TW293880B - - Google Patents

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經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 203880 A6 _B6_ 五、發明説明（1) 太發明背暑 太發明铕Μ 本發明係有關抗睡分析，詳言之，係有關用來偵澜丙 烯睃與丙烯酿胺之磺化共聚物之單株抗體與抗鱧分析。 生前抟Μ钓沭 如美國專利第4,756,881號及第4,752,443號所述，丙 烯酸與丙烯醯胺之磺化共聚物係用於處理工業冷卻水Μ防 止腐蝕與磯物沈澱（規楔）。一般言之，活性磺化共聚物 將溶解之磯物質由冷郤水移除，係藉著與礦物質複合而達 成。一段時間之後，磺化共聚物分子之複合部位變成飽和 ，並且共聚物分子變得不具活性，未能將其它礦物質由冷 郤水中移除。 為了防止對於機器腐蝕，並且造成規模的損害，當此 聚合物失去活性時，必須将其移除，並且Μ活性磺化共聚 物取代之。因而，必須將活化之磺化共聚物持續通入到冷 卻水中取代失去活性之磺化共聚物。維持適當之活性磺化 共聚物之通入量對於冷卻水条統維持最佳操作是必要的。 不適當之通入速率可能導致駸重的問題。例如，不足夠之 活性磺化共聚物可能導致所處理的水被溶解的碾物質蓋通 ，引致霰重的腐蝕或規棋沈澱。另一方面，維持太高量活 性聚合物過於花費，並且爲處理工業冷卻水之不充分方法 〇 雖然有數棰方法可用於判定工業冷卻水条統中磺化共 聚物之结濃度，即活性加上不活性之磺化共聚物，這些技 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -装. 訂. 本紙張尺度適用中國國家櫺準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 3 82. 5. 20,000 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 A6 B6 五、發明説明（2) 術因為僅能判定全部磺化共聚物之濃度，並且不能测量活 性磺化共聚物之濃度，因而未能令人感到滿意。此外，這 些方法缺乏專一性並且敏感度差。例如，較古老偵測磺化 共聚物的方法包含MPVSK進行膠腥滴定，Khyamine 1622 進行複合，或以過量的锰與絡萁酵S進行反應。上述測試 偵测任何聚陰離子物質，並且有約50 ρρ·聚合物之偵測閥 。目前，工業冷卻水中之活性磺化聚合物的總貴並不便宜 *也不能快速進行判定。 圏忒筋沭 第1圖係以圖來表示酴合瘤細胞条6E2-H1-G4產生之 單株抗鱧，和與牛血清白蛋白結合之丙烯酸與丙烯醯胺之 磺化共聚物（BSA-SCP)的結合外形+，與牛血淸白蛋白結 合之丙烯酸與丙烯醯胺之非磺化共聚物（BSA-CP)-，丙烯 睃與丙烯醯胺之磺化共聚物（SCP)·，及對照組之牛血淸 白蛋白（BSA) G ; 第2_係Μ圖表示融合瘤細胞条6D12-H9-H3之單株抗 鱧與 BSA-SCP +，BSA-CP -，SCP 與 BSA 〇 之結合外形； 第3圖係融合瘤細胞条4D4-C9-F6之單株抗體與85八_ SCPH·，BSA-CP-，SCP ，與BSAO 之結合外形； 第4圈係Μ圖表示使用融合瘤細胞条6D12-H9-H3之單 株抗鼸進行抑制酵素連結免疫分析（ELISA)，其中，厲係 BSA，+ 係 CP，夺俤 SCP及 〇 係 BSA-SCP ; 第5圖係以圖表示使用融合癃細胞条6E2-H1-G4進行 抑制ELISA分析，其中，係BSA,-係CP 係SCP及口 衣紙張尺度遇用中國國家標準（CNS>甲4規格（210 X 297公釐） _ 4 _ 82. 5. 20,000 ------------------ -----裝------，11-------# (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) A6 B6 如 38d〇 五、發明説明（3) {請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 係 BSA-SCP ; 第6圖係M_表示使用融合瘤細胞条6D12-H9-H3之單 株抗體進行抑制ELISA分折比偵測溶於（PBS)缓衝液中之活 性與非活性SCP之磷酸緩衝鹽液，其中第一組僅包含PBS， 第二組包含10 ppm CP，第三組包含1〇 ppm SCP*第4組 包含20 ppm SCP，第5組包含10 ppm SCP，第6組包含10 PPm不具活性之SCP及4nMFe;及 第7圖係以圔表示使用融合瘤細胞条6D12-H9-H3之單 株抗醱進行抑制ELISA分析，Μ偵測Tr is缀衝鹽（TBS)缓衝 液中之活性與非活性SCP，其中第1組僅包含TBS ,第2組 包含10 PPm CP， 第3組包含10 ppm SCP，第4组包含20 ppm SCP，第5組包含10 ppm SCP，第6組包含10 ppm不 活性SCP與4mMFe。 太發昍槪垂 本發明其中一項目的係提供一種對於丙烯酸與丙烯醯 胺之磺化共聚物具有親和力之單株抗體。本發明單株抗醱 對於磺化丙烯酸與丙烯醯胺之共聚物有絕對的專一性，並 且於用於某些偵測上，每毫升範圍中之克數有較低之偵測 限度。 經濟部中央櫺準屬员工消费合作社印製 本發明單株抗體係由融合瘤細胞条產生。本發明其中 一較佳融合瘤細胞糸為融合瘤細胞条6E2-HhG4。本發明 另外之較佳融合廇細胞条是融合瘤細胞糸6D12-H9-H3。 本發明另一項目的係提供一棰對於丙烯酸與丙烯酿胺 之磺化共聚物具有親和力之單株抗嫌製備法。本發明方法 本紙張尺度適用t國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 5 82. 5. 20,000 293880 A6 B6 經濟部中央標準局S工消费合作社印# 五、發明説明（4) 包含之步®如下：a)使用附於載髏蛋白質之丙烯酸與丙烯 醯胺之磺化共聚物對哺乳動物進行免疫；b)由經過免疫之 動物中移出之細胞*製備成產生單株抗醱之融合癥細胞； (0選殖融合瘤細胞Μ產生融合廇細胞条；及d)由融合瘤細 胞条提取單株抗覼。據此，本發明其中一項較佳具鰻實施 例為哺乳動物係老鼠，並且融合瘤細胞糸爲融合瘤細胞条 6E2-fU-G4。因而，據此，本發明另外之較佳具體實施例 為哺乳動物是老鼠，並且融合瘤細胞糸為融合瘤細胞糸6D 12-H9-H3 〇 本發明另外之一目的是有關一種判定液醱中丙烯酸與 丙烯瞌胺之磺化共聚物之存在或濃度的方法。本發明方法 包含之步《為培育含有丙烯酸與丙烯醢胺之磺化共聚物與 對於丙烯酸與丙烯醯胺之磺化共聚物具有親和力之單株抗 鱧的液饈樣本，其中此單株抗鼸係與固饉載臑相结合。 齡住凰艚窗掄例：>鈐沭 目前已發展出對丙烯酸與丙烯醯胺之磺化共聚物（SCP) 具有親和力之產生單株抗體的融合瘤細胞条。與SCP結合 之本發明單株抗暖具有不同程度之專一性。藉著使用兩棰 不同分析方式，結論證明這些單株抗《能識別每百萬中由 〇到數百份濃度範園之SCP。此處敘述之實施例證明使用 本發明單株抗體判定液體*如由工桊冷卻水塔中之水樣品 ，其中SCP存在或濃度的可能性。 依據本發明之一項具體實施例，一棰對於磺化共聚物 具有親和力之單株抗《係以酵素連結免疫分析法（ELI SA> -------*----------,------裝------，玎------< (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） -6 - 82. 5. 20,000 經濟部+央標準局霣工消费合作社印製 A6 B6 五、發明説明（5) 以判定液髏樣本中SCP的濃度。使用本發明單株抗鼸之ELISA 方式較佳是用來測量掖涯樣本中SCP的濃度。三種較佳之 免疫分析策略為三明治EUSA，競爭性ELISA及間接ELISA 。雖然此處所敘之數棰抗饈對於分析液體樣本中之SCP很 有用，二棰最佳單株抗體為由融合瘤細胞糸6E2-H1-G4及 6D12-H9-H3所製備者，因為逭二種選殖株在間接ELISAs中 具有最大抗SCP專一性。 依據本發明較佳具體實施例，三明治ELISA將作爲測 量SCP漉度之用。較佳為以純化之抗SCP抗體作為吸附抗 體之用。抗鱧將被吸附於96個孔槽撤價盤之孔槽中。加入 含有SCP之測試樣品並且使其結合到吸附之抗體上。下一 步驟中，加入酵素棲示之抗SCP抗體並且使其結合到被塗 覆抗體吸附之SCP分子的暴露抗原位置上。因而，洗滌後 留存之酵素榡示抗臞量與樣本中SCP的量直接相鼷。各槽 孔中所結合之酵素量可以一發色園酵素基質培餐，並測量 所生成顔色之變化而予以定量。使用已知濃度之SCP聚合 物可建立橒準曲線。一般將三明治ELI SAs結合使用可使本 方法有更高的敏感度。 另外較佳之具體例，競爭性ELISAs係用來測量液體樣 本之SCP。依據本具暖貢施例，純化之抗SCP抗體將吸附 於96孔槽撤價盤之孔槽上。含有SCP之測試樣本將加到具 已知量酵素檁示SCP聚合物之盤中。洗滌後留存之酵素檫 示SCP董將與原來存於测試樣本中之SCP量成反比。存在 之酵素量將Μ添加適合的發色園物質予Μ測置。使用已知 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） _ 82. 5. 20,000 -----------------1 -----裝------*订 ^ (請先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) A6 2^3880 B6_ 五、發明説明（6) (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 量之SCP建立檷準曲線，此棰特別方式之優點爲：在一培 育期間僅需作一步K分析。 依據本發明再一具體實施例，係使用間接ELISA測液 嫌中SCP之濃度。依據本具體實施例，已知量之牛血清白 蛋白（BSA-SCP)複合物将被吸附到96孔榷撤價盤之鬵曲的 孔槽上。其次，使抗SCP單株抗體之不同稀釋液與固定之 SCP結合。之後，加入酵素棲示之綿羊抗鼠Ig，並且使其 與主要的抗體結合。隨後加入發色園物質，所結合之酵素 將其轉變成有色的產物。於492 nm下藉著测量吸收度（光 學密度）定量所生成之顔色變化。顔色變化的量與存留之 酵素檷示抗醱成比例，因而，與在開始時能結合到固定 SCP之抗SCP抗體量直接相關連。本實驗之結果將生成用於 分折中之抗SCP抗體的最佳濃度。 訂出間接ELISA之抗體適合漉度之後，由存於溶液之 SCP可Μ得到SCP塗覆之撤價盤與箪株抗體間之結合抑制。 經濟部中央標準局員工消费合作社印製 加到SCP塗覆撤價盤之前，Μ不同濃度之SCP培育單株抗體 SCP主要抗體。繪出自由SCP濃度函數之抑制百分率Μ建立 檷準曲線*此係以各為一定量之固定SCP與主要抗《進行 之。若是此檷準曲線，當其與冷郤水樣本中發生者爲相關 之濃度處呈現陡概的劑量反醮，則此分析方式將是適合的 。其優點為不需要另外進行純化或是對抗SCP單株抗體進 行修飾。 上述討論之任何分析可以使用其它之固«載供条统， 如塗覆之管子與聚合物薄膜作進一步之發展與改良。然而 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐） _ 8 _ 82. 5. 20,000 經濟部中央櫺準局R工消费合作社印* A6 B6 五、發明説明（7) ，三明治ELISA或競爭性ELISA式較佳，由於其可設計爲“ “測量尺”（dipstick〉分析。雖然如此，任何Μ上分析方 式係打算使用本發明單株抗體來拥量液《樣本中之SCP濃 度。 窗掄相Μ :枯：展会成 抗原Μ下列方式製備： 20毫克聚合物首先由偶合劑，卜乙基3 (3’-二甲胺基 -丙基）硪化二亞胺（EDC)於pH值爲5下製得。在室溫下培 育15分之後，加入 15毫克 Keyhole Limpet Henocyanin (KLH〉或10毫克牛血清白蛋白（BSA)並且使其在pH 7.0，室 溫下反應4小時。在4t：下，隔夜透析下將小分子Λ副產 物移除。測試磺化（SCP)與非磺化（CP>形式之丙烯酸與丙 烯醯胺共聚物。磺化共聚物係購買Nalco化學公司之PRISM® 牌。非磺化共聚物也是購自Nalco化學公司。离與低分子 量片段亦對磺化與非磺化二種形式作澜試。共聚物分子量 ，非磺化形式為6.6 KD與23 KD，磺化形式爲7.4 KD與26 KD。小分子量磺化與非磺化共聚物，使用前述之偁合剤EDC ，經由將共聚物羧酸殘基偁合到載醱蛋白質KLH與BSA之胺 基上。對BSA複合物進行膠《霣泳顯示成功的複合為每分 子BSA與約1到4値共聚物分子複合。KLH後合物由於不均 勻致較不能Μ霣泳法做有意義的分析。 啻掄俐？_ : SCP-BSA嫌合物#間培R1.TSA餾雄>泡丨用 低分子量共聚物之BSA後合物，使用兔子抗BSA抗血 清進行間接ELISA之操作澜試其對撤價盤之吸附作用。盤 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） ~ 9 - 82. 5. 20,000 -----------------^ ------裝------" (諳先閲讀背面之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央櫺準扃员工消費合作社印製 A6 _B6 _ 五、發明説明（8〉 子塗覆溶於磷酸缓衝鹽ΡΗ 7·2 (PBS)，灌度為〇.〇1 ng/mi (〇 5 us/孔槽）之複合物。Μ溶於PBS之5 %非脂肪乳 汁阻礙盤上未結合之位置。兔子抗BSA抗血淸之稀釋液以 盤子培育之。山葵過氧物酶（HRP)檷示了山羊抗兔子抗體 ，隨後使其與主要抗BSA抗體結合。之後，結合酵素（HRP〉 使用發色圍物質定量之。造些分析Μ雙份進行操作，結果 列示於表1中。這些結果指出BSA複合物與ELISA盤緊密結 合，因而確定這些複合物在間接ELISA式中，對於抗SCP 抗鼸筛選之利用性。 弄1 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 以Rh拚RSAlfn渣准行間培KI.TSA 1 抗鹿 OH l / a b a x 價勘倌 #1 SCP-BSA 0.96 1:9000 CP-BSA 0.94 1:7100 BSA 0.87 1：14,000 無Ag 0.31 1:50 #2 SCP-BSA 0.94 1:9000 CP-BSA 0.92 1:7700 BSA 0.86 1:13,000 無Ag 0.36 <1:50 啻掄俐：免痔 對4組（A-D)雌性Balb/c鼠，每組5隻鼠，約9-12週 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 82. 5. 20,000 經濟部中央樣準局R工消費合作社印製 A6 _ B6__ 五、發明説明（9 )

龄進行操之。經由腹膜内注射，每週對A與B組中之每隻 鼠投予100 iig SCP-KLH免疫原。A組接受Freund’s佐劑乳 化之免疫原，B組接受Ribi’s佐劑乳化之免疫原。C組與 D組每遇每隻老鼠接受100 Wg各經過Freund’s佐劑或Ribi’s 佐劑乳化之未後合SCP免疫原，進行免疫。定期採血並且 K間接ELISA抗SCP-BSA與CP-BSA評估各血清樣本。由ELISA 結果評估抗鼸價數值；抗體價數定爲產生光密度之樣本血 淸稀釋液，其在間接ELISA測得之最大訊號之1/2 (0D

1 / a m a X 。表1提出四組動物所得之價數結果。 奮掄例4 :融会 將對SCP-BS A抗齷價數升高之鼠殺掉，並分離出脾細 胞，且以缺乏次黃質胍磷核糖基轉移酶（HGPRT)之SP2/0漿 細胞廇細胞，用融合劑聚乙酵（PEG)將此二細胞融合之。 融合#1係以2叟價數各為1:11,000與1:14,000抗5〔？-85八 的B組鼠進行操作，其抗CP-BSA之相两價數值各為1 : 4700 與1 : 6700。融合#2係以2隻價數各為1 : 2600與1 : 2900抗 SCP-BSA的E組鼠進行操作（隨後開始操作另一组老鼠）。 其抗CP-BSA之相關價數爲1 : 1000與1 : 920。将融合的細 胞移置於96孔槽之組鏃培餐盤中，並且在次黄質胺基蝶昤 胸腺嘧啶培餐基中選擇以確定生成了融合瘤細咆。產生抗 SCP單株抗醱之融合瘤細胞条為6E2-H1-G4，6D12-H9-H3， 6C8-P1-F9， 4D4-C9-F6， 4B1-H6-E10及4F12-C12。 奮掄俐5:抗鶄夕檯女牛连 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS>甲4規格（210 X 297公釐） 82. 5. 20,000 -------：---.--------------裝------#嫁 . 一 ί (請先W讀背面之注意事項再填寫本頁) A6 _B6___ 五、發明説明（10) 融合瘤細胞条6E2-IU-G4與6D12-H9-H3之擴大生產係 將其在試管内培餐數個階段，並將其注射到一組Pristane -primed Balb/c之鼠體内。這些細胞成長爲鼠之腹水腫瘤 ，並且收集累積於鼠腹膜穴内生成之液醱。腹膜液髏富含 目檷之抗SCP抗醱，純化之並且用於下述之分析中。 奮掄俐fi :抗艚：> 紳化 依據分析方式所需，抗體需爲未純化之腹水，或為高 度純化之免疫球製剤。以多棰方法將抗體由腹水液諼中純 化出，此係依抗體型式及抗體對不同级衝液之敏感性而定 。實施例5中鑑定之6E2-IU-G4與6D12-H9-H3品糸爲IgG 型式，因而使用假親和性型式蛋白質A 。 营掄例7 :盟株抗腰對SHP ：>梓里袢 表2摘錄發展出之不同融合瘤細胞条。所有細胞Μ有 限稀釋，在適合之生長因子存在下作次S殖。鑑定細胞之 選殖族群時，再度分析上澄液對SCP之结合性，並且將呈 現需要之結合特異性之單一菌落續大並且解凍。 (請先Μ讀背面之注意事項再璜寫本頁) -裝- 訂. 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（210 X 297公釐） 12 82. 5. 20,000 A6 B6 五、發明説明（11) 抗仝ffi ：>结会數擄 编號 細胞条 親代之ELIS A訊號 SCP CP 子代之ELISA訊號 SCP CP 1 6D12 H9-H3 1.70 0.11 1.48 0.02 2 6C8-F1-F9 0.92 0.02 0.77 0.00 3 4D4-C9-F6 0.77 0.18 0.61 0. 12 4 6E2-H1-G4 2.00 0.11 1.81 0.45 5 4B1-H6-E10 1.39 0.50 1.74 0.55 6 4F12-C12 1.46 0.16 1.48 1.38 -------.---.--------------裝------.玎------Ψ (請先閲讀背面之注意事項再埃寫本頁) 經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 奮掄例ft :杭SCP盟抶拚賭夕夺艾反鼴袢画 K間接ELISA測試不同之抗SCP單株抗體之結合特異性 。在雙份之槽孔中，每個榷孔塗覆500 ng下列之抗原：BS 八-5〔{>，854-〔？，50?或85戍。每次以10的倍數對腹水液體 進行連續稀釋到由1: 10到1: 10β，將其以不同抗原塗覆 之盤子進行培育。以腹水液髓樣本培育之後，洗滌此盤並 且用HRP檷示之綿羊抗鼠Ig進行培育。最終，存於各榷孔 中之酵素（HRP)量MHa〇a及發色園物質進行定量。使用自 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐〉 82. 5. 20,000

經濟部中央標準局貝工消费合作社印製 五、發明説明（i2 ) 動之ELISA讀數器率錄492 nm之光學密度，结果摘錄於第 1，2及3圖中。 三艏不同單株抗體之結果示於第1，2及3圖中，細 胞糸6E2-H1-G4與6D12-H9-H3與BSA-CP比較下呈現較高之 結合特異性，而细胞条4D4-C9-F6對於BSA-SCP與BSA-SP幾 乎完全相同。這些結果證實表1中所示之先前發現，這些 研究是以這些細胞細之組織培養上澄液進行的。 實施例9 :以油制分析評仕杭SCP Μ抶桥韹逛 圖Ml 洁里杜 由間接EL ISA結果得到之資訊摘錄於第1，2及3圖 中，産生對BSA-CP其持異性之單株抗體的二細胞条6E2-H1 -G4與6D12-H9-H3為本發明較佳之細胞糸。間接ELISA之 結果偽用來計算在抑制ELISA中所産生最敏感結果之二種 不同單株抗髅的最佳濃度。在這組實驗中進行之抑制ELIS A簡短述敘如下： 徽價盤中毎個槽孔塗覆500 ng BSA-SCP並且將盤中之 非待異位置封阻。某固定濃度之雙份腹水液體樣本於室溫 下以增加瀵度之競争性抗原作預先培育2小時。預先培養 之後，使此抗體與BSA-SCP塗覆之盤相結合。用於競爭性 ELISA之抗原，包含BSA-SCP，SCP，CP或BSA。本分析之 目標係證明溶液相分析中之抗體專一性。高度待異性之抗 體將與溶液中均勻的抗原緊密結合而不與其它物質結合。 使用HRP樣示之綿羊抗鼠Is與HRP之發色團物質之前要先判 定抗SCP單株抗體結合到BSA-SCP塗覆盤之濃度。此分析之 -14 - (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) ύ.. 、1Τ 線 本紙張尺度逋用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210X297公釐）

經濟部中央標準局貝工消費合作社印製 五、發明説明（13) 结果示於第4與5圖户。由這些謹可看出，6E2-H9-G4與 6D12-H9-H3兩個細胞糸確實在抑制ELISA中呈現相當大的 差異。細胞条6D12-H9-H3 (示於第4圖）偵測約5到40 ρρπ 之SCP並且將其與SP分別出來。細胞条6E2-H1-G4 (示於第 5圖）並不如此敏銳，但仍能用於分析。上述所有分析均 在pH 7.2之磷酸缓衝鹽液中進行操作。 審渝例1 0 :椹擗現塭様太分析 購自 Nalco 化學公司，Naperville，Illinois，商品 名為PRISM㊅聚合物之SCP，製備含有SCP之多種水性樣本 。這些樣本中有某些稱為“現場（field) ”情況*在於其 含有相當高濃度之鐵與鈣離子，致SCP實質為非活性的。 對於含有足以防止剝落之未複合活性SCP量的樣本也進行 測試。 進行一条列實驗判定本發明單株抗體是否能分辨SCP 活性與非活性溶液。這些结果示於第6與7圖中。也使用 磷酸緩衝鹽（PBS)與Tris緩衝發（TBS)進行平行之試驗。由 第6與7圖所示，此分析有效分辨“活性”樣本（樣本4 >與“非活性”樣本（樣本6)。如第6圖實驗所示，本 分析俱於PBS中進行，使用TBS者則示於第7圖中。樣本3 與2為正與負的對照組，各含1〇 ppra SCP聚合物與CP聚合 物，並且各由缓衝液PBS與TBS組成。在此分析中，樣本皆 以1 : 2之適合缓衝液稀釋，PBS或TBS組成下列：僅以PBS 培育之樣本1。樣本4含有20 ppm SCP，因而為“活性” 的樣本，同樣的，其含有足以防止剝落之SCP量。 -15 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0X297公釐） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 A7 B7 五、發明説明（14 樣本5含有10 ppm之SCP，雖然其聚合物濃度較低， 也被視為“活性的”。以10 ppm SCP與4 mM鐵離子製備樣 本6以模擬“非活性”樣本。假定樣本6並不能防止剝落 ，很明顯地其被視為不含有任何可偵測到之自由，活性SCP 量。 本發明申請專利範圍可對於上述之組成物，操作，與 不同細胞条，單株抗體•步驟及程序作不背離本發明精神 與範圍之修改。 依據本發明所製備之融合瘤細胞株的撤生物寄存資 料如下： ATCC寄存编號 鼠融合瘤細胞6E2-H1-G4 HB11015 鼠融合瘤細胞6D12-H9-G3 HB11016 ----I:------------、·ιτ------Μ I (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央揉準局貞工消費合作社印裝 16 - 本紙張尺度逍用中國國家標準（CNS ) A4规格（210 X 297公釐）

Claims (1)

1. 鯉濟部中央榡準局貝工消費合作社印製 ^、申請專利範圍 第81 106630號專利申請案申請專利範圍修正本 修正日期：85年10月 1. 一種用以偵測一被用來防止在一供工業用途之用的水容 器内之腐蝕與礦物質沉積之由丙烯酸與丙烯醯胺所構成 經磺化的共聚物的存在或濃度之方法，其包括如下步驟 (a) 以一對一由丙烯酸'與丙烯醯胺所構成經磺化的共 聚物具有專一親和性之單株抗體來培育一得自於 一工業容器之水樣品，該樣品在取樣前曾經該由 丙烯酸與丙烯醯胺所構成經磺化的共聚物予以處 理過；以及 (b) 偵測及測量該抗體的結合程度，由此可反映出該 共聚物之存在，並可測定出該共聚物之濃度。 2 .如申請專利範圍第1項之方法，其中該抗體係為由寄存 編號為ATCC HB11015之融合瘤細胞株所産生的單株抗體 3.如申請專利範圍第i項之方法，其中該抗體偽為由寄存 編號為ATCC ΗΒΠ016之融合瘤細胞株所産生的單株抗體 4 .如申請專利範圍第1項之方法，其中該容器傺為一工業 用冷卻水塔。 5 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中該聚合物係為聚丙 烯醯胺，而該容器係為一工業用鍋壚： 6 ·如申請專利範圍第1項之方法，其中抗原-抗體結合之 -17 法尺度適用申國國家標準（CNS ) A4%格（210X297公釐） --------1 裝------訂 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 六、申請專利範圍 偵測及測量偽藉由一種酵素-聯結免疫吸附分析上。 7.如申請專利範圍第1項之方法，其中該單株抗體被結合 至一固體載體。 8 . —種用以偵測一工業用水樣器中之一由丙烯酸與丙烯醒 胺所構成之經磺化共聚物的濃度之方法，該方法包括如 下步驟：以一對一由丙烯酸與丙烯醯胺所構成之經磺化 共聚物具有專一親和性的_單株抗體，來培育一含有該一 由丙烯酸與丙烯醯胺所構成之經磺化共聚物的工業水樣 品；以及偵測及測量該抗體的結合程度，由此可反映出 該共聚物之存在，並可測定出該共聚物之濃度。 9·如申請專利範圍第8項之方法，其中該抗體傜為由寄存 編號為ATCC HB11015之融合瘤細胞株所産生的單株抗體 〇 10 .如申請專利範圍第8項之方法，其中該抗體偽為由寄存 编號為ATCC HB11016之融合瘤細胞株所産生的單株抗體 〇 Π .如申請專利範圍第8項之方法，其中抗原-抗體结合之 偵測及測量係藉由一種酵素-聯結免疫吸附分析。 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 (請先聞讀背面之注意事項再填寫本頁) 12.如申請專利範圍第8項之方法，其中該單株抗髏被結合 至一固體載體。 13 . —種用以偵測及定量一工業水樣品内之由丙烯酸與丙稀 醯胺所構成之經磺化共聚物的檢驗套組，其包含有： (a ) —種對由丙烯酸與丙烯醯胺所構成之經磺化共聚 物具有專一親和力並能與該聚合物錯合之單株抗 -18 - 本紙張適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 2^See〇 A8 B8 C8

   、申請專利範圍 體；以及 (b) —種用以偵測該單株抗髏與該共聚物之錯合的分 析物。 申請專利範圍第13項之檢驗套組，其中該抗體傜為由 寄存编號為ATCC HB11015之融合瘤細胞株所産生的單株 抗體。 ^ ·如申請專利範圍第13項之·檢驗套組，其中該抗體係為由 寄存编號為ATCCHB11016之融合瘤細胞株所産生的單株 抗體。 申請專利範圍第13項之檢驗套組，其中該共聚物傜為 丙烯酸與聚丙烯醯胺之一經磺化共聚物。 17·如申請專利範圍第13項之檢驗套組，其中該共聚物傜為 聚丙烯酸酯。 U.如申請專利範圍第13項之撿驗套組，其中該分析物係為 —酵素-聯結免疫吸附分析物。 Μ ·如申請專利範圍第13項之檢驗套組，其中該錯合發生在 —固體載體上。 --------{-裝------訂-----」姝 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部4-央棣準局WBC工消費合作社印製 9 本紙浪尺度適用中國國家標準（CNS ) Α4規格（210 X 297公釐）