TWI639579B - Algae broken wall ferment as foliar fertilizer and enhance leaf crops against mites use - Google Patents

Abstract

本發明提供一種將藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲 害之用途，利用菌體所分泌之纖維素水解酵素水解微藻之細胞壁，以溫和釋放出該微藻所具有的營養成分與元素，收集該些成分成為一藻類破壁發酵物原液。利用該藻類破壁發酵物可施用於作物或植栽，而促進其莖、葉以及/或果實的生長。

Description

藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之 用途

本發明係關於一種藻類其細胞壁被分解後之發酵物，尤其是關於一種使用菌體將微藻類細胞壁破壁後所收集之發酵物作為葉面肥之用途。

一般情況下，無論是經濟作物例如禾穀類、瓜果類、蔬菜類或是觀賞植物盆栽，為使其開花數多、結果數多而品質好，肥料的使用是最常見且方便的方法。傳統上最常使用的肥料性質上屬於化學肥料，但化學肥料肥效單一、容易造成環境污染，長期使用更會導致土壤被破壞，使土質不再適合作物或植株生長。因此，為使農業能夠永續經營，不依賴大量化學肥料及化學農藥的農業生產體系是必要的，如此才能減少對環境生態的衝擊，此外，生產的能源及成本可以降低，但仍可維持穩定產量，甚至提高收益更是永續農業所追求的目標。

農業生產若不依賴化學肥料，就需替代以生物性肥料、有機質肥料及礦物質肥料，但以生物性肥料促進化學、有機質肥料利用效率之技術則是目前最受重視的土壤生物技術。最早的生物性肥料，是農民將蔬果採收完畢後，再焚地耕種，近年來則是利用豆科植物與穀類作物進行輪作。生物性肥料係指含具有活性微生物體(包含其休眠孢子)，如細菌、真菌、藻類等微生物之微生物體及其代謝產物的特定製劑，其具有供應植物養分的效果，例如增進植物養分和元素之供應量與總量、或刺激植物生長、或促進植物對營養和元素的吸收。 因此，發現並利用一含有豐富前述有效成分且易取得或保存之生物性天然有機肥料，將是土壤生物技術發展的一重要課題。

所謂葉面肥，係指施用於植物葉面的肥料。相較於一般土壤施肥，葉面施肥較常被利用於例如作物出現養分缺乏的症狀、因土壤太酸、太鹼、太密實所造某些元素欠缺、大雨積水或乾旱所產生養分輸送不良而導致養分失衡，或目的性的促進作物的生產。於現今講求精準農業、高品質農產品、保護環境、降低用藥與節約能源的趨勢下，葉面施肥某種程度上是一相當有效之手段。基本上，調整作物生長可利用肥料成分之改變以刺激作物自身分泌生長素/荷爾蒙，而改變其原本生理作用而達到促進生長之目的，雖然使用葉面肥做為調整作物生理改變之效率遠不及直接採用植物荷爾蒙，然而其對人的安全性高，對作物生長控制之風險亦比較小。此外，使用植物荷爾蒙特別需要注意其有效濃度的範圍，而此範圍又常受植物本身營養及生理狀況、氣候狀況以及土壤中肥料狀況所影響，若濃度不適當對作物的傷害程度將相當嚴重。因此，找尋一種安全、有效，且不容易對植物產生負面影響之葉面肥亦是一必須解決的問題。此外，若能找尋到一種可同時用作葉面肥與一般根肥的肥料組成分，對於作物或植栽的培養將更能依據該植物特性與生長環境等因子來調整施用方式，而更可促進其最佳的生長。

為了解決前述的課題，找尋並利用一具較佳效果且安全之生物性肥料，幫助農民或植栽者，能夠在相當或更少的成本下，讓作物或植物的生長需求獲得滿足或提升，同時能夠在環境保護的前提下，達成永續農業之目標，實現經濟獲益與環境維護雙贏的局面，本發明提供一種藻類破壁發酵物，並將其施用於植物而作為肥料的用途。該藻類破壁發酵物係由以下方法製得：將一 預定數量之微藻加入一預先培養且與該微藻具一預定比例之菌體溶液中進行發酵，其中，該菌體溶液中之菌體可分泌纖維素水解酵素；該微藻加入後使該菌體分泌該纖維素水解酵素以水解該微藻之細胞壁；以及收集該微藻於細胞壁水解後所形成之一藻類破壁發酵物原液。

在本發明的一實施例中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該菌體可為真菌。所述真菌可為杏鮑菇菌(Pleurotus eryngii)或秀珍菇菌(Pleurotus ostreatus)，但並不以此為限。

在本發明的一實施例中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該微藻可為普通小球藻(Chlorella vulgaris)、原始(核)小球藻(Chlorella protothecoides)、蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、橢圓核小球藻(Chlorella ellipsodiea)、微小小球藻(Chlorella minutissima)或酪蠅小球藻(Chlorella protophila)，但並不僅限於此。

在本發明的一實施例中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物可施用於果實類作物，例如：木瓜、番茄、葡萄或香蕉植株，但並不僅限於此。

在本發明的另一態樣中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物可施用於禾穀、根莖類作物，例如：高粱、一條根、玉米、小麥，或園藝植株，例如茶花，但並不僅限於此。

在本發明的另一態樣中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物可施用於葉菜類作物，例如：萵苣、黑尼龍菜、小白菜、芥藍菜或白芥藍菜植株，但並不僅限於此。

在本發明的另一實施例中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物係施用於植株之葉面表面、背面或二者。

在本發明的另一實施例中，所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物施用之濃度係以該藻類破壁發酵物原液稀釋500倍至3000倍，較佳為稀釋500倍至2000倍，最佳為500倍至1000倍。

藉由本發明將藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，一方面可藉由該藻類所具有豐富之有機化合物，特別是胺基酸，或是萃取物中其他的有效成分，提供作物或植栽最適當的養分，並由葉面達到最好的吸收方式與利用，達到克服養分缺乏、因應生長環境變異或調整生長需求的目的，一方面也因為該藻類破壁發酵物對人畜無毒無害、對環境無汙染，也實現了永續農業的目標。

以下將進一步說明本發明的實施方式，下述所列舉的實施例係用以闡明本發明，並非用以限定本發明之範圍，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可做些許更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。

圖1係本發明實施例施用於木瓜對其莖、葉生長影響之比較照片。

圖2係本發明實施例施用於茶花對其莖、葉生長影響之比較照片。

圖3係本發明實施例施用於聖女番茄對其果實生長影響之比較照片。

圖4係本發明實施例施用於黑尼龍菜對其莖、葉生長影響之比較照片。

圖5係本發明實施例施用於小白菜對其莖、葉生長影響之比較照片。

圖6係本發明實施例施用於芥藍菜對其莖、葉生長影響之比較照片。

圖7係本發明實施例施用於白芥藍菜對其莖、葉生長影響之比較照片。

本發明所提供之一種藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，首先進行藻類破壁發酵物的製備。

實施例1 藻類破壁發酵物的製備

藻類破壁發酵物的製備，首先分別準備菌類溶液與藻類溶液。本實施例所利用之菌類屬真菌類的杏鮑菇菌(Pleurotus eryngii)。將市售的杏鮑菇菌以刀子切開約5mm正方形塊狀接種於固態培養基上(15g/L麥芽精粉、20g/L葡萄糖、6g/L酵母萃取物與15g/L瓊脂)，培養約7天。之後將前述瓊脂培養基挖出，加入250ml無菌水進行均質化後備用；關於藻類部分，本實施例則係取0.5g的綠藻粉(Chlorella vulgaris)加入10ml(重量比約1：20)的無菌水中，攪拌均勻後備用。取前述10ml均質化後的杏鮑菇菌液，加入80ml的液態培養液中(15g/L麥芽精粉、20g/L葡萄糖與6g/L酵母萃取物)，再加入10ml綠藻溶液，之後於50L發酵桶中，於室溫下(25~35℃)，進行厭氧發酵約3天，即可獲得藻類破壁發酵物原液。若須以乾燥狀態取用，則可將此原液以70℃進行烘乾。

本發明關於藻類破壁發酵物的製備，係利用菌體所分泌的纖維素水解酵素對藻類細胞壁進行水解，相較於研磨或切割的機械方式，或是利用反覆冷凍、超音波震盪的物理方法、還是利用特殊酵素分解、有機溶劑滲透的化學方法，利用本發明生物自然分泌的纖維素水解酵素，更能夠在高效率分解細胞壁的同時，較為完整並保留該藻類內含的所有成分，而可充分利用其內容物所帶來的功效。

前述所利用的綠藻粉中之綠藻又稱小球藻、綠球藻，係一種微藻，生長在新鮮、無污染的水域，屬單細胞植物，細胞大小約只有2~8μm。綠藻具有植物的兩大特徵：具有葉綠體及細胞壁，其葉綠體中含有葉綠素a及b、葉紅素、葉黃素等，而其光合作用的方式和高等植物相同。綠藻在分類學上屬植物界(Kingdom Plantae)、綠藻門(Division Chlorophyta)、綠球藻綱(Class Chlorophyceae)、綠球藻目(OrderChlorocaccales)、綠球藻科(Family Chlorellaceae)的綠球藻屬(GeneraChlorella)。可利用的綠球藻除前述普通小球藻(Chlorella vulgaris)外，尚包括：原始(核)小球藻(Chlorella protothecoides)、蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、橢圓核小球藻(Chlorella ellipsodiea)、微小小球藻(Chlorella minutissima)或酪蠅小球藻(Chlorella protophila)等，但並不僅限於此。

前述纖維素水解酵素，可將不具溶解性的纖維素分解成單糖。該些酵素可包括但不限於：內切型纖維素纖維分解酵素(endo-β -1,4-glucanase)E.C.3.2.1.4(又稱β -1,4-D-glucanhydrolase或carboxymethylcellulase(CMCase))、外切型纖維素纖維分解酵素(exo-β -1,4-glucanase)E.C.3.2.1.91(又稱β -1,4-glucancellobiohydrolase或cellulose-β -1,4-glucancellobiosidase)、β -葡萄糖甘酵素(β -1,4-glucosidase)E.C.3.2.1.21(又稱β -1,4-glucohydrolase或cellobiase)。

前述纖維素水解酵素可由不同的菌體所分泌，例如秀珍菇菌(Pleurotus ostreatus)可分泌水解羧甲基纖維素(Carboxymethylcellulose,CMC)。

前述杏鮑菇菌僅為例示，其亦可為真菌類的秀珍菇菌(Pleurotus ostreatus)，或其他可以分泌前述將藻類細胞壁加以水解的酵素的菌株。

前述微藻溶液與菌體溶液的比例並未設有特別的限制，可在0.5：1~1：5的範圍內，較佳為1：1~1：3之間，更佳為1：1。

實施例2 葉面肥之施用測試-木瓜

選取40株台農二號木瓜株分為對照組與實驗組於網室中進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)。取10公斤該肥料以10噸水稀釋，即稀釋1000倍，以根部灌注方式進行施肥。施用週期為每5~10天灌注1次，(共進行2個月)，共施灑6次。實驗組則取200ml如實施例1所製備的藻類破壁發酵物原液，以200公升的水稀釋，及稀釋1000倍，又另取200ml如實施例1所製備的藻類破壁發酵物原液，以400公升的水稀釋，即稀釋2000倍，分別以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每5~10天1次(共進行2個月)，共施灑6次。自第1次施肥後第2、4週進行紀錄，觀察其生長點(芽點)間距、開花與結果狀況，其結果如表1與圖1所示。

由表1與圖1之結果可知，雖然實驗組芽點增加的比例不如對照組，但是就結果數目而言，其結果數的比例顯著高於對照組。顯見利用本發明之藻類破壁發酵原液做為葉面肥以促進木瓜的結果，比使用一般化學肥料之效果更為顯著。

實施例3 葉面肥之施用測試-茶花

取700顆7吋茶花苗分為對照組與實驗組進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)。取10公斤該肥料以10噸水稀釋，即稀釋1000倍，以土壤灌注方式進行施肥。施用週期為每月灌注1次(6月~11月間)，共6次。實驗組則取200ml如實施例1所製備的藻類破壁發酵物原液，以200公升的水 稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每15天施灑1次(共進行2個月)，共施灑4次。自第1次施肥後第60天進行紀錄，觀察葉、莖等生長狀況，其結果如表2與圖2所示。

由表2與圖2之結果可知，在葉的形態部分，對照組與實驗組的葉色都可呈現深綠色，但實驗組的葉面面積較大，而且嫩芽相較於只有少數幾顆有的對照組，實驗組每顆幾乎都有嫩芽，整體生長情況佳。在莖生長方面，對照組一開始並未有明顯差異，一直到第45天才有明顯成長，枝長平均為75公分，莖直徑平均為1.1公分；至於對照組，枝幹成長速度並未有停滯現象，從施灑後就有逐漸成長，枝長平均為95公分，莖直徑平均為1.4公分。因此，最後整株茶花重量，實驗組平均為2.3公斤，相較之下，對照組只有1.8公斤，足足少了約27%的重量。從以上結果可知，藉由本發明之施用方法，特別是利用藻類破壁發酵物作為葉面肥之利用方式，的確能夠有效產生生長促進之效果。相較於過去習知藻類僅作為營養補充品、促進免疫活性等保健食品(請參江善宗等著，纖維素水解酵素於綠藻工業之應用研究，2006，農業生技產業季刊第七期)而言，本發明提供一完全異於習知的效用。

實施例4 葉面肥之施用測試-聖女番茄

以300坪園區分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)。取1公斤該肥料以1噸水稀釋，即稀釋1000倍以土壤灌注方式進行施肥。施用週期為每月灌注1次，共6次。實驗組則取200ml如實施例1所製備的藻類破壁發酵物原液，以200公升的水稀釋，即稀釋1000倍，於種植芽苗三週後著果期時，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每15天施灑1次(共進行2個月)，共施灑4次。自第1次施肥後第60天進行紀錄，觀察葉、莖等生長狀況，其結果如表3與圖3所示。

由表3與圖3之結果可知，在果實形態部分，對照組的果實較為瘦扁、大小不一、且光澤黯淡偏黃，但實驗組相較之下，果實相當飽滿、大小較均勻一致、且顏色紅潤。此外，就果實口感測試，對照組較軟嫩、水分較少，但實驗組之果實因飽滿而較Q脆，而且水分多，整體果實品質優良。另一方面，就產量而言對照組結果數多，總收成僅為280公斤，而實驗組為350公斤，提高產量約25%。此外，實驗組之甜度亦大幅提高4度。從以上結果可知，藉由本發明之施用方法，特別是利用藻類破壁發酵物作為葉面肥之利用方式，的確能夠有效促進果實的生長，並使其具有好的品質、甜度，同樣是完全異於習知的新效用。

實施例5 葉面肥之施用測試-玉米

以2公頃田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)，取10公斤該肥料以10噸水稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每10天施灑1次(共進行6個月)，共施灑18次。實驗組使用10L如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液，以10公噸的水稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每10天施灑1次(共進行6個月)，共施灑18次。其生長情形如表4所示。

由表4可知，實驗組玉米植株的莖生長得較為粗壯，每莖增重高達77%，而每莖玉米粒數也有高達69%的增長。因此，實驗組的玉米每公頃產量大幅提高了45%。顯見利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，將比一般化學肥料之效果更為顯著。

實施例6 葉面肥之施用測試-小麥

以2公頃田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)，取10公斤該肥料以10噸水稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每10天施灑1次(共進行4個月)，共施灑12次。實驗組使用10L如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液，以10公噸的水稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每10天施灑1次(共進行4個月)，共施灑12次。其生長情形如表5所示。

表5

由表5可知，實驗組小麥植株所結的穀穗較為飽滿，穀重平均增加了40%，而整體產量大幅提高到140%，幾乎為原本的2.5倍。顯見利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，將比一般化學肥料之效果更為顯著。

實施例7 葉面肥之施用測試-葡萄

以2公頃田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)，取10公斤該肥料以10噸水稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每10天施灑1次(共進行7個月)，共施灑21次。實驗組使用10L如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液，以10公噸的水稀釋，即稀釋1000倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每10天施灑1次(共進行7個月)，共施灑21次。其生長情形如表6所示。

由表6可知，實驗組葡萄植株每一藤蔓同樣生長得較為粗壯且長，每藤蔓增重30%，而每公頃的產量似乎與藤蔓的生長相關，也增加了約25%。重要的是，葡萄的甜度由原本的14度大幅提高至19度。因此，利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，將比一般化學肥料之效果更為顯著，對於果實的甜度、品質也有明顯提升。

實施例8 葉面肥之施用測試-黑尼龍菜

以300平方公尺田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)，取50毫升該肥料以25公升水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次。試驗組使用50毫升如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液(液態)以25公升的水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次，其生長結果如表7與圖4所示。

由表7與圖4可知，黑尼龍菜實驗組中，每一植株的體型要比原本使用一般肥料壯大許多，無論葉長、葉寬、莖長、莖粗都增加了約15%~60%，且葉片數目也增加了50%，使整體的產量大幅提高。此外，觀察菜株上之蛀蟲，也發現實驗組的部分減少了7%，因此，利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，除了比一般化學肥料之效果更為顯著外，也提高了植株對蛀蟲的抵抗力。

實施例9 葉面肥之施用測試-小白菜

以300平方公尺田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)，取50毫升該肥料以25公升水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次。實驗組使用50毫升如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液(液態)以25公升的水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次。其生長情形如表8與圖5所示。

由表8與圖5可知，小白菜實驗組中，每一植株的體型要比原本使用一般肥料壯大許多，無論葉長、葉寬、莖長、莖粗都增加了約20%~58%，且葉片數目也增加了57%，使整體的產量大幅提高。此外，觀察菜株上之蛀蟲，也發現實驗組的部分減少了5%，因此，利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，除了比一般化學肥料之效果更為顯著外，也提高了植株對蛀蟲的抵抗力。

實施例10 葉面肥之施用測試-芥藍菜

以300平方公尺田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料(市售即溶複合肥料10-20-20)，取50毫升該肥料以25公升水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行 1個月)，共施灑4次。試驗組使用50毫升如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液(液態)以25公升的水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次，其生長結果如表9與圖6所示。

由表9與圖6可知，芥藍菜實驗組中，每一植株的體型要比原本使用一般肥料壯大許多，無論葉長、葉寬、莖長、莖粗都增加了約28%~50%，且葉片數目也增加了33%，使整體的產量大幅提高。此外，觀察菜株上之蛀蟲，也發現實驗組的部分減少了3%，因此，利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，除了比一般化學肥料之效果更為顯著外，也提高了植株對蛀蟲的抵抗力。

實施例11 葉面肥之施用測試-白芥藍菜

以300平方公尺田地分對照組與實驗組二個區域進行試驗。對照組使用一般化學肥料，取50毫升該肥料以25公升水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次。試驗組使用50毫升如實施例1所製備的藻類破壁發酵原液(液態)以25公升的水稀釋，即稀釋500倍，以葉面噴灑方式進行施肥。施用週期為每7天施灑1次(共進行1個月)，共施灑4次，其生長結果如表10與圖7所示。

由表10與圖7可知，實驗組的白芥藍菜，其葉長、葉寬、莖長、莖粗都增加了約13%~22%，雖增加幅度較小，但還是比原本使用一般肥料壯大許多。此外，葉片數目卻增加了75%，推測是葉片數之增加導致每一葉片之大小增長幅度縮小。另一方面，觀察菜株上之蛀蟲，也發現實驗組的部分同樣有減少，並減少了2%，因此，利用本發明之藻類破壁發酵原液做為肥料用途，除了比一般化學肥料之效果更佳外，也提高了植株對蛀蟲的抵抗力。

藉由上述試驗可知，本發明以藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，除了在根、莖、葉與果實的生長調節上，產生促進分化與發育之效果外，亦可藉由該發酵物所含有之其他有效成分，提供植株生長所需之養分或元素，因此更能進一步促進植物各器官之發育與成長，同時由於該藻類破壁發酵物對於植株本身並無負面之生長影響，因此在濃度的控制上也較無須擔心因其不平衡所造成的植株傷害。

Claims (7)

1. 一種藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物係由以下方法製得：將一預定數量之微藻加入一預先培養且與該微藻具一預定比例之菌體溶液中進行發酵，其中，該菌體溶液中之菌體係真菌並可分泌纖維素水解酵素，該菌體溶液係將塊狀真菌接種於固態培養基上培養約7天，而該固態培養基為15g/L麥芽精粉、20g/L葡萄糖、6g/L酵母萃取物與15g/L瓊脂，之後將所述瓊脂培養基挖出，加入250ml無菌水進行均質化後備用；該微藻加入後使該菌體分泌該纖維素水解酵素以水解該微藻之細胞壁，其中該微藻與該菌體溶液的比例設定在0.5：1~1：5的範圍；以及收集該微藻於細胞壁水解後所形成之一藻類破壁發酵物原液；該藻類破壁發酵物施用之濃度係以該藻類破壁發酵物原液稀釋500倍至3000倍。
2. 如申請專利範圍第1項所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該真菌係杏鮑菇菌(Pleurotus eryngii)或秀珍菇菌(Pleurotus ostreatus)。
3. 如申請專利範圍第1項所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該微藻係普通小球藻(Chlorella vulgaris)、原始(核)小球藻(Chlorella protothecoides)、蛋白核小球藻(Chlorella pyrenoidosa)、橢圓核小球藻(Chlorella ellipsodiea)、微小小球藻(Chlorella minutissima)或酪蠅小球藻(Chlorella protophila)。
4. 如申請專利範圍第1項所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物係施用於木瓜、番茄、葡萄或香蕉植株。
5. 如申請專利範圍第1項所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物係施用於高粱、一條根、玉米、茶花或小麥植株。
6. 如申請專利範圍第1項所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物係施用於萵苣、黑尼龍菜、小白菜、芥藍菜或白芥藍菜植株。
7. 如申請專利範圍第1、4、5或6項所述之藻類破壁發酵物作為葉面肥並提升葉菜作物抗蛀蟲害之用途，其中該藻類破壁發酵物係施用於植株之葉面表面、背面或二者。