UA121097C2 - Імуногенна композиція, що містить антигени мікоплазм - Google Patents
Імуногенна композиція, що містить антигени мікоплазм Download PDFInfo
- Publication number
- UA121097C2 UA121097C2 UAA201507462A UAA201507462A UA121097C2 UA 121097 C2 UA121097 C2 UA 121097C2 UA A201507462 A UAA201507462 A UA A201507462A UA A201507462 A UAA201507462 A UA A201507462A UA 121097 C2 UA121097 C2 UA 121097C2
- Authority
- UA
- Ukraine
- Prior art keywords
- immunogenic composition
- antigens
- mycoplasma
- specified
- eukaryotic cells
- Prior art date
Links
- 239000000427 antigen Substances 0.000 title claims abstract description 375
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 title claims abstract description 375
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 title claims abstract description 375
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims abstract description 246
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 title claims abstract description 234
- 241000204031 Mycoplasma Species 0.000 title claims abstract description 220
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 claims abstract description 145
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 110
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims abstract description 42
- 241001430197 Mollicutes Species 0.000 claims description 72
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 52
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 49
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 35
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 29
- 206010028470 Mycoplasma infections Diseases 0.000 claims description 27
- 230000003053 immunization Effects 0.000 claims description 26
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 23
- 241000282887 Suidae Species 0.000 claims description 21
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims description 18
- 238000002649 immunization Methods 0.000 claims description 16
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 15
- 241000204003 Mycoplasmatales Species 0.000 claims description 13
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 claims description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 10
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims description 9
- 208000031729 Bacteremia Diseases 0.000 claims description 7
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 claims description 6
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 claims description 5
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 claims description 5
- 229920002125 Sokalan® Polymers 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229960001631 carbomer Drugs 0.000 claims description 4
- 238000004904 shortening Methods 0.000 claims description 4
- 230000006872 improvement Effects 0.000 claims description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 2
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 86
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 abstract description 80
- 241001148549 Mycoplasma hyosynoviae Species 0.000 abstract 3
- 241000204045 Mycoplasma hyopneumoniae Species 0.000 abstract 2
- 241000202938 Mycoplasma hyorhinis Species 0.000 abstract 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 74
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 47
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 37
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 17
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 16
- 244000144980 herd Species 0.000 description 15
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 12
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 12
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 11
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 11
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 9
- 229960004279 formaldehyde Drugs 0.000 description 9
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 8
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 7
- 210000004671 cell-free system Anatomy 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- -1 dispersing media Substances 0.000 description 7
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 6
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 6
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 6
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 6
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 5
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 5
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 5
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 5
- 229920001577 copolymer Polymers 0.000 description 5
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 5
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 5
- FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N maleic anhydride Chemical compound O=C1OC(=O)C=C1 FPYJFEHAWHCUMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 5
- 239000007762 w/o emulsion Substances 0.000 description 5
- SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 2-(2-methoxy-5-methylphenyl)ethanamine Chemical compound COC1=CC=C(C)C=C1CCN SMZOUWXMTYCWNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N Methacrylic acid Chemical compound CC(=C)C(O)=O CERQOIWHTDAKMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 4
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- FHDAHQFLZOYWQM-QDYAWOJKSA-N (1R,3R)-5-[(2E)-2-[(1R,3aS,7aR)-1-[(2S)-1-imidazol-1-ylpropan-2-yl]-7a-methyl-2,3,3a,5,6,7-hexahydro-1H-inden-4-ylidene]ethylidene]-2-methylidenecyclohexane-1,3-diol Chemical compound C[C@H](Cn1ccnc1)[C@H]2CC[C@H]3\C(=C\C=C4C[C@@H](O)C(=C)[C@H](O)C4)\CCC[C@]23C FHDAHQFLZOYWQM-QDYAWOJKSA-N 0.000 description 3
- 108010042708 Acetylmuramyl-Alanyl-Isoglutamine Proteins 0.000 description 3
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 3
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 3
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 239000003429 antifungal agent Substances 0.000 description 3
- 229940121375 antifungal agent Drugs 0.000 description 3
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 3
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 3
- 229920001400 block copolymer Polymers 0.000 description 3
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 3
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 3
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 3
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 239000007951 isotonicity adjuster Substances 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 3
- BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N muramyl dipeptide Chemical compound OC(=O)CC[C@H](C(N)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](C)O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H](O)[C@@H]1NC(C)=O BSOQXXWZTUDTEL-ZUYCGGNHSA-N 0.000 description 3
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 3
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 3
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 3
- 235000017709 saponins Nutrition 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N squalane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C PRAKJMSDJKAYCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N Aziridine Chemical compound C1CN1 NOWKCMXCCJGMRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 241000282465 Canis Species 0.000 description 2
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 2
- VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N Ethene Chemical compound C=C VGGSQFUCUMXWEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N Isobutene Chemical compound CC(C)=C VQTUBCCKSQIDNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010023232 Joint swelling Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 208000005141 Otitis Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 2
- 206010036141 Polyserositis Diseases 0.000 description 2
- DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M Sodium bisulfite Chemical compound [Na+].OS([O-])=O DWAQJAXMDSEUJJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 210000004271 bone marrow stromal cell Anatomy 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 2
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M decanoate Chemical compound CCCCCCCCCC([O-])=O GHVNFZFCNZKVNT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 239000002612 dispersion medium Substances 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 208000019258 ear infection Diseases 0.000 description 2
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 2
- 208000024756 faint Diseases 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 208000030175 lameness Diseases 0.000 description 2
- 231100000516 lung damage Toxicity 0.000 description 2
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 2
- 239000007758 minimum essential medium Substances 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 2
- WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M octanoate Chemical compound CCCCCCCC([O-])=O WWZKQHOCKIZLMA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid group Chemical group C(CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC)(=O)O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 2
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 2
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 2
- 239000003340 retarding agent Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 2
- 235000010267 sodium hydrogen sulphite Nutrition 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 206010042772 syncope Diseases 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 230000004584 weight gain Effects 0.000 description 2
- 235000019786 weight gain Nutrition 0.000 description 2
- JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N (2r,3r,4s)-2-[(1r)-1,2-dihydroxyethyl]oxolane-3,4-diol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC[C@H](O)[C@H]1O JNYAEWCLZODPBN-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N (6E,10E,14E,18E)-2,6,10,15,19,23-hexamethyltetracosa-2,6,10,14,18,22-hexaene Chemical compound CC(C)=CCCC(C)=CCCC(C)=CCCC=C(C)CCC=C(C)CCC=C(C)C YYGNTYWPHWGJRM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ULQISTXYYBZJSJ-UHFFFAOYSA-N 12-hydroxyoctadecanoic acid Chemical compound CCCCCCC(O)CCCCCCCCCCC(O)=O ULQISTXYYBZJSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFIMISVNSAUMBU-UHFFFAOYSA-N 2-(hydroxymethyl)-2-(prop-2-enoxymethyl)propane-1,3-diol Chemical compound OCC(CO)(CO)COCC=C RFIMISVNSAUMBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KIHBGTRZFAVZRV-UHFFFAOYSA-N 2-Hydroxyoctadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCC(O)C(O)=O KIHBGTRZFAVZRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMHYVXGZRGOICM-AUYXYSRISA-N 2-[(z)-octadec-9-enoyl]oxypropyl (z)-octadec-9-enoate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC(C)OC(=O)CCCCCCC\C=C/CCCCCCCC UMHYVXGZRGOICM-AUYXYSRISA-N 0.000 description 1
- 125000003903 2-propenyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 206010001052 Acute respiratory distress syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- 206010003757 Atypical pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 206010006895 Cachexia Diseases 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 208000005156 Dehydration Diseases 0.000 description 1
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 239000006145 Eagle's minimal essential medium Substances 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N Elaidinsaeure-aethylester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 239000005977 Ethylene Substances 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 206010024264 Lethargy Diseases 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 description 1
- 239000005662 Paraffin oil Substances 0.000 description 1
- 240000002834 Paulownia tomentosa Species 0.000 description 1
- 235000010678 Paulownia tomentosa Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N Phenolsulfonephthalein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1(C=2C=CC(O)=CC=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 BELBBZDIHDAJOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 208000013616 Respiratory Distress Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N Tetramethylsqualene Natural products CC(=C)C(C)CCC(=C)C(C)CCC(C)=CCCC=C(C)CCC(C)C(=C)CCC(C)C(C)=C BHEOSNUKNHRBNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001336 alkenes Chemical class 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940086737 allyl sucrose Drugs 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000016063 arterial thoracic outlet syndrome Diseases 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 1
- 239000003782 beta lactam antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N beta-propiolactone Chemical compound O=C1CCO1 VEZXCJBBBCKRPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000000476 body water Anatomy 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 238000013216 cat model Methods 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 208000013116 chronic cough Diseases 0.000 description 1
- 239000007376 cm-medium Substances 0.000 description 1
- 230000001332 colony forming effect Effects 0.000 description 1
- 229940001442 combination vaccine Drugs 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061428 decreased appetite Diseases 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 208000028659 discharge Diseases 0.000 description 1
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 1
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000002086 displacement chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N ethyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC LVGKNOAMLMIIKO-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- 229940093471 ethyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 210000004475 gamma-delta t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 208000037824 growth disorder Diseases 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 230000003862 health status Effects 0.000 description 1
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- KUQWZSZYIQGTHT-UHFFFAOYSA-N hexa-1,5-diene-3,4-diol Chemical compound C=CC(O)C(O)C=C KUQWZSZYIQGTHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000004435 hydrogen atom Chemical group [H]* 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 206010020718 hyperplasia Diseases 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 210000005061 intracellular organelle Anatomy 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000002427 irreversible effect Effects 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- 201000010666 keratoconjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 210000000867 larynx Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229940057995 liquid paraffin Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 208000030208 low-grade fever Diseases 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 239000003120 macrolide antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229940041033 macrolides Drugs 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 208000004396 mastitis Diseases 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 230000037353 metabolic pathway Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N methanone Chemical compound O=[14CH2] WSFSSNUMVMOOMR-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 1
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000009456 molecular mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000010413 mother solution Substances 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 229940031348 multivalent vaccine Drugs 0.000 description 1
- JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N n-Triacontane Natural products CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC JXTPJDDICSTXJX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AFFLGGQVNFXPEV-UHFFFAOYSA-N n-decene Natural products CCCCCCCCC=C AFFLGGQVNFXPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000006384 oligomerization reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 1
- 206010034674 peritonitis Diseases 0.000 description 1
- 239000007793 ph indicator Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 229960003531 phenolsulfonphthalein Drugs 0.000 description 1
- 238000013310 pig model Methods 0.000 description 1
- 230000004260 plant-type cell wall biogenesis Effects 0.000 description 1
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 1
- 229920000058 polyacrylate Polymers 0.000 description 1
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 1
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 1
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 229960000380 propiolactone Drugs 0.000 description 1
- 229940010310 propylene glycol dioleate Drugs 0.000 description 1
- 108010009004 proteose-peptone Proteins 0.000 description 1
- 150000007660 quinolones Chemical class 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 230000001850 reproductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000029058 respiratory gaseous exchange Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- WBHHMMIMDMUBKC-XLNAKTSKSA-N ricinelaidic acid Chemical compound CCCCCC[C@@H](O)C\C=C\CCCCCCCC(O)=O WBHHMMIMDMUBKC-XLNAKTSKSA-N 0.000 description 1
- FEUQNCSVHBHROZ-UHFFFAOYSA-N ricinoleic acid Natural products CCCCCCC(O[Si](C)(C)C)CC=CCCCCCCCC(=O)OC FEUQNCSVHBHROZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000009589 serological test Methods 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L sodium thiosulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=S AKHNMLFCWUSKQB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019345 sodium thiosulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 229940032094 squalane Drugs 0.000 description 1
- 229940031439 squalene Drugs 0.000 description 1
- TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N squalene Natural products CC(=CCCC(=CCCC(=CCCC=C(/C)CCC=C(/C)CC=C(C)C)C)C)C TUHBEKDERLKLEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000036435 stunted growth Effects 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229940031626 subunit vaccine Drugs 0.000 description 1
- 150000005846 sugar alcohols Polymers 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229940040944 tetracyclines Drugs 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L thimerosal Chemical compound [Na+].CC[Hg]SC1=CC=CC=C1C([O-])=O RTKIYNMVFMVABJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940033663 thimerosal Drugs 0.000 description 1
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 1
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 1
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 125000000391 vinyl group Chemical group [H]C([*])=C([H])[H] 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 239000000304 virulence factor Substances 0.000 description 1
- 230000007923 virulence factor Effects 0.000 description 1
- 230000000007 visual effect Effects 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000002132 β-lactam antibiotic Substances 0.000 description 1
- 229940124586 β-lactam antibiotics Drugs 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/02—Bacterial antigens
- A61K39/0241—Mollicutes, e.g. Mycoplasma, Erysipelothrix
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
- A61K35/22—Urine; Urinary tract, e.g. kidney or bladder; Intraglomerular mesangial cells; Renal mesenchymal cells; Adrenal gland
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/04—Immunostimulants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/70—Multivalent vaccine
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
Винахід стосується імуногенної композиції та її застосування, що містить один або декілька антигенів мікоплазм із мікоплазматичних бактерій, вибраних із групи, яка складається з M. hyorhinis, M. hyopneumoniae, M. hyosynoviae і будь-яких їх комбінацій; або один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин на MDCK-клітини або McСoy-клітини, де один або декілька антигенів являють собою цільні інактивовані бактерини.
Description
Передумови створення винаходу
Бактерії роду Мусоріазта належать до класу Моїїсшез і являють собою групу організмів, що має походження з типу Ріппісцієв (фірмікути). МоїЇйсшев являють собою найдрібніші організми, що автономно реплікуються, які структурно відрізняються від інших еубактерій відсутністю в них клітинної стінки. Поверхня їх одношарової мембрани розглядається як поверхня розділу, що має вирішальне значення для адаптації й виживання, які мають місце в імунокомпетентному хазяїні, що має складний механізм. Крім того, Моїййсцієз має невеликий геном і обмежену кількість метаболічних шляхів. Із цієї причини представники роду Мусоріаєта описані також як "мінімальні саморепліковані організми". Однак, незважаючи на цю уявну простоту, велика кількість мікоплазматичних бактерій є патогенами людини й широкого спектру тварин. На відміну від інших патогенних бактерій, вірулентність яких головним чином визначається токсинами, інвазинами й цитолізинами, патогенні мікоплазматичні бактерії, ймовірно, не мають вказаних типових первинних факторів вірулентності (Спатбаца І. і ін., МисіІеіс Асій5 Кев. 29, 2001, стор. 2145-2153, Егазег і ін., Зсіепсе 270, 1995, стор. 397-403). Зараз доступна лише невелика кількість даних про молекулярні механізми й фактори, які забезпечують патогенним мікоплазмам можливість ушкоджувати клітини-хазяї, викликати запалення й захворювання.
Патогенні мікоплазматичні бактерії є, насамперед, збудниками атипової пневмонії, сечостатевих інфекцій і артритів у людини й тварин (Мусоріазта5з: Моїесшаг бБіоіоду, рашодепісйу апа вігагедіє5 ог сопігої, під ред. Віапснага А. і сх. Р. Вгомлпіпа, вид-во Ногі2оп
Віозсіеєпсе, Мутопанат Ц.К., 2005; Кобрівсй М. і ЕРтїв М.Р. 5м/іпе тусоріазтовзев, Нем. 5сі. Тесп.
ОН. Іпії. Ері;. 15, 1996, стор. 1569-1605). Відомо, що реактивація або загострення симптомів повторюються й поступово переходять у хронічну стадію захворювання, і із цієї причини поряд з раннім діагностуванням і раннім лікуванням важливими є попередження або лікування загострення або реактивації. М. пуорпештопіає є етіологічним агентом ензоотичної пневмонії. У свиней це є однією з найпоширеніших і економічно важливих хвороб, з якою зв'язані знижений приріст маси й погана ефективність використання корму. Хвороба викликає ушкодження в легенях, хронічний кашель, тьмяний волосяний покрив, затримку росту й зовнішні ознаки поганого розвитку, що проявляються протягом декількох тижнів. Ушкодження легень, насамперед у вентральній верхівковій й серцевій долях, характеризуються гіперплазією
Зо епітеліальних клітин і підвищеним накопиченням монуклеарних клітин у периваскулярному і перибронхіолярному просторі. М. пуогпіпізх, інший вид мікоплазм, що часто зустрічається в дихальних шляхах свиней, може викликати полісерозит і артрит у поросят. М. пуозупоміає, як правило, локалізовані в мигдалинах і можуть викликати артрит, що приводить до економічних втрат. М. пуозупоміає виділяють зі зразків, отриманих із суглобів і з гортані/мигдалин, і цей вид може індукувати утворення антитіл у крові й синовіальній рідині. М. Бомі5 розглядається як один або найбільш патогенний вид мікоплазматичних бактерій, і він наносить серйозний економічний збиток в усьому світі. Мікоплазми викликають серйозні клінічні ознаки у великої рогатої худоби будь-якого віку. М. ромі5 являє собою патоген Мусоріазхта, що найчастіше зустрічається, який, як встановлено, викликає пневмонію, мастит і артрит у великої рогатої худоби, і його етіологічна роль також пов'язана з отитом, кератокон'юнктивітом, синовітом і репродуктивними порушеннями в корів і биків.
Оскільки в мікоплазм відсутня клітинна стінка, на них не впливають багато загальноприйнятих антибіотиків, такі як пеніцилін або інші бета-лактамні антибіотики, мішенню яких є синтез клітинної стінки. Терапевтичні засоби, застосовувані при зараженні мікоплазмами, які знайшли застосування на практиці, являють собою деякі антибіотики, наприклад, на основі макролідів, або нові антибіотики на основі хінолонів або антибіотики на основі тетрациклінів, але для таких антибіотиків характерні шкідливі впливи, такі як виникнення стійких до лікарських засобів штамів, що приводить до того, що зв'язана з мікоплазмами інфекція стає більш серйозною, оскільки при цьому не досягаються необхідні терапевтичні впливи, і це є передумовою для перетворення в хронічну стадію захворювання.
Крім того, ефективним методом контролю інфекції, яка викликається мікоплазмами, є вакцинація. Вакцини, ефективні у відношенні декількох видів мікоплазматичних бактерій, відомі з існуючого рівня техніки. Наприклад, в УМО 2009/058833 (А2) описаний ослаблений, авірулентний штам бактерій Мусоріаєта Бомі5, призначений для вакцинації. Крім того, в УМО 2009/126356 (Аг) описана імуногенна композиція проти Мусоріазта пуорпеитопіає. Однак існує потреба в ефективних комбінованих вакцинах, які забезпечують захист від декількох патогенів.
Потреба у вказаних комбінованих вакцинах є дуже високою для мінімізації кількості імунізацій, необхідних для забезпечення захисту від декількох патогенів, для зниження вартості обробок і для підвищення прийнятності й зони дії. Однак проблема, пов'язана з антигенною бо інтерференцією, ускладнює розвиток багатокомпонентних вакцин. Так, антигенна інтерференція характеризується тим, що введення декількох антигенів часто приводить до зниженої відповіді на певні антигени в порівнянні з імунною відповіддю, виявленою при індивідуальному введенні вказаних антигенів.
Таким чином, існує потреба в ефективних комбінованих вакцинах, які забезпечують захист від декількох патогенів.
Опис винаходу
Перед описом об'єктів даного винаходу слід зазначити, що в контексті даного опису й у доданій формулі винаходу вживання поняття в однині має на увазі також його згадування в множині, якщо з контексту точно не є очевидним інше. Так, наприклад, посилання на "антиген" включає також множину антигенів, посилання на "клітину" стосується однієї або декількох клітин і їх еквівалентів, відомих фахівцям у даній галузі, і т.д. Якщо не вказане інше, то всі технічні й наукові поняття, застосовувані в контексті даного опису, мають значення, добре відомі звичайному фахівцеві в галузі, до якої належить винахід. Хоча для втілення на практиці або при тестуванні даного винаходу можна застосовувати будь-які методи й матеріали, подібні або еквівалентні до представлених у даному описі, нижче описані переважні методи, обладнання й матеріали. Усі згадані в контексті даного опису публікації включені в нього як посилання для цілей опису й обговорення клітинних ліній, векторів і методологій, вказаних у публікаціях, які можна застосовувати у зв'язку з винаходом. Ніщо із вказаного в даному описі не слід розглядати як визнання того, що з урахуванням існуючого рівня техніки даний винахід не може претендувати на обсяг, представлений у вказаному описі.
Даний винахід вирішує проблеми, які є в існуючому рівні техніки, і має виражену перевагу в даній галузі техніки. У цілому, даний винахід стосується імуногенної композиції, що містить: а) один або декілька антигенів М. пуозупоміає і один або декілька антигенів, вибраних із групи, яка складається з М. пуорпештопіає і М. БПуогпіпів, і їх комбінації; і б) фармацевтично прийнятний носій.
Крім того, даний винахід стосується імуногенної композиції, що містить: а) один або декілька антигенів М. пуогпіпіз і один або декілька антигенів М. Нуозупоміаєї і б) фармацевтично прийнятний носій.
Цінним є те, згідно із представленими в описі даного винаходу експериментальними даними, імуногенна композиція, представлена в даному описі, має ефективність і позбавлена антигенної інтерференції. Зокрема, після введення імуногенної композиції, що містить антигени
М. пуотіпі5, М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає, продемонстрована відсутність інтерференції незалежно від ефективності М. пуогіпів і М. пуорпеитопіає.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. пуогпіпіє; один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; б) один або декілька антигенів М. пуорпештопіає; і в) фармацевтично прийнятний носій.
Поняття "імуногенна композиція" стосується композиції, яка містить принаймні один антиген, який викликає імунологічну відповідь у хазяїна, якому вводять імуногенну композицію. Вказана імунологічна відповідь може являти собою клітинну та/або антитіло-обумовлену (гуморальну) імунну відповідь на імуногенну композицію, запропоновану у винаході. Хазяїна позначають також як "суб'єкт". Переважно будь-який з хазяїв або суб'єктів, описаних або згаданих у контексті даного опису, являє собою тварину.
Як правило, "імунологічна відповідь" включає (але, не обмежуючись тільки ними) одну або декілька з наступних дій: виробництво або активація антитіл, В-клітин, Т-клітин-хелперів, Т- клітин-супресорів та/або цитотоксичних Т-клітин та/або гама-дельта-Т-клітин, спрямованих конкретно до антигену або антигенів, включеного (их) в імуногенну композицію, запропоновану у винаході. Переважно в хазяїна повинна бути або захисна імунологічна відповідь, або терапевтична відповідь. "Захисна імунологічна відповідь" може проявлятися або в зниженні, або у відсутності клінічних ознак, у нормі характерних для інфікованого хазяїна, більш швидкому часі відновлення та/або меншій тривалості інвазійної здатності або більш низькому титрі патогену в тканинах або загальній воді організму або екскрементах інфікованого хазяїна.
У випадку, коли в хазяїна проявляється захисна імунологічна відповідь, така як стійкість до нової інфекції, та/або в нього знижується клінічна серйозність хвороби, то імуногенну композицію називають "вакциною".
Поняття "Інфекція" або "інфікований" стосується зараження суб'єкта патогеном, тобто М. пуогпііпіз або М. пуогпіпів і М. пуозупоміає або М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає і М. нуозупоміає. "Терапевтична відповідь" можна продемонструвати за зниженням та/або лікуванням клінічних ознак, у нормі характерних для хазяїна, коли хазяїн уже інфікований патогеном бо (наприклад, мікоплазмою), який у нормі викликає вказану клінічну ознаку або клінічні ознаки.
Поняття "мікоплазми" відоме фахівцеві в даній галузі. "Мусоріазєта" стосується роду бактерій, наприклад, описаному в: Мусоріазтав: МоїІесшаг Біоіоду, раїподепісйу апа вігаіедієв
Ттог сопігої, під ред. Віапснага А. і сх. РЕ. Вгомпіпа, вид-во Ногігоп Віозсіепсе, Мутопанат Ц.К., 2005; Кобізсиі М. і в Егїїв М.Р. Зу/іпе тусоріазтозев, Нем. Зсі.Тесн. ОМ. Іпї. Ері. 15, 1996, стор. 1569-1605. Бактерії можна класифікувати на основі їх біохімічних і мікробіологічних властивостей, а також їх морфології. Такі критерії класифікації добре відомі в даній галузі. Як правило, зараження мікоплазмами асоціюється із клінічними ознаками, вказаними в даному описі.
У контексті даного опису поняття "мікоплазми" стосується М. Ппуогпіпіз або М. пуотіпів і М. пуозупоміає або М. пуогпіпізх, М. пуорпештопіае і М. пуозупоміае. Приклад повної геномної послідовності М. пуогпіпі5 представлений в І іш МУ. і ін., У. Васіегіої. Т. 192 (21), 2010, стор. 5844- 5845 дої: 10.1128/)8.00946-10, Ериб від 27 серпня 2010 р або в СаїЇсий М... і ін., У. Васіегіої. т. 194 (7), 2012, с. 1848 аої: 10.1128/)8.00033-12. Наприклад, ізоляти М. пуозупоміає депоновані в
Американській колекції тканинних культур під реєстраційними номерами АТСС 25591 або АТС 27095. Наприклад, ізоляти Мусоріазта пуорпештопіає депоновані в Американській колекції тканинних культур під реєстраційними номерами АТСС 25095, АТС 25617 і АТСС 25934.
Геномна ДНК 9У-штаму Мусоріазєта Ппуорпештопіає депонована в Американській колекції тканинних культур під реєстраційними номерами АТОС 259340.
У контексті даного опису поняття "антиген" стосується (але, не обмежуючись тільки ними) компонентів, які викликають імунологічну відповідь у хазяїна на імуногенну композицію, що представляє інтерес, або вакцину, що містить вказаний антиген або його імунологічно активний компонент. Антиген або його імунологічно активний компонент може являти собою цільний мікроорганізм (в інактивованій або модифікованій живій формі) або будь-який його фрагмент або фракцію, який/яка, якщо його/ її вводять хазяїнові може викликати імунологічну відповідь у хазяїна. Антиген може являти собою або може містити цільні живі організми або в їх вихідній формі, або у вигляді ослаблених організмів у так званій модифікованій живій вакцині (МІ М).
Антиген може додатково містити елементи, властиві вказаним організмам (субодиничні вакцини), при цьому вказані елементи одержують або шляхом розщеплення цільного організму або ростучих культур вказаних організмів і наступних стадій очищення, з одержанням
Зо необхідних(ої) структур(и), або шляхом процесів синтезу за допомогою відповідної маніпуляції в прийнятній системі, наприклад, (але, не обмежуючись тільки ними) у бактеріях, комахах, ссавцях і інших видах, і необов'язково шляхом наступних процедур виділення й очищення, або шляхом індукції вказаних процесів синтезу у тварині, яка потребує вакцини, шляхом безпосереднього включення генетичного матеріалу з використанням прийнятних фармацевтичних композицій (вакцинація полінуклеотидом). Антиген може містити цільні організми, інактивовані відповідними методами, у так званій убитій вакцині (КМ). Якщо організм являє собою бактерію, то вбиту вакцину називають бактерином.
Поняття "фармацевтично прийнятний носій" включає будь-який і всі розчинники, дисперсійні середовища, агенти для нанесення покриттів, стабілізатори, розріджувачі, консерванти, антибактеріальні й протигрибкові засоби, агенти, що надають ізотонічність, агенти, що сповільнюють адсорбцію, ад'юванти, засоби, що стимулюють імунну систему, і їх комбінації.
В одному з об'єктів даного винаходу один або декілька антигенів являють собою цільні інактивовані бактерини. Один або декілька цільних інактивованих антигенів може (уть) являти собою цільний інактивований бактерин, вибраний із групи, що включає: М. Нуотіпів; М. пуозупоміає; М. пуорпештопіає; М. пуогпіпі5 і М. пуозупоміає; і М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає і
М. нуозупоміав.
Так, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Нуогпіпів; і один або декілька антигенів
М. Ппуозупоміае; і б) фармацевтично прийнятний носій, у якій антигени М. Нуотіпів; М. пуозупоміає; або М. пуогпіпіз5 і М. пуозупоміає являють собою цільні інактивовані бактерини.
Згідно з іншим об'єктом винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Нуотіпів; один або декілька антигенів М. пуозупоміає і один або декілька антигенів М. пуорпештопіае б) фармацевтично прийнятний носій, у якій антигени М. Пуогпіпіє; М. ПпПуозупоміае;ї та/"або М. Ппуорпештопіаеє являють собою цільні інактивовані бактерини. Згідно із цим об'єктом даного винаходу або антиген М. пуогпіпі5 являє собою цільний інактивований бактерин, або антиген М. пуорпештопіає являє собою цільний інактивований бактерин, або антиген М. пуозупоміає являє собою цільний інактивований бактерин. Однак згідно із цим об'єктом винаходу мається на увазі також, що всі антигени в імуногенній композиції, запропонованій в даному винаході, являють собою цільні інактивовані 60 бактерини, тобто антигени М. Впуогпіпіз і М. Нуозупоміає або антигени М. ВПуогіпів, М.
пуорпешитопіає і М. нуозупоміає являють собою цільні інактивовані бактерини.
Для цілей даного винаходу можна використовувати будь-який прийнятний метод інактивації.
Так, інактивацію можна здійснювати шляхом хімічних та/або фізичних обробок, відомих фахівцеві в даній галузі. Переважні методи інактивації включають додавання циклізованого бінарного етиленіміну (ВЕЇ), включаючи додавання розчину гідроброміду 2-брометиленаміну (ВЕА), циклізованого з утворенням бінарного етиленіміну (ВЕЇ). Інші переважні хімічні інактивуючі агенти включають (але, не обмежуючись тільки ними) Тритон Х-100, дезоксихолат натрію, бромід цетилтриметиламонію, В-пропіолактон, тимеросал, фенол і формальдегід (формалін). Однак інактивація може включати також стадію нейтралізації. Переважні нейтралізуючі агенти включають (але, не обмежуючись тільки ними) тіосульфат натрію, бісульфіт натрію й т.п.
Переважні умови інактивації формаліном включають застосування формаліну в концентрації приблизно від 0,02 до 2,0 об. 95, більш переважно приблизно від 0,1 до 1,0 об. 95, ще більш переважно приблизно від 0,15 до 0,8 об. 956, ще більш переважно приблизно від 0,16 до 0,6 об. 95 і найбільш переважно приблизно від 0,2 до 0,4 об. 95. Тривалість інкубації залежить від стійкості видів мікоплазм. Як правило, процес інактивації здійснюють доти, поки ріст мікоплазм не перестає піддаватися виявленню в прийнятній системі культивування.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу цільні інактивовані бактерини являють собою інактивовані формаліном бактерини, переважно з використанням вказаних вище концентрацій. Так, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Нуотіпіб; і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, у якій один або декілька антигенів являють собою цільні інактивовані бактерини, і один або декілька цільних інактивованих бактеринів являють собою інактивовані формаліном бактерини. Згідно з іншим об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає. Згідно із цим об'єктом даного винаходу мається на увазі, що або антиген М. пуогпіпіз являє собою інактивований формаліном бактерин, або антиген М. пуорпештопіає являє собою інактивований формаліном бактерин, або антиген М. пуозупоміае являє собою інактивований формаліном бактерин. Однак згідно із цим об'єктом даного винаходу мається на
Зо увазі також, що всі антигени мікоплазм в імуногенній композиції, запропонованій в даному винаході, являють собою інактивовані формаліном бактерини, тобто антигени М. Пуогпіпів і М. пуозупоміає або антигени М. пуогіпіпіх і М. пуорпештопіає і М. пуозупоміае являють собою інактивовані формаліном бактерини.
Пропонований у винаході компонент, що представляє собою інактивований бактерин, можна включати в ліпосоми, використовуючи відому технологію, наприклад, описану в Майшге, 252, 1974, стор. 252-254 або в дошигпаї ої Іттипоіоду, 120, 1978, стор. 1109-1113. В іншому варіанті здійснення винаходу компонент, який являє собою інактивований бактерин, запропонований у винаході, можна кон'югувати із прийнятними біологічними сполуками, такими як полісахариди, пептиди, білки або т.п. або з їх комбінацією.
Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція, представлена в даному описі, має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуогпіпіх, у суб'єкта, який потребує цього. Так, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М.
Нуотіпів; і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, де вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. Пуогпіпі5, у суб'єкта, який потребує цього. Згідно з наступним об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпешитопіає. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільні інактивовані бактерини вказаних вище видів мікоплазм.
Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція, представлена в даному описі, яка містить також один або декілька антигенів М. Ппуорпештопіає, має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуорпештопіає, у суб'єкта, який потребує цього. Так, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. пуотіпів; один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; б) один або декілька антигенів М. пуорпешитопіає; і в) фармацевтично прийнятний носій, де вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуорпештопіає, у суб'єкта, який потребує цього. Згідно з наступним об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/(або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. Пуогпіпіє і М. 60 пуорпешитопіає, у суб'єкта, який потребує цього. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільні інактивовані бактерини вказаних вище видів мікоплазм.
Поняття "лікування та/або профілактика" стосується зменшення захворюваності інфекцією, яка викликається мікоплазмами, череди або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційовані з конкретною мікоплазматичною інфекцією. Так, поняття "лікування та/або профілактика" стосується також зменшення кількості тварин у череді, які стають інфікованими конкретними мікоплазматичними бактеріями (тобто зменшення захворюваності конкретною інфекцією, яка викликається мікоплазмою) або зниження серйозності клінічних ознак, які, як правило, викликаються або асоційовані з мікоплазматичною інфекцією, у групі тварин, у якій тварин обробляли застосовуваною в ефективній кількості імуногенною композицією, представленою в даному описі, у порівнянні з групою тварин, яких не обробляли вказаною імуногенною композицією. "Лікування та/або профілактика", як правило, передбачає введення в ефективній кількості імуногенної композиції, запропонованої в даному винаході, тварині або череді тварин, які потребують цього, або на яких може виявляти сприятливий вплив вказане лікування/вказана профілактика. Поняття "лікування" стосується введення в ефективній кількості імуногенної композиції, коли особина або принаймні декілька тварин у череді вже інфіковані вказаною мікоплазмою й коли у вказаних тварин уже виявлені деякі клінічні ознаки, які викликаються або асоційовані з мікоплазматичною інфекцією. Поняття "профілактика" стосується обробки особини до зараження вказаної особини мікоплазмою або принаймні, коли у вказаної тварини або в жодної із тварин у групі тварин не виявлені які-небудь клінічні ознаки, які викликаються або асоційовані із зараженням вказаною мікоплазмою.
У контексті даного опису "ефективна кількість" означає (але, не обмежуючись тільки вказаним) кількість антигену, яка викликає або може викликати імунну відповідь у суб'єкта.
Вказана ефективна кількість може зменшувати захворюваність конкретною мікоплазматичною інфекцією в череді або знижувати серйозність клінічних ознак, пов'язаних з конкретною мікоплазматичною інфекцією.
Переважно частоту зустрічальності або серйозність клінічних ознак знижують принаймні на 10 95, білош переважно принаймні на 20 95, більш переважно принаймні на 30 95, ще більш
Зо переважно принаймні на 40 95, ще більш переважно принаймні на 50 95, ще більш переважно принаймні на 60 95, ще більш переважно принаймні на 70 95, ще більш переважно принаймні на 80 95, ще більш переважно принаймні на 90 95 і найбільш переважно принаймні на 95 95 у порівнянні із суб'єктами, яких або не обробляли імуногенною композицією, або обробляли відомою з існуючого рівня техніки імуногенною композицією, але які згодом були інфіковані конкретними мікоплазматичними бактеріями.
Поняття "клінічні ознаки" у контексті даного опису стосується ознак інфекції в суб'єкта, яка викликається мікоплазматичними бактеріями. Клінічні ознаки інфекції залежать від конкретного патогену. Приклади вказаних клінічних ознак включають (але, не обмежуючись тільки ними) респіраторний дистрес-синдром, полісерозит (такий як перитоніт, плеврит, перикардит), артрит (кульгавість і набрякання суглобів), отит, огрубіння волосяного покриву, невелика лихоманка, депресія, знижений апетит і бактеріємія. При цьому клінічні ознаки включають також (але, не обмежуючись тільки ними) клінічні ознаки, які піддаються безпосередньому виявленню в живої тварини. Приклади клінічних ознак, які піддаються безпосередньому виявленню в живої тварини, включають виділення з носа й ока, апатичність, кашель, стерторозне дихання, схильність до падіння, підвищену температуру, приріст або втрату маси, зневоднювання, діарею, набрякання суглобів, кульгавість, кахексію, блідість шкіри, поганий ріст і т.п.
Зниження частоти зустрічальності або серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з інфекцією конкретною мікоплазмою, у суб'єкта можна досягати шляхом введення однієї або декількох доз імуногенної композиції, запропонованої в даному винаході, суб'єктові, який потребує цього. Як продемонстровано в прикладах 2 і 3, імуногенна композиція, представлена в даному описі, мала ефективність після введення однократної дози суб'єктові, який цього потребує. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. пуогпіпів; і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, де вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуогпіпі5, у суб'єкта, який потребує цього, після введення однократної дози.
Вказану однократну дозу вводять тільки один раз. Згідно з іншим об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм являють собою цільні бо інактивовані бактерини вказаних вище видів мікоплазм.
Крім того, було встановлено, що одна доза імуногенної композиції, яка містить М. пуорпештопіає, також є ефективною після введення вказаної однократної дози такої імуногенної композиції. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. пуотіпів; один або декілька антигенів М. Ннуозупоміає; б) один або декілька антигенів М. пуорпештопіає; і в) фармацевтично прийнятний носій, де вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуорпештопіає, у суб'єкта, який потребує цього, після введення однократної дози. Вказану однократну дозу вводять тільки один раз. Згідно з іншим об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. Пуогпіпі5 їі М. пуорпешитопіає, у суб'єкта, який потребує цього. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільні інактивовані бактерини вказаних вище видів мікоплазм.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу імуногенну композицію готують для введення у вигляді однократної дози вказаної імуногенної композиції. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. пуотіпів; і один або декілька антигенів М. пуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, де імуногенну композицію готують для введення у вигляді однократної дози вказаної імуногенної композиції. Вказана імуногенна композиція може містити також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає, при цьому вказану імуногенну композицію, яка містить а) один або декілька антигенів М. Ппуогпіпіх і один або декілька антигенів М.
Ппуозупоміає; б) один або декілька антигенів М. пуорпештопіає; і в) фармацевтично прийнятний носій, готують або надають для введення у вигляді однократної дози. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм можуть являти собою цільні інактивовані бактерини вказаних вище видів мікоплазм. Крім того, вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуотіпіх або М. пуогпііпі5 і М. пуорпештопіає, у суб'єкта, який потребує цього, після введення однократної дози вказаних антигенів мікоплазм, у кожному випадку залежно від того, чи містить композиція один або декілька антигенів М. пуорпештопіає чи ні. Важливо відзначити, що експериментальні дані, представлені в описі даного винаходу, продемонстрували, що введення однократної дози імуногенної композиції, запропонованої в даному винаході, вірогідно й ефективно стимулювало захисну імунну відповідь. Зокрема, гуморальна імунна відповідь, що піддається вимірюванню, продемонстрована для М. Пуогпіпів і
М. пуорпеитопіає.
Як відзначалося вище, поняття суб'єкт або хазяїн у контексті даного опису стосується тварин, переважно ссавців, таких як миші, щури, морські свинки, кролики, хом'яки, свині, вівці, собаки, кішки, коні, мавпи або велика рогата худоба, а також переважно людини.
Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Пуогпіпіє; і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, де вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. Ппуогпіпіх у свиней. Згідно з наступним об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуотіпі5 у свиней. Коли вказана імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає, то вона згідно з наступним об'єктом винаходу має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М.
Нуорпеитопіає у свиней. Згідно з наступним об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів М. пуогппіпі5 і М. Нуорпештопіає, має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. пуогпіпі5 і М. нуорпеитопіає у свиней. І в цьому випадку один або декілька антигенів мікоплазм можуть являти собою цільні інактивовані бактерини вказаних вище видів мікоплазм.
Згідно з наступним об'єктом даного винаходу імуногенна композиція являє собою вакцину.
Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Нуогпіпів; і один або декілька антигенів
М. Нуозупоміає; і 6) фармацевтично прийнятний носій, де імуногенна композиція являє собою вакцину. Вказана вакцина може містити також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає.
Вакцина, запропонована у винаході, при її введенні суб'єктові, який потребує цього, має такі ж цінні властивості, що й властивості, описані для імуногенних композицій.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу фармацевтично прийнятний носій 60 вибирають із групи, яка складається з розчинників, дисперсійних середовищ, агентів для нанесення покриттів, стабілізаторів, розріджувачів, консервантів, антибактеріальних і протигрибкових засобів, агентів, що надають ізотонічність, агентів, що сповільнюють адсорбцію, ад'ювантів, засобів, що стимулюють імунну систему, і їх комбінацій.
Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Нуотіпіб; і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, у якій фармацевтично прийнятний носій вибирають із групи, яка складається з розчинників, дисперсійних середовищ, агентів для нанесення покриттів, стабілізаторів, розріджувачів, консервантів, антибактеріальних і протигрибкових засобів, агентів, що надають ізотонічність, агентів, що сповільнюють адсорбцію, ад'ювантів, засобів, що стимулюють імунну систему, і їх комбінацій. Як відзначалося вище, вказана вакцина може містити також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає. Крім того, один або декілька антигенів мікоплазм із вказаних вище видів мікоплазм може являти собою цільний інактивований бактерин, вказаний вище.
У контексті даного опису "ад'юванти" можуть включати гідроксид алюмінію й фосфат алюмінію, сапоніни, наприклад, Оці А, 05-21 (фірма Сатрбгідде Віоїесп Іпс., Кембридж, шт.
Масачусетс), ОРІ-0100 (фірма Саїйепіса Рпагтасеціїса!5, Іпс., Бірмінгем, шт. Алабама), емульсію вода-в-маслі, масло-в-воді, емульсію вода-в-маслі-в-воді. Основою емульсії можуть бути, зокрема, легке рідке парафінове масло (типу, що відповідає Європейській фармакопеї); ізопреноїдне масло, таке як сквалан або сквален; масло, що утворюється при олігомеризації алкенів, зокрема, ізобутену або децену; ефіри кислот або спиртів, що містять лінійну алкільну групу, більш конкретно рослинні олії, етилолеат, пропіленгліколю ди(каприлат/капрат), гліцерину три(каприлат/капрат) або пропіленгліколю диолеат; ефіри розгалужених жирних кислот або спиртів, зокрема ефіри ізостеаринової кислоти. Масла застосовують у комбінації з емульгаторами з одержанням емульсії. Переважними емульгаторами є неіоногенні поверхово- активні речовини, зокрема, ефіри сорбітану, маніду (наприклад, ангідроманітолеат), гліцерину, полігліцерину, пропіленгліколю й олеїнової, ізостеринової, рицинолевої або гідроксистеаринової кислоти, які необов'язково є етоксилованими, і блокспівполімери поліоксипропілену- поліоксиетилену, зокрема продукти типу Рішигопіс, насамперед 1121 (див. Нипіег і ін., Те Тнеогу апа Ргасіїса! Арріїсайоп ої Адіимапів, під ред. біеулай-Тий! О. Е. 5., вид-во доппулЛІеу апа 5опв,
Ко) МУ, 1995, стор. 51-94 і Тода їі ін., Массіпе 15, 1997, стор. 564-570). Наприклад, можна застосовувати емульсію 5РТ, описану на с. 147 в "Массіпе ЮОезідп, Те Зибрипії апа Адіимапі
Арргоаспі", під ред. М. РоугеїЇ ії М. Мем/тап, вид-во Ріепит Ргез5, 1995 і емульсію МЕ59, описану на с. 183 у цій же книзі. Інші придатні ад'юванти включають (але, не обмежуючись тільки ними) ад'ювантну систему КІВІ (фірма Кірі Іпс.), блокспівполімер (фірма Суїгх, Атланта, шт.
Джорджія), БАБ-М (фірма Спігоп, Емеривіл, шт. Каліфорнія), монофосфорил-ліпід А, ад'ювант авридин ліпід-амін, термолабільний ентеротоксин з Е. соїї (рекомбінантний або інший), холерний токсин, ІМ5 1314 або мурамілдипептид (але винахід не обмежений вказаними ад'ювантами). Із співполімерів малеїнового ангідриду й алкенільного похідного застосовують співполімери ЕМА (фірма Мопзапіо) співполімери, що представляють собою, малеїнового ангідриду й етилену. Розчинення вказаних полімерів у воді приводить до одержання кислого розчину, який повинен бути нейтралізований, переважно до фізіологічного значення рнН, для одержання розчину ад'юванта, у який може бути включена імуногенна, імунологічна композиція або композиція вакцини.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу фармацевтично прийнятний носій являє собою ад'ювант, вибраний із групи, яка складається з гідроксиду алюмінію, фосфату алюмінію, сапонінів, емульсії вода-в-маслі, емульсії масло-в-воді, емульсії вода-в-маслі-в- воді, полімерів акрилової або метакрилової кислоти, співполімерів малеїнового ангідриду й алкенільного похідного, ад'ювантної системи КІВІ, блокспівполімеру, 5АБ-М, монофосфорил-ліпіду А, авридин ліпід-аміну, термолабільного ентеротоксину з Е. соїї (рекомбінантного або іншого), холерного токсину, ІМ5 1314, мурамілдипептиду і їх комбінацій. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів М. Нуотіпіб; і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій, де фармацевтично прийнятний носій являє собою ад'ювант, вибраний із групи, яка складається з гідроксиду алюмінію, фосфату алюмінію, сапонінів, емульсії вода-в-маслі, емульсії масло-в-воді, емульсії вода-в-маслі-в- воді, полімерів акрилової або метакрилової кислоти, співполімерів малеїнового ангідриду й алкенільного похідного, ад'ювантної системи РІВІ, блокспівполімеру, ЗАЕ-М, монофосфорил-ліпіду А, авридин ліпід- аміну, термолабільного ентеротоксину з Е. соїї (рекомбінантного або іншого), холерного токсину,
ІМ5 1314, мурамілдипептиду і їх комбінацій. Вказана вакцина може містити також один або 60 декілька антигенів М. пуорпештопіає. Крім того, один або декілька антигенів мікоплазм із вказаних видів мікоплазм може являти собою цільний інактивований бактерин, вказаний вище в даному описі.
Іншим прикладом ад'юванта є сполука, вибрана з полімерів акрилової або метакрилової кислоти й співполімерів малеїнового ангідриду й алкенільного похідного. Переважними ад'ювантами є полімери акрилової або метакрилової кислоти, зшиті, насамперед із простими поліалкеніловими ефірами цукрів або поліспиртів. Такі сполуки позначають як карбомер (Рпатеигора, т. 8, Мо 2, червень 1996 р.). Фахівець у даній галузі може також почерпнути з О5
Мо 2909462 опис вказаних акрилових полімерів, зшитих з полігідроксилованою сполукою, що має принаймні З гідроксильні групи, переважно не більше 8, при цьому атоми водню принаймні в трьох гідроксилах заміщені ненасиченими аліфатичними радикалами, що мають принаймні 2 атоми вуглецю. Переважними радикалами є радикали, які містять від 2 до 4 атомів вуглецю, наприклад, вініли, аліли й інші ненасичені групи етиленового ряду. Ненасичені радикали можуть самі містити інші замісники, такі як метил. Найбільш придатними є продукти, які продаються за назвою САКВОРОЇ Ф; (фірма ВЕ Сооагіспй, шт. Огайо, США). Вони являють собою полімери акрилової кислоти, зшиті із простими поліалкеніловими ефірами, або дивінілгліколем, або зшиті з алілсахарозою або з алілпентаеритритом. З них можна відзначити САКВОРОЇ Ф 974Р, 934Р і 971Р. Найбільш переважним є застосування САКВОРОЇ Ф 971Р.
Переважно ад'ювант додають у кількості, що становить від приблизно 100 мкг до приблизно 10 мг на дозу. Ще більш переважно ад'ювант додають у кількості від приблизно 100 мкг до приблизно 10 мг на дозу. Ще більш переважно ад'ювант додають у кількості від приблизно 500 мкг до приблизно 5 мг на дозу. Ще більш переважно ад'ювант додають у кількості від приблизно 750 мкг до приблизно 2,5 мг на дозу. Найбільш переважно ад'ювант додають у кількості приблизно 1 мг на дозу.
Відповідно до одного з об'єктів винаходу фармацевтично прийнятний носій являє собою емульсію вода-в-маслі або карбомер. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів
М. Нуотіпів; і один або декілька антигенів М. Ннуозупоміає; і 6) фармацевтично прийнятний носій, де фармацевтично прийнятний носій являє собою емульсію вода-в-маслі-в-воді або карбомер.
Вказана вакцина може містити також один або декілька антигенів М. пПуорпештопіає. Крім того, один або декілька антигенів мікоплазм із вказаних видів мікоплазм може являти собою цільний інактивований бактерин, вказаний вище в даному описі.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу емульсія вода-в-маслі-в-воді являє собою
Монтанід ІЗА20О7 МО або САКВОРОЇФ. Монтанід ІЗА207 МО являє собою ад'ювант, що складається із складних олеїнових ефірів безводного маніту в розчині немінерального масла, і її створюють для одержання емульсій вакцин типу вода-в-маслі-в-воді. Монтанід ІЗА207 МО добре відомий фахівцеві в даній галузі. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, що містить а) один або декілька антигенів
М. Нуотіпів; і один або декілька антигенів М. Ннуозупоміає; і 6) фармацевтично прийнятний носій, де фармацевтично прийнятний носій являє собою Монтанід ІБА207 МО або САКВОРОЇ Ф. Як відзначалося вище, вказана вакцина може містити також один або декілька антигенів М. пуорпешитопіає. Крім того, один або декілька антигенів мікоплазм із вказаних видів мікоплазм може являти собою цільний інактивований бактерин, вказаний вище в даному описі.
Даний винахід стосується також імуногенної композиції, отриманої за допомогою способу, що полягає в тому, що а) культивують мікоплазматичні бактерії, вибрані із групи, яка складається з М. Нуотіпі5, М. нуорпеитопіає і М. пуозупоміає, у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують один або декілька антигенів вказаних мікоплазматичних бактерій; і в) додають фармацевтично прийнятний носій.
Поняття "культивування" відоме фахівцеві в даній галузі. Поняття стосується розмноження клітин у культурі за межами організму. Зокрема, поняття "культивування" стосується розмноження клітин за межами організму у клітинній системі.
Поняття "клітинна система" відоме фахівцеві в даній галузі. Зокрема, "клітинна система" являє собою клітинну систему іп міго для культивування мікроорганізму, такого, наприклад, як мікоплазматична бактерія. Вказана клітинна система містить клітини-хазяї й середовище для культури клітин, придатне для розмноження вказаних клітин за межами організму. Зокрема, клітини-хазяї можуть бути чутливими або нечутливими до зараження мікоплазматичними бактеріями. Вказані клітини-хазяї можуть бути присутні у вигляді живих клітин, в інактивованій формі або у вигляді клітинних фрагментів. Переважно вказані клітини-хазяї є чутливими до зараження мікоплазматичними бактеріями. Клітини-хазяї, які можна застосовувати для втілення на практиці способу, представленого в даному описі, включають (але, не обмежуючись тільки 60 ними) клітини Мадин-Дарбі епітелію нирки собаки (МОСК) (наприклад, клітини Мадин-Дарбі епітелію нирки собаки, депоновані в Американській колекції тканинних культур під реєстраційним номером АТСС ССІ-34 або АТСС СКІ-2285) або клітини МеоСоу (наприклад, депоновані в Американській колекції тканинних культур під реєстраційним номером АТОСС СК - 1696). Прийнятні середовища для культивування клітин відомі фахівцеві в даній галузі й надходять у продаж. Вони можуть містити живильні речовини, солі, фактори росту, антибіотики, сироватку (наприклад, сироватку плода корови) і рН-індикатори (наприклад, феноловий червоний).
Під поняття "система на основі еукаріотичних клітин" підпадає система, що містить первинні еукаріотичні клітини й еукаріотичні клітини, виведені з багатоклітинних організмів, таких як рослини або тварини. Крім того, система на основі еукаріотичних клітин включає еукаріотичні одноклітинні організми (які називають також мікроорганізмами), наприклад, бактерії або гриби, включаючи дріжджі. Однак, як повинно бути очевидно, еукаріотичні клітини відрізняються від мікоплазматичних бактерій.
Поняття "низький вміст сироватки" стосується зниженої кількості сироватки, що додається для культивування мікоплазматичних бактерій у систему на основі еукаріотичних клітин, у порівнянні з кількістю сироватки, яку використовують для культивування мікоплазматичних бактерій цих же видів у безклітинній системі культивування. Кількість сироватки для культивування мікоплазматичних бактерій у системі на основі еукаріотичних клітин у порівнянні з кількістю сироватки для культивування мікоплазматичних бактерій у безклітинній системі культивування знижують принаймні на 10 95, переважно принаймні на 20 95, більш переважно принаймні на 30 95, ще більш переважно принаймні на 40 95, ще більш переважно принаймні на 50 95, ще більш переважно принаймні на 60 95, ще більш переважно принаймні на 70 95, ще більш переважно принаймні на 8095, ще більш переважно принаймні на 90 95, ще більш переважно принаймні на 95 95, ще більш переважно принаймні на 96 95, ще більш переважно принаймні на 97 95, ще більш переважно принаймні на 98 95, ще більш переважно принаймні на 99 95, найбільш переважно на 100 95. Таким чином, повинно бути очевидно, що згідно із даним винаходом мікоплазматичні бактерії найбільш переважно культивувати в системі на основі еукаріотичних клітин, що зовсім не містить яку-небудь сироватку.
Поняття "безклітинна система культивування" у контексті даного опису стосується системи
Зо культивування, яка не включає які-небудь клітини крім мікоплазматичних бактерій.
Переважні кількості сироватки для культивування мікоплазматичних бактерій у системі на основі еукаріотичних клітин включають концентрації сироватки, що становлять приблизно від 0 до 10 об. 95, більш переважно приблизно від 1 до 9 об. 95, ще більш переважно приблизно від 1 до 8 об. 95, ще більш переважно приблизно від 1 до 7 об. 95, ще більш переважно приблизно від 1 до 6 об. 95 і найбільш переважно приблизно від 2 до 5 об. 9».
Переважні кількості сироватки для культивування мікоплазматичних бактерій у системі на основі еукаріотичних клітин, що містить МОСК-клітини, включають концентрації сироватки, що становлять приблизно від 0 до 6 об. 95, більш переважно приблизно від 1 до 5 об. 95, ще більш переважно приблизно від 2 до 4 об. 95, ще більш переважно приблизно від 2 до З об. 95 і найбільш переважно приблизно 2 об. 95.
Переважні кількості сироватки для культивування мікоплазматичних бактерій у системі на основі еукаріотичних клітин, що містить МеоеСоу-клітини, включають концентрації сироватки, що становлять приблизно від 0 до 10 об. 95, більш переважно приблизно від 1 до 9 об. 95, ще більш переважно приблизно від 1 до 8 об. 95, ще більш переважно приблизно від 1 до 7 об. 95, ще більш переважно приблизно від 4 до 6 об. 95 і найбільш переважно приблизно 5 об. 95.
Згідно із даним винаходом слід розуміти, що еукаріотичні клітини або система на основі еукаріотичних клітин повинні інфікуватися мікоплазматичними бактеріями. Вказане зараження приводить до розмноження мікоплазматичних бактерій у системі на основі еукаріотичних клітин.
Зараження еукаріотичних клітин мікоплазматичними бактеріями й умови постінкубаційного періоду, що дозволяють здійснювати розмноження мікоплазматичних бактерій, добре відомі фахівцеві в даній галузі. Однак переважно після трансфекції клітини інкубують протягом періоду часу, що становить аж до 21 дня, більш переважно від приблизно 2 днів до приблизно 14 днів, більш переважно від приблизно 2 днів до приблизно 8 днів, ще більш переважно від приблизно
З до 5 днів. Переважні умови інкубації включають температуру приблизно від 32 до 422С, більш переважно приблизно від 34 до 402С, ще більш переважно приблизно від 35 до 399, ще більш переважно приблизно від 36 до 382С і найбільш переважно приблизно 372С. Переважні умови інкубації включають також концентрацію СО, що становить приблизно від 2 до 895, більш переважно приблизно від З до 7 96, ще більш переважно приблизно від 4 до 6 95 і найбільш переважно приблизно 595. Переважно еукаріотичні клітини обстежують після трансфекції 60 відносно характеристичних змін, таких як тенденції відносно клітинної щільності, зниження життєздатності, включаючи цитопатичні дії під час постінкубаційного періоду й зміна кольору середовища через зміну рН.
Поняття "одержання" включає збір, виділення, очищення та/або складання композиції (наприклад, інактивацію та/або приготування суміші) антигену.
Поняття "збір" стосується збору або витягу антигену мікоплазматичних бактерій із трансфікованої системи на основі еукаріотичних клітин. Для витягу вказаного мікоплазматичного антигену можна застосовувати будь-який загальноприйнятий метод, відомий у даній галузі, наприклад, будь-який метод розділення. Методи, добре відомі в даній галузі, включають центрифугування або фільтрацію, наприклад, з використанням напівпроникної мембрани, що має певний розмір пор.
Поняття "виділення" включає стадію виділення мікоплазматичного антигену. Методи виділення антигенів мікоплазматичних бактерій з інфікованої системи на основі еукаріотичних клітин відомі фахівцеві в даній галузі. Вказані методи являють собою фізичні та/або хімічні методи, включаючи (але, не обмежуючись тільки ними) цикли заморожування-відтавання, обробку ультразвуком і т.п.
Методи "очищення" антигенів з ізоляту добре відомі фахівцям у даній галузі, наприклад, являють собою методи, описані в: Ргоїеїп ригійсайоп тейшйоав5-а ргасіїса! арргоасі, під ред. Е.М.
Нагттіз і 5. Апдаї, вид-во ІВІ. Ргев55 аї Охгога Опімегейу Ргез5. Вказані методи включають (але, не обмежуючись тільки ними) розділення шляхом центрифугування та/або фільтрації, осадження, витісну хроматографію (гель-фільтрацію), афінну хроматографію, метал-хелатну хроматографію, іонообмінну хроматографію, ковалентну хроматографію, хроматографію гідрофобних взаємодій і т.п. Антиген можна одержувати в очищеній (чистій) формі або у формі, вільній або практично вільній від інших клітинних матеріалів або культурального середовища і т.д. Після вказаного виділення та/або очищення антиген має чистоту, що становить принаймні 80 95, переважно 80 95-90 95, більш переважно 90 95-97 95, найбільш переважно більше 97 95 аж до абсолютно чистотою форми без будь-якого забруднення.
Згідно з іншим об'єктом винаходу поняття "одержання" у контексті даного опису може включати також додаткові стадії остаточної обробки типу стадій додавання буфера, інактивації, нейтралізації й т.п.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм, вибраних із групи, що включає М. ПНуотіпів, М.
Нуорпеитопіає, М. Нуозупоміає і будь-які їх комбінації, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нуогпіпіз, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нуозупоміає, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпеитопіає, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуогпіпіз і М. пуорпештопіає, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуогпіпі5 і М. Ннуозупоміає, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі бо еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, що містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нуогпіпі5, М. пуорпештопіає і М. Ннуозупоміає, де один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Один або декілька антигенів мікоплазм інактивують, переважно за допомогою будь-якого з методів, вказаних вище в даному описі. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм інактивують, переважно за допомогою будь-якого з методів, вказаних вище в даному описі. Таким чином, наступним об'єктом даного винаходу є імуногенна композиція, отримана способом, який полягає у тому, що а) культивують мікоплазматичні бактерії, вибрані із групи, яка складається з М. пуогіпі5, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-яких їх комбінацій у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують один або декілька антигенів вказаних мікоплазматичних бактерій, у якому стадія одержання включає інактивацію одного або декількох антигенів мікоплазм; і в) додають фармацевтично прийнятний носій. Стадію інактивації можна здійснювати за допомогою будь-якого методу, вказаного вище в даному описі. Відповідно до одного з об'єктів винаходу вказана інактивація приводить до одержання цільних інактивованих бактеринів мікоплазматичних бактерій. Переважно вказану інактивацію мікоплазматичних бактерій здійснюють за допомогою формаліну, у результаті антиген мікоплазм являє собою цільний інактивований формаліном бактерин. Відповідно до одного з об'єктів винаходу антигени мікоплазм являють собою цільний інактивований бактерин
М. Нуотіпі5, цільний інактивований бактерин М. Нуорпештопіає, цільний інактивований бактерин М. пуозупоміаеє, цільний інактивований бактерин М. Нуогпіпіз ії М. пуозупоміає або цільний інактивований бактерин М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає, або цільний інактивований бактерин М. пуопіпів і М. пуорпештопіає, або цільний інактивований бактерин М. пуотіпів, М.
Зо пуорпешитопіає і М. пуозупоміає. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм в імуногенній композиції являють собою цільні інактивовані бактерини, переважно цільні інактивовані формаліном бактерини.
Відповідно до одного з об'єктів винаходу антиген мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де сироватка не містить свинячої сироватки. Оскільки мікоплазматичні бактерії М. пуопіпі5, М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає є патогенами свиней, свиняча сироватка може містити компоненти, які можуть впливати на антигени мікоплазм у композиції, запропонованої в даному винаході, тому в переважному об'єкті винаходу застосовують не свинячу сироватку або зовсім не застосовують сироватку. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, отримана способом, який полягає у тому, що а) культивують мікоплазматичні бактерії, вибрані із групи, що включає М. пуогппіпі5, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-які їх комбінації в системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують антиген вказаних мікоплазматичних бактерій; і в) додають фармацевтично прийнятний носій, у якому система на основі еукаріотичних клітин вільна від свинячої сироватки.
Як відзначалося вище, система на основі еукаріотичних клітин може містити клітини лінії
МОСК або клітини лінії МеСоу. Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонований спосіб одержання імуногенної композиції, що полягає в тому, що а) культивують мікоплазматичні бактерії, вибрані із групи, яка складається з М. Нуогтіпів, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-яких їх комбінацій, у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують антиген вказаних мікоплазматичних бактерій; і в) додають фармацевтично прийнятний носій, при цьому система на основі еукаріотичних клітин містить клітини лінії МОСК або клітини лінії МеСоу.
Згідно з наступним об'єктом винаходу антиген мікоплазм, що входить в імуногенну композицію, одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказаний антиген мікоплазм має підвищену імуногенність в порівнянні з таким же антигеном, отриманим з мікоплазм, які культивували в безклітинній системі для культивування.
У контексті даного опису поняття "підвищена імуногенність" означає, що імунологічна відповідь, яка викликається імуногенною композицією, що містить антиген, що представляє інтерес, підвищується в порівнянні із застосовуваною як контроль імуногенною композицією, що бо містить такий же антиген, де антиген застосовуваної як контроль імуногенної композиції одержують із мікоплазматичних бактерій, культивованих у безклітинній системі для культивування.
Поняття "підвищений" означає, що клітинна та/або гуморальна імунна відповідь підвищується принаймні на 10 95, переважно принаймні на 20 95, більш переважно принаймні на 30 95, ще більш переважно принаймні на 40 95, ще більш переважно принаймні на 50 95, ще більш переважно принаймні на 75 95, найбільш переважно принаймні на 100 95 у порівнянні з клітинною та/або гуморальною імунною відповіддю, яка викликається застосовуваною як контроль імуногенною композицією, що містить такий же антиген, де антиген застосовуваної як контроль імуногенної композиції одержують із мікоплазматичних бактерій, культивованих у безклітинній системі культивування. Звичайному фахівцеві в даній галузі повинно бути очевидно, як вимірювати клітинну та/або гуморальну імунну відповідь. Зокрема, такому фахівцеві в даній галузі повинно бути очевидно, що необхідно або порівнювати клітинну імунну відповідь імуногенної композиції, що представляє інтерес, із клітинною відповіддю контрольної композиції, або гуморальну імунну відповідь імуногенної композиції, що представляє інтерес, з гуморальною імунною відповіддю контрольної композиції, але не клітинну імунну відповідь імуногенної композиції, що представляє інтерес, з гуморальною імунною відповіддю контрольної композиції й навпаки. Крім того, клітинну імунну відповідь можна вимірювати, наприклад, шляхом оцінки активації цитотоксичних Т-клітин, що представляє/, що представляють інтерес імуногенною композицією /антигеном. Гуморальну імунну відповідь можна вимірювати, наприклад, шляхом оцінки кількості антигсенспецифичних антитіл, що виробилися в процесі введення імуногенної композиції, що містить вказаний антиген, тварині. Клітинну та/або гуморальну імунну відповідь можна вимірювати, наприклад, шляхом застосування мишиної моделі, котячої моделі, створеної на коровах моделі або створеної на свинях моделі. Однак аналізи, описані в прикладі 4 і 5, можна застосовувати як референс-аналізи для виявлення імунної відповіді проти М. пуопіпів і М. пуорпеитопіає.
Поняття "такий же (той же самий) антиген" означає що природа антигенів є ідентичною. Так, якщо антиген мікоплазм, що входить в імуногенну композицію, отриману в системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, являє собою цільний інактивований бактерин М. пуогпіпі5, то поняття "такий же антиген" означає, що антиген мікоплазм, отриманий
Зо у безклітинній системі, являє собою також цільний інактивований бактерин М. пуотпіпів. Крім того, якщо антиген мікоплазм, що входить в імуногенну композицію, отриману в системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, одержують або очищають за допомогою конкретного методу, то поняття "такий же антиген" означає, що антиген мікоплазм із безклітинної системи одержують або очищають за допомогою такого ж методу.
Важливо відзначити, що згідно з експериментальними даними, отриманими при створенні даного винаходу, антигени мікоплазм, отримані вказані вище методом, мають підвищену імуногенність в порівнянні з антигенами мікоплазматичних бактерій, які культивували в безклітинній системі культивування. Зокрема, при застосуванні отриманих на основі МОСК що містять М. пуотіпі5 вакцин встановлений більш ранній початок сероконверсії, більша кількість серопозитивних свиней і більш високі серологічні титри.
Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, отримана способом, який полягає у тому, що а) культивують мікоплазматичні бактерії, вибрані із групи, яка складається з М. Нуогтпіпі5, М. пуорпеитопіає, М.
Ппуозупоміає і будь-яких їх комбінацій, у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують антиген вказаних мікоплазматичних бактерій; і в) додають фармацевтично прийнятний носій, де вказана імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати методами інактивації, вказаними в даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуотіпіх, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з бо наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нпуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуорпештопіає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуогпіпіз і М. пуорпештопіає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною
Зо композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації вказаних у даному описі.
Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуогпіпіє і М. пуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації вказаних у даному описі.
Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній систем для культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм бо представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації вказаних у даному описі.
Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає і М. Ннуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, яка містить такий же антиген, отриманий з мікоплазм, культивованих у безклітинній системі культивування. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інакстивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Згідно з наступним об'єктом винаходу антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, при цьому імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин.
Поняття "компонента еукаріотичних клітин" включає як цільні клітини, так ії фрагменти вказаних еукаріотичних клітин. Поняття "фрагмент" стосується будь-яких частин еукаріотичної клітини, таких як частини клітинної мембрани або внутрішньоклітинні органели, у тому числі цільні органели або їх компоненти. Однак поняття фрагмент стосується також будь-якого компонента вказаної еукаріотичної клітини, такому як ліпіди, білки, цукри, ДНК, РНК і тлп., а також їх комбінації. Крім того, компоненти еукаріотичних клітин і антигену мікоплазм можуть в імуногенній композиції або знаходитися окремо один від одного, або бути приєднані один до одного, або знаходитися у вигляді комбінації вказаних положень.
Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована
Зо імуногенна композиція, отримана способом, який полягає у тому, що а) культивують мікоплазматичні бактерії, вибрані із групи, яка складається з М. Нуогтпіпі5, М. пуорпеитопіає, М.
Ппуозупоміає і будь-яких їх комбінацій, у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують антиген вказаних мікоплазматичних бактерій; і в) додають фармацевтично прийнятний носій, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин.
Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації вказаних у даному описі.
Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуотіпіх5, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нпуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний 60 інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуорпештопіає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуогпіпіз і М. пуорпештопіає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі.
Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм
Зо представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації вказаних у даному описі.
Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає і М. Ннуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де імуногенна композиція містить компоненти еукаріотичних клітин із вказаної системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інакстивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Згідно з наступним об'єктом винаходу антиген мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, при цьому вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм.
Поняття "приєднаний" стосується будь-якої взаємодії, асоціації, зв'язування, прикріплення або зшивання вказаних компонентів еукаріотичних клітин з антигеном мікоплазм. Таким чином, поняття "приєднаний" включає будь-які взаємодії, включаючи непрямі й прямі, необоротні або оборотні, фізичні й хімічні, електростатичні та/або ковалентні зв'язки. Таким чином, повинно бути очевидно, що компоненти еукаріотичних клітин, наприклад, можуть бути зв'язані з антигеном мікоплазм. Однак слід розуміти, що компоненти еукаріотичних клітин можуть також бути зшиті з антигеном мікоплазм. Вказане зшивання можна одержувати декількома методами, відомими фахівцеві в даній галузі, наприклад, шляхом обробки формальдегідом і т.п.
Таким чином, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонована імуногенна композиція, отримана способом, що полягає в тому, що а) культивують бо мікоплазматичну бактерію, вибрану із групи, яка складається з М. Нпуогтіпі5, М. пуорпеитопіає,
М. пуозупоміає і будь-яких їх комбінацій, у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки; б) одержують антиген вказаних мікоплазматичних бактерій; і в) додають фармацевтично прийнятний носій, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інакстивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуотіпіз, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нпуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуорпештопіає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуогпіпіз і М. пуорпештопіає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Ппуогпіпіє і М. пуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний бо інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпештопіає і М. пуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає і М. Ннуозупоміає, у якій один або декілька антигенів мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки. Крім того, згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин. Згідно з наступним об'єктом винаходу всі антигени мікоплазм являють собою інактивовані бактерини, переважно інактивовані формаліном бактерини.
Ї наступним варіантом здійснення даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм, вибраних із групи, яка складається з М. пуотіпів, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-яких їх комбінацій, у якій один або декілька антигенів
Зо мікоплазм одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки.
Таким чином, наступним об'єктом даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів, вибраних із групи, яка складається з М. Нуогіпі5, М. пуорпеитопіає і М.
Ппуозупоміає; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Пуогпіпіб; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інакстивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуозупоміає; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інакстивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпештопіає; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інакстивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один 60 або декілька антигенів мікоплазм М. Пуогіпізх і М. Ппуорпештопіає; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин.
Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. Нуогппіпі5 і М. пуозупоміає; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуорпешйтопіає і М. пуозупоміае; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин.
Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Таким чином, одним з об'єктів даного винаходу є імуногенна композиція, яка містить один або декілька антигенів мікоплазм М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає і М. Нуозупоміає; і один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин. Згідно з наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Вказаний цільний інактивований бактерин можна одержувати за допомогою методів інактивації, вказаних у даному описі. Переважно вказаний цільний інактивований бактерин являє собою інактивований формаліном бактерин.
Даний винахід стосується також способу імунізації суб'єкта, що полягає в тому, що вводять суб'єктові будь-яку з імуногенних композицій, вказаних у даному описі.
Поняття "імунізація" стосується активної імунізації шляхом введення імуногенної композиції суб'єкту, який підлягає імунізації, що приводить до імунологічної відповіді на антиген, включений у вказану імуногенну композицію.
Переважно імунізація приводить до зменшення захворюваності, зв'язаної з конкретною мікоплазматичною інфекцією в череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з конкретною мікоплазматичною інфекцією.
Наступним об'єктом даного винаходу є спосіб імунізації суб'єкта за допомогою будь-якої з імуногенних композицій, представлених у даному описі, що полягає в тому, що вводять вказаному суб'єктові імуногенну композицію, запропоновану у винаході.
Вказана імуногенна композиція містить а) один або декілька антигенів М. пуозупоміає і один або декілька антигенів, вибраних із групи, яка складається з М. пуорпештопіає і М. пуогіпів і їх комбінацій; і б) фармацевтично прийнятний носій.
Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція, запропонована у винаході, містить: а) один або декілька антигенів М. пуогпіпі5 і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій. Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає.
Якщо імуногенну композицію одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, вказаної в даному описі, то імуногенна композиція, як правило, може містити один або декілька антигенів мікоплазматичної бактерії, вибраної із групи, яка складається з М. Ппуогпіпіз, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-яких їх комбінацій, як додатково буде описано нижче. Згідно з наступним об'єктом винаходу, вказаному вище, вказана імуногенна композиція може містити один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин додатково до одного або декількох антигенів мікоплазматичної бактерії, вибраної із групи, яка складається з М. Ппуогпіпі5, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-якої їх комбінації.
Згідно 3 наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм, застосовуваних для імунізації суб'єкта, який потребує цього, являють собою цільний інактивований бактерин. Згідно із цим об'єктом даного винаходу будь-який один з антигенів мікоплазм являє собою цільний інактивований бактерин. Однак згідно із цим об'єктом даного винаходу мається на увазі також, що всі антигени в імуногенній композиції, запропонованій в даному винаході, являють собою цільні інактивовані бактерини, тобто антиген М. Нуогпніпів, бо антиген М. Нуозупоміає та/або антигени М. пуорпештопіае представляє (ють) собою цільні інактивовані бактерини. Вказані цільні інактивовані бактерини можна одержувати за допомогою методів інактивації, які вказані в даному описі. Переважно вказані цільні інактивовані бактерини являють собою інактивовані формаліном бактерини.
Переважно така обробка приводить до зменшення захворюваності, зв'язаної з конкретною мікоплазматичною інфекцією в череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з конкретною мікоплазматичною інфекцією.
Згідно з наступним об'єктом винаходу імунізація тварини, яка цього потребує, імуногенними композиціями, представленими в даному описі, приводить до попередження зараження тварини мікоплазматичною інфекцією. Ще більш переважно імунізація приводить до ефективної тривалої імунологічної відповіді проти мікоплазматичної інфекції. Як повинно бути очевидно, вказаний період часу повинен становити більше 2 місяців, переважно більше З місяців, більш переважно більше 4 місяців, більш переважно більше 5 місяців, більш переважно більше 6 місяців. Як повинно бути очевидно, імунізація не може мати ефективність у відношенні всіх імунізованих тварин. Однак згідно з винаходом потрібно, щоб значна частина тварин у череді була ефективно імунізована.
Переважно в даному контексті під чередою тварин маються на увазі тварини, у яких у нормі, тобто без імунізації можуть розвиватися клінічні ознаки, які, як правило, викликаються або асоційовані з мікоплазматичною інфекцією. Фахівець у даній галузі легко може визначити чи є тварини в череді ефективно імунізованими. Переважно імунізація може розглядатися як ефективна, якщо частота зустрічальності або серйозність клінічних ознак принаймні в 33 95, принаймні в 50 95, принаймні в 60 95, принаймні в 70 95, принаймні в 80 95 або принаймні в 90 95 особин даної череди знизилися принаймні на 10 95, більш переважно принаймні на 20 95, ще більш переважно по меншій мері на 30 95, ще більш переважно принаймні на 40 95, ще більш переважно принаймні на 50 95, ще більш переважно принаймні на 60 95, ще більш переважно принаймні на 70 95, ще більш переважно принаймні на 80 95, ще більш переважно принаймні на 9095 і найбільш переважно принаймні на 9595 у порівнянні із тваринами, яких або не імунізували, або імунізували з використанням імуногенної композиції, відомої з рівня техніки, що існує до створення даного винаходу, і після цього заражали конкретною мікоплазматичною бактерією.
Зо В одному з об'єктів даного винаходу тварини вибирають із групи, що включає свиней, велику рогату худобу, кішок і собак. Таким чином, одним з об'єктів винаходу є спосіб імунізації тварини, що полягає в тому, що вводять тварині імуногенну композицію, запропоновану у винаході, де тварину вибирають із групи, що включає свиней, велику рогату худобу, кішок і собак.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу імуногенну композицію вводять однократно.
Таким чином, наступним об'єктом винаходу є спосіб імунізації тварини, що полягає в тому, що вводять тварині імуногенну композицію, запропоновану у винаході, у якому імуногенна композиція має ефективність відносно зниження захворюваності, зв'язаної з конкретною мікоплазматичною інфекцією в череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з конкретною мікоплазматичною інфекцією, після введення однієї дози вказаної імуногенної композиції вказаній тварині. Очевидно, що вказану одну дозу вводять тільки один раз. Як продемонстровано в прикладах 2 і 3, встановлено, що імуногенна композиція, представлена в даному описі, має ефективність після введення у вигляді однієї дози тварині, яка потребує цього.
Так, коли вказаний спосіб полягає в тому, що вводять один або декілька антигенів М. пуогпіпі5, то вказана імуногенна композиція є ефективною відносно зниження захворюваності, зв'язаною інфекцією М. Пуогпіпіх у череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з інфекцією М. пуогппіпі5. Коли вказаний спосіб полягає в тому, що вводять один або декілька антигенів М. пуорпештопіає, то згідно з наступним об'єктом винаходу композиція є ефективною відносно зниження захворюваності, зв'язаною інфекцією М. пуорпештопіаеє у череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з інфекцією М. пуорпештопіає. І в цьому варіанті один або декілька антигенів мікоплазм, що підлягають введенню згідно зі способом, запропонованим у даному винаході, можуть являти собою цільні інактивовані бактерини представлених вище в даному описі видів мікоплазм.
Переважно одна доза має загальний об'єм приблизно до 0,5 до 2,5 мл, більш переважно приблизно від 0,6 до 2,0 мл, ще більш переважно приблизно від 0,7 до 1,75 мл, ще більш переважно приблизно від 0,8 до 1,5 мл, ще більш переважно приблизно від 0,9 до 1,25 мл, при цьому найбільш переважною є одна доза об'ємом 1,0 мл.
Однак імуногенну композицію можна вводити два або більшу кількість разів, при цьому бо першу дозу вводять до введення другий (бустерної) дози. Переважно другу дозу вводять принаймні через 15 днів після першої. Більш переважно другу дозу вводять через 15-40 днів після першої дози. Ще більш переважно другу дозу вводять принаймні через 17 днів після першої дози. Ще більш переважно другу дозу вводять через 17-30 днів після першої дози. Ще більш переважно другу дозу вводять принаймні через 19 днів поле першої дози. Ще більш переважно другу дозу вводять через 19-25 днів після першої дози. Найбільш переважно другу дозу вводять принаймні через 21 день після першої дози. Згідно із переважним об'єктом винаходу застосовують дворазову схему введення, при цьому першу й другу дози імуногенної композиції вводять в однаковій кількості. Переважно кожна доза включає переважні вказані вище кількості, при цьому найбільш переважною є перша й друга доза об'ємом 1 мл. Крім схеми на основі першої й другої доз в альтернативному варіанті здійснення винаходу передбачається застосування додаткових наступних доз. Наприклад, згідно із цими об'єктами винаходу можна вводити третю, четверту або п'яту дозу. Переважно при застосуванні схем, що включають третю, четверту й п'яту дозу, їх вводять у такій же кількості, що й першу дозу, з часовими рамками між дозами, що узгоджуються із вказаним вище проміжком часом між введенням першої й другої доз.
Імуногенну композицію переважно застосовують місцево або системно. Прийнятними звичайно застосовуваними шляхами введення є оральне або парентеральне введення, таке як інтраназальне, внутрішньовенне, внутрішньом'язове, внутрішньоочеревинне, підшкірне введення, а також введення шляхом інгаляції. Однак залежно від природи й механізму дії сполуки імуногенну композицію можна вводити також іншими шляхами.
Як правило, коли застосовують бактеріальний антиген, такий як мікоплазматичний бактерин, імуногенна композиція містить від приблизно 103 до приблизно 1092 колонієутворюючих одиниць (КУЄ) бактеріального антигену на дозу, переважно від приблизно 107 до приблизно 107 КУО бактеріального антигену на дозу, більш переважно від приблизно 105 до приблизно 105 КУО бактеріального антигену на дозу. Якщо в імуногенній композиції застосовують інактивований бактерин, то величина КУО стосується кількості мікоплазматичних бактерій до інактивації.
Наприклад, імуногенну композицію, запропоновану в даному винаході, яка містить антигени
М. пуорпештопіає, переважно застосовують у кількостях, що становлять від приблизно 102 до приблизно 10!2 КУО на дозу, переважно від приблизно 103 до приблизно 107 КУО на дозу, ще
Ко) більш переважно в кількості від приблизно 107 до приблизно 103 КУО на дозу, найбільш переважно в кількості від приблизно 107 до приблизно 107 КУО на дозу. Імуногенну композицію, запропоновану в даному винаході, яка містить антигени М. пуогпіпіз, переважно застосовують у кількостях, що становлять від приблизно 102 до приблизно 1019 КУО на дозу, переважно від приблизно 103 до приблизно 109 КУО на дозу, ще більш переважно в кількості від приблизно 107 до приблизно 108 КУО на дозу, найбільш переважно в кількості від приблизно 105 до приблизно 107 КУО на дозу. Імуногенну композицію, запропоновану в даному винаході, яка містить антигени М. пуозупоміає, переважно застосовують у кількостях, що становлять від приблизно 102 до приблизно 1072 КУО на дозу, переважно від приблизно 103 до приблизно 109 КУО на дозу, ще більш переважно в кількості від приблизно 107 до приблизно 109 КУО на дозу, найбільш переважно в кількості від приблизно 105 до приблизно 107 КУО на дозу.
Таким чином, наступним об'єктом винаходу є спосіб імунізації тварини, що полягає в тому, що вводять тварині імуногенну композицію, запропоновану у винаході, у якому імуногенна композиція має ефективність відносно зниження захворюваності, зв'язаної з конкретною мікоплазматичною інфекцією в череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з конкретною мікоплазматичною інфекцією, після введення однієї дози вказаної імуногенної композиції вказаній тварині, де вказана одна доза містить від 102 до приблизно 10792 КУО мікоплазматичних бактерій на дозу.
Одним з об'єктів даного винаходу є спосіб імунізації тварини, що потребує цього, що приводить до підвищення параметра ефективності, вибраного із групи, що включає вкорочення тривалості бактеріємії, зменшення бактеріального навантаження, або їх комбінацію в порівнянні із твариною з неімунізованої контрольної групи цього ж виду.
Поняття "укорочення тривалості бактеріємії" означає, що тривалість бактеріємії у тварини, імунізованої імуногенною композицією, коротшає принаймні на 1095, більш переважно принаймні на 20 95, ще більш переважно принаймні на 30 95, ще більш переважно принаймні на 40 95, ще більш переважно принаймні на 50 95, ще більш переважно принаймні на 60 95, ще більш переважно по меншій мері на 70 95, ще більш переважно принаймні на 80 95, ще більш переважно принаймні на 9095 і найбільш переважно принаймні на 100 95 у порівнянні із тваринами, яких не імунізують або яких імунізують імуногенною композицією, відомою з рівня техніки, що існував до створення даного винаходу, і після цього заражають конкретною бо мікоплазматичною бактерією. Як повинно бути очевидно, тривалість бактеріємії визначають із використанням репрезентативної кількості тварин у кожній групі (неімунізованій і імунізованій групі) перед їх порівнянням.
Поняття "зменшення бактеріального навантаження" означає, що бактеріальне навантаження мікоплазматичними бактеріями дикого типу у тварини, інфікованої мікоплазматичними бактеріями дикого типу, знижується принаймні на 10 95, більш переважно принаймні на 20 95, ще більш переважно принаймні на 30 95, ще більш переважно принаймні на 40 95, ще більш переважно принаймні на 50 95, ще більш переважно принаймні на 60 95, ще більш переважно принаймні на 7095, ще більш переважно принаймні на 8095, ще більш переважно принаймні на 9095 і найбільш переважно принаймні на 100 95 після імунізації імуногенною композицією, запропонованою в даному винаході, у порівнянні із тваринами, яких не імунізують або яких імунізують імуногенною композицією, відомою з рівня техніки, що існував до створення даного винаходу, і після цього заражають конкретною мікоплазматичною бактерією. Як повинно бути очевидно, бактеріальне навантаження визначають із використанням репрезентативної кількості тварин у кожній групі (неімунізованій і імунізованій групі) перед їх порівнянням.
Таким чином, наступним об'єктом даного винаходу є спосіб імунізації тварини, що полягає в тому, що вводять тварині, що потребує цього, імуногенну композицію, запропоновану в даному винаході, що приводить до поліпшення параметра ефективності, вибраного із групи, що включає вкорочення тривалості бактеріємії, зменшення бактеріального навантаження, або їх комбінацію в порівнянні із твариною з неімунізованої контрольної групи цього ж виду.
Відповідно до одного з об'єктів даного винаходу спосіб можна застосовувати для тварини віком приблизно З тижні. Так, відповідно до одного з об'єктів винаходу в даній заявці запропонований спосіб імунізації особини, що полягає в тому, що обробляють тварину імуногенною композицією, запропонованою у винаході, де спосіб можна застосовувати для тварини віком приблизно З тижні.
Важливо відзначити, що експериментальні дані, представлені в даному винаході, свідчать про ефективність імуногенної композиції для поросят віком приблизно З тижні.
Переважно вказану тварину слід імунізувати у віці від 1 дня до 21 дня, більш переважно вказану тварину слід імунізувати у віці від 1 дня до 10 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до 9 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до 8 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до 7 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до 6 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до 5 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до 4 днів, ще більш переважно у віці від 1 дня до З днів, ще більш переважно у віці від 1 або 2 дня й найбільш переважно у віці 1 день.
Таким чином, одним з об'єктів винаходу є спосіб імунізації тварини, що полягає в тому, що вводять тварині імуногенну композицію, запропоновану у винаході, для імунізації тварини, що потребує цього, де вік тварини, яка підлягає імунізації, становить від 1 дня до 21 дня.
Даний винахід стосується також будь-якої імуногенної композиції, представленої в даному описі, призначеної для застосування в будь-якому зі способів, представлених у даному описі, наприклад, для застосування для лікування та/(або профілактики мікоплазматичних інфекцій у тварини або для застосування для імунізації тварини проти мікоплазматичної інфекції.
Вказана імуногенна композиція містить а) один або декілька антигенів М. Нуозупоміає і один або декілька антигенів, вибраних із групи, яка складається з М. пПуорпештопіає, М. пуогпіпів і їх комбінації; і б) фармацевтично прийнятний носій.
Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція, запропонована у винаході, містить: а) один або декілька антигенів М. пуогпіпі5 і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій. Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає.
Якщо імуногенну композицію одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, представленої в даному описі, то імуногенна композиція, як правило, може містити один або декілька антигенів мікоплазматичної бактерії, вибраної із групи, яка складається з М. пуогпіпіх, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-якої їх комбінації, що додатково буде описано нижче. Як описано вище, згідно з іншим об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція може містити один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин крім одного або двох антигенів мікоплазматичних бактерій, вибраних із групи, яка складається з М. пуогпіпі5, М. пуорпештопіає, М. пуозупоміає і будь-якої їх комбінації.
Згідно 3 наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм, застосовуваний(их) для імунізації суб'єкта, який потребує цього, представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Згідно із цим об'єктом даного винаходу будь-який один антиген мікоплазм являє собою цільний інактивований бактерин. Однак під цей об'єкт даного винаходу 60 підпадає також варіант, коли всі антигени в імуногенній композиції, запропонованій в даному винаході, являють собою цільні інактивовані бактерини, тобто антиген М. Вуотіпі5, антиген М.
Нпуозупоміає та/або антиген М. пуорпештопіає, представляє (ють) собою цільні інактивовані бактерини. Вказані цільні інактивовані бактерини можна одержувати за допомогою методів інактивації, представлених у даному описі. Переважно вказані цільні інактивовані бактерини являють собою інактивовані формаліном бактерини.
Переважно вказане застосування приводить до зниження захворюваності, зв'язаної з конкретною мікоплазматичною інфекцією в череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з конкретною мікоплазматичною інфекцією.
Даний винахід стосується також застосування імуногенної композиції, представленої в даному описі, для лікування та/або профілактики мікоплазматичних інфекцій у суб'єкта або для імунізації суб'єкта проти мікоплазматичної інфекції.
Вказана імуногенна композиція містить а) один або декілька антигенів М. пуозупоміає і один або декілька антигенів, вибраних із групи, яка складається з М. пПуорпештопіає, М. пуогпіпів і їх комбінацій; і б) фармацевтично прийнятний носій.
Згідно з наступним об'єктом імуногенна композиція, запропонована у винаході, містить: а) один або декілька антигенів М. пуогпіпіз і один або декілька антигенів М. Нуозупоміає; і б) фармацевтично прийнятний носій. Згідно з наступним об'єктом винаходу імуногенна композиція містить також один або декілька антигенів М. пуорпештопіає.
Якщо імуногенну композицію одержують у системі на основі еукаріотичних клітин із зниженим вмістом сироватки, представленої в даному описі, то імуногенна композиція, як правило, може містити один або декілька антигенів мікоплазматичної бактерії, вибраної із групи, яка складається з М. пуотіпів, М. пуорпеитопіає, М. Нуозупоміає і будь-якої їх комбінації, що додатково буде описано нижче. Як описано вище, згідно з іншим об'єктом винаходу вказана імуногенна композиція може містити один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин крім одного або декількох антигенів мікоплазматичних бактерій, вибраних із групи, яка складається з М. Нпуотіпіх, М. пуорпештопіає, М. Нуозупоміає і будь-якої їх комбінації.
Згідно 3 наступним об'єктом винаходу один або декілька антигенів мікоплазм, застосовуваний(их) для імунізації суб'єкта, який потребує цього, представляє (ють) собою цільний інактивований бактерин. Згідно із цим об'єктом даного винаходу будь-який один антиген мікоплазм являє собою цільний інактивований бактерин. Однак під цей об'єкт даного винаходу підпадає також варіант, коли всі антигени в імуногенній композиції, запропонованій в даному винаході, являють собою цільні інактивовані бактерини, тобто антиген М. Вуотіпі5, антиген М.
Нуозупоміає та/або антигени М. пуорпештопіає, представляє (ють) собою цільні інактивовані бактерини. Вказані цільні інактивовані бактерини можна одержувати за допомогою методів інактивації, представлених у даному описі. Переважно вказані цільні інактивовані бактерини являють собою інактивовані формаліном бактерини.
Переважно вказане застосування приводить до зниження захворюваності, зв'язаної з конкретною мікоплазматичною інфекцією, у череді, або зниження серйозності клінічних ознак, які викликаються або асоційованих з конкретною мікоплазматичною інфекцією.
Приклади
Наведені нижче приклади представлені тільки з метою ілюстрації даного винаходу. Вони не повинні розглядатися, як такі, що обмежують яким-небудь способом обсяг формули винаходу.
Приклад 1
Культивування мікоплазматичних бактерій в МОСК-клітинах або МеСоу-клітині відповідно
А. Культивування М. пуогпіпі5, М. пуозупоміає і М. пуорпештопіає в МОСК-клітинах
М. нуотіпів:
Клітини МОСК, вирощені в Т75-колбі(ах) до досягнення конфлюентності, обробляли трипсином і пересівали в 5 Т150-колб (розщеплення 1:10), використовуючи середовище
МЕМ 5 95 ЕВ5. Колби інкубували при 379С--5 95 СО» до досягнення моношаром конфлюентності приблизно 95-100 95. Середовище відкидали, колби промивали двічі 1-кратним ЗФР. Потім у кожну колбу додавали 4-5 мл М. пуоптіпів (МОІ-10-100). Давали пройти зараженню в колбах в однакових умовах інкубації протягом періоду часу, що становить не менше 2 год. Після періоду зараження в кожну колбу додавали середовище для інфікування (МЕМ'-2 95 ЕВ5), попередньо нагріте приблизно до 372С, у кількості, достатній для досягнення об'єму в кожній колбі 60 мл.
Потім колбам давали пройти інкубацію до досягнення » 90 95 ЦПД (приблизно 3-7 днів). Потім збирали клітинну суспензію з кожної колби й об'єднували (пасаж п). Потім цей продукт використовували для зараження нових колб МОСкК-клітинами, що досягли 95-100 95 конфлюентності, використовуючи таку ж процедуру, що й для попереднього зараження (пасаж 60 пя1), збільшуючи кількість колб, застосовуваних для досягнення необхідного відповідного кінцевого об'єму (пасаж п2, пасаж пз і т.д.).
М. пуозупоміає
М. пуозупоміає культивували також як М. Ппуогпіпі5 з декількома модифікаціями: середовище для інфікування містила ОМЕМ»2 95 ЕВ5--1 95 розчину аргініну; М. пуозупоміає, як правило, не характеризувалася ЦПД, тому зміна кольору й каламутності середовища були індикатором, що має вирішальне значення, для пересівання з одержанням наступного пасажу.
М. пуорпеитопіає
М. пуорпештопіаеє культивували в такий же спосіб, що й М. Пуогпіпіз. Залежно від застосовуваного для зараження штаму ЦПД могло проявлятися або відсутнє. Тому зміну кольору й каламутності середовища можна використовувати як індикатор для пересівання з одержанням наступного пасажу.
Б. Умови культивування М. пуогппіпі5, М. пуозупоміає і М. пуорпештопіає в МеСоу-клітинах
М. нуотіпів:
МеСоу-клітини вирощували в суспензійних культурах у перемішуваних колбах у модифікованому середовищі ЕМЕМ, доповненому 10 95 ЕВ5. Клітини пересівали в нові колби так, щоб кінцева концентрація становила 105-109 клітин/мл. Для М. пуотіпів 500 мл клітин з концентрацією 105-105 клітин/мл висівали в З-літрову колбу з розрахунку 107-108 КУО в 1 мл.
Потім колби інкубували при 372С у присутності 5 95 СО» на магнітній мішалці протягом 3-7 днів.
Моніторинг росту мікоплазм здійснювали шляхом візуального визначення зміни кислотності рН і підвищення каламутності. Ріст мікоплазм оцінювали також шляхом аналізу БОЕ для визначення кількостей.
М. пуозупоміає
М. пуозупоміає культивували також як М. Нуогпіпіз. 500 мл клітин із щільністю 105-106 клітин/мл висівали в З-літрову колбу з розрахунку 105-107 КУО в 1 мл. Потім колби інкубували при 372С у присутності 5 95 СО» на магнітній мішалці протягом приблизно 2 тижнів. Для оцінки росту визначали як зміну рнН, так і підвищення каламутності, додатково до аналізів БОЕ для оцінки кількостей.
М. пуорпеитопіає
М. пуорпештопіає культивували в такий же спосіб, що й М. пуогпіпів і М. пуозупоміає. 500 мл клітин з концентрацією 105-105 клітин/мл висівали в З-літрову колбу з розрахунку 105-107 КУО в 1 мл. Потім колби інкубували при 37 "С у присутності 595 СО» на магнітній мішалці протягом приблизно 2 тижнів. Для оцінки росту можна застосовувати як визначення зміни рн, так і підвищення каламутності додатково до аналізів БОЕ для оцінки кількостей.
В. Культивування різних видів мікоплазм із різними типами сироватки
Для вирішення питання про те, чи можна культивувати види мікоплазм із використанням різних типів сироватки різного походження, МОСК-клітини заражали М. Пуогпіпі5 і культивували з використанням сироватки плода корови, свинячої сироватки, кролячої сироватки, курячої сироватки або кінської сироватки відповідно. Для кожного типу сироватки культивування М. пуогпіпіє в МОСК-клітинах здійснювали відповідно до описаного вище методу (тобто застосовували 5 9о сироватки для вирощування клітин і 2 96 сироватки для зараження). МОСК- клітини збирали через 4 дня після зараження згідно зі стандартним методом. Аналіз ССУ (одиниця зміни кольору) здійснювали для визначення титру живих М. Пуогпіпіб5. Крім того, здійснювали ЯПЛР (кількісна полімеразна ланцюгова реакція в реальному часі) для визначення загального вмісту геному (дс) М. Ппуогпіпіз. Результати наведеного як приклад експерименту представлено в таблиці 1.
Таблиця 1:
Культивування М. пуогпіпі5 з використанням різних типів сироватки (Свинячасироватла.д 77777 Ї1111717111111л6061111111111 11111111 850С1С (Кінськасироваткаїд 77777711 Ї1177717171117л649177777771 11117111 9001
У таблиці 1 продемонстровано, що титри, виміряні або за допомогою аналізу СС, або за допомогою ДПЛР, виявилися подібними при використанні різних типів сироватки. Крім того, дані, отримані методом вестерн-блотингу (не представлені), підтвердили вказаний результат. Таким чином, М. пуогпіпіз можна культивувати в МОСК-клітинах незалежно від того, який тип сироватки застосовували для культивування.
Приклад 2
Приготування вакцин
Коли останній пасаж був готовий для збору (наявність 290 95 ЦПД), здійснювали один цикл заморожування-відтавання у всіх колбах шляхом витримування їх у морозильній камері при температурі « -602С протягом 22 год., швидкого відтавання при 372С, збору й об'єднання лізатів, і піпетування наверх й вниз до гомогенізації. Як правило, потім до цієї суспензії додавали 10- 20 95 гліцерину й гомогенізували. Вказану суспензію розділяли на аліквотів робочого об'єму.
Маточні розчини зберігали при температурі « -602с до застосування.
Необхідні обсяги вказаних вище маточних розчинів інактивували за допомогою 0,295 формаліну. Надлишок формаліну нейтралізували бісульфітом натрію в момент змішання вакцини. Вакцини змішували з ад'ювантом Мопіапіде "м ІЗА 207 МО або з ад'ювантом СагророїФ).
Вакцини зберігали при 2-76.
Приклад З
Оцінка ефективності вакцин
Ефективність вакцин оцінювали за їх здатністю викликати гуморальну імунну відповідь (а також за титром, визначеним за допомогою ЕГІЗА) після введення свиням.
Догляд за тваринами
Перед початком експерименту тварини мали хороший стан здоров'я й фон харчування.
Перед процедурою рандомізації й оцінки здійснювали визначення стану здоров'я. Під час експерименту використовували немедичний корм. Кормовий раціон відповідав віку, стану й виду тестованої тварини згідно зі стандартною процедурою вирощування у виробничих умовах. Під час експерименту тварини мали вільний доступ до води.
Оцінка ефективності вакцин на основі М. Ппуогіпіпіз і М. Нуорпеитопіає після введення свиням
М. нуотіпів:
Нормальним поросятам віком 6 тижнів х 5 днів вводили внутрішньом'язово дозу об'ємом 2 мл (7,1-7,3 с910 ССО/дозу) у день 0 (00) і знову в день 21 (021) вакцини на основі М. пуотіпів.
Зо М. пуоппіпіз культивували в МОСК-клітинах відповідно до описаного вище методу. У вакцину додавали ад'ювант Монтанід ІБА207Ус або САКВОРОЇІ Ф. Як плацебо використовували ЗФР.
Загальний стан здоров'я поросят оцінювали щодня. Зразки крові збирали перед вакцинацією в
ОО, ї в дні 7, 14, 21, 28, 35 і 42. Сироватку тестували у відношенні специфічних у відношенні М. пуогпіпіз антитіл за допомогою непрямого ЕГІЗБА фірми ВІМІ КУО. При застосуванні ЕГІЗА фірми ВІМІ КО співвідношення 5/Р » 0,200 розглядали як позитивне.
Як продемонстровано в таблиці 2, за даними ЕЇІ5А М. Пуогпіпіє викликала сильну гуморальну імунну відповідь. 6/6 (100 95) тварин, вакцинованих М. Нуогпіпіз-МОСК - Монтанід
ІЗА207УЄ виявилися позитивними через 2 тижні після обробки першою дозою (014). Усі тварини залишалися позитивними аж до 042, при цьому підвищення титрів виявлене після застосування другої дози (028). У тварин, вакцинованих М. пуотіпі--МОСК--Сагророїю також виявлена гуморальна імунна відповідь.
Таблиця 2:
Отримані за допомогою ЕГІЗА результати для М. Нуогпіпів 77171711... | Довакцинації | 0О | 07 | 014 | 021 | 028 | 035 | аг
М.Ннуотіпів МОСК --
МонтанідівдобтУ |00000000ооозіоювз оте то тво тив 1133
М.Ннуотіпів МОСК --
Аналогічні результати, що стосуються гуморальної імунної відповіді після вакцинації, одержували при культивуванні М.пуогпіпіз в МоСоу-клітинах (дані не представлені). Крім того, аналогічні результати, що стосуються гуморальної імунної відповіді після вакцинації, одержували при обробці поросят віком З тижні ї- 5 днів (дані не представлені). Аналогічні результати одержували після однодозової обробки (дані не представлені).
М. пуорпеитопіає
Нормальним поросятам віком 6 тижнів х 5 днів вводили внутрішньом'язово дозу об'ємом 2 мл (8,0-8,5 їс9410 ССИи/дозу) в БО і знову в 021 вакцину на основі М. пуорпешитопіає. У вакцину додавали ад'ювант Монтанід ІЗА207У0. Як плацебо використовували ЗФР. Загальний стан здоров'я поросят оцінювали щодня. Зразки крові збирали перед вакцинацією в ОО, і в дні 7, 14, 21, 28, 35 і 42 для тестування відносно присутності антитіл до М. пуорпештопіає. У прикладі, результати якого представлено в таблиці 3, застосовували набір, що продається, для ЕГІЗА фірми ІОЕХХ відносно присутності антитіл к. При застосуванні ЕГІЗА фірми співвідношення 5/Р » 0,400 розглядали як позитивне.
Як продемонстровано в таблиці 3, за даними ЕГІ5А М. пуорпештопіає викликала сильну гуморальну імунну відповідь. З вакцинованих М. пуорпептопіае МОСКУІЗА207 тварин 3/6 (50 Фо) виявилися позитивними в 014 і 5/6 (83,3 95) в 021, а 6/6 (100 95) виявилися позитивними в 028, З5і 42.
Таблиця 3:
Отримані за допомогою ЕГІЗА фірми ІОЕХХ результати для М. пуорпештопіає я кнннетнитк: Ден рен веен ве вакцинації
М. пуорпеитопіає МОСК --
Аналогічні результати одержували після однодозової обробки (дані не представлені).
Приклад 4
Ефективність вакцин, отриманих з мікоплазматичних бактерій, які культивували в лінії еукаріотичних клітин, у порівнянні з вакцинами, отриманими з мікоплазматичних бактерій, які культивували в безклітинній системі 54 тваринних лінії СЮ/СО віком 8 тижнів ж 5 днів розділяли на 6 груп. Кожну із груп М1 і М2 обробляли інактивованим ізолятом М. Пуогпіпіз, який культивували в МОСК-клітинах і середовищі СМ (комплексне середовище; наприклад, середовище на основі протеозного пептону, що містить свинячу сироватку й дріжджовий екстракт, або середовище Фриза) відповідно; групу МЗ3 ії МА обробляли інактивованим ізолятом М. Нуотіпіз, який культивували в
МОСК-середовищу й СМ відповідно. В усі вакцини як ад'ювант додавали Монтанід ІЗА207МО; доза й шлях відповідали схемі 2х2 мл, дози вводили шляхом внутрішньом'язової ін'єкції однієї дози в ОО, а другої дози в 021. Групу СС (контрольна група) обробляли плацебо без антигену (ЗФР) відповідно такій же схемі. Групу 5С (строгий контроль) не обробляли протягом експерименту, ці тварини служили як строгий контроль. В 042, 43 і 44 поросят у групах М1-Ма4 і
СС піддавали контрольному зараженню вірулентним ізолятом М. Нуогпіпіз. Доза й шлях
Зо відповідали схемі: 40 мл внутрішньоочеревинно, 15 мл внутрішньовенно й 15 мл інтраназально відповідно. Зразки крові збирали щотижня, починаючи з 00, і до закінчення експерименту (058) для тестування за допомогою специфічного для М. Ппуопіпіз ЕГІЗА. При застосуванні ЕГІ5А фірми КУО співвідношення 5/Р » 0,200 розглядали як позитивне. Усі поросята в 5С-групі залишалися негативними протягом експерименту, що свідчило про відсутність експозиції М.
Нуогпіпіз. Групи М І-МА і СС були негативними в ОО ї 7. Однак серологічні результати варіювалися в значній мірі між вакцинами на основі СМ ії на основі МОСК. У порівнянні з вакцинами на основі СМ для вакцин на основі МОСК виявлений більш ранній початок сероконверсії, більша кількість серопозитивних свиней і більш високі серологічні титри.
Таблиця 4:
Отримані за допомогою ЕГІЗА результати для М. пуогпіпів
Грула. 77771717 100 07 (014 (021 (028 (035 Щ|042 (049 |058
Крім того, здійснювали експерименти з титрування для порівняння вакцин, отриманих за допомогою клітинних культур, з вакцинами на основі мікоплазматичних бактерій, культивованих у безклітинній системі.
М. пуогпіпіє культивували в МоСоу-клітинах відповідно до описаного вище методу або культивували в СМ (комплексне середовище) відповідно.
Готували вакцини з антигеном, отриманим з використанням МеСоу, застосовуючи нерозведений антиген (повний), антиген, розведений у співвідношенні 1:10, ї антиген, розведений у співвідношенні 1:100, усі змішані в співвідношенні 1:11 із застосовуваним як ад'ювант Монтанідом ІЗА207УС. Аналогічним способом готували вакцини з використанням отриманого в СМ антигену.
Свиней (вік у момент вакцинації становив З тижні) вакцинували, використовуючи одну дозу об'ємом 2 мл, яку вводили ІМ у день 0.
Як продемонстровано в таблиці 5, перед контрольним зараженням (000-021) усі групи в середньому розглядалися як "негативні", хоча в групі "МеСоуіІ5А "повний" (антиген)» і "МеСоутхіІЗА 1:10") виявлені відповіді, що мають тенденцію до позитивності. Через 1 тиждень після контрольного зараження (028) виявлена відповідь у всіх вакцинованих групах, крім групи "СМАІ5А 1:100".
З таблиці 5 очевидно, що для кожного типу антигену (МеСоу, СМ) виявлений стандартний титраційний ефект ("повний»»1:1021:100). Крім того, у таблиці 5 продемонстровано, що тварини із групи "МеСоухІ5А "повний»» і "МеСоутіЗА 1:10" мали більш високі середні бали, у порівнянні із групою, обробленою "СМУІ5А "повний", і ця особливість зберігалася до закінчення досліду в 042. Групи з позитивними (5/Р 2 0,200) середніми значеннями після контрольного зараження являли собою групи "МеСоуї "повний" і "МеСоуж1:10". При застосуванні вакцин "МеСоух "повний" і "МеСоуж1:10) отримана більш висока серологічна відповідь у порівнянні з вакциною "СМ. "повний" як до контрольного зараження, так і після контрольного зараження. Крім того, у тварин, вакцинованих "МеСоуї1:100" також виявлена відповідь, що відрізняється від відповіді в обробленій плацебо (невакцинованій) групі й групі "СМа-1:100" (відповідь у групі, обробленій "СМ1:100" або її відсутність виявилися еквівалентними з відповіддю в невакцинованих тварин).
Зо Експерименти з титрування продемонстрували, що вакцини на основі клітинних культур забезпечували переважні серологічні результати в порівнянні з вакцинами з мікоплазматичних бактерій, культивованих у безклітинній системі.
Таблиця 5:
Отримані за допомогою ЕГІЗА результати для М. Нуогпіпів
Грула 0 (00 07 (014 (021 028 035 |042 повний»
СМ
СМ
Приклад 5
Ефективність мульвалентної вакцини, що містить антиген М. пуозупоміає, М. пуорпеитопіає і М. пуогпіпів.
У цьому досліді 15 СО/СО-тваринам віком 11 тижнів - 5 днів вводили однократно дозу об'ємом 2 мл, ІМ, тривалентної прототипової комбінованої вакцини Мусоріазта. Вакцина складалася з інактивованої М. пуогпіпі5, інактивованої М. пуорпеитопіає і інактивованої М.
Нуозупоміає. Усі види культивували в МОСК-клітинах. У вакцину додавали як ад'ювант Монтанід
ІБА207МУО. Зразки крові відбирали щотижня, починаючи від дня 0 і до дня 28. Моніторинг рівнів антитіл у сироватці здійснювали за допомогою призначеного для оцінки М. Нуоптіпів ЕГІЗА фірми ВІМІ КО і призначеного для оцінки М. пуорпештопіає ЕГІЗА фірми ІОЕХХ. Ніякий серологічний аналіз, придатний для оцінки М. Нпуозупоміає, не був відомий до моменту проведення даного експерименту.
Для М. Пуогпіпіз за допомогою ЕГІЗБА продемонстрована сильна гуморальна імунна відповідь через 2 тижні після вакцинації (014), при цьому 11/15 (73,3 95) були позитивними, а 15/15 (100 95) були позитивними до 021.
Для М. пуорпеитопіає за допомогою ЕГІЗА фірми ІПЕХХ продемонстровано, що 4 свині були позитивними (5/Р » 0,400) за антитілами до М. пуорпештопіає в БО. Якщо цих чотирьох свиней виключити, то п'ять інших свиней виявилися сероконвертованими до М. пПуорпештопіає до 028. Три із цих п'яти свиней виявилися позитивними в 21.
Таблиця 6:
Отримані за допомогою ЕГІ5ЗА результати для М. Нуогпіпів ро 77777771 107.77 10147777 01021777 10281
Таблиця 7:
Отримані за допомогою ЕГІЗА фірми ІОЕХХ результати для М. пуорпештопіає ро 77777777 107.77 (01477777 01021777 00288
Результати, отримані для М. Пуогпіпі5, свідчать про відсутність інтерференції з іншими фракціями у вакцині. Крім того, рівні антигену М. пуогпіпі5, присутні в комбінованій вакцині, застосовуваній в даному експерименті, були достатніми для індукції гуморальної імунної відповіді, що піддається вимірюванню після введення однієї дози об'ємом 2 мл. Результати, отримані для М. пуорпештопіає, свідчать про деяку сероконверсію. Можливо, що в наступних дослідженнях доцільно застосовувати в суміші більш високі рівні цієї фракції для збільшення сероконверсії. Таким чином, результати, що стосуються фракцією М. Пуотіпіз і М. пуорпеитопіає, свідчать про відсутність інтерференції між цими видами.
Claims (20)
1. Імуногенна композиція, яка містить а) один або декілька антигенів мікоплазм із мікоплазматичних бактерій, вибраних із групи, яка складається з М. пуогпіпі5, М. пуорпеитопіає,
М. пуозупоміає і будь-яких їх комбінацій; і б) один або декілька компонентів системи на основі еукаріотичних клітин, де один або декілька антигенів являють собою цільні інактивовані бактерини, і Зо де вказана система на основі еукаріотичних клітин містить МОСК-клітини або МеСоу-клітини або один або декілька їх компонентів.
2. Імуногенна композиція за п. 1, у якій антиген мікоплазм являє собою антигени М. пуоптіпі5 або
М. пуорпештопіає.
3. Імуногенна композиція за п. 1 або п. 2, у якій антиген мікоплазм являє собою антигени М. пуогіпі5 і М. пуорпештопіає або антигени М. пуогпіпів і М. пуорпештопіає, і М. пуозупоміає.
4. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-3, де компоненти системи на основі еукаріотичних клітин включають сироватку.
5. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-4, де імуногенна композиція не містить свинячої сироватки.
6. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-5, де вказані компоненти еукаріотичних клітин приєднані до антигену мікоплазм.
7. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-6, у якій цільні інактивовані бактерини являють собою інактивовані формаліном бактерини.
8. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-7, де вказана імуногенна композиція має підвищену імуногенність в порівнянні з імуногенною композицією, що містить такий самий антиген мікоплазм, отриманий з мікоплазм, які культивували в безклітинній системі культивування.
9. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 2-8, де імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. Пуогпіпі5, у суб'єкта, який потребує цього.
10. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 2-9, де імуногенна композиція має ефективність при лікуванні та/або профілактиці клінічних ознак, які викликаються М. Ппуорпештопіає, у суб'єкта, який потребує цього.
11. Імуногенна композиція за п. 9 або п. 10, де вказаний суб'єкт вибраний із групи, яка складається зі свиней, великої рогатої худоби, кішок і собак.
12. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-11, де вказана імуногенна композиція являє собою вакцину.
13. Імуногенна композиція за будь-яким з пп. 1-12, де імуногенна композиція включає фармацевтично прийнятний носій, або де імуногенна композиція включає ад'ювант, або де імуногенна композиція включає емульсію вода-в-маслі-у-воді або карбомер.
14. Застосування імуногенної композиції за будь-яким з пп. 1-13 для приготування лікарського засобу для імунізації суб'єкта.
15. Застосування за п. 14, де вказаного суб'єкта вибирають із групи, яка складається зі свиней, великої рогатої худоби, кішок і собак.
16. Застосування за п. 14 або п. 15, де імуногенну композицію вводять однократно.
17. Застосування за будь-яким з пп. 14-16, де вказане застосування приводить до поліпшення параметра ефективності, вибраного із групи, яка складається з укорочення тривалості бактеріємії й зменшення бактеріального навантаження, або їх комбінації, у порівнянні із суб'єктом з неімунізованої контрольної групи цього ж виду.
18. Застосування за будь-яким з пп. 14-17, де зазначене застосування є придатним для суб'єкта віком три тижні або старше.
19. Застосування імуногенної композиції за будь-яким з пп. 1-13 для лікування та/або профілактики мікоплазматичних інфекцій у суб'єктів.
20. Застосування імуногенної композиції за будь-яким з пп. 1-13 для приготування лікарського засобу для лікування та/або профілактики мікоплазматичних інфекцій у суб'єкта. Зо
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261747026P | 2012-12-28 | 2012-12-28 | |
| PCT/US2013/076803 WO2014105671A1 (en) | 2012-12-28 | 2013-12-20 | Immunogenic composition comprising mycoplasma antigens |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| UA121097C2 true UA121097C2 (uk) | 2020-04-10 |
Family
ID=49956440
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| UAA201507462A UA121097C2 (uk) | 2012-12-28 | 2013-12-20 | Імуногенна композиція, що містить антигени мікоплазм |
Country Status (20)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9878027B2 (uk) |
| EP (2) | EP3730148A3 (uk) |
| JP (2) | JP6195630B2 (uk) |
| KR (1) | KR102355614B1 (uk) |
| CN (2) | CN104981252B (uk) |
| AR (1) | AR094296A1 (uk) |
| AU (2) | AU2013370982C9 (uk) |
| BR (1) | BR112015015199B1 (uk) |
| CA (1) | CA2896293C (uk) |
| CL (1) | CL2015001659A1 (uk) |
| DK (1) | DK2938356T3 (uk) |
| EA (1) | EA038206B1 (uk) |
| ES (1) | ES2808673T3 (uk) |
| MX (1) | MX2015007729A (uk) |
| MY (1) | MY174818A (uk) |
| PH (1) | PH12015501335A1 (uk) |
| SG (1) | SG11201505086QA (uk) |
| TW (1) | TWI633890B (uk) |
| UA (1) | UA121097C2 (uk) |
| WO (1) | WO2014105671A1 (uk) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2014105672A1 (en) * | 2012-12-28 | 2014-07-03 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Method of making a mycoplasma vaccine |
| UA121097C2 (uk) * | 2012-12-28 | 2020-04-10 | Бьорінгер Інгельхайм Ветмедіка Гмбх | Імуногенна композиція, що містить антигени мікоплазм |
| CN104730256B (zh) * | 2015-04-03 | 2016-05-04 | 江苏省农业科学院 | 用于检测支原体抗体的组合物及其应用 |
| CN113461791B (zh) * | 2021-06-23 | 2022-05-03 | 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 | 猪鼻支原体外膜蛋白Mhr_0493在制备猪鼻支原体或其抗体检测试剂盒中的应用 |
| CN113444157B (zh) * | 2021-06-23 | 2022-05-13 | 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所 | 猪鼻支原体外膜蛋白Mhr_0461在制备猪鼻支原体或其抗体检测试剂盒中的应用 |
Family Cites Families (35)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US2909462A (en) | 1955-12-08 | 1959-10-20 | Bristol Myers Co | Acrylic acid polymer laxative compositions |
| GB1074920A (en) | 1965-04-21 | 1967-07-05 | Pfizer & Co C | Growth medium for mycoplasma pneumoniae and vaccine production |
| ES343655A1 (es) * | 1966-07-11 | 1968-09-01 | Research Corp | Metodo para la preparacion de un inoculo para aves de co- rral. |
| JPS5540568B2 (uk) | 1972-10-05 | 1980-10-18 | ||
| US5338543A (en) * | 1992-02-27 | 1994-08-16 | Ambico, Inc. | Thimerosal inactivated mycoplasma hyopneumoniae vaccine |
| US6537552B1 (en) * | 1999-10-19 | 2003-03-25 | Iowa State University Research Foundation | Vaccine adjuvant |
| CA2401117C (en) | 2000-03-03 | 2010-06-29 | Juridical Foundation The Chemo-Sero-Therapeutic Research Institute | Cell usable in serum-free culture and suspension culture and process for producing virus for vaccine by using the cell |
| MY129765A (en) * | 2000-12-19 | 2007-04-30 | Wyeth Corp | Improved mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine |
| US7018638B2 (en) * | 2000-12-19 | 2006-03-28 | Wyeth | Mycoplasma hyopneumoniae bacterin vaccine |
| CN1612749A (zh) * | 2001-07-02 | 2005-05-04 | 辉瑞产品公司 | 用于减弱牲畜体内牛支原体肺炎的猪肺炎支原体疫苗和方法 |
| EA009901B1 (ru) * | 2001-07-02 | 2008-04-28 | Пфайзер Продактс Инк. | Способ лечения или предупреждения заболевания или нарушения у животного, вызванного mycoplasma hyopneumoniae |
| TWI238721B (en) * | 2003-06-20 | 2005-09-01 | Animal Technology Inst Taiwan | Swine enzootic vaccine, its producing method and usage |
| WO2006056841A1 (en) * | 2004-11-24 | 2006-06-01 | Pharmacia & Upjohn Company Llc | Multiple-strain mycoplasma hyopneumoniae vaccines |
| EP1846223A4 (en) * | 2005-02-09 | 2012-05-30 | Magna Int Inc | METHOD FOR PRODUCING A SEMISTRUCTURAL PLATE |
| EP1862537B1 (en) | 2005-03-10 | 2013-05-08 | Kyoritsu Seiyaku Corporation | Cell line culturable without aminal-derived component, method for establishment thereof, method for production of virus using the cell line and method for production of vaccine |
| US20070009545A1 (en) * | 2005-07-07 | 2007-01-11 | Joachim Frey | Mycoplasma subunit vaccine |
| JP5260525B2 (ja) * | 2006-09-15 | 2013-08-14 | メディミューン，エルエルシー | 高力価までウイルス増殖を支持するｍｄｃｋ細胞株と、それを用いたバイオリアクタープロセス |
| US20090068231A1 (en) * | 2007-09-11 | 2009-03-12 | Wyeth | Live attenuated mycoplasma strains |
| UY31437A1 (es) | 2007-10-29 | 2009-05-29 | Vacuna de mycoplasma bovis y métodos de uso de la misma | |
| ME01000B (me) | 2007-11-06 | 2012-10-20 | Zoetis Services Llc | Živa vakcina avirulentne mycoplasma hyopneumoniae sa adjuvansom |
| EP2242511A4 (en) | 2008-01-23 | 2012-10-24 | Boehringer Ingelheim Vetmed | IMMUNOGENIC COMPOSITIONS OF MYCOPLASMA HYOPNEUMONIAE PCV2, AND METHODS FOR PRODUCING SUCH COMPOSITIONS |
| US8444989B1 (en) * | 2008-04-18 | 2013-05-21 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | One dose vaccination against mycoplasma infections of pigs |
| WO2009142086A1 (ja) * | 2008-05-23 | 2009-11-26 | 学校法人久留米大学 | マイコプラズマ感染症用ワクチン組成物 |
| BR122021025097B1 (pt) * | 2008-06-27 | 2022-07-26 | Zoetis Services Llc | Composição imunogênica, composição de vacina e uso da mesma |
| ES2579935T3 (es) | 2009-05-19 | 2016-08-17 | Bioproperties Pty Ltd | Cepa de vacuna de Mycoplasma Hyopneumoniae sensible a temperatura y uso de la misma |
| WO2011075379A1 (en) * | 2009-12-18 | 2011-06-23 | Boehringer Ingelheim Vetmedica, Inc. | Multivalent vaccine against porcine teschovirus and other disease causing organisms in swine |
| AT509622A1 (de) * | 2010-04-08 | 2011-10-15 | Greiner Bio One Gmbh | Verfahren und kit zur trennung viraler und prokaryontischer von eukaryontischen nukleinsäuren |
| CN102258776B (zh) | 2011-07-07 | 2013-07-10 | 普莱柯生物工程股份有限公司 | 猪肺炎支原体、猪鼻支原体二联灭活疫苗及其制备方法 |
| UA114504C2 (uk) * | 2012-04-04 | 2017-06-26 | Зоетіс Сервісіз Ллс | Комбінована вакцина pcv, mycoplasma hyopneumoniae та prrs |
| US9120859B2 (en) * | 2012-04-04 | 2015-09-01 | Zoetis Services Llc | Mycoplasma hyopneumoniae vaccine |
| UA114503C2 (uk) * | 2012-04-04 | 2017-06-26 | Зоетіс Сервісіз Ллс | Комбінована вакцина pcv та mycoplasma hyopneumoniae |
| WO2014105672A1 (en) * | 2012-12-28 | 2014-07-03 | Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh | Method of making a mycoplasma vaccine |
| UA121097C2 (uk) * | 2012-12-28 | 2020-04-10 | Бьорінгер Інгельхайм Ветмедіка Гмбх | Імуногенна композиція, що містить антигени мікоплазм |
| KR102257743B1 (ko) * | 2013-09-19 | 2021-05-28 | 조에티스 서비시즈 엘엘씨 | 유성 아쥬반트 |
| KR20160132494A (ko) * | 2014-04-03 | 2016-11-18 | 베링거잉겔하임베트메디카인코퍼레이티드 | 돼지 유행성 설사 바이러스 백신 |
-
2013
- 2013-12-20 UA UAA201507462A patent/UA121097C2/uk unknown
- 2013-12-20 CA CA2896293A patent/CA2896293C/en active Active
- 2013-12-20 EA EA201500700A patent/EA038206B1/ru unknown
- 2013-12-20 EP EP20160539.1A patent/EP3730148A3/en active Pending
- 2013-12-20 AU AU2013370982A patent/AU2013370982C9/en not_active Ceased
- 2013-12-20 CN CN201380065991.5A patent/CN104981252B/zh active Active
- 2013-12-20 SG SG11201505086QA patent/SG11201505086QA/en unknown
- 2013-12-20 US US14/135,791 patent/US9878027B2/en active Active
- 2013-12-20 KR KR1020157020445A patent/KR102355614B1/ko active IP Right Grant
- 2013-12-20 ES ES13821324T patent/ES2808673T3/es active Active
- 2013-12-20 EP EP13821324.4A patent/EP2938356B1/en active Active
- 2013-12-20 WO PCT/US2013/076803 patent/WO2014105671A1/en active Application Filing
- 2013-12-20 CN CN201910422717.8A patent/CN110227151B/zh active Active
- 2013-12-20 JP JP2015550684A patent/JP6195630B2/ja active Active
- 2013-12-20 MX MX2015007729A patent/MX2015007729A/es active IP Right Grant
- 2013-12-20 BR BR112015015199-0A patent/BR112015015199B1/pt active IP Right Grant
- 2013-12-20 DK DK13821324.4T patent/DK2938356T3/da active
- 2013-12-20 MY MYPI2015001620A patent/MY174818A/en unknown
- 2013-12-27 AR ARP130105051A patent/AR094296A1/es unknown
- 2013-12-27 TW TW102148878A patent/TWI633890B/zh active
-
2015
- 2015-06-12 CL CL2015001659A patent/CL2015001659A1/es unknown
- 2015-06-15 PH PH12015501335A patent/PH12015501335A1/en unknown
-
2017
- 2017-06-30 JP JP2017129051A patent/JP6456437B2/ja active Active
- 2017-12-19 US US15/846,975 patent/US10758602B2/en active Active
-
2018
- 2018-04-18 AU AU2018202698A patent/AU2018202698B2/en not_active Ceased
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| UA121193C2 (uk) | Спосіб одержання імуногенної композиції проти мікоплазми | |
| US10758602B2 (en) | Immunogenic composition comprising mycoplasma antigens | |
| CA2699218C (en) | Mycoplasma bovis vaccine |