TWI745667B

TWI745667B - 一種大豆分離蛋白用於製備預防或治療骨鬆合併肌少症、提升身體機能及降低運動後疲勞之組合物的用途。

Info

Publication number: TWI745667B
Application number: TW108110445A
Authority: TW
Inventors: 黃啟彰; 黃士瑋; 徐藝洳; 林哲立; 李孟謙; 黃文經
Original assignee: 國立體育大學
Priority date: 2019-03-26
Filing date: 2019-03-26
Publication date: 2021-11-11
Also published as: TW202034944A

Abstract

一種大豆分離蛋白用於製備預防或治療骨鬆合併肌少症、提升身體機能及降低運動後疲勞之組合物的用途，特別是用於預防或治療針對雌激素不足所引起的骨鬆合併肌少症、身體機能下降及運動後疲勞；卵巢切除或更年期婦女使用本發明之組合物，可以提升骨骼強度，降低運動所引起之疲勞，增加肌肉耐力，降低血液中乳酸、血氨、肌酸磷酸激酶之濃度，並且改善身體各項生化指標數值，包含降低血液中丙胺酸轉胺酶、天門冬胺酸轉胺酶、肌酸酐、肌酸磷酸激酶、乳酸去氫酶和總膽固醇濃度，並可提升高密度脂蛋白膽固醇濃度；該組合物可進一步與運動訓練一起合併使用。

Description

一種大豆分離蛋白用於製備預防或治療骨鬆合併肌少症、提升身體機能及降低運動後疲勞之組合物的用途。

本發明係關於一種大豆分離蛋白用於改善雌激素不足婦女的骨鬆合併肌少症、身體機能及運動後疲勞之用途。

更年期女性，因雌激素不足，常造成身體機能下降及一些生理症狀的產生，例如體脂重新分佈、肌肉質量和力量減少，導致肌少症(Sarcopenia)；骨質流失速度過快，導致骨質疏鬆症(Osteoporosis)；總膽固醇(Total cholesterol，TC)、三酸甘油脂(Triglyceride，TG)或血壓升高等。

肌少症為一種與年齡相關的肌肉質量減少和強度下降的症狀。影響肌少症的原因有很多，如內分泌功能的變化、慢性疾病、不使用(disuse)、發炎和營養缺乏等。患有肌少症會增加身體功能障礙、殘疾、跌倒和骨折的風險。

骨質疏鬆症為一種骨質流失，導致跌倒和骨折的風險提高之症狀。若骨質密度(Bone mineral density，BMD)檢查的T評分(T-Score)低於正常年輕人的平均骨密度2.5個標準差，即判定為骨質疏鬆症。女性卵巢功能衰老後，因雌激素分泌不足，會導致血液中介白素-6(Interleukin 6，IL-6)和腫瘤壞死因子(Tumor necrosis factor，TNF)含量上升，造成破骨細胞增加及骨吸收加速，使骨質和骨量減少，因此更年期女性為骨質疏鬆症之高風險群。

老年婦女肌少症和骨質疏鬆症的並存稱為骨鬆合併肌少症(Osteosarcopenia)。之前的一項研究報導，由肌肉減少症引起的肌肉質量減少會降低重力機械負荷能力和骨質密度。同時患有肌少症和骨質疏鬆症的個體，跌倒和骨折的風險高於患有單一上述疾病的患者。

中國專利CN106307553揭示了一種包含乳清蛋白及大豆分離蛋白的組合物可用於改善肌少症，預防長期臥床病人肌肉萎縮。

中國專利CN101181069A揭示了大豆蛋白粉、乳清蛋白粉、大豆異黃酮的複方組合物可用於預防婦女停經後骨質疏鬆。韓國專利KR100509177B1揭示使用乳清蛋白為主要有效成分，再添加大豆異黃酮、海藻鈣等成分之複方組合物，可用於預防骨質疏鬆。

目前雖已有先前技術使用從大豆分離之物質預防骨質疏鬆或肌少症，然而皆為與乳清蛋白合併使用的複方組合物。乳清蛋白為從牛奶中分離出的蛋白，屬於動物性蛋白，純素者不適合食用，對乳製品敏感者亦不適合食用。另外，現在沒有針對預防或改善更年期婦女的骨鬆合併肌少症的膳食補充品，因此如何提供一種可用於預防或治療因雌激素不足所造成的骨鬆合併肌少症或身體機能下降之純植物性來源的膳食補充品是本發明欲解決的問題。

大豆分離蛋白(Isolated soy protein，ISP)，是將大豆經鹼性萃取，去除掉油脂及醣類，再經酸沉澱、調整至中性的植物性蛋白粉。一般大豆蛋白的蛋白量含量約為50-65%，而大豆分離蛋白則是保有90%的完全蛋白質，且具人體高消化利用率。大豆分離蛋白富含支鏈胺基酸 (branched-chain amino acids，簡稱BCAA)。支鏈胺基酸包含纈胺酸(valine)、白胺酸(leucine)及異白胺酸(isoleucine)，有助於將蛋白質代謝的淨平衡從分解代謝轉變為合成代謝。另外，因為大豆分離蛋白經去油脂與去醣類處理，所以不會有大豆本身味道。以上優勢皆讓大豆分離蛋白適合作為膳食補充品，然而，目前仍未有純大豆分離蛋白用於預防或治療雌激素不足所引起之骨質疏鬆或身體機能下降之研究，此亦為本發明在此欲解決的一重要課題。

本發明的目的在於提供一種大豆分離蛋白用於製備預防或治療骨鬆合併肌少症、提升身體機能及降低運動後疲勞之組合物的用途；其中該組合物係用於雌激素不足之婦女。

為達前述發明目的，其中該大豆分離蛋白的有效量為每日12g~30g。

為達前述發明目的，其中該雌激素不足之婦女係指卵巢切除或進入更年期之婦女。

為達前述發明目的，其中該預防或治療骨質疏鬆係藉由提升骨能量、骨骼強度或肌肉品質而達成。

為達前述發明目的，其中該身體機能係包含與丙胺酸轉胺酶(Alanine aminotransferase，ALT)、天門冬胺酸轉胺酶(Aspartate aminotransferase，AST)、肌酸酐(Creatinine，CREA)、肌酸磷酸激酶(Creatine phosphate kinase，CPK)或乳酸去氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)生化指標相關的身體機能。

為達前述發明目的，其中該提升身體機能係降低血液中總膽固醇濃度、提升血液中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)濃度。

為達前述發明目的，其中該降低運動後疲勞係指降低運動後血液中乳酸(Lactate)、血氨(Ammonia)或肌酸磷酸激酶之濃度。

為達前述發明目的，其中該組合物可進一步包括藥學上可接受之載劑、賦形劑、稀釋劑。

為達前述發明目的，其中該組合物可進一步製成流體乳品、濃縮牛奶、優酪乳、酸乳、冷凍優格、乳桿菌發酵飲料、奶粉、冰淇淋、乳酪、乾酪、豆漿、發酵豆漿、蔬果汁、果汁、運動飲料、甜點、果凍、糖果、嬰兒食品、健康食品、動物飼料、中草藥組合物或膳食補充品。

為達前述發明目的，其中該組合物可進一步與運動訓練合併使用。

綜上所述，本發明具有使用純植物性的大豆分離蛋白，適合純素者及對乳製品敏感者食用之優勢，且解決了過去沒有人利用大豆分離蛋白(ISP)作為雌激素不足婦女運動訓練時之食品補充或藥物的用途，並達成預防及改善骨鬆合併肌少症、改善身體機能、降低運動後疲勞等功效。

圖1係大豆分離蛋白與運動訓練介入對卵巢去除小鼠(OVX mouse)之影響的實驗分組與流程；圖2係大豆分離蛋白與運動訓練介入對卵巢去除小鼠體重的影響。

發明係以下面的實施例予以示範闡明，但本發明不受下述實施例所限制。

本發明之新穎技術特徵，包含特定特徵，係揭示於申請專利範圍，針對本發明之技術特徵，較佳之理解茲配合說明書、依據本發明原理之實施例、和圖式將本發明較佳之實施例詳細說明。

本說明書及申請專利範圍中所述之所有技術性及科學用語，除非另有所定義，皆依據以下敘述定義之。其中單數用語「一」、「一個」、「該」，除非另有說明，皆可指涉多於一個對象。除非另有說明，實施本發明採用之通常技術可包括核磁共振、高效液相層析法、蛋白質化學、生物化學、重組DNA技術、藥理學技術。

本說明書使用之「或」、「以及」、「和」，除非另有說明，皆指涉「或/和」。此外，用語「包含」、「包括」皆非有所限制之開放式連接詞。前述段落僅為系統性之指涉而不應解釋為對發明主體之限制。除非另有說明，本發明所用之材料皆市售易於取得，下列僅為示例可取得之管道。

本說明書用語「合併使用」或近似用語，係指涉給予、施予一服用者至少一種選擇之藥物，且包含一療程，該療程係同時或分別以相同或多種途徑給藥。

本說明書用語「有效量(effective amount)」或「治療(therapeutically)有效量」，係指涉化合物或藥物之一足夠量，可於服用者服藥後減輕一或多項疾病症狀或生理狀況；其結果為降低和/或緩和徵象(sign)、症狀(symptom)、或病因，或為其他生理系統之有意圖之改變。舉例而言，治療之「有效量」係包含一本發明提供化合物之可於臨床上顯著降低疾病症狀之劑量。一適當之有效量，其有效值取決於通常藥學技術，如藥物增量方法(dose escalation methods)。

本說明書用語「疲勞」或其近似用語，係指涉由於長時間運動所造成之肌肉疲勞、由於高強度運動所造成之肌肉疲勞、因長期壓力所造成之肌肉疲勞、個體中高強度運動引起的肌肉疲勞、個體中年齡相關性之肌肉疲勞伴隨於疾病或異常之肌肉疲勞、肌病變所引起之肌肉疲勞、或由於個體的肌肉萎縮症所引起之肌肉疲勞。

本說明書用語「治療」係包含以治療或預防之方式緩和、減輕、或改善至少一項疾病症狀或生理狀況、預防新增之症狀、抑制疾病或生理狀況、阻止或減緩疾病發展、造成疾病或生理狀況之復原、減緩因疾病造成的生理狀況、停止疾病症狀或生理狀況。

藥物給予途徑和劑量：以下治療實施僅為例示，由於個體治療療程之變異極大，而大量的建議值之偏離並非異常。劑量可依據變異而改變，而不限於使用之化合物之活性、治療疾病或生理狀態、給藥方式、個體需求、疾病嚴重性、及醫師判斷。

大豆分離蛋白(ISP)：本發明實施例中所使用之大豆分離蛋白係購自Best Jet/Gogodone Co.Ltd，並委託台灣檢驗科技股份有限公司(SGS Taiwan,Ltd)分析該大豆分離蛋白的營養及胺基酸成分，分析結果如表1所示。

實驗動物：14週大、無特定病原體的雌性ICR品系小鼠係購自查爾斯河授權公司(A Charles River Licensee Corp.,Yi-Lan,Taiwan)。實驗前，小鼠先預養一週適應環境；於溫度控制在24±1℃、濕度50%-60%、12小時光照/12小時黑暗循環的動物房飼養，並供予一般飼料(No.5001；PMI Nutrition International,Brentwood,MO,USA)和蒸餾水任食。小鼠以隨機的方式分為以下5組，每組8隻：(a)偽卵巢去除小鼠組(sham OVX，與OVX組做相同的手術操作，但不切除卵巢，作為對照組)；(b)卵巢去除小鼠組(OVX)；(c)卵巢去除小鼠給予大豆分離蛋白介入組(OVX+ISP)；(d)卵巢去除小鼠給予運動訓練介入組(OVX+ET)；(e)卵巢去除小鼠給予大豆分離蛋白合併運動訓練介入組(OVX+ISP+ET)。小鼠的卵巢去除處理是在14週齡小鼠購買來一天內，由有經驗的獸醫進行。

大豆分離蛋白的60公斤人體有效劑量為每次攝入18.5g；38公斤人體有效劑量為每次攝入11.7g；100公斤人體有效劑量為每次攝入30.8g。本發明實施例中使用的小鼠大豆分離蛋白攝取量(3.8g/kg)為與人體的等效劑量，該劑量係依據體表面積差異和美國食品藥物管理局所提出之公式計算：假設人體重60kg，人體有效劑量為18.5g/60kg=0.308g/kg。利用人體與小鼠之換算系數為12.3倍(小鼠和人類之間體表面積的差異)可換算出小鼠的有效劑量為3.8g/kg。大豆分離蛋白給予時間係於OVX+ISP+ET組完成運動訓練後半小時，同時給予OVX+ISP+ET組及OVX+ISP組。

實驗方法

運動訓練(Exercise training，ET)方法：使用裝有自來水(水溫：30±1℃，水深：14-18公分)的塑膠容器(高度：65公分，直徑：20公分)。訓練計劃包括三個階段，分別為適應階段、肌肉生長階段和最大肌肉力量階段。適應階段係於第一週時，讓小鼠負重其體重3-6%之重量，進行6個週期的3分鐘休息/2分鐘強迫游泳訓練(於14公分水深位置)，每週進行五次。肌肉生長期階段係於第二週時，讓小鼠負重其體重10-14%之重量，進行5-7個週期的1分鐘休息/1分鐘強迫游泳訓練(於14公分水深位置)，每週進行5次；並於第三週時，讓小鼠負重其體重14-17%之重量，進行5個週期的1分鐘休息/1分鐘強迫游泳訓練(於16公分水深位置)，每週進行五次。最大肌肉力量階段係讓小鼠負重其體重22%之重量，進行10個週期的3分鐘休息/0.5分鐘強迫游泳訓練(於18公分水深位置)，每週進行五次。

前肢握力(Forelimb grip strength，Grip strength)測試：大豆分離蛋白和/或運動訓練介入4週後，使用低力測試系統(Model-RX-5，Aikoh Engineering，Nagoya，Japan)評估本發明實施例中所有小鼠的前肢握力。

小鼠之運動耐力測試：大豆分離蛋白和/或運動訓練介入4週後測試小鼠之運動耐力。試驗在裝有水的塑膠容器中進行(高度：65公分，半徑：20公分)，將尾部固定有鉛片(鉛片重量為小鼠體重5%)的小鼠，放入水中(水深：40公分，水溫：27℃)，讓小鼠游泳至力竭，當小鼠無法上升至水面呼吸時間大於7秒時判斷為力竭，小鼠游泳持續時間記錄為運動耐力。

運動後疲勞相關之生化指標分析：在給予大豆分離蛋白一小時後，所有小鼠皆進行無額外負擔之15分鐘游泳測試，運動15分後採血並以1500g、4℃離心10分鐘以分離血清。使用Beckman D×C 800自動分析儀測試血清中血氨(Ammonia)、血糖(Glucose，GLU)、乳酸(Lactate)、血尿素氮(Blood urine nitrogen，BUN)、肌酸磷酸激酶(Creatine phosphate kinase，CPK)含量。

組織樣本之收集處理及肝醣(Glycogen)分析：在運動耐力測試結束後1小時，小鼠經CO₂麻醉處理、犧牲後，取出肝臟(Liver)、腎臟(Kidney)、心臟(Heart)、肺(Lung)、肌肉(Muscle)(取小腿後側的腓腸肌及比目魚肌部位)、腸(Intestine)、卵巢脂肪墊(Ovarian fat pad，OFP)和棕色脂肪組織(Brown adipose tissue，BAT)，秤重，並將肌肉與肝臟樣品保存於液態氮中，用於肝醣分析。取出100mg的肝臟或肌肉組織，加入0.5mL冰的10%過氯酸(Perchloric acid)，將組織均質化。將均質化完之組織均質液於4°C、15,000×g條件下離心15分鐘，取上清液置於冰上備用。取30μL前述上清液或30μL肝醣標準品(購自Sigma)加入96微孔盤中，接著加入200μL碘化鉀(Iodine-potassium)呈色10分鐘後，使用微孔盤分析儀(Tecan Infinite M200,Tecan Austria,Salzburg,Austria)分析460nm波長吸光值。

血液樣本之收集及處理：在實驗週期結束時，所有小鼠均接受95% CO2處理，並立即採集小鼠血液，接著離心、收集血清，然後使用血液生化自動分析儀器(Hitachi 7060,Hitachi,Tokyo,Japan)進行血液生化分析，項目包括：天門冬胺酸轉胺酶(Aspartate aminotransferase，AST)、丙胺酸轉胺酶(Alanine aminotransferase，ALT)、鹼性磷酸酶(alkaline-P)、白蛋白(Albumin)、總蛋白(Total protein)、血尿素氮(Blood urine nitrogen，BUN)、肌酸酐(Creatinine，CREA)、肌酸磷酸激酶(Creatine phosphate kinase，CPK)、尿酸(Uric acid，UA)、總膽固醇(Total cholesterol，TC)、三酸甘油脂(Triglyceride，TG)、血糖(Glucose，GLU)、乳酸去氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)。

骨骼強度(Bone strength)測量：根據破壞載荷(Failure load，FL)評估骨骼強度、剛度和能量。使用電腦化測驗儀器(SV-H1000,Japan Instrumentation System Co.,Tokyo,Japan)，經由三點彎曲試驗(Three-point bending test)測試右股骨中段區的破壞載荷。

統計分析方法：數據以平均值和標準誤差表示，使用單因子變異數分析(One-way analysis of variance，ANOVA)分析各組之間的差異，並用SAS 9.0(SAS Inst.,Cary,NC,USA)進行統計分析，當p<0.05時表示具統計上的意義。

實施例一、大豆分離蛋白與運動訓練對體重(BW)及身體組成的影響

大豆分離蛋白與運動訓練對小鼠體重(BW)的影響如圖2所示。OVX小鼠無論有無大豆分離蛋白和/或運動訓練介入，體重皆顯著高於對照組(Sham OVX)。OVX組、OVX+ISP組、OVX+ET組和OVX+ISP+ET組的初始體重和最終體重皆無顯著差異。

大豆分離蛋白與運動訓練對OVX小鼠體重、身體組成、攝食量(Food intake)及飲水量(Water intake)的影響如表2所示。OVX小鼠無論有無大豆分離蛋白和/或運動訓練介入，攝食量和飲水量均低於對照組(Sham OVX)。

實施例二、大豆分離蛋白與運動訓練對小鼠運動能力表現之探討

前肢握力表現：大豆分離蛋白與運動訓練對小鼠前肢握力表現的影響如表3所示。OVX+ISP+ET組的前肢握力較OVX組高，表示大豆分離蛋白與運動訓練的介入可提升OVX小鼠的前肢握力。

運動耐力表現：大豆分離蛋白與運動訓練對小鼠運動耐力表現的影響如表3所示。經大豆分離蛋白和/或運動訓練介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ET、OVX+ISP+ET)，其游泳持續時間皆較OVX組小鼠長，表示大豆分離蛋白和/或運動訓練的介入可提升OVX小鼠的運動耐力。

綜合前肢握力表現及運動耐力表現結果可知，給予大豆分離蛋白介入，尤其是給予大豆分離蛋白合併運動訓練介入，可提升OVX小鼠的肌肉品質與運動能力表現。

實施例三、大豆分離蛋白與運動訓練對運動後疲勞相關指標(Fatigue-Related Indicators)的影響

運動後疲勞可以通過生化指標，如乳酸(Lactate)、血氨(Ammonia)、血糖(Glucose)、肌酸磷酸激酶(CPK)及血尿素氮(BUN)等指標進行評估。大豆分離蛋白與運動訓練對運動後疲勞相關指標之影響的分析結果如表4所示。

乳酸(Lactate)：乳酸是骨骼肌在無氧系統代謝下於肌肉和肝醣進行糖質新生的前驅物，血液中乳酸的濃度常被用來當作疲勞的指標。由表4可知，經大豆分離蛋白和/或運動訓練介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ET、OVX+ISP+ET)，血液中乳酸濃度低於OVX組小鼠，且經大豆分離蛋白合併運動訓練介入的OVX小鼠(OVX+ISP+ET)之血液中乳酸濃度又較只有運動訓練介入的OVX小鼠(OVX+ET)低。

血氨(Ammonia)：運動過程中，血氨濃度的增加和周邊及中樞疲勞程度有關。由表4可知，OVX+ISP+ET組的血氨濃度低於其他組，表示大豆分離蛋白與運動訓練介入可降低OVX小鼠的血氨濃度。

肌酸磷酸激酶(CPK)：血液中肌酸磷酸激酶為肌肉營養缺乏、損傷、衰竭等機能障礙的指標。由表4可知，經大豆分離蛋白和/或運動訓練介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ET、OVX+ISP+ET)，其血液中肌酸磷酸激酶濃度皆顯著低於OVX組小鼠。

綜合表4結果可知，補充大豆分離蛋白可幫助改善OVX小鼠的運動後疲勞相關指標，尤其是降低OVX小鼠運動後之血液中乳酸、血氨和肌酸磷酸激酶濃度，表示補充大豆分離蛋白可減緩OVX小鼠運動後的肌肉疲勞。

實施例四、大豆分離蛋白與運動訓練對肝臟肝醣和肌肉肝醣的影響

肝醣(Glycogen，GLY)：運動過程中，肝醣為能量來源，肌肉肝醣係合成ATP時的重要燃料，也是運動過程中提供能量的直接來源，由表5可得知OVX+ISP組的肌肉肝醣量較其他實驗組高。此結果顯示，補充大豆分離蛋白，可使OVX小鼠的肌肉肝醣含量顯著提升。

實施例五、大豆分離蛋白介入4週後小鼠生化指標之變化

大豆分離蛋白介入4週後分析小鼠各項生化指標之變化分析結果如表6所示。血糖(GLU)、尿酸(UA)和鹼性磷酸酶(Alkaline-P)在各組之間沒有顯著差異。

肝功能代謝指標：丙胺酸轉胺酶(ALT)和天門冬胺酸轉胺酶(AST)普遍存在於心臟和骨骼肌細胞中，當肝細胞受到破壞時會釋出於血液中，血液中丙胺酸轉胺酶和天門冬胺酸轉胺酶的濃度可反應肝臟損害的程度，用來作為肝細胞損害的指標。由表6可知，OVX組的丙胺酸轉胺酶和天門冬胺酸轉胺酶較其他組高，而經大豆分離蛋白介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ISP+ET)，其血液中丙胺酸轉胺酶和天門冬胺酸轉胺酶濃度皆有所降低。

腎功能指標：肌酸酐(CREA)為肌酸分解的代謝產物，會經由腎臟排到尿液中，肌酸酐滯留於血液中的量，常用幫助評估腎功能。表6結果顯示，經大豆分離蛋白介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ISP+ET)，其血液中肌酸酐濃度低於OVX組小鼠。

心臟功能指標：肌酸磷酸激酶(CPK)為存在於肌肉、腦部和心臟的酵素，當這些部位受傷時，血液中的肌酸磷酸激酶的濃度會上升，臨床上常用於協助判斷心臟疾病。由表6可知，經大豆分離蛋白介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ISP+ET)，尤其係經大豆分離蛋白和運動介入的OVX小鼠(OVX+ISP+ET)，其血液中肌酸磷酸激酶濃度低於OVX組小鼠。

乳酸去氫酶(lactate dehydrogenase，LDH)：乳酸去氫酶為廣泛存在於身體各項器官的葡萄糖代謝相關酵素，當器官細胞受損時，乳酸去氫酶會被釋出到血液中，因此臨床上常用乳酸去氫酶在血液中的濃度來評估心臟、肝臟、腎臟、肌肉萎縮等相關疾病。由表6可知，經大豆分離蛋白介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ISP+ET)，其血液中乳酸去氫酶濃度低於OVX組小鼠。

總膽固醇(Total cholesterol，TC)：膽固醇為一種脂質分子，係細胞膜外層的主要成分。血液中膽固醇可藉由低密度脂蛋白(Low-density lipoprotein，LDL)或高密度脂蛋白(High-density lipoprotein，HDL)運送，低密度脂蛋白會將膽固醇運送至細胞或組織，而高密度脂蛋白則是將膽固醇運送至肝臟分解代謝。因由低密度脂蛋白攜帶的低密度脂蛋白膽固醇(LDL-c)會附著在血管壁上，過量時可能會導致動脈血管硬化，因此一般低密度脂蛋白膽固醇被視為壞的膽固醇，而高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)通常被視為是好的膽固醇。由表6可知，經大豆分離蛋白介入的OVX小鼠(OVX+ISP、OVX+ISP+ET)，其血液中總膽固醇濃度低於OVX組小鼠；且其高密度脂蛋白膽固醇濃度高於OVX組小鼠。

綜合表6結果可知，給予大豆分離蛋白介入，尤其係給予大豆分離蛋白合併運動訓練介入，可改善OVX小鼠的血液中各項生化指標濃度；該各項生化指標包含丙胺酸轉胺酶(ALT)、天門冬胺酸轉胺酶(AST)、肌酸酐(CREA)、肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸去氫酶(LDH)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)。結果顯示，補充大豆分離蛋白可提升OVX小鼠的身體機能。

實施例六、大豆分離蛋白介入4週後小鼠的骨骼強度分析

小鼠在大豆分離蛋白介入4週後的骨骼強度分析結果如表7所示。對照組(Sham OVX)、OVX+ISP組、OVX+ET組和OVX+ISP+ET組的骨能量(Bone energy)無顯著差異，但較OVX組高。另外，OVX+ISP+ET組的骨骼強度(bone strength)高於OVX組、OVX+ISP組和OVX+ET組。結果顯示，OVX小鼠在大豆分離蛋白介入後，尤其是大豆分離蛋白合併運動訓練介入後，骨能量和/或骨骼強度皆有所提升。

表示單因子變異數分析顯著差異(p<0.05)。

本發明所使用的大豆分離蛋白為純植物性蛋白，具有適合純素者及對乳製品敏感者食用之優勢，且本發明解決了過去沒有人利用大豆分離蛋白(ISP)作為雌激素不足婦女運動訓練時之食品補充或藥物的用途，並達成以下之功效：1)預防及改善骨鬆合併肌少症：提升骨骼強度及肌肉品質；2)改善身體機能：包含丙胺酸轉胺酶(ALT)、天門冬胺酸轉胺酶(AST)、肌酸酐(CREA)、肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸去氫酶(LDH)在內之生化指標數值皆有所改善，且能降低血液中總膽固醇(TC)濃度、提升血液中高密度脂蛋白膽固醇(HDL-c)濃度；3)降低運動的副作用、降低疲勞：降低因運動引起的乳酸、血氨、肌酸磷酸激酶濃度升高。

於本說明書較佳實施例揭示之內容，本發明所屬領域具有通常知識者可明顯得知前述實施例僅為例示；具本發明所屬技術領域通常知識者可藉由諸多變換、替換而實施，而不與本發明之技術特徵有所差異。依據說明書實施例，本發明可有多種變換仍無礙於實施。本說明書提供之請求項界定本發明之範圍，該範圍涵蓋前述方法與結構及與其相等之發明。

上述多項功效，實屬充分符合新穎性及進步性之法定專利要件，爰依法提出申請，懇請貴局核准本件發明專利申請案，以勵發明。

Claims

一種大豆分離蛋白用於製備預防或治療骨鬆合併肌少症同時提升身體機能及降低運動後疲勞之醫藥組合物的用途；其中該醫藥組合物係用於雌激素不足之婦女，其中該醫藥組合物於施用期間同時合併高強度運動訓練，其中該提升身體機能係降低血液中總膽固醇濃度、提升血液中高密度脂蛋白膽固醇濃度，其中該大豆分離蛋白的有效量為每日12g~30g。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該雌激素不足之婦女係指卵巢切除或進入更年期之婦女。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該預防或治療骨鬆合併肌少症係藉由提升骨能量、骨骼強度或增加肌肉品質而達成。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該身體機能係包含與丙胺酸轉胺酶、天門冬胺酸轉胺酶、肌酸酐、肌酸磷酸激酶或乳酸去氫酶生化指標相關的身體機能。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該降低運動後疲勞係指降低運動後血液中乳酸、血氨或肌酸磷酸激酶之濃度。
如申請專利範圍第1項所述之用途，其中該醫藥組合物可進一步包括藥學上可接受之載劑、賦形劑、稀釋劑。
如申請專利範圍第1~6項所述之用途，其中該醫藥組合物可進一步與運動訓練合併使用。