522002 A7 B7 五、發明説明（I ) 發明的背景 本發明關於一種方法，其係於哺乳動物受外科手術或 者是接受入侵性醫療方法等外傷前，利用血紅素製備物的 施與以加速痊癒或復原或降低罹病率及死亡率。 血紅素爲一種可攜氧的色素，位於紅血球中，在醫學 技藝上已被廣泛使用於治療的用途。血紅素最初被用來當 成血液的替代品以運輸或釋放氧。亦被用來治療低血壓， 出血，休克，缺血，感染，貧血，血栓形成，中風，低氧症， 惡病質，心肌阻塞及其它方面。這都是病患在呈現上述現 象後或在病患遭受創傷或傷害，或經歷外科手術後才用來 加以治療用。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請也閱讀背ώ-之注意事項再填寫本頁) 血紅素亦被施與在接受化學療法或放射性療法以治療 癌症的病人之前處理上（美國專利案號 5,428,007; WO92/20368; WO 92/20369)，預防或治療系統性低血壓或 因內生性一氧化氮產物所引起的敗血性休克上（美國專利 案號 5,296,466)，在圍手術或外科手術期間以維持患者具 有穩定的血紅素濃度上 （WO 9 5/03 06 8)，也使用於手術前 自體血液使用法中，圍手術期血液稀釋方法之一部份（美 國專利案號 5,3 44,393 及 5,4 51，205)。 爲加速接受外科或者是入侵性醫療方法者的痊癒或復 原速度，並降低罹病率及死亡率，新的療法有其存在的必 要性。 發明摘要 在本發明的目的中，値得注意的是提供加速接受外科 _3^___ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 522002 A7 B7 _ 五、發明説明（>) 手術或者是入侵性醫療方法後復原的血紅素製備物及提供 其方法。 本發明提供一種促進接受外科手術或者是入侵性醫療 方法後復原的方法，包括施與接受外科手術或者是入侵性 醫療方法之患者有效劑量的血紅素製備物。 本發明適用之進一步範疇可自下列之詳述中而明白。 然而，必須瞭解到下列詳述及實施例，其指出本發明之較 佳具體實施例，僅作爲列舉說明，對熟於此技藝人士可自 詳述中明白本發明之精神及範疇內之不同變化及修飾。 發明詳述 以下的詳述將有助於熟於此技藝人士實行本發明。但 此詳述並不可被過分地解釋局限在本發明中，經由一般熟 於此技藝人士對此處所描述之具體實施例進行之修飾及改 變並不違反本發明的精神及範圍。 本文中所引用之參考文獻的內容將倂入此處作爲參 考。 本發明是供應血紅素的製備物給接受外科手術或是入 侵性醫療方法的人類等哺乳動物。其效用是在治療方面， 即促進外科手術後的復原，這包括減少外科手術後痊癒及 復原所需的時間，並降低外科手術後的罹病率或死亡率之 可能性. 暫不考慮結合本發明中其他特別的理論，其主要的效 用有一部分是由於因血紅素所引起之預處理作用。當一病 患受到外傷（即創傷或傷害），舉例來說，因接受外科手 ____4___ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X29?公釐） (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) >裝· 訂 522002 A7 ____ Β7_ 五、發明説明（》） 術，入侵性醫療方法或意外時，該.外傷會干擾病患的生理 平衡。病患的身體自然會生物性的反應在外傷上以恢復生 理上的平衡。這種反應是一種自發性的壓力反應。如果 此壓力反應不當，或在受外傷後強烈反應，將很容易引起 身體的不適。如果能夠在病患遭受外傷前先供應血紅素的 製備物，血紅素將會在病患體內先行引起自發性的壓力反 應，以伴隨受外傷時可能會引發的生理性壓力。由於該壓 力反應是在身體受外傷前就已引發，所以體內已有所準備 以面臨生理上的壓力反應β先行給予治療可降低體內的延 遲性壓力反應，因此可加速受外傷後的痊癒及復原，並降 低罹病率和死亡率◊ 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 在此所描述的”外科手術” 一詞是指因治療疾病，傷 害，和畸形等所需而使用人工或手術的方法.一般所指的 外科方法包括，但不侷限於腹部的手術，耳部的手術，離 體的手術，心臟的手術，造形截斷術，保守性手術，美容 手術，細胞減少術，牙科手術，齒面手術，普通手術，大 手術，小手術，Moh氏手術，開心手術，器官移植手術，矯 正手術，整形手術，精神病學方面的手術，放射性療法， 重建手術，超聲，立體定位的，構造上，胸腔上和獸醫方面 所使用的手術。本發明所使用的方法適合病患於其身體 任何一部分經歷接受任何型式的外科手術上，諸如上述所 舉的例子但亦不局限在上述的範圍內，而且包括任何普通 的，大型的，小型的入侵性外科手術。 小型的入侵性外科手術包括皮膚的穿刺或切割，或將 5 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 522002 Α7 Β7 五、發明説明（+) 儀器或外來物質插入體內.非限制性之小型入侵性外科手 術的例子包括動脈或靜脈的導管插入法，經由尿道的外科 切除術，內腔鏡檢（例如腹腔鏡檢查，枝氣管鏡檢，檢尿 法，咽鏡檢法，細胞檢查法，子宮鏡檢，胃鏡檢查，大腸 鏡檢，陰道鏡檢，體腔鏡檢，乙狀結腸鏡檢及水層矯光術） 及血管形成術（例如氣球血管形成術，雷射血管形成術， 及經皮轉移的血管形成術）。 本發明所使用的方法適用於因接受各種型式的入侵性 醫療方法而引起外傷的病患。入侵性醫療方法包括，但 不侷限於一般的導管插入法（例如將導管插入體腔以抽出 或注入液體），和插管法（例如將管子插入體內的管腔或 中空的器官中）。插管法舉例而言，包括氣管，鼻腔，鼻與 氣管，口，口與氣管的插管）。 本方法所使用的血紅素有效劑量爲可縮短外科手術， 入侵性醫療方法或外傷後痊癒及復原所需的時間，或降低 外科手術或外傷後的罹病率或死亡率之可能性的劑量β 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 爲達到上述效果所使用的血紅素劑量約爲每公斤體重 10毫克至約每公斤體重 5,500毫克，較佳的劑量約爲每 公斤體重25毫克至約每公斤體重1，000毫克，最佳的劑 量約爲每公斤體重50毫克至約每公斤體重400毫克。 有效血紅素劑量的施與可以非經腸道的方式進行，就 是在術前或病人接受外科手術前或入侵性醫療方法前或遭 受其他外傷前例如，以靜脈或動脈注射，輸液或動脈導管 插入（在特定的臨床狀況下）等方法供應。血紅素有效 ____6_____ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公瘦） 522002 Α7 Β7 五、發明説明（7) 劑量的供應方式可採單一劑量，或連續多次次劑量的給 請 閱 讀 背 面~ 之 注 意 事 項 再 填 寫 本 頁 與。此單一劑量，或每一回多次次劑量的供應是採用慢 速而連續性的注射。 可經由單一劑量，或連續多次次劑量的方式供應血紅 素給接受外科手術或入侵性醫療方法或外傷的病患以縮短 痊癒或復原的時間，或降低外科手術後或外傷的罹病率或 死亡率之可能性，烘應的時間約爲外科手術前或受外傷前 約7 2小時到約1 2小時內，較佳的時間是約4 8小時到約1 8 小時內，而最佳的時間是外科手術前或受外傷前約36小 時到約24小時. 此處所使用的名詞”血紅素”包括所有含有血球素， 或類血球多胜肽及血基質的可攜氧蛋白，並且能夠運輸及 釋放氧到細胞，組織或器官中，當它被注入哺乳動物的血 液中時，爲一種與生理上相容的載體。 ”血紅素"這個 名詞包括所有自發及非自發性產生的血紅素。 "血紅素 製備物”這個名詞包括於生理相容的載體內之血紅素或是 與生理相容的載體重組之凍乾血紅素，但並不包括全血， 紅血球細胞或群狀紅血球細胞。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 自發性的血紅素包括任何與細胞中自然存在的血紅素 相同的血紅素。自發性的血紅素爲優勢野生型的血紅素， 但亦包括自發性突變的血紅素。野生型的血紅素通常位於 自然的細胞中。野生型的血紅素包括血紅素 Α，正常成 人的血紅素具有兩條 α -血球素鏈及兩條/3 ·血球素鏈。突 變的血紅素是因爲有一胺基酸序列發生至少一個以上胺基 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210Χ297公釐） 522002 A7 _ B7 五、發明説明（t ) 酸的取代，增加或缺失，因此與野生型的血紅素胺基酸序 列不同而發生的突變◊成人突變血紅素有一胺基酸序列與 血紅素 A的胺基酸序列不同。自發性突變的血紅素具有 一未經人類修飾過的胺基酸序列。本發明中所稱的自發性 血紅素並不侷限於它所產生的方法。這些代表性的方法包 括，例如，紅血球的溶解和純化，重組生產及蛋白質的合 成等。 非自發性的血紅素包括與細胞中自然存在的血紅素胺 基酸序列有別的突變型血紅素，和經化學方法修飾過的血 紅素。這種非自發性的血紅素並不局限在於它的製備方法 中，但其典型的製備方法是採用一種或數種習知技術所製 造，包括DNA的重組技術，DNA的轉植技術，蛋白質 的合成技術和其他誘導突變發生的方法。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請心閱讀背，面之注意事項再填寫本K ) 經化學修飾的血紅素是指一自發性或非自發性的血紅 素與化學物質鍵結或被化學物質包裹起來的血紅素分子。 例如一個血紅素分子可與吡哆醛-5’-磷酸鹽或其他親氧性 修飾的部份相結合以改變血紅素分子與氧鍵結的特徵，以 交聯劑形成交聯或聚合的血紅素，或以接合劑形成接合的 血紅素。接合的，聚合的或是交聯的血紅素比未經修飾過 的血紅素待在血管內的時間較長。 本發明所採用的許多血紅素修飾技術的例子在科學的 文獻上均有描述（由 R.M. Winslow於 1992年在 Hemoglobin-Based Red Cell Substitutes 上所評論，由馬里 蘭巴爾的摩約翰霍浦金大學出版）。以下將描述本發明中 __8______ 本紙張尺度適用巾國@家標準（CNS ) A4;眺（21GX297公董) " "~ 522002 A7 B7 五、發明説明（g ) 一些具代表性的化學修飾的血紅素的製備方法. 血紅素可經由修飾而促進其與氧鍵結的親和力.試劑 與血紅素分子上的 2,3-二磷酸甘油鍵結位置相鍵結，會 降低血紅素分子與氧的親和力，並延長停留在血管內的時 間，這些揭示於美國的專利案號 4,529,71 9及 5,3 80,824 (吡哆醛 5’-磷酸鹽），美國的專利案號 4,600,53 1 (含有羧 基，膦酸鹽，磷酸鹽，磺酸鹽或硫酸鹽-苯基-酯的化合物， 例如單（3,5-二溴水楊基）延胡索酸），美國的專利案號 5,268,500 (芳基尿基酸化合物），美國的專利案號 5,3 82,68〇 (2[4-(((苯甲基）胺基）羰基）苯氧基]-2_甲基丙酸）， 及美國的專利案號 5,290,803和 5,432，191。 一般而 言，經由各種方法所製備或修飾過的血紅素，只要該血紅 素可以運輸及釋放氧氣的，都適合本方法。較佳地，該血 紅素的 P5〇是介於約20到約45mmHg之間。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背Φ·之注意事項再填寫本頁} 被包裹的血紅素是一種含有血紅素的物質所組成，它 可以允許小分子進入並與血紅素反應，反應產物亦可穿透 該物質而出。用來包裹血紅素的物質在以下所列的美國 專利中均有描述，美國專利案號 4,343,71 5 (聚胺基甲酸 脂，丙烯酸膠，順丁烯二酸酐聚合物，環氧聚合物，戊 二醛聚合物，美國專利案號 5,061，68 8，5,217,648及 5,438,〇41 (油狀乳膠物），和美國專利案號 4,322,31 1， 4,324,683 及 4,390,521(聚合物 接合的血紅素至少含有一非血紅素分子與血紅素共價 鍵結或離子鍵結。在一些具體實施例中，非血紅素分子亦可 ____9______ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 522002 A7 B7 五、發明説明（斤）
在血紅素分子與血紅素分子之間形成分子內的交聯。有關 製備接合血紅素所需的接合物質及方法在 WO 91/0 7190 (聚烯基乙二醇）， 美國專利案號 4,670,4 17，5,091，176, 5,219,564, 5,234,903, 5,3 12,808 和 5,3 86,01 4， WO 94/04193，WO 94/09027 及日本專利案號 59- 104323 和 6 1-053223 (聚烯基氧化物），美國專利案號 5,349,00 1和 5，405,877 (以環狀的醯亞胺硫鹽所活化的聚烯基氧化物）， 美國專利案號 4,3〇1，144 (聚烯基乙二醇，烯基乙二醇共 聚物，乙醇聚烯基乙二醇醚聚合物，羧酸-聚烯基乙二醇醚 共聚物，及胺·聚烯基乙二醇衍生物）， 美國專利案號 4,267,234，4,267,435 和 4，369,226 (聚戊二醛），加拿大專 利申請案號 2,074,852 (二乙烯楓’)，美國專利案號 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 4,412,989 (聚醚），美國專利案號 4,377,512 (菊粉），美國 專利案號 5,〇79,337和 5，11〇,9〇9(多醣類，聚乙烯醇，聚 乙烯吡咯烷酮，聚甲基丙烯酸脂，多胜肽，聚烯基乙二醇， 羥烷基澱粉，及葡聚糖），美國專利案號 4,920，194(硫酸 葡糖胺聚糖片段，例如肝燐脂），美國專利案號 4,970, 1 56 (活性蛋白），美國專利案號 4,336,248 (雙乙醛），美國專 利案號 4,900,780 (羥烷基澱粉或聚醚塊狀聚合物），及美 國專利案號 4,698,387，4,93 5,465，和5,5 1 4,780中均有描 述。 交聯的血紅素是在分子間靠著交聯試劑連接血球素和 類血球素蛋白次單位。這種次單位物質是血紅素分子中 的血球素或類血球素蛋白。分子內的交聯可以防止當供 _10___ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 一 ~ ~ 522002 A7 B7 五、發明説明（q ) 應血紅素入體內時，血球素或類血球素蛋白的解離β舉例 來說，如果二元體之間沒有交聯的話，就會被解離成二個 α-/?血球素二元體.有關交聯血紅素及其製備方法在美 國專利案號 4,529,719和4,600,53 1 (利用二苯基酯的衍生 物做 α - α交叉聯結，例如雙（3,5-二溴水楊）延胡索酸）， 美國專利案號 4,001，401和4,053,590 ( α-T?血球素的 連接是使用鹵化環烷類，二環氧化物，和重氮聯苯胺），美 國專利案號 4,857,636 (由寡多醣所衍生的乙醛），美國專 利案號 5,334,705 (苯三碳酸鹽），WO 94/21682 (3-/?血球 素的連接是使用二或三多醣），美國專利案號 5,290,9 19 和 5,3S7,672 (二價或三價的化合物），美國專利案號 5,334,707 (召_点或3-^的連接是使用醯基磷酸酯），美 國專利案號5,362,8 85和 WO 92/09630 (亞胺酸脂，例如 二甲基adipimidate 或二甲基 suberimidate)，美國專利 案號5,514,780 (聚羧酸），美國專利案號 5,399,671和 WO 90/13309 (/5-点連結）以及美國專利案號 4,473,496 (雙醛） 中均有描述。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閱讀背•面之注意事項再填寫本頁) 聚合型的血紅素是指由血紅素和血紅素分子間相互連 接而成。聚合作用通常會增加血紅素的分子量，以增加其 在血管內的半衰期。製備聚合型血紅素所需的聚合劑在未 決的美國專利申請系列號碼 08/149,679，08/1 73,882, 0 8/480,593, 和 08/473,459， 以及美國專利案號 4,777,244 (脂肪族的雙醛），美國專利案號 5,349,054 (苯 五羧酸鹽），WO 94/14460 (反式麩胺)，和 EP 201618(戊 11 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 522002 A7 B7 五、發明説明（/ C?) 二醛）中均有描述。 血紅素亦可結合下列所述的方法加以改造，例如日本 專利案號 59-089629，59-1 03322，和 59-104323(經 ρ比咳 醛- 5’-磷酸修飾和聚乙烯乙二醇結合的血紅素），美國專利案 號 5,248,766 (以環氧乙烷相連接而形成交聯和聚合的四 元體血紅素），美國專利案號 4,650,786，4,7 10,488和 4,900,816 (以肌醛磷酸醇修飾和多醣接合的血紅素），美國 專利案號 5,1 89, 146和 5,364,9 32(以二或多醛類作爲分 子內或分子間的交叉連接），EP 361719(吡哆醛化，二羧酸 鹵-酯交聯，和聚合化），WO 90/13309 (以吡哆醛-5·磷酸 的衍生物作爲分子內的交聯，以戊二醒進行聚合作用），美 國專利案號 5,439,882 (高碘酸鹽-氧化ATP分子內的交 聯和高碘酸鹽-氧化腺苷鹽聚合作用），美國專利案號 4,826,8 1 1和5，194,590 (.吡哆醛化和戊二醛聚合作用），以 及美國專利案號 4,529,71 9(以二乙醯水楊酸酯和_哆醛化 做爲分子間的交聯）。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經重組而產生的血紅素是利用 DNA的重組技巧而製 造出來的。例如，可以使用點突變技巧，基因融合技巧，或 將以基因工程改造過的質體轉植入細菌或酵母菌等微生物 中，或轉植入昆蟲或哺乳動物或植物等的細胞中，或者是 轉植入基因工程改造的植物或動物或任何其他宿主細胞或 器官中，這些含有核酸多元體（例如 cDNA)的質體可以 編碼成血球素蛋白，融合蛋白，或類似與氧可逆鍵結的血 球素的蛋白。重組的突變物與人造的血紅素以及細胞培養 12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 522002 A7 B7 五、發明説明（/ / ) 和體液的產物在美國專利案號 5,449,759和 5,028,5 8 8, 和 WO 88/09179，AU614525，GB 2234749 B，和 EP 3 5 8708 B1中均有描述。由細菌和酵母菌中所產生的雙-α和雙 類多胜肽血球素以及其他血紅素的變體，還有其他的融合 血紅素在 WO 90/1 3645，WO 91/1 6349，ΕΡ 56 1245 Α1，和 AU 614525中均有描述。在 WO 93/0 9143 中有關於非自 發性的多型類血紅素蛋白的描述。在 WO 92/22646，WO 93/25071，和WO 95/04744中有來自轉植豬所取得的人類 血紅素生產和回收的描述。在WO 92/22646，WO93/25071， WO 95/04744，WO 95/14038，和 WO 96/15151 中有描述 衍生自紅血球及非紅血球細胞中之血紅素製備和純化的方 法。 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 ·-- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本發明中所使用的有關血紅素的方法並不會產生熱原， 毒性或其他汙染物。所謂不會產熱的血紅素是指絕對不會 產生發熱的汙染物之血紅素或者是那些雖然在受血紅素供 應的病患體內會發熱但其發熱產物是在生理可接受範圍之 血紅素。具有細菌性內毒素汙染的血紅素主要衍生自紅血 球。當紅血球被分解以獲取血紅素時，會釋放出內毒素。 重組的血紅素是由非紅血球宿主細胞所製造，例如細菌會 汙染細胞內的組成物，如蛋白質，毒性物質或多醣類等， 當其進入哺乳動物體內時會釋放出毒性物質或產熱反應 (Rietschel e t al. (1992) Scientific American 267:54-61;
Suffredini et al.( 1989) New Eng. J. Med. 321:280-287 卜 本發明中所採用的血紅素是無基質的。基質是一種不 _^_1_3__ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） '~ 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 52^002 A7 ____ B7__ 五、發明説明（f V) 可溶的細胞膜片段，會汙染紅血球解離後所產生的血紅素， 具有毒性，根據報告指出會引起呼吸困難，支氣管痙攣， 低血壓，心律不整，散佈性血管內的凝集，補體的活化， 以及腎臟方面，心臟方面和肝臟方面相關的缺血和急性發 炎 (Feola ( 1988) Surgery, Gynecoloogy & Obstetrics 166:211-222; MacDonald et al. (1988) F.A.S.E.B. J. 2(6) Abstr. 8 2 17; Stone et al. (1979) Surgery, Gynecology & Obstetrics 149:874-876; Rabiner et al. (19 6 7) J. Exp. Med. 126:1 127-1 142)。本發明在此處所提的”無基質的血紅素” 是指完全不具基質的血紅素或是病患生理上可接受範圍內 的基質濃度之血紅素（即不會引起不良副作用的情形 下）。完全不具基質的血紅素包括由非紅血球所生產的重 組血紅素。而含有生理上可接受基質濃度的無基質血紅素 包括，例如，由紅血球純化而得的血紅素等。以半透膜滲 析或交換法將血紅素超微濾法過濾爲生理上可接受的溶液， 較佳的範圍是約介於 1至約20 g/dl間的血紅素。此溶液 一般而言包括與全血等張的，並且爲生理上可接受的電解 液載體，具有可逆式攜氧及運輸氧氣等血紅素的特質。所 謂生理上可接受的溶液，例如生理食鹽水，食鹽和葡萄糖 的混合物，林格氏液，含乳糖的林格氏液，洛克-林格氏液 (Locke-Ringer’s solution)，克伯林格氏液 （Krebs-Ringer’s solution)，哈特曼平衡食鹽水 （Hartmann’s balanced saline), 肝燐脂鈉檸檬酸鹽-檸檬酸-葡萄糖 溶液 (heparinized sodium citrate-citric acid-dextrose _14 _ ^紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） ： (請先閲讀背*面之注意事項再填寫本頁) •裝· 訂 522002 A7 B7 五、發明説明（G) solution)，以及聚合血漿的替代品，例如聚乙烯氧化物 (polyethylene oxide),聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇和乙烯 氧化物-丙二醇濃縮物。這些溶液可以非經腸道的方式提 供，例如由靜脈或動脈血管注入或輸入，而不會有不良副 作用產生。血紅素可以被冷凍乾燥以利儲存，也可以在使 用前解凍。製備這溶液或製備成冷凍乾燥粉末的方法在文 獻上均有記載。 本方法所採用的血紅素較佳是與雙（3,5-二溴柳）-延胡 索酸以加速延胡索酸在二個 α次單位 （DCLHbTM，由 Baxter Healthcare，Deerfield, Illinois 所製造）間的交聯。 這種交聯的血紅素及其製備方法在美國專利案號 4,598,064，4,600,53 1，和 RE 34,271 中有詳盡的描述，但 省略了色層分離的步驟。這種血紅素較佳是在美國專利案 號 4,831，012，4,861，867，5，1 28,452 和 5,281，579 以及 美國專利申請系列案號 07/207,346中所描述的條件下製 造。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先k讀背也之注意事項再填寫本頁) 實際上，較佳的及適用於本發明的 DCLHbTM溶液是 由Baxter Healthcare股份有限公司所生產，在平衡的電解 液中含有經修飾過的10 g/dl之四元體血紅素。該產物來 自志願贈與者的紅血球細胞，該志願者必須是經檢驗爲 HbsAg，HIV-1和2以及HCV爲陰性者。在製造生產的 過程中，紅血球細胞會經由滲透作用被解離而釋放出血紅 素。經超微過濾後，無基質的血紅素會與二乙醯水楊酸交 聯試劑反應而產生穩定的四元體血紅素，該四元體血紅素 _15_ 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 522002 A7 B7 五、發明説明（[4 ) 具有反-丁烯乙酸的一部分以連接二個α次單位。在交聯後， 將該反應混合物加熱使病毒去活化並使外來的蛋白質沈澱. 經由過濾將沈澱物移除。然後將 DCLHbTM濃縮並經由滲 濾作用置入生理電解質載體。最後產生的溶液與全血爲等 張，膠體滲透壓（將近40陶爾），其組成如表一所示. 表一 1 0%二乙醯水楊酸交聯的血紅素溶液之化學成份分析
血紅素的含量 10 g/dl 膠體滲透壓 43 mmHg 體積滲摩爾濃度 290 mOsm/L 酸鹼値 (pH) 7.4 @ 37 °C 鈉離子 (Na+) 145 mEq/L 鉀離子 (K+) 4 mEq/L 鈣離子 (Ca+) 2.3 mEq/L 鎂離子 (Mg++) 0.9 mEq/L 氯離子 (C1-) 115 mEq/L 乳酸鹽 (Lactate) 34 mEq/L 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先閲讀背Φ-之注意事項再填寫本頁) _16 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 5^2002 A7 B7 五、發明説明（ιΓ) 如上所述，本發明將可在許多方面獲得証實。該變化 並未背離現有發明的精神和範疇，而且所有的修飾及替代 物對習於此技藝人士顯而易見並且將包含於下列申請專利 範圍的範疇内。 (請先，閲讀背£7-之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X 297公釐）