIG. 7 shows the top plate 54 with the fluid passages 55 contained therein in a top view.
  • Contacts 32 are formed on the side 39 of the carrier plate 28 facing away from the side 33 in the form of plug-in or screw connections for lines with plug parts connected to them.
  • branch channels 40, 41, 42 and 43 are provided in the first carrier plate 28, which branch off from the respective reservoirs 2 to 5 and their respective flow cross-section is smaller than that of the reservoirs 2 to 5 and enables an electrokinetic delivery of the fluids.
  • the ends of the branch channels 40 to 43 lie directly opposite the fluid passages 55 in the cover plate 54.
  • FIG. 8 shows a longitudinal section through the support plates 28 and 29 connected to one another, including their cover plates 54 and 55, in the region of the reservoir 4.
  • FIG. 9 shows a plan view of the support plate 28 in the region of the reservoir 4.
  • the reservoir 4 is on the side 33 of the support plate 28 is formed as a trench-shaped depression with a cross section of 0.3 x 0.3 mm, for example, and is covered by the cover plate 54 to form a channel.
  • the fluid connection 23 and the electrode connection 36 are formed, which extend through the carrier plate 28 into the reservoir 4.
  • a fluid connector 47 with a fluid line 48 is screwed into the fluid connection 23 and an electrode connector 49 with an electrode line 50 and the electrode 14 is screwed into the electrode connection 36.
  • the electrode 14 designed as a wire electrode extends transversely through the reservoir 14 widened at this point and is held with its end in the recess 46 of the connecting plate 44.
  • the electrode 14 is therefore flowed around on both sides by the fluid flowing through the reservoir 4 and discharged via the fluid connection 23.
  • the branch duct 42 which for example has a cross section of 0.1 ⁇ 0.1 mm, branches off in front of the electrode 14, that is to say sufficiently small for an electrokinetic delivery of the fluid to the electrode 14 is gone.
  • the fluid passage 55 in the cover plate 54 lies in the end region of the branch duct 42 and connects it via the fluid passage 56 in the cover plate 53 to the duct system 6 in the carrier plate 29.
  • the cross section of the duct system 6 is, for example, 0.05 x 0.05 mm .
  • the fluid passage 55 is shown in FIG Cover plate 54 expanded on the side facing the cover plate 53 in the form of a recess 57, the depth of which is 0.1 mm, for example is sufficiently low not to hinder the electrokinetic delivery of the fluid through the fluid passages 55 and 56.
  • a sealing ring 58 can be arranged in the flat recess 57.
  • FIGS. 10 and 11 each show, in different sectional representations, a section of the reservoir 2 in the area between the two fluid connections 19 and 20.
  • the electrode 12 is wire-shaped at least in its end area and penetrates the first carrier plate 28 from the side 39. Furthermore, the electrode 12 extends across the reservoir 2 into a recess 46 in the cover plate 54, where it is held at its end. This ensures that the electrode 12 on both sides of the
  • Sample fluid 25 flows around.
  • the reservoir 2 is widened in the region of the electrode 12, so that its flow cross section narrows only slightly or not at all at this point.
  • the branch of the branch channel 40 from the reservoir 2 is arranged in front of the electrode 12 in relation to the flow direction of the sample fluid 25, so that gas bubbles 52 formed by electrolysis on the electrode 12 from the flowing sample fluid 25 from the branch of the Stitch channel 40 are transported away and discharged and thus do not get into the stitch channel 40 and subsequently into the channel system 6.
  • the stub channel 40 branches off from the reservoir 2 at an angle ⁇ 90 °, so that the pressure-driven sample fluid 25 flowing through the reservoir 2 is not pressed into the stub channel 40.

Abstract

Eine mikrostrukturierte Anordnung zur Behandlung mindestens eines Fluids enthält Reservoirs zur Aufnahme des Fluids vor bzw. nach seiner Behandlung, ein die Reservoirs untereinander verbindendes Kanalsystem mit Mitteln zur Behandlung des Fluids, in den Reservoirs angeordnete Elektroden und eine an die Elektroden schaltbare Spannungsquelle zur elektrokinetischen Förderung des Fluids von mindestens einem zu mindestens einem anderen der Reservoirs über das Kanalsystem. Um die Anordnung im Hinblick auf ihre praktische Verwendbarkeit, insbesondere für den Einsatz im industriellen oder sonstigen Prozessbetrieb, zu verbessern, sind die Reservoirs (2, 3, 4, 5) mit den Elektroden in einer ersten Trägerplatte (28) und das Kanalsystem (6) in einer weiteren Trägerplatte (29) ausgebildet, wobei beide Trägerplatten (28, 29) unter fluidisch dichter Verbindung der Reservoirs (2, 3, 4, 5) mit dem Kanalsystem (6) lösbarmiteinander verbunden sind.

Description

Beschreibung
Mikrostrukturierte Anordnung zur Behandlung mindestens eines Fluids
Die Erfindung betrifft eine mikrostrukturierte Anordnung zur Behandlung mindestens eines Fluids nach dem Oberbegriff des Anspruchs 1. Unter Behandlung sind hier die Durchführung von Reaktionen, insbesondere aber die Analyse, beispielsweise durch Kapillarelektrophorese, zu verstehen.
Eine Anordnung der eingangs angegebenen Art ist beispielsweise aus der EP 1 162 455 AI bekannt. Dort weist ein Mikrochip- Laborsystem mehrere Reservoirs auf, die zusammen mit einem Kanalsystem auf mikromechanischem Wege in einem Substrat ausgebildet sind. Einige der Reservoirs enthalten zu bearbeitende Fluide, hier ein Proben-Fluid und ein Puffer-Fluid, die nach ihrer Bearbeitung, hier der Analyse des gepufferten Pro- ben-Fluids durch Kapillarelektrophorese, als Abfallprodukte in anderen Reservoirs gesammelt werden. Die Förderung der
Fluide durch das Kanalsystem erfolgt elektrokinetisch durch Anlegen einer elektrischen Spannung zwischen den betreffenden Reservoirs, wozu in diesen Elektroden angeordnet sind, die an eine Spannungsquelle schaltbar sind.
Bisher wurden die Reservoirs mit den Elektroden und dem Kanalsystem auf einem Substrat ausgebildet, wobei die Reservoirs diskontinuierlich mit den Fluiden gefüllt wurden, so wie dies im Laborbetrieb üblich ist.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, die mikrostrukturierte Anordnung der eingangs angegebenen Art im Hinblick auf ihre praktische Verwendbarkeit zu verbessern und insbesondere für den Einsatz im industriellen oder sonstigen Prozessbe- trieb zu ertüchtigen. Gemäß der Erfindung wird die Aufgabe durch die in Anspruch 1 angegebene Anordnung gelöst, von der vorteilhafte Weiterbildungen in den Unteransprüchen angegeben sind.
Bei der erfindungsgemäßen Anordnung sind die Strukturen für die Fluidbehandlung und die Strukturen für die fluidische und elektrische Versorgung voneinander entkoppelt und auf unterschiedlichen Trägerplatten realisiert, so dass insbesondere die Trägerplatte mit den in der Regel sehr viel feineren und damit störungs- und verschleißanfälligeren Strukturen für die Fluidbehandlung als konstruktiv einfaches und preiswertes Austauschteil hergestellt werden kann. So sind die zur elek- trokinetischen Förderung des Fluids dienenden Elektroden nicht mehr, wie bisher üblich, in Dünnschichttechnik auf dem Substrat mit den Strukturen für die Fluidbehandlung aufgebracht, sondern auf der Trägerplatte mit den Strukturen für die fluidische und elektrische Versorgung angeordnet, wo sie wesentlich robuster, beispielsweise aus Vollmaterial, realisiert werden können. Durch Aneinanderfügen der beiden Träger- platten werden die darin ausgebildeten Strukturen, nämlich die Reservoirs mit den Elektroden und das Kanalsystem, miteinander verbunden, wobei die Verbindung nach außen hin fluidisch dicht erfolgt.
Die Reservoirs und das Kanalsystem können in unterschiedlicher Weise als mikrofluidische Strukturen realisiert sein, wobei sie vorzugsweise in Form von grabenförmigen Vertiefungen auf jeweils einer Seite der beiden Trägerplatten ausgebildet sind und wobei die beiden Trägerplatten an diesen Sei- ten miteinander verbunden sind. Die Verbindung beider Trägerplatten kann unmittelbar oder mittelbar unter Zwischenlage einer Verbindungsplatte erfolgen, welche Fluidpassagen zur fluidischen Verbindung der Reservoirs mit dem Kanalsystem enthält und im Übrigen die Vertiefungen in den beiden Träger- platten fluidisch dicht abdeckt. Vorzugsweise sind die Trägerplatten auf ihren die grabenförmigen Vertiefungen enthaltenden Seiten mit Deckelplatten abgedeckt, die Fluidpassagen zur fluidischen Verbindung der Reservoirs mit dem Kanalsystem enthalten.
Das jeweils zur Aufnahme des Fluids vor seiner Behandlung dienende Reservoir weist in vorteilhafter Weise zwei Fluidan- schlüsse zur kontinuierlichen Zufuhr und Abfuhr des Fluids in das bzw. aus dem Reservoir auf, wobei die Elektrode in einem Strömungsweg des Fluids zwischen beiden Fluidanschlüssen angeordnet ist und die Stelle, an der das Reservoir mit dem Kanalsystem verbindbar ist, bezogen auf die Strömungsrichtung des Fluids, vor der Elektrode in dem Reservoir liegt. Das Reservoir wird von dem Fluid durchströmt, welches dazu kontinuierlich aus einem industriellen oder sonstigen Prozess entnommen und druckgetrieben durch das Reservoir gefördert werden kann. Die Verweildauer des Fluids von dem Zeitpunkt seiner Entnahme aus dem Prozess bis zu dem Zeitpunkt, an dem ein Teil von ihm zur Behandlung in dem Kanalsystem elektro- kinetisch aus dem Reservoir abgezweigt und in das Kanalsystem gefördert wird, ist daher bei entsprechend hohem Volumenstrom des durch das Reservoir strömenden Fluids sehr kurz und von dem Zeitpunkt oder den Zeitpunkten der Abzweigung unabhängig. Da die Abzweigung des Fluids aus dem Reservoir in das Kanalsystem, in Richtung der Strömung des Fluids durch das Reservoir gesehen, vor der Elektrode erfolgt, können durch Elek- trolyse an der Elektrode entstehende Gasblasen nicht in das Kanalsystem gelangen und dieses blockieren. Da für die Behandlung des Fluids jedes Mal nur ein Teil davon aus dem Reservoir in das Kanalsystem abgezweigt wird, ist der Strömungsquerschnitt des Reservoirs größer als der des Kanal- Systems. In jedem Fall ist der Querschnitt des Kanalsystems klein genug, um überhaupt eine elektrokinetische Förderung des Fluids zu ermöglichen.
Die Verbindung zwischen dem Reservoir in der ersten Träger- platte und dem Kanalsystem in der zweiten Trägerplatte erfolgt vorzugsweise über einen in der ersten Trägerplatte ausgebildeten und von dem Reservoir abzweigenden Stichkanal, dessen Strömungsquerschnitt kleiner als der des Reservoirs ist und eine elektrokinetische Förderung des Fluids ermöglicht. Der Stichkanal zweigt von der Elektrode ausgesehen vorzugsweise unter einem Winkel ≥ 90° von dem Reservoir ab, so dass das Fluid, welches das Reservoir druckgetrieben durchströmt, nicht in den Stichkanal gedrückt wird.
Zur kontinuierlichen Entleerung der jeweils zur Aufnahme des Fluids nach seiner Behandlung dienenden Reservoirs können diese jeweils einen Fluidanschluss aufweisen, über den das
Fluid aus dem Reservoir abgeführt und gegebenenfalls entsorgt wird.
Bevorzugt sind die Elektroden derart angeordnet, dass sie je- weils in den Strömungsweg des Fluids durch das jeweilige Reservoir hineinragen und von dem Fluid umströmt werden. Das ermöglicht es, die Elektroden als robuste Drahtelektroden auszubilden, die durch Elektrolyse weniger schnell abgebaut werden, als beispielsweise Dünnschichtelektroden. Damit die Strömung des Fluids durch die Elektroden nicht gestört wird, kann das Innere des Reservoirs im Bereich der hineinragenden Elektrode aufgeweitet sein, so dass der Strömungsquerschnitt des Reservoirs zumindest annähernd konstant bleibt.
Um die Elektroiden bei Bedarf, z. B. aufgrund von Abnutzung, leicht austauschen zu können, sind sie bevorzugt jeweils Bestandteil eines Elektroden-Steckers, der lösbar und fluidisch dicht in einem Elektrodenanschluss in der ersten Trägerplatte gehalten ist.
Zur weiteren Erläuterung der Erfindung wird im Folgenden auf die Figuren der Zeichnung Bezug genommen; im Einzelnen zeigen:
Figur 1 ein Ausführungsbeispiel der erfindungsgemäßen mikrostrukturierten Anordnung mit Fluid-Reservoirs und Elektroden auf einer ersten Trägerplatte und einem Kanalsystem zur Fluidanalyse auf einer zweiten Trägerplatte, die
Figuren 2 und 3 ein Beispiel für die zweite Trägerplatte mit dem Kanalsystem und aufliegender Trägerplatte in Seitenansicht und Draufsicht, die
Figuren 4 bis 6 ein Beispiel für die erste Trägerplatte mit den Reservoirs und Elektroden und aufliegender Trägerplatte in Draufsicht, Seitenansicht und Unteransicht,
Figur 7 ein Beispiel für die mit der ersten Trägerplatte verbundene Deckelplatte in Draufsicht, die
Figuren 8 und 9 ein Beispiel für die fluidische Verbindung eines Reservoirs in der ersten Trägerplatte mit dem Kanalsystem in der zweiten Trägerplatte in zwei unterschiedlichen Schnittdarstellungen, und die
Figuren 10 und 11 ein Beispiel für ein von dem Fluid durch- strömtes Reservoir mit einem davon abzweigenden Stichkanal in zwei unterschiedlichen Schnittdarstellungen.
Figur 1 zeigt eine mikrostrukturierte Anordnung zur Behandlung von Fluiden, mit Reservoirs 2, 3, 4 und 5 zur Aufnahme der Fluide vor bzw. nach ihrer Behandlung und mit einem Kanalsystem 6, das die Reservoirs 2 bis 5 untereinander verbindet und in dem die Behandlung der Fluide erfolgt. Bei dem gezeigten Ausführungsbeispiel besteht das Kanalsystem 6 aus vier Kanälen 7, 8, 9 und 10, die von jeweils einem der vier Reservoirs 2 bis 5 abzweigen und an einer Kreuzungsstelle 11 miteinander verbunden sind. In den Reservoirs 2 bis 5 sind Elektroden 12, 13, 14 und 15 angeordnet, die an einer vierpoligen Spannungsquelle 16 angeschlossen sind, mittels der zwischen den Elektroden 12 bis 15 unterschiedliche Hochspan- nungen einstellbar sind. In Abhängigkeit von den eingestellten Hochspannungen werden Fluide aus vorgebbaren Reservoirs, hier 2 und 3, über das Kanalsystem 6 in andere Reservoirs, hier 4 und 5, elektrokinetisch gefördert.
Bei dem gezeigten Ausführungsbeispiel werden beispielsweise zunächst ein Puffer-Fluid aus dem Reservoir 3 über die Kanäle
8 und 9 in das Reservoir 4 und gleichzeitig ein Proben-Fluid aus dem Reservoir 2 über die Kanäle 7 und 10 in das Reservoir 5 gefördert . Durch Verändern der Hochspannungen an den Elek- troden 12 bis 15 wird dann das Proben-Fluid an der Kreuzungsstelle 11 für eine vorgegebene Zeit und damit in einer vorgegebenen Menge in den Kanal 9 eingeleitet, bevor es anschlies- send wieder in den Kanal 10 umgeleitet wird. Das in den Kanal
9 eingeleitete und anschließend durch das nachfolgende Puf- fer-Fluid durch den Kanal 9 hindurch geförderte Proben-Fluid wird dort elektrophoretisch in seine Bestandteile getrennt, die mittels einer Detektoreinrichtung 17 detektiert werden; eine der Detektoreinrichtung 17 nachgeordnete Auswerteeinrichtung 18 bestimmt die detektierten Bestandteile des Pro- ben-Fluids qualitativ und quantitativ.
Alternativ zu dem gezeigten Ausführungsbeispiel kann zunächst aus dem Reservoir 3 ein Proben-Fluid über die Kanäle 8 und 10 und aus dem Reservoir 2 ein Puffer-Fluid über die Kanäle 7 und 10 in das Reservoir 5 gefördert werden. Durch Verändern der Hochspannungen an den Elektroden 12 bis 15 wird das Puffer-Fluid an der Kreuzungsstelle 11 in den Kanal 9 umgeleitet und injiziert dabei das sich im Bereich der Kreuzungsstelle 11 befindende Proben-Fluid in den Kanal 9. Dort wird das Pro- ben-Fluid elektrophoretisch in seine Bestandteile getrennt, die mittels der Detektoreinrichtung 17 detektiert werden. Die Menge des in den Kanal 9 injizierten Proben-Fluids entspricht dem Volumen der Kreuzungsstelle 11 und kann dadurch vergrös- sert werden, dass der Kanal 10 gegenüber dem Kanal 8 in Richtung auf die Detektoreinrichtung 17 zu versetzt in den Kanal 9 einmündet .
Bei dem gezeigten Ausführungsbeispiel sind die Reservoirs 2 bis 5 in Form von weiteren Kanälen mit Fluidanschlüssen 19, 20, 21, 22, 23 und 24 ausgebildet. Dabei weisen die zur Fluid-Einspeisung in das Kanalsystem 6 dienenden Reservoirs 2 und 3 jeweils zwei Fluidanschlüsse 19 und 20 bzw. 21 und 22 auf, wobei die Kanäle 7 und 8 jeweils im Bereich zwischen den beiden Fluidanschlüssen 19 und 20 bzw. 21 und 22 mit den Reservoirs 2 bzw. 3 verbunden sind. Wie am Beispiel des Reservoirs 2 gezeigt ist, wird das Proben-Fluid 25 kontinuierlich aus einem industriellen Prozess, hier einer Rohrleitung 26, entnommen und nach Aufbereitung, beispielsweise Filterung und Pufferung, in einer Probenaufbereitungseinrichtung 27 durch eine Pumpe oder ähnliches druckgetrieben über den Fluidan- schluss 19 in das Reservoir 2 eingespeist. Das Proben-Fluid 25 durchströmt das Reservoir 2 und wird über den Fluidan- schluss 20 entsorgt.
Wie im Folgenden noch näher erläutert wird, sind die Reservoirs 2 bis 5 mit den Elektroden 12 bis 15 auf einer, hier mit 28 angedeuteten, ersten Trägerplatte und das Kanalsystem 6 in einer, hier mit 29 angedeuteten, weiteren Trägerplatte ausgebildet, wobei beide Trägerplatten 28 und 29 unter Herstellung fluidisch dichter Verbindungen zwischen den Reservoirs 2 bis 5 und dem Kanalsystem 6 lösbar miteinander ver- bunden sind.
Die Figuren 2 und 3 zeigen die zweite Trägerplatte 29 in Seitenansicht bzw. mit Sicht auf die Seite 30 der Trägerplatte 29, auf der das Kanalsystem 6 in Form von grabenförmigen Ver- tiefungen ausgebildet ist. Diese sind durch eine Deckelplatte 53 abgedeckt, die an den Enden der vier Kanäle 7 bis 10 hier nicht gezeigte Fluidpassagen enthält. Neben Zentriermitteln 31 weist die Trägerplatte 29 auch noch Kontakte 32 der hier nicht gezeigten Detektoreinrichtung 17 zum Anschluss an die Auswerteeinrichtung 18 auf.
Figur 4 zeigt die erste Trägerplatte 28 mit Sicht auf ihre Seite 33, auf der die Reservoirs 2 bis 5, ebenfalls in Form von grabenförmigen Vertiefungen, ausgebildet sind. Diese sind, ebenso wie bei der in den Figuren 2 und 3 gezeigten Trägerplatte 29, mit einer Fluidpassagen enthaltenden Deckel- platte 54 abgedeckt. Die Figuren 5 und 6 zeigen die erste Trägerplatte 28 mit ihrer Deckelplatte 54 in Seiten- und Unteransieht; Figur 7 zeigt die Deckelplatte 54 mit den darin enthaltenen Fluidpassagen 55 in Draufsicht. Die Fluidanschlüsse 19 bis 24 sowie Elektrodenanschlüsse 34, 35, 36 und 37 für die Elektroden 12 bis 15 und Anschlüsse 38 für die
Kontakte 32 sind auf der von der Seite 33 abgewandten Seite 39 der Trägerplatte 28 in Form von Steck- oder Schraubanschlüssen für Leitungen mit daran angeschlossenen Steckerteilen ausgebildet. Zur fluidischen Verbindung der Reservoirs 2 bis 5 in der ersten Trägerplatte 28 mit den Fluidpassagen 55 in der Deckelplatte 54 sind in der ersten Trägerplatte 28 Stichkanäle 40, 41, 42 und 43 vorgesehen, die von dem jeweiligen Reservoir 2 bis 5 abzweigen und deren jeweiliger Strömungsquerschnitt kleiner als der des Reservoirs 2 bis 5 ist und eine elektrokinetische Förderung der Fluide ermöglicht. Dabei liegen die Enden der Stichkanäle 40 bis 43 den Fluidpassagen 55 in der Deckelplatte 54 direkt gegenüber. Um die Reservoirs 2 bis 5 und das Kanalsystem 6 miteinander zu verbinden, liegen die beiden Trägerplatten 28 und 29 mit ihren Deckelplatten 54 und 53 unter Druck aneinander, wobei die Fluidpassagen in den Deckelplatten 54 und 53 miteinander fluchten. Der Anpressdruck für die Trägerplatten 28 und 29 mit ihren Deckelplatten 54 und 53 wird durch eine hier nicht gezeigte Klemmeinrichtung erzeugt, in der die Trägerplatten 28 und 29 lösbar gehalten sind. Figur 8 zeigt einen Längsschnitt durch die einschließlich ihrer Deckelplatten 54 und 55 miteinander verbundenen Trägerplatten 28 und 29 im Bereich des Reservoirs 4. Figur 9 zeigt eine Draufsicht auf die Trägerplatte 28 im Bereich des Reser- voirs 4. Das Reservoir 4 ist auf der Seite 33 der Trägerplatte 28 als grabenförmige Vertiefung mit einem Querschnitt von beispielsweise 0,3 x 0,3 mm ausgebildet und wird unter Bildung eines Kanals von der Deckelplatte 54 abgedeckt. Auf der davon abgewandten Seite 39 der Trägerplatte 28 sind der Fluidanschluss 23 und der Elektrodenanschluss 36 ausgebildet, die sich durch die Trägerplatte 28 hindurch bis in das Reservoir 4 erstrecken. In dem Fluidanschluss 23 ist ein Fluid- Stecker 47 mit Fluid-Leitung 48 und in dem Elektrodenanschluss 36 ein Elektroden-Stecker 49 mit Elektroden-Leitung 50 und der Elektrode 14 eingeschraubt. Die als Drahtelektrode ausgebildete Elektrode 14 erstreckt sich quer durch das an dieser Stelle aufgeweitete Reservoir 14 und ist mit ihrem Ende in der Ausnehmung 46 der Verbindungsplatte 44 gehalten. Die Elektrode 14 wird daher von dem das Reservoir 4 durch- strömenden und über den Fluidanschluss 23 abgeführten Fluid beidseitig umströmt. Von dem Reservoir 4 geht, in Strömungsrichtung des Fluids gesehen, vor der Elektrode 14 der Stichkanal 42 ab, welcher beispielsweise einen Querschnitt von 0,1 x 0,1 mm aufweist, also ausreichend klein für eine elek- trokinetische Förderung des Fluids zur Elektrode 14 hin ist. Die Fluidpassage 55 in der Deckelplatte 54 liegt im Endbereich des Stichkanals 42 und verbindet diesen über die Fluidpassage 56 in der Deckelplatte 53 mit dem Kanalsystem 6 in der Trägerplatte 29. Der Querschnitt des Kanalsystems 6 be- trägt beispielsweise 0,05 x 0,05 mm. Um die Ausrichtung der Fluidpassagen 56 und 55 in den Deckelplatten 53 und 54 zueinander zu erleichtern und bei der Verbindung der beiden Trägerplatten 28 und 29 einen konstruktions- und montagebedingten Versatz zwischen beiden Fluidpassagen 55 und 56 zu ermög- liehen, ist die Fluidpassage 55 in der Deckelplatte 54 auf der der Deckelplatte 53 zugewandten Seite in Form einer Ausnehmung 57 erweitert, deren Tiefe mit beispielsweise 0,1 mm ausreichend gering ist, um die elektrokinetische Förderung des Fluids durch die Fluidpassagen 55 und 56 nicht zu behindern. Zur Abdichtung der fluidischen Verbindungsstelle zwischen den beiden Deckelplatten 53 und 54 kann in der flachen Ausnehmung 57 ein Dichtungsring 58 angeordnet sein.
Die Figuren 10 und 11 zeigen jeweils in unterschiedlichen Schnittdarstellungen einen Ausschnitt aus dem Reservoir 2 im Bereich zwischen den beiden Fluidanschlüssen 19 und 20. Die Elektrode 12 ist zumindest in ihrem Endbereich drahtförmig ausgebildet und durchdringt die erste Trägerplatte 28 von der Seite 39 kommend. Im Weiteren verläuft die Elektrode 12 quer durch das Reservoir 2 bis in eine Ausnehmung 46, in der Deckelplatte 54, wo sie mit ihrem Ende gehalten ist. Dadurch wird erreicht, dass die Elektrode 12 beidseitig von dem
Proben-Fluid 25 umströmt wird. Im Bereich der Elektrode 12 ist das Reservoir 2 aufgeweitet, so dass sich an dieser Stelle sein Strömungsquerschnitt nur gering oder überhaupt nicht verengt. Der Abzweig des Stichkanals 40 von dem Reser- voir 2 ist, bezogen auf die Strömungsrichtung des Proben- Fluids 25, vor der Elektrode 12 angeordnet, so dass durch Elektrolyse an der Elektrode 12 entstehende Gasblasen 52 von dem strömenden Proben-Fluid 25 vom Abzweig des Stichkanals 40 weg transportiert und ausgetragen werden und somit nicht in den Stichkanal 40 und nachfolgend in das Kanalsystem 6 gelangen. Außerdem zweigt der Stichkanal 40, von der Elektrode 12 aus gesehen, unter einem Winkel ≥ 90° von dem Reservoir 2 ab, so dass das druckgetrieben durch das Reservoir 2 strömende Proben-Fluid 25 nicht in den Stichkanal 40 gedrückt wird.

Claims

Patentansprüche
1. Mikrostrukturierte Anordnung zur Behandlung mindestens eines Fluids (25) , mit Reservoirs (2 bis 5) zur Aufnahme des Fluids (25) vor bzw. nach seiner Behandlung, mit einem die Reservoirs (2 bis 5) untereinander verbindenden Kanalsystem (6), das Mittel zur Behandlung des Fluids (25) enthält, und mit in den Reservoirs (2 bis 5) angeordneten Elektroden (12 bis 15), sowie einer an die Elektroden (12 bis 15) schaltba- ren Spannungsquelle (16) zur elektrokinetischen Förderung des Fluids (25) von mindestens einem zu mindestens einem anderen der Reservoirs (2 bis 5) über das Kanalsystem (6), da dur c h g e k enn z e i c hn e t , dass die Reservoirs (2 bis 5) mit den Elektroden (12 bis 15) in einer ersten Trä- gerplatte (28) und das Kanalsystem (6) in einer zweiten Trägerplatte (29) ausgebildet sind und dass beide Trägerplatten (28, 29) unter fluidisch dichter Verbindung der Reservoirs (2 bis 5) mit dem Kanalsystem (6) lösbar miteinander verbunden sind.
2. Mikrostrukturierte Anordnung nach Anspruch 1, d a dur c h g e k e nn z e i c hn e t , dass die Reservoirs
(2 bis 5) und das KanalSystem (6) jeweils in Form von grabenförmigen Vertiefungen auf einer Seite (33) der ersten Träger- platte (28) bzw. einer Seite (30) der zweiten Trägerplatte
(29) ausgebildet sind und dass die beiden Trägerplatten (28, 29) an diesen Seiten (30, 33) einander zugewandt miteinander verbunden sind.
3. Mikrostrukturierte Anordnung nach Anspruch 1 oder 2, da du r c h g e k e nn z e i c hn e t , dass die Trägerplatten (29, 28) auf ihren die grabenförmigen Vertiefungen enthaltenden Seiten (30, 33) mit Deckelplatten (53, 54) abgedeckt sind, die Fluidpassagen (56, 55) zur fluidischen Ver- bindung der Reservoirs (2 bis 5) mit dem Kanalsystem (6) enthalten.
4. Mikrostrukturierte Anordnung nach einem der vorangehenden Ansprüche, d a du r c h g e k enn z e i c hn e t , dass das jeweils zur Aufnahme des Fluids (25) vor seiner Behandlung dienende Reservoir (2; 3) zwei Fluidanschlüsse (19, 20; 21, 22) zur kontinuierlichen Zufuhr und Abfuhr des Fluids
(25) in das bzw. aus dem Reservoir (2; 3) aufweist, dass die Elektrode (12; 13) in einem Strömungsweg des Fluids (25) zwischen beiden Fluidanschlüssen (19, 20; 21, 22) angeordnet ist und dass die Stelle, an der das Reservoir (2; 3) mit dem dem Kanalsystem (6) verbindbar ist, bezogen auf die Strömungsrichtung des Fluids (25), vor der Elektrode (12; 13) liegt.
5. Mikrostrukturierte Anordnung nach Anspruch 4, du r c h g e k enn z e i c hn e t , dass der Strömungs- querschnitt des Reservoirs (2, 3) größer als der des Kanalsystems (6) ist.
6. Mikrostrukturierte Anordnung nach Anspruch 5, da du r c h g e k e nn z e i c hn e t , dass in der ersten Trägerplatte (28) ein von dem Reservoir (2, 3) abzweigender Stichkanal (40, 41) ausgebildet ist, dessen Strömungsquerschnitt kleiner als der des Reservoirs (2, 3) ist und über den das Reservoir (2, 3) mit dem Kanalsystem (6) in der zweiten Trägerplatte (29) verbindbar ist.
7. Mikrostrukturierte Anordnung nach Anspruch 6, da du r c h g e k e nn z e i c hn e t , dass der Stichkanal (40, 41) von der Elektrode (12, 13) aus gesehen unter einem Winkel (α) ≥ 90° von dem Reservoir (2, 3) abzweigt.
8. Mikrostrukturierte Anordnung nach einem der vorangehenden Ansprüche, da du r c h g e k enn z e i c hn e t , dass das jeweils zur Aufnahme des Fluids nach seiner Behandlung dienende Reservoir (4, 5) einen Fluidanschluss (23, 24) zur Abfuhr des Fluids aus dem Reservoir (4, 5) aufweist.
9. Mikrostrukturierte Anordnung nach einem der Ansprüche 4 bis 8, dadur ch gekenn z e i chne t , dass die Elektrode (z. B. 12) in den Strömungsweg des Fluids (25) durch das jeweilige Reservoir (z. B. 2) hineinragt und von dem Fluid (25) umströmt wird.
10. Mikrostrukturierte Anordnung nach Anspruch 9, da dur ch g e k enn z e i chne t , dass das Reservoir (z. B. 2) im Bereich der hineinragenden Elektrode (z. B. 12) aufgeweitet ist, so dass sein Strömungsquerschnitt zumindest annähernd konstant bleibt.
11. Mikrostrukturierte Anordnung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadur ch gekenn z e i chn e t , dass die Elektroden (z- B. 14) jeweils Bestandteil eines Elektroden-Steckers (49) sind, der lösbar und fluidisch dicht in einem Elektrodenanschluss (36) in der ersten Trägerplatte (28) gehalten ist.
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102004062923A1 (de) * 2004-12-28 2006-07-06 Hirschmann Laborgeräte GmbH & Co. KG Vorrichtung zur Förderung von Fluiden, Verfahren zur Herstellung derselben und Pipette mit einer solchen Vorrichtung

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001004613A1 (en) * 1999-07-08 2001-01-18 Shaorong Liu Microfabricated injector and capillary array assembly for high-resolution and high throughput separations
WO2001037958A2 (en) * 1999-11-04 2001-05-31 Princeton University Electrodeless dielectrophoresis for polarizable particles
US6331439B1 (en) * 1995-06-07 2001-12-18 Orchid Biosciences, Inc. Device for selective distribution of liquids
US20020023684A1 (en) * 1998-01-20 2002-02-28 Chow Calvin Y.H. Multi-layer microfluidic devices
US20020166592A1 (en) * 2001-02-09 2002-11-14 Shaorong Liu Apparatus and method for small-volume fluid manipulation and transportation

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6001229A (en) * 1994-08-01 1999-12-14 Lockheed Martin Energy Systems, Inc. Apparatus and method for performing microfluidic manipulations for chemical analysis

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6331439B1 (en) * 1995-06-07 2001-12-18 Orchid Biosciences, Inc. Device for selective distribution of liquids
US20020023684A1 (en) * 1998-01-20 2002-02-28 Chow Calvin Y.H. Multi-layer microfluidic devices
WO2001004613A1 (en) * 1999-07-08 2001-01-18 Shaorong Liu Microfabricated injector and capillary array assembly for high-resolution and high throughput separations
WO2001037958A2 (en) * 1999-11-04 2001-05-31 Princeton University Electrodeless dielectrophoresis for polarizable particles
US20020166592A1 (en) * 2001-02-09 2002-11-14 Shaorong Liu Apparatus and method for small-volume fluid manipulation and transportation

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE102004062923A1 (de) * 2004-12-28 2006-07-06 Hirschmann Laborgeräte GmbH & Co. KG Vorrichtung zur Förderung von Fluiden, Verfahren zur Herstellung derselben und Pipette mit einer solchen Vorrichtung

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