TW448168B - Tetrahydrofurans - Google Patents

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4 4 816 3 Α7 Β7 五、發明説明（） 技術領域 本發明為有關可當作翳藥品之具有制癌作用等生理活 性之新穎四氫呋喃類，又有闊該化合物之製法。 習知技術 以往臨床療法所用之藥物有烷化劑，代謝抑制劑，植 物鹼等制癌劑，抗生物質，免疫促進劑，免疫調節劑等 多樣分岐，但這些之藥物療法仍未完成。 欲解決之課題 本發明之目的為開發具有制癌作用等生理作用且安全 性髙之新穎化合物i提供該也合物之製法及其醫藥組成 物。 解決課題之手段 本發明之第一發明為有關如下式〔I〕2,5 -二羥基四 氫-2-呋喃甲酸或其光學活性體或其鹽。 (諳先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 丁 0

0H COOH 經濟部中央標準局員工消費合作杜印製 本發明之第二發明為有關如式〔I〕2, 5 -二羥基四氫 -2 -呋喃甲酸或其光學活性體或其鹽之製法，其特徵為 將選自下列（a), (b)之至少一種化合物加熱處理之工程 U)葡萄糖醇類（glucaric acid)或葡萄糖醇酸衍生物 (b)含葡萄糖醇酸及/或葡萄糖醇酸衍生物之化合物。 本發明之第三發明為有關如式〔I] 2, 5 -二羥基四氫 -2 -呋喃甲酸或其光學活性體或其鹽所選出之化合物為 有效成分之醫藥。 本發明之第三發明之適宜態樣中醫藥為制癌劑。 圖面之簡單説明 —3 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4纟見格（210Χ297公漦） 448168 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ ) 1 1 第 1 圖 乃 示 葡 萄 糖 二 酸 (S a c c h a r i c a c i d) 之 酸 性 下 加 1 1 熱 處 理 物 之 細 胞 白 滅 (a P 〇 P t os e s )誘發作用。 1 I 第 2 圖 乃 示 D- Μ 萄 糖 二 酸 1 , 4 - 内 酯 之 加 熱 處 理 物 之 細 請 1 I 胞 白 滅 誘 發 作 用 〇 先 閲 讀 1 1 第 3 圖 乃 示 2， 5 - 二 羥 基 四 氫 -呋喃甲酸之質譜。 i & 1 I 之 第 4 圖 乃 示 2 , 5- 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸之I Re 注 意 1 I 第 5 圖 乃 示 2 , 5 - 二 翔 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸之1 Η -K HR 〇 事 項 I | 再 1 第 6 圖 乃 示 2 , 5 - 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸之L 3 C - K HR 填 ·-' 1 本 袈 發 明 之 實 施 形 能 I 、* 1 I 葡 萄 糖 醇 酸 也 稱 葡 萄 糖 二 酸 » 以 分 子 式 C e Η ID 〇 8 (分 1 1 子 量 2 1 0 . 14 )表 7K， 僳將D -襬萄糖及含它之寡糖或多糖 1 I 以 硝 酸 等 氣 化 而 得 之 二 羧 酸 > 也 可 由 D- 葡 萄 糖 m 酸 之 溴 1 1 訂 1 水 來 氧 化 而 得 〇 又 可 從 印 度 橡 m 樹 之 乳 液 中 以 m 鹽 萃 出 〇 m 萄 糖 醇 酸 衍 生 物 有 葡 萄 糖 醇 酸 tap .甲 内 酿 1 葡 萄 摘 赌 醇 酸 1 I 二 内 酯 y Μ 萄 糖 醇 酸 酯 * 萄 糖 醇 醯 胺 > 鹽 類 等 ί 由 加 1 1 熱 處 理 而 生 成 式 C I〕 2 ,5 -二羥基四氫- 2 - 呋 喃 甲 酸 者 均 1 1 包 括 在 本 發 明 〇 本 發 明 之 2 , 5 - 二 羥 基 四 氬 -2 -呋喃甲酸 I 在 2 位 及 5 位 有 二 個 不 對 稱 t 但 本 發 明 之 2， 5 - 二 羥 基 1 1 四 Μ •1 -呋喃甲酸包括所有四種異構物， 即（ 2 S 1 5 S )體 [ » (2 S， 5 R) m 歷 » (2 R , 5 S ) 體 及 (2 R , 5 R) 體 〇 葡 萄 糖 醇 酸 | 内 酯 有 1 , 4 - 早 内 酯 y 3 , 6 - act 早 内 酯 » 1， 4- 3， 6 - 二 内 酯 可 1 1 用 這 内 酯 0 1 I m 萄 糖 醇 酸 酯 有 如 甲 酯 ， 乙 酯 等 9 可 從 葡 ρ 糖 醇 酸 製 1 造 〇 又 可 由 m 胺 化 來 製 造 醯 4 胺 化 合 物 » 此 醯 胺 化 物 也 可 1 1 1 1 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公# ) A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ ) 1 1 用 於 本 發 明 〇 1 [ 含 有 葡 萄 耱 醇 酸 之 化 合 物 可 例 如 將 多 糖 氣 化 而 以 中 間 1 [ 物 質 獲 得 > 含 有 葡 萄 糖 醇 酸 衍 生 物 之 化 合 物 9 如 含 有 m 請 [ I 萄 耱 Tfn 醇 酸 内 酯 之 化 合 物 9 含 有 m 萄 糖 醇 酸 酯 之 化 合 物 9 閱 1 I 讀 1 I 含 有 葡 萄 糖 醇 醯 胺 之 化 合 物 也 可 分 別 製 造 〇 背 1 I 之 本 發 明 中 葡 萄 糖 醇 酸 或 其 衍 生 物 9 含 有 葡 萄 据 醇 酸 及 注 意 1 \ / 或 其 衍 生 物 之 化 合 物 只 要 其 加 熱 處 理 物 中 生 成 式 c η 事 項 1 ] 再 1 \ 2， 5 — 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸則無特定。 填 ) 本 發 · 本 裝 明 中 加 熱 處 理 方 法 乃 將 選 白 葡 萄 iftfe 醇 酸 或 其 衍 生 頁 1 I 物 j 含 有 m 萄 糖 醇 酸 及 / 或 其 衍 生 物 之 化 合 物 > 例 如 在 1 1 酸 性 中 性 下 » 室 溫 4 0 0。。， 數秒〜數曰。 宜5 0〜2 0 o°c ! | 9 數 秒 2 4小 時 之 加 熱 處 理 之 方 法 » 由 此 方 法 得 含 有 2 , 1 1 訂 1 5- h~l 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸之加熱處理物。 加 熱 處 理 時 之 PH * 原 料 之 濃 度 只 要 為 其 加 熱 處 理 而 生 1 I 成 2， 5 - 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲..酸之範圍内則無特定， 考 1 1 量 操 作 性 及 産 等 來 設 定 卽 可 0 1 1 本 發 明 中 加 熱 處 理 不 拘 濕 式 或 乾 式 加 熱 均 可 7 但 從 本 ) I 發 明 之 2， 5- 二 羥 基 四 氮 -2 -呋喃甲酸之生成效率而言， 1 以 濕 式 加 熱 較 佳 Ο 濕 式 加 熱 可 用 水 蒸 氣 加 熱 9 水 蒸 氣 加 I 壓 加 熱 9 加 壓 式 加 熱 等 任 意 濕 式 加 熱 方 法 〇 乾 式 加 熱 可 I 用 由 乾 燥 熱 風 之 直 接 加 熱 法 9 從 熱 源 經 隔 壁 加 熱 之 間 接 1 1 加 熱 法 等 Ο 直 接 加 熱 方 法 有 氣 流 乾 熱 法 » 噴 乾 熱 法 等 1 I 9 間 接 加 熱 法 可 用 鼓 乾 燥 法 等 〇 [ | 加 熱 處 理 物 中 生 成 有 細 胞 5 白 滅 誘 發 作 甩 9 癌 細 胞 增 殖 1 t i 1 i 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公犮） 4 4B1 6 8 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ 4 ) 1 I 抑 制 作 用 9 抗 m 作 用 等 之 物 質， 隨目的 而改變PH 時間 1 1 y 濕 度 ， 原 料 MW 痕 度 等 加 熱 處 理條 件，則 可調製含所望物 1 | 質. 而 有 細 胞 白 滅 誘 發 作 用 > 癌細 胞增殖 抑制作用，抗菌 請 1 | 作 用 等 之 加 熱 處 理 物 〇 先 閲 I | 讀 1 [ 本 發 明 之 2 , 5 - 二 羥 基 四 氫 -2-呋喃甲酸或其光學活性 背 面 1 I 之 體 其 鹽 具 有 強 力 抑 制 癌 細 胞 增殖 活性， 可以此活性為指 意 1 I 標 » 將 2 , 5 - 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸或其光學活性體或 事 項 1 1 再 1 其 鹽 從 加 熱 處 理 物 中 精 製 αια 単 離。 此精製 單離手段可用化 ύ 學 方 本 裝 法 物 理 方 法 等 習 知 之 精製 手段， 將凝膠過濾法， 頁 ! I 分 子 量 分 割 膜 之 分 割 法 5 溶 劑萃 取法， 分備法，用離子 1 1 交 換 樹 脂 等 之 各 種 層 析 法 等 習知 之精製 法予以組合來精 1 I 製 CTD 早 離 反 應 生 成 物 中 之 2 , 5- 二羥 基四氫 -2 -呋喃甲酸或 I ! 訂 1 其 光 學 活 性 體 〇 例 如 將 葡 萄 糖 醇 酸 在 12 1 °C反應4小時，使在反應液 1 I 中 生 成 式 C I〕 2 ,5 -二羥基四氫- 2-呋喃 甲酸或其光學活 1 1 性 體 9 而 施 行 含 此 衍 生 物 之 反應 生成物 之逆相柱層析， 1 1 則 可 精 製 CIO 早 離 2， 5- 二 羥 基 四 氫-2 -呋喃甲酸或其光學活 ^ I 性 體 Ο 1 1 本 發 明 化 合 物 也 可 由 a -酮葡萄糖醇酸半醛之加水反 | m Tt1M 而 得 知 〇 該 a -酮葡萄糖醇酸半醛可依習知方法製得 I c J . Ba c t • 9 第 1 1 6卷， 第1 4 6 4 〜1 3 5 4 頁（ 1973)] 0 1 1 將 所 an 早 離 之 2 , 5 - 二 羥 基 四 氫-2 -呋喃甲酸予以光學分 1 I 劃 » 得 ㈠2 ，5 -二羥基四氫- 2-呋 喃甲酸 及（〇 2，5-二羥 [ I 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸。 - 6 - 1 1 1 i 1 i 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4规格（210X297公釐）

4 4 8 1 B B ;·；· A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ Γ ) 1 1 或 其 光 學 活 性 體 之 分 離 可 藉 m 旋 混 合 物 之 機 械 分 剃 1 1 優 先 析 晶 法 » 以 非 對 映 體 鹽 或 色 接 化 合 物 結 晶 化 之 依 分 1 I 剷 酵 素 徹 生 物 之 動 力 學 分 割 * 依 層 析 之 分 割 等 〇 請 1 依 層 析 之 分 割 可 甩 氣 JUtr 腊 層 析 9 液 體 層 析 9 薄 層 層 析 等 先 閲 1 I 讀 1 I 0 可 使 用 各 適 合 之 對 掌 固 定 相 〇 背 面 1 ! 之 依 液 體 層 析 之 光 學 分 割 可 用 對 掌 性 固 定 相 之 方 法 9 用 注 意 i 對 掌 性 溶 離 液 之 方 法 » 以 非 對 映 體 分 離 等 〇 事 項 1 ] 再 1 \ 對 掌 性 固 定 相 可 用 醒 胺 % 固 定 相 尿 糸 固 定 相 配 體 填 ) 交 換 型 固 定 相 寫 装 » 多 糖 及 多 糖 衍 生 物 固 定 相 » 蛋 白 質 固 定 頁 、_·〆 1 1 相 聚 甲 基 丙 烯 酸 酿 固 疋 相 9 聚 甲 基 丙 烯猶 胺 固 定 相 等。 1 i 溶 離 液 可 用 己 烷 % 9 醇 糸 r 水 (缓衝液） 糸 等 f 與 上 述 1 | 画 定 相 組 合 而 適 田 地 使 用 〇 1 1 訂 1 本 發 明 之 2， 5 - 二 羥 基 四 氮 -2 -呋喃甲酸或其光學活性 體 之 鹽 有 醫 藥 容 許 鹽 t 例 如 鹼 金 靥 鹽 » 鹼 土 金 屬 鹽 » 舆 1 1 有 機 鹼 之 鹽 等 * 可 依 習 知 方法 轉 換 〇 1 1 本 發 明 之 2 , 5 ^ 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸或其光學活性 1 i am 體 或 其 鹽 具 有 癌 細 胞 增 殖 抑 制 作 用 9 細 胞 白 滅 誘 發 作 用 ,J I 0 抗 菌 作 用 等 藥 理 作 甩 可 以 此 等 為 有 效 成 分 製 造 對 如 I 1 癌 及 感 染 症 之 防 治 醫 藥 0 I 即 本 發 明 之 2 , 5 - 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸或其光學活 I 性 體 或 其 鹽 具 有 對 如 人 前 骨 m 性 白 血 病 細 胞 HL -6 〇 , 人 1 急 性 淋 巴 m 球 性 白 血 病 細 胞 HO L I -3 » 肺 細 胞 A- 5 4 9 , 1 S V 4 0 轉 形 肺 細 胞 ff I -3 8VA1 3 , 肝癌細胞Η ep G 2 , 結腸癌 1 I 細 胞 HC T 11 6 , 人結腸癌細胞SV480 -7 - 人 結 腸 癌 細 胞 Wi Dr 1 ! 1 1 1 1 本紙張尺度適用t國國家標準< CNS ) A4規格（2】〇X297公釐） 經濟部中央標準局負工消費合作杜印製 44816b A 7 B7 五、發明説明（P ) ，胃癌細咆AGS,脊髄瘤細胞等癌細胞有細胞増殖.抑制 作用，可製造以本發明之2,5 -二羥基四氫-2-呋喃甲酸 ，其或其光學活性體或其鹽所選出之化合物為有效成分 之制癌劑。 以本發明之2,5 -二羥基四氫-2-呋喃甲酸，或其光學 活性體或其鹽所選出之化合物為有效成分，將其與習知 之醫藥用載體配合來製劑化，則可製造制癌劑，細胞自 滅誘發劑，抗菌劑等藥劑。藥劑，如制癌劑之製造一般 將2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸，或其光學活性體或其 鹽所選出之化合物與藥學容許之液狀固體之載體配合， 必要時加溶劑，分散劑，乳化劑，緩衝劑，安定劑，賦 形劑，粘合劑，崩散劑，滑澤劑等而作成如錠劑，顆粒 劑，散劑，粉末劑，瞜囊等固形劑；如液劑，懸浮液， 乳液等液劑〇也可製成乾燥品而用前加適當載體來作成 液狀。 翳藥用載體可依上述投與形態及劑型來選擇。口服劑 時可用如殺粉，乳糖，白糖，甘露糖，羧甲基纖維素， 玉米澱粉，無機鹽等。當調製口服劑時，可更配合粘合 劑，崩散劑，界面活性劑，潤澤劑，流動性促進劑，矯 味劑，著色劑，香料等。 若為非口服劑時，可依常法將本發明之有效成分2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸，其或其光學活性體或其鹽所 選出之化合物溶解或懸浮於當作稀釋劑之注0用蒸餾水 ，生理食鹽水，葡萄糖水溶液，注射用植物油，胡麻油 -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2丨OX297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ,策- 丁 -5

4 4 8 1 6 L A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ ) 9 花 生 油 * 大 豆 油 9 玉 米 油 » 丙 二 醇 聚 乙 二 醇 等 S 必 I 1 要 時 加 殺 菌 劑 〇 安 定 劑 > 等 張 化 劑 7 無 痛 化 劑 等 來 調 製〇 1 I 本 發 明 之 制 癌 劑 乃 以 適 應 製 劑 形 態 之 適 當 投 與 途 徑 投 請 1 [ 與 〇 投 與 方 法 也 無 特 定 可 内 服 外 用 及 注 射 〇 注 射 劑 先 閲 I | 讀 1 [ 可 在 如 靜 脈 i 肌 肉 皮 下 t 皮 内 等 投 與 外 用 劑 也 包 括 背 δ I | 之 坐 劑 等 〇 注 意 i 1 制 癌 劑 之 投 與 量 乃 依 製 劑 形 態 y 投 與 方 法 使 用 目 的 事 項 1 ΐ . 再 1 及 適 用 之 患 者 之 年 齡 體 重 症 狀 而 適 田 地 設 定 9 雖 非 本 袈 —1 定 9 但 —- 般 在 製 劑 中 含 有 之 2 , 5- 二 羥 基 四 m -2 -呋喃甲 頁 ί 1 酸 » 或 其 光 學 活 性 體 或 其 鹽 所 選 出 之 化 合 .物 之 量 為 成 人 I 1 每 曰 0 . 1 M g 2 0 0 m g / k g 〇 當 然 投 與 量 乃 依 種 種 條 件 而 變 1 i 動 » 有 bb 上 述 投 與 量 少 之 情 形 9 也 有 超 過 此 範 圍 之 情 形 1 訂 〇 本 發 明 之 藥 劑 除 就 此 P 服 之 外 9 也 可 加 入 任 意 飲 食 品 1 中 而 曰 常 攝 取 〇 1 1 本 發 明 之 2 , 5- 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸， 或其光學活 1 1 性 體 或 其 鹽 可 從 Μ 萄 糖 醇 酸 有 效 地 製 造 0 除 制 癌 活 性 之 1 ! 外 » 尚 有 癌 細 胞 分 化 誘 m 活 性 9 細 胞 g 滅 誘 發 活 性 > 抗 -..v 1 菌 活 性 等 生 理 活 性 而 可 當 作 醫 藥 〇 ! 1 本 發 明 之 2 , 5- 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸也可由ί X - _ 葡 -j I I 萄 糖 醇 酸 半 m 之 加 水 反 應 而 得 9 以 a -酮葡萄糖醇酸半 I m 為 有 效 成 分 投 與 而 轉 變 成 2 , 5- 二 羥 基 四 氣 -2 -呋喃甲 1 1 酸 之 醫 藥 也 包 括 在 本 發 明 之 醫 藥 〇 1 I 本 發 明 之 2 , 5 - 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸， 其或其光學 1 I 活 性 體 或 其 m πττ 具 有 制 癌 作 用 9 y 細 胞 自 滅 誘 發 作 用 等 生 理 1 1 1 1 1 1 本紙張尺度適用中國國家標隼（CMS ) A4規格< 210X297公麓） 五、發明説明（牙 ΑΊ B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 可或 或得制合 的非 g 變形品 進飲 菌之，如 依 料品 \ 所抑配 目雖 h 而情食 增或 抗狀用有 可 飲食 及理殖， 用，曰件之飲 或品 之粒使法。劑 或之 酸處增分 使定每條圍意 劑食 物顆合方等腐 品能 醇熱胞成。，設人種範任 菌於 理，混之乾，.防 食機 糖加細效藥..法地成種此入 抗加 處狀物燥凍或 之理 萄物癌有醫方當為依過加 作添 熱 Η 加乾，劑 成生 葡合，為等與適量乃超可 當當 加脆添。燥菌 而等 有化用物劑投而之量有也 可可 C 逑，他狀乾抗 釋性 含種作理癌，狀分與也， 而又用上狀其粒空之 稀發 ，一發處制態症成投，外 ，。使有末與顆真分 或誘 物少誘熱成.形，效然形之.性劑法含粉或，，成 \ 滅 生至滅加作劑重有當情服 菌腐方，，性狀燥效 及自 衍之自該可製體含。之口 抗防之時狀作片乾有 加胞 其出胞以則依，中Big少此 有之腐料糊操脆式為 添細 或選細，，乃龄劑00量就 具性防飲，易-棚處 ,， 酸物有等體量年製~2與除 物存料或狀童狀，理 有性 醇合具用載與之在 G 投劑。理保飲品液考末燥處 含癌 糖化物作用投者般E1述藥取處之或食為若粉乾熱 _ \且 其制 萄之理菌藥之患一 上之攝熱料品於可。成式加 將有 葡物處抗醫劑之但6,比明常加飲食加狀狀燥鼓述 ，具。自生熱，之癌用 ，om有發日逑或使添形形乾，上 用作料將衍加用知.制適定10，本而上品來若之何宜乾以 作當飲 其之作習 及一 ~動 。中 食料 劑任則噴 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 本纸張尺度適用中國0家標準（CNS ) Λ4規格（210X29"?公釐） A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ ) 業 者 習 知 之 任 何 方 法 製 造 * 其 製 造 時 > 可 適 當 添 加 製 劑 1 1 上 容 許 之 習 知 添 加 物 9 如 賦 形 劑 t 安 定 劑 -» · 朋 散 劑 4 粘 1 1 合 劑 > 助 溶 劑 等 也 可 併 用 乙 醇 » 乙 酸 鈉 > 抗 壞 血 酸 > 請 1 j 甘 油 脂 肪 酸 酯 食 鹽 ， EDTA等抗_物質 〇 先 m 讀 I 1 | 上 述 加 熱 處 理 物 對 食 品 或 飲 料 之 添 加 量 乃 依 食 品 或 飲 背 ιέ 1 | 料 之 種 類 而 異 S 添 加 對 hftg- 應 其 g 的 之 量 即 可 〇 冬 t Ί I 以 上 述 加 熱 處 理 物 為 有 效 成 分 之 抗 閡 劑 之 使 用 方 法 乃 事 項 再 1 Λ 於 食 品 或 飲 料 以 適 當 方 法 添 加 〇 添 加 方 法 無 特 定 > 只 要 寫 ) 以 任 何 方 法 使 上 述 加 熱 處 理 物 含 在 食 品 或 飲 料 即 可 Ο 故 本 頁 '—， 1 1 在 抗 m _ 之 使 用 〇 添 加 乃 包 括 使 上 逑 加 熱 處 理 物 含 在 食 1 1 品 或 飲 料 中 之 任 何 方 法 〇 通 常 之 方 法 乃 於 食 品 或 飲 料 之 1 I 製 程 中 添 加 4 但 也 可 用 於 含 上 逑 加 熱 處 理 物 之 溶 液 浸 漬 1 食 品 —* 定 時 間 之 方 法 Ο 又 可 併 用 食 品 中 添 加 之 方 法 及 浸 訂 1 漬 方 法 0 適 合 浸 漬 方 法 之 食 品 為 水 中 也 不 崩 形 之 食 品 9 1 1 如 魚 % t 熱 狗 等 魚 畜 肉 捏 製 品 > 煮 麵 等 麵 類 冷 凍 前 之 I 1 蝦 9 貝 魚 類 等 冷 凍 食 品 等 〇 i 1 以 上 述 加 熱 處 理 物 為 有 效 成 分 之 抗 菌 劑 當 作 防 腐 m J I 則 可 更 提 高 食 品 或 飲 料 之 保 存 性 〇 在 冷 凍 食 品 或 凍 凍 果 I 1 等 能 於 冷 凍 刖 之 加 工 工 程 抑 制 污 染 徹 生 物 之 增 殖 可 獲 *» 1 1 衛 生 上 極 佳 之 結 果 〇 以 上 述 加 熱 處 理 物 為 有 效 成 分 之 抗 I 菌 劑 兼 具 革 蘭 陽 性 及 陰 性 細 胞 雙 方 效 果 例 如 甲 基 青 徽 1 1 素 耐 性 黃 色 m 萄 球 m 之 除 菌 J 腸 出 血 性 大 腸 菌 0 - 1 57等 1 i 食 物 中 毒 病 原 m 之 感 染 預 防 極 為 有 用 0 1 j 上 述 抗 菌 劑 對 齲 穿 菌 及 牙 周 病 菌 也 有 抗 菌 活 性 > 提 供 1 1 -1 1- 1 1 [ i 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2l〇X 297公；i ) 6

Q A7 B7 五、發明説明（β ) 含上述抗菌劑之口内用劑，其形狀可為液狀，苷狀等習 知之形狀ο 口内用劑有刷牙劑，可為液狀，赍狀或粉末 狀等習知之刷牙劑之形狀。刷牙劑中上逑加熱處理物之 含量無特限，只要含有對齲齒菌及牙周病菌有效之濃度 卽可。刷牙劑中可添加習知之添加劑，如濕潤劑，界面 活性劑，粘合劑，香料，甜味料等。 食品或飲料中含有上逑加熱處理物，則可製造細胞自 滅誘發用之食品或飲料因具有該加熱處理物之種種生 理活性，細胞自滅誘發作用，制癌作用，抗菌作用等， 故為具有防癌，制癌效果之細胞異常增殖性疾病用健康 食品或飲料，對維持活體之恆常性，尤其胃腸健康維持 有用之食品或飲料。又上述加熱處理物作為食品或飲料 之添加劑，尤其食品或飲料用防腐劑極為有用。 本發明之2,5 -二羟基四氫-2-呋喃甲酸，或其光學活 性體或其鹽，或上逑加熱處理物對小白鼠口服生理活性 有效量仍未見毒性。 實施例 玆舉實施例説明，但本發明不限於這些實施例，實施 例中％乃指重量％。 經濟部中央標隼局員工消費合作社印製 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 實施例1 (1)將D-葡萄糖二酸鉀（Nakaraitex公司製，304-02)溶 解於IN HC1呈10mg/ml，加熱121°C 3Q分，在鹽酸酸性 下調製加熱處理物。次以NaGH調為PH7.0,稀釋成5mg/ml ，對人前骨髓性白血病細胞HL-6[)之細胞自滅誘發活性 ^12" 本紙張尺度適用中國國家標率（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 〇 A7 B7 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（ U ) 1 測 定 如 下 〇 1 1 在 含 5 6°C 處 理 3 0 分 之 牛 胎 血 清 (Gibbco公司製）10%之 1 I RP Μ I 1 6 4 〇培養基（ 曰 水 公 司 製 造 )在3 7°c培養之HL-6M 請 1 | AT C C C C L -2 4G )在含1 0 %牛眙血清之R Ρ Η I 16 4 0培養基懸 閱 讀 1 1 浮 成 2 . 5 X 1 〇 5 値 / 4 .5 m 1 〇 背 面 1 I 之 對 此 懸 浮 液 4 . 5 m 1加前述鹽酸酸性下加熱處理物溶液 注 意 1 I 0 , 5 m 1 , 在3 7°C , 5 % C0 2 下 培 養 1M、 時。另 為確認，將 事 項 1 再 1 -·\ 以 細 胞 白 滅 誘 發 試 劑 悉 知 之 放 線 徽素 D (細馬 公司製）水 填 : 袈 溶 液 (〇 .1 mg/ ml )〇 .0 5 m i及生理食鹽水〇 . 4 5 m 1代替前述 頁 1 ! 酸 性 下 加 熱 處 理 物 溶 液 進 行 同 樣 培養 〇 1 1 將 培 養 細 胞 在 光 學 顯 撤 鏡 下 觀 察， 確認在 鹽酸酸性下 1 I 加 熱 處 理 物 溶 液 及 放 線 徽 素 D 添 加培 養細胞 中核之凝縮 1 1 訂 1 > 細 胞 之 縮 小 f 細 胞 白 滅 小 體 之 形成 及細胞 增殖抑制作 用 C 在 對 照 之 生 理 食 鹽 水 ί 0 . 5M NaC 1水（與 PH諏整後稀 1 I 釋 之 鹽 酸 酸 性 下 加 熱 處 理 物 同 等 之鹽 濃度)及葡萄糖醇酸 1 1 鉀 鹽 之 未 加 熱 物 0 . 5ml添加培養細胞則無這些現象。 1 1 (2 ) 在 D- m 萄 糖 二 酸 鉀 在 水 溶 解 為It) nt g / ία 1 , 貝 IJ Ρ Η 3 . 9 5 0 一) I 將 此 加 熱 12 1°C 3 0 分 則 PH4 . 1〇 此酸性下加熱處理物 1 1 之 PH以 Na 0H 調 為 PH Ί · 0後， 彷實施例1 -⑴測 定對H L-6 0 I 細 胞 之 細 胞 g 滅 誘 發 活 性 及 細 胞 增殖 抑制活 性，結果本 I 試 料 兼 具 兩 活 性 〇 1 1 此 結 果 如 第 1 圖 > 卽 第 1 圃 乃 示於 HL-60細胞培養液 1 | 添 加 葡 萄 糖 二 酸 之 酸 性 下 加 熱 物 為1 in g / m 1 時 之培養時間 1 I 與 培 養 液 中 活 細 胞 數 之 關 俗 ， JJt 惯 軸為 培養時 間（小時）， 1 [ -1 3 - ! ί i 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規掊（210X2W公楚）

4481 6 G ' A7 B7 五、發明説明（a ) 縱軸為培養液中活細胞數（x 10s個/ 5ml)。第1.圖中 白四方（口）為無添加試料（對照 >,白菱形<◊)為葡萄糖 二酸之酸性下加熱處理物添加。 (3) 將D-葡萄糖二酸1,4-内酯一水合物（Nakaleitex公司 製，304-35)溶在 IN HC1 成 10mg/ml,加熱 121°C 30 分來 調整鹽酸酸性下加熱處理物。次以NaOH調為PH7.Q,稀 釋成5mg/ml,仿實施例1-(1)測定對HL-60細胞之細胞自 滅誘發活性及細胞增殖抑制活性，結果本試料兼具兩活 性。但未加熱之D-葡萄糖二酸1,4 -内酯則無活性。 (4) D -葡萄糖二酸1,4 -内酯一水合物溶在水（lOmg/iDl) ，以N a 0 Η調為p Η 7 · 0後，加熱1 2 1 °C 3 0分則P Η 4 . 3。次以 NaOH調為ΡΗ7.0後，仿實施例1-(1)測定對HL-60細胞之 自滅誘發活性及細胞増殖抑制活性，結果本試料兼具兩 活性。未加熱D-Μ萄糖二酸1，4-内酯則無活性。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 ^^1 ^^^1 i 111 -i -11-......'^^^1 ^^^1 ^^^1 UK —^—J Hi \ ' Γ .¾ 、V5 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 結果如第2圔，乃示於H k-60細胞之培養液加D -葡萄 糖二酸1,4 -内酯之加熱處理物1 mg/ ml時之培養畤間與 培養液中活細胞數之關僳，横軸為培養時間（小時），縱 軸為培養液中活細胞數（Xl〇s値/5ml)。第2圖中自 四方（口）為無添加試料（對照），白菱形（◊)為添加D -葡 萄糖二酸1,4 -内酯加熱處理物。 (5) D -葡萄糖二酸鉀lQrag/ml溶在水則pH 3.95。將此加 熱1 2 °C 3 0分，1 , 2 , 4及1 6小時。將各加熱物及未加 熱物調為PH 7左右後，以fl.2 2# m濾器滅菌來調製細胞自 滅誘發活性及細胞增殖抑制活性測定用之試料，而稀釋 — 14" 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公处） ,44816 6 A7 B7 五、發明説明（β ) 2, 5, 1 0 , 2 0, 5 0及100倍，對人前骨髓性白血病細胞 H L-6Q細胞測定細胞增殖抑制活性如下，而比較活性之 強度》 即各稀釋液10# 1或水1〇Αί 1各注入96穴徹板之穴，而 加含5000個HL-60細胞之含10%牛胎血清RPMI 1640培養 基lGO^ul,在5%C02存在下，於37°C培養48小時。次 加溴化5 fflg/κΐ 3-(4,5 -二甲基喀唑-2-基）-2,5 -二苯四 銼（MTT，細馬公司製）璘酸緩衝食鹽水溶液ltJ/zl,繼绩 培養4小時後，以顯徹鏡觀察生育狀態。又加含0 . 0 4 N HC1之2 -丙醇lQG# 1而充分攪拌，測定在5 9flnm之吸光度 作為細胞增殖度（MTT法 結果，未加熱之D -葡萄糖二酸鉀溶液無細胞增殖活性 ，在30分，1, 2, 4, 16小時加熱處理之D-葡萄糖二酸 鉀加熱處理液分別至2倍，2倍，5倍，10倍，20倍稀 釋確認細胞增殖抑制活性。又在呈細胞增殖抑制活性之 試料濃度確認在培養細胞有核之凝縮，細胞之縮小，細 胞自滅小體之形成，而確認其細胞自滅誘發活性〇 經濟部中央標準局^工消費合作社印製 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 他方面，PH調製前，從各加熱處理物取樣而濃縮蒸乾 而溶在其容量之1/20之50 %甲醇，點在2片薄層矽膠[ 黙克公司製，Silica gei F 2 5 4〕<上而以乙酸正丁酯之 乙酸：蒸餾水（3: 1: 1)展開，薄層之一方以短波長UV 照射來檢出。次噴以硝酸銀-氨溶液（0 . 1 N硝酸銀水溶液 與5N氨水之等量混液）而加熱來檢出。在另一方之薄層 ί, 噴以乙醇-硫酸混液（乙醇：硫酸=2: 1)而加熱來檢出 -1 5 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > Λ4規格（_2!0Χ297公尨） 448 1 A7 B7 五、發明説明（) 斑點。 薄層矽膠層析之結_，隨時間增加之斑點在iiFO. 13附 近，RFG.06附近，RFQ.03附近確認，此增加之趨勢與依 MTT法分析之細胞增殖抑制活性之增加里平行關係。 (6)將D -葡萄糖二酸1，4-内酷一水合物（Nakaraitex公 司)製呈1 0 si g / m 1溶在水則P Η 2 . 5 〇將此加熱1 2 1 °C 3 0分， 1, 2, 4, 16小時。各加熱處理物及未加熱處理物調為 PH7附近，以G.22>ub濾器滅《來調製細胞增殖抑制活性 測定用之試料β將此試料稀釋2, 5，10，20, 50, 100 倍，依宵施例i-(5)之ΗΤΤ法測定對HL-60細胞之細_增 殖抑制活性來tb較活性之強度。又觀察培養細胞之核之 凝縮，細胞之縮小及細胞自滅小體之形成，以比較細胞 自滅誘發活性之強度。 結果，未加熱D -葡萄糖二酸1,4 -内酯溶液無細胞增殖 抑制活性及細胞自滅誘發活性，加熱3G分，1, 2， 4, 16 小時之處理物分別至1 , 2，5 , 1 0，5 0倍稀釋確認有細胞 增殖抑制活性及細胞自滅誘發活性。 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) 另在PH調整前，從各加熱處理物取樣濃縮蒸乾，溶在 蒸乾容量之1/20之50%甲醇，而彷實施例1-(5)薄層矽 膠層析。 薄層層析結果，隨時間增加之斑點在RF0. 13附近，RF 0.06附近，RFG.03附近確認，此增加趨势與依KTT法分 析之細胞增殖抑制活性之增加呈平行關俗。 將1.5ml D -葡萄糖二酸1,4 -内酯之加熱處理物濃縮蒸 -1 6 — 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210Χ29?公楚） ^ j4 4 B 1 6 j A7 B7 五、發明説明（W ) 乾而溶在60# 1 50%甲醇，其中50/·ί1仿實施例1-.( 5)在 薄層矽朦展開，釗取RF0.13附近，RF0-13〜G.06之間， RF0.06附近，RFO.0 3附近及原點附近之矽膠，各以500# 1 50 %甲醇萃取而濃縮蒸乾後，溶在lGO^ul滅菌蒸餾水， 彷宵施例1-(5)測定細胞增殖抑制活性及細胞自滅誘發 活性，結果在原點至ϋ F 0 . 1 3之間有活性。 (7) D-葡萄糖二酸1,4 -内酯一水合物（Hakaraitex公司 製）呈1 0 m g / in 1溶在水則p Η 2 . 5。將此加熱1 2 1 °C及1 6小時。 這些D -葡萄糖二酸1,4 -内酯加熱物及未加熱物用API-III(Sai-X公司製）以陰離子模態來質量分析，結果在 加熱物隨加熱時間及細胞自滅誘發活性之增加而分子量 (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) '蒗 加 增 地 顯 明 質 物 之 等 萄 ο ο 0 1 D 品 樣 之 例將時 施 > 小 實 "4 % 經 « 於ΓΓ 溶ka ,4再Na 1i /IV 二Μ據 糖？se 酯 内 濾 分 1 0 熱一 加出 物取 合 ， 水水 製 司 公 酸 乙 氟 三 % 1 ο 以 製 司 公 溶 水 分 每 以 相 動 non 移 為 液 用 .mz- 流 之

X 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 製 司 公 曹 ί 認 確 果 结 度 光 釋 稀 料 試 Μ 些 22這 0.將 一了 /4. t 峰 主 値 0 滅 器 濾 峰 on各 2 取 出分 檢法 ，方 c L 榑 P 1 Η 同 行以 施故 吸 之 施 料 試 之 性 活 制倍 抑2ί 殖3 增6’ 胞1 細 8 癌 * 製4 調 2 例 施 實 依 胞 細 病 血 白 性 0 # 前 人 對 定 測 法 方 之 細度 之強 胞之 細性 60,' 活 L-較 ί 比 而 性 活 發 誘 滅 白 胞 細 及 性 活 制 抑 殖 増 胞 本紙張尺度適用中國國家標车（CNS ) Λ4規掊（2Ι0Χ297公釐）

44816 S Α7 Β7 五、發明説明（+ ) 結果，在留存時間5^6分之峰確認活性，至留存峙間 5. 6分之峰之32倍稀釋物確認癌細胞增殖抑制活性及細 胞自滅誘發作用。 (2)分取實施例2-(1)之留存時間5. 6分之峰，減壓蒸乾 。此試料之質量分析以DX 302質量分析計（曰本電子公 司製）施行。溶在重水而依NMR解析其構造。NMR使用JNM -A50M日本電子公司製又在水溶解成88#g/®l,用 UV-25flO分光光度計（島津製作所公司製）測定U V ,結果 如下。 此試料之各特性如第3〜6圖。即第3〜6圏均為本發明_ 2, 5 -二羥基四氫-2-呋喃甲酸之各特性值。 第3圖為質譜〔縱軸為相對強度（％),橫軸為ra/z〕， 第4圖為UV〔縱軸為吸光度，橫軸為波長（nm)〕，第5 圖為1 H-HMR〔縱軸為訊號之強度，横軸為化學移位值 (PPm)〕，第6圖為BC-NMR.〔縱軸為訊號強度，横軸為 化學移位值（P P m ) }。 F AB-MS : m/z 131 〔M_H2〇 + H〕+ UV : Imax末端吸収 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 -----:---I ) -- (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) Ή-NMR ： δ 1 . 8 3 ( 1 H, m, 4—Η)，1 . 9 4 ( 1 H, m, 3—Η )，2 . 18 ( 1 Η, m, 4 —Η) , 2 . 3 6 (1 Η, m, 3 —Η)，5. 55 (1Η, d - d , J = 2 . 0，5. Ο Η ζ , 5—Η) ,3C-NMR :6 3 2. 1，34. 3，100. 5，103. 3，174. 4 τ. -18- 本紙张尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ·4規格（210X297公漦） ^4B16 b ΑΊ B7 五、發明説明（π ) 非對映體 fH-NMR : δ 1. 8 8 (1 H, m, 4—Η) , 2. Ο 7 (1 H, m, 3—Η )，2. 15 (1Η, m, 4—Η) , 2. 2 3 ( 1 Η, m, 3—Η) ,5.51 (1Η, d-d, J = 3. 5, 5. Ο Η ζ , 5—Η) ，3C-NMR :6 3 2. 7, 3 5. 5, 1 0 1. 1，1 0 3. 5, 1 7 4, 7 在1 H-NMR以HOD之化學移位值為4·65ρρβι,在BC-NMR. 以二愕烷之化學移位值為6 7 . 4 p p m。 從這些值得知，本試料為如下式[II】（2S, 5S)-2,5- 二羥基四氫-2-呋喃甲酸及其對掌體t及如下式[III] (2S，5R)-2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸及其對掌體之混 合物^非對映體1,非對映體2之一方為式[II]物質， 其對掌體，或這些之混合物，另一方為式[III]物質， 其對掌體，或這些之混合物。 J*nC0Q\i 經濟部中央標準局員工消費合作社印聚

〇、 【ΠΙΙ (請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁)

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. 00H 實施例3 將葡萄糖醇酸半醛依J.Bact.第116卷，第1464 -1 9 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（2IOX297公釐） 4481 A7 B7 五、發明説明（d ) ~ 1354頁（1973)之方法調製而加水反應，得2, 5 -二羥基 四氫-2-呋喃甲酸。 實施例4 (1)將D-葡萄糖二酸鉀在蒸餾水溶解成1%,加熱12D°C 4小時，用此加熱處理物檢討對抗菌活性。 將大腸捍菌Η B 1 0 1在L B ( 1 %脾，0 . 5 %酵母汁，0 · 5 % 食鹽，ΡΗ7.0)行種培養一夜。於5ml LB加5G及500#1葡 萄糖二酸鉀加熱處理物之培養基及不加任何物之培養基 接種5# 1種培養液，在37 "C振盪培養來測定生育。培養 開始時及6. 5小時後，用富士數字濁度計（富士工業公司 銷售，秋元電機製作所製造），以調製刻度82. 3之條件 測定，從6 . 5小時後之值扣除培養開始時之值，得生育 之值。結果如表1，葡萄糖二酸鉀加熱處理物確有抗菌 活性。 表1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 袈· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 添加量（# i/5ml 生育（濁度） 0 16 7 5 0 15 7 5 0 0 1 2 0 (2)卜葡萄糖二酸1,4 -内酯一水合物溶在蒸餾水成1% r. ，加熱1 2 0 °C 4小時。用此加熱處理物仿實施例4 - ( 1 )之 一 2 0 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) Λ4規格（210X297公釐） 經濟部中央標隼局員工消费合作社印製 44816 〇 Α7 Β7五、發明説明（θ ) 方法檢討抗活性，結果如表2, 酯加熱處理物確有抗菌活性。 表2 添加量（# 1 / 5 m 1 生育（濁度） 0 16 7 50 154 5 0 0 15 葡萄糖二酸1，·4 -内 實施例5注射劑 (1) 調整2 ,5 -二羥基四氳-2-呋喃甲酸之0.1%注射用蒸 餾水水溶液而無菌過濾，得注射劑。 (2) 將實施例1-(2)之D-tt萄糖二酸加熱處理物之中和 物之濃縮蒸乾桡溶在注射用蒸餾水來調製1 %溶液，而 在毎支凍乾用小瓶中充填上清（按乾燥物lOmg)來凍乾。 另添加當作溶解液之生理食鹽水2ml。 仿上惟用實施例1-(4)之D-葡萄糖二酸1,4 -内酯加熱 處理物調製注射_ ^ 實施例6錠劑 -21 本紙張尺度適用中國國家標隼（CNS ) Λ4規格（210Χ297公埯） -----^--ί.}装------ΪΤ (讀先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) A7 B7 五、發明説明（w ) 經濟部中央標準局貝工消費合作社印繁 用 下 列 處 方 調 製 錠 劑 〇 D- m 萄 糖 —l 酸 鉀 加 熱 處 理 物 1 0 ία g 玉 米 澱 粉 6 5 m g 羧 甲 基 m 雄 素 2 0 mg 聚 乙 烯 吡 咯 啶 _ 3 m g 硬 脂 酸 m 2 m g 每 錠 共 1 0 0 m g 使 用 |j>ii 霣 施 例 1 - (2 )之D -葡萄糖二酸加熱處理物之中 和 物 之 1 凍 乾 品 〇 發 明 之 效 果 本 發 明 提 供 具 有 制 癌 作 用 J 癌 細胞增殖抑制作用， 細 胞 滅 誘 發 作 用 7 抗 菌 作 用 等 生 理活性且安全高之2 ,5 - 二 羥 基 四 氫 -2 -呋喃甲酸或其光學活性體或其鹽，並 提 供 含 該 化 合 物 之 有 生 理 活 性 機 能 醫藥（尤其制癌劑）。 -22- (請先間讀背面之注意事項再填寫本頁) --a

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Claims (1)

1. 448 16 8 申請專利為 Α8 Β8 C8 D8 第87100782號「四氫映喃類」專利案 (89年12月1日修正） 六申請專利範圍： 1·—種如下式[Ι]2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸或其鹽 Η 0

   經濟部智慧財產局員工消費合作社印製 2. —種如式丨1]2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸或其鹽之製 法，其特徵爲將選自下列（a)，（b)之至少一種化合物 加熱處理之工程： (a>葡萄糖醇類（glucaric acid)或葡萄糖醇酸衍生物， 0>)含葡萄糖醇酸及/或葡萄糖醇酸衍生物之化合物。 3. —種制癌劑之醫藥組成物，其特徵爲以式[1]2,5-二羥 基四氫-2-呋喃甲酸，或其鹽所選出之化合物爲有效 成分* 4. 一種用於誘發細胞自滅之醫藥組成物，其特徵爲以式 [I] 2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸，或其鹽所選出之化 合物爲有'效成分。 5. —種用於抗菌之醫藥組成物，其特徵爲以式丨I】2,5-二羥基四氫-2-呋喃甲酸，或其鹽所選出之化合物爲 有效成分。 C請先閱讀背面之注意事項再填寫本頁) ----訂---------線 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐）