TWI833096B - 組合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

一種組合物包含橙花純露、洋甘菊純露和迷迭香純露。一種治療和/或降低受試者罹患疾患的風險的方法,該方法包含向受試者施用有效量的所述組合物。一種所述組合物在製備用於治療或降低罹患疾患的藥物的用途。

Description

組合物及其用途
本發明係關於用於改善受試者的健康狀況的包含純露的一種組合物,特別地但非排他地一種口服組合物。本發明係關於一種治療和/或降低受試者罹患疾患的風險的方法。
工作繁忙或日程繁忙的人通常罹患相當大的生活壓力。長時間的壓力和不良習慣可能會導致心理健康問題,且甚至可能更嚴重地導致精神疾病,包括抑鬱症、焦慮症、飲食障礙症、社交退縮症等。抑鬱症是常見的可以很嚴重的精神疾病之一,其可嚴重影響人們如何以負面方式感受和行動。當人們感到壓力時,焦慮也可能同時發生。此外,精神疾病也可能導致身體疾病,例如患有抑鬱症的人可能會有胃腸道疾患和心血管疾病的風險。患有精神疾病的人的免疫系統通常很脆弱,並容易受到其他健康問題的影響,包括但不限於糖尿病、關節炎、自體免疫性疾患,且甚至癌症。
已經開發出許多藥物來治療不同類型的心理或精神疾病。例如,諸如氟西汀、西酞普蘭、帕羅西汀、舍曲林、氟伏沙明的抗抑鬱藥是常用的五羥色胺再攝取抑制劑,以用於減輕與抑鬱症有關的症狀。但是,這些抗抑鬱藥可能引起嚴重的副作用,例如噁心、頭痛、腹瀉和性欲降低。其他現有的用於治療抑鬱症的藥物包括文拉法辛和度洛西汀,它們可能導致血壓升高、頭痛和便秘。
癲癇是現今一種常見的神經系統疾患。根據流行病學統計,癲癇年發病率約為50-70/10萬,患病率約為5‰。此外,中國約有600萬以上癲癇患者,且每年的新發癲癇患者有65-70萬。這種腦部疾患的特點是持續存在著能夠增加未來出現癲癇發作可能性的腦部持久性改變,並出現相應的神經生物學、認知、心理學和社會功能障礙等方面的後果。
目前治療癲癇的藥物不能有效預防和治癒癲癇,只能減少或暫停其發作,且往往需終身服藥。然而,大多抗癲癇藥物存在不良反應,例如對某些患者的不敏感性、致畸形性和耐藥性,且毒副作用較明顯,對患者行為、認知功能等有負面影響。這造成治療的間斷性及病情反復,使患者難以接受。
糖尿病腎病是由患有糖尿病而導致的腎臟正常功能的惡化。據統計,大約40%的糖尿病患者會發展成患有腎病。已發現可以通過控制血糖和血壓水平來預防或延遲糖尿病腎病。
為了幫助降低血壓,通常使用包括血管張力素轉換酶 (ACE) 抑制劑和血管張力素受體阻斷劑 (ARB) 的藥物,因為它們已被證明在降低血壓的同時可保護腎功能並防止進一步的損傷。然而,ACE抑制劑通常會產生例如乾咳、高鉀血症和血管性水腫的副作用,而ARB則通常會引起頭暈、高鉀血症和頭痛。
因此,存在強烈的需求來開發沒有顯著副作用或副作用很少的促進健康特別是心理和精神健康的組合物和方法,以及用於治療、預防或減少罹患癲癇、糖尿病腎病,以及與氧化壓力有關的身體疾病的風險的方法。
根據本發明的一個方面,揭露了一種組合物,其包含橙花純露、洋甘菊純露和迷迭香純露。
根據本發明的另一方面,揭露了一種通過向受試者施用有效量的所述組合物來治療和/或降低受試者罹患疾患的風險的方法。
根據本發明的另一方面,揭露了所述組合物在製備用於治療或降低罹患疾患風險的藥物中的用途。
不期望受到理論的限制,認為本發明的組合物對於治療、預防和/或降低罹患疾病的風險可能是有效的,所述疾病特別是與氧化壓力有關的神經退行性疾病、癲癇,以及糖尿病腎病。該組合物還適合於促進受試者的心理健康;和/或增加多巴胺水平。不受理論的限制,認為該組合物能夠在氧化壓力下保護神經元細胞,例如最小化由氧化壓力觸發的不期望的影響。
除非另有具體規定,否則本文中的所有測試均在標準條件下進行,包括25°C 的室內和測試溫度、海平面(1 atm.)壓力、pH 7,並且所有測量均以公制單位進行。此外,除非另有特別說明,否則本文中的所有百分比、比率等均以重量計。應當理解,除非另外特別指明,否則本文所述的材料化合物、化學品等通常是可從全球各種供應商處獲得的商品品項和/或工業標準品項。
如本文所用的,術語“純露”是指通過蒸餾,特別是蒸汽蒸餾植物的一部分或整個植物,然後分離而獲得的液體。它可以用從植物物質製備精油的相同方法獲得。與衍生自相同植物物質的相應精油相比,純露包括更多的水溶性化合物,但更少的芳香族化合物。因此,它可能是透明的混合物,其內包括有懸浮的微小的液滴或顆粒,而幾乎無法通過肉眼觀察到這些液滴或顆粒。純露也可以稱為水溶膠、水精油、餾出物或花水。應當理解,可以通過蒸餾花、葉、樹皮、莖、根、漿果、果實、木或植物的其他部位來獲得純露,而不必僅是花。
如本文所用的,橙花純露是指衍生自橙花的純露,並且橙花可以來自但不限於來自代代花(Citrus aurantium subsp. amara )或苦橙(Bigaradia )的花。
如本文所用的,洋甘菊純露是指衍生自母菊(Matricaria chamomilla )和/或羅馬洋甘菊(Chamarmelum nobile )的純露。
如本文所用的,迷迭香純露是指衍生自迷迭香(Rosmarinus officinalis )的純露。
如本文所用的,術語“口服藥物組合物”是指適合於通過對受試者口服給藥(即通過口服施用)進行治療和/或預防性治療或預防疾病的組合物。因此,本發明的口服藥物組合物可以呈分散體、乳劑、混懸劑、糖漿劑、軟明膠膠囊等的形式。在一個優選的實施方式中,口服藥物組合物呈具有或沒有藥學上可接受的賦形劑的分散體、乳劑或混懸劑的形式。藥學上可接受的賦形劑包括液體填充劑、潤滑劑、稀釋劑、溶劑或囊封材料,以用於將口服藥物組合物的活性成分攜帶和遞送至受試者的器官或身體的一部分以發揮治療作用。
表述“有效量”大體表示足以產生治療期望結果的量,其中結果的確切性質取決於所治療的具體疾患而變化。當疾患伴有炎症時,其結果通常是抑制或降低炎症因子的表達或功能活性。結果也可能是增強抗炎因子表達或功能活性。當該疾患與精神疾患如抑鬱症和焦慮症相關時,其結果可能是增加多巴胺水平,增加幸福感,改善睡眠品質和/或提高食欲。當疾患與神經退行性疾患相關時,結果可以是增加神經元細胞生長或發育,包括神經元突長度的延長和/或神經系統疾病的延遲發展。具有本領域普通技術的醫師或獸醫將理解確定和開出組合物的有效量,特別是本發明的口服藥物組合物的有效量。醫師或獸醫也將能夠根據要減輕的狀況的嚴重性來調整組合物的有效量。
在本文的一個實施方式中,本發明涉及一種用於促進多巴胺產生、減輕不適和/或減輕與身體或精神疾病有關的症狀的組合物。本文的組合物被認為可有效地增加多巴胺的水平並且對氧化壓力具有神經保護作用。
認為通過增加多巴胺的產生可以改善個別患者的心理健康,因為多巴胺是可以調節正常的行為、動機和情感,並影響運動、記憶和注意力的關鍵的獎勵神經遞質。通常,多巴胺的增加將導致更好的情緒,因此在調節受試者的情緒方面是有用的。
在本文的一個實施方式中,本發明的組合物包括衍生自一種或多種植物的一種或多種純露。
本領域技術人員知道用於從植物物質獲得純露的合適方法。植物物質是非轉基因植物物質,且更優選地是沒有農藥和添加劑的植物物質。獲得純露的一種可能方式是通過進行蒸汽蒸餾。例如,產生蒸汽以穿過植物物質並導致植物物質以蒸氣形式釋放精油和其他物質。然後,蒸氣進入被冷水包圍的冷凝室中以形成混合物,即冷凝物從氣相返回液相。然後將混合物經受分離器以分離包括上部和下部的至少兩個部分。上部指漂浮在混合物之上的層,因為其包括從植物物質中提取的大部分揮發性芳香味化合物,這些香料化合物通常重量較輕,從而形成濃縮的精油。下部指在分離器的底部且在漂浮層下方獲得的層。下部比上部具有更少量的芳香味化合物,並且該化合物通常比在上部的化合物重。下部被認為是蒸餾過程的水基副產物,且被稱為純露。
與精油相比,純露被認為濃縮度較低,並且取決於其應用,可以不經稀釋地施用於受試者。與精油相比,它通常使用安全且刺激性小。純露可以是不同等級的,並且可以從世界各地的供應商或公司商購獲得。用於製備本發明的組合物的純露是治療級的,即具有不可檢測的或僅痕量的污染物。
在本發明的一個實施方式中,組合物包括橙花純露、洋甘菊純露和迷迭香純露。相信這些純露的組合在增加多巴胺水平和發揮抗氧化損傷的神經保護作用方面具有意想不到的和有希望的作用。因此,它在各種應用中都是有用的,尤其當它通過口服途徑施用于單個患者時。本發明的一個實施方式中的組合物被配製成包括口服藥物組合物、飲料、食品(包括食品補充劑)等的口服組合物。
橙花純露可具有抗菌和抗真菌作用,以及抗炎作用,尤其當在皮膚上使用時。
通常,洋甘菊純露可用於促進皮膚的鎮靜作用,並具有保濕和舒緩的作用。
迷迭香已經在食品以及芳香療法中用於調味劑多年。通常,迷迭香純露可局部使用以刺激頭髮生長、皮膚恢復和疼痛緩解。
雖然上述純露通常用於局部應用以改善皮膚或頭髮狀況,或用作室內芳香劑以減輕焦慮,但發明人出乎意料地發現,將上述純露組合口服施用可以在提高多巴胺水平方面取得優異的效果,即促進受試者的心理健康,並保護神經元突細胞免受氧化壓力。不希望受到理論的限制,由於多巴胺水平的提高,還認為本發明可以幫助減輕與神經系統疾患(例如神經退行性疾患)、代謝疾患、自體免疫性疾患、胃腸道疾患、心血管疾患、心理疾患或精神疾患有關的症狀。
在一個實施方式中,橙花純露與洋甘菊純露與迷迭香純露的體積比為約1:1:1至約10:1:1,例如約1:1:1、約2:1:1、約3:1:1、約4:1:1、約5:1:1、約6:1:1、約7:1:1、約8:1:1、約9:1:1或約10:1:1。在一個具體的實施方式中,橙花純露與洋甘菊純露與迷迭香純露的體積比為約6:1:1至約8:1:1、約6:1:1或約8:1:1。
應當理解,取決於其用途,組合物可以包含一種或多種額外的純露、添加劑、載體和/或治療劑。在其中組合物還包括額外的純露的一個實施方式中,橙花純露與洋甘菊純露與迷迭香純露與額外的純露的體積比可以是約5:1:1:3、約6:1:1:2或約7:1:1:1。
除了純露之外,該組合物可以包括基於組合物總體積的約0體積%至約99.9體積%的水,其範圍為約0.5體積%至約99.5體積%、約5體積%至約95體積%、約10體積%至約90體積%、約20體積%至約80體積%、約30體積%至約70體積%、約40體積%至約60體積%,約50體積%、約60體積%、約70體積%、約80體積%或約90%。所述水的體積是指額外添加到純露中的水,其不包括純露中的原始水含量。在一個實施方式中,總純露與水的體積比可以為約1:1至約1:20、約1:1、約1:2、約1:5、約1:9、約1:10、約1:15、約1:19或約1:20。在另一實施方式中,總純露與水的體積比可以為約0.5:99.5至約5:95,特別是約0.5:99.5、約1:99或約2:98。
相信本發明的組合物在誘導多巴胺產生中可能是有效的。通過如在示例中所述的對轉基因斑馬魚進行實驗,觀察到多巴胺水平增加。也有臨床觀察表明該組合物可以説明改善幸福感並緩解壓力和焦慮。不受理論的限制,因此認為該組合物適用於製備飲料,以及用於促進包括使用者的心理和精神健康在內的健康的口腔用組合物。還認為本文的組合物可具有抗氧化作用。
在其中總純露與水的體積比為約1:99或約0.5:99.5的一個實施方式中,該組合物可以作為日常飲用的飲料提供。使用者可能會發現含有水的組合物更容易飲用,尤其是在運動後或在溫暖或炎熱的天氣下。同時,水的存在可以幫助改善血液循環並促進純露的吸收。
用於製備組合物的水可以是純化的飲用水,其可以選自由以下組成的組中:蒸餾水、去離子水、礦泉水、反滲透水(縮寫為“RO水”),以及其組合。在一個實施方式中,水是RO水。RO水指在施加的壓力下通過使用部分滲透膜純化的水。RO水通常不含包括重金屬的礦物質,並且具有減少的懸浮化學和生物污染物含量。因此,它是清潔的和飲用安全的,並且適合於製備口服製劑。在組合物可以作為飲料提供的一個實施方式中,組合物包括基於組合物總體積的至少約10體積%至約90體積%的RO水。在另一實施方式中,組合物包括基於組合物總體積的約50體積%至約95體積%或約75體積%至約99體積%的RO水。
在本文的一個實施方式中,本發明的組合物包括基於組合物總體積的約0.1體積%至約10體積%的橙花純露、約0.01體積%至約1體積%的洋甘菊純露和約0.01體積%至約1體積%的迷迭香純露。組合物還可包括基於組合物總體積的至少約50體積%的水,或約75.0體積%至約99.9體積%的水。
在一個具體實施方式中,該組合物包括約0.4體積%的橙花純露、約0.05體積%的洋甘菊純露、約0.05體積%的迷迭香純露和約99.5體積%的水。在一個可替代的實施方式中,組合物包括約0.3體積%的橙花純露、約0.1體積%的額外純露、約0.05體積%的洋甘菊純露、約0.05體積%的迷迭香純露和約99.5%體積的水。應當理解,這些包括較高比例的水的實施方式適合於配製成日常所需的飲料。連續攝入該組合物有助於增強個體的免疫系統並改善他/她的情緒。該組合物還可以説明緩解壓力。兒童或成人每天可以飲用100毫升以上(例如每天350毫升),且該組合物可作為包裝飲料提供。組合物也可以作為治療的一部分提供給患者,這取決於施用該組合物的量和頻率。
在本文的另一實施方式中,本發明的組合物包括基於組合物總體積的至少約40體積%的橙花純露、至少約5體積%的洋甘菊純露和至少約5體積%的迷迭香純露。特別地,該組合物包括約50體積%至約80體積%的橙花純露、約5體積%至約20體積%的洋甘菊純露和約5體積%至約20體積%的迷迭香純露,以及可選地,水。例如,組合物包括基於組合物總體積的約80體積%的橙花純露、約10體積%的洋甘菊純露和約10體積%的迷迭香純露。這些組合物包括較高比例的總純露,並且適合配製成藥物組合物或作為治療用療法的一部分施用。
本發明的組合物(特別地其純露)通常包含揮發芳香族化合物,其至少包括α-松油醇、芳樟醇、1,8-桉樹腦、樟腦和香豆素。在一個實施方式中,α-松油醇、芳樟醇、1,8-桉樹腦、樟腦和香豆素在橙花純露、洋甘菊純露,以及迷迭香純露中找到。在一個實施方式中,該組合物包括至少約50mg/L的α-松油醇、至少約20mg/L的芳樟醇、至少約5mg/L的1,8-桉樹腦、至少約1mg/L的樟腦,以及至少約1mg/L香豆素。
在一個實施方式中,組合物可以包括 約50mg/L至約120mg/L、約70mg/L至約110mg/L或約80mg/L至約100mg/L的α-松油醇; 約20mg/L至約100mg/L、約40mg/L至約80mg/L或約50mg/L至約70mg/L的芳樟醇; 約5mg/L至約45mg/L、約15mg/L至約35mg/L,或約20mg/L至約30mg/L的1,8-桉樹腦; 約1mg/L至約30mg/L、約10mg/L至約20mg/L或約15mg/L至約18mg/L的樟腦;以及 約1mg/L至約15mg/L、約1mg/L至約7mg/L或約2mg/L至約5mg/L的香豆素。
在一個實施方式中,特別是當組合物作為飲料提供時,組合物包括約80mg/L至約90mg/L的α-松油醇、約50mg/L至約60mg/L的芳樟醇、約25mg/L至約30mg/L的1,8-桉樹腦、約15mg/L至約18mg/L的樟腦和約2mg/L至約3mg/L的香豆素。不受理論的限制,認為組合物中包括α-松油醇、芳樟醇、1,8-桉樹腦、樟腦和香豆素的上述組分積極地促進了受試者的健康狀況。應當理解,該組合物可以進一步包括例如亞油酸、油酸、芳樟醇氧化物(呋喃型),鄰氨基苯甲酸甲酯、冰片、香茅醇、棕櫚酸、香葉醇,以及類似物。可以通過本領域中合適的方法來確定組合物中上述組分的量。例如,可以通過在研究或商業實驗室中基於標準方案和標準參考進行氣相色譜法(GC)來確定組分。
此外,組合物的pH為約4.0至約8.0,約5.0至約7.0,或約6.0至約6.5。所述pH值適合於受試者去飲用。
如上所述,可以將組合物配製為藥物組合物,特別是口服藥物組合物。為了易於儲存和施用,組合物可以進一步包括相對少量的防腐劑。
本文的受試者通常是哺乳動物,例如齧齒動物、食肉動物或人。在一個實施方式中,受試者是人。
在另一實施方式中,組合物可以配製成眼藥水和/或洗眼液以沖洗使用者的眼睛或減輕眼睛的不適感。例如,配製成眼藥水溶液的組合物可以包括基於組合物總體積的約99.5體積%的純水,例如蒸餾水或反滲透水,和約0.5體積%的總純露。總純露包括上述的橙花純露、洋甘菊純露和迷迭香純露,且特別地其體積比為約8:1:1。換句話說,本文的組合物也適合於經眼部途徑施用。相信本發明的組合物可以説明減輕由灰塵、不希望的刺激性氣體顆粒、污染物和/或與眼睛接觸的化學物質引起的眼睛刺激和疼痛。還相信口服組合物形式的組合物可以説明減輕由上述物質在同一情況下引發的不適,包括疼痛和刺激以及呼吸道中的炎症。
在另一實施方式中,該組合物可以作為飲料提供,以向受試者提供營養和水。飲料可以作為包裝飲料提供在瓶、罐或任何合適的容器中。該飲料可以是滋補和提神的飲料,同時溫和地促進受試者的健康。例如,在飲用飲料後,多巴胺水平可能升高,因此受試者可能感到更快樂和放鬆。它可以幫助用戶緩解壓力並改善睡眠品質。另外,由於存在懸浮在飲料中的微小液滴/顆粒(例如組合物中存在的精油或芳香族化合物的液滴),飲料的搖晃會散發出一種可接收的、甜美和水果的香氣,用戶可以發現它更加清爽舒緩。應該理解的是,上述的組合物也可以添加到食品中。
因此,組合物分別適合於製備口服藥物組合物、眼藥水、洗眼液、包括食品補充劑的食品和用於促進受試者健康的飲料。
在另一方面,本發明涉及治療、預防和/或降低受試者罹患疾患的風險的方法。該疾患可以選自由以下組成的組中:神經系統疾患(例如神經退行性疾患)、代謝疾患、自體免疫性疾患、胃腸道疾患、心血管疾患、心理疾患和精神疾患。該方法包括對受試者施用有效量的上述組合物的步驟。受試者也是如上所述,特別地是齧齒動物、食肉動物或人。
在受試者是人的一個實施方式中,將組合物製備為藥物組合物,並以每天約1ml至約30ml,或每天約3ml至約10ml的體積施用於受試者,這取決於要減輕的狀況的嚴重性。在一個實施方式中,該組合物被配製成口服藥物組合物的形式,因此可以通過口服途徑施用。
本發明的方法有效地治療、預防和/或減少罹患與疼痛、肌肉異常、頭痛、呼吸困難、抑鬱、焦慮、疲勞、睡眠困難和/或吞咽困難相關的疾患的風險。應當理解,取決於受試者的狀況,可以將組合物與一種或多種額外治療劑(例如,包括2017年6月2日發布的發明人為賴冬妮的香港短期專利第HK1221598號中描述的藥物組合物)組合施用於受試者。
本發明進一步涉及通過向受試者施用有效量的本發明的組合物來減輕與上述疾患有關的症狀的方法。應當理解,本發明還涉及本發明的組合物在製備用於治療或預防所述疾患的藥物中的用途。
下面列出的示例進一步說明了本發明。本領域技術人員將理解上述的實施方式以及下面給出的示例並非旨在進行限制。示例 1 組合物的製備
在以下的示例中,本發明的組合物由以下成分製備: •   3482.5毫升的反滲透(RO)水; •   14毫升的橙花純露(治療級); •   1.75毫升的洋甘菊純露(治療級);以及 •   1.75毫升的迷迭香純露(治療級)。 組合物的總量為3500ml,且可以裝入十個瓶中,每個瓶中包括350ml的組合物。pH為6。用於製備組合物的所有純露均為治療級,並可以通過商業供應商獲得。
進行GC測試以確認根據本發明製備的組合物中的主要成分。GC測試由實驗室按照標準測試條件和程式進行。表1示出了組合物中的10種成分以及其他成分。
表1。組合物中10種成分的GC結果。
成分
α-松油醇 84.1mg/L
芳樟醇 57.8mg/L
1,8-桉樹腦 25.5mg/L
樟腦 16.0mg/L
香豆素 2.3mg/L
亞油酸 6.3mg/L
油酸 8.9mg/L
芳樟醇氧化物(呋喃型) 9.7mg/L
鄰氨基苯甲酸甲酯 11.4mg/L
冰片 6.9mg/L
為了確定該組合物對於使用者而言與治療劑一起飲用或施用是否安全,進行了數項測試以評估重金屬含量和微生物含量。
分析組合物的樣品以確定重金屬的含量。重金屬測試由實驗室按照標準測試條件和程式進行。在測定總金屬之前,通過基於美國國家環境保護局(USEPA)方法3005開發的方法消化樣品。結果如下。
表2。對組合物的樣品進行重金屬測試的結果。
金屬和主要的陽離子 定量極限 ,LOR μg/L 樣品中的量( μg/L 推薦的指導值( μg/L
1 <1 20
10 <10 10
0.2 <0.2 3
1 <1 50
1 <1 10
0.5 <0.5 6
1 <1 -
根據結果,組合物中的重金屬含量未超過世界衛生組織(WHO)建議的飲用水指導值,請參閱WHO發佈的飲用水水質準則。
接下來,對組合物的另一樣品進行了微生物測試。微生物測試也由實驗室按照標準測試條件和程式進行。在該測試中,組合物中不存在包括大腸桿菌以及金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌和異養生物在內的大腸菌群。在測試中未檢測到它們。
基於測試結果,該組合物不具有過量的重金屬和微生物污染物,因此可以安全飲用,並且可以作為包括飲用水的飲料提供給消費者和個人。示例 2 對多巴胺產生的影響
多巴胺是關鍵的獎勵神經遞質,其在大腦獎勵系統中具有重要作用。它可以調節正常的行為、動機和情緒,並影響運動、記憶和專注力。通常,多巴胺的增加將導致更好的情緒,因此在調節受試者的情緒方面是有用的。
酪氨酸羥化酶(TH)是多巴胺合成中的限速酶。TH的表達可以反映受試者中多巴胺的水平。因此進行了測試以通過使用轉染的斑馬魚來確定本發明的組合物在多巴胺產生中的作用。特別地,使用了綠色螢光蛋白(GFP)轉染斑馬魚以表明TH的存在。
如圖2所示,與圖1所示的對照組相比,在使用本發明的組合物(即示例1中製備的組合物)處理轉染的斑馬魚後,TH-GFP表達增強。用稀釋的組合物(即將組合物稀釋1/10)處理另一轉染的斑馬魚。圖3所示的結果表明,與未稀釋的組合物相比,稀釋的組合物對TH-GFP表達的影響較小。該組合物的作用可以是劑量依賴性的。
基於該結果,本發明的組合物可以誘導TH水平,從而增加多巴胺的產生。用該組合物施用或治療的受試者可以具有更好的心情,並表現出改善的運動或情緒反應。示例 3 神經元的預防保護作用
為了研究本發明的組合物在氧化壓力下對神經元是否具有任何保護作用,進行了神經元突生長試驗。
假定可以通過神經元突長度的變化來反映組合物的保護作用。當神經元突的平均長度在氧化挑戰後增加或大體保持不變時,認為該組合物對神經元突具有保護作用,例如保護神經元突免受氧化壓力。換句話說,當神經元突的平均長度在氧化挑戰後減小時,該組合物不能發揮保護作用。
在實驗中,使用了SH-SY5Y細胞,即人神經母細胞瘤細胞系(ATCC® CRL-2266TM )。在使細胞處於氧化壓力條件下之前,進行了實驗以評估本發明的組合物對細胞的作用,例如確定細胞的合適工作濃度範圍。通過用普通細胞培養基(DMEM/F12)稀釋該組合物來製備不同濃度的組合物。首先,根據下述組,用濃度為1%、0.1%、0.01%或0.001%的組合物(示例1的組合物)處理SH-SY5Y細胞持續24或48小時。
表3。在對照組和四個治療組中組合物的濃度。
組別 組合物的體積濃度
對照 0%
A組 1%
B組 0.1%
C組 0.01%
D組 0.001%
在指定的時間點,將處理的細胞固定並在PBS中溫育以進行後續測量。通過Motic Image Plus 2.0軟體測量SH-SY5Y細胞中神經元突的長度。每組計數三十個細胞。將神經元突的平均長度(AU)相對於對照組和治療組作圖以進行比較。多組實驗資料的統計顯著性由兩組樣品的學生配對t檢驗確定,且結果以均值±標準差表示。在測試中,p<0.05被認為具有統計學意義。
圖4示出了用組合物處理細胞24小時後神經元突的平均長度。與對照組相似,B、C和D組(即用0.1%、0.01%或0.001%的組合物處理)的神經元突長度沒有明顯變化。但是,A組明顯減少,表明1%的組合物可能不適用於SH-SY5Y細胞。類似地,圖5示出了用組合物處理細胞48小時後神經元突的平均長度。結果表明溫育時間不會顯著改變組合物對細胞的作用。B、C和D組對細胞無明顯影響,而A組導致神經元突長度減少。因此,認為對於SH-SY5Y細胞,該組合物可以在0.1%、0.01%和0.001%的濃度下更好地工作。
在下一個實驗中,用不同濃度的組合物預處理SH-SY5Y細胞,然後進行過氧化氫誘導的氧化壓力挑戰。然後將處理過的細胞在37°C和5%CO2 的潮濕培養箱中溫育24和48小時。溫育後,在37°C下用500mM過氧化氫(H2 O2 )挑戰細胞3小時,以便誘導氧化壓力。在指定的時間點,將處理的細胞固定並在PBS中溫育以進行測量。通過Motic Image Plus 2.0軟體測量SH-SY5Y細胞中神經元突的長度。每組計數三十個細胞。將神經元突的平均長度(AU)相對於對照組和治療組作圖以進行比較。多組實驗資料的統計顯著性由兩組樣品的學生配對t檢驗確定,並且結果以平均值±標準差表示。在測試中,p<0.05被認為具有統計學意義,其中p≤0.05*,p≤0.01**,p≤0.001***。
圖6示出了在氧化壓力挑戰之前和之後,不同組中的SH-SY5Y細胞的神經元突的平均長度,其中在挑戰之前細胞被預處理24小時。
每組有兩個結果(即“前”和“後”),其指示每組在H2 O2 挑戰之前和挑戰之後獲得的結果。挑戰後,對照組中的神經元突平均長度顯著減少了50%以上,這意味著細胞處於明顯的壓力狀態。對於B、C和D組中的細胞,在挑戰之前與組合物一起溫育後,神經元突的平均長度沒有顯著變化。儘管在挑戰後神經元突的平均長度減少或幾乎保持不變,但其長度仍高於對照組。因此,與對照組相比,發現該組合物以0.1%、0.01%和0.001%的體積濃度對神經元突具有保護作用。
對於A組中的細胞,結果表明1%的組合物不適合於溫育SH-SY5Y細胞,因為它可能在細胞中誘導明顯的氧化壓力。因此,較低濃度的組合物是優選的。
圖7示出了在氧化壓力挑戰之前和之後,不同組中的SH-SY5Y細胞的神經元突的平均長度,其中在挑戰之前細胞預處理48小時。
類似於24小時的預處理,對照組中的神經元突在進行48小時預處理後的挑戰後的長度顯著減少。對於B和C組中的細胞(即在挑戰前用0.1%和0.01%的組合物處理過的細胞)具有比對照組更長的平均長度(p值<0.001)。即使在0.001%的濃度下,神經元突的平均長度仍比對照組的平均長度適度更長(p值<0.05)。因此,發現該組合物在相對較低的濃度對神經元突具有保護作用。
A組細胞的結果表明,組合物的1%不適合溫育SH-SY5Y細胞,因為它可能在細胞中誘導明顯的氧化壓力。
基於以上結果,發現了如果用本發明的組合物預處理細胞,則由H2 O2 挑戰引起的細胞損傷被減輕。因此,結果暗示了該組合物可以減輕受到H2 O2 挑戰的SH-SY5Y細胞的氧化損傷。示例 4 對神經元突的治療作用
進行了另一種神經元突生長測定以確定該組合物是否可以刺激已經被氧化劑損傷的神經細胞的恢復和生長。與示例4相似,使用神經元突長度來確定在氧化壓力下的神經保護作用。在添加和溫育本發明的組合物之前,將SH-SY5Y細胞用於測定中並暴露於H2 O2 達5小時。
有趣的是,發現了神經元突的長度在12小時後減小,然後又在之後的12小時內再次生長,儘管神經元突的長度仍無法與其初始長度進行比較。
首先,在暴露於H2 O2 後將SH-SY5Y細胞分為4組,即一個對照組和三個治療組。如下製備不同濃度的組合物,而對照組是指未經組合物處理的細胞樣品。
表4。對照組和三個治療組中組合物的濃度。
組別 組合物的體積濃度 稀釋
對照 0% NA
I組 10% 1/10稀釋
II組 1% 1/100稀釋
III組 0.1% 1/1000稀釋
在添加組合物後,將細胞溫育24小時,並在第12小時和第24小時測量神經元突的長度。
圖8示出了在12小時處理後神經元突長度的變化。結果表明,該組合物可以減輕由H2 O2 挑戰引起的效應,特別地,用該組合物處理的細胞具有增加的神經元突長度。同樣,組合物的濃度越低,延長神經元突抵抗氧化壓力的神經保護作用越好。
圖9示出了在24小時處理後神經元突長度的變化。儘管對照組在額外的12小時溫育後的神經元突長度幾乎恢復到其初始長度,但與對照組相比,治療組仍展現出顯著增加的長度。因此,該組合物對氧化壓力下的細胞具有神經保護作用。示例 5 對癲癇的治療作用
為了研究本發明的組合物(即示例1中的組合物)對癲癇(EP)是否具有任何抑制作用,對實驗性受癲癇影響的小鼠進行了各種實驗。
如本領域技術人員已知的,戊四唑(PTZ)為很強的致癇劑,其致癇模型被認為是理想的全身強直性驚厥發作模型之一,PTZ本身無特殊的神經毒性作用,所以被廣泛應用於癲癇發病機理的研究、抗癲癇藥物的篩選。當PTZ誘發小鼠癲癇發生時,其癇性發作的特點是初期以陣攣性發作為主,然後很快會有全身強直性驚厥發作。PTZ是一種中樞神經系統興奮藥,作用GABA-GABAA受體系統。它促使興奮性突觸的易化過程增強,並使GABA釋放減少。這又降低抑制功能,提高驚厥敏感性,並升高中樞神經系統興奮性,從而誘發EP。根據其發作特點,在本實驗中以這兩種發作形式為指標並結合目前Racine標準來分析其癇性行為。
在本實驗中也使用了卡馬西平(CBZ)作為比較組之一。CBZ是一種已知的抗驚厥藥,它通過減少引起癲癇發作和神經痛的神經衝動而起作用。它具有穩定作用,並能降低神經細胞膜對Na+ 和Ca2+ 的通透性,從而降低細胞的興奮性。它延長不應期,也可能增強GABA的突觸傳遞功能。
首先,將72隻雄性健康ICR小鼠隨機分為6組,每組12隻,分別為空白對照組(0.5體積%的羧甲基纖維素鈉溶液)、PTZ模型組(0.5體積%的羧甲基纖維素鈉溶液)、卡馬西平組(卡馬西平80mg/kg),以及本發明的組合物的高、中、低劑量組。在連續7日內每日對各組供試小鼠灌胃給藥。在最後一次給藥後30分鐘後,除空白對照組外,其餘各組小鼠腹腔注射80mg/kg的PTZ以誘導小鼠驚厥發作。每隻小鼠單獨放在籠子裡觀察30分鐘,記錄小鼠癲癇發作等級、持續時間、潛伏期及死亡率等行為學變化。
採用了Racine分級標準(參見: https://en.wikipedia.org/wiki/Racine_stages)來判斷小鼠癲癇的發作等級: 0級:無反應; I級:濕狗樣顫動(wet dog shakes),面肌抽動、陣攣、顫動(如眨眼、鬍鬚跳動、節律性咀嚼等); II級:I級發作加節律性點頭; III級:II級發作加前肢陣攣,但沒有後肢直立動作; IV級:有後肢直立動作,伴有斜行雙側摔倒或站立伴前肢陣攣;以及 V級:失平衡、傾倒、四肢抽動、全身陣攣、全身性強直、摔倒、翻滾並失去體位控制。
首先,進行了實驗以測定本發明的組合物對PTZ致癇小鼠發作行為的影響。在小鼠腹腔注射PTZ後,小鼠表現出EP症狀。從表5可以看到,與模型組比較,本發明的組合物對致癇小鼠的行為有明顯的改善作用。在本實驗中,組合物高、中、低劑量組有統計學差異(p<0.05),其中與空白組比較,#p<0.05;與模型組比較,*p<0.05。
表5。對PTZ致癇小鼠發作行為的影響(n=12)。
組別 0 I II III IV V
空白對照 0 0 0 0 0 0
PTZ模型組 0 0 0 1 1 10#
卡馬西平組 1 3 3 2 2 1*
高劑量組 0 3 2 2 3 2*
中劑量組 0 2 4 3 2 1*
低劑量組 0 1 2 2 4 3*
然後,進行了實驗以測定組合物對PTZ所致癲癇小鼠的影響。有研究表明,PTZ可以通過降低小鼠腦組織中GABA的含量誘導驚厥,因此小鼠腹腔注射80mg/kg PTZ可誘發其發生驚厥的概率。在表6示出了組合物對PTZ所致癲癇小鼠驚厥的影響結果,其中與空白組比較,#p<0.05;與模型組比較,*p<0.05;**p<0.01。與空白對照組相比,PTZ模型組小鼠全部發生驚厥,表明造模成功。與PTZ模型組相比,高劑量組可極顯著地延長PTZ所致癲癇小鼠驚厥潛伏期,縮短驚厥持續時間,降低驚厥強度,並降低死亡率。
表6。對PTZ所致癲癇小鼠驚厥的影響(n=12)。
組別 驚厥數 驚厥潛伏期 /s 驚厥持續時間 /s 死亡率 /%
空白對照 0 / / 0
PTZ模型組 12 76.6±40.3# 234.2±34.8# 100
卡馬西平組 8 365.2±25.6** 165.3±32.5* 16.7
高劑量組 8 247.4±56.2** 132.5±26.4** 25.0
中劑量組 8 243.2±34.8** 160.3±23.1* 33.3
低劑量組 8 146.1±45.6 194.1±46.1 75.0
此外,還進行了實驗以測定組合物對PTZ致癇小鼠發作次數的影響。表7示出了該實驗的結果,其中與空白組比較,#p<0.05;與模型組比較,*p<0.05;**p<0.01。與模型組比較,卡馬西平組、高劑量組可明顯減少Ⅳ級EP小鼠的發作次數(p<0.05)。高劑量組可顯著減少Ⅳ、V級EP小鼠的發作次數(p<0.01)。中劑量組可明顯減少V級EP小鼠的發作次數(p<0.01)。低劑量組可明顯減少V級EP小鼠的發作次數(p<0.05)。
表7。對PTZ致癇小鼠發作次數的影響(n=12)。
組別 I II III IV V
空白對照 0 0 0 0 0
PTZ模型組 1.8±3.5# 1.6±1.2# 3.2±1.8# 4.8±2.9# 7.3±2.5#
卡馬西平組 0.9±0.4 1.4±0.8 1.5±0.8* 2.1±1.8* 6.3±2.1
高劑量組 4.8±2.5** 3.9±0.8** 1.6±2.0 1.9±0.6** 3.1±1.9**
中劑量組 2.6±0.9 3.9±1.3** 5.9±0.7** 4.2±2.8 4.1±0.8**
低劑量組 2.2±1.1 2.0±0.9 2.9±2.1 4.6±1.8 3.8±3.1*
在以上相關指標的測定小鼠行為學觀察結束後,進行了實驗以研究組合物對驚厥小鼠腦內NO、Na-K-ATP、Asp、5-HT含量的影響。在行為學觀察結束後,立即將小鼠處死,並迅速取出腦組織及所需器官,稱其品質,然後將腦組織放入液氮中於-80°C冰箱保存。測定前用預冷的生理鹽水洗掉表面血跡,稱品質,按1:9的體積比加入PBS將腦組織充分勻漿,取勻漿液3000r/min離心20分鐘。收集上清液以作為隨後ELISA測試的樣品以對GABA、Glu、NO、Na+ -K+ -ATP、Asp、5-HT含量等進行檢測。
如表8所示,與空白對照組相比,PTZ模型組小鼠腦組織中NO濃度顯著升高(p<0.01)。與PTZ模型組相比,高、中劑量組均可顯著(p<0.05)降低驚厥小鼠腦內NO濃度,但效果略差于卡馬西平,低劑量組則無顯著(p>0.05)效果。
表8。對驚厥小鼠腦內NO、Na-K-ATP、Asp、5-HT含量的影響(n=12)。
組別 NO μmol/L Na-K-ATP ng/L Asp pg/mL 5-HT ng/L
空白對照 32.5±2.3 180.1±32.3 40.3±2.5 12.3±1.2
PTZ模型組 43.2±3.1## 132.4±4.5# 52.3±5.6## 7.4±0.9#
卡馬西平組 26.4±2.5** 192.1±5.7** 42.1±1.2** 14.6±2.6**
高劑量組 29.2±1.1** 182.0±8.9** 41.3±0.9** 13.2±4.5**
中劑量組 33.4±2.4 176.7±46.2* 50.2±3.1 12.6±4.5**
低劑量組 33.2±1.9 152.6±7.8 49.3±4.6 11.9±2.2*
基於以上實驗結果,發現了本發明的組合物可有效對抗PTZ引發小鼠的癇性發作,降低其興奮性,減少癲癇發作及其程度,並具有明顯的良好抗癲癇作用,且有劑量依賴效應。
眾所周知,腦內GABA、Glu、Asp和5-HT的含量對癲癇的發生至關重要,Glu和Asp為興奮性氨基酸,GABA和5-HT為抑制性氨基酸。Glu含量過多可破壞中樞神經元突的神經毒素,產生興奮造成腦損傷。
在本示例中,組合物的高、中劑量均可顯著回調PTZ所致癲癇小鼠腦組織中的GABA濃度,從而減小腦組織的損傷程度。GABA受體分為GABAa和GABAb兩種,GABA受體表達在Glu能突觸終末和GABA能突觸終末上。GABAb受體激動劑可以啟動這些受體,並抑制GABA能及Glu能突觸,進而抑制GABA和Glu的釋放,發揮中樞抑制作用。實驗證明組合物的高、中劑量均可顯著緩解N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)所致小鼠腦組織中Glu濃度的升高,提高5-HT水平,降低Asp水平,並有效降低了癲癇的發作等級,延長了驚厥潛伏期,縮短了癲癇時間,具有良好的抗癲癇效果。示例 6 對糖尿病腎病的治療作用
為了研究本發明的組合物對糖尿病腎病(DN)是否具有任何抑制作用,對實驗性大鼠進行了各種實驗。
首先,在正常進食、飲水條件下,每隻大鼠先腹腔注射0.5mL完全弗氏佐劑(CFA),次日再腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ)溶液(劑量30mg/kg)。每週1次,連續2週重複上述步驟。在第二次注射STZ後72小時,挑選空腹血糖值在16.8-25mmol/L之間的糖尿病(DM)大鼠,繼續飼養,造模時間共30天。預試驗結果示出,在實驗第30天,與正常組大鼠比較,DM大鼠尿的微量白蛋白尿(MALB)顯著升高,並且腎重/體重比及腎小球濾過率(GFR)增加,說明DM大鼠已出現腎臟病變,證明DN模型成功。表10中所示的模型組和轉基因(GM)組使用了上述的DN模型。GM組大鼠分別於分組當日開始早晨8時灌胃給藥(即,本發明的組合物),正常對照組和模型對照組給生理鹽水,容量均為1mL/100g體重,每日1次,連續4週。
為了進行血清血管張力素II(Ang II)測定,在最後一次給藥後使大鼠禁食12小時,麻醉後於股靜脈處采血6 mL分別置於乙二胺四乙酸(EDTA)、肝素抗凝試管中,以4°C 3000r/min離心分離血漿,並在低溫下保存待測。
如表9所示(其中與正常組比較,*p<0.01;與模型組比較,#p<0.01),與正常對照組比較,模型組的Ang II增加,使用GM處理後,Ang II降低,與模型組比較有顯著性差異(p<0.01)。
表9。對DN大鼠的Ang II的影響。
陽性藥組別 濃度 Ang II pg/ml
正常對照陽性藥組 / 96.42±9.43
模型組 / 245.91±13.34*
GM組 0.4ml/200g 164.22±16.13#
此外,還進行了實驗以確定本發明的組合物對腎重/體重比和GFR的影響。在最後一次給藥後的一小時後,取出雙側腎臟,電子天平稱重以計算腎重/體重比。另外,在最後一次給藥後的一小時後,用戊巴比妥鈉麻醉大鼠,在腹主動脈采血,並以離心分離血清。在大鼠處死前一天,以代謝籠法收集各組大鼠 24小時內的尿液。使用了比色法測定血、尿肌酐含量。根據血、尿肌酐值及每分鐘尿量,計算出GFR,其中GFR=尿肌酐×每分鐘尿量/血肌酐。
如表10所示(其中與正常組比較,*p<0.01;與模型組比較,#p<0.01),與正常對照組比較,模型組大鼠腎重/體重比和GFR增加。在使用GM處理後,腎重/體重比和GFR降低,與模型組比較有顯著性差異(p<0.01)。
表10。對DN大鼠腎重/體重比和腎小球濾過率的影響。
組別 濃度 腎重 / 體重( g/Kg GFR ml/min
正常對照組 / 6.56±1.58 0.64±0.4
模型組 / 10.16±1.28* 18.92±7.52*
GM組 0.4ml/200g 8.18±2.01# 9.61±4.61#
本發明的非限制性實施方式包括:
1、一種組合物,其包含橙花純露、洋甘菊純露和迷迭香純露。
2、如實施方式1所述之組合物,其中該橙花純露與該洋甘菊純露與該迷迭香純露的體積比為1:1:1至10:1:1。
3、如實施方式1所述之組合物,其中該組合物包含基於該組合物的總體積的約0.1體積%至約10體積%的該橙花純露、約0.01體積%至約1體積%的該洋甘菊純露、約0.01體積%至約1體積%的該迷迭香純露。
4、如實施方式1所述之組合物,還包含基於該組合物的總體積的至少50體積%的水。
5、如實施方式1所述之組合物,還包含基於該組合物的總體積的約75.0體積%至約99.9體積%的水。
6、如實施方式1至5中任意一項所述之組合物,其中該組合物包含: -約50mg/L至約120mg/L的α-松油醇; -約20mg/L至約100mg/L的芳樟醇; -約5mg/L至約45mg/L的1,8-桉樹腦; -約1mg/L至約30mg/L的樟腦;以及 -約1mg/L至約15mg/L的香豆素。
7、如實施方式6所述之組合物,其中該組合物包含: -約70mg/L至約110mg/L的α-松油醇, -約40mg/L至約80mg/L的芳樟醇, -約15mg/L至約35mg/L的1,8-桉樹腦, -約10mg/L至約20mg/L的樟腦,以及 -約1mg/L至約7mg/L的香豆素。
8、如實施方式6所述之組合物,其中該組合物包含: -約80mg/L至約100mg/L的α-松油醇, -約50mg/L至約70mg/L的芳樟醇, -約20mg/L至約30mg/L的1,8-桉樹腦, -約15mg/L至約18mg/L的樟腦,以及 -約2mg/L至約5mg/L的香豆素。
9、如實施方式6所述之組合物,其中該組合物包含: -約80mg/L至約90mg/L的α-松油醇, -約50mg/L至約60mg/L的芳樟醇, -約25mg/L至約30mg/L的1,8-桉樹腦, -約15mg/L至約18mg/L的樟腦,以及 -約2mg/L至約3mg/L的香豆素。
10、如實施方式1至5中任意一項所述之組合物,其pH為約5至約7。
11、如實施方式1至5中任意一項所述之組合物,其中該組合物是口服組合物。
12、如實施方式11所述之組合物,其中該組合物是藥物組合物或飲料組合物。
13、一種通過向受試者施用有效量的如實施方式1至12中任意一項所述之組合物來治療和/或降低受試者罹患疾患的風險的方法。
14、如實施方式13所述之方法,其中該疾患選自由以下組成的組中:神經系統疾患、代謝疾患、自體免疫性疾患、胃腸道疾患、心血管疾患、心理疾患和精神疾患;或神經退行性疾患。
15、如實施方式13所述之方法,其中該疾患與選自由以下組成的組中的狀況相關:疼痛、肌肉異常、頭痛、呼吸困難、抑鬱、焦慮、疲勞、睡眠困難和/或吞咽困難。
16、如實施方式13所述之方法,其中將該組合物與一種或多種額外治療劑組合施用於所述受試者。
17、如實施方式13所述之方法,其中該疾患是與氧化壓力相關的神經退行性疾患。
18、如實施方式14所述之方法,其中該神經系統疾患是癲癇。
19、如實施方式14所述之方法,其中該代謝疾患是糖尿病腎病。
20、如實施方式13所述之方法,其中該疾患減少多巴胺產生。
21、如實施方式1至12中任意一項所述之組合物在製備用於治療或降低罹患疾患的風險的藥物中的用途。
22、如實施方式21所述之用途,其中該疾患選自由以下組成的組中:神經系統疾患、代謝疾患、自體免疫性疾患、胃腸道疾患、心血管疾患、心理疾患和精神疾患;或神經退行性疾患。
23、如實施方式21所述之用途,其中該藥物包含一種或多種額外治療劑。
24、如實施方式21所述之用途,其中該疾患與選自由以下組成的組中的狀況相關:疼痛、肌肉異常、頭痛、呼吸困難、抑鬱、焦慮、疲勞、睡眠困難和/或吞咽困難。
25、如實施方式21所述之用途,其中該疾患是與氧化壓力相關的神經退行性疾患。
26、如實施方式21所述之用途,其中該組合物促進多巴胺產生。
27、如實施方式22所述之用途,其中該神經系統疾患是癲癇。
28、如實施方式22所述之用途,其中該代謝疾患是糖尿病腎病。
本領域技術人員將理解的是,在不脫離如廣泛描述的本發明的範圍的情況下,可以對本發明進行許多變化和/或修改,如具體實施方式所示的。因此,本實施方式在所有方面都應被認為是說明性的而不是限制性的。
本文具體引用的所有參考文獻通過引用整體併入本文。然而,除非另外指出,否則本文所包含的對現有技術的任何引用均不是承認該資訊是公知常識。
(無)
圖1示出了用酪氨酸羥化酶-綠色螢光蛋白(TH-GFP)轉染的正常斑馬魚的兩個顯微圖像,其中左圖像示出了斑馬魚中GFP的表達,而右圖像是在光學顯微鏡下拍攝的。
圖2示出了用TH-GFP轉染,然後與本發明的一個實施方式的組合物一起溫育的斑馬魚的兩個顯微圖像,其中左圖像示出了斑馬魚中的GFP表達,而右圖像是在光學顯微鏡下拍攝的。
圖3示出了用TH-GFP轉染,然後與稀釋的組合物一起溫育的斑馬魚的兩個顯微圖像,其中左圖像示出了斑馬魚中的GFP表達,而右圖像是在光學顯微鏡下拍攝的。
圖4是示出本發明的一個實施方式的組合物對24小時處理後的SH-SY5Y細胞中神經元突的影響的橫條圖。
圖5是示出本發明的一個實施方式的組合物對48小時處理後的SH-SY5Y細胞中神經元突的影響的橫條圖。
圖6是橫條圖,示出了在氧化壓力挑戰之前和之後,用各種濃度的本發明實施方式的組合物處理的SH-SY5Y細胞的神經元突的平均長度,其中將細胞在挑戰之前預處理24小時。
圖7是示出用本發明一個實施方式的組合物的各種濃度處理的SH-SY5Y細胞神經元突在氧化壓力挑戰之前和之後的平均長度的橫條圖,其中細胞在挑戰之前被預處理48小時。
圖8示出了在處理細胞12小時之後神經元突長度的變化,其中細胞在添加本發明的一個實施方式的組合物之前經受氧化壓力挑戰。
圖9示出了在處理細胞24小時之後,即在獲得用於繪製圖8的結果之後的額外12小時後,神經元突長度的變化。

Claims (10)

  1. 一種組合物,其包含橙花純露、洋甘菊純露和迷迭香純露。
  2. 如請求項1所述之組合物,其中該橙花純露與該洋甘菊純露與該迷迭香純露的體積比為約1:1:1至約10:1:1。
  3. 如請求項1所述之組合物,其中該組合物還包含基於該組合物的總體積的至少50體積%的水。
  4. 如請求項1至3中任意一項所述之組合物,其中該組合物包含:-約50mg/L至約120mg/L的α-松油醇;-約20mg/L至約100mg/L的芳樟醇;-約5mg/L至約45mg/L的1,8-按樹腦;-約1mg/L至約30mg/L的樟腦;以及-約1mg/L至約15mg/L的香豆素。
  5. 如請求項1至3中任意一項所述之組合物,其pH為約5至約7。
  6. 如請求項1至3中任意一項所述之組合物,其中該組合物是口服組合物。
  7. 一種如請求項1至請求項6中任意一項所述之組合物在製備用於治療或降低罹患疾患的風險的藥物中的用途,該疾患選自由神經系統疾患和糖尿病腎病組成的組中。
  8. 如請求項7所述之用途,其中該神經系統疾患為神經退行性疾患,其中該神經退行性疾患與氧化壓力相關。
  9. 如請求項7所述之用途,其中該神經系統疾患為癲癇。
  10. 一種如請求項1至請求項6中任意一項所述之組合物在製備用於促進多巴胺產生的藥物中的用途。
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