TW202423442A - Kras g12d降解劑及其製備方法與應用 - Google Patents

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葉正清
馮焱
丁陳利
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大陸商上海領泰生物醫藥科技有限公司
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Abstract

本發明公開了一類KRAS G12D降解劑及其製備方法和應用。本發明的KRAS G12D降解劑為式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽。本發明所述化合物能夠有效降解和/或抑制細胞中的KRAS G12D蛋白，可用作製備治療和/或預防由KRAS G12D介導所引起的相關疾病或病症的藥物。

Description

KRAS　G12D降解劑及其製備方法與應用
本發明屬於醫藥技術領域，具體的，本發明涉及KRAS G12D降解劑及其製備方法和其應用。
本申請要求申請日為2022年10月21日的中國專利申請2022112973637的優先權；申請日為2023年1月20日的中國專利申請2023100563994的優先權；申請日為2023年7月11日的中國專利申請2023108468752的優先權；申請日為2023年7月19日的中國專利申請2023108869828的優先權；申請日為2023年10月17日的中國專利申請2023113475347的優先權。本申請引用上述中國專利申請的全文。
RAS (rat sarcoma)是在腫瘤中突變率最高的致癌基因之一，其突變存在於約30%的人類惡性腫瘤中。RAS家族包括KRAS、NRAS和HRAS，其中KRAS (kirsten rat sarcoma viral oncogene)相較於其他兩種RAS亞型更易出現突變，約占85%，在實體瘤中尤為常見 (Cancer Res. 2020, 80, 2969-2974)。30~40%的結直腸癌、90%的胰腺癌、15~20%的肺癌都存在KRAS基因突變。KRAS被激活以後，通過RAF-MEK-ERK和PI3K-AKT-mTOR等下游信號通路，調控細胞增殖、分化和存活等功能。KRAS基因突變後，蛋白持續處於活化狀態，導致下游信號通路持續激活而促進腫瘤發生 (Nat. Rev. Cancer 2015, 15, 290-301)。因此，KRAS是腫瘤治療努力攻克的重要靶點，包括靶向KRAS 蛋白本身、或其翻譯後修飾、膜定位、蛋白質-蛋白質相互作用及RAS下游信號通路。
由於，KRAS與GTP或GDP以超高親和力結合(皮莫耳濃度)，而且RAS蛋白表面光滑，缺乏理想的小分子結合位點，因此開發直接作用於RAS蛋白的競爭性抑制劑被認為是極具挑戰性的(Nat. Rev. Drug Discov. 2020, 19, 533-552)。
目前，根據抑制劑的作用模式，KRAS抑制劑 (Cancer Discov. 2022, 12, 924-937) 可以分為： 1) 直接靶向於KRAS 的抑制劑，如KRAS G12C、KRAS G12D、KRAS G12R (J. Am. Chem. Soc. 2022, 144, 35, 15916-15921)和KRAS G12S (Nat. Chem. Biol. 2022, 18, 1177-1183)等抑制劑； 2) 間接作用於KRAS 的抑制劑，如SHP2 (SHP 099, Nature 2016, 535, 148−152 & J. Med. Chem. 2016, 59, 7773−7782; RMC4550, Nat. Cell Biol. 2018, 20, 1064-1073; TNO155, J. Med. Chem. 2020, 63, 22, 13578-13594; RMC4630, WO 2021142026A1; JAB-3068, WO2017211303A1等)、SOS1抑制劑 (Bay-293, Proc. Natl. Acad. Sci. U S A. 2019, 116, 2551-2560; BI-3406, Cancer Discov. 2021, 11, 142-157; MRTX0902, J. Med. Chem. 2022, 65, 678-9690等)及KRAS (on)等抑制劑 (WO2021091982A1, WO2022060836A1)。
近年來，隨著對KRAS研究的不斷深入，KRAS 抑制劑的研發也終於取得了顯著的進展 (Cancer Discov. 2022, 12, 924-937)。KRAS-G12C抑制劑設計過程中，主要利用12號密碼子的半胱胺酸，易於形成共價鍵，採用共價靶向半胱胺酸位點成為KRAS藥物開發的重要突破口。Shokat在Switch-Ⅱ發現了一種新的變構結合口袋，稱為Switch-Ⅱ口袋，並開發了第一批KRAS-G12C共價抑制劑 (Nature 2013, 503, 548–551; Nat. Rev. Drug Discov. 2016, 15, 771–785)。2021年5月28日，FDA加速批准Amgen公司開發的Lumakras (Sotorasib, AMG510) ( Nature 2019, 575, 217-223; J. Med. Chem. 2020, 63, 52−65)，用於治療腫瘤攜帶KRAS-G12C突變的非小細胞肺癌患者 (N. Engl. J. Med. 2021, 384, 2371-2381)。目前全球有多款靶向KRAS-G12C的小分子藥物處於臨床，2022年2月16日，FDA接受了Mirati公司遞交的第二款KRAS-G12C抑制劑Adagrasib (MRTX849) (Cancer Discov. 2020, 10, 54–71 & J. Med. Chem. 2020, 63, 6679−6693)的新藥申請，用於治療至少接受過一種全身療法的攜帶KRAS G12C突變的非小細胞肺癌患者(N. Engl. J. Med. 2022, 387, 120-131)。Adagrasib有望成為全球第二款KRAS靶向藥。
與KRAS G12C是非小細胞肺癌 (NSCLC)患者中最常見的突變不同，KRAS G12D是結直腸癌和胰腺癌中最常見的突變。因為KRAS G12C突變體12號密碼子有一個半胱胺酸 (Cys)，易於形成共價鍵；借助這一結構特徵，可實現突變體與小分子抑制劑的共價結合。但KRAS G12D突變體12號密碼子上面是天冬胺酸 (Asp)，沒有辦法採取這一策略。
KRAS-G12D的激活主要是由蛋白-蛋白相互作用介導的。考慮到KRAS蛋白表面缺乏明顯的可結合口袋，且環肽與蛋白質表面具有高度的結合親和力，肽類分子作為靶向KRAS G12D的首選 (Biochem. Biophys. Res. Commun. 2017, 484, 605−611; Bioorg. Med. Chem. Lett. 2017, 27, 2757−2761; ACS Med. Chem. Lett. 2017, 8, 732−736; Sci. Rep. 2020, 10, 21671)。目前已經報道了幾種有效的靶向KRAS G12D的環肽(MedChemComm 2013, 4, 378−382; Angew. Chem., Int. Ed. 2015, 54, 7602−7606; J. Med. Chem. 2021, 64, 13038)，但它們的細胞膜通透性比較差。細胞對肽的攝取能力取決於細胞表面受體神經纖維蛋白-1 (NRP1)的調節，且該蛋白在人肺癌細胞的細胞膜上過表達。因此，篩選出靶向NRP1和KRAS G12D的環肽，不僅使環肽具有較高的細胞攝取能力，還能作用於KRAS G12D發揮抗腫瘤作用 ( J. Am. Chem. Soc. 2022, 144, 7117−7128)。
2021年12月10日，Mirati公司報道了第一個非共價、有效和高選擇性的KRAS-G12D抑制劑MRTX1133 (J. Med. Chem. 2022, 65, 3923-3942；WO2021041671A1)。MRTX1133可抑制激活或失活狀態的KRAS-G12D突變體細胞，但不抑制野生型腫瘤細胞，特異性在1000倍以上。在胰腺癌和結直腸癌的體內移植腫瘤模型中，均顯示出劑量依賴性抑制。
WO2021041671A1、WO2022015375A1、WO2022031678A1、WO2022066646A1、WO2022098625A1、WO2022192790A1、WO2022192794A1、WO2021106231A1、WO2021107160A1、WO2022173870A1等專利公開了幾類KRAS G12D抑制劑。
靶向蛋白降解劑為近年來全球範圍內熱門的研發技術 (Nat. Rev. Drug Discov. 2017, 16, 101-114; Nat. Rev. Drug Discov. 2019, 18, 949-963; Nat. Rev. Drug Discov. 2022, 21, 181-200)。該技術具有以下特點：「可成藥」 靶點開發遭遇瓶頸，「不可成藥」 靶點潛力無窮，PROTAC技術有望解決「不可成藥」 靶點的開發難題；PROTAC藥物具有成藥性好、選擇性高、克服耐藥性、給藥途徑多樣、用量小、毒性低等優點。
因此，對KRAS G12D靶向蛋白降解劑存在未滿足的臨床需求。
本發明所要解決的技術問題是為了克服KRAS G12D降解劑種類有限的缺點，為此，而提供了一種KRAS G12D降解劑及其製備方法和應用。本發明的提供的化合物能夠有效降解和/或抑制細胞中的KRAS G12D蛋白。
本發明供了式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽： G-L-E             Gʹ-L-E Ⅰ                 Ⅰ’ 其中： G為G1： ； Gʹ為G1ʹ： ； 各Y 1獨立地為鍵、O、-C(R 3a) 2或-NR 3a； 各X 1獨立地為鍵或-(CH 2) m-； 各X 1’獨立地為鍵或-C(O)-； 各R 1a獨立地為-OH、-N(R 3a) 2、C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基，所述C 3-C 12環烷基、3-12元雜環烷基可任選被1個或多個R a取代； 各R 2a獨立地為鹵素、氘、氰基、胺基、羥基、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 2、-N(R 3a) 2、C 1-C 3烷基-O-C l-C 3烷基-、HC(=O)-、-CO 2R 3a、-CON(R 3a) 2或5-6元雜芳基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基或5-6元雜芳基任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； 各R 3a獨立地為H、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 3-C 6烯基或C 3-C 6炔基； 或者兩個R 3a與它們所連接的原子一起形成4-12元雜環烷基，所述4-12元雜環烷基任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； 或者R 1a與R 3a（此處的R 3a為Y 1基團中-C(R 3a) 2和-NR 3a中的R 3a）與它們各自連接的原子一起形成4-12元雜環烷基，所述4-12元雜環烷基含有至少一種選自N、O或S的雜原子（當R 1a與-NR 3a中R 3a與它們各自連接的原子一起形成4-12元雜環烷基時，所述的4-12元雜環烷基含有至少1個N原子），且任選被1個或多個R b取代； 各環A1獨立地為不存在、-L’-6-15元芳基、-L’-5-15元雜芳基或-L’-5-15元雜環烷基； 各環B獨立地為6-15元芳基、5-15元雜芳基、C 5-C 15環烷基或5-16元雜環烷基，所述6-15元芳基、5-15元雜芳基、C 5-C 15環烷基或5-16元雜環烷基任選被1個或多個R a取代； 各L’獨立地為鍵或C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被1個或多個氘、羥基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R a和各R b獨立地為氫、羥基、鹵素、氰基、-N(R 3a) 2、-CH 2N(R 3a) 2、3-8元雜環烷基、C l-C 6烷基、HC(=O)-、-CO 2R 4a、-CO 2N(R 4a) 2、C l-C 3烷氧基、(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-、C l-C 3烷基-N(R 4a) 2、C 2-C 4烯基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基、C l-C 3烷氧基、C 2-C 4烯基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基任選被1個或多個氘、鹵素、氰基、羥基、胺基、硝基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； 各R 4a獨立地為氫、C l-C 3烷基或C l-C 3羥基烷基； 或者兩個R 4a與它們所連接的原子一起形成雜環烷基，所述雜環烷基任選被1個或多個氘、-OH、-NH 2、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； m為0、1、2、3或4； n為0、1、2、3或4； J 1和J 2獨立地為CR´或N；條件是：J 1和J 2不同時為CR´；R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； 各R 2a’獨立地為鹵素、氘、氰基、胺基、羥基、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 2、N(R 3a) 2、C 1-C 3烷基-O-C l-C 3烷基-、HC(=O)-、-CO 2R 3a、-CON(R 3a) 2、5-6元雜芳基或-O-3-8元雜環烷基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基、5-6元雜芳基或-O-3-8元雜環烷基任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； 當J 1和J 2同時為N時，至少有一個R 2a’為-O-3-8元雜環烷基； L為連接鏈，其通過共價鍵連接G和E； L為連接鏈，其通過共價鍵連接Gʹ和E； 其中，所述各E獨立地為E1、E2或E3： 其中所述E1中： Z’為O、S或CH 2； X 2'為CH或N； Y 2'為CH、N、O或者S； Q 1、Q 2、Q 3、Q 4和Q 5各自獨立的為CR 3b或N； R 3b各自獨立地為氫、氘、羥基、胺基、氰基、鹵素、硝基、巰基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、6-10元芳基、5-10元雜芳基、-O-(C 1-C 6烷基)、-O-(C 1-C 6雜烷基)、-O-(C 3-C 8環烷基)、-O-(3-8元雜環烷基)、-S-(C 1-C 6烷基)、-S-(C 1-C 6雜烷基)、-S-(C 3-C 8環烷基)、-S-(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 1-C 6雜烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2、-N(3-8元雜環烷基) 1-2、-O-(C 6-C 10芳基)、-O-(5-10元雜芳基)；所述C 1-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基任選的被1-3個獨立的選自氘、羥基、鹵素、氰基、胺基、O(C 1-C 6烷基)、O-(C 3-C 8環烷基)、-O-(3-8元雜環烷基)、N(C 1-C 6烷基) 1-2、-NH(C 3-C 8環烷基)、-NH(3-8元雜環烷基)、-O-( C 6-C 10芳基)和-O-(5-10元雜芳基)的基團取代；或者相鄰的兩個R 3b與其所連接的原子一起形成環烷基、雜環烷基（例如5、6、7或8元的雜環烷基，雜原子為N，S和O中的一種或多種，個數為1個、2個或3個）、雜芳基或者芳基； m''為1、2或3； R 1b各自獨立地為氫、氘、羥基、胺基、氰基、鹵素、C 1-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、-O(C 1-C 6烷基)、-O-(C 3-C 8環烷基)、-O-(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-NH(C 3-C 8環烷基)、-NH(3-8元雜環烷基)、-O-( C 6-C 10芳基)或-O-(5-10元雜芳基)，所述烷基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基任選的被1-3個獨立的選自羥基、鹵素、氰基、羥基和胺基的基團取代； R 2b為無、氫、氘、C 1-C 6烷基或者C 3-C 6環烷基，所述C 1-C 6烷基和C 3-C 6環烷基任選的被1-3個獨立的選自羥基、鹵素、氰基、羥基、胺基和-OC(O)(C 1-C 6烷基)的基團取代。
其中所述E2中： Q 1、Q 2、Q 3和Q 4各自獨立地為CR 3b或N； W為CR 1cR 2c、C(S)、C(O)、SO 2、-OC=R 4c-、-SC=R 4c-或-C=R 4cNR 5c-或-N=CA′-； X為CH 2、O或S； X c為-CH 2-或-NG′-； Z為CH 2、O或者S； G′和G′′各自獨立地為氫、氘、C 1-C 6烷基、OH、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基任選被1個或多個羥基、鹵素、氰基和胺基取代； A′為氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基或鹵素； R 1c、R 2c和R 3c各自獨立的為氫、氘、羥基、鹵素、-NH 2、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6鹵代烷基、-CONR ′R ′′、-OR ′、-NR ′R ′′、-SR ′、-SO 2R ′、-SO 2NR ′R ′′、-CR ′R ′′、-CR ′NR ′R ′′、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-P(O)(OR ′)R ′′、-P(O)R ′R ′′、-OP(O)(OR ′)R ′′、CN、-NR ′SO 2NR ′R ′′、-NR ′C(O)NR ′R ′′、-C(O)NR ′C(O)R ′′、-NR ′C(=N-CN)NR ′R ′′、-C(=N-CN)NR ′R ′′、-NR ′C(=N-CN)R ′′、-NR ′C(=C-NO 2)NR ′R ′′、-SO 2NR ′COR ′′、-NO 2、-COR ′、-C(C=N-OR ′)R ′′、-CR ′=CR ′R ′′、-CCR ′、-S(C=O)(C=N-R ′)R ′′、-SF 5或-OCF 3; R 4c為O或者S； R 5c為H、C 1-C 6烷基、C 6-C 10芳基、5-12元雜芳基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基； R ′和R ′′各自獨立地為鍵、氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或3-8元雜環烷基； n ′′為0、1、2、3或4； 為單鍵或雙鍵； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體； 其中所述E3中： X 1和X 2各自獨立地為鍵、O、C(O)、C(S)、NR 1d或CR 1dR 2d； R 1d和R 2d各自獨立地為H、氘、C 1-C 6烷基，所述C 1-C 6烷基任選被1個或多個鹵素或C 1-C 6烷氧基取代； R P獨立地為H、氘、鹵素、-OH、C 1-C 3烷基，所述C 1-C 3烷基任選被1個或多個鹵素、羥基或C 1-C 3烷氧基取代； W 3為C 1-C 6烷基、-T-N(R 3dR 4d)、-T-N(R 3dR 4d)X 3、-T- C 6-C 10芳基、-T-5-10元雜芳基、-T-3-8元雜環基、-NR 5d-T-C 6-C 10芳基、-NR 5d-T-5-10元雜芳基或-NR 5d-T-3-8元雜環基，所述C 1-C 6烷基、-T-N(R 3dR 4d)、-T-N(R 3dR 4d)X 3、-T-C 6-C 10芳基、-T-5-10元雜芳基、-T-3-8元雜環基、-NR 5d-T-C 6-C 10芳基、-NR 5d-T-5-10元雜芳基或-NR 5d-T-3-8元雜環基任選被取代； X 3為C(O)、R 3d、R 4d或R 5d； R 3d、R 4d或R 5d各自獨立地選自H、氘、C 1-C 6烷基，所述C 1-C 6烷基任選被1個或多個鹵素、-OH、R 1dC(O)、R 1dC(S)、R 1dSO、R 1dSO 2、NR 1dR 2dC(O)、NR 1dR 2dC(S)、NR 1dR 2dSO或NR 1dR 2dSO 2； T為C 1-C 6烷基或-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-中的1個或多個亞甲基任選的被選自氘、鹵素或C 1-C 6烷基取代，所述C 1-C 6烷基任選被鹵素、-OH或胺基取代； n為0、1、2、3、4、5或6； W 4為 、 、 或 ，所述 、 、 或 任選被取代； R 6d和R 7d各自獨立地為H、氘、C 3-C 8環烷基或C 1-C 6烷基，所述C 3-C 8環烷基或C 1-C 6烷基任選被鹵素、-OH、CN、NO 2或胺基取代； W 5為6-10元芳基或5-10元雜芳基； R 8d為H、氘、鹵素、CN、OH、NO 2、NR 6dR 7d、OR 6d、COR 6dR 7d、NR 6dCOR 7d、SO 2R 6dR 7d、R 6dSO 2R 7d、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基，所述C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基任選被氘、鹵素、-OH、CN、NO 2或胺基取代。
優選的，本發明某些實施方式中，上述各C 1-C 6雜烷基中1、2、3或4個亞甲基被雜原子和/或雜原子團替換，所述雜原子為O、S和N中的一種或多種；雜原子團為-C(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NH-和-NHC(O)-中的一種或多種。
優選的，本發明某些實施方式中，上述各3-8元雜環烷基、上述各4-12元雜環烷基、上述各5-16元雜環烷基和上述各雜環烷基的中的雜原子或雜原子團各自獨立地可為O、S、-S(O)-、-S(O) 2-和N中的一種或多種，個數為1、2、3、4或5個。優選的，當雜原子為氮原子時，其不被季銨化或氧化。
優選的，本發明某些實施方式中，上述各5-6元雜芳基、上述各5-10元雜芳基、上述各5-12元雜芳基、上述各5-15元雜芳基和上述各雜芳基的中的雜原子各自獨立地可為O、S、-S(O)-、-S(O) 2-和N中的一種或多種，個數為1、2、3或4個。
優選的，本發明某些實施方式中，式Ⅰ中，R 2a、R 3a和L’中的C 1-C 4亞烷基、R a和R b中一個或多個基團的定義還可以替換為如下的定義，條件是：L通過-C(O)-與E連接； R 2a和R 2a’獨立地為-O-C l-C 6雜烷基、-NH(C l-C 6雜烷基) 、-N(C l-C 6雜烷基)(C l-C 6雜烷基)或-C 3-C 4炔基-N(R 5a’) 2； R 2a和R 2a’中，所述羥基獨立地任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3烷基、C 3-C 8環烷基、-Si-C 1-C 3烷基、3-8元雜環烷基或-CON(R 3a) 2取代； R 2a和R 2a’中，所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基和5-6元雜芳基獨立地選被1個或多個C 3-C 8環烷基、-Si-C 1-C 3烷基、3-8元雜環烷基或-CON(R 3a) 2取代； 各R 3a為氘； L’中的C 1-C 4亞烷基還可任選地被1個或多個鹵素取代； R a和R b獨立地可為鍵、氘、氧代、氰基甲基、-N(R 3a) 2、-CH 2N(R 3a) -2、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(C 1-C 6雜烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-O-苯基、-O-吡啶基、C 2-C 4炔基、三唑基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 2、-C 3-C 4炔基-N(R 3a) 2或3-8元雜環烷基； 或者，相鄰的兩個R a與它們所連接的原子一起形成6-10元芳基、5-10元雜芳基、5-8元環烷基或5-8元雜環烷基，所述6-10元芳基、5-10元雜芳基、5-8元環烷基或5-8元雜環烷基任選被1個或多個羥基、胺基、鹵素、氰基或硝基取代； R a和R b中，所述C l-C 6烷基、C l-C 3烷氧基、C 2-C 4烯基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基任選被1個或多個C l-C 3鹵代烷基取代； R a和R b中，所述C 1-C 6雜烷基、苯基、吡啶基、C 2-C 4炔基、三唑基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 1-2或-C 3-C 4炔-N (R 3a) 2任選被1個或多個氘、鹵素、氰基、羥基、胺基、硝基、C l-C 3鹵代烷基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； 各R 4a獨立地為C 4-C 6烷基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 1a中，所述C 3-C 12環烷基為C 3-C 6環烷基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 1a中，所述3-12元雜環烷基為5-6元的單環的飽和的雜環烷基或者7、8或9元的橋環雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個，例如哌啶基、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的鹵素為F、Cl、Br或I，例如F或Cl。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的C l-C 6烷基、所述的-S-C l-C 6烷基中的C l-C 6烷基和所述的-O-C 1-C 6烷基中的C l-C 6烷基獨立地為C l-C 4烷基，還可為C l-C 3烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的C l-C 6烷基或所述的-O-C 1-C 6烷基可任選被1個或多個鹵素或C 1-C 3烷氧基取代。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的C 1-C 6雜烷基為C 3雜烷基，所述雜烷基中2亞甲基被O和-C(O)NH-替換，例如 。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的C 3-C 8環烷基為C 3-C 6環烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基或環己基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a’中，所述的-O-3-8元雜環烷基為-O-3、4、5、或6元單環的飽和的雜環烷基，雜原子為N、S和O種的一種或多種，個數為1、2或3個，例如 。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的C 3-C 8可任選被1個或多個C 1-C 3烷基取代。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的3-8元雜環烷基為3-6元雜環烷基，雜原子為N、S和O種的一種或多種，個數為1、2或3個。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’中，所述的C 2-C 6炔基為C 2-C 4炔基，例如乙炔基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’任選被取代基取代，所述的取代基中，所述的鹵素為F、Cl、Br或I，例如F。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’任選被取代基取代，所述的取代基中，所述的C 1-C 3烷氧基為甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基，例如甲氧基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 2a和各R 2a’任選被取代基取代，所述的取代基中，所述的C 1-C 3烷基為甲基、乙基、正丙基或異丙基，例如甲基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R 3a中，所述的C l-C 6烷基、所述的-S-C l-C 6烷基中的C l-C 6烷基和所述的-O-C 1-C 6烷基中的C l-C 6烷基獨立地為C l-C 4烷基，還可為C l-C 3烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基。
優選的，本發明某些實施方式中，各環A1中，所述的-L’-6-15元芳基中的6-15元芳基為6-10元芳基，例如苯基或萘基。
優選的，本發明某些實施方式中，各環A1中，所述的-L’-5-15元雜芳基中的5-15元雜芳基為5-10元雜芳基，還可為6、7、8或9元的單環或雙環的雜芳基，雜原子為N、S和O中的一種或多種，個數為1或2個，例如吡啶基、1H-吲唑基、苯基[d]噻唑或惡唑並苯基。
優選的，本發明某些實施方式中，各環A1中，所述的-L’-5-15元雜環烷基中的5-15元雜環烷基為5-10元雜環烷基，雜原子為N、S和O中的一種或多種，個數為1或2個。
優選的，本發明某些實施方式中，各環B中，所述6-15元芳基為6-10元芳基，例如苯基或萘基。
優選的，本發明某些實施方式中，各環B中，所述5-15元雜芳基為5-10元雜芳基，還可為5-6元雜芳基，雜原子為N，個數為1或2個，例如吡啶基。
優選的，本發明某些實施方式中，各環B中，所述C 5-C 15環烷基為C 5-C 7單環的飽和的環烷基、C 5-C 7環烯基或C 8-C 15元三環的環烷基，例如 或 ，「 」表示通過此處鍵與其連接的環稠合。
優選的，本發明某些實施方式中，各環B中，所述5-16元雜環烷基為5-7元的單環的雜環烷基的雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個，例如吡咯烷基、哌啶基或四氫-2H-吡喃基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R a和各R b中，所述鹵素為F、Cl、Br或I，例如F或Cl。
優選的，本發明某些實施方式中，各R a和各R b中，所述C 1-C 6烷基為C 1-C 3烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基。
優選的，本發明某些實施方式中，各R a和各R b中，所述C l-C 3烷氧基和所述(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-中的C l-C 3烷氧基獨立地為甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基。
優選的，本發明某些實施方式中，所述G1為G1-Ⅰ或G1-Ⅱ： 其中所述G1-Ⅰ中： R 1e為羥基、-N(R a’’) 2、C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基（例如6、7、8、9或10元單環或橋環雜環烷基，雜原子為N、S或O中的一種或多種，個位數為1、2或3個），所述C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基任選被一個或多個R x取代； X 1e為鍵或C l-C 4亞烷基； Y 1e為鍵、O或NR a’’； 環C為C 6-C 10元芳基（例如苯基）、5-10元雜芳基（例如5或6元雜芳基，雜原子為N，個位數為1或2）或者5-10元雜環烷基（例如5或6元雜環烷基，雜原子為N，個位數為1或2）； X’為鍵、C或者N（例如X’為鍵、C或N）； Y’為C或者N； 為一個或多個任選存在的雙鍵； R 2e為H、氘、鹵素、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； R 3e為鍵、H、氘、鹵素、氰基、氧代、-O(C 1-C 6烷基)（例如甲氧基或乙氧基）、-O(C 1-C 6雜烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-O-苯基或-O-吡啶基，所述苯基或吡啶基任選被1個或多個羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 3鹵代烷基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； R 4e為-L 1-6-10元芳基（例如苯基或萘基）或-L 1-5-10元雜芳基（例如6、7、8或9元的單環或雙環的雜芳基，雜原子為N、S或O中的一種或兩種，個位數為1或2），所述6-10元芳基或5-10元雜芳基任選被1個或多個R a’取代； 或者R 4e與它所連接的碳原子一起形成C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基（即R 4e與其連接的Y’形成螺環結構），所述C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基任選被鹵素、羥基、氰基、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)和C l-C 6烷基取代； R 5e為氫、氘、鹵素（例如F、Cl或Br）、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； L 1為鍵或C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被鹵素、氘、羥基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R a’’獨立地為氫、氘或C l-C 6烷基； 各R x獨立地為H、氘、-OH、鹵素、C l-C 3烷基（例如甲基）、-N(R a’’) 1-2（例如-N(CH 3) 2）、-CH 2N(R a’’) 1-2、C 1-C 3烷氧基、(C 1-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基、C l-C 3烷基-N(R a’’) 1-2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)、-CO 2R a’’、-CON(R a’’) 2、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基，所述C l-C 3烷基、C l-C 3烷氧基或C 2-C 4烯基任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基或胺基取代； R a’為獨立地為鹵素（例如F或Cl）、氰基、羥基、C l-C 6烷基（例如甲基、乙基或異丙基）、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基（例如-S-甲基）、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基（例如乙炔基）、三唑基、-O-C l-C 6烷基（例如乙氧基）、-O-C l-C 6雜烷基、-N(C l-C 6烷基) 1-2、-N(C l-C 6雜烷基) 1-2、-CH 2C(=O)N(R 5a’) 2、-C 3-C 4炔基(NR 5a’) 1-2、-N(R 5a’) 1-2、(C 1-C 3烷氧基)C l-C 3烷基-、C 3-C 6環烷基（例如環丙基）或3-6元雜環烷基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-N(C l-C 6烷基) 1-2、-N(C l-C 6雜烷基) 1-2、C 3-C 6環烷基或3-6元雜環烷基，任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基、胺基、C 1-C 3烷基、-O-C 1-C 3烷基或-Si-C 1-C 3烷基取代； 各R 5a’獨立地為H、氘或C 1-C 6烷基。
其中所述G1-Ⅱ中： 環D為6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基任選被R b’取代，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 環E為C 5-C 7環烷基、5-7元雜環烷基(例如5元單環的雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個)、C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基、C 5-C 7環烯基或8-10元螺環；環E與嘧啶環之間形成並環，所述C 5-C 7環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 5-C 7環烯基或8-10元螺環任選被R b’’取代，所述雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； Y’’為6-10元雜環烷基、6-10元芳基（例如苯基或萘基）或5-10元雜芳基，所述6-10元雜環烷基或5-10元雜芳基含有至少一種選自N、S或O的雜原子，且任選被R b’’’取代； R b’為C l-C 3烷基、羥基、-O(C l-C 3烷基)、氰基、鹵素、-N(R x’) 1-2、-CH 2N(R x’) 1-2、氰基甲基或3-8元雜環烷基； R b’’為鹵素(例如F)、氘、氰基、羥基、C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基（例如乙炔基）、三唑基、-O-C 1-C 3烷基、-CH 2C(=O)N(R x’) 1-2、-C 3-C 4炔基(NR x’) 1-2、-N(R x’) 1-2、 C 1-C 3烷氧基- C l-C 3烷基-，所述C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、C 1-C 3烷氧基任選被氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； R b’’’為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 2-C 4炔基、C 2-C 4烯基、O(C l-C 6烷基)、HC(=O)-、-CO 2R x’、-CO 2N(R x’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R x’獨立地為H或C 1-C 3烷基； p為0或1。
優選的，本發明某些實施方式中，所述G1為G1-Ⅰ-a、G1-Ⅰ-b或G1-Ⅱ-a： 其中： r為1或2； t為1、2或3； W 1與W 2與它們所連接的N原子一起形成6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子（例如6、7、8、9或10元單環或橋環雜環烷基，雜原子為N、S或O中的一種或多種，個位數為1、2或3個，且至少含有1個N）； 其中所述G1-Ⅰ-a、G1-Ⅰ-b或G1-Ⅱ-a的環C、R 1e、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’、Y’’和p如本發明所定義和描述。
優選的，本發明某些實施方式中，所述G1為G1-Ⅰ-a1、G1-Ⅰ-a1′、G1-Ⅰ-a1′′、G1-Ⅰ-a1′′′、G1-Ⅰ-a2、G1-Ⅰ-a2′、G1-Ⅰ-b1、G1-Ⅰ-b2或G1-Ⅱ-a1： 其中所述G1-Ⅰ-a1、G1-Ⅰ-a1′、G1-Ⅰ-a1′′和G1-Ⅰ-a1′′′中： R 1a’為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基（例如甲基）、C 3-C 8環烷基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’、-CO 2N(R 5a’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基或C 3-C 8環烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R 5a’獨立地為氫或C l-C 6烷基； 其中R 3e、R 4e、R 5e、X’和Y’如G1-Ⅰ-a所定義和描述。
其中所述G1-Ⅰ-a2和G1-Ⅰ-a2′中： 各R 1a’’獨立地為氫、羥基、鹵素、C l-C 3烷基、C l-C 3烷氧基、(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-、C l-C 3烷基-N(R 5a’) 1-2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’或-CO 2N(R 5a’) 2，所述C l-C 3烷基或C 2-C 4烯基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R 4a’為-L 2-6-10元芳基、6-10元芳基（例如苯基或萘基）、-L 2-5-10元雜芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基可任選被一個或多個R 8a’取代； 各L 2為C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R 5a’獨立地為H或C l-C 3烷基； 每個R 8a’獨立地是鹵素、氘、氰基、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、N(R 5a’) 1-2或-O-C l-C 6烷基，所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、-O-C 1-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R 3a’是氫或氧代。 所述G1-Ⅰ-b1、G1-Ⅰ-b2、G1-Ⅱ-a1中： 其中R 1e、R 3e、R 4e、R 5e、t、r、Y’’和p如本發明中所定義和描述。 優選的，本發明某些實施方式中，所述G1´為G1´-Ⅰ或G1´-Ⅱ： 其中所述G1´-Ⅰ中： n2為1或2； J 1和J 2獨立地選自CR´或N，且J 1和J 2不同時為CR´； R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； R 1e為羥基、-N(R a’’) 2、C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基，所述C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基任選被一個或多個R x取代； X 1e為鍵或C l-C 4亞烷基； Y 1e為鍵、O或NR a’’； 環C為C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基或者5-10元雜環烷基； X'為鍵、O、C或者N； Y'為C或者N； 為一個或多個任選存在的雙鍵； R 2e為H、氘、鹵素、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； R 3e為H、氘、鹵素、氰基、氧代、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 1-C 6雜烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-O-苯基或-O-吡啶基，所述苯基或吡啶基任選被1個或多個羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 3鹵代烷基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； R 4e為-L 1-6-10元芳基或-L 1-5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基任選被1個或多個R a’取代； 或者當n2為2，兩個R 4e與它所連接的碳原子一起形成C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基，所述C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基任選被鹵素、羥基、氰基、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)或者C l-C 6烷基取代； R 5e為氫、氘、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； L 1為鍵或C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被鹵素、氘、羥基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R a’’獨立地為氫、氘或C l-C 6烷基； 各R x獨立地為H、氘、-OH、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、-N(R a’’) 1-2、-CH 2N(R a’’) 1-2、C 1-C 3烷氧基、(C 1-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基、C l-C 3烷基-N(R a’’) 1-2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)、-CO 2R a’’、-CON(R a’’) 2、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C l-C 3烷氧基或C 2-C 4烯基任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基或胺基取代； R a’為獨立地為鹵素、氘、氰基、羥基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-NH(C l-C 6雜烷基)、-N(C l-C 6雜烷基) 2、-CH 2C(=O)N(R 5a’) 2、-C 3-C 4炔基(NR 5a’) 2、-N(R 5a’) 2（例如-N(C l-C 6烷基) 2、-NH(C l-C 6雜烷基)、）、(C 1-C 3烷氧基)C l-C 3烷基-、C 3-C 6環烷基或3-6元雜環烷基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-NH(C l-C 6烷基)、-N(C l-C 6烷基) 2、-NH(C l-C 6雜烷基)、-N(C l-C 6雜烷基) 2、-、C 3-C 6環烷基、3-6元雜環烷基，任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基、胺基、C 1-C 3烷基、-O-C 1-C 3烷基或-Si-C 1-C 3烷基取代； 各R 5a’獨立地為H、氘或C 1-C 6烷基； 其中所述G1´-Ⅱ中： J 1和J 2獨立地為CR´或N，且J 1，J 2不同時為CR´； R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； 環D為6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基任選被R b’取代，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 環E為C 5-C 15環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基或C 5-C 7環烯基8-10元螺環；所述C 5-C 7環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 5-C 7環烯基或8-10元螺環任選被R b’’取代，所述雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； Y''為6-10元雜環烷基、6-10元芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元雜環烷基或5-10元雜芳基含有至少一種選自N、S或O的雜原子，且任選被R b’’’取代； R b’為氫、C l-C 6烷基、羥基、-O(C l-C 3烷基)、氰基、鹵素、-N(R x’) 2、-CH 2N(R x’) 2、、-CO 2R x’、-CO 2N(R x’) 2氰基甲基5-6元雜芳基或3-8元雜環烷基，所述C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R b’’為鹵素、氘、氰基、羥基、C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 3烷基、-CH 2C(=O)N(R x’) -2、-C 3-C 4炔基(NR x’) 2、-N(R x’) 2或 C 1-C 3烷氧基- C l-C 3烷基-，所述C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、C 1-C 3烷氧基任選被氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； R b’’’為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 2-C 4炔基、C 2-C 4烯基、O(C l-C 6烷基)、HC(=O)-、-CO 2R x’、-CO 2N(R x’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R x’獨立地為H或C 1-C 6烷基； p為0或1。
優選的，本發明某些實施方式中，所述G1´-I為G1´-Ⅰ-a或G1´-Ⅰ-b；所述G1´-Ⅱ為G1´-Ⅱ-a： 其中： r為1或2； t為1、2或3； W 1與W 2與它們所連接的N原子一起形成6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 其中所述G1´-Ⅰ-a、G1´-Ⅰ-b或G1´-Ⅱ-a的環C、J 1、J 2、R 1e、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、X'、Y'、Y''和p如本發明所定義和描述。
優選的，本發明某些實施方式中，所述G1´為G1´-Ⅰ-a1、G1´-Ⅰ-a1′、G1´-Ⅰ-a1′′、G1´-Ⅰ-a1′′′、G1´-Ⅰ-a2、G1´-Ⅰ-b1、G1´-Ⅰ-b2或G1´-Ⅱ-a1： 其中所述G1´-Ⅰ-a1 、G1´-Ⅰ-a1′、G1´-Ⅰ-a1′′和G1´-Ⅰ-a1′′′中： R 1a'為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’、-CO 2N(R 5a’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R 5a’是獨立地為氫或C l-C 6烷基； 其中J 1、J 2、R 3e、R 4e、R 5e、X'和Y'如本發明中G1´-Ⅰ-a所定義和描述； 其中所述G1´-Ⅰ-a2中： J 1和J 2獨立地為CR´或N，且J 1和J 2不同時為CR´； R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； t´為0或1； 各R 1a''獨立地為氫、羥基、鹵素、C l-C 3烷基、C l-C 3烷氧基、-(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-、-C l-C 3烷基-N(R 5a’) -2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’或-CO 2N(R 5a’) 2，所述C l-C 3烷基或C 2-C 4烯基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R 4a'為-L 2-6-10元芳基、6-10元芳基、-L 2-5-10元雜芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基可任選被一個或多個R 8a’取代； L 2為C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； R 5a’獨立地為H或C l-C 3烷基； 每個R 8a’為地是鹵素、氘、氰基、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、N(R 5a’) 1-2或-O-C l-C 6烷基，所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、-O-C 1-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R 3a'是氫或氧代； 所述G1´-Ⅰ-b1、G1´-Ⅰ-b2和G1´-Ⅱ-a1中： 其中J 1、J 2、R 1e、R 3e、R 4e、R 5e、t、r、Y''和p如本發明所定義和描述。
優選的，本發明某些實施方式中，G1’中： Y 1為鍵；X 1為鍵；X 1’為鍵； R 1a為3-12元雜環烷基，所述的3-12元雜環烷基中的雜原子為O、S和N中的一種或多種，個數為1、2或3個； 環A1為-L’-6-15元芳基；L’為鍵； 環B為5-15元雜芳基；所述的5-15元雜芳基中的雜原子為O、S和N中的一種或多種，個數為1、2或3個； 各R 2a’獨立地為羥基、C l-C 6烷基、C 2-C 6炔基或-O-3-8元雜環烷基。
較佳地，G1’為G1´-Ⅰ-a1或G1´-ⅠII： 。
優選的，本發明某些實施方式中，各環B獨立地為6-15元芳基、5-15元雜芳基、C 5-C 15環烷基或或5-16元雜環烷基，各R a獨立地為鹵素、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-NH(C 1-C 6烷基) 2-N(C 1-C 6烷基) 2、-NH(C 3-C 8環烷基)或-N(C 3-C 8環烷基) 2。
較佳地，各環B獨立地為6-15元芳基、5-15元雜芳基或或5-16元雜環烷基，各R a獨立地為鹵素、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2或-N(C 3-C 8環烷基) 1-2取代。
更佳地，各環B獨立地為6-15元芳基或5-15元雜芳基或或5-16元雜環烷基，各R a獨立地為鹵素、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 6烯基、-C 3-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)或-N(C 1-C 6烷基) 1-2取代（例如F、Cl、羥基、氰基、甲基）。
優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 、 、 、 、 或 ；所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2取代。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 、 、 或 ；所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2或-N(C 3-C 8環烷基) 1-2取代。
更優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 或 ，所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 6烯基、-C 3-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)或-N(C 1-C 6烷基) 1-2取代。
優選地，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 或 ，所述結構單元 任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-NH(C 1-C 6烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 2、-NH(C 3-C 8環烷基) 或-N(C 3-C 8環烷基) 2取代。
優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，各環A1為C 6-C 15芳基或5-15元雜芳基；R 2a和R 2a’獨立地為為羥基、胺基、鹵素、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、-O-C 1-C 6烷基、C 3-C 8為環丙基、C 2-C 6炔基或-O-3-8元雜環烷；所述C l-C 6烷基、所述-S-C l-C 6烷基和所述C 3-C 8為環丙基任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代。
較佳地，R 2a和R 2a’獨立地為羥基、胺基、鹵素、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、-O-C 1-C 6烷基、C 3-C 8為環丙基或C 2-C 6炔基。
優選的，本發明某些實施方式中，各環A1為C 6-C 15芳基或5-15元雜芳基，所述C 6-C 15芳基或5-15元雜芳基任選被-OH、F、Cl、Br、I、CN、-NH 2、-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、-OCH 3、OCH 2CH 3、 、 或-SCH 3取代，所述-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、 或-SCH 3任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代。
較佳地，R 2a和R 2a’為獨立地為羥基、胺基、F、Cl、甲基、乙基、異丙基、三氟甲基、 、-SCH 3、 、環丙基或 。
更優選的，本發明某些實施方式中，環A1為苯基、吡啶基、萘基、 、 或 ，所述環A1（即本方案中定義的基團）任選被-OH、F、Cl、Br、I、CN、-NH 2、-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、-OCH 3、OCH 2CH 3、 、 或-SCH 3取代，所述-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、 或-SCH 3任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代。
優選的，本發明某些實施方式中， 為不存在、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被1、2或3個R a取代。
更優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 或 ，所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被1或2個R a取代。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
更優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被1、2或3個R a取代。
優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為： 、 、 、 、 、 、 、 或 ，所述結構單元 （即本方案定義的結構單元）任選被1或2個R a取代。
較佳地，R a為任選被1個或多個羥基取代的C l-C 6烷基，例如-CH 2OH。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為： 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 或 ，所述 、 和 獨立地任選被1、2或3個R a取代。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 、 或 。較佳地，各R 2a’獨立地為鹵素、C l-C 6烷基、C 2-C 6炔基或-O-3-8元雜環烷基。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，結構單元 為 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，L為-(CH 2) j-，所述-(CH 2) j-中的1個或多個亞甲基任選的被選自-NR 3’-、-O-、-CR 1’R 2’-、-C(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NR 3’-、-NR 3’C(O)-、-S(O) 2NR 3’-、-NR 3’S(O) 2-、亞乙烯基、亞乙炔基、苯基、8-10元雙環亞芳基、3-7元飽和或部分不飽和的亞環烷基、5-11元的飽和或部分不飽和的亞螺環烷基、5-11元的飽和或部分不飽和的亞稠環烷基、8-10元雙環飽和或部分不飽和的亞環烷基、具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的4-7元飽和或部分不飽和的亞雜環烷基、具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞螺雜環烷基、具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞稠雜環烷基、具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的8-10元雙環飽和或部分不飽和的亞雜環烷基、具有1-4個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的5-6元亞雜芳基、或具有1-5個選自氮、氧或硫雜原子的8-10元雙環雜芳基的基團替代，所述亞乙烯基、亞乙炔基、亞環烷基、亞雜環烷基、苯基、亞螺雜環烷基、亞稠雜環烷基、亞螺環烷基、亞稠環烷基、亞雜芳基各自獨立的任選的被1個或多個選自鹵素、氧代、-NR 3’R 4’、-OR 3’、硝基、-CN、C 1-C 6烷基、C 3-C 10環烷基、C 3-C 10雜環烷基的取代基取代，所述烷基、環烷基、雜環烷基任選被1個或多個選自鹵素、-OH、-NH 2、-CN、C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基的取代基取代，R 1’、R 2’各自獨立為鹵素、-OH、-NH 2、C 1-C 4烷基、C 1-C 4氯代烷基、C 1-C 4羥基烷基、-O(C 1-C 4烷基)、-NH(C 1-C 4烷基)、-NH(C 1-C 4烷基)、C 3-C 6環烷基、-O(C 3-C 6環烷基)、-NH(C 3-C 6環烷基)、C 3-C 6雜環烷基、-O(C 3-C 6雜環烷基)、-NH(C 3-C 6環烷基)；R 3’、R 4’各自獨立的為氫、氘、C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6雜環烷基，j為2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12。
優選的，本發明某些實施方式中，L為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 。
優選的，本發明某些實施方式中，L中的亞甲基被選自-O-、C(O)-、亞乙烯基、具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的4-7元飽和或部分不飽和的亞雜環烷基和具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞螺雜環烷基取代。
優選的，本發明某些實施方式中，j為8。
優選的，本發明某些實施方式中，L為-O-CH 2-亞乙烯基-CH 2-具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的4-7元飽和或部分不飽和的亞雜環烷基-CH 2-具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞螺雜環烷基-C(O)-，例如 。
優選的，本發明某些實施方式中，L為LA： 其中所述LA中： 情形I： 環U為C 3-C 12亞環烷基或含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述C 3-C 12亞環烷基和3-12元亞雜環烷基任選被選自鹵素、氧代、氰基、胺基、羥基、CO 2Bn、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵代烷基、C 1-C 6羥基烷基和-O-(C 1-C 6烷基)的取代基取代； 環Y為鍵、C 3-C 12亞環烷基或含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基（亞雜環烷基可以為單環亞雜環烷基或雙螺亞雜環烷基），所述C 3-C 12亞環烷基和3-12元亞雜環烷基任選被選自鹵素、氧代、氰基、胺基、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵代烷基、C 1-C 6羥基烷基和-O-(C 1-C 6烷基)的取代基取代； X''為鍵、-C(O)-、-NH-、-NCH 3-、-O-、-C(CH 3) 2-、-S-、-C=C-、-C≡C-、-CHF-、-CHCF 3-、-(CH 2) qC(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-(CH 2) qC(O)NH-、-C(O)NCH 3-、-NHC(O)-、-NCH 3C(O)-或-C(O)CH 2O-； q為1或2； Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-、-S-、-NH-、-C≡C-、-N(C 1-C 6烷基)-、-N(C 1-C 6鹵代烷基)-、-C(O)-、-N(C 1-C 6羥基烷基)-、-N(C 3-C 8環烷基)-或-CR dR e-替代，v為1、2、3、4、5、6或7； R d、R e各自獨立地為H、-OH、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基； 或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成-C=C(R f) 2、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基； R f為氫或C 1-C 3烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-、-NH-、-C≡C-、-N(C 1-C 6烷基)-、-N(C 1-C 6鹵代烷基)-、-C(O)-、-N(C 1-C 6羥基烷基)-或-N(C 3-C 8環烷基)-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8。
情形II： 環U為含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基（例如含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基），所述3-12元亞雜環烷基任選被如下取代基取代：被1、2或3個羥基取代的C 1-C 6烷基（例如-CH 2OH）： 環Y為含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基（例如雙螺亞雜環烷基）； X''為-C(O)-； Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的1個或兩個亞甲基任選的被選自-O-和-CR dR e-替代，v為1、2、3、4、5、6或7；R d、R e各自獨立地為H、NH 2或被1、2或3個鹵素（例如氟）取代的C 1-C 6烷基（例如-CH 2CHF 2或-CH 2CH 2CF 3），或R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的亞甲基上1個或多個氫任選地（例如1或2個）被氘取代；各k獨立地為1、2、3、4、5、6、7或8。
優選的，本發明某些實施方式中，L為LA： 其中所述LA中： 環U為C 3-C 12亞環烷基或含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述亞環烷基和亞雜環烷基任選被選自鹵素、氧代、氰基、胺基、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵代烷基、C 1-C 6羥基烷基或-O-(C 1-C 6烷基)的取代基取代； 環Y為鍵、C 3-C 12亞環烷基或含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述亞環烷基和亞雜環烷基任選被選自鹵素、氧代、氰基、胺基、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵代烷基、C 1-C 6羥基烷基或-O-(C 1-C 6烷基)的取代基取代； X''為鍵、-C(O)-、-NH-、-NCH 3-、-O-、-C(CH 3) 2-、-S-、-C=C-、-C≡C-、-CHF-、-CHCF 3-、-(CH 2) qC(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-(CH 2) qC(O)NH-、-C(O)NCH 3-、-NHC(O)-、-NCH 3C(O)-或-C(O)CH 2O-； q為1或2； Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-、-S-、-NH-、-C≡C-、-N(C 1-C 6烷基)-、-N(C 1-C 6鹵代烷基)-、-C(O)-、-N(C 1-C 6羥基烷基)-、-N(C 3-C 8環烷基)-或-CR dR e-替代，v為1、2、3、4、5、6或7； R d、R e各自獨立地為H、-OH、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基； 或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-、-NH-、-C≡C-、-N(C 1-C 6烷基)-、-N(C 1-C 6鹵代烷基)-、-C(O)-、-N(C 1-C 6羥基烷基)-或-N(C 3-C 8環烷基)-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8。
優選的，本發明某些實施方式中，環U中，所述C 3-C 12亞環烷基為C 3-C 6單環的飽和的亞環烷基或C 6-C 10元（例如7、8或9元雙環橋環）亞橋環烷基，例如亞環己烷基或亞雙環[2.2.2]辛烷基。
優選的，本發明某些實施方式中，環U中，所述3-12元亞雜環烷基為3-8元（例如亞雜環烷基3、4、5或6元）的飽和的單環的亞雜環烷基、6-10元（例如7、8或9元稠環）的亞稠雜環烷基或6-10元（例如7、8或9元稠環）的亞橋雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個，例如亞氮雜環丁烷基、亞吡咯烷基、亞哌啶基、亞哌𠯤基、亞六氫-1H-吡咯𠯤基、亞2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷基、亞3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷基或亞3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷基。或者，所述3-12元亞雜環烷基還可替換為8、9或10元亞橋雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1、2或3個，例如 。
優選的，本發明某些實施方式中，環U的取代基中，所述鹵素為F、Cl、Br或I。
優選的，本發明某些實施方式中，環U的取代基中，所述的C l-C 6烷基和所述的-O-(C 1-C 6烷基)中的C l-C 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基或三級丁基。
優選的，本發明某些實施方式中，所述環U上的1、2、3或4個氫原子任選被選自鹵素、胺基、羥基、-O-(C 1-C 6烷基)或C 1-C 6烷基的取代基取代。或者，所述環U上的1、2、3或4個氫原子還可被1、2或3個羥基取代的C 1-C 6烷基取代。
更優選的，本發明某些實施方式中，所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被選自F、-OH、-OCH 3、-NH 2或甲基取代。或者，所述環U上的1、2、3或4個氫原子還可被-CH 2OH取代。
優選的，本發明某些實施方式中，環U為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。或者，優選的，環U替換為 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，環Y中，所述C 3-C 12亞環烷基為C 3-C 6單環的亞環烷基，例如亞環己烷基。
優選的，本發明某些實施方式中，環Y中，所述3-12元亞雜環烷基為6-8元（例如6、7或8元）的單環的亞雜環烷基、7-11（例如7、8、9、10或11元）元亞螺雜環烷基或7-11（例如7、8、9、10或11元）元亞稠雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個，例如亞哌啶基、亞哌𠯤基、亞3-氮雜螺[5.5]十一烷基、亞7-氮雜螺[3.5]壬烷基、亞2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷基、亞3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、亞2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷基或亞2-氮雜螺[3.3]庚烷基。或者，所述3-12元亞雜環烷基還可替換為7、8、9、10或11元亞螺雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個，例如2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷。
優選的，本發明某些實施方式中，環Y的取代基中，所述-O-(C 1-C 6烷基)中的C l-C 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基或三級丁基。
優選的，本發明某些實施方式中，環Y為 、 、 、 、 、 、 或 。或者，優選的，環Y還可替換為 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，LA中環U為含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基、6-10元的亞稠雜環烷基、6-10元的亞橋雜環烷基或者C 6-C 10的亞橋環烷基；環Y為含有1個或者2個氮雜原子的6-8元飽和的單環亞雜環烷基、含有1個或者2個氮雜原子的7-11元的亞螺雜環烷基或者亞稠雜環烷基；X''為鍵或-C(O)-；Lx為-(CH 2) v-，v為1、2、3、4或者5；Ly為-(CH 2) k-，k為1、2、3、4或者5。LA中，環Y還可替換為7、8、9、10或11元亞螺雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個。
優選的，本發明某些實施方式中，LA中環U為含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基、6-10元的亞稠雜環烷基；環Y為含有1個或者2個氮雜原子的6-8元飽和的單環亞雜環烷基、含有1個或者2個氮雜原子的7-11元的亞螺雜環烷基或者亞稠雜環烷基；X''為鍵或-C(O)-；Lx為-(CH 2) v-，v為1、2、3、4或者5；Ly為-(CH 2) k-，k為1、2、3、4或者5。LA中，環Y還可替換為7、8、9、10或11元亞螺雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個。
優選的，本發明某些實施方式中，LA為LA-1、LA-2： X''為-C(O)-或-C(O)NH-； 其中，所述LA-1、LA-2中，環U、環Y、Lx、Ly、q如本發明中所定義和描述。
優選的，本發明某些實施方式中，其中，LA為LA-3、LA-4、LA-5或LA-6： 其中所述LA-3中: Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-S-、-NH-、-NMe-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 、 、 、 、 、 、 、-C(CH 3) 2-、-CH(CH 3)-、-CH(OH)-、-CH(OCH 3)-、C(CH 3)(OH)-或-C=CH 2；v為1、2、3、4、5或6； 環U為 、 、 、 、 、 、 或 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接；所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被F、-OH、-OCH 3、-NH 2取代； 環Y為鍵、 、 、 或 ，其中c端與Ly連接，d端與X''連接；所述環Y中的1、2、3或4個氫原子任選被F、-OH、-OCH 3、取代； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-C≡C-、-C(O)-或-N(C 1-C 6烷基)-替代；k為1、2、3、4、5或6； X''為鍵、-C(O)-、-(CH 2) 1-2C(O)-或-(CH 2) 1-2C(O)NH-； 其中所述LA-4中: Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-S-、-NH-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 、 、 、 、 、 、 、 、-C(CH 3) 2-、-CH(CH 3)-、-CH(CH 3)-、-CH(OCH 3)-、-CH(OH)-、-C(CH 3)(OH)-或-C=CH 2；v為1、2、3、4、5或6； 環U為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接；所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被F取代（例如 或 ）；環Y為 、 、 、 、 或 ，其中c端與Ly連接，d端與X''連接；所述環Y中的1、2、3或4個氫原子任選被F取代； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-或-N(C 1-C 6烷基)-替代；k為1、2、3、4、5或6； X''為-C(O)-； 或者，環Y還可以替換為 或 ； 情形b： Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-S-、-NH-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 、-CH(NH 2)-、-CH(CH 2CHF 2)-、-CH(CH 2CH 2CF 3)-或-CH(CH 3) 2-；v為1、2、3、4、5或6； 環U為 、 或 ； 環Y為 、 或 。
Ly為-(CH 2) k-，其所述Ly中的亞甲基上的被1個或多個氫任選地（例如1或2個）被氘取代；k為1、2、3、4、5或6； X''為-C(O)-； 其中所述LA-5中: Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-替代；v為1、2、3或4； 環U為 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接；所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被F取代； 環Y為鍵； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-C(O)-或-NH-替代；k為1、2、3、4、5、6、7或8； X''為-C(O)NH-； 其中所述LA-6中: Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 ；v為1、2、3或4； 環U為 、 或 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接； 環Y為 ； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-C(O)-或-NH-替代；k為1、2、3、4、5或6； X''為鍵。
優選的，LA為如下結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
較佳地，各環U獨立地為含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基或6-10元的亞橋雜環烷基； 各環Y獨立地為含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述的雜環烷基為亞單環雜環烷基或雙螺亞雜環烷基； X''為-C(O)-。
最佳地，LA為如下任一結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，LA為如下任一結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，E1具有式E1-1a、E1-1b、E1-1c、E1-1d、E1-1e、E1-1f、E1-1g、E1-1aa、E E1-1h、1-1bb、E1-1cc、E1-1dd、E1-1ee、E1-1ff、E1-1gg或E1-1hh結構： 其中所述Q 1、Q 2、Q 3、Q 4、Q 5、R 1''、R 2''、R 3''、m''如本發明中所定義和描述。
優選的，本發明某些實施方式中，E1具有式E1-1h''、E1-1i'、E1-1j'或E1-1h''h''結構： 其中，R 3b如本發明中所定義和描述。
優選的，本發明某些實施方式中，R 3b為氫、鹵素、氰基、-OH、-NH 2、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2或-S(C 1-C 6烷基)，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)或-O(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2或-S(C 1-C 6烷基)任選被1-3個鹵素、氰基、-OH和-NH 2取代。或者，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)或-O(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2和-S(C 1-C 6烷基)還可任選被1、2或3個氘取代。
優選的，本發明某些實施方式中，E1為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，E2具有式E2-1a、E2-1b、E2-1c、E2-1d、E2-1e或E2-1f結構： 或 其中所述E2-1a、E2-1b、E2-1c、E2-1d、E2-1e和E2-1f中： W為CR 1cR 2c、C(S)、C(O)或SO 2； X為CH 2、O或S; Y 2為NH、-N-C 1-C 6烷基、-N- C 6-C 10芳基、-N-5-10元雜芳基、-N- C 3-C 8環烷基、-N-3-8元雜環烷基、O或S； Z為CH 2、O或者S； G′′和G′各自獨立地選自氫、氘、C 1-C 6烷基、OH、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基任選被1-3個獨立的選自羥基、鹵素、氰基、胺基的基團取代； Q 1、Q 2、Q 3、Q 4各自獨立的為CR 3b或N； A′為氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或鹵素； R 1c、R 2c和R 3c各自獨立的選自氫、羥基、鹵素、-NH 2、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6鹵代烷基、-CONR ′R ′′、-OR ′、-NR ′R ′′、-SR ′、-SO 2R ′、-SO 2NR ′R ′′、-CR ′R ′′、-CR ′NR ′R ′′、芳基、雜芳基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-P(O)(OR ′)R ′′、-P(O)R ′R ′′、-OP(O)(OR ′)R ′′、-Cl、-F、-Br、-I、-CF 3、-CN、-NR ′SO 2NR ′R ′′、-NR ′C(O)NR ′R ′′、-C(O)NR ′C(O)R ′′、-NR ′C(=N-CN)NR ′R ′′、- C(=N-CN)NR ′R ′′、-NR ′C(=N-CN)R ′′、-NR ′C(=C-NO 2)NR ′R ′′、-SO 2NR ′COR ′′、-NO 2、-COR ′、-C(C=N-OR ′)R ′′、-CR ′=CR ′R ′′、-CCR ′、-S(C=O)(C=N-R ′)R ′′、-SF 5或-OCF 3; R ′和R ′′各自獨立的為鍵、氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或3-8元雜環烷基； n ′′為0、1、2或3； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體； 其中，R 3b如本發明中所描述和定義。
優選的，本發明某些實施方式中，E2具有式E2-1bb、E2-1aa或E2-1cc結構： 其中所述E2-1bb中： Q 1、Q 2、Q 3和Q 4各自獨立的為CR 3b或N； W為C(O)或CH 2； A'為氫、氘、C 1-C 6烷基或鹵素； R 3c為氫、氘、羥基、鹵素、-NH 2、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6鹵代烷基； n ′′為0、1、2或3； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體; 其中，R 3b如本發明中所描述和定義； 其中所述E2-1aa或E2-1cc中： W為CH 2或C(O)； A'為氫、甲基、Cl或F； R 3c各自獨立的為氫、鹵素、氰基、羥基、NH 2、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基； n ′′為0、1、2或3； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體。
優選的，本發明某些實施方式中，E2為： 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，E3具有式E3-1結構： W 3為C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或 ，所述芳基、雜芳基任選被取代； R 9、R 10各自獨立地選自氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基或5-10元雜芳基，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基或5-10元雜芳基任選被1個或多個-OH、鹵素或-NH 2取代； 或R 9、R 10與它們所連接的碳原子形成C 3-C 8環烷基，所述C 3-C 8環烷基任選被-OH、鹵素、-NH 2或C 1-C 3烷基取代； R 11選自C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或 ，所述C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基或5-10元雜芳基任選被1個或多個-OH、鹵素或-NH 2取代； R 12選自H、C(O)或取代的烷基； R 13選自H、C 1-C 6烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基，所述烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基任選被取代； R 16為H、鹵素、-OH、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基，所述C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基任選被鹵素取代； o為1、2、3或4， 其中，R 8d、R 14a、R 14b、R 15如本發明中所描述和定義。
優選的，本發明某些實施方式中，E3具有式E3-1a、E3-1b或E3-1c結構： 其中， R 1d為H、乙基、異丙基、三級丁基、二級丁基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、烷基、羥基烷基、雜芳基或鹵代烷基，所述烷基、羥基烷基、雜芳基任選被取代； R 6d為H、-CH 3、-CH 2F、-CH 2OH、乙基、異丙基或環丙基； R 8d為H、鹵素、CN、OH、NO 2、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基，所述C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基任選被鹵素、-OH、CN、NO 2或胺基取代； X d為CH 2或C(O)； R d為5-6元雜芳基，所述5-6元雜芳基任選被取代。
優選的，本發明某些實施方式中，E3具有式E3-1aa結構： 其中， R 6d為H、-CH 3、-CH 2F、-CH 2OH、乙基、異丙基或環丙基； R 9為H； R 10為H、乙基、異丙基、三級丁基、二級丁基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基； R 11為 或5-10雜芳基，所述5-10雜芳基任選被1個或多個-OH、鹵素或-NH 2取代； R 12為H或C(O)； R 13為H、烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基，所述烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基任選被取代； R 8d為H、鹵素、CN、OH、NO 2、nn、 、 或 。
更優選，式E3-1aa通過R 12與L連接。
優選的，本發明某些實施方式中，E3為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
優選的，本發明某些實施方式中，E3為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
在本發明一優選實施方案中，所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物中， G1為 、 或 ； G1’為 ； L為 ； E獨立地為E1： ； R 1a’、R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’、各R a、R 2a’、J 1、J 2、Lx、Ly、環U、環Y、X''、Q 1、Q 2、Q 3、Q 4、Q 5、X 2’、Y 2’、R 1b、R 2b、Z’和m''的定義均前所述。
在本發明一優選實施方案中， 所述的式ⅠⅠ或Ⅰ’化合物中，G1為 或 ；G1’為 ； R 1a為 、 或 ； L為 ， Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的兩個亞甲基被選自-O-和-CR dR e-替代； R d和R e各自獨立地為H、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、NH 2或被1、2或3個鹵素取代的C 1-C 6烷基，或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基； v為1、2、3、4、5、6或7； 環U為含有1-2個N雜原子的3-12元亞雜環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8； 環Y為含有1、2或3個選自N和O雜原子的3-12元亞雜環烷基； X''為-C(O)-； E為 ； 各R a、R 2a、R 2a’、J 1、J 2、n和各R 3b的定義如前所述。
較佳地： 各R 2a和R 2a’獨立地為鹵素、羥基、C l-C 6烷基或C 2-C 6炔基；R a為鹵素； L為如下任一結構； 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； R 3b為鹵素、C 1-C 6烷基或-O-(C 1-C 6烷基)，所述C 1-C 6烷基或-O-(C 1-C 6烷基)任選的被1-3個獨立的選自氘或鹵素取代。優選，在本發明一優選實施方案中，所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物中，G1為 ；G1’為 ； R 1a為 或 ； L為 ， Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的兩個亞甲基被選自-O-和或-CR dR e-替代； R d和R e各自獨立地為C 1-C 6烷基，或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基； v為1、2、3、4、5、6或7； 環U為含有1-2個N雜原子的3-12元亞雜環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8； 環Y為含有1-2個選自N雜原子的3-12元亞雜環烷基； X''為-C(O)-； E為 。
更優選， 各R 2a和R 2a’獨立地為鹵素、羥基、C l-C 6烷基或C 2-C 6炔基；R a為鹵素； L為如下任一結構的化合物： ； R 3b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基或-O-(C 1-C 6烷基)。
優選的，本發明某些實施方式中，所述式Ⅰ或I’化合物為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
本發明還提供一種如式W-1、W-2、W-3、W-4、W-5、INTA、INTA’、INTC或INTC’所示的化合物： ; 其中，環C、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、R 1b、R 2b、R 3b、W 1、W 2、X’、Y’、J 1、J 2、L和E如如本發明所定義和描述；Lx、環U、Ly和環Y的定義以及它們之間的連接關係本發明所定義和描述；p’’為1、2、3或4；n2為1或2。
優選地，式W-1為式W-1-1、式W-2為式W-2-1、式W-3為式W-3-1、式W-4為式W-4-1或式W-5為式W-5-1： 其中，環C、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、R 1b、R 2b、R 3b、W 1、W 2、Lx、環U、Ly和環Y和p’’如本發明所定義和描述。
優選地，所述式W-1、W-2、W-3、W-4或W-5所示的化合物選自： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
本發明還提供一種如式II-1、式II-2或式II-3所示的化合物： ； 其中，各R 1a獨立地為 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，各R 19獨立地為胺基保護基（例如-Boc）；R 17和各R 18獨立地為羥基保護基（例如-MOM），J1、J2、L和E的定義均前述。
所述的如式II-1、式II-2或式II-3的化合物優選為如下任一化合物： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
本發明提供了一種式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽的製備方法。
本發明提供了一種藥物組合物，包括治療有效量的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
本發明提供了一種降解KRAS G12D蛋白的方法，包括使式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物與KRAS G12D蛋白接觸。
本發明提供了一種所述式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物用作治療或預防KRAS G12D介導的疾病或病症的藥物使用。
本發明提供了一種所述式Ⅰ或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物用作治療或預防KRAS突變介導的疾病或病症的藥物使用。
本發明提供了一種所述式Ⅰ或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物在製備用作治療或預防KRAS突變介導的疾病或病症的藥物中的應用。
本發明提供了一種所述式Ⅰ或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物在製備用作治療或預防由KRAS G12D與SOS1或SHP2蛋白相互作用所引起的疾病或病症 (癌症)的藥物中的應用。
本發明提供了一種式Ⅰ或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物在製備治療或預防癌症藥物中的應用。
本發明提供了一種式Ⅰ或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物在製備治療或預防胰腺癌、肺癌、結腸直腸癌、膽管上皮癌、多發性骨髓瘤、黑色素瘤、子宮癌、子宮內膜癌、甲狀腺癌、急性髓性白血病、膀胱癌、尿路上皮癌、胃癌、子宮頸癌、頭頸部鱗狀細胞癌、彌漫性大B細胞淋巴瘤、食道癌、慢性淋巴細胞性白血病、肝細胞癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、成膠質細胞瘤、腎癌及肉瘤藥物（例如上述疾病為KRAS G12D與SOS1或SHP2蛋白相互作用所引起的疾病或病症）中的應用。
本發明提供一種治療或預防由KRAS G12D介導的疾病或病症的方法，包括向有需要的患者施用治療有效量的式Ⅰ或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物。
本發明提供一種治療或預防由KRAS G12D與SOS1或SHP2蛋白相互作用調控的疾病或病症（例如癌症）的方法，包括向有需要的患者施用治療有效量的式Ⅰ或I’或I’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或其藥物組合物。
本發明某些實施方案中，所述癌症選自： 心臟: 肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤)、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤組; 肺: 支氣管癌(鱗狀細胞癌、未分化小細胞癌、未分化大細胞癌、腺癌)、肺泡癌(細支氣管癌)、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤錯構瘤、間皮瘤; 胃腸道:食管癌(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(導管腺癌、胰島素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌腫瘤、血管活性腸肽瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌腫瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、纖維神經瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤); 泌尿生殖系統: 腎(腺癌、胚胎性癌肉瘤（腎母細胞瘤）、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睾丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎瘤、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣腫瘤、脂肪瘤); 肝: 肝癌(肝細胞癌)、肝小膽管癌、肝母細胞瘤、惡性血管皮內細胞瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤; 膽道: 膽管癌、膽囊癌、壺腹癌、肝小膽管癌; 骨: 骨源性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、軟骨瘤(骨軟骨外骨病)、良性軟骨瘤、軟骨母細胞瘤、軟骨黏液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細胞瘤; 神經系統: 顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、膠質瘤)、大腦(星形細胞瘤、成神經管細胞瘤、神經膠質瘤、室管膜瘤、生殖細胞瘤(松果體瘤)、多形膠質母細胞瘤、少突神經膠質瘤、神經鞘瘤、眼癌、先天性腫瘤)、脊髓神經纖維瘤、腦膜瘤、神經膠質瘤、肉瘤); 婦產科: 子宮(子宮內膜癌(血清囊腺癌、粘液囊腺癌、非分類癌)、顆粒-鞘膜細胞瘤、卵巢塞萊二氏細胞瘤、無性細胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(明細胞癌、鱗狀細胞癌、肉毒桿菌肉瘤(胚胎型橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌); 血液學: 血液(骨髓性白血病(急性和慢性)、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病、骨髓增生性疾病、多發性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤(惡性淋巴瘤); 皮膚: 惡性黑色素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西肉瘤、痣發育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕疙瘩、銀屑病； 腎上腺: 成神經細胞瘤。
本發明某些實施方案中，癌症是KRAS G12D相關癌症。
本發明某些實施方案中，癌症是非小細胞肺癌,小細胞肺癌,結直腸癌,直腸癌或胰腺癌。
本發明還提供了一種前述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，其立體異構體、其阻轉異構體、其藥學上可接受的鹽、其立體異構體的藥學上可接受的鹽或其阻轉異構體的藥學上可接受的鹽，用於治療與KRAS G12D突變蛋白相關的疾病或病症。
本發明還提供了一種前述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物, 其中與KRAS G12D突變蛋白相關的疾病或病症是與KRAS G12D突變蛋白相關的癌症。
本發明某些實施方案中，癌症選自胰腺癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌或肺癌。
本發明某些實施方案中，肺癌選自非小細胞肺癌或小細胞肺癌。
本發明提供了一種式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽的製備方法： 當G為 、L為LA ，且環U含有NH基團時，製備方法為： ； 當G1’ 、L為LA ，且環U含有NH基團時，製備方法為： ； INT-A（INT-A’）與INT-B發生還原胺化反應得到目標化合物；其中所述還原胺化的還原試劑包括但不限於Pd/C、硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉、硼烷、三乙醯氧基硼氫化鈉。其中所述 指含有NH基團的環U；R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’、n2、R 1a’如G1-I-a1中所定義和描述； 指含有醛基的Lx；、環U、環Y、X’’、Lx、Ly如LA中所定義；E如本發明中所定義和描述，優選E為E1-1a、E1-1b、E1-1c、E1-1d、E1-1e、E1-1f、E1-1g、E1-1aa、E E1-1h、1-1bb、E1-1cc、E1-1dd、E1-1ee、E1-1ff、E1-1gg或E1-1hh。
當G為 、L為LA ，且環Y含有NH基團，X’’為C(O)時，製備方法為： ； 當G1’為 、L為LA ，且環Y含有NH基團，X’’為C(O)時，製備方法為： ； INT-C（或INT-C’）與INT-D鹼性條件下發生取代反應得到目標化合物；其中所述鹼包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、碳酸鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉。其中 指含有NH基團的環Y；P 100為五氟苯基或者對硝基苯基；R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’、n2、R 1a’如G1-I-a1中所定義和描述；環U、環Y、X’’、Lx、Ly如LA中所定義；E如本發明中所定義和描述，優選E為E1-1a、E1-1b、E1-1c、E1-1d、E1-1e、E1-1f、E1-1g、E1-1aa、E E1-1h、1-1bb、E1-1cc、E1-1dd、E1-1ee、E1-1ff、E1-1gg或E1-1hh。
當G為說明書中其它結構、L為LA 時，製備方法同上。
詳細說明：除非有相反陳述、下列用在說明書和申請專利範圍中的術語具有下述含義。
「烷基」是指飽和的脂肪族烴基團，包括直鏈或支鏈烷基；例如C 1-C 8烷基是指含有1-8個碳原子的烷基，所述C 1-C 8烷基包括C 1-C 2、C 1-C 3、C 1-C 4、C 1-C 5、C 2-C 3或C 2-C 4烷基等；例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、三級丁基、二級丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、 2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基 戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己 基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙 基戊基、2-甲基-3-乙基戊基或其各種支鏈異構體；優選C 1-C 6烷基；更優選C 1-C 4烷基。所述烷基可以是取代的或未取代的。在一些實施方案中，所述烷基為C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6、C 7或C 8烷基。
「雜烷基」是指飽和的脂肪族烴基團中的亞甲基 (-CH 2-)被雜原子 (如O, S, N)、雜原子團 (如-C(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-)、C(O)NH-、-NHC(O)-、亞乙烯基或亞乙炔基所取代，包括直鏈或支鏈雜烷基；C 1-C 8雜烷基是指含有1-8個碳原子的烷基中的亞甲基至少有一個被雜原子或雜原子團取代，例如-C(O)-CH 3、-CH 2-O-CH 3、-CH 2-S-CH 3、-CH 2-S(O)-CH 3、-CH 2-S(O) 2-CH 3、-CH 2-S-CH 2-CH 3、-CH 2-O-CH 2-CH 3、-CH 2-O-CH 2-CH 3、-CH 2-S(O)-CH 2-CH 3、或其各種支鏈異構體；優選C 1-C 6雜烷基；更優選C 1-C 4雜烷基。所述雜烷基可以是取代的或未取代的。在一些實施方案中，所述雜烷基為C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6、C 7或C 8雜烷基。
除非另有規定，環上原子的數目通常被定義為環的元數，例如，「5-7元環」是指環繞排列5-7個原子的「環」。
除非另有規定，C n-n+m或C n-C n+m包括n至n+m個碳的任何一種具體情況，例如C 1-12包括C 1、C 2、C 3、C 4、C 5、C 6、C 7、C 8、C 9、C 10、C 11、和C 12，也包括n至n+m中的任何一個範圍，例如C 1-12包括C 1-3、C 1-6、C 1-9、C 3-6、C 3-9、C 3-12、C 6-9、C 6-12、和C 9-12等；同理，n元至n+m元表示環上原子數為n至n+m個，例如3-12元環包括3元環、4元環、5元環、6元環、7元環、8元環、9元環、10元環、11元環、和12元環，也包括n至n+m中的任何一個範圍，例如3-12元環包括3-6元環、3-9元環、5-6元環、5-7元 環、6-7元環、6-8元環、和6-10元環等。
「環烷基」指飽和或部分不飽和的單環或多環環狀烴取代基；「C 3-C 11環烷基」指包括3至11個碳原子的環烷基，所述C 3-C 11環烷基包括C 3-C 11、C 3-C 10、C 3-C 8、C 4-C 11、C 4-C 10、C 4-C 8、C 4-C 7、C 4-C 6或C 4-C 5等；「C 3-C 8元環烷基」指包括3至8個碳原子的環烷基，所述C 3-C 8環烷基包括C 3-C 8、C 3-C 6、C 3-C 5、C 4-C 8、C 4-C 7、C 4-C 6或C 4-C 5等；
單環環烷基的非限制性實施例包含但不局限於環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等，優選環丙基、環丁基、環戊基、環己基；優選C 3-C 8元環烷基；更優選C 3-C 6元環烷基。
多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。「螺環烷基」指單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，他們可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基基或多螺環烷基，優選7-12元雙螺環烷基。螺環烷基的非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 等。
「稠環烷基」指系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，優選雙環稠環烷基。稠環烷基的非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 等。
「橋環烷基」指任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，他們可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基。橋環烷基的非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 等。
所述環烷基環可以稠合於芳基、雜芳基或雜環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實施例包括茚滿基、四氫萘基、苯並環庚烷基等。所述環烷基可以是任選取代的或未取代的。
在一些實施方案中，所述環烷基為C 3、C 4、C 5、C 6、C 7、C 8、C 9、C 10、C 11、C 12單環或多環（例如螺環、稠環或橋環）環烷基。
「雜環烷基」指飽和的或部分不飽和的單環或多環環狀烴取代基，其中一個或多個（例如2、3、4或5）環原子選自氮、氧或S(O) r(其中r是整數0、1或2)，但不包含-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳，其中氮原子任選地被季銨化，氮和硫雜原子可任選被氧化 (即NO和S(O)p，p是1或2)。「3-11元雜環烷基」指包含3至11個環原子的環基，「5-10元雜環烷基」指包含5至10個環原子的環基，「3-8元雜環烷基」指包含3至8個環原子的環基，優選含有1-2個選自N、O或S雜原子的「3-11元雜環烷基」，更優選含有1個或2個N原子的3-11元雜環烷基。例如3-10元雜環烷基，所述3-10元雜環烷基包括3-8元、3-6元、3-5元、4-6元、5-6元、4元、5元和6元雜環烷基等。3-10元雜環烷基的實例包括但不限於氮雜環丁基、氧雜環丁基、硫雜環丁基、吡咯烷基、吡唑烷基、咪唑烷基、四氫噻吩基(包括四氫噻吩-2-基和四氫噻吩-3-基等)、四氫呋喃基(包括四氫呋喃-2-基等)、四氫吡喃基、哌啶基(包括1-哌啶基、2-哌啶基和3-哌啶基等)、哌𠯤基(包括1-哌𠯤基和2-哌𠯤基等)、嗎啉基(包括3-嗎啉基和4-嗎啉基等)、二㗁烷基、二噻烷基、異㗁唑烷基、異噻唑烷基、1，2-㗁𠯤基、1，2-噻𠯤基、六氫噠𠯤基、高哌𠯤基、高哌啶基或二氧雜環庚烷基等。
單環雜環烷基優選為含有1-2個N雜原子的3-8元單環雜環烷基；單環雜環烷基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌𠯤基、嗎啉基、硫代嗎啉基、高哌𠯤基等，優選哌啶基和哌𠯤基。
多環雜環烷基包括螺環、稠環和橋環的雜環烷基。「螺雜環烷基」指單環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環烷基團，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O) r(其中r是整數0、1、2)，其餘環原子為碳。他們可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺雜環烷基、雙螺雜環烷基或多螺雜環烷基，優選含有1-2個選自N、O或S雜原子的飽和的「3-11元雙螺雜環烷基」；更優選含有1個或2個N原子的飽和的「7-11元雙螺雜環烷基」。螺雜環烷基的非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 等。
「稠雜環烷基」指系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對原子的多環雜環烷基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O) r(其中r是整數0、1、2)，其餘環原子為碳。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環烷基，優選含有1-3個選自N、O或S雜原子的 「3-11元雙環稠雜環烷基」；更優選含有1個或2個N原子的飽和的「3-11元雙環稠雜環烷基」。稠雜環烷基的非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 等。
「橋雜環烷基」指任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環烷基團，他們可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，其中一個或多個環原子選自氮、氧或S(O) r(其中r是整數0、1、2)，其餘環原子為碳。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，橋雜環烷基的非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 、 等。
所述雜環烷基環可以稠合於芳基、雜芳基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜環烷基，非限制性實施例包含： 、 、 、 ，所述雜環烷基可以是任選取代的或未取代的。
在一些實施方案中，所述雜環烷基為3、4、5、6、7、8、9、10、11、12元單環或多環（例如螺環、稠環或橋環）雜環烷基，其中雜原子的個數可以為1、2、3、4或5個，每個雜原子獨立地為氮、氧或S(O) r(其中r是整數0、1或2)。
「芳基」指全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)且具有共軛的π電子體系的多環基團，「C 6-C 10芳基」或「6-10元芳基」指含有6-10個碳的全碳芳基，例如苯基和萘基；優選苯基。所述芳基環可以稠合於雜芳基、雜環烷基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為芳基環，非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 ，所述芳基可以是任選取代的或未取代的。在一些實施方案中，所述芳基為C 6-C 10芳基。
「雜芳基」指包含1至4個雜原子的雜芳族體系，所述雜原子包括氮、氧或S(O) r(其 中r是整數0、1、2)，5-6元雜芳基指含有5-6個環原子的雜芳族體系，5-10元雜芳基指含有5-10個環原子的雜芳族體系，優選5-6元雜芳基；更優選含有1個或2個N原子的5-6元雜芳基；非限制實施例包括呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡𠯤基、吡唑、咪唑基、三唑基、四唑基等；優選吡啶基。所述雜芳基環可以稠合於芳基、雜環烷基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，非限制性實施例包含： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 ，所述雜芳基可以是任選取代的或未取代的。在一些實施方案中，所述雜芳基為5、6、7、8、9、10元雜芳基，其中雜原子的個數可以為1、2、3、4或5個，每個雜原子獨立地為氮、氧或S。
「烯基」指由至少兩個碳原子和至少一個碳-碳雙鍵組成的如上述所定義的烷基，「C 2- 8烯基」指含有2-8個碳的直鏈或支鏈烯基，包括但不限於乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-、2-或3-丁烯基等，優選「C 2- 6烯基」，更優選「C 2- 4烯基」。所述烯基可以是取代的或未取代的。在一些實施方案中，所述烯基為C 2、C 3、C 4、C 5、C 6、C 7、C 8烯基。
「炔基」指至少兩個碳原子和至少一個碳-碳三鍵組成的如上所定義的烷基，「C 2- 8炔基」指含有2-8個碳的直鏈或支鏈炔基，包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、1-、2-或3-丁炔基，優選「C 2- 6炔基」，更優選「C 2- 4炔基」。所述炔基可以是取代的或未取代的。在一些實施方案中，所述炔基為C 2、C 3、C 4、C 5、C 6、C 7、C 8炔基。
「亞基」指二價基團，如亞烷基指二價烷基，亞烯基指二價烯基，亞炔基指二價炔基，亞環烷基指二價環烷基，亞雜環烷基指二價雜環烷基，亞芳基指二價芳基，亞雜芳基指二價雜芳基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基如上所定義，所述亞基可以是任選取代的或未取代的。
「鹵代烷基」指任選的被一個或多個氟、氯、溴或碘原子取代的烷基，其中所述烷基如上所定義，非限制性實施例包括二氟甲基、二氯甲基、二溴甲基、三氟甲基、三氯甲基、三溴甲基等。
「羥基烷基」指任選被一個或多個-OH取代的烷基，其中所述烷基如上所定義，非限制性實施例包括羥甲基、羥乙基、羥基丙基、羥基異丙基。
「烷氧基」指-O-烷基，其中所述烷基如上所定義，非限制性實施例包括甲氧基、乙氧基、異丙氧基、三級丁氧基等。
「環烷氧基」指-O-環烷基，其中所述環烷基如上所定義，非限制性實施例包括環丙烷氧基、環丁烷氧基、環戊烷氧基、環己烷氧基等。
「雜環烷氧基」指-O-雜環烷基，其中所述雜環烷基如上所定義，非限制性實施例包括氮雜環丁烷氧基、氮雜環戊烷氧基、哌啶基氧基、哌𠯤基氧基、氧雜環戊基氧基、氧雜環己基氧基等。 「-C(O)C 1-C 3烷基」指-C(O)-CH 3、-C(O)-CH 2CH 3等。 「雜原子或雜原子團」指N、O、S、S(=O) 2、S(O)等。 「氰基」指-CN。 「羥基」指-OH。 「磺醯基」指-S(O) 2-。 「羧基」或「羧酸」指-COOH。 「氧代」指=O基團。 「鹵素」指氟、氯、溴或碘。 「EA或EtOAc」指乙酸乙酯。 「THF」指四氫呋喃。 「DCM」指二氯甲烷。 「cataCXium A Pd-G3」指甲磺酸[正丁基二(1-金剛烷基)膦](2-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)。 「POCl 3」指三氯氧磷。 「NaHCO 3」指碳酸氫鈉。 「NaCl」 指氯化鈉。 「Na 2SO 4」 指硫酸鈉。 「NH 4Cl」 指氯化銨。 「Cs 2CO 3」 指碳酸銫。 「NaBH(OAc) 3」指醋酸硼氫化鈉。 「Triton B」 指苄基三甲基氫氧化銨。 「NaBH 3CN」指氰基硼氫化鈉 「CsF」 指氟化銫。 「Na 2CO 3」 指碳酸鈉。 「HOAc」 指醋酸。 「TPAP」 指四丙基高釕酸銨。 「NMO」 指N-甲基嗎啉氧化物。 「Cs 2CO 3」 指碳酸銫。 「NaH」 指鈉氫。 「 i-PrOH」 指異丙醇。 「DMF」指N,N-二甲基甲醯胺。 「MeOH」指甲醇。 「Pd/C」指鈀/碳。 「DMSO」指二甲基亞碸。 「TFA」指三氟醋酸。 「DIEA」指N,N-二異丙基乙胺。 「Dess-Martin」指戴斯-馬丁試劑。 「PBS」指磷酸緩衝鹽溶液。 「SDS-PAGE」指十二烷基硫酸鈉-聚丙烯醯胺凝膠電泳。 「PVDF」指聚偏二氟乙烯。 「PE」指石油醚。 「AcOH」指醋酸。 「HCl」指鹽酸。 「dioxane」指1,4-二氧六環。 「ACN」指乙腈。 「DMP」指鄰苯二甲酸二甲酯。 「Pd-118」指1,1'-雙(二三級丁基膦)二茂鐵二氯化鈀。 「BH 3」指硼烷。 「PdCl 2(dtbpf)」指[1,1'-雙(二三級丁基膦)二茂鐵]二氯化鈀。 「HATU」指2-(7-偶氮苯並三氮唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯。 「EtOH」指乙醇。 「DMAP」指4-二甲胺基吡啶。 「TBAF」指氟化四丁基銨。 「EDCI」指1-乙基-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽。 「HOBT」指1-羥基苯並三唑。 「LiAlH 4」指氫化鋁鋰。 「RuPhos Pd G3」指 (2-二環己基膦基-2ʹ,6ʹ-二異丙氧基-1,1ʹ-聯苯)[2-(2ʹ-胺基-1,1ʹ-聯苯基)]鈀(II)甲磺酸鹽。 「LAH」指氫化鋁鋰。 「TsCl」指對甲苯磺醯氯。 「Na 2S 2O 3」指硫代硫酸鈉。 「NaNO 2」指亞硝酸鈉。 「BBr 3」指三溴化硼。 「K 3PO 4」指磷酸鉀。 「AcOK」指醋酸鉀。 「DIBAL-H」指二異丁基氫化鋁。 「TEA」指三乙胺。 「GTP」指三磷酸鳥苷。 「Prep-HPLC」或「pre-HPLC」指製備高效液相色譜。 「sat.」指飽和溶液。 「aq」指水溶液。
本文的化學結構中，作為連接鍵的「-」表示單鍵，「=」表示雙鍵（未限定構型的情況下，其可以為反式或順式）。
「任選」意味著隨後所描述地事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，「任選被烷基取代的雜環烷基團」意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環烷基團被烷基取代的情形和雜環烷基團不被烷基取代的情形。
「取代的」指基團中的一個或多個氫原子、優選為最多5個、更優選為1～3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。不言而喻、取代基僅處在它們的可能的化學位置、本領域技術人員能夠在不付出過多努力的情況下確定(通過實驗或理論)可能或不可能的取代。例如具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。
除非另有說明，本文所用術語「任選取代的」可以是未取代的或者取代的；當被取代時，取代基可以是一個或多個（例如2、3、4、5或6個）獨立選自烷基、烯基、炔基、羥基、羥基烷基、鹵代烷基、烷氧基、胺基、胺基烷基、氰基、鹵素、氧代、環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基，所述烷基、烯基、炔基、羥基、羥基烷基、鹵代烷基、烷氧基、胺基、胺基烷基任選被一個或多個（例如2、3、4、5或6個）環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基取代；所述環烷基、雜環烷基、芳基和雜芳基任選被一個或多個選自烷基、烯基、炔基、羥基、羥基烷基、鹵代烷基、烷氧基、胺基、胺基烷基、氰基、鹵素、氧代的基團取代。
除非另有說明，本文所用的下列術語和短語旨在具有下列含義。一個特定的術語或短語在沒有特別定義的情況下不應該被認為是不確定的或不清楚的，而應該按照普通的含義去理解。當本文中出現商品名時，意在指代其對應的商品或其活性成分。
「藥物組合物」表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或 前體藥物與其他化學組分的混合物、以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。藥物組合物的目的是促進對生物體的給藥、利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。
本發明還提供式(I)化合物藥學上可接受的鹽。術語「藥學上可接受的鹽」是指相對無毒的本發明化合物的酸加成鹽或鹼加成鹽。所述酸加成鹽為本發明式(I)化合物與合適的無機酸或者有機酸形成的鹽，這些鹽可在化合物最後的分離和提純過程中製備，或者可用純化的式(I)化合物以其游離鹼形式與適宜的有機酸或無機酸進行反應來製備。代表性酸加成鹽包括鹽酸鹽、酒石酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月矽酸鹽、硼酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、磷酸氫鹽、碳酸鹽、碳酸氫鹽、甲苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、葡萄糖酸鹽、乳糖酸鹽和月桂基磺酸鹽等。所述鹼加成鹽為式(I)化合物與合適的無機鹼或者有機鹼形成的鹽，包括例如與鹼金屬、鹼土金屬、季銨陽離子形成的鹽，例如鈉鹽、鋰鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽、四甲基季銨鹽、四乙基季銨鹽等；胺鹽包括與氨(NH 3)、一級胺、二級胺或三級胺形成的鹽，如甲胺鹽、二甲胺鹽、三甲胺鹽、三乙胺鹽、乙胺鹽等。
本發明的藥學上可接受的鹽可由含有酸根或鹼基的母體化合物通過常規化學方法合成。一般情況下，這樣的鹽的製備方法是：在水或有機溶劑或兩者的混合物中，經由游離酸或鹼形式的這些化合物與化學計量的適當的鹼或酸反應來製備。
所述「藥學上可接受的輔料」是指與活性成份一同給藥的、有利於活性成份給藥的惰性物質，包括但不限於國家食品藥品監督管理局許可的可接受的用於人或動物(例如家畜)的任何助流劑、增甜劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、矯味增強劑、表面活性劑、潤濕劑、分散劑、崩解劑、助懸劑、穩定劑、等滲劑、溶劑或乳化劑。
如本文所用並且如在本領域中所熟悉的，「治療(treatment)」或「治療(treating)」是用於獲得有益的或所期望的結果(包括臨床結果)的方法。有益的或所期望的臨床結果可以包括但不限於：減少腫瘤進展、減小腫瘤大小、降低腫瘤生長速率、減少腫瘤侵襲和轉移潛能、緩解或改善一種或更多種症狀或病況、降低疾病程度、穩定(即不惡化)的疾病狀態、預防疾病傳播、延遲或減緩疾病進展、改善或減輕疾病狀態，以及緩解(不論是部分還是全部)，無論是可檢測的還是不可檢測的。「治療(treatment)」或「治療(treating)」還可以意指與如果不接受治療而預期的存活期相比延長存活期。
本申請化合物的治療劑量可根據例如以下而定：治療的具體用途、給予化合物的方式、患者的健康和狀態，以及簽處方醫師的判斷。本申請化合物在藥用組合物中的比例或濃度可不固定，取決於多種因素，它們包括劑量、化學特性(例如疏水性)和給藥途徑。
本發明中，表述-N(基團) 1-2表示的是-NH(基團)或-N (基團) 2。
術語「治療」意為將本申請所述化合物或製劑進行給藥以改善或消除疾病或與所述疾病相關的一個或多個症狀，且包括： (i)抑制疾病或疾病狀態，即遏制其發展； (ii)緩解疾病或疾病狀態，即使該疾病或疾病狀態消退。
術語「治療有效量」意指(i)治療特定疾病、病況或障礙，(ii)減輕、改善或消除特定疾病、病況或障礙的 一種或多種症狀，或(iii)預防或延遲本文中所述的特定疾病、病況或障礙的一種或多種症狀發作的本申請化合物的用量。構成「治療有效量」的本申請化合物的量取決於該化合物、疾病狀態及其嚴重性、給藥方式以及待被治療的哺乳動物的年齡而改變，但可例行性地由本領域技術人員根據其自身的知識及本公開內容而確定。
除非本申請中另外要求，在整個說明書和其後的申請專利範圍中，詞語「包括(comprise)」及其英文變體例如「包括(comprises)」和「包括(comprising)」應解釋為開放式的、含括式的意義，即「包括但不限於」。
在整個本說明書中提到的「在一些實施方案」或「在實施方案中」或「在另一實施方案中」或「在某些實施方案中」意指在至少一實施方案中包括與該實施方案所述的相關的具體參考要素、結構或特徵。因此，在整個說明書中不同位置出現的短語「在一些實施方案中」或「在實施方案中」或「在另一實施方案中」或「在某些實施方案中」不必全部指同一實施方案。此外，具體要素、結構或特徵可以任何適當的方式在一個或多個實施方案中結合。
除非另有說明，術語「異構體」意在包括幾何異構體、順反異構體、立體異構體、對映異構體、旋光異構體、非對映異構體和互變異構體。
本發明的化合物可以存在特定的幾何或立體異構體形式。本發明設想所有的這類化合物，包括順式和反式異構體、(-)-和(+)-對映體、(R)-和(S)-對映體、非對映異構體、(D)-異構體、(L)-異構體，及其外消旋混合物和其他混合物，例如對映異構體或非對映體富集的混合物，所有這些混合物都屬本發明的範圍之內。烷基等取代基中可存在另外的不對稱碳原子。所有這些異構體以及它們的混合物，均包括在本發明的範圍之內。
除非另有說明，術語「對映異構體」或者「旋光異構體」是指互為鏡像關係的立體異構體。
除非另有說明，術語「順反異構體」或者「幾何異構體」系由因雙鍵或者成環碳原子單鍵不能自由旋轉而引起。
除非另有說明，術語「非對映異構體」是指分子具有兩個或多個手性中心，並且分子間為非鏡像的關係的立體異構體。
除非另有說明，用楔形實線鍵和楔形虛線鍵表示一個立體中心的絕對構型，用直形實線鍵和直形虛線鍵表示立體中心的相對構型，用波浪線表示楔形實線鍵或楔形虛線鍵或用波浪線表示直形實線鍵或直形虛線鍵。
除非另有說明，術語「非對映異構體」是指分子具有兩個或多個手性中心，並且分子間為非鏡像的關係的立體異構體。
除非另有說明，「(+)」表示右旋，「(-)」表示左旋，「(±)」表示外消旋。
「任選」或「任選地」指的是隨後描述的事件或狀況可能但不是必需出現的，並且該描述包括其中所述事件或狀況發生的情況以及所述事件或狀況不發生的情況。
術語「被取代的」是指特定原子上的任意一個或多個氫原子被取代基取代，取代基可以包括重氫和氫的變體，只要特定原子的價態是正常的並且取代後的化合物是穩定的。當取代基為氧(即＝O)時，意味著兩個氫原子被取代。氧取代不會發生在芳香基上。
術語「任選被取代的」是指可以被取代，也可以不被取代，除非另有規定，取代基的種類和數目在化學上可以實現的基礎上可以是任意的。
術語「前藥」表示作為本發明的化合物的化學衍生物，該衍生物如果在體內發生化學反應轉化成通式I 所示的化合物。
當任何變量(例如R)在化合物的組成或結構中出現一次以上時，其在每一種情況下的定義都是獨立的。因此，例如，如果一個基團被0-2個R所取代，則所述基團可以任選地至多被兩個R所取代，並且每種情況下的R都有獨立的選項。此外，取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
當一個連接基團的數量為0時，比如-(CRR)0-，表示該連接基團為單鍵。
當其中一個變量選自單鍵時，表示其連接的兩個基團直接相連，比如A-L-Z中L代表單鍵時表示該結構實際上是A-Z。
當一個取代基為空缺時，表示該取代基是不存在的，比如A-X中X為空缺時表示該結構實際上是A。當所列舉的取代基中沒有指明其通過哪一個原子連接到被取代的基團上時，這種取代基可以通過其任何原子相鍵合，例如，吡啶基作為取代基可以通過吡啶環上任意一個碳原子連接到被取代的基團上。
當所列舉的連接基團沒有指明其連接方向，其連接方向是任意的，例如，中連接基團L為-M-W-，此時-M-W-既可以按與從左往右的讀取順序相同的方向連接環A和環B構成也可以按照與從左往右的讀取順序相反的方向連接環A和環B構成所述連接基團、取代基和/或其變體的組合只有在這樣的組合會產生穩定的化合物的情況下才是被允許的。
除非另有規定，當某一基團具有一個或多個可連接位點時，該基團的任意一個或多個位點可以通過化學鍵與其他基團相連。當該化學鍵的連接方式是不定位的，且可連接位點存在H原子時，則連接化學鍵時，該位點的H原子的個數會隨所連接化學鍵的個數而對應減少變成相應價數的基團。所述位點與其他基團連接的化學鍵可以用直形實線鍵直形虛線鍵或波浪線表示。例如-OCH3中的直形實線鍵表示通過該基團中的氧原子與其他基團相連；中的直形虛線鍵表示通過該基團中的氮原子 的兩端與其他基團相連；中的波浪線表示通過該苯基基團中的1和2位碳原子與其他基團相連。
除非另有規定， 用於表示 內的基團任意位點的氫原子可被取代。
除非另有說明，術語「富含一種異構體」、「異構體富集」、「富含一種對映體」或者「對映體富集」指其中一種異構體或對映體的含量小於100%，並且，該異構體或對映體的含量大於等於60%，或者大於等於70%，或者大於等於80%，或者大於等於90%，或者大於等於95%，或者大於等於96%，或者大於等於97%，或者大於等於98%，或者大於等於99%，或者大於等於99.5%，或者大於等於99.6%，或者大於等於99.7%，或者大於等於99.8%，或者大於等於99.9%。
除非另有說明，術語「異構體過量」或「對映體過量」指兩種異構體或兩種對映體相對百分數之間的差值。例如，其中一種異構體或對映體的含量為90%，另一種異構體或對映體的含量為10%，則異構體或對映體過量(ee值)為80%。
可以通過的手性合成或手性試劑或者其他常規技術製備光學活性的(R)-和(S)-異構體以及D和L異構體。如果想得到本發明某化合物的一種對映體，可以通過不對稱合成或者具有手性助劑的衍生作用來製備，其中將所得非對映體混合物分離，並且輔助基團裂開以提供純的所需對映異構體。或者，當分子中含有鹼性官能團(如胺基)或酸性官能團(如羧基)時，與適當的光學活性的酸或鹼形成非對映異構體的鹽，然後通過本領域所公知的常規方法進行非對映異構體拆分，然後回收得到純的對映體。此外，對映異構體和非對映異構體的分離通常是通過使用色譜法完成的，所述色譜法採用手性固定相，並任選地與化學衍生法相結合(例如由胺生成胺基甲酸鹽)。
本發明的化合物可以在一個或多個構成該化合物的原子上包含非天然比例的原子同位素。例如，可用放射性同位素標記化合物，比如氚(3H)，碘-125( 125I)或C-14( 14C)。又例如，可用重氫取代氫形成氘代藥物，氘與碳構成的鍵比普通氫與碳構成的鍵更堅固，相比於未氘化藥物，氘代藥物有降低毒副作用、增加藥物穩定性、增強療效、延長藥物生物半衰期等優勢。本發明的化合物的所有同位素組成的變換，無論放射性與否，都包括在本發明的範圍之內。
本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的多種合成方法來製備，包括下面列舉的具體實施方式、其與其他化學合成方法的結合所形成的實施方式以及本領域技術上人員所熟知的等同替換方式，優選的實施方式包括但不限於本發明的實施例。
本發明的化合物可以通過本領域技術人員所熟知的常規方法來確認結構，如果本發明涉及化合物的絕對構型，則該絕對構型可以通過本領域常規技術手段予以確證。例如單晶X射線繞射法(SXRD)，把培養出的單晶用Bruker D8 venture繞射儀收集繞射強度數據，光源為CuKα輻射，掃描方式：掃描，收集相關數據後，進一步採用直接法 (Shelxs97)解析晶體結構，便可以確證絕對構型。
本發明的化合物或其藥學上可接受的鹽可給藥於哺乳動物包括人，可口服、直腸、腸胃外(靜脈內、肌肉內或皮下)、局部給藥(粉劑、軟膏劑或滴劑)、或瘤內給藥。
本發明化合物的給藥劑量可以大約為0.05-300mg/kg體重/天，優選10-300mg/kg體重/天，更優選10-200mg/kg體重/天。
本發明化合物或其藥學上可接受的鹽可以配製為用於口服給藥的固體劑型，包括但不限於膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑等。在這些固體劑型中，本發明式(I)化合物作為活性成分與至少一種常規惰性賦形劑(或載體)混合，例如與檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或與下述成分混合：(1)填料或增容劑，如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和矽酸等；(2)粘合劑，如羥甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉一級膠等；(3)保濕劑，如甘油等；(4)崩解劑，如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯澱粉或木薯澱粉、藻酸、某些複合矽酸鹽和碳酸鈉等；(5)緩溶劑，如石蠟等；(6)吸收加速劑，如季銨化合物等；(7)潤濕劑如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯等；(8)吸附劑，如高嶺土等；和(9)潤滑劑，如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉等，或其混合物。膠囊劑、片劑和丸劑中也可包含緩衝劑。
所述固體劑型如片劑、糖丸、膠囊劑、丸劑和顆粒劑可採用包衣和殼材料例如腸溶衣和其他本領域公知的材料進行包衣或微囊化。它們可包含不透明劑，並且這種組合物中活性成分的釋放可以延遲的方式在消化道內的某一部分中釋放。可採用的包埋組分的實例是聚合物質和蠟類物質。必要時、活性成分也可與上述賦形劑中的一種或多種形成微膠囊形式。
本發明化合物或其藥學上可接受的鹽可以配製為用於口服給藥的液體劑型，包括但不限於藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿和酊劑等。除了作為活性成分的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽外，液體劑型可包含本領域中常規採用的惰性稀釋劑如水和其他溶劑、增溶劑和乳化劑，如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺以及油類，特別是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油等或這些物質的混合物等。除了這些惰性稀釋劑外，本發明液體劑型也可包含常規助劑，如潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香料等。
所述懸浮劑包括如乙氧基化異十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇只、微晶纖維素、甲醇鋁和瓊脂等或這些物質的混合物。
本發明化合物或其藥學上可接受的鹽可以配製為用於腸胃外注射的劑型包括但不限於生理上可接受的無菌含水或無水溶液、分散液、懸浮液或乳液，以及用於重新溶解成無菌的可注射溶液或分散液的無菌粉末。適宜的載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑包括水、乙醇、多元醇及其適宜的混合物。
本發明化合物或其藥學上可接受的鹽也可以配製為用於局部給藥的劑型包括如軟膏劑、散劑、栓劑、滴劑、噴射劑和吸入劑等。作為活性成分的本發明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽在無菌條件下和生理上可接受的載體及任選的防腐劑、緩衝劑，或必要時可能需要的推進劑一起混合。
本發明還提供藥物組合物，它含有本發明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽作為活性成分，以及藥學上可接受載體、賦形劑或稀釋劑。在製備藥物組合物時，通常是將本發明式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽與藥學上可接受載體、賦形劑或稀釋劑混合。
可以按常規製備方法將所述本發明組合物配製為常規藥物製劑。例如片劑、丸劑、膠囊劑、散劑、顆粒劑、乳液劑、混浮劑、分散液、溶液劑、糖漿劑、酏劑、軟膏劑、滴劑、栓劑、吸入劑、噴射劑等。
本發明所述的化合物或其藥學上可接受的鹽可以單獨給藥，或者 (如果需要)與其他藥學上可接受的治療劑聯合給藥，如與其他抗腫瘤藥物。待組合的各成分可同時或順序的給予，以單一制劑形式或以不同製劑的形式給予。所述組合不僅可包括本發明化合物和一種其他活性劑的組合，也可包括本發明化合物和兩種或更多種其他活性劑的組合。
本發明中，可與KRAS G12D降解劑式(I)化合物一起或組合使用的其他藥學上可接受的治療劑可為：EGFR和/或其突變體抑制劑、ErbB2(Her2) 和/或其突變體抑制劑、ALK和/或其突變體抑制劑、MEK和/或其突變體抑制劑、KRAS和/或其突變體抑制劑、BCR-ABL和/或其突變體抑制劑、FGFR1/FGFR2/FGFR3和/或其突變體抑制劑、ROS1和/或其突變體抑制劑、c-MET和/或其突變體抑制劑、AXL和/或其突變體抑制劑、NTRK1和/或其突變體抑制劑、RET和/或其突變體抑制劑、紫杉烷、含鉑化合物、抗代謝物、有絲分裂激酶抑制劑、免疫治療劑、抗血管生成藥物、拓撲異構酶抑制劑、A-Raf/B-Raf/C-RAf和/或其突變體抑制劑、ERK和/或其突變體抑制劑、細胞凋亡抑制劑、AKT和/或其突變體抑制劑、mTOR抑制劑、外遺傳調控劑、IGF1/2和/或IGF1-R抑制劑、Ras GEF和/或其突變體抑制劑、SOS1和/或其突變體抑制劑、SHP2和/或其突變體抑制劑、PI3K和/或其突變體抑制劑、PD-1/PD-L1抑制劑。EGFR和/或其突變體降解劑、ErbB2(Her2) 和/或其突變體降解劑、ALK和/或其突變體降解劑、MEK和/或其突變體降解劑、KRAS和/或其突變體降解劑、BCR-ABL和/或其突變體降解劑、FGFR1/FGFR2/FGFR3和/或其突變體降解劑、ROS1和/或其突變體降解劑、c-MET和/或其突變體降解劑、AXL和/或其突變體降解劑、NTRK1和/或其突變體降解劑、RET和/或其突變體降解劑、A-Raf/B-Raf/C-RAf和/或其突變體降解劑、ERK和/或其突變體降解劑、AKT和/或其突變體降解劑、IGF1/2和/或IGF1-R降解劑、Ras GEF和/或其突變體降解劑、SOS1和/或其突變體降解劑、SHP2和/或其突變體降解劑、PI3K和/或其突變體降解劑。EGFR和/或其突變體單抗，ErbB2(Her2)和/或其突變體單抗，PD-1/PD-L1單抗，CTLA-4單抗。PD-L1/TIGHT雙抗、PD-L1/CTLA-4雙抗、EGFR/MET雙抗、EGFR/CD3雙抗、EGFR/4-IBB雙抗、PD-L1/4-IBB雙抗、HER2/CD3雙抗。
本發明中，可與KRAS G12D降解劑式(I)化合物一起或組合使用的其他藥學上可接受的治療劑可為：阿法替尼(afatinib)、厄洛替尼(erlotinib)、吉非替尼(gefitinib)、拉帕替尼(lapatinib)、西妥昔單抗、帕尼單抗、奧希替尼、奧莫替尼(olmutinib)、EGF-816、曲妥珠單抗(trastuzumab)、帕妥珠單抗(pertuzumab)、唑替尼(crizotinib)、阿雷替尼(alectinib)、恩曲替尼(entrectinib)、布吉替尼(brigatinib)、曲美替尼(trametinib)、考比替尼(cobimetinib)、貝美替尼(binimetinib)、司美替尼(selumetinib)、瑞法替尼(refametinib)、伊馬替尼(imatinib)、達沙替尼(dasatinib)、尼羅替尼(nilotinib)、尼達尼布(nintedanib)、克唑替尼、勞拉替尼(lorlatinib)、色瑞替尼(ceritinib)、美樂替尼(merestinib)、紫杉醇(paclitaxel)、nab-紫杉醇、多西他賽(docetaxel)、順鉑(cisplatin)、卡鉑(carboplatin)、奧沙利鉑(oxaliplatin)、5-氟尿嘧啶、卡培他濱(capecitabine)、氟尿苷、阿糖胞苷(cytarabine)、吉西他濱(gemcitabine)、曲氟尿苷(trifluridine)及替比嘧啶(tipiracil)的組合(＝TAS102)、帕博西尼(palbociclib)、瑞博西尼(ribociclib)、阿貝西尼(abemaciclib)、伊匹單抗(ipilimumab)、納武單抗(nivolumab)、帕博利珠單抗(pembrolizumab)、阿替珠單抗(atezolizumab)、阿維魯單抗(avelumab)、德瓦魯單抗(durvalumab)、匹利珠單抗(pidilizumab)、PDR-001(＝斯帕珠單抗(spartalizumab))、貝伐珠單抗(bevacizumab)、伊立替康(irinotecan)、脂質體伊立替康、托泊替康(topotecan)、烏利替尼(ulixertinib)、雷帕黴素、替西羅莫司(temsirolimus)、依維莫司(everolimus)、利達莫司(ridaforolimus)、JQ-1、GSK 525762、OTX 015(＝MK8628)、CPI 0610、TEN-010(＝RO6870810)、珍妥珠單抗(xentuzumab)(WO 2010/066868中的抗體60833)或MEDI-573(＝杜昔妥單抗(dusigitumab))。
在符合本領域常識的基礎上，上述各優選條件，可任意組合，即得本發明各較佳實例。
本發明所用試劑和原料均市售可得。
化合物依據本領域常規命名原則，市售化合物也可採用供應商目錄名稱。
本發明通過KRAS G12D激酶活性測試實驗證明本發明所述式Ⅰ化合物能夠有效的與KRAS G12D靶蛋白結合或產生抑制效果，通過Western-Blot證明本發明所述式Ⅰ化合物能夠有效的特異性的降解A427細胞中KRAS G12D蛋白。本發明所述式Ⅰ化合物，和/其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥和/或其藥學上可接受的鹽可有效的降解KRAS G12D蛋白，從而達到預防或治療與KRAS G12D相關或與KRAS G12D與SOS1或SHP2蛋白互作用所引起的疾病或病症的效果。
下面通過實施例的方式進一步說明本發明，但並不因此將本發明限制在所述的實施例範圍之中。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，按照常規方法和條件，或按照商品說明書選擇。
下面將結合實施例對本發明做進一步詳細、完整地說明，但決非限制本發明，本發明也並非僅局限於實施例的內容。本發明實施例中的起始原料是已知的並且可以在市場上買到、或者可以採用或按照本領域已知的方法來合成。在無特殊說明的情況下，本發明實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照原料或商品製造廠商所建議的條件。
Ⅰ 化合物製備實施例 中間體1： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲醇的製備 將哌𠯤-1-羧酸三級丁酯 (14.7 g, 102.0 mmol)溶於甲苯 (120 mL)中，升溫至120 ℃, 然後加入1-(羥甲基)環丙烷-1-羧酸甲酯 (12 g, 68.0 mmol)和苯矽烷 (5.5 g, 51.0 mmol)。混合物在120 ℃下反應16小時, 再加入苯矽烷 (14.7 g, 136.0 mmol)和乙酸鋅(1.2 g, 6.8 mmol)，繼續反應2小時。反應結束後，冷卻到室溫，加入2M鹽酸水溶液 (120 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (10 mL x 3)萃取，水相用氧化鈉溶液 (4M, 60 mL)調節pH至12, 二氯甲烷 (100 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析純化得到1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 261.2.
步驟2： 3-(2-((1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (5.00 g, 11.70 mmol)和1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲醇 (3.30 g, 12.80 mmol)溶解在THF中，然後加入碳酸銫，混合物在90 ℃下攪拌反應16小時。反應結束後，冷卻到室溫，加入氯化銨飽和溶液 (100 mL) 淬滅反應，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3) 萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物通過矽膠柱 (PE:EtOAc = 10:1 ~ 3:1)純化，得到 3-(2-((1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 652.3.
步驟3: 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.5 g, 2.4 mmol)溶於DCM (15 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸脂 (1.03 g, 7.2 mmol)和DIEA (0.62 g, 4.8 mmol)。混合物在室溫反應30分鐘，減壓濃縮，濃縮物用MeOH (15 mL)溶解，加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後將混合物濃縮並通過矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH=100:1 ~10:1)得到 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 562.2.
步驟4： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 1.78 mmol)和 ((2-氟-6-((甲氧基甲基)氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯並呋喃-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (1.1 g, 2.14 mmol)的1,4-二氧六環 (9 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd-G3 (262 mg, 0.36 mmol)和碳酸銫 (1.74 g, 5.34 mmol)。混合物在氮氣保護下80 ℃反應16小時。反應液中加入水 (100 mL)，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經柱色譜(DCM:MeOH = 100:1 ~7:1)純化得到 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 912.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.17 (s, 1H), 8.11 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.59-7.53 (m, 1H), 7.33 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.77-4.70 (d, J= 12 Hz, 1H), 4.40-4.15 (m, 6H), 3.73 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 3.43 (s, 1H), 3.38-3.32 (m, 2H), 2.95-2.85 (m, 4H), 2.52-2.51 (m, 2H), 2.47-2.29 (m, 2H), 1.96-1.77 (m, 3H), 1.74-1.57 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 0.81 (t, J= 7.2 Hz, 18H), 0.69-0.60 (m, 2H), 0.53-0.37 (m, 5H).
中間體2： 3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 2,4,7-三氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶的製備 將7-氯-8-氟-1,2,3,4-四氫吡啶並[4,3-d]嘧啶-2,4-二酮 (9.30 g, 43.14 mol)溶於POCl 3(100 mL)，冷卻至0 °C，攪拌下緩慢滴加DIEA (16.69 g, 129.42 mol)。將反應液加熱至120 °C反應16小時。反應完畢，將反應液濃縮，用乙酸乙酯稀釋，然後緩慢倒入冰水中淬滅，乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，分離有機相。有機相依次用冷卻的NaHCO 3水溶液和飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮得2,4,7-三氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶。
步驟2： 3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將2,4,7-三氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶 (1.00 g, 3.97 mmol )和TEA (1.20 g, 11.90 mmol)溶於THF (15 mL)中，冷卻至-60 °C。緩慢滴加3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (0.71 g, 3.37 mmol)的THF (5 mL)溶液，-60 °C下反應30分鐘。 反應完畢， 將反應液倒入NH 4Cl 水溶液 (20 mL)並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱 (PE:EtOAc=3:1)純化得到3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=428.2.
步驟3： 3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.20 g, 3.27 mmol)和 ( S)-2-(羥基甲基)四氫吡咯-1-甲酸苄基酯 (1.15 g, 4.91 mmol)溶於THF (25 mL)中，加入Cs 2CO 3(2.13 g, 6.54 mmol)。將反應液加熱至85 °C反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (30 mL)，乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱 (DCM:MeOH = 100:1)純化得到3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=627.2.
步驟4： 3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (540 mg, 0.86 mmol)，2-(8-乙基-3-((甲氧基甲基)氧基)萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷 (353 mg, 1.03 mmol) 和磷酸鉀 (364 mg, 1.72 mmol)加入到dioxane/H 2O (10 mL/2 mL)中，加入催化劑cataCXium A Pd-G3 (62 mg, 0.086 mmol)。混合均勻，氮氣置換三次，將反應液加熱至100 °C 反應16 h。反應完畢，將反應液濃縮，經矽膠柱 (DCM:MeOH = 80:1)純化得到3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 806.9.
中間體3： 3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛
步驟1： 3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛的製備 將9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (400 mg, 1.16 mmol)溶於DCM (4 mL)中，然後加入TFA (2 mL)。將混合物在室溫攪拌1小時並濃縮，得到3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛，直接用於下一步反應。
步驟2： 3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛的製備 向3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (500 mg, 1.87 mmol)的DMSO (5mL)的溶液中加入DIEA (720 mg, 5.61 mmol)和4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (850 mg, 1.96 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。加入水並用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化得到3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 432.0.
中間體4： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 9-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向9-甲醯基-3-氮雜螺環[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (1.30 g, 4.62 mmol)和哌𠯤-1-羧酸三級丁酯 (1.82 g, 8.28 mmol)的DCM/MeOH (15 mL/5 mL)的混合溶液中加入AcOH (0.2 mL)，並在室溫下攪拌0.5小時。然後在0-5 oC下，向上述混合物中分批加入NaBH(OAc) 3(2.25 g, 10.60 mmol)並繼續攪拌0.5小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM: MeOH = 150:1~20:1)純化得到9-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 486.3.
步驟2： 4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄基酯的製備 向9-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (750 mg, 4.54 mmol) 的1,4-二氧六環(5 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環(6 N, 5 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時，反應液直接減壓濃縮得到4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄基酯。所得粗品無需純化，直接用於下一步反應。
步驟3： 4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄基酯的製備 向4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄基酯 (632 mg, 粗品)的DMSO (10 mL)溶液中加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲酸五氟苯酯 (430 mg, 1.00 mmol)和DIEA (516 mg, 4.00 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，然後經pre-HPLC純化得到4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄基酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 632.3.
步驟4： 1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄基酯 (586 mg, 0.93 mmol)的乙酸乙酯 (20 mL)溶液中加入Pd/C (300 mg)，室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 498.2.
步驟5： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.114 mmol)的THF (0.8 mL)溶液中，加入1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (68 mg, 0.17mmol)和鈦酸四異丙酯 (485 mg, 1.71 mmol)，在70 ℃下攪拌2小時。然後混合物在室溫下先加入MeOH (0.3 mL)，再分批加入NaBH(OAc) 3(72 mg, 0.34 mmol)並攪拌4小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=100:1~20:1)純化得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 662.4.
步驟6： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.0755 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入氟化銫 (40 mg, 0.27 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。上述混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取，有機相經無水硫酸鈉乾燥，濾液減壓濃縮得到 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1167.3.
中間體5： 3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 向 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.81 mmol)的1,4-二氧六環/H 2O (5.0 mL/1.0 mL)溶液中加入 (5-甲基-1 H-吲唑-4-基)硼酸 (257 mg, 1.46 mmol)，碳酸銫 (792 mg, 2.43 mmol)和1,1''-雙(二-三級丁基膦)二茂鐵二氯合鈀 (59 mg, 0.08 mmol)，在N 2保護下75 ℃下反應過夜。將反應混合物過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (MeOH:DCM = 100:1~20:1)純化得到3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 590.2.
中間體6： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (500 mg, 1.0 mmol)和2-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷 (411 mg, 1.2 mmol)的1,4-二氧六/H 2O (5 mL/1 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd-G3 (146 mg, 0.2 mmol)和碳酸銫 (981 mg, 3.0 mmol)。混合物在氮氣保護下85 oC反應16小時，反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (DCM: MeOH =50:1)純化得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 674.2.
步驟2： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 0 ℃，向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (320 mg, 0.47 mmol)的DCM (5 mL)溶液中加入Dess-Martin 氧化劑 (242 g, 0.57 mmol)，室溫下反應1小時。反應液中加入硫代硫酸鈉溶液 (5 mL)和碳酸氫鈉溶液 (5 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=30:1)純化得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 672.3.
中間體7： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 向4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯鹽酸鹽 (930 mg, 2.2 mmol)的DMSO (20 mL)溶液中加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲酸五氟苯酯 (921 mg, 2.3 mmol)和DIEA (995 mg, 7.7 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，經Pre-HPLC純化，得到4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 616.3.
步驟2： 1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (900 mg, 1.46 mmol)的乙酸乙酯 (20 mL)溶液中加入Pd/C (100 mg)，室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮得到1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 482.2.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙烷基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.114 mmol)的THF (5 mL)溶液中，加入1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (66 mg, 0.17 mmol)和鈦酸四異丙酯 (485 mg, 1.71 mmol)，在70 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下先加入MeOH (5 mL), 再分批加入NaBH(OAc) 3(72 mg, 0.34 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 654.9.
步驟4： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.076 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入氟化銫 (40 mg, 0.27 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。加入水並用乙酸乙酯萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮得3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1151.5.
中間體8： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將 3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (0.5 g, 1.17 mmol)和1-(胺基甲基)環丙基]甲醇 (0.16 g, 1.52 mmol)加入到THF (8 mL)中，然後加入碳酸銫 (0.76 g, 2.34 mmol)，混合物在25 ℃下反應16小時。反應結束後，加入水 (30 mL)並用乙酸乙酯 (30 mL x 2)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化，得到3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 493.1. 1H NMR (300 MHz, DMSO- d 6) δ 8.65 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.89 - 7.57 (m, 1H), 4.78 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 4.54 - 4.35 (m, 2H), 4.23 (s, 2H), 3.58 - 3.43 (m, 3H), 3.42 - 3.37 (m, 1H), 3.33 - 3.28 (m, 1H), 1.87 -1.65 (m, 4H), 1.49 (s, 9H), 0.52 - 0.35 (m, 4H).
步驟2： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.81 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (540 mg, 1.05 mmol)的1,4-二氧六環 (15 mL)和H 2O (3 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (60 mg, 0.081 mmol)和碳酸銫 (660 mg, 2.03 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應6小時。反應液直接過濾減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化, 得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 843.4.
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.24 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (122 mg, 0.29 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (3 mL)和碳酸氫鈉溶液 (3 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 841.4.
中間體9： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 2.33 mmol)和 (1-苄基哌啶-4-基)甲醇(0.96 g, 2.67 mmol)溶於THF (10 mL)中，加入Cs 2CO 3(2.28 g, 7.00 mmol)。將反應液加熱至90 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (50 mL），乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (PE:EA = 3:1)得到3-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 597.3. 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.71 (s, 1H), 7.36 - 7.26 (m, 5H), 4.53 - 4.25 (m, 6H), 3.77 - 3.57 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 2.95 (d, J= 11.2 Hz, 2H), 2.05 - 1.93 (m, 4H), 1.86 - 1.80 (m, 2H), 1.73 - 1.68 (m, 2H), 1.51 (s, 9H), 1.47 - 1.37 (m, 2H), 1.28 - 1.22 (m, 1H).
步驟2： 3-(7-氯-8-氟-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.02 g, 1.71 mmol)溶入DCM (10 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸酯 (733 mg, 5.12 mmol)和DIEA (441 mg, 3.42 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮，濃縮物加入MeOH (3 mL)溶解，加熱到50 ℃反應10分鐘。反應結束後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 7:93)純化，得到3-(7-氯-8-氟-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 507.0. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.86 (s, 1H), 4.61 (d, J= 12.4 Hz, 2H), 4.42 - 4.32 (m, 4H), 3.72 (d, J= 12.4 Hz, 2H), 3.41 (d, J= 12.4 Hz, 2H), 3.03 – 2.90 (m, 2H), 2.19 - 2.16 (m, 1H), 2.06 (d, J= 13.6 Hz, 2H),1.97 - 1.89 (m, 2H), 1.78 - 1.71 (m, 2H), 1.67 - 1.57 (m, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.54 - 1.24 (m, 1H).
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.79 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (485 mg, 0.95 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (58 mg, 0.08 mmol)和碳酸銫 (771 mg, 2.37 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 7%)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 429.3.
中間體10： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 2-(4-苄基哌𠯤-1-基)乙醇的製備 在室溫下，向1-苄基哌𠯤 (1000 mg, 5.673 mmol)和2-溴-1-醇 (851 mg, 6.808 mmol)的無水乙腈 (25 mL)溶液中，加入無水碳酸鉀 (1180 mg, 8.510 mmol)，並在90 ℃下攪16小時。反應結束後，濾除析出物，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇=100:1 ~ 10:1, 0.1% NH 3)純化，得到2-(4-苄基哌𠯤-1-基)乙醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 221.2.
步驟2： 3-(2-(2-(4-苄基哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向2-(4-苄基哌𠯤-1-基)乙醇 (823 mg, 3.735 mmol)和 3-(2, 7-二氯-8-氟吡啶並[4, 3-d]嘧啶-4-基)-3, 8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (800 mg, 1.868 mmol)的無水乙腈 (25 mL)溶液中，加入無水碳酸銫 (1217 mg, 3.736 mmol)和1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷 (105 mg, 0.934 mmol)，並在25 ℃下攪4小時。反應結束後，用四氫呋喃 (50 mL)稀釋，濾除固體，濾液在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (石油醚:四氫呋喃 = 10:1~2:1)純化，得到3-(2-(2-(4-苄基哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 612.1.
步驟3： 3-(7-氯-8-氟-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(2-(4-苄基哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (840 mg, 1.372 mmol)的二氯甲烷 (40 mL)溶液中，加入1-氯乙基氯甲酸酯 (1217 mg, 3.736 mmol)，並在30 ℃下攪1小時。反應結束後，在40 ℃下減壓濃縮，得到3-(7-氯-8-氟-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 522.1.
步驟4： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-氯-8-氟-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (714 mg, 1.372 mmol)和 (2-氟-6-甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (845 mg, 1.646 mmol)的1,4-二氧六環 (20 mL)和水 (4 mL)溶液中，加入無水碳酸銫 (1608 mg, 4.938 mmol)和cataCXium(R)A Pd G3 (240 mg, 0.329 mmol)。脫氣後，在氮氣保護下，85 ℃攪拌16小時。反應結束後，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇=100:1 ~ 10:1, 0.1% NH 3)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 872.2.
中間體11： 1-(2-甲氧基-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (473 mg, 1.86 mmol)的二甲基亞碸 (8 mL)溶液中加入DIEA (721 mg, 5.58 mmol)和3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲酸五氟苯酯 (800 mg, 1.86 mmol)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，用水 (10 mL)和乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。有機相用鹽水 (20 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 445.1.
步驟2： 1-(2-甲氧基-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (920 mg, 1.84 mmol)的1,4-二氧六環 (4 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (2 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，在真空下濃縮得到1-(2-甲氧基-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 401.1.
中間體12： 1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向9-甲醯基-3-氮雜螺環[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (0.5 g, 1.77 mmol)1-苄基哌𠯤 (0.38 g, 2.14 mmol)的1,2-二氯乙烷 (10 mL)溶液中加入乙酸 (0.1 mL)。將混合物在30 ℃下攪拌半小時。將上述混合物降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(0.75 g, 3.56 mmol)，然後升至室溫反應3小時。反應完畢，加入H 2O (10 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM/MeOH = 20:1)純化，得到9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 442.2.
步驟2： 9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷的製備 向9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.45 mmol)的1,4-二氧六環 (3 mL)溶液中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (1 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時。反應液直接減壓濃縮得到9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷，未進一步純化直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 342.3.
步驟3： 1-(5-(9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的裝製備 將9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷 (150 mg, 0.45 mmol)溶於 DMF (3 mL)中，加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (205 mg, 0.47 mmol)和DIEA (175 mg, 1.35 mmol)。將反應液在室溫下攪拌1小時。反應液中加入水 (20 mL)，然後用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和鹽水 (30 mL x 3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾，濾液濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH =100:1~5:1)純化，得到1-(5-(9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 592.2.
步驟4： 1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將1-(5-(9-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (0.16 g, 0.27 mmol)溶於DCM (3 mL)中，然後加入1-氯乙基氯甲酸酯 (77 mg, 0.54 mmol)和DIEA (70 mg, 0.54 mmol)。混合物在室溫反應30分鐘後再加入MeOH (3 mL)，反應液在50 ℃反應30分鐘。反應結束後加入水，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，有機相用飽和氯化鈉溶於洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 502.2.
中間體13： 1-(2-氯-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮鹽酸鹽
步驟1： 9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (294 mg, 1.16 mmol)的DMF (5 mL)溶液中，加入4-氯-3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (500 mg, 1.15 mmol)和DIEA (387 mg, 3.00 mmol)，在室溫下反應2小時。反應液中加入水 (50 mL)並用乙酸乙酯 (30 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1洗脫)純化，得到9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 449.2.
步驟2： 1-(2-氯-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮鹽酸鹽的製備 向9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.79 mmol)的1,4-二氧六環 (5.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 5.0 mL)，室溫反應1小時。反應液濃縮直接減壓濃縮得到1-(2-氯-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮鹽酸鹽。所得產物直接用於下一步反應。
中間體14： 3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.5 g, 1.78 mmol)的DMF (6 mL)溶液中加入氟化銫 (1.35 g, 8.92 mmol)。混合物在25 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 30:1)純化，得到3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 685.3.
步驟2： 3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (800 mg, 1.17 mmol)的乙酸乙酯 (6 mL)溶液中加入Pd/C (124 mg, 0.117 mmol)，30 ℃反應16小時。反應結束後將反應液減壓濃縮，得到3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 688.9.
中間體15： 3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.61 mmol)和三異丙基((6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷 (361 mg, 0.73 mmol) 的1,4-二氧六環 (6 mL)和H 2O (1.2 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (44 mg, 0.061 mmol)和碳酸銫 (398 mg, 1.22 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應6小時。反應液直接過濾減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化，得到3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 826.1.
步驟2： 3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (260 mg, 0.31mmol)的二氯甲烷 (5 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (200 mg, 0.47 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (5 mL)和碳酸氫鈉溶液 (5 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 824.1.
中間體16： 1-(2-氯-5-(4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-羥基乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (5 g, 18.99 mmol)的DCM (50 mL)溶液中加入Dess-Martin氧化劑 (10.5 g, 24.69 mmol)，將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (50 mL)和碳酸氫鈉溶液 (50 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (50 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，得到4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸苄酯，直接用於下一步。
步驟2： 4-(2-(((1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (2.66 g, 10.2 mmol)的DCM/MeOH (30 mL/15 mL)溶液中加入4-((甲基胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (2.8 g, 12.3 mmol)和乙酸 (1.5 mL)。將混合物在室溫攪拌2 h。然後0 ℃下加入NaBH(OAc) 3(4.3 g, 20.4 mmol)。混合物用水 (30 mL)溶液稀釋，並用DCM (30 mL x 3)萃取。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱色譜層析 (DCM:MeOH=20:1)純化，得到4-(2-(((1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 474.1.
步驟3： 4-((甲基(2-(哌啶-4-基)乙基)胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(2-(((1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (2 g, 4.2 mmol)的甲醇 (15 mL)溶液中加入Pd/C (447 mg)，氫氣球保護下30 ℃攪拌16小時。過濾並濃縮混合物，得到4-((甲基(2-(哌啶-4-基)乙基)胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 340.3.
步驟4： 4-(((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-((甲基(2-(哌啶-4-基)乙基)胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (600 mg, 粗品)的DMF (8 mL)溶液中加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (769 mg, 1.77 mmol)和DIEA (686 mg, 5.31 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，反應結束後，加入水 (10 mL)淬滅反應，並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，有機相乾燥濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到4-(((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 590.3.
步驟5：1-(2-氯-5-(4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-(((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (900 mg, 1.5 mmol)的1,4-二氧六環 (3 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (2 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，加入Na 2CO 3(5 mL)水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH (NH 3) = 20:1)純化，得到1-(2-氯-5-(4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 490.3.
中間體17： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (4.0 g, 9.35 mmol)和環丙烷-1,1-二基二甲醇 (1.9 g, 18.7 mmol)的THF (50 mL)溶液中加入Cs 2CO 3(9.1 g, 28.0 mmol)，常溫攪拌16 h。反應液中加入H 2O (50 mL)並用EtOAc (50 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 50:1)純化得到3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 494.2.
步驟2： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (6.0 g, 12.2 mmol)和 (2-氟-6-(甲氧基甲基氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (7.5 g, 14.6 mmol)的1,4-二氧六環 (60 mL)和H 2O (12 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (1.8 g, 2.4 mmol)和碳酸銫 (11.9 g, 36.4 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應3小時，加入水 (100 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 844.4.
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (4.0 g, 4.7 mmol)的DCM (40 mL)溶液降溫至0 ℃，然後加入Dess-Martin (2.4 g, 5.7 mmol)，室溫下反應0.5小時。反應液中加入水 (30mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 30:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 842.4. 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.27 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.79 (dd, J= 9.2 Hz, 5.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.35-7.28 (m, 2H), 5.35 - 5.24 (m, 2H), 4.86 - 4.69 (m, 2H), 4.64 - 4.55 (m, 1H), 4.50 - 4.28 (m, 2H), 4.21 - 4.10 (m, 1H), 3.90 - 3.68 (m, 1H), 3.62 - 3.34 (m, 4H), 2.05 - 1.98 (m, 3H), 1.79 - 1.64 (m, 1H), 1.52 (s, 9H), 1.39 - 1.26 (m, 4H), 0.95 - 0.78 (m, 18H), 0.61 - 0.47 (m, 3H).
中間體18： 1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向3-(哌啶-4-基)丙-1-醇 (3 g, 20.9 mmol)的四氫呋喃 (12 mL)溶液中加入碳酸氫鈉 (42 mL)溶液，降溫至0 ℃後，緩慢滴加氯甲酸苄酯 (3.9 g, 23.0 mmol)，室溫反應2小時後，用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。有機相乾燥濃縮並經矽膠柱層析 (PE:EA = 30:1)純化，得到4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 278.1.
步驟2： 4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (4 g, 14.4 mmol)的二氯甲烷 (50 mL)溶液中加入Dess-Martin (7 g, 17.3 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (50 mL)和碳酸氫鈉溶液 (50 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (50 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 276.1.
步驟3： 4-(3-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (3.3 g, 12.0 mmol)的1,2-二氯乙烷 (60 mL)中加入哌𠯤-1-羧酸三級丁酯 (6.7 g, 36.0 mmol)和乙酸 (2 mL)，室溫反應2小時，降溫至0 ℃後，緩慢加入醋酸硼氫化鈉 (5.3 g, 24.0 mmol)，室溫反應16小時。反應結束後，加入水 (60 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (60 mL x 3)萃取。有機相乾燥濃縮並經矽膠逐層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到4-(3-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 446.2.
步驟4： 4-(3-(哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(3-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯 (2.5 g, 5.6 mmol)的甲醇 (40 mL)的溶液中加入Pd/C (597 mg)，在30 ℃下攪拌16小時。過濾並濃縮混合物，得到4-(3-(哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 312.2.
步驟5： 4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(3-(哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯 (250 mg, 0.8 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (348 mg，0.8 mmol)和DIEA (310 mg, 2.4 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，反應結束後，加入水 (5 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，有機相乾燥濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 562.2.
步驟6： 1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.71 mmol)的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6N, 1 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時，濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH (NH 3) = 20:1)純化，得到1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 462.2.
中間體19：9-(3-羥丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 參照專利WO2022223034A1中實施例21制得。
中間體20： 9-(2-羥基乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 參照專利WO2022223034A1中實施例22制得。
中間體21： 1-(2-氯-5-(哌𠯤-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 參照專利WO2023025159A1中實施例40制得。
中間體22： 3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 參照專利WO2023025159A1中中間體32制得。
中間體23： 1-(2-氯-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 參照專利WO2023025159A1中實施例48制得。
中間體24：3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 參照中間體3的製備方法。
中間體25： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： ( S)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙酸甲酯的製備 將 ( S)-3-羥基-2-甲基丙酸甲酯 (30 g, 254 mmol)和咪唑 (34.5 g, 508 mmol)溶於二氯甲烷 (120 mL)，加入三級丁基二甲基氯矽烷 (46 g, 305 mmol)，室溫反應3小時。反應完畢，將反應液倒入飽和氯化銨水溶液 (20 mL)並用乙酸乙酯萃取 (200 mL x 3)。合併有機相，用飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 30:1)得到 ( S)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙酸甲酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.80 - 3.73 (m, 1H), 3.70 - 3.58 (m, 4H), 2.69 - 2.57(m, 1H), 1.14 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.03 (d, J= 1.4 Hz, 6H).
步驟2： ( R)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙-1-醇的製備 將 ( S)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙酸甲酯 (49 g, 211 mmol)溶於THF/MeOH (500 mL/100 mL)，冷卻至0-5 ℃，加入硼氫化鋰 (7 g, 317 mmol)，溫反應16小時。先加入氯化銨水溶液淬滅反應，然後用乙酸乙酯萃取 (200 mL x 3)。合併有機相，用飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得到 ( R)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙-1-醇，所得粗品直接用於下一步反應。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.77 - 3.69 (m, 1H), 3.68 - 3.49 (m, 3H), 2.82 (brs, 1H), 2.00 - 1.87 (m, 1H), 0.89 (s, 9H), 0.83 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.07 (s, 6H).
步驟3： ( S)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙基甲基磺酸鹽的製備 將 ( R)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙-1-醇 (35 g, 172 mmol)和三乙胺 (34.7 g, 344 mmol)溶於DCM中，冷卻至0-5 ℃，加入甲磺醯氯 (23.6 g, 206 mmol)，室溫反應2小時。加入氯化銨水溶液並用DCM萃取，有機相用飽和氯化鈉水溶液洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得到粗品 ( S)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙基甲基磺酸鹽，所得粗品直接用於下一步反應。
步驟4： ( R)-1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤的製備 將 ( S)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙基甲基磺酸鹽 (48 g, 粗品)加入到1-苄基哌𠯤鹽酸鹽 (73 g, 344 mmol)和碳酸鉀 (95 g, 688 mmol)的混合液中，60 ℃下加熱反應16小時。將反應液過濾，濾液濃縮經柱層析 (PE:EtOAc = 20:1~3:1)純化得 ( R)-1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 363.4.
步驟5： ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇的製備 將 ( R)-1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤 (22 g, 60 mmol)溶於乙醇 (300 mL)中，冷卻至0-5 ℃，加入濃鹽酸 (80 mL)，室溫反應1小時。將反應液濃縮去除乙醇，殘餘物中加水 (100 mL)，然後用甲基三級丁基醚 (100 mL)萃取。水相用碳酸鈉水溶液調節至pH = 8~9，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併的乙酸乙酯有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得到 ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇 ( e.e.= 98.8%)。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.34 - 7.28 (m, 4H), 7.27 - 7.22 (m, 1H), 3.70 - 3.59 (m, 1H), 3.54 - 3.39 (m, 3H), 2.86 - 2.25 (m, 10H), 2.18 - 2.10 (m, 1H), 0.73 (d, J= 6.8 Hz, 3H). LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 249.2.
步驟6： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.50 g, 3.50 mmol)和 ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇 (1.30 g, 5.26 mmol)溶於THF (100 mL)于封管反應器中，加入Cs 2CO 3(3.42 g, 10.5 mmol)。將反應液加熱至90 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (30 mL)，然後乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮所得粗產品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 640.4.
步驟7： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 1.56 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (0.96 g, 1.81 mmol)的1,4-二氧六環/水 (6 mL/1.2 mL)的混合溶液中加入Ruphos Pd G3 (0.13 g, 0.16 mmol)和磷酸鉀 (0.99 g, 4.68 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (20 mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 990.6.
步驟8： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.30 mmol)溶於DCM (3 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸酯 (130 mg, 0.91 mmol)和DIEA (117 mg, 0.91 mmol)。混合物在室溫反應1小時，反應液直接減壓濃縮，濃縮物中加入MeOH (5 mL)，然後加熱到50 ℃反應1小時。反應結束後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 20:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 900.5.
中間體26： 3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 向3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲酸 (50 mg, 0.2 mmol)的DMF (5 mL)溶液中，加入HATU (76 mg, 0.2 mmol)和DIEA (130 mg, 1 mmol)，然後加入3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (47 mg, 0.17 mmol)，並在室溫下反應過夜。反應完畢後，反應液中加入H 2O (15 mL)，然後用乙酸乙酯 (15 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 415.3.
中間體27： 3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛
步驟1： 5-胺基-2-氟-4-甲基苯甲酸的製備 向2-氟-4-甲基-5-硝基苯甲酸 (4.8 g, 24.1 mmol)的MeOH (150 mL)溶液中加入Pd/C (700 mg, 10%)。混合物在H 2氛圍中50 ℃下攪拌過夜。反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮得5-胺基-2-氟-4-甲基苯甲酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 170.1.
步驟2： 5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲酸的製備 向5-胺基-2-氟-4-甲基苯甲酸 (4.1 g, 24.2 mmol)中加入丙烯酸 (6.6 mL, 7 g, 96.8 mmol)和HOAc (30 mL)，在100 ℃下攪拌3小時。反應後，加入脲 (9 g, 150 mmol)，120 ℃攪拌過夜。將反應液倒入冰水中，邊攪拌邊加入濃鹽酸，低溫靜置過夜，過濾並水洗，濾餅乾燥後得到5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 267.1.
步驟3： 3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛的製備 向5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲酸 (350 mg, 1.3 mmol)的DMF (10 mL)溶液中，加入HATU (502 mg, 1.3 mmol)和DIEA (430 mg, 3.3 mmol)，然後加入3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (200 mg, 1.1 mmol)並在室溫下攪拌過夜。反應完畢後，加入H 2O (50 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 430.2.
中間體28： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 參照中間體17的製備方法。
中間體29： 3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 參照中間體26的製備方法。
中間體30： ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇
步驟1： ( R)-1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇的製備 將 ( R)-三級丁基二甲基(環氧-2-基甲氧基)矽烷 (20 g, 106 mmol)， N-苄基哌𠯤鹽酸鹽 (25 g, 117 mmol)和碳酸鉀 (29 g, 212 mmol)的THF (15 mL)混合液加熱回流3小時。反應完畢，過濾掉固體，濾液濃縮得粗產品，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)得到 ( R)-1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 365.3.
步驟2： ( R)-1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤的製備 將 ( R)-1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇 (20.0 g, 55 mmol)溶於THF (200 mL)中，0 ℃下加入NaH (2.6 g, 110 mmol)，25 ℃反應30分鐘後冷卻至0 ℃，加入碘甲烷 (9.7 g, 69 mmol)，在室溫下反應3 h。反應完畢，反應液緩慢倒入冷卻的NH 4Cl水溶液 (200 mL)中，然後用乙酸乙酯 (200 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化得到 ( R)-1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤 (e.e. = 99.3%)。 手性分離: 色譜柱: IG 5 um, Column size 4.6*250 mm; 流動相: Hex : EtOH : DEA = 90 : 2 : 0.2; 流速: 1 mL/min 254 nm; 柱溫：30 ºC. LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 379.2.
步驟3： ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇的製備 將 ( R)-1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤 (15.0 g, 40 mmol)溶於乙醇 (100 mL)中，冷卻至0-5 ℃時加入濃鹽酸 (40 mL)，室溫反應1小時。反應完畢，將反應液濃縮去除乙醇，濃縮物中加水 (100 mL)，用甲基三級丁基醚 (100 mL)萃取。水相用碳酸鈉水溶液調節至pH = 8~9，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併的EA相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得 ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇，直接用於下一步反應。
中間體31： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.5 g, 3.50 mmol)和 ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇 (1.11 g, 4.20 mmol)溶於ACN (15 mL)中，加入Cs 2CO 3(3.42 g, 10.5 mmol)和DABCO (79 mg, 0.70 mmol)，室溫反應1 h。反應完畢，濾除固體，濾餅用二氯甲烷洗2遍，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 656.3.
步驟2： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.2 g, 1.83 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (1.13 g, 2.20 mmol)的1,4 -二氧六環 (8 mL)和H 2O (1.6 mL)的混合溶液中加入Cata CXium Pd G 3(267 mg, 0.366 mmol)和碳酸銫 (1.79 g, 5.49 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時。反應液中加入水 (20 mL)，然後用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1006.6.
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.3 g, 1.29 mmol)溶於DCM (5 mL)中，然後加入1 -氯乙基氯碳酸酯 (553 mg, 3.87 mmol)和DIEA (500 mg, 3.87 mmol)。混合物在室溫反應1小時，反應液直接減壓濃縮，濃縮物用MeOH (5 mL)溶解，然後加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 15:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 916.5.
實施例1： 1-(5-(4-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 0 ℃下，向4-(3-羥丙基)哌啶-1-甲酸苄酯 (3.0 g, 10.8 mmol)的DCM (60 mL)溶液中分批加入Dess-Martin 試劑 (5.5 g, 13.0 mmol)，反應1小時。反應完成後，反應液用飽和Na 2S 2O 3水溶液 (50 mL)和NaHCO 3水溶液 (50 mL)淬滅，並用 DCM (100 mL x 3)萃取。合併有機相並用飽和食鹽水(100 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (EA:PE = 3:17~3:7)純化得到4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.78 (s, 1H), 7.38-7.28 (m, 5H), 5.12 (s, 2H), 4.28-4.02 (m, 2H), 2.90-2.65 (m, 2H), 2.51-2.42 (m, 2H), 1.74-1.54 (m, 4H), 1.51-1.37 (m, 1H), 1.21-1.03 (m, 2H).
步驟2： 3-(2-((( S)-1-(3-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (360 mg, 0.45 mmol)溶於乙醇 (10 mL)和乙酸 (1 mL)，加入鈀碳 (100 mg)。反應液氫氣球保護下置換三次，15 ℃反應1小時。反應完畢，過濾，濾液直接用於下一步。將上述濾液冷卻至0-5 ℃，加入NaBH(OAc) 3(243.80 mg, 1.15 mmol)，然後加入4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸苄酯，15 ℃下繼續反應30分鐘。加入碳酸氫鈉水溶液淬滅，用EtOAc (30 mL x 2) 萃取。有機相用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 80:1)純化得到3-(2-((( S)-1-(3-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=932.1.
步驟3： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基]吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-(3-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (230 mg, 0.25 mmol)溶於乙醇 (10 mL)，加入鈀碳 (80 mg)。反應液氫氣球保護下置換三次，15 ℃反應3小時。反應完畢，過濾，濾液減壓濃縮得3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基]吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯，無需純化直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=798.3.
步驟4： 3-(2-((( S)-1-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基]吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.20 mmol)和DIEA (51.60 mg, 0.40 mmol)溶於DMSO (2 mL)中，加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1-基)苯甲酸五氟苯酯 (87 mg, 0.20 mmol)，室溫反應1小時。加入水 (30 mL)， EtOAc萃取 (30 mL x 2)。有機相用飽和NaCl溶液 (50 mL x 3)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱 (DCM:MeOH = 20:1)純化得3-(2-((( S)-1-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=1048.6.
步驟5： 1-(5-(4-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((( S)-1-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.095 mmol)於DCM (2 mL)中，加入TFA (1 ml)。15 ℃反應1小時。反應液濃縮，DCM (20 mL)稀釋，加入NaHCO 3水溶液調節至pH＞7。分離有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經高效液相製備得1-(5-(4-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=904.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.04 (s, 1H), 7.64-7.56 (m, 2H), 7.46 (s, 1H), 7.38-7.31 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 7.15 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.66-4.34 (m, 5H), 3.84-3.59 (m, 7H), 3.20-3.15 (m, 1H), 3.04-2.66 (m, 6H), 2.45-2.20 (m, 4H), 2.09-2.00 (m, 1H), 1.90-1.49 (m, 12H), 1.33-0.98 (m, 4H), 0.89 (t, J= 7.2 Hz, 3h).
實施例2： 1-(( S)-2-(3-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙氧基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)吡咯-2-甲醯胺
步驟1： 3-(3-羥基丙氧基)丙酸苄酯的製備 在室溫下向丙烯酸苄酯 (20.0 g, 0.123 mol)和丙烷-1,3-二醇 (46.89 g, 0.617 mol)的乙腈 (250 mL)溶液中加入Triton B (82.00 g, 0. 123 mol, 25%水溶液)。將反應液在室溫下攪拌過夜。將反應混合物加入鹽水並用EtOAc (200 mL x 2)萃取。將有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得到粗產物，經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 5:1)純化，得到3-(3-羥基丙氧基)丙酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=239.1.
步驟2： 3-(3-氧代丙氧基)丙酸苄酯的製備 將3-(3-羥基丙氧基)丙酸苄酯 (1.90 g, 7.98 mmol)的二氯甲烷 (30 mL) 溶液冷卻至0-10 °C，分批加入Dess-Martin氧化劑 (4.06 g, 9.58 mmol)。將所得反應液在室溫下攪拌1.5小時。加入硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液淬滅，二氯甲烷 (30 mL × 2)萃取。將合併的有機相用飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾。濾液減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 5:1)純化，得到3-(3-氧代丙氧基)丙酸苄酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.76 (t, J= 1.6 Hz, 1H), 7.37-7.28 (m, 5H), 4.52 (s, 2H), 4.44 (t, J= 6.0 Hz, 2H),  3.73 (t, J= 6.0 Hz, 2H),  2.79-2.73 (m, 2H), 2.63-2.58 (m, 2H).
步驟3： 3-(2-((( S)-1-(3-(3-(苄氧基)-3-氧代丙氧基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.37 mmol)溶於乙醇 (9 mL)/乙酸 (1 mL)中，加入鈀炭 (100 mg)。氫氣球保護下置換三次，在10 ℃反應1小時。將反應液通過矽藻土過濾，濾液直接用於下一步。將濾液冷卻至0-5 ℃，加入NaBH(OAc) 3(196.10 mg, 0.93 mmol)，然後加入3-(3-氧代丙氧基)丙酸苄酯 (174.64 mg, 0.74 mmol)並在15 ℃下攪拌30分鐘。反應完畢，加入碳酸氫鈉水溶液並用乙酸乙酯 (30 mL × 2)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並過濾。減壓濃縮得粗產品，通過薄層製備板 (DCM:MeOH = 10:1)純化得到3-(2-((( S)-1-(3-(3-(苄氧基)-3-氧代丙氧基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] +=447.3.
步驟4： 3-(3-(( S)-2-(((4-(8-(三級-丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙氧基)丙酸的製備 將 3-(2-((( S)-1-(3-(3-(苄氧基)-3-氧代丙氧基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50.0 mg, 0.06 mmol)溶於乙酸乙酯 (3 mL)中，加入鈀碳 (20 mg)。氫氣球保護下置換三次，在30 ℃下攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，所得粗產物經薄層製備板 (DCM:MeOH= 5:1)純化得到3-(3-(( S)-2-(((4-(8-(三級-丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙氧基)丙酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 402.3.
步驟5： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((( S)-1-(3-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙氧基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(3-(( S)-2-(((4-(8-(三級-丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙氧基)丙酸 (33 mg, 0.041 mmol)和HATU (18.62 mg, 0.049 mmol)溶於DMF (1 mL)中，攪拌3分鐘，依次加入DIEA (10.58 mg, 0.82 mmol)和 (2 S,4 R)-1-(( S)-2-胺基-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)吡咯-2-甲醯胺 (21.18 mg, 0.049 mmol)，反應液在25 ℃下攪拌1小時。反應液加水 (30 mL)稀釋並用乙酸乙酯 (10 mL × 2)萃取。有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品經薄層製備板 (DCM:MeOH = 5:1)純化3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((( S)-1-(3-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙氧基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 608.5.
步驟6： 1-(( S)-2-(3-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙氧基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)吡咯-2-甲醯胺的製備 將3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((( S)-1-(3-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙氧基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (30 mg, 0.0247mmol)溶於DCM (1 mL)中，加入TFA (0.5 mL)並在15 ℃下攪拌1小時。反應液減壓濃縮，然後加DCM (20 mL)溶解，加入NaHCO 3水溶液調節至pH＞7。分離有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經Pre-HPLC純化得到1-(( S)-2-(3-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙氧基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苯基)吡咯-2-甲醯胺。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=1071.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 7.62 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.47-7.32 (m, 5H), 7.28 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.03-7.00 (m, 1H), 4.65-4.31 (m, 8H),  3.89-3.44 (m, 10H), 3.22-2.99 (m, 3H), 2.56-2.00 (m, 11H), 1.88-1.74 (m, 8H), 1.35-1.27 (m, 3H), 1.00 (s, 9H), 0.88 ( J= 7.6 Hz, 3H).
實施例3： 1-(5-(4-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 2-(哌啶-4-基)乙醛的製備 在0 ℃向4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (400 mg, 1.76 mmol)的DCM (4.0 mL)溶液中加入TFA (2.0 mL)，並在室溫下攪拌1小時。反應液減壓濃縮，得到粗產物2-(哌啶-4-基)乙醛，無需純化直接用於下一步。
步驟2： 2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙醛的製備 向 4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (477 mg, 1.10 mmol)和 DIEA (568 mg, 4.40 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入2-(哌啶-4-基)乙醛 (180 mg, 1.41 mmol)。將混合物在室溫攪拌1小時並通過反相矽膠柱層析 (C18, ACN:水 = 0~100%)純化，得到2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 378.1.
步驟3： 3-(2-((1-((4-(2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (62 mg, 0.068 mmol)和2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙醛 (51 mg, 0.14 mmol)溶於DCM/MeOH/AcOH (0.3mL/0.2mL/0.1mL)，室溫下攪拌30分鐘。加入NaBH(OAc) 3(19 mg, 0.22 mmol)，並在室溫下攪拌2小時。加入NaHCO 3水溶液並用DCM (20 mL x 2)萃取。合併有機相用鹽水洗滌，乾燥並濃縮。粗品經矽膠柱 (二氯甲烷:甲醇 = 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-(2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 637.2.
步驟4： 1-(5-(4-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (54 mg, 0.042 mmol)溶於DMF (2 mL)中，加入氟化銫 (32 mg, 0.21 mmol)。室溫下反應30分鐘。加入水 (10 mL)並用EtOAc (20 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，乾燥並濃縮。將殘餘物溶解在1,4-二氧六環 (2 mL)中，並加入HCl/二氧六環溶液 (6 N, 1 mL)。將混合物在室溫下攪拌0.5小時並減壓濃縮。所得粗產物經Pre-HPLC純化得到化合物1-(5-(4-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 973.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.88-7.81 (m, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.39 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.36-7.27 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 4.70-4.47 (m, 4H), 4.41-4.32 (m, 1H), 3.81-3.62 (m, 7H), 3.31 (s, 1H), 3.10-3.00 (m, 1H), 2.96-2.73 (m, 4H), 2.67-2.27 (m, 11H), 1.89-1.76 (m, 4H), 1.67-1.54 (m, 2H), 1.49-1.42 (m, 2H), 1.35-1.11 (m, 3H), 0.76-0.66 (m, 2H), 0.55-0.43 (m, 2H).
實施例4： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 1-(2-氯-5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(哌啶-4-基)丙烷-1-醇 (500 mg, 3.49 mmol)的DMSO (5 mL)溶液中加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (1.6 g, 3.66 mmol)和DIEA (1.35 g, 10.47 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，並經Pre-HPLC純化 (乙腈/水 = 0~100%)得到1-(2-氯-5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 394.0.
步驟2： 3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛的製備 向1-(2-氯-5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (350 mg, 0.89 mmol)的DCM (10 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (452 mg, 1.07 mmol)，反應一小時，將反應也過濾，濾液減壓濃縮，所得粗產物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 200:1~20:1)純化得到3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 392.0.
步驟3： 3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的DCM/MeOH (3 mL/3 mL)的溶液中，加入乙酸 (0.1 mL)和3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛 (65 mg, 0.16 mmol)，在室溫下攪拌0.5小時。混合物在室溫下加入NaBH 3CN (19 mg, 0.22 mmol)並攪拌0.5小時。將混合物濃縮並經矽膠柱 (MeOH:DCM = 200:1~ 20:1)純化得到3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 644.6.
步驟4： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-((3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)- 基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.1 mmol)的DMF (3 mL) 溶液中加入氟化銫 (80 mg, 0.5 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。用EA和水萃取，濃縮有機相，殘餘物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL)，反應0.5小時，然後減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 987.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.1, 5.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.40 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.34-7.27 (m, 2H), 7.20 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.69-4.34 (m, 6H), 3.81-3.64 (m, 7H), 3.36 (s, 1H), 3.12-3.00 (m, 1H), 2.90 -2.77 (m, 3H), 2.66-2.35 (m, 9H), 2.32-2.26 (m, 2H), 1.90-1.76 (m, 5H), 1.57-1.47 (m, 3H), 1.30-1.12 (m, 5H), 0.71 (t, J= 5.2 Hz, 2H), 0.49 (t, J= 5.2 Hz, 2H).
實施例5： 1-(5-(4-(4-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丁基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(哌啶-4-基)丁烷-1-醇的製備 4-(4-羥基丁基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 ( 500 mg, 1.94 mmol )溶於鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1.5 mL)的溶液中，於30 ℃下攪拌16小時。反應完成後，減壓濃縮混合物4-(哌啶-4-基)丁烷-1-醇。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟2： 1-(2-氯-5-(4-(4-羥基丁基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-(哌啶-4-基)丁烷-1-醇 (257 mg, 1.63 mmol)的二甲基亞碸 (3 mL)溶液中加入DIEA (1.3 mL)和4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (746 mg, 1.72 mmol)。將混合物在30 °C下攪拌16小時。反應完成後，反應液用水 (10 mL)稀釋，乙酸乙酯 (100 mL × 3)萃取。有機相用鹽水 (50 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱 (DCM:MeOH(NH 3) = 20:1)純化得到1-(2-氯-5-(4-(4-羥基丁基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=408.1.
步驟3： 4-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)正丁醛的製備 向1-(2-氯-5-(4-(4-羥基丁基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮 (245 mg, 0.60 mmol)的二氯甲烷 (5 mL)溶液中加入Dess Martin試劑 (305 mg, 0.72 mmol)。將混合物在30 °C下攪拌1小時。反應完成後，反應液用水 (10 mL)稀釋，乙酸乙酯 (20 mL × 3)萃取，有機相用鹽水 (20 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得粗品4-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)正丁醛。粗產物用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 406.1 .
步驟4： 3-(2-((1-((4-(4-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丁基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的1,2-二氯乙烷 (0.5 mL)和甲醇 (5 mL)的混合液中加入乙酸 (0.01 mL)和4-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)正丁醛 (134 mg, 0.33 mmol)。將混合物在30 °C下攪拌1小時，然後加入NaBH 3CN (21 mg, 0.33 mmol)。反應完畢，加入H 2O (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL × 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH=20:1)得到3-(2-((1-((4-(4-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丁基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 651.3
步驟5： 1-(5-(4-(4-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丁基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(4-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丁基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (110 mg, 0.08 mmol)溶於DMF (1mL) 中，加入CsF (60 mg, 0.4 mmol)，於室溫下反應2小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機層用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，然後用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(4-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丁基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1001.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.2, 4.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.40 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.20 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.71-4.30 (m, 6H), 3.82-3.62 (m, 7H), 3.31 (s, 1H), 3.12-3.03 (m, 1H), 2.91-2.78 (m, 3H), 2.62-2.24 (m, 11H), 1.91-1.74 (m, 5H), 1.66-1.43 (m, 4H), 1.32-1.09 (m, 6H), 0.71 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 0.49 (t, J= 6.0 Hz, 2H).
實施例6： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.1 mmol)的DCM/甲醇 (3 mL/3 mL)溶液中加入HOAc (0.1 mL)和3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (64 mg, 0.15 mmol)，並在室溫下攪拌0.5小時。混合物在0-5 ℃加入NaBH 3CN (13 mg, 0.20 mmol) 並攪拌0.5小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 664.2.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (120 mg, 0.09 mmol)的DMF (3.0 mL)的溶液中加入CsF (75 mg, 0.49 mmol)，室溫下反應30分鐘。加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濾液濃縮得中間體粗品。將粗品溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7，然後用EtOAc/i-PrOH (v/v = 5/1, 10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，濃縮。粗品將Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1027.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.2, 5.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.41 (dd, J= 8.2, 2.0 Hz, 1H), 7.36-7.28 (m, 2H), 7.20 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.85-4.33 (m, 5H), 3.82-3.64 (m, 8H), 3.45-3.34 (m, 3H), 2.88-2.82 (m, 2H), 2.57-2.36 (m, 8H), 2.19-2.11 (m, 2H), 1.91-1.73 (m, 6H), 1.61-1.29 (m, 8H), 1.21-1.04 (m, 4H), 0.75-0.66 (m, 2H), 0.54-0.45 (m, 2H).
實施例7： 1-(5-(9-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙烷-1-醇的製備 將9-(3-羥基丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (360 mg, 1.16 mmol)溶於DCM (4 mL)中，然後加入TFA (2 mL)。將混合物在室溫攪拌1小時並濃縮，得到3-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙烷-1-醇。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟2： 1-(2-氯-5-(9-(3-羥基丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙烷-1-醇 (240 mg, 1.14 mmol) 的DMF (5 mL)溶液中加入DIEA (736 mg, 5.70 mmol)和4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (496 mg, 1.14 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應也中加入水，然後用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM: MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化得到1-(2-氯-5-(9-(3-羥基丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=462.2.
步驟3： 3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙醛的製備 向1-(2-氯-5-(9-(3-羥基丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (200 mg, 0.43 mmol)的DCM (5 mL)的溶液中加入TPAP (101 mg, 0.87 mmol)和NMO (30 mg, 0.09 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應結束後，反應液中加入水，然後用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 460.2.
步驟4： 3-(2-((1-((4-(3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol) 的乙醇 (2 mL)溶液中加入乙酸 (0.1 mL) 和 3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙醛 (76 mg, 0.17 mmol)，並在室溫下攪拌15分鐘。混合物在0-5 ℃加入NaBH 3CN (21 mg, 0.33 mmol)並攪拌0.5小時。將混合物濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到3-(2-((1-((4-(3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 678.7.
步驟5： 1-(5-(9-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.07 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (56 mg, 0.37 mmol)，室溫下反應2小時。反應液中加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濾液濃縮得粗品。將所得粗品溶於1,4-二氧六環 (2.0 mL)，然後加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7，再用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1055.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.51 (s, 1H), 10.23 (s, 1H), 9.02 (s, 1H),7.99 – 7.95 (m, 1H), 7.63 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.54 – 7.35 (m, 4H), 7.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 10.4 Hz, 1H), 4.34 – 4.18 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.77 – 3.71 (m, 1H), 3.62 – 3.48 (m, 7H), 3.18 – 3.27 (m, 2H), 2.76 – 2.69 (m, 2H), 2.43 – 2.11 (m, 13H), 1.73 – 1.60 (m, 5H), 1.48 – 0.97 (m, 16H), 0.66 – 0.56 (m, 2H), 0.43 – 0.36 (m, 2H).
實施例8： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 1-(5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(哌啶-4-基)丙烷-1-醇 (300 mg, 2.09 mmol)在DMSO (3 mL)溶液中加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲酸五氟苯酯 (0.95 g, 2.20 mmol)和DIEA (0.81 g, 6.27 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時。反應結束後，反應液中加水，然後用乙酸乙酯萃取。有機相經飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱純化得到1-(5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 390.1.
步驟2： 3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛的製備 向1-(5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (270 mg, 0.69 mmol)的DCM (5 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (353 mg, 0.83 mmol)，然後反應1小時。將將反應混合物過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (MeOH:DCM = 0~1:4)純化得到3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=388.1.
步驟3： 3-(2-((1-((4-(3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的DCM/MeOH (3 mL/3 mL)溶液中加入HOAc (0.1 mL)和3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛 (51 mg, 0.13 mmol)，在室溫下攪拌0.5小時。混合物在室溫下加入NaBH 3CN (14 mg, 0.22 mmol)並攪拌0.5小時。將混合物濃縮並通過柱色譜純化，通過柱色譜純化得到3-(2-((1-((4-(3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 642.5.
步驟4： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.07 mmol)在DMF (3 mL)溶液中加入氟化銫 (52 mg, 0.34 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液中加入EA和水，分離有機相，乾燥並減壓濃縮。所得混合物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL))，反應0.5小時。通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 983.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.33 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.01-7.92 (m, 1H), 7.52-7.41 (m, 1H), 7.39-7.29 (m, 3H), 7.19-7.10 (m, 2H), 4.48 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 4.31-4.23 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.66-3.50 (m, 7H), 3.01-2.59 (m, 6H), 2.44-2.03 (m, 12H), 1.72-1.60 (m, 4H), 1.51-1.36 (m, 3H), 1.29-1.14 (m, 4H), 1.11-0.98 (m, 2H), 0.68-0.58 (m, 2H), 0.45-0.35 (m, 2H).
實施例9： 1-(5-(4-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羧酸(9 H-芴-9-基)甲酯的製備 將3-(哌啶-4-基)丙-1-醇 (2.5 mg, 17.48 mmol)溶於1,4-二氧六環/水 (10 mL/10 mL)溶液中，然後加入碳酸氫鈉 (2.93 g, 34.88 mmol)和9-芴甲基- N-琥珀醯亞胺碳酸酯 (6.50 g, 19.29 mmol)。將混合物在室溫下攪拌16小時。用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層次純化得到4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羧酸(9 H-芴-9-基)甲酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 366.0.
步驟2： 4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸(9 H-芴-9-基)甲酯的製備 向 4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羧酸(9 H-芴-9-基)甲酯 (500 mg, 1.37 mmol)在DCM (10 mL)的溶液中加入Dess-Martin試劑 (696 mg, 1.64 mmol)反應1小時。將混合物過濾，濃縮並矽膠柱層析純化 (PE:EA = 10:1 ~ 3:1)得到4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸(9 H-芴-9-基)甲酯。 1H NMR (400 MHz,CDCl 3) δ 9.84(s, 1H), 7.81 (d, J= 10.0 Hz, 2H), 7.62 (d, J= 8.8 Hz, 2H), 7.49 - 7.41 (m, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 4.54 - 4.89 (m, 2H), 4.33 - 4.05 (m, 3H), 2.87 - 2.70 (m, 2H), 2.58 - 2.48 (m, 2H), 1.82 - 1.65 (m, 4H), 1.51 - 1.39 (m, 1H), 1.20-1.01 (m, 2H). LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 386.0.
步驟3： 3-(2-((( S)-1-苄基吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (5.00 g, 11.67 mmol)和 ( S)-(1-苄基吡咯烷-2-基)甲醇 (3.35 g, 17.51 mmol)溶於THF (50 mL)中，加入Cs 2CO 3(11.44 g, 35.01 mmol)。將反應液加熱至85 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (50 mL)，乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，合併有機相，並用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗產品經矽膠柱層析 (PE: EA = 5:2)純化得到3-(2-((( S)-1-苄基吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 583.2.
步驟4： 3-(2-((( S)-1-(3-(1-(((9 H-芴-9-基)甲氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-苄基吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (2.0 g, 3.4 mmol)溶DCM (20 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸脂 (1.46 g, 1.02 mmol)和DIEA (1.32 g, 1.02 mmol)。混合物反應也在室溫反應30分鐘，減壓濃縮，所得濃縮物加入MeOH (20 mL)，加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後將混合物濃縮至三分之一體積，加入4-(3-氧代丙基)哌啶-1-羧酸(9 H-芴-9-基)甲酯 (2.12 g, 5.8 mmol)並再室溫攪拌2分鐘，0-5 ℃下加入NaBH(OAc) 3(1.84 g, 8.7 mmol)，然後反應液升至室溫反應30分鐘，反應液中加入碳酸鈉水溶液調節至pH＞7，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，有機相用飽和氯化鈉溶於洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化得到3-(2-((( S)-1-(3-(1-(((9 H-芴-9-基)甲氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 840.4.
步驟5： 3-(7-氯-8-氟-2-((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-(3-(1-(((9 H-芴-9-基)甲氧基)羰基)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 1.19 mmol)溶於二氯甲烷 (2 mL)和甲醇 (10 mL)中，加入哌啶 (2 mL)。將反應混合物在室溫下攪拌過夜。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化得到3-(7-氯-8-氟-2-((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 618.3.
步驟6： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (350 mg, 0.57 mmol)的1,4-二氧六環/H 2O (4.0 mL/0.8 mL)的溶液中加入 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔)三異丙基矽烷，磷酸鉀 (360 mg, 1.7 mmol)和cataXium A Pd G3 (41 mg, 0.057 mmol)，N 2保護下100 ℃下反應過夜。將反應混合物過濾並濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~20:1)純化得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 484.7.
步驟7： 3-(2-((( S)-1-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((( S)-1-(3-(哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.16 mmol)的DMSO (3 mL)溶液中加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (74 mg, 0.17 mmol)和DIEA (60 mg, 0.47 mmol)，然後反應液在室溫下反應2小時。反應液中加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，有機層用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化得到3-(2-((( S)-1-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-yl)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 609.7.
步驟8： 1-(5-(4-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 室溫下，向 3-(2-((( S)-1-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-yl)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.11 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入CsF (90 mg, 0.6 mmol)並攪拌30分鐘。用EA和水萃取混合物，濃縮有機相。所得混合物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL)並攪拌0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 918.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.11 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.61 (dd, J= 8.3, 2.5 Hz, 1H), 7.53 - 7.46 (m, 1H), 7.39 - 7.28 (m, 3H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 4.56 - 4.41 (m, 2H), 4.31 - 4.24 (m, 2H), 4.10 - 3.96 (m, 3H), 3.81 - 3.73 (m, 3H), 3.56 - 3.47 (m, 1H), 3.16 - 3.11 (m, 1H), 2.89 - 2.81 (m, 2H), 2.44 - 2.34 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 6H), 1.86 - 1.78 (m, 2H), 1.65 - 1.55 (m, 2H), 1.37 - 1.27 (m, 12H), 1.16 - 1.03 (m, 2H).
實施例10： 1-(5-(4-((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環己烷基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-(吡啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 0 ℃下，向4-(2-羥基乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (2 g, 8.72 mmol)的THF (10 mL)溶液中加入NaH (1.75 g, 43.6 mmol, 60%)並室溫攪拌0.5小時，然後加入4-(溴甲基)吡啶 (3.4 g, 13.08 mmol)。將反應液室溫下攪拌12小時。反應液中加入氯化銨水溶液淬滅並用乙酸乙酯萃取，有機相乾燥，濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化得到4-(2-(吡啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 321.2.
步驟2： 4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(2-(吡啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (2.4 g, 7.49 mmol)的 i-PrOH/H 2O (20 mL/ 20 mL)溶液中加入Pd/C (500 mg)，在75 ℃下氫氣氛圍下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品經矽膠層析柱 (MeOH:DCM = 0~1:4)純化得到4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 4.05 (s, 1H), 3.44 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.23 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.11 - 3.04 (m, 2H), 2.74 - 2.55 (m, 4H), 1.93 (s, 2H), 1.75 - 1.62 (m, 5H), 1.59 - 1.42 (m, 12H), 1.19 - 1.04 (m, 4H).
步驟3： 4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.61 mmol)的DMSO (5 mL)溶液中加入 4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (0.28 g, 0.64 mmol)和DIEA (0.24 g, 1.84 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時。粗品經Pre-HPLC (ACN/H 2O = 0%~100%)純化得到4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 599.2.
步驟4： 1-(2-氯-5-(4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (120 mg, 0.21 mmol)的DCM (4 mL)溶液中加入TFA (2 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時，反應液直接減壓濃縮得到1-(2-氯-5-(4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。所得粗品直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 477.2.
步驟5： 3-(2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.095 mmol)的THF/MeOH (3 mL/3 mL)溶液中，加入1-(2-氯-5-(4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (54 mg, 0.11 mmol)和鈦酸四異丙酯 (405 mg, 1.43 mmol)，在70 ℃下攪拌2小時，然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(61 mg, 0.28 mmol)，並繼續攪拌2小時。將反應液直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=100:1~20:1)純化得到 3-(2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 652.0.
步驟6： 1-(5-(4-((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環己烷基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.054 mmol)的DMF (2 mL)溶液中加入氟化銫 (40 mg, 0.27 mmol)，然後混合液在室溫下攪拌30分鐘。向混合液中加入水，然後用乙酸乙酯萃取，濃縮有機相。所得混合物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 ml)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1ml)，反應混合物再繼續反應0.5小時。粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環己烷基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI) m/z: [M+H] += 1002.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.88 - 7.81 (m, 1H), 7.62 (d, J =8.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.43 - 7.37 (m, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.20 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.67 - 4.31 (m, 6H), 3.81 - 3.63 (m, 7H), 3.44 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.34 (s, 1H), 3.30 - 3.23 (m, 3H), 3.14 - 3.02 (m, 3H), 2.90 - 2.79 (m, 3H), 2.52 - 2.36 (m, 2H), 2.00 - 1.91 (m, 2H), 1.88 - 1.77 (m, 5H), 1.66 (d, J= 11.7 Hz, 2H), 1.49 - 1.42 (m, 2H), 1.34 - 1.26 (m, 5H), 0.75 - 0.66 (m, 2H), 0.56 - 0.44 (m, 2H).
實施例11： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-氰基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環己烷基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氟苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 1-(2-氟-5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(哌啶-4-基)丙-1-醇 (260 mg, 1.81 mmol)的DMSO (5 mL)溶液中加入 4-氟-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (797 mg, 1.91 mmol)和DIEA (702 mg, 5.43 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，並通過反相柱色譜法純化得到1-(2-氟-5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 378.1.
步驟2： 3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛的製備 向1-(2-氟-5-(4-(3-羥基丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (250 mg, 0.66 mmol)的DCM (5 mL)溶液中加入DMP (338 mg, 0.79 mmol)並反應1小時。將混合物過濾，濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 376.1.
步驟3： 3-(2-((1-((4-(3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環己烷基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的DCM/MeOH (3 mL/3 mL)溶液中加入HOAc (0.1 ml)和3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)哌啶-4-基)丙醛 (50 mg, 0.13 mmol)，混合物先在室溫下攪拌0.5小時，然後將混合物溫度降至0 ℃，加入NaBH 3CN (14 mg, 0.22 mmol)並攪拌0.5小時。將反應液直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH =20:1)純化得到3-(2-((1-((4-(3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環己烷基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 636.6.
步驟4： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-氰基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環己烷基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氟苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(3-(1-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環己烷基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (110 mg, 0.086 mmol)溶於DMF (3 mL)中，加入氟化銫 (66 mg，0.43 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液中加入水 (10 mL)，乙酸乙酯萃取，濃縮有機相。將濃縮物溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL)，反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-氰基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環己烷基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氟苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 971.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.52 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.08 - 7.86 (m, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.41 - 7.34 (m, 3H), 7.16 (d, J =2.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.32 - 4.22 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.75 (t, J =2.4 Hz, 2H), 3.66 - 3.42 (m, 5H), 3.11 - 2.60 (m, 6H), 2.46 - 2.10 (m, 12H), 1.68 - 1.62 (m, 4H), 1.49 - 1.36 (m, 3H), 1.28 - 1.13 (m, 4H), 1.12 - 0.97 (m, 2H), 0.68 - 0.55 (m, 2H), 0.43 - 0.35 (m, 2H).
實施例12： 1-(5-(9-((( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： ( S)-9-((2-(羥基甲基)吡咯-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向9-醛基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (5.56 g, 19.77 mmol)和 ( S)-吡咯-2-基甲醇 (3.00 g, 29.66 mmol)的1,2-二氯乙烷 (150 mL)溶液中加入乙酸 (0.5 mL)。將混合物在30 °C下攪拌半小時。0 oC下加入NaBH(OAc) 3(8.42 g, 39.54 mmol)，室溫反應2小時。反應完畢，反應液中加入H 2O (100 mL)，然後用乙酸乙酯 (100 mL x 3) 萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH=20:1)純化得到 ( S)-9-((2-(羥基甲基)吡咯-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 367.2.
步驟2： ( S)-(1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇的製備 向 ( S)-9-((2-(羥基甲基)吡咯-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 2.73 mmol)的1,4-二氧六環 (10 mL)的溶液中加入HCl/1,4-二氧六環溶液 (6 N, 10 mL)，室溫反應2小時。反應液濃縮得到 ( S)-(1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇，所得粗品直接用於下一步反應。
步驟3： ( S)-(1-((3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇的製備 向 ( S)-(1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇鹽酸鹽 (1.60 g, 10.73 mmol)的1,2-二氯乙烷/甲醇 (28 mL/14 mL) 的混合液中加入三乙胺 (0.67 g, 6.60 mmol)並攪拌3分鐘。加入苯甲醛 (1.05 g, 9.90 mmol)和乙酸 (3 mL)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。0 ℃下加入NaBH(OAc) 3(0.52 g，8.25 mmol)，室溫反應16小時。反應完畢，加入碳酸鈉溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。將合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到 ( S)-(1-((3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.33 - 7.29 (m, 4H), 7.20 - 7.25 (m, 1H), 3.60 (dd, J= 10.6, 3.4 Hz, 1H), 3.50 (s, 2H), 3.35 (d, J= 10.5 Hz, 1H), 3.19 - 3.09 (m, 1H), 2.58 - 2.47 (m, 1H), 2.45 - 2.33 (m, 5H), 2.22 - 2.12(m, 2H), 1.86 - 1.60 (m, 7H), 1.55 - 1.36 (m, 6H), 1.12 - 0.96 (m, 4H).
步驟4： 3-(2-((( S)-1-((3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (0.55 g, 1.28 mmol)和 ( S)-(1-((3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲醇 (0.75 g, 2.10 mmol)溶於THF (10 mL)中，加入Cs 2CO 3(1.37 g, 4.20 mmol)。將反應液加熱至85 °C反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (50 mL)，乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:2)純化得到3-(2-((( S)-1-((3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=748.3 .
步驟5： 3-(2-((( S)-1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-((3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.134 mmol)溶於DCM (2 mL)中，然後加入1-氯乙基氯甲酸脂 (38 mg, 0.267 mmol)。混合物在室溫反應1小時，再加入MeOH (2 mL)，然後繼續反應1小時。反應液中加入NH 3/MeOH並濃縮，經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化得到3-(2-((( S)-1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 658.3.
步驟6： 3-(2-((( S)-1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((( S)-1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (60 mg，0.091 mmol)的二氧六環/H 2O (1.0 mL/0.2 mL)的溶液中加入 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (70 mg, 0.14 mmol)，碳酸銫 (77 mg, 0.23 mmol)和cataXium A Pd-G3 (7 mg, 0.0091 mmol)，在N 2保護下75 ℃下反應16小時。將混合物過濾濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化得到 3-(2-((( S)-1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 504.7.
步驟7： 3-(2-((( S)-1-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((( S)-1-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.050 mmol)的DMSO (2 mL)溶液中，加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (28 mg, 0.017 mmol)和DIEA (19 mg, 0.015 mmol)，在室溫下反應1小時。反應液中加入水 (5 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品矽膠柱層析 (DCM:MeOH =100:1 ~20:1)純化得到3-(2-((( S)-1-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 629.7.
步驟8： 1-(5-(9-((( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((( S)-1-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.040 mmol)在DMF (1.5 mL)的溶液中加入氟化銫 (30 mg, 0.20 mmol)，在室溫下反應30分鐘。反應液中加入水，然後用乙酸乙酯萃取，有機相減壓濃縮。將濃縮物溶於1,4-二氧六環 (2 mL)中，再加入HCl/1,4-二氧六環溶液 (6 N, 1 mL)，反應0.5小時，然後直接減壓濃縮，所得粗品Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=958.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.05 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.91 - 7.82 (m, 1H), 7.76 - 7.47(m, 2H), 7.45 - 7.27 (m, 3H), 7.26 - 7.13 (m, 1H), 4.77-4.42 (m, 5H), 3.86 - 3.55 (m, 8H), 3.51 - 3.38 (m, 3H), 3.18 - 2.55 (m, 6H), 2.21-1.40 (m, 16H), 1.30 - 1.05 (s, 5H).
實施例13： 1-(5-(4-(((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-((吡啶-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 0 ℃下，向 4-(羥基甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (1 g, 4.65 mmol)的THF (10 mL)溶液中加入NaH (1.1 g, 27.9 mmol, 60%)，並室溫攪拌0.5小時，然後再加入4-(溴甲基)吡啶 (2.4 g, 9.3 mmol)。將反應液室溫下攪拌4小時。反應液中加入氯化銨水溶液進行淬滅，用乙酸乙酯萃取，有機相經乾燥、減壓濃縮，所得粗品矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到4-((吡啶-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 307.1.
步驟2： 4-((哌啶基-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-((吡啶-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (850 mg, 2.77 mmol)的 i-PrOH/H 2O (5 mL/5 mL)的混合溶液中加入Pd/C (298 mg)，在75 ℃下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化得到4-((哌啶基-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=313.3.
步驟3： 4-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-((哌啶基-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.32 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (139 mg, 0.32 mmol)和DIEA (124 g, 0.94 mmol)。然後混合物在室溫下攪拌3小。反應液直接經Pre-HPLC純化得到4-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-100+H] += 463.1.
步驟4： 1-(2-氯-5-(4-((哌啶基-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.28 mmol) 的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時。反應液直接減壓濃縮得到1-(2-氯-5-(4-((哌啶基-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 463.2.
步驟5： 3-(2-((1-((4-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (72 mg, 0.086 mmol)的THF (0.8 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-((哌啶基-4-基甲氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (80 mg, 0.17 mmol)和鈦酸四異丙酯 (366 mg, 1.29 mmol)，在70 ℃下攪拌2小時。然後將上述混合物降至室溫，先加入MeOH (0.3 mL)，再分批加入NaBH(OAc) 3(54 mg, 0.26 mmol)，所得反應混合液繼續攪拌反應4小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化得到3-(2-((1-((4-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 644.8.
步驟6： 1-(5-(4-(((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg，0.054 mmol)的DMF (2 mL)溶液中加入氟化銫 (40 mg, 0.27 mmol)，然後在室溫下攪拌30分鐘。向上述混合物中加入水，然後用乙酸乙酯萃取，有機相減壓濃縮。將所得混合物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，並攪拌反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶基-4-基)甲氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 988.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.39 - 7.34 (m, 2H), 7.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.54 - 4.36 (m, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.79-3.69 (m, 1H), 3.67 - 3.45 (m, 6H), 3.22 - 3.10 (m, 5H), 3.09 - 2.86 (m, 4H), 2.79 - 2.70 (m, 3H), 2.34 - 2.21 (m, 3H), 1.84 - 1.76 (m, 3H), 1.67 - 1.55 (m, 6H), 1.48-1.41 (m, 1H), 1.16-1.04 (m, 4H), 0.66 - 0.60 (m, 2H), 0.42 - 0.35 (m, 2H).
實施例14： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 粗品)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，然後加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1023.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.59 - 7.42 (m, 1H), 7.40 - 7.29 (m, 3H), 7.19-7.09 (m, 2H), 4.48 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 4.34 - 4.18 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.71 - 3.35 (m, 10H), 2.68 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 2.45 - 2.12 (m, 10H), 2.08 - 1.99 (m, 2H), 1.74 - 1.58 (m, 6H), 1.56 - 1.15 (m, 8H), 1.13 - 0.94 (m, 4H), 0.66 - 0.55 (m, 2H), 0.45 - 0.34 (m, 2H).
實施例15： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (40 mg, 0.034 mmol)的甲醇 (2 mL)溶液中加入Pd/C (10 mg)，氫氣球保護下室溫反應2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 586.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (38 mg, 粗品)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1027.5. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.04 (s, 1H), 7.67 (dd, J= 9.0, 5.8 Hz, 1H), 7.43 (dd, J= 8.5, 2.0 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.29 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.27 - 7.20 (m, 1H), 7.18 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.05 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.61 (t, J= 11.2 Hz, 2H), 4.52 - 4.33 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.76-3.40 (m, 10H), 2.80 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.56 - 2.10 (m, 12H), 1.73 - 1.72 (m, 6H), 1.61 - 1.27 (m, 10H), 1.19 - 1.09 (m, 3H), 0.80 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 0.74-0.64 (m, 2H), 0.55-0.43 (m, 2H).
實施例16： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg，0.68 mmol)的二氯甲烷 (5 mL)的溶液中加入 N-甲嗎啉啉氧化物(180 mg，1.54 mmol)和四正丙基過釕酸銨(20 mg，0.057 mmol),室溫反應2小時。反應液濃縮經矽膠柱層析純化 (DCM/MeOH = 100/1 ~ 20:1)得到3-(8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 588.2.
步驟2： 3-(2-((1-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (170 mg, 0.29 mmol)和哌𠯤-1-羧酸苄基酯 (191 mg，0.87mmol)的二氯甲烷/乙酸 (2 mL/0.1 mL)混合溶液中加入鈦酸四異丙酯 (191 mg, 0.87mmol)。將混合物在30 °C下攪拌2小時，然後反應溫度降至0 ℃，再加入NaBH(OAc) 3(184 mg, 0.87 mmol)，再室溫繼續反應16小時。反應完畢，反應液中加入H 2O (10 mL)，用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(2-((1-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 792.3.
步驟3： 3-(8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((1-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (85 mg, 0.11 mmol)溶於異丙醇 (3 mL)中，加入Pd/C，氫氣球保護下反應16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗產品3-(8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=658.3 .
步驟4： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.12 mmol)的DCM /MeOH (1.0 mL/0.5 mL)溶液中加入HOAc (0.05 mL)和3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (62 mg, 0.14 mmol)，在室溫下攪拌0.5小時後，再向混合物中加入NaBH 3CN (76 mg, 0.36 mmol)並繼續攪拌0.5小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~10:1)純化得到 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 1073.5.
步驟5： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (60 mg, 0.056 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，然後加入HCl/1,4-二氧六環溶液 (6 N, 1 mL)，反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟-7-(5-甲基-1 H-吲唑-4-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 487.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 13.09 (s, 1H), 10.50 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 7.69 - 7.50 (m, 4H), 7.41 - 7.30 (m, 2H), 4.56 - 4.34 (m, 2H), 4.30 (s, 2H), 3.82 - 3.68 (m, 1H), 3.67 - 3.43 (m, 7H), 3.30 - 3.15 (m, 3H), 2.78 - 2.69 (m, 2H), 2.44 - 2.10 (m, 13H), 2.05 - 1.97 (m, 2H), 1.71 - 1.57 (m, 6H), 1.50 - 1.24 (m, 7H), 1.11 - 1.90 (m, 4H), 0.69 - 0.56 (m, 2H), 0.44 - 0.33 (m, 2H).
實施例17： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)-3-甲基二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛的製備 向3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (125 mg, 粗品)的DMF (3 mL)溶液中加入DIEA (411 mg, 3.18 mmol)和4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (180 mg, 0.40 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到3-(4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 446.2.
步驟2： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的EtOH (2.0 mL)溶液中加入HOAc (0.1 mL)和 3-(4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (76 mg, 0.17 mmol)，並在室溫下攪拌 15 分鐘，然後混合物溫度降至0-5 ℃，加入NaBH 3CN (21 mg, 0.33 mmol) 並攪拌0.5小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 671.4.
步驟3： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)-3-甲基二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(3-甲基-2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.067 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (51 mg, 0.335 mmol)，室溫下反應1小時。向上述混合物加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液檢驗濃縮得中間體粗品，將其溶於1,4-二氧六環 (2.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液中加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，然後用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。所得粗品通經pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)-3-甲基二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 521.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.15 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97(dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.49 - 7.35 (m, 3H) , 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H),  4.48 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.33 - 4.20 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.78 - 3.45  (m, 9H), 3.29 - 3.21  (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.92 – 2.80 (m, 2H), 2.45 - 2.17  (m, 9H), 2.10 - 1.95 (m, 1H), 1.73 - 1.58 (s, 6H), 1.55 - 1.37 (m, 5H), 1.35 - 1.19  (m, 3H), 1.11 - 0.92  (m, 4H), 0.71 - 0.54 (s, 2H), 0.45 - 0.31 (s, 2H).
實施例18： 1-(5-(9-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛的製備 將9-(2-氧代乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (250 mg, 0.85 mmol)溶於DCM (2 mL)中，然後加入TFA (1 mL)。將混合物在室溫攪拌1小時。反應液直接減壓濃縮得到2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 196.2.
步驟2： 2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛的製備 向2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛 (150 mg, 0.77 mmol)的DMF (5 mL)溶液中加入DIEA (496 mg, 3.84 mmol)和4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (334 mg, 0.77 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 446.2.
步驟3： 3-(2-((1-((4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的EtOH (2.0 mL)溶液中加入HOAc (0.1 mL)和2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛 (73 mg, 0.17 mmol)，並在室溫下攪拌15分鐘。然後將上述混合物降至0-5 ℃，加入NaBH 3CN (21 mg, 0.33 mmol)並攪拌0.5小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~5:1)純化得到3-(2-((1-((4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 671.3.
步驟4： 1-(5-(9-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.07 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (57 mg, 0.37 mmol)，室溫下反應2小時。向上述混合物中加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮得中間體粗品，將其溶於二氧六環 (2.0 mL)，加入HCl/二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液中加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1041.0. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.51 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.55 - 7.35 (m, 4H), 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.47 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 4.33 - 4.19 (m, 3H),  3.91 (s, 1H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.66 - 3.49 (m, 7H), 3.27 - 3.21 (m, 2H), 2.80 - 2.68 (m, 2H), 2.48 - 2.12 (m, 13H), 1.65 - 1.59 (m, 5H), 1.52 - 0.95 (m, 14H), 0.69 - 0.56 (m, 2H), 0.46 - 0.32 (m, 2H).
實施例19： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.12 mmol)的DCM (0.6 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (69 mg, 0.15 mmol)，AcOH (0.1 mL)和鈦酸四異丙酯 (68 mg, 0.24 mmol)，室溫下攪拌2小時，然後將反應液降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，室溫繼續反應4小時。將反應混合物直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH= 100:1~ 20:1)純化得到3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 559.2.
步驟2： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.045 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 973.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.02 (s, 1H), 7.67 - 7.58 (m, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.41 - 7.32 (m, 2H), 7.28 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 7.01 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 4.66 - 4.44 (m, 4H), 4.37 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 3.83 - 3.52 (m, 7H), 3.11 - 2.99 (m, 1H), 2.90 - 2.75 (m, 3H), 2.59 - 2.19 (m, 12H), 1.91 - 1.73 (m, 5H), 1.55 - 1.47 (m, 2H), 1.33 - 1.09 (m, 6H), 0.90 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 0.75 - 0.66 (d, J= 4.5 Hz, 2H), 0.54 - 0.43 (s, 2H).
實施例20： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.12 mmol)的DCM (0.5 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (75 mg, 0.15 mmol)，AcOH (0.1 mL)和鈦酸四異丙酯 (68 mg, 0.24 mmol)，在室溫下攪拌2小時。反應液降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，然後反應液室溫繼續反應4小時。將反應液直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1153.3.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (55 mg, 0.048 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1009.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.66 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 7.31 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.27 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 7.17 - 7.09 (m, 2H), 6.96 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 4.40 (d, J= 11.8 Hz, 2H), 4.35 - 4.21 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.68 - 3.38 (m, 9H), 2.68 (t, J= 6.5 Hz, 3H), 2.44 - 1.91 (m, 15H), 1.70 - 1.57 (m, 6H), 1.54 - 1.39 (m, 5H), 1.32 - 1.24 (m, 2H), 1.12 - 0.94 (m, 4H), 0.81 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 0.67 - 0.58 (m, 2H), 0.42 - 0.33 (m, 2H).
實施例21： 1-(5-(4-(2-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.31 mmol)和苯甲醛 (39 mg, 0.37 mmol)的1,2-二氯乙烷/甲醇 (0.5 mL/0.5 mL)的混合液中加入乙酸 (0.01 mL)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。0 ℃下加入NaBH 3CN (39 mg, 0.62 mmol)，室溫反應2小時。反應完畢，加入H 2O (10 mL)，用乙酸乙酯 (30mL x 3)萃取。將合併的有機層用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到4-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 417.3.
步驟2： 1-苄基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶的製備 向4-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.24 mmol)的DCM (2 mL)溶液中加入TFA (1 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時，反應液直接減壓濃縮得到1-苄基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶，直接用於下一步反應。
步驟3： 1-(5-(4-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將1-苄基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶 (100 mg, 0.32 mmol)溶於DMSO (2 mL)中，加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (110 mg, 0.34 mmol)和DIEA (93 mg, 0.96 mmol)。將反應液在室溫攪拌2小時。加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和鹽水 (30 mL x 3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾，濾液濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到1-(5-(4-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 567.2.
步驟4： 1-(2-氯-5-(4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將1-(5-(4-(2-((1-苄基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (200 mg, 0.35 mmol)溶於DCM (2 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸脂 (150 mg, 1.05 mmol)和DIEA (90 mg, 0.7 mmol)。混合物在室溫反應30分鐘，減壓濃縮，濃縮物加入MeOH (2 mL)溶解，加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 100:1 ~9:1)純化，得到1-(2-氯-5-(4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 477.3.
步驟5： 3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.095 mmol)的THF/MeOH (1 mL/1 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (270 mg, 0.95 mmol)和1-(2-氯-5-(4-(2-(哌啶-4-基甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (54 mg, 0.11 mmol)，在70 ℃下攪拌2小時。然後混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(61 mg, 0.28 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 651.7.
步驟6： 1-(5-(4-(2-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.054 mmol)在DMF (2 mL)中溶解，邊攪拌邊加入氟化銫 (40 mg, 0.27 mmol)，室溫下攪拌30分鐘。用EA和水萃取，濃縮有機相。將殘餘物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL)，然後繼續反應0.5小時。將反應液直接減壓濃縮，粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(2-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 501.6. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.51 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.34 (m, 2H), 7.16 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 4.54 - 4.33 (m, 2H), 4.31 - 4.22 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 3.67 - 3.58 (m, 2H), 3.57 - 3.47 (m, 4H), 3.39 - 3.32 (m, 2H), 3.14 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 2.95 - 2.88 (m, 2H), 2.77 - 2.66 (m, 3H), 2.34 - 2.22 (m, 2H), 1.80 (t, J = 11.4 Hz, 2H), 1.70 - 1.51 (m, 9H), 1.47 - 1.39 (m, 3H), 1.28 - 1.19 (m, 2H), 1.16 - 1.01 (m, 4H), 0.76 - 0.66 (s, 2H), 0.55 - 0.45 (m, 2H).
實施例22： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
步驟1： 3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲基氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.24 mmol)的DMF (3 mL)中，室溫下加入CsF (181 mg, 1.19 mmol)並在室溫反應30分鐘。反應結束後，加入水並用乙酸乙酯萃取，合併有機相，用飽和食鹽水洗，乾燥，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析 (PE:EA =10:1 ~ 5:2)純化，得到3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 686.3.
步驟2： 3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.217 mmol)的EtOAc (2 mL)溶液中加入Pd/C (150 mg)，在30 ℃下攪拌16小時。過濾，濾液減壓濃縮得到3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。粗品直接用於下一步，無需純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 690.3.
步驟3： 3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.145 mmol)的THF/MeOH (1 mL/1 mL)溶液中，加入1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (80 mg, 0.174 mmol)和鈦酸四異丙酯 (412 mg, 1.45 mmol)，然後在80 ℃下攪拌2小時。上述混合物冷卻至室溫，然後加入NaBH(OAc) 3(97 mg, 0.435 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 9:1)純化，得到3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1135.5.
步驟4： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.088 mmol)的二氧六環 (2.0 mL)的溶液中加入HCl/二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥，減壓濃縮。粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 496.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 9.91 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 7.76 (dd, J= 9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 3H), 7.01 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.49 - 4.22 (m, 5H), 3.80 - 3.70 (s, 1H), 3.66 - 3.47 (m, 6H), 2.80 - 2.62 (m, 4H), 2.43 - 2.07 (m, 15H), 1.67 - 1.55 (m, 5H), 1.48 - 1.33 (m, 3H), 1.28 - 1.14 (m, 3H), 1.11 - 0.98 (m, 2H), 0.72 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 0.66 - 0.58 (m, 2H), 0.45 - 0.33 (m, 2H).
實施例23： 1-(5-(4-(3-(4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2,2-二甲基丙基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮
步驟1： 3-((三級丁基二苯基矽基)氧)-2,2-二甲基丙-1-醇的製備 向2,2-二甲基丙基-1,3-二醇 (5.00 g, 48.0 mmol)的二氯甲烷 (50 mL)溶液中加入咪唑 (9.80 g, 144.0 mmol)，降溫至0 ℃，緩慢滴加三級丁基二苯基氯矽烷 (7.92 g, 28.8 mmol)，混合物在0 ℃下反應1小時。反應結束後，加入水 (100 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (150 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物通過矽膠柱層析 (PE:EA = 6:94)純化，得到3-((三級丁基二苯基矽基)氧)-2,2-二甲基丙-1-醇。 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.72 - 7.61 (m, 4H), 7.47 - 7.32 (m, 6H), 3.48 - 3.34 (m, 4H), 1.09-0.98 (m, 9H), 0.94-0.79 (m, 6H).
步驟2： 3-(2-(3-((三級丁基二苯基矽基)氧)-2,2-二甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (2.0 g, 4.7 mmol)和3-((三級丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二甲基丙醇 (3.22 g, 9.4 mmol)加入到THF (20 mL)中，然後加入碳酸銫 (4.60 g, 10.5 mmol)，混合物在90 ℃下攪拌反應16小時。反應結束後，冷卻到室溫，加入氯化銨飽和溶液 (50 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 3:1)純化，得到3-(2-(3-((三級丁基二苯基矽基)氧)-2,2-二甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 734.3.
步驟3： 3-(7-氯-8-氟-2-(3-羥基-2,2-二甲基丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(3-((三級丁基二苯基矽基)氧)-2,2-二甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.1 g, 1.5 mmol)溶於DMF (15 mL)中，加入氟化銫 (684 mg, 4.5 mmol)。混合物升溫至50 ℃反應6小時。反應結束後，冷卻到室溫，加入水 (50 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到3-(7-氯-8-氟-2-(3-羥基-2,2-二甲基丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 496.2.
步驟4： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(3-羥基-2,2-二甲基丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-(3-羥基-2,2-二甲基丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.806 mmol )和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (496 mg, 0.967 mmol)的1,4-二氧六環/H 2O (5 mL/1 mL)混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (117 mg, 0.161 mmol)和碳酸銫 (788 mg, 2.418 mmol)。混合物在氮氣保護下80 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(3-羥基-2,2-二甲基丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 846.4.
步驟5： 3-(2-(2,2-二甲基-3-氧代丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(3-羥基-2,2-二甲基丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.473 mmol)的DCM (10 mL)溶液降溫至0 ℃，加入Dess-Martin氧化劑 (401 mg, 0.946 mmol)，室溫下反應0.5小時。反應結束後，加入水 (20 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化得到3-(2-(2,2-二甲基-3-氧代丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 844.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.62 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.75 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 1H), 7.34 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.75 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.49 - 4.18 (m, 5H), 3.76 (d, J= 12 Hz, 1H), 3.43 (s, 3H), 3.38-3.32 (m, 1H), 1.93-1.78 (m, 3H), 1.69-1.58 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.12 (d, J= 4.8 Hz, 6H), 0.81 (t, J= 7.6 Hz, 18H), 0.54 - 0.43 (m, 3H).
步驟6： 3-(2-(3-(4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)-2,2-二甲基丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(2,2-二甲基-3-氧代丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.118 mmol)和1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (66 mg, 0.142 mmol)的DCM (2 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (335 mg, 1.18 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(79 mg, 0.354mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (MeOH:DCM = 0~1:4)純化，得到 3-(2-(3-(4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)-2,2-二甲基丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 645.4.
步驟7： 1-(5-(4-(3-(4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2,2-二甲基丙基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(3-(4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)-2,2-二甲基丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (60 mg, 0.047 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (36 mg, 0.235 mmol)，室溫下反應1小時。加入水 (10 mL)稀釋，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (1.0 mL)，然後再加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 0.5 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，然後用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2,2-二甲基丙基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 989.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97(dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.49 - 7.37 (m, 1H), 7.41 - 7.33 (m, 2H) , 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.45 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.33 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 4.19 -  4.05  (m, 2H), 3.90 (s, 1H), 3.79 - 3.71  (m,1H), 3.66 - 3.49 (m, 6H) , 3.06 - 2.96(m, 1H), 2.82 - 2.64  (m, 4H), 2.49 - 2.42  (m, 4H), 2.37 - 2.13  (m, 9H), 1.70 - 1.60 (m, 4H), 1.54 - 1.32  (m, 4H) ,1.28 - 1.14  (m, 3H) , 1.10 - 1.00 (m, 2H), 0.94 (s, 6H).
實施例24： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丁基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： (1-(((三級丁基二苯基矽基)氧)甲基)環丁基)甲醇的製備 向環丁烷-1,1-二甲醇 (5.0 g, 43 mmol)的二氯甲烷 (50 mL)溶液中加入咪唑 (8.78 g, 129 mmol)，上述混合物降溫至0 ℃，緩慢滴加三級丁基二苯基氯矽烷 (7.1 g, 25.8 mmol)，混合物在0 ℃下反應1小時。反應結束後，加入水 (100 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (150 mL x 3)萃取。合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 6:94)純化，得到(1-(((三級丁基二苯基矽基)氧)甲基)環丁基)甲醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 377.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 7.71 - 7.61 (m, 4H), 7.47 - 7.35 (m, 6H), 4.53 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 3.59 (s, 2H), 4.53 (d, J= 5.2 Hz, 2H), 1.82 - 1.69(m, 6H),1.02(s, 9H) .
步驟2： 3-(2-((1-(((三級丁基二苯基矽基)氧)甲基)環丁基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.5 g, 3.5 mmol)和 (1-(((三級丁基二苯基矽基)氧)甲基)環丁基)甲醇 (2.36 g, 6.65 mmol)加入到THF (20 mL)中，然後加入碳酸銫 (3.42 g, 10.5 mmol)，混合物在90 ℃下攪拌反應16小時。反應結束後 冷卻到室溫 加入氯化銨飽和溶液 (50 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 4:1)純化，得到3-(2-((1-(((三級丁基二苯基矽基)氧)甲基)環丁基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 746.3.
步驟3： 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((1-(((三級丁基二苯基矽基)氧)甲基)環丁基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.2 g, 1.6 mmol)溶於DMF (15 mL)中，加入氟化銫 (729 mg, 4.8 mmol)。混合物升溫至50 ℃反應6小時。反應結束後，冷卻到室溫，加入水 (50 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 2:1)純化得到3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 508.2.
步驟4： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (500 mg, 0.98 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (605 mg, 1.18 mmol)的1,4-二氧六環/H 2O (5 mL/1 mL)混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (143 mg, 0.20 mmol)和碳酸銫 (962 mg, 2.95 mmol)。混合物在氮氣保護下80 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 858.4.
步驟5： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯( 500 mg, 0.58 mmol)的DCM (10 mL)溶液降溫至0 ℃，加入Dess-Martin氧化劑 (495 mg, 1.17 mmol)，室溫下反應0.5小時。反應結束後，加入水 (20 mL)淬滅反應，用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 856.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.73 (s, 1H), 9.19 (s, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.75 ( d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.53 (m, 1H), 7.34 ( d, J= 2.8 Hz, 1H), 5.37 (s, 2H), 4.79 - 4.63 (m, 3H), 4.37 - 4.18 (m, 3H), 3.75 (d, J= 12.0 Hz,1H), 3.44 (s, 3H), 3.36 (d, J= 12.4 Hz,1H), 2.40 - 2.25 (m, 2H), 2.10 - 1.98 (m, 3H), 1.99 - 1.78 (m, 4H), 1.65 - 1.58 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 0.81( t, J= 7.6 Hz, 18H), 0.54 - 0.43(m, 3H).
步驟6： 3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丁基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.117 mmol)和1-(2-氯-5-(4-(3-(哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (65 mg, 0.140 mmol)的DCM (2 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (333 mg, 1.17 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(78 mg, 0.351 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到 3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丁基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 651.5.
步驟7： 1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丁基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(3-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)丙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丁基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.077 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (58 mg, 0.385 mmol)，室溫下反應1小時。加入水 (10 mL)稀釋，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (2.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，然後用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(4-(3-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丁基)甲基)哌𠯤-1-基)丙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1001.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.41-7.33 (m, 2H) , 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.53 - 4.35  (m, 4H), 4.31 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.82 - 3.71  (m, 1H), 3.66 - 3.51  (m, 5H), 3.01 (s, 1H), 2.84 - 2.63  (m, 4H), 2.45 - 2.06  (m, 12H), 2.04 - 1.78  (m, 7H), 1.72-1.57 (m, 6H), 1.49 - 1.33  (m, 3H), 1.24 - 1.04 (m, 2H), 1.09 - 0.98 (m, 2H).
實施例25： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丁基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丁基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丁基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.117 mmol)和1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (70 mg, 0.140 mmol)的DCM (2 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (333 mg, 1.17 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(78 mg, 0.351 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 15:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丁基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 669.9.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丁基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丁基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.077 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (58 mg, 0.385 mmol)，室溫下反應1小時。加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (2.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液中加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丁基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 519.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.1, 5.9 Hz, 1H), 7.51-7.42 (m, 1H), 7.41 - 7.27(m, 3H), 7.23 - 7.08 (m, 2H), 4.58 - 4.39 (m, 3H), 4.31 (d, J= 12.1 Hz, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.67 - 3.37 (m, 9H), 2.68 (t, J= 6.4 Hz, 3H), 2.46 - 2.11 (m, 10H), 2.05 - 1.80 (m, 8H), 1.73 - 1.57 (m, 6H), 1.56 - 1.17 (m, 8H), 1.12 - 0.89 (m, 4H).
實施例26： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2,2-二甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2,2-二甲基丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(2,2-二甲基-3-氧代丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.118 mmol)和1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (71 mg, 0.142 mmol)的DCM (2 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (335 mg, 1.18 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(79 mg, 0.354 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (MeOH:DCM=0~1:4)純化，得到3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2,2-二甲基丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 663.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2,2-二甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2,2-二甲基丙基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.038 mmol)的DMF (2.0 mL)溶液中加入CsF (29 mg, 0.19 mmol)，室溫下反應1小時。反應結束後，加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (1.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 0.5 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7，用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2,2-二甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1025.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 3H), 7.19 - 7.12 (m, 2H), 4.46 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 4.34 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 4.20 - 4.14 (m, 2H), 3.91(s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.66 - 3.37 (m, 10H), 2.68 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.48 - 2.36 (m, 5H), 2.33-2.19 (m, 6H), 2.08 - 1.98(m, 2H), 1.72 - 1.60 (m, 6H), 1.54 - 1.38 (m, 5H), 1.34 - 1.22 (m, 3H), 1.11 - 0.98 (m, 3H), 0.94 (s, 6H).
實施例27： 1-(5-(4-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 哌啶-4-甲醛的製備 將4-甲醯哌啶-1-羧酸三級丁酯 (1 g, 4.7 mmol)溶於二氯甲烷 (4 mL)的溶液中，加入三氟乙酸 (2 mL)，於30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，減壓濃縮得到哌啶-4-甲醛。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟2： 1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-甲醛的製備 向哌啶-4-甲醛 (500 mg, 4.4 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (5 mL)溶液中加入DIEA (2.8 mg, 22 mmol)和4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (1.5 g, 3.5 mmol)。將混合物在30 ℃下攪拌16小時。反應完成後，用水 (10 mL)稀釋，乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取。有機相用鹽水 (50 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH (NH 3) = 20:1)，得到1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 364.1.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (151 mg, 0.17 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液中加1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-甲醛 (40 mg, 0.11 mmol)和鈦酸四異丙酯 (1 g)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，降溫至0 ℃後，加入無水甲醇 (1 mL)和NaBH(OAc) 3(98 mg，0.44 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。反應完畢後，加入加入H 2O (10 mL)稀釋，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到 3-(2-((1-((4-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 630.3.
步驟4： 1-(5-(4-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.08 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (61 mg, 0.4 mmol)，於室溫下反應2小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)稀釋，用Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，然後用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品用Pre-HPLC純化，得到1-(5-(4-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 959.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 8.8 Hz, 5.6 Hz, 1H), 7.63 (m, J= 8.0 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.40 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.20 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.70 - 4.44 (m, 4H), 4.38 - 4.33 (m, 1H), 3.85 - 3.61 (m, 7H), 3.36 (s, 1H), 2.93 - 2.77 (m, 2H), 2.55 - 2.33 (m, 7H), 2.24 - 2.11(m, 3H), 1.91 - 1.71(m, 7H), 1.36 - 1.27 (m, 4H), 1.24 - 1.04 (m, 2H), 0.76 - 0.64 (s, 2H), 0.56 - 0.43 (s, 2H).
實施例28： 1-(5-(4-(2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-(1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 將4-(2-氧代乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (2 g, 8.8 mmol )溶於1,2-二氯乙烷 (30 mL)中，並加入乙酸 (1 mL)和哌𠯤-1-羧酸苄酯 (5.8 g, 26.4 mmol)，將混合物在30 ℃下攪拌2小時後，冰浴下緩慢加入NaBH 3CN (1.1 g, 17.6 mmol)，於30 °C下攪拌16小時。反應完成後，用水 (30 mL)稀釋，乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH=20:1)純化，得到4-(2-(1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 432.2.
步驟2： 4-(2-(哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(2-(1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (2 g, 4.6 mmol)的甲醇 (10 mL)溶液中加入Pd/C (490 mg)，在氫氣氛圍下30 ℃下攪拌16小時。反應完成後，經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到4-(2-(哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟3： 4-(2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯五氟苯基 (582 mg, 1.34 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入DIEA (520 mg, 4.02 mmol)，加入4-(2-(哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (400 mg, 1.34 mmol)的DMF (3 mL)溶液，在30 ℃下攪拌2小時。反應完成後，加水 (10 mL)，乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取。有機相用飽和食鹽水 (30 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到4-(2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 548.3.
步驟4： 1-(2-氯-5-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向 4-(2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.55 mmol)的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (1 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，加入Na 2CO 3(5 mL)溶液，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得到1-(2-氯-5-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟5： 3-(2-((1-((4-(2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-(2-(哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (81 mg, 0.18 mmol)和鈦酸四異丙酯 (1 g)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，降溫至0 ℃後，加入無水甲醇 (1 mL)和NaBH(OAc) 3(107 mg, 0.48 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。反應完畢後，加入加入H 2O (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到 3-(2-((1-((4-(2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 637.4.
步驟6： 1-(5-(4-(2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(2-(4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (110 mg, 0.086 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (65 mg, 0.43 mmol)，於室溫下反應1小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。向上述所得產品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。所得粗品用Pre-HPLC純化，得到1-(5-(4-(2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙基)哌𠯤-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 973.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.2 Hz, 5.6 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.46 - 7.38 (m,1H), 7.35 - 7.25 (m, 2H), 7.19 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 4.66 - 4.43 (m, 4H), 4.42 - 4.29 (m, 1H), 3.94 - 3.60 (m, 7H), 3.35 (s, 1H), 2.90 - 2.81 (m, 2H), 2.53 -2.36 (m, 7H),  2.07 - 1.97 (m, 2H), 1.90 - 1.77 (m, 4H), 1.73 - 1.55 (m, 3H), 1.42 - 1.22 (m, 9H), 0.77 - 0.67(m, 2H), 0.59 - 0.44 (m, 2H).
實施例29： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-溴苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛的製備 將9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.71 mmol)溶於二氯甲烷 (2 mL)溶液中，加入三氟乙酸 (1 mL)，於30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，減壓濃縮得3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟2： 3-(4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛的製備 向3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (128 mg, 0.71 mmol)的二甲基亞碸(3 mL)溶液中加入DIEA (459 mg, 3.55 mmol)和4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (340 mg, 0.71 mmol)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，用水 (10 mL)稀釋，乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。有機相用鹽水 (30 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH (NH 3) = 20:1)，得到3-(4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 476.0.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的乙醇/乙酸 (2 mL/0.02 mL)混合液中加入3-(4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (80 mg, 0.17 mmol)。將混合物在30 ℃下攪拌0.5小時。然後添加NaBH 3CN (20 mg, 0.33 mmol)。反應完畢，加入H 2O (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 687.2.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-溴苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-溴-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.11 mmol)的DMF (1 mL)溶液中，加入CsF (76 mg, 0.5 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。向上述所得產品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，然後用Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品用Pre-HPLC純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-溴苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 536.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.01 - 7.94 (m, 1H), 7.78 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.45 - 7.43 (m, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 1H), 7.33 - 7.27 (m, 1H), 7.16 (d, J= 2.0 Hz,1H), 4.52 -4.43 (m, 1H), 4.32 - 4.20 (m, 3H), 3.93 (s, 1H), 3.79 - 3.69 (m, 1H), 3.68 - 3.47 (m, 7H), 3.27 - 3.18 (m, 2H), 2.80 - 2.65 (m, 2H), 2.37 - 2.19 (m, 9H), 2.10 - 1.95 (m, 3H), 1.72 - 1.58 (m, 6H), 1.56 - 1.22 (m, 9H), 1.14-0.89 (m, 3H), 0.66 - 0.55 (m, 2H), 0.44 - 0.33 (m, 2H).
實施例30： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (40 mg, 0.058 mmol)的四氫呋喃 (0.5 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (35 mg, 0.070 mmol)和鈦酸四異丙酯 (50 mg)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，降溫至0 ℃後，加入無水甲醇 (0.5 mL)和NaBH(OAc) 3(52 mg, 0.23 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] +=588.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (30 mg, 0.026 mmol)中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，用Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品經Pre-HPLC純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 516.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.04 (s, 1H), 7.69 - 7.62 (m, 2H), 7.53 (s, 1H), 7.41 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.30 - 7.20 (m, 2H), 7.05 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.61 (t, J= 11.3 Hz, 2H), 4.48 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 4.38 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 3.78 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 3.74 - 3.63 (m, 7H), 3.46 - 3.36 (m, 2H), 2.90 - 2.82 (m, 2H), 2.55 - 2.35 (m, 9H), 2.24 - 2.08 (m, 4H), 1.90 - 1.72 (m, 7H), 1.64 - 1.58 (s, 3H), 1.53 - 1.40 (m, 3H), 1.35 - 1.26 (m, 2H), 1.18 - 1.11 (m, 2H), 0.80 (t, J= 7.4 Hz, 3H),  0.74 - 0.66 (m, 2H), 0.52 - 0.43 (m, 2H).
實施例31： 1-(5-(9-(4-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁-3-烯酸的製備 -20 ℃下，將LiHMDS (10.8 mL, 10.8 mmol, 1 M/THF)滴加到2-羧乙基三苯基溴化磷 (1.92 g, 4.60 mmol)的THF (10 mL)溶液中並繼續攪拌30分鐘。然後加入9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 3.60 mmol)的THF (5 mL)溶液。室溫反應16小時，加入水 (50 mL)並用乙酸乙酯 (40 mL)萃取。將水相分離，用1 N鹽酸水溶液調節pH = 2~3，用乙酸乙酯 (40 mL x 3)萃取。將合併的有機相用食鹽水 (100 mL)洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，醋瓶通過矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 100:1~4:1)純化，得到 4-(3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁-3-烯酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 360.1.
步驟2： 4-(3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁酸的製備 將4-(3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁-3-烯酸 (0.8 g, 2.37 mmol)溶於MeOH (10 mL)中，加入Pd/C (150 mg)，在氫氣球保護下置換三次並室溫攪拌過夜。將混合物過濾並濃縮，得到類4-(3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁酸。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.39 - 3.30 (m, 4H), 2.33 (t, J= 7.2 Hz, 1H), 1.67 -1.60 (m, 4H), 1.57 - 1.52 (m, 2H), 1.49 - 1.43 (m, 11H), 1.30 - 1.22 (m, 5H), 1.10 - 1.04 (m, 4H).
步驟3： 9-(4-羥基丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 將4-(3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁酸 (0.75 g, 2.21 mmol)溶於THF (5 mL)中，0 ℃下滴加BH 3/四氫呋喃溶液 (11.1 mmol, 1 M)。在室溫下繼續反應2 h。0 ℃下加入MeOH (2 mL)淬滅反應，濃縮得到9-(4-羥基丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯，直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 270.2.
步驟4： 9-(4-氧代丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向 9-(4-羥基丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (0.55 g, 1.69 mmol)的DCM (10 mL)溶液中分批加入戴斯-馬丁氧化劑 (1.08 g, 2.54 mmol)。將混合物在室溫攪拌1 h。將反應液濃縮，粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 50:1~5:1)純化，得到9-(4-氧代丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 9.76 (s, 1H), 3.42 - 3.30 (m, 4H), 2.41 (t, J= 5.2 Hz, 1H), 1.70 -1.60 (m, 4H),  1.48 - 1.40 (m, 12H),  1.30 - 1.20 (m, 6H), 1.12 - 1.02 (m, 4H).
步驟5： 4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁醛的製備 將9-(4-氧代丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (320 mg, 0.99 mmol)溶於DCM (4 mL)中，然後加入TFA (2 mL)。將混合物在室溫攪拌1小時並濃縮，得到4-(3-氮雜螺環[5.5]十一烷-9-基)丁醛三氟乙酸鹽 (粗品)，將所得粗品溶於DMF (3 mL)，並加到DIEA (516 mg, 4.00 mmol)和4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (430 mg, 0.99 mmol)的DMF (3 mL)溶液中，反應液在室溫下攪拌1小時。反應液中加入水，並用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 30:1)純化，得到4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 474.2.
步驟6： 3-(2-((1-((4-(4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.088 mmol)和4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁醛 (83 mg, 0.175 mmol)的DCM/MeOH/AcOH (2.0 mL/0.5 mL/0.05 mL)溶液在室溫下攪拌2小時。0-5 ℃加入NaBH 3CN (47 mg, 0.22 mmol)並在室溫攪拌0.5小時。將混合物濃縮，粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到 3-(2-((1-((4-(4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 685.0.
步驟7： 1-(5-(9-(4-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.058 mmol)的DMF (1.5 mL)溶液中加入CsF (44 mg, 0.29 mmol)，室溫下反應1小時。反應液中加入水 (5 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (2.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-(4-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1069.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.88 - 7.80 (m, 1H), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.41 (dd, J= 8.0 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.20 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 4.70 - 7.30 (m, 5H), 3.92 - 3.61 (m, 9H), 3.46 - 3.34 (m, 3H), 2.90 - 2.82 (m, 2H), 2.57 - 2.27 (m, 10H), 1.88 - 1.71 (m, 5H), 1.60 - 1.43 (m, 6H), 1.33 - 1.11 (m, 12H), 0.77 - 0.63 (m, 2H), 0.53 - 0.41 (m, 2H).
實施例32： 1-(5-(9-(2-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯烷-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 9-(2-氧代乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向9-(2-羥基乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (500 mg, 1.68 mmol)的DCM (10 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (860 mg, 2.02 mmol)，反應1小時。將混合物過濾，濾液濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (PE:EA = 10:1 ~ 1:1) 純化，得到9-(2-氧代乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H-tBu] += 240.2.
步驟2： ( S)-9-(2-(2-(羥基甲基)吡咯烷-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向9-(2-氧代乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (0.35 g, 1.18 mmol)和 ( S)-吡咯烷-2-基甲醇 (0.18 g, 1.78 mmol)的1,2-二氯乙烷 (6 mL)溶液中加入乙酸 (0.1 mL)。將混合物在30 ℃下攪拌半小時。0 ℃下加入NaBH(OAc) 3(0.52 g, 2.36 mmol)，然後室溫再反應2小時。反應完畢，加入H 2O (10 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到 ( S)-9-(2-(2-(羥基甲基)吡咯烷-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 381.2.
步驟3： ( S)-(1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲醇的製備 向 ( S)-9-(2-(2-(羥基甲基)吡咯烷-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (210 mg, 0.55 mmol)的DCM (3 mL)溶液中加入TFA (1 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時。反應液直接減壓濃縮得到 ( S)-(1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲醇，未進一步純化直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 281.2.
步驟4： ( S)-(1-(2-(3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲醇的製備 向 ( S)-(1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲醇 (154 mg, 0.55 mmol)的DCM/MeOH (3 mL/3 mL)溶液中，加入HOAc (0.1 mL)和苯甲醛 (88 mg, 0.83 mmol)，在室溫下攪拌0.5小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(233 mg, 1.65 mmol)並攪拌0.5小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析純化，得到 ( S)-(1-(2-(3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 371.2.
步驟5： 3-(2-((( S)-1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (0.14 g, 0.32 mmol)和 ( S)-(1-(2-(3-苄基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲醇 (0.18 g, 0.48 mmol)溶於THF (10 mL)中，然後加入Cs 2CO 3(0.32 g, 0.96 mmol)。將反應液加熱至80 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (50 mL)，乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，粗產品經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)得到3-(2-((( S)-1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 672.3.
步驟6： 3-(2-((( S)-1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((( S)-1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.074 mmol)的二氧六環/H 2O (1 mL/0.2 mL)的溶液中加入 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (57 mg, 0.112 mmol)，碳酸銫 (73 mg, 0.22 mmol)和Pd-118 (5 mg, 0.012 mmol)，在N 2保護下100 ℃下反應過夜。將混合物過濾，濾液減壓濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (DCM/MeOH = 100:1 ~20:1)純化，得到3-(2-((( S)-1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 511.8.
步驟7： 3-(2-((( S)-1-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-(2-(3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (30 mg, 0.029 mmol)溶於 DMF (0.5 mL)中，然後加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (16 mg, 0.035 mmol)和DIEA (12 mg, 0.087 mmol)。將反應液在50 ℃下攪拌過夜。反應液中加入水 (20 mL)，然後用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和鹽水 (30 mL x 3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥。過濾，濾液濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到3-(2-((( S)-1-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 636.9.
步驟8： 1-(5-(9-(2-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯烷-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((( S)-1-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)吡咯烷-2-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (20 mg, 0.016 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (12 mg, 0.078 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。加入乙酸乙酯和水稀釋，分離有機相並濃縮有機相。所得產品在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL)，反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-(2-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯烷-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 972.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.71 (s, 1H), 8.55 - 8.51 (m, 2H), 8.13 - 8.08 (m, 1H), 8.06 - 7.98 (m, 1H), 7.87 - 7.81 (m, 1H), 7.74 - 7.65 (m, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 2H), 7.17 (s, 1H), 4.54 - 4.32 (m, 4H), 3.98 - 3.76 (m, 9H), 3.68 - 3.55 (m, 3H), 3.37 (s, 1H), 3.14 - 3.05 (m, 2H), 2.92 - 2.84 (m, 2H), 2.60 - 2.50 (m, 1H), 2.06 - 1.82 (m, 8H), 1.70 - 1.55 (m, 6H), 1.37 - 1.26 (m, 9H)
實施例33： 1-(5-(9-((4-((3-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯的製備 將3-(甲氧基羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸 (2 g, 11.75 mmol)溶於THF (15 mL)中，加入BH 3/THF (17.6 mL, 17.6 mmol, 1M)。將反應液於0 ℃反應3 h。反應完畢，用甲醇淬滅反應，直接減壓濃縮得到3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.68 (s, 3H), 3.64 - 3.60 (m, 3H), 2.04 - 1.97 (m, 6H).
步驟2： 3-(7-氯-8-氟-2-((3-(甲氧基羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯(0.36 g, 0.85 mmol)和3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯 (0.2 g, 1.28 mmol)溶於THF (10 mL)中，然後加入Cs 2CO 3(0.73 g, 2.55 mmol)。將反應液加熱至80 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (50 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:2)純化得到3-(7-氯-8-氟-2-((3-(甲氧基羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 548.1.
步驟3： 3-(7-氯-8-氟-2-((3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(7-氯-8-氟-2-((3-(甲氧基羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.55 mmol)溶於THF (5 mL)中，然後加入LAH/THF (0.7 mL, 0.7 mmol, 1M)。將反應液在0 ℃至室溫下攪拌2小時。加入四水合酒石酸鈉鉀淬滅反應，過濾，濾液濃縮得到3-(7-氯-8-氟-2-((3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 520.1.
步驟4： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (60 mg, 0.12 mmol)的1,4-二氧六環/H 2O (1 mL/0.2 mL)溶液中加入 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (71 mg, 0.14 mmol)，碳酸銫 (117 mg, 0.36 mmol)和PdCl 2(dtbpf) (5 mg, 0.012 mmol)，在N 2保護下80 ℃下反應過夜。將反應液過濾，濾液濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~20:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 870.4.
步驟5： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-甲醯基雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-(羥基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.057 mmol)的DCM (3 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (30 mg, 0.068 mmol)反應1小時。將混合物過濾，濃縮，所得粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-甲醯基雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 868.2.
步驟6： 3-(2-((3-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-甲醯基雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (10 mg，0.012 mmol)和1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (7 mg, 0.014 mmol)的四氫呋喃/甲醇 (0.5 mL/0.5 mL)混合溶液中加入鈦酸四異丙酯 (50 mg, 0.18 mmol)。將上述混合物先在70 ℃下攪拌2小時，然後降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(8 mg, 0.036 mmol)，再室溫反應2小時。反應完畢，加入H 2O (10 mL)淬滅反應，用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-((3-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 677.4.
步驟7： 1-(5-(9-((4-((3-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((3-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (15 mg, 0.011 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (12 mg, 0.078 mmol)，反應液在室溫下攪拌過夜。用乙酸乙酯和水稀釋反應液，分離有機相並減壓濃縮。將上述所得產品在室溫下再加入1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 1 mL)，繼續反應0.5小時。上述反應液直接減壓濃縮，所得粗品通過Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((3-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1053.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (s, 1H), 8.61 - 8.31 (br, 1H), 7.87 (dd, J= 9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.64 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.44 - 7.30 (m, 3H), 7.20 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.73 (d, J= 13.4 Hz, 2H), 4.55 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 4.46 (d, J= 11.9 Hz, 1H), 4.12 - 4.04 (m, 2H), 3.91 - 3.68 (m, 6H), 3.46 - 3.38 (m, 2H), 3.36 (s, 1H), 3.07 - 2.75 (m, 12H), 2.64 - 2.54 (m, 2H), 2.12 - 2.00 (m, 4H), 1.91 - 1.78 (m, 8H), 1.69 - 1.60 (m, 4H), 1.55 - 1.43 (m, 2H), 1.37 - 1.17 (m, 5H).
實施例34： (2 S,4 R)-1-(( S)-2-(3-(4-(2-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)乙基)哌啶-1-基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺
步驟1： 3-(4-(2-羥基乙基)哌啶-1-基)丙酸苄酯的製備 在室溫下向2-(哌啶-4-基)乙烷-1-醇 (2.00g, 16.3 mmol)的乙腈 (20 mL)溶液中加入丙烯酸苄酯 (2.64 g, 15.5 mmol)。將反應液在室溫下攪拌過夜。將反應混合物加入鹽水並用EtOAc (50 mL x 3)萃取。有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾， 濾液濃縮以得到粗產物，其通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(4-(2-羥基乙基)哌啶-1-基)丙酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 292.2.
步驟2： 3-(4-(2-氧代乙基)哌啶-1-基)丙酸苄酯的製備 將3-(4-(2-羥基乙基)哌啶-1-基)丙酸苄酯 (2.00 g, 6.86 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液冷卻至0-10 ℃，分批加入Dess-Martin氧化劑 (5.8 g, 13.7 mmol)。將所得反應液在室溫下攪拌1.5小時。加入硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液淬滅，二氯甲烷 (20 mL x 3)萃取。將合併的有機相用飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾。濾液真空濃縮，粗品用矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 9:1)純化，得到3-(4-(2-氧代乙基)哌啶-1-基)丙酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 290.2.
步驟3： 3-(2-((( S)-1-(2-(1-(3-(苄氧基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)乙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-((苄氧基)羰基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.248 mmol)溶於乙醇/乙酸 (2 mL/0.1 mL)中，然後加入鈀炭 (100 mg)。氫氣球保護下置換三次，在10 ℃反應1小時。將反應液通過矽藻土過濾，濾液直接用於下一步。將濾液冷卻至0-5 ℃，加入NaBH(OAc) 3(158 mg, 0.744 mmol)，然後加入3-(4-(2-氧代乙基)哌啶-1-基)丙酸苄酯 (79 mg, 0.273 mmol)並在15 ℃下攪拌30分鐘。反應完畢，加入碳酸氫鈉水溶液並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取。將合併的有機層用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥並過濾。減壓濃縮，粗產品通過薄層製備板 (DCM:MeOH = 9:1)純化得到3-(2-((( S)-1-(2-(1-(3-(苄氧基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)乙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 473.8.
步驟4： 3-(4-(2-(( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)乙基)哌啶-1-基)丙酸的製備 將3-(2-((( S)-1-(2-(1-(3-(苄氧基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)乙基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.137 mmol)溶於乙醇 (2 mL)中，加入鈀碳 (80 mg)。氫氣球保護下置換三次，在30 ℃下攪拌2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮，所得粗產物通過薄層製備板 (DCM:MeOH = 9:1)純化，得到3-(4-(2-(( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)乙基)哌啶-1-基)丙酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-H] -= 854.4.
步驟5： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((( S)-1-(2-(1-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)乙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(4-(2-(( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)乙基)哌啶-1-基)丙酸 (100 mg, 0.058 mmol)和HATU (67 mg, 0.176 mmol)溶於DMF (2 mL)中，攪拌3分鐘，依次加入DIEA (45 mg, 0.351 mmol)和 (2 S,4 R)-1-(( S)-2-胺基-3,3-二甲基丁醛基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺 (60 mg, 0.140 mmol)。反應液在25 °C下攪拌1小時。反應完成後，將混合物用水 (20 mL)稀釋，用乙酸乙酯 (15 mL x 3)萃取。有機相用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮。所得粗品經薄層製備板 (DCM:MeOH = 7:1)純化得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((( S)-1-(2-(1-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)乙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 634.9.
步驟6： (2 S,4 R)-1-(( S)-2-(3-(4-(2-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)乙基)哌啶-1-基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺的製備 將3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((( S)-1-(2-(1-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)乙基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.082 mmol)溶於DCM (2 mL)中，然後加入TFA (1 mL)並在15 ℃下攪拌1小時。將反應液濃縮，殘餘物加DCM (20 mL)稀釋，然後用NaHCO 3水溶液調節至pH＞7。分離有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經Pre-HPLC製備得 (2 S,4 R)-1-(( S)-2-(3-(4-(2-(( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)乙基)哌啶-1-基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1125.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.12 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.63 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.47 -7.28 (m, 6H), 7.17 (d, J= 7.1 Hz, 1H), 7.01 (t, J= 2.5 Hz, 1H), 4.83 - 4.72(m, 3H), 4.59 - 4.44 (m, 4H), 4.37 - 4.31(m, 1H), 4.13 (s, 2H), 4.00 - 3.75 (m, 4H), 3.68 - 3.61 (m, 2H),3.41 - 3.33 (m, 2H), 3.23 - 3.07 (m, 3H), 2.78 - 2.61 (m, 4H),2.47 - 2.43 (m, 3H), 2.40 - 2.17 (m, 4H), 2.15 - 1.98 (m, 7H), 1.95 - 1.88 (m, 2H), 1.57 - 1.44 (m, 3H), 1.57 - 1.44 (m, 2H), 1.38 - 1.25 (m, 4H), 1.02 (d, J = 12.6 Hz, 9H), 0.93 - 0.84 (m, 3H).
實施例35： (2 S,4 R)-1-(( S)-2-(3-(4-((( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺
步驟1： 3-(4-(羥基甲基)哌啶-1-基)丙酸苄酯的製備 在室溫下向哌啶-4-基甲醇 (3.00 g, 0.026 mmol)的乙腈 (30 mL)溶液中加入丙烯酸苄酯 (4.44 g, 0.027 mmol)。將反應液在室溫下攪拌過夜。反應混合物中加入鹽水並用EtOAc (50 mL x 3)萃取。將有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得到粗產物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 9:1)純化，得到3-(4-(羥基甲基)哌啶-1-基)丙酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 278.2.
步驟2： 3-(4-甲醯基哌啶-1-基)丙酸苄酯的製備 將3-(4-(羥基甲基)哌啶-1-基)丙酸苄酯 (3.0 g, 10.83 mmol)的二氯甲烷 (50 mL)溶液冷卻至0-10 ℃，分批加入Dess-Martin氧化劑 (9.18 g, 21.66 mmol)。將所得反應液在室溫下攪拌1.5小時。反應液中加入硫代硫酸鈉水溶液、碳酸氫鈉水溶液淬滅，用二氯甲烷 (30 mL x 2)萃取。將合併的有機相用飽和鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥並過濾。濾液真空濃縮，粗品用矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 2:1)純化，得到3-(4-甲醯基哌啶-1-基)丙酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 276.1.
步驟3： 3-(2-((( S)-1-((1-(3-(苄氧基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((( S)-1-苄基吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (0.55 g, 0.94 mmol)溶入DCM (10 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸脂 (0.27 g, 1.87 mmol)和DIEA (0.24 g, 1.87 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮至5 mL，濃縮物加入MeOH (3 mL)溶解，加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後將混合物濃縮至三分之二體積，加入3-(4-甲醯基哌啶-1-基)丙酸苄酯 (0.51 g, 1.87 mmol)並室溫攪拌2分鐘，然後0-5 ℃下加入NaBH(OAc) 3(597 g, 2.82 mmol)。反應液升至室溫反應30分鐘，先加入水，再用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，有機相用飽和氯化鈉溶於洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)得到3-(2-((( S)-1-((1-(3-(苄氧基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 752.3.
步驟4： 3-(4-((( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙酸的製備 將3-(2-((( S)-1-((1-(3-(苄氧基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.40mmol)溶於1,4-二氧六環 (3 mL)中，加入氫氧化鈉水溶液 (1.05 mL, 2 N)，室溫攪拌2小時。乙酸乙酯萃取，有機相減壓濃縮得到3-(4-((( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙酸，直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 662.3.
步驟5： 3-(4-((( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙酸的製備 向3-(4-((( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙酸 (264 mg, 0.40 mmol)的1,4-二氧六環/H 2O (4.0 mL/1 mL)的溶液中加入 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (256 mg, 0.50 mmol)，碳酸銫 (326 mg, 1.00 mmol)和cataXium A Pd G3 (29 mg, 0.04 mmol)，在N 2保護下75 ℃下反應過夜。將混合物過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~20:1)純化，得到3-(4-((( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1012.9.
步驟6： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-((( S)-1-((1-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(4-((( S)-2-(((4-(8-(三級丁氧羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙酸 (220 mg, 0.22 mmol)和HATU (99 mg, 0.26 mmol)溶於DMF (4 mL)中，攪拌3分鐘，依次加入DIEA (85 mg, 0.66 mmol)和 (2 S,4 R)-1-(( S)-2-胺基-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺 (122 mg, 0.26 mmol)，反應液在25 °C下攪拌1小時。向反應混合物中加水 (15 mL)稀釋，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH= 20:1)純化得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-((( S)-1-((1-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 713.1.
步驟7： (2 S,4 R)-1-(( S)-2-(3-(4-((( S)-2-(((4-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺的製備 將3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-((( S)-1-((1-(3-((( S)-1-((2 S,4 R)-4-羥基-2-((4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)胺基甲醯)吡咯-1-基)-3,3-二甲基-1-氧代丁烷-2-基)胺基)-3-氧代丙基)哌啶-4-基)甲基)吡咯-2-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.11 mmol)溶於DMF (2 mL)中，在室溫下加入CsF (83 mg, 0.55 mmol)並攪拌30分鐘。加入水並用乙酸乙酯萃取，有機相減壓濃縮。將濃縮物溶於1,4-二氧六環 (2 mL)中，然後加入HCl/1,4-二氧六環溶液 (6 N, 1 mL)，反應攪拌0.5小時。反應液直接減壓濃縮。所得粗品經Pre-HPLC純化混合物得到 (2 S,4 R)-1-(( S)-2-(3-(4-((( S)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)吡咯-1-基)甲基)哌啶-1-基)丙醯胺)-3,3-二甲基丁醯基)-4-羥基- N-(4-(4-甲基噻唑-5-基)苄基)吡咯烷-2-甲醯胺。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1124.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.08 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 8.87 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.91 -7.83 (m, 1H), 7.47 - 7.29 (m, 6H), 7.22 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.81 - 4.75 (m, 3H), 4.57 - 4.30 (m, 6H), 4.28 - 4.20 (m, 2H), 4.03 - 3.86 (m, 3H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 3.58 - 3.40 (m, 4H), 3.27 - 3.18 (m, 3H), 3.10 - 2.64 (m, 6H), 2.48 - 2.41 (m, 3H), 2.31 - 1.85 (m, 14H), 1.67 - 1.45 (m, 2H), 1.05 - 0.96 (m ,9H).
實施例36： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙烷基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (40 mg, 0.034 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化混合物得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙烷基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1008.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.02 (s, 1H), 8.70 - 8.34 (m, 2H), 7.90 - 7.83 (m, 1H), 7.41 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 4H), 7.21 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.65 (t, J= 13.9 Hz, 2H), 4.53 - 4.35 (m, 2H), 3.87 - 3.64 (m, 8H), 3.46 - 3.33 (m, 3H), 2.96 - 2.76 (m, 9H), 2.69 - 2.42 (m, 5H), 2.32 (s, 3H), 1.98 - 1.85 (m, 4H), 1.77 - 1.71 (m, 2H), 1.62 - 1.54 (m, 4H), 1.47 - 1.27 (m, 5H), 1.19 - 1.14 (m, 2H), 0.82 - 0.72 (m, 2H), 0.62 - 0.54 (m, 2H).
實施例37： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙烷基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.043 mmol)的甲醇 (2 mL)溶液中，加入Pd/C (10 mg)，氫氣球保護下室溫反應2小時。反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 578.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙烷基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙烷基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (36 mg, 粗品)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)和HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液直接減壓濃縮，所得粗品經Pre-HPLC純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙烷基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 506.3.
實施例38： 1-(5-(9-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 向3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (473 mg, 1.86 mmol )的二甲基亞碸 (8 mL)溶液中加入DIEA (721 mg, 5.58 mmol)和3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲酸五氟苯酯 (800 mg, 1.86 mmol)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，用水 (10 mL)和乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。有機相用鹽水 (20 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 445.1.
步驟2： 1-(2-甲氧基-5-(3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (920 mg, 1.84 mmol)的1,4-二氧六環 (4 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (2 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，在真空下濃縮得到1-(2-甲氧基-5-(3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 401.1.
步驟3： 4-((9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向1-(2-甲氧基-5-(3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (200 mg, 0.5 mmol)的1,2-二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入三乙胺 (51 mg, 0.5 mmol)，乙酸 (0.1 mL)和4-甲醯哌啶-1-羧酸三級丁酯 (213 mg, 1.0 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時後，加入醋酸硼氫化鈉 (212 mg, 1.0 mmol)。30 ℃下攪拌1小時，反應完成後，用水 (5 mL)和乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到4-((9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 598.4.
步驟4： 1-(2-甲氧基-5-(9-哌啶-4-基甲基)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (250 mg, 0.42 mmol)的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (1 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，在真空下濃縮得到1-(2-甲氧基-5-(9-哌啶-4-基甲基)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 498.2.
步驟5： 3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲氧基環丙基甲氧基基)吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯(100 mg, 0.12 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液和無水甲醇 (0.5 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(9-哌啶-4-基甲基)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (70 mg, 0.14 mmol)和鈦酸四異丙酯 (171 mg, 0.6 mmol)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，加入NaBH(OAc) 3(100 mg, 0.48 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] +=662.9.
步驟6： 1-(5-(9-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3,9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (125 mg, 0.095 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (73 mg, 0.48 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向殘餘物中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1023.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.99 - 7.95 (m, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.17 - 7.13 (m, 2H), 4.50 (d, J= 12.2 Hz, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.60 - 3.56 (m, 4H), 3.41 (s, 5H), 3.02 - 2.90 (m, 3H), 2.68 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.30 (s, 7H), 2.09 (d, J= 6.3 Hz, 2H), 1.86 (t, J= 10.8 Hz, 2H), 1.73 - 1.67 (m, 4H), 1.63-1.57 (m, 2H), 1.47 - 1.37  (m, 9H), 1.05 - 0.99 (m, 2H), 0.65 - 0.62 (m, 2H), 0.42-0.37 (m, 2H).
實施例39： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(三幅甲氧基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 向3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲酸五氟苯酯 (320 mg, 0.66 mmol)的二甲基亞碸 (3 mL)溶液中加入DIEA (256 mg, 1.98 mmol)和4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (266 mg, 0.69 mmol)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，用水 (10 mL)和乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。有機相用鹽水 (20 mL)洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)得到4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 686.2.
步驟2： 1-(5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(三氟甲氧基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (450 mg, 0.66 mmol)的四氫呋喃 (2 mL)的溶液中加入Pd/C (70 mg)，氫氣球保護下在30 ℃下攪拌16小時。過濾並濃縮混合物，粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:NH 3/MeOH = 10:1)得到1-(5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(三氟甲氧基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 552.2.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁基酯 (100 mg, 0.12 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液和無水甲醇 (0.5 mL)溶液中加入1-(5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(三氟甲氧基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (99 mg, 0.18 mmol)和鈦酸四異丙酯 (171 mg, 0.6 mmol)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，0 ℃下加入NaBH(OAc) 3(100 mg, 0.48 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 10:1)，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 689.8.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(三幅甲氧基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(三氟甲氧基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.12 mmol)溶於DMF (1 mL) 中，加入CsF (91 mg, 0.6 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(三幅甲氧基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1077.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.53 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.59 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.50 - 7.43 (m, 3H), 7.38 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 4.27 - 4.26 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.72 - 3.54 (m, 8H), 3.30 - 3.24 (m, 3H), 2.69 - 2.67 (m, 3H), 2.38 - 2.27 (m, 9H), 2.04 (s, 2H), 1.70 - 1.62 (s, 6H), 1.53 - 1.50 (m, 3H), 1.44 - 1.26 (m, 4H), 1.14 - 0.96 (m, 4H), 0.67 - 0.59 (m, 2H), 0.44 - 0.34 (m, 2H).
實施例40： 1-(5-(9-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)氮雜環丁烷基-3-基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯的製備 向1-(2-甲氧基-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (200 mg, 0.5 mmol)的1,2-二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入三乙胺 (51 mg, 0.5 mmol)，乙酸 (0.1 mL)和3-醛基氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯 (185 mg, 1.0 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時後，加入醋酸硼氫化鈉 (212 mg, 1.0 mmol)。30 ℃下攪拌1小時，反應完成後，用水 (5 mL)和乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 10:1)得到3-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 570.2.
步驟2： 1-(5-(9-(氮雜環丁烷基-3-基甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯 (210 mg, 0.37 mmol)的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (1 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，在真空下濃縮得到1-(5-(9-(氮雜環丁烷基-3-基甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 470.2.
步驟3： 3-(2-((1-((3-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)氮雜環丁烷基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液和無水甲醇 (0.5 mL)溶液中加入1-(5-(9-(氮雜環丁烷基-3-基甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (84 mg, 0.18 mmol)和鈦酸四異丙酯 (171 mg, 0.6 mmol)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，加入NaBH(OAc) 3(100 mg, 0.48 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 10:1)，得到 3-(2-((1-((3-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)氮雜環丁烷基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 648.5.
步驟4： 1-(5-(9-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)氮雜環丁烷基-3-基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((3-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)氮雜環丁烷基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.039 mmol)的DMF (1 mL) 溶液中加入CsF (30 mg, 0.20 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)氮雜環丁烷基-3-基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 995.5. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.02 (s, 1H), 7.86 (dd, J= 9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 7.39 - 7.37 (m, 1H), 7.36 - 7.30 (m, 2H), 7.22 - 7.17 (m, 2H), 4.65 - 4.57 (m, 2H), 4.34 (dd, J= 29.9, 11.3 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 3.76 - 3.64 (m, 10H), 3.48 - 3.43 (m, 1H), 3.39 - 3.36 (m, 1H), 3.12 - 3.04 (m, 2H), 2.85 - 2.76 (m, 3H), 2.68 (s, 2H), 2.59 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 2.46 - 2.36 (m, 4H), 1.90 - 1.78 (m, 4H), 1.59 - 1.52 (m, 5H), 1.38 - 1.28 (m, 4H), 0.70 - 0.65 (m, 2H), 0.61 - 0.57 (m, 2H).
實施例41： 1-(5-(9-(2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)氮雜環丁烷基-3-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-氧代乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-羥基乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯 (600 mg, 2.98 mmol)的二氯甲烷 (10 mL)溶液中加入Dess-Martin (1.5 g, 3.58 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (20 mL)和碳酸氫鈉溶液 (20 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，得到3-(2-氧代乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯。粗品直接用於下一步。
步驟2： 3-(2-(9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯的製備 向1-(2-甲氧基-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (250 mg, 0.62 mmol)的1,2-二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入三乙胺 (63 mg, 0.62 mmol)，乙酸 (0.1 mL)和3-(2-氧代乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯 (247 mg, 1.24 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時後，加入醋酸硼氫化鈉 (263 mg, 1.24 mmol)。30 ℃下攪拌1小時，反應完成後，用水 (5 mL)和乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 10:1)，得到3-(2-(9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 584.3.
步驟3： 1-(5-(9-(2-(氮雜環丁烷基-3-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)氮雜環丁烷-1-羧酸三級丁酯 (350 mg, 0.6 mmol)的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (1 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，加入Na 2CO 3(5 mL)並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH (NH 3) = 5:1)，得到1-(5-(9-(2-(氮雜環丁烷基-3-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 484.2.
步驟4： 3-(2-((1-((3-(2-(9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)氮雜環丁烷基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(5-(9-(2-(氮雜環丁烷基-3-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (70 mg, 0.14 mmol)和鈦酸四異丙酯 (171 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃下加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH (NH 3) = 10:1)，得到3-(2-((1-((3-(2-(9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)氮雜環丁烷基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 655.9.
步驟5： 1-(5-(9-(2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)氮雜環丁烷基-3-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((3-(2-(9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)氮雜環丁烷基-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (120 mg, 0.09 mmol)的DMF (1 mL)溶液中，加入CsF (68 mg, 0.45 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-(2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)氮雜環丁烷基-3-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1009.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.89 - 8.76 (m, 1H), 8.53 - 8.47 (m, 2H), 8.01 - 7.65 (m, 1H), 7.47 - 7.10 (m, 6H), 4.73 - 4.28 (m, 7H), 3.95 (s, 7H), 3.82 - 3.63 (m, 7H), 3.59 - 3.36 (m, 9H), 3.16 - 2.88 (m, 2H), 2.82 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.36 (s, 1H), 2.15 - 1.94 (m, 5H), 1.84 - 1.49 (m, 6H), 1.35 - 1.25 (m, 1H), 0.61 (s, 4H).
實施例42： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 7-溴-2,4-二氯-8-氟喹唑啉的製備 將7-溴-8-氟喹唑啉-2,4(1 H,3 H)-二酮 (20 g, 77.21 mol)溶於POCl 3(200 mL)，冷卻至0 ℃, 攪拌下緩慢滴加DIEA (29.88 g, 231.63 mol)。將反應液加熱至120 ℃反應16小時。反應完畢，將反應液濃縮，用乙酸乙酯稀釋，然後緩慢倒入冰水中淬滅。二氯甲烷 (200 mL x 3)萃取，分離有機相。有機相用無水Na 2SO 4乾燥，過濾濃縮得到7-溴-2,4-二氯-8-氟喹唑啉。粗品無需純化，直接用於下一步反應。
步驟2： 3-(7-溴-2-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將7-溴-2,4-二氯-8-氟喹唑啉 (4.5 g, 0.0152 mmol)和 TEA (4.6 g, 0.0456 mmol) 溶於THF (30 mL)，冷卻至-60 ℃。緩慢滴加3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的THF (20 mL)溶液，-60 ℃反應30分鐘。反應完畢，將反應液倒入NH 4Cl水溶液 (50 mL)並用乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併有機相，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 3:1)得到3-(7-溴-2-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 471.0, 473.0.
步驟3： 3-(7-溴-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(7-溴-2-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (2.0 g, 4.24 mmol)加入到無水乙腈(30 mL)中，然後加入碳酸銫(4.14 g, 12.72 mmol)和環丙烷-1,1-二基二甲醇 (240 mg, 2.12 mmol)，混合物在25 ℃下攪拌反應1小時。反應結束後，加入飽和鹽水 (30 mL)淬滅反應，並用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到3-(7-溴-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 537.1.
步驟4： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-溴-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.558 mmol)和(2-氟-6-(甲氧基甲基氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (284 mg, 0.67 mmol) 的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入CataCXium A Pd G3 (81 mg, 0.112 mmol)和碳酸銫 (546 mg, 1.674 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (20 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 843.4.
步驟5： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.237 mmol)的DCM (4 mL)溶液降溫至0 ℃，加入Dess-Martin試劑 (201 mg, 5.7 mmol )，室溫下反應0.5小時。反應結束後，加入飽和硫代硫酸鈉溶液 (10 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 841.4.
步驟6： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.119 mmol)和1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (69 mg, 0.143 mmol)的DCM/AcOH (1.0 mL/0.01 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (169 mg, 0.595 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(79 mg, 0.357 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1306.6.
步驟7： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.077 mmol)的DMF (2 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (58 mg, 0.385 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。用EA和水萃取，濃縮有機相。將混合物在室溫下再加入1,4-二氧六環 (1mL)和HCl/1,4-二氧六環的混合物 (6 N, 0.5 mL)，反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1006.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.37 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 7.96 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 3H), 7.24 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.18 - 7.12 (m, 1H), 7.06 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 4.29 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 4.26 - 4.16 (m, 3H), 3.84 (s, 1H), 3.83 - 3.74 (m, 1H), 3.62 - 3.39 (m, 8H), 2.87 - 2.60 (m, 3H), 2.46 - 2.17 (m, 14H), 2.04 (s, 2H),1.78 - 1.63 (m, 6H), 1.54 - 1.37 (m, 5H), 1.34 - 1.32(m, 2H), 1.12 - 0.93(s, 4H), 0.61 (s, 2H), 0.38 (s, 2H).
實施例43： 1-(5-(2-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 2-(2-乙氧基-2-氧代亞乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯的製備 向2-(二乙氧基磷醯基)乙酸乙酯 (7.04 g, 31.4 mmol)的DMF (70 mL)溶液中加入NaH (1.26 g, 31.4 mmol, 60%)。將混合物在0 ℃攪拌30分鐘。然後加入2-氧代-7-氮螺並[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯 (5.00 g, 20.9 mmol)並在室溫攪拌3 h。反應液冷卻至0 ℃，加入NH 4Cl (100 mL)水溶液淬滅，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水 (100 mL x 3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，粗品經矽膠柱色譜法 (PE:EA = 100:1 ~10:1)純化得到2-(2-乙氧基-2-氧代亞乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 254.2.
步驟2： 2-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯的製備 將2-(2-乙氧基-2-氧代亞乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯 (6.4 g, 20.7 mmol)溶於EtOH (60 mL)中，加入Pd/C (2.2 g, 2.07 mmol, 10%)，在H 2氛圍下攪拌16小時。將混合物過濾並濃縮，得到2-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯，直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 256.3.
步驟3： 2-(2-羥基乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯的製備 在0-5 ℃下，向2-(2-乙氧基-2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯 (6.2 g, 19.9 mmol)的THF (90 mL)溶液中滴加LAH (23.9 mL, 23.9 mmol, 1 M in THF)。室溫下繼續反應1 h。將反應液冷卻至0-5 ℃，加入Na 2SO 4·10H 2O淬滅反應並攪拌1小時。將混合物過濾，濾液濃縮，得到2-(2-羥基乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 214.2.
步驟4： 2-(2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯的製備 向2-(2-羥基乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯 (2 g, 7.4 mmol)的DCM (20 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (3.8 g, 8.9 mmol)，將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (30 mL)和碳酸氫鈉溶液 (30 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化，得到2-(2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 212.2.
步驟5： 2-(2-(4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯的製備 向2-(2-氧代乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯 (1.60 g, 5.98 mmol)的DCM/MeOH (10 mL/5 mL)溶液中加入哌𠯤-1-羧酸苄酯 (1.58 g, 7.18 mmol)和乙酸 (0.5 mL)。將混合物在室溫攪拌2 h。然後0 ℃下加入NaBH(OAc) 3(2.53 g, 11.96 mmol)。混合物用水 (10 mL)溶液稀釋，並用 DCM (10 mL x 3)萃取。合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並通過矽膠柱色譜層析 (PE:EA = 3:1)純化，得到2-(2-(4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 472.2.
步驟6： 4-(2-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 向2-(2-(4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羧酸三級丁酯 (800 mg, 1.7 mmol)的1,4-二氧六環 (4 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (2 mL)，在30 ℃下攪拌1小時。反應完成後，加入Na 2CO 3(5 mL)水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮得到4-(2-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 372.2.
步驟7： 4-(2-(7-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-(7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (270 mg, 粗品)的DMF (4 mL)溶液中加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲酸五氟苯酯 (314 mg, 0.73 mmol)和DIEA (377 g, 2.92 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，反應結束後，加入水 (10 mL)淬滅反應，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，有機相乾燥濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到4-(2-(7-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 618.2.
步驟8： 1-(2-甲氧基-5-(2-(2-(哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-(2-(7-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (370 mg, 0.6 mmol)的異丙醇 (3 mL)和四氫呋喃 (1 mL)的溶液中加入Pd/C (64 mg)，在30 ℃下攪拌16小時。過濾並濃縮混合物，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 15:1)純化，得到1-(2-甲氧基-5-(2-(2-(哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 484.3.
步驟9： 3-(2-((1-((4-(2-(7-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(2-(2-(哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (70 mg, 0.14 mmol)和鈦酸四異丙酯(170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到 3-(2-((1-((4-(2-(7-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 655.9.
步驟10： 1-(5-(2-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(2-(7-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-2-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.11 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (84 mg, 0.55 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(2-(2-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-7-氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 505.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.50 - 7.41 (m, 1H), 7.39 - 7.30 (m, 3H), 7.18 - 7.12 (m, 2H), 4.48 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 4.31 - 4.24 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.67 - 3.49 (m, 7H), 3.46 - 3.46 - 3.34 (m, 2H), 2.69 - 2.60 (m, 3H), 2.44 - 2.13 (m, 11H), 2.12 - 2.06 (m, 2H), 1.95 - 1.87 (m, 2H), 1.69 - 1.62 (m, 4H), 1.62 - 1.41 (m, 7H), 1.39 - 1.32 (m, 2H), 0.65 - 0.59 (m, 2H), 0.42 - 0.36 (m, 2H).
實施例44： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.096 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (60 mg, 0.125 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-(((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 654.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.067 mmol)溶於DMF (2 mL)中，加入CsF (102 mg, 0.67 mmol)，於室溫下反應1小時。反應完成後，用H 2O (10 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 1006.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.09 (s, 1H), 8.73 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 7.94 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.88 - 7.81 (m, 0.5H), 7.48 - 7.38 (m, 1.5H), 7.36 - 7.29 (m, 3H), 7.24 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 4.39 (dd, J= 23.8, 12.0 Hz, 1H), 4.28 - 4.10 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.85 - 3.75 (m, 1H), 3.69 - 3.33 (m, 10H), 2.87 - 2.57 (m, 3H), 2.47 - 2.14 (m, 13H), 2.12 - 1.93 (m, 3H), 1.74 - 1.60 (m, 6H), 1.55 - 1.22 (m, 8H), 1.11 - 1.01 (m, 3H), 0.56 - 0.46 (m, 2H), 0.32 - 0.17 (m, 2H).
實施例45： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-氯萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-氯-7-(8-氯萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (135 mg, 0.24 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液中加入Cs 2CO 3(235 mg, 0.72 mmol)和1,1-環丙烷二甲醇 (49 mg, 0.48 mmol)。將混合物在90 ℃下攪拌16小時。反應完成後，用水 (5 mL)和乙酸乙酯 (5 mL x 2)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (PE:EA = 1:1)，得到3-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 620.2.
步驟2： 3-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (115 mg, 0.19 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (98 mg, 0.23 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (3 mL)和碳酸氫鈉溶液 (3 mL)淬滅反應, 並用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 618.1.
步驟3： 3-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-氯萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.13 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (77 mg, 0.16 mmol)和鈦酸四異丙酯 (185 mg, 0.65 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(83 mg, 0.39 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 542.9.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-氯萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(7-(8-氯萘-1-基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (88 mg, 0.08 mmol)中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (6 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-氯萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 983.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 8.19 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 8.09 (d, J= 7.4 Hz, 1H), 7.75 - 7.68 (m, 1H), 7.66 - 7.54 (m, 3H), 7.35 - 7.29 (m, 2H), 7.25 - 7.21 (m, 1H), 4.46 - 4.36 (m, 2H), 4.32 - 4.24 (m, 2H), 3.84 - 3.74 (m, 1H), 3.68 - 3.43 (m, 8H), 2.82 - 2.65 (m, 3H), 2.42 - 2.23 (m, 10H), 2.21 (s, 3H), 2.09 -1.97 (m, 3H), 1.70 - 1.61 (mi, 6H), 1.54 - 1.45 (m, 3H), 1.42 - 1.36 (m, 2H), 1.27 - 1.21 (m, 1H), 1.12 - 0.93 (m, 5H), 0.64 - 0.59 (m, 2H), 0.41 - 0.36 (m, 2H).
實施例46： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (72 mg, 0.14 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-(((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 664.3.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (45 mg, 0.03 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (23 mg, 0.15 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] +=513.7. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.74 (s, 1H), 7.87 - 7.81 (m, 1H), 7.64 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.55 - 7.52 (m, 1H), 7.44 -7.40 (m, 1H), 7.33 - 7.28 (m, 2H), 7.18 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.55 - 4.35 (m, 2H), 3.83 - 3.76 (m, 2H), 3.74 -3.58 (m, 7H), 3.56 - 3.46 (m, 2H), 3.43 - 3.35 (m, 3H), 2.90 - 2.83 (m, 2H), 2.58 - 2.41 (m, 6H), 2.24 - 2.12 (m, 2H), 1.91 - 1.81 (m, 4H), 1.76 - 1.66 (m, 2H), 1.64 - 1.44 (m, 6H), 1.40 -1.26  (m, 3H), 1.24 - 0.86 (m, 5H), 0.66 - 0.54  (m, 2H), 0.46 - 0.32 (m, 2H).
實施例47： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.81 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)溶液和水溶液 (1 mL)中加入2-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷 (332 mg, 0.97 mmol)和Cs 2CO 3(784 mg, 2.4 mmol)，並在N 2氛圍下加入CataCXium A Pd G3 (118 mg, 0.16 mmol)。將混合物在85 ℃下攪拌16小時。反應完成後，用水 (5 mL)和乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，無水Na 2SO 4乾燥，過濾並在真空下濃縮。經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 50:1)，得到 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 673.4.
步驟2： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.59 mmol)的二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (304 mg, 0.71 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (3 mL)和碳酸氫鈉溶液 (3 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 30:1)純化，得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 671.3.
步驟3： 3-(2-(((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-(((1-醛基環丙基)甲基)胺基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.15 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (90 mg, 0.18 mmol)和鈦酸四異丙酯 (213 mg, 0.75 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(95 mg, 0.45 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-(((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 579.4.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)胺基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.086 mmol)中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)胺基)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1012.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.51 (s, 1H), 9.84 (s, 1H), 8.79 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 7.91-7.80 (m, 0.5H), 7.66 - 7.61 (m, 2H), 7.57 - 7.49 (m, 1.5H), 7.41 - 7.32 (m, 2H), 7.25 - 7.23 (m, 1H), 7.10 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 6.95 - 7.91 (m, 1H), 4.36 - 4.27 (m, 2H), 3.80 - 3.70 (m, 1H), 3.65 -3.40 (m, 10H), 3.33 -3.18 (m, 3H), 2.81 - 2.66 (m, 3H), 2.47 - 2.16 (m, 10H), 2.11 - 2.01 (m, 2H), 1.70 - 1.62 (m, 5H), 1.60 - 1.22 (m, 8H), 1.16 - 0.94 (m, 4H), 0.87 - 0.80 (m, 3H), 0.56 - 0.46 (m, 2H), 0.33 - 0.15 (s, 1H).
實施例48： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氟苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 向4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯鹽酸鹽 (100 mg, 0.26 mmol)的DMSO (3 mL)溶液中加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲酸五氟苯酯 (114 mg, 0.27 mmol)和DIEA (101 mg, 0.78 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時，並通過反向柱色譜法純化，得到4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 620.5.
步驟2： 1-(2-氟-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (160 mg, 0.25 mmol)的THF (10 mL)溶液中加入Pd/C (30 mg)，室溫下攪拌16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮得到1-(2-氟-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 486.3.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲基氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁基酯 (100 mg, 0.119 mmol)的THF (5 mL)溶液中，加入1-(2-氟-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (69 mg, 0.14 mmol)和鈦酸四異丙酯 (507 mg, 1.78 mmol)，在70 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入MeOH (5 mL), 分批加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 102:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 656.9.
步驟4： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.099 mmol)的DMF (3 mL)的溶液中加入氟化銫 (75 mg, 0.49 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。加入水並用乙酸乙酯萃取，有機相用無水硫酸鈉乾燥，濃縮得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1155.1.
步驟5： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氟苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-氟苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.086 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液濃縮並通過高效液相色譜法純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氟苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 506.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.51 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.04 - 7.93 (m, 1H), 7.51 - 7.43 (m, 2H), 7.40 - 7.33 (m, 3H), 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.49 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 4.32 - 4.22 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.75 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 3.67 - 3.49 (m, 7H), 2.75 - 2.65 (m, 3H), 2.43 - 2.16 (m, 11H), 2.04 (s, 2H), 1.67 (s, 6H), 1.52 - 1.27 (m, 7H), 1.12 - 0.96 (m, 4H), 0.67 - 0.59 (m, 2H), 0.44 - 0.36 (m, 2H).
實施例49： 1-(5-(9-((4-((1-(((7-(2-胺基苯並[d]噻唑-4-基)-4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮甲酸鹽
步驟1： (4-溴苯並[d]噻唑-2-基)胺基羧酸三級丁酯的製備 向4-溴苯並[d]噻唑-2-胺 (4.00 g, 17.46 mmol)的無水二氯甲烷 (40 mL)溶液中加入DMAP (214 mg, 1.75 mmol)，降溫至0 ℃, 向反應液中滴加三乙胺 (3.53 g, 34.92 mmol)和二碳酸二三級丁酯 (5.72 g, 26.19 mmol)。混合物在氮氣保護下25 ℃反應4小時，加入水 (50 mL)淬滅，並用二氯甲烷 (50 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物用石油醚攪拌，過濾得到 (4-溴苯並[d]噻唑-2-基)胺基羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 272.9. 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.68 (s, 1H), 7.71 (d, J= 8.0 Hz , 1H), 7.59 (d, J= 7.6 Hz , 1H), 7.15 - 7.10 (m, 1H), 1.54 (s, 9H).
步驟2： (4-(1 H-萘並[1,8-de][1,3,2]二氮雜硼烷-2(3 H)-基)苯並[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯的製備 向 (4-溴苯並[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯 ( 3.50 g, 10.63 mmol)和2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)-2,3-二氫-1H-萘[1,8-de][1,3,2]二氮雜硼烷 (4.06 g, 13.82 mmol)的1,4-二氧六環 (35 mL)溶液中加入XPhos Pd G2 (104 mg, 1.06 mmol)和醋酸鉀 (3.13 g, 31.89 mmol)。混合物在氮氣保護下105 ℃反應16小時，加入水 (100 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 10:1)純化，得到 (4-(1 H-萘並[1,8-de][1,3,2]二氮雜硼烷-2(3 H)-基)苯並[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 417.1. 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 8.32 (s, 1H), 7.87 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.67 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 1H), 7.19 (s, 2H), 7.12 (t, J= 8.0 Hz, 2H), 7.03 (d, J= 8.0 Hz, 2H), 6.43 (d, J= 7.2 Hz, 2H), 1.60 (s, 9H).
步驟3： (2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)硼酸的製備 將 (4-(1 H-萘並[1,8-de][1,3,2]二氮雜硼烷-2(3 H)-基)苯並[d]噻唑-2-基)胺基甲酸三級丁酯 (2.50 g, 6.01 mmol)的THF (25 mL)溶液降溫至0 ℃, 滴加鹽酸溶液 (5 N, 18 mL, 90.08 mmol)，室溫下反應16小時。反應結束後，加入水 (100 mL)淬滅反應，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化，得到 (2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)硼酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 295.0.
步驟4： 3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.81 mmol)和 (2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)硼酸 (286 mg, 0.97 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入PdCl 2(dtbpf) (52 mg, 0.08 mmol)和碳酸銫 (528 mg, 1.62 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-H] -= 706.0.
步驟5： 3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.42 mmol)的DCM (3 mL)溶液降溫至0 ℃，加入Dess-Martin試劑 (534 mg, 1.26 mmol)，室溫下反應0.5小時。反應結束後，加入水 (10 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 50:1)純化，得到3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-H] -= 704.1.
步驟6： 3-(2-((1-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.28 mmol) 和哌𠯤-1-羧酸苄酯 (75 mg, 0.34 mmol)的DCM (1 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (403 mg, 1.42 mmol)和醋酸 (0.1 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(180 mg, 0.85 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 455.8.
步驟7： 3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 H 2條件下，向3-(2-((1-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的甲醇 (1 mL)溶液中加入鈀碳 (200 mg)，室溫反應16小時。反應液經矽藻土過濾，濾液濃縮，得到3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯, 直接用於下一步反應。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 776.4.
步驟8： 3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-8-氟-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (65 mg, 0.083 mmol)和3-(3-(2,4-二氧基四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (52 mg, 0.126 mmol)的DCM (1 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (119 mg, 0.418 mmol)和醋酸(0.1 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(53 mg, 0.251 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H]+ = 586.4.
步驟9： 1-(5-(9-((4-((1-(((7-(2-胺基苯並[d]噻唑-4-基)-4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮甲酸鹽的製備 向3-(7-(2-((三級丁氧羰基)胺基)苯並[d]噻唑-4-基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (48 mg, 0.041 mmol)的1,4-二氧六環 (0.5 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((7-(2-胺基苯並[d]噻唑-4-基)-4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮甲酸鹽。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 971.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.05 (s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.77 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.47 - 7.39 (m, 2H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 4.70 (d, J= 12.8 Hz, 2H), 4.46 (s, 2H), 3.89 - 3.82 (m, 3H), 3.80 - 3.74 (m, 2H), 3.73 - 3.63 (m, 3H), 3.48 - 3.37 (m, 3H), 2.98 - 2.78 (m, 9H), 2.66 (s, 2H), 2.59-2.47 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.99 - 1.86 (m, 4H), 1.81 - 1.72 (m, 2H), 1.66 - 1.55 (m, 4H), 1.50 - 1.41 (m, 2H), 1.34 - 1.28 (m, 1H), 1.24 - 1.09 (m, 4H), 0.82 - 0.76 (m, 2H), 0.62 - 0.56 (m, 2H).
實施例50： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.148 mmol)和1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H, 3 H)-二酮 (90 mg, 0.178 mmol)的DCM (1 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (211 mg, 0.744 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(95 mg, 0.446 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4）純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 579.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (103 mg, 0.088 mmol)的1,4-二氧六環 (0.5 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1013.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.69 - 7.60 (m, 2H), 7.54 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.40 - 7.32 (m, 2H), 7.27 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.12 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.96 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 12.4 Hz, 2H), 4.35 - 4.22 (m, 2H), 3.82 - 3.69 (m, 1H), 3.64 - 3.48 (m, 7H), 2.77 - 2.70 (m, 2H), 2.42 - 1.98 (m, 15H), 1.70 -1.57 (m, 6H), 1.56 - 1.16 (m, 9H), 1.11 - 0.91 (m, 4H), 0.81 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 0.67 - 0.58 (m, 2H), 0.42 - 0.35 (m, 2H).
實施例51： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲基氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.148 mmol)和1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (86 mg, 0.178 mmol)的DCM (2 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (211 mg, 0.744 mmol)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(95 mg, 0.446 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 569.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (107 mg, 0.094 mmol)的1,4-二氧六環 (0.5 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 497.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.67 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.20 (m, 5H), 7.12 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.97 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.42 (d, J= 11.6 Hz, 2H), 4.35 - 4.22 (m, 2H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.64 - 3.44 (m, 7H), 2.87 - 2.58 (m, 3H), 2.43 - 2.14 (m, 15H), 2.03 (s, 3H), 1.71-1.58 (m, 6H), 1.55 - 1.21 (m, 8H), 1.14 - 0.90 (m, 4H), 0.81 (t, J= 7.2 Hz, 3H), 0.65 - 0.58 (m, 2H), 0.43 - 0.34 (m, 2H).
實施例52： 1-(5-(9-(4-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-(4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.120 mmol)和4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧基四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁醛 (68 mg, 0.144 mmol)的DCM/MeOH (0.5 mL/0.5 mL)的攪拌溶液中，加入乙酸 (0.1 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.360 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到3-(2-((1-(4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 658.0.
步驟2： 1-(5-(9-(4-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-(4-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丁基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (138 mg, 0.088 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (80 mg, 0.525 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (0.5 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-(4-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)丁基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 508.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 1H), 7.64 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.55 - 7.52 (m, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 4.50 - 4.41 (m, 1H), 4.34 - 4.26 (m, 1H), 4.21 - 4.16 (m, 2H), 3.93 (s, 1H), 3.81 - 3.70 (m, 1H), 3.65 - 3.51 (m, 7H), 2.89 - 2.81 (m, 2H), 2.77 - 2.70 (m, 2H), 2.26 - 2.19 (m, 2H), 1.89 -1.80 (m, 2H), 1.75 - 1.63 (m, 9H), 1.52 - 1.45 (m, 3H), 1.43 - 1.35 (m, 3H), 1.34 - 1.14 (m, 12H), 1.10 - 0.96 (m, 4H).
實施例53： 1-(5-(9-(2-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.117 mmol)和2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛 (62 mg, 0.140 mmol)的DCM (1 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (166 mg, 0.583 mmol)和醋酸 (0.1 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在室溫下加入NaBH(OAc) 3(74 mg, 0.350 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並通過矽膠柱色譜 (MeOH:DCM = 0 ~ 1:4)純化，得到3-(2-((1-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 643.9.
步驟2： 1-(5-(9-(2-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (78 mg, 0.061 mmol)的DMF (1 mL)的攪拌溶液中加入氟化銫 (46 mg, 0.303 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水(10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (0.5 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-(2-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 493.8. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.05 (s, 1H), 8.45 (s, 2H), 7.91 - 7.83 (m, 1H), 7.65 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.55 - 7.51 (m, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 2H), 7.24 - 7.18 (m, 1H), 4.79 - 4.70 (m, 2H), 4.51 - 4.35 (m, 2H), 4.16 - 4.05 (m, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 2H), 3.82 - 3.76 (m, 2H), 3.75 - 3.66 (m, 2H), 3.65 - 3.55 (m, 2H), 3.46 - 3.35 (m, 3H), 3.17 - 3.08 (m, 2H), 3.07 - 2.95 (m, 2H), 2.92 - 2.78 (m, 2H), 2.22 - 2.00 (m, 7H), 1.83 - 1.71 (m, 4H), 1.70 - 1.42 (m, 7H), 1.40 - 1.31 (m, 2H), 1.28 - 1.11 (m, 4H).
實施例54： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)硫代)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： ((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫醇乙酸酯的製備 將5,7-二氧-6-硫代[2.5]辛烷6-氧化物 (5.0 g, 33.8 mmol)溶解在DMSO (30 mL)中。加入硫代乙酸鉀 (7.7 g, 67.6 mmol)中。反應液在40 ℃下加熱5小時。反應完成後，加入水 (100 mL)，乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取。有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌並濃縮得 ((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫醇乙酸酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.35 (s, 2H), 3.02 (s, 2H), 2.38 (s, 3H), 0.61 - 0.47 (d, J= 7.2 Hz, 4H).
步驟2： ((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲基)硫醇乙酸酯的製備 將NaH (0.75 g, 18.7 mmol, 60%)懸浮於在THF (30 mL)中，冷卻至0 ℃，滴加 ((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫醇乙酸酯 (2.0 g, 12.5 mmol)的THF (5 mL)溶液。室溫反應2小時。反應完成後，加入氯化銨水溶液淬滅，乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取。有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌並濃縮得到 ((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲基)硫醇乙酸酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.44 (s, 2H), 3.04 (s, 2H), 2.33 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.52 - 0.47 (s, 4H), 0.04 (s, 6H).
步驟3： (1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲硫醇的製備 將 ((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲基)硫醇乙酸酯 (1.5 g, 5.46 mmol)溶於乙醇 (20 mL)中，加入氫氧化鈉水溶液 (2 N, 10 mL)室溫反應1小時。加入甲基三級丁基醚萃取去除雜質，水相用1 N鹽酸水溶液調節pH=3並用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取。將乙酸乙酯相用飽和氯化鈉溶液洗滌並濃縮得 (1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲硫醇。 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 3.53 (s, 2H), 2.54 (d, J= 7.9 Hz, 2H), 2.11 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 0.87 (s, 9H), 0.48 - 0.39 (m, 4H), 0.04 (m, 6H).
步驟4： 3-(2-(((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲基)硫代)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (0.5 g, 1.17 mmol)加入到(1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲硫醇 (0.41 g, 1.75 mmol)和碳酸銫 (0.76 g, 2.34 mmol)的THF (8 mL)混合液中,在25 ℃下反應2小時。反應結束後，加入水 (30 mL)並用乙酸乙酯 (30 mL x 2)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化，得到 3-(2-(((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲基)硫代)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 624.1.
步驟5： 3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲基)硫代)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (450 mg, 0.72 mmol)溶於THF (5 mL)中。0 ℃下加入TBAF (1 M, 1.3 mL)並繼續反應半小時。反應結束，加入水並用乙酸乙酯萃取。有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾濃縮經矽膠柱色譜法 (DCM:MeOH = 100:1)純化，得到3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 510.0.
步驟6： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.59 mmol)和 (2-氟-6-(甲氧基甲基氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (393 mg, 0.77 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (43 mg, 0.059 mmol)和碳酸銫 (391 mg, 1.2 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應6小時。反應液直接過濾減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 860.0.
步驟7： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-(羥基甲基)環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (280 mg, 0.325 mmol)的二氯甲烷 (5 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (207 mg, 0.48 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (5 mL)和碳酸氫鈉溶液 (5 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 858.0.
步驟8： 3-(2-(((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)硫代)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(((1-醛基環丙基)甲基)硫代)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (95 mg, 0.11 mmol)的二氯甲烷 (1.2 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (65 mg, 0.13 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-(((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)硫代)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1339.2.
步驟9： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)硫代)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲基)硫代)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.052 mmol)溶於DMF (2 mL)中，加入CsF (102 mg, 0.67 mmol)，於室溫下反應1小時。反應完成後，用H 2O (10 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)硫代)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 520.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.33 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.98 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.51 – 7.42 (m, 1H), 7.42 – 7.35 (m, 2H), 7.32 (d, J= 2.1 Hz, 1H), 7.22 – 7.07 (m, 2H), 4.48 (d, J= 12.3 Hz, 1H), 4.25 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.96 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.69 – 3.33 (m, 12H), 2.68 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.48 – 2.13 (m, 11H), 2.05 (d, J= 6.8 Hz, 2H), 1.61 – 1.70 (m, 5H), 1.57 – 1.39 (m, 5H), 1.35 – 1.17 (m, 3H), 1.15 – 0.93 (m, 4H), 0.69 – 0.55 (m, 2H), 0.42 – 0.30 (m, 2H).
實施例55： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.097 mmol)的二氯甲烷(1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮(56 mg, 0.12 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH =20:1)，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 645.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (60 mg, 0.047 mmol)溶於DMF (2 mL)中，加入CsF (71 mg, 0.47 mmol)，於室溫下反應1小時。反應完成後，用H 2O (10 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 495.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.37 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.94 - 7.84 (m, 1H), 7.48 - 7.33 (m, 2H), 7.31 - 7.28 (m, 3H), 7.24 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.11 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.49 (d, J= 10.9 Hz, 1H), 4.34 - 4.17 (m, 3H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.68 - 3.44 (m, 8H), 3.43 - 3.35 (m, 2H), 2.85 - 2.56 (m, 3H), 2.46 - 2.14 (m, 13H), 2.12 - 1.91 (m, 3H), 1.69 - 1.62 (m, 5H), 1.53 - 1.22 (m, 8H), 1.12 - 0.91 (m, 4H), 0.66- 0.54 (m, 2H), 0.42 - 0.32 (m, 2H).
實施例56： 1-(5-(9-(2-(4-((3-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(4-苄基哌𠯤-1-羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯的製備 將3-(甲氧基羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸 (3.0 g, 17.6 mmol)，1-苄基哌𠯤 (2.7 g, 18.51 mmol)和DIEA (6.8 g, 52.9 mmol)溶於DCM (80 mL)中，加入EDCI (4.38 g, 22.9 mmol)和HOBT (3.1 g, 22.9 mmol)。混合物室溫下反應2小時, 加入氯化銨水溶液淬滅反應，並用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物用乙酸乙酯 (20 mL)攪拌，過濾得到3-(4-苄基哌𠯤-1-羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 329.2.
步驟2： (3-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲醇的製備 將3-(4-苄基哌𠯤-1-羰基)雙環[1.1.1]戊烷-1-羧酸甲酯 (2.2 g, 6.70 mmol)的THF (50 mL)中冷卻至0 ℃，滴加1 M的LiAlH 4的THF溶液 (13.4 mL, 13.4 mmol)反應2小時。加入十水硫酸鈉淬滅反應，過濾，濾液濃縮得到 (3-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 287.3.
步驟3： 3-(2-((3-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (898 mg, 2.13 mmol)和 (3-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲醇 (900 mg, 3.15 mmol)加入到THF (15 mL)中，然後加入碳酸銫 (1710 mg, 5.25 mmol)，混合物在90 ℃下攪拌反應16小時。反應結束後，冷卻到室溫，加入水並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化，得到3-(2-((3-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 678.0.
步驟4： 3-(7-氯-8-氟-2-((3-(哌𠯤-1-基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((3-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.0 g, 1.47 mmol)溶入DCM (15 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸脂 (0.53 g, 3.68 mmol)。混合物在室溫反應1小時，加入MeOH (10 mL) 溶解，加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後將混合物濃縮並經矽膠柱層析純化(DCM:MeOH = 100:1 ~10:1)，得到3-(7-氯-8-氟-2-((3-(哌𠯤-1-基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 588.2.
步驟5： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-(哌𠯤-1-基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((3-(哌𠯤-1-基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯(330 mg, 0.56 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (374 mg, 0.73 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (41 mg, 0.056 mmol)和碳酸銫 (456 mg, 1.40 mmol)。混合物在氮氣保護下80 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~7:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-(哌𠯤-1-基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 469.8.
步驟6： 3-(2-((3-((4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((3-(哌𠯤-1-基甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.11 mmol)的二氯甲烷 (1.5 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛 (36 mg, 0.11 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(70 mg, 0.33 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (15 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-((3-((4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 684.4.
步驟7： 1-(5-(9-(2-(4-((3-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((3-((4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (65 mg, 0.048 mmol)的DMF (2.0 mL)攪拌溶液中加入CsF (51 mg, 0.33 mmol)，室溫下反應1小時。加入水 (10 mL), 乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (2.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-(2-(4-((3-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)雙環[1.1.1]戊烷-1-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 534.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.49 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.38 (dd, J= 7.2, 2.2 Hz, 2H), 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.27 (m, 4H), 3.90 (s, 1H), 3.79 - 3.70 (m, 1H), 3.66 – 3.49 (m, 7H), 3.28 – 3.21 (m, 2H), 2.77 - 2.70 (m, 2H), 2.44 - 2.09 (m, 13H), 1.72 - 1.61 (m, 12H), 1.53 - 1.40 (m, 4H), 1.33 - 1.21 (m, 5H), 1.12 - 0.98 (m, 4H).
實施例57： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.097 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (58 mg, 0.12 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 655.3.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.038 mmol)溶於DMF (2 mL)中，加入CsF (71 mg, 0.47 mmol)，於室溫下反應1小時。反應完成後，用H 2O (10 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1009.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.88 (dd, J= 8.0, 1.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.47 - 7.31 (m, 4H), 7.11 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.49 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 4.30 - 4.15 (m, 3H), 3.87 - 3.68 (m, 1H), 3.67 - 3.34 (m, 8H), 2.86 - 2.59 (m, 3H), 2.44 - 2.13 (m, 11H), 2.15 - 1.93 (m, 3H), 1.69 - 1.58 (m, 5H), 1.56 - 1.19 (m, 8H), 1.12 - 0.90 (m, 4H), 0.66- 0.54 (m, 2H), 0.47 - 0.30 (m, 2H).
實施例58： 1-(5-(9-((3-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (50 mg, 115.76 μmol)的1,2-二氯乙烷 (5 mL)中加入3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸三級丁酯 (30 mg, 138.91 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應0.5小時。 再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (49 mg, 213.52 μmol)繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，粗品通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)純化，得到8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 628.4.
步驟2： 1-(5-(9-((3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羧酸三級丁酯 (72.5 mg, 115.40 μmol)的二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入三氟乙酸 (1.8 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，將反應液倒至飽和碳酸鈉水溶液 (50 mL)中，用二氯甲烷 (50 mL x 2)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到1-(5-(9-((3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 528.3.
步驟3： 3-(2-((1-((8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (68.3 mg, 81.11 μmol)和1-(5-(9-((3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (51.4 mg, 97.33 μmol)的DCM (6 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (115.2 mg, 405.55 μmol)和冰醋酸 (48.7 mg, 811.10 μmol)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (51.6 mg, 243.33 μmol)，繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，粗品通過薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇=10:1)，得到3-(2-((1-((8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 677.2.
步驟4： 3-(2-((1-((8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-((1-((8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (55.9 mg, 41.28 μmol)的 N,N-二甲基甲醯胺 (5 mL)溶液中加入氟化銫 (63 mg, 412.80 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應1小時。反應結束後，將反應液倒至水 (50 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-((1-((8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1197.2.
步驟5： 1-(5-(9-((3-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向3-(2-((1-((8-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (40 mg, 41.28 μmol )中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。粗品先經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)純化，再經高效液相製備色譜純化得到1-(5-(9-((3-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 527.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.38 (dd, J= 7.0, 2.2 Hz, 2H), 7.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.41 - 4.19 (m, 3H), 3.88 (s, 1H), 3.79 - 3.71 (m, 1H), 3.67 - 3.44 (m, 7H), 3.02 - 2.91 (m, 2H), 2.78 - 2.71 (m, 2H), 2.63 - 2.55 (m, 2H), 2.32 - 2.19 (m, 2H), 2.16 - 2.02 (m, 4H), 1.76 - 1.17 (m, 19H), 1.16 - 0.82 (m, 5H), 0.64 - 0.51(m, 2H), 0.40 - 0.27 (m, 2H).
實施例59： 1-(5-(9-((5-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (100 mg, 231.52 μmol)的1,2-二氯乙烷(5 mL)中加入 2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (52 mg, 0.14 mmol)，在氮氣保護下25 ℃反應0.5小時。 再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (98 mg, 0.46 mmol)繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，粗品通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)純化，得到5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 614.4.
步驟2： 1-(5-(9-((2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (128.5 mg, 209.22 μmol)的二氯甲烷 (6 mL)溶液中加入三氟乙酸 (3 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，將反應液倒至飽和碳酸鈉水溶液 (100 mL)中，用二氯甲烷 (50 mL x 2)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到1-(5-(9-((2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 514.3.
步驟3： 3-(2-((1-((5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)和1-(5-(9-((2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (110 mg, 0.21 mmol)的DCM (15 mL)攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (253 mg, 0.89 mmol)和冰醋酸 (107 mg, 0.18 mmol)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (113 mg, 0.53 mmol)，繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，粗品通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 670.3.
步驟4： 3-(2-((1-((5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-((1-((5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (125.3 mg, 93.50 μmol)的 N,N-二甲基甲醯胺 (12 mL)溶液中加入氟化銫(142 mg, 935.00 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應1小時。反應結束後，將反應液倒至水 (50 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL )洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-((1-((5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 592.3.
步驟5： 1-(5-(9-((5-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向3-(2-((1-((5-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (112.8 mg, 93.50 μmol)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。粗品先通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)純化，再經高效液相製備色譜純化得到1-(5-(9-((5-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 520.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.0, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.38 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.17 (s, 1H), 4.47 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 4.37 - 4.20 (m, 3H), 3.91 (s, 1H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 3.68 - 3.45 (m, 7H), 3.29 - 3.21 (m, 3H), 3.16 - 3.06 (m, 1H), 2.77-2.71 (m, 2H), 2.64 - 2.53 (m, 4H), 2.49 - 2.41 (m, 3H), 2.34 - 2.17 (m, 2H), 1.72 - 1.59 (m, 6H), 1.55 - 1.21 (m, 9H), 1.11 - 0.92 (m, 4H), 0.61 - 0.50 (m, 2H), 0.48 - 0.36 (m, 2H).
實施例60： 1-(5-(9-((4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(2-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (50 mg, 57.33 μmol)和3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (25 mg, 57.33 μmol)的DCM (5 mL)攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (81 mg, 286.65 μmol)和冰醋酸 (5 mg, 83.33 μmol)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (36 mg, 172.00 μmol)，繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)純化，得到3-(2-(2-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 644.4.
步驟2： 3-(2-(2-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(2-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (58 mg, 45.18 μmol)的 N,N-二甲基甲醯胺 (5 mL)溶液中加入氟化銫 (69 mg, 451.84 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應1小時。反應結束後，將反應液倒至水 (50 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-(2-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 566.3.
步驟3： 1-(5-(9-((4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向3-(2-(2-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (52 mg, 45.18 μmol)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。所得粗品先通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)純化，再經高效液相製備色譜分離純化得到1-(5-(9-((4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)乙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 494.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.0, 6.1 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.38 (d, J= 7.8 Hz, 2H), 7.17 (s, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 3H), 4.31 (d, J= 12.0 Hz, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.79 - 3.53 (m, 8H), 2.80 - 2.67 (m, 4H), 2.37 - 2.25 (m, 4H), 2.25 - 1.87 (m, 4H), 1.72 - 1.60 (m, 6H), 1.60 - 1.18 (m, 11H), 1.17 - 0.83 (m, 5H).
實施例61： 1-(5-(9-(2-(4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)乙基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(2-(4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(哌𠯤-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 114.66 μmol)和2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙醛 (52 mg, 114.66 μmol)的DCM (10 mL)攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (163 mg, 573.30 μmol)和冰醋酸 (10 mg, 166.66 μmol)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (72 mg, 344.00 μmol)，繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (10 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)純化，得到3-(2-(2-(4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 651.4.
步驟2： 3-(2-(2-(4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(2-(4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (99 mg, 75.95 μmol)的 N,N-二甲基甲醯胺 (10 mL)溶液中加入氟化銫 (115 mg, 759.55 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應1小時。反應結束後，將反應液倒至水 (50 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-(2-(4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 573.3.
步驟3： 1-(5-(9-(2-(4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)乙基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向3-(2-(2-(4-(2-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)乙基)哌𠯤-1-基)乙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (91 mg, 75.95 μmol)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1.5 小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。所得粗品先通過薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)純化，再經高效液相製備色譜分離純化得到1-(5-(9-(2-(4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)乙基)哌𠯤-1-基)乙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1001.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.38 (dd, J= 7.4, 2.2 Hz, 2H), 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.51 - 4.38 (m, 3H), 4.31 (d, J= 11.8 Hz, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.80 - 3.69 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 7H), 3.29 - 3.21 (m, 2H), 2.80 - 2.64 (m, 5H), 2.49 - 2.40 (m, 4H), 2.37 - 2.16 (m, 6H), 1.68 - 1.62 (m, 5H), 1.53 - 1.40 (m, 4H), 1.36 - 1.19 (m, 6H), 1.13 - 0.99 (m, 4H).
實施例62： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑林-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-溴-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (400 mg, 0.74 mmol)和2-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷 (304 mg, 0.89 mmol)的1,4-二氧六環 (6 mL)和H 2O (1.2 mL)的混合溶液中加入RuPhos Pd G3 (62 mg, 0.074 mmol)和碳酸銫 (726 mg, 2.22 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時。反應液直接過濾減壓濃縮。濃縮物通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 30:1)純化, 得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 673.4.
步驟2： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.30 mmol)的二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (153 mg, 0.36 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (5 mL)和碳酸氫鈉溶液 (5 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物通過矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 50:1)純化，得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 671.3.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.13 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (131 mg, 0.26 mmol)和鈦酸四異丙酯 (185 mg, 0.65 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(83 mg, 0.39 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品通過矽膠柱層析 (DCM/MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1156.6.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑林-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑林-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.086 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)中，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑林-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 506.8. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.51 (s, 1H), 9.87 (s, 1H), 7.78 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.69 - 7.59 (m, 2H), 7.54 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.41 - 7.32 (m, 2H), 7.27 - 7.17 (m, 2H), 7.11 (d, J= 7.0 Hz, 1H), 6.88 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.31 - 4.17 (m, 4H), 3.81 - 3.70 (m, 1H), 3.63 - 3.40 (m, 7H), 3.30 - 3.22 (m, 2H), 2.77 - 2.70 (m, 2H), 2.46 - 2.11 (m, 12H), 2.07 - 1.97 (m, 2H), 1.73 - 1.60 (m, 6H), 1.54 - 1.20 (m, 8H), 1.10 - 0.98 (m, 3H), 0.79 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 0.65 - 0.57 (m, 2H), 0.42 - 0.33 (m, 2H).
實施例63： 1-(5-(4-(2-((1-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-4-羥基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-(甲苯磺醯基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-羥基乙基)哌啶-1-甲酸苄酯 (0.5 g, 1.9 mmol)的DCM (15 mL)溶液中加入DMAP (23 mg, 0.19 mmol)和三乙胺 (0.96 g, 5.7 mmol)。將混合物在0 ℃攪拌5分鐘。然後加入TsCl (0.44 g, 2.25 mmol)並在室溫攪拌過夜。反應液濃縮並通過矽膠柱色譜法 (PE:EA = 100:1 ~ 1:1)純化得到4-(2-(甲苯磺醯基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 418.1.
步驟2： 4-((2-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 將4-羥基-4-(羥基甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (0.3 g, 1.3 mmol)溶於THF (20 mL)中，加入NaH (62 mg, 1.56 mmol, 60%)，在冰水浴至室溫下攪拌1小時。加入4-(2-(甲苯磺醯基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (0.6 g, 1.44 mmol)，並在60 ℃攪拌過夜。反應液冷卻至0 ℃，加入NH 4Cl (100 mL)水溶液淬滅，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取。將合併的有機相用鹽水 (100 mL x 3)洗滌，經無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮並通過矽膠柱色譜法 (PE:EA = 100:1 ~1:1)純化得到4-((2-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H-100] += 377.3.
步驟3： 4-羥基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-((2-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-羧酸三級丁酯 (0.45 g, 0.94 mmol)的THF (50 mL)溶液中加入Pd/C (100 mg, 10%)。室溫下反應16 h。將混合物過濾，濾液濃縮，得到4-羥基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 343.3.
步驟4： 4-((2-(1-(4-氯-3-(2, 4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-羥基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (220 mg, 0.64mmol)的DMF (10 mL)溶液中，加入4-氯-3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (291 mg, 0.67 mmol)和DIEA (248 mg, 1.92 mmol)，在室溫下反應2小時。加入水 (30 mL)並用乙酸乙酯 (30 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~20:1)純化，得到4-((2-(1-(4-氯-3-(2, 4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H-100] += 493.2.
步驟5： 1-(2-氯-5-(4-(2-((4-羥基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((2-(1-(4-氯-3-(2, 4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-羧酸三級丁酯 (190 mg, 0.32 mmol)的1,4-二氧六環 (3 mL)溶液中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (1.5 mL)，室溫下攪拌1小時，反應液直接減壓濃縮得到1-(2-氯-5-(4-(2-((4-羥基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 493.2.
步驟6： 3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-醛基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-(2-((4-羥基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (80 mg, 0.16 mmol)和鈦酸四異丙酯 (500 mg, 1.8 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 660.0.
步驟7： 1-(5-(4-(2-((1-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-4-羥基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-羥基哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (25 mg, 0.019 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (14 mg, 0.095 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(4-(2-((1-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-4-羥基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 509.7. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.07 (s, 1H), 8.41 (br, 2H), 7.90 - 7.83 (m, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.40 - 7.30 (m, 3H), 7.20 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.73 - 4.65 (m, 4H), 4.60 - 4.51 (m, 4H), 4.46 - 4.37 (m, 2H), 3.96-3.89 (m, 2H), 3.84 - 3.76 (m, 4H), 3.66 - 3.58 (m, 2H), 3.49 - 3.43 (m, 2H), 3.37 (s, 1H), 3.23 - 3.11 (m, 4H), 2.89 - 2.82 (m, 2H), 2.08 - 1.89 (m, 6H), 1.81 - 1.59 (m, 5H), 1.49 - 1.43 (m, 2H), 1.16 - 1.05 (m, 2H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.90 - 0.82 (m, 2H).
實施例64： 1-(5-(9-(2-(4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧基)乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基二甲醇的製備 在冰水浴下，向雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二羧酸二甲酯 (1 g, 4.4 mmol)THF (10 mL)的溶液中加入LAH (22 mL, 22.1 mmol, 1 M)，室溫反應2小時。在混合物加入十水硫酸鈉，過濾，濃縮得到雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基二甲醇。
步驟2： 雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二甲醛的製備 在乾冰丙酮浴下，將雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基二甲醇 (1 g, 5.87 mmol)溶於二氯甲烷 (10 mL)中，並加入到草醯氯 (1.5 g, 11.75 mmol)和二甲基亞碸 (2.3 g, 29.35 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液中，反應1小時後加入三乙胺 (5.9 g, 58.7 mmol)，繼續攪拌15分鐘後升至室溫。加入稀鹽酸 (1 N, 50 mL)並用二氯甲烷萃取，有機相再用飽和碳酸氫鈉溶液萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮得到雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二甲醛。
步驟3： 1,4-雙(2-甲氧基乙烯基)雙環[2.2.2]辛烷的製備 在冰水浴下，向(甲氧基甲基)三苯基氯化膦 (7.2 g, 21 mmol) DMF (50 mL)的溶液中加入NaH (0.84 g, 21 mmol, 60%)，室溫反應0.5小時。然後滴加雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二甲醛 (1 g, 6 mmol)的DMF (10 mL)溶液，室溫反應3小時。反應完畢，加入H 2O (100 mL)，並用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (PE:EA=10:1)，得到1,4-雙(2-甲氧基乙烯基)雙環[2.2.2]辛烷。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 223.3.
步驟4： 2,2'-(雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基)二乙醛的製備 向1,4-雙(2-甲氧基乙烯基)雙環[2.2.2]辛烷 (0.45 g, 2 mmol)THF (6 mL)的溶液中加入稀鹽酸(3 mL, 1 N)，室溫反應過夜。加入H 2O (20 mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮得到2,2'-(雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基)二乙醛。
步驟5： 2,2’-(雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基)雙(乙烷-1-醇)的製備 向2,2'-(雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基)二乙醛 (0.4 g, 2 mmol)甲醇 (20 mL)的溶液中加NaBH 4(378 mg, 10 mmol)，反應在室溫下攪拌2小時。加入H 2O (20 mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮得到2,2’-(雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基)雙(乙烷-1-醇)。
步驟6： 3-(7-氯-8-氟-2-(2-(4-(2-羥基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3, 8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (414 mg, 0.97 mmol)和2,2’-(雙環[2.2.2]辛烷-1,4-二基)雙(乙烷-1-醇) (230 mg, 1.16 mmol)加入到THF (30 mL)中，然後加入碳酸銫 (0.94 g, 2.9 mmol)，混合物在80 ℃下反應16小時。反應結束後，加入水 (50 mL)並用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化，得到3-(7-氯-8-氟-2-(2-(4-(2-羥基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3, 8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 590.3.
步驟7： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(4-(2-羥基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-(2-(4-(2-羥基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (210 mg, 0.35 mmol)和 (2-氟-6-(甲氧基甲基氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (274 mg, 0.53 mmol)的1,4-二氧六環 (8 mL)和H 2O (2 mL)的混合溶液中加入cataCXium A Pd G3 (26 mg, 0.035 mmol)和碳酸銫 (290 mg, 0.89 mmol)。混合物在氮氣保護下100 ℃反應過夜。反應液直接過濾減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(4-(2-羥基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 940.9.
步驟8： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(4-(2-氧乙基)雙環[2.2.2]辛-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(4-(2-羥基乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.21 mmol)的二氯甲烷 (10 mL)溶液中加入Dess-Martin試劑 (108 mg, 0.26 mmol)。將混合物在室溫下攪拌1小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (3 mL)和碳酸氫鈉溶液 (3 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化, 得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(4-(2-氧乙基)雙環[2.2.2]辛-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 938.9.
步驟9： 3-(2-(2-(4-(2-(9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-(4-(2-氧乙基)雙環[2.2.2]辛-1-基)乙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (120 mg, 0.13 mmol)的二氯甲烷 (5 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮鹽酸鹽 (62 mg, 0.15 mmol)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.6 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (25 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 20:1)，得到3-(2-(2-(4-(2-(9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 664.0.
步驟10： 1-(5-(9-(2-(4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧基)乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(2-(4-(2-(9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (125 mg, 0.094 mmol)溶於DMF (5 mL)中，加入CsF (72 mg, 0.47 mmol)，於室溫下反應1小時。反應完成後，用H 2O (10 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-(2-(4-(2-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧基)乙基)雙環[2.2.2]辛烷-1-基)乙基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 513.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.17 (br, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 2H), 7.17 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 4.53 - 4.22 (m, 4H), 3.92 (s, 1H), 3.82 - 3.71 (m, 1H), 3.69 - 3.43 (m, 8H), 2.78 - 2.70 (m, 2H), 2.35 - 2.15 (m, 6H), 1.71 - 1.60 (m, 4H), 1.55 (t, J= 7.2 Hz, 2H), 1.48 - 1.30 (m, 20H), 1.23 - 1.16 (m, 2H).
實施例65： 1-(5-(4-((2-(1-((1-(((7-(6-胺基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 6-溴- N, N-雙(4-甲氧基苄基)-4-甲基吡啶-2-胺的製備 在0 ℃，氮氣保護下，向含鈉氫 (16.04 g, 400.98 mmol, 60%)的四氫呋喃 (400 mL)懸濁液中緩慢加入6-溴-4-甲基吡啶-2-胺 (25.00 g, 133.66 mmol)的 N,N-二甲基甲醯胺 (10 mL)和四氫呋喃 (100 mL)的溶液，在氮氣保護下10 ℃反應1小時。再在0 ℃加入4-甲氧基氯苄 (62.80 g, 400.98 mmol)，繼續25 ℃反應18小時。反應結束後，將反應液倒至飽和氯化銨水溶液 (500 mL)中，用乙酸乙酯 (200 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (500 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到6-溴- N, N-雙(4-甲氧基苄基)-4-甲基吡啶-2-胺。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 427.1.
步驟2： N, N-雙(4-甲氧基苄基)-4-甲基-6-(三丁基錫)吡啶-2-胺的製備 在-65 ℃氮氣保護下，向含6-溴- N, N-雙(4-甲氧基苄基)-4-甲基吡啶-2-胺 (37.90 g, 23.40 mmol)的四氫呋喃 (200 mL)溶液中滴加正丁基鋰溶液 (1.6 M, 26.3 mL)，升溫至-45 ℃攪拌1小時，再降溫至-65 ℃滴加三正丁基氯化錫 (19.00 g, 58.50 mmol)。緩慢升至室溫，攪拌18小時。反應結束後，將反應液倒至飽和氯化銨水溶液 (500 mL)中，用乙酸乙酯 (150 mL x 2)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (200 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚:乙酸乙酯 = 20:1 ~ 10:1)，得到 N, N-雙(4-甲氧基苄基)-4-甲基-6-(三丁基錫)吡啶-2-胺。
步驟3： 3-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向7-溴-2,4,6-三氯-8-氟喹唑啉(3.5 g, 10.6 mmol)的無水二氯甲烷(40 mL)的溶液中，在-50 ℃下加入三乙胺 (3.212 g, 31.8 mmol)和3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (2.03 g, 9.54 mmol)，在-50 ℃下攪拌2小時。反應結束後，加入飽和氯化銨 (50 mL)，用二氯甲烷 (50 mL x 3)萃取，合併有機相，並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (石油醚:乙酸乙酯= 3:1)純化，得到3-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 506.9.
步驟4： 3-(7-溴-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-溴-2,6-二氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (2.50 g, 4.94 mmol)和 (1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲醇 (2.14 g, 9.88 mmol)的無水乙腈 (25 mL)的溶液中，加入1,4-二氮雜二環[2.2.2]辛烷 (0.28 g, 2.47 mmol)和碳酸銫 (3.22 mg, 9.88 mmol)，在25 ℃下攪拌18小時。反應結束後，將反應液倒至冰水 (100 mL)中, 用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚:四氫呋喃 = 200:1 ~ 20:1)，得到3-(7-溴-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 685.0.
步驟5： 3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-溴-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (2.01 g, 2.93 mmol)和 N, N-雙(4-甲氧基苄基)-4-甲基-6-(三丁基錫)吡啶-2-胺 (5.61 g, 8.79 mmol)的1,4-二氧六環 (80 mL)溶液中加入四三苯基膦鈀 (0.34 g, 0.23 mmol)，在氮氣保護下110 ℃反應18小時。反應結束後，降至室溫，加入飽和氟化鉀水溶液 (100 mL)並攪拌2小時，矽藻土過濾，濾液用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚:四氫呋喃 = 30:1~10:1)，得到3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 952.8.
步驟6： 3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (303 mg, 318.23 μmol)的冰醋酸 (15 mL)溶液中加入 N-碘代丁二醯亞胺 (107 mg, 477.35 μmol)，在氮氣保護下20 ℃反應2小時。反應結束後，將反應液倒至飽和碳酸鈉水溶液 (200 mL)中，用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚:四氫呋喃 = 100:1~10:1)，得到3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1078.6.
步驟7： 3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-3-碘-4-甲基吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (266 mg, 246.39 μmol)和六甲基磷醯三胺 (544 mg, 3038.20 μmol)的 N, N-二甲基乙醯胺 (10 mL)溶液中加入碘化亞銅 (579 mg, 3040.17 μmol)和2,2-二氟-2-(氟磺醯基)乙酸甲酯 (1459 mg, 7595.50 μmol)，在氮氣保護下80 ℃反應18小時。反應結束後，加入乙酸乙酯 (100 mL)稀釋攪拌15分鐘，經矽藻土過濾，濾液用飽和鹽水 (100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品經矽膠柱層析純化 (石油醚:四氫呋喃 = 25:1~5:1)，得到3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1020.8.
步驟8： 3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-2-((1-(((三級丁基二甲基矽基)氧)甲基)環丙基)甲氧基)-6-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (118 mg, 115.50 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL)溶液中加入氟化銫 (176 mg, 1157.00 μmol)，在氮氣保護下60 ℃反應18小時。反應結束後，將反應液倒至水 (100 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (100 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 906.7.
步驟9： 3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向含3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (165 mg, 115.50 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)溶液中加入Dess-Martin氧化劑 (74 mg, 173.55 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應1小時。反應結束後，將反應液倒至飽和碳酸氫鈉水溶液 (50 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇(NH 3) = 10:1)純化，得到3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 904.7.
步驟10： 3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯l)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (86 mg, 94.99 μmol)和1-(2-氯-5-(4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (65 mg, 136.27 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (147 mg, 517.20 mmol)和冰醋酸 (0.1 mL)，在氮氣保護下25 ℃反應2小時。再加入醋酸硼氫化鈉 (62 mg, 292.54 mmol)繼續25 ℃反應18小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，得到粗品3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯l)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1365.6.
步驟11：1-(5-(4-((2-(1-((1-(((7-(6-胺基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向3-(7-(6-(雙(4-甲氧基苄基)胺基)-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-6-氯-2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯l)哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (41 mg, 30.00 μmol)的二氯甲烷 (2 mL)溶液中加入三氟乙酸 (1 mL)和一水對甲苯磺酸 (57 mg, 299.68 μmol)，在25 ℃反應18小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。得到粗品先經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1%氨甲醇溶液)純化，再經高效液相製備色譜純化得到1-(5-(4-((2-(1-((1-(((7-(6-胺基-4-甲基-3-(三氟甲基)吡啶-2-基)-4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-6-氯-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 512.9. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.82 (s, 1H), 7.63 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.41 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.59 (s, 1H), 4.63 - 4.54 (m, 1H), 4.48 - 4.32 (m, 4H), 3.82 - 3.71 (m, 3H), 3.63 - 3.56 (m, 4H), 3.45 (t, J= 6.2 Hz, 2H), 3.28 - 3.25 (m, 1H), 3.18 - 3.05 (m, 3H), 2.91 - 2.77 (m, 3H), 2.55 - 2.45 (m, 2H), 2.44 (d, J= 1.3 Hz, 3H), 2.08 - 1.92 (m, 3H), 1.84 - 1.79 (m, 4H), 1.69 - 1.65 (m, 2H), 1.49 - 1.44 (m, 2H), 1.36 - 1.31 (m, 2H), 1.26 - 1.15 (m, 4H), 0.95 - 0.85 (m, 2H), 0.75 - 0.65 (m, 2H), 0.55 - 0.45 (m, 2H).
實施例66： 1-(5-(4-(2-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-(對甲苯磺醯氧基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-羥基乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (5 g, 19 mmol)的DCM (150 mL)溶液中加入DMAP (230 mg, 1.9 mmol)和三乙胺 (9.6 g, 57 mmol)。將混合物在0 ℃攪拌15分鐘。然後加入TsCl (4.4 g, 22.5 mmol)並在室溫攪拌過夜。反應液濃縮並經矽膠柱層析 (PE:EA = 100:1~1:1)純化得到4-(2-(對甲苯磺醯氧基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 418.1.
步驟2： 4-(羥基甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 將1-氧雜-6-氮雜螺[2.5]辛烷-6-羧酸三級丁酯 (1 g, 4.7 mmol)溶於MeOH (15 mL)中，加入對甲苯磺酸 (40 mg, 0.23 mmol)，在室溫下攪拌16小時。將反應液直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 100:1~1:1)純化得到4-(羥基甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 3.50 - 3.90 (m, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.24 (s, 3H), 3.14 (t, J= 11.6 Hz, 2H), 1.82 - 1.76 (m, 2H), 1.49 - 1.41 (m, 11H).
步驟3： 4-((2-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(羥基甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯 (0.34 g, 1.38 mmol)的THF (10 mL)溶液中加入NaH (66 mg, 1.65 mmol, 60%)，在冰水浴至室溫下反應1小時，然後加入4-(2-(對甲苯磺醯氧基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (637 mg, 1.52 mmol)，反應液在60 ℃下攪拌過夜。反應完成後，反應液直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到4-((2-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-Boc+H] += 391.3.
步驟4： 4-甲氧基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-((2-(1-((苄氧基)羰基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯 (230 mg, 粗品)的THF (10 mL)溶液中，加入Pd/C (25 mg, 10%)，在室溫下反應過夜。反應後，過濾，濾液濃縮得到4-甲氧基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。
步驟5： 4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-甲氧基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.39 mmol)的DMF (5 mL)溶液中，加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (205 mg, 0.47 mmol)和DIEA (151 mg, 1.17 mmol)，在室溫下反應2小時。反應液中加水 (10 mL)，然後用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化，得到4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-Boc+H] += 507.0.
步驟6： 1-(2-氯-5-(4-(2-((4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.21 mmol)的二氯甲烷 (3 mL)溶液中加入三氟乙酸 (1 mL)，反應液在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，反應液直接濃縮，所得粗品中加入DIEA，再減壓濃縮得到1-(2-氯-5-(4-(2-((4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 507.0.
步驟7： 3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-(2-((4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (60 mg, 0.12 mmol)和鈦酸四異丙酯 (506 mg, 1.8 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，反應體系降至0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，反應液中加入H 2O (5 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 10:1)，得到 3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 666.9.
步驟8： 1-(5-(4-(2-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (120 mg, 0.09 mmol)溶於DMF (1 mL)中，然後加入CsF (58 mg, 0.45 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(4-(2-((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 516.7. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.1, 5.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 1H), 7.41 - 7.28 (m, 3H), 7.20 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 4.66 - 4.33 (m, 6H), 3.80 - 3.63 (m, 7H), 3.45 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.36 (s, 1H), 3.20 (s, 3H), 2.89 - 2.72 (m, 5H), 2.56 - 2.42 (m, 2H), 2.35 - 2.25 (m, 2H), 1.89 - 1.69 (m, 8H), 1.62 - 1.47 (m, 5H), 1.35 - 1.27 (m, 2H), 1.23 - 1.05 (m, 2H), 0.76 - 0.68 (m, 2H), 0.56 - 0.48 (m, 2H).
實施例67： 1-(5-(4-((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙-1-醇的製備 向2-(哌啶-4-基)乙-1-醇 (1.5 g, 11.6 mmol)和4-甲氧基苯甲醛 (1.6 g, 11.6 mmol)的1,2-二氯乙烷 (28 mL)和甲醇 (14 mL)的混合液中加入乙酸 (0.5 mL)。將混合物在30 ℃下攪拌1小時。0 ℃下加入NaBH 3CN (1.8 g, 29.0 mmol)，室溫反應16小時。反應完畢，加入H 2O (30 mL)，並用乙酸乙酯 (30ml x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙-1-醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 250.2.
步驟2： 2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙基4-甲基苯磺酸鹽的製備 將2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙-1-醇 (1.9 g, 7.6 mmol)溶於氯仿 (60 mL)中，加入吡啶 (1.2 g, 15.2 mmol)和TsCl (2.2 g, 11.5 mmol)，在冰水浴至室溫下攪拌12小時。反應完成後，濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙基4-甲基苯磺酸鹽。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 404.1.
步驟3： 4-甲氧基-4-((2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 向4-(羥甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羧酸三級丁酯 (0.15 g, 0.61 mmol)的THF (5 mL)溶液中加入NaH (35 mg, 0.73 mmol, 60%)，在冰水浴至室溫下反應1小時，然後加入2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙基4-甲基苯磺酸鹽 (300 mg, 0.67 mmol)，反應液在60 ℃下攪拌過夜。反應完成後，反應液直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到4-甲氧基-4-((2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 477.3.
步驟4： 1-(4-甲氧基苄基)-4-(2-((4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶的製備 向4-甲氧基-4-((2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.33 mmol)的DCM (4 mL)溶液中加入TFA (2 mL)。將混合物在室溫下攪拌1小時，反應液直接濃縮得到1-(4-甲氧基苄基)-4-(2-((4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶，未進一步純化直接用於下一步反應。
步驟5： 1-(2-氯-5-(4-甲氧基-4-((2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向1-(4-甲氧基苄基)-4-(2-((4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶 (150 mg, 粗品)的DMSO (3 mL)溶液中，加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (160 mg, 0.37 mmol)和DIEA (130 mg, 0.96 mmol)，在室溫下反應2小時。反應液中加入水 (10 mL)並用乙酸乙酯(10 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化，得到1-(2-氯-5-(4-甲氧基-4-((2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 627.2.
步驟6： 1-(2-氯-5-(4-甲氧基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將1-(2-氯-5-(4-甲氧基-4-((2-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (200 mg, 0.32 mmol)溶於DCM (5 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸脂 (92 mg, 0.64 mmol)和DIEA (82 mg, 0.64 mmol)。混合物在室溫反應30分鐘，減壓濃縮，濃縮物加MeOH (5 mL)溶解，然後再在50 ℃反應30分鐘。反應結束後將混合物濃縮，經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化得到1-(2-氯-5-(4-甲氧基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 507.1.
步驟7： 3-(2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-甲氧基-4-((2-(哌啶-4-基)乙氧基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (60 mg, 0.12 mmol)和鈦酸四異丙酯 (506 mg, 1.8 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 666.9.
步驟8： 1-(5-(4-((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-(2-((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-4-甲氧基哌啶-4-基)甲氧基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.075 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (57 mg, 0.375 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(4-((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙氧基)甲基)-4-甲氧基哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1032.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.1, 5.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.53 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.44 - 7.39 (m, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.20 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.66 - 4.26 (m, 6H), 3.80 - 3.64 (m, 6H), 3.54 - 3.44 (m, 3H), 3.38 - 3.36 (m, 2H), 3.34 (s, 1H), 3.25 (s, 3H), 3.16 - 3.05 (m, 3H), 2.89 - 2.80 (m, 2H), 2.54 - 2.41 (m, 2H), 2.05 - 1.95 (m, 2H), 1.89 - 1.66 (m, 8H), 1.53 - 1.40 (m, 4H), 1.34 - 1.22 (m, 3H), 0.77 - 0.69 (m, 2H), 0.55 - 0.48 (m, 2H).
實施例68： 1-(5-(9-(3-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-(3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(哌啶-4-基甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.120 mmol)和3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙醛 (81 mg, 0.18 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.1 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(128 mg, 0.60 mmol)並攪拌2小時。將反應液濃縮並經矽膠柱色譜 (MeOH:DCM=0~1:4)純化，得到3-(2-((1-(3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 650.9.
步驟2： 1-(5-(9-(3-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-(3-(3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)丙基)哌啶-4-基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (72 mg, 0.06 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (42 mg, 0.28 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物中加入1,4-二氧六環 (0.5 mL)，然後邊攪拌邊加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-(3-(4-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)哌啶-1-基)丙基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 500.7. 1H NMR (400 MHz, MeOD) δ 9.00 (s, 1H), 7.90 - 7.82 (m, 1H), 7.64 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 7.23 - 7.17 (m, 1H), 4.68 - 4.52 (m, 2H), 4.40 - 4.27 (m, 2H), 3.84 - 3.63 (m, 8H), 3.50 - 3.35 (m, 3H), 3.15 - 3.06 (m, 2H), 2.91 - 2.78 (m, 2H), 2.57 - 2.33 (m, 2H), 2.25 - 2.11 (m, 2H), 1.96 - 1.75 (m, 8H), 1.63 - 1.42 (m, 9H), 1.37 - 1.12 (m, 9H).
實施例69： 1-(5-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)和1-(2-氯-5-(哌𠯤-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (90 mg, 0.27 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.1 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(113 mg, 0.53 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (MeOH:DCM=0~1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 582.4.
步驟2： 1-(5-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (166 mg, 0.14 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (108 mg, 0.71 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物中加入1,4-二氧六環 (0.5 mL)，然後邊攪拌邊加入HCl/二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 862.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.01 - 7.94 (m, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.56 - 7.53 (m, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.18 - 7.15 (m, 1H), 4.47 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.31 - 4.24 (m, 3H), 3.93 (s, 1H), 3.79 – 3.70 (m, 1H), 3.68 - 3.41 (m, 8H), 2.77 - 2.68 (m, 2H), 2.49 - 2.26 (m, 8H), 1.68 - 1.62 (m, 4H), 0.67 - 0.63 (m, 2H), 0.45 - 0.39 (m, 2H).
實施例70： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.15 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (144 mg, 30 mmol)和鈦酸四異丙酯 (2 13 mg, 0.75 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(95 mg, 0.45 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1136.8.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.076 mmol)溶於1,4-二氧六環 (1 mL)中，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 M, 0.5 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 496.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 9.85 (s, 1H), 7.78 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.38 - 7.29 (m, 3H), 7.25 - 7.17 (m, 3H), 7.14 - 7.08 (m, 1H), 6.87 - 6.90 (m, 1H), 4.19 - 4.29 (m, 4H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.61 - 3.39 (m, 8H), 2.80 - 2.64 (m, 3H), 2.41 - 2.24 (m, 10H), 2.36 - 2.16 (m, 4H), 2.13 - 1.94 (m, 2H), 1.71 - 1.62 (m, 6H), 1.57 - 1.36 (m, 6H), 1.34 - 1.18 (m, 3H), 1.13 - 0.94 (m, 4H), 0.80 (t, J= 7.4 Hz, 3H), 0.67 - 0.56 (m, 2H), 0.47 - 0.28 (m, 2H).
實施例71： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)和1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (70 mg, 0.14 mmol)的DCM/AcOH (1.0 mL/0.1 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.60 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (MeOH:DCM=0~1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1322.7.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (115 mg, 0.087 mmol)的DMF (2 mL)攪拌溶液中加入CsF (66 mg, 0.435 mmol)，在室溫下攪拌1 h。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3) 萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1022.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.34 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 7.97 (dd, J 1= 9.2 Hz, J 2= 2.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.50 - 7.44 (m, 1H),7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.34 - 7.31 (m, 1H), 7.20 - 7.14( m, 2H), 7.07 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.38 - 4.27 (m, 1H), 4.26 - 4.11 (m, 3H), 3.90 - 3.81 (m, 4H), 3.67 - 3.58 (m, 2H), 3.55 - 3.34 (m, 8H), 2.74 - 2.66 (m, 2H), 2.56 - 2.62 (m, 1H), 2.49 - 2.16 (m, 10H), 2.11 - 2.02 (m, 2H), 1.76 - 1.64 (m, 5H), 1.58 - 1.40 (m, 5H), 1.39 - 1.19 (m, 3H), 1.15 - 0.93 (m, 4H), 0.68 - 0.59 (m, 2H), 0.43 - 0.36 (m, 2H).
實施例72： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)的MeOH (1.0 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (136 mg, 0.27 mmol)和AcOH (0.1 mL)，混合溶液在25 ℃下攪拌2小時。然後在0 ℃下加入NaBH 3CN (34 mg, 0.54 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 664.0.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.075 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入CsF (57 mg, 0.375 mmol)，在室溫下攪拌1 h。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 513.8. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.11 (s, 1H), 7.96 (dd, J= 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.55 - 7.53 (m, 1H), 7.48 - 7.42 (m, 1H), 7.39 - 7.34 (m, 2H), 7.18 - 7.13 (m, 1H), 7.05 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.32 - 4.16 (m, 4H), 3.83 (s, 1H), 3.78 - 3.70 (m, 1H), 3.66 - 3.38 (m, 8H), 2.81 - 2.64 (m, 3H), 2.42 - 2.22 (m, 10H), 2.11 - 1.97 (m, 3H), 1.75 - 1.63 (m, 6H), 1.55 - 1.30 (m, 7H), 1.13 - 0.95 (m, 4H), 0.64 - 0.59 (m, 2H), 0.40 -0.35 (m, 2H).
實施例73： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.19 mmol)和1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮 (114 mg, 0.23 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (270 mg, 0.95 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(121 mg, 0.57 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1170.8.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.14 mmol)中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 513.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.33 (s, 1H), 9.91 (s, 1H), 7.82 - 7.72 (m, 2H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 7.32 - 7.30 (m, 1H), 7.29 - 7.27 (m, 1H), 7.26 - 7.21 (m, 1H), 7.14 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.92 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.31 - 4.19 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 3.65 - 3.53 (m, 3H), 3.52 - 3.37 (m, 7H), 2.72 - 2.64 (m, 2H), 2.49 - 2.08 (m, 13H), 2.06 - 1.99 (m, 2H), 1.72 - 1.62 (m, 6H), 1.53 - 1.37 (m, 5H), 1.32 - 1.23 (m, 2H), 1.11 - 0.94 (m, 4H), 0.71 (t, J= 7.3 Hz, 3H), 0.64 - 0.59 (m, 2H), 0.40 -0.35 (m, 2H).
實施例74： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.19 mmol)和1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (115 mg, 0.23 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (270 mg, 0.95 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(121 mg, 0.57 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z):  [M/2+H] += 587.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (170 mg, 0.14 mmol)中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1030.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 7.82 - 7.72 (m, 2H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 3H), 7.26 - 7.21 (m, 1H), 6.94 - 6.92 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.30 - 4.19 (m, 4H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 3.67 - 3.38 (m, 8H), 2.81 - 2.62 (m, 3H), 2.45 - 2.15 (m, 12H), 2.17 - 1.93 (m, 3H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.54 - 1.38 (m, 5H), 1.34 - 1.22 (m, 2H), 1.14 - 0.93 (m, 4H), 0.74 - 0.68 (m, 3H), 0.64 - 0.58 (m, 2H), 0.40 - 0.34 (m, 2H).
實施例75： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.19 mmol)和1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (111 mg, 0.23 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (270 mg, 0.95 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(121 mg, 0.57 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (MeOH:DCM=0~1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1154.8.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (155 mg, 0.13 mmol)中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 505.8. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 9.90 (s, 1H), 7.83 - 7.69 (m, 2H), 7.37 - 7.28 (m, 4H), 7.26 - 7.20 (m, 2H), 6.92 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.33 - 4.17 (m, 4H), 3.85 - 3.74 (m, 1H), 3.64 - 3.35 (m, 8H), 2.85 - 2.59 (m, 3H), 2.46 - 2.15 (m, 15H), 2.13 - 1.92 (m, 3H), 1.73 - 1.61 (m, 6H), 1.53 - 1.37 (m, 5H), 1.33 - 1.22 (m, 2H), 1.12 - 0.93 (m, 4H), 0.75 - 0.67 (m, 3H), 0.64 - 0.58 (m, 2H), 0.40 - 0.34 (m, 2H).
實施例76： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-溴-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.2 g, 2.23 mmol)和三異丙基((6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)矽烷 (1.3 g, 2.68 mmol)的1,4-二氧六環 (12 mL)和H 2O (2.4 mL)的混合溶液中加入PdCl 2(dtbpf) (291 mg, 0.446 mmol)和碳酸銫 (2.19 g, 6.69 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (20 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 30:1)純化，得到3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 825.3.
步驟2： 3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.5 g, 1.82 mmol)的DCM (10 mL)溶液降溫至0 ℃，然後加入Dess-Martin氧化劑 (2.32 g, 5.46 mmol)，室溫下反應2小時。反應結束後，加入飽和硫代硫酸鈉溶液 (10 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:EtOAc = 10:1)純化，得到3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 823.4.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)和1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (109 mg, 0.22 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (256 mg, 0.90 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(114 mg, 0.54 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1304.8.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (180 mg, 0.14 mmol)的DMF (2 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (106 mg, 0.70 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時。然後加H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 502.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.09 (s, 1H), 7.87 (d, J= 7.3 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.47 - 7.38 (m, 2H), 7.37 - 7.33 (m, 1H), 7.32 - 7.28 (m, 2H), 7.18 - 7.12 (m, 2H), 7.00 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.31 (d, J= 11.4 Hz, 1H), 4.25 - 4.16 (m, 3H), 3.84 (s, 3H), 3.62 - 3.51 (m, 5H), 3.49 - 3.40 (m, 5H), 2.70 - 2.65 (m, 2H), 2.42 - 2.19 (m, 11H), 2.12 - 1.95 (m, 3H), 1.76 - 1.64 (m, 6H), 1.55 - 1.40 (m, 5H), 1.31 - 1.23 (m, 2H), 1.11 - 0.96 (m, 4H), 0.64 - 0.58 (m, 2H), 0.40 - 0.34 (m, 2H).
實施例77： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)和1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (106 mg, 0.22 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (256 mg, 0.90 mmol)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH(OAc) 3(114 mg, 0.54 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1288.8.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (175 mg, 0.14 mmol)的DMF (2 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (106 mg, 0.70 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 494.8. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 7.87 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.47 - 7.38 (m, 2H), 7.32 (dd, J= 12.1, 5.0 Hz, 3H), 7.24 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.17 - 7.12 (m, 1H), 7.00 (d, J= 2.5 Hz, 1H),  4.34 - 4.15 (m, 4H), 3.86 - 3.73 (m, 1H), 3.58 - 3.38 (m, 8H), 3.30 - 3.20 (m, 2H), 2.80 - 2.66 (m, 2H), 2.47 - 2.22 (m, 10H), 2.21 (s, 3H), 2.12 - 1.96 (m, 3H), 1.76 - 1.63 (m, 6H), 1.54 - 1.38 (m, 5H), 1.33 - 1.21 (m, 2H), 1.11 - 0.94 (m, 4H), 0.64 - 0.58 (m, 2H), 0.40 - 0.34 (m, 2H).
實施例78： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)和1-(2-氯-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (136 mg, 0.27 mmol)的MeOH (1.5 mL)溶液中加入AcOH (0.15 mL)，混合溶液在30 ℃下攪拌2小時。然後在室溫下加入NaBH 3CN (34 mg, 0.54 mmol)並攪拌1小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1308.8.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.115 mmol)的DMF (2 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (87 mg, 0.575 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入1,4-二氧六環 (1 mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1008.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.09 (s, 1H), 7.87 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.71 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 1H), 7.47 - 7.35 (m, 3H), 7.30 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.18 - 7.11 (m, 1H), 7.00 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.30 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 4.25 - 4.13 (m, 3H), 3.80 - 3.69 (m, 1H), 3.64 - 3.39 (m, 8H), 3.29 - 3.25 (m, 2H), 2.82 - 2.62 (m, 3H), 2.44 - 2.18 (m, 10H), 2.04 (s, 2H), 1.76 - 1.62 (m, 6H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.34 - 1.22 (m, 2H), 1.11 - 0.92 (m, 4H), 0.64 - 0.58 (m, 2H), 0.40 - 0.34 (m, 2H).
實施例79： 1-(5-(4-(((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-(((1-(三級丁氧羰基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (300 mg, 0.63 mmol)的DCM (1 mL)溶液中加入TFA (1 mL)溶液，將混合物在25 ℃下攪拌2小時，減壓濃縮得到4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯，無需純化直接進行下一步。
步驟2： 4-(2-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯的製備 向4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (235 mg, 粗品)的DMF (3 mL)溶液中加入4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲酸五氟苯酯 (274 mg, 0.63 mmol)和DIEA (407 mg, 3.15 mmol)。將混合物在室溫下攪拌2小時，反應結束後，加入水 (10 mL)淬滅反應，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，有機相乾燥，濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到4-(2-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 624.3.
步驟3：1-(2-氯-5-(4-((甲基(2-(哌啶-4-基)乙基)胺基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將4-(2-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羧酸苄酯 (350 mg, 0.56 mmol)加入TFA (3 mL)溶液中，混合物在25 ℃下攪拌1小時後，減壓濃縮，粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到1-(2-氯-5-(4-((甲基(2-(哌啶-4-基)乙基)胺基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 489.9.
步驟4： 3-(2-((1-((4-(2-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-((甲基(2-(哌啶-4-基)乙基)胺基)甲基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (132 mg, 0.27 mmol)和鈦酸四異丙酯 (256 mg, 0.90 mmol)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入甲醇 (1 mL)和NaBH(OAc) 3(114 mg,0.54 mmol)，攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=15:1)純化，得到3-(2-((1-((4-(2-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 658.0.
步驟5： 1-(5-(4-(((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(2-(((1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.12 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (91 mg, 0.60 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時，反應完成後加H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入二氧六環 (1mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8M,1mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(4-(((2-(1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 508.8. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.1, 6.0 Hz, 1H), 7.62 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.55 - 7.51 (m, 1H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.55 - 4.35 (m, 2H), 4.32 - 4.22 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.82 - 3.69 (m, 1H), 3.67 - 3.48 (m, 6H), 3.10 - 2.66 (m, 7H), 2.45 - 2.13 (m, 6H), 2.12 - 2.05 (m, 5H), 1.83 - 1.74 (m, 3H), 1.68 - 1.63 (m, 4H), 1.57 (d, J= 11.8 Hz, 2H), 1.31 - 1.20 (m, 3H), 1.11 - 0.98 (m, 4H), 0.66 - 0.58 (m, 2H), 0.42 - 0.35 (m, 2H).
實施例80： 1-(5-(4-(2-(((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-(((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.17 mmol)的四氫呋喃 (1 mL)溶液中加入1-(2-氯-5-(4-(2-(甲基(哌啶-4-基甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (98 mg, 0.20 mmol)和鈦酸四異丙酯 (241 mg, 0.85 mmol)，將混合物在70 ℃下攪拌2小時後，0 ℃時加入甲醇 (1 mL)和NaBH(OAc) 3(108 mg, 0.51 mmol)，攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=15:1)純化，得到3-(2-((1-((4-(((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 658.0.
步驟2： 1-(5-(4-(2-(((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-(((2-(1-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)哌啶-4-基)乙基)(甲基)胺基)甲基)哌啶-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (135 mg, 0.10 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (76 mg, 0.50 mmol)，在30 ℃下攪拌1小時，反應完成後加H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入二氧六環 (1mL)和鹽酸/1,4-二氧六環 (8M, 1mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(4-(2-(((1-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌啶-4-基)甲基)(甲基)胺基)乙基)哌啶-1-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 508.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.90 (dd, J= 9.0, 5.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.45 - 7.33 (m, 3H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 4.72 - 4.54 (m, 4H), 4.40 (d, J= 11.7 Hz, 1H), 3.86 - 3.76 (m, 6H), 3.63 - 3.49 (m, 2H), 3.41 (s, 1H), 3.06 - 2.74 (m, 6H), 2.70 - 2.53 (m, 4H), 2.49 - 2.35 (m, 5H), 2.01 - 1.77 (m, 8H), 1.73 - 1.36 (m, 7H), 1.25 - 1.10 (m, 2H), 0.94 - 0.85 (m, 2H), 0.79 - 0.69 (m, 2H).
實施例81： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1：2-溴-6-氯-4-甲氧基苯胺的製備 將2-氯-4-甲氧基苯胺 (50.0 g, 0.32 mol)溶於DCM (500 mL)溶液中，0 ℃滴加溴素 (45.5 g, 0.29 mol)。室溫反應16 h。反應結束後，加Na 2S 2O 3水溶液 (60 mL)淬滅反應，用DCM (60mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 100:1)純化得到2-溴-6-氯-4-甲氧基苯胺。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 236.0.
步驟2： 1-溴-3-氯-2-碘-5-甲氧基苯的製備 0 ℃下將NaNO 2(23.5 g, 0.34 mol)，KI (29.0 g, 0.42 mol)的H 2O (300 mL)溶液加至2-溴-6-氯-4-甲氧基苯胺 (40 g, 0.17 mol)與對甲苯磺酸 (92.9 g, 0.54 mol)的乙腈 (2 L)溶液中常溫攪拌16小時。反應完成後加入碳酸氫鈉溶液 (300 mL)和硫代硫酸鈉溶液 (300 mL)淬滅反應。攪拌一小時後，用乙酸乙酯 (500 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE/ EtOAc = 20/1)純化得到1-溴-3-氯-2-碘-5-甲氧基苯。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) δ 7.12 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.98 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H).
步驟3： 3-溴-5-氯-4-碘苯酚的製備 0 ℃下向1-溴-3-氯-2-碘-5-甲氧基苯 (20 g, 0.057 mol)的DCM (200 mL)溶液中緩慢滴加BBr 3(1 M, 205 mL)，常溫攪拌4 h。反應完成後，加H 2O (100 mL)淬滅反應。Na 2CO 3溶液調節pH至8-9，DCM (100 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 10:1)純化得到3-溴-5-氯-4-碘苯酚。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-H] -= 330.7, 332.7.
步驟4： 3-溴-5-氯-4-環丙基苯酚的製備 向3-溴-5-氯-4-碘苯酚 (16.5 g, 0.05 mol)的1,4-二氧六環 (210 mL)和H 2O (70 mL)溶液中加入環丙基硼酸 (6.4 g, 0.075 mol)，Pd(dppf)Cl 2(1.8 g, 0.0025 mol)和K 3PO 4(38.2 g, 0.18 mol)，N 2保護下110 ℃反應16 h。反應完成後，加入H 2O (200 mL)，並用EtOAc (60mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，經高效液相色譜法製備純化混合物得到3-溴-5-氯-4-環丙基苯酚。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-H] -= 245.0, 247.0.
步驟5： 3-氯-4-環丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯酚的製備 將3-溴-5-氯-4-環丙基苯酚 (3.2 g, 12.93 mmol)，聯硼酸頻那醇酯(8.2 g, 32.33 mmol)，Pd(dppf)Cl 2(0.95 g, 1.30 mmol)，AcOK (3.8 g, 38.79 mmol)溶於1,4-二氧六環 (30 mL)中，110 ℃攪拌16 h，加入H 2O (30 mL)，用EtOAc (50mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮得到3-氯-4-環丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯酚，無需純化直接用於下一步。
步驟6： 3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (370 mg, 0.75 mmol)的1,4-二氧六環(6 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入3-氯-4-環丙基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)苯酚 (330 mg, 1.12 mmol)，cataCXium A Pd G3 (109 mg, 0.15 mmol)和碳酸銫 (734 mg, 2.25 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 50:1)純化，得到3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 626.2.
步驟7： 3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.16 mmol)的DCM (2 mL)溶液中加入TPAP (5.6 mg, 0.016 mmol)，NMO (41 mg, 0.35 mmol)，混合物常溫攪拌2小時，反應完全後，加入水 (10 mL)並用DCM (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 50:1)純化，得到3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 623.8.
步驟8： 3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.11 mmol)的DCM (1 mL)溶液中加入1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (79 mg, 0.16 mmol)，AcOH (0.1 mL)和鈦酸四異丙酯 (156 mg, 0.55 mmol)，在室溫下攪拌2小時。反應液降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(70 mg, 0.33 mmol)，室溫繼續反應4小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1089.3.
步驟9： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.06 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液濃縮並經高效液相色譜製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 989.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.03 (s, 1H), 7.40 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.34 - 7.27 (m, 2H), 6.95 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 6.78 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.59 (d, J= 12.0 Hz, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.73 - 3.58 (m, 7H), 3.49 - 3.36 (m, 2H), 2.90 - 2.77 (m, 2H), 2.67 - 2.35 (m, 9H), 2.31 (s, 3H), 2.19 - 2.10 (m, 2H), 1.89 - 1.81 (m, 3H), 1.81-1.70 (m, 4H), 1.63 - 1.56 (m, 3H), 1.53 - 1.40 (m, 3H), 1.34 - 1.26 (m, 3H), 1.21 - 1.10 (m, 3H), 0.74 - 0.68 (m, 2H), 0.67 - 0.56 (m, 2H), 0.53 - 0.47 (m, 2H), 0.13 - 0.01 (m, 2H).
實施例82： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.18 mmol)的DCM (1.5 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (134 mg, 0.27 mmol)，AcOH (0.1 mL)和鈦酸四異丙酯(68 mg, 0.90 mmol)，在室溫下攪拌2小時。反應液降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(114 mg, 0.54 mmol)，室溫繼續反應4小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=1305.8.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.11 mmol)的DMF (2 mL)溶液中加入CsF (8.97 mg, 0.55 mmol)，常溫攪拌半小時。加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。將濃縮得到的中間體溶於二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機層用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮，經高效液相色譜法製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙炔基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 503.2. 1H NMR(400 MHz, MeOD) δ: 8.98 (s, 1H), 7.81 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.53 - 7.47 (m, 1H), 7.43 (dd, J= 8.5, 2.1 Hz, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 2H), 7.31 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.15 (d, J= 2.6 Hz, 1H), 4.65 (d, J= 11.3 Hz, 1H), 4.58 - 4.45 (m, 2H), 4.35 (d, J= 11.1 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.79 - 3.61(m, 8H), 3.54 -3.43 (m, 2H), 2.80 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.69 - 2.36 (m, 9H), 2.20 -2.11 (m, 2H), 1.95 - 1.71 (m, 6H), 1.69 - 1.21 (m, 9H), 1.19 - 1.00 (m, 4H), 0.74 - 0.67 (m, 2H), 0.54 -0.42 (m, 2H).
實施例83： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.12 mmol)的DCM (1.0 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (90 mg, 0.18 mmol)，AcOH (0.1 mL)和鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.60 mmol)，在室溫下攪拌2小時。反應液降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，室溫繼續反應4小時。將混合物濃縮並經柱色譜 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [(M-Boc)/2+H] += 526.9.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (40 mg, 0.035 mmol)溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液濃縮並經高效液相色譜製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 504.7. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ: 7.83 (d, J= 9.2 Hz, 1H), 7.60 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 1H), 7.37 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.32 - 7.27 (m, 1H), 7.22 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.18 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.90 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.58 - 4.33 (m, 4H), 3.98 - 3.85 (m, 5H), 3.73 - 3.63 (m, 5H), 3.46-3.51(m, 2H), 2.86 - 2.79(m, 5H), 2.50 - 2.38 (m, 4H), 2.09 - 0.98 (m, 4H), 1.97 - 1.88 (m, 4H), 1.80 - 1.71(m, 2H), 1.66 - 1.53 (m, 4H), 1.53 - 1.45 (m, 2H), 1.35 - 1.24(m, 7H), 1.22 - 1.16 (m, 2H), 0.86 (t, J= 6.8 Hz, 3H), 0.81 - 0.73 (m, 2H), 0.64 - 0.52 (m, 2H).
實施例84： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基l-7-氟-3-羥基萘1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙酸甲酯的製備 將3-羥基-2-甲基丙酸甲酯 (3.60 g, 30.47 mmol)溶於二氯甲烷 (35 mL)中，0 ℃下加入三乙胺 (9.25 g, 91.42 mmol)和甲磺醯氯 (5.24 g, 45.71 mmol)，反應2小時。反應完畢，升至室溫，加入水 (50 mL)，乙酸乙酯萃取 (50 mL x 3)。合併的有機相用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品。將粗品溶於DMF (50 mL)中，加入碳酸鉀 (12.64 g, 91.42 mmol)和1-苄基哌𠯤 (10.74 g, 60.95 mmol)，將反應液加熱至85 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，反應液中加入水 (200 mL)，乙酸乙酯萃取 (100 mL x 3)。合併的有機相用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙酸甲酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 277.3.
步驟2： 3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇的製備 將3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙酸甲酯 (1.17 g, 4.23 mmol)溶於THF (10 mL)中，冰浴下加入DIBAL-H (12.69 mL, 12.69 mmol, 1M)，反應3小時。反應完畢，升至室溫，反應液中加入飽和酒石酸鈉鉀溶液 (100 mL)，乙酸乙酯萃取 (50 mL x 3)。合併的有機相用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 249.1.
步驟3： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (997 mg, 2.33 mmol)和3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇 (867 mg, 3.49 mmol)溶於THF (10 mL)中，加入Cs 2CO 3(1.14 g, 3.49 mmol)。將反應液加熱至90 ℃反應4 d。反應完畢，冷卻至室溫，反應液中加入水 (30 mL)，乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併的有機相用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮得粗產品，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 30:1)純化得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 640.3.
步驟4： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.47 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧基硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (288 mg, 0.56 mmol)的1,4-二氧六環 (3 mL)和H 2O (0.6 mL)的混合溶液中加入Ruphos Pd G3 (40 mg, 0.05 mmol)和磷酸鉀 (298 mg, 1.41 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時。反應液中加入水 (20 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，合併的有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 495.6.
步驟5： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (320 mg, 0.32 mmol)溶入DCM (3 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸酯 (139 mg, 0.97 mmol)和DIEA (125 mg, 0.97 mmol)。混合物在室溫反應1小時。反應液直接減壓濃縮，濃縮物中加入MeOH (3 mL)溶解，然後加熱到50 ℃反應10分鐘。反應結束後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH (NH 3) = 30:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 899.9.
步驟6： 3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.17 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (107 mg, 0.25 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.1 mL)攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(106 mg, 0.50 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 656.9.
步驟7： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基l-7-氟-3-羥基萘1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (104 mg, 0.08 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (60 mg, 0.40 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (0.5 mL)攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相色譜製備純化得到1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基l-7-氟-3-羥基萘1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 506.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.47 - 7.36 (m, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 7.19 - 7.11 (m, 2H), 4.51 - 4.40 (m, 2H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 4.12 - 4.01 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.63 - 3.44 (m, 8H), 2.68 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.44 - 2.24 (m, 8H), 2.23 - 2.09 (m, 3H), 2.08 - 1.87 (m, 3H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.54 - 1.40 (m, 5H), 1.34 - 1.22 (m, 4H), 1.13 - 0.94 (m, 7H).
實施例85： 1-(5-(9-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.095 mmol)和1-(2-氯-5-(3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (57.6 mg, 0.14 mmol)的DCM/AcOH (2 mL/0.1 mL)攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(50 mg, 0.24 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-((1-((9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 615.5.
步驟2： 1-(5-(9-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((9-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.057 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (83 mg, 0.55 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (0.5 mL)攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，然後用EtOAc (10 mL x 2)萃取。合併的有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 465.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.1, 5.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.8 Hz, 1H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.41 - 7.33 (m, 2H), 7.16 (d, J= 2.3 Hz, 1H), 4.50 (d, J= 11.6 Hz, 1H), 4.34 - 4.20 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.78 - 3.41 (m, 11H), 2.78 - 2.68 (m, 2H), 2.43 - 2.29 (m, 6H), 1.78 - 1.60 (m, 4H), 1.54 - 1.29 (m, 8H), 0.70 - 0.55 (m, 2H), 0.48 - 0.33 (m, 2H).
實施例86： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-((1 S,4 S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： (1 S,4 S)-5-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯的製備 向2,4,7-三氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶 (1 g, 3.96 mmol)的無水四氫呋喃(20 mL)的溶液中，在-70 ℃下加入DIEA (2.04 g, 15.84 mmol)和 (1 S,4 S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (0.67 g, 3.37 mmol)，在-70 ℃下攪拌2小時。反應結束後，加入飽和氯化銨水溶液 (30 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (石油醚:乙酸乙酯 = 2:1)純化，得到 (1 S,4 S)-5-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 414.1.
步驟2： (1 S,4 S)-5-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯的製備 向 (1 S,4 S)-5-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (500 mg, 1.21 mmol)和環丙烷-1,1-二基二甲醇 (247 mg, 2.42 mmol)的無水THF (10 mL)溶液中，加入無水碳酸銫 (798 mg, 2.42 mmol)，在25 ℃下攪拌16小時。反應結束後，倒入水中 (30 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，合併有機相，飽和氯化鈉 (50 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇 = 20:1)純化，得到 (1 S,4 S)-5-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 480.3.
步驟3： (1 S,4 S)-5-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向 (1 S,4 S)-5-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (350 mg, 0.73 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (487mg, 0.95 mmol)的1,4-二氧六環 (8 mL)和水 (1 mL)的混合溶液中，加入無水碳酸銫 (476 mg, 1.46 mmol)和cataCXium(R) A Pd G3 (53 mg, 0.073 mmol)。在氮氣保護下，85 ℃攪拌16小時。反應結束後，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經矽膠薄層層析 (二氯甲烷:甲醇 = 100:1~10:1)純化，得到 (1 S,4 S)-5-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 830.6.
步驟4： (1 S,4 S)-5-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，將 (1 S,4 S)-5-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (280 mg, 0.38 mmol)的二氯甲烷 (5 mL)溶液降溫至0 ℃，加入Dess-Martin試劑 (215 mg, 0.51 mmol)，在15 ℃下攪拌2小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉水溶液 (20 mL)，用二氯甲烷 (20 mL x 2)萃取，合併有機相，飽和氯化鈉 (30 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。所得粗品經矽膠薄層層析 (二氯甲烷:甲醇 = 100:1~20:1)純化，得到 (1 S,4 S)-5-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 828.7.
步驟5： (1 S,4 S)-5-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向 (1 S,4 S)-5-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.11 mmol)和1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (105 mg, 0.22 mmol)的二氯甲烷/AcOH (2.3 mL/0.2 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (156 mg, 0.55 mmol)，在25 ℃下攪拌2小時。混合物在0-5 ℃下加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (69 mg, 0.33 mmol)，繼續25 ℃反應3小時。反應液濃縮並經矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇 = 100:1~10:1, 0.1% NH 3)純化，得到 (1 S,4 S)-5-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 647.5.
步驟6： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-((1 S,4 S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向 (1 S,4 S)-5-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.077 mmol)的DMF (3 mL)溶液中加入CsF (59 mg, 0.39 mmol)，常溫攪拌1小時。加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用飽和氯化鈉水溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。將濃縮得到的中間體溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取。將合併的有機層用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮，經高效液相色譜製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-((1 S,4 S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z):  [M/2+H] += 497.3. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.09 (d, J= 19.7 Hz, 1H), 7.97 (dd, J= 9.0, 6.1 Hz, 1H), 7.49 - 7.42 (m, 1H), 7.38 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.24 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 7.19 - 7.10 (m, 1H), 5.18 (d, J= 21.9 Hz, 1H), 4.37 - 4.11 (m, 3H), 4.01 - 3.89 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.64 - 3.44 (m, 3H), 3.30 - 3.20 (m, 2H), 3.12 - 2.91 (m, 2H), 2.80 - 2.65 (m, 2H), 2.46 - 2.23 (m, 10H), 2.21 (s, 3H), 2.11 - 1.95 (m, 3H), 1.93 - 1.86 (m, 1H), 1.80 - 1.73 (m, 1H), 1.71 - 1.62 (m, 2H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.32 - 1.23 (m, 2H), 1.12 - 0.94 (m, 4H), 0.66 - 0.58 (m, 2H), 0.44 - 0.35 (m, 2H).
實施例87： 1-(5-(9-((3-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-6-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 6-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羧酸三級丁酯的製備 將3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羧酸三級丁酯 (66 mg, 0.33 mmol)加至3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (120 mg, 0.28 mmol)的1,2-二氯乙烷 (6 mL)溶液。將混合物在25 °C下攪拌1小時。0 ℃下加入NaBH 3CN (177 mg, 0.84 mmol)，室溫反應2小時。反應完畢，加入H 2O (15 mL)，用乙酸乙酯 (15 mL x 3)萃取。將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到6-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羧酸三級丁酯。 MS (ESI, m/z): [M+H] += 614.3.
步驟4： 1-(5-(9-((3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-6-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向6-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷-3-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.16 mmol)的1,4-二氧六環 (3 mL)溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (1.5 mL)，室溫下攪拌1小時，反應液直接濃縮得到1-(5-(9-((3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-6-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 514.3.
步驟5： 3-(2-((1-((6-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入1-(5-(9-((3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-6-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (73 mg, 0.14 mmol)和鈦酸四異丙酯 (506 mg, 1.8 mmol)，將混合物在25 °C下攪拌2小時後，0 °C加入NaBH(OAc) 3(76 mg, 0.36 mmol)，在25 °C下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，用乙酸乙酯 (15 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((6-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 MS (ESI): [M/2+H] += 670.5.
步驟6： 1-(5-(9-((3-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-6-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((6-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (25 mg, 0.019 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (14 mg, 0.095 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向濃縮物中加入氯化氫/1,4-二氧六環 (6 M，1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((3-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-6-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +=1039.1. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.00 (s, 1H), 7.89 - 7.82 (m, 1H), 7.67 - 7.59 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 - 7.28 (m, 3H), 7.20 (s, 1H), 4.63 - 4.47 (m, 4H), 4.34 - 4.27 (m, 1H), 3.81 - 3.65 (m, 8H), 3.35 (s, 1H), 3.19 - 3.11 (m, 4H), 2.89 - 2.67 (m, 5H), 2.19 (t, J= 7.5 Hz, 2H), 1.86 - 1.70 (m, 5H), 1.61 - 1.54 (m, 4H), 1.33 - 1.30 (m, 7H), 1.17 - 1.13 (m, 2H), 0.93 - 0.87 (m, 3H), 0.73 - 0.66 (m, 2H), 0.56 - 0.49 (m, 2H).
實施例88： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯的製備 -78 ℃下，將TEA (727 mg, 7.2 mmol)加入到2,4,7-三氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶 (600 mg, 2.4 mmol)的THF (6 mL)溶液中，攪拌30 min後，加入3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯 (434 mg, 1.9 mmol)後攪拌4小時。反應完成後，自然升至室溫，加入H 2O (10 mL)並用EtOAc (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 5:1)純化得到3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 442.1.
步驟2： 3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯 (360 mg, 0.8 mmol)和環丙烷-1,1-二基二甲醇 (163 mg, 1.6 mmol)的乙腈 (5 mL)溶液中加入Cs 2CO 3(782 mg, 2.4 mmol)和DABCO (44.8 mg, 0.4 mmol)，常溫攪拌30分鐘，反應完全後，加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 508.2.
步驟3： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-氯-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.59 mmol)的1,4-二氧六環 (6 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入2-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-1)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷 (243 mg, 0.71 mmol)，cataCXium A Pd G3 (87 mg, 0.12 mmol)和碳酸銫 (577 mg, 1.77 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時。反應完成後，加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 688.4.
步驟4： 3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯的製備 將3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-(羥基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯 (135 mg, 0.20 mmol)的DCM (5 mL)溶液降溫至0 ℃，加入Dess-Martin試劑 (170 mg, 0.40 mmol)，室溫下反應1小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉溶液 (5 mL)和碳酸氫鈉溶液 (5 mL)淬滅反應，並用二氯甲烷 (5 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H]+ = 686.4.
步驟5： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯的製備 向3-(7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.13 mmol)的DCM (2 mL)溶液中加入1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (100 mg, 0.20 mmol)和AcOH (0.1 mL)，在室溫下攪拌2小時。反應液降至0 ℃，加入NaBH(OAc) 3(83 mg, 0.39 mmol)，室溫繼續反應4小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1~20:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1167.8.
步驟6： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙基-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-羧酸三級丁酯 (50 mg, 0.04 mmol)的1,4-二氧六環 (2 mL)溶液中，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液濃縮並經高效液相色譜製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-7-(8-乙基-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 512.3. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 9.09 (s, 1H), 7.62 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.43 (d, J= 8.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 7.28 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.21 - 7.11 (m, 2H), 7.02 (dd, J =2.8, 2.4 Hz, 1H), 4.69 (d, J= 14.4 Hz, 1H), 4.56-4.49 (m, 2H), 4.42 - 4.32 (m, 1H), 4.30 - 3.99 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 3.87-3.82 (m, 2H), 3.76 - 3.61 (m, 4H), 3.52 - 3.44 (m, 2H), 2.80 (t, J= 6.6 Hz, 2H), 2.53-2.34 (m, 10H), 2.24-2.11 (m, 7H), 1.84-1.74 (m, 3H), 1.67 - 1.56 (m, 4H), 1.55 - 1.47 (m, 2H), 1.42-1.28 (m, 3H), 1.21 - 1.06 (m, 4H), 0.93 - 0.86 (m, 3H), 0.78 - 0.65 (m, 2H), 0.55 - 0.48 (m, 2H).
實施例89： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟-2-((1-甲醯環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 144.21 μmol)和1-(2-甲氧基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (108 mg, 216.31 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (205 mg, 721.05 μmol)和冰醋酸 (0.1 mL)，在25 ℃下攪拌3小時，再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (92 mg, 432.64 μmol)繼續在25 ℃反應18小時。反應液中加入甲醇 (10 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇= 10:1)，得到3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1105.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向粗品3-(7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (99.2 mg, 89.71 μmol)的1,4-二氧六環溶液 (2 mL)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮，殘餘物中加入甲醇 (5 mL)和氨甲醇溶液 (1 mL)溶解，再在30 ℃下減壓濃縮。所得粗品先經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇=10:1, 0.1% NH 3)，再經高效液相製備色譜純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(3-氯-2-環丙基-5-羥基苯基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 503.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 9.97 (s, 1H), 9.07 (s, 1H), 7.36 (dd, J= 8.4 Hz, 2.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.94 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 6.77 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.40-4.37 (m, 2H), 4.28 (s, 2H), 3.84 (s, 3H), 3.61-3.52 (m, 10H), 2.69-2.66 (m, 2H), 2.50-2.10 (m, 10H), 2.03-2.01 (m, 2H), 1.76-1.72 (m, 1H), 1.72-0.75 (m, 20H), 0.62-0.57 (m, 4H), 0.40-0.38 (m, 2H).
實施例90： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (140 mg, 0.14 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (91 mg, 0.21 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.1 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。上述混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(90 mg, 0.42 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 657.0.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (120 mg, 0.092 mmol)的DMF (1 mL)攪拌溶液中加入氟化銫 (70 mg, 0.46 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液中加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相色譜純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1011.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.12 (m, 2H), 4.51 - 4.40 (m, 2H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 4.12 - 4.01 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.66 - 3.37 (m, 10H), 2.68 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 2.45 - 1.97 (m, 14H), 1.71 - 1.60 (m, 6H), 1.57 - 1.35 (m, 5H), 1.33 - 1.31 (m, 2H), 1.15 - 0.91 (m, 7H).
實施例100： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (120 mg, 133.30 μmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (110 mg, 266.61 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (189 mg, 666.50 μmol)和冰醋酸 (0.2 mL)，在25 ℃下繼續攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (85 mg, 399.90 μmol)，25 ℃反應16小時。反應液中加入甲醇 (5 mL)，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇=10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 648.4.
步驟2： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (108.0 mg, 83.35 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (5 mL)溶液中加入氟化銫 (127 mg, 833.50 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應2小時。反應結束後，將反應液倒入水 (60 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，有機相分別用水 (60 mL)和飽和鹽水 (60 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到粗品3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1139.5.
步驟3： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向粗品3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (67.1 mg, 58.89 μmol)的1,4-二氧六環溶液 (2 mL)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 3 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，加入稀氨甲醇溶液 (5 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。所得粗品先經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇=10:1, 0.1% NH 3)，再經高效液相製備得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 995.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.23 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 3.6 Hz, 1H), 4.47-4.43 (m, 2H), 4.32-4.29 (m, 1H), 4.10-4.03 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.83-3.76 (m, 2H), 3.53-3.50 (m, 6H), 2.81-2.65 (m, 4H), 2.33-2.29 (m, 6H), 2.21 (m, 3H), 2.16-1.99 (m, 6H), 1.70-1.60 (m, 6H), 1.55-1.35 (m, 6H), 1.35-1.20 (m, 4H), 1.20-1.10 (m, 4H), 0.97-0.96 (m, 3H).
實施例102： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.14 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)和乙酸 (0.1 mL)混合溶液中加入3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (94 mg, 0.22 mmol)和鈦酸四異丙酯 (205 mg, 0.72 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(92 mg, 0.43 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 658.4.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(( R)-3-(4-((3-(4-氯-3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.12 mmol)溶於DMF (2 mL)中，加入CsF (92 mg, 0.61 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 2 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-氯苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1015.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.50 (s, 1H), 10.15 (brs, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.63 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.35 (m, 2H), 7.17 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.53 - 4.36 (m, 2H), 4.36 - 4.23 (m, 1H), 4.14 - 3.99 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.83 - 3.69 (m, 1H), 3.66 - 3.49 (m, 7H), 2.77 - 2.70 (m, 2H), 2.41 - 1.96 (m, 14H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.54 - 1.21 (m, 8H), 1.10 - 0.90 (m, 7H).
實施例103： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.36 mmol)的二氯甲烷 (6 mL)及甲醇 (3 mL)和乙酸 (0.1 mL)的混和溶液中加入1-苄基哌𠯤 (150 mg, 0.72 mmol)和鈦酸四異丙酯 (506 mg, 1.8 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(227 mg, 1.07 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (15 mL)，用乙酸乙酯 (15 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 501.9.
步驟2： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-((1-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (180 mg, 0.18 mmol)溶於DCM (5 mL)中，然後加入1-氯乙基氯甲酸酯 (29 mg, 0.36 mmol)和DIEA (26 mg, 0.36 mmol)。混合物在室溫反應30分鐘，反應液減壓濃縮，濃縮物中加MeOH (5 mL)，加熱到50 ℃反應30分鐘後，直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 200:1 ~ 20:1)純化得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.088 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)和乙酸 (0.1 mL)混合溶液中加入3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (47 mg, 0.11 mmol)和鈦酸四異丙酯 (125 mg, 0.44 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(56 mg, 0.26 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，反應液中加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 656.0.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (52 mg, 0.04 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (30 mg, 0.2 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，用Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1010.4. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.85 (dd, J= 9.1, 5.7 Hz, 1H), 7.40 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 4H), 7.20 (d, J= 2.5 Hz, 1H), 4.67 - 4.30 (m, 7H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.72 - 3.64 (m, 6H), 3.46 - 3.36 (m, 2H), 3.35 (s, 1H), 2.92 - 2.80 (m, 2H), 2.58 - 2.36 (m, 8H), 2.18 - 2.10 (m, 2H), 1.90 - 1.72 (m, 6H), 1.61 - 1.29 (m, 8H), 1.18 - 1.07 (m, 3H), 0.75 - 0.65 (m, 2H), 0.53 - 0.45 (m, 2H).
實施例104： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-4-氟-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-((1-((4-((3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (55 mg, 0.06 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)和乙酸 (0.1 mL)混合溶液中加入3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (39 mg, 0.09 mmol)和鈦酸四異丙酯 (85 mg, 0.3 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌2小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(39 mg, 0.18 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取，合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，真空減壓濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 663.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-4-氟-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-((1-((4-((3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (30 mg, 0.023 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (17 mg, 0.11 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋混合物，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入鹽酸/1,4-二氧六環 (8 M, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，然後用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾，減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-4-氟-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1025.5. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.99 (s, 1H), 7.88 - 7.82 (m, 1H), 7.36- 7.28 (m, 3H), 7.22 - 7.14 (m, 2H), 4.64 - 4.52 (m, 10H), 3.75 - 3.65 (m, 6H), 3.35 (s, 1H), 2.91 - 2.80 (m, 2H), 2.62 - 2.39 (m, 8H), 2.30 (s, 3H), 2.21 - 2.15 (m, 2H), 1.89 - 1.68 (m, 6H), 1.60 - 1.47 (m, 4H), 1.33 - 1.29 (m, 4H), 1.20 - 1.10 (m, 3H), 0.75 - 0.65 (m, 2H), 0.54 - 0.45 (m, 2H).
實施例105： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇的製備 將三級丁基二甲基(環氧乙烷-2-基甲氧基)矽烷 (9 g, 47.9 mmol)溶於乙醇 (50 mL)中，加入1 -苄基哌𠯤鹽酸鹽 (11.2 g, 52.7 mmol)和碳酸鉀 (13.2 g, 95.8 mmol)，100 ℃反應5 h。反應完畢，過濾，濾液濃縮，經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 5:1)純化得到1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇。 1H NMR (400 MHz, CDCl 3) 7.27 -7.23 (m, 4H), 7.23 -7.26 (m, 1H), 3.79 -3.71 (m, 1H), 3.64 -3.57 (m, 2H), 3.53 -3.47 (m, 2H), 3.27 -3.17 (m, 1H), 2.67 -2.41 (m, 8H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6h). LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 365.2.
步驟2： 1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤的製備 將1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇 (5.0 g, 13.7 mmol)溶於THF (50 mL)中，0 -5 ℃下加入NaH (0.82 g, 20.6 mmol)，室溫反應30分鐘。冷卻至0 -5 ℃，加入碘甲烷 (2.44 g, 17.2 mmol)，室溫反應5 h。反應完畢，加入飽和氯化銨水溶液萃滅反應，乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取。有機相用飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉過濾，濾液濃縮經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 8:1)純化得到1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 379.3.
步驟3： 3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇的製備 將1-苄基-4-(3-((三級丁基二甲基矽基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤 (1.60 g, 4.23 mmol)溶於甲醇 (10 mL)中，0 ℃下，冰浴下加入濃鹽酸 (3 mL)，反應2小時。反應完畢，加入飽和碳酸鈉溶液調節pH＞7，然後用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 4:1)得到3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 265.2.
步驟4： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (750 mg, 1.75 mmol)和3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙-1-醇 (555 mg, 2.1 mmol)溶於ACN (10 mL)中，加入Cs 2CO 3(5.25 g, 1.71 mmol)和DABCO (39 mg, 0.35mmoL)，室溫反應1 h。反應完畢，過濾，濾餅用二氯甲烷沖洗兩遍，濾液濃縮，所得濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 2:1)純化得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 656.3.
步驟5： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (500 mg, 0.76 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (467 mg, 0.912 mmol)的1,4 -二氧六環 (6 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入Cata CXium Pd G 3(111 mg, 0.152 mmol)和碳酸銫 (743 mg, 2.28 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時。反應液中加入水 (20 mL)，並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 5%)純化，得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1006.5.
步驟6： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-(2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (500 mg, 0.5 mmol)溶於DCM (5 mL)中，加入1-氯乙基氯碳酸酯 (194 mg,1.5 mmol)和DIEA (129 mg,1.0 mmol)。混合物在室溫反應1小時，反應液減壓濃縮，濃縮物中加入MeOH (5 mL)，加熱到50 ℃反應50分鐘。反應結束後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 15:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-(2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 458.8.
步驟7： 3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-(2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.164 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (84 mg, 0.197 mmol)的DCM/AcOH (2 mL/0.1 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(109 mg, 0.492 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 664.4.
步驟8： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (160 mg, 0.12 mmol)的DMF (2 mL)溶液中加入氟化銫 (92 mg, 0.60 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相，用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。向濃縮物的1,4 -二氧六環 (2 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7，用EtOAc (20 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1027.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO -d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.41 -7.27(m, 3H), 7.21 -7.10 (m, 2H), 4.59 -4.41 (m, 2H), 4.36 -4.26(m, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.76 -3.38 (m, 10H), 3.36 (d, J= 1.9 Hz, 3H), 2.77 -2.60(m, 3H), 2.49 -2.14 (m, 11H), 2.09 -1.98 (m, 2H), 1.74 -1.58(s, 6H), 1.57 -1.19 (m, 7H), 1.15 -0.88 (m, 4H).
實施例106： 1-(5-(3-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(羥基甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯的製備 在0 ℃下，向9-(三級丁氧羰基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲酸 (350 mg, 1.17 mmol)的THF (4 mL)溶液中滴加BH 3/THF (0.23 mL, 2.34 mmol, 10 M/DMSO)。室溫下繼續反應2 h。將反應液冷卻至0-5 ℃，加入甲醇淬滅反應並攪拌10分鐘，反應液濃縮得到3-(羥基甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯。
步驟2： (2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲醇的製備 將3-(羥基甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯 (300 mg, 1.05 mmol)溶於DCM (3 mL)中，然後加入TFA (1.5 mL)。將混合物在室溫攪拌1小時並濃縮，得到 (2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲醇。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟3： 1-(5-(3-(羥基甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向 (2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲醇 (280 mg, 粗品)的DMF (5mL)的溶液中加入DIEA (1.08 g, 8.4 mmol)和1-(2-甲基-5-(五氟苯甲醯)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (436 mg, 1.05 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。加入水並用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到1-(5-(3-(羥基甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 416.3.
步驟4： 9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛的製備 向1-(5-(3-(羥基甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (130 mg, 0.313 mmol)的DCM (3 ml)的溶液中加入Dess-Martain氧化劑 (332 mg,0.783 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉萃滅，然後用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 5:1)純化，得到9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 414.3.
步驟5： 3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (80 mg, 0.088 mmol)和9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛 (76 mg, 0.17 mmol)的DCM/AcOH (2.0 mL/0.1 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.3 mL)，並在室溫下攪拌2小時。混合物在0-5 ℃加入NaBH(OAc) 3(59 mg, 0.26 mmol)並在室溫下反應2小時，反應結束後。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (MeOH:DCM = 0~1:4)純化，得到3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 655.4.
步驟6： 1-(5-(3-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (40 mg, 0.03 mmol)的DMF (2.0 mL)的攪拌溶液中加入CsF (23mg, 0.15 mmol)，室溫下反應2小時。反應液中加入水 (10 mL)，乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾濾液濃縮得中間體粗品。將其溶於1,4-二氧六環 (1.0 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 0.5 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相製備純化得到1-(5-(3-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1009.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.03 (s, 1H), 8.44 - 8.40 (m, 2H), 7.90 - 7.83 (m, 1H), 7.43 - 7.39 (m, 1H), 7.37 - 7.28 (m, 4H), 7.20 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.76 - 4.63 (m, 2H), 4.60 - 4.47 (m, 1H), 4.44 - 4.33 (m, 1H), 4.05 - 3.91 (m, 2H), 3.90 - 3.76 (m, 4H), 3.75 - 3.53 (m, 4H), 3.54 - 3.36 (m, 3H), 3.23 - 3.14 (m, 1H), 3.11 - 2.98 (m, 4H), 2.97 - 2.76 (m, 8H), 2.73 - 2.50 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.10 - 1.85 (m, 5H), 1.80 - 1.57 (m, 2H), 1.53 - 1.12 (m, 5H), 0.88 - 0.70 (m, 2H), 0.65 - 0.50 (m, 2H).
實施例107： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸的製備 在室溫下，向9-甲醯基-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (2.000 g, 7.107 mmol)和2-甲基-2-丁烯 (6 mL)的四氫呋喃 (80 mL)和三級丁醇 (20 mL)的溶液中加入亞氯酸鈉 (2.571 g, 28.429 mmol)和磷酸二氫鈉 (6.822 g, 56.856 mmol)的水溶液 (80 mL)，室溫下反應18小時。反應結束後，用乙酸乙酯 (100 mL x 3)萃取，合併有機相，飽和氯化鈉 (100 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (石油醚:四氫呋喃= 10:1~5:1)純化，得到3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸。 LC-MS: (ESI, m/z): [2M+Na] += 617.5.
步驟2： 9-(4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 在0 ℃，向3-(三級丁氧羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸 (300 mg, 1.009 mmol)和哌𠯤-1-羧酸苄酯 (222 mg, 1.009 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (15 mL)溶液中加入 N, N-二異丙基乙胺 (391 mg, 3.026 mmol)和HATU (767 mg, 2.018 mmol)，在25 ℃攪拌3小時。反應結束後，倒入冰水中 (100 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，有機相分別用水 (100 mL)和飽和氯化鈉 (100 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇 = 200:1~100:1)純化，得到9-(4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 444.3.
步驟3： 9-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯的製備 在0 ℃，向9-(4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-羰基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯 (446.1 mg, 892.82 μmol)的四氫呋喃 (20 mL)溶液中加入氘代氫化鋰鋁 (56.2 mg, 1339.24 μmol)，在25 ℃下攪拌18小時。反應結束後，加入丙酮 (1 mL)攪拌10分鐘後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇 = 200:1~100:1)純化，得到9-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 488.4.
步驟4： 4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 在0 ℃，向9-((4-((苄氧基)羰基)哌𠯤-1-基)甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羧酸三級丁酯(96.5 mg, 197.87 μmol)的二氯甲烷 (5 mL)溶液中加入三氟乙酸 (1.7 mL)，在25 ℃下攪拌1小時。反應結束後，減壓濃縮，得到4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-羧酸苄酯，直接用於下一步。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 388.3.
步驟5： 4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 在室溫下，向4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (80 mg, 粗品)和 N, N-二異丙基乙胺 (300 mg, 2321.26 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL)溶液中加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲酸五氟苯酯 (90 mg, 217.66 μmol)。反應結束後，倒入冰水中 (100 mL)，用乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取，有機相分別用水 (100 mL)和飽和氯化鈉 (100 mL)洗滌，用無水硫酸鈉乾燥，減壓濃縮。所得粗品經矽膠薄層層析 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)純化，得到4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 618.4.
步驟6： 1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (74.5 mg, 120.59 μmol)的甲醇 (5 mL)溶液加入鈀碳 (10 mg)，氫氣球保護置換三次，在25 ℃下攪拌18小時。反應結束後，減壓濃縮，得到1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮，直接用於下一步。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 484.4.
步驟7： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯基環丙基)甲氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (85 mg, 100.49 μmol)和1-(2-甲基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (58 mg, 120.59 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (286 mg, 1004.90 μmol)和冰醋酸 (0.1 mL)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (72 mg, 344.00 μmol)繼續25 ℃反應4小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1308.7.
步驟8： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (57.9 mg, 44.24 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (5 mL)溶液中加入氟化銫 (67 mg, 442.40 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應1小時。反應結束後，將反應液倒至水 (100 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相，用飽和鹽水 (50 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1152.7.
步驟9： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在室溫下，向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基-d2)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (37.0 mg, 32.11 μmol)的1,4-二氧六環溶液 (2 mL)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 6 mL)，室溫下反應1.5小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮幹，濃縮物中加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮幹。所得粗品先經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)，再經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基-d2)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1008.2. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.73 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.32 - 7.21 (m, 4H), 7.19 - 7.17 (m, 1H), 7.08 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.52 - 4.41 (m, 3H), 4.33 - 4.30 (m, 1H), 3.90 - 3.80 (m, 1H), 3.70 - 3.63 (m, 4H), 3.60- 3.54 (m, 2H), 3.50 - 3.35 (m, 2H), 3.19 (s, 1H), 2.87 - 2.75 (m, 2H), 2.60 - 2.50 (m, 2H), 2.50 - 2.30 (m, 4H), 2.31 (s, 3H), 1.95 - 1.80 (m, 4H), 1.80 - 1.70 (m, 2H), 1.70 - 1.53 (m, 4H), 1.53 - 1.40 (m, 4H), 1.40 - 1.25 (m, 4H), 1.20 - 1.00 (m, 4H), 0.75 - 0.60 (m, 2H), 0.53 - 0.43 (m, 2H).
實施例108： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (237.3 mg, 263.60 μmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (217.0 mg, 527.30 μmol)的二氯甲烷 (15 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (375 mg, 1318.00 μmol)和冰醋酸 (0.3 mL)，在25 ℃下攪拌3小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (168 mg, 790.80 μmol)繼續25 ℃反應16小時。反應液中加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1)，得到3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 648.5.
步驟2： 3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (219.4 mg, 169.33 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL)溶液中加入氟化銫 (257 mg, 1693.30 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應2小時。反應結束後，將反應液倒至水 (60 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，有機相分別用水 (60 mL)和飽和鹽水 (60 mL)洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 570.4.
步驟3： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在0 ℃下，向粗品3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (198.2 mg, 169.33 μmol)的1,4-二氧六環溶液 (3 mL)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應2小時。反應結束後，在30 °C下減壓濃縮，濃縮物中加入氨甲醇溶液 (1 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮。所得粗品先經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)，再經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 995.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.37 (s, 1H), 10.15 (br, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 9.2 Hz, 1H), 7.38 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.31 (d, J= 1.2 Hz, 1H), 7.24 - 7.22 (m, 1H), 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.50-4.37 (m, 2H), 4.35 - 4.25 (m, 1H), 4.15 - 4.00 (m, 1H), 3.93(s, 1H), 3.83 - 3.77 (m, 1H), 3.70 - 3.50 (m, 8H), 2.85 - 2.65 (m, 3H), 2.45 - 2.30 (m, 9H), 2.30 - 2.25 (m, 4H), 2.20 - 2.10 (m, 2H), 2.10 - 2.00 (m, 3H), 1.70 - 1.60 (m, 6H), 1.55 - 1.23 (m, 8H), 1.10 - 1.00 (m, 2H), 1.00 - 0.90 (m, 3H).
實施例109： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.17 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (108 mg, 0.26 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(108 mg, 0.51 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 650.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (157 mg, 0.12 mmol)的DMF (1 mL)的攪拌溶液中加入氟化銫 (184 mg, 1.20 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (20 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7，然後用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 998.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.48 - 7.43 (m, 1H), 7.41 - 7.36 (m, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.26 - 7.21 (m, 1H), 7.19 - 7.15 (m, 1H), 4.51 - 4.40 (m, 2H), 4.36 - 4.27 (m, 1H), 4.12 - 4.00 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 7H), 2.82 - 2.65 (m, 3H), 2.47 - 1.97 (m, 15H), 1.65 (s, 6H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.34 - 1.21 (m, 2H), 1.15 - 1.01 (m, 3H), 0.99 - 0.93 (m, 4H).
實施例110： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-乙基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.17 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (111 mg, 0.26 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(108 mg, 0.51 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 656.0.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-乙基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.12 mmol)的DMF (1 mL)的攪拌溶液中加入氟化銫 (182 mg, 1.20 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)淬滅，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機層用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相高效液相色譜純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-乙基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1009.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.48 - 7.43 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 2H), 7.19 - 7.15 (m, 1H), 4.51 - 4.40 (m, 2H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 4.13 - 4.00 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.86 - 3.76 (m, 1H), 3.65 - 3.46 (m, 7H), 2.83 - 2.64 (m, 3H), 2.60 - 2.54 (m, 2H), 2.45 - 1.99 (m, 15H), 1.65 (s, 6H), 1.54 - 1.38 (m, 5H), 1.35 - 1.23 (m, 2H), 1.16 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 1.09 - 0.93 (m, 7H).
實施例151： 1-(5-(3-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-烯丙基-4-((2-(甲氧基羰基)烯丙基)氧)哌啶-1-羧酸三級丁酯的製備 將4-烯丙基-4-羥基哌啶-1-甲酸三級丁酯 (9.0 g, 37.29 mmol)溶於DMF (200 mL)中，0 ℃下加入NaH (1.79 g, 44.75 mmol)，室溫反應1小時後冷卻至0 ℃，加入2-(溴甲基)丙烯酸甲酯 (6.68 g, 37.29 mmol)，在室溫下繼續反應72 h。反應完畢，反應液中加入NH 4Cl (200 mL)，乙酸乙酯 (200 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化得到4-烯丙基-4-((2-(甲氧基羰基)烯丙基)氧)哌啶-1-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 362.2.
步驟2： 9-(三級丁基)3-甲基1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-3-烯-3,9-二羧酸二甲酯的製備 將4-烯丙基-4-((2-(甲氧基羰基)烯丙基)氧)哌啶-1-羧酸三級丁酯 (3.0 g, 8.84 mmol)溶於DCE (700 mL)中，加入Grubbs II (229 mg, 0.27 mmol)，在90 ℃下反應16小時，反應完畢後冷卻至室溫，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化得到9-(三級丁基)3-甲基1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-3-烯-3,9-二羧酸二甲酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 334.2.
步驟3： 9-(三級丁基)3-甲基1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3,9-二甲酸二甲酯的製備 向9-(三級丁基)3-甲基1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一碳-3-烯-3,9-二羧酸二甲酯 (1.3 g, 4.17 mmol)的EtOH (20 mL)溶液中加入Pd(OH) 2(586 mg, 4.17 mmol)，在H 2氛圍中，50 ℃下反應16小時，反應完畢後冷卻至室溫，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 5:1)純化得到9-(三級丁基)3-甲基1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3,9-二甲酸二甲酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 336.2.
步驟4： 3-(羥基甲基)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯的製備 將9-(三級丁基)3-甲基1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3,9-二甲酸二甲酯 (1.0 g, 2.19 mmol)溶於THF (10 mL)中，冰水浴下加入DIBAL-H (9.57 mL, 9.57 mmol)，反應3小時。反應完畢，升至室溫，加入飽和酒石酸鈉鉀溶液 (100 mL)，乙酸乙酯 (50 mL x 3)萃取。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA=1:1)純化得到3-(羥基甲基)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+Na] += 308.3.
步驟5： 3-甲醯基-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯的製備 向3-(羥基甲基)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯 (700 mg, 2,46 mmol)的DCM (10 ml)溶液中加入Dess-Martain (2.09 g, 4.92 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應結束後，加入硫代硫酸鈉萃滅，然後用乙酸乙酯萃取。合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-甲醯基-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M-tBu+H] += 228.2.
步驟6： 1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛的製備 將3-甲醯基-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.71 mmol)溶於DCM (1.5 mL)中，然後加入TFA (1.5 mL)。將混合物在室溫攪拌1小時並濃縮，得到1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛。粗品直接用於下一步，無需進一步純化。
步驟7： 9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛的製備 向1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛 (230 mg, 粗品)的DMF (3mL)溶液中加入DIEA (459 mg, 3.55 mmol)和3-(2,4-二氧四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲酸五氟苯酯 (294 mg, 0.71 mmol)，反應液在室溫下攪拌1小時。反應液中加入水，然後用乙酸乙酯萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 414.3.
步驟8： 3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-(哌𠯤-1-基甲基)環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.16 mmol)和9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-甲醛 (99 mg, 0.24 mmol)的DCM/AcOH (2.0mL /0.2mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，並在室溫下攪拌2小時。在0-5 ℃下向上述混合物中加入NaBH(OAc) 3(153 mg, 0.72 mmol)，然後再在室溫下反應2小時。反應結束後，將混合物直接減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=1:0~4:1)純化，得到3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 655.4
步驟9： 1-(5-(3-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((9-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-3-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.099 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (150 mg, 0.99 mmol)，在室溫下攪拌1小時。反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，有機相用鹽水洗滌，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環(1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取，合併的有機相經無水Na 2SO 4乾燥，濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(3-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-1-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷-9-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1009.4 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.13 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 1H), 7.35 - 7.29 (m, 2H), 7.28 - 7.22 (m, 1H), 7.19 - 7.14 (m, 1H), 4.55 - 4.40 (m, 1H), 4.34 - 4.20 (m, 3H), 4.15 - 4.00 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.85 - 3.74 (m, 1H), 3.69 - 3.58 (m, 2H), 3.57 - 3.44 (m, 4H), 3.23 - 3.05 (m, 3H), 2.79 - 2.65 (m, 2H), 2.41 - 1.98 (m, 17H), 1.72 - 1.60 (m, 5H), 1.59 - 1.42 (m, 4H), 1.38 - 1.19 (m, 4H), 0.65 - 0.57 (m, 2H), 0.44 - 0.32 (m, 2H).
實施例155： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.16 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (103 mg, 0.24 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(102 mg, 0.48 mmol)並攪拌2小時。將反應混合物直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 664.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (137 mg, 0.10 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (152 mg, 1.0 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4 -二氧六環 (2 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (20 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1027.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO -d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.0 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.30 (m, 3H), 7.19 - 7.12 (m, 2H), 4.59 - 4.41 (m, 2H), 4.36 - 4.24 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.79 - 3.42 (m, 10H), 3.36 (d, J= 1.9 Hz, 3H), 2.76 - 2.60 (m, 3H), 2.48 - 1.96 (m, 13H), 1.73 - 1.58 (m, 6H), 1.55 - 1.38 (m, 5H), 1.34 - 1.25 (m, 2H), 1.13 - 0.94 (m, 4H).
實施例172： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲氧基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.16 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (99 mg, 0.24 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(102 mg, 0.48 mmol)並攪拌2小時。將反應混合物直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 656.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲氧基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (141 mg, 0.11 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入氟化銫 (167 mg, 1.10 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液中加水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4 -二氧六環 (2 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (20 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲氧基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 506.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO -d 6) δ 10.36 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.04 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.1, 6.1 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.29 (m, 3H), 7.26 - 7.21 (m, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.59 - 4.43 (m, 2H), 4.37 - 4.26 (m, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 1H), 3.69 - 3.51 (m, 7H), 3.35 (s, 3H), 2.82 - 2.63 (m, 3H), 2.46 - 2.19 (m, 13H), 2.09 - 1.96 (m, 3H), 1.70 - 1.61 (m, 6H), 1.55 - 1.39 (m, 5H), 1.31 - 1.22 (m, 4H), 1.10 - 0.90 (m, 4H).
實施例173： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-4-氟-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.17 mmol)和3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (112 mg, 0.26 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.15 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(108 mg, 0.51 mmol)並攪拌2小時。將反應混合物直接濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 657.5.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-4-氟-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(5-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-2-氟-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (125 mg, 0.095 mmol)的DMF (1 mL)的攪拌溶液中加入氟化銫 (144 mg, 0.95 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液加入Na 2CO 3水溶液將混合物調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-4-氟-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1013.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.38 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 8.01 - 7.93 (m, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.37 (m, 1H), 7.35 - 7.31 (m, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 1H), 7.18 - 7.15 (m, 1H), 4.52 - 4.42 (m, 2H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 4.12 - 4.00 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.80 - 3.72 (m, 1H), 3.65 - 3.50 (m, 7H), 3.23 - 3.15 (m, 2H), 2.78 - 2.66 (m, 2H), 2.39 - 2.02 (m, 17H), 1.73 - 1.59 (m, 6H), 1.54 - 1.38 (m, 5H), 1.34 - 1.22 (m, 2H), 1.13 - 1.01 (m, 3H), 1.00 - 0.94 (m, 4H).
實施例174： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-溴-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(7-溴-2-氯-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (500 mg, 1.06 mmol)和3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇 (342 mg, 1.38 mmol)溶於ACN (10 mL)中，加入Cs 2CO 3(1.04 g, 3.18 mmol)和DABCO (24 mg,0.212 mmol)。將反應液在室溫下反應2 h。反應完畢，過濾掉固體，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-溴-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 683.3.
步驟2： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-溴-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (550 mg, 0.804 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (495 mg, 0.97 mmol)的1,4-二氧六環 (6 mL)和H 2O (1 mL)的混合溶液中加入Cata CXium Pd G3 (105 mg, 0.16 mmol)和碳酸銫 (786 mg, 2.41 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，反應液中加入水 (20 mL)，然後用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA =1:1)純化，得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 989.6.
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (600 mg, 0.61 mmol)溶於DCM (6 mL)中，加入1-氯乙基氯碳酸酯 (262 mg, 1.83 mmol)和DIEA (157 mg, 1.22 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮，濃縮物用MeOH (3 mL)溶解，加熱到50 ℃反應30分鐘。反應結束後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3)= 15:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 899.5.
步驟4： 3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.17 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (103 mg, 0.25 mmol)的DCM/AcOH (3 mL/0.1 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(237 mg, 0.84 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮，所得濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=1:0~4:1)純化，得到3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 647.9.
步驟5： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (125 mg, 0.097 mmol))的DMF (2 mL)溶液中加入氟化銫 (74 mg, 0.49 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (2 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 497.7. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.37 (s, 1H), 10.12 (s, 1H), 7.96 (dd, J= 9.2 Hz, 6.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.45 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 7.36 - 7.21 (m, 3H), 7.24 (d, J= 8 Hz, 1H),7.18 - 7.10 (m, 1H), 7.06 (d, J= 2.8 Hz, 1H), 4.07 - 3.95 (m, 1H), 3.85 - 3.71 (m, 1H), 3.63 - 3.38 (m, 7H), 2.82 - 2.64 (m, 2H), 2.47 - 2.23 (m, 9H), 2.22 - 1.98 (m, 9H), 1.77 - 1.61 (m, 6H), 1.54 - 1.22 (m, 8H), 1.12 - 0.89 (m, 7H).
實施例191： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-羥基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)丙烷-1,2-二醇的製備 將 ( R)-1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙-2-醇 (5.00 g, 13.70 mmol)溶於乙醇 (500 mL)中，冰浴下加入濃鹽酸 (10 mL)，反應2小時。反應完畢，濃縮除去乙醇，加入水 (50 mL)，用甲基三級丁基醚 (50 mL)萃取。水相加入飽和碳酸鈉溶液調節pH＞7，然後用乙酸乙酯/異丙醇萃取 (30 mL x 3)。合併EA相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EA= 4:1)純化得到 ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)丙烷-1,2-二醇。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 251.2.
步驟2： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-羥基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.50 g, 3.50 mmol)和 ( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)丙烷-1,2-二醇 (1.75 g, 7.00 mmol)溶於乙腈 (20 mL)加入至封管反應器，加入Cs 2CO 3(2.28 g, 7.00 mmol)，DABCO (39 mg, 0.35 mmol)，30 ℃下反應3小時。反應完畢，過濾，濾液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 10:1 ~ 1:2)純化得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-羥基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 642.3.
步驟3： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-羥基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-羥基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.00 g, 1.56 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (1.04 g, 2.03 mmol)的1,4-二氧六環 (10 mL)和H 2O (2 mL)的混合溶液中加入CataCXium A Pd G3 (114 mg, 0.16 mmol)和碳酸銫 (1.02 g, 3.12 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時。反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=20:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-羥基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 496.8.
步驟4： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-羥基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (800 mg, 0.81 mmol)和咪唑 (109 mg, 1.60 mmol)溶於二氯甲烷中，加入TBSCl (159 mg, 1.05 mmol)，25 ℃反應5小時。將反應液濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH =100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 553.9.
步驟5： 3-(2-(( R)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (200 mg, 0.18 mmol)溶於DCM (2 mL)中，加入DIEA (46 mg, 0.36 mmol)和1-氯乙基氯甲酸酯 (39 mg, 0.27 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮，濃縮物中加入MeOH (3 mL)，加熱至50 ℃反應1小時。反應結束後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3)=20:1)純化，得到3-(2-(( R)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 508.9.
步驟6： 3-(2-(( R)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.089 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (76 mg, 0.18 mmol)的DCM/AcOH (1 mL/0.1 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (0.3 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(57 mg, 0.26 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH=100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 714.5.
步驟7： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-羥基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-2-((三級丁基二甲基矽基)氧)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (75 mg, 0.0525 mmol)的DMF (1 mL)的攪拌溶液中加入氟化銫 (62 mg, 0.41 mmol)，在室溫下攪拌2小時。反應液中加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-羥基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 507.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.33 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.3, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.33 (m, 2H), 7.32 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.18 - 7.12 (m, 2H), 4.88 (t, J= 4.6 Hz, 1H), 4.51 - 4.39 (m, 2H), 4.36 - 4.25 (m, 1H), 4.23 - 4.10 (m, 1H), 4.06 - 3.96 (m, 1H), 3.95 - 3.88 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.68 - 3.34 (m, 9H), 2.68 (t, J= 6.5 Hz, 2H), 2.46 - 2.12 (m, 11H), 2.10 - 1.91 (m, 3H), 1.68 - 1.62 (m, 5H), 1.54 - 1.39 (m, 5H), 1.31 - 1.22 (m, 3H), 1.10 - 0.94 (m, 4H).
實施例207： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基甲矽烷基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸三級丁酯 (150 mg, 166.81 μmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (128 mg, 300.36 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)的攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (237 mg, 834.05 μmol)和冰醋酸 (0.3 mL)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (106 mg, 500.43 μmol)，繼續25 ℃反應16小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇=10:1, 1%氨甲醇)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1310.6.
步驟2： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (115.0 mg,  87.74 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (8 mL)溶液中加入氟化銫 (133 mg, 877.39 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應2小時。反應結束後，將反應液倒入水 (60 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，有機相分別用水 (60 mL)和飽和鹽水 (60 mL)洗滌，合併有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 MS(ESI) m/z:[M+H] += 1154.5.
步驟3： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在0 ℃，向粗品3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (104.2 mg, 87.74 μmol)的1, 4-二氧六環溶液 (2.5 mL)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1小時。反應結束後，在30 ℃下減壓濃縮，濃縮物中加入氨甲醇溶液 (5 mL)，再在30 ℃下減壓濃縮。所得粗品先經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇=10:1, 0.1% NH 3)純化，再經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1010.4. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.33 (s, 1H), 7.98 - 7.94 (m, 1H), 7.72 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 8.8 Hz, 1H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 7.32 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 7.18 - 7.14 (m, 2H), 7.07 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.38 (m, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 2H), 4.05 - 3.99 (m, 1H), 3.90 - 3.80 (m, 4H), 3.61 - 3.58 (m, 2H), 3.50 - 3.46 (m, 3H), 2.70 - 2.67 (m, 3H), 2.45 - 2.05 (m, 12H), 2.05 - 1.95 (m, 3H), 1.75 - 1.60 (m, 6H), 1.60 - 1.35 (m, 6H), 1.35 - 1.20 (m, 4H), 1.20 - 0.85 (m, 8H).
實施例243： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-乙基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯的製備 向4-((3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (1 g, 2.60 mmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (10 mL)的溶液中，加入3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲酸五氟苯酯 (1.3 g, 3.12 mmol)和 N, N-二異丙基乙胺 (3.3 g, 26.0 mmol)，在常溫下攪拌2小時。反應結束後，加入水 (20 mL)，用乙酸乙酯 (20 mL x 2)萃取，合併有機相，飽和氯化鈉 (20 mL x 3)洗滌，並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇 = 20:1)純化，得到4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 630.4.
步驟2： 1-(2-乙基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-羧酸苄酯 (730 mg, 1.16 mmol)的甲醇 (5 mL)溶液中，加入Pd/C (123 mg)，在氫氣下25 ℃攪拌1小時。反應結束後，過濾並減壓濃縮，所得粗品經矽膠柱層析 (二氯甲烷:甲醇 = 20:1)純化，得到1-(2-乙基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 496.4.
步驟3： 3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向1-(2-乙基-5-(9-(哌𠯤-1-基甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮 (90 mg, 0.18 mmol)和3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-((1-甲醯環丙基)甲氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸苄酯 (100 mg, 0.12 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)的溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (170 mg, 0.60 mmol)，在25 ℃下攪拌16小時。混合物在室溫下加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (85 mg, 0.40 mmol)繼續25 °C反應3小時。反應液減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 0.1% NH 3)純化，得到3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1321.8.
步驟4： 1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-乙基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-((1-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-乙基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)環丙基)甲氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (112 mg, 0.085 mmol)的DMF (1 mL)溶液中加入CsF (64 mg, 0.42 mmol)，常溫攪拌半小時。加入水 (10 mL)，用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。將濃縮得到的中間體溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮，所得粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-((1-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)環丙基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-乙基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1021.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.37 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 6.1 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 7.16 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.48 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 4.31 - 4.18 (m, 3H), 3.92 (s, 1H), 3.87 - 3.72 (m, 1H), 3.68 - 3.39 (m, 7H), 2.82 - 2.65 (m, 2H), 2.60 - 2.53 (m, 2H), 2.44 - 1.93 (m, 15H), 1.72 - 1.62 (m, 6H), 1.53 - 1.26 (m, 7H), 1.16 (t, J= 7.5 Hz, 3H), 1.11 - 0.94 (m, 4H), 0.69 - 0.58 (m, 2H), 0.45 - 0.34 (m, 2H).
實施例249： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-胺基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： ( S)-(1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基-1-氧代丙-2-基)羧酸三級丁酯的製備 向 (三級丁氧羰基)- L-絲胺酸 (1.16 g, 5.64 mmol)的DCM (20 mL)溶液中加入PyBOP (2.7 g, 5.2 mmol)和DIEA (3.3 mL, 18.8 mmol)。將混合物在0 ℃至室溫攪拌2小時。反應液濃縮並經矽膠柱層析 (PE:EA = 100:1 ~ 1:1)純化得到 ( S)-(1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基-1-氧代丙-2-基)羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 364.3.
步驟2： ( R)-(1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基丙-2-基)羧酸三級丁酯的製備 將 ( S)-(1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基-1-氧代丙-2-基)羧酸三級丁酯 (2 g, 5.5 mmol)溶於THF (40 mL)中，加入DIBAL-H (27.5 mL, 27.5 mmol)，在冰水浴至室溫下攪拌過夜。反應後，用酒石酸鈉鉀溶液猝滅，並用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化得 ( R)-(1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基丙-2-基)羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 350.3.
步驟3： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 ( R)-(1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基丙-2-基)羧酸三級丁酯 (0.9 g, 2.57 mmol)的乙腈 (20 mL)溶液中加入3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (735 mg, 1.72 mmol)，DABCO (96 mg, 0.86 mmol)和碳酸銫 (1.4 g, 4.2 mmol)，室溫下攪拌1小時。反應完成後，濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 741.4.
步驟4： 3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (320 mg, 0.43 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (332 mg, 0.65 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1mL)的混合溶液中加入Ruphos Pd G3 (36 mg, 0.043 mmol)和磷酸鉀 (228 mg, 1.08 mmol)。混合物在氮氣保護下100 ℃反應16小時。反應液中加入水 (20 mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1091.6.
步驟5： 3-(2-(( R)-2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( R)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (320 mg, 29 mmol)溶於DCM (15 mL)中，加入1-氯乙基氯碳酸酯 (84 mg, 0.58 mmol)和DIEA (76 mg, 0.58 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮，濃縮物加入MeOH (15 mL)溶解，加熱到50 ℃反應1小時。反應結束後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 15:1)純化，得到3-(2-(( R)-2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 501.4.
步驟6： 3-(2-(( R)-2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (240 mg, 0.24 mmol)的二氯甲烷 (15 mL)溶液和乙酸 (0.5 mL)溶液中加入3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (155 mg, 0.36 mmol)和鈦酸四異丙酯 (340 mg, 1.2 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌1小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(155 mg, 0.72 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (15 mL)，並用乙酸乙酯 (15 mL x 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析純化 (DCM:MeOH = 10:1)，得到3-(2-(( R)-2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 707.0.
步驟7： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-胺基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(( R)-2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (300 mg, 0.21 mmol)溶於DMF (5 mL)中，加入CsF (167 mg, 1.1 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (15 mL)稀釋反應液，並用乙酸乙酯 (15 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入HCl/1,4-二氧六環 (8 N, 5 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (15 mL)，用Na 2CO 3水溶液調節pH＞7，並用乙酸乙酯 (15 mL × 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-胺基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1012.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.13 (br, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.95 (dd, J= 8.6, 6.0 Hz, 1H), 7.44 (td, J= 9.0, 2.2 Hz, 1H), 7.40 - 7.27 (m, 3H), 7.17 - 7.11 (m, 2H), 4.95 - 4.59 (m, 1H), 4.56 - 4.07 (m, 3H), 3.94 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.69 - 3.46 (m, 11H), 2.68 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.48 - 2.37 (m, 6H), 2.35 - 2.18 (m, 4H), 2.11 - 1.99 (m, 2H), 1.76 - 1.58 (m, 6H), 1.57 - 1.37 (m, 5H), 1.34 - 1.23 (m, 2H), 1.14 - 0.91 (m, 4H).
實施例250： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-胺基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： (1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基-1-氧代丙-2-基)羧酸三級丁酯的製備 向 (三級丁氧羰基)絲胺酸 (1.16 g, 5.64 mmol)的DCM (20 mL)溶液中加入PyBOP (2.7 g, 5.2 mmol)和DIEA (3.3 mL, 18.8 mmol)。將混合物在0 ℃至室溫攪拌2小時。反應液濃縮並經矽膠柱層析 (PE:EA = 100:1~1：1)純化得到 (1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基-1-氧代丙-2-基)羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 364.3.
步驟2： (1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基丙-2-基)羧酸三級丁酯的製備 將 (1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基-1-氧代丙-2-基)羧酸三級丁酯 (0.7 g, 1.9 mmol)溶於THF (20 mL)中，加入DIBAL-H (9.6 mL, 9.6 mmol)，在冰水浴至室溫下攪拌過夜。反應後，用酒石酸鈉鉀溶液猝滅，並用乙酸乙酯 (50 mL x 2)萃取，有機相用飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化得 (1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基丙-2-基)羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 350.3.
步驟3： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向 (1-(4-苄基哌𠯤-1-基)-3-羥基丙-2-基)羧酸三級丁酯 (0.39 g, 1.12 mmol)的乙腈 (10 mL)溶液中加入3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (240 mg, 0.56 mmol)，DABCO (31.4 mg, 0.28 mmol)和碳酸銫 (456 mg, 1.4 mmol)。室溫下攪拌1小時。反應完成後，濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 741.4.
步驟4： 3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (130 mg, 0.175 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (135 mg, 0.263 mmol)的1,4-二氧六環 (5 mL)和H 2O (1mL)的混合溶液中加入Ruphos Pd G3 (15 mg, 0.018 mmol)和磷酸鉀 (93 mg, 0.44 mmol)。混合物在氮氣保護下100 ℃反應16小時，加入水 (10 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 20:1)純化，得到3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 546.4.
步驟5： 3-(2-(2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-((三級丁氧羰基)胺基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (110 mg, 0.1 mmol)溶於DCM (5 mL)中，加入1-氯乙基氯碳酸酯 (29 mg, 0.2 mmol)和DIEA (26 mg, 0.2 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮，濃縮物加入MeOH (5 mL)溶解，加熱到50 ℃反應1小時。反應結束後減壓濃縮，濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 15:1)純化，得到3-(2-(2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 501.9.
步驟6： 3-(2-(2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (86 mg, 0.086 mmol)的二氯甲烷 (1 mL)溶液和乙酸 (0.1 mL)溶液中加入3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (55 mg, 0.13 mmol)和鈦酸四異丙酯 (121 mg, 0.43 mmol)，將混合物在25 ℃下攪拌1小時後，0 ℃加入NaBH(OAc) 3(55 mg, 0.26 mmol)，在25 ℃下攪拌1小時。反應完畢後，加入H 2O (5 mL)，並用乙酸乙酯 (5 mL × 3)萃取，將合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾並在真空下濃縮。粗品經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 707.0.
步驟7： 1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-胺基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 將3-(2-(2-((三級丁氧羰基)胺基)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (70 mg, 0.05 mmol)溶於DMF (1 mL)中，加入CsF (38 mg, 0.25 mmol)，於室溫下反應0.5小時。反應完成後，用H 2O (5 mL)稀釋反應液，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾減壓濃縮。向粗品中加入HCl/1,4-二氧六環 (8 N, 1 mL)，室溫下攪拌0.5小時。反應完成後，加入H 2O (5 mL)，用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7，並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮。粗品用高效液相製備純化，得到1-(5-(9-((4-(3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-胺基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1012.5. 1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 8.78 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 7.93 - 7.79 (m, 1H), 7.43 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 2H), 7.18 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 4.70 - 4.33 (m, 4H), 3.99 - 3.82 (m, 5H), 3.79 - 3.44 (m, 11H), 3.41 (s, 1H), 2.92 - 2.62 (m, 10H), 2.39 (s, 2H), 2.09 - 1.89 (m, 4H), 1.81 - 1.49 (m, 7H), 1.42 - 1.05 (m, 6H).
實施例251： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 166.81 μmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (124 mg, 300.26 μmol)的二氯甲烷 (10 mL)攪拌溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (237 mg, 834.05 μmol)和冰醋酸 (0.3 mL)，在25 ℃下攪拌2小時。再加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (106 mg, 500.43 μmol)繼續25 ℃反應16小時。加入甲醇 (5 mL)淬滅反應，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品經薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇=10:1, 1%氨甲醇)，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1294.6.
步驟2： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (169.7 mg,  129.68 μmol)的 N, N-二甲基甲醯胺 (8 mL)溶液中加入氟化銫 (197 mg, 1296.81 μmol)，在氮氣保護下25 ℃反應2小時。反應結束後，將反應液倒入水 (60 mL)中，用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，有機相分別用水 (60 mL)和飽和鹽水 (60 mL)洗滌，合併的有機相用無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1138.5.
步驟3： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 在0 °C，向粗品3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-(甲氧基甲氧基)萘-1-基)-8-氟喹唑啉-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150.9 mg, 129.68 μmol)的1,4-二氧六環溶液 (2.5 mL)中加入氯化氫/1,4-二氧六環溶液 (4.0 M, 5 mL)，室溫下反應1小時。反應結束後，在30 °C下減壓濃縮，濃縮物中加入氨甲醇溶液 (5 mL)，再在30 °C下減壓濃縮。所得粗品先經薄層層析製備板 (二氯甲烷:甲醇=10:1, 0.1% NH 3)純化，再經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟喹唑啉-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 994.1. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.37 (s, 1H), 7.98 - 7.94 (m, 1H), 7.72 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.36 - 7.33 (m, 2H), 7.31 (s, 1H), 7.24 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 7.18 - 7.14 (m, 1H), 7.07 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 4.46 - 4.38 (m, 1H), 4.30 - 4.20 (m, 2H), 4.00 - 3.99 (m, 1H), 3.94 - 3.82 (m, 1H), 3.82 - 3.77 (m, 1H), 3.56 - 3.43 (m, 4H), 2.83 - 2.66 (m, 3H), 2.33 - 2.22 (m, 9H), 2.21 (s, 3H), 2.15 - 1.96 (m, 6H), 1.73 - 1.66 (m, 6H), 1.60 - 1.35 (m, 6H), 1.35 - 1.00 (m, 8H), 1.00 - 0.95 (m, 3H), 0.95 - 0.83 (m, 1H).
實施例252： 1-(5-(9-((4-(( R)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)-3-甲基丁基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.52 g, 3.03 mmol)溶於THF (15 mL)中，加入Cs 2CO 3(2.28 g, 6.99 mmol)和 ( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁-1-醇 ()。將反應液加熱至 90 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (30 mL)，乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥，過濾，濾液濃縮，所得粗產品經矽膠柱層析 (PE:EtOAc = 2:1)得到3-(2-(( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 668.4.
步驟2： 3-(2-(( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (900 mg, 1.35 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (830 mg, 1.62 mmol)的1,4 -二氧六環 (10 mL)和H 2O (2 mL)的混合溶液中加入Cata CXium Pd G 3(197 mg, 0.27 mmol)和碳酸銫 (1.58 g, 4.86 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (20 mL)淬滅，並用乙酸乙酯 (30 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (PE:EA = 1:1)純化，得到3-(2-(( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 509.9.
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-3-甲基-2-(哌𠯤-1-基甲基)丁氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( R)-2-((4-苄基哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (900 mg, 0.88 mmol)溶於DCM (10 mL)中，加入1 -氯乙基氯碳酸酯 (378 mg,2.64 mmol)和DIEA (227 mg,1.0 mmol)。混合物在室溫反應1小時，減壓濃縮，濃縮物加入MeOH (10 mL)溶解，加熱到50 ℃反應50分鐘。反應結束後減壓濃縮，濃縮物矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 15:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-3-甲基-2-(哌𠯤-1-基甲基)丁氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 928.6.
步驟4： 3-(2-(( R)-2-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-3-甲基-2-(哌𠯤-1-基甲基)丁氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.162 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (104 mg, 0.243 mmol)的DCM/AcOH (2 mL/0.1 mL)溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(108 mg, 0.486 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 10:1)純化，得到3-(2-(( R)-2-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 670.5.
步驟5： 1-(5-(9-((4-(( R)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)-3-甲基丁基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-2-((4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-甲基丁氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (145 mg, 0.11 mmol)的DMF (2 mL)溶液中加入氟化銫 (84 mg, 0.55 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4 -二氧六環 (2 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (20 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品通過高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-2-(((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)甲基)-3-甲基丁基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 520.2. 1H NMR (400 MHz, DMSO -d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.04 - 7.89 (m, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 7.19 - 7.12 (m, 2H), 4.52 - 4.39 (m, 2H), 4.37 - 4.22 (m, 2H), 3.92 (d, J= 1.6 Hz, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.65 - 3.37 (m, 9H), 2.70 - 2.65 (m, 2H), 2.46 - 2.13 (m 10H), 2.07 - 2.00 (m, 2H), 1.96 - 1.86 (m, 2H), 1.73 - 1.59 (m, 6H), 1.55 - 1.21(m, 8H), 1.16 - 0.82 (m, 11H).
實施例253： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲氧基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲氧基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 在室溫下，向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( R)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (100 mg, 0.111 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲氧基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (57 mg, 0.133 mmol)的二氯甲烷 (2 mL)溶液中，加入鈦酸四異丙酯 (158 mg, 0.555 mmol)，在25 ℃下攪拌16小時。混合物在0 ℃下加入三乙醯氧基硼氫化鈉 (71 mg, 0.333 mmol)繼續25 ℃反應3小時。加入甲醇 (5 mL)，在40 ℃下減壓濃縮，所得粗品通過薄層層析製備板純化 (二氯甲烷:甲醇 = 10:1，0.1% NH 3)，得到3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲氧基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 658.0.
步驟2： 1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲氧基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( R)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-(甲氧基-d3)苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (90 mg, 0.0685 mmol)的DMF (2 mL)溶液中加入CsF (52 mg, 0.343 mmol)，常溫攪拌半小時。加入水 (2 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。將濃縮得到的中間體溶於1,4-二氧六環 (2 mL)，加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用乙酸乙酯 (5 mL x 3)萃取。將合併的有機相用Na 2SO 4乾燥，過濾並減壓濃縮，所得粗品經高效液相製備純化得到1-(5-(9-((4-(( R)-3-((4-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-(甲氧基-d3)苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 507.6. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.33 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.46 (t, J= 9.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.33 (m, 2H), 7.32 (d, J= 1.9 Hz, 1H), 7.17 (d, J= 2.4 Hz, 1H), 7.14 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 4.53 - 4.40 (m, 2H), 4.36 - 4.23 (m, 1H), 4.14 - 4.00 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.66 - 3.41 (m, 8H), 2.68 (t, J= 6.7 Hz, 2H), 2.44 - 1.97 (m, 15H), 1.72 - 1.61 (m, 6H), 1.54 - 1.39 (m, 5H), 1.33 - 1.20 (m, 4H), 1.10 - 1.02 (m, 2H), 0.99 - 0.92 (m, 4H).
實施例254： 1-(5-(9-((4-(( S)-3-((4-(3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮
步驟1： 3-(2-(( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2,7-二氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (1.50 g, 3.50 mmol)和 ( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙-1-醇 (1.30 g, 5.26 mmol)溶於THF (20 mL)于封管反應器中，加入Cs 2CO 3(2.28 g, 7.0 mmol)。將反應液加熱至 90 ℃反應16 h。反應完畢，冷卻至室溫，加入水 (30 mL)，乙酸乙酯萃取 (30 mL x 3)。合併有機相，用飽和NaCl溶液洗滌，無水Na 2SO 4乾燥過濾，濾液濃縮得粗產品，經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)得到3-(2-(( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 640.4.
步驟2： 3-(2-(( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(2-(( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-7-氯-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (800 mg, 1.25 mmol)和 ((2-氟-6-(甲氧基甲氧基)-8-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼烷-2-基)萘-1-基)乙炔基)三異丙基矽烷 (769 mg, 1.50 mmol)的1,4-二氧六環/水 (5.0 mL/1.0 mL)的混合溶液中加入Ruphos Pd G3 (105 mg, 0.125 mmol)和磷酸鉀 (796 mg, 3.75 mmol)。混合物在氮氣保護下85 ℃反應16小時，加入水 (20 mL)，並用乙酸乙酯 (20 mL x 3)萃取，合併有機相並用無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 20:1)純化，得到3-(2-(( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 990.6.
步驟3： 3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( S)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 將3-(2-(( S)-3-(4-苄基哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (850 mg, 0.86 mmol)溶於DCM (4 mL)中，加入1-氯乙基氯甲酸酯 (369 mg, 2.58 mmol)和DIEA (333 mg, 2.58 mmol)。混合物在室溫反應1小時後減壓濃縮，濃縮物加入MeOH (5 mL)溶解，加熱到50 ℃反應1小時。反應結束後減壓濃縮。濃縮物經矽膠柱層析 (DCM:MeOH(NH 3) = 20:1)純化，得到3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( S)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 900.5.
步驟4： 3-(2-(( S)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯的製備 向3-(8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)-2-(( S)-2-甲基-3-(哌𠯤-1-基)丙氧基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (150 mg, 0.167 mmol)和3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-甲醛 (107 mg, 0.251 mmol)的DCM/AcOH (1.5 mL/0.1 mL)的攪拌溶液中加入鈦酸四異丙酯 (0.5 mL)，在30 ℃下攪拌2小時。混合物在冰浴下加入NaBH(OAc) 3(106 mg, 0.501 mmol)並攪拌2小時。將混合物濃縮並經矽膠柱層析 (DCM:MeOH = 100:1 ~ 10:1)純化，得到3-(2-(( S)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯。 LC-MS: (ESI, m/z): [M/2+H] += 657.0.
步驟5： 1-(5-(9-((4-(( S)-3-((4-(3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮的製備 向3-(2-(( S)-3-(4-((3-(3-(2,4-二氧代四氫嘧啶-1(2 H)-基)-4-甲氧基苯甲醯)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-9-基)甲基)哌𠯤-1-基)-2-甲基丙氧基)-8-氟-7-(7-氟-3-(甲氧基甲氧基)-8-((三異丙基矽基)乙炔基)萘-1-基)吡啶並[4,3-d]嘧啶-4-基)-3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-8-羧酸三級丁酯 (165 mg, 0.126 mmol)的DMF (1 mL)的攪拌溶液中加入氟化銫 (191 mg, 1.26 mmol)，在室溫下攪拌30分鐘。反應液加入水 (10 mL)，並用乙酸乙酯 (10 mL x 2)萃取，合併有機相並用飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鈉乾燥後減壓濃縮。向濃縮物的1,4-二氧六環 (1.0 mL)的攪拌溶液中加入HCl/1,4-二氧六環 (6 N, 1.0 mL)，室溫反應0.5小時。反應液用Na 2CO 3水溶液調節至pH＞7並用EtOAc (10 mL x 2)萃取。有機相用鹽水洗滌，經無水Na 2SO 4乾燥並濃縮。粗品經高效液製備純化得到1-(5-(9-((4-(( S)-3-((4-(3,8-二氮雜螺雙環[3.2.1]辛烷-3-基)-7-(8-乙炔基-7-氟-3-羥基萘-1-基)-8-氟吡啶並[4,3-d]嘧啶-2-基)氧)-2-甲基丙基)哌𠯤-1-基)甲基)-3-氮雜螺[5.5]十一烷-3-羰基)-2-甲氧基苯基)二氫嘧啶-2,4(1 H,3 H)-二酮。 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] += 1011.5. 1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 10.32 (s, 1H), 10.14 (s, 1H), 9.03 (s, 1H), 7.97 (dd, J= 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.49 - 7.43 (m, 1H), 7.40 - 7.34 (m, 2H), 7.31 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 7.19 - 7.12 (m, 2H), 4.51 - 4.40 (m, 2H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 4.12 - 4.01 (m, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.66 - 3.37 (m, 10H), 2.68 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.45 - 1.97 (m, 14H), 1.71 - 1.60 (m, 6H), 1.57 - 1.35 (m, 5H), 1.33 - 1.31 (m, 2H), 1.15 - 0.91 (m, 7H).
使用與前述實施例中所示類似的方法合成表1中的化合物 表1
實施例 化合物結構 LC-MS: (ESI, m/z): [M+H] +
91 960
92 974
93 988
94 1002
95 1023
96 967
97 1031
98 1021
99 1037
101 1061
111 995
112 981
113 995
114 1026
115 1022
116 1006
117 1011
118 991
119 989
120 955
121 973
122 969
123 985
124 984
125 1018
126 995
127 1009
128 997
129 1027
130 1012
131 1026
132 992
133 1011
134 977
135 1039
136 1025
137 1037
138 1026
139 1031
140 1045
141 1019
142 1037
143 1051
144 1073
145 1025
146 1053
147 1023
148 1037
149 991
150 991
152 1017
153 1021
154 1031
156 1015
157 1030
158 1029
159 1053
160 1005
161 935
162 919
163 905
164 939
165 919
166 947
167 961
168 962
169 962
170 958
171 1009
175 995
176 995
177 1009
178 1038
179 1025
180 1039
181 1023
182 1008
183 1008
184 1033
185 1039
186 1039
187 1039
188 1037
189 995
190 865
192 878
193 844
194 1084
195 1085
196 1083
197 1065
198 1063
199 1044
200 1060
201 991
202 975
203 995
204 979
205 979
206 999
208 983
209 1009
210 993
211 1013
212 997
213 1005
214 989
215 1009
216 993
217 1013
218 1023
219 1007
220 1027
221 992
222 976
223 996
224 996
225 980
226 1000
227 1010
228 994
229 1014
230 991
231 1005
232 958
233 959
234 1009
235 1009
236 1011
237 994
238 1020
239 1024
240 1042
241 1024
242 1008
244 1008
245 995
246 1015
247 1009
248 1012
Ⅱ生物活性測試實施例
測試實施例1：KRAS-G12D結合試驗
本方法使用KRAS-G12D/GTP結合試驗試劑盒 (PerkinElmer)，以均相時間分辨熒光技術 (HTRF)測定化合物對KRAS-G12D與GTP結合的抑制作用。
詳細測試方法參考試劑盒說明書，實驗流程如下：將本發明中的化合物先溶解於DMSO中，濃度為20 mM，用試劑盒中的緩衝液進行等梯度稀釋，使受試化合物在反應體系中的終濃度範圍為0.02~5000 nM，DMSO的終濃度為0.5%。將5 μL化合物與5 μL 1x Human KRAS G12D 6His-tagged (PerkinElmer)、5 μL 1x 6His Eu Cryptate Antibody (PerkinElmer)以及5 μL 1x GTP Red reagent (PerkinElmer)在384孔板 (Greiner)中25 ℃下孵育1 小時。孵育結束後，在EnVision酶標儀 (PerkinElmer)上以HTRF模式測定各孔在激發波長為337 nm，讀取各孔在發射波長為620 nm和665 nm的熒光強度，使用公式Ratio＝(665 nm/620 nm)×10 4算出Ratio值。通過與對照組熒光強度比值進行對比，計算化合物在各濃度下的抑制率，進而通過GraphPad Prism 8分析軟件以對數濃度-抑制率進行非線性曲線擬合，得出化合物的IC 50值 (表2)。
測試實施例2：KRAS-G12D降解試驗
在KRAS G12D突變的人肺癌細胞A-427 (ATCC)、在KRAS G12D突變的人胃癌細胞AGS、KRAS G12D突變的人轉移胰腺癌細胞AsPc-1、KRAS G12D突變的人胰腺腺癌細胞Panc 04.03上考察化合物對KRAS-G12D的降解作用。具體方法為：在24孔細胞培養板每孔中鋪0.95 mL細胞，使細胞密度為5×10 5個/孔；細胞板置於5% CO 2培養箱中37 ℃培養過夜。然後在相應鋪有細胞的孔中加入50 μL稀釋後的化合物溶液，使化合物的終濃度在0.03~3000 nM範圍內。DMSO終濃度為0.25%。加入化合物後的細胞板置於5% CO 2培養箱中37 ℃培養24 小時後，移除24孔細胞培養板中培養液後，用1×PBS (凱基)清洗2次，細胞培養板底部貼壁的A-427細胞加入120 μL RIPA (強)裂解液 (碧雲天)，補充1 mM苯甲基磺醯氟、蛋白酶抑制劑混合物 (碧雲天)以及蛋白酶磷酸酶抑制劑混合物 (碧雲天)裂解，冰上靜置30分鐘後，將每孔中的蛋白裂解液分別轉移至1.5 mL離心管中，15000 g、4 ℃離心20分鐘。離心後的細胞裂解上清液凍存於-80 ℃冰箱備用。
已製備完成的細胞裂解上清液樣品從-80 ℃冰箱取出解凍後，使用BCA蛋白質定量試劑盒 (天根)確定細胞裂解液中總蛋白的濃度。然後用PBS和5×SDS-PAGE蛋白上樣緩衝液 (碧雲天)將樣品的總蛋白濃度調整至0.5 μg/μL，100 ℃水浴15分鐘。然後置於冰上冰浴5分鐘後，14000 g、4 ℃離心1分鐘，混勻作為蛋白免疫印跡試驗的上樣樣品。在10%預製膠 (凱基)的上樣孔中加樣，上樣量為10 μL (總蛋白為5 μg)，加入足夠的Tris-MOPS-SDS電泳液 (Adamas)後120 V恒電壓、55分鐘進行電泳。電泳結束後，250 mA恒電流、55分鐘，把膠上的蛋白轉至PVDF膜上。轉膜結束後，將PVDF膜放入1×Quick Block封閉液 (碧雲天)中室溫孵育30分鐘。 封閉結束後，PVDF膜分別用5% BSA作為稀釋液1:1000比例稀釋的KRAS抗體 (Abcam)和1:2000比例稀釋的β-actin抗體 (Abcam)，4 ℃孵育過夜，然後用1×TBST緩衝液 (2.4g Tris, 8.8 g NaCl, 1.5 mL Tween 20, 調pH至7.4, 定容至1 L)洗滌膜10分鐘/次，共3次。再用5% BSA稀釋的二抗 (Abcam)室溫孵育2小時，然後再用1×TBST緩衝液洗滌膜10分鐘/次，共3次。最後用Clarity Western ECL Substrate (BIO-RAD)孵育5分鐘發光顯色，ChemiScope 6200 Touch化學發光成像系統 (勤翔)進行顯色和蛋白圖譜拍照。蛋白圖譜通過化學發光分析軟件 (勤翔)進行灰度值分析。使用公式：灰度校正值＝ (目的蛋白灰度值/對應內參灰度值)×10 3，計算出各樣品的灰度校正值。再與對照組灰度校正值對比計算降解率。進而通過GraphPad Prism 8分析軟件以對數濃度-抑制率進行非線性曲線擬合，得出化合物的DC 50和D max值 (表3、表4)。
測試實施例3：3D細胞增殖抑制試驗
在KRAS G12D突變的人肺癌細胞A427、KRAS G12D突變的人胃癌細胞AGS、KRAS G12D突變的人轉移胰腺癌細胞AsPc-1、KRAS G12D突變的人胰腺癌細胞Panc 04.03、KRAS G12D突變的人胰腺癌細胞HPAC、KRAS G12V突變的人肺癌鱗癌細胞SW900和KRAS WT的人胃癌細胞MKN1上考察化合物對3D細胞增殖的抑制作用。具體方法為：
在96孔低吸附微孔板 (PerkinElmer)相應孔中加入10 μL化合物梯度稀釋溶液，使受試化合物在反應體系中的終濃度範圍為10000 nM～0.026 nM。DMSO終濃度為0.2%。然後在相應每孔中鋪90 μL細胞，使細胞密度為5×10 2個/孔 (SW900細胞密度為5×10 3個/孔，MKN1細胞密度為1×10 3個/孔)。除受試化合物測試孔外，同時設置DMSO對照孔和培養基對照孔，DMSO對照孔中分別含有DMSO和細胞，培養基孔中只含有培養基。加完樣後，將96孔低吸附微孔板放入5%二氧化碳培養箱中，37 ℃孵育7天。7天后取出微孔板，每孔加入100 μL CTG試劑 (Promega)，室溫孵育60分鐘後在酶標儀EnVision上採用化學發光程序讀數。通過細胞增殖抑制百分比計算公式：抑制率%= (DMSO對照組平均值-化合物單濃度讀值)/ (DMSO對照組平均值-培養基對照組平均值)×100，計算化合物在各濃度時的抑制率，進而通過GraphPad Prism 8以對數濃度-抑制率進行非線性曲線擬合，得出化合物的IC 50值 (表5)。
測試實施例4：KRAS G12D介導的磷酸化ERK抑制試驗
根據AlphaLISA SureFire Ultra p-ERK 1/2 (Thr202/Tyr204) 試劑盒 (PerkinElmer)和AlphaLISA SureFire Ultra TotalERK 1/2試劑盒 (PerkinElmer)說明書提供的測試方法，分別確定樣品中的磷酸化ERK和總ERK相對含量。
磷酸化ERK和總ERK測定的實驗流程如下：每個樣品分別取10 μL加入384孔板 (Greiner)中，然後每個孔中分別加入5 μL已配製的Acceptor Beads (PerkinElmer)混合溶液 (包含50× Acceptor Beads 615、Activation Buffer, 以及等體積的Reaction Buffer 1和Reaction Buffer 2)，室溫孵育2小時。然後每個孔中分別加入5 μL用Dilution Buffer稀釋配製的1×Donor Beads (PerkinElmer)，室溫孵育過夜。孵育結束後，在EnVision酶標儀 (PerkinElmer)上用AlphaScreen標准設置模式分別測定磷酸化ERK和總ERK的AlphaLISA信號值。採用公式：磷酸化ERK校正值=磷酸化ERK AlphaLISA信號值/總ERK AlphaLISA信號值，計算各樣品的磷酸化ERK相對比值。通過與DMSO照孔磷酸化ERK相對比值進行對比，計算化合物在各濃度下對磷酸化ERK的百分比抑制率，再利用GraphPad Prism 8分析軟件以對數濃度-抑制率進行非線性曲線擬合，得出化合物對磷酸化ERK抑制的IC 50值 (表2)。 表2
實施例 KRAS G12D:GTP / IC 50(nM) pERK ( A427) / IC 50(nM)
實施例1 C -
實施例2 C -
實施例3 A B
實施例4 A A
實施例5 A A
實施例6 A A
實施例7 A A
實施例8 A A
實施例9 B -
實施例10 A A
實施例11 A -
實施例12 C -
實施例13 A A
實施例14 A A
實施例15 A A
實施例16 E E
實施例17 A A
實施例18 A A
實施例19 A A
實施例20 A A
實施例21 A A
實施例22 A A
實施例23 A C
實施例24 A A
實施例25 A C
實施例26 B A
實施例27 A -
實施例28 A -
實施例29 A A
實施例30 B A
實施例31 A A
實施例32 D E
實施例33 C A
實施例34 C -
實施例35 A -
實施例36 A A
實施例38 A -
實施例40 A -
實施例42 A -
實施例45 A -
實施例52 C -
實施例55 A -
實施例56 B -
實施例57 A -
實施例58 D -
實施例59 A -
實施例61 21.13 -
實施例63 1.15 -
實施例69 2.4 -
實施例84 2.47 -
實施例85 1.34 -
實施例108 3.22 -
實施例174 5.19 -
表2：「-」表示未檢測
當IC 50≤50 nM為A，當50 nM＜IC 50≤100 nM時為B，當100 nM＜IC 50≤500 nM為C，當500 nM＜IC 50≤1000 nM為D，當1000 nM＜IC 50≤10 μM為E。 表3
實施例 A427 (KRAS G12D) AGS (KRAS G12D)
DC 50(nM) Dmax (%) DC 50(nM) Dmax (%)
實施例1 E C - -
實施例2 E C - -
實施例3 A B - -
實施例4 A A - -
實施例5 A A - -
實施例6 A A 7.91 100
實施例7 A A - -
實施例8 A B - -
實施例9 E C - -
實施例10 A A - -
實施例11 E B - -
實施例12 E B - -
實施例13 B B - -
實施例14 A A - -
實施例15 A A 2.17 99.6
實施例16 E C - -
實施例17 E D - -
實施例18 A A - -
實施例19 B A - -
實施例20 A A 19.88 100
實施例21 A A - -
實施例22 A B - -
實施例23 E C - -
實施例24 A A - -
實施例25 A B - -
實施例26 E C - -
實施例27 E C - -
實施例28 E D - -
實施例29 A A - -
實施例30 A B - -
實施例31 A A - -
實施例32 E D - -
實施例33 A A - -
實施例34 E D - -
實施例35 E D - -
實施例36 A A - -
實施例37 A A - -
實施例38 A A - -
實施例39 A B - -
實施例40 E C - -
實施例41 E - - -
實施例42 A A 11.8 77.43
實施例43 A B - -
實施例44 A A - -
實施例45 E D - -
實施例46 A A - -
實施例47 C B - -
實施例48 A A - -
實施例50 A A 1.73 97.3
實施例51 A A 9.87 97.23
實施例52 C B - -
實施例55 A A 1.91 99.17
實施例56 A B - -
實施例57 A A 0.69 94.24
實施例58 A A - -
實施例59 E D - -
實施例62 15.75 94.8 - -
實施例70 14.64 87.3 - -
實施例71 2.1 95.02 7.02 99.62
實施例72 101 82.64
實施例73 19.84 87.25 16.03 85.65
實施例74 38.12 76.95 - -
實施例75 4.13 83.79 57.81 89.25
實施例76 1.74 89.31 - -
實施例77 1.76 94.49 1.47 100
實施例78 10.08 70.25 28.86 92.62
實施例81 16.83 76.5 2.99 80.33
實施例82 1.21 98.96 3.84 97.74
實施例83 33.87 87.25 - -
實施例84 4.67 86.33 3.82 92.15
實施例88 0.65 89.47 - -
實施例90 0.86 95.58 10.62 98.9
實施例107 4.98 94.74 - -
實施例109 - - 4.8 94.46
實施例243 1.66 92.88 - -
表4
實施例 ASPC-1 (KRAS G12D) Panc 04.03 (KRAS G12D)
DC 50(nM) Dmax (%) DC 50(nM) Dmax (%)
實施例6 2.9 100 21.71 99.87
實施例15 12.97 99.3 16.58 98.91
實施例20 0.57 100 15.15 100
實施例42 0.22 100 7.46 100
實施例50 33.13 100 31.91 99.26
實施例51 4.79 99.41 23.01 93.8
實施例55 11.07 95.17 4.08 98.62
實施例57 15.03 99.48 8.95 97.31
實施例71 4.76 98.61 11.85 98.85
實施例73 35.67 100 27.1 95.64
實施例75 8.79 99.46 9.38 92.04
實施例77 13.15 98.18 26.23 98.51
實施例78 23.74 100 16.26 100
實施例81 17.77 98.2 - -
實施例82 12.56 93.67 6.74 100
實施例84 0.71 99.59 1.99 98.61
實施例89 94.69 69 - -
實施例90 1.87 100 - -
實施例100 2.54 100 - -
實施例102 8.93 100 - -
實施例106 10.47 99.46 - -
實施例107 13.71 97.54 - -
實施例109 0.64 98.77 - -
實施例110 2.56 99.23 - -
實施例172 113.41 55.05 - -
實施例173 2.42 98.98 - -
實施例174 13.65 100 - -
實施例207 15.07 99.7 - -
實施例251 8.72 99.13 - -
實施例252 42.29 100 - -
表3、表4中：「-」表示未檢測
當DC 50≤50 nM為A，當50 nM＜DC 50≤100 nM時為B，當100 nM＜DC 50≤500 nM為C，當500 nM＜DC 50≤1000 nM為D; 1000 nM＜DC 50≤10 μM為E; 當80≤D max(%)≤100時為A，當50≤D max(%)＜80時為B，當30≤D max(%)＜50時為C，當D max(%)＜30時為D。 表5
實施例 3D Cell proliferation IC 50(nM)
A427 (KRAS G12D) AGS (KRAS G12D) AsPc-1 (KRAS G12D) Panc 04.03 (KRAS G12D) HPAC (KRAS G12D)
實施例3 E A - - -
實施例4 C B - - -
實施例5 B A - - -
實施例6 A A - - 5.35
實施例7 A A - - -
實施例8 B A - - -
實施例10 C A - - -
實施例11 - A - - -
實施例13 B A - - -
實施例14 A A - - -
實施例15 A A A A 4.06
實施例16 C E - - -
實施例17 B B - - -
實施例18 A A - - -
實施例19 C A - - -
實施例20 A A 3.27 10.49 -
實施例21 C A - - -
實施例22 B A - - -
實施例23 C B - - -
實施例24 C B - - -
實施例25 C - - - -
實施例26 B B - - -
實施例27 - A - - -
實施例29 A A - - -
實施例30 A A - - -
實施例31 A A 5.62 22.24 -
實施例32 E E - - -
實施例33 C A - - -
實施例36 A A - - 1.19
實施例37 C A - - -
實施例38 A A - - -
實施例39 C A - - -
實施例40 E C - - -
實施例42 A A 1.75 8.41 2.96
實施例44 C A - - -
實施例45 B B - - -
實施例47 B B - - -
實施例48 A A - - -
實施例50 A A A A 11.58
實施例51 A A A A 4.55
實施例54 A A - - -
實施例55 A A - - 4.28
實施例56 B A - - -
實施例57 A A A A 9.88
實施例59 C A - - -
實施例60 C A - - -
實施例61 C A - - -
實施例62 13.07 4.98 - - -
實施例67 36.51 33.65 - - -
實施例68 - 24.78 - - -
實施例70 - 15.51 - - -
實施例71 46.81 4.17 5.28 16.7 9.31
實施例72 - 8.64 - - -
實施例73 3.54 21.05 14.93 64.81 14.73
實施例74 31.58 15.74 - - -
實施例75 88.07 9.10 14.85 83.87 11.33
實施例76 74.76 9.53 - - -
實施例77 17.75 8.9 6.75 31.47 9.54
實施例78 16.26 9.25 17.03 37.93 18.71
實施例81 67.08 5.52 12.96 27.77 4.37
實施例82 21.83 5.78 4.95 14.13 4.15
實施例84 6.5 1.05 2.58 17.01 1.30
實施例85 - 50.22 - - -
實施例86 - 97.52 - - -
實施例87 - 605.7 - - -
實施例89 - 8.65 11.46 - 12.85
實施例90 28.27 0.65 1.19 8.82 2.44
實施例100 - 3.63 2.02 23.79 2.43
實施例102 - 6.56 3.69 15.17 13.49
實施例103 - 4.35 1.41 16.79 1.58
實施例104 - 2.49 1.83 31.28 5.32
實施例105 - - 93.5 - 12.69
實施例106 - 13.37 30.78 63.45 151.5
實施例107 - - 27.46 - 10.79
實施例108 - - 4.53 - 6.87
實施例109 - 3.98 1.42 6.73 1.62
實施例110 - 5.69 4.47 12.53 18.64
實施例151 - 6.82 3.86 23.11 6.92
實施例173 - 4.22 1.51 5.88 3.8
實施例174 64.2 19.41 62.48 31.28 1.78
實施例207 - 11.21 16.15 34.46 -
實施例243 121.2 2.16 2.34 21.73 0.61
實施例251 - - 14.33 - -
表5中：「-」表示未檢測
當IC 50≤50 nM為A，當50 nM＜IC 50≤100 nM時為B，當100 nM＜IC 50≤500 nM為C，當500 nM＜IC 50≤1000 nM為D，當1000 nM＜IC 50≤10 μM為E。
實驗結論：本發明化合物能夠有效地與KRAS G12D靶蛋白結合或產生抑制效果，本發明所述化合物能夠有效地降解KRAS G12D蛋白。本發明化合物能夠有效地抑制 pERK磷酸化，本發明化合物能夠有效地抑制3D細胞增殖。
無
無

Claims (23)

  1. 一種式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽： G-L-E             G’-L-E Ⅰ                 Ⅰ’ 其中： G為G1： ； Gʹ為G1ʹ： ； 各Y 1獨立地為鍵、O、C(R 3a) 2或NR 3a； 各X 1獨立地為鍵或-(CH 2) m-； 各X 1’獨立地為鍵或-C(O)-； 各R 1a獨立地為-OH、-N(R 3a) 2、C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基，所述C 3-C 12環烷基、3-12元雜環烷基可任選被1個或多個R a取代； 各R 2a獨立地為鹵素、氘、氰基、胺基、羥基、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 2、N(R 3a) 2、C 1-C 3烷基-O-C l-C 3烷基-、HC(=O)-、-CO 2R 3a、-CON(R 3a) 2或5-6元雜芳基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基或5-6元雜芳基任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； 各R 3a獨立地為H、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 3-C 6烯基或C 3-C 6炔基； 或者兩個R 3a與它們所連接的原子一起形成4-12元雜環烷基，所述4-12元雜環烷基任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； 或者R 1a與R 3a與它們各自連接的原子一起形成4-12元雜環烷基，所述4-12元雜環烷基含有至少一種選自N、O或S的雜原子，且任選被1個或多個R b取代； 各環A1獨立地為不存在、-L’-6-15元芳基、-L’-5-15元雜芳基或-L’-5-15元雜環烷基； 各環B獨立地為6-15元芳基、5-15元雜芳基、C 5-C 15環烷基或5-16元雜環烷基，所述6-15元芳基、5-15元雜芳基、C 5-C 15環烷基或5-16元雜環烷基任選被1個或多個R a取代； 各L’獨立地為鍵或C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被1個或多個氘、羥基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R a和各R b獨立地為氫、羥基、鹵素、氰基、-N(R 3a) 2、-CH 2N(R 3a) 2、3-8元雜環烷基、C l-C 6烷基、HC(=O)-、-CO 2R 4a、-CO 2N(R 4a) 2、C l-C 3烷氧基、(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-、C l-C 3烷基-N(R 4a) 2、C 2-C 4烯基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基、C l-C 3烷氧基、C 2-C 4烯基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基任選被1個或多個氘、鹵素、氰基、羥基、胺基、硝基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； 各R 4a獨立地為氫、C l-C 3烷基或C l-C 3羥基烷基； 或者兩個R 4a與它們所連接的原子一起形成雜環烷基，所述雜環烷基任選被1個或多個氘、-OH、-NH 2、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； m為0、1、2、3或4； n為0、1、2、3或4； J 1和J 2獨立地為CR´或N；條件是：J 1和J 2不同時為CR´；R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； 各R 2a’獨立地為鹵素、氘、氰基、胺基、羥基、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 2、N(R 3a) 2、C 1-C 3烷基-O-C l-C 3烷基-、HC(=O)-、-CO 2R 3a、-CON(R 3a) 2、5-6元雜芳基或-O-3-8元雜環烷基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基、5-6元雜芳基或-O-3-8元雜環烷基任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； 當J 1和J 2同時為N時，至少有一個R 2a’為-O-3-8元雜環烷基； L為連接鏈，其通過共價鍵連接G和E； L為連接鏈，其通過共價鍵連接Gʹ和E； 其中，所述各E獨立地為E1、E2或E3： 其中所述E1中： Z’為O、S或CH 2； X 2'為CH或N； Y 2'為CH、N、O或者S； Q 1、Q 2、Q 3、Q 4、Q 5各自獨立的為CR 3b或N； R 3b各自獨立地為氫、氘、羥基、胺基、氰基、鹵素、硝基、巰基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、6-10元芳基、5-10元雜芳基、-O-(C 1-C 6烷基)、-O-(C 1-C 6雜烷基)、-O-(C 3-C 8環烷基)、-O-(3-8元雜環烷基)、-S-(C 1-C 6烷基)、-S-(C 1-C 6雜烷基)、-S-(C 3-C 8環烷基)、-S-(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 1-C 6雜烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2、-N(3-8元雜環烷基) 1-2、-O-(C 6-C 10芳基)、-O-(5-10元雜芳基)；所述C 1-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基任選的被1-3個獨立的選自氘、羥基、鹵素、氰基、胺基、O(C 1-C 6烷基) 、O-(C 3-C 8環烷基)、-O-(3-8元雜環烷基)、N(C 1-C 6烷基) 1-2、-NH(C 3-C 8環烷基)、-NH(3-8元雜環烷基)、-O-( C 6-C 10芳基)和-O-(5-10元雜芳基)的基團取代；或者相鄰的兩個R 3b與其所連接的原子一起形成環烷基、雜環烷基、雜芳基或者芳基； m''為1、2或3； R 1b各自獨立地為氫、氘、羥基、胺基、氰基、鹵素、C 1-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、-O(C 1-C 6烷基)、-O-(C 3-C 8環烷基)、-O-(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-NH(C 3-C 8環烷基)、-NH(3-8元雜環烷基)、-O-( C 6-C 10芳基)或-O-(5-10元雜芳基)，所述烷基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基任選的被1-3個獨立的選自羥基、鹵素、氰基、羥基和胺基的基團取代； R 2b為無、氫、氘、C 1-C 6烷基或者C 3-C 6環烷基，所述C 1-C 6烷基和C 3-C 6環烷基任選的被1-3個獨立的選自羥基、鹵素、氰基、羥基、胺基和-OC(O)(C 1-C 6烷基)的基團取代； 其中所述E2中： Q 1、Q 2、Q 3和Q 4各自獨立地為CR 3b或N； W為CR 1cR 2c、C(S)、C(O)、SO 2、-OC=R 4c-、-SC=R 4c-或-C=R 4cNR 5c-或-N=CA′-； X為CH 2、O或S； X c為-CH 2-或-NG′-； Z為CH 2、O或者S； G′和G′′各自獨立地為氫、氘、C 1-C 6烷基、OH、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基任選被1個或多個羥基、鹵素、氰基和胺基取代； A′為氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基或鹵素； R 1c、R 2c和R 3c各自獨立的為氫、氘、羥基、鹵素、-NH 2、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6鹵代烷基、-CONR ′R ′′、-OR ′、-NR ′R ′′、-SR ′、-SO 2R ′、-SO 2NR ′R ′′、-CR ′R ′′、-CR ′NR ′R ′′、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-P(O)(OR ′)R ′′、-P(O)R ′R ′′、-OP(O)(OR ′)R ′′、CN、-NR ′SO 2NR ′R ′′、-NR ′C(O)NR ′R ′′、-C(O)NR ′C(O)R ′′、-NR ′C(=N-CN)NR ′R ′′、-C(=N-CN)NR ′R ′′、-NR ′C(=N-CN)R ′′、-NR ′C(=C-NO 2)NR ′R ′′、-SO 2NR ′COR ′′、-NO 2、-COR ′、-C(C=N-OR ′)R ′′、-CR ′=CR ′R ′′、-CCR ′、-S(C=O)(C=N-R ′)R ′′、-SF 5或-OCF 3; R 4c為O或者S； R 5c為H、C 1-C 6烷基、C 6-C 10芳基、5-12元雜芳基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基； R ′和R ′′各自獨立地為鍵、氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或3-8元雜環烷基； n ′′為0、1、2、3或4； 為單鍵或雙鍵； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體； 其中所述E3中： X 1和X 2各自獨立地為鍵、O、C(O)、C(S)、NR 1d或CR 1dR 2d； R 1d和R 2d各自獨立地為H、氘、C 1-C 6烷基，所述C 1-C 6烷基任選被1個或多個鹵素或C 1-C 6烷氧基取代； R P獨立地為H、氘、鹵素、-OH、C 1-C 3烷基，所述C 1-C 3烷基任選被1個或多個鹵素、羥基或C 1-C 3烷氧基取代； W 3為C 1-C 6烷基、-T-N(R 3dR 4d)、-T-N(R 3dR 4d)X 3、-T- C 6-C 10芳基、-T-5-10元雜芳基、-T-3-8元雜環基、-NR 5d-T-C 6-C 10芳基、-NR 5d-T-5-10元雜芳基或-NR 5d-T-3-8元雜環基，所述C 1-C 6烷基、-T-N(R 3dR 4d)、-T-N(R 3dR 4d)X 3、-T-C 6-C 10芳基、-T-5-10元雜芳基、-T-3-8元雜環基、-NR 5d-T-C 6-C 10芳基、-NR 5d-T-5-10元雜芳基或-NR 5d-T-3-8元雜環基任選被取代； X 3為C(O)、R 3d、R 4d或R 5d； R 3d、R 4d或R 5d各自獨立地選自H、氘、C 1-C 6烷基，所述C 1-C 6烷基任選被1個或多個鹵素、-OH、R 1dC(O)、R 1dC(S)、R 1dSO、R 1dSO 2、NR 1dR 2dC(O)、NR 1dR 2dC(S)、NR 1dR 2dSO或NR 1dR 2dSO 2； T為C 1-C 6烷基或-(CH 2) n-，所述-(CH 2) n-中的1個或多個亞甲基任選的被選自氘、鹵素或C 1-C 6烷基取代，所述C 1-C 6烷基任選被鹵素、-OH或胺基取代； n為0、1、2、3、4、5或6； W 4為 、 、 或 ，所述 、 、 或 任選被取代； R 6d和R 7d各自獨立地為H、氘、C 3-C 8環烷基或C 1-C 6烷基，所述C 3-C 8環烷基或C 1-C 6烷基任選被鹵素、-OH、CN、NO 2或胺基取代； W 5為6-10元芳基或5-10元雜芳基； R 8d為H、氘、鹵素、CN、OH、NO 2、NR 6dR 7d、OR 6d、COR 6dR 7d、NR 6dCOR 7d、SO 2R 6dR 7d、R 6dSO 2R 7d、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基，所述C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基任選被氘、鹵素、-OH、CN、NO 2或胺基取代。
  2. 如請求項1所述的一種式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其中： 式Ⅰ或Ⅰ’中，R 2a、R 2a’、R 3a、L’中的C 1-C 4亞烷基、R a和R b中一個或多個基團的定義還替換為如下的定義，條件是：L通過-C(O)-與E連接； R 2a和R 2a’獨立地為-O-C l-C 6雜烷基、-NH(C l-C 6雜烷基) 、-N(C l-C 6雜烷基)(C l-C 6雜烷基)或-C 3-C 4炔基-N(R 5a’) 2； R 2a和R 2a’中，所述羥基獨立地任選被1個或多個氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基、C 1-C 3烷基、C 3-C 8環烷基、-Si-C 1-C 3烷基、3-8元雜環烷基或-CON(R 3a) 2取代； R 2a和R 2a’中，所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-O-C 1-C 6烷基、-O-C 3-C 8環烷基和5-6元雜芳基獨立地任選被1個或多個C 3-C 8環烷基、-Si-C 1-C 3烷基、3-8元雜環烷基或-CON(R 3a) 2取代； 各R 3a為氘； L’中的C 1-C 4亞烷基還任選地被1個或多個鹵素取代； R a和R b獨立地為鍵、氘、氧代、氰基甲基、-N(R 3a) 2、-CH 2N(R 3a) -2、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(C 1-C 6雜烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-O-苯基、-O-吡啶基、C 2-C 4炔基、三唑基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 2、-C 3-C 4炔基-N(R 3a) 2或-3-8元雜環烷基； 或者，相鄰的兩個R a與它們所連接的原子一起形成6-10元芳基、5-10元雜芳基、5-8元環烷基或5-8元雜環烷基，所述6-10元芳基、5-10元雜芳基、5-8元環烷基或5-8元雜環烷基任選被1個或多個羥基、胺基、鹵素、氰基或硝基取代； R a和R b中，所述C l-C 6烷基、C l-C 3烷氧基、C 2-C 4烯基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基任選被1個或多個C l-C 3鹵代烷基取代； R a和R b中，所述C 1-C 6雜烷基、苯基、吡啶基、C 2-C 4炔基、三唑基、-CH 2C(=O)N(R 3a) 1-2或-C 3-C 4炔-N (R 3a) 2任選被1個或多個氘、鹵素、氰基、羥基、胺基、硝基、C l-C 3鹵代烷基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； 各R 4a獨立地為C 4-C 6烷基。
  3. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）各C 1-C 6雜烷基中1、2、3或4個亞甲基被雜原子和/或雜原子團替換，所述雜原子為O、S和N中的一種或多種；雜原子團為-C(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NH-和-NHC(O)-中的一種或多種； （2）所述各3-8元雜環烷基、所述各4-12元雜環烷基、所述各5-16元雜環烷基、所述各雜環烷基、所述各5-6元雜芳基、所述各5-10元雜芳基、所述各5-12元雜芳基、所述各5-15元雜芳基和所述各雜芳基的中的雜原子或雜原子團各自獨立地為O、S、-S(O)-、-S(O) 2-和N中的一種或多種，個數為1、2、3、4或5個； （3）各R 1a中，所述C 3-C 12環烷基為環丙基、環丁基、環戊基或環己基； （4）各R 1a中，所述3-12元雜環烷基為5-6元的單環的飽和的雜環烷基或者7、8或9元的橋環雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個，例如哌啶基、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； （5）各R 2a和各R 2a’中，所述的鹵素為F、Cl、Br或I，例如F或Cl； （6）各R 2a和各R 2a’中，所述的C l-C 6烷基、所述的-S-C l-C 6烷基中的C l-C 6烷基和所述的-O-C 1-C 6烷基中的C l-C 6烷基獨立地為C l-C 4烷基，還可為C l-C 3烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基； （7）各R 2a和各R 2a’中，所述的C 1-C 6雜烷基為C 3雜烷基，所述雜烷基中2亞甲基被O和-C(O)NH-替換，例如 ； （8）各R 2a和各R 2a’中，所述的C 3-C 8環烷基為C 3-C 6環烷基，例如環丙基、環丁基、環戊基或環己基； （9）各R 2a’中，所述的-O-3-8元雜環烷基為-O-3、4、5、或6元單環的飽和的雜環烷基，雜原子為N、S和O種的一種或多種，個數為1、2或3個，例如 ； （10）各R 2a和各R 2a’中，所述的3-8元雜環烷基為3-6元雜環烷基，雜原子為N、S和O種的一種或多種，個數為1、2或3個； （11）各R 2a和各R 2a’中，所述的C 2-C 6炔基為C 2-C 4炔基，例如乙炔基； （12）各R 2a和各R 2a’任選被取代基取代，所述的取代基中，所述的鹵素為F、Cl、Br或I，例如F； （13）各R 2a和各R 2a’任選被取代基取代，所述的取代基中，所述的C 1-C 3烷氧基為甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基，例如甲氧基； （14）各R 2a和各R 2a’任選被取代基取代，所述的取代基中，所述的C 1-C 3烷基為甲基、乙基、正丙基或異丙基，例如甲基； （15）各R 3a中，所述的C l-C 6烷基、所述的-S-C l-C 6烷基中的C l-C 6烷基和所述的-O-C 1-C 6烷基中的C l-C 6烷基獨立地為C l-C 4烷基，還可為C l-C 3烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基； （16）各環A1中，所述的-L’-6-15元芳基中的6-15元芳基為6-10元芳基，例如苯基或萘基； （17）各環A1中，所述的-L’-5-15元雜芳基中的5-15元雜芳基為5-10元雜芳基，還可為6、7、8或9元的單環或雙環的雜芳基，雜原子為N、S和O中的一種或多種，個數為1或2個，例如吡啶基、1H-吲唑基、苯基[d]噻唑或惡唑並苯基； （18）各環A1中，所述的-L’-5-15元雜芳基中的5-15元雜芳基為5-10元雜芳基，還可為6、7、8或9元的單環或雙環的雜芳基，雜原子為N、S和O中的一種或多種，個數為1或2個，例如吡啶基、1H-吲唑基、苯基[d]噻唑或惡唑並苯基； （19）各環A1中，所述的-L’-5-15元雜環烷基中的5-15元雜環烷基為5-10元雜環烷基，雜原子為N、S和O中的一種或多種，個數為1或2個； （20）各環B中，所述6-15元芳基為6-10元芳基，例如苯基或萘基； （21）各環B中，所述5-15元雜芳基為5-10元雜芳基，還可為5-6元雜芳基，雜原子為N，個數為1或2個，例如吡啶基； （22）各環B中，所述C 5-C 15環烷基為C 5-C 7單環的飽和的環烷基、C 5-C 7環烯基或C 8-C 15元三環的環烷基，例如 或 ； （23）各環B中，所述5-16元雜環烷基為5-7元的單環的雜環烷基的雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個，例如吡咯烷基、哌啶基或四氫-2H-吡喃基； （24）各R a和各R b中，所述鹵素為F、Cl、Br或I，例如F或Cl； （25）各R a和各R b中，所述C 1-C 6烷基為C 1-C 3烷基，例如甲基、乙基、正丙基或異丙基； （26）各R a和各R b中，所述C l-C 3烷氧基和所述(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-中的C l-C 3烷氧基獨立地為甲氧基、乙氧基、正丙氧基或異丙氧基。
  4. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）各環B獨立地為6-15元芳基、5-15元雜芳基或或5-16元雜環烷基，各R a獨立地為鹵素、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2或-N(C 3-C 8環烷基) 1-2取代； 優選，各環B獨立地為6-15元芳基或5-15元雜芳基或或5-16元雜環烷基，各R a獨立地為鹵素、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 6烯基、-C 3-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)或-N(C 1-C 6烷基) 1-2取代； 更優選，R a為F、Cl、羥基、氰基或甲基； （2）各環A1為C 6-C 15芳基或5-15元雜芳基；R 2a和R 2a’獨立地為羥基、胺基、鹵素、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、-O-C 1-C 6烷基、C 3-C 8為環丙基、C 2-C 6炔基或-O-3-8元雜環烷；所述C l-C 6烷基、所述-S-C l-C 6烷基和所述C 3-C 8為環丙基任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代； 優選，R 2a和R 2a’獨立地為羥基、胺基、鹵素、C l-C 6烷基、C 1-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、-O-C 1-C 6烷基、C 3-C 8為環丙基或C 2-C 6炔基，所述C l-C 6烷基、所述-S-C l-C 6烷基和所述C 3-C 8為環丙基任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代； 更優選，R 2a和R 2a’獨立地為-OH、F、Cl、Br、I、CN、-NH 2、-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、-OCH 3、OCH 2CH 3、 、 或-SCH 3取代，所述-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、 或-SCH 3任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代； 進一步優選，R 2a和R 2a’獨立地為羥基、胺基、F、Cl、甲基、乙基、異丙基、三氟甲基、 、-SCH 3、 、環丙基或 。
  5. 如請求項4所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）結構單元 為 、 、 、 、 、 或 ；所述 、 、 、 、 、 和 獨立地任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2取代； 結構單元 可為 、 、 或 ；所述 、 、 和 獨立地任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2或-N(C 3-C 8環烷基) 1-2取代； 結構單元 還可 或 ，所述 和 任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 6烯基、-C 3-C 6炔基、-C 3-C 8雜環烷基（例如3-8元雜環烷基）、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)或-N(C 1-C 6烷基) 1-2取代； 結構單元 進一步還可為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； （2）結構單元 為 、 或 ，所述的結構單元 任選被F、Cl、Br、I、羥基、胺基、氰基、-C 1-C 6烷基、-C 1-C 6雜烷基、-C 3-C 8環烷基、-C 2-C 6烯基、-C 2-C 6炔基、-3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-NH(C 1-C 6烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 2、-NH(C 3-C 8環烷基) 或-N(C 3-C 8環烷基) 2取代； 結構單元 進一步可為 、 或 ； （3）環A1為苯基、吡啶基、萘基、 、 或 ，所述苯基、吡啶基、萘基、 、 和 獨立地任選被-OH、F、Cl、Br、I、CN、-NH 2、-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、-OCH 3、OCH 2CH 3、 、 或-SCH 3取代，所述-CH 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH(CH 3) 2-、 或-SCH 3任選被鹵素、CN、-OH、-NH 2或C 1-C 3烷基取代。
  6. 如請求項5所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1） 為不存在、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； （2）結構單元 為 ； （3）結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，所述 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 和 獨立地任選被1、2或3個R a取代； 結構單元 可為 、 或 ，所述 、 和 獨立地任選被1或2個R a取代； 結構單元 進一步還可為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； 例如，結構單元 為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； 再例如，結構單元 為 、 、 、 、 或 ； （4）結構單元 為 、 或 ，所述結構單元 任選被1、2或3個R a取代； 結構單元 進一步還可為 、 或 。
  7. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）結構單元 為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ；例如 、 、 、 、 或 ； 結構單元 可為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，所述 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 和 獨立地任選被1、2或3個R a取代； 結構單元 還可為： 、 、 、 、 、 、 、 或 ，所述 、 、 、 、 、 、 、 和 獨立地任選被1或2個R a取代；較佳地，R a為任選被1個或多個羥基取代的C l-C 6烷基，例如-CH 2OH； 結構單元 進一步可為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； （2）結構單元 為 、 、 或 ； 進一步可為 、 、 或 。
  8. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）G1為G1-Ⅰ或G1-Ⅱ： 其中所述G1-Ⅰ中： R 1e為羥基、-N(R a’’) 2、C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基，所述C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基任選被一個或多個R x取代； X 1e為鍵或C l-C 4亞烷基； Y 1e為鍵、O或NR a’’； 環C為C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基或者5-10元雜環烷基； X’為鍵、C或者N； Y’為C或者N； 為一個或多個任選存在的雙鍵； R 2e為H、氘、鹵素、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； R 3e為鍵、H、氘、鹵素、氰基、氧代、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 1-C 6雜烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-O-苯基或-O-吡啶基，所述苯基或吡啶基任選被1個或多個羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 3鹵代烷基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； R 4e為-L 1-6-10元芳基或-L 1-5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基任選被1個或多個R a’取代； 或者R 4e與它所連接的碳原子一起形成C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基，所述C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基任選被鹵素、羥基、氰基、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)和C l-C 6烷基取代； R 5e為氫、氘、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； L 1為鍵或C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被鹵素、氘、羥基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R a’’獨立地為氫、氘或C l-C 6烷基； 各R x獨立地為H、氘、-OH、鹵素、C l-C 3烷基、-N(R a’’) 1-2、-CH 2N(R a’’) 1-2、C 1-C 3烷氧基、(C 1-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基、C l-C 3烷基-N(R a’’) 1-2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)、-CO 2R a’’、-CON(R a’’) 2、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基，所述C l-C 3烷基、C l-C 3烷氧基或C 2-C 4烯基任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基或胺基取代； R a’為獨立地為鹵素、氰基、羥基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-N(C l-C 6烷基) 1-2、-N(C l-C 6雜烷基) 1-2、-CH 2C(=O)N(R 5a’) 2、-C 3-C 4炔基(NR 5a’) 1-2、-N(R 5a’) 1-2、(C 1-C 3烷氧基)C l-C 3烷基-、C 3-C 6環烷基或3-6元雜環烷基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-N(C l-C 6烷基) 1-2、-N(C l-C 6雜烷基) 1-2、C 3-C 6環烷基或3-6元雜環烷基，任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基、胺基、C 1-C 3烷基、-O-C 1-C 3烷基或-Si-C 1-C 3烷基取代； 各R 5a’獨立地為H、氘或C 1-C 6烷基； 其中所述G1-Ⅱ中： 環D為6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基任選被R b’取代，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 環E為C 5-C 7環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基、C 5-C 7環烯基或8-10元螺環；環E與嘧啶環之間形成並環，所述C 5-C 7環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 5-C 7環烯基或8-10元螺環任選被R b’’取代，所述雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； Y’’為6-10元雜環烷基、6-10元芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元雜環烷基或5-10元雜芳基含有至少一種選自N、S或O的雜原子，且任選被R b’’’取代； R b’為C l-C 3烷基、羥基、-O(C l-C 3烷基)、氰基、鹵素、-N(R x’) 1-2、-CH 2N(R x’) 1-2、氰基甲基或3-8元雜環烷基； R b’’為鹵素、氘、氰基、羥基、C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 3烷基、-CH 2C(=O)N(R x’) 1-2、-C 3-C 4炔基(NR x’) 1-2、-N(R x’) 1-2、 C 1-C 3烷氧基- C l-C 3烷基-，所述C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、C 1-C 3烷氧基任選被氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； R b’’’為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 2-C 4炔基、C 2-C 4烯基、O(C l-C 6烷基)、HC(=O)-、-CO 2R x’、-CO 2N(R x’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R x’獨立地為H或C 1-C 3烷基； p為0或1； （2）所述G1´為G1´-Ⅰ或G1´-Ⅱ： 其中所述G1´-Ⅰ中： n2為1或2； J 1和J 2獨立地選自CR´或N，且J 1和J 2不同時為CR´； R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； R 1e為羥基、-N(R a’’) 2、C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基，所述C 3-C 12環烷基或3-12元雜環烷基任選被一個或多個R x取代； X 1e為鍵或C l-C 4亞烷基； Y 1e為鍵、O或NR a’’； 環C為C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基或者5-10元雜環烷基； X'為鍵、O、C或者N； Y'為C或者N； 為一個或多個任選存在的雙鍵； R 2e為H、氘、鹵素、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； R 3e為H、氘、鹵素、氰基、氧代、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 1-C 6雜烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-S(C 1-C 6烷基)、-S(C 3-C 8環烷基)、-O-苯基或-O-吡啶基，所述苯基或吡啶基任選被1個或多個羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 3鹵代烷基、C l-C 3烷基或C l-C 3烷氧基取代； R 4e為-L 1-6-10元芳基或-L 1-5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基任選被1個或多個R a’取代； 或者當n2為2，兩個R 4e與它所連接的碳原子一起形成C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基，所述C 8-C 10芳基或者8-10元雜芳基任選被鹵素、羥基、氰基、-O(C 1-C 6烷基)、-S(C 1-C 6烷基)或者C l-C 6烷基取代； R 5e為氫、氘、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、-O(C 1-C 6烷基)或-O(C 3-C 8環烷基)； L 1為鍵或C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被鹵素、氘、羥基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R a’’獨立地為氫、氘或C l-C 6烷基； 各R x獨立地為H、氘、-OH、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、-N(R a’’) 1-2、-CH 2N(R a’’) 1-2、C 1-C 3烷氧基、(C 1-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基、C l-C 3烷基-N(R a’’) 1-2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)、-CO 2R a’’、-CON(R a’’) 2、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C l-C 3烷氧基或C 2-C 4烯基任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基或胺基取代； R a’為獨立地為鹵素、氘、氰基、羥基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、三唑基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-NH(C l-C 6雜烷基)、-N(C l-C 6雜烷基) 2、-CH 2C(=O)N(R 5a’) 2、-C 3-C 4炔基(NR 5a’) 2、-N(R 5a’) 2（例如-N(C l-C 6烷基) 2、-NH(C l-C 6雜烷基)、）、(C 1-C 3烷氧基)C l-C 3烷基-、C 3-C 6環烷基或3-6元雜環烷基，其中所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、-S-C l-C 6烷基、C 2-C 6烯基、C 2-C 6炔基、-O-C l-C 6烷基、-O-C l-C 6雜烷基、-NH(C l-C 6烷基)、-N(C l-C 6烷基) 2、-NH(C l-C 6雜烷基)、-N(C l-C 6雜烷基) 2、-、C 3-C 6環烷基、3-6元雜環烷基，任選被氘、鹵素、氰基、羥基、硝基、胺基、C 1-C 3烷基、-O-C 1-C 3烷基或-Si-C 1-C 3烷基取代； 各R 5a’獨立地為H、氘或C 1-C 6烷基； 其中所述G1´-Ⅱ中： J 1和J 2獨立地為CR´或N，且J 1，J 2不同時為CR´； R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； 環D為6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基任選被R b’取代，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 環E為C 5-C 15環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10元芳基、5-10元雜芳基或C 5-C 7環烯基8-10元螺環；所述C 5-C 7環烷基、5-7元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 5-C 7環烯基或8-10元螺環任選被R b’’取代，所述雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； Y''為6-10元雜環烷基、6-10元芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元雜環烷基或5-10元雜芳基含有至少一種選自N、S或O的雜原子，且任選被R b’’’取代； R b’為氫、C l-C 6烷基、羥基、-O(C l-C 3烷基)、氰基、鹵素、-N(R x’) 2、-CH 2N(R x’) 2、-CO 2R x’、-CO 2N(R x’) 2氰基甲基5-6元雜芳基或3-8元雜環烷基，所述C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R b’’為鹵素、氘、氰基、羥基、C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 3烷基、-CH 2C(=O)N(R x’) -2、-C 3-C 4炔基(NR x’) 2、-N(R x’) 2或 C 1-C 3烷氧基- C l-C 3烷基-，所述C l-C 4烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、C 1-C 3烷氧基任選被氘、鹵素、羥基、氰基、胺基、硝基、C 1-C 3烷氧基或C 1-C 3烷基取代； R b’’’為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 2-C 4炔基、C 2-C 4烯基、O(C l-C 6烷基)、HC(=O)-、-CO 2R x’、-CO 2N(R x’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R x’獨立地為H或C 1-C 6烷基； p為0或1。
  9. 如請求項8所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其中： 所述G1為G1-Ⅰ-a、G1-Ⅰ-b或G1-Ⅱ-a： 其中： r為1或2；t為1、2或3； W 1與W 2與它們所連接的N原子一起形成6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 其中所述G1-Ⅰ-a、G1-Ⅰ-b或G1-Ⅱ-a的環C、R 1e、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’、Y’’和p如請求項8所述； 優選，所述G1為G1-Ⅰ-a1、G1-Ⅰ-a1′、G1-Ⅰ-a1′′、G1-Ⅰ-a1′′′、G1-Ⅰ-a2、G1-Ⅰ-a2′、G1-Ⅰ-b1、G1-Ⅰ-b2或G1-Ⅱ-a1： 其中所述G1-Ⅰ-a1、G1-Ⅰ-a1′、G1-Ⅰ-a1′′和G1-Ⅰ-a1′′′中： R 1a’為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’、-CO 2N(R 5a’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基或C 3-C 8環烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R 5a’獨立地為氫或C l-C 6烷基；其中R 3e、R 4e、R 5e、X’和Y’如G1-Ⅰ-a所定義均如請求項8所述； 其中所述G1-Ⅰ-a2和G1-Ⅰ-a2′中： 各R 1a’’獨立地為氫、羥基、鹵素、C l-C 3烷基、C l-C 3烷氧基、(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-、C l-C 3烷基-N(R 5a’) 1-2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’或-CO 2N(R 5a’) 2，所述C l-C 3烷基或C 2-C 4烯基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R 4a’為-L 2-6-10元芳基、6-10元芳基、-L 2-5-10元雜芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基可任選被一個或多個R 8a’取代； 各L 2為C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； 各R 5a’獨立地為H或C l-C 3烷基； 每個R 8a’獨立地是鹵素、氘、氰基、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、N(R 5a’) 1-2或-O-C l-C 6烷基，所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、-O-C 1-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R 3a’是氫或氧代； 所述G1-Ⅰ-b1、G1-Ⅰ-b2和G1-Ⅱ-a1中： 其中R 1e、R 3e、R 4e、R 5e、t、r、Y’’和p的所定義均如請求項8所述； 所述G1´為G1´-Ⅰ-a、G1´-Ⅰ-b或G1´-Ⅱ-a： 其中： r為1或2； t為1、2或3； W 1與W 2與它們所連接的N原子一起形成6-10元雜環烷基，所述6-10元雜環烷基含有至少一種選自N、S或O的雜原子； 其中所述G1´-Ⅰ-a、G1´-Ⅰ-b或G1´-Ⅱ-a的環C、J 1、J 2、R 1e、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、X'、Y'、Y''和p的定義均同請求項8所述； 優選的，所述G1´為G1´-Ⅰ-a1、G1´-Ⅰ-a1′、G1´-Ⅰ-a1′′、G1´-Ⅰ-a1′′′、G1´-Ⅰ-a2、G1´-Ⅰ-b1、G1´-Ⅰ-b2或G1´-Ⅱ-a1： 其中所述G1´-Ⅰ-a1、G1´-Ⅰ-a1′、G1´-Ⅰ-a1′′和G1´-Ⅰ-a1′′′中： R 1a'為氫、羥基、鹵素、氰基、C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’、-CO 2N(R 5a’) 2或5-6元雜芳基，所述C l-C 6烷基、C 3-C 8環烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； 各R 5a’是獨立地為氫或C l-C 6烷基； 其中J 1、J 2、R 3e、R 4e、R 5e、X'和Y'的定義均同請求項8所述； 其中所述G1´-Ⅰ-a2中： J 1和J 2獨立地為CR´或N，且J 1和J 2不同時為CR´； R´為氫、鹵素、氘、氰基、胺基、羥基或C l-C 6烷基； t´為0或1； 各R 1a''獨立地為氫、羥基、鹵素、C l-C 3烷基、C l-C 3烷氧基、-(C l-C 3烷氧基)-C l-C 3烷基-、-C l-C 3烷基-N(R 5a’) -2、氰基、C 2-C 4烯基、HC(=O)-、-CO 2R 5a’或-CO 2N(R 5a’) 2，所述C l-C 3烷基或C 2-C 4烯基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R 4a'為-L 2-6-10元芳基、6-10元芳基、-L 2-5-10元雜芳基或5-10元雜芳基，所述6-10元芳基或5-10元雜芳基可任選被一個或多個R 8a’取代； L 2為C 1-C 4亞烷基，所述C 1-C 4亞烷基任選被羥基、鹵素、氰基、胺基、C l-C 4羥基烷基或5-10元雜芳基取代； R 5a’獨立地為H或C l-C 3烷基； 每個R 8a’為地是鹵素、氘、氰基、羥基、胺基、C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、三唑基、-O-C 1-C 6烷基、N(R 5a’) 1-2或-O-C l-C 6烷基，所述C l-C 6烷基、C l-C 6雜烷基、C 3-C 6環烷基、-S-C l-C 3烷基、C 2-C 4烯基、C 2-C 4炔基、-O-C 1-C 6烷基任選被鹵素、羥基、氰基或胺基取代； R 3a'是氫或氧代； 所述G1´-Ⅰ-b1、G1´-Ⅰ-b2、G1´-Ⅱ-a1中： 其中J 1、J 2、R 1e、R 3e、R 4e、R 5e、t、r、Y''和p的定義均同請求項8所述。
  10. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其中： L為-(CH 2) j-或LA ； 所述-(CH 2) j-中的1個或多個亞甲基任選的被選自-NR 3’-、-O-、-CR 1’R 2’-、-C(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-C(O)NR 3’-、-NR 3’C(O)-、-S(O) 2NR 3’-、-NR 3’S(O) 2-、亞乙烯基、亞乙炔基、苯基、8-10元雙環亞芳基、3-7元飽和或部分不飽和的亞環烷基、5-11元的飽和或部分不飽和的亞螺環烷基、5-11元的飽和或部分不飽和的亞稠環烷基、8-10 元雙環飽和或部分不飽和的亞環烷基、具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的4-7元飽和或部分不飽和的亞雜環烷基、具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞螺雜環烷基、具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞稠雜環烷基、具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的8-10元雙環飽和或部分不飽和的亞雜環烷基、具有1-4個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的5-6元亞雜芳基、或具有1-5個選自氮、氧或硫雜原子的8-10元雙環雜芳基的基團替代，所述亞乙烯基、亞乙炔基、亞環烷基、亞雜環烷基、苯基、亞螺雜環烷基、亞稠雜環烷基、亞螺環烷基、亞稠環烷基、亞雜芳基各自獨立的任選的被1個或多個選自鹵素、氧代、-NR 3’R 4’、-OR 3’、硝基、-CN、C 1-C 6烷基、C 3-C 10環烷基、C 3-C 10雜環烷基的取代基取代，所述烷基、環烷基、雜環烷基任選被1個或多個選自鹵素、-OH、-NH 2、-CN、C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基的取代基取代，R 1’、R 2’各自獨立為鹵素、-OH、-NH 2、C 1-C 4烷基、C 1-C 4氯代烷基、C 1-C 4羥基烷基、-O(C 1-C 4烷基)、-NH(C 1-C 4烷基)、-NH(C 1-C 4烷基)、C 3-C 6環烷基、-O(C 3-C 6環烷基)、-NH(C 3-C 6環烷基)、C 3-C 6雜環烷基、-O(C 3-C 6雜環烷基)、-NH(C 3-C 6環烷基)；R 3’、R 4’各自獨立的為氫、氘、C 1-C 4烷基、C 3-C 6環烷基、C 3-C 6雜環烷基，j為2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12； 所述LA的定義為情形I或情形II： 情形I： 環U為C 3-C 12亞環烷基或含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述亞環烷基和亞雜環烷基任選被選自鹵素、氧代、氰基、胺基、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵代烷基、C 1-C 6羥基烷基或-O-(C 1-C 6烷基)的取代基取代； 環Y為鍵、C 3-C 12亞環烷基或含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述亞環烷基和亞雜環烷基任選被選自鹵素、氧代、氰基、胺基、羥基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6鹵代烷基、C 1-C 6羥基烷基或-O-(C 1-C 6烷基)的取代基取代； X''為鍵、-C(O)-、-NH-、-NCH 3-、-O-、-C(CH 3) 2-、-S-、-C=C-、-C≡C-、-CHF-、-CHCF 3-、-(CH 2) qC(O)-、-S(O)-、-S(O) 2-、-C(O)O-、-OC(O)-、-(CH 2) qC(O)NH-、-C(O)NCH 3-、-NHC(O)-、-NCH 3C(O)-或-C(O)CH 2O-； q為1或2； Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-、-S-、-NH-、-C≡C-、-N(C 1-C 6烷基)-、-N(C 1-C 6鹵代烷基)-、-C(O)-、-N(C 1-C 6羥基烷基)-、-N(C 3-C 8環烷基)-或-CR dR e-替代，v為1、2、3、4、5、6或7； R d、R e各自獨立地為H、-OH、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基； 或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-、-NH-、-C≡C-、-N(C 1-C 6烷基)-、-N(C 1-C 6鹵代烷基)-、-C(O)-、-N(C 1-C 6羥基烷基)-或-N(C 3-C 8環烷基)-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8； 情形II： 環U為含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述3-12元亞雜環烷基任選被如下取代基取代：被1、2或3個羥基取代的C 1-C 6烷基： 環Y為含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基； X''為-C(O)-； Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的1個或兩個亞甲基任選的被選自-O-和-CR dR e-替代，v為1、2、3、4、5、6或7；R d、R e各自獨立地為H、NH 2或被1、2或3個鹵素取代的C 1-C 6烷基，或R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的亞甲基上1個或多個氫任選地被氘取代；各k獨立地為1、2、3、4、5、6、7或8。
  11. 如請求項10所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： L中，-(CH 2) j-中的亞甲基被選自-O-、C(O)-、亞乙烯基、具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的4-7元飽和或部分不飽和的亞雜環烷基和具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞螺雜環烷基取代；j為8； 優選，-(CH 2) j-為-O-CH 2-亞乙烯基-CH 2-具有1-2個獨立地選自氮、氧或硫雜原子的4-7元飽和或部分不飽和的亞雜環烷基-CH 2-具有1-2個獨立的選自氮、氧或硫雜原子的5-11元飽和或部分不飽和的亞螺雜環烷基-C(O)-； LA為如下方案 1或 2； 方案 1： LA中環U為含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基、6-10元的亞稠雜環烷基、6-10元的亞橋雜環烷基或者C 6-C 10的亞橋環烷基；環Y為含有1個或者2個氮雜原子的6-8元飽和的單環亞雜環烷基、含有1個或者2個氮雜原子的7-11元的亞螺雜環烷基或者亞稠雜環烷基；X''為鍵或-C(O)-；Lx為-(CH 2) v-，v為1、2、3、4或者5；Ly為-(CH 2) k-，k為1、2、3、4或者5；或者，LA中，環Y還可替換為7、8、9、10或11元亞螺雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個； 優選，LA中環U為含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基、6-10元的亞稠雜環烷基；環Y為含有1個或者2個氮雜原子的6-8元飽和的單環亞雜環烷基、含有1個或者2個氮雜原子的7-11元的亞螺雜環烷基或者亞稠雜環烷基；X''為鍵或-C(O)-；Lx為-(CH 2) v-，v為1、2、3、4或者5；Ly為-(CH 2) k-，k為1、2、3、4或者5；或者，LA中，環Y還可替換為7、8、9、10或11元亞螺雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個； 方案 2： LA為LA-1、LA-2： 其中，X''為-C(O)-或-C(O)NH-； 所述LA-1和LA-2中，環U、環Y、Lx、Ly、q均如請求項10所述； 優選，LA為LA-3： 其中所述LA-3的定義為如下的情形1-5中的任一種； 情形1： Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-S-、-NH-、-NMe-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 、 、 、 、 、 、 、 、-C(CH 3) 2-、-CH(CH 3)-、-CH(OH)-、-CH(OCH 3)-、C(CH 3)(OH)-或-C=CH 2；v為1、2、3、4、5或6； 環U為 、 、 、 、 、 、 或 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接；所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被F、-OH、-OCH 3、-NH 2取代； 環Y為鍵、 、 、 或 ，其中c端與Ly連接，d端與X''連接；所述環Y中的1、2、3或4個氫原子任選被F、-OH、-OCH 3、取代； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-C≡C-、-C(O)-或-N(C 1-C 6烷基)-替代；k為1、2、3、4、5或6； X''為鍵、-C(O)-、-(CH 2) 1-2C(O)-或-(CH 2) 1-2C(O)NH-； 情形2： Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-S-、-NH-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 、 、 、 、 、 、 、 、-C(CH 3) 2-、-CH(CH 3)-、 -CH(CH 3)-、-CH(OCH 3)-、-CH(OH)-、-C(CH 3)(OH)-或-C=CH 2；v為1、2、3、4、5或6； 環U為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接；所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被F取代； 環Y為 、 、 、 、 或 ，其中c端與Ly連接，d端與X''連接；所述環Y中的1、2、3或4個氫原子任選被F取代； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-或-N(C 1-C 6烷基)-替代；k為1、2、3、4、5或6； X''為-C(O)-； 或者，情形2中的環Y還替換為 或 ； 情形3： Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-S-、-NH-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 、-CH(NH 2)-、-CH(CH 2CHF 2)-、-CH(CH 2CH 2CF 3)-或-CH(CH 3) 2-；v為1、2、3、4、5或6； 環U為 、 或 ； 環Y為 、 或 ； Ly為-(CH 2) k-，其所述Ly中的亞甲基上的被1個或多個氫任選地被氘取代；k為1、2、3、4、5或6； X''為-C(O)-； 情形4： Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-替代；v為1、2、3或4； 環U為 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接；所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被F取代； 環Y為鍵； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-C(O)-或-NH-替代；k為1、2、3、4、5、6、7或8； X''為-C(O)NH-； 情形5： Lx為-(CH 2) v-，其中所述Lx中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-或-CR dR e-替代；-CR dR e-為 ；v為1、2、3或4； 環U為 、 或 ，其中a端與Lx連接，b端與Ly連接； 環Y為 ； Ly為-(CH 2) k-，其中所述Ly中包含的一個或兩個CH 2各自獨立地任選的被-O-、-C(O)-或-NH-替代；k為1、2、3、4、5或6； X''為鍵。
  12. 如請求項10所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）LA中環U中，所述C 3-C 12亞環烷基為C 3-C 6單環的飽和的亞環烷基或C 6-C 10元亞橋環烷基，例如亞環己烷基或亞雙環[2.2.2]辛烷基； （2）LA中環U中，所述3-12元亞雜環烷基為3-8元的飽和的單環的亞雜環烷基、6-10元的亞稠雜環烷基或6-10元的亞橋雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個；或者，所述3-12元亞雜環烷基為8、9或10元亞橋雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1、2或3個， 所述3-12元亞雜環烷基優選為亞氮雜環丁烷基、亞吡咯烷基、亞哌啶基、亞哌𠯤基、亞六氫-1H-吡咯𠯤基、亞2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷基、亞3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷基、亞3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚烷基或 ；（3）LA中環U的取代基中，所述鹵素為F、Cl、Br或I； （4）LA中環U取代基中，所述的C l-C 6烷基和所述的-O-(C 1-C 6烷基)中的C l-C 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基或三級丁基； （5）LA中環U上的1、2、3或4個氫原子任選被選自鹵素、胺基、羥基、-O-(C 1-C 6烷基)或C 1-C 6烷基的取代基取代，或者，所述環U上的1、2、3或4個氫原子還可被1、2或3個羥基取代的C 1-C 6烷基取代； 優選，所述環U中的1、2、3或4個氫原子任選被選自F、-OH、-OCH 3、-NH 2或甲基取代；或者，所述環U上的1、2、3或4個氫原子被-CH 2OH取代； （6）LA中環Y中，所述C 3-C 12亞環烷基為C 3-C 6單環的亞環烷基，例如亞環己烷基； （7）LA中環Y中，所述3-12元亞雜環烷基為6-8元的單環的亞雜環烷基、7-11元亞螺雜環烷基或7-11元亞稠雜環烷基，雜原子為N，個數為1或2個；或者，所述3-12元亞雜環烷基為7、8、9、10或11元亞螺雜環烷基，雜原子為N和/或O，個數為1或2個； 優選，所述3-12元亞雜環烷基為亞哌啶基、亞哌𠯤基、亞3-氮雜螺[5.5]十一烷基、亞7-氮雜螺[3.5]壬烷基、亞2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷基、亞3,9-二氮雜螺[5.5]十一烷基、亞2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷基、亞2-氮雜螺[3.3]庚烷基或2-氧雜-9-氮雜螺[5.5]十一烷； （8）LA中環Y的取代基中，所述-O-(C 1-C 6烷基)中的C l-C 6烷基獨立地為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、二級丁基或三級丁基。
  13. 如請求項12所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其中LA為如下結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； 優選，各環U獨立地為含有1個或者2個氮雜原子的4-8元飽和的單環亞雜環烷基或6-10元的亞橋雜環烷基；各環Y獨立地為含有1-2個選自N、O或S雜原子的3-12元亞雜環烷基，所述的雜環烷基為亞單環雜環烷基或雙螺亞雜環烷基；X''為-C(O)-； 更優選，LA為如下任一結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； 最優選，LA中的環U為 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  14. 如請求項10所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）L中，-(CH 2) j-為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； （2）L中，LA為如下任一結構： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  15. 如請求項1所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）所述E1具有式E1-1a、E1-1b、E1-1c、E1-1d、E1-1e、E1-1f、E1-1g、E1-1aa、E E1-1h、1-1bb、E1-1cc、E1-1dd、E1-1ee、E1-1ff、E1-1gg或E1-1hh結構： Q 1、Q 2、Q 3、Q 4、Q 5、R 1''、R 2''、R 3''和m''的均同請求項1或2所述； （2）所述E2具有式E2-1a、E2-1b、E2-1c、E2-1d、E2-1e或E2-1f結構： 、 、 、 、 或 ； 其中所述E2-1a、E2-1b、E2-1c、E2-1d、E2-1e和E2-1f中： W為CR 1cR 2c、C(S)、C(O)或SO 2； X為CH 2、O或S; Y 2為NH、-N-C 1-C 6烷基、-N- C 6-C 10芳基、-N-5-10元雜芳基、-N- C 3-C 8環烷基、-N-3-8元雜環烷基、O或S； Z為CH 2、O或者S； G′′和G′各自獨立地選自氫、氘、C 1-C 6烷基、OH、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基、-CH 2-雜環烷基或-CH 2-苯基任選被1-3個獨立的選自羥基、鹵素、氰基、胺基的基團取代； Q 1、Q 2、Q 3、Q 4各自獨立的為CR 3b或N；R 3b的定義同請求項1或2所述； A′為氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 6環烷基或鹵素； R 1c、R 2c和R 3c各自獨立的選自氫、羥基、鹵素、-NH 2、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6鹵代烷基、-CONR ′R ′′、-OR ′、-NR ′R ′′、-SR ′、-SO 2R ′、-SO 2NR ′R ′′、-CR ′R ′′、-CR ′NR ′R ′′、芳基、雜芳基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-P(O)(OR ′)R ′′、-P(O)R ′R ′′、-OP(O)(OR ′)R ′′、-Cl、-F、-Br、-I、-CF 3、-CN、-NR ′SO 2NR ′R ′′、-NR ′C(O)NR ′R ′′、-C(O)NR ′C(O)R ′′、-NR ′C(=N-CN)NR ′R ′′、- C(=N-CN)NR ′R ′′、-NR ′C(=N-CN)R ′′、-NR ′C(=C-NO 2)NR ′R ′′、-SO 2NR ′COR ′′、-NO 2、-COR ′、-C(C=N-OR ′)R ′′、-CR ′=CR ′R ′′、-CCR ′、-S(C=O)(C=N-R ′)R ′′、-SF 5或-OCF 3; R ′和R ′′各自獨立的為鍵、氫、氘、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或3-8元雜環烷基； n ′′為0、1、2或3； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體； （3）所述E3具有式E3-1結構： W 3為C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或 ，所述芳基、雜芳基任選被取代； R 9、R 10各自獨立地選自氫、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基或5-10元雜芳基，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基或5-10元雜芳基任選被1個或多個-OH、鹵素或-NH 2取代； 或R 9、R 10與它們所連接的碳原子形成C 3-C 8環烷基，所述C 3-C 8環烷基任選被-OH、鹵素、-NH 2或C 1-C 3烷基取代； R 11選自C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基或 ，所述C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、3-8元雜環烷基、C 6-C 10芳基或5-10元雜芳基任選被1個或多個-OH、鹵素或-NH 2取代； R 12選自H、C(O)或取代的烷基； R 13選自H、C 1-C 6烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基，所述烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基任選被取代； R 16為H、鹵素、-OH、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基，所述C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基任選被鹵素取代； o為1、2、3或4， 其中，R 8d、R 14a、R 14b和R 15的定義均同請求項1和2所述。
  16. 如請求項15所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）E1具有式E1-1h''、E1-1i'、E1-1j'或E1-1h''h''結構： 其中，R 3b的定義如請求項1或2所述； 優選，R 3b獨立地為氫、鹵素、氰基、-OH、-NH 2、C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)、-O(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2或-S(C 1-C 6烷基)； 所述C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)或 -O(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2或-S(C 1-C 6烷基)任選被1-3個鹵素、氰基、-OH、-NH 2取代； 或者，所述C 1-C 6烷基、C 3-C 8環烷基、3-8元雜環烷基、-O(C 1-C 6烷基)、-O(C 3-C 8環烷基)或-O(3-8元雜環烷基)、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、-N(C 3-C 8環烷基) 1-2和-S(C 1-C 6烷基)還任選被1、2或3個氘取代； （2）E2具有式E2-1bb、E2-1aa或E2-1cc結構： 其中所述E2-1bb中： Q 1、Q 2、Q 3和Q 4各自獨立的為CR 3b或N； W為C(O)或CH 2； A'為氫、氘、C 1-C 6烷基或鹵素； R 3c為氫、氘、羥基、鹵素、-NH 2、-N(C 1-C 6烷基) 1-2、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 1-C 6鹵代烷基； n ′′為0、1、2或3； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體; 其中，R 3b的定義如請求項1或2所述； 其中所述E2-1aa或E2-1cc中： W為CH 2或C(O)； A'為氫、甲基、Cl或F； R 3c各自獨立的為氫、鹵素、氰基、羥基、NH 2、C 1-C 6烷基或C 1-C 6烷氧基； n ′′為0、1、2或3； -----為鍵，其可為 R立體異構體、 S立體異構體或非立體異構體； （3）E3具有式E3-1a、E3-1b或E3-1c結構： 其中， R 1d為H、乙基、異丙基、三級丁基、二級丁基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、烷基、羥基烷基、雜芳基或鹵代烷基，所述烷基、羥基烷基、雜芳基任選被取代； R 6d為H、-CH 3、-CH 2F、-CH 2OH、乙基、異丙基或環丙基； R 8d為H、鹵素、CN、OH、NO 2、C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基，所述C 6-C 10芳基、5-10元雜芳基、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、C 3-C 8環烷基或3-8元雜環烷基任選被鹵素、-OH、CN、NO 2或胺基取代； X d為CH 2或C(O)； R d為5-6元雜芳基，所述5-6元雜芳基任選被取代； 優選的，E3具有式E3-1aa結構： 其中， R 6d為H、-CH 3、-CH 2F、-CH 2OH、乙基、異丙基或環丙基； R 9為H； R 10為H、乙基、異丙基、三級丁基、二級丁基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基； R 11為 或5-10雜芳基，所述5-10雜芳基任選被1個或多個-OH、鹵素或-NH 2取代； R 12為H或C(O)； R 13為H、烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基，所述烷基、-烷基CO-、-(環烷基)烷基CO-、-芳烷基CO-、-芳基CO-、-(雜環烷基)CO-或芳基烷基任選被取代； R 8d為H、鹵素、CN、OH、NO 2、nn、 、 或 ； 更優選，式E3-1aa通過R 12與L連接。
  17. 如請求項16所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其滿足如下1個或多個條件： （1）E1為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； （2）E中，E2為： 或 ； （3）E3為： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  18. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其為方案a、b或c： 方案a： 所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物中，G1為 、 或 ； G1’為 ； L為 ； E獨立地為E1： ； R 1a’、R 3e、R 4e、R 5e、X’和Y’的定義均如請求項8或9所述；各R a、R 2a’、J 1和J 2如請求項1-9任一項中所述；Lx、Ly、環U和環Y的定義如請求項10-14中任一項中所述；X''、Q 1、Q 2、Q 3、Q 4、Q 5、X 2’、Y 2’、R 1b、R 2b、Z’和m''的定義如請求項1-9任一項中所述； 方案b： 所述的式ⅠⅠ或Ⅰ’化合物中，G1為 或 ；G1’為 ； R 1a為 、 或 ； L為 ， Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的兩個亞甲基被選自-O-和-CR dR e-替代； R d和R e各自獨立地為H、C 1-C 6烷基、C 1-C 6烷氧基、NH 2或被1、2或3個鹵素取代的C 1-C 6烷基，或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基； v為1、2、3、4、5、6或7； 環U為含有1-2個N雜原子的3-12元亞雜環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8； 環Y為含有1、2或3個選自N和O雜原子的3-12元亞雜環烷基； X''為-C(O)-； E為 ； 各R a、R 2a、R 2a’、J 1、J 2和n的定義均如請求項1-9任一項中所述；各R 3b的定義如請求項1-17中任一項所述； 較佳地， 各R 2a和R 2a’獨立地為鹵素、羥基、C l-C 6烷基或C 2-C 6炔基；R a為鹵素； L為如下任一結構； 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； R 3b為鹵素、C 1-C 6烷基或-O-(C 1-C 6烷基)，所述C 1-C 6烷基或-O-(C 1-C 6烷基)任選的被1-3個獨立的選自氘或鹵素取代； 方案c： 所述的式ⅠⅠ或Ⅰ’化合物中，G1為 ；G1’為 ； R 1a為 或 ； L為 ， Lx為-(CH 2) v-，所述Lx中的兩個亞甲基被選自-O-和或-CR dR e-替代； R d和R e各自獨立地為C 1-C 6烷基，或者R d與R e與它們所連接的C原子一起形成C 3-C 8環烷基； v為1、2、3、4、5、6或7； 環U為含有1-2個N雜原子的3-12元亞雜環烷基； Ly為-(CH 2) k-，所述Ly中的一個或兩個亞甲基任選的被選自-O-替代，k為1、2、3、4、5、6、7或8； 環Y為含有1-2個選自N雜原子的3-12元亞雜環烷基； X''為-C(O)-； E為 ； 各R a、R 2a、R 2a’、J 1、J 2和n的定義均如請求項1-9任一項中所述；各R 3b的定義如請求項1-17中任一項所述； 優選， 各R 2a和R 2a’獨立地為鹵素、羥基、C l-C 6烷基或C 2-C 6炔基；R a為鹵素； L為如下任一結構； ； R 3b各自獨立地為氫、C 1-C 6烷基或-O-(C 1-C 6烷基)。
  19. 如請求項1或2所述的式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，其為如下任一化合物： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
  20. 一種藥物組合物，其包括治療有效量的如請求項1-19中任一項所述式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
  21. 一種物質 X在製備藥物中的應用，其中所述物質 X為如請求項1-19中任一項所述式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽，或者，如請求項20所述藥物組合物；所述藥物為用作治療或預防KRAS突變介導的疾病或病症的藥物，或者，用作治療或預防癌症藥物； 優選，所述KRAS突變介導的疾病或病症為KRAS G12D與SOS1或SHP2蛋白相互作用所引起的疾病或病症； 所述癌症選自： 心臟: 肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肪肉瘤)、黏液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤組; 肺: 支氣管癌(鱗狀細胞癌、未分化小細胞癌、未分化大細胞癌、腺癌)、肺泡癌(細支氣管癌)、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨瘤錯構瘤、間皮瘤; 胃腸道:食管癌(鱗狀細胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(導管腺癌、胰島素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、類癌腫瘤、血管活性腸肽瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌腫瘤、卡波西氏肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、纖維神經瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯構瘤、平滑肌瘤); 泌尿生殖系統: 腎(腺癌、胚胎性癌肉瘤（腎母細胞瘤）、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細胞癌、移行細胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睾丸(精原細胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎瘤、絨毛膜癌、肉瘤、間質細胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣腫瘤、脂肪瘤); 肝: 肝癌(肝細胞癌)、肝小膽管癌、肝母細胞瘤、惡性血管皮內細胞瘤、肝細胞腺瘤、血管瘤; 膽道: 膽管癌、膽囊癌、壺腹癌、肝小膽管癌; 骨: 骨源性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、軟骨肉瘤、尤因氏肉瘤、惡性淋巴瘤(網狀細胞肉瘤)、多發性骨髓瘤、惡性巨細胞瘤脊索瘤、軟骨瘤(骨軟骨外骨病)、良性軟骨瘤、軟骨母細胞瘤、軟骨黏液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細胞瘤; 神經系統: 顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、膠質瘤)、大腦(星形細胞瘤、成神經管細胞瘤、神經膠質瘤、室管膜瘤、生殖細胞瘤(松果體瘤)、多形膠質母細胞瘤、少突神經膠質瘤、神經鞘瘤、眼癌、先天性腫瘤)、脊髓神經纖維瘤、腦膜瘤、神經膠質瘤、肉瘤); 婦產科: 子宮(子宮內膜癌(血清囊腺癌、粘液囊腺癌、非分類癌)、顆粒-鞘膜細胞瘤、卵巢塞萊二氏細胞瘤、無性細胞瘤、惡性畸胎瘤)、外陰(鱗狀細胞癌、上皮內癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(明細胞癌、鱗狀細胞癌、肉毒桿菌肉瘤(胚胎型橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌); 血液學: 血液(骨髓性白血病(急性和慢性)、急性淋巴細胞白血病、慢性淋巴細胞白血病、骨髓增生性疾病、多發性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤(惡性淋巴瘤); 皮膚: 惡性黑色素瘤、基底細胞癌、鱗狀細胞癌、卡波西肉瘤、痣發育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕疙瘩、銀屑病; 腎上腺: 成神經細胞瘤； 例如，所述癌症選自： 胰腺癌、肺癌、結腸直腸癌、膽管上皮癌、多發性骨髓瘤、黑色素瘤、子宮癌、子宮內膜癌、甲狀腺癌、急性髓性白血病、膀胱癌、尿路上皮癌、胃癌、子宮頸癌、頭頸部鱗狀細胞癌、彌漫性大B細胞淋巴瘤、食道癌、慢性淋巴細胞性白血病、肝細胞癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、成膠質細胞瘤、腎癌及肉瘤。
  22. 一種如請求項1-19中任一項所述式Ⅰ或Ⅰ’化合物，和/或其立體異構體、對映異構體、非對映異構體、阻轉異構體、氘代化物、水合物、溶劑化物、代謝物、前藥，和/或其藥學上可接受的鹽的製備方法，其為如下方法： 當G為 ，L為LA ，且環U含有NH基團時，製備方法為： ； 當G1’ 、L為LA ，且環U含有NH基團時，製備方法為： ； 其中，所述 指含有NH基團的環U； R 1a’的定義均如請求項1-10中任一項中所述；R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’和R 1a’的定義均如請求項8或9任一項中所述； 指含有醛基的Lx；Lx為定義如請求項10-14任一項中所述； 環U、環Y、X’’、Lx和Ly的定義均如請求項10-14任一項中所述； E的定義均如請求項1-19中任一項所述； 當G為 、L為LA ，且環Y含有NH基團，X’’為C(O)時，其製備方法為： ； 當G1’為 、L為LA ，且環Y含有NH基團，X’’為C(O)時，其製備方法為： ； 其中 指含有NH基團的環Y； P 100為五氟苯基或者對硝基苯基； R 1a’的定義均如請求項1-10中任一項中所述；R 3e、R 4e、R 5e、X’、Y’和R 1a’的定義均如請求項8或9所述； 環U、環Y、X’’、Lx和Ly的定義均如請求項10-14任一項中LA中所定義； E的定義如請求項1-18中任一項所述。
  23. 一種如式W-1、W-2、W-3、W-4、W-5、式II-1、式II-2或式II-3所示的化合物： ； 其中，各R 1a獨立地為 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ，各R 19獨立地為胺基保護基；R 17和各R 18獨立地為羥基保護基； J1、J2、L和E的如請求項1-18中任一項所述； 環C、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、R 1b、R 2b、R 3b、W 1、W 2、X’和Y’的定義均如請求項8-10中任一所述； 環U、環Y、X’’、Lx和Ly的定義均如請求項10-13中任一項所述； p’’為1、2、3或4； 優選地，式W-1為式W-1-1、式W-2為式W-2-1、式W-3為式W-3-1、式W-4為式W-4-1、式W-5為式W-5-1： 其中，環C、R 2e、R 3e、R 4e、R 5e、W 1和W 2如請求項8-10中任一項所述；R 1b、R 2b和R 3b的定義如請求項1-16中任一項所述； Lx、環U、Ly、環Y和p’’的定義如請求項10-14中任一項所述； 更優選地，所述式W-1、W-2、W-3、W-4或W-5所示的化合物選自： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 ； 所述的如式II-1、式II-2或式II-3所示的化合物優選為如下任一化合物： 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 、 或 。
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