TWI844072B - 具有高細胞內油含量的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 - Google Patents
具有高細胞內油含量的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- TWI844072B TWI844072B TW111130426A TW111130426A TWI844072B TW I844072 B TWI844072 B TW I844072B TW 111130426 A TW111130426 A TW 111130426A TW 111130426 A TW111130426 A TW 111130426A TW I844072 B TWI844072 B TW I844072B
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- microalgae
- biomass
- schizophora
- culture
- species
- Prior art date
Links
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 20
- 241000598397 Schizochytrium sp. Species 0.000 title claims abstract description 6
- 235000020660 omega-3 fatty acid Nutrition 0.000 title claims description 11
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 title description 6
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 claims abstract description 59
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 50
- MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N all-cis-docosa-4,7,10,13,16,19-hexaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCC(O)=O MBMBGCFOFBJSGT-KUBAVDMBSA-N 0.000 claims abstract description 41
- 235000020669 docosahexaenoic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 25
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 claims abstract description 23
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 23
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 claims abstract description 23
- 229940090949 docosahexaenoic acid Drugs 0.000 claims abstract description 20
- 239000012075 bio-oil Substances 0.000 claims abstract description 17
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims abstract description 11
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 241000158688 Schizophora Species 0.000 claims description 50
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 23
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 claims description 21
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 claims description 21
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 claims description 21
- 239000006166 lysate Substances 0.000 claims description 21
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 claims description 20
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 14
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 14
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 12
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 12
- DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N (2e,4e,6e,8e,10e,12e)-docosa-2,4,6,8,10,12-hexaenoic acid Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C=C\C(O)=O DVSZKTAMJJTWFG-SKCDLICFSA-N 0.000 claims description 6
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 claims description 6
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 claims description 6
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 claims description 6
- GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 6-Ketone, O18-Me-Ussuriedine Natural products CC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O GZJLLYHBALOKEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 5
- KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N docosahexaenoic acid (DHA) Natural products COC(=O)C(C)NOCC1=CC=CC=C1 KAUVQQXNCKESLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 5
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 5
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 claims description 4
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 4
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 4
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 claims description 4
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 4
- VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N sodium nitrate Chemical compound [Na+].[O-][N+]([O-])=O VWDWKYIASSYTQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 claims description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 claims description 3
- 235000013923 monosodium glutamate Nutrition 0.000 claims description 3
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 2-(3-bromo-2-fluorophenyl)acetic acid Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC(Br)=C1F PAWQVTBBRAZDMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 claims description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 claims description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 claims description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 claims description 2
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 claims description 2
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 claims description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 claims description 2
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 claims description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 claims description 2
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 claims description 2
- 235000013877 carbamide Nutrition 0.000 claims description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 claims description 2
- 125000001477 organic nitrogen group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000004317 sodium nitrate Substances 0.000 claims description 2
- 235000010344 sodium nitrate Nutrition 0.000 claims description 2
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 claims 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 abstract description 18
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 abstract description 13
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 abstract description 13
- 241001467333 Thraustochytriaceae Species 0.000 abstract description 8
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 abstract description 2
- 239000000047 product Substances 0.000 description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 description 32
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 32
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 16
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 15
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 14
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 11
- 235000021323 fish oil Nutrition 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 8
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 7
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 7
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 7
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 6
- DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N alpha-linolenic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O DTOSIQBPPRVQHS-PDBXOOCHSA-N 0.000 description 6
- 235000019784 crude fat Nutrition 0.000 description 6
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 5
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 5
- 235000019688 fish Nutrition 0.000 description 5
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 5
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000003674 animal food additive Substances 0.000 description 4
- YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N arachidonic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O YZXBAPSDXZZRGB-DOFZRALJSA-N 0.000 description 4
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- -1 fatty acid calcium salts Chemical class 0.000 description 4
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 4
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 4
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000020661 alpha-linolenic acid Nutrition 0.000 description 3
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 229960004488 linolenic acid Drugs 0.000 description 3
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 3
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 3
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 3
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 3
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N (7Z,10Z,13Z,16Z,19Z)-docosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCC(O)=O YUFFSWGQGVEMMI-JLNKQSITSA-N 0.000 description 2
- GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N (±)-α-Tocopherol Chemical compound OC1=C(C)C(C)=C2OC(CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C)(C)CCC2=C1C GVJHHUAWPYXKBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000272517 Anseriformes Species 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 241000003595 Aurantiochytrium limacinum Species 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000238424 Crustacea Species 0.000 description 2
- 235000021294 Docosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 241000233671 Schizochytrium Species 0.000 description 2
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 241000736901 Thiocystis Species 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 description 2
- 235000021342 arachidonic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940114079 arachidonic acid Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N boric acid Chemical compound OB(O)O KGBXLFKZBHKPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004327 boric acid Substances 0.000 description 2
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 2
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 2
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 2
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 2
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N hexadecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 2
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 2
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 229940012843 omega-3 fatty acid Drugs 0.000 description 2
- 239000006014 omega-3 oil Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N phosphoric acid;potassium Chemical compound [K].OP(O)(O)=O PJNZPQUBCPKICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 description 2
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 2
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 2
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- 235000019165 vitamin E Nutrition 0.000 description 2
- 239000011709 vitamin E Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethoxybenzenecarbothioamide Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(N)=S WEEMDRWIKYCTQM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 241000143060 Americamysis bahia Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 229910015900 BF3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000005996 Blood meal Substances 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N Bromocresolgreen Chemical compound CC1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C(=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 FRPHFZCDPYBUAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 description 1
- 241000238366 Cephalopoda Species 0.000 description 1
- 108010022172 Chitinases Proteins 0.000 description 1
- 102000012286 Chitinases Human genes 0.000 description 1
- 241000555825 Clupeidae Species 0.000 description 1
- 241001454694 Clupeiformes Species 0.000 description 1
- 241001149724 Cololabis adocetus Species 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000938605 Crocodylia Species 0.000 description 1
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 1
- 108091092584 GDNA Proteins 0.000 description 1
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 241000208818 Helianthus Species 0.000 description 1
- 235000003222 Helianthus annuus Nutrition 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 1
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 239000005913 Maltodextrin Substances 0.000 description 1
- 229920002774 Maltodextrin Polymers 0.000 description 1
- 241001502129 Mullus Species 0.000 description 1
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000021314 Palmitic acid Nutrition 0.000 description 1
- 235000019483 Peanut oil Nutrition 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010064851 Plant Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 108010059820 Polygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241000700141 Rotifera Species 0.000 description 1
- 241000269821 Scombridae Species 0.000 description 1
- 238000012300 Sequence Analysis Methods 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010006785 Taq Polymerase Proteins 0.000 description 1
- 241001290308 Thalassoma Species 0.000 description 1
- 241001298230 Thraustochytrium sp. Species 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- 229930003427 Vitamin E Natural products 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OHVGNSMTLSKTGN-BTVCFUMJSA-N [C].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O Chemical compound [C].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O OHVGNSMTLSKTGN-BTVCFUMJSA-N 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 235000021120 animal protein Nutrition 0.000 description 1
- 238000000137 annealing Methods 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 229940036811 bone meal Drugs 0.000 description 1
- 239000002374 bone meal Substances 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 1
- 229930002875 chlorophyll Natural products 0.000 description 1
- 235000019804 chlorophyll Nutrition 0.000 description 1
- ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M chlorophyll a Chemical compound C1([C@@H](C(=O)OC)C(=O)C2=C3C)=C2N2C3=CC(C(CC)=C3C)=[N+]4C3=CC3=C(C=C)C(C)=C5N3[Mg-2]42[N+]2=C1[C@@H](CCC(=O)OC\C=C(/C)CCC[C@H](C)CCC[C@H](C)CCCC(C)C)[C@H](C)C2=C5 ATNHDLDRLWWWCB-AENOIHSZSA-M 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021310 complex sugar Nutrition 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000002577 cryoprotective agent Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 235000013325 dietary fiber Nutrition 0.000 description 1
- 235000019621 digestibility Nutrition 0.000 description 1
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 1
- 229940079920 digestives acid preparations Drugs 0.000 description 1
- 239000008298 dragée Substances 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000020774 essential nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 108010093305 exopolygalacturonase Proteins 0.000 description 1
- 150000002191 fatty alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002192 fatty aldehydes Chemical class 0.000 description 1
- 230000035558 fertility Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 239000013505 freshwater Substances 0.000 description 1
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 description 1
- WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N gamma-tocopherol Natural products CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC1CCC2C(C)C(O)C(C)C(C)C2O1 WIGCFUFOHFEKBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 235000013402 health food Nutrition 0.000 description 1
- 230000008642 heat stress Effects 0.000 description 1
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- OOYGSFOGFJDDHP-KMCOLRRFSA-N kanamycin A sulfate Chemical compound OS(O)(=O)=O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N OOYGSFOGFJDDHP-KMCOLRRFSA-N 0.000 description 1
- 229960002064 kanamycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 244000144972 livestock Species 0.000 description 1
- 239000007937 lozenge Substances 0.000 description 1
- 235000020640 mackerel Nutrition 0.000 description 1
- 239000000395 magnesium oxide Substances 0.000 description 1
- CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N magnesium oxide Inorganic materials [Mg]=O CPLXHLVBOLITMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-) Chemical compound [O-2].[Mg+2] AXZKOIWUVFPNLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940035034 maltodextrin Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 1
- JBXYCUKPDAAYAS-UHFFFAOYSA-N methanol;trifluoroborane Chemical compound OC.FB(F)F JBXYCUKPDAAYAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N methyl red Chemical compound C1=CC(N(C)C)=CC=C1\N=N\C1=CC=CC=C1C(O)=O CEQFOVLGLXCDCX-WUKNDPDISA-N 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M monosodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O LPUQAYUQRXPFSQ-DFWYDOINSA-M 0.000 description 1
- 239000004223 monosodium glutamate Substances 0.000 description 1
- WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N n-Pentadecanoic acid Natural products CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O WQEPLUUGTLDZJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000312 peanut oil Substances 0.000 description 1
- 229940056360 penicillin g Drugs 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 230000029553 photosynthesis Effects 0.000 description 1
- 238000010672 photosynthesis Methods 0.000 description 1
- 230000000243 photosynthetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009372 pisciculture Methods 0.000 description 1
- 235000021118 plant-derived protein Nutrition 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 235000008476 powdered milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 1
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 1
- 235000013772 propylene glycol Nutrition 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 208000017443 reproductive system disease Diseases 0.000 description 1
- 235000019173 retinyl acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000011770 retinyl acetate Substances 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 235000019512 sardine Nutrition 0.000 description 1
- 239000013535 sea water Substances 0.000 description 1
- 239000008159 sesame oil Substances 0.000 description 1
- 235000011803 sesame oil Nutrition 0.000 description 1
- 238000007493 shaping process Methods 0.000 description 1
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007901 soft capsule Substances 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000003807 solvent-free extraction Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960002385 streptomycin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000007940 sugar coated tablet Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 239000012085 test solution Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000012137 tryptone Substances 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 229940046009 vitamin E Drugs 0.000 description 1
- 229940046001 vitamin b complex Drugs 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/16—Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/10—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
- A23K10/12—Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K20/00—Accessory food factors for animal feeding-stuffs
- A23K20/10—Organic substances
- A23K20/158—Fatty acids; Fats; Products containing oils or fats
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/02—Pretreatment
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C11—ANIMAL OR VEGETABLE OILS, FATS, FATTY SUBSTANCES OR WAXES; FATTY ACIDS THEREFROM; DETERGENTS; CANDLES
- C11B—PRODUCING, e.g. BY PRESSING RAW MATERIALS OR BY EXTRACTION FROM WASTE MATERIALS, REFINING OR PRESERVING FATS, FATTY SUBSTANCES, e.g. LANOLIN, FATTY OILS OR WAXES; ESSENTIAL OILS; PERFUMES
- C11B1/00—Production of fats or fatty oils from raw materials
- C11B1/02—Pretreatment
- C11B1/025—Pretreatment by enzymes or microorganisms, living or dead
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor
- C12N1/125—Unicellular algae isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/89—Algae ; Processes using algae
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Botany (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Virology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Mycology (AREA)
- Sustainable Development (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
本申請案係關於一種易於萃取細胞中之油的新穎裂殖壺菌屬物種品系及一種使用其生產含ω3之油的方法，且本發明之新穎破囊壺菌系列微藻在生物質中具有高脂肪含量且其中具有高含量之不飽和脂肪酸，諸如二十二碳六烯酸及二十碳五烯酸，且極易於自生物質萃取藉由自身或藉由培養及醱酵所產生之生物質及包括不飽和脂肪酸之脂肪組分。因此，該微藻、生物質乾燥產物及自其產生之生物油可有效地用作用於飼料之組成物或用於食品之組成物或其類似物。
Description
與相關申請案之交叉參考
本申請案主張基於2021年11月08日申請之韓國專利申請案第10-2021-0152561號的優先權，且揭示於對應韓國專利申請案之文件中的全部內容作為本說明書之一部分以引用之方式併入。
本發明係關於一種易於萃取細胞中之油的新穎裂殖壺菌屬物種(Schizochytrium sp.)品系及一種使用其生產含ω3之油的方法。
破囊壺菌(Thraustochytrid)在自然界之各種環境中存活及分佈。其藉由附著至生物體而以共生關係生存，漂浮於海洋環境或淡水或半鹹水環境中，且分佈於各種沈積層中存活。此等破囊壺菌屬於海洋生態食物鏈之最低層，且亦歸類為作為浮游植物之有機異養原生生物微藻(microalgae)。自然環境中之破囊壺菌在功能上負責自然循環元素(諸如硫、氮、磷、鉀及其類似物)之循環及純化。此外，其含有高濃度之多不飽和脂肪酸(polyunsaturated fatty acid，PUFA)
以充當海洋生態系統之來源，該多不飽和脂肪酸包括歸類為ω-3之二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)及二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)。
包括人類之大部分高級生物體本身無法合成包括二十二碳六烯酸及二十碳五烯酸之多不飽和脂肪酸，因此必須將其作為必需養分食用。多不飽和脂肪酸當中的二十二碳六烯酸及二十碳五烯酸為腦、眼組織及神經系統所必需的脂肪酸，且特定言之，已知其在嬰兒之神經系統(諸如視力及運動神經能力)發育及預防心血管疾病方面起重要作用，且其為腦結構脂質中最豐富的組分。
迄今為止，多不飽和脂肪酸之主要來源為自鯵魚類之油中萃取的魚油，該鯵魚類諸如鯖魚、秋刀魚、鮪魚、鯵魚、沙丁魚、鯡魚及其類似物，且此極適用作用於海水魚之魚類養殖飼料，諸如開口餌料(initial feed)。儘管已在工業上研發自魚油萃取及攝入多不飽和脂肪酸，但亦存在缺點。魚油之品質視魚類物種、季節及捕魚地點而變化，且魚油係經由捕魚產生的，因此其難以連續供應。另外，由於魚油中所包含之重金屬及有機化學物質之污染問題、在加工過程期間雙鍵氧化之問題以及魚油所特有之魚腥味及其類似問題，在製造過程及生產中存在侷限性。
為解決此等問題，近來，正進行關於藉由微生物培養生產包括二十二碳六烯酸及二十碳五烯酸之多不飽和脂肪酸之方法的研究。特定言之，除能夠天然地新合成脂肪酸之外，微藻亦可提供優於魚油之若干優勢。其可經由以工業規模進行培養來穩定地供應，且其使得能夠產生具有相對恆定生化組成之生物質。不同於魚油，由微藻產生之脂質不會具有任何令人不適的氣味。此外，其具有與魚油相比更簡單的脂肪酸組成，此有助於分離主要脂肪酸之步驟。
基於此等優勢，近來，關於多不飽和脂肪酸之生產的研究及工業化正極其快速地推進，該多不飽和脂肪酸包含ω-3不飽和脂肪酸(ω不飽和脂肪酸)，諸如二十二碳六烯酸(DHA)、二十碳五烯酸(EPA)、二十碳四烯酸
(arachidonic acid，ARA)、二十二碳五烯酸(docosapentaenoic acid，DPA)及α-次亞麻油酸及其類似物，且該等研究及工業化主要係由破囊壺菌屬物種(Thraustochytrium sp.)及裂殖壺菌屬物種微生物生產多不飽和脂肪酸，該等微生物為一種海洋微藻。舉例而言，揭示了一種用於使用裂殖壺菌屬物種ATCC20888及裂殖壺菌屬物種PTA10208(其為裂殖壺菌屬物種微生物)生產ω-3多不飽和脂肪酸之方法(美國專利第5,130,242號)及另外，一種用於使用破囊壺菌屬物種ATCC10212(破囊壺菌屬物種PTA10212)(其為破囊壺菌系列破囊壺菌屬物種微生物)生產二十二碳六烯酸及二十碳五烯酸之方法。
本發明之一個具體實例提供一種新穎裂殖壺菌屬物種微藻。在一個特定具體實例中，新穎裂殖壺菌屬物種微藻可為裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻(寄存編號KCTC14660BP)。
本發明之另一具體實例提供衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質或生物油。
本發明之其他具體實例提供一種飼料組成物，其包含裂殖壺菌屬物種微藻衍生之生物質、生物油或其組合。
本發明之其他具體實例提供一種食品組成物，其包含裂殖壺菌屬物種微藻衍生之生物質、生物油或其組合。
本發明之其他具體實例提供一種用於生產衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質或生物油的方法。
本發明之其他具體實例提供一種用於生產裂殖壺菌屬物種微藻之生物質或生物油的用途。
本發明之其他具體實例提供一種用於生產裂殖壺菌屬物種微藻之飼料組成物或食品組成物的用途。
本申請案中所揭示之各描述及具體實例可應用於其他描述及具體實例中之各者。換言之，本申請案中所揭示之各種要素的所有組合均屬於本發明之範圍內。另外，可發現本發明之範圍不受下文所描述的詳細描述限制。此外，所屬技術領域中具有通常知識者將僅使用常見實驗識別或確認本申請案中所描述之本發明之特定態樣的許多等效物。另外，此類等效物意欲包括於本發明中。
本發明之一個具體實例提供一種新穎裂殖壺菌屬物種微藻。
本說明書中所用之術語「破囊壺菌(Thraustochytrid)」意謂破囊壺菌目(order Thraustochytriales)微藻。另外，本說明書中所用之術語「裂殖壺菌屬物種(Schizochytrium sp.)」為屬於破囊壺菌目之破囊壺菌科(family Thraustochytriaceae)的屬名稱中之一者，且可與術語「裂殖壺菌屬物種(裂殖壺菌屬)(Schizochytrium sp.(genus Schizochytrium))」互換使用。此外，術語「微藻(microalgae)」意謂無法用裸眼看到且僅可經由顯微鏡在具有葉綠素之光合植物中看到且在水中以自由浮動方式生存的生物體，且亦稱為浮游植物。存在各種類型之微藻，且由於光合成係不可能的，因此甚至包括僅經由異養生長之品系。
作為本發明中之一個具體實例，在自海岸區域收集環境樣品以獲得破囊壺菌系列之純的經分離群落之後，作為總脂質及脂肪酸之分析的結果，獲得兩種品系亦即具有極佳胞內DHA含量之CD01-1821及CD01-1822。作為培養評估之結果，證實CD01-1821品系更適用於按比例擴大方法(scale-up process)，因為該品系在相同醱酵條件下具有更高的總生物質產量及總油含量。
因此，在本發明中，新穎裂殖壺菌屬物種微藻可為裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻(寄存編號KCTC14660BP)。
另外，裂殖壺菌屬物種品系可具有SEQ ID NO：1之18s rRNA核苷酸序列，但不限於此。舉例而言，裂殖壺菌屬物種微藻可具有18S rRNA，其由展示與SEQ ID NO：1之核苷酸序列具有80%或更高、85%或更高、90%或更高、95%或更高、98%或更高或99%或更高之序列一致性的核苷酸序列組成，但不限於此。
本說明書中所用之術語「二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)」為具有C22H32O2之化學式的多不飽和脂肪酸中之一者，且對應於ω-3脂肪酸以及α-次亞麻油酸(α-次亞麻油酸(α-linolenic acid)：ALA)及二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)，且常見名稱為二十二碳六烯酸(cervonic acid)，且其亦可表達為呈縮寫形式之22：6 n-3。
本說明書中所用之術語「二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)」為具有C20H30O2之化學式的多不飽和脂肪酸中之一者，且對應於ω-3脂肪酸以及ALA及DHA，且其亦可表達為呈縮寫形式之20：5 n-3。
按脂肪酸之總重量計，裂殖壺菌屬物種微藻可生產及/或包含35重量%至60重量%之DHA。舉例而言，以脂肪酸之總重量計，裂殖壺菌屬物種微藻可生產40重量%至65重量%、45重量%至65重量%、50重量%至65重量%、40重量%至60重量%、45重量%至60重量%、50重量%至60重量%或55重量%至60重量%之DHA。
按脂肪酸之總重量計，裂殖壺菌屬物種微藻可生產及/或包含0.1重量%至2重量%之EPA。舉例而言，以脂肪酸之總重量計，裂殖壺菌屬物種微藻可生產0.2重量%至2重量%、0.2重量%至1.5重量%、0.2重量%至1重量%、0.3重量%至2重量%、0.3重量%至1.5重量%、0.3重量%至1重量%、0.5重量%至2重量%、0.5重量%至1.5重量%、0.5重量%至1重量%、0.5重量%至0.9重量%或0.6重量%至0.8重量%之EPA。
本發明之另一態樣提供衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質或生物油，其包含裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻、微藻之培養物、培養物之乾燥產物或乾燥產物之溶胞產物。
裂殖壺菌屬物種微藻之描述如上文所描述。
本說明書中所使用之術語「生物質(biomass)」意謂生質能之能量來源，亦即活機體，諸如植物、動物、微生物及其類似者，且亦意謂生態學上單位時間及空間中存在之特定活機體之重量或能量的量。另外，生物質包含細胞所分泌之化合物，但不限於此，且可含有細胞及/或細胞中之內含物以及細胞外材料。在本申請案中，生物質可為裂殖壺菌屬物種微藻本身、其培養物、其乾燥產物、其溶胞產物或藉由培養或醱酵微藻產生之產物，或可為生物質之濃縮物或乾燥產物，但不限於此。
裂殖壺菌屬物種微藻之「培養物」係指藉由培養微藻產生之產物，且具體言之，其可為包含微藻之培養溶液或自培養溶液移除微藻之培養物濾液，但不限於此。裂殖壺菌屬物種微藻(microalgal)培養物之「乾燥產物」自微藻培養物移除水分，且例如其可呈微藻之乾燥微生物細胞形式，但不限於此。此外，乾燥產物之「溶胞產物(lysate)」統稱為對自微藻培養物移除水分之乾燥產物進行裂解的結果，且例如其可為乾燥微生物細胞粉末，但不限於此。可根據所屬技術領域中已知之培養方法，藉由將微藻接種至微藻培養基來製備裂殖壺菌屬物種微藻之培養物，且培養物之乾燥產物及其溶胞產物亦可根據所屬技術領域中已知之用於加工或乾燥微藻或培養溶液之方法來製備。
衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質可包含以生物質之總重量計40重量%至85重量%、45重量%至80重量%、50重量%至75重量%、50重量%至70重量%、54重量%至66重量%之粗脂肪。
衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質可包含按生物質之總重量
計5至25重量%、5至20重量%、10至20重量%或15至20重量%之粗蛋白質。
衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質可包含以脂肪酸之總重量計35重量%或更多或35重量%至60重量%之DHA，且可包含以脂肪酸之總重量計0.1重量%或更多或0.1重量%至2重量%之EPA，且可包含以脂肪酸之總重量計30重量%至40重量%或更多之棕櫚酸。
裂殖壺菌屬物種微藻具有高油含量高油含量，且特定言之高ω-3含量，以使得可縮短複合糖中之培養時間。因此，其對於按比例擴大方法係有利的。
「油含量(oil content)」可與「粗脂肪含量(crude fat content)」互換使用。
生物質可藉由根據一個態樣之衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質的製備方法製備。
本發明之其他態樣提供一種組成物，其包含裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻、微藻之培養物、培養物之乾燥產物或乾燥產物之溶胞產物。
組成物可包含裂殖壺菌屬物種微藻衍生之生物質、生物油或其組合。
本發明之其他態樣提供一種飼料組成物，其包含衍生自裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻之生物質、或該生物質之濃縮物或乾燥產物。
裂殖壺菌屬物種微藻、生物質、微藻之培養物、培養物之乾燥產物及乾燥產物之溶胞產物之描述如上文所描述。
生物質之濃縮物或乾燥產物可根據所屬技術領域中已知之用於微生物生物質之處理、濃縮或乾燥的方法製備。
本說明書中所用之術語「生物油(bio-oil)」意謂藉由生物、熱化學及物理化學萃取方法自生物質獲得之油，且在本申請案中，所製備之生物油可
含有多不飽和脂肪酸，且特定言之，可含有DHA及EPA，但不限於此。
在本說明書中，生物油可包含生物質萃取物。
作為用於製備生物油萃取物之方法，可使用根據用於裂解或溶解細胞膜或細胞壁組分之方法利用酶(諸如蛋白酶、纖維素酶、果膠酶或殼質酶或其類似物)之方法；用於使用均質機、超音波處理器、珠粒處理及其類似物以物理方式裂解細胞膜或細胞壁組分之方法；用於藉由直接添加溶劑藉由胞內滲透萃取之方法；在各種裂解過程之後經由離心過程進行分離之無溶劑萃取方法及其類似方法，但不限於此。
組成物可呈溶液、粉末或懸浮液之形式，但不限於此。組成物可為例如食品組成物、飼料組成物或飼料添加劑組成物。
本說明書中所用之術語「飼料組成物(feed composition)」係指飼餵至動物之食物。飼料組成物係指供應用於維持動物壽命或產生肉、牛奶及其類似物所需之有機或無機養分的物質。飼料組成物可進一步包含用於維持動物壽命或產生肉、牛奶及其類似物所需之營養組分。飼料組成物可製備為所屬技術領域中已知之各種類型的飼料，且特定言之，可包含濃縮飼料、粗飼料及/或專用飼料。
本說明書中所用之術語「飼料添加劑(feed additive)」包括出於各種效應之目的添加至飼料中的物質，該等效應諸如養分補充及防止體重減輕、增加飼料中纖維之可消化性、改良油品質、預防生殖病症及提高生育率、預防夏季高溫應激及其類似效應。本申請案之飼料添加劑對應於飼料管理法案(Feed Management Act)下之補充飼料，且可進一步包含礦物質製劑，諸如碳氫化鈉(sodium hydrocarbon)、膨土、氧化鎂、複合礦物及其類似物；作為痕量礦物質之礦物製劑，諸如鋅、銅、鈷、硒及其類似物；維生素製劑，諸如角蛋白、維生素E，維生素A、D及E，菸鹼酸、維生素B複合物及其類似物；保護性胺基酸製
劑，諸如甲硫胺酸、離胺酸及其類似物；保護性脂肪酸製劑，諸如脂肪酸鈣鹽及其類似物；活細胞；及酵母劑，諸如益生菌(細菌製劑)、酵母培養物、模具醱酵產物及其類似物。
本說明書中所用之術語「食品組成物」包括功能性食品、營養補充劑、健康食品及食品添加劑及其類似物之所有形式，且以上類型之食品組成物可根據所屬技術領域中已知之常見方法以各種形式製備。
本申請案之組成物可進一步包含：穀粒，諸如經研磨或壓碎之小麥、燕麥、大麥、玉米及稻米；植物蛋白質飼料，例如具有大豆及向日葵作為主要組分之飼料；動物蛋白質飼料，例如血粉、肉粉、骨粉及魚粉；糖及乳製品，例如由各種粉末狀奶粉及乳清粉末組成之乾燥組分，且除此之外，可進一步包含營養補充劑、消化及吸收增強劑、生長促進劑及其類似物。
本申請案之組成物可單獨投予或與可食用載劑當中之其他飼料添加劑組合投予。另外，組成物可直接混合作為追肥(top dressing)或飼餵或易於以分開的口服調配物形式投予以飼餵至動物中。當組成物分開投予以飼餵時，其可作為中間釋放或持續釋放調配物，以同樣所屬技術領域中已知之醫藥學上可接受之可食用載劑的組合形式來製備。此可食用載劑可為固體或液體，例如玉米澱粉、乳糖、蔗糖、大豆片、花生油、橄欖油、芝麻油以及丙二醇。當使用固體載劑時，組成物可為呈錠劑、膠囊、散劑、糖衣錠或口含錠或不可分散形式之追肥。當使用液體載劑時，組成物可為明膠軟膠囊或糖漿或懸浮液、乳液或溶液之調配物。
本申請案之組成物可含有例如防腐劑、穩定劑、潤濕劑或乳化劑、低溫保護劑或賦形劑或其類似物。低溫保護劑可為選自由以下者組成之群的一或多者：甘油、海藻糖、麥芽糊精、脫脂乳粉及澱粉。
防腐劑、穩定劑或賦形劑可以足以降低組成物中所包含之裂殖壺
菌屬物種微藻之劣化的有效劑量包含於組成物中。另外，當組成物呈乾燥狀態時，低溫保護劑可以足以降低組成物中所包含之裂殖壺菌屬物種微藻之劣化的有效劑量包含於組成物中。
組成物可藉由沈積、噴塗或混合添加至動物飼料中來使用。
本發明之組成物可施加至各種動物飲食，包括哺乳動物、鳥類、魚類、甲殼動物、頭足類動物、爬行動物及兩棲動物，但不限於此。舉例而言，哺乳動物可包括豬、母牛、綿羊、山羊、實驗嚙齒動物或寵物，且鳥類可包括家禽，且家禽可包括雞、火雞、鴨、鵝、野雞或鵪鶉或其類似物，但不限於此。此外，魚類可包括商業家畜魚及其魚苗、觀賞魚及其類似物，且甲殼動物可包括蝦、藤壺及其類似物，但不限於此。此外，組成物可施加至浮游動物輪蟲之飲食。
本發明之其他態樣提供一種用於生產衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質的方法，其包含培養裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻；及自微藻、其乾燥產物或其溶胞產物回收含有二十二碳六烯酸之生物質。
裂殖壺菌屬物種微藻、生物質、微藻之培養物、培養物之乾燥產物及乾燥產物之溶胞產物之描述如上文所描述。
本說明書中所用之術語「培養物(culture)」意謂使微藻在經適當控制之環境條件下生長。本申請案之培養方法可根據所屬技術領域中已知之合適的培養基及培養條件進行。此培養方法可易於由所屬技術領域中具有通常知識者根據所選擇之微藻來調整及使用。
特定言之，本申請案之裂殖壺菌屬物種微藻之培養可在異養條件(但不限於此)下進行。
本說明書中所用之術語「異養(heterotrophic)」為視獲自體外能量來源或養分來源的有機物而定的營養方法，且為與自養對應的術語，且其可與術語『暗培養(dark culture)』互換使用。
培養裂殖壺菌屬物種微藻不特定限於此，但可藉由已知分批培養方法、連續培養方法、分批進料培養方法以及其類似方法進行。本申請案之微藻的培養中所用的任何培養基及其他培養條件可在無特定限制之情況下使用，只要其為用於培養常見微藻之培養基即可。特定言之，本申請案之微藻可藉由在好氧條件下在含有適合碳源、氮源、磷源、無機化合物、胺基酸及/或維生素及其類似物之常見培養基中調節溫度、pH及其類似者來培養。
特定言之，可使用鹼性化合物(例如：氫氧化鈉、氫氧化鉀或氨)或酸性化合物(例如：磷酸酯或硫酸酯)調節適當pH(例如，pH 5至9，特定言之，pH 6至8，最特定言之，pH 6.8)，但不限於此。
另外，為了維持培養之好氧條件，可將氧氣或含氧氣體注入培養物中，或為了維持厭氧及微好氧條件，可在不注入氣體的情況下注入氮氣、氫氣或二氧化碳，但不限於此。
此外，培養溫度可維持在20至45℃或25至40℃，且可培養約10至160小時，但不限於此。另外，在培養期間，可使用諸如脂肪酸聚乙二醇酯之消泡劑以抑制氣泡形成，但不限於此。
用於培養裂殖壺菌屬物種微藻之培養基中所包含的碳源可為選自由以下者組成之群中之任何一或多者：葡萄糖、果糖、麥芽糖、半乳糖、甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、木糖及甘油，但用於培養微藻之任何碳源不限於此。
用於培養裂殖壺菌屬物種微藻之培養基中所包含的氮源可為：(i)選自由酵母萃取物、牛肉萃取物、蛋白腖(peptone)及胰腖(tryptone)組成之群的任何一或多種有機氮源，或ii)選自由乙酸銨、硝酸銨、氯化銨、硫酸銨、硝酸鈉、尿素及麩胺酸單鈉(Monosodium glutamate，MSG)組成之群的任何一或多種無機氮源，但任何用於培養微藻之氮源不限於此。
用於培養裂殖壺菌屬物種微藻之培養基可分別包含或混合且包
含磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀作為磷源及其對應之含鈉鹽及類似物，但不限於此。
使用所屬技術領域中已知之適當方法自微藻、微藻培養物、培養物之乾燥產物或乾燥產物之溶胞產物回收生物質可收集目標生物質。舉例而言，可使用離心、過濾、陰離子交換層析、結晶及HPLC及其類似者，且其可進一步包含純化方法。
本發明之其他態樣提供一種用於生產衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物油的方法，其包含培養裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻；及自微藻、其乾燥產物或其溶胞產物回收含有二十二碳六烯酸之生物質。
裂殖壺菌屬物種微藻、生物油、微藻之培養物、培養物之乾燥產物及乾燥產物之溶胞產物以及培養微藻之描述如上文所描述。
使用所屬技術領域中已知之適當方法自微藻、微藻培養物、培養物之乾燥產物或乾燥產物之溶胞產物回收脂質可收集目標脂質。舉例而言，可使用離心、過濾、陰離子交換層析、結晶及HPLC及其類似者，且其可進一步包含純化方法。
舉例而言，脂質及脂質衍生物，諸如脂肪醛、脂肪醇及烴(例如烷烴)可用疏水性溶劑，諸如己烷萃取。亦可使用液化、油液化及超臨界CO2萃取之方法及其類似方法萃取脂質及脂質衍生物。另外，已知的微藻脂質回收方法包括例如以下方法：i)藉由離心收穫細胞及用蒸餾水洗滌，且接著藉由冷凍乾燥進行乾燥，及ii)粉碎所得細胞粉末，且接著用正己烷萃取脂質(Miao,X及Wu,Q,Biosource Technology(2006)97：841-846)。
本發明之其他態樣提供一種用途，其用於自裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻、微藻之培養物、培養物之乾燥產物或乾燥產物之溶胞產物中生產生物質或生物油。
裂殖壺菌屬物種微藻、生物質、微藻培養物、培養物之乾燥產物
及乾燥產物之溶胞產物如上文所描述。
本發明之其他具體實例提供一種用途，其用於自裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻、微藻培養物、培養物之乾燥產物或乾燥產物之溶胞產物中生產飼料組成物或食品組成物。
裂殖壺菌屬物種微藻、生物質、微藻培養物、培養物之乾燥產物及乾燥產物之溶胞產物如上文所描述。
本發明之新穎破囊壺菌系列微藻在生物質中具有高脂肪含量且其中具有高含量之不飽和脂肪酸，諸如二十二碳六烯酸及二十碳五烯酸，且極易於自生物質萃取藉由自身或藉由培養及醱酵所產生之生物質及包括不飽和脂肪酸之脂肪組分。因此，該微藻、生物質乾燥產物及自其產生之生物油可有效地用作用於飼料之組成物或用於食品之組成物或其類似物。
[圖1]為一示意圖，其展示分離破囊壺菌系列微藻品系之方法。
[圖2]為一圖式，其展示分析總脂質含量及29種經分離的破囊壺菌系列微藻之ω-3當中的二十二碳六烯酸(DHA)及二十碳五烯酸(EPA)之含量的結果。
[圖3]為用光學顯微鏡觀測野生型裂殖壺菌屬物種品系CD01-1821之相片。
在下文中，將藉由實施例更詳細地描述本發明。然而，此等實施
例意欲說明性地描述一或多個特定具體實例，且本發明之範圍不受此等實施例限制。
實施例1.破囊壺菌系列微藻之分離
為分離破囊壺菌系列微藻，自沿著韓國西海岸區域、Seocheon、Gunsan、Buan及Yeonggwang-gun區域之總共40個區域收集呈海水、葉子及沈積物形式之環境樣品。以產生及觀測到有機沈積物之特定區域為中心進行取樣，且將所收集之環境樣品在7天內輸送至實驗室環境，且進行用於移除除破囊壺菌系列微藻以外之其他污染源(諸如細菌微生物及真菌及原生生物)的操作。經由連續顯微鏡檢查，聚焦於顯示出特徵形態且在生命週期內形成可觀測到之游走孢子或構成在發育階段期間所產生之外質網狀結構的樣品，來分離出破囊壺菌系列微藻細胞(圖1)。作為分離製程中可使用之分離及培養培養基，利用經改良之YEP培養基(酵母萃取物0.1g/L、蛋白腖0.5g/L、MgSO4．7H2O 2g/L、海鹽50g/L、H3BO3 5.0mg/L、MnCl2 3.0mg/L、CuSO4 0.2mg/L、NaMo4．2H2O 0.05mg/L、CoSO4 0.05mg/L、ZnSO4．7H2O 0.7mg/L、瓊脂15g/L)。可獲得經由若干次分離及繼代培養過程移除污染源之純的經分離群落，且將經分離群落再次在包括抗生素調配混合溶液(硫酸鏈黴素0-50mg/L、安比西林(Ampicillin)0-30mg/L、青黴素G 0-30mg/L、硫酸康黴素(Kanamycin sulfate)0-30mg/L)之固體培養基中進行污染源控制及移除過程，且藉此獲得純的可分離群落。
實施例2.經分離微藻之培養評估及優異品系選擇
針對實施例1中之純的經分離群落進行培養評估，且經由此選擇優異品系。
特定言之，使用經改良之GGYEP培養基(葡萄糖5g/L、甘油5g/L、酵母萃取物0.1g/L、蛋白腖0.5g/L、MgSO4．7H2O 2g/L、海鹽50g/L、H3BO3 5.0mg/L、MnCl2 3.0mg/L、CuSO4 0.2mg/L、NaMo4．2H2O 0.05mg/L、CoSO4 0.05
mg/L、ZnSO4．7H2O 0.7mg/L)在250mL燒瓶中在10-35℃、100-200rpm之條件下培養實施例1中之純的經分離群落約2天。基於已進行的培養的結果，選擇29種可在30℃或更高的溫度下生長，且具有極佳生長速率且可確保微生物細胞量之微藻。對於所選擇之微藻品系，在經改良GYEP培養基中以500mL燒瓶規模培養2天，該培養基包括30g/L葡萄糖作為碳源，且培養條件為30℃、150rpm。在確認所有輸入碳源在培養環境中被消耗2天後，回收全部培養溶液且在60℃之乾燥烘箱中乾燥隔夜以獲得生物質。
為了分析經培養微藻微生物細胞之脂質及多不飽和脂肪酸含量，使用如下方法，且微藻衍生之利用經乾燥微生物細胞之含脂肪酸油係藉由以下方法來量測。方法為，將8.3M鹽酸溶液(HCl)添加至5g乾燥微生物細胞，且接著在80℃下水解微藻微生物細胞之細胞壁，且接著添加乙基醚30mL及石油醚20mL且混合30秒，且接著重複離心3次或更多次。回收經分離之溶劑層，且轉移至預稱重之圓底燒瓶中，且接著經由氮氣吹掃移除溶劑，且在乾燥器中冷卻為恆重。藉由在乾燥之後藉由自燒瓶之重量減去空燒瓶之重量來量測經乾燥油之重量，計算總油含量。藉由用甲醇0.5N NaOH及14%三氟硼烷甲醇(BF3)預處理且藉由氣相層析法量測展示油中所包含之二十二碳六烯酸(DHA)之含量。
[計算公式1]
總油含量(%)=(*油g/經乾燥微生物細胞量g)×100
*油g：在酸水解及溶劑移除之後的燒瓶重量-球形燒瓶重量
下表1之「生物質」意指培養溶液中微生物細胞之濃度，且其可與下表2之細胞乾重(dry cell weight，DCW)互換使用。
(在該表中，TFA意謂總脂肪酸，且可與「粗脂肪含量」或「粗脂肪量」或「總脂質」互換使用。)
因此，如表1及圖2中所示，展示2種CD01-1821及CD01-1822品系中的胞內DHA含量極高。
作為脂肪酸分析之結果，在5L規模培養基中針對具有極佳胞內DHA含量之2種CD01-1821、CD01-1822品系進行培養評估。對於種菌培養，將其在500mL燒瓶中在30℃、150rpm之條件下使用滅菌MJW02培養基(葡萄糖30g/L、MgSO4．7H2O 3.0g/L、Na2SO4 15g/L、NaCl 0.8g/L、酵母萃取物1.0g/L、MSG．1H2O 1.0g/L、NaNO3 1.0g/L、KH2PO4 0.8g/L、K2HPO4 1.5g/L、CaCl2 0.5g/L、維生素混合溶液10ml/L)培養約24小時。將種菌培養之燒瓶等分且接種於
5L培養基中。供應與總培養溶液相比28%之葡萄糖碳源且進行培養約72小時，且在滅菌MJW02培養基中在30℃、500rpm、1.5vvm、pH 5-8之培養環境條件下進行培養。
因此，如表2中所示，證實CD01-1821品系更適用於按比例擴大方法，因為該品系在相同醱酵條件下具有高於CD01-1822品系之總生物質產量及粗脂肪量。因此，選擇CD01-1821品系且將其用於品系序列鑑別及額外品系研發。使用光學顯微鏡觀測所選擇之CD01-1821品系之類型且展示於圖3中。
實施例3.複合碳源條件下CD01-1821品系之培養特徵的確認
在基於異養微生物之醱酵中，葡萄糖組分主要用作碳源之原料。此時，葡萄糖為呈90%或更高之精製形式的單醣，且在工業規模醱酵期間產生的成本高於其他碳源原料組分。為了利用廉價碳源原料且經由其獲得價格競爭力，重要的是發現一種可用於藉由微生物醱酵且可通常自廉價碳源組分而非純化葡萄糖培養的品系。
因此，針對實施例2中所選擇之CD01-1821品系及CJM01(KR 10-2100650 B1)品系在具有葡萄糖、果糖或蔗糖作為主要組分之粗糖中進行醱酵培養評估以確認培養特徵。在30L培養基中進行培養，且基於經改良之MJW02培養基，分別用包含以下者之粗糖溶胞產物進行實驗：葡萄糖450g/L；葡萄糖225g/L及果糖225g/L之混合物；葡萄糖225g/L、果糖220g/L及硫酸鹽1.51g/L。培養條件設定為與30℃、500rpm、1.5vvm、pH 5-8之條件相同，且分別供應總培養溶液之35%的碳源。
因此，如表3中所示，CD01-1821品系展示在醱酵中在果糖混合物或粗糖溶胞產物培養基條件而非葡萄糖單組分下在等同或更高含量下之總生物質產量及粗脂肪量。另一方面，當培養基中添加除葡萄糖組分以外之糖組分時，CJM01品系展示雙重碳源消耗及細胞生長模式之雙期生長形式，且展示總培養時間延長之現象。經由對應的實驗結果，可確認CD01-1821品系在複合碳源條件下具有按比例擴大醱酵之可能性。
實施例4.新穎裂殖壺菌屬物種品系CD01-1821之鑑別
對於實施例1及實施例2中之經分離及選擇之微藻品系CD01-1821之生物分子鑑別，分析18S rRNA基因序列。
特定言之，在自純的經分離微藻CD01-1821之群落萃取及分離gDNA之後，使用引子18s-Fwd、LABY-ARev進行PCR擴增反應以用於表4中所述之18s rRNA區域之基因擴增。
對於PCR反應，使用含有taq聚合酶之反應溶液，在95℃下進行變性5分鐘；且接著在95℃下變性30秒、在50℃下黏合30秒且在72℃下聚合2分鐘，重複35次；且接著在72℃下進行聚合反應5分鐘。經由PCR方法擴增之反應溶液在1%瓊脂糖凝膠中進行電泳，且藉此，確認約1000bp大小之DNA片段經擴增，且進行核苷酸序列定序分析。作為分析之結果，經確認，經由NCBI BLAST搜尋，
所獲得之對應序列展示與屬於破囊壺菌科(family)系列微藻之蛞蝓形裂殖壺菌(Schizochytrium limacinum)品系OUC109之18S rRNA基因序列的95.11%同源性，且展示與裂殖壺菌屬物種之裂殖壺菌屬物種品系LY-2012之18S rRNA基因序列的95.0%同源性。經由此，確認經分離之微藻CD01-1821為新穎裂殖壺菌屬物種品系，且命名為裂殖壺菌屬物種CD01-1821品系，且於2021年8月23日寄存於韓國生物科學與生物技術研究所之韓國菌種保藏中心(KCTC)且指定為寄存編號KCTC14660BP。
實施例5. CD01-1821品系培養溶液樣品之粗蛋白質含量之分析
為分析裂殖壺菌屬物種CD01-1821品系培養溶液樣品中之粗蛋白質含量，使用如下方法。
特定言之，精確量測相當於約20至30mg之乾燥微生物細胞，亦即各醱酵溶液乾燥產物(試樣)且置於分解管中，且添加兩種分解促進劑。當硫酸(H2SO4)與硫酸鉀(K2SO4)之比率為1.4至2.0：1.0時，分解促進劑被有效地分解。接著，將濃硫酸(H2SO4)12至15mL添加至分解管，且當藉由在420℃下在分解裝置中分解45至60分鐘，分解溶液之顏色呈透明淺綠色(使用銅促進劑)或透明黃色(使用硒催化劑)時，將其冷卻至室溫。冷卻後，將80mL蒸餾水添加至經分解測試溶液中。在將與混合指示物混合之25mL收集溶液添加至錐形瓶(Erlenmeyer flask)中之後，將其置於蒸餾設備上，且抬升錐形瓶支架以使得蒸餾溶液在蒸餾期間進入收集溶液。將50mL氫氧化鈉溶液(NaOH)(量對應於在分解期間所使用之硫酸的4倍)添加至分解管，且將其在蒸餾設備中蒸餾3至4分鐘。經確認，蒸餾設備的錐形瓶中的收集溶液變成綠色同時收集蒸餾溶液中所包含的氨(NH3)。使用鹽酸溶液(通常0.1N或0.2N)滴定蒸餾溶液直至終點達到淡粉色，且記錄用於滴定之酸的量。在自動裝置之情況下，蒸餾、滴定及計算均自動進行。使用實驗結果，藉由以下計算公式2推導出氮%。藉由將先前推導出之
氮%乘以6.25之平均氮係數來表達蛋白質定量。
[計算公式2]
氮(%)={(HCl量mL-空白測試mL)×M×14.01/試樣量mg}×100
*14.01：氮之原子量
*M：HCl之體積莫耳濃度
*降解促進劑：Kjeltabs或其等效者
*硼酸溶液：藉由添加H3BO3 100g(或400g)、0.1%溴甲酚綠色溶液100mL及0.1%甲基紅溶液100mL製備之恆定體積為10L之1%(或4%)硼酸溶液
對於胺基酸含量分析，自CD01-1821及CD01-2147品系之培養溶液收集約1g之醱酵的溶液乾燥產物(試樣)樣品。在利用6N濃度之HCl溶液對胞內蛋白質進行酸水解之後，將其稀釋且用蒸餾水過濾，且進行液相層析。
因此，如表5中所示，經確認，CD01-1821乾燥微生物細胞中之粗
蛋白質含量為17%。另外，在乾燥微生物細胞中之胺基酸含量中，麩胺酸最高，且其次為酪胺酸、丙胺酸、苯丙胺酸、甘胺酸、精胺酸、絲胺酸、纈胺酸、離胺酸、天冬胺酸、甲硫胺酸、異白胺酸及白胺酸。經由此，確認CD01-1821乾燥微生物細胞中之胺基酸係由麩胺酸、酪胺酸、丙胺酸、苯丙胺酸、甘胺酸、精胺酸、絲胺酸、纈胺酸、離胺酸、天冬胺酸、甲硫胺酸、異白胺酸及白胺酸構成。
根據以上描述，本申請案所屬技術領域中具有通常知識者將能夠理解，本申請案可以其他特定形式實施而不改變其技術精神或基本特徵。就此而言，應理解，上文所描述之實施例在所有態樣中為例示性的而非限制性的。本申請案之範圍應解釋為包括由稍後將描述之申請專利範圍的含義及範圍衍生的所有變化或修改形式以及其等效概念而非以上詳細描述。
[寄存編號]
寄存機構之名稱：韓國生物科學與生物技術研究所(Korea Research Institute of Bioscience and Biotechnology)之韓國菌種保藏中心(Korea Collection for Type Culture，KCTC)
寄存編號：KCTC14660BP
寄存日期：20210823
Claims (14)
- 一種新穎裂殖壺菌屬物種(Schizochytrium sp.)CD01-1821微藻(寄存編號KCTC14660BP)。
- 如請求項1之裂殖壺菌屬物種微藻，其中該裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻具有生產ω-3不飽和脂肪酸之能力。
- 如請求項2之裂殖壺菌屬物種微藻，其中該ω-3不飽和脂肪酸為二十二碳六烯酸(docosahexaenoic acid，DHA)及二十碳五烯酸(eicosapentaenoic acid，EPA)。
- 如請求項3之裂殖壺菌屬物種微藻，其中該微藻產生以該脂肪酸之總重量計35重量%至60重量%的二十二碳六烯酸。
- 如請求項3之裂殖壺菌屬物種微藻，其中該微藻產生以該脂肪酸之總重量計0.1重量%至2重量%之二十碳五烯酸。
- 一種衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質，其包含如請求項1之裂殖壺菌屬物種微藻、該微藻之培養物、該培養物之乾燥產物或該乾燥產物之溶胞產物。
- 一種組成物，其包含如請求項6之衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質、該生物質之濃縮物或乾燥產物或該生物質之萃取物。
- 如請求項7之組成物，其中該組成物為飼料組成物或食品組成物。
- 一種用於生產衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質的方法，其包含：1)培養如請求項1之裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻；及2)自該微藻、其乾燥產物或其溶胞產物回收含有二十二碳六烯酸之生物質。
- 如請求項9之用於生產衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物質的 方法，其中該培養係在異養條件下進行。
- 如請求項9之用於生產生物質的方法，其中該培養係使用包含碳源及氮源之培養基進行。
- 如請求項11之用於生產生物質的方法，其中該碳源為選自由以下者組成之群的一或多種類別：葡萄糖、果糖、麥芽糖、半乳糖、甘露糖、蔗糖、阿拉伯糖、木糖及甘油。
- 如請求項11之用於生產生物質的方法，其中該氮源為：i)選自由酵母萃取物、牛肉萃取物、蛋白腖及胰腖組成之群的任何一或多種有機氮源，或ii)選自由乙酸銨、硝酸銨、氯化銨、硫酸銨、硝酸鈉、尿素及麩胺酸單鈉(Monosodium glutamate，MSG)組成之群的任何一或多種無機氮源。
- 一種用於生產衍生自裂殖壺菌屬物種微藻之生物油的方法，其包含：1)培養如請求項1之裂殖壺菌屬物種CD01-1821微藻；及2)自該微藻、其乾燥產物或其溶胞產物回收含有二十二碳六烯酸之生物質。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR10-2021-0152561 | 2021-11-08 | ||
| KR1020210152561A KR20230066973A (ko) | 2021-11-08 | 2021-11-08 | 세포 내 오일 함유량이 높은 신규한 스키조키트리움 속 균주 및 이를 이용한 오메가3를 함유한 오일 생산방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TW202319535A TW202319535A (zh) | 2023-05-16 |
| TWI844072B true TWI844072B (zh) | 2024-06-01 |
Family
ID=86241267
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW111130426A TWI844072B (zh) | 2021-11-08 | 2022-08-12 | 具有高細胞內油含量的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP4431594A1 (zh) |
| KR (1) | KR20230066973A (zh) |
| CN (1) | CN118215730A (zh) |
| AR (1) | AR127602A1 (zh) |
| AU (1) | AU2022382354A1 (zh) |
| CA (1) | CA3236164A1 (zh) |
| CL (1) | CL2024001382A1 (zh) |
| MX (1) | MX2024005590A (zh) |
| TW (1) | TWI844072B (zh) |
| WO (1) | WO2023080400A1 (zh) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101847551B1 (ko) * | 2016-11-04 | 2018-04-10 | 전북대학교산학협력단 | 카로티노이드 계열의 항산화 색소 및 dha를 포함한 바이오오일을 고생산하는 돌연변이 미세조류인 스키조키트리움 속 shg104 균주 및 이의 용도 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5130242A (en) | 1988-09-07 | 1992-07-14 | Phycotech, Inc. | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| KR20080111586A (ko) * | 2007-06-19 | 2008-12-24 | 이정열 | Schizochytrium mangrovei MM103을 이용한 Docosahexanoic acid(DHA)의 생산 방법 |
| KR101777217B1 (ko) * | 2015-09-15 | 2017-09-11 | 한국생명공학연구원 | Dha를 고농도로 포함한 바이오오일 생산 미세조류인 스키조키트리움 속 sh103 균주 및 이의 용도 |
| KR20190110186A (ko) * | 2018-03-20 | 2019-09-30 | 재단법인 탄소순환형 차세대 바이오매스 생산전환 기술연구단 | Dha를 고농도로 포함한 바이오오일 생산 미세조류인 스키조키트리움 속 abc-101 균주 및 상기 균주를 이용한 dha 생산 방법 |
| KR102100650B1 (ko) | 2018-06-29 | 2020-04-16 | 씨제이제일제당 주식회사 | 신규한 트라우즈토카이트리움 속 균주, 및 이를 이용한 다중불포화지방산 생산방법 |
| KR102550213B1 (ko) * | 2020-12-07 | 2023-06-30 | 씨제이제일제당 주식회사 | 신규한 스키조키트리움 속 균주 및 이를 이용한 다중불포화지방산 생산방법 |
-
2021
- 2021-11-08 KR KR1020210152561A patent/KR20230066973A/ko not_active Application Discontinuation
-
2022
- 2022-08-10 EP EP22890136.9A patent/EP4431594A1/en active Pending
- 2022-08-10 CA CA3236164A patent/CA3236164A1/en active Pending
- 2022-08-10 AU AU2022382354A patent/AU2022382354A1/en active Pending
- 2022-08-10 WO PCT/KR2022/011959 patent/WO2023080400A1/ko active Application Filing
- 2022-08-10 MX MX2024005590A patent/MX2024005590A/es unknown
- 2022-08-10 CN CN202280074522.9A patent/CN118215730A/zh active Pending
- 2022-08-12 TW TW111130426A patent/TWI844072B/zh active
- 2022-11-08 AR ARP220103055A patent/AR127602A1/es unknown
-
2024
- 2024-05-07 CL CL2024001382A patent/CL2024001382A1/es unknown
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101847551B1 (ko) * | 2016-11-04 | 2018-04-10 | 전북대학교산학협력단 | 카로티노이드 계열의 항산화 색소 및 dha를 포함한 바이오오일을 고생산하는 돌연변이 미세조류인 스키조키트리움 속 shg104 균주 및 이의 용도 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| MX2024005590A (es) | 2024-05-23 |
| CA3236164A1 (en) | 2023-05-11 |
| WO2023080400A1 (ko) | 2023-05-11 |
| KR20230066973A (ko) | 2023-05-16 |
| CL2024001382A1 (es) | 2024-09-27 |
| CN118215730A (zh) | 2024-06-18 |
| AR127602A1 (es) | 2024-02-14 |
| AU2022382354A1 (en) | 2024-05-02 |
| EP4431594A1 (en) | 2024-09-18 |
| TW202319535A (zh) | 2023-05-16 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5940194B2 (ja) | 改変された量の塩化物およびカリウムを使用した微細藻類における高レベルのｄｈａの産生法 | |
| US20240101953A1 (en) | Novel schizochytrium sp. strain and polyunsaturated fatty acid production method using same | |
| RU2754686C1 (ru) | Новые штаммы микроводорослей рода Thraustochytrium и способ получения полиненасыщенных жирных кислот с их использованием | |
| CN116490616A (zh) | 由单一微藻制备含蛋白质和ω-3脂肪酸的生物质的方法及由其制备的生物质 | |
| TWI844072B (zh) | 具有高細胞內油含量的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 | |
| TWI842054B (zh) | 易於萃取細胞中之油的新穎裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系及使用其生產含ω-3之油的方法 | |
| RU2827970C1 (ru) | Новый штамм schizochytrium sp. и способ получения полиненасыщенных жирных кислот с его использованием | |
| JP2024540424A (ja) | 細胞内のオイル抽出が容易な新規のシゾキトリウム属菌株およびこれを用いたオメガ３を含むオイルの生産方法 | |
| TW202426626A (zh) | 裂殖壺菌屬物種（Schizochytrium sp.）品系的新穎品系及使用其生產含ω-3之油的方法 | |
| TW202432824A (zh) | 裂殖壺菌屬菌株之新穎菌株以及使用其生產含有花生四烯酸的油之方法 | |
| KR102023756B1 (ko) | 신규 트라우스토키트리드〔Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｄ〕 계 미세조류 트라우스토키트리움〔Ｔｈｒａｕｓｔｏｃｈｙｔｒｉｕｍ〕ｓｐ．ＬＡ６〔ＫＣＴＣ１２３８９ＢＰ〕및 이를 이용한 바이오오일의 생산방법 |