WO1993005808A1 - Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung - Google Patents

Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung Download PDF

Info

Publication number
WO1993005808A1
WO1993005808A1 PCT/DE1992/000778 DE9200778W WO9305808A1 WO 1993005808 A1 WO1993005808 A1 WO 1993005808A1 DE 9200778 W DE9200778 W DE 9200778W WO 9305808 A1 WO9305808 A1 WO 9305808A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
bone
composition according
growth factors
growth
biologically active
Prior art date
Application number
PCT/DE1992/000778
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
David J. Baylink
Rolf Ewers
Axel Kirsch
Original Assignee
Baylink David J
Rolf Ewers
Axel Kirsch
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Baylink David J, Rolf Ewers, Axel Kirsch filed Critical Baylink David J
Priority to AT92919963T priority Critical patent/ATE189400T1/de
Priority to EP92919963A priority patent/EP0558727B1/de
Priority to JP5505690A priority patent/JPH06503357A/ja
Priority to DE59209809T priority patent/DE59209809D1/de
Publication of WO1993005808A1 publication Critical patent/WO1993005808A1/de

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/28—Bones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/16—Fluorine compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/001—Use of materials characterised by their function or physical properties
    • A61L24/0015—Medicaments; Biocides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/043—Mixtures of macromolecular materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L24/00—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices
    • A61L24/04—Surgical adhesives or cements; Adhesives for colostomy devices containing macromolecular materials
    • A61L24/10—Polypeptides; Proteins
    • A61L24/106—Fibrin; Fibrinogen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/22—Polypeptides or derivatives thereof, e.g. degradation products
    • A61L27/227—Other specific proteins or polypeptides not covered by A61L27/222, A61L27/225 or A61L27/24
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/14—Macromolecular materials
    • A61L27/26—Mixtures of macromolecular compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L27/00—Materials for grafts or prostheses or for coating grafts or prostheses
    • A61L27/50—Materials characterised by their function or physical properties, e.g. injectable or lubricating compositions, shape-memory materials, surface modified materials
    • A61L27/54—Biologically active materials, e.g. therapeutic substances
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/28—Bones
    • A61F2002/2817—Bone stimulation by chemical reactions or by osteogenic or biological products for enhancing ossification, e.g. by bone morphogenetic or morphogenic proteins [BMP] or by transforming growth factors [TGF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2/00—Filters implantable into blood vessels; Prostheses, i.e. artificial substitutes or replacements for parts of the body; Appliances for connecting them with the body; Devices providing patency to, or preventing collapsing of, tubular structures of the body, e.g. stents
    • A61F2/02—Prostheses implantable into the body
    • A61F2/30—Joints
    • A61F2002/30001—Additional features of subject-matter classified in A61F2/28, A61F2/30 and subgroups thereof
    • A61F2002/30667—Features concerning an interaction with the environment or a particular use of the prosthesis
    • A61F2002/30677—Means for introducing or releasing pharmaceutical products, e.g. antibiotics, into the body
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61F—FILTERS IMPLANTABLE INTO BLOOD VESSELS; PROSTHESES; DEVICES PROVIDING PATENCY TO, OR PREVENTING COLLAPSING OF, TUBULAR STRUCTURES OF THE BODY, e.g. STENTS; ORTHOPAEDIC, NURSING OR CONTRACEPTIVE DEVICES; FOMENTATION; TREATMENT OR PROTECTION OF EYES OR EARS; BANDAGES, DRESSINGS OR ABSORBENT PADS; FIRST-AID KITS
    • A61F2310/00—Prostheses classified in A61F2/28 or A61F2/30 - A61F2/44 being constructed from or coated with a particular material
    • A61F2310/00005—The prosthesis being constructed from a particular material
    • A61F2310/00341—Coral, e.g. aragonite, porite
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2300/00—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices
    • A61L2300/10—Biologically active materials used in bandages, wound dressings, absorbent pads or medical devices containing or releasing inorganic materials
    • A61L2300/106—Halogens or compounds thereof, e.g. iodine, chlorite
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2430/00—Materials or treatment for tissue regeneration
    • A61L2430/02—Materials or treatment for tissue regeneration for reconstruction of bones; weight-bearing implants

Definitions

  • the invention relates to a bone growth-promoting composition, in particular for use in 'the treatment of bone diseases.
  • Vertebrate bone formation is a dynamic process that involves ongoing bone production and resorption. Bone healing requires the multiplication of new osteoblasts, which in turn differentiate and synthesize the bone matrix. Autologous bone grafting material is normally used for bone defects. The disadvantage of this approach is that autologous bone material cannot accelerate healing as quickly as would be desirable and that in some cases autologous bone material is not available.
  • fluoride which has been shown to stimulate bone formation in vivo by a direct mitogenic effect on bone cells.
  • the bone mineral density of the axial skeleton of patients treated with fluoride increases, as does the serum level of alkaline phosphatase, an index of bone formation in the skeleton.
  • Significant increases in spinal bone density can be observed after approximately 12-18 months of fluoride therapy.
  • fluoride treatment is not equally effective in all patients, as some patients react very weakly to fluoride and others do not at all.
  • this object is achieved in the case of a composition which promotes bone growth by containing at least one substance from the group consisting of the growth factors FGF, TGF- ⁇ , IGF-II, PDGF and biologically active mutants and fragments thereof, and at least one salt the group consisting of physiologically compatible vanadates, molybdates and fluorides, with the exception of the combination of IGF-II and fluoride.
  • the composition contains in combination at least two growth factors, most preferably three, one of which or several are optionally replaced by a biologically active mutant or a corresponding fragment.
  • the combination of two or more growth factors (or corresponding mutants or fragments thereof) not only has an additive effect on the multiplication and differentiation of bone cells, but also creates a surprisingly noticeable synergism.
  • the cation associated with the vanadate, molybdate, or fluoride ion is selected from the group consisting of sodium, potassium, calcium, magnesium and ammonium, which are physiologically particularly acceptable cations.
  • the growth factor for use in a composition according to the present invention can be made by a number of different techniques.
  • the present invention proposes that at least one of the growth factors be derived from natural, preferably human, bone material, such as e.g. for IGF-II by Mojein et al., Biochem. Biophys. Akta 884, 234 (1986).
  • the growth factors can also be isolated from bone cells grown in culture.
  • the second way to obtain the growth factors is to isolate them from serum, including human, bovine, spicy, pig, or horse serum, using conventional techniques.
  • the third (and possibly ultimately the preferred) method of production involves recombinant DNA techniques, ie the extraction of the growth factors or biologically active mutants or fragments thereof as recombinant Connection from a genetic engineering process.
  • recombinant DNA techniques ie the extraction of the growth factors or biologically active mutants or fragments thereof as recombinant Connection from a genetic engineering process.
  • composition according to the invention can also be characterized by a content of a mitogenic bone extract.
  • a content of a mitogenic bone extract is possible using conventional techniques.
  • the present invention also relates to the use of the composition according to the invention for the treatment of bone diseases.
  • the composition of the invention promotes the action of growth factors, which 'leads to proliferation and differentiation of bone cells. These new bone cells then achieve the goal of either quickly filling up bone defects or promoting the healing of, for example, irregular fractures; the composition according to the invention also proves to be particularly effective in the treatment of other bone diseases, such as osteoporosis.
  • TGF-ß or IGF-II
  • vanadate also increase and differentiate human bone cells
  • Extracts were based on protein and activity of alkaline
  • TGF-ß (and IGF-II) increases the effect of vanadate on the growth of human bone cells.

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Materials For Medical Uses (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)

Abstract

Knochenwachstumsfördernde Zusammensetzung, mit einem Gehalt an wenigstens einer Substanz aus der Gruppe, die aus den Wachstumsfaktoren FGF, TGF-β, IGF-II, PDGF und biologisch aktiven Mutanten und Fragmenten derselben besteht, sowie wenigstens einem Salz aus der Gruppe, die aus physiologisch verträglichen Vanadaten, Molybdaten und Fluoriden besteht, ausgenommen die Kombination aus IGF-II und Fluorid, sowie Verwendung derselben.

Description

Snochenwachstums ordernde Zusammensetz- g
Die Erfindung betrifft eine knochenwachstumsfördernde Zusammensetzung, insbesondere zur Verwendung bei' der Behandlung von Knochenerkrankungen.
Die Knochenbildung bei Wirbeltieren ist ein dynamischer Prozeß, der die fortlaufende Knochenproduktion und Knochenresorption umfaßt. Knochenheilung erfordert die Vermehrung neuer Osteoblasten, die sich ihrerseits differenzieren und Knochenmatrix synthetisieren. Bei Knochendefekten verwendet man normalerweise autologes Knochen-Pfropfmaterial. Der Nachteil dieses Ansatzes liegt darin, daß autologes Knochenmaterial die Heilung nicht so schnell beschleunigen kann, wie es erwünscht wäre, und daß in einigen Fällen autologes Knochenmaterial nicht verfügbar ist.
Unter den pharmazeutischen Zusammensetzungen, die verwendet worden sind, um Knochenerkrankungen zu behandeln, findet sich Fluorid, von dem gezeigt worden ist, daß es die Knochenbildung in vivo durch einen direkten mitogenen Effekt auf Knochenzellen stimuliert. Die Dichte von Knochenmineral des axialen Skeletts von Patienten, die mit Fluorid behandelt worden sind, steigt an, ebenso wie der Serumspiegel an alkalischer Phosphatase, einem Index für Knochenbildung im Skelett. Signifikante Anstiege in der Dichte der Wirbelsäulenknochen können nach etwa 12-18 Monaten Fluorid-Therapie beobachtet werden. Die Fluorid- Behandlung ist jedoch nicht bei allen Patienten gleich wirksam, da einige Patienten nur sehr schwach auf Fluorid reagieren und andere überhaupt nicht.
Zusätzlich zur Fluorid-Behandlung gibt es eine Anzahl anderer Techniken, die für den Zuwachs von Knochenmasse vorgeschlagen worden sind, einschließlich der Verwendung von 1,25-Dihydroxy-Vitamin E und anderen Wachstumsfördernden Substanzen, aber diese Behandlungen haben teilweise nur sehr uiibestimmte Erfolge gezeigt.
Die europäische Patentanmeldung 0 289 314 offenbart die Verwendung von IGF-II bei der Behandlung von Knochenstörungen- Außerdem ist offenbart, daß die Kombination von IGF-II und Fluorid-Ionen eine unerwartet verstärkte Wirkung auf die Vermehrung der Knochenzellen bewirkt, wobei das Fluorid-Ion die die Osteoblasten stimulierende Wirkung von IFG-II verstärkt. Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine neue Zusammensetzung zur Verfügung zu stellen, die zu einer erhöhten Vermehrung und Differenzierung von Knochenzellen führt.
Erfindungsgemäß wird diese Aufgabe bei einer knochenwachs- tumsfördernden Zusammensetzung durch einen Gehalt an wenigstens einer Substanz aus der Gruppe, die aus den Wachstumsfaktoren FGF, TGF-ß, IGF-II, PDGF und biologisch aktiven Mutanten und Fragmenten derselben besteht, sowie wenigstens einem Salz aus der Gruppe, die aus physiologisch verträglichen Vanadaten, Molybdaten und Fluoriden besteht, ausgenommen die Kombination aus IGF-II und Fluorid.. Zu unserer eigenen Überraschung konnte gezeigt werden, daß nicht nur die Kombination aus IGF-II und Fluorid bei der Steigerung der Vermehrung von Knochenzellen wirksam ist, sondern daß jede der vorgenannten Kombinationen aus wenigstens einem der genannten Wachstumsfaktoren (oder einem biologisch aktiven Mutanten oder Fragment derselben) und wenigstens einem der genannten Salze in dieser Hinsicht in wenigstens vergleichbarem Maße wirksam ist.
In einem ersten Versuch, diese Befunde zu erklären, vermuten wir, daß die Verstärkungswirkung von Fluorid-, Vanadat-, oder Molybdatverbindungen auf ihrer hemmenden Wirkung auf Phosphotyrosylproteinphosphatase beruht. Dieses Enzym bewirkt die Dephosphorylierung von Phosphoproteinen, induziert von mitogenen Signalen, wodurch diese mitogenen Signale inaktiviert werden. Durch Hemmen dieser De¬ phosphorylierung verstärkt man dann das mitogene Signal, das vom Wachstumsfaktor erzeugt wird.
In einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung enthält die Zusammensetzung in Kombination wenigstens zwei Wachs¬ tumsfaktoren, am bevorzugtesten drei, von denen einer oder mehrere fakultativ durch eine biologisch aktive Mutante oder ein entsprechendes Fragment ersetzt sind. Für diese Kombinationen konnte gezeigt werden, daß die Kombination von zwei oder mehr Wachstumsfaktoren (oder entsprechender Mutanten oder Fragmente derselben) nicht nur eine additive Wirkung auf die Vermehrung und Differenzierung von Knochenzellen hat, sondern einen überraschend merkbaren Synergismus schafft.
Vorzugsweise ist das mit dem Vanadat-, Molybdat-, oder Fluorid-Ion verknüpfte Kation aus der Gruppe ausgewählt, die aus Natrium, Kalium, Calcium, Magnesium und Ammonium besteht, die physiologisch besonders akzeptable Kationen darstellen.
Der Wachstumsfaktor zur Verwendung in einer Zusammensetzung nach der vorliegenden Erfindung kann mit einer-Anzahl verschiedener Techniken hergestellt werden.
Erstens schlägt die vorliegenden Erfindung vor, daß wenigstens einer der Wachstumsfaktoren aus natürlichem, vorzugsweise menschlichem Knochenmaterial gewonnen ist, wie z.B. für IGF-II von Mojein et al., Biochem. Biophys. Akta 884, 234 (1986) beschrieben. Alternativ dazu können die Wachs umsfaktoren auch aus Knochenzellen isoliert werden, die in Kultur gezüchtet sind.
Der zweite Weg für die Gewinnung der Wachstumsfaktoren ist die Isolierung aus Serum, einschließlich Human-, Rinder-, Scharfs-, Schweine- oder Pferdeserum, unter Verwendung herkömmlicher Techniken.
Die dritte (und möglicherweise letztendlich die bevorzugte) Herstellungmethode umfaßt jedoch rekombinante DNA-Techniken, d.h. die Gewinnung der Wachstumsfaktoren oder biologisch aktiven Mutanten oder Fragmente derselben als rekombinante Verbindung aus einem gentechnologischen Verfahren. Einige dieser Techniken sind zum Beispiel für IGF-II in obengenannter europäischer Patentanmeldung 0 289 314 beschrieben.
Schließlich kann die erfindungsgemäße Zusammensetzung noch durch einen Gehalt an einem mitogenen Knochenextrakt gekennzeichnet sein. Die Herstellung eines solchen wirksamen Knochenextrakts, der ein oder mehrere der genannten Wachstumsfaktoren enthält, ist unter Verwendung üblicher Techniken -möglich.
Die vorliegende Erfindung betrifft auch die Verwendung der erfindungsgemäßen Zusammensetzung für die Behandlung von Knochenerkrankungen. Die erfindungsgemäße Zusammensetzung fördert die Wirkung der Wachstumsfaktoren, was' zu einer Vermehrung und Differenzierung der Knochenzellen führt. Diese neue Knochenzellen verwirklichen dann das Ziel, entweder Knochendefekte schnell aufzufüllen oder das Heilen von z.B. unregelmäßigen Brüchen zu fördern, die erfindungsgemäße Zusammensetzung erweist sich dabei auch bei der Behandlung von anderen Knochenerkrankungen, wie Osteoporose als besonders wirkungsvoll.
Die Erfindung wird nun anhand der folgenden Beispiele noch weiter veranschaulicht.
BEISPIEL 1
Wirkung von TGF-ß (oder IGF-II) und Vanadat auch die Vermehrung und Differenzierung von menschlichen Knochenzellen
Menschliche Osteosarcomzellen, SaOs, wurden als Schicht auf DMEM aufgebracht, das 1% Kalbsserum enthält. Am folgenden Tag wurde das Medium gegen serumfreies DMEM ausgetauscht. Am nächsten Tag wurde die Faktoren zugesetzt (d.h. TGF-ß (oder
IGF-II) und Vanadat) . Nach 18 Stunden wurde eine Zellver-
3 mehrung durch Einbringen von H-Thymidin. festgestellt.
Parallele andere Platten wurden einmal mit PBS gespült und die Zellschicht mit 0,01% Triton X-100 extrahiert. Die
Extrakte wurden auf Protein und Aktivität von alkalischer
Phosphatase hin untersucht. Die Ergebnisse zeigen klar, daß
TGF-ß (und IGF-II) die Wirkung von Vanadat auf die Vermehrung von menschlichen Knochenzellen steigert.
BEISPIEL 2
Wirkung von FGF und Molybdat auf die Vermehrung und Differenzierung von menschlichen Knochenzellen
Die Vorgehensweise dieses Beispiels ist vergleichbar mit Beispiel 1, mit der Ausnahme, daß die entsprechenden anderen Faktoren zugesetzt werden. Wieder werden die Extrakte auf Protein und Aktivität von alkalischer Phosphatase untersucht. Auch bei FGF zeigt sich, daß die Wirkung von Molybdat auf die Vermehrung von menschlichen- Knochenzellen gesteigert wird.
BEISPIEL 3
Wirkung von PDGF und Fluorid auf die Vermehrung und Differen¬ zierung von menschlichen Knochenzellen
Die Vorgehensweise dieses Beispiels ist vergleichbar mit Beispiel 1, mit der Ausnahme, daß die entsprechenden anderen Faktoren zugesetzt werden. Auch hier werden die Extrakte wieder auf Protein und Aktivität von alkalischer Phosphatase hin untersucht. Auch PDGF steigert die Wirkung von Fluorid auf die Vermehrung von menschlichen Knochenzellen.
Die in der vorstehenden Beschreibung, sowie in den Ansprüchen offenbarten Merkmale der Erfindung können sowohl einzeln als auch in beliebiger Kombination für die Verwirklichung der Erfindung in ihren verschiedenen Ausfuhrungsformen wesentlichen sein.

Claims

Ansprüche
1. Knochenwachstumsfördernde Zusammensetzung, gekennzeichnet durch einen Gehalt an wenigstens einer Substanz aus der Gruppe, die aus den Wachstumsfaktoren FGF, TGF-ß, IGF-II, PDGF und biologisch aktiven Mutanten und Fragmenten derselben besteht, sowie wenigstens einem Salz aus der Gruppe, die aus physiologisch verträglichen Vanadaten, Molybdaten und Fluoriden besteht, ausgenommen die Kombination aus IGF-II und Fluorid.
2. Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß sie in Kombination wenigstens zwei Wachstumsfaktoren, enthält von denen einer oder beide fakultativ durch eine biologisch aktive Mutante oder ein entsprechendes Fragment ersetzt ist.
3. Zusammensetzung nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß sie in Kombination drei Wachstumsfaktoren enthält, von denen einer oder mehrere fakultativ durch eine biologisch aktive Mutante oder ein entsprechendes Fragment ersetzt sind.
4. Zusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, daß das mit dem Vanadat-, Molybdat- oder Fluorid-Ion verknüpfte Kation ausgewählt ist aus der Gruppe, die aus Natrium, Kalium, Calciu , Magnesium und Ammonium besteht.
5. Zusammensetzung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens einer der . Wachstumsfaktoren aus natürlichem Knochenmaterial gewonnen ist. ■
6. Zusammensetzung nach Anspruch 5, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens einer der Wachstumsfaktoren aus menschlichem Knochenmaterial gewonnen ist.
7. Zusammensetzung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens einer der Wachstumsfaktoren aus Serum, einschließlich Human-, Rinder-, Schafs-, Schweine- oder Pferdeserum, gewonnen ist.
8. Zusammensetzung nach einem der vorangehenden Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß wenigstens einer der Wachstums¬ faktoren bzw. eine (eines) von deren biologisch aktiven Mutanten oder Fragmenten als rekombinante Verbindung aus einem gentechnologischen Verfahren gewonnen ist.
9. Zusammensetzung nach einem der vorangehenden Ansprüche, gekennzeichnet durch einen Gehalt an einem mitogenen Knochenextrakt.
10. Verwendung einer Zusammensetzung nach einem der voran¬ gehenden Ansprüche, zur Behandlung von Knochenerkrankungen.
PCT/DE1992/000778 1990-01-12 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung WO1993005808A1 (de)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
AT92919963T ATE189400T1 (de) 1990-01-12 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung
EP92919963A EP0558727B1 (de) 1990-01-12 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung
JP5505690A JPH06503357A (ja) 1990-01-12 1992-09-09 骨の成長促進組成物
DE59209809T DE59209809D1 (de) 1991-09-13 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/464,225 US5071655A (en) 1990-01-12 1990-01-12 Pharmaceutical combination for treatment of bone-wasting diseases
DE4130545A DE4130545C2 (de) 1990-01-12 1991-09-13 Verwendung einer knochenwachstumsfördernden Zusammensetzung
DEP4130545.0 1991-09-13
DE4130546A DE4130546C2 (de) 1990-01-12 1991-09-13 Verwendung einer knochenwachstumsfördernden Zusammensetzung

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO1993005808A1 true WO1993005808A1 (de) 1993-04-01

Family

ID=39535589

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/DE1992/000778 WO1993005808A1 (de) 1990-01-12 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung
PCT/DE1992/000780 WO1993005823A1 (de) 1990-01-12 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/DE1992/000780 WO1993005823A1 (de) 1990-01-12 1992-09-09 Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung

Country Status (7)

Country Link
US (1) US5071655A (de)
EP (2) EP0558727B1 (de)
JP (2) JPH06503357A (de)
AT (2) ATE198835T1 (de)
AU (2) AU2553992A (de)
DE (2) DE4130546C2 (de)
WO (2) WO1993005808A1 (de)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5776193A (en) * 1995-10-16 1998-07-07 Orquest, Inc. Bone grafting matrix
US6902584B2 (en) 1995-10-16 2005-06-07 Depuy Spine, Inc. Bone grafting matrix
US8870954B2 (en) 2008-09-09 2014-10-28 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of tendon and ligament injuries
US9161967B2 (en) 2006-06-30 2015-10-20 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating the vertebral column
US9545377B2 (en) 2004-10-14 2017-01-17 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
US9642891B2 (en) 2006-06-30 2017-05-09 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating rotator cuff injuries
US10258566B2 (en) 2004-10-14 2019-04-16 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating bone
US11235030B2 (en) 2010-02-22 2022-02-01 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of tendinopathies

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1186481A (en) * 1968-03-25 1970-04-02 Parke Davis & Co New Pyrrolidine Compounds and Methods for their Production
US5422340A (en) * 1989-09-01 1995-06-06 Ammann; Arthur J. TGF-βformulation for inducing bone growth
US5409911A (en) * 1992-09-11 1995-04-25 Merck & Co., Inc. Prostaglandin analog for treating osteoporosis
DE4236090C1 (de) * 1992-10-26 1994-01-05 Asta Medica Arzneimittel Pharmazeutische Zubereitung für die Fluoridionen-Versorgung
DE4242889A1 (de) * 1992-12-18 1994-06-23 Merck Patent Gmbh Hohlendoprothesen mit Knochenwachstumsfördernder Füllung
WO1994015653A1 (en) * 1993-01-12 1994-07-21 Genentech, Inc. Tgf-beta formulation for inducing bone growth
FR2705235B1 (fr) * 1993-05-13 1995-07-13 Inoteb Utilisation de particules d'un sel de calcium biocompatible et biorésorbable comme ingrédient actif dans la préparation d'un médicament destiné au traitement local des maladies déminéralisantes de l'os.
FR2706768B1 (de) * 1993-05-13 1995-12-01 Inoteb
AU680204B2 (en) * 1993-08-25 1997-07-24 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Periodontal disease remedy
US6046164A (en) * 1993-08-25 2000-04-04 Kaken Pharmaceutical Co., Ltd. Therapeutic agent for diseases of periodontal tissue
US5817327A (en) * 1994-07-27 1998-10-06 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Incorporation of biologically active molecules into bioactive glasses
US5591453A (en) * 1994-07-27 1997-01-07 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Incorporation of biologically active molecules into bioactive glasses
US6048964A (en) * 1995-12-12 2000-04-11 Stryker Corporation Compositions and therapeutic methods using morphogenic proteins and stimulatory factors
US7026292B1 (en) 1995-12-12 2006-04-11 Stryker Corporation Compositions and therapeutic methods using morphogenic proteins and stimulatory factors
AU4721696A (en) * 1996-02-29 1997-09-16 T. Sam Lindholm An osteogenic device and a method for preparing the device
CA2235025C (en) * 1996-08-16 2001-10-09 Mcw Research Foundation, Inc. Bone morphogenetic protein and fibroblast growth factor compositions and methods for the induction of cardiogenesis
BG101544A (en) * 1997-05-30 1998-11-30 Медицински Университет-Ректорат Method for the preparation of biologically active coatings over titanium osteal implants
WO1999002200A1 (en) * 1997-07-07 1999-01-21 Australian Institute Of Marine Science Shaped products or structures for medical or related purposes
DE59903490D1 (de) 1998-09-11 2003-01-02 Schmidmaier Gerhard Biologisch aktive implantate
US6677432B1 (en) * 1998-10-07 2004-01-13 Stryker Corporation Mutations of the C-terminal portion of TGF-β superfamily proteins
AU1525700A (en) 1998-11-19 2000-06-05 Board Of Trustees Of The University Of Arkansas, The Increasing bone strength with selected bisphosphonates
US6121253A (en) * 1998-11-20 2000-09-19 Merck Frosst Canada & Co. Prostaglandin conjugates for treating or preventing bone disease
DE19944681A1 (de) * 1999-08-20 2001-03-01 Metz Stavenhagen Peter Knochenersatzstoff zur Implantation im menschlichen oder tierischen Körper
DE19952550A1 (de) * 1999-11-02 2001-05-03 Tutogen Medical Gmbh Knochenimplantat
DE19952939A1 (de) 1999-11-03 2001-05-10 Tutogen Medical Gmbh Implantat aus Knochenmaterial
US20010041792A1 (en) * 2000-02-03 2001-11-15 Donda Russell S. Extraction of growth factors from tissue
US20020114795A1 (en) 2000-12-22 2002-08-22 Thorne Kevin J. Composition and process for bone growth and repair
JP4754823B2 (ja) * 2002-10-07 2011-08-24 ザイモジェネティクス， インコーポレイテッド Ｆｇｆ１８の投与方法
US7718616B2 (en) 2006-12-21 2010-05-18 Zimmer Orthobiologics, Inc. Bone growth particles and osteoinductive composition thereof
US8613938B2 (en) 2010-11-15 2013-12-24 Zimmer Orthobiologics, Inc. Bone void fillers

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0322249A2 (de) * 1987-12-22 1989-06-28 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Verfahren zur Herstellung und Zusammensetzungen von Kollagen-Derivaten
WO1990004974A1 (en) * 1988-11-02 1990-05-17 Genentech, Inc. Method for the treatment of periodontal disease
US5118667A (en) * 1991-05-03 1992-06-02 Celtrix Pharmaceuticals, Inc. Bone growth factors and inhibitors of bone resorption for promoting bone formation

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4501754A (en) * 1979-09-07 1985-02-26 The Upjohn Company Methods of treating bone resorption
IE52879B1 (en) * 1981-05-12 1988-03-30 Ici Plc Pharmaceutical spiro-hydantoin derivatives
US4726952A (en) * 1983-08-11 1988-02-23 Mission Pharmacal Slow-release sodium fluoride tablet, method of making, and method of treatment of osteoporosis
ATE128715T1 (de) * 1984-07-16 1995-10-15 Celtrix Pharma Polypeptide induzierende faktoren in knochen und knorpel.
US4686104A (en) * 1985-04-30 1987-08-11 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Methods of treating bone disorders
EP0271668B1 (de) * 1986-10-22 1991-12-18 Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Wachstumstimulierendes Material, Herstellungsverfahren und therapeutische Zusammensetzung
DE3851776T2 (de) * 1987-04-28 1995-05-04 Boehringer Mannheim Gmbh Verwendung von IGF-II zur Behandlung von Knochenkrankheiten.
NZ226171A (en) * 1987-09-18 1990-06-26 Ethicon Inc Gel formulation containing polypeptide growth factor
WO1989004646A1 (en) * 1987-11-13 1989-06-01 Jefferies Steven R Bone repair material and delayed drug delivery
AU645244B2 (en) * 1988-04-08 1994-01-13 Genetics Institute, Llc Bone and cartilage inductive compositions
GB8823649D0 (en) * 1988-10-07 1988-11-16 Geistlich Soehne Ag Chemical compounds
SE8804164A0 (sv) * 1988-11-17 1990-05-18 Per Prisell Farmaceutisk beredning
US5102870A (en) * 1989-04-14 1992-04-07 Schering Ag Treatment and prevention of oral mucositis with growth factors
DE3936568C2 (de) * 1989-11-03 1997-06-19 Karlheinz Prof Dr Dr Schmidt Wirkstoffkomplex für die Herstellung von biologischen Teilen in Form von Organen für Lebewesen; Verfahren zum Herstellen desselben und seine Verwendung

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0322249A2 (de) * 1987-12-22 1989-06-28 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Verfahren zur Herstellung und Zusammensetzungen von Kollagen-Derivaten
WO1990004974A1 (en) * 1988-11-02 1990-05-17 Genentech, Inc. Method for the treatment of periodontal disease
US5118667A (en) * 1991-05-03 1992-06-02 Celtrix Pharmaceuticals, Inc. Bone growth factors and inhibitors of bone resorption for promoting bone formation

Cited By (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6187047B1 (en) 1995-10-16 2001-02-13 Orquest, Inc. Bone grafting matrix
US6764517B2 (en) 1995-10-16 2004-07-20 Depuy Acromed, Inc. Tissue repair matrix
US6902584B2 (en) 1995-10-16 2005-06-07 Depuy Spine, Inc. Bone grafting matrix
US7842097B2 (en) 1995-10-16 2010-11-30 Depuy Spine, Inc. Tissue repair matrix
US5776193A (en) * 1995-10-16 1998-07-07 Orquest, Inc. Bone grafting matrix
US11318230B2 (en) 2004-10-14 2022-05-03 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
US11571497B2 (en) 2004-10-14 2023-02-07 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
US11364325B2 (en) 2004-10-14 2022-06-21 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
US9545377B2 (en) 2004-10-14 2017-01-17 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods of use thereof
US10258566B2 (en) 2004-10-14 2019-04-16 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating bone
US9642891B2 (en) 2006-06-30 2017-05-09 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating rotator cuff injuries
US11058801B2 (en) 2006-06-30 2021-07-13 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating the vertebral column
US10456450B2 (en) 2006-06-30 2019-10-29 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating rotator cuff injuries
US9161967B2 (en) 2006-06-30 2015-10-20 Biomimetic Therapeutics, Llc Compositions and methods for treating the vertebral column
US11135341B2 (en) 2008-09-09 2021-10-05 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor composition and methods for the treatment of tendon and ligament injuries
US8870954B2 (en) 2008-09-09 2014-10-28 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of tendon and ligament injuries
US11235030B2 (en) 2010-02-22 2022-02-01 Biomimetic Therapeutics, Llc Platelet-derived growth factor compositions and methods for the treatment of tendinopathies

Also Published As

Publication number Publication date
WO1993005823A1 (de) 1993-04-01
US5071655A (en) 1991-12-10
JPH06503358A (ja) 1994-04-14
EP0558727A1 (de) 1993-09-08
DE4130546C2 (de) 1993-10-21
JPH06503357A (ja) 1994-04-14
AU2553992A (en) 1993-04-27
EP0557498A1 (de) 1993-09-01
DE4130546A1 (de) 1993-03-18
ATE189400T1 (de) 2000-02-15
DE4130545A1 (de) 1993-03-18
DE4130545C2 (de) 1993-10-21
EP0557498B1 (de) 2001-01-24
ATE198835T1 (de) 2001-02-15
AU2584192A (en) 1993-04-27
EP0558727B1 (de) 2000-02-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
WO1993005808A1 (de) Knochenwachstumsfördernde zusammensetzung
Yiamouyiannis Fluoride, the aging factor
EP0271668A1 (de) Wachstumstimulierendes Material, Herstellungsverfahren und therapeutische Zusammensetzung
EP0777491A1 (de) Verwendung von geschmacksneutralem, hydrolysiertem kollagen und mittel enthaltend dasselbe
DE102009030351A1 (de) Zusammensetzung zur Behandlung von degenerativen Gelenkerkrankungen
DE69637104T2 (de) Heilmittel für arthrosis deformans und entzündliche gelenkerkrankungen
WO2000021611A1 (de) Elektromagnetische stimulierung von knorpelgewebe
DE3626414A1 (de) Praeparat zur stimulierung von chondrocyten und osteoblasten (ossein-hydroxyapatit-komplex), verfahren zu seiner herstellung und dieses enthaltende arzneimittel
DD272034A5 (de) Verfahren zur herstellung einer praeparation zur regulierung des gewebewachstums
EP1481055A1 (de) Verfahren zur behandlung von erkranktem, degeneriertem oder geschädigtem gewebe unter verwendung von in vitro hergestelltem dreidimensionalem gewebe in kombination mit gewebezellen und/oder exogenen faktoren
EP0604774B1 (de) Verwendung eines Gemischs aus Calciumhydroxid und Oleum pedum tauri zur Kollagenneubildung in vivo
EP1071481B1 (de) Zubereitung zur kollagenneubildung
DE69922174T2 (de) Biomaterial zur Behandlung von Zahnfäule
EP0301484B1 (de) PTH-Modifikationen und therapeutische Zusammensetzungen, die sie enthalten und daraus bestehen
DE19848597C2 (de) Zubereitung aus Calciumhydroxid, einem zwei- oder mehrwertigen Alkohol und einem fetten Öl vegetarischen oder animalischen Ursprungs und seine Verwendung zur Kollagenneubildung
DE102018126781A1 (de) Kalziumhaltige Formulierung und ihre Verwendung bei Knochenschwund
EP3777904B1 (de) Osteotroper knochenersatz
Gaissmaier et al. Current state of evidence regarding the therapy of osteoarthritis with autologous platelet-rich plasma
WO2022073664A1 (de) Kollagenhydrolysat als wirkstoff zum verzögern der alterung
Fang et al. Comparison of osteogenic power of periosteal transplants from rib and tibia
DE886053C (de) Verfahren zur Inaktivierung von Virusproteinen
Hahn et al. Bone scintigraphy in psoriasis
DE202014011473U1 (de) Zusammensetzung zur Verwendung in der Behandlung von Knochenbrüchen durch beschleunigte Konsolidierung
Fleck Hyperostosen, Fibrodysplasien und Knorpeldysplasien
Grauer Bisphosphonate in der Behandlung des Morbus Paget

Legal Events

Date Code Title Description
AK Designated states

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AU BR CA JP UA US

AL Designated countries for regional patents

Kind code of ref document: A1

Designated state(s): AT BE CH DE DK ES FR GB GR IE IT LU MC NL SE

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 1992919963

Country of ref document: EP

ENP Entry into the national phase

Ref country code: US

Ref document number: 1993 50443

Date of ref document: 19930907

Kind code of ref document: A

Format of ref document f/p: F

WWP Wipo information: published in national office

Ref document number: 1992919963

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: CA

WWG Wipo information: grant in national office

Ref document number: 1992919963

Country of ref document: EP