TWI837925B - 免疫原性組成物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本發明揭示一種免疫原性組成物，其包含有一源自於羅伊氏乳酸桿菌的醣基化伴護素60以及一免疫原。本發明亦揭示一種包含有該免疫原性組成物的口服疫苗，以及該口服疫苗在抗癌上的用途。

Description

免疫原性組成物及其用途
本發明是有關於一種免疫原性組成物(immunogenic composition)，其包含有一源自於羅伊氏乳酸桿菌( Lactobacillus reuteri)的醣基化伴護素60 (glycosylated chaperonin 60)以及一免疫原。本發明亦有關於一種包含有該免疫原性組成物的口服疫苗(oral vaccine)，以及該口服疫苗在抗癌上的用途。
熱休克蛋白(heat shock protein, HSP)是一種細胞(例如，真核與原核細胞)因應環境的壓力所產生的分子伴護蛋白(molecular chaperone)。HSP依據其分子量的大小而被區分為不同的家族，包括HSP10、HSP40、HSP60、HSP70、HSP90以及HSP100。HSP60 [又被稱作GroEL或伴護素60 (chaperonin 60, Cpn60)是目前被研究最多的HSP之一，它通常會被表現於病原菌菌體的表面上，並且當該病原菌侵入宿主細胞時會使HSP60的表現量明顯增加。HSP60已被知曉可做為一種細菌性免疫原(bacterial immunogen)，其能誘發先天性與適應性免疫反應。
目前已有研究顯示衍生自病原菌的HSP能有效地對抗病原菌感染。例如，在Bansal A. et al. (2010), Mol. Cell Biochem., 337:213-221中，Bansal A.等人揭示使用衍生自傷寒沙門桿菌( Salmonella typhi)的HSP60來對小鼠進行疫苗接種(vaccination)能夠有效地刺激免疫反應以及提供對抗致命性傷寒沙門桿菌Ty2感染(lethal S. typhiTy2 infection)的保護性免疫(protective immunity)。
在Yamaguchi H. et al. (2003), Clin. Diagn. Lab. Immunol., 10:808-812中，Yamaguchi H.等人揭示使用衍生自幽門螺旋桿菌( Helicobacter pylori)的HSP60來對無特定病原菌(specific pathogen free, SPF)小鼠進行疫苗接種能夠有效地抑制幽門螺旋桿菌的定殖(colonization)。但是，這些經接種的小鼠被觀察到有嚴重的免疫後胃炎(postimmunization gastritis)以及胃炎所造成的腺體結構(glandular structure)破壞、表面糜爛(surface erosion)以及顯著的發炎細胞浸潤(inflammatory cells infiltration)。
已有研究報導，醣基化HSP60 (glycosylated HSP60)可從益生菌菌體中被分離出來。例如，在Tytgat H.L. et al. (2016), J. Mol. Microbiol. Biotechnol., 26:345-358中，Tytgat H.L.等人從鼠李糖乳酸桿菌GG ( Lactobacillus rhamnosusGG, LGG)菌體中分離出各種的醣基化蛋白(glycosylated proteins)，其中包括醣基化GroEL。
就申請人所知，迄今尚未有研究報導衍生自益生菌的醣基化HSP60可被應用在疫苗上。
發明概要
於是，在第一個方面，本發明提供一種免疫原性組成物(immunogenic composition)，其包含有一源自於羅伊氏乳酸桿菌( Lactobacillus reuteri)的醣基化伴護素60 (glycosylated chaperonin 60, Cpn60)以及一免疫原(immunogen)。
在第二個方面，本發明提供一種口服疫苗(oral vaccine)，其包含有一粒子(particle)，該粒子含有： 一如上所述的免疫原性組成物作為核心(core)； 一包覆該免疫原性組成物的抗性澱粉內殼(resistant starch inner shell)；以及 一包覆該抗性澱粉內殼的海藻酸鈣外殼(calcium alginate outer shell)。
在第三個方面，本發明提供一種如上所述的免疫原性組成物供應用於製備一用來疫苗接種(vaccination)之醫藥品的用途。
在第四個方面，本發明提供一種如上所述的免疫原性組成物供應用於製備一用來對抗肝癌之醫藥品的用途。
在第五個方面，本發明提供一種對抗肝癌的方法，其包括對一個體投予一如上所述的口服疫苗。
於本發明中，包含有該免疫原性組成物的口服疫苗被證實能夠有效地誘發對於H22細胞-關聯性免疫原具有專一性的IgA與IgG1的大量生成，因而該源自於羅伊氏乳酸桿菌的醣基化Cpn60被認為能夠提升免疫原的免疫原性(immunogenicity)，而可供用於疫苗相關應用。
發明的詳細說明
要被瞭解的是：若有任何一件前案刊物在此被引述，該前案刊物不構成一個下述承認：在台灣或任何其他國家之中，該前案刊物形成本技藝中的常見一般知識之一部分。
為了這本說明書之目的，將被清楚地瞭解的是：文字“包含有(comprising)”意指“包含但不限於”，以及文字“包括(comprises)”具有一對應的意義。
除非另外有所定義，在本文中所使用的所有技術性與科學術語具有熟悉本發明所屬技藝的人士所共同瞭解的意義。一熟悉本技藝者會認知到許多與那些被描述於本文中者相似或等效的方法和材料，它們可被用於實施本發明。當然，本發明決不受到所描述的方法和材料之限制。
本發明提供一種免疫原性組成物(immunogenic composition)，其包含有一源自於羅伊氏乳酸桿菌( Lactobacillus reuteri)的醣基化伴護素60 (glycosylated chaperonin 60, Cpn60)以及一免疫原(immunogen)。
如本文所使用的，術語“免疫原”與“抗原(antigen)”可被交替地使用，意指包含一或多個表位(epitope)的分子，其能夠誘發一個體(subject)的體液性免疫反應(humoral immune response)和/或細胞免疫反應(cellular immune response)。
依據本發明，該免疫原可以是一經減毒的(attenuated)、去活化的(inactivated)或經修飾的(modified)活病原體(pathogen)[例如，細菌(bacteria)、病毒(virus)、真菌(fungi)、寄生蟲(parasite)或其他微生物(microbes)]。此外，該免疫原亦可以是一衍生自病原體、細胞(cell)、組織(tissue)或器官(organ)的組分(component)或分子(molecule)，例如，經分離、純化或重組的蛋白質(protein)、胜肽(peptide)、核酸(nucleic acid)、脂質(lipid)或醣(carbohydrate)。
依據本發明，該免疫原可以是一種與腫瘤有關的免疫原(tumor-associated immunogen)。
如本文所使用的，術語“與腫瘤有關的免疫原”意指由腫瘤細胞所表現的蛋白質或多肽，例如，位於腫瘤細胞的細胞膜之表面蛋白質或多肽、核蛋白以及醣蛋白等。
依據本發明，該腫瘤是選自於由下列所構成的群組：肝細胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)、膽管癌(cholangiocarcinoma)、肝母細胞瘤(hepatoblastoma)、淋巴瘤(lymphoma)、肉瘤(sarcoma)，以及它們的組合。
在本發明的一個較佳具體例中，該腫瘤是肝細胞癌。
在某些具體例中，該腫瘤亦可以是癌症患者的原位癌(carcinoma in situ)。
依據本發明，該免疫原是選自於由下列所構成的群組：肝細胞癌細胞-關聯性免疫原(hepatocellular carcinoma cell-associated immunogen)、膽管癌細胞-關聯性免疫原(cholangiocarcinoma cell-associated immunogen)、肝母細胞瘤細胞-關聯性免疫原(hepatoblastoma cell-associated immunogen)、淋巴瘤細胞-關聯性免疫原(lymphoma cell-associated immunogen)、肉瘤細胞-關聯性免疫原(sarcoma cell-associated immunogen)，以及它們的組合。
在本發明的一個較佳具體例中，該免疫原是H22細胞-關聯性免疫原。
本發明亦提供一種口服疫苗(oral vaccine)，其包含有一粒子(particle)，該粒子含有： 一如上所述的免疫原性組成物作為核心(core)； 一包覆該免疫原性組成物的抗性澱粉內殼(resistant starch inner shell)；以及 一包覆該抗性澱粉內殼的海藻酸鈣外殼(calcium alginate outer shell)。
依據本發明，該抗性澱粉內殼與該海藻酸鈣外殼可利用熟習此技藝者所詳知且慣用的技術來形成，在此方面，可參考，例如，TW 202210086 A、Zafarullah M. et al. (2017), Food Hydrocoll., 66:286-295、N H Zakaria et al. (2017), IOP Conf. Ser.: Mater. Sci. Eng.doi: 10.1088/1757-899X/209/1/012087以及Carbinatto F.M. et al. (2012), Int. J. Pharm ., 423:281-288。
依據本發明，以該抗性澱粉的總重量為計算基礎，該抗性澱粉可包含有15-35 wt%的直鏈澱粉(amylose)以及65-85 wt%的支鏈澱粉(amylopectin)。在某些具體例中，該抗性澱粉包含有17-24 wt%的直鏈澱粉以及76-83 wt%的支鏈澱粉。
依據本發明，該抗性澱粉可以是源自於植物的第二型抗性澱粉(resistant starch type 2, RS2)。該植物可包括，但不限於：香蕉、馬鈴薯、番薯、玉米、高粱、木薯、小麥以及稻米。
此外，本發明提供一種如上所述的免疫原性組成物供應用於製備一用來疫苗接種(vaccination)之醫藥品的用途。
本發明亦提供一種如上所述的免疫原性組成物供應用於製備一用來對抗肝癌之醫藥品的用途。
如本文所使用的，術語“疫苗接種”意指主動免疫(active immunization)，亦即藉由對一個體投予免疫原來誘發專一性免疫反應(specific immune response)。
依據本發明，該醫藥品可利用熟習此技藝者所詳知的技術而被製造成一適合於口服投藥(oral administration)之劑型(dosage form)，這包括，但不限於：無菌的粉末、錠劑(tablet)、片劑(troche)、口含錠(lozenge)、丸劑(pellet)、膠囊(capsule)、分散性粉末(dispersible powder)或細顆粒(granule)、溶液、懸浮液(suspension)、乳劑(emulsion)、糖漿(syrup)、酏劑(elixir)、濃漿(slurry)以及類似之物。
依據本發明，該醫藥品可以是一口服疫苗。
依據本發明，該醫藥品可進一步包含有一被廣泛地使用於藥物製造技術之藥學上可接受的載劑(pharmaceutically acceptable carrier)。例如，該藥學上可接受的載劑可包含一或多種選自於下列的試劑：溶劑(solvent)、緩衝液(buffer)、乳化劑(emulsifier)、懸浮劑(suspending agent)、分解劑(decomposer)、崩解劑(disintegrating agent)、分散劑(dispersing agent)、黏結劑(binding agent)、賦形劑(excipient)、安定劑(stabilizing agent)、螯合劑(chelating agent)、稀釋劑(diluent)、膠凝劑(gelling agent)、防腐劑(preservative)、潤濕劑(wetting agent)、潤滑劑(lubricant)、吸收延遲劑(absorption delaying agent)、脂質體(liposome)以及類似之物。有關這些試劑的選用與數量是落在熟習此項技術之人士的專業素養與例行技術範疇內。
依據本發明，該醫藥品可進一步包含有一選自於由下列所構成之群組的佐劑(adjuvant)：皂素(saponin)、海藻糖二黴菌酸酯(trehalose dimycolate)、霍亂毒素(choleric toxin)、單磷醯脂質A (monophosphoryl lipid A)、脂多醣(lipopolysaccharides)、細胞激素[例如，干擾素(interferon, IFN)或粒細胞－巨噬細胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor, GM-CSF)]、性激素脫氫表雄固酮(dehydroepiandrosterone, DHEA)、弗倫氏完全佐劑(Freund’s complete adjuvant)、弗倫氏不完全佐劑(Freund’s incomplete adjuvant)、鋁膠(aluminum gel)[例如，氫氧化鋁(aluminum hydroxide)、磷酸鋁(aluminum phosphate)或硫酸鋁鉀鹽(potassium aluminum sulfate)]、油質佐劑(water-in-oil-in-water, W/O/W型)、油包水型(water-in-oil, W/O)乳劑、水包油型(oil-in-water, O/W)乳劑、刀豆素A (Concanavalin A, Con A)、β-葡聚醣(β-glucan)，以及它們的組合。
此外，本發明進一步提供一種對抗肝癌的方法，其包括對一個體投予(administering)一如上所述的口服疫苗。
如本文中所使用的，術語“投予”以及“投藥(administration)”可被交換地使用，並且意指藉由任何合適的途徑來對一個體導入(introducing)、提供(providing)或遞送(delivering)一預定的活性成分以執行其預期的效用。
如本文中所使用的，術語“個體”意指任何感興趣的哺乳類動物，諸如人(humans)、猴子(monkeys)、牛(cows)、綿羊(sheep)、馬(horses)、豬(pigs)、山羊(goats)、狗(dogs)、貓(cats)、小鼠(mice)以及大鼠(rats)。
依據本發明，該口服疫苗的投藥劑量與投藥次數會視下列因素而變化：投藥途徑以及個體之年齡、身體狀況與反應。一般而言，該口服疫苗可呈單一劑量或是分成數個劑量的形式而被口服地投藥。 較佳實施例之詳細說明
本發明將就下面的實施例來做進一步說明，但應瞭解的是，該等實施例僅是供例示說明用，而不應被解釋為本發明的實施上的限制。 實施例 一般實驗材料： 1. 源自於羅伊氏乳酸桿菌( Lactobacillus reuteri)的醣基化伴護素60 (glycosylated chaperonin 60, Cpn60)的製備：
首先，將購自於台灣的食品工業發展研究所(Food Industry Research and Development Institute, FIRDI)的生物資源保存及研究中心(Bioresource Collection and Research Center, BCRC)(300新竹市食品路331號，台灣)的羅伊氏乳酸桿菌BCRC 14691接種至MRS (De Man, Rogosa and Sharpe)肉湯培養基(HiMedia)中，並於37℃下進行培養歷時48小時。所得到的培養物以6,000 rpm予以離心歷時15分鐘，然後收集上澄液並使用Macrosep® advance離心裝置(Macrosep® advance centrifugal devices)(PALL Corporation)來進行濃縮，而得到一蛋白質樣品。接著，取50 μg之所得到的蛋白質樣品並採用熟習此項技藝者所詳知且慣用的技術來進行12%十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分析[12% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) analysis]，繼而為過碘酸-希夫(PAS)染色[periodic acid-Schiff (PAS) staining]，藉此確認該蛋白質樣品中存在一具有分子量為60 kDa的醣基化蛋白質。
之後，將60-kDa蛋白質帶(60-kDa protein band)從凝膠上切下來，該60-kDa蛋白質帶藉由膠體內胰蛋白酶切割(in-gel trypsin digestion)與液相層析-串聯式質譜法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)來進行鑑定。所使用的LC-MS/MS分析儀器為UltiMate TM3000 RSLCnano LC系統(Thermo Fisher Scientific)以及TripleTOF ®6600系統(Applied Biosystems Sciex)，分析軟體為Mascot第2.7版，所得到的數據是使用NCBI與SWISS-PROT的細菌資料庫來進行比對。申請人經由LC-MS/MS分析的結果而認為該蛋白質為醣基化Cpn60。 2. 下面實驗中所使用的香蕉抗性澱粉(banana resistant starch)是依據TW 202210086 A當中所述的方法而被製得，並且是屬於第二型抗性澱粉(resistant starch type 2, RS2)。 3. 下面實驗中所使用的麥芽糊精(maltodextrin)以及海藻酸鈉(sodium alginate)分別是購自於鑫隴興業有限公司(Sinlong Food's Additive Inc.)以及Sigma-Aldrich。 4. 實驗動物：
下面實驗中所使用的雄性BALB/c小鼠(8至10週大)是購自於財團法人國家實驗研究院國家實驗動物中心(National Laboratory Animal Center, R.O.C.)。所有的實驗動物個別地被飼養於一個光照與黑暗各為12小時、室溫維持在20-26℃以及相對濕度維持在30-70%的動物房中，而且水分與飼料被充分地供給。有關實驗動物的處理以及一切實驗程序均是依據財團法人國家實驗研究院國家實驗動物中心的實驗動物照護及使用委員會(Institutional Animal Care and Use Committee, IACUC)之規範來進行。 5. 小鼠肝細胞癌細胞株(mouse hepatocellular carcinoma cell line) H22的來源與培養：
下面實驗中所使用的小鼠肝細胞癌細胞株H22是購自於Elabscience (Catalog No: EP-CL-0341)。H22細胞被接種在RPMI 1640培養基[添加有10% 胎牛血清(fetal bovine serum, FBS)]中，並在培養條件設定為37℃、5% CO 2的培養箱中進行培養。之後，大約每隔2天更換新鮮的培養基。當細胞密度達到約80-90%匯聚(confluence)時，進行細胞繼代培養(subculture)。 6. H22細胞-關聯性免疫原(H22 cell-associated immunogen)的製備：
對H22細胞加入適量的生理食鹽水並予以均質化(homogenized)，繼而於4℃下以10,000 rpm進行離心歷時10分鐘，由此所形成的上澄液被使用作為H22細胞-關聯性免疫原並儲存於-20℃下備用。 實施例1. 口服疫苗(oral vaccine) 的製備
首先，將200 μL之依據上面“一般實驗材料”的第6項當中所得到的H22細胞-關聯性免疫原與10 μg之依據上面“一般實驗材料”的第1項當中所得到的源自於羅伊氏乳酸桿菌的醣基化Cpn60予以混合均勻，俾以得到一免疫原性組成物(immunogenic composition)。接著，將該免疫原性組成物混合以20 μg的10%麥芽糊精以及40 μg的20%香蕉抗性澱粉，藉此香蕉抗性澱粉形成一內殼(inner shell)並包覆該免疫原性組成物以及麥芽糊精，而得到一初始粒子(initial particle)。
之後，對該初始粒子加入1 mL的2%海藻酸鈉以及2 mL的0.1 M氯化鈣溶液(calcium chloride solution)並於室溫下靜置歷時30分鐘，藉此海藻酸鈉與氯化鈣進行交聯反應(cross-linking reaction)以形成一海藻酸鈣外殼(calcium alginate outer shell)。該海藻酸鈣外殼包覆該初始粒子，而得到一以抗性澱粉為基質的粒子(resistant starch-based particle)，其在下面實施例中被使用作為一試驗口服疫苗(test oral vaccine)。
另外，為供比較，參照上面所述的步驟來製備2種比較口服疫苗(comparative oral vaccine)(亦即比較口服疫苗1與2)以及1種對照口服疫苗(control oral vaccine)，不同之處在於：在製備初始粒子時，該比較口服疫苗1僅添加H22細胞-關聯性免疫原，而該比較口服疫苗2僅添加源自於羅伊氏乳酸桿菌的醣基化Cpn60，至於該對照口服疫苗則不添加該免疫原性組成物。
所得到的各個口服疫苗被進行冷凍乾燥處理歷時24小時，由此所形成的冷凍乾燥粉末被儲存於-20℃備用。 實施例2. 本發明的口服疫苗 的活體內免疫原性試驗 ( in vivoImmunogenicity assay) 實驗方法： A、 口服疫苗的投藥 (administration of oral vaccine) ：
首先，將雄性BALB/c小鼠隨機地分成4組(每組n=5)，其中包括1個對照組、2個比較組(亦即比較組1與2)以及1個實驗組。接著，透過管餵(oral gavage)的方式，對比較組1與2的小鼠投藥以200 μL之比較口服疫苗1與2 [配於磷酸鹽緩衝生理鹽水(phosphate buffered saline, PBS)中]，對實驗組的小鼠投藥以200 μL之本發明的口服疫苗(配於PBS中)，以及對對照組的小鼠投藥以200 μL之對照口服疫苗(配於PBS中)。各組的小鼠每天被投藥一次，投藥總共歷時4天。
之後，在開始投藥之後的第20天之時，透過管餵的方式，對各組的小鼠進行追加劑(booster doses)的投藥，亦即，比較組1與2的小鼠被投藥以200 μL之比較口服疫苗1與2 (配於PBS中)，實驗組的小鼠被投藥以200 μL之本發明的口服疫苗(配於PBS中)，以及對照組的小鼠被投藥以200 μL之對照口服疫苗(配於PBS中)。各組的小鼠每天被投藥一次，投藥總共歷時4天。 B、 血清中 IgA 以及 IgG1 的含量分析：
在開始投藥之前(亦即第0天)以及在開始投藥之後的第15天與第30天結束之時，藉由動脈穿刺而從各組小鼠的尾部動脈來採集血液樣品。之後，所得到的血液樣品在4℃下以12,000 rpm進行離心歷時5分鐘，繼而收取上清液作為血清樣品。
各個血清樣品是分別使用Mouse IgG1 ELISA kit (Elabscience, Cat. No. E-EL-M3035)與Mouse IgA ELISA kit (Elabscience, Cat. No. E-EL-M0690)並依據製造商的操作指南來進行血清中IgG1與IgA含量的測定。簡言之，將50 μg/mL H22細胞-關聯性免疫原塗覆(coating)於一96-井培養盤的各井中，繼而使用封阻緩衝液(blocking buffer)[含有1%牛血清白蛋白(bovine serum albumin, BSA)的PBST]來進行封阻(blocking)。之後，將各個經稀釋的血清樣品添加至該96-井培養盤的各井中來進行反應，繼而使用各個套組中所提供的生物素化偵測抗體(biotinylated detection antibody)以及HRP綴合物(HRP conjugate)來進行偵測(detection)，並且使用3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, TMB)來進行呈色。最後，以一ELISA讀取機(ELISA reader)在波長450 nm下來測量各井的吸光值(OD 450)。另外，參照上述方法對一96-井培養盤來進行塗覆及封阻處理，但是不添加生物素化偵測抗體以及HRP綴合物，由此所形成的96-井培養盤被拿來進行相同的吸光值(OD 450)測量，並將所測得的吸光值(OD 450)作為背景值。
相對OD值(relative OD value)是藉由將所測得的OD 450數值代入下列公式(I)而被計算出： 公式 (I) ： A = B-C其中：A＝相對OD值 B＝各井所測得的吸光值(OD 450) C＝背景值(OD 450) 結果：
圖1顯示在開始投藥之後的第30天結束之時，在各組小鼠的血清中針對IgA所測得的相對OD值。從圖1可見，實驗組與比較組2所測得的相對OD值皆明顯高於對照組所測得者，而比較組1與對照組之間則沒有顯著的差異性。
圖2顯示在開始投藥之後的第30天結束之時，在各組小鼠的血清中針對IgG1所測得的相對OD值。從圖1可見，實驗組所測得的相對OD值明顯高於對照組所測得者，而比較組1、比較組2與對照組之間則沒有顯著的差異性。
此外，就實驗組小鼠而言，在開始投藥之後的第30天結束之時針對IgG1所測得的相對OD值高於在第0天以及在開始投藥之後的第15天結束之時所測得者(數據未顯示)。這表示本發明的口服疫苗能有效地誘發IgG1生成，並且IgG1含量會隨著時間的增加而明顯升高。
綜合以上的實驗結果可知，單獨使用H22細胞-關聯性免疫原無法誘發抗體生成，而單獨使用源自於羅伊氏乳酸桿菌的醣基化Cpn60僅能誘發生成少量的抗體。相反地，依據本發明的免疫原性組成物能夠有效地誘發大量生成對於H22細胞-關聯性免疫原具有專一性的IgA與IgG1。申請人據此而認為，源自於羅伊氏乳酸桿菌的醣基化Cpn60能夠提升免疫原(例如，與肝腫瘤有關的免疫原)的免疫原性(immunogenicity)，因此當其與免疫原一起組合使用時能成功引起免疫反應，並且在疫苗產業上具有優異的發展潛力。
於本說明書中被引述之所有專利和文獻以其整體被併入本案作為參考資料。若有所衝突時，本案詳細說明(包含界定在內)將佔上風。
雖然本發明已參考上述特定的具體例被描述，明顯地在不背離本發明之範圍和精神之下可作出很多的修改和變化。因此意欲的是，本發明僅受如隨文檢附之申請專利範圍所示者之限制。
本發明的上述以及其它目的、特徵與優點，在參照以下的詳細說明與較佳實施例和隨文檢附的圖式後，將變得明顯，其中： 圖1顯示實施例2的各組小鼠的血清中針對IgA所測得的相對OD值；以及 圖2顯示實施例2的各組小鼠的血清中針對IgG1所測得的相對OD值。

Claims (17)

  1. 一種免疫原性組成物，其包含有一源自於羅伊氏乳酸桿菌(Lactobacillus reuteri)的醣基化伴護素60以及一與腫瘤有關的免疫原。
  2. 如請求項1的免疫原性組成物，其中該免疫原是腫瘤的組織、細胞或溶胞產物。
  3. 如請求項2的免疫原性組成物，其中該腫瘤是選自於由下列所構成的群組：肝細胞癌、膽管癌、肝母細胞瘤、淋巴瘤、肉瘤，以及它們的組合。
  4. 如請求項3的免疫原性組成物，其中該腫瘤是肝細胞癌。
  5. 如請求項2的免疫原性組成物，其中該免疫原是選自於由下列所構成的群組：肝細胞癌細胞-關聯性免疫原、膽管癌細胞-關聯性免疫原、肝母細胞瘤細胞-關聯性免疫原、淋巴瘤細胞-關聯性免疫原、肉瘤細胞-關聯性免疫原，以及它們的組合。
  6. 如請求項5的免疫原性組成物，其中該免疫原是H22細胞-關聯性免疫原。
  7. 一種口服疫苗，其包含有一粒子，該粒子含有：一如請求項1的免疫原性組成物作為核心；一包覆該免疫原性組成物的抗性澱粉內殼；以及 一包覆該抗性澱粉內殼的海藻酸鈣外殼。
  8. 如請求項7的口服疫苗，其中該免疫原是一種與腫瘤有關的免疫原。
  9. 如請求項8的口服疫苗，其中該腫瘤是選自於由下列所構成的群組：肝細胞癌、膽管癌、肝母細胞瘤、淋巴瘤、肉瘤，以及它們的組合。
  10. 如請求項9的口服疫苗，其中該腫瘤是肝細胞癌。
  11. 如請求項8的口服疫苗，其中該免疫原是選自於由下列所構成的群組：肝細胞癌細胞-關聯性免疫原、膽管癌細胞-關聯性免疫原、肝母細胞瘤細胞-關聯性免疫原、淋巴瘤細胞-關聯性免疫原、肉瘤細胞-關聯性免疫原，以及它們的組合。
  12. 如請求項11的口服疫苗，其中該免疫原是H22細胞-關聯性免疫原。
  13. 一種如請求項1至6中任一項的免疫原性組成物供應用於製備一用來疫苗接種之醫藥品的用途。
  14. 如請求項13的用途，其中該醫藥品是一口服疫苗。
  15. 一種如請求項4的免疫原性組成物供應用於製備一用來對抗肝癌之醫藥品的用途。
  16. 如請求項15的用途，其中該醫藥品是一口服疫苗。
  17. 如請求項15的用途，其中該免疫原是H22細胞-關聯性免疫原。
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