TWI622352B - 含有熱不穩定性乳蛋白之組成物及其製備方法 - Google Patents

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Abstract

本發明揭露一種用於製備包含熱不穩定性乳蛋白之組成物的方法。在部分實施例中，該方法涉及將包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的第一組成物予以至少約130℃的溫度處理；以及將該第一組成物與包含熱不穩定性乳蛋白之第二組成物組合。在另一實施例中，該方法包括將已予以至少約130℃的溫度處理的包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源之第一組成物與包含不穩定性乳蛋白之組成物組合，以形成包括脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白之第三組成物，並將該第三組成物無菌包裝。

Description

含有熱不穩定性乳蛋白之組成物及其製備方法
本揭露大體上係關於含有熱不穩定性乳蛋白之營養組成物之領域，例如嬰兒配方、人乳強化營養品、孩童膳食補充品等等，以及製備此種組成物之方法。
數種於乳品中的天然蛋白質具有有益的生物活性。這些蛋白質可在全乳和乳清、酪蛋白或其他乳蛋白部分或分離物中發現。例如，乳鐵蛋白為可在人乳或非人乳中發現的蛋白質，具有許多不同的抗細菌及抗病毒活性。其他包括乳過氧化酶及乳黏附素(lactadherin)(乳脂肪球-EGF(表皮生長因子)8蛋白)的乳蛋白亦業經指出有益於降低感染風險。因此，已期望試圖將這些生物活性蛋白包括於針對人類的乳類膳食組成物中，例如嬰兒配方。
遺憾的是，在通常用於提供人類消費之用的衛生乳類組成物之溫度條件下，會失去或大幅降低某些乳蛋白生物活性，將生物活性蛋白包括於乳類膳食組成物的嘗試常受到妨礙。更特定言之，許多乳蛋白經熱處理方法而變性或不活化。舉例而言，乳鐵蛋白及例如乳過氧化酶及乳黏附素之其他生物活性乳蛋白當在巴斯德殺菌法條件(例如72℃共15秒)下會有一些程度的不穩定性。其他於高熱條件下變性或不活化的乳蛋白為乳鐵蛋白素( lactoferricin)及轉形生長因子(TGF-β)。此種蛋白質在嚴苛處理條件(例如130℃至145℃)下係特別易受損。
因此，提供用於製備例如嬰兒配方、人乳強化營養品、孩童膳食補充品等等之營養組成物的方法，其已經過高溫處理條件但含有具生物活性的不耐熱乳蛋白，將會有所助益。
發明概述
簡言之，在一實施例中，該揭露係關於一種製備組成物之方法。在一實施例中，該方法包括：a)提供包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的第一組成物，並將該第一組成物予以至少約130℃的溫度處理；b)提供包含熱不穩定性乳蛋白的第二組成物；以及c)將該第一組成物與包含熱不穩定性乳蛋白之該第二組成物組合，以形成包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白之第三組成物。在一較佳實施例中，該第一及第三組成物係營養組成物。
在某些實施例中，該第一組成物含有達至約7 g/100 kcal的脂肪或脂質來源，更佳為約3 g/100 kcal至約7 g/100 kcal的脂肪或脂質來源，以及達至約5 g/100 kcal的蛋白質來源，更佳為約1 g/100 kcal至約約5 g/100 kcal的蛋白質來源。
較佳的是，在該第二組成物中的熱不穩定性乳蛋白係 乳鐵蛋白、乳過氧化酶、乳鐵蛋白素、TGF-β和/或乳黏附素，更佳為該熱不穩定性乳蛋白係乳鐵蛋白。特別較佳的是該熱不穩定性乳蛋白係藉由非人來源製造的乳鐵蛋白。
在某些實施例中，該第二組成物係溶液，較佳為水性溶液，其包括已經過例如藉由逆滲透、紫外(UV)光處理、照射、電脈波、高熱等等處理以供食品加工用的水。在一實施例中，該第二組成物在與該第一組成物組合前已經過過濾。在另一實施例中，該熱不穩定性乳蛋白在該第二組成物與該第一組成物組合時已予以消毒。在又另一實施例中，該方法進一步包括無菌包裝該第三組成物。該第二組成物或該第三組成物均未予以大於約80℃溫度的處理。
在又另一實施例中，該揭露係關於一種用於製備組成物的方法，包括步驟：將包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源、已經過至少約130℃溫度的處理第一組成物與包含熱不穩定性乳蛋白、未經過大於約80℃溫度處理第二組成物組合，以形成包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源及熱不穩定性乳蛋白的第三組成物；以及無菌包裝該第三組成物。
熟習本技術領域者於閱讀下列說明加上所附圖式即可輕易得知本揭露的各種其他目的、特徵及優點。
發明詳述
在一實施例中，本揭露係關於一種用於製備包含脂肪 或脂質來源、蛋白質來源及熱不穩定性乳蛋白的組成物之方法，包含步驟如下：a)將包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源之第一組成物予以至少約130℃的溫度處理；b)提供包含熱不穩定性乳蛋白的第二組成物；以及c)將該第一組成物與該第二組成物組合，以形成包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白之第三組成物。在該較佳實施例中，該第二組成物尚未經過約80℃或更高的溫度。
可用於包含在該第一組成物中的脂肪或脂質來源可為任何本技術領域中已知或使用者，其包括但不限於動物來源，例如：乳脂(milk fat)、乳酪(butter)、乳酪脂(butter fat)、蛋黃脂質；水產來源，例如：魚油、水產油脂、單細胞油；蔬菜及植物油脂，例如：玉米油、菜籽油、葵花子油、大豆油、軟棕櫚油(palmolein)、椰子油、高油酸葵花子油、月見草油、芥花子油、橄欖油、亞麻子油、棉籽油、高油酸紅花子油、硬棕櫚油(palm stearin)、棕櫚仁油、小麥胚芽油；中鏈三酸甘油脂及脂肪酸之乳化劑及酯類；及任何彼等之組合。
在某些實施例中，包括於該第一組成物中的蛋白質來源包含牛乳蛋白。可用於包括在該第一組成物中的牛乳蛋白包括但不限於乳蛋白粉末、乳蛋白濃縮物、乳蛋白分離物、脫脂奶固體、脫脂奶、脫脂奶粉、乳清蛋白、乳清蛋白分離物、乳清蛋白濃縮物、甜乳清、酸乳清、酪蛋白、酸酪蛋白、酪蛋白鹽(例如酪蛋白鈉、酪蛋白鈉鈣、酪蛋 白鈣)及任何彼等之組合。
在一實施例中，該蛋白質係以完整蛋白質提供。在其他實施例中，該蛋白質係以完整蛋白質及部分水解蛋白質兩者來提供，水解程度介於約4%至10%。在又進一步之實施例中，該蛋白質包含大量經水解之蛋白質，水解程度大於15%，甚至大於50%，且甚至高至90%或更高。在又另一實施態樣中，該蛋白質來源可以含麩醯胺酸胜肽補充。
在本揭露之一特別實施例中，該蛋白質來源包含乳清及酪蛋白，且乳清與酪蛋白比例與人乳中的乳清與酪蛋白比例類似。舉例而言，在某些實施例中，乳清與酪蛋白的重量比為約20%乳清：80%酪蛋白至約80%乳清：20%酪蛋白。
在某些實施例中，該第一組成物和/或該第三組成物可分類為嬰兒配方。術語「嬰兒配方」係指為人乳取代物、呈液體或粉末形式、能滿足嬰兒營養分需求的組成物。在美國，嬰兒配方乳含量規定於美國聯邦法規第21章第100、106及107部份。這些法規界定巨量營養素、維生素、礦物質及其他成分量以模擬人乳的營養及其他性質。在另一實施例中，該第一組成物和/或該第三組成物可為人乳強化營養品，意指其為加至人乳中以加強人乳營養價值之組成物。作為人乳強化營養品，該第三組成物可為粉末形式或液體形式。在又另一實施例中，該揭露之第一組成物和/或該第三組成物可為孩童營養組成物。
該第一組成物可使用熟習技術領域者熟知的配備及方法予以130℃的溫度處理。較佳的是，該第一組成物係予以約130℃至約150℃的溫度處理至少約1秒的時間期間。更佳的是，該第一組成物係予以約130℃至約150℃的溫度處理至少約3秒至約30秒的時間期間。
該包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的第一組成物係與包含熱不穩定性乳蛋白的第二組成物組合。
如本文中所用，「熱不穩定性乳蛋白」這種蛋白質是1)天然存在於至少一種哺乳動物乳汁中(即具有實質上與天然存在於至少一種哺乳動物乳汁中的蛋白質相同之胺基酸序列的蛋白質)或天然存在於至少一種哺乳動物乳汁中的蛋白質之胺基酸變異型的蛋白質；以及2)當予以例如高於80℃、或在某些情況中為至少約130℃的溫度之高溫處理時，其生物活性喪失或降低。較佳的是，該熱不穩定性乳蛋白係天然存在於至少一種哺乳動物乳汁。舉例而言，此種蛋白質可自至少一種哺乳動物的乳汁所分離或藉由基改生物所產生。在另一實施例中，該熱不穩定性乳蛋白係天然存在於至少一種哺乳動物乳汁中的蛋白質之胺基酸變異型，該胺基酸變異型係藉由例如自天然存在於至少一種哺乳動物乳汁中的蛋白質的胺基酸序列移除、取代一或多個胺基酸或將一或多個胺基酸加至天然存在於至少一種哺乳動物乳汁中的蛋白質的胺基酸序列來製備。供用於本揭露中的熱不穩定性乳蛋白包括但不限於乳鐵蛋白、乳黏附素、乳過氧化酶、乳鐵蛋白素、TGF-β、溶菌酶及 免疫球蛋白。較佳的是，該熱不穩定性乳蛋白係乳鐵蛋白、乳黏附素和/或乳過氧化酶。特別較佳的是該熱不穩定性乳蛋白係乳鐵蛋白。
乳鐵蛋白為約80 kD的單鏈多肽，取決於物種而含有1-4個聚醣。不同物種的乳鐵蛋白3-D結構均非常相似，但並非完全相同。各乳鐵蛋白包含二個同型葉狀結構，稱之為N-葉及C-葉，係分別指分子N端及C端。各葉狀結構進一步由二個次葉或結構域組成，其形成裂隙，其中該鐵離子(Fe3+)係與(二)碳酸鹽陰離子協同合作而緊密結合。這些結構域係分別稱為N1、N2、C1及C2。乳鐵蛋白的N端具有強陽離子胜肽區域，其負責許多重要結合特性。乳鐵蛋白具有非常高的等電點(~pI 9)且其陽離子本質在其防禦細菌、病毒及真菌病原體的能力中扮演主要角色。於乳鐵蛋白N端區域內有數群陽離子胺基酸殘基調介乳鐵蛋白抗各類微生物的生物活性。舉例而言，人類乳鐵蛋白的N端殘基1-47(牛乳鐵蛋白為1-48)對乳鐵蛋白的鐵非依賴性生物活性係為關鍵。在人類乳鐵蛋白中，在N端中的殘基2至5(RRRR)及28至31(RKVR)為富含精胺酸陽離子結構域，對乳鐵蛋白的抗微生物活性特別重要。在牛乳鐵蛋白中亦發現相似N端區域(殘基17至42；FKCRRWQWRMKKLGAPSITCVRRAFA)。
如在「Perspectives on Interactions Between Lactoferrin and Bacteria」中所述(該文出現在 BIOCHEMISTRY AND CELL BIOLOGY,pp 275-281(2006)刊物中)，來自不同宿主物種的乳鐵蛋白雖然通常具有相對高等電點，在內葉末端區域帶有正電胺基酸，但胺基酸序列不同。適合用於本揭露之乳鐵蛋白包括具有與HLf(349-364)片段的胺基酸序列AVGEQELRKCNQWSGL至少48%同源性。在一些實施例中，該乳鐵蛋白具有與HLf(349-364)片段的胺基酸序列AVGEQELRKCNQWSGL至少65%同源性，且在實施例中，為至少75%同源性。舉例而言，用於本揭露之非人乳鐵蛋白包括而不限於牛乳鐵蛋白、豬乳鐵蛋白、馬乳鐵蛋白、水牛乳鐵蛋白、山羊乳鐵蛋白、鼠類乳鐵蛋白及駱駝乳鐵蛋白。
在一較佳實施例中，該乳鐵蛋白係由非人來源所製造的乳鐵蛋白。如本文中所用，「由非人來源生產之乳鐵蛋白」意指藉由人乳以外的來源製造或獲得之乳鐵蛋白。舉例而言，在某些實施例中，該乳鐵蛋白係基改生物製造的人乳鐵蛋白和/或非人乳鐵蛋白。術語「生物體」如本文中所用，指任何持續之生命系統，例如動物、植物、真菌或微生物。如本文中所用，術語「非人乳鐵蛋白」指具有與人乳鐵蛋白胺基酸序列不同的胺基酸序列之乳鐵蛋白。亦較佳的是該乳鐵蛋白並無水解。在一實施例中，該乳鐵蛋白係牛乳鐵蛋白。在某些實施例中，該乳鐵蛋白係提供作為分離物，而在其他者係作為富含乳清部分的組分。
在美國專利第4,791,193號(其係以引用方式全部併入本案)中，Okonogi等人揭露用於製造高純度牛乳鐵蛋 白的方法。通常，該方法如揭露者，包括三個步驟。首先生乳原料與弱酸性陽離子交換劑接觸以吸附乳鐵蛋白，接以第二步驟，在此步驟進行沖洗以移除未吸附物質。接著去吸附步驟，此時乳鐵蛋白被移走，以產生經純化之牛乳鐵蛋白。其他方法可包括如美國專利第7,368,141、5,849,885、5,919,913及5,861,491號中所述步驟，該等揭露均以引用方式全部併入本案。
在某些實施例中，該熱不穩定性乳蛋白在與該第一組成物組合前已經過滅菌(未施以超過80℃的溫度)。在一個實施例中，該第二組成物已經由一或多個過濾器過濾，較佳為在與該第一組成物組合前過濾器本身已經過滅菌。
可以理解的是，在某些實施例中，予以至少約130℃的溫度處理之第一組成物本身含有熱不穩定性乳蛋白。舉例而言，若此熱不穩定性乳蛋白的生物活性並非關鍵，則可能如此。因此，在某些實施例中，包括脂肪或脂質來源、蛋白質來源及熱不穩定性乳蛋白的第一組成物予以至少約130℃，並與包括熱不穩定性乳蛋白、較佳為與第一組成物中存在的熱不穩定性乳蛋白相異的熱不穩定性乳蛋白之第二組成物組合，其中該第二組成物未予以大於約80℃的溫度處理。
組合該第一及第二組成物的步驟可藉由熟習本技術領域者熟知的方法達成。更特定言之，在某些實施例中，該第一及第二組成物的組合可藉由無菌添加(aseptic dosing )達成，且可以連續法或分批法進行。舉例而言，在一實施例中，該第二組成物為水性溶液，更佳為包含已處理(例如藉由逆滲透)以供食品加工用的水之水性溶液。接著將該溶液加至較佳為液體形式之第一組成物。在一特定較佳實施例中，該第一組成物為液體組成物形式，且該第二組成物係已經過滅菌之液體的形式，並將該第一組成物添加該第二組成物流。
在另一較佳實施例中，製備包含熱不穩定性乳蛋白之組成物的方法包括：a)將包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的液體營養組成物予以至少約130℃的溫度處理；b)製備包括熱不穩定性乳蛋白的溶液；c)將該溶液予以滅菌；以及d)將該液體營養組成物與該溶液組合。
在又另一較佳實施例中，包括乳鐵蛋白的該第三組成物係藉由包括下列之方法製備：a)將包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的液體營養組成物予以至少約130℃的溫度處理，以形成第一組成物；b)製備包括乳鐵蛋白的溶液，乳鐵蛋白濃度為至少1%；在一些實施例中，該乳鐵蛋白濃度係約1%至約30%，且在其他實施例中，該乳鐵蛋白濃度為約1%至約20%，以形成第二組成物；c)將該第二組成物在不大於80℃的溫度予以滅菌；以及d)將該第一組成物與該第二組成物組合以形成第三組成物。在一實施例中，該方法包括製備溶液包含1-20%乳鐵蛋白及已處理(例如藉由逆滲透)以供食品加工用之水。亦較佳的是將該第二組成物予以滅菌步驟包括在低於約60℃的 溫度將該第二組成物經一或多個過濾器過濾(較佳為過濾器本身已經予以滅菌)，且較佳為約4℃至約60℃。在一實施例中，該第二組成物的pH當為溶液時，係約2至7。在一些實施例中，將該液體營養組成物(即該第一組成物)與該乳鐵蛋白溶液(即該第二組成物)組合以形成該第三組成物的步驟包括將該液體營養組成物添加該乳鐵蛋白溶液流。
在一實施例中，包括乳鐵蛋白、與第一組成物組合的該第二組成物量係經選擇，而使乳鐵蛋白存在於該第三組成物中的量為約0.1 g/L至約2 g/L。在另一實施例中，包括乳鐵蛋白、與第一組成物組合的該第二組成物量係經選擇，而使乳鐵蛋白存在於該第三組成物中的量為至少約10 mg/100 kCal，特別是當希望該營養組成物係供孩童之用。在某些實施例中，乳鐵蛋白於該第三組成物中的上限為約300 mg/100 kCal。在另一實施例中，其中該第三組成物係嬰兒配方，乳鐵蛋白存在於該第三組成物中的量為約70 mg至約220 mg/100 kCal；在又另一實施例中，乳鐵蛋白存在於該第三組成物中的量為約90 mg至約190 mg/100 kCal。
在組合該第一及第二組成物後，可隨該第三組成物進行額外加工步驟，唯任何此種額外加工步驟不會導致該第三組成物中任何完整熱不穩定性蛋白質不活化或變性。舉例而言，在一較佳實施例中，該第三組成物在組合該第一及第二組成物步驟後立即無菌包裝，或在一或多個額外步 驟後無菌包裝。在另一實施例中，在組合該第一及第二組成物步驟後立即無菌包裝，或在一或多個額外步驟後無菌包裝，該第三組成物係與包裝組合，該包裝已經過滅菌且於滅菌條件下密封，例如介於約4℃至約30℃之間的溫度。於再另一實施例中，於組合該第一及第二組成物後，該第三組成物例如經由冷凍乾燥縮至粉末形式。該粉末接著可於投服人類前例如藉由將該粉末加入乳或水配製成液體形式。
該第三組成物藉由本文揭露方法所製造之第三組成物可提供最小、部分或完整營養支持。該組成物可為營養補充品或代餐。在一些實施例中，該組成物可連同食物或另一營養組成物投予。在此實施例中，該組成物可於個體攝取前與食物或其他營養組成物互混，或可於個體攝取食物或營養組成物之前或之後投予該個體。在某些實施例中，該第三組成物係投予嬰兒或孩童。「孩童」係定義為年齡超過12個月至約12歲的人。術語「嬰兒」通常係定義為出生至12個月大的人。在某些實施例中，該組成物可投服至接受嬰兒配方、人乳、人乳強化營養品或其組合之早產嬰兒。「早產嬰兒」係為妊娠少於約37週後出生的嬰兒，而「足月嬰兒」意指妊娠至少約37週後出生之嬰兒。
該第三組成物可以但不必要為嬰兒配方，且可為營養完整。熟習本技術人士將理解「營養完整」取決於許多因素而有不同，包括但不限於該術語所套用之個體年齡、臨 床條件及膳食攝入。一般而言，「營養完整」意指本揭露之組成物提供所有正常生長所需的適量之碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。若在指涉營養素，術語「必需」係指任何身體無法合成足以供正常生長以及維持健康而因此必須藉由膳食供應的營養素。術語「有條件之必需」若在指涉營養素，則意指該營養素在當身體無法取得適量前驅化合物以供進行內生性合成的條件下必須藉由膳食供應。
針對早產嬰兒，該「營養完整」之組成物依定義為提供該早產嬰兒所有生長所需的質量上適量之碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。針對足月嬰兒，該「營養完整」之組成物依定義為提供該足月嬰兒所有生長所需的質量上適量之碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。針對孩童，該「營養完整」之組成物依定義為提供該孩童所有生長所需的質量上適量之碳水化合物、脂質、必需脂肪酸、蛋白質、必需胺基酸、條件性必需胺基酸、維生素、礦物質及能量。
該第三組成物可用任何本技術領域中已知形式提供，包括粉末、凝膠、懸浮液、糊劑、固體、液體、液體濃縮物或現成品。在一較佳實施例中，該第三組成物係嬰兒配方，特別適於用作為嬰兒唯一來源營養的嬰兒配方。
在該較佳實施例中，該第三組成物可腸道投予。如本文所用，「腸道」意指透過胃腸道或消化道或於胃腸道或消化道內，且「腸道投予」包括口服餵食、胃內餵食、鼻腸管投服(transpyloric administration)或任何其他導入消化道。
較佳的是，根據本揭露製備之第三組成物包括一或多種益菌生、一或多種益生菌和/或一或多種長鏈多不飽和脂肪酸來源。如本文中所用，術語「益生菌」意指對宿主健康具有正面作用的低致病性或不具致病性微生物，而術語「益菌生」意指藉由選擇性刺激結腸中可改善宿主健康的一種或少數種細菌生長和/或活性來正面影響宿主的非可消化性食物成分。
將一或多種益菌生、一或多種益生菌和/或一或多種長鏈多不飽和脂肪酸(LCPUFA)來源包括於根據本揭露之組成物中可藉由數種方法達成。舉例而言，在一實施例中，例如該益菌生和/或該長鏈多不飽和脂肪酸的一或多種這些組分，在將該第一組成物予以至少約130℃的溫度處理前係包括在該組成物中。在又另一實施例中，例如該益菌生和/或該長鏈多不飽和脂肪酸的一或多種這些組分於予以至少約130℃的溫度處理後但與該第二組成物組合前係存在於該第一組成物中。在其他實施例中，任何包括之益生菌係例如於無菌加工期間加至該第三組成物。較佳的是，若期望包括在經此種溫度條件時失去其活性的益菌生、益生菌和/或長鏈多不飽和脂肪酸來源，則其包括於 該第三組成物或該第二組成物中，或在該第一組成物已經過至少約130℃的溫度處理後加入。
如所述，在一實施例中，可依本揭露包括一或多種益生菌。只要能達到預期結果，在此實施態樣中，任何本技術領域已知的益生菌均可接受。在一特定實施例中，該益生菌可選自乳酸桿菌(Lactobacillus)菌種、鼠李醣乳酸桿菌(Lactobacillus rhamnosus GG)、雙叉桿菌(Bifidobacterium)菌種、短雙叉桿菌(Bifidobacterium brevis)、龍根雙叉桿菌(Bifidobacterium longum)及動物雙叉桿菌(Bifidobacterium animalis subsp.lactis BB-12)。
若有包括，則該第三組成物中的益生菌量可為每日每kg體重約104至約1010菌落形成單位(cfu)。在另一實施態樣中，該益生菌量可為每日每kg體重約106至約109cfu。在又另一實施態樣中，該益生菌量可為每日每kg體重至少約106 cfu。又，該揭露之組成物亦可包括益生菌態(probiotic-conditioned)介質組分。
在一實施例中，一或多種益生菌係活菌。在另一實施例中，一或多種益生菌係非活菌。如本文中所用，術語「活菌」係指活的微生物。術語「非活菌」或「非活益生菌」意指非活的益生菌微生物、它們的細胞組成和其代謝物。此等非活益生菌可為經過熱殺死或其他不活化、但仍留存對宿主健康有利影響能力。在本揭露中，可用的益生菌可為天然存在、合成或透過遺傳操作生物體所開發，而不 論此種新來源為現今已知或之後所開發者。若使用活益生菌，較佳的是該益生菌係包括於該第二組成物或於該第三組成物中。
一或多種益菌生亦可用於根據本揭露之組成物。此種益菌生可為天然存在、合成或透過遺傳操作生物體和/或植物所開發，而不論此種新來源為現今已知或之後所開發者。在某些實施例中，包括於本揭露的組成物之益菌生包括美國專利第7,572,474號所教示，該案之揭露係以引用方式併入本案。可用於本揭露之益菌生可包括寡醣、多醣及其他含有果糖、木糖、大豆、半乳糖、葡萄糖及甘露糖之益菌生。更具體而言，可用於本揭露之益菌生可包括乳果糖、乳果寡醣(lactosucrose)、棉子糖、葡萄糖寡醣、菊糖、聚右旋糖、聚右旋糖粉末、半乳糖寡醣、果糖寡醣、異麥芽糖寡醣、大豆寡醣、乳果寡醣、木糖寡醣、幾丁寡醣(chito-oligosaccharide)、甘露糖寡醣、阿拉伯糖寡醣、唾液酸寡醣、海藻糖寡醣、及龍膽寡醣(gentio-oligosaccharide)。較佳的是，該益菌生係聚右旋糖和/或半乳糖寡醣。隨意地，除了聚右旋糖和/或半乳糖寡醣，根據本揭露用於一或多種額外益菌生。
在一實施例中，係包括該益菌生而使存在於該第三組成物中的益菌生總量係約0.1 g/100 kcal至約1 g/100 kcal。更佳的是，存在於該第三組成物中的益菌生總量可為約0.3 g/100 kcal至約0.7 g/100 kcal。該益菌生至少20%應包含半乳糖寡醣(GOS)和/或聚右旋糖(PDX)。
在一實施例中，若使用聚右旋糖，則該第三組成物中的聚右旋糖量範圍可為約0.1 g/100 kcal至約1 g/100 kcal的範圍內。在另一實施例中，該第三組成物中的聚右旋糖量可為約0.2 g/100 kcal至約0.6 g/100 kcal的範圍內。
在一實施例中，若使用半乳糖寡醣，則該第三組成物中的半乳糖寡醣量範圍可為約0.1 g/100 kcal至約1 g/100 kcal。在另一實施例中，該第三組成物中的半乳糖寡醣量可為約0.2 g/100 kcal至約0.5 g/100 kcal的範圍內。在某些實施例中，該第三組成物中的聚右旋糖與半乳糖寡醣比例係介於約9：1至約1：9。
根據本揭露，亦可使用一或多種長鏈多不飽和脂肪酸來源。較佳的是，LCPUFA的來源包含二十二碳六烯酸(DHA)。其他適合的LCPUFA包括但不限於α-亞麻油酸、γ-亞麻油酸、亞麻油酸、次亞麻油酸、二十碳五烯酸(EPA)及花生四烯酸(ARA)。
在一實施例中，該第一組成物係以DHA及ARA兩者補充。在此實施例中，ARA：DHA重量比例可為約1：3至約9：1。在本揭露的一實施例中，ARA：DHA重量比例係約1：2至約4：1。
該第三組成物中的長鏈多不飽和脂肪酸量可為約5 mg/100 kcal至約100 mg/100 kcal，更佳為約10 mg/100 kcal至約50 mg/100 kcal。
該組成物可使用本技術領域中已知的標準技術補充含 有DHA及ARA的油脂。舉例而言，DHA及ARA可藉由取代等量之通常存在於組成物中的油脂(例如高油酸葵花子油)來加至該組成物。作為另一實例，含有DHA及ARA的油脂可藉由取代等量之通常存在於未有DHA及ARA組成物中的其餘整體脂肪摻合物來加至該組成物。
若有使用，則DHA及ARA來源可為本技術領域中任何已知來源，例如水產油脂、魚油、單細胞油脂、蛋黃脂質及腦部脂質。在一些實施例中，該DHA及ARA係分別源自單細胞Martek油脂、DHASCO®及ARASCO®或彼等之變化物。該DHA及ARA可為天然形式，惟該LCPUFA來源之剩餘物不會造成對個體任何實質有害影響。或者，該DHA及ARA可以精製形式使用。
在本揭露的一實施例中，DHA及ARA來源係如美國專利第5,374,567、5,550,156及5,397,591號中所教示之單細胞油脂，該等專利所揭露者係以引用方式全部併入本案。然而，本揭露不只限於此種油脂。
在一特定實施例中，根據本揭露，TGF-β是其中一種存在之熱不穩定性蛋白質。TGF-β可以其非活化形式存在於用於此處的蛋白質來源中。非活化形式之TGF-β接著於人的腸道中藉由酵素、極端pH活化和/或分裂來活化。在一特定實施例中，本揭露之組成物提升TGF-β在人腸道中的生體可用率或生物活性。這可包括提升TGF-β在人體中的訊息傳遞。在一實施例中，本揭露的組成物可提升TGF-β在人腸道中的生物活性至少約5%，更有利的是提 升至少約15%，或甚至是至少約25%或更高，達至約65%。
在本揭露的一特定實施例中，該第三組成物包括約0.0150(pg/μg)ppm至約0.1000(pg/μg)ppm的TGF-β。在另一實施例中，在該第三組成物中的TGF-β量係約0.0225(pg/μg)ppm至約0.0750(pg/μg)ppm。
在本揭露的一特定實施例中，該揭露之第三組成物的TGF-β量係約500 pg/mL至約10,000 pg/mL組成物，更佳為約3000 pg/mL至約8000 pg/mL。
在一實施例中，在該第三組成物中的TGF-β1：TGF-β2比例係在約1：1至約1：20的範圍，或更特定言之，係在約1：5至約1：15的範圍。
在一些實施例中，該組成物中之TGF-β生物活性係藉由加入生物活性乳清部分(bioactive whey fraction)來提升。若生物活性乳清部分達成所欲結果，則任何本技術領域中已知的生物活性乳清部分可用於此實施例中。在一實施例中，此生物活性乳清部分可為乳清蛋白濃縮物。在一特定實施例中，該乳清蛋白濃縮物可為Salibra®800，其可購自Glanbia Nutritionals。在一特定實施例中，該Salibra®800乳清蛋白濃縮物係2.5%酸化。在另一實施例中，該Salibra® 800乳清蛋白濃縮物係5%酸化。在又另一實施例中，該Salibra®800乳清蛋白濃縮物係2%酸化。 在進一步之實施例中，該Salibra®800乳清蛋白濃縮物係3%酸化。
在另一實施例中，該乳清蛋白濃縮物可為Nutri Whey 800，其可購自DMV International。在又另一實施例中，該乳清蛋白濃縮物可為Salibra-850，其可購自Glanbia Nutritionals。於再另一實施例中，該乳清蛋白濃縮物可為Prolacta Lacatalis WPI90，其可購自Lactilus Industrie U.S.A.,Inc.。在進一步之實施例中，該乳清蛋白濃縮物可供自MG Nutritionals。
實例
下列實例係提供以說明本揭露之營養組成物實施例，但不應解讀為對其之任何限制。熟悉本技術領域者於考量本文所揭露營養組成物或方法的說明書或實施，將清楚明白本文中之申請專利範圍範疇內的其他實施例。本說明書連同本實例僅欲視為例示，本揭露的範圍及精神係由接續於實例之後的申請專利範圍所指定。
實例1
此實例說明可用於製備根據本揭露的營養產品之成分 的一實施例。
實例2
此實例說明可用於製備根據本揭露的營養產品之成分的另一實施例。
將來自實例1及2、含有上述組分(乳鐵蛋白除外)之營養組成物製備成液體形式，且予以約135℃至約145℃的溫度處理共約3秒至約30秒的時間期間。以逆滲透水製備1-30%的乳鐵蛋白溶液，且以經滅菌之過濾器過濾，以產生經滅菌乳鐵蛋白溶液。藉由將該該液體營養組成物添加以乳鐵蛋白溶液流，與乳鐵蛋白溶液組合。將得到之組成物無菌包裝。
現參照圖式，根據本揭露之方法的一實施例流程圖以元件符號10表示。在該方法中，製備營養組成物100。營養組成物100可包括各種熱穩定性成分，和一或多種熱不穩定性蛋白質。在加工步驟20中，營養組成物100暴露於至少130℃的溫度，以形成無菌的第一組成物120；在營養組成物100中之任何熱不穩定性蛋白質可在第一組成物120中不活化或變性。
接續流程圖10中所示方法，製備含有一或多種熱不穩定性蛋白質溶液200，並予以加工步驟30的處理，該加工步驟可包括過濾，但不包括將溶液200暴露於大於80℃的溫度，以形成無菌的第二組成物220；在第二組成物220中的熱不穩定性蛋白質係未變性或去活性者。
接著，在加工步驟40中組合第一組成物120及第二組成物220，以形成第三組成物300，其含有來自第二組成物220的完整熱不穩定性蛋白質。接著，於加工步驟50中將第三組成物300無菌加工及包裝，以提供無菌經包裝之組成物320。
所有本說明書中所引用之參考文獻、包括但不限於所有論文、刊物、專利、專利申請、發表、文字、報導、文稿、小冊、書籍、網路文章、期刊文章、定期性刊物等等，在此係以引用方式將它們全部併入本說明書。本文中之參考資料的討論僅欲用於總結其作者之主張，並不作為承認任何參考資料構成先前技術。申請人保留挑戰引用之參考文獻之準確性和針對性的權利。
雖然已使用特定術語、裝置及方法說明本揭露之較佳實施例，但此說明僅為描述目的。所使用文字為說明文字而非限制性文字。應了解，本技術領域中具有通常知識者在未悖離於下列申請專利範圍所主張的本揭露之精神及範疇下，可進行更改及變動。此外，應了解，各種實施例可全部或部分相互取代。舉例而言，雖然已例示用於製造依據該些方法所製成的市售無菌液體營養補充物的方法，但其他使用亦被涵蓋。因此，後附申請專利範圍之精神及範疇不應受限於本說明中所含的較佳態樣。
10‧‧‧流程圖
100‧‧‧營養組成物
120‧‧‧第一組成物
20‧‧‧加工步驟
200‧‧‧溶液
220‧‧‧第二組成物
30‧‧‧加工步驟
300‧‧‧第三組成物
320‧‧‧無菌經包裝之組成物
40‧‧‧加工步驟
50‧‧‧加工步驟
圖1係例示根據本揭露之一實施例的流程圖。

Claims (16)

  1. 一種用於製備包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白的組成物之方法，其包含依以下順序進行的下列步驟：a)提供包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的第一組成物，並將該第一組成物予以至少約130℃的溫度處理；b)提供包含熱不穩定性乳蛋白的第二組成物，並將該第二組成物在不大於80℃的溫度予以滅菌，其中該滅菌進一步包括該第二組成物在該第一組成物與該第二組成物組合之前經一或多個過濾器過濾；以及c)將該第一組成物與包含熱不穩定性乳蛋白之該第二組成物組合，以形成包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白之第三組成物，其中該第二組成物及該第三組成物不予以高於約80℃的溫度處理。
  2. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該第二組成物係水性溶液，其包含已處理以供食品加工用之水。
  3. 如申請專利範圍第2項之方法，其中該水係經逆滲透處理。
  4. 如申請專利範圍第1項之方法，其進一步包含將該第三組成物無菌包裝之步驟。
  5. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該熱不穩定性乳蛋白係選自由乳鐵蛋白、乳鐵蛋白素(lactoferricin)、TGF-β、乳過氧化酶、乳黏附素(lactadherin)及其組合所組成的群組。
  6. 如申請專利範圍第5項之方法，其中乳鐵蛋白係以至少10mg/100kCal的量存在於該第三組成物中。
  7. 如申請專利範圍第1項之方法，其中乳鐵蛋白係以70mg/100kCal至220mg/100kCal的量存在於該第三組成物中。
  8. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該脂肪或脂質來源係以約3g/100kcal至約7g/100kcal的量存在於該第一組成物中。
  9. 如申請專利範圍第1項之方法，其中該蛋白質來源係以約1g/100kcal至約5g/100kcal的量存在於該第一組成物中。
  10. 一種包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白的組成物，其係以下列方法製備：a)將包含脂肪或脂質來源及蛋白質來源的第一組成物予以至少約130℃的溫度處理；以及b)將該第一組成物與包含熱不穩定性乳蛋白之第二組成物組合，以形成包含脂肪或脂質來源、蛋白質來源以及熱不穩定性乳蛋白之第三組成物，其中該第二組成物及該第三組成物不予以高於約80℃的溫度處理，以及，其中該第二組成物已在不大於80℃的溫度予以滅菌，其中該滅菌進一步包括該第二組成物在該第一組成物與該第二組成物組合之前經一或多個過濾器過濾。
  11. 如申請專利範圍第10項之組成物，其中該熱不穩定性乳蛋白係選自由乳鐵蛋白、乳鐵蛋白素、TGF-β、乳過氧化酶、乳黏附素及其組合所組成的群組。
  12. 如申請專利範圍第11項之組成物，其中該熱不穩定性乳蛋白係乳鐵蛋白。
  13. 如申請專利範圍第12項之組成物，其中該乳鐵蛋白係選自由非人類乳鐵蛋白、藉由基改生物所製造之人類乳鐵蛋白及其組合所組成的群組。
  14. 如申請專利範圍第10項之組成物，其中該第三組成物係嬰兒配方。
  15. 如申請專利範圍第10項之組成物，其中該脂肪或脂質來源係以約3g/100kcal至約7g/100kcal的量存在於該第一組成物中。
  16. 如申請專利範圍第10項之組成物，其中該蛋白質來源係以約1g/100kcal至約5g/100kcal的量存在於該第一組成物中。
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