TWI616210B - 經修飾微氣泡及其製備方法 - Google Patents

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Abstract

本發明提供一種經修飾微氣泡，包含白蛋白微氣泡及複數個幾丁寡糖乳酸。白蛋白微氣泡包含白蛋白殼層及位於白蛋白殼層內之氣體核心，而複數個幾丁寡糖乳酸連接於白蛋白殼層之外側表面上。

Description

經修飾微氣泡及其製備方法
本發明是有關於一種經修飾微氣泡。
落髮現象普遍影響了各齡層之男性及女性，且其影響隨著年齡增加而提高。其中，雄性禿(AGA)為最常見的掉髮型態，其成因來自於遺傳上對雄性激素敏感的毛囊。在這些敏感毛囊中，二氫睪固酮(DHT)會結合雄性激素受體，而此激素-受體複合體會活化特定基因，使得較大之末端毛囊轉變為較小型毛囊。
欲治療落髮，米諾地爾(Minoxidil，簡稱Mx，商品名落建Rogaine)係目前唯一被美國食品藥物管理局(FDA)認可、男性及女性皆適用之治療用藥，可減少患者落髮並促進毛髮生長。然而，米諾地爾須持續使用才能在長期展現療效。此外，部分患者抱怨使用後會有頭皮搔癢或發炎現象，其主因在於所使用之溶劑－丙二醇，而非米諾地爾。雖有其他可能之候選有機溶劑如丁二醇、聚山梨酯、或甘油，但並不保證這些有機溶劑不會引起副作用。
有鑑於此，目前需要一種米諾地爾的新劑型，可使米諾地爾在目標區域進行緩釋，並經皮穿透而深入毛囊，以縮短生髮療程；同時此新劑型不採用有機溶劑，以降低免疫原性及發炎反應。
本發明係提供一種經修飾微氣泡，其包含白蛋白微氣泡及複數個幾丁寡糖乳酸。白蛋白微氣泡包含白蛋白殼層及位於白蛋白殼層內之氣體核心，而複數個幾丁寡糖乳酸連接於白蛋白殼層之外側表面上。
在本發明之一實施例中，經修飾微氣泡更包含藥物，連接幾丁寡糖乳酸，以形成攜藥經修飾微氣泡。
在本發明之一實施方式中，藥物具有負電荷。
在本發明之一實施方式中，藥物為米諾地爾。本發明係提供一種經修飾微氣泡，其可連接如米諾地爾等藥物，並透過超音波處理而緩釋藥物，使藥物經皮穿透而被目標組織吸收，以達到縮短療程之功效。
在本發明之一實施方式中，經修飾微氣泡的直徑為4,000-4,400 nm。
在本發明之一實施方式中，經修飾微氣泡之製備方法包含：提供白蛋白微氣泡，以及於0-10o C環境中連接複數個幾丁寡糖乳酸至白蛋白微氣泡，以形成經修飾微氣泡。
在本發明之一實施方式中，於0-10o C環境中連接複數個幾丁寡糖乳酸至白蛋白微氣泡步驟包含加入含有複數個幾丁寡糖乳酸的第一溶液至白蛋白微氣泡，而複數個幾丁寡糖乳酸於第一溶液中之濃度為1-5 mg/ml。
在本發明之一實施方式中，經修飾微氣泡之製備方法更包含於0-10o C環境中連接米諾地爾至經修飾微氣泡，以形成攜藥經修飾微氣泡。
在本發明之一實施方式中，於0-10o C環境中連接米諾地爾至經修飾微氣泡步驟包含加入含有米諾地爾之第二溶液至經修飾微氣泡以形成含有攜藥經修飾微氣泡之第三溶液，而米諾地爾於第二溶液中之濃度為1-5mg/ml，第一溶液與第二溶液之體積比為1:1-3:1，且攜藥經修飾微氣泡之米諾地爾於第三溶液中之濃度為0.1-0.5 mg/ml。
在本發明之一實施方式中，經修飾微氣泡之製備方法更包含將第三溶液之pH值調整為4-6。
為了使本揭示內容的敘述更加詳盡與完備，下文將參照附隨圖式來描述本發明之實施態樣與具體實施例；但這並非實施或運用本發明實施例的唯一形式，且可在有益的情形下相互組合或取代；亦可在一實施例中附加其他的實施例，而無須進一步的記載或說明，並可在無此等特定細節之情況下實踐本發明之實施例。另外，單數形式的「一」及「該」包含複數形式，除非內容有明確表示不包含複數形式。
本發明係提供一種經修飾微氣泡，其可連接諸如米諾地爾等藥物，並可作為超音波對比劑，透過超音波處理而緩釋米諾地爾，使米諾地爾在到達目標組織後因超音波處理而持續釋放，並經皮穿透而深入毛囊，以達到縮短生髮療程、降低免疫原性及發炎反應之功效。
請參閱第1圖，其係顯示本發明多個實施例之經修飾微氣泡之剖面圖。如第1圖所示，本發明之經修飾微氣泡10包含一白蛋白(albumin)微氣泡(microbubble，MB) 100及複數個幾丁寡糖乳酸(chitosan oligosaccharide lactate，COL) 200。白蛋白微氣泡100包含蛋白殼層110以及位於該白蛋白殼層110內之氣體核心120。在多個實施例中，幾丁寡糖乳酸(COL) 200係連接於白蛋白殼層110之外側表面上。在一些實施例中，氣體核心120包含水難溶性氣體，如全氟化丙烷(C3 F8 ) 或六氟化硫(SF6 )。
由於白蛋白帶有負電荷，因此白蛋白殼層110之表面電位小於零，而可吸引帶有正電荷之分子。幾丁寡醣乳酸(COL) 200具有許多胺基(-NH2 )，在酸性溶液中會吸附氫離子而成為-NH3 + ，使COL 200帶有正電荷。因此帶有負電荷之白蛋白殼層110可藉由電性吸引之方式連接COL 200，使COL 200分布於白蛋白殼層110外側表面，形成經COL 200修飾之經修飾微氣泡(COL-MB)10。
接著參閱第2圖，其係顯示本發明多個實施例之攜藥經修飾微氣泡的剖面圖。在一些實施例中，帶有正電荷之COL 200上可再連結一帶有負電荷之藥物 300。在多個實施例中，米諾地爾(Mx)具有帶負電之氧原子，容易受到COL 200的-NH3 + 所吸引，而吸附至COL 200上。因此如第2圖所示，COL-MB 10上之COL 200可再連結藥物300(如Mx)，而形成攜藥經修飾微氣泡(Mx-COL-MB) 20。值得注意的是，由於MB 100及Mx 300皆帶有負電荷，因此MB 100無法直接吸附Mx 300，而係透過帶有正電荷之COL 200與Mx 300進行連接，使攜藥經修飾微氣泡(Mx-COL-MB) 20趨於電中性。
相較傳統攜帶藥物之微氣泡係注射式而須將藥物進行包覆以避免藥物注射入血液後被分解，本發明之攜藥經修飾微氣泡20係外用式，故藥物300不需被包覆，僅需吸附於經修飾微氣泡10之外側表面，在接觸皮膚表面並受到超音波刺激後，即可使藥物300被釋放而經皮穿透。
請參閱第3圖，係顯示本發明多個實施例之製備經修飾微氣泡之流程圖。在步驟402中，經修飾微氣泡10之製備方法包含提供白蛋白微氣泡(MB) 100。在多個實施例中，將滅菌過之10-30%人類血清白蛋白(HSA)溶液以磷酸緩衝液(PBS)稀釋為1-5% (w/v)的HSA原液。接著，將C3 F8 或SF6 氣體通入5-20 mL的HSA原液中，並以超音波儀進行1-5分鐘、100-300 W的超音波震盪，則白蛋白可形成殼層並包覆C3 F8 或SF6 氣體以組成白蛋白微氣泡(MB) 100。MB 100形成後進行離心，以移除溶液及其中未形成殼層之白蛋白。
接著在步驟404中，複數個幾丁寡糖乳酸(COL)200 係於0-10o C環境中連接至MB 100，以形成經修飾微氣泡(COL-MB) 10。在多個實施例中，COL 200溶於第一溶液，其於第一溶液中之濃度為1-5 mg/ml，且第一溶液可例如為生理食鹽水或PBS。在一些實施例中，步驟404係將含有1-5 mg/mL的COL(分子量約4,000-6,000)之第一溶液1-5mL加入至MB 100中，並以10-200 rpm之速率於0-10o C攪拌20-30小時以形成COL-MB 10。接著進行離心並沖洗數次，以剔除游離的COL 200，使溶液中僅保留COL-MB 10。
接著在步驟406中，米諾地爾(Mx) 300係於0-10o C環境中連接至經修飾微氣泡10，以形成攜藥經修飾微氣泡(Mx-COL-MB) 20。在多個實施例中，步驟406包含加入第二溶液至經修飾微氣泡10，以形成第三溶液。Mx 300溶於第二溶液，其於第二溶液中之濃度為1-5 mg/ml，且第二溶液可例如為生理食鹽水或PBS。在一些實施例中，步驟406係將含有1-5 mg/mL的Mx (分子量209.25)之第二溶液，以相對於第一溶液之不同體積比，諸如1:1、1:2、或1:3，與含有MB-COL 10之溶液進行混合，並以10-200 rpm之速率於0-10o C攪拌20-30小時，以形成含有攜藥經修飾微氣泡(Mx-COL-MB) 20的第三溶液，並進行離心及沖洗數次以剔除游離的 Mx 300。在多個實施例中，攜藥經修飾微氣泡20所吸附之米諾地爾300於第三溶液中之濃度為0.1-0.5 mg/ml。
在步驟408中，將含有Mx-COL-MB 20之第三溶液的pH值調整為4-6。在多個實施例中，pH值之調整係透過滴定方式將氫氧化鈉等鹼類或鹽酸等酸類加入至第三溶液中，以分別提高pH值或降低pH值而達成。或在多個實施例中，第三溶液之pH值被調整至與人類頭皮pH值相近的pH 4.5-5.5。
實例： 以下的實例係用以詳述本發明之特定態樣，並使本發明所屬技術領域中具有通常知識者得以實施本發明。以下的實例不應用以限制本發明。
實驗例 1-6 及比較例 1-2 ： 微氣泡修飾及攜藥前後之表面電位及粒徑變化 參閱第4A圖，其係顯示根據本發明實驗例1-6及比較例1之表面電位圖。表 1
如第4A圖及上表1所示，比較例1係未經修飾微氣泡(MBs)，其表面電位約-3.87 ± 2.78 mV。比較例2 (未顯示於第4A圖)係未經修飾微氣泡與未連接之米諾地爾(MBs+Mx)，其表面電位略升至-0.43 ± 1.01 mV，而Mx吸附率僅2.55 ± 0.15%。
另以定量MB與不同體積比之COL混合，形成攜帶COL含量不同之COL-MB。詳細而言，實驗例1-3之製備方法係將定量MB分別加入含有2mg/ml的COL之不同體積的第一溶液(COL:MB之體積比分別為1:1、2:1、3:1)中，並在約4o C下混合約24小時，而形成COL-MBs (1:1)(實驗例1)、COL-MBs (2:1)(實驗例2)、及COL-MBs (3:1) (實驗例3)。實驗例1-3的表面電位分別為20.23 ± 1.20 mV、24.98 ± 1.10 mV、及25.23 ± 2.60 mV，顯示負電性MB可大量吸附正電性COL，使COL-MB的表面電位大幅增加。
然後，加入含有Mx之第二溶液至含有COL-MB(即實驗例1、2、3)之溶液，以形成含有Mx-COL-MB(即實驗例4、5、6)之第三溶液。詳細而言，實驗例4-6之製備方法係分別在實驗例1-3中加入不同體積之含有2mg/ml的Mx之第二溶液，並在約4o C下混合約24小時。實驗例4-6的第二溶液與第一溶液之體積比分別為1:1、1:2、1:3。如第4A圖及上表1所示，實驗例4之表面電位大幅下降至0.41 ± 1.73 mV，但實驗例5及實驗例6的表面電位僅分別略降至20.54 ± 1.02 mV 及21.10 ± 1.97 mV。這顯示了當Mx:COL之溶液體積比為1:1(如實驗例4)時，COL能吸附最大量之Mx，其Mx吸附率達14.87 ± 0.03%，使其Mx吸附量在第三溶液中之濃度達到約0.3 mg/ml，並使其表面電位的降幅最大且趨於零，近乎電中性而易溶於生理食鹽水(如PBS)中。
參閱第4B圖係顯示根據本發明實驗例1、4及比較例1之粒徑-數量圖。如第4B圖及上表1所示，比較例1之粒徑尺寸為約1550± 270 nm，實驗例1之粒徑範圍介於4,000-4,400 nm，約為4150 ± 170 nm，顯示MB連接COL後粒徑大幅增加。實驗例4之粒徑為約4500 ± 100 nm，顯示Mx連接COL後不致使粒徑大幅增加。
參閱第4C圖，其係顯示根據本發明實驗例1、4及比較例1之電子顯微影像。如第4C圖所示，比較例1之表面因具有許多不規則之白蛋白顆粒而較為粗糙，實驗例1之表面則因連接COL而較為平整，而實驗例4則因連接了Mx而相較之下最為平滑。
實驗例 1’ 、 4’ 、比較例 1’ 、 3 、 4 、 5 ： 修飾及攜藥前後之微氣泡被破壞後吸收光譜變化 微氣泡為超音波對比劑，在受到特定強度及時間之超音波衝擊下，會產生慣性穴蝕效應而被破壞。此測試係將3種被破壞微氣泡－被破壞MB (比較例1’)、被破壞COL-MB (實驗例1’)、被破壞Mx-COL-MB (實驗例4’)，與非微氣泡之比較例－白蛋白(比較例3)、Mx(比較例4)、生理食鹽水(比較例5)進行比較，以探討修飾及攜藥前後之微氣泡被破壞後吸收光譜變化。
參閱第5圖，其係顯示本發明實驗例1’、4’、比較例1’、3、4、5之吸收光譜圖。如第5圖所示，相較於比較例3及比較例4具有特定吸收峰，比較例1’及實驗例1’皆不會吸收特定波長之光線，與比較例5相同。然而，實驗例4’卻會吸收波長230 nm、261 nm、及285 nm之光線，與比較例4所吸收的光線波段相同，顯示被破壞之Mx-COL-MB會釋出Mx。
實驗例 7-10 ： Mx-COL-MB 的藥物體外釋放測試 此測試以透析法測量Mx-COL-MB在經過超音波處理後的Mx釋放行為，且係將Mx-COL-MB分處於4種環境中，分別為：pH 4且經超音波處理的實驗例7、pH 4而未經超音波處理的實驗例8、pH 7.4且經超音波處理的實驗例9、及pH 7.4而未經超音波處理的實驗例10。此測試之步驟包含：將含有實驗例7-10中任一者的3 mL PBS懸浮液置入透析袋中，並對相同pH值的PBS釋放基進行透析，其透析溫度為37 ± 0.5°C，並伴隨著600 rpm的磁力攪拌。在第0.5 小時，1MHz的超音波儀係被置於透析袋以上3 mm處，並以功率3 W/cm2 之超音波震盪1分鐘。在第0.1、0.2、0.3、 0.4、 0.5、1、2、3、4、5、及 6 小時，分別取出1 mL之釋放基溶液樣本，以測定透析至樣本中的Mx含量，並將相同體積之PBS補充至釋放基中。Mx累積釋放百分比係根據以下等式進行計算:其中，R 為釋放速率，cn 為每次取樣時總體釋放基中的藥物濃度，ci 為前一次取樣釋放基中的藥物濃度，v0 為釋放基之總體積，vi 為取樣釋放基之體積，而W 為釋放樣本的總藥物含量。
請參閱第6圖，其係顯示根據本發明實驗例7-10之米諾地爾累積釋放率-時間圖。如第6圖所示，實驗例10在第0.5小時的Mx累積釋放率僅有13.6%，但實驗例9在同一時間的釋放率為29.2%。實驗例8在第0.5小時的Mx累積釋放率為30.3%，但實驗例7在同一時間的累積釋放率為51.4%。在未經過US處理的情況下，Mx之釋放會顯著受限。實驗例10在第6小時的Mx累積釋放率僅41.2%，而實驗例8在第6小時的Mx累積釋放率為67.3%。然而在經過US處理後，Mx-COL-MB會持續而緩慢地釋放Mx。實驗例9在第6小時的Mx累積釋放率達68%，而實驗例7在第6小時的Mx累積釋放率則達89%。因此，US處理可將Mx-COL-MB之Mx釋放率提升20-26%，而pH 4亦會使Mx釋放率提高。由於人類頭皮pH值恰約為pH 4.5-5.5，因此，當Mx-COL-MB接觸頭皮並搭配3 W/cm2 、1分鐘之超音波刺激時，將可快速地釋放Mx。
實驗例 11 、比較例 6-7 ： 經皮穿透深度測試 此測試係分為3組溶液：未加MB且未US處理之比較例6、未加MB但有進行US處理之US組(比較例7)、以及加入500 ml的MB並進行US處理之US+MBs組(實驗例11)。每一組中皆含有0.1 mg的螢光劑FITC (fluorescein isothiocyanate)，並分別均勻滴加於4.5 cm2 、3 mm厚之豬耳皮膚，以1MHz超音波儀提供功率3 W/cm2 之超音波進行連續震盪，每次震盪時間1 分鐘。在震盪後，使FITC(及MB)停留在豬耳皮膚上6小時，接著被清洗移除。
參閱第7圖，其係顯示根據本發明實驗例11、比較例6、7之螢光劑經皮穿透之顯微影像。第6A-6C為亮視野圖，而第6D-6F為暗視野螢光圖。第6A、6D圖為比較例6，其FITC穿透深度為312 ± 19 μm。第6B、6E圖為比較例7，其FITC之穿透深度為405 ± 23 μm。相較於此，第6C、6F圖為實驗例11，其FITC穿透深度達到1856 ± 45 μm。這顯示了經過US處理，皮膚通透度有所增加，再透過MB之作用，將能有效地使藥物經皮穿透。
實驗例 4 、 12 、比較例 1 、 4 、 8 、 9 ： Mx-COL-MB 所釋放 Mx 之經皮穿透測試 此測試可分為6組溶液：未經超音波處理之Mx組(比較例4)、MBs組(比較例1)、Mx-COL-MBs組(實驗例4)，及經過超音波處理之US+Mx組(比較例8)、US+MBs+Mx組(比較例9)、US+Mx-COL-MBs組(實驗例12)。在比較例4、8、9中，Mx濃度為0.3 mg/ml；而在實驗例4、12中，Mx-COL-MB所攜帶之Mx濃度為0.3 mg/ml。此測試之步驟包含：將3 mm厚之豬耳皮膚夾置於經皮吸收系統(Franz diffusion cell)的供給槽(donor cell)及接收槽(receptor cell)之間，而其測試溫度為37 ± 0.5°C。取上述6組溶液中任一者的1ml置於面向角質(SC)端的供給槽，使MB、Mx、或Mx-COL-MB能穿透供給槽底端之石蠟膜而到達皮膚。另外，面向真皮端的接收槽則充滿pH 7.4的12 ml PBS，並進行600 rpm的磁力攪拌及加入0.01%慶大霉素(gentamicin)以避免Mx在穿透過程中被細菌分解。在第0.5 小時，1MHz的超音波儀係被置於皮膚以上3 mm處，並以功率3 W/cm2 之超音波震盪1分鐘。在第0.5、1、2、3、4、5、6、8、12、及18小時，皆會從接收槽中取出經0.2μm孔徑過濾後之1 mL接收液樣本，以測定接收液中的Mx含量，並將相同體積之PBS補充至接收液中。在第18小時後，豬耳皮膚樣本會經過清洗，並以1 ml接收液進行均質化，取上清液離心後再取上清液以測定豬耳皮膚的Mx吸收量。
請參閱第8圖，其係顯示根據本發明實驗例4、12、比較例1、4、8、9之米諾地爾滲透量-時間圖。如第8圖所示，比較例9雖然在前6小時內可快速滲透Mx達62.9 ± 5.0 μg/cm2 ，但在8-18小時的滲透量逐漸變為平緩。相對地，實驗例12在第18小時的Mx累積滲透量達到240.0 ± 32.8 μg/ml，顯著高於其他組別之Mx累積滲透量，包含比較例9的174.3 ± 19.8 μg/ml、比較例8的113.0 ± 6.0 μg/ml、比較例4的103.1 ± 0.5 μg/ml、實驗例4的73.3 ± 1.4 μg/ml、以及比較例1的21.7 ± 1.6 μg/ml(背景值)。此顯示將Mx-COL-MBs及MBs+Mx經過超音波處理(實驗例12及比較例9)後，其Mx滲透量相較於Mx (比較例4)可分別增加2.3倍及1.7倍。因此，在實驗例12中，經過US處理之Mx-COL-MBs能在18小時內展現最高之Mx累積滲透量。表 2
參閱上表2，以皮膚吸收量而言，比較例4的Mx皮膚吸收量達52.42 ± 9.55 μg/ml，顯著高於比較例8、比較例9、實驗例4、及實驗例12。然而，以皮膚穿透量來說，實驗例12的經皮穿透量達240.04 ± 32.82 μg/ml，顯著高於其他組別。因此，經過US處理之Mx-COL-MBs除了在18小時內展現最高之Mx累積滲透量，亦展現最高之Mx經皮穿透量，可使最大量之Mx經皮穿透。
實驗例 12 、比較例 4 、 8 、 9 、 10 ： 動物之毛髮生長測試 此測試係取用6週大、20-25克之C57BL/6小鼠，在第8週時對其背部上約10 cm2 區域進行除毛，並使該除毛區域之毛囊皆同時停留於休止期。小鼠被分為5組: 未處理組(比較例10)、僅提供Mx之Mx組(比較例4)、提供Mx及US處理的US組(比較例8)、提供Mx、MBs及US處理的US+MBs組(比較例9)、與提供Mx-COL-MBs及US處理之US+Mx-COL-MBs組(實驗例12)。在所有組別中，超音波處理係以功率3 W/cm2 之超音波震盪1分鐘，且每組中之Mx濃度皆為0.3mg/ml (即0.5 ml/cm2 )。此測試係透過色差計(chroma meter)測定小鼠的除毛區域之皮膚亮度變化，並以下列之等式計算其毛髮生長速率: 毛髮生長速率(%) = (L 1 －Ln )/L 1 ´100% 其中L 1 為除毛後之區域亮度，而Ln 為不同時間之區域亮度。
請參閱第9圖，其係顯示根據本發明實驗例12、比較例4、8、9、10之小鼠背部毛髮生長的上視觀察-時間圖。如第9圖所示，在第10天時，皮膚亮度顯著降低的小鼠數量分別為：實驗例12的5隻、比較例9的3隻、比較例8的1隻、比較例4的1隻、及比較例10的0隻，顯示實驗例12之毛髮生長最快。在第14天時，實驗例12中每隻小鼠的毛髮生長較其餘四組更為顯著。
請參閱第10圖，其係顯示根據本發明實驗例12、比較例4、8、9、10之小鼠背部毛髮生長速率-時間圖。如第10圖所示，在第10及第14天時，實驗例12的毛髮生長速率分別較第1天時增加了22.6%及64.7%，顯著高於其他四組。在第16天時，實驗例12的毛髮生長速率達到了84.2%，高於比較例10的49.2%、比較例4的45.5%、比較例8的64.5%、及比較例9的83.5%。
請參閱第11圖，其係顯示根據本發明實驗例12、比較例4、8、9、10之小鼠背部毛囊切片染色的顯微影像。第11A-11E圖為毛囊之縱剖面圖，而第11F-11J圖為毛囊之冠狀剖面圖。第11A及11F圖為比較例10，第11B及11G圖為比較例4，第11C及11H圖為比較例8，第11D及11I圖為比較例9，第11E及11J圖為實驗例12。如第11A-11E圖所示，在第21天時比較例4的皮膚顯著增厚，比較例8的毛髮長度增加，比較例9的毛髮生長更長，而實驗例12的皮膚厚度及毛髮長度皆有最顯著的增長，且促進毛囊在垂直面上由表皮往皮下組織進行向下延長。在第10F-10J圖中，雖然所有組別的毛囊數量在治療後並未顯著增加，但比較例8、比較例9、及實驗例12在角質化毛幹之直徑及毛囊尺寸皆有所增加，比較例9及實驗例12的增加程度較為顯著，而實驗例12的毛囊剖面則最顯著延長。
綜上所述，本發明係將溶於PBS之攜藥經修飾微氣泡(Mx-COL-MB)以外用方式施用於皮膚，再進行超音波(US)處理，使Mx-COL-MB大量釋出米諾地爾(Mx)，而Mx可大量地經皮穿透而到達毛囊，使毛髮生長速率顯著提升，達到縮短生髮療程與減低皮膚敏感反應之功效。
雖然本發明已以實施方式揭露如上，然其並非用以限定本發明，任何熟習此技藝者，在不脫離本發明之精神和範圍內，當可作各種之更動與潤飾，因此本發明之保護範圍當視後附之申請專利範圍所界定者為準。
10‧‧‧經修飾微氣泡
100‧‧‧白蛋白微氣泡
110‧‧‧白蛋白殼層
120‧‧‧氣體核心
20‧‧‧攜藥經修飾微氣泡
200‧‧‧幾丁寡糖乳酸
300‧‧‧藥物
402、404、406、408‧‧‧步驟
為使本發明之特徵、優點與實施例能更明顯易懂，所附圖式之說明如下： 第1圖係顯示根據本發明多個實施例之經修飾微氣泡之剖面圖。 第2圖係顯示根據本發明多個實施例之攜藥經修飾微氣泡之剖面圖。 第3圖係顯示根據本發明多個實施例之製備攜藥經修飾微氣泡之流程圖。 第4A圖係顯示根據本發明實驗例1-6及比較例1之表面電位圖。 第4B圖係顯示根據本發明實驗例1、4及比較例1之粒徑-數量圖。 第4C圖係顯示根據本發明實驗例1、4及比較例1之電子顯微影像。 第5圖係顯示本發明實驗例1’、4’、比較例1’、3、4、5之吸收光譜圖。 第6圖係顯示根據本發明實驗例7-10之米諾地爾累積釋放率-時間圖。 第7圖係顯示根據本發明實驗例11、比較例6、7之螢光劑經皮穿透之顯微影像。 第8圖係顯示根據本發明實驗例4、12、比較例1、4、8、9之米諾地爾滲透量-時間圖。 第9圖係顯示根據本發明實驗例12、比較例4、8、9、10之小鼠背部毛髮生長的上視觀察-時間圖。 第10圖係顯示根據本發明實驗例12、比較例4、8、9、10之小鼠背部毛髮生長速率-時間圖。 第11圖係顯示根據本發明實驗例12、比較例4、8、9、10之小鼠背部毛囊切片染色的顯微影像。

Claims (6)

  1. 一種經修飾微氣泡，包含：一白蛋白微氣泡，包含：一白蛋白殼層；以及一氣體核心，位於該白蛋白殼層之內；複數個幾丁寡糖乳酸，連接於該白蛋白殼層之一外側表面上；以及米諾地爾，連接該些幾丁寡糖乳酸以形成一攜藥經修飾微氣泡，其中該攜藥經修飾微氣泡之粒徑為約4400nm至約4600nm。
  2. 如申請專利範圍第1項所述之經修飾微氣泡，其中該米諾地爾具有一負電荷。
  3. 如申請專利範圍第2項所述之經修飾微氣泡，其中該米諾地爾的濃度為約0.3mg/ml。
  4. 一種經修飾微氣泡之製備方法，包含：提供一白蛋白微氣泡；於0-10℃環境中加入含有複數個幾丁寡糖乳酸的一第一溶液至該白蛋白微氣泡以形成一經修飾微氣泡，其中，該些幾丁寡糖乳酸於該第一溶液中具有一濃度為2mg/ml；以及於0-10℃環境中加入含有米諾地爾之一第二溶液至該經修飾微氣泡，以形成含有一攜藥經修飾微氣泡之一第三溶液，其中，該米諾地爾於該第二溶液中具有一濃度為2mg/ml，該第一溶液與該第二溶液之一體積比為1：1，且該攜藥經修飾微氣泡之該米諾地爾於該第三溶液中具有一濃度為0.3mg/ml。
  5. 如申請專利範圍第4項所述之方法，更包含將該第三溶液之pH值調整為4-6。
  6. 一種經修飾微氣泡，其係由申請專利範圍第4項所述之製備方法製備而得。
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