TW272191B - Novel asymmetrically substituted bisnaphthalimides - Google Patents

Description

272191 A6 _B6 五、發明説明（1 )

坊銜節園 本發明係闞於新穎不對稱取代之雙萘二甲醢亞胺，闞於 其製備方法·及翮於使用其供控制疾病。 發明背畺 US-A-4 841 052揭示化合物在其中兩個萘二甲醯亞胺基 是經由一涸含一傾芳基之橋埋结在一起。這些化合物是在 電照相有機調色劑中用作敏化劑。US-A-4 874 863描述雙 萘二甲醢诖胺其是逋於作為制癌劑。US-A-5 086 059之物 質亦然，其是在其萘基另含之烯橋。 註钿說明 本發明係關於不對稱取代之雙萘二甲醢亞胺具此式I

(請先閲讀背面.之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 在其中 A · B及D 是相同或不同及是直鏈或支鐽亞烷基，環 亞烷基*或伸笨基· R1及R2 是相同或不同及是氫原子或Ci-Ce烷基或 芳基或苄基，其是經（：1-(：<1烷基.鹵原子 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 82. 5. 20,000 272191 A6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 B6_ 五、發明説明（2 ) ，CF3-，硝基，羥基，HRg，OR4 ， d. COOR5 - C0NR| > CONHR7 · NHCOR8 -S 0 2 N H R e或S 0 „ R 1 °基團取代，或合在一起 是一個-CH2-，-C2H4-，或 C3He-基團， t，，Η及Η， 是相同或不同及是氫或鹵原子，硝基，胺 基，h - Ce烷基，CF3 ，羥基，NR|， OR4 ， COOR5 ， CHO > C0NR| · CONHR7 · NHCOR8 * S02HHRq ， S0„R10 · COR11 * 脲基，h - Ce烷基脲基，N = C = S或N = C = 0 基團， R3-RX1 是相同或不同及是h - Ce烷基，環烷基或 芳基， ir 是零，1或 2，及 ：I 是一個單鍵或雙鐽， 及其與生理上可耐受之酸之鹽。 作為 A， B及D之較佳亞烷基是具1_8個碳原子者，尤 其是具1- 4個碳原子者。較佳之環亞烷基是具3 - 7個碳原 子者。 特加提及之芳基團供作為R1- R8者是笨基。後者Μ被該 基之1-2個取代為佳。作為R3-Re之較佳環烷基是具3-7個碳原子者。X及YK是硝基，胺基或甲基或氯原子為 佳，及X’及Y’M是氫為佳。 這些新穎化合物，可Μ依照Μ次之反應方案製備： (請先閲讀背面.之注意事項再塡寫本頁) 衣紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2〗0 X 297公釐） 82. 5. 20,000 272191 Α6 Β6 經濟部中央標準局員工消費合作社印52 五、發明説明（

IV

R1 R2 III

Υ

在有機溶劑諸如二晖烷，乙酵或二甲基甲醢胺中萘二甲 酸酐I與當量或與達至5 0 X過量之一種多胺®於自2 0至 150*C反應。縮κ此方式獲得之溶液，及藉例如再结晶 或層析法純化殘留物。κ此方式獲得之單醢亞胺隨後與酐 V反應•及如κ上所述純化。 Μ此方式獲得之化合物，如有需要，随後可以以生理上 可耐受之酸轉化為其鹽。將此鹼溶解於，例如，乙酵，二 氯甲烷或乙醚中’’及Μ酸沉澱此鹽。逋當的酸是棒樺酸， 酒石酸，乳酸，磷酸，踺烷磺酸，特別是甲磺酸，乙酸甲 酸，順-丁烯二酸，反-丁烯二酸，蘋果酸，丁二酸，丙 二酸，硫酸，甲笨磺酸，L-毅胺酸，L-天冬胺酸，丙酮酸 ，黏酸，苯甲酸，葡萄糖醛酸，草酸，抗壞血酸及，特別 是，鹽酸。 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4规格（21.0 X 297公釐〉 82. 5. 20,000 (請先閲讀背面.之注意事項再塡寫本頁) -裝. '11. 272191 A6 B6 五、發明説明（4 ) 或V之起始物料具一個單鍵在其五-原子環中者，可以 藉掲示於文獻（J. Amer. Chem· Soc. 93, 737 (1971))中 之方法製備。對應化合物具一個雙鐽在此五原子瑁中者， 可K自具一涸單鐽者藉在J. Aner. Chem. Soc. 91, (1 969) 917中所述供製備吡喃瓖醗之方法獲得。 多胺Μ可以購得或藉已知之方法製備。 這些新穎化合物激活非特異性的免疫佃胞其殺死瘤细胞 。因此它們可Μ用供治療癌症諸如腸癌*肺癌及乳癌Μ及 白血病。用__量是約1- 500奄克/公斤體重。 這些新顏化合物具有非常溶解於水之優點。因此它們比 已知之類似結構化合物使用較容易。 (請先閲讀背面.之注意事項再填寫本頁} .裝· 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 Μ次之例用意在詳》說明本發明。在每一案例中之份或 百分率數據是重量基準。 Α. 起始物料之製備方法 a. ( 3-胺丙基）[3-( 1,8-萘二甲皤亞胺）丙基] -甲胺 溶解2.2克（0.015奠耳）之雙-（3-胺丙基） 甲胺於250亳升之乙酵中，及於4小時期間徐徐 加入2.4克（0.012莫耳）之萘-1,8-二甲酸酐 。隨後於室溫攪拌此混合物1小時。於減壓下移 除此有機溶劑。餘留之油是藉閃蒸層析法 (CH2CU/MeOH/NH4OH = 4/6/1 )純化。得產物 - 6 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 82. 5. 20,000 訂_ 272191 A6 B6 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 五、發明説明（5 ) 1.7克（50¾)[熔點 =2661C (甲酵）]及是直 接用於次一步之反應。 Μ類似Aa之方式製備Μ次化合物； b . N-( 2-胺乙基）-N ’ - [ 2-( 1，8-萘二甲醣亞胺） 乙基]-1 , 2 -二胺基乙烷，產率 3 0 SS，熔點 1 3 7 "C (乙酸乙酯）。 c . N-( 2-胺乙基）-N ’ - [ 2-( 4-氯-1 , 8-萘二甲皤 亞胺）乙基]-1,3-二胺基丙烷•產率 53«，油[ 氫氛化物，熔點2531C ]。 d. N-( 3-胺丙基）-Ν’- [ 3-( 3-羥-1，8-萘二甲醢 亞胺）丙基]-1,4-二（乙胺基）丁烷，產率 44¾ ，油。 e . N-[ 3-( 3-胺-1 , 8-萘二甲醮亞胺）丙基](3-胺 丙基）胺，產率33¾，熔點190¾。 f . N-( 2-胺乙基）[2-( 4-氮-1 , 8-萘二甲醣亞胺 )乙基]胺，產率 24¾，熔點 28010(甲酵>。 g. N-[ 3-( 3-胺-1 , 8-萘二甲釀亞胺）丙基] -N ’ - ( 3 -胺丙基卜1 , 4 -二胺基丁烷，產率2 5 ， 熔點 260 ¾。 h . N-( 3-胺丙基）[3-( 4-氯-1 , 8-萘二甲醯亞胺 )丙基]甲胺，產率 32¾，油。 i . [ 3-( 3-胺-1 , 8-萘二甲醢亞胺）丙基](3-胺 丙基）甲胺，產率32¾，熔點330tM分解）。 (請先閲讀背面.之注意事項再塡寫本頁) 本紙張又度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2〗0 X 297公釐） 82. 5. 20,000 A6 B6 五、發明説明（6 ) B . 最終產物之製備方法 例 1 N-[ 3-( 3-胺-1,8-萘二甲醯亞胺）丙基]-N-[3-( 5,6-苊萘二甲醣亞胺）丙基]胺 0.7 克（0.0021 莫耳）之 H-[ 3-( 3-胺-1,8-萘二 甲醣亞胺）丙基](3-胺丙基）胺（自例Ae )與 0.45克（0.002奠耳）之5,6-苊萘二甲酸酐在50奄升 之乙醇中加熱回流2小時。於冷卻後，濾出沉澱· Μ 乙酵洗滌及自二甲苯再结晶。獲得0.4克（38¾)之純 產物，熔點 205 °C。 Μ與例1類似之方式装備K次表中之產物： (請先閲讀背面.之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（210 X 297公釐） 82. 5. 20,000 Α6 Β6 五、發明説明（7 ) 製備之式I化合物: 表 單鐽） 例 煽號 A B D R1 R2 2 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 - 3 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 一 4 (CH2)3 - (ch2)3 ch3 - 5 (CH2)2 (CH2)3 (CH2)2 H H 6 (ch2)2 (CH2)2 (CH2)2 % H H 7 (ch2)3 - (CH2)3 ch3 - 8 (CH2)2 - (CH2)2 H — 9 (ch2)3 (CH2)4 (CH2)3 H H 10 (CH2)3 (CH2)4 (CH2)3 C2H5 C2H5 11 (CH2)3 - (ch2)3 ch3 - 12 (CH2)3 — (CH2)3 ch3 - 13 (ch2)3 - (CH2)3 ch3 - 14 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 - 15 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 - 16 (CH2)3 — (CH2)3 ch3 一 17 (ch2)3 - (CH2)3 ch3 需. 18 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 一 19 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 - 20 (CH2)3 - (CHz)3 ch3 - 21 (CH2)3 一 (CH2)3 ch3 — 22 (CH2)3 - (CH2)3 ch3 - 23” (CH2)3 - (CH2)3 ch3 一 | *1τ (請先閲讀背面，之注意事項再塡寫本頁) 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 化合物23有一個雙鐽在其五-原子環 (;| =雙鍵） 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)甲4規格（2】Ο X 297父釐） 82. 5. 20,000 272ίαϊ 82107878號專利申請案 中立說明軎修7F百（π年芫用η Β7 五、發明説明（ 續 製備之式I化合物 經濟部中央樣準局8工消費合作社印製 例 X X, Y Y/ m 熔點 (°C) 產率 (%) 2 4-C1 H H ' H 0 17 6 78 3 3-NO, H H E 0 182 80 4 2-CH3 H H H 0 96 66 5 4-C1 H H H 1 164 40 6 Η H H H 1 202 67 7 Η H H H 0 127 60 8 4-C1 H H H 0 211 63 9 3-ΝΗ2 H H H 1 14a 30 10 3-ΟΗ H H + H 1 78 68 11 4-CH3 H 5-CH3 H 0 202 77 12 4-NO, H H H 0 189 69 13 4 —NH-nBu H H H 0 119 4 7 14 3-N=C=S H H H 0 260 17 15 3-NHCOCH3 H H H - 0 177 46 16 3-NHCOOC2H5 H H H 0 189 41 17 4-Br H H H 1 0 154 84 18 3-NHCOCsH5 Ξ H H 0 . 234 81 19 3-叫 H 6-NOj H 0 238 41 20 3-N〇2 H 6-NH5 H 0 236 37 21 3-N02 H 4-C1 H 0 197 29 22 3-NH2 H H H 0 236 71 23” 3-H H H H 0 79 41 化合物23有一個雙鐽在其五-原子環 (,丨=雙键） (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -10 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 83.3.10,000

Claims (1)

1. 272181 ^‘2107878號專利申請案 正 A8 中文申請專利範圍修正本（84年β月）C8 D8 申請專利範圍 種如下列通式I所示之不對稱取代之雙萘二甲醯亞胺 〇

   //

   Π W一 Λ'

   〇 〇 其中 A - B及D 是相同或相異且是具1至4個碳原子之直鍵 或支鏈亞烷基， R 1及R 2 是相同或相異且是氫原子或C i - C β烷基， X及Υ 是相同或相異且是氫或鹵素原子，硝基*胺 基，甲基，羥基，NHC0R8或N = C = S基團， R8 iCi-U 烷基， 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 利 專 請 申 據 艮 f 含 係 〇 其分 ， 成 物性 ,。合活 及鍵鹽姐為 ,雙之藥物 1 或酸翳合 或鍵受之化 零單耐症 I 是是可癌式 上療之 理治項 生於1 與用第 其種圍 m U及一範 2 ------------1 装 訂 | 線 (請先閱讀背面之注意事項再塡寫本頁) 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS)A4規格（210 X 297公釐） 2^2191 第821〇7878號專利申請案 中文補充説明書(84年6月） A.活體外方法 細胞毒性可用粘連細胞系的標準方法，如微培養四唑鏘分析法(MTT)測 定。此分析法的詳情已發表(Cancer Research 48 : 589-601，1988)。用腫 瘤細胞’如HT-29大腸癌’之指數生長培養作微滴定盤培養。將細胞種 於96槽盤内，每槽種3,000-5,000個細胞，且在37°C生長過夜。加ΙΟ-4 至10_1ί)Μ稀釋的試驗化合物溶液。再將細胞培養48-72小時。檢驗每槽 内的活細胞數目時，加ΜΤΤ(溴化3-(4,5-二甲嘧唑-2-基)-2，5-聯苯基四唑 鏘)染料50微升之3毫克/毫升生理鹽水溶液）。將此混合物於37°C培養5小 時，然後於每槽内加5〇微升25%的SDS(pH2)。培養過夜後，用盤判讀器 讀每一槽於550毫微米之吸光度。以重複估計之平均値，與不使用藥物 的對照組相比，計算出每一藥物濃度的抑制百分比。於治療細胞抑制 550毫微米吸收率達對照組的50%的藥物濃度，設定爲1〇5〇。 B·活體内方法 本發明化合物還可以各種用以鑑定活體内活性的前臨床鑑定試驗，此試 驗爲是否適於臨床使用指標。此種鑑定可藉將人的腫瘤作異種移植，移 植於裸鼠或將鼠的腫瘤移植於同種鼠(同基因的)上完成，此法是此技藝 所已知的。將試驗化合物給予帶育腫瘤的鼠後，評估其抗腫瘤效力。 更特定地説，將生長於無胸腺裸鼠的人腫瘤或生長於同基因寄主的鼠腫 瘤移植給新受移植動物，每一移植的臛瘤片約5〇毫克重，或由腹水收取 的1 x 1〇8細胞。移植的那一天設定爲第〇天，之後用試驗化合物給由5-10 隻鼠組成的各組作靜脈内或腹腔内注射，劑量爲一般劑量。化合物可作 單一劑量給予，或多次給予，劑量爲〇.1至100毫克/公斤體重。實體腫瘤 的大小是用游標測徑氣器由二方向測量，用如下公式評估其體積： (長度X寬度2) / 2=毫米3(腫瘤體積） SLH/14G.DOC 272191 療崎照細目比，求出治療/對 f σ/c)値。各數據可作如下的評價。T/c値爲i或大於塒表示此化合物 對腫瘤生長無效，T/C値<(U時表示腫瘤塊有某種程度的減小。T/c値爲 0.15-0.49時可任爲有中等度活性，<0·01_014時表示具良好或極好活性。 化合物使腫瘤快完全消失(治療後見不到有腫瘤塊)時，表示其活性出色 的好。T/C値>0.5時認爲化合物無效。 腹腔内(ι.ρ.)給予腫瘤細胞後的壽命研究係以平均存活時間^爲基礎 評估。用藥物治療的(T)鼠的MST與對照鼠(C)的MST作比較，以Τ/C百分 比表示。使T/C百分比>100%的化合物表示腫瘤有某種程度的減小。T/C 百分比爲125-150%時表示有中等度活性，爲150-200%時表示具良好至極 好活性，>200%時表示活性出色的好。 SLH/1 4G.DOC -2 - 272191 HT-29腫瘤細胞繁殖之抑制 實例 IC50 (Μ) 1 1 X 10'5 2 7 xlO·6 • 3 3 X 10'7 4 4χ10_5 5 6 xlO·8 6 9χ10'9 7 5 xlO·7 8 7 xlO'6 9 1 χ ΙΟ-5 10 7 xlO-7 11 6χ10'5 12 1 χ ΙΟ'8 13 3χ10'6 14 ΙχΙΟ-5 15 1 χ ΙΟ'8 16 1 χ ΙΟ'6 17 5 χ ΙΟ-5 18 5 χ ΙΟ-8 19 6χ10'7 20 5 χ ΙΟ'7 21 ΙχΙΟ-6 SLH/14G.D0C 2/2191 22 — 1 — lxlO'5 23 3 X 1〇·5 細胞毒性研究係如下完成：將ΗΤ-29細胞種於有96個槽的盤内，每—槽 内（密度爲5000。種植過夜後，加藥物滴定液，使終容積爲2〇〇微升。培 養72小時後，每一槽内加50微升MTT(3毫克/毫升)於PBS内之溶液，再於 37 C培養6小時。加5〇微升25%的SDS的溶液，pH 2使反應停止。再於37 °C培養過夜後’由於MTT的代謝，用盤判讀數器於wo毫微米讀出吸光 度。由槽吸光度計算細胞毒性，以未用藥物的對照組治療的百分比表示 。所有評估都以至少一次重覆完成。 SLH/1 4G.DOC -4 - 272191 HT-29腫瘤細胞繁殖之抑制a LU# 實例 ^ IC50 (Μ) 69227 1 1x10 74533 2 7x10 69230 3 3x10 69229 4 4x10 69226 5 6x10 69224 6 9x10 69225 7 5x10 74531 8 .7x10 74532 9 1x10 73920 10 7x10 74526 11 6x10 74525 12 1x10 73921 13 3x10 73925 14 1x10 74528 15 1x10 73918 16 1x10 74524 17 5x10 74527 18 5x10 73917 19 6x10 73916 20 5x10 77652 21 1x10 74927 22 1x10 77653 23 3x10 SLH/I 4G.D0C 細胞毒性研究係如下完成：將HT-29細胞種於有96個槽的盤内，每—样 内（密度爲5000。種植過夜後，加藥物滴定液，使終容積爲2〇〇微升。择 養72小時後，每一槽内加50微升ΜΤΤ(3毫克/毫升)於PBS内之溶液，再於 37°C培養6小時。加50微升25%的SDS的溶液，pH 2使反應停止。再於37 °C培養過夜後，由於MTT的代謝，用盤判讀數器於550毫微米讀出吸光 度。由槽吸光度計算細胞毒性，以未用藥物治療的對照組的百分比表示 。所有評估都以至少一次重覆完成。 SLH/ι 〇〇c