WO2003099752A1

WO2003099752A1 - Analogues de gingerol et leur utilisation

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Publication number: WO2003099752A1
Application number: PCT/JP2003/006470
Authority: WO
Inventors: Hisatoyo Kato; Shuhei Yamaguchi
Original assignee: Toagosei Co., Ltd.
Priority date: 2002-05-27
Filing date: 2003-05-23
Publication date: 2003-12-04
Also published as: US20050171211A1; EP1510511A4; EP1510511A1

Description

明細書ジンゲロール類似化合物およびその用途技術分野

本発明は、食品、医薬品、医薬部外品および化粧品等の分野で有用な天然のジンゲロールと類似の化学構造を有する新規な化合物（以下ジンゲロール類似化合物という）およびその用途に関するものである。本発明のジンゲロール類似化合物は、チロシナーゼ活性阻害剤および抗酸化剤として優れた性能を有しており、前記食品、医薬品または化粧品等に添加することができる。背景技術

しみ、そばかすなどは、紫外線の暴露などに起因して人の表皮の色素細胞内に形成されたメラニン色素が異常沈着することにより発生する。メラニン色素は、

7ミノ酸の一種である Lーチロシンが酸化酵素であるチロシナ一ゼによって L— ドーパおよび L一ド一パキノンへと代謝された後、さらに各種の過程を経ることによる合成される（参考文献：ファインケミカル誌、 1 9 9 9年 3月 1 5日号、特集美白剤の開発と製品展開、および、フレグランスジャーナル誌、 1 9 9 7 年 9月号、特集最近の美白剤の研究開発動向）。したがって、しみ、そばかすの予防のためには、チロシナ一ゼの活性を阻害することが有効である。

他方近年、活性酸素が様々な疾病を引き起こすことが明らかになってきている。活性酸素は生体の免疫機構の中で生成し、外部から侵入した病原菌などを攻撃する働きをもっているのであるが、それが過剰に生成してしまう場合には、生体を構成する脂質、タンパク質および DNA等と反応し、生体に悪影響を及ぼす。生体膜等を構成する不飽和脂肪酸は特に酸化され易く、酸化により過酸化脂質を生成する。この過酸化脂質は、動脈硬化、高血圧症および肝機能障害などを誘起することが知られている。また、食品、医薬品、化粧品等には、通常不飽和脂肪酸が含まれているが、それが酸化されて過酸化脂質を生成すると前記製品の品質が低下する。

上記の問題を解決するための手段として、抗酸化剤の使用がある。食品、医薬品、医薬部外品および化粧品等の分野で使用する抗酸化剤としては、人体への毒性が少ない天然抗酸化剤が好ましい。具体的な天然抗酸化剤としては、トコフエロール類、ァスコルビン酸およびその誘導体、ュビキノンおよびその誘導体、フラボン誘導体、没食子酸誘導体、ポリフエノール類等が挙げられる（福沢健治、「フリーラジカル防御の薬理学と薬物開発の展望」、日本臨床、 1 9 8 8年 1 0月、 4 6巻、 1 0号、 p . 2 2 6 9 - 2 2 7 6 , および

Sies, H.、外 2名、「 Antioxidant Functions of VitaminsJ、 Annals New York Academy o£ Sciences^ 1 9 9 2年、 6 6 9卷、 p . 7— 2 0 )。

本発明は、食品、医薬品、医薬部外品、化粧品等の製品中に添加され、チロシナーゼ活性阻害剤または抗酸化剤として作用する化合物を提供することを目的とする。発明の開示本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討した結果、ジンゲロールに類似する化合物がチ口シナーゼ活性阻害性および抗酸化性を有することを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明における第一発明は、下記一般式（1) で表わされるジンゲロ

—ル類似化合物である。

(式（1) 中、 R¹は炭素数 1〜18のアルキル基であり、 R ²は水素原子またはメチル基であり、 R ³はメチル基またはェチル基であり、また Aは炭素数 1~4 のアルキレン基である。）

第二発明は、下記一般式（2) で表わされるジンゲロール類似化合物である。

(式（2) 中、 R¹は炭素数 1〜 18のアルキル基であり、 R ²は水素原子またはメチル基であり、 R ³はメチル基またはェチル基であり、また Aは炭素数 1〜4 のアルキレン基である。）

第三発明は、前記一般式（1) または（2) で表わされるジンゲロール類似化合物からなるチロシナーゼ活性阻害剤である。

第四発明は、前記一般式（1) または（2) で表わされるジンゲロール類似化合物からなる抗酸化剤である。以下、本発明についてさらに詳しく説明する。第一発明のジンゲロール類似化合物を表わす前記一般式（1) における R¹は、炭素数 1 ~ 1 8の分岐を有してもよいアルキル基であり、メチル基、ェチル基、プロピル基、ブチル基、イソプチル基、ペンチル基、へキシル基、ぺプチル基、ォクチル基、 2—ェチルへキシル基、ノニル基、デシル基、ラウリル基、ステアリル基などが例示できる。 R¹ としては、直鎖アルキル基が好ましく、さらに天然界に存在するジンゲロールの構造を考慮すると、 R¹の炭素数は偶数であることが好ましい。ェチル基、プチル基、へキシル基、ォクチル基、デシル基が特に好ましい。

一般式（1) において、 R²は水素原子またはメチル基であり、好ましくはメチル基である。

一般式（1) において、 R³はメチル基またはェチル基であり、好ましくはメチル基である。

一般式（1) において、 Aは炭素数 1〜4のアルキレン基であり、好ましくはエチレン基またはブチレン基であり、さらに好ましくはエチレン基である。

一般式（1) で表わされるジンゲロール類似化合物の一例は、例えば化学合成または天然由来の一般式（3) で表わされる化合物にメタノールまたはエタノールを付加させることにより、容易に合成することができる。

(3)

式（3) 中の R¹は、式（1) 中の R¹に対応し、 R²および R⁴はそれぞれ独立に水素原子、低級アルキル基またはフエノール性水酸基の保護基である。ただし、 R ²および R ⁴がの少なくとも一方は水素原子またはフエノール性水酸基の保護基である。

一般式（3) の R ²およびまたは R⁴がフエノール性水酸基の保護基であるときは、当該保護基の導入および脱離が容易である点で、シリル型保護基およびァシル型保護基等が好ましい。具体的には、トリメチルシリル基、 t一プチルジメチルシリル基、ァセチル基、プロピオニル基、プチロイル基、イソプチロイル基、ピパロイル基、ベンゾィル基、トルオイル基等が挙げられ、さらに好ましくは、ァセチル基、プロピオニル基、ブチロイル基、イソブチロイル基、ピパロイル基、ベンゾィル基およびトルオイル基である。一般式（3) で表わされる化合物へのメタノールまたはエタノールの付加反応は、アルカリ触媒の存在下に行うのが好ましく、アルカリ触媒としては、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、ナトリウムメトキシドまたはナトリウムエトキシド等の金属アルコキシド、水素化ナトリゥム等が挙げられる。使用する触媒量は、一般式（3) における R²および R⁴の構造および触媒の種類により異なるが、 0. 0 5から 1 0化学当量、好ましくは、 0. 1から 5化学当量である。触媒の使用量が少な過ぎると反応の進行が遅く、多すぎる場合は反応後に多量の中和剤が必要となる。

付加反応は溶媒中で行っても良く、溶媒としては、テトラヒドロフラン、 1， 4一ジォキサン、ジェチルェ一テル、 1， 2ージメトキシエタン、 N， N—ジメチルホルムアミド、へキサメチルホスホリックトリアミド、 N, N—ジメチルプロピレンゥレア、イソプロピルアルコール、水およびこれらの混合溶媒等を好適に使用することができる。

反応温度は、 — 2 0 〜 1 0 O が好ましく、さらに好ましくは 0°C~80°C である。反応温度が低すぎる場合は反応の進行が遅く、また反応温度が高すぎる場合は副反応が進行する。反応時間は数 1 0分〜数時間が適当である。

反応終了後は、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィーなどの公知の方法により、一般式（1) で表わされるジンゲロール類似化合物を得ることができる。一般式（3)で表わされる化合物 [以下式（3)化合物という] は、下記式（4) で表わされる化合物 [以下式（4) 化合物という] と下記式（5) で表わされる化合物 [以下式（5) 化合物という] とを原料として下記式（6) で表わされる化合物 [以下式（6) 化合物という] を合成し、さらに式（6) 化合物から HX を脱離させることにより合成できる。式（4) 中の R¹は炭素数 1〜1 8のアルキル基であり、また Xはベンゼンスルホニル基またはトルエンスルホニル基である。

式（5) 中の R²および R⁴は、前記式（3) における R²および R⁴そに対応し, また Aは炭素数 1〜4のアルキレン基である。

式（6) 中の R²および R⁴は、前記式（3) における R²および R⁴そに対応し、また Aは炭素数 1〜4のアルキレン基である。 R ¹は炭素数 1〜 1 8のアルキル基であり、また Xはベンゼンスルホニル基またはトルエンスルホニル基である。式（4) 化合物は、 K. I n oma t a, e t a 1., C h em. L e t t., 93 1 ( 1 98 5 ) 等の文献に記載の合成方法により、合成することができる。また、式（ 5 ) 化合物は、 G. S o l l a d i e, e t a 1 J. Or g. Ch em. , 58， 2 1 8 1 ( 1 993) 等の文献に記載の合成方法により、合成することができる。

式（5) における好ましい Aは、エチレン基またはプチレン基であり、更に好ましくはエチレン基である。式（6) 化合物は、式（4) 化合物にアルキル金属化合物を作用させた後、さらに式（5) 化合物を反応させることにより、合成することができる。すなわち、アルキル金属化合物が式（4) 化合物を攻撃し、置換基一 Xが結合している炭素から水素原子を引き抜くことにより、式（4) 化合物に基づく炭素ァニオンが生成する。その後、反応系に式（5) 化合物を添加すると、前記炭素ァニオンが、式（4) 化合物中のアルデヒド基と反応して、式（6) が合成できる。

式（4) 化合物から水素原子を引き抜く反応において使用されるアルキル金属化合物としては、 n—プチルリチウム、 s—ブチルリチウム、 t一プチルリチウム、フエニルリチウム等のアルキルリチウム化合物、 n—ブチルマグネシウムク口リド、 s—ブチルマグネシウムクロリド、 t一ブチルマグネシウムクロリド、 n—ブチルマグネシウムブロミド、 s—ブチルマグネシウムブロミド、 t—ブチルマグネシウムブロミド等のグリニャール化合物等が挙げられる。好ましくは、 n -ブチルリチウム、 n—ブチルマグネシゥムクロリドまたは n。—ブチルマグネ

4 シゥムブロミドである。

また、上記アルキル金属化合物に代えて、金属リチウム、金属ナトリウム等のアル力リ金属類を使用してもよい。

アルキル金属化合物の好ましい使用量は、一般式（4) で表わされる化合物に対し、 0. 7〜1. 3化学当量であり、さらに好ましくは、 0. 9〜1. 1化学当量である。

式（4) 化合物と上記アルキル金属化合物との反応は、非プロトン性の溶媒中で行うことが好ましく、テトラヒドロフラン、 1， 4—ジォキサン、ジェチルェ一テル、 1, 2—ジメトキシェタン、へキサメチルホスホリックトリアミド、 N， N—ジメチルプロピレンゥレアおよびこれらの混合溶媒等を好適に使用することができる。

式（4) 化合物と上記アルキル金属化合物との反応における反応温度は、一 1 0 0で〜 2 5 °Cが好ましく、より好ましくは一 80°C~0°Cである。反応温度が低すぎる場合は温度維持にコストがかかり、また、反応温度が高すぎる場合は副反応が進行する。反応時間は数分〜数 1 0分が適当である。

次いで、式（4) 化合物とアルキル金属化合物とを反応させて得られる反応液に、式（5) 化合物を添加する。この際の反応液の温度としては、一 100 〜 2 5 °Cが好ましい。反応時間は通常数分〜数 1 0分である。

反応終了後は、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィーなどの公知の方法により、式（6) 化合物を単離精製することができる。式（3) 化合物は、前記のとおり、式（6) 化合物から HXを脱離させることにより合成することができる。すなわち、式（6) 化合物におけるエチレン性不飽和結合と後記する金属触媒を反応させて、 7C—ァリル錯体を形成した後、得られる 7t—ァリル錯体と塩基性化合物を反応させることにより、式（3) 化合物を合成することができる。

金属触媒としては、式（6) 化合物におけるエチレン性不飽和結合と π—ァリル錯体を形成するものが使用でき、パラジウム錯体を好適に使用することができ、具体的には、テトラキストリフエニルホスフィンパラジウム（0価）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（0価）クロ口ホルム付加物、塩化パラジゥム（2価） Ζトリフエニルホスフィン混合物、酢酸パラジウム（2価） Ζトリブチルホスフィン混合物などが挙げられる。括弧内は、各化合物における金属パラジウムの価数である。

金属触媒の好ましい使用量は、式（6) 化合物 1 mo 1あたり 0. 000 1〜 lmo lであり、さらに好ましくは 0. 00 1〜0. lmo lである。

上記塩基性化合物としては、トリェチルァミン、ジイソプロピルエヂルァミン、 N—メチルイミダゾ一ル、ピリジンなどの第三級ァミン類が好適であり、使用量は式（6) 化合物 1 mo 1に対して 0. 9 mo 1以上であり、 1. Omo lから 1 Omo 1の範囲が好適である。また、かかる塩基性化合物を溶媒として使用しても良い。

上記反応は溶媒の存在下で実施することが好ましく、テトラヒドロフラン、 1， 4一ジォキサン、ジェチルェ一テル、 1， 2—ジメトキシェタン、ァセトニトリレ、クロ口ホルム、ジクロロメタン、 1， 2—ジクロロェタン、へキサメチルホスホリックトリアミド、 N , N—ジメチルプロピレンゥレア、メタノール、エタノール、ィソプロピルアルコール、エチレンダリコール、グリセリンおよびこれらの混合溶媒等を使用することができ、中でも 1， 2—ジクロロェタンとアルコール類との混合物が好適である。

反応温度は室温〜 1 5 0 °Cが好ましく、さらに好ましくは 5 0〜 1 2 0 °Cである。反応時間としては数時間〜数 1 0時間が適当である。

反応終了後は、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィーなどの公知の方法により、一般式（3 ) 化合物を得ることができる。次に、一般式（2 ) で表わされるジンゲジオール類似化合物について説明する。一般式（2 )で表わされるジンゲジオール類似化合物は、例えば前記一般式（ 1 ) で表わされる化合物のカルボ二ル基を還元することにより合成できる。

かかる還元反応において使用し得る還元剤としては、特に限定されるものではないが、水素化リチウムアルミニウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ホウ素ナトリゥムなどの水素化金属類を好適に使用することができる。水素化金属類を用いる場合の好適な使用量は、水素化金属類の種類および一般式（1 ) における R ²の構造により異なる。一般式（1 ) における R ²がメチル基であり、かつ還元剤として水素化リチウムアルミニウムを用いる場合は、一般式（1 ) で表わされる化合物 1モルに対して、水素化リチウムアルミニウム 0 . 5〜 3モルが好適である。

反応は溶媒を用いても良く、テトラヒドロフラン、 1 , 4—ジォキサン、ジェチルエーテル、 1 , 2—ジメトキシェタン、ジグライムおよびこれらの混合溶媒等を好適に使用することができる。

還元剤として水素化金属類を使用する場合の反応温度としては、一 3 0で〜 1 0 0でが好ましく、反応時間は通常数分〜数 1 0分である。反応終了後は、溶媒抽出、カラムクロマトグラフィーなどの公知の方法により、目的化合物を得ることができる。一般式（1 ) で表わされる化合物および一般式（2 ) で表わされる化合物に関しては、後記実施例において実験結果を示すとおり、 Lーチロシンの酸化酵素であるチロシナーゼの活性を阻害する性質があることが確認された。さらに、上記化合物はいずれもフエノール性水酸基を有しており、それによつて抗酸化剤としての性質も予想されたが、実験によりその性能が十分に高いことも確認できた。これらの化合物の具体的な用途としては、食品、医薬品、医薬部外品および化粧水、美容液、乳液、クリーム、パック等の化粧品等への配合が挙げられる。図面の簡単な説明

第 1図は、後記する実施例 5において行った、 Lード一パを基質とするチロシナ一ゼ活性の阻害性に関する試験結果を表わすものである。図中の Al、 A2、 Bl および； B2は、それぞれ以下のサンプルを表示しており、縦軸の数値の単位は％であり、それはチロシナーゼ活性阻害率の大きさを表わす。

Α1、 Α2··· 3ιη1の酵素反応液中に、実施例 1で得られた式（11) 化合物を 0.27 ^ モル（A1) または 0.54 モル（Α2) 添加したサンプル。 Bl、 B2-3mlの酵素反応液中に、標準化合物としてのアルブミンをモル (B1) または 0.54 モル（Β2) 添加したサンプル。発明を実施するための最良の形態

以下、合成例、実施例および比較例を挙げて本発明を具体的に説明する。なお、以下に示す各式において、 T sは ρ—トルエンスルホニル基を表わす。

合成例 1

下記式（7) 化合物および式（8) 化合物から、式（9) 化合物を合成した。式（ 7 ) 化合物；

)

式（9) 化合物；

さらに上記式（9) 化合物をパラジウム触媒存在下で、脱 T s化することにより、下記式（1 0) で表わされる化合物すなわち [6] -ショウガオールを合成した。

[6] 一ショウガオ一ル；

(1 0)

5 0m lのテトラヒドロフランに 3. 46 g (1 3. 7mmo 1 ) の式（ 7 ) 化合物を溶かし、ドライアイス Zアセトンで— 78°Cに冷却した。この溶液に、 1. 50Mの —プチルリチウム/ Λ—へキサン溶液 9. 1 0m l (1 3. 7 m mo 1 ) を滴下した。そして同温度で 20分間攪拌後、 50m lのテトラヒドロフランに 3. 49 g (1 3. Ommo 1 ) の式（8) 化合物を溶かした溶液を滴下した。滴下後、同温度で 1 0分間攪拌後、徐々に昇温した。反応溶液の温度が一 1 0°Cになったところで、メタノール 2m 1を加えて反応を停止させた。この反応混合物に飽和食塩水 3 Om 1を加えて攪拌後、有機層を分取した。水層を酢酸ェチル 3 Om lで抽出し、合せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。溶媒を留去し、シリカゲルカラムクロマトグラフィーによる精製を行い、淡黄色の高粘度液状の化合物 5. 79 g (収率 79 %) を得た。

本品の重クロ口ホルム中で測定した¹ H— NMRスぺクトルのケミカルシフト値は、 0. 72— 0. 89 (3 H， m)、 0. 98— 1. 24 (4 H, m)、 1. 52 - 2. 04 (4H, m)、 2. 45 (3H， s ), 2 82 - 2. 94 (2 H, m)、 3. 16 -3. 64 (1H， m)、 3. 79 (3H， s)、 4. 04-4. 6 5 (2 H, m)、 5. 03 - 5. 85 (2 H, m)、 6. 70— 6. 84 (2 H， m)、 6. 96 - 7. 05 ( 1 H, m)、 7. 32 (2H， d)、 7. 45-7. 7 5 ( 5 H, m)、 8. 20 (2 H, d) であった。

また、赤外線吸収スペクトル（KB rペレット法）で吸収があった波数（cm -¹) は、 3520， 2950, 2930, 2870, 1740, 1600, 15 10， 1450, 1280， 1260, 1200， 1 140, 1 120, 108 0, 1060， 1020， 710であった。

さらに、元素分析の結果は、炭素 69. 22 %、水素 6. 55 %であった。以上の分析により、得られた化合物が式（9) 化合物であることを確認した。

1, 2—ジクロロェタン 39 g、イソプロピルアルコール 13 gおよびグリセリン 13 gの混合溶媒に 1. 31 g (2. 51 mm o l) の式（9) 化合物を溶かし、これにトリェチルァミン 1. 05m l ( 7. 53 mm o 1 )、トリフエニルホスフィン 39. 5 mg (0. 151 mm o 1 )、およびテトラキストリフエニルホスフィンパラジウム 87. Omg ( 0. 0753 mmo 1 ) を加えてバス温 1 00でで 18時間攪拌した。つぎに、溶媒などを留去した後、蒸留水 50m l、飽和食塩水 20m 1および酢酸ェチル 50m 1を加えて分配し、有機層を分取した。この抽出後の水層を酢酸ェチル 20m 1で再抽出した。合せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、濃縮した。得られた反応混合物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製した後、酢酸ェチルと n—へキサン混合溶媒による再結晶を行い、無色結晶性の化合物 603 mg (収率 63 %) を得た。

本品の重クロ口ホルム中で測定した¹ H— NMRスぺクトルのケミカルシフ卜値は、 0. 9 1 ( 3 H, t)、 1. 25 - 1. 60 ( 6 H, m)、 2. 21 ( 2 H, q)、 2. 85 - 3. 00 (4 H, m)、 3. 82 (3H， s)、 6. 16 ( 1 H, d)、 6. 79 - 6. 94 (3H， m)、 7. 05 ( 1 H, d)、 7. 45 - 7. 6 8 (3H, m)、 8. 20 (2H， d) であった。

また、赤外線吸収スペクトル（KB rペレット法）で吸収があった波数（cm -¹) は、 2950, 2930, 2870, 1730， 1660, 1600, 15 10, 1470， 1450, 1420, 1270， 1200, 1 1 50， 106 0， 710であった。

さらに、 CHN元素分析の結果は、炭素 75. 56 %、水素 7. 70 %であつた。

以上の分析により、得られた化合物が上記式（10) で表わされる化合物であることを確認した。実施例 1

上述の合成例 1で得た式（10) で表わされる化合物に水酸化ナトリウムの存在下でメタノールを付加させるとともに、ベンゾィル基の除去を行い、本発明のジンゲロール類似化合物の 1例である下記式（11) 化合物を合成した。

式（ 1 1 ) 化合物；

(I D

式（10) で表わされる化合物 33 Omg (0. 867mmo 1) をイソプロピルアルコール 2m 1に溶解した後、メタノール 8m 1および 1 N水酸化ナ卜リゥム水溶液 0. 9m lを加え、室温で 2時間攪拌した後、 0. 5N塩酸 2mlを加えて反応を停止させた。反応液中のメタノールを留去した後、飽和食塩水 25 m lを加え、酢酸ェチル 25m 1で 2回抽出した。これらの酢酸ェチルを合わせ無水硫酸マグネシウムで乾燥後、濃縮した。この濃縮物をシリカゲル薄層クロマトグラフィ一により精製し、無色液状の化合物 19 lmg (71 %) を得た。本品の重クロ口ホルム中で測定した¹ H— NMRスぺクトルのケミカルシフト値は、 0. 89 ( 3 H, t)、 1. 20 - 1. 83 (8 H， m)、 2. 34-2. 89 (6H, m)、 3. 28 (3H, s)、 3. 57— 3. 70 ( 1 H, m)、 3. 86 (3H， s)、 5. 49 (1H， s)、 6. 63— 6. 73 ( 2 H， m)、 6. 81 ( 1 H， d) であった。

また、赤外線吸収スペクトル（KB rペレット法）で吸収があった波数（cm ^_1) は、 3400， 2930, 2860, 1710, 1600, 1510, 14 60， 1450, 1430, 1370, 1270, 1230, 1090, 103 0であった。

さらに、元素分析の結果は、炭素 69. 80 %、水素 8. 98%であった。以上の分析により、得られた化合物が式（11) 化合物であることを確認した。実施例 2

実施例 1で得られた式（1 1) 化合物を還元して、下記式（12) で表わされるもう一つの種類のジンゲロール類似化合物を合成した。

式（12) 化合物；

式（11) 化合物 1 54mg (0. 5 Ommo 1 ) のテトラヒドロフラン 5m 1溶液を水素化リチウムアルミニウム 19. Omg (0. 5 Ommo 1) のテトラヒドロフラン lm 1溶液中に滴下し、室温で 16時間攪拌した。つぎに、蒸留水 5mし 0. 5 N塩酸 2m 1を滴下し、酢酸ェチル 1 Om 1で 3回抽出した。有機層を無水硫酸マグネシゥムで乾燥後、シリ力ゲル薄層クロマトグラフィーにより精製し、無色液状の化合物 146mg (94%) を得た。

本品の重クロ口ホルム中で測定した¹ H— NMRスぺクトルのケミカルシフト値は、 0. 89 (3H, t)、 1. 20 - 1. 87 (12 H, m)、 2. 52— 2. 81 (2H, m)、 3. 30— 3. 55 (4 H, m)、 3. 72 - 4. 00 (4 H, m)、 5. 55 (1H, s)、 6. 65 - 6. 75 (2 H, m)、 6. 81 ( 1 H， d) であった。また、赤外線吸収スペクトル（KB rペレット法）で吸収があつた波数（cm一¹) は、 3390, 2930, 2860, 1600， 1 51 0， 1 460, 1450, 1430, 1370, 270 230, 1 080， 1 0 3 0であった。

さらに、元素分析の結果は、炭素 69. 74%、水素 9. 47 %であった。以上の分析により、得られた化合物が式（] 2) 化合物であることを確認した。実施例 3

(過酸化脂質生成抑制試験）

実施例 1で得られた式（1 1) 化合物および実施例 2で橹られた式（1 2) 化合物を用いて、リノール酸における過酸化脂質生成抑制試験を行った。上記化合物とともに d 1— α—トコフエロール（東京化成工業製）についても、同様な試験を行い対照データを得た。

試験操作は以下のとおりである。試験結果として、下記操作（3) によるリノール酸残存率を表 1に記載した。

( 1) 50m 1のスクリユーバイアルに取ったリノール酸（0. 2 g、東京化成工業製）、試験用化合物（0. 0 1 g)、および界面活性剤ニッサン OT— 22 1

(0. 4 g、日本油脂（株）製）にエタノール（2. 0 g) を添加して溶解させた後、蒸留水（1 7. 39 g) を加え攪拌し、密栓をして 40°Cの恒温槽に放置した。これを 2偭調製した。

なお、試験用化合物を添加しないブランク試験も同様に行った。

(2) 試験開始から 1週間後、 2週間後、 3週間後、および 4週間後のリノール酸残量を HP L Cにより定量した。

HP LCの分析条件は、検出波長： 2 1 0 nm、移動相： pH2. 5に調整したリン酸水素ニナトリウム一リン酸緩衝液とメタノールとの混合溶液（1 0 : 9 0 )、流速： 1m l /m i n、カラム： ODS— 80 T s (4. 6 mm X 1 50 mm)、カラム温度 4 OT:の条件にて実施した。

(3) HP L Cでの定量はそれぞれの試料について 2回ずつ行い、計 4回の測定値の平均値からリノール酸残存率を算出した。この結果を表 1に示した。表 1

(単位； %)

実施例 4

(DPPHラジカル消去試験）

ラジカル消去活性については、安定ラジカルである D P P H (1,1-diphenyl- 2-picryl ydrazyl) を用いて、試験用化合物 [式（1 1) 化合物、式（1 2) 化合物および対比試料として d 1— α—トコフエロール（東京化成工業製）] についてラジカル消去活性を測定した。測定方法は以下のとおりである。なお、以下にトリスとあるのは、トリスヒドロキシメチレアミノメタン [tris(hydoroxymethyl)aminomethane] の略称であり、 Mは濃度の単位 Mol/L を表わす。

1 0 OmMトリスー塩酸緩衝液（pH= 7. 4) 800 1と試験用化合物のエタノール溶液 200 1 (最終濃度 1 0 g mL) に 2 00 Mの DPPH エタノール溶液 lm 1を添加し良く攪拌した。これを室温、暗所にて 2 0分間静置した後、 5 1 7 nmの吸光度を測定した（試料溶液の吸光度）。

他方、 1 0 OmMトリスー塩酸緩衝液（pH= 7. 4) 8 00 しェタノ一ル 2 00 1および 200； Μの DP PHエタノール溶液 lm 1を用いて上記と同様に操作し、吸光度を測定することにより、ブランクの吸光度を得た。

各試験用化合物の場合およびブランクについて、それぞれ 3回同様な操作を繰返し、得られた吸光度の平均値を以下の式に代入し、 DPPHラジカル消去率を算出した。

DP PHラジカル消去率（％) =

{ 1 - (試料溶液の吸光度/ブランク液の吸光度） } X I 00 その結果は以下のとおりであり、式（1 1) 化合物および式（1 2) 化合物は、 d 1 - α -トコフエロール以上のラジカル捕捉能を有することが分かった。

式（ 1 1 ) 化合物の D Ρ ΡΗラジカル消去率 3 5. 1 % 式（ 1 2) 化合物の D Ρ ΡΗラジカル消去率 40. 0 % d 1— α—トコフエロールの DP ΡΗラジカル消去率 2 6. 7 % 実施例 5

実施例 1で得られた式（1 1) 化合物を用いて、 L—ドーパを基質としたチロシナーゼ活性阻害試験を行った。アルブチン（東京化成工業製）についても同様な試験を行い、対比データとした。試験操作は以下のとおりである。試験結果は、図 1のとおりである。

(1) リン酸二水素ナトリウム 1. 000 gおよびリン酸水素ニナトリウム 1.

186 gを蒸留水 50 Om 1に溶解したリン酸緩衝液 1. 80m l、 L—ド一パ 32. 7mgを蒸留水 20 Om 1に溶解した基質液 1. 00mしおよび、試験用化合物すなわち式（10)化合物をジメチルスルホキシドに溶解した試験液 0. 10m lを混合した。試験用化合物の使用量は、下記操作（2) で得られる酵素反応液 3 ml中に試験用化合物が 0. 27 モルまたは 0. 54 //モル含まれるような量とした。

(2) マッシュルームチロシナ一ゼ 3. Omg (2400ュニット、シグマ社製）を蒸留水 7. Om 1に溶解した酵素液 0. 1 Om 1を（1) で調製した溶液に加えて、 1 5秒間攪拌した。得られた溶液を 2 5°Cで保持し、 1分 45秒後および 2 分 45秒間後の 47 5 nmでの吸光度を測定した。

(3) 上記（1) (2) の試験操作を各試験用化合物およびブランク試験（ジメチルスルホキシドのみ）について 3回行い、得られた平均値を下記計算式に代入して、チロシナーゼ活性阻害率（％) を求めた。

チロシナーゼ活性阻害率（％) = [(T¹— T²) /T¹ ] X 1 00

T¹ = ブランク液の 2分 45秒間後と 1分 45秒後の吸光度の差

T² = 試験用化合物を加えた溶液の 2分 45秒間後と 1分 45秒後の吸光度の差

図 1から式（1 1 ) 化合物は、既存のチロシナーゼ活性阻害剤であるアルプチン以上の性能を有することがわかった。産業上の利用可能性

本発明のジンゲロール類似化合物は、良好なチ口シナーゼ活性阻害性および抗酸化性を有しており、食品、医薬品、医薬部外品および化粧水、美容液、乳液、クリーム、パック等の化粧品等へ配合することができる。

Claims

請求の範囲 . 下記一般式（1) で表わされるジンゲロール類似化合物,

(式（1) 中、 R¹は炭素数 1〜18のアルキル基であり、 R²は水素原子またはメチル基であり、 R ³はメチル基またはェチル基であり、また Aは炭素数 1〜4 のアルキレン基である。）

2. 下記一般式（2) で表わされるジンゲロール類似化合物。

(式（2) 中、 R¹は炭素数 1〜18のアルキル基であり、 R ²は水素原子またはメチル基であり、 R ³はメチル基またはェチル基であり、また Aは炭素数 1~4 のアルキレン基である。）

3. 請求項 1または 2記載のジンゲロール類似化合物からなるチロシナーゼ活性阻害剤。

4. 請求項 1または 2記載のジンゲロール類似化合物からなる抗酸化剤。