WO2004026318A1

WO2004026318A1 - α-グリコシルセラミドを有効成分とするＣ型肝炎ウイルス抑制剤

Info

Publication number: WO2004026318A1
Application number: PCT/JP2003/011908
Authority: WO
Inventors: Isao Serizawa; Kazuo Ushida; Nobusuke Nishi
Original assignee: Kirin Beer Kabushiki Kaisha
Priority date: 2002-09-20
Filing date: 2003-09-18
Publication date: 2004-04-01
Also published as: AU2003266530A1; CN1681519A; KR20050062551A; US20050159365A1; JPWO2004026318A1; EP1541153A1; CA2499265A1; BR0314640A; TW200412980A

Abstract

ヒトＣ型肝炎ウイルスに感染した患者を対象とした、α-グリコシルセラミドを有効成分として含む当該ウイルスの増殖抑制剤の提供。　式（I）の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む、Ｃ型肝炎ウイルス抑制剤。

Description

明細書 a _グリコシルセラミドを有効成分とする C型肝炎ゥィルス抑制剤技術分野

本発明は、ヒト C型肝炎ウィルスに感染した患者を対象とした、 a-グリコシルセラミドを有効成分として含む当該ウィルスの増殖抑制剤に関する。背景技術

近年、海綿に由来するァゲラスフィン類の誘導体の一つとして合成された KRN7000 (Tetrahedron Lett. , 34:5591-5592, 1993; Tetrahedron Lett. , 34:5593-5596, 1993; Tetrahedron, 50:2771-2784, 1994)が、ナチュラルキラー T (ΝΚΤ)細胞に発現する不可変型 Τ細胞受容体（TCR)のリガンドであることが判明した（Science, 278:1626-1629, 1997; J. Exp. Med., 188:1521-1528, 1998; J. Exp. Med. 188:1529-1534, 1998)。 KRN7000 に代表される α—グリコシルセラミド（ - GlyCer)は親水性のガラクトース、グルコースなどの糖類と脂肪酸-スフィンゴシン塩基からなる疎水性セラミドとが a配位にて結合したスフインゴ糖脂質であり、リガントとして NKT細胞を刺激することで強い抗腫瘍活性を示すことが報告された（Oncol. Res. , 7:529-534, 1995; Cancer Res. , 58:1202-1207, 1998)。 a -GlyCer は、糖脂質抗原として樹状細胞 (DC)をはじめとした抗原提示細胞 (APC)に取り込まれた後、蛋白抗原のプロセスを担うことで知られる TAP (transporter associated with antigen processing)経路を介さずプロセスされた後、主要組織適合抗原 (MHC)クラス lb様の非多形性分子 CDldによって APC膜上に提示される。 NKT細胞は、膜上にある不可変型 TCRが、 APC上の CDldにより提示された KRN7000を認識することで活性化される。この原理に基づいて、 α-GlyCer を取り込ませたヒト単球由来 DC を用いたヒト NKT細胞の効率の良い培養が可能となった（Hum. I腿 unol.， 60:10-19, 1999)。さらに、インターロイキン- 7 (IL-7)や IL-15は、 a -GlyCerと相乗的に NKT細胞をインビトロで増殖させることが報告された（Hum. I腿 unol., 61:357-365, 1999)。 NKT細胞は、リンパ球サブセッ卜に属し、 TCRとナチュラルキラー（NK)細胞マーカーの両方を発現するユニークな細胞である（Annu. Rev. Immunol. , 15, 535-562, 1997; J. Exp. Med., - 182, 633-638, 1995)。注目すべき性質の一つとしては、 NKT 細胞に発現している TCRo!鎖は不可変型であり、この α鎖が、ごく限られた種類の iS鎖と対を形成することにより非常に限られた TCRレパトァ（不可変型 TCR) を発現することがあげられる。この不可変型 TCR 鎖は、ヒトでは V 24、マウスでは 14であり、両種間に高い相同性を持つことが知られており、特に TCRの抗原結合部位の中央を形成すると考えられている CDR3領域では 85%と非常に高いアミノ酸レベルの相同性を示す。また、 TCRj3鎖は、ヒトでは V|S11、マウスでは V/38、 VjS7又は V/32である（J. Exp. Med. , 180:1097, 1994; Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 88:7518, 1991; Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:6506, 1992; J. Exp. Med., 176:269, 1992)。一方、 NK細胞マ一カーとしては、 MR- PI (CD161又は NK1.1) が NKT細胞上に発現しているが、その機能は不明な部分が多い。また、 NKT細胞は、 Thl型サイト力イン（TH1細胞（Thl)により産生されるサイト力イン）であるインターフェロン-ァ (IFN-r)と、 Th2型サイトカイン（TH2細胞（Th2)により産生されるサイトカイン）のィン夕一ロイキン - 4 (IL-4)の両方を産生することができる（L Exp. Med., 179:1285-1295, 1994; J. Exp. Med., 186:109, 1997; J. I匪 imol., 161:3271-3281, 1998)ことから、 Tヘルパー細胞の分化調節に深く関与すると考えられている。なぜなら、 IFN -ァの過剰な産生は TMへの分化を、また IL - 4の過剰な産生は Τ1ι2への分化を誘導するからである。さらに、 ΝΚΤ細胞は、 ΝΚ細胞様の殺腫瘍活性の中心的な役割を担うパーフオリンおよびグランザィムを産生することが報告されている（Pro Natl. Acad. Sci. USA, 95:5690-5693, 1998; Hum. Immunol. , 61:357-365, 1999)。

KRN7000は NKT細胞のリガンドとして作用することは知られている（Kawano T e t al. , Science 278: 1626, 1997)。すなわち、 KRN7000は樹状細胞（DC)のような抗原提示細胞 (APC)に取り込まれた後、抗原提示分子の一種である CDldによって DC の表面に提示される。 NKT細胞に発現する不可変型 T細胞受容体（TCR)が、 DCの表面上に提示された CDldと KRN7000のいわゆる免疫複合体を認識することができる。免疫複合体に結合した NKT細胞は活性化され、様々な免疫反応を惹起する。生体内には種々の糖がセラミドと j8結合している ]3—ガラクトシルセラミドゃ j8—グリコシルセラミド等が存在している（Svennerholm, L. et al. , Biochem. Biophys. Acta, 280, 626 (1972) ； Karlsson, K. -A. et al. , Biochim. Biop ys. Acta, 316, 317 (1973))。一方、 α-ガラクトシルセラミドが顕著な免疫賦活作用および抗腫瘍作用を有すること（Mori ta，M. et al., J. Med. Chem. , 38, 2176 (1995)) および α -ガラクトシルセラミドゃ a-グリコシルセラミドのこれらの作用は、 β 一ガラクトシルセラミドゃ i3-グリコシルセラミドの作用よりもはるかに強力であること（Motoki, K. et al. , Biol. Pliarm. Bull., 18, 1487 (1995))が知られている。さらに、《-ガラクトシルセラミドゃひ-グリコシルセラミド等のひ- グリコシルセラミド構造を有する化合物は、生体内に投与した場合に放射線防護作用 (Motoki, K. et al. , Bioorg. Med. Chem. Lett. , 5， 2413 (1995))、マウスメラノーマ B 1 6の肺転移抑制作用（Kobayashi, E. et al. , Oncology Res. , 7, 529 (1995))、およびマウス大腸癌 Colon26 やマウス Tリンパ腫 EL-4 の肝転移抑制作用（元木一宏ら日本癌学会総会記事、 523 (1996) ) を有することおよび血小板数や白血球数を増加させること（ Motoki, K. et al. , Biol. Pharm. Bull. , 19， 952 (1996))が知られている。

ところで、 KRN7000 を含む《-ガラクトシルセラミドゃ -グリコシルセラミドは感染症治療薬としての可能性も示唆されている（国際公開第 93/05055号パンフレット）。実際、ヒト B型肝炎ウィルス（HBV)のトランスジエニックマウスに投与した結果、そのマウスの肝臓における HBVの DNA複製が強く抑制された（J. Exp. Med. 192:921-930, 2000)。

しかしながら、 HBV抑制効果があつたとしても、それを直ちに他のウィルスに当てはめることはできない。特に効果が認められた HBVは DNAウィルスであるので、ヒト C型肝炎ウィルス（HCV)のような RNAウィルスに対しても効果を有するとは予測できない。

現在、世界中で 1億を越える人が C型肝炎ウィルス（HCV)により感染されていると推定されている。その多くが慢性肝臓疾患、すなわち慢性 C型肝炎に進行し、さらに、肝硬変、肝細胞性癌等を発症するリスクがある。 C型肝炎ウィルスは大別して 6種のジエノタイプ（genotype)に分類される。日米欧において、 C型肝炎患者の約 70%がジエノタイプ 1 (更にジエノタイプ laと lbに分類される）に感染している。ィンターフェロン（IFN)が慢性 C型肝炎の患者について臨床的に認められた治療薬であった。しかしながら、ジエノタイプ 1はインターフェロン治療に対して明らかな抵抗性を示すことが知られている。また、インターフェロンは持続応答率が低く、投与頻度が高い上に、インターフェロン治療は治療された患者の寿命の性質を低下させるような副作用（即ち、網膜症、甲状腺炎、急性膝炎、うつ病）を誘発する。特にうつ病に起因する自殺は深刻な問題となっている。このように従来は、 C型肝炎の治療に用い得る良好な結果を得られる C型肝炎ゥィルス抑制剤は存在せず、新たな HCV感染症の治療に有効な C型肝炎ウィルス抑制剤が望まれていた。

特許文献 1

国際公開第 93/05055号パンフレツト

非特許文献 1

Tetrahedron Lett. , 34:5591-5592, 1993

非特許文献 2

Tetrahedron Lett., 34:5593-5596, 1993

非特許文献 3

Tetrahedron, 50:2771-2784, 1994

非特許文献 4

Science, 278:1626-1629, 1997

非特許文献 5

J. Exp. Med., 188:1521-1528, 1998

非特許文献 6

J. Exp. Med. 188:1529-1534, 1998

非特許文献 7

Oncol. Res., 7:529-534, 1995

非特許文献 8

Cancer Res., 58:1202-1207, 1998

非特許文献 9 Hum. Immunol. , 60:10-19, 1999

非特許文献 1 o

Hum. Immunol., 61:357-365, 1999

非特許文献 1 1

Annu. Rev. I腿 ιπιο1·， 15, 535-562, 1997 非特許文献 1 2

J. Exp. Med., 182, 633-638, 1995

非特許文献 1 3

J. Exp. Med., 180:1097, 1994

非特許文献 14

Pro Natl. Acad. Sci. USA, 88:7518, 1991 非特許文献 1 5

Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89:6506, 1992 非特許文献 16

J. Exp. Med., 176:269, 1992

非特許文献 1 7

J. Exp. Med., 179:1285-1295, 1994

非特許文献 18

J. Exp. Med., 186:109, 1997

非特許文献 19

J. Immunol., 161:3271-3281, 1998

非特許文献 20

Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95:5690-5693, 1998 非特許文献 21

Hum. Immunol. , 61:357-365, 1999

非特許文献 22

Kawano T et al. , Science 278: 1626, 1997 非特許文献 23

Porcelli S et al. J Exp Med 178:1-16, 1993 非特許文献 24

Svennerholm, L. et al.， Bioc em. Biop ys. Acta, 280, 626 (1972) 非特許文献 25

Karlsson, K. -A. et al. , Biochim. Biophys. Acta, 316, 317 (1973) 非特許文献 26

Morita, M. et al. , J. Med. Chem. , 38, 2176 (1995)

非特許文献 27

Motoki, K. et al., Biol. Pharin. Bull., 18, 1487 (1995) 非特許文献 28

Motoki, K. et al.,Bioorg. Med. Chem. Lett., 5, 2413 (1995) 非特許文献 29

Kobayashi, E. et al. , Oncology Res. , 7, 529 (1995)

非特許文献 30

元木一宏ら、日本癌学会総会記事、 523 (1996)

非特許文献 31

Motoki, K. et al. , Biol. Pharm. Bull., 19, 952 (1996) 非特許文献 32

Eberl G et al. , J. I匪 imol 162: 6410 - 6419, 1999

非特許文献 33

J. Exp. Med 192: 741-753, 2000

非特許文献 34

J. Exp. Med. 192:921-930, 2000

非特許文献 35

Toder R et al. , Chromosome Res. 9:431-435, 2001 発明の開示

本発明は、 α—グリコシルセラミドを含有する、 C型肝炎ウィルスを抑制する薬剤の提供をその目的とする。

上述のように KRN7000のヒトの HCV感染に対する抑制効果は疑問視されていた。しかしながら、本発明者等は、新規な HCV抑制剤が望まれる状況下、 KRN7000が HCV感染に対して効果がないかどうかについて検討を行った。

一般的に、薬物の抗 HCV効果を検討するための実験動物モデルは主として HCV に感染したチンパンジーが用いられている。それは HBVと同様に HCVもマウスには感染しないことと、 HBVのようなトランスジエニックマウスの作製が困難であることに起因する。

本発明者等は KRN7000を用いた HCV感染チンパンジーを用いた薬効試験の過程で、 KRN7000が HCV抑制効果を有することを見出し、本発明を完成させるに至つた。

本発明の C型肝炎ウィルス抑制剤は、下記式（I ) の化合物またはその塩もしくは溶媒和物を有効成分として含んでなるものである：

. (I)

(上記式中、

R¹は Hまたは OHであり、

Xは 7〜27のいずれかの整数であり、

R²は下記（a) 〜（e) からなる群から選択される置換基であり（ここで、 Y は 5〜17のいずれかの整数である）、

(a) -CH₂ (CH₂) CH,

(b) 一 CH (OH) (CH₂) _yCH₃

(c) -CH (OH) (CH₂) yCH (CH₃) ₂ (d) 一 CH二 CH (CH₂) _y CH₃

(e) 一 CH (OH) (CH₂) _yCH (CHj) CH₂CH₃、そして R³〜R⁹は下記の i) 〜v) のいずれかで定義される置換基である： i ) R³、 R および R⁸が Hのとさ

R⁴は H、 OH、 NH,、 NHCOCH または下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (C) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R³は OH、または下記基（E) および（F) ：

(E) (F)

からなる群から選択される置換基であり、

R⁷は、 OHまたは下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (C) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R⁹は H、 CH₃、 CH₂OH、または下記基（Α') 〜 (D')

(Α') (Β') (C) (D') からなる群から選択される置換基である；

ii) RK R⁶および R⁷が Hのとき

R⁴は H、 OH、 NH,、 NHCOCHK または下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (G) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R⁵は OH、または下記基（E) および（F) ：

(E) (F) からなる群から選択される置換基であり、

R⁸は OH、または下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (C) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R⁹は H、 CH CH,OHまたは下記基（Α') 〜（D')

(Α') (Β' (C) (D') からなる群から選択される置換基である。）

以上の化合物の合成方法については、国際公開第 98/44928号公報を参照するとができる。

すなわち、本発明は以下のとおりである。 (1) 上記式（I) の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む、 C型肝炎ウィルス抑制剤、

(2) C型肝炎ウィルスがジエノタイプ 1型である（1) の C型肝炎ウィルス抑制剤、

(3) (1) の式（I) の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む C型肝炎治療剤、

(4) C型肝炎が慢性 C型肝炎である、（3) の C型肝炎治療剤、

(5) C型肝炎が急性 C型肝炎である、（3) の C型肝炎治療剤、

(6) (1) の式（I) の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む、 C型肝炎により低下した肝機能を改善する薬剤、

(7) 式（ I ) の化合物中、 R³、および R»が Hを表し、 R⁴が OHまたは基（A) 〜（D) のいずれかの置換基を表し、 R⁵が OHまたは基（E) もしくは（F) の置換基を表し、および R⁸がそれぞれ Hまたは OHのいずれかを表し（伹し、

R¹および R⁸の両方が同一の基を表すことはない）、 R⁹が CH₂OH、 CH₃、 H、または基（Α') 〜（D') のいずれかの置換基を表す、（1) 〜（6) のいずれかの薬剤、

(8) 式（I ) の化合物中、 Xが 2 1〜25の整数であり、 R²が置換基（b) (式中、 Yは 1 1〜1 5である）を表す、（1) 〜（6) のいずれかの薬剤、（9) 式（I ) の化合物中、 Xが 9〜1 3の整数であり、 R²が置換基（a) (式中、 Y は 1 1〜1 5である）を表す、（1) 〜（6) のいずれかの薬剤、

(10) 式（ I ) の化合物が、（2 S， 3 S, 4 R) — 1— (ひ一D—ガラクトピラノシルォキシ）一 2—へキサコサノィルァミノ一 3， 4一才クタデカンジォール、

(2 S, 3 R) — 1— («— D—ガラク卜ピラノシルォキシ）一 2—テ卜ラデカノィルアミノー 3一才クタデカノール、

(2 S, 3 R) 一 1— (ひ一 D—ダルコピラノシルォキシ）一 2ーテトラデカノィルアミノー 3—ォクタデカノール、

(2 S, 3 R) 一 1一 (6 ' —デォキシ一 α— D—ガラク卜ピラノシルォキシ) - 2ーテトラデカノィルァミノ一 3一才クタデカノール、

(2 S, 3 R) - 1 - (/3— L—ァラビノビラノシルォキシ）一2—テトラデカノィルァミノ一 3一才クタデカノール、

0_ a— D—ガラクトビラノシル一（1→6) — O— a— D—ガラクトピラノシル— （1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 ) — 2 _アミノー Ν—へキサコサノィル - 1 , 3, 4—才クタデカントリオール、

0_ 一 D—ガラクトピラノシル一 (1→6) —Ο—ひ一 D—ダルコビラノシルー（1→1) ― (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—ァミノ一Ν—へキサコサノィル— 1 , 3, 4—ォクタデカントリオール、

0— a— D—ガラクトピラノシル一（1→2) —0_ α— D—ガラクトビラノシル一（1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) — 2—アミノー N— [(R) 一 2—ヒド口キシテトラコサノィル] 一 1， 3， 4一才クタデカントリオール、

Ο— |3— D—ガラクトフラノシル一 (1→3) — Ο— α— D—ガラク卜ピラノシルー ( 1→ 1 ) - (2 S, 3 S, 4 R) 一 2 _アミノー N— [(R) — 2—ヒド口キシテトラコサノィル] — 1， 3， 4—ォクタデカントリオール、および

0- (Ν—ァセチルー 2 -ァミノ一 2—デォキシー a— D—ガラク卜ピラノシルー (1→3) -0- [α— D—ダルコピラノシル一 (1→2)] — Ο—ひ一 D— ガラクトピラノシルー（1→1)— (2 S, 3 S， 4R)— 2—ァミノ一 N— [(R) — 2—ヒドロキシテトラコサノィル] — 1, 3， 4—ォクタデカントリオールからなる群から選ばれる化合物である、（1) 〜（6) のいずれかの薬剤、（1 1) 式（ I ) の化合物が、

(2 S, 3 S, 4 R) - 1 - (α—D—ガラクトピラノシルォキシ）一 2—へキサコサノィルアミノー 3, 4一才クタデカンジオール、

O— a— D—ガラクトピラノシル一（1→6) —〇一 α— D—ガラクトピラノシル— ( 1→ 1 ) 一 (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー Ν—へキサコサノィル - 1 , 3, 4一才クタデカントリオ一ル、

Ο— a— D—ガラクトビラノシル一（1→6) —0— α— D—ダルコビラノシルー（1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) — 2—ァミノ一 Ν—

1 , 3， 4—ォクタデカントリオール、 O— a— D—ガラクトピラノシルー（1→2) —〇一 a— D—ガラクトビラノシルー（1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—ァミノ _N— [(R) — 2—ヒド口キシテトラコサノィル] 一 1， 3， 4—ォクタデカントリオール、

O— /3—D—ガラクトフラノシルー（1→3) — 0_ α— D—ガラクトビラノシルー（1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー N— [(R) 一 2—ヒド口キシテトラコサノィル] 一 1， 3 , 4一才クタデカントリオール、および

Ο— （Ν—ァセチル一 2—ァミノ一 2—デォキシー a— D—カラクトビラノシルー（1→3) — O— [a— D—ダルコピラノシル一（1→2)] — O— a— D— ガラクトピラノシルー（1→1)— (2 S， 3 S, 4R)— 2—ァミノ _N— [(R) 一 2—ヒドロキシテトラコサノィル] 一 1， 3， 4—ォクタデカントリオールからなる群から選ばれる化合物である、（1) 〜（6) のいずれかの薬剤、ならびに (12) 式（ I ) の化合物が、（2 S， 3 S, 4R) — 1一（a— D—ガラクトピラノシルォキシ） - 2—へキサコサノィルァミノ― 3 , 4一才クタデカンジォールである、（1) 〜（6) のいずれかの薬剤。

本発明の式（I) の化合物を有効成分として含む、 C型肝炎ウィルス抑制剤である。

(1) 式 U ) の化合物

前記式（I) の化合物中、セラミド部分の Xは、好ましくは 1 1〜2 5の整数である。

R²における Yは好ましくは 9〜1 7の整数、より好ましくは 1 1〜1 5である。式（I ) のセラミド部分における Xおよび R²の好ましい組み合わせは、 Xが 2 1〜25の整数であり、 R²が置換基（b) (式中、 Yは 1 1〜1 5である）を表す化合物、および Xが 9〜 13の整数であり、 R²が置換基（a) (式中、 Yは 1 1〜1 5である）を表す化合物である。

式（I) の糖部分における R〜R⁹の好ましい組み合わせは、 R³および R^Dが H を表し、 R⁴が OHまたは基（A) 〜（D) のいずれかの置換基を表し、 R⁵が O Hまたは基（E) もしくは（F) の置換基を表し、 R⁷および R⁸がそれぞれ Hまたは OHのいずれかを表し（但し、 R¹および R⁸の両方が同一の基を表すことはない）、 R⁹が CH₂OH、 CH₃、 H、または基（Α') 〜（D，）のいずれかの置換基を表す化合物である。

更に好ましい組み合わせとしては、 R³および R°が Hであり、およびが OHであり、 R¹および R⁸がそれぞれ Hまたは OHのいずれかを表し（但し、 R^T および R⁸の両方が同一の基を表すことはない）、かつ R⁹が CH₂OHまたは基（A

') 〜（D') のいずれかの置換基を表す化合物、および R³、 R⁶および R⁸が Hであり、 R⁴、 R⁵および R⁷が OHであり、かつ R⁹が CH₂OHである化合物が挙げられる。

式（I ) の化合物の好ましい例としては、

Xが 2 1〜25の整数であり、

R²が置換基（b) (式中、 Yは 1 1〜1 5の整数である）であり、 R³および R^Bが Hであり、

R⁴が OHまたは基（A) 〜（D) からなる群から選択される基であり、 R⁵ が OHまたは基（E) および（F) からなる群から選択される基であり、 R⁷ およびがそれぞれ Hまたは OHであり（但し、両方が同一の基を表すことはない）、

R⁹が CH₂OHまたは基（Α') 〜（D') からなる群から選択される基である化合物、

Xが 9〜1 3の整数であり、

R²が置換基（a) (式中、 Yは 1 1〜1 5の整数である）であり、 R³および R^Dが Hであり、

R⁴および R⁵が OHであり、

R7および R⁸がそれぞれ Hまたは OHであり（伹し、両方が同一の基を表すことはない）、 R⁹が H、 CH₃、または CH₂OHである化合物、 Xが 2 1〜2 5の整数であり、

R²が置換基（b) (式中、 Yは 11〜15の整数である）であり、 R³およびが Hであり、

R⁴および R⁵が OHであり、

R⁷および R^Gがそれぞれ Hまたは OHであり（但し、両方が同一の基を表すことはない）、

R^Sが CH₂OHまたは基（Α') 〜（D') からなる群から選択される基である化合物、および

Xが 21〜25の整数であり、

R²が置換基（b) (式中、 Yは 11〜15の整数である）であり、 R³、 R⁶、および R⁸が Hであり、

R R および R⁷が OHであり、

R⁹が CH, OHである化合物が挙げられる。

本発明による薬剤剤の有効成分として好ましい化合物群としては、

(2 S, 3 S, 4 R) 一 1— (Q!—D—ガラクトピラノシルォキシ）一 2—へキサコサノィルァミノ一 3， 4一才クタデカンジオール (KRN7000),

(2 S, 3 R) — 1— ( 一D—ガラクトビラノシルォキシ）一 2—テトラデカノィルァミノ _ 3—ォク夕デカノ一ル (AGL-517),

(2 S, 3 R) — 1— (α— D—ダルコピラノシルォキシ）一 2—テトラデカノィルアミノー 3—才クタデカノール (AGL- 563)、

(2 S, 3 R) 一 1— (6 ' ーデォキシ一 α— D—ガラクトピラノシルォキシ) 一 2ーテトラデカノィルァミノ一 3—ォク夕デカノール（AGL-571)、

(2 S, 3 R) 一 1― (j8— L—ァラビノピラノシルォキシ）一 2—テトラデカノィルァミノ一 3—才ク夕デ力ノール（AGL - 577)、〇一 α—D—ガラクトビラノシルー（1→6) —0— a_D—ガラクトピラノシルー（1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー N—へキサコサノィル — 1 , 3, 4—ォクタデカントリオール（AGL- 586)、

O— a— D—ガラク卜ピラノシルー（1~ 6) — Ο— a— D—ダルコピラノシルー（1→1) ― (2 S, 3 S, 4 R) — 2—ァミノ一Ν—へキサコサノィル一 1 , 3, 4—ォクタデカントリオール（AGL- 584)、

0— a—D—ガラクトビラノシル一（1→2) — O— a— D—ガラクトピラノシル一（1→1) ― (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—ァミノ一 Ν— [(R) — 2—ヒド口キシテトラコサノィル] — 1 , 3, 4_ォクタデカントリオール (S1140B- 9)、

0— /3—D—ガラクトフラノシル一（1→3) —0—ひ一 D—ガラクトピラノシル一（1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—ァミノ一 N— [(R) _ 2—ヒド口キシテトラコサノィル] — 1, 3， 4一才クタデカントリオール（719-7)、および

0- (Ν—ァセチルー 2 _アミノー 2ーデォキシー一 D—カラクトピラノシルー（1→3) — Ο— [ 一 D—ダルコビラノシルー（1→2)] -0- α-Ό- ガラクトピラノシルー ( 1→ 1 ) ~ (2 S, 3 S, 4 R) - 2ーァミノ— N— [(R) 一 2—ヒドロキシテトラコサノィル] — 1， 3, 4ーォクタデカン卜リオール (STL-8)

が挙げられる。

これらの化合物については、 ΝΚΤ 細胞増殖促進作用があることが確認されている（国際公開第 98/44928号公報）。

本発明による薬剤の有効成分として特に好ましい化合物は、（2 S， 3 S, 4R) — 1— (α—D—ガラクトビラノシルォキシ）一 2—へキサコサノィルアミノー 3， 4—ォク夕デカンジオール（KRN7000) である。

式（I ) の化合物は、薬学上許容される非毒性塩であることができる。式（I) の化合物の塩としては、酸付加塩、例えば、無機酸（例えば塩酸、硫酸、硝酸、リン酸）との塩、あるいは有機酸（例えば、酢酸、プロピオン酸、マレイン酸、ォレイン酸、パルミチン酸、クェン酸、コハク酸、酒石酸、フマル酸、ダルタミン酸、パントテン酸、ラウリルスルホン酸、メタンスルホン酸およびフタル酸）との塩が挙げられる。

式（I ) の化合物は溶媒和物（例えば、水和物）であることができる。

式（I ) の化合物は、 Q!—グリコシルセラミドを合成するための合目的的な任意の方法により製造することができる。

まず、 D—リキソ一スを出発物質としてセラミド部分を合成し、次いで、このセラミドに糖を導入することによって、式（I ) の化合物を調製することができる。このような α—グリコシルセラミドの一般的な合成方法については、例えば、国際公開第 93/5055号公報、国際公開第 94/2168号公報、国際公開第 94/9020号公報、および国際公開第 94/24142号公報を参照することができる。

また、式（I ) の化合物は、天然物 (生物等) からカラムクロマトグラフィー等によって単離、精製することもできる。

本発明の薬剤は C型肝炎ウィルスの増殖を抑制することから、 C型肝炎の治療剤としても利用し得る。 C型肝炎は慢性 C型肝炎であっても、急性 C型肝炎であつても本発明の治療剤として用いることができる。本発明の薬剤を C型肝炎ウイルスに感染した患者、 C型肝炎ウィルスに感染し肝炎の症状を発症した患者に投与することにより、 C型肝炎ウィルス感染症を治療することができ、また C型肝炎を治療することができる。本発明の薬剤を一定期間患者に投与することにより感染した C型肝炎を完全に消失させることが可能である。さらに、本発明の薬剤は C型肝炎ウィルス感染に起因する C型肝炎の諸症状を緩和することができる。本発明の薬剤の一定期間の投与により感染した c型肝炎ウィルスを完全に消失させることが可能であるが、完全な消失に至らない場合でも患者内でのウィルスの増殖を抑制することができ、 C型肝炎ウィルスの症状を抑え肝機能を改善し、さらに肝硬変や肝癌へと進行するのを防止することができる。

式（I ) の化合物またはその塩又は溶媒和物は、治療方法、投与方法、および投与目的によって決まる適当な剤型、具体的には、注射剤、懸濁剤、乳化剤、軟膏剤、クリーム剤錠剤、カプセル剤、顆粒剤、散剤、丸剤、細粒剤、トローチ錠、直腸投与剤、油脂性坐剤、水溶性坐剤等の製剤、に処方することができる。

これらの各種製剤は、下記の薬学上許容される担体等を用いて常法により製造することができる：賦形剤、例えば、溶剤（例えば、水、生理食塩水）、増量剤および充てん剤（例えば、乳糖、デンプン、結晶セルロース、マンニ卜一ル、マルトース、リン酸水素カルシウム、 ^質無水ケィ酸、炭酸カルシウム）；補助剤、例えば、可溶化剤（例えば、エタノール、ポリソルベー卜剤）、結合剤（例えば、デンプン、ポリビニルピロリドン、ヒドロキシプロピルセルロース、ェチルセル口 —ス、カルポキシメチルセルロース、アラビアゴム）、崩壊剤（例えば、デンプン、カルポキシメチルセルロースカルシウム）、滑沢剤（例えば、ステアリン酸マグネシゥム、タルク、硬化油）、安定剤（例えば、乳糖、マンニトール、マルトース、ポリソルベート類、マクロゴール類、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油）、等張化剤、湿潤化剤、潤滑剤、分散剤、緩衝剤、溶解補助剤；添加剤、例えば、抗酸化剤、保存剤、矯味矯臭剤、無痛化剤、安定化剤、着色剤、および甘味剤。

また、各種製剤には、必要に応じて、グリセリン、ジメチルァセトアミド、 7 0 %乳酸ナトリウム、界面活性剤、塩基性物質（例えば、エチレンジァミン、ェ夕ノールァミン、炭酸ナトリウム、アルギニン、メダルミン、トリスァミノメタン）を添加することもできる。

本発明において、式（I ) の化合物は、合目的な任意の投与経路、具体的には、動物の場合には、腹腔内投与、皮下投与、静脈または動脈への血管内投与、注射による局所投与などの方法が可能である。また、ヒトの場合には、静脈内投与、動脈内投与、注射による局所投与、腹腔または胸腔への投与、皮下投与、筋肉内投与、舌下投与、経皮吸収または直腸内投与により投与することができる。静脈内投与もしくは皮下投与がもつとも好ましい。

本発明による治療剤における各有効成分は、個々の状況に応じて連続的または間欠的に投与できる。具体的な投与量は、投与方法、患者の諸条件、たとえば、年齢、体重、性別、感受性、投与時間、併用薬剤などにより変化する。一般に、式（I ) の化合物の投与量は、例えば、静脈内投与では、ヒ卜成人に対して 1日あたり 0 . 0 0 1〜1 O m g程度、好ましくは、 0 . 0 5〜2 m g、より好ましくは、 0 . 0 1〜l m g、である。式（I ) の化合物は、凍結乾燥製剤にするのが好ましく、投与直前に注射用蒸留水等で溶解し、患者に投与するのが好ましい。また、投与は一定間隔、例えば数日から数ケ月ごとに行い、一定期間投与を続けるのが好ましい。 C型肝炎ウィルス抑制効果の判定は、定期的に C型肝炎ウィルスの感染の有無および感染量をモニタ一することにより行うことができる。 C型肝炎ウィルス量は RT-PCR等により C型肝炎ウィルス RNA量を測定することによりモニターできるさらに、 C型肝炎ウィルスの減少または消失により肝炎が治癒し、感染中に低下していた肝機能も改善される。肝機能の改善は、血清中の ALT、 AST, LDHを測定することによりモニタ一できる。

さらに、本発明は C型肝炎ウィルスに感染した患者に本発明の薬剤を投与することを含む C型肝炎ウィルス抑制法であり、 C型肝炎に罹患した患者に本発明の薬剤を投与することを含む C型肝炎の治療法であり、また C型肝炎ウィルスに感染し肝機能が低下した患者に本発明の薬剤を投与することを含む C型肝炎ウィルス感染により低下した肝機能の改善方法である。さらに、本発明は、式（I) の化合物の C型肝炎ウィルス抑制剤、 C型肝炎治療剤および C型肝炎ウィルス感染により低下した肝機能の改善用薬剤の製造への使用である。さらには、式（I) の化合物をインターフェロンや他の抗ウィルス剤、例えばリバビリン（ribavi rin, RBV) 等との併用で用いることも本発明に含まれる。

本明細書は本願の優先権の基礎である日本国特許出願 2002-275466号の明細書および/または図面に記載される内容を包含する。図面の簡単な説明

図 1は、 KR7000を投与した C型肝炎ウィルス感染チンパンジー 2頭の血液中の総白血球数、好中球数およびリンパ球数の経時的変化を示す図である。

図 2 Aは、 KR7000投与前の C型肝炎ウィルス感染チンパンジーの F A C Sによる N K T細胞測定の結果を示す図である。

図 2 Bは、 KR7000を投与した C型肝炎ウィルス感染チンパンジー 2頭の T細胞数に対する N K T細胞数の百分比の経時的変化を示した図である。

図 3は、 KR7000を投与した C型肝炎ウィルス感染チンパンジー 2頭の血清中の A L T , A S Tおよび L D Hの経時的変化を示した図である。

図 4は、 KR7000を投与した C型肝炎ウィルス感染チンパンジー 2頭の C型肝炎ウィルスの増減を示した図である。図 5は、本発明で使用する α—グリコシルセラミド化合物の代表例（KRN7000) の合成反応経路の概略を示す図である。

図 6は、図 5に続く合成反応経路の概略を示す図である。

図 7は、実施例 1〜3の化合物の化学式を示す図である。発明を実施するための最良の形態

以下の実施例により本発明を詳細に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。

化合物の合成および単離 ·精製

〔実施例 1〕 (2 S, 3 S, 4R) - 1一 (α—D—ガラク卜ビラノシルォキシ） — 2—へキサコサノィルアミノー 3， 4一才クタデカンジオール（KRN7000) の合成

合成工程は、図 5および 6に示される通りである。図 5の反応経路中、 p y r はピリジン、 B r PPh₃ (CH₂) ₁₂C H₃はトリデカントリフエニルホスホニゥムブロミド、 n— BuL iは n—ブチルリチウム、 M s C 1は塩化メタンスルホ二ル、 BnB rは臭化ベンジル、 1 _ P r OHはプロピルアルコールを表し、図 6 の反応経路中、 WS C— HC 1は 1ーェチルー 3— (3 ' —ジメチルァミノプロピル）一カルポジイミド ·塩酸塩、 MS 4 Aはモレキュラーシーブス 4 A、 He x 4NB rはテトラへキシルアンモニゥムブロミドを表す。

(1) 化合物 G 1の合成

D—リキソース（200 g、 1. 33mo 1 ) に塩化カルシウムで乾燥したァセトン溶液（3. 0 L) に硫酸（0. 5mL) を加え、 1 8時間室温で攪拌した。モレキュラーシーブス 4 Aの粉末（100 g) を加え、反応液を中和後、セライト濾過し、残渣をアセトンで洗浄した。濾液と洗液をあわせて減圧濃縮し、 G 1 の粗生成物を得た。収量 240 g (95%)。これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。分析用のサンプルは、へキサン：アセトン（9 : 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。

mp 76- 78°C ; FDMS m/z 191 (M+ 1 )に， ¹ H - NMR (5 00MHz , CDC 1₃) δ 5. 45 ( 1 Η, d， J = 1. 8 Hz), 4. 83 ( 1 H， d d, J = 3. 7, 5. 5Hz), 4. 64 ( 1 H, d, J = 6. 1 Hz), 4. 27 -4. 30 ( 1 H, m), 3. 90— 3. 99 (2 H， m)， 1. 48 (3 H， s), 1. 32 (3H， s)。

(2) 化合物 G 2の合成

化合物 G l (239 、約1. 26mmo 1 ) の塩化メチレン溶液（ 1 68m 1 ) に、ピリジン（10m 1 )、塩化トリチル（39. 0 g) を加え、 32°Cで 4 時間攪拌した。エタノール（8m l) を滴下し、室温で 2時間攪拌した。飽和塩化アンモニゥム水溶液、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水で洗浄後、減圧濃縮した。残渣は酢酸ェチルに溶解し、 0°Cに冷却して結晶化した。収量 50 1 g (D—リキソースより 87 %)。

mp l 74- 1 76°C ; FDMS m/z 432 M^† ； ^!H-NMR (500 MHz , CDC 1₃) δ 7. 2 1 - 7. 49 ( 15 H, m), 5. 38 ( 1 H, d，

J = 2. 4Hz), 4. 75 ( 1 H, d d， J = 3. 7 , 6. 1 Hz), 4. 59 (1H， d, J = 6. 1 H z ), 4. 3 1 -4. 35 ( 1 H, m), 3. 43 ( 1 H, d d, J =4. 9， 9. 8Hz), 3. 39 ( 1 H， d d, J = 6. 7 , 9. 8Hz)， 1. 29 (3 H, s)， 1. 28 (3 H, s)。

(3) 化合物 G 3の合成

トリデカントリフエニルホスホニゥムブロミド（962 g、 1. 16mo 1 ；

1—ブロモトリデカン、トリフエニルホスフィンを 4. 5時間、 140°Cに加熱して調製した）の THF溶液（ 1 500m l ) に、アルゴン雰囲気下、 n—プチルリチウムの 2. 5Mへキサン溶液（462mL ； 366mmo 1 ) を 0°Cで滴下した。滴下終了後、 1 5分間攪拌し、化合物 G 2 (2 50 g、 579mmo 1 ) の THF溶液（45 Om l ) を滴下した。室温まで、徐々に温度を上げつつ 1 8 時間攪拌した。反応液を減圧濃縮し、残渣にへキサン：メタノール：水（1 0 ：

7 : 3、 1000m l )の混液を加え、飽和塩化アンモニゥム水溶液で洗浄した。水層はへキサン（500m l ) で抽出し、すべての有機層をあわせて無水硫酸マグネシゥムで乾燥後、減圧濃縮し、 G 3の粗生成物を得た。これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。収量 339 g (98%)。分析用のサンプルは、へキサン：酢酸ェチル（9 ： 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。

FDMS m/z 598 M^† ;^!H-NMR (500 MHz , C D C 1 j) «37.

2 1 -7. 45 (1 5H, m), 5. 48 - 5. 59 (2 H， m)， 4. 9 1 (0. 7 H, t , J = 7. 3 H z ), 4. 44 (0. 3 H, t , J - 7. 3 Hz), 4. 26 (0. 3H， d d， J =4. 3， 7. 3 H z ), 4. 2 1 (0. 7 H, d d, J =4. 3, 6. 7 H z ), 3. 75 (0. 7 H, m) , 3. 69 (0. 3 H, m), 3. 24 (0. 3H, d d, J =4. 9 , 9. 8 H z ), 3. 1 7 (0. 7 H， d d, J =4. 9， 9. 8 H z ), 3. 09 - 3. 14 [1H，（3. 1 1， d d， J =4. 9, 9. 2 H z ), H 1 b E overlapped] , 1. 75 - 2. 03 (2 H， m)， 1. 49 (3H, s)， 1. 39 a n d 1. 38 (3 H, e a c h s ), 1. 21 - 1. 34 ( 20 H, m)， 0. 88 (3 H, t , J = 6. 7Hz；)。 (4) 化合物 G4の合成

化合物 G 3 (338 g、約 565 mm o 1 ) の塩化メチレン溶液（ 1 500m 1 ) にピリジン (500m l ) を加え、塩化メタンスルホニル (49m 1、 63 3mmo 1 ) を滴下し、 3 1°Cで 24時間攪拌した。エタノール（40m l ) を滴下し、室温で 1時間攪拌した。減圧濃縮後、残渣にへキサン：メタノール：水 (1 0 : 7 : 3、 1 000m l ) の混液を加え、分液した。水層はへキサン（2 00m l ) で 3回抽出し、すべての有機層をあわせて無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、 G 4の粗生成物を得た。これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。収量 363 g (95%)。分析用のサンプルは、へキサン：酢酸ェチル (9 ： 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。

FDMS m/z 676M^† ;'H-NMR (500MHz , CDC 1 j) 67.

21 -7. 47 ( 1 5 H, m)， 5. 1 (0. 7 H, d d d, J = 5. 5, 9. 2 , 1 1. 0Hz), 5. 32 (0. 7 H， b t， J = 1 1. 0Hz)， 5. 22 (0. 3 H, b d d， J = 9. 2, 1 5. 0 H z ), 5. 02 (0. 3 H, d t , J I = 7. 3Hz， = 1 5. 0Hz), 4. 8 (0. 7 H, d d d, J = 3.

1， 5. 5, 7. 9Hz), 4. 73 (0. 7 H, d d, J = 5. 5, 9. 8Hz), 4. 64-4. 67 (0. 3 H， m), 4. 6 1 (0. 3 H, d d, J = 5. 5， 9. 2 Hz ), 4. 48 (0. 7 H, d d, J = 5. 5, 7. 9 H z ), 4. 22 (0. 3H, d d， J = 5. 5， 9. 2Hz)， 3. 55 (0. 3 H, d d， J =2. 4， 1 1. 6Hz)， 3. 45 (0. 7 H, d d， J = 3. 2, 1 1. OH z)， 3. 06- 3. 12 [4H, (3. 1 2， s), (3. 1 1, s)， (3. 09， d d， J = 3. 1， 1 1. 0 Hz)], 1. 66— 1. 82 (2 H, m), 1. 47 an d l. 46 (3 H, e a c h s)， 1. 39 (3 H, s)， 1. 1 3— 1. 35 (20 H, m), 0. 88 ( 3 H, t， J = 6. 8Hz)。

(5) 化合物 G 5の合成

化合物 G4 (362 g、約 536mmo 1 ) の塩化メチレン溶液（ 1 500m 1 ) にメタノール（350m l ) を加え、これに濃塩酸（200m l ) を滴下し、 5 h室温で攪拌した。反応液に炭酸水素ナトリウムを加えて中和後、濾過した。濾液を減圧濃縮し、残渣に酢酸ェチルを加え、食塩水で洗浄した。水層は酢酸ェチルで抽出し、すべての有機層をあわせて無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。へキサンより結晶化した。収量 161 g (G 2より 70%)。 mp 66 - 67°C ; FDMS mZ z 377 (Μ-Η,Ο)^† ; ^!H-NMR (5

00MHz, CDC 1₃+D₂0) δ 5 - 86 (0. 3 H, d t , J _t = 7. 3Hz， J 14. 7 H z ), 5. 77 (0. 7 H, d t， Jj = 7. 3， J _d = 10. 4 Hz), 5. 55 (0. 3 H, b r . d d, J = 7. 3, 14. 7Hz), 5. 4 9 (0. 7 H, b t， J = 9. 8Hz)， 4. 9 1 -4. 97 (1 H， m)， 4. 51 (0. 7 H, b t , J = 9. 8Hz), 4. 1 1 (0. 3 H, b t， J = 7. 3Hz), 3. 94- 4. 03 (2 H, m)， 3. 67 - 3. 73 [1 H, (3. 7 0， dd, J = 3. 1， 6. 7 H z ), (3. 69, d d, J = 3. 1， 7. 3 H z )], 3. 20 a n d 3. 19 (3 H, e a c h s ), 2. 05— 2. 22 (2 H， m), 1. 22 - 1. 43 (20H， m)， 0. 88 (3H， t, J = 6. 7Hz；)。

(6) 化合物 G 6の合成

化合物 G 5 ( 160 g、 405mmo 1 ) の THF溶液（780m l ) に 5 % パラジウム—硫酸バリウム（1 6 g) を加え、反応容器を水素ガスで置換後、室温にて 20時間攪拌した。反応液をセライト濾過後、クロ口ホルム：メタノールの混液（1 : 1) で洗浄した。濾液と洗液をあわせ、減圧濃縮した。残渣は酢酸ェチルより結晶化した。収量 146 g (9 1 %)。

[α] ^l + 1 2° (c 1, CHC 1 ,/Me OH= 1 ： l) ; mp l 24- 1 2

6°C ； FDMS m/z 3 9 7 (M + 1) ^† ; 'H-NMR (50 0 MHz， C D C 1₂/CD₃OD= 1 : 1) 4. 9 3— 4. 9 6 (l H， m， H2)， 3. 9

1 (1 H， d d， J = 6. 7 , 1 2. 2 H z ), 3. 8 5 ( 1 H, d d， J = 4. 9, 1 2. 2 H z ), 3. 54- 3. 6 0 (1 H， m), 3. 5 0 ( 1 H, d d， J = 1. 8， 8. 5 H z ), 3. 1 9 ( 3 H, s)， 1. 7 5 - 1. 8 3 ( 1 H, m), 1. 53 - 1. 62 ( 1 H， m)， 1. 2 1 - 1. 45 (24H, m)， 0. 8 9 ( 3 H, t， J = 6. 7 Hz)。

(7) 化合物 G 7の合成

化合物 G 6 ( 145 g、 3 6 5mmo 1 ) の DMF溶液（1 00 0m l ) にァジ化ナトリウム（47 g、 7 3 Ommo 1 ) を加え、 9 5 °Cで 4時間攪拌した。反応液を濃縮し、残渣に酢酸ェチル（45 0m l ) を加え、水洗した。水層は酢酸ェチルで再抽出した。すべての有機層をあわせて食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシゥムで乾燥、減圧濃縮し、 G 7の粗生成物を得た。収量 1 2 2 g (9 7 %)。これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。収量 1 2 6 g (9 5%)。分析用のサンプルは、へキサン：酢酸ェチル（9 ： 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマ卜グラフィ一により精製した。

[a] ^l + 1 6. 5° (c O. 5， CHC 1厂 Me OH， 1 ： 1 ) ； m p 9 2 - 9 3°C； FDMS m/z 344 (M+ l) ¹ ; ^jH-NMR (5 0 0 MHz ,

CD₂OD) δ 3. 9 1 ( 1 H, d d， J = 3 , 7， 1 1. 6 H z ), 3. 7 5 ( 1

H, d d, J = 7. 9， 1 1. 6 H z ), 3. 49 - 3. 6 1 (3 H, m)， 1. 50 - 1. 7 1 (2 H, m)， 1. 2 2 - 1. 46 (24H, m), 0. 9 0 (3 H, t , J = 6. 7Hz)。

(8) 化合物 G 8の合成化合物 G 7 ( 1 2 1 g、約 3 5 2mmo 1 ) の塩化メチレン溶液（7 5 0m l ) にピリジン（2 5 0m 1 )、塩化トリチル（ 1 2 4 g、 44 5 mm o 1 ) を加え、室温で 1 6時間攪拌した。エタノール（3 0m l ) を滴下し、室温で 3 0分間攪拌した後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、飽和塩化アンモニゥム水溶液、食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、減圧濃縮した。残渣は、へキサン：酢酸ェチル（1 0 : 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。収量 3 4. 4 g (G 6より 5 2%)。

[ ] + 1 1. 9 ° (c O . 9， CHC 1₃)， FDMS m/ z 5 8 5 M+ ;

'H-NMR (5 0 0MH z， CD C 1₃+D₂0) δ 7. 2 4 - 7. 6 1 ( 1 5Ή, m)， 3. 6 2 - 3. 6 6 (2 H, m), 3. 5 1 - 3. 5 7 (2H, m), 3. 4 2 (1 H， d d, J = 6. 0， 1 0. 4H z)， 1. 2 3— 1. 5 6 ( 2 6 H, m)， 0. 8 8 (3 H， t , J = 6. 7 H z)。

(9) 化合物 G 9の合成

化合物 G 8 (3 3. 5 g、 5 7. 3 mm o 1 ) の DM F溶液（3 0 0m l ) に 6 0 %水素化ナトリウム（5. 5 g、 N aHとして約 1 3 8mmo 1 ) を加え、室温で 4 0分間攪拌した。反応液を 0°Cに冷却し、臭化べンジル（1 5m l、 1 2 Ommo 1 )を滴下した。室温まで徐々に温度をあげながら 1 8時間攪拌した。反応液に氷水（1 0 0m l ) を加えて、反応を停止した後、酢酸ェチルを用いて抽出した。抽出液は食塩水で 3回洗浄し、すべての有機層をあわせて無水硫酸マグネシゥムで乾燥後、減圧濃縮し、 G 9の粗生成物を得た。これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。収量 4 2. 2 g (9 6%)。分析用のサンプルは、へキサン：酢酸ェチル（1 0 0 ： 1 ) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマトグラフィ一により精製した。

[a] ¹ + 9. 8 ° (c l . 0 , CHC 1₃)， FDMS mZ z 7 3 8 (M

-N₂) ¹ ; )Η - NMR (5 0 0 MHz , CD C ） δ 7. 0 7 - 7. 4 8 (2 5 H, m)， 4. 57 ( 1 H, d, J = 1 1. 6 H z ), 4. 44 ( 1 H, d, J = 1 1. 6 H z ), 4. 4 1 (2 H, s)， 3. 7 3— 3. 7 9 (1 H, m), 3. 4 6— 3. 56 (2H， m), 3. 3 7 ( 1 H, d d, J = 8. 6， 1 0. 4Hz ),

I . 2 0 - 1. 64 (26 H, m), 0. 8 8 (3H, t , J = 6. 7Hz)。 (10) 化合物 G l 0および G l 1の合成

化合物 G 9 (4 1. 2 g、約 54mmo 1 ) の 1一プロパノール溶液（2 5 0 m l ) にメタノール（30m l ) を加え、更に 5 %パラジウム炭素（4. 1 g)、蟻酸アンモニゥム（2 7. l g、 4. 3 mo 1 ) を加えた。室温で 1 6時間攪拌後、酢酸ェチルで希釈し、セライト濾過した。濾液を減圧濃縮し、酢酸ェチルで溶解後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水で 3回洗浄し、すべての有機層をあわせて無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、 G 1 0の粗生成物を得た。収量 38. 9 g (98 %)。得られた G 1 0は、これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。

化合物 G 1 0の塩化メチレン溶液（3 0 0m l ) に、へキサコサン酸（2 2. 4 g、 56. 5mmo 1 )、 WS C塩酸塩（1 2. 6 g、 64. 6mmo 1 ) を加え、 2時間加熱還流した。室温まで冷却後、減圧濃縮した。残渣に酢酸ェチル（5 0 0m l ) を加え、 0. 5 M塩酸水溶液、食塩水、飽和炭酸水素ナトリゥム水溶液、更に食塩水で洗浄した。すべての有機層をあわせて無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮し、 G l 1の粗生成物を得た。収量 53. 2 g (8 8%)。得られた G 1 1は、これ以上の精製を行わずに次の工程に用いた。分析用のサンプルは、へキサン：酢酸ェチル（1 0 0 ： 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマト

-により精製した。

[ ¹ + 5. 3° (c 0. 4, CHC 1₃) ; FDMS m/ z 1 1 1 8 M¹

)H_NMR (5 00MHz , CDC ) δ 7. 2 0 - 7. 3 8 (2 5 H, m)

5. 57 (1 H， d， J = 9. 1 Hz), 4. 80 ( 1 H, d, J = 1 1. 6 H z ),

4. 48 -4. 50 (3H， m), 4. 24-4. 3 2 (1 H, m), 3. 8 3 ( 1

H, d d， J = 3. 0， 6. 7 H z ), 3. 43 - 3. 5 1 (2H, m, H 1 a), 3. 2 9 ( 1 H, d d, J =4. 3 , 9. 8 H z ), 1. 9 2 (2 H, t , J = 7. 3 H z), 1. 2 8 - 1. 6 0 (7 2 H, m)， 0. 8 8 (6 H, t , J = 6. 7 H z )。

(11) 化合物 G l 2の合成

化合物 G i l (5 2. 2 g、約 4 7mmo 1 ) の塩化メチレン溶液（ 1 8 0m 1 ) にメタノール（3 6m l ) を加え、次いで 1 0 %塩酸メタノール溶液（3.

Om l ) を滴下し、室温で 2時間攪拌した。反応液は粉状の炭酸水素ナトリウム ( 1 8 g) で中和し、セライト濾過した。残渣は塩化メチレンで洗净した。濾液と洗液をあわせ、食塩水で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮した。残渣をアセトンに加熱溶解し、 0°Cに冷却して沈殿化により精製した。収量 3 8. 6 g (G 9より 7 7 %)。

[ ] ¹ - 2 9 - 7 ° (c O . 7， CHC l ₃) ; mp 7 5 - 7 6. 5 °C ； F D

MS m/z 8 7 6 M^† ； Ή-NMR (5 0 0 MH z , CD C 1 j) δ 7. 3 0

- 7. 4 7 ( 1 0 H, m)， 6. 0 3 (1 H, d， J = 7. 9 H z ), 4. 7 2 ( 1 H， d, J = 1 1. 6 Hz ), 4. 6 6 (1 H, d， J = 1 1. 6 Hz), 4. 6 1 ( 1 H, d， J = 1 1. 6 H z ), 4. 4 5 ( 1 H, d， J = 1 1. 6 H z ), 4. 1 2 - 4. 1 7 ( 1 H, m), 4. 0 0 ( 1 H， d t , J ₍ = 4. 3 , =

7. 3 H z)， 3. 6 7 - 3. 7 2 (2 H, m), 3. 6 1 ( 1 H， d d d, J =

4. 3， 8. 6， 1 1. 6Hz)， 1. 9 4— 2. 0 5 (2 H, m)， 1. 1 5 一 1. 6 9 (7 2 H, m), 0. 8 8 (6 H, t , J = 6. l H z)。

(12) 化合物 G l 3の合成

1) 2 , 3， 4， 6—テトラ一 O—べンジルー D_ガラクトピラノシルァセテート（7 9. 8 g) をトルエン（1 6 0m l ) およびイソプロピルエーテル（5

2 0m l ) の混液に溶解し、一 1 0〜0°Cに冷却した。これに、 2. 0等量の H

B rを含むィソプロピルェ一テル溶液を加えた（ 2. 8 mm o 1 / 1、約 1 0

0m l)。 — l 0〜0°Cで約 9 0分間攪拌後、反応液に 5 %炭酸水素ナトリウム水溶液を注ぎ、攪拌して過剰の HB rを中和した。全量を分液ロートに移して分液後、水層を廃棄し、 10%塩化ナトリウム水溶液で 2回洗浄した。減圧濃縮して 2, 3, 4, 6—テトラ一〇一べンジルー α— D—ガラクトピラノシルブロミド (Ga l B r) のシロップを得た。

2) 化合物 G 12 (60. 0 g、 68. 6 mm o 1 ), テトラへキシルアンモニゥムブロミド（89. 4 g、 206mmo 1 )、モレキュラーシーブス 4 A (6 0 g) のトルエン溶液（420m l ) に、 DMF (140m l ) 次いで、 Ga l B r (約 137mmo 1 ) のトルエン溶液（250m l ) を加え、室温で 72時間攪拌した。反応液にメタノール（1 2m l ) を加え、 2時間攪拌した。セライト濾過後、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液、食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシゥムで乾燥し、減圧濃縮した。残渣にァセトニトリルを加え、 2時間攪拌し、沈殿を得た。得られた沈殿を減圧乾燥し、乾燥粉体を得た。これをへキサン：酢酸ェチル（8 ： 1) を溶出溶媒としてシリカゲルクロマトグラフィーにより精製した。収量 70. 9 g (74%)。

[a] ^l + 1 8. 8° (c 0. 9， CHC l j) ； mp 74- 75 V, ； FDMS m/z 1 399 (M+ 1 ) ^† ; ^!H-NMR (500 MH z , CDC 1₃) δ 7.

21 - 7. 37 ( 30 H, m), 6. 1 2 ( 1 H, d, J = 9. 0Hz)， 4. 9 1 ( 1 H, d， J = 1 1. 6 H z ), 4. 84 ( 1 H, d, J = 3. 7 H z ), 4. 72 -4. 80 (4H， m)， 4. 35— 4. 65 (7 H, m), 4. 1 2 -4. 18 (1H, m)， 3. 99 -4. 05 (2 H, m), 3. 84- 3. 93 (4H, m), 3. 73 ( 1 H, d d, J = 3. 7 , 1 1. 0Hz), 3. 47 - 3. 51

(2H, m), 3. 42 ( 1 H, d d, J = 6. 1， 9. 1 H z ), 1. 87 - 1. 99 (2 H, m)， 1. 1 8 - 1. 70 (72 H, m)， 0. 88 (6 H, t , J = 7. 4Hz)。

(13) 化合物 KRN7000の合成

化合物 G 1 3 (60. 0 g、 42. 9mmo 1 ) をエタノール（960m l ) に加えて懸濁させ、これに 20 %水酸化パラジウム（6. 0 g) のエタノール懸濁液を加えた。更に水素源となる 4—メチルシクロへキセン（120m l、 93. 5mmo 1 ) を加え、 4時間加熱還流した後、濾過し、触媒を除いた。残渣は加温したエタノールで洗浄した。濾液を室温放置することによって得た白色沈殿を濾過、減圧乾燥した。得られた粉体をエタノール：水 (9 2 : 8、 3. 5 L) に懸濁し、攪拌しながら加熱溶解後、室温放置することによって再度沈殿化した。沈殿液を濾過し、濾取したケーキを減圧乾燥し、白色粉末を得た。収量 3 5. 0 g (9 5 %)o

[ ] + 43. 6° (c l . 0 , pyridine)； mp 1 8 9. 5 - 1 9 0. 5。C ； negativeF ABMS mZ z 8 57 (M— H) " ; I R (cm—¹, KB r ) 3 3

0 0, 2 93 0, 2 8 5 0, 1 640, 1 540, 147 0, 1 0 7 0 ; Ή-Ν MR (5 0 OMH z , C₅D₅N) δ 8. 47 ( 1 H, d， J = 8. 5Hz)， 5.

5 8 ( 1 H, d, J = 3. 7 H z ), 5. 2 7 ( 1 H, m), 4. 6 3— 4. 7 0 (2 H, m), 4. 5 6 ( 1 H, m) , 4. 5 2 ( 1 H, t , J = 6. 1 Hz), 4. 3 7 -4. 47 (4H， m), 4. 3 3 (2H， m), 2. 45 (2H, t， J = 7. 3Hz)， 2. 2 5 - 2. 34 (1 H, m), 1. 87 - 1. 9 7 (2 H, m), 1. 7 8 - 1. 8 5 (2 H, m)， 1. 6 2— 1. 72 ( 1 H， m), 1 · 2 6—

1. 45 (6 6 H, m), 0. 8 8 (6H， t , J = 6. 7 H z ), ¹³C-NMR (1 2 5MHz , C₅D₅N) 5 1 7 3. 2 (s), 1 0 1. 5 (d), 76. 7 (d),

7 3. 0 (d), 7 2. 5 (d)， 7 1. 6 (d)， 7 1. 0 (d), 7 0. 3 (d)， 6 8. 7 ( t ), 6 2. 7 ( t)， 5 1. 4 (d), 36. 8 ( t), 34. 4 ( t), 3 2. 1 ( t ), 30. 4 ( t)， 30. 2 ( t ), 3 0. 0 3 ( t ), 3 0. 0 0

( t)， 2 9. 9 3 ( t ), 2 9. 8 7 ( t ), 2 9. 8 1 ( t)， 2 9. 7 6 ( t)， 2 9. 6 ( t ), 2 6. 5 (t)， 2 6. 4 (t)， 2 2. 9 ( t)， 14. 3 (q)₀

〔実施例 2〕 O—ひ一D—ガラクトピラノシルー (1— 2) ー〇一 a— D -ガラクトピラノシルー（1→1) - (2 S, 3 S, 4R) ー 2—ァミノ一 N— [(R) 一 2—ヒドロキシテトラコサノィル]一 1， 3， 4一才クタデカントリオール（S

1 140 B- 9) の単離および精製

沖繩県久米島近海の海底水深 1 5〜2 5mで採取された海綿を、凍結乾燥した粉末 447. 1 gをクロ口ホルムとメタノールの混液で抽出し、抽出液を減圧下濃縮して 5 1. 28 gのエキスを得た。これを酢酸ェチルと水で分配後、上層と中間層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧下濃縮してそれぞれ 18. 37 gと 9. 44 gのフラクションを得た。上層より得たフラクションを 10 %水性メタノールと n—へキサンとで分配したアルコール層と、中間層より得たフラクションを合わせて濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィーに繰り返して順相 T L C上単一の活性成分を 169. 9mg得た。さらに ODS— AMカラム（YM C製、 250mmX20丽径、メタノール、 9. Oml/min) を用いた逆相 HPLCで精製し（保持時間： 30. 3分）、純粋な表題化合物（S1140B- 9) を 10. 2mg得た。なお、表題化合物は、 F. Cafieri et al., Liebigs Ann. Chem. 1995, 1477-1481 を参照し、単離、精製することもできる。

n e g a t i v e FABMS m/z 1 007 [(M-H) "3； I R ； Ή NMR ( 500MHz, CJDJN, 24°C) δ (p pm) 8. 55 ( 1 H, d,

J = 9. 2Hz, NH), 5. 60 (1H， d， J = 3. 7 H z , HI ' ' ), 5.

57 ( 1 H, d, J = 3. 7 H z , H I ' ' ' ), 5. 1 3 ( 1 H,

m, H 2), 4. 75 (1H， d d， J = 3. 7 , 10. 4H z , H2 ' '), 4.

62 (2H, m), 4. 54 (4H, m), 4. 25 -4. 47 ( 1 0 H, m), 2. 1 7 (2 H, m), 1. 99 (1H， m)， 1. 87 (2H， m), 1. 75 ( 1 H， m)， 1. 65 (2H, m), 1. 1 2 - 1. 49 (60 H, m), 0. 85 (6 H, m, t e rm i n a l me t h y 1 ) ; ¹³C NMR ( 1 2 5 MH z， CJDJN,

45°C) δ ( pm) 175. 5 (s , C I '), 99. 5 (d, C I ' ' ' ), 98. 6 (d, C I ' '), 76. 7 (d， C

2 ' ' ), 76. 0 (d, C 3)， 72. 8 (d， C 4), 72. 6 (d, C 5 ' 一）， 72. 6 (d, C 4 ' ' ), 72. 5 (d, C 2)， 7 1. 3 (d, C 3 ' ' ' ), 7 1. 0 (d), 70. 8 (d), 70. 5 (d, C 2 ' ' ' ), 69. 7 (d， C 3 ' ' ), 68. 6 ( t , C I), 62. 7 (t)， 62. 5 ( t ), 51. 2 ( t , C 2), 39. 4 (t), 35. 6 ( t ), 33. 7 (t)， 32 · 2 ( t), 30.

5 ( t ), 30. 3 ( t ), 30. 1 (t)， 30. 0 (t), 29. 7 (t), 29.

6 ( t ), 26. 7 ( t ), 26. 0 ( t ), 23. 0 ( t ), 22. 9 ( t ), 14. 3 ( q , t e rm i n a l me t hy l )

〔実施例 3〕

下記に記載の化合物は、それぞれの化合物の後に挙げた文献に記載の方法に従つて合成した。

(2 S, 3 R) 一 1 - (a_D—ガラクトピラノシルォキシ) - 2—テトラデカノィルアミノー 3—才クタデカノール（AGL— 51 7) (国際公開第 93/5055 号公報）

(2 S, 3 R) — 1— (α—D—ダルコピラノシルォキシ）一2—テトラデカノィルアミノー 3—ォクタデカノ一ル（AGL— 563) (国際公開第 94/9020 号公報）

(2 S, 3 R) - 1 - (6 ' ーデォキシー α—D—ガラクトピラノシルォキシ） — 2—テトラデカノィルァミノ一 3—ォクタデカノール（AG L— 57 1 ) (国際公開第 94/9020号公報）

(2 S, 3 R) — 1— (/3— L—ァラビノピラノシルォキシ） - 2—テトラデカノィルアミノー 3—ォク夕デカノール（AGL— 577) (国際公開第 94/9020 号公報）

O—ひ一 D—ガラクトビラノシルー（1→6) — O—ひ一D—ガラクトピラノシルー (1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー N—へキサコサノィルー 1， 3, 4一才クタデカントリオール（AGL— 586) (国際公開第 94/24142 号公報）

O— α—D—ガラクトピラノシルー (1→6) 一 O— α _ D—ダルコピラノシル一 (1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) — 2—アミノー Ν—へキサコサノィル— 1 , 3， 4一才クタデカントリオール（AGL— 584) (国際公開第 94/24142 号公報）

Ο— a— D—ガラク卜フラノシルー (1→3) 一 Ο—《— D_ガラク卜ビラノシルー（1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) —2—アミノー N— [(R) — 2—ヒドロキシテトラコサノィル] — 1， 3， 4一才クタデカントリオ一ル（7 1 9— 7)

(国際公開第 94/24142号公報）

0- (N—ァセチルー 2—アミノー 2ーデォキシーひ一 D—カラクトピラノシル一 (1→3) — O— [ひ一 D_ダルコピラノシル一（1→2)] — O— 一 D—ガラクトビラノシルー（1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー N— [(R) 一 2—ヒドロキシテトラコサノィル]一 1， 3, 4—ォクタデカントリオール（S TL- 8) (国際公開第 94/24142号公報）

式（ I) の化合物と上記実施例に記載の化合物との対応は、下記表 1に示されるとおりである。

式（I) の化合物と実施例に記載の化合物との対応

〔実施例 4〕薬理試験例： C型肝炎ウィルス持続感染チンパンジーに対する KRN7000の有効性試験

本発明の配糖体化合物の代表として、式（ I ) の化合物（KRN7000) を用いて以下の実験を行った。

C型肝炎ウィルスに持続感染する実験用の動物種はチンパンジーのみである。そこで、本試験は C型肝炎ウィルスキヤリアを含むチンパンジーを長期間に渡り人工飼育 ·繁殖を行ってきたチンパンジー専用施設（三和化学研究所熊本霊長類パーク）の 2頭を供試動物として選択し、実施した。本試験は、試験開始前に実験審査委員会による倫理ならびに試験内容の審査と実施許可を受け、また試験期間中においてはチンパンジーに与える苦痛を可能な限り排除し実施した。試験に用いた 2頭のチンパンジーは以降、動物番号 C 33 (HCV (l a) 持続感染期間 22年；）および動物番号 C 54 (HCV (l b) 持続感染期間 20年）で示す。

約 1ヶ月間の馴化期間の後に、動物に 28日間間隔で 2回（第 0日目および第 28日目）、 10 n g/k gの用量の KRN7000を静脈内投与した。 KRN7000に対するチンパンジーの反応および慢性 HCV感染に対する薬効を確認するためのサンプルを得るため、採血を各投与の前後に行った。総白血球数は自動血球計数装置（S y s me X K一 4500、シスメックス株式会社）を用い測定した。白血球百分比は、全血を脱脂したスライドグラスに塗沫後、ディフ'クイック（国際試薬）により固定 '染色し、白血球 200個について鏡検して求めた。好中球およびリンパ球数は総白血球数にそれらの比率を乗じて算出した。 ΝΚΤ 細胞数の Τ細胞中における百分比は、全血をそれぞれ異なる蛍光色素で標識された抗ヒト TCR V 24抗体（ベックマン ·コール夕株式会社）、 KRN7000 ( 一 Ga l C e r) 結合ヒト CD 1 d 4量体（t e t r ame r) ならびに抗ヒト CD 3抗体（日本べクトン ·デッキンソン株式会社）を用い染色した後、 FACS Ly s i n g S o l u t i o n (日本べクトン ·デッキンソン株式会社）にて溶血 ·固定し、 F AC S C 1 i b u r (日本べクトン ·デッキンソン株式会社）にて測定した。抗ヒ卜 TCR Va 24抗体、 t e t r a m e rならびに抗ヒト C D 3抗体の何れにも反応した細胞をチンパンジーにおける NKT細胞と判定した。血清中の A L T ( a 1 an i n e a m i n o t r an s f e r a s e)、 AST ( a s p a r t a t e am i n o t r an s f e r a s e) ならびに LDH ( 1 a c t a t e d e hyd r o g e n a s e) 活性は、自動分析装置を用いて測定した。血清中 HC V— RNA量の測定は、アンプリコア（登録商標） GT HC V モ二夕一（ロシュ ·ダイァグノスティックス株式会社）を用いた RT— PCR法、ならびにクォンティプレックス HCV— RNA' 2 (バイエルコーポレーション）を用いた分岐 D N Aプロ一ブ（ b D N A )法で実施した。血清中 KRN7000濃度は、 LC一 MS/MS (液体クロマトグラフィー ·タンデム質量分析）法にて測定した。

図 1に、投与前後の総白血球数、好中球数ならびにリンパ球数の推移を示す。

2頭とも何れの投与においても投与 6時間後における好中球数の増加が認められ、多くの場合、その変動を反映した総白血球数の一過性の増加がみられた。また、投与 6時間後にはリンパ球数の減少が一部の例外を除き認められた。

図 2に、 CD 3陽性細胞にゲートした細胞集団の内に存在する、 t e t r am e rで染色され、かつ TCR V α 24陽性のチンパンジーにおける NKT細胞の FACS (f l u o r e s c e n c e a c t i v a t e d c e l l s o r t e r ) による解析図の代表例（図 2 A) と、 KRN7000投与前後におけるそれら NKT細胞の変動（図 2B) を示す。 2頭とも何れの投与においても、投与翌日には NKT細胞は検出されなくなった。被験動物番号 C 54の場合、 NKT細胞は本剤投与後の消失の後、緩やかな回復傾向を示した。この KRN7000投与後における NKT細胞の急速な消失は、 KRN7000の刺激により直ちに NKT細胞が活性化した後アポトーシスに至ったことを示唆する。また、活性化した NKT細胞からは各種サイトカインが放出されたものと推定される。

図 3に、 KRN7000 投与前後における肝傷害の指標となる臨床検査項目である血清中の ALT、 AS Tならびに LDH活性の値を示す。 2頭とも何れの投与においても、投与後 1ないし 3日目をピークとして一過性に軽度上昇を示し、その後投与前値に回復した。

図 4に、 RT— PCR法あるいは bDNA法を用いて測定した、 KRN7000 投与前後における血清中の HCV—RN A量の変動を示す。 2頭とも何れの投与においても KRN7000投与 1あるいは 3日後に血清中の HCV- RNA量の明らかな減少が認められた。また、 1回目（第 0日目）の投与よりも 2回目（第 28日目）の投与により HCV-RNA量の持続的な低下が認められた。

表 2に、 KRN7000投与前後における血清中 KRN7000濃度の測定成績を示す。 2 頭とも何れの投与においても KRN7000投与 1 5分後を最大とする KRN7000が検出され、投与した KRN7000が確実に体内移行したことが示された。

表 2 投与前後における血中 KRN7000濃度の測定被験動物番号投与回数採血時期血中濃度

、ng/ mL)

C33 1回目投与前 <10

15分後 89

6時間後 38

2回目投与前 <10

15分後 97

6時間後 58

C54 1回目投与前 <10

15分後 129

6時間後 42

2回目投与前ぐ 10

15分後 141

6時間後フフ以上、 KRN7000 投与により刺激された NKT細胞の活性化に基づくサイトカインの放出によると考えられる白血球数の変動や軽度一過性の肝細胞傷害所見がみられ、それと同時に血清中 HCV— RNA量が減少したという結果から、投与した KRN7000の作用により肝臓局所で H C V感染肝細胞における H C V— R N A複製が抑制されたことを示唆している。従って、今回の試験により KRN7000の慢性 H C V感染チンパンジ一における抗 H C V作用が明らかとなつた。

本明細書で引用した全ての刊行物、特許および特許出願をそのまま参考として本明細書にとり入れるものとする。産業上の利用の可能性

実施例が示すように、本発明の薬剤を C型肝炎ウィルスに感染した

一に投与することにより、 C型肝炎ウィルスの減少が認められ、低下していた肝機能の改善が期待された。従って、本発明の薬剤はヒトにおける C型肝炎ウィルス抑制剤、 C型肝炎治療剤として利用することができる。

Claims

請求の範囲

1. 式（I) の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む、 c型肝炎ウィルス抑制剤。

(I)

(上記式中、

R¹は Hまたは OHであり、

Xは？〜 27のいずれかの整数であり、

R²は下記（a) 〜（e) からなる群から選択される置換基であり（ここで、 Y は 5〜1 7のいずれかの整数である）、

(a) -CH₂ (CH₂) yCH₃

(b) -CH (OH) (CH₂) |CH₃

(c) — CH (OH) (CH₂) CH (CH₃) ₂ (d) 一 CH=CH (CH₂) yCH

(e) 一 CH (OH) (CH₂) _yCH (CH₃) CH₂CH₃、そして R³〜R⁹は下記の i) 〜v) のいずれかで定義される置換基である： i ) R³、 R および R⁸が H のとさ

R⁴は H、 OH、 NH₂、 NHCOCH₃、または下記基（A) 〜（D) ：

(A) (B) (C) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R⁵は OH、または下記基（E) および（F) ：

(E) (F) からなる群から選択される置換基であり、

R⁷は、 OHまたは下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (C) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R⁹は H、 CH₃、 CH₂OH、または下記基（Α') 〜（D') ：

(Α') Β') (C) ( ）からなる群から選択される置換基である；

ii) RK R⁶および R7が Hのとき

R⁴は H、 OH、 NH₂、 NHCOCH₃、または下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (C) 《D) からなる群から選択される置換基であり、

R⁵は OH、または下記基（E) および（F) ：

(E) ）

からなる群から選択される置換基であり、

R^FLは OH、または下記基（A) 〜（D)

(A) (B) (C) (D) からなる群から選択される置換基であり、

R¹¹は H、 CH CH₉OHまたは下記基（Α') 〜（D')

(Α') (Β') (C) (D.) からなる群から選択される置換基である。）

2. C型肝炎ウィルスがジエノタイプ 1型である請求項 1記載の C型肝炎ゥィルス抑制剤。

3. 請求項 1記載の式（I) の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む C型肝炎治療剤。

4. C型肝炎が慢性 C型肝炎である、請求項 3記載の C型肝炎治療剤。

5. C型肝炎が急性 C型肝炎である、請求項 3記載の C型肝炎治療剤。

6. 請求項 1記載の式（I) の化合物またはその塩若しくは溶媒和物を有効成分として含む、 C型肝炎により低下した肝機能を改善する薬剤。

7. 式（ I)の化合物中、 R³、および R^fiが Hを表し、 R⁴が OHまたは基（A) 〜（D) のいずれかの置換基を表し、 R⁵が OHまたは基（E) もしくは（F) の置換基を表し、 R⁷および R⁸がそれぞれ Hまたは OHのいずれかを表し（但し、 R7および R⁸の両方が同一のを表すことはない）、 R⁹が CH₂〇H、 CH₃、 H、または基（Α') 〜（D') のいずれかの置換基を表す、請求項 1〜6のいずれか 1項に記載の薬剤。

8. 式（I ) の化合物中、 Xが 21〜25の整数であり、 R²が置換基（b) (式中、 Yは 1 1〜15である）を表す、請求項 1〜6のいずれか 1項に記載の薬剤。

9. 式（I) の化合物中、 Xが 9〜13の整数であり、 R²が置換基（a) (式中、 Yは 1 1〜1 5である）を表す、請求項 1〜6のいずれか 1項に記載の薬剤。

1 0. 式（ I ) の化合物が、（2 S， 3 S, 4R) — 1— ( 一 D—ガラク卜ピラノシルォキシ）一 2 _へキサコサノィルァミノ _ 3， 4—ォク夕デカンジォール、

(2 S, 3 R) _ 1一（CK—D—ガラクトピラノシルォキシ）一 2—テトラデカノィルアミノー 3一才ク夕デ力ノール、

(2 S, 3 R) 一 1 - ( α— D—ダルコピラノシルォキシ) 一 2—テトラデカノィルアミノー 3—ォク夕デカノ一ル、

(2 S, 3 R) - 1 - (6 ' —デォキシ一 CK—D—ガラクトピラノシルォキシ）一 2—テトラデカノィルァミノ一 3—ォク夕デカノール、

(2 S, 3 R) — 1一（jS_L—ァラビノピラノシルォキシ）一 2—テトラデカノィルァミノ一 3一才クタデカノール、

O— a— D—ガラクトピラノシルー（1→6) — O—ひ一 D—ガラクトビラノシルー (1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—ァミノ一N—へキサコサノィル一 1, 3 , 4 _ォクタデカントリオール、

0— 一 D—ガラクトピラノシル一（1→6) — O— a—D—ダルコピラノシルー (1→1) - (2 S, 3 S, 4 R) — 2—アミノー N—へキサコサノィルー

1， 3, 4—才クタデカントリオール、

O— α;— D—ガラク卜ピラノシル一（1→2) — O— a_D_ガラク卜ピラノシル一（1→1) ― (2 S, 3 S， 4R) — 2—アミノー N— [(R) 一 2—ヒド口キシテトラコサノィル] 一 1, 3, 4—才クタデカントリオール、 O— j3— D—ガラクトフラノシル一（1→3) — O— a;— D—ガラクトビラノシルー（1→1) ― (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—ァミノ一N— [(R) ー 2—ヒド口キシテトラコサノィル] — 1, 3, 4_ォク夕デカントリオ一ル、および

O— (N -ァセチルー 2—アミノー 2ーデォキシーひ一 D—ガラクトビラノシルー（1→3) — O— [α—D—ダルコピラノシルー（1→2)] — O— a— D— ガラクトピラノシルー ( 1→1) - (2 S, 3 S, 4R) - 2ーァミノ— Ν— [(R) — 2—ヒドロキシテトラコサノィル] — 1， 3， 4一ォク夕デカントリオールからなる群から選ばれる化合物である、請求項 1〜 6のいずれか 1項に記載の薬剤。

1 1. 式（ I ) の化合物が、

(2 S, 3 S, 4 R) - 1 - (α—D—ガラクトピラノシルォキシ) — 2—へキサコサノィルアミノー 3， 4—ォクタデカンジオール、

Ο— α— D—ガラクトピラノシル一（1→6) — O— a— D—ガラクトピラノシルー ( 1→ 1 ) - (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー Ν—へキサコサノィル一 1 , 3， 4ーォクタデカントリオール、

Ο— a— D—ガラクトビラノシル一（1→6) — Ο— α— D—ダルコピラノシル一（1→1) 一 (2 S, 3 S , 4 R) 一 2—ァミノ— Ν—へキサコサノィルー 1 , 3， 4—ォクタデカントリオール、

Ο— α— D—ガラクトピラノシルー (1→2) — Ο— a— D—ガラクトピラノシル一（1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) 一 2—アミノー N— [(R) 一 2—ヒド口キシテトラコサノィル] 一 1， 3， 4—ォクタデカントリオール、

Ο— /3— D—ガラクトフラノシル一（1→3) —〇一 α—D—ガラクトピラノシルー（1→1) 一 (2 S, 3 S, 4 R) ― 2—アミノー N— [(R) 一 2—ヒド口キシテトラコサノィル] 一 1， 3 , 4一才クタデカントリオール、および

O— (N—ァセチル一 2—ァミノ一 2—デォキシ一 α— D—カラクトビラノシルー (1→3) — Ο— [«— D—ダルコピラノシルー ( 1→2)] -0- -Ό~ ガラクトピラノシル一（1→1) 一（2 S, 3 S, 4R)— 2—ァミノ一 N— [(R) 一 2—ヒドロキシテトラコサノィル] 一 1， 3， 4一ォク夕デカントリオールからなる群から選ばれる化合物である、請求項 1〜 6のいずれか 1項に記載の薬剤。

1 2. 式（ I ) の化合物が、（2 S， 3 S, 4R) — 1— ( 一 D—ガラクトピラノシルォキシ）一 2一へキサコサノィルァミノ― 3 , 4—ォク夕デカンジォールである、請求項 1〜 6のいずれか 1項に記載の薬剤。