TWI317282B - Neutral endopeptidase (nep) and human soluble endopeptidase (hsep) inhibitors for prophylaxis and treatment of neurodegenerative disorders - Google Patents

Description

1317282 九、發明說明： 【發明所屬之技彳标領域】 本發明涉及具有中性内肽酶(NEP)和/或人可溶内肽酶 (hSEP)抑制活性的已知苯並氮雜萆、苯並噁氮雜革 5 (benz〇xazepine)、苯並噻氮雜箪(benzothiazepine)-N-乙酸和膦酰 基取代的苯並氮雜革酮(benzazepinone)衍生物的一種新用途。 本發明的化合物用於製備預防和治療神經變性疾病的藥物組 合物。 本發明涉及本文公開的化合物用於製備提供有益效果的 10藥物的用途。有益效果在本文中公開或者對於本領域技術人員 來說根據說明書和本領域中的公知常識是顯而易見的。本發明 還涉及本發明的化合物用於製備治療或預防疾病或狀態的用 途。更具體而言，本發明涉及一種用於治療本文公開的或本領 域技術人員根據說明書和本領域中的公知常識知曉的疾病或 15症狀。在本發明的實施方案中，本文公開的特定化合物用於製 備藥物。 在專利申請案US 20030045449中，描述了用於治療神經變 性疾病的基質-金屬蛋白酶抑制劑。與該發明有關的問題首先 2〇是基質-金屬蛋白酶抑制劑包含一組廣泛的蛋白酶抑制劑，第 二是根據該申請所述的金屬蛋白酶必須用於還包含^^〇8抑 制劑的藥物組合物。 【發明内容】 本發明的目標是確定特定的金屬蛋白酶抑制劑’其在作為 1317282

令人驚奇的是，已發現具有中性内肽酶(NEP)和/或人可溶 r ⑽酶(hSEP)抑繼性的苯並氮料、苯並魏鮮、苯並喧 ; 11料^乙酸和膦取代的苯並氮鱗贿生物在動物外 5冑性腦損傷模型中具有保護個。這種性質使它們可用於製備 預防和治療神經變性疾病的藥物組合物。 ί 方&方式】 # 本發明的化合物根據歐洲專利ΕΡ 0 733 642、ΕΡ 0 916 679 和ΕΡ 1 468 010是已知的，其中包括其詳細的合成，並可以由 10通式(1)描述：

其中：

Ri代表式(2)或(3)的基團：

R7〇/j~ 〇r8 (2) A代表CH2、〇或s , r2和R3獨立地代表氫或画素， ^4和R6獨立地代表氫或形成生物不获魏g旨的基團； &選自由(CrQ)院氧基(CrC6)烧基，它可以被扣-⑸烧氧 1317282 基取代，苯基-(CrC6>烷基和苯氧基-(ch：6)-烷基，其中笨基 可以被(CrC6)烧基、（CrC6)-院氧基或鹵素取代，和萘基 -(Ci-C6)-烧基組成的組， R·7和Rs獨立地代表氫或形成生物不穩定膦酸酯的基團。 5 所有具有式(1)的化合物、外消旋物、非對映異構體混合 物和單獨的立體異構體屬於本發明；且還包括其藥理學上可接 受的鹽。因此，潛在不對稱碳原子上的取代基為R_構型或§_構 I 型的化合物屬於本發明。 前藥是本身無活性但轉化成一種或多種活性代謝產物的 10治療劑。前藥是用於克服母體藥物分子的某些使用障礙的藥物 分子的生物可逆衍生物。這些障礙包括但不限於溶解性、滲透 性、穩定性、系統前代謝(preSySternic metab〇lism)和乾向限制 (Medicinal Chemistry: Principles and Practice, 1994, ISBN 0-85186-494-5, Ed.: F. D. King, p.215; J. Stella, "Prodrugs as 15 therapeutics' Expert Opin. Ther. Patents. 14(3\ 277-280, 2004; P. _ Ettmayer 等人，“Lessons iearned from 咖加㈣ and investigational prodrugs”，J.Med.Chem·，47, 2393-2404, 2004)。 前藥即在通過任何已知途徑施用給人時代謝成具有式（丨)的化 合物的化合物屬於本發明。具體而言，這涉及具有羥基的化合 20物。這種化合物可以與有機酸反應得到具有式(1)的化合物，其 中存在在給藥後容易除去的附加的基團，例如包括但不限於 脒、烯胺、曼尼希域、羥基_亞曱基衍生物、〇_(酰氧基亞曱基 氨基甲酸酯)衍生物、氨基甲酸酯、酯、酰胺或烯胺酮。 藥學上可接受的鹽可以用現有技術中熟知的標準方法獲 1317282 付’例如通過將本發明的化合物與適宜的金屬離子或有機域如 胺混合。 這個目彳示了以通過製備具有上述通式(1)的化合物的金屬 鹽來實現’其中的金屬離子為雜子或二價金麟子。優選的 二價金屬鹽為_、鎂和鋅鹽。最優選触。 本發明特別涉及具有通式⑷的化合物

其中的符號具有以上給出的含義。 更特別地，本發明涉及具有通式(5)的化合物

其中的符號具有以上給出的含義。 根據本發明的最優選的活性物質為： •(2R)-2][1-({[(3S)-1-(羧曱基)_2_氧代^，❻四氫]!^ 苯並氮雜萆-3_基]氨基}羰基)環戊基]甲基}-4-苯基丁酸(6): ⑧

8 15 1317282 •(2R)-2-{[l-({[(3S)-l-(羧甲基)-2-氧代-2,3,4,5-四氫-1沁1-苯並氮雜萆-3-基]氨基}幾基)環戊基]甲基}冬(1-萘基)丁酸(7):

•((3S)-3-{[(l-{[(节氧基)(乙氧基)鱗酰基]曱基}環戊基)幾 基]氨基}-2_氧代―2,3,4,5·四氫-1H-1-苯並氮雜箪-1-基)乙酸叔丁 酯（8):

藥物組合物. 10 本發明的化合物可以通過f規方法，仙翻如液體或 固體載體材料製成適於施用的形式。本發明的藥物組合物可 以腸内、口、腸胃外(肌内或靜脈内）、直腸或局部(10响或 topically)施用。它們可以溶液、散劑、片劑、膠囊（包括微膠 囊）、軟膏(乳膏或凝膠)或栓劑的形式施用。這種製劑的適宜 賦形劑是藥用常規液體或m體填充劑和增量劑、溶劑、乳化 15劑、潤滑劑、調味劑、著色劑和/或緩衝物質❶可以^及L常 用輔料是碳魏、二氧化鈦、乳糖、甘雜醇和其他糖、= 石、乳蛋自、霄、麟、纖維素及其触物1物和植: 油如魚肝油、向日葵油、花生油或芝麻油、聚乙二醇和溶1 1317282 如無菌水和單或多羥基醇如甘油。 本毛明的化合物-般作為藥物組合物施用。可以使用的藥 ， 物組合物的類型包括但不限於片劑、。且嚼片、膠囊、溶液、腸 胃外溶液、栓劑、祕劑和本文公開或者本躺技術人員根據 5說明書和本領_公知常識知曉的其他類型。 在本發明的實施方案中，提供一種藥用包裝或藥盒，其包 含-個或多個填充了-種或多種本發明的藥物組合物的成分 • 辟器:與這些容器有關的是各種書寫材料，如使用說明書， 或者由S理藥σο的生產、使用或銷售的政府機構指定形式的通 。所述通。反映生產、使用或銷售機構對於人或獸施用的批 准。 適於本發明的化合物的非f具體的製劑已公開在專利申 凊 W0 03/068266和 W0 04/062692 中。 上述的具體化合物意在進一步更詳細地舉例說明本發 is明，因此不應被理解為以任何方式限制本發明。本發明的其他 • 實施方案對於本領域技術人員來說經考慮本文公開的本發明 的說明和實踐後是顯而易見的。因此，要認為該說明書和實施 例僅作為例舉，而本發明的真實範圍和精神如申請專利範圍所 7JT ° 20外傷性腦損傷：延遲的神經元死亡 方法 挫傷裝置.挫傷裝置由不銹鋼管組成，其長度為4〇cm，以 1 cm的間距穿孔以防止空氣壓縮在管中。用水合三氯乙醛以4⑽ mg/kg腹膜内的方式麻醉230_270g的Wistar大鼠，在右半球進行 1317282 顱骨切開術，將引導下墜重量至搁置在硬腦膜表面的腳踏板的 2置與頭顱表面垂直放置，選擇由挪重量產生的綱§議力 里產生腦挫傷。允許最大2·5 mm的腦表面凹窩以避免硬腦膜的 機械刺傷。腳踏板中心立體定向放置在前能後丨5圓和側面 5 2.5 mm處。用含有在磷酸鹽緩衝液巾的4%低聚甲義溶液在 造成腦損傷3天後使大鼠經歷灌注固定。 腦至内(i.e.v.)注射.通過體積為5_15y的Hamiit〇n注射器進 .行化合物的腦室内施用。在造成外傷之後歷經5分鐘、15分鐘 -8小時用以下立體定向座標進行注射：Ap= 〇 5 mm，L= 2mm和 10 V=-5.5，相對於前囟點（Swans〇n，L. w (1992)Brain M叩&

Structure of the Rat Brain, Elsevier, Amsterdam) 〇 靜脈内注射：用與26標準規格針連接的lmi注射器進行化 合物的靜脈内施用。將針沿皮膚小切口插至左股靜脈。在3〇秒 内以lml/kg體重的體積進行化合物施用。 15 海馬的形態測定分析。在外傷性損傷3天後，在從l〇.21mm _延伸到11.21111111的5個不同嗓尾(]*0血0(^1；^1)水平上和通過它 的中側軸立體測定海馬CA3子區域内的損害(Swanson，L. W. (1992) Brain Maps: Structure of the Rat Brain, Elsevier, Amsterdam)。為了定量評價海馬的神經元損失，使用立體剝離 20 器技術(Cruz-Orive，L. M. & Weibel, E. R. (1990)Am_ J.Physiol. 258 ’ L148-L156)來評價錐狀神經元的數值密度(Nv)。將無偏差 的s十數框(0.05 mm X 0.05 mm ;剝離器高度〇.〇1 mm)和高孔徑 物鏡(x40)用於取樣。通過存在被含有尼氏物質的細胞質所環繞 並帶有清楚的核質和清楚的核仁的典型核來鑒定正常神經 ⑧ 11 1317282 元。認為CA2和CA3亞區域之間的邊界是大錐狀細胞的較寬鬆 的排列通向亞區域CA3的稠密壓積的錐狀細胞的地點。認為連 接鋸齒狀顆粒細胞層側端的任意線條是亞區域CA3和CA4之間 的連接。 5 本發明的化合物用於預防和治療神經元變性疾病，例如缺 灰性中風、外傷性腦損傷、急性播散性腦脊髓炎、肌萎縮性側 索硬化(ALS)、色素性視網膜炎、輕度認知障礙、阿爾茨海默 氏病、皮克病、老年性癡呆、進行性核上麻痹、皮層下癡呆、 威爾遜病、多發梗塞病、動脈硬化性癡呆症、與AIDs有關的 1〇癡呆、小腦變性、脊髓小腦變性綜合征'弗裏德賴希共濟失調、 共濟失調-毛細血管擴張症、與癲癇有關的腦損傷、脊髓損傷、 腿多動综合枉、亨廷頓舞蹈病和帕金森病、紋狀體黑質變性、 大腦脈管炎、線粒體腦肌病、神經元蠟樣脂褐質沉積症、脊髓 性肌萎縮、涉及中樞神經系統的溶酶體貯存疾病、腦白質營養 15 ^良、尿素迴圈缺陷症、肝性腦病、腎性腦病、代謝性腦病、 卟啉症、細菌或病毒性腦膜炎和腦膜腦炎、朊病毒病、神經毒 -物中，、格_巴綜合征、慢性炎性神經病、多肌炎、皮 肌炎和放射誘導的腦損傷。 藥的劑里且為〇.〇〇1_1〇〇〇 mg/kg，優選〇】_觸 20 者體重。 藥理學試驗結果 在上述的外傷性腦損傷模型中，具有式咏7的化合物引起 劑量的神經保護效果。在當外傷後長達8小時於腦室内 *"、气和7的化合物時，這些效果仍然明顯。 ⑧ 12 1317282 試驗化合物的神經保護作用的劑量反應 測置具有式6和7的化合物在成年wistar大鼠外傷後i5分鐘 進灯月a至内施用時的神經保護效果的劑量反應。如該方法所述 的那樣在CA3海馬亞區域巾測定神經元密度^在賦形劑處理的 5大鼠的非<損左側和賦形劑處理的大鼠的受損右側以及在用 八有式6和7的化合物處理的大鼠中，測量6種立體定向水平的 CA3神經元的密度土標準偏差(=SED)，結果如下表丨所示。在以 下所有的表中，數字(“η”)在使用時表示每組的大鼠數。 產上~CΑ3海馬的神經元密度，細胞X 103/mm3 立體定向水平 _賦形劑左側 賦形劑右側 (n=8) 化合物式(6) 化合物式(7) 10.21 148.57±2.23 90·29±5·54 112.5111.40 107.25115.19 10.41 154.29±3.73 84.86+7.29 103.75±11.80 100.25±14.71 10.61 158.86±3.44 77_71±5.82 101.75±14_80 93.50116.96 10.81 155.71+4.07 76.57±13.45 98.50±10.68 93.50±12.36 11.01 150.86+1.95 85.71110.98 96.75土 13.98 101.50±18.81 11.21 148.29±1.38 92.86+8.71 101.75115.17 107.75±16.51 10 將賦形劑注射至經受過頭部外傷的大鼠的右腦室，導致 CA3海馬的神經元密度降至對照值的48%，而注射lOpg式(6)的 化合物或式(7)的化合物部分地防止海馬神經元損失。方差分析 (“ANOVA”)表明兩種試驗物質對CA3海馬的神經元損失有顯 著的保護性治療效果。 15 靜脈内(i_v.)施用後的活性 注射賦形劑導致C A3海馬的神經元密度降低至對照值的 53%，而注射30或300 mg/kg式⑺的試驗物質部分地防止海馬 神經元損失，其中300 mg/kg的劑量最為有效。方差分析 (“ANOVA”)表明兩種受試劑量的試驗物質對cA3海馬的神經 1317282 元損失都有顯著的保護性治療效果(p<_l; n=8/組） 選表明3GG mg/kg的劑量帶來比如mg/kg的劑量明顯更好的神 經保護作用。 表_gl_CA3海馬的神經元密度(細胞x 1 〇3/mm3)，靜脈内給藥 立體定向水平 賦形劑左側 __ (n=8) 賦形劑右側 (n-8) 化純姻 300MG/KG(N=8) 化辦勿式⑺ 30MG/KG(N=8) 10.21 150.50±1.41 97.5017.39 126.5015.53 107.50+6.99 10.41 154.25±1.67 90.25±5.60 117.75+4.95 102.25±7.89 10.61 157.25±2.38 84.75±7.09 110.00±7.01 100.75±9.91 10.81 154.00±1.85 88.〇〇±7.17 106.75±7.48 101.75±9.65 11.01 149.00±1.07 94.0015.45 116.50±9.06 111.25+7.55 11.21 146.00±1.51 99.7518.24 125.25±5.01 117.75±10.11 5 【圖式簡單説明】 (無） 【主要元件符號說明】 (無）

Claims (1)

1. 1317282 第94100474號專利申請案申請專利範圍修正本98年?月21曰 十、申請專利範園： 1. 一種通式(1)的化合物、其所有立體異構體以及藥理學上可 接受的鹽用於製備藥物組合物的用途：

   其中： R!代表式(2)或(3)的基團： r5 0 H r7o〆卜 /〇 or8 Re (2) (3) A代表CH2、0或S， 10 R2和R3獨立地代表氯或_素， R4和R6獨立地代表氫或形成生物不穩定羧酸酯的基 團； R5選自以下所構成的群組：可以被(Q-C6)烷氧基取代 之(CrC6)烷氧基(CrC6)烷基、苯基_(Cl_C6)_烷基和苯氧基 -(CrC6)-烧基，其中苯基可以被(CrC6)烧基、（CrQ)-烧氧 基或ii素取代’和萘基_(Ci_c6)-烧基， r7*r8獨立地代表氫或形成生物不穩定膦酸酯的基 團， 15 15 1317282

   9# # 2 5修(炎)正替換頁| 該藥物組合物係用於預防和絲選自以下所構成的群 組之病狀：外傷性腦損傷、急_散性腦㈣炎、與痛痛 有關的腦損傷、脊麵傷 '細m騎性腦膜炎和腦膜腦 炎、朊病毒病、神經毒性化合物中毒，和放射誘導的腦損 傷，以及驗顯缺血性巾風，㈣條件是該藥物組合物 不包含越固酮受體拮抗劑。 2_如申請專利範圍第1項的用途，其特徵在於該藥物組合物包 含通式(4)的化合物、其所有立體異構體以及藥理學上可接 受的鹽中的至少一個化合物

   其中的符號具有巾請專利範圍第丨項給出的含義。 3.如申請專職圍第丨項_途，其特徵在於該藥物組合物包 含通式(5)的化合物、其所有立體異構體以及藥理學上可接 受的鹽中的至少一個化合物

   其中的符號具有切專利範圍第1項給出的含義。 4.如申請專利範圍第1項的用途，其特徵在於該化合物為具有 式⑹的叫2-{[1伽S)七(繞甲基)_2_氧代_2,3,4,5_四氯 15 1317282

   -1H-1-苯並氮雜箪-3-基]氨基}羰基)環戊基]甲基}-4-苯基丁 酸：

   及其藥理學上可接受的鹽。 5 5.如申請專利範圍第1項的用途，其特徵在於該化合物為具有 式(7)的(211)-2-{[1-({[(33)-1-(羧曱基)-2-氧代-2,3,4,5-四氳 -1H-1-苯並氮雜箪-3-基]氨基}羰基)環戊基]甲基}-4-(1-萘 基)丁酸：

   10 及其藥理學上可接受的鹽。 6.如申請專利範圍第1項的用途，其特徵在於該化合物為具有 式(8)的-((3S)-3-{[(l-{[(节氧基)(乙氧基)磷酰基]甲基}環戊 基)羰基]氨基}-2-氧代-2,3,4,5-四氫-111-1-苯並氮雜革-1-基) 乙酸叔丁酯：

   17 1317282 7. 5 8. 9. 10

   及其藥理學上可接受的鹽。 如申請專利範圍第1-6項中任一項的用途，其特徵在於該藥 理學上可接受的鹽選自鋰鹽、鈣鹽、鎂鹽和辞鹽所構成的 群組，且該藥理學上可接受的鹽優選為鈣鹽。 如申請專利範圍第1-6項中任一項的用途，其特徵在於該治 療係針對外傷性腦損傷或脊髓損傷。 如申請專利範圍第1-6項中任一項的用途，其特徵在於該治 療係針對急性播散性腦脊髓炎、與癲癇有關的腦損傷、細 菌或病毒性腦膜炎和腦膜腦炎、朊病毒病、神經毒性化合 物中毒和放射誘導的腦損傷。 如申請專利範圍第1-6項中任一項的用途，其特徵在於該預 防係針對缺血性中風。 18