TWI637748B - 蓮蓬萃取物用於治療及／或預防腎臟病變之用途 - Google Patents
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Abstract
本發明係揭露蓮蓬萃取物之第二用途，其能夠有效地抑制血液中發炎因子、提昇抗氧化酵素活性、降低腎臟氧化壓力，據此達到保護腎臟及治療、預防腎臟疾病之功效。
Description
本發明係有關於一種植物萃取物之第二用途，特別係指一種蓮蓬萃取物用於治療及/或預防腎臟病變之用途。
按，腎臟為人體一個重要之代謝器官，主要能夠過濾如尿酸、尿素氮或肌酐酸等身體所代謝出之物質，使之與電解質、水分等形成尿液而排除體外。而當腎臟功能受損，則會使人體逐漸失去正常之代謝功能，對於身體健康造成極大威脅。腎臟病於初期時沒有特別明顯之症狀，大多數腎臟病患者於後期時才會發現已經罹病，已無法單純藉由藥物改善症狀，使得多數患者最終皆須面臨洗腎或是尋求換腎之治療方式。
根據統計資料顯示，世界各國之腎臟疾病患者數量皆持續成長，造成各國醫療資源及支出十分承重之負擔，而根據臺灣衛生福利部之2014年之統計資料可知，腎臟疾病係為台灣人十大死因之一。由上可知，腎臟疾病已儼然成為世界各國重要之公共衛生議題，是以，倘若能尋得一種安全且有效之治療方法乃對於公共健康是一大福音。
隨著近年強調天然之養身方法，植物中具生物活性之成份逐漸受到重視，故目前許多研究皆著眼於自植物中開發出具有療效之活性成份。據此，本案發明人係致力於自天然植物中開發出能夠用以治療及/或預防腎臟疾病或腎臟病變之組合物。
本發明之主要目的係在提供蓮蓬萃取物之第二用途，其係能夠有效地治療及/或預防腎臟疾病。
為能達成上述目的，於本發明之一實施例中係提供一種將蓮蓬萃取物用於製造治療及/或預防腎臟疾病之組合物之用途。藉由投予一有效量之本發明所揭蓮蓬萃取物至一個體，係能夠達到預防及/或治療腎臟損傷相關疾病之功效。較佳地，該蓮蓬萃取物係由蓮蓬經水萃取而得者，其中又以加熱萃取法為佳。
較佳地，該腎臟疾病係為與腎臟纖維化或腎臟發炎相關之疾病。
較佳地，該腎臟疾病係為慢性腎衰竭。
較佳地，該腎臟疾病係為痛風性腎病變。
較佳地，該組合物含有1~2wt%之蓮蓬萃取物。
本發明之另一目的係在於提供藉由蓮蓬萃取物預防與腎臟病變相關疾病之用途。
為能達成上述目的，於本發明之另一實施例係揭露一種將蓮蓬萃取物用於製造治療痛風之組合物之用途，其中：
該蓮蓬萃取物係由蓮蓬經水萃取而得者，又以加熱萃取法為佳。
該組合物含有1~2wt%之蓮蓬萃取物。
第一圖係顯示各該組小鼠腎臟外觀。
第二圖係為各該組小鼠腎臟重量。
第三圖係檢測各該組小鼠血清中TNF-α表現之結果。
第四圖係各該組小鼠IL-6之表現量化結果。
第五圖係各該組小鼠麩胱甘肽過氧化酶之表現量化結果。
第六圖係各該組小鼠麩胱甘肽還原酶之表現量化結果。
第七圖係各該組小鼠麩胱甘肽之表現量化結果。
第八圖係各該組小鼠過氧化氫酶之表現量化結果。
第九圖係各該組小鼠超氧歧化酶之表現量化結果。
第十圖係顯示各該組小鼠之總抗氧化能力。
第十一圖係顯示各該組小鼠之脂質過氧化程度。
第十二圖係為各該組小鼠腎臟切片經H&E染色之結果。
第十三圖係為各該組小鼠腎臟切片經梅生三色染色之結果。
以下將透過若干實例並搭配圖式做進一步說明如后。
所有實驗數據之結果係以mean±SD表示，其中，#：P<0.05，##：P<0.01為與第一組比較之結果；*：P<0.05，**：P<0.01為與第二組比較的結果。
實例一：製備蓮蓬萃取物
取一乾燥蓮蓬100g，加入約4公升蒸餾水，加熱約1~2小時，過濾出濾液，進行冷凍乾燥，獲得一粉末狀之蓮蓬萃取物，而後將該蓮蓬萃取物與水製備為不同濃度，以供後續實例使用。
實例二：建立慢性腎損傷動物模式
由國家實驗研究院實驗動物中心取得若干6週齡雄性C57BL/6小鼠，隨機分為四組：第一組為控制組；第二組為腺嘌呤誘導組；第三組為1wt%蓮蓬萃取物組，並且投予腺嘌呤；第四組為2wt%蓮蓬萃取物組，並且投予腺嘌呤。各該組小鼠之飼養環境條件為：自動空氣調節(換氣率每小時12次)、自動光照控制(12小時白晝，12小時黑夜)、室溫控制於22±2℃、相對濕度50-55%、給予一般飼料與飲水，其中，實驗時間共9週，而第二至四組小鼠於實驗每週每天被投予0.2%的腺嘌呤，以誘導腎臟損傷，而於第4週開始，第三組及第四組小鼠每天則分別多被投予1wt%及2wt%之蓮蓬萃取物。實驗結束後，將各該組小鼠予以犧牲，並取其腎臟。
實例三：分析腎臟重量
將各該組小鼠之腎臟予以稱重，並且拍照，結果如第一圖及第二圖所示。
請參閱第一圖及第二圖，相較於第一組，第二組小鼠之腎臟萎縮並且重量減輕，顯示投予腺嘌呤會誘導腎臟損傷之發生。而相較於第二組小鼠，第三組及第四組小鼠之腎臟重量皆有提昇且萎縮之情形較為輕微，並且隨著投予濃度之增加，可明顯維持小鼠腎臟重量。由此結果顯示本發明所揭蓮蓬萃取物係能夠有效改善或/及治療腎臟損傷及其相關疾病。
實例四：血液生化值分析
自各該組小鼠心臟取出血液，離心(3000rpm)後取其上清液，進行血液生化值分析，結果如下表一所示。
由表一之結果可知，第二組小鼠之血中尿素氮及肌酸酐分別高於第一組小鼠3.90及2.63倍；相較於第二組小鼠，第三組及第四組小鼠之血中尿素氮值分別下降為0.82倍及0.84倍，而肌酸酐則分別下降為0.79及0.71倍。由此顯示本發明所揭蓮蓬萃取物係能夠有效改善腎臟功能異常，而能達到治療或改善腎臟損傷相關疾病之功效。
實例五：檢測血液中發炎因子之表現
將各該組小鼠之血液以ELISA檢測其內發炎因子：IL-6、TNF-α之表現。本實例係使用BioLegend ELISA MAXTM Deluxe Sets進行分析，而詳細實驗步驟係為本發明所屬技術領域之通常知識，並且非為本發明之技術特徵所在，故於此不加以冗言。實驗結果係如第三圖及第四圖所示。
由第三圖及第四圖之結果可知，第二組小鼠血液中TNF-α及IL-6之表現量係分別為第一組小鼠之1.95及1.25倍，顯示腺嘌呤係會使腎臟產生發炎現象而導致腎臟病變。再者，第三組及第四組小鼠血液中TNF-α之表現量係分別為第二組小鼠之0.97倍及0.76倍；以IL-6來說，第三組及
第四組小鼠之表現量係分別為第二組小鼠之1.08倍及0.89倍。由此結果可知，本發明所揭蓮蓬萃取物於高劑量時能夠改善或治療腎臟發炎或其相關病變。
實例六：抗氧化酵素測定
取各該組小鼠之腎臟組織，測定各該組小鼠之抗氧化酵素：麩胱甘肽過氧化酶、麩胱甘肽還原酶、麩胱甘肽、過氧化氫酶及超氧歧化酶，以及各該組小鼠之總抗氧化能力、脂質過氧化程度。測定結果如第五圖至第十一圖所示。而於此實例中之測定方法為本發明之通常知識，並且非本發明之技術特徵所在，故於此不加以贅述。
由第五圖可知，第二組小鼠之麩胱甘肽過氧化酶比活性為第一組之0.79倍，第三組及第四組小鼠之麩胱甘肽過氧化酶比活性為第二組小鼠之1.38及1.59倍。請參閱第六圖，第二組小鼠之麩胱甘肽還原酶比活性為第一組之0.77倍，第三組及第四組小鼠之麩胱甘肽還原酶比活性為第二組小鼠之1.28及1.09倍。
請參閱第七圖，第二組小鼠之麩胱甘肽含量為第一組之0.43倍，而相較於第二組，第三組及第四組小鼠之麩胱甘肽含量皆有顯著增加，分別為第二組之1.91倍及2.25倍。由第八圖之結果可知，第二組小鼠過氧化氫酶比活性係低於第一組，為第一組之0.79倍，而第三組及第四組小鼠過氧化氫酶比活性係分別為第二組小鼠之1.32倍及1.42倍。又請參閱第九圖，第二組小鼠之超氧歧化酶比活性係為第一組之0.62倍，而相較於第二組，第三組與第四組小鼠之超氧歧化酶比活性明顯增加，分別為第二組之1.33倍及1.35倍。
請再參閱第十圖，第二組小鼠之總抗氧化能力係為第一組小鼠之1.27倍，而第三組及第四組小鼠之總抗氧化能力係較第二組小鼠增加，分別為第二組之1.13倍及1.07倍。由第十一圖之結果可知，第二組小鼠脂質過氧化程度為第一組小鼠之1.4倍，並且，第三組及第四組小鼠脂質過氧化程度分別為第二組小鼠之0.72倍及0.69倍。
由上述結果可知，投予本發明所揭蓮蓬萃取物至腎臟損傷之個體，其係能提高麩胱甘肽過氧化酶、麩胱甘肽還原酶、過氧化氫酶及超氧歧化酶比活性、提高麩胱甘肽含量，並且能夠降低脂質過氧化程度。換言之，本發明所揭蓮蓬萃取物係能夠提升抗氧化酵素活性，使氧化壓力下降，進而能達到保護腎臟及治療或改善腎臟損傷之功效。
實例七：組織切片染色
取各該組小鼠之腎臟進行石蠟包埋，切片為厚度5μm之切片，分別進行H&E及梅生三色染色法進行染色，結果如第十二圖至第十三圖所示。
由第十二圖之結果可知，第二組小鼠腎絲球周圍之近曲小管與遠曲小管部分產生空洞化，並且整體顏色偏黃。而不論於第三組及第四組小鼠之切片皆可觀察到腎絲球周圍之近曲小管與遠曲小管部分空洞化較不嚴重，且整體顏色與組織型態都更接近第一組，其中第四組小鼠之組織型態更接近第一組。
由第十三圖之結果可知，第二組小鼠腎臟之纖維化程度係明顯多於第一組小鼠，而經投予蓮蓬萃取物之第三組及第四組小鼠腎臟纖維化之程度係明顯少於第二組。
由上述結果顯示於腎損傷之個體投予本發明所揭蓮蓬萃取物係能夠有效地保護腎臟且能減少腎臟纖維化之情形，並且投予之濃度越高，改善腎臟損傷之效果越佳，因此，本發明所揭蓮蓬萃取物係能達到治療及/或預防腎臟損傷或是腎臟病變之功效。
藉由上述各該實例之結果可證實本發明所揭蓮蓬萃取物係能夠作為治療或/及預防腎臟病變或其相關疾病之有效成分，因此，能夠因應商業上之需求搭配藥學上可接受之載體或食品上可接受之成分，製備成為醫藥組成物或是食品。再者，本發明所揭蓮蓬萃取物係以可食用之植物做為原料，並且，以水作為萃取溶劑，是以，能夠被安全地使用於人體。
Claims (7)
- 一種蓮蓬萃取物用於製備治療及/或預防腎臟疾病之組合物之用途，其中，蓮蓬萃取物係蓮蓬以水作為萃取溶劑並經加熱步驟後萃取而得者，並且，該腎臟疾病係選自由腺嘌呤誘導腎臟損傷及痛風性腎病變所組成之群。
- 依據申請專利範圍第1項所述用途，其中該腎臟疾病係為由腺嘌呤會誘導腎臟損傷。
- 依據申請專利範圍第2項所述用途，其中，該由腺嘌呤誘導腎臟損傷係為腎纖維化。
- 依據申請專利範圍第2項所述用途，其中該由腺嘌呤誘導腎臟損傷係為腎臟發炎。
- 依據申請專利範圍第2項所述用途，其中該由腺嘌呤誘導腎臟損傷係為慢性腎衰竭。
- 依據申請專利範圍第1項所述用途，其中該腎臟疾病係為痛風性腎病變。
- 依據申請專利範圍第1項所述用途，其中該組合物含有1~2wt%之蓮蓬萃取物。
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