TWI263505B

TWI263505B - Pharmaceutical composition comprising a C1C-2 channel opener

Info

Publication number: TWI263505B
Application number: TW91133604A
Authority: TW
Inventors: Ryuji Ueno
Original assignee: Sucampo Ag
Priority date: 2001-11-19
Filing date: 2002-11-18
Publication date: 2006-10-11
Also published as: AR037556A1; EP1455794A2; DE60239220D1; JP4377692B2; TW200304829A; AU2002348670A1; CA2466906A1; DK1455794T3; US20100204332A1; US7732487B2; EP2364708A2; WO2003043639A2; ATE498402T1; JP2005515186A; EP2364708A3; ES2359804T3; WO2003043639A3; EP1455794B1; US20030166632A1; CA2466906C

Description

1263505 「 i五、發明說明α) [發明所屬之技術領域] 本發明係關於一種醫藥組成物，包括以啟物作為活性成分。本發明亦關於一種治療之開啟相關的病症或疾病之方法。 i [先前技術] 氣離子通道係一種用於運輸氣離子（c 1 膜蛋白質。已有報告指出於神經、肌肉及上存有各種氣離子通道，且這些氣離子通道涉能及細胞H ( c y t 〇 p h y 1 a X i s )機制。例如，自電魚發電器官中選殖出氯離子 C 1 C - 0，近來發現係形成大家族（C 1 C家族）。例為：存在於哺乳動物之骨骼肌中的C 1 C - 1 器官之上皮中的C 1 C- 2 ;分佈於海馬體、小月及C1C-4;存在於肺、腎等中的C1C-5;存在骨骼肌、腎等中的C1C-6及C1C-7 ;以及僅特之 C1CK-1 及 C1CK-2。 ! 一般來說，各種通道係與許多疾病相關 ί i通道之官能障礙或存在於活化此等通道之程陷在此等疾病及身體不適之發病中扮演一重是，可開啟各種通道及幫助細胞電生理功能合物對處理及減輕此等病症方面具有重要的力。

I 因此推論C 1 C- 2通道於囊胞性纖維症之要角色，囊胞性纖維症係一種於高加索種族 C 1 C - 2通道開與C1C-2通道 )之離子-運輸皮之細胞膜中及各種生理功通道並稱為 C 1 C家族之實 :存在於各種 I等中的C1C-3 於腦、睪丸、定於腎中顯示。咸信，這些序中之調節缺要角色。於調節作用的化治療及預防能台療上扮演重中常見之體染

314186. ptd 第4頁 1263505 五、發明說明（2) i色體隱性之遺傳性疾病（Cuppoletti等人，American |

Journal of Physiology. Cell Physiology， 281(1)，C46—54， 2001; J〇〇等人，Biochemicaet |Biophysica Acta， 1446(3)， 431-437， 1999以及

Schwiebert等人，Proc. Natl. Acad· Sci. USA 97(7)， 3 8 7 9 - 3 8 8 4， 1 9 9 8 )。然而，C 1 C - 2在其他作用方面之詳細情形並不十分明確。 [發明内容] 本發明人對具有開啟C 1 C-2通道之能力的化合物進行深入的研究，發現C 1 C - 2通道開啟物可有效治療各種疾病0 換言之，本發明係有關一種預防或治療處理與c 1 d 通道開啟相關之病症或疾病之方法，該方法包含經由對g 要此種治療處理之個體投予有效量之C 1 C- 2通道開啟物，惟該疾病不為囊胞性纖維症。本發明進一步係有關—# & i移植程序中處理欲移植之組織或器官之方法，包括使_ & 織或器官與以c 1 C-2通道開啟物作為活性成分之醫藥纟且/成'' 物接觸之步驟。再者，本發明亦有關用於預防或治療處理與C 1 2 | 道開啟相關之病症或疾病之醫藥組成物，其包括以C ρ 通道開啟物作為活性成分，惟該疾病或病症不為囊胞性i 維症。本發明亦有關於移植程序中用以處理欲移植的I^ 或器官之醫藥組成物，其包括以c 1 C- 2通道開啟物作織性成分 Λ山JU、A 巧 >舌

314186. ptd 第5頁 1263505 五、發明說明（3) 此外，本發明係有關利用C 1 C - 2通道開啟物製造用以預防或治療處理與C 1 C - 2通道開啟相關之病症或疾病之一醫藥組成物，惟該疾病不為囊胞性纖維症。本發明亦有關利用C 1 C - 2通道開啟物製造於移植程序中用以處理欲移植 I的組織或器官之醫藥組成物。 I 本發明所使用之C1C-2通道開啟物無特定限制，只要具有C1C-2通道開啟活性，其可為任何化合物。該C1C-2通道開啟活性可藉由測定通過細胞膜中C 1 C- 2通道之氯離子流（自細胞内流至細胞外或相反方向）的增加而予以確認。例如，可藉由使用已知之分析策略（例如全細胞貼片失試驗法）篩選出具有C 1 C - 2通道開啟活性之化合物。具有C 1 C-2通道開啟活性之化合物的實例包含環合氧酵素抑制劑、非類固醇之抗發炎劑（例如布洛芬 (i b u p r 〇 f e η )及依布石西琳（e b s e 1 e η ))、蛋白質激酶A、油酸、反油酸、花生四烯酸、細胞生長因子（例如TGFa (轉化生長因子-α )及K G F (角質細胞生長因子））、前列腺素化合物及苯并味σ坐衍生物。 | 本發明中「與C 1 C-2通道之開啟相關之病症或疾病」 I包含預防上或治療上於目標組織之細胞中與C 1 C - 2通道開啟之活化相關或敏感的病症、病態、疾病及失調；以及於預防上或治療上與C 1 C- 2通道作用相關之病症、病態、疾病及失調。這些病症並無限制，只要其係與C 1 C - 2通道之開啟相關但不為囊胞性纖維症之病症或疾病。該疾病或病症之實例包含肝臟的疾病，例如肝炎及肝硬化；胰臟的疾

314186. ptd 第6頁 1263505 五、發明說明（4) 病，例如胰臟炎；便秘；外分泌失調，例如乾眼症及口乾症；大腦功能失調；心血管系統失調；呼吸系統失調以及消化系統失調。此外，「需要該種處理之患者」為患有如上所討論之病症或疾病之患者，或易患有此等病症或疾病之患者。該患者可為任何哺乳動物（包含人類）。根據本發明，係對需要此種處理之病人投予包括具有 C 1 C - 2通道開啟活性之化合物的醫藥組成物。該醫藥組成物可呈適合全身性或局部性施用之形式，該組成物可經口、靜脈注射（包括滴注）、皮下注射、直腸内、陰道内、經皮或眼部等途徑投藥。本發明中所使用之劑型的實例包括，但不限於内服製劑、注射劑、滴注劑、外用製劑、滴眼液、栓劑或陰道用。活性成分之劑量係依據動物種系（例如動物或人類）、年齡、體重、欲治療的症狀、期望療效、投藥途徑、處理期間而異，可根據所使用之化合物選擇適合的劑量。本發明之醫藥組成物除了活性成分外，分可包括生理上可接受且適合的添加劑。此處所使用之「添加劑」係下列各種成分之通稱：賦形劑、稀釋劑、填充劑、再溶劑、潤滑劑、佐劑、黏結劑、崩散劑、塗覆劑、包囊劑、軟膏基質、栓劑基質、氣霧劑、乳化劑、分散劑、懸浮劑、增稠劑、等張力調節劑、緩衝劑、緩和劑、保藏劑、抗氧化劑、橋味劑、香味劑、著色劑，以及功能物質例如環糊精以及生物可分解聚合物。上述加劑為業界眾所周知，可由

314186. ptd 第7頁 1263505 五、發明說明（5) 製藥學之一般書籍「處理」一詞防、照顧、緩解病根據本發明，包括組成物可有效用於症。該疾病或病症秘、外分泌失調、系統失調以及消化制體液分泌之器官進作用會造成，例中腸液之分泌，以液及唾液之分泌。治療肝臟疾病、外秘。本發明之組成欲移植的組織或器官可有效地預防可性低下以及伴隨之於移植程序中器官之功能直到將手術後該組織可被自捐贈者體中取出組織或器官、於移者，以及用於手術所述添加劑中選用。用於此處係包含任一種控制手段例如預情、退行病情以及停止病情的進展。 C 1 C - 2通道開啟物作為活性成分之醫藥處理與C 1 C - 2通道開啟相關之疾病或病之實例包含肝臟疾病、胰臟疾病、便大腦功能失調、心血管系統失調、呼吸系統失調。尤其，該組成物具有促進控分泌氯離子之能力。該氣離子分泌之促如，加速肝臟中膽汁之分泌、加速腸道及加速外分泌系統例如淚腺及唾腺中淚此外，本發明之醫藥組成物可有效用於分泌失調（例如乾眼症及口乾症）以及便物或方法亦可有效用於移植程序中處理官。藉由本發明組成物處理該組織或器能於移植手術期間或之後發生之器官活疾病。，不僅需要於某段期間内維持該組織或其移植至受贈者體中，而且還需確保於受贈者接受。本發明組成物可用於處理之組織或器官、保存及維持該經取出之植手術期間處理該組織或器官以及受贈後之處理。

314186. ptd 第8頁 1263505 五、發明說明（6) 於移植過程中，可對捐贈者活體内投予本發明之醫藥組成物或直接施用於經取出之組織或器官。例如，於進行取出組織或器官之手術時，可將該組成物用作為灌流液 (persuf ate)而灌注至捐贈者之活體中、作為活體外之灌 I流液而灌注至該經取出之器官中、作為經取出之器官的保 i存溶液以及將該器官移植至受贈者時於血液再次灌注前作 i為沖洗溶液。本發明之組成物可用作為灌流液、保存溶液 i及沖洗溶液中之一者，或作為上述溶液之二者或全部。 | 根據本發明，該組成物可含有單一活性成分或者組合二或多種活性成分。當組合多種活性成分時，其個別劑量可因其治療效力及安全性之考量而予以適當地增加或減少〇再者，本發明之組成物可含有其他醫藥活性成分，只要其不會與本發明之目的相牴觸即可。 I 後文將以實施例說明本發明之進一步細節，但該等實 j i施例絕非意圖囿限本發明之範圍。 I實產例1 i (方法）試驗物質1 : 1 3，1 4 -二氫-1 5 -酮基-1 6，1 6 -二氟-前列腺素Ei，其係所使用之C1C-2通道開啟物。將10或100微克/ I公斤於5毫升容積/公斤媒劑中之試驗物質1經口投予至至少已經禁食1 6小時之雄性威斯達大鼠（六週齡體重·· 1 8 0 - 2 1 0克）。對照組接受相等容積之媒劑（含0 . 5 %乙醇及〇.〇1%聚山梨醇酯（0〇1丫5〇1^&七6)8〇之蒸顧水）。投予後3〇

314186. ptd 第9頁 1263505 _________________________________________ ___________________________ _ _____________———_——〆.一，丨五、發明說明（7) 丨分鐘，大鼠於乙醚麻醉下接受剖腹手術。於+ 一 &胃P i及迴腸末端部個別結紮並取出腸。自取出之腸中收集各動 I物之腸液並測量其量。以及以10, 00 Oxg離心腸液5分鐘亚 I收集上清液。該上清液中之氯離子濃度係使用氣離子計數 i器（CL-7，希拉奴馬（Hiranuma)產業公司）測量。採用丹尼 i特氏（Dunnett’ s)試驗比較對照組以及各劑量試驗物質1之接受組。P值小於0 . 0 5視為統計上有意義。 (結果）表1顯示各組腸液之量及腸液内之氣離子濃度。

表1 ·試驗物質1對大鼠之腸液量及腸液内氯離子濃度之影響組別 ---—__ 劑量腸液量 n 毫升腸液内之氣離子濃度平均±標準差，毫當量/升 — 7 0.9+ 0.1 41·8± 3.9 ^物質1 10微克/公斤 7 3.3± 0.3** 110.1+ 5.6** ^物質1 100微克/公斤 7 5·3± 0·2** 126.6+ 2.4** 叮疋特氏試驗(Dunnett’s Test) :與對照組相比較，林 Ρ<0·01

之二广贫10及1 〇〇微克/公斤試驗物質1與腸液量及腸在=Ϊ，濃度呈劑量相依性關係。此外，與對照組相濃度ΐί:'” 1之各組中夜量及腸液内之氯又W者增加。子之^述結果顯示Clc — 2通道開啟物確實加速腸道刀泌而增加腸液量’且其有效治療便秘。

第10頁 1263505 I五、發明說明（8) 實皇例2 (方法）以3 0微升/眼之量將含有〇 · 〇〇 1 %試驗物質1之點眼液、、岗入雄白兔眼中。對照組係滴入相同量之點眼液媒劑。滴/入 2小時後，不經麻醉，於眼瞼下方（於耳側）三分之—處以史開莫紙（Schirmer’s Paper， Showa Yakuhin Kak〇 Κ·Κ·， Japan, Lot No· 9011N)藉由使其端内側與結膜择合而將眼瞼覆蓋1分鐘。自帶有刻度之濾紙上測量其濕S 區域之長度而測定淚液量。利用毛細移液管自眼驗下方之結膜收集5微升淚液。以蒸餾水將所收集之淚液稀釋5倍，以及使用氯離子計數器（CL-7，希拉奴馬產業公司，日測3:淚液之氣離子濃度。採用學生t試驗（S t u d e n t，s t -1 e s t)及威爾克森氏試驗（w i 1 c 〇 χ 〇 η ’ s t e s t)比較對照会且及試驗物質1接受組。P值小於〇 · 〇 5視為具有統計上之意義。 ^ (結果）表2顯示各組淚液之量及淚液内之氯離子濃度。表2 ·試驗物質1對大鼠之淚液量及淚液内氣離子濃度之影組別劑量 η 淚液量毫升淚液内之氯離子濃度平均It標準差，毫當量/升召 - 8 6.8± 0.5 116.9 土 1.3 0.001% 8 11·5± 〇.7## .##n/n a,' 152.9± 7.7## L石〜漱·兴对兕、姐孑目比，ui 威爾克森氏試驗：與對照組相比，⑻中<〇. 01

314186. ptd 第11頁 1263505 五、發明說明（9) : 與對照組相比，在接受試驗物質1之組別中，淚液量及淚液内之氣離子濃度顯著增加。：上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物確實加速眼睛中氣離子之分泌以增加淚液量，且其可有效治療乾眼症。 i i ! 實施例3 (方法） | 試驗物質2 : 1 3，1 4 -二氮-1 5 -嗣基-1 6，1 6 -二氟-1 8 (S)-甲基-前列腺素E i，其係所使用之C1C-2通道開啟物。 |試驗物質2以1 0 0微克/公斤之劑量每日三次經口投予至雄性威斯達大鼠（六週齡體重：1 8 0 - 2 1 0克）持續一星期。對照組接受相等容積之媒劑（含0 . 0 1 %聚山梨醇酯8 0及0 . 5 %乙醇之蒸餾水）。於最後投予日之隔日早上（距離最後一次投藥約1 7小時），大鼠於乙醚麻醉下將聚乙烯導管（PE 1 0，貝騰狄金森（Becton Dickinson )公司）插入其總膽管。大鼠置於玻爾曼（Borrmann’s)籠内，留置1小時讓其由麻醉中甦醒。距離插管後1至2小時，收集排出之膽汁以測量膽汁

I 量。使用氯離子計數器（CL-7，希拉奴馬產業公司）測量膽 i 汁之氣離子濃度。採用學生t試驗來比較對照組及試驗物質2接受組。P值小於0 . 0 5被視為統計上有意義。 (結果） | 表3顯示各組之膽汁量及膽汁内之氯離子濃度。表3.試驗物質2對大鼠之膽汁量及膽汁内氯離子之濃度之影響

314186. ptd 第 12 頁 1263505 發明說明（10) —--— "------------------------_ --------------- —-------- | 組別劑量 η 膽汁量毫升膽汁内之氯^ 平均±標準差，毫當量/升 _對照 — 7 364.4± 26.1 91·1± 2·^ 驗物質2 100微克/公斤 8 491.9± 36.7* 98·4± 1.8^ 學生t試驗: :與對照組相比， *Ρ<0. 05 --------- 1 1 與對照組相比，在接受試驗物質2之組別中，其膽汁 ΐ及膽汁内之氣離子濃度顯著增加。上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物確實加速肝臟中氯離子之分泌以增加膽汁量，且其可有效處理肝臟疾病以及肝移植。

f——mjL (方法）使用雄性威斯達大鼠。以苯巴比妥納（pentobarbital s 〇 d i u m )麻醉下，於試驗組及對照組之大鼠的總膽管中插入導管以收集膽汁。該導管插入及固定於肝門靜脈後，藉由蠕動性泵裝置以固定流速（4, 〇毫升/分鐘/克肝重）注入以95%0及5%C0飽和之包括牛膽酸納（s〇dium t a u r 〇 c ο 1 a t e )，3 0微莫耳/升）之克利布斯-林嘉氏液 (K r e b s - R i n g e r ) ( P h 7 . 4，3 7。(：）。於灌注下移除肝臟。試驗組中，於該克利布斯—林嘉氏液内加入試驗物質2。灌注 3 0分鐘後，測量試驗組及對照組之膽汁量。亦測量膽汁内之氯離子濃度。投予試驗物質2或媒劑3 0分鐘後之膽汁量

314186. ptd 第13頁 1263505 五、發明說明（11) 係以緊接於投予前膽汁量之相對值（％)表示。 (結果）表4顯示各組之膽汁量及膽汁内之氣離子濃度。表4.試驗物質2對大鼠之膽汁量及膽汁内氣離子之濃度之影響組別濃度(μΜ) η 膽汁之相對量(％) (平均±標準差）膽汁内之氯離子濃度 μΜ/分鐘/克肝臟 (平均±標準差）對照 - 5 92·4± 2.7 0.268± 0.007 試驗物質2 10 5 126.2+ 9.0** 0.353土 0.009** 與對照組相比，**Ρ<0· 01 (單一 AN0VA之費雪（Fisher’s)多重比較試驗) 與對照組相比，在接受試驗物質2之組別中，其膽汁量及膽汁内之氯離子濃度顯著增加。上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物確實加速經移除之肝臟中的氣離子之分泌以增加膽汁量。此結果顯示於器官移植（包含肝臟移植）程序中以C 1 C - 2通道開啟物之處理係有效的。實施姓5 — (方法）於雄性威斯達大鼠（體重：約2 8 0克）之腹膜内注射苯巴比妥鈉（5 0毫克/公斤）將其麻醉以及自腹中線切開大鼠腹部，暴露出肝門區域。於總膽管中插入導管以及於肝門 i靜脈處插入配備有三頭栓之19號（19gauge)思弗羅® i ( s u r Π ο® )針。同時，以4 . 0毫升/分鐘/克肝重之流速將經

314186. ptd 第14頁 1263505 五、發明說明（12) 氧化之克利布斯-林嘉氏緩衝液灌注至肝臟中以及藉由切 i開下腔靜脈進行放血。自附近的組織中將肝臟切除，移出 I體外並進行體外灌注。使該肝臟進行1 5分鐘之預先灌注直 I到其氧氣消耗量達到穩定狀態。然後於4°C下以器官保存 i I溶液（威斯康辛大學溶液；u-w溶液）取代該灌注液。待取 | i代完成後，立即將該接著三頭栓針之肝臟自灌注過程中移出並將該灌注口夾住。然後於相同溫度下將肝臟放置於保存溶液（U-W溶液）中且貯存1 6小時。貯存1 6小時後，該肝臟再次以克利布斯-林嘉氏缓衝液灌注。再次灌注3 0分鐘後，測量膽汁流量。 (1 )於器官保存溶液（U-W溶液）中添加試驗物質2之效果上述灌注方法中，試驗物質2係以1 0// Μ之濃度添加至保存溶液（U-W溶液）中。 (2 )再次灌注期間於灌注液中添加試驗物質2之效果上述灌注方法中，試驗物質2並未添加與保存溶液 i中，但以1 0// Μ之濃度添加至用於再次灌注之灌注液（克利丨 I布斯-林嘉氏緩衝液）中。 I (結果） ! ! I 表5及表6分別顯示於（1 )及（2 )之條件下進行再次灌注 i

I |後3 0分鐘膽汁之流量。

314186. ptd 第15頁 1263505 五、發明說明（13) 表5 .試驗物質2添加至保存溶液之器官保存效果組別濃度(μΜ) Ν 膽汁之流量 μ17分鐘/克肝臟 (平均±標準差）對照一 5 2·11± 0.18 試驗物質2 10 5 2.43+ 0.10* 與對照組相比，*P<0. 05 表6.再次灌注期間添加試驗物質2至灌注液中之效果組別濃度(μΜ) Ν 膽汁之流量 μΙ7分鐘/克肝臟 (平均±標準差）對照 - 5 2.11± 0.18 試驗物質2 10 5 2.67± 0.31* 與對照組相比，〕<0· 05 與對照組相比，在接受試驗物質2之組別中，其膽汁流量顯著增加，該試驗物質2係添加至保存溶液以及於再次灌注期間添加至灌注液中。上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物可有效改善器官之保存、於再次灌注期間抑制失調以及於移植後改善攝取率，因此，於器官移植程序中（包含肝臟移植)以試驗物質2處理係有效的。實1姓6 (方法）將於1 0毫升/公斤媒劑中之試驗物質1皮下以0. 3毫克/

314186. ptd 第16頁 1263505 五、發明說明（14) 公斤體重之量投予至ddY雄鼠（5周齡，體重：27至30克）。對照組則係投予媒劑。投予3 0分鐘後，以斷頭臺將該老鼠斬首。測量斬首後所顯示之喘息時間。 | (結果）表7顯示各組之抗缺氧作用表7.抗缺氧作用組別劑量(毫克/公斤） η 喘息時間(平均±標準差）對照 - 10 20·3± 1.9 試驗物質1 0.3 10 24.1± 1.9** t-試驗：**P<0. 01 與對照組相比，在接受試驗物質1之組別中，其喘息時間顯著增加。上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物可有效處理血液缺氧、組織缺氧或腦部缺氧。寬1例」 (方法）將於5毫升/公斤媒劑中之試驗物質1以0 · 1或0 . 0 1毫克 /公斤之量皮下投予至雄威斯達大鼠（7周齡，體重：2 0 0至 2 5 0克）。對照組則投予相同量之媒劑（生理鹽水）。投予3 0 分鐘後，將6 0 0毫克/毫升之硫酸銨投予至該大鼠之腹腔。計算投予硫酸銨3 0分鐘後大鼠之存活率。於氣仿麻醉下殺死投予硫酸銨3 0分鐘後還存活之大鼠，且取出其肺臟並秤重。關於那些在投予硫酸銨後3 0分鐘内死亡之動物，於死

314186. ptd 第17頁 1263505 五、發明說明（15) 亡後立即取出其肺臟並秤重。將各個組別之肺重與未接受硫酸銨之正常組進行比較。根據所測得之肺重，計算與正常組相比時，該接受試驗物質1組別其肺重增加之抑制率。 (結果）表8顯示存活率以及表9顯示該肺重增加之抑制率。表8.抗肺水腫（antipneumonedema)作用（存活率）組別劑量(毫克/公斤） η 存活率(％) 對照 — 10 30 試驗物質1 0.1 10 60 表9.抗肺水腫作用（肺重增加之抑制率）組別劑量(毫克/公斤） η 肺重增加之抑制率(％) 試驗物質1 0.01 10 47 上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物可有效處理肺病症。宽盖11 (方法）藉由水-浸沒監禁緊迫誘發潰瘍模式以及吲哚美辛 (indome thac in)誘發潰瘍模式之方式測定試驗物質對急性潰瘍之作用。將試驗物質1經口投予至已禁食2 4小時之雄性威斯達大鼠（體重：1 8 0至2 1 0克）。於水-浸沒監禁緊迫誘發潰瘍

314186. ptd 第18頁 1263505 五、發明說明（16) 模式中，經口投予試驗物質1經10分鐘後，將該大鼠關在丨緊迫籠内且浸入23X：之水中達其胸膛之劍胸骨處。浸入水 I 中6小時後，藉由頸椎脫臼殺死該動物。於11引11朵美辛誘發丨潰瘍之模式中，經口投予試驗物質1或2後立即經口投予10 | i毫克/公斤之吲哚美辛。投予5小時後，藉由頸椎脫臼殺死 | 該動物。將自該動物取出之胃以1 %福馬林固定，然後沿著 i | 較大之彎曲切開。測量胃中所形成之各潰瘍的較長軸 (mm )。合計各動物之胃中該潰瘍的較長軸，以其為潰瘍係數。根據對照組之潰瘍係數及接受試驗物質組之潰瘍係數，計算潰瘍抑制率。 (結果）表1 0顯示抗-水監禁緊迫潰瘍之作用以及表1 1顯示抗吲哚美辛潰瘍之作用組別劑量(微克/公斤） η 潰瘍係數 (平均±標準差）存活率(％) 對照 - 10 29·3± 3.0 一試驗物質1 30 10 13.4± 2.0** 54.3 試驗物質1 100 10 4·3± 1.9** 85.3 與對照組相比，**P<〇. 01 (丹尼特氏試驗)

314186. ptd 第19頁 !2635〇5 -------------- 夺 ^ i1 ·抗吲哚美辛潰瘍之作用組別 ~~ΪΓθ9 劑量(微克/公斤） —— η h-— 潰瘍係數 (平均±標準差）潰瘍抑制率(％) 試驗物質1 9 10 49.6± 7.6 — 對日3 ----- 10 ---—_ 27.9+ 5.1 44 試驗物質2 1 10 86.4+ 9.6 - 試驗物質2 丄 η 10 35.7± 8.3** 58.7 試驗物質2 J 1 A 10 30.0± 4.6** 65.3 1U 10 19.7± 4.8** 77.2 :，不即<υ· (丹尼-- 一結果顯示C1C-2通道開啟物可有效處理胃潰瘍。 (方法）等氣化水（Hgci D以4毫克/公斤之量藉由肌内注射投予疗威’、斤達大鼠(體重：2 4 5至2 9 0克），俾誘發大腸中之潰，。於投予HgC1前3〇分鐘以及投予後2及6小時，皮下投予、二物貝2。對照組則投予媒劑。投予H g C 1 22 4小時後，於 =，麻醉下將動物放血至死。切開腹部後，將迴腸開口之 ^°卩及肛門之上部縫起來，以及取出由盲腸到直腸之大腸區域。日 m ^ ^ 大知以1 %福馬林固定，然後切開，且於立體 3 U鏡下以卡尺測量較大及較小軸之潰瘍。較小軸黏以較轴之積為潰瘍面積。再者，計算各動物之總潰瘍面積，表不為總潰瘍面積。 (結果）

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第20頁 1263505 五、發明說明（18) 表1 2顯示該抗-大腸潰瘍之作用。表1 2.抗-大腸潰瘍之作用組別劑量(微克/ 公斤） η 總潰瘍面積，mm2 (平均±標準差）潰瘍抑制率 (%) 對照 - 5 29.0+ 23.5 - 試驗物質2 10 5 15·2± 15.8 54.3 試驗物質2 1000 5 3·7± 8.3** 85.3 與對照組相比，**P<0. 05 (丹尼特氏試驗) 上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物可有效處理腸内潰瘍*〇實施例1—0 (方法）於苯巴比妥鈉麻醉下，將禁食整夜之雄威斯達大鼠 (體重：2 4 0至2 7 0克）之腹部切開。然後自膽管十二指腸開口處逆向注入含有1 0 %牛膽酸3毫升及0 . 3 %胰蛋白酶溶液0 . 3毫升之混合溶液俾使其誘發胰臟炎。於注入牛膽酸及胰 I蛋白酶之混合溶液前3 0分鐘，及於注入後2及4小時皮下投予試驗物質2。對照組則投予媒劑。注入牛膽酸及胰蛋白酶之混合溶液6小時後，收集血液以測量血清澱粉酯之活性。 (結果）表1 3顯示抗-騰臟炎之作用。

314186. ptd 第21頁 1263505 五、發明說明α9) 表1 3 .抗-騰臟炎之作用組別劑量(微克/公斤） η 血漿澱粉酶Iu/L2 (平均±標準差）抑制率(％) 對照 — 12 3141+ 838 試驗物質2 100 9 2430+ 417 22 6 上述結果顯示C 1 C - 2通道開啟物可有效處理胰臟炎實魏倒_ 1 1 (方法）以米格魯犬（體重：8 · 8至1 0 · 3公斤）進行實驗，於戊硫喷妥鈉（t h i 〇 p e n t a 1 s 〇 d i u m)及α -氯醛糖麻醉下，經！直角波形電磁血流計（rectangular wave electromagnetic blood flow meter， MFV-3100， Nih〇n Koden)自設置於主動脈弓上之F J探針引導心輸出量至成、、# 指示單位且將其紀錄於記錄器。依照下述方法製備心臟2 力之模型。自插入於左股骨靜脈之導管連續注入溶有普萘洛爾（propranolol )之乳酸化林格氏溶液使心臟舒$ 開始超過負荷。3 0分鐘後’將左前下行枝（L A D )绑紫。 N 士。° 將 LAD綁紮後30分鐘，自右股骨靜脈連續注入甲氧明 (methoxamine )溶液（5微克/公斤/分鐘）’以5微克/公斤分鐘增加曱氧明溶液之注入至該心輸出量較心臟舒張起^ 負荷前至少減少2 0 %，真該注入量最大增加至2 〇微克過 /分鐘。當心輸出量較心臟舒張超過負荷前減少至少斤時，將曱氧明之劑量降低為5微克/公斤/分鐘，以及兮:

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1263505 五、發明說明（20) 酸化林格氏溶液之注入降低為3毫升/公斤/分鐘並持續到完成實驗。當心輸出量減少至少2 0 %後之6 0至9 0分鐘，且其他血液動力學之參數達穩定時，經由插入於中十二指腸 |之插管投予試驗物質2。對照組則投予媒劑。投予試驗物質2經 3 0分鐘後心輸出量之比例與剛投予試驗物質2之前或投予媒劑組相比，係以相對值（％ )表示。 (結果）表1 4顯示該心輸出量之增加作用。表1 4.心輸出量增加作用組別劑量(微克/公斤） η 相對心輸出量，％ (平均±標準差）對照 - 15 97.7± 2.13 試驗物質2 100 15 108.7± 0.47* 試驗物質2 300 15 117·8± 2.42** 與對照組相比，*P<0. 05，**P<0. 01 (丹尼特氏試驗) 述結果顯示C 1 C-2通道開啟物可有效處理心血管系統病症

314186. ptd 第23頁 1263505 圖式簡單說明

本案無圖式 314186. ptd 第24頁

Claims

1263505 : Λ ： Μ, 秦號 91133604_fy 年+月 4 曰_^____ 六、> 請專利範圍 … 1. 一種醫藥組成物，係用於預防或治療處理消化系統失調，該醫藥組成物包括自1 3，1 4 -二氮-1 5 -S同基-1 6，1 6 -二氟-前列腺素E1及13，14 -二氮-1 5 -嗣基-1 6，1 6 -二氟-1 8 ( S )甲基-前列腺素E 1所成群組中選出之化合物作為活性成分。 2. 如申請專利範圍第1項之組成物，其中，該消化系統失調為胃潰瘍或大腸潰瘍。 3. —種醫藥組成物，係用於預防或治療處理心血管系統失調，該醫藥組成物包括1 3，1 4 -二氫-1 5 -酮基-1 6，1 6 -二氟-1 8 ( S )甲基-前列腺素E 1作為活性成分。 4. 一種醫藥組成物，係用於預防或治療處理胰臟疾病，該醫藥組成物包括13, 14-二氫-15-酮基-16, 16-二氟-1 8 ( S )甲基-前列腺素E 1作為活性成分。 5. 如申請專利範圍第4項之組成物，其中，該胰臟疾病為胰臟炎。

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