TWI757860B

TWI757860B - 抗氧化美白組合物及其製備方法和應用

Info

Publication number: TWI757860B
Application number: TW109130449A
Authority: TW
Inventors: 陳正雄; 陳佳琦; 陳玉倩; 陳政治; 呂梨萍; 黃敬翔; 劉士榮
Original assignee: 佐登妮絲國際股份有限公司
Priority date: 2020-03-20
Filing date: 2020-09-04
Publication date: 2022-03-11
Also published as: TW202135778A; CN111265469A

Abstract

本發明涉及一種抗氧化美白組合物及其製備方法和應用，屬於護膚品技術領域。本發明的組合物在3’-羥基化染料木黃酮、8-羥基化大豆苷元、酵母萃取物的基礎上，複配蓮花萃取物、白雪姬葉萃取物、羽衣草萃取物、洛神花乳酸菌發酵液、紫陽花葉萃取物、芽孢桿菌發酵液、複合胜肽，具有協同增效的作用，製備得到的組合物具有較强的DPPH清除能力、總還原力、亞鐵離子螯合力、蘑菇酪胺酸酶抑制力，具有較高的總酚含量，具有抗氧化美白的功效，能用于製備抗氧化美白護膚品。

Description

抗氧化美白組合物及其製備方法和應用

本發明涉及一種抗氧化美白組合物及其製備方法和應用，屬於護膚品技術領域。

人類膚色主要取決於皮膚表皮層中黑色素的含量，皮膚黑色素細胞的黑色素小體透過黑色素生成作用產生黑色素以防禦抵抗陽光中的紫外線。黑色素的生成過程包括多種酵素催化及化學反應，目前已知酪胺酸酶為調控黑色素生成的重要酵素之一，不僅參與黑色素生成過程中的許多反應，並且為催化反應中速率限制步驟的關鍵酵素，因此酪胺酸酶的含量可作為黑色素生成反應的指標。儘管黑色素具有光保護作用，但當黑色素過多或異常分布時，會造成黑色素過量沉著及產生斑塊而影響美觀。因此，如何有效抑制酪胺酸酶活性及防止如黑斑及老人斑等異常黑色素沉著情形發生，已成為相關業者的研發重點。

本發明人的專利CN106166119A公開了3’-羥基染料木黃酮用于製備抑制黑色素生成的組合物的用途，其是將3’-羥基染料木黃酮作為化妝材料組合物，以抑制酪胺酸酶活性與抑制黑色素生成，達到美白淡斑的功效。

然而，目前尚無相關研究公開3’-羥基染料木黃酮如何與其他成分組合配比，用於製備抗氧化美白組合物。因此，本發明研發一種包含3’-羥基染料木黃酮的抗氧化美白組合物及其製備方法和應用。

本發明的目的在於克服上述習知技術的不足之處而提供一種抗氧化美白組合物及其製備方法和應用。

為實現上述目的，本發明採取的技術方案為：一種抗氧化美白組合物，所述抗氧化美白組合物包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.001%~0.01%、8-羥基化大豆苷元0.0001%~0.001%、酵母萃取物0.0001%~0.001%、蓮花萃取物0.0001%~0.001%、白雪姬葉萃取物0.0001%~0.001%、羽衣草萃取物0.0001%~0.001%、洛神花乳酸菌發酵液0.001%~0.01%、紫陽花葉萃取物0.001%~0.01%、芽孢桿菌發酵液1%~10%、複合胜肽1%~10%、水35%~45%、甘油20%~30%、1,3-丙二醇20%~30%、1,3-丁二醇5%~15%。

作為本發明所述抗氧化美白組合物的較佳實施方式，所述抗氧化美白組合物包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.004%、8-羥基化大豆苷元0.0001%、酵母萃取物0.0001%、蓮花萃取物0.0004%、白雪姬葉萃取物0.0002%、羽衣草萃取物0.0004%、洛神花乳酸菌發酵液0.002%、紫陽花葉萃取物0.001%、芽孢桿菌發酵液2%、複合胜肽1%、水40.0088%、甘油23.763%、1,3-丙二醇24.248%、1,3-丁二醇8.972%。

第二方面，本發明提供了上述抗氧化美白組合物的製備方法，包括以下步驟：將各組分按配比混合均勻，即得抗氧化美白組合物。

第三方面，本發明提供了上述抗氧化美白組合物在製備抗氧化美白護膚品中的應用。

作為本發明所述應用的較佳實施方式，所述護膚品為爽膚水、面霜、眼霜、精華液、乳液或面膜。

第四方面，本發明提供了一種護膚品，所述護膚品包括上述抗氧化美白組合物。

作為本發明所述護膚品的較佳實施方式，所述護膚品還包括護膚品領域可接受的輔料。

與習知技術相比，本發明的有益效果為：本發明的組合物在3’-羥基化染料木黃酮、8-羥基化大豆苷元、酵母萃取物的基礎上，複配蓮花萃取物、白雪姬葉萃取物、羽衣草萃取物、洛神花乳酸菌發酵液、紫陽花葉萃取物、芽孢桿菌發酵液、複合胜肽，具有協同增效的作用，製備得到的組合物具有較强的DPPH清除能力、總還原力、亞鐵離子螯合力、蘑菇酪胺酸酶抑制力，具有較高的總酚含量，具有抗氧化美白的功效，能用於製備抗氧化美白護膚品。

第1圖為實施例1和比較例1的DPPH清除率結果統計圖。

第2圖為實施例1和比較例1的總酚含量結果統計圖。

第3圖為實施例1和比較例1的總還原力結果統計圖。

第4圖為實施例1和比較例1的螯合亞鐵離子清除率結果統計圖。

第5圖為實施例1和比較例1的酪胺酸酶抑制結果統計圖。

為更好地說明本發明的目的、技術方案和優點，下面將結合具體實施例對本發明作進一步說明。

本發明實施例所使用的原料均為市售產品，原料採購於LipoTrue,S.L.公司、Technoble Co.,Ltd.或Lucas Meyer Cosmetics公司。

實施例1

一種抗氧化美白組合物，包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.004%、8-羥基化大豆苷元0.0001%、酵母萃取物0.0001%、蓮花萃取物0.0004%、白雪姬葉萃取物0.0002%、羽衣草萃取物0.0004%、洛神花乳酸菌發酵液0.002%、紫陽花葉萃取物0.001%、芽孢桿菌發酵液2%、複合胜肽1%、水40.0088%、甘油23.763%、1,3-丙二醇24.248%、1,3-丁二醇8.972%。

本實施例抗氧化美白組合物的製備方法為：將各組分按配比混合均勻，即得抗氧化美白組合物。

實施例2

一種抗氧化美白組合物，包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.001%、8-羥基化大豆苷元0.0001%、酵母萃取物0.0001%、蓮花萃取物0.001%、白雪姬葉萃取物0.001%、羽衣草萃取物0.001%、洛神花乳酸菌發酵液0.01%、紫陽花葉萃取物0.01%、芽孢桿菌發酵液10%、複合胜肽1%、水35%、甘油20%、1,3-丙二醇20%、1,3-丁二醇13.9758%。

本實施例抗氧化美白組合物的製備方法同實施例1。

實施例3

一種抗氧化美白組合物，包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.01%、8-羥基化大豆苷元0.001%、酵母萃取物0.001%、蓮花萃取物0.0001%、白雪姬葉萃取物0.0001%、羽衣草萃取物0.0001%、洛神花乳酸菌發酵液0.001%、紫陽花葉萃取物0.001%、芽孢桿菌發酵液1%、複合胜肽10%、水40%、甘油22%、1,3-丙二醇20%、1,3-丁二醇6.9857%。

本實施例抗氧化美白組合物的製備方法同實施例1。

比較例1

一種抗氧化美白組合物，包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.004%、8-羥基化大豆苷元0.0001%、酵母萃取物0.0001%、1,3-丙二醇99.9958%。

本比較例抗氧化美白組合物的製備方法同實施例1。

效果例

1.DPPH自由基清除試驗

DPPH(1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl)為一種相當穩定的自由基，其溶於乙醇為藍紫色溶液，在波長517nm處有强烈的吸光反應。當DPPH自由基被抗氧化物還原時，其於波長517nm處的吸光值將會下降，是以判斷DPPH乙醇溶液與樣品反應後於波長517nm吸光值變化程度，即可進一步評估樣品的抗氧化能力。

在試驗上首先取20μL序列稀釋不同濃度的實施例1樣品、對比例1樣品分別加入96孔細胞分析盤中的不同孔洞作為實驗組，接著再加入180μL濃度0.3mM的DPPH乙醇溶液，均勻混合後於室溫避光靜置反應30分鐘後，再以Microplate reader(SPECTROstar Nano)測定於波長517nm下吸光值(OD₅₁₇)，其中，實驗組樣品的最終濃度分別為0.5%、0.8%、1%和2%。此外，在本試驗中另使用新鮮配製高效抗氧化劑L-抗壞血酸(L-Ascorbic acid,Vit.C)水溶液作為正對照組(positive control,PC)，以及使用乙醇溶液作為控制組，以比較本發明組合物相較於正對照組的DPPH清除能力。

將實施例1和比較例1製備得到的抗氧化美白組合物進行上述試驗，DPPH清除率結果如第1圖所示。由第1圖可知，實施例1製備得到的抗氧化美白組合物在0.5%、0.8%、1%及2%濃度時的DPPH清除力大約為比較例1的1.28、1.42、1.65及1.46倍。

2.總酚含量檢驗

本試驗系利用磷鉬酸酚試劑(Folin-Cioealteu phenol reagent)測定本發明中3’-羥基染料木黃酮的相對總酚含量，以進一步說明本發明組合物在抗氧化功效上的潜力。

在試驗上首先取200μL不同濃度的實施例1樣品、比較例1樣品至不同的微量離心管中以作為實驗組，並於各個微量離心管中加入100μL的Na₂CO₃與100μL的磷鉬酸酚試劑後，於室溫下避光反應90分鐘。之後，再於各個微量離心管中取200μL反應液至96孔細胞分析盤中的不同孔洞，並以Microplate reader(SPECTROstar Nano)測定於波長750nm下吸光值(OD₇₅₀)，且每組實驗組進行三重複測試，其中，實驗組的組合物的最終濃度分別為0.15%、0.25%、0.4%、0.5%和0.75%，且在本試驗中另以20ppm、40ppm、60ppm、80ppm與100ppm沒食子酸做為正對照組，以及使用水、甘油、1,3-丙二醇及1,3-丁二醇作為控制組，以比較本發明組合物相較於正對照組的相對總酚含量。

實施例1和比較例1的總酚含量檢驗結果如第2圖所示。由第2圖可知，實施例1製備得到的抗氧化美白組合物相對於沒食子酸的總酚含量大約為比較例1的2.01倍。

3.總還原力檢驗

本試驗由總還原力測試以檢測本發明組合物的還原力活性。總還原力的測定主要原理系將赤血鹽(K₃Fe(CN)₆)還原成黃血鹽(K₄Fe(CN)₆)後，再與Fe³⁺反應而形成普魯士藍(Prussian blue，Fe₄(Fe(CN)₆)₃)，並以普魯士藍的生成量作為總還原力分析的指標。普魯士藍於波長700nm(OD₇₀₀)處具有强烈的吸光反應，吸光值愈高表示赤血鹽被還原為黃血鹽的量越多，是以判斷樣品於波長700nm吸光值變化程度，即可進一步評估樣品的還原力活性。

在試驗上首先取25μL不同濃度的實施例1樣品、比較例1樣品至96孔細胞分析盤中的各個孔洞作為實驗組，再於每孔加入25μL的赤血鹽與25μL的三氯乙酸(Trichloroacetic acid，TCA)並置於50℃下反應20分鐘。接著，分別於每孔加入100μL的水與20μL的FeCl3，於室溫避光反應10分鐘，接著再用Microplate reader(SPECTROstar Nano)測定於波長700nm下吸光值(OD₇₀₀)，且每組實驗組進行三重複測試，其中，實驗組的組合物的最終濃度分別為0.034%、0.057%、0.091%、0.114%和0.17%，且在本試驗中另以20ppm、40ppm、60ppm、80ppm與100ppm沒食子酸(Gallic acid)做為正對照組，以及使用去離子水作為控制組，以比較本發明組合物相較於正對照組的還原力活性。

實施例1和比較例1的總還原力結果如第3圖所示。由第3圖可知，實施例1相對於沒食子酸的總還原力大約為比較例1的1.3倍。

4.亞鐵離子螯合試驗

菲咯嗪(FerroZine)試劑在螯合亞鐵離子(Fe²⁺)之後，會產生鮮紅色的FerroZine-Fe²⁺錯合物，並在562nm具有强烈吸光反應。當亞鐵離子被螯合時，游離的Fe²⁺會減少，FerroZine-Fe²⁺錯合物的生成量也會因此降低，減少在562nm的吸光反應，藉此評估樣品的螯合亞鐵離子能力。

在試驗上首先取20μL不同濃度的實施例1樣品、比較例1樣品分別加入96孔細胞分析盤中的不同孔洞作為實驗組，接著再加入120μL的甲醇及20μL的FeCl₂，搖晃30秒後，再加入40μL的菲咯嗪試劑，均勻混合後於室溫避光反應30分鐘。最後，再以Microplate reader(SPECTROstar Nano)測定於波長562nm下吸光值(OD₅₆₂)，其中，實驗組樣品的最終濃度分別為0.1%、0.2%、0.4%、0.6% 及0.8%。此外，在本試驗中另使用高效且穩定的螯合劑EDTA-2Na水溶液作為正對照組，以及使用去離子水溶液作為控制組，以比較本發明組合物相較於正對照組的螯合亞鐵離子能力。

實施例1和比較例1的螯合亞鐵離子清除率結果如第4圖所示。由第4圖可知，實施例1在0.1%、0.2%、0.4%、0.6%及0.8%濃度時的亞鐵離子螯合力大約為比較例1的5.76、7.32、6.83、12.50及10.38倍。

5.蘑菇酪胺酸酶抑制試驗

L-多巴(L-Dopa)在酪氨酸酶(Tyrosinase)的作用下會轉變為多巴醌，再接續轉變為黑色素，為最廣泛使用的黑色素生成前驅物之一。黑色素的生成量可以透過測量475nm的吸光值强弱得知，而加入樣品時475nm的吸光值若有降低，代表黑色素生成量有受到抑制，即該樣品具有美白效果。

在試驗上首先取10μL的樣品和80μL的PBS及10μL的酪氨酸酶均勻混合，之後再加入900μL的2.5mM L-多巴，搖晃混勻後立即倒入cuvette中，並利用Microplate reader(SPECTROstar Nano)每10秒測量一次475nm的吸光强度(OD₄₇₅)，持續測量5分鐘，即可得到一時間對吸光值的變化曲線。此外，本試驗中也另外測量了不加入樣品的控制組吸光值變化曲線，透過把所有曲線合並在同一張圖表上，即可比較本發明組合物的美白效果强弱。

實施例1和比較例1的酪胺酸酶抑制結果如第5圖所示。由第5圖可知，經過5分鐘的黑色素生成反應後，實施例1在475nm的吸光值大約為比較例1的0.87倍。

最後所應當說明的是，以上實施例僅用以說明本發明的技術方案而非對本發明保護範圍的限制，儘管參照較佳實施例對本發明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發明技術方案的實質和範圍。

Claims

一種抗氧化美白組合物，其中，該抗氧化美白組合物包含如下質量百分比的組分：3’-羥基化染料木黃酮0.004%、8-羥基化大豆苷元0.0001%、酵母萃取物0.0001%、蓮花萃取物0.0004%、白雪姬葉萃取物0.0002%、羽衣草萃取物0.0004%、洛神花乳酸菌發酵液0.002%、紫陽花葉萃取物0.001%、芽孢桿菌發酵液2%、複合胜肽1%、水40.0088%、甘油23.763%、1,3-丙二醇24.248%、1,3-丁二醇8.972%。
一種如請求項1所述的抗氧化美白組合物在製備抗氧化美白護膚品中的應用。
如請求項2所述的應用，其中，該護膚品為爽膚水、面霜、眼霜、精華液、乳液或面膜。
一種護膚品，其中，該護膚品包括如請求項1所述的抗氧化美白組合物。
如請求項4所述的護膚品，其中，該護膚品還包括護膚品領域可接受的輔料。