TW202339714A - 可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用 - Google Patents
可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用 Download PDFInfo
- Publication number
- TW202339714A TW202339714A TW111113809A TW111113809A TW202339714A TW 202339714 A TW202339714 A TW 202339714A TW 111113809 A TW111113809 A TW 111113809A TW 111113809 A TW111113809 A TW 111113809A TW 202339714 A TW202339714 A TW 202339714A
- Authority
- TW
- Taiwan
- Prior art keywords
- equol
- bifidobacterium
- combination
- bcrc
- daidzein
- Prior art date
Links
- ADFCQWZHKCXPAJ-GFCCVEGCSA-N equol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1CC2=CC=C(O)C=C2OC1 ADFCQWZHKCXPAJ-GFCCVEGCSA-N 0.000 title claims abstract description 84
- 235000019126 equol Nutrition 0.000 title claims abstract description 84
- ADFCQWZHKCXPAJ-UHFFFAOYSA-N indofine Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1CC2=CC=C(O)C=C2OC1 ADFCQWZHKCXPAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 83
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 title claims abstract description 9
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 title claims abstract description 9
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title abstract description 6
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 claims abstract description 5
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N daidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 63
- 235000007240 daidzein Nutrition 0.000 claims description 31
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 20
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 17
- 241001608472 Bifidobacterium longum Species 0.000 claims description 16
- 229940009291 bifidobacterium longum Drugs 0.000 claims description 16
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 16
- 241000186012 Bifidobacterium breve Species 0.000 claims description 11
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 claims description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 claims description 10
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 claims description 9
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 claims description 9
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 claims description 9
- 241000186016 Bifidobacterium bifidum Species 0.000 claims description 8
- 241000194035 Lactococcus lactis Species 0.000 claims description 8
- 235000014897 Streptococcus lactis Nutrition 0.000 claims description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 8
- 229940002008 bifidobacterium bifidum Drugs 0.000 claims description 7
- 235000013322 soy milk Nutrition 0.000 claims description 7
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 6
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 claims description 3
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 claims description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 claims description 2
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 claims 1
- GMTUGPYJRUMVTC-UHFFFAOYSA-N Daidzin Natural products OC(COc1ccc2C(=O)C(=COc2c1)c3ccc(O)cc3)C(O)C(O)C(O)C=O GMTUGPYJRUMVTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- KYQZWONCHDNPDP-UHFFFAOYSA-N Daidzoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N daidzein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 KYQZWONCHDNPDP-QNDFHXLGSA-N 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 abstract 2
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 abstract 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 33
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 16
- TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N genistein Natural products C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O TZBJGXHYKVUXJN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 235000006539 genistein Nutrition 0.000 description 11
- 229940045109 genistein Drugs 0.000 description 11
- ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N genistein 7-O-beta-D-glucoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC(O)=C2C(=O)C(C=3C=CC(O)=CC=3)=COC2=C1 ZCOLJUOHXJRHDI-CMWLGVBASA-N 0.000 description 11
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 9
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 9
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 9
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 8
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- 238000004321 preservation Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 5
- 230000036541 health Effects 0.000 description 5
- 208000006820 Arthralgia Diseases 0.000 description 3
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 3
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 3
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 3
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 241001394620 Eggerthella sp. Species 0.000 description 3
- 208000033830 Hot Flashes Diseases 0.000 description 3
- 206010060800 Hot flush Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000000112 Myalgia Diseases 0.000 description 3
- 208000001132 Osteoporosis Diseases 0.000 description 3
- 206010033557 Palpitations Diseases 0.000 description 3
- 208000001431 Psychomotor Agitation Diseases 0.000 description 3
- 206010038743 Restlessness Diseases 0.000 description 3
- 208000013738 Sleep Initiation and Maintenance disease Diseases 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 206010022437 insomnia Diseases 0.000 description 3
- 230000009245 menopause Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000011259 mixed solution Substances 0.000 description 3
- 208000013465 muscle pain Diseases 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 3
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000001692 EU approved anti-caking agent Substances 0.000 description 2
- 235000013527 bean curd Nutrition 0.000 description 2
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000002290 gas chromatography-mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 2
- 238000001294 liquid chromatography-tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 2
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 2
- 241000452716 Adlercreutzia equolifaciens Species 0.000 description 1
- 241000283712 Asaccharobacter celatus DSM 18785 Species 0.000 description 1
- 241000741973 Bifidobacterium breve DSM 20213 = JCM 1192 Species 0.000 description 1
- 241000711816 Catenibacterium sp. Species 0.000 description 1
- 241000193464 Clostridium sp. Species 0.000 description 1
- 241001478240 Coccus Species 0.000 description 1
- JHYXBPPMXZIHKG-CYBMUJFWSA-N Dihydrodaidzein Natural products C1=CC(O)=CC=C1[C@@H]1C(=O)C2=CC=C(O)C=C2OC1 JHYXBPPMXZIHKG-CYBMUJFWSA-N 0.000 description 1
- 239000004267 EU approved acidity regulator Substances 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241001560644 Enterorhabdus mucosicola Species 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 240000001929 Lactobacillus brevis Species 0.000 description 1
- 235000013957 Lactobacillus brevis Nutrition 0.000 description 1
- 241001147746 Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 241000866684 Lactobacillus graminis Species 0.000 description 1
- 241001640457 Lactobacillus intestinalis Species 0.000 description 1
- 241000186612 Lactobacillus sakei Species 0.000 description 1
- 241000186610 Lactobacillus sp. Species 0.000 description 1
- 241000194040 Lactococcus garvieae Species 0.000 description 1
- 241000168733 Paraeggerthella Species 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 241000191996 Pediococcus pentosaceus Species 0.000 description 1
- 241000588770 Proteus mirabilis Species 0.000 description 1
- 241000645045 Slackia equolifaciens Species 0.000 description 1
- 241001191217 Slackia isoflavoniconvertens Species 0.000 description 1
- 241000711835 Slackia sp. Species 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000004067 bulking agent Substances 0.000 description 1
- -1 carrier Substances 0.000 description 1
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 150000001949 daidzein Chemical class 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- JHYXBPPMXZIHKG-UHFFFAOYSA-N dihydrodaidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1C(=O)C2=CC=C(O)C=C2OC1 JHYXBPPMXZIHKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 description 1
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 description 1
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 1
- 235000019264 food flavour enhancer Nutrition 0.000 description 1
- 235000003599 food sweetener Nutrition 0.000 description 1
- 239000003517 fume Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000003054 hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 1
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 1
- 235000020939 nutritional additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 1
- 239000003765 sweetening agent Substances 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本發明提出一種可產生雌馬酚的益生菌菌株，其包括：副乾酪乳桿菌PA-88、短雙歧桿菌FL-01、嗜酸乳桿菌AC-69、長雙歧桿菌Gold-01、兩歧雙歧桿菌eq-01、或乳酸乳球菌CO-17。本發明尚提出利用上述益生菌菌株的應用。
Description
本發明攸關一種益生菌菌株，且特別關於一種可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用。
雌馬酚（equol）最早於1932年自懷孕母馬的尿液中分離取得，之後陸續於綿羊血清及人體尿液中鑑別出來。雌馬酚屬於一種非類固醇的天然雌性激素，學名4’,7-異黃烷二醇（4’,7-isoflavandiol）。如圖1所示，雌馬酚為大豆苷元（daidzein）的代謝產物，可透過腸內細菌代謝大豆苷元而轉化形成，而大豆苷元主要透過攝取大豆等豆科植物取得。
研究指出非所有的人體內均存在雌馬酚，僅30至50%的人存在雌馬酚，更指出約僅50%的日本人存在雌馬酚，約僅20至30%的歐美人士存在雌馬酚，造成這些個體差異的主因在於飲食內容與體內菌相組成的不同。研究更發現相較大豆苷元，雌馬酚具有更佳的生物活性。除了具備類激素的作用外，雌馬酚更具備抗氧化、免疫調節與保健功能。於體內雌性激素不足時，雌馬酚可扮演雌性激素的促進劑；反之，於體內雌性激素過多時，則可與雌性激素競爭地結合至雌性激素受體，造成降低雌性激素促進之細胞增生的活性，進而降低雌性激素過多造成的疾病發生。雌性激素失衡亦可能會引發疾病，如：乳腺癌、動脈粥狀硬化、骨質疏鬆，而透過雌馬酚與雌性激素受體的結合，則可緩解雌性激素失衡的問題。目前常利用雌馬酚來緩解女性更年期的不適症狀，如：熱潮紅、失眠、躁動、憂鬱、無力、關節或肌肉疼痛、心悸。
常見之可代謝大豆苷元來產生雌馬酚或其前軀體的細菌種類與菌株如以下表1所列。
表1、細菌種類與菌株
| 種類 | 菌株 | 來源 | 文獻 |
| Adlercreutzia equolifaciens | FJC-B9 | 人類糞便 | Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2008, 58, 1221-1227 |
| Asaccharobacter celatus | do03 | 大鼠盲腸 | J. Biosci. Bioeng. 2006, 102, 247-250 |
| Bifidobacterium breve | ATCC15700 | 人類腸道 | J. Funct. Foods 2012, 4, 736-745 |
| Bifidobacterium longum | BB536 | 人類糞便 | J. Funct. Foods 2012, 4, 736-745 |
| Catenibacterium sp. | D1 | 人類糞便 | FEMS Microbiol. Lett. 2008, 282, 73-80 |
| Clostridium sp. | HGH6 | 人類糞便 | Arch. Microbiol. 2000, 174, 422-428 |
| Clostridium-like sp. | TM-40 | 人類糞便 | Anaerobe 2007, 13, 32-35 |
| Eggerthella sp. | YY7918 | 人類糞便 | Biosci. Biotechnol. Biochem. 2008, 72, 2660-2666 |
| Eggerthella sp. | D2 | 人類糞便 | FEMS Microbiol. Lett. 2008, 282, 73-80 |
| Eggerthella sp. | Julong 732 | 人類糞便 | Appl. Environ. Microbiol. 2005, 71, 214-219 |
| Eggerthella-like bacteria | SNR48-44、SNR44-10、SNR45-571、SNR46-41、SNR48-350 | 臭豆腐 | Int. J. Food Sci. Nutr. 2013, 64, 936-943 |
| Enterorhabdus mucosicola | Mt1B8 | 小鼠迴腸黏膜 | Appl. Environ. Microbiol. 2008, 74, 4847-4852 |
| Lactobacillus sp. | Niu-O16 | 牛瘤胃 | Appl. Environ. Microbiol. 2005, 71, 214-219 |
| Lactobacillus paracasei | CS2 (JS1) | 人類糞便 | PLoS ONE 2018, 13, e0192490 |
| Lactobacillus sakei/graminis | CS3 | 人類糞便 | PLoS ONE 2018, 13, e0192490 |
| Lactobacillus intestinalis | JCM 7548 | 大鼠糞便 | Arch. Microbiol. 2019 |
| Lactococcus garvieae | 20-92 | 人類糞便 | J. Intest. Microbiol. 2007, 21, 217-220 |
| Paraeggerthella sp. | SNR40-432 | 臭豆腐 | Int. J. Food Sci. Nutr. 2013, 64, 936-943 |
| Pediococcus pentosaceus | CS1 | 人類糞便 | PLoS ONE 2018, 13, e0192490 |
| Proteus mirabilis | LH-52 | 大鼠腸道 | Acta Microbiol. Sin. 2012, 52, 696-702 |
| Slackia equolifaciens | DZE | 人類糞便 | Int. J. Syst. Evol. Microbiol. 2010, 60, 1721-1724 |
| Slackia isoflavoniconvertens | HE8 | 人類糞便 | Appl. Environ. Microbiol. 2009, 75, 1740-1744 |
| Slackia sp. | NATTS | 人類糞便 | Arch. Microbiol. 2010, 192, 279-287 |
職是之故，尋找新穎且可代謝大豆苷元來產生雌馬酚的微生物確實為本發明所屬技術領域人士積極解決的課題之一。
本發明之一目的在於尋找新穎並可產生雌馬酚的微生物，以提供雌馬酚的生產更多樣化的選擇。
是以，本發明提出一種可產生雌馬酚的益生菌菌株，其包括：副乾酪乳桿菌（
Lactobacillus paracasei）PA-88（寄存編號：BCRC 911091）、短雙歧桿菌（
Bifidobacterium breve）FL-01（寄存編號：BCRC 911111）、嗜酸乳桿菌（
Lactobacillus acidophilus）AC-69（寄存編號：BCRC 911107）、長雙歧桿菌（
Bifidobacterium longum）Gold-01（寄存編號：BCRC 911109）、兩歧雙歧桿菌（
Bifidobacterium bifidium）eq-01（寄存編號：BCRC 911110）、或乳酸乳球菌（
Lactoccus lactics）CO-17（寄存編號：BCRC 911117）。
本發明另提出一種產生雌馬酚的方法，其包括：於大豆苷元或雌馬酚之前軀體的存在下培養上述所有菌株之一或任意組合。
本發明又提出一種上述所有菌株之一或任意組合的用途，其為用於製備產生雌馬酚的食品、飲品、或保健品。
本發明更提出一種可食用的組合物，其包括上述所有菌株之一或任意組合以及大豆苷元或雌馬酚的前軀體。
本發明再提出一種上述組合物的用途，其為用於製備產生雌馬酚的組合物。
為讓本發明上述及/或其他目的、功效、特徵更明顯易懂，下文特舉較佳實施方式，作詳細說明於下：
本發明之第一實施方式提出一種益生菌菌株，其可將大豆苷元轉化成雌馬酚，此菌株包括：副乾酪乳桿菌（
Lactobacillus paracasei）PA-88（寄存編號：BCRC 911091）、短雙歧桿菌（
Bifidobacterium breve）FL-01（寄存編號：BCRC 911111）、嗜酸乳桿菌（
Lactobacillus acidophilus）AC-69（寄存編號：BCRC 911107）、長雙歧桿菌（
Bifidobacterium longum）Gold-01（寄存編號：BCRC 911109）、兩歧雙歧桿菌（
Bifidobacterium bifidium）eq-01（寄存編號：BCRC 911110）、或乳酸乳球菌（
Lactoccus lactics）CO-17（寄存編號：BCRC 911117）。
鑑於上述此等菌株的生物活性，本發明之第二實施方式提出一種產生雌馬酚的方法，此方法包括以下步驟：於大豆苷元或雌馬酚之前軀體的存在下培養此等菌株之一或任意組合。本文所用之「雌馬酚的前軀體」乙詞意指大豆苷元轉化成雌馬酚過程中的中間產物，如圖1所示，例如為二氫大豆苷元（dihydrodaidzein）或四氫大豆苷元（tetrahydrodaidzein）。詳言之，培養時可將此等菌株之一或任意組合培養於一含大豆苷元或雌馬酚之前軀體的基質中，基質的實例可以為但不限於MRS Broth、牛奶、果汁、或豆奶；培養溫度可以為但不限於2至53℃，較佳地為30至40℃，更佳地為30℃；培養時間可以為但不限於48至120小時，較佳地為60至84小時，更佳地為72小時；培養pH值可以為但不限於4.0至6.2，較佳地為4.3至5.5，更佳地為5.0；此等菌株之一或任意組合於基質的培養起始濃度可以為但不限於1x10
6至1x10
8cfu/mL，較佳地為5x10
6至5x10
7cfu/mL，更佳地為1x10
7cfu/mL；於每1克的大豆苷元或雌馬酚之前軀體的存在下，此等菌株之一或任意組合的培養起始總菌株量可以為但不限於5x10
6至5x10
8cfu，較佳地為1x10
7至1x10
8cfu，更佳地為8x10
7cfu。
培養後更可自基質萃取取得雌馬酚。詳言之，萃取時可將基質與乙酸乙酯均勻混合，再自所得的混合物分離取得一乙酸乙酯層，之後乾燥乙酸乙酯層取得雌馬酚。基質與乙酸乙酯的體積比可以為但不限於1：（0.1至10），較佳地為1：（0.5至2），更佳地為1：1；乾燥可以採用但不限於風乾或熱烘實現，而於採用熱烘的條件下，熱烘溫度可以為但不限於40至65℃，較佳地為45至55℃，更佳地為50℃。
鑑於上述此等菌株的生物活性，本發明之第三實施方式提出一種此等菌株之一或任意組合的用途，此用途為用於製備產生雌馬酚的食品、飲品、或保健品，藉此有此需求的個體可服用之。由於轉化取得雌馬酚須大豆苷元或雌馬酚的前軀體作為起始物，因此服用時、前、及/或後個體體內須存在大豆苷元或雌馬酚的前軀體，但不以此為限，只要大豆苷元或雌馬酚的前軀體與此等菌株之一或任意組合於個體內接觸反應即可。基於雌馬酚的生理功能，所製備的食品、飲品、或保健品至少可治療或預防乳腺癌、動脈粥狀硬化、骨質疏鬆、或女性更年期的不適症狀，如：熱潮紅、失眠、躁動、憂鬱、無力、關節或肌肉疼痛、心悸，但不以此為限。
鑑於上述此等菌株的生物活性，本發明之第四實施方式提出一種可食用的組合物，此組合物包含此等菌株之一或任意組合以及大豆苷元或雌馬酚的前軀體。具體而言，於每1克的大豆苷元或雌馬酚之前軀體的存在下，此等菌株之一或任意組合的總菌株量可以為但不限於5x10
6至5x10
8cfu，較佳地為1x10
7至1x10
8cfu，更佳地為8x10
7cfu。另外，可食用的組合物可以呈食品、飲品或保健品的形式，但不以此為限。此外，除了此等菌株之一或任意組合以及大豆苷元或雌馬酚的前軀體外，可食用的組合物更可包括添加劑，添加劑可以為但不限於酸度調節劑、防結塊劑、抗氧化劑、增積劑、載體、乳化劑、增味劑、包覆劑、保存劑、安定劑、甜味劑、增稠劑、營養添加劑或調味劑。而且，大豆苷元或雌馬酚之前軀體與添加劑之間的重量比可以為但不限於1：（1至5），較佳地為1：（2至4），更佳地為1：須說明的是，以每日每60公斤人體所須下，可食用的組合物含有總菌株量1x10
9cfu此等菌株之一或任意組合、12.5克大豆苷元或雌馬酚的前軀體以及37.5克添加劑，但不以此為限。
鑑於上述此等菌株的生物活性，本發明之第五實施方式提出一種上述所提之組合物的用途，此用途為用於製備產生雌馬酚的組合物，藉此有此需求的個體可服用之。所製備的組合物可以呈食品、飲品或保健品的形式，但不以此為限。基於雌馬酚的生理功能，所製備的組合物至少可治療或預防乳腺癌、動脈粥狀硬化、骨質疏鬆、或女性更年期的不適症狀，如：熱潮紅、失眠、躁動、憂鬱、無力、關節或肌肉疼痛、心悸，但不以此為限。
茲以下列實施例例示說明本發明：
習知利用高效能液相層析（high performance liquid chromatography，HPLC）、氣相層析質譜（gas chromatography-mass spectrometry，GC/MS）、或液相層析串聯質譜（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC MS/MS）來定性檢測雌馬酚。然而，於雌馬酚與其他代謝產物（如：大豆苷元或金雀異黃酮（genistein））同時存在下，難以將雌馬酚與其他代謝產物分離區分，而可能干擾檢測結果造成誤判。
取1mg雌馬酚標準品溶解於50μl乙酸乙酯配置成雌馬酚溶液，取1mg金雀異黃酮標準品溶解於50μl乙酸乙酯配置成金雀異黃酮溶液，並取1mg雌馬酚標準品與1mg金雀異黃酮標準品溶解於50μl乙酸乙酯配置成混合溶液。之後，滴定2μL溶液於薄層色層分析片上，揮發後置於展開槽內進行展開，而展開液為三氯甲烷：甲醇＝10：1。展開後，以波長254nm觀察薄層色層分析片。
如圖2所示，Lane 1為雌馬酚溶液，Lane 2為金雀異黃酮溶液，Lane 3為混合溶液。由此可知，能透過薄層色層分析將雌馬酚與金雀異黃酮分離區分，而雌馬酚的Rf值為0.33，金雀異黃酮的Rf值為0.28，故薄層色層分析為一套值得信賴之定性檢測雌馬酚的方法。
取5ml之大豆苷元或豆奶基質的菌株發酵液（發酵條件為溫度30℃，時間72小時）至離心管內，並加入5mL乙酸乙酯均勻混合。對所得的混合物高速離心分層取得乙酸乙酯層，再於抽風櫃內以55℃加熱乙酸乙酯層直至乾燥。之後，將乾燥產物溶解於50μL乙酸乙酯供備用。最後，參考上述的薄層色層分析過程對備用液進行分析。
如圖3所示，Lane 1為雌馬酚溶液，Lane 2為金雀異黃酮溶液，Lane 3為純豆奶基質，Lane 4為自長雙歧桿菌（
Bifidobacterium longum）536菌株發酵液取得的備用液，Lane 5為自副乾酪乳桿菌PA-88菌株發酵液取得的備用液，Lane 6為自短雙歧桿菌FL-01菌株發酵液取得的備用液，Lane 7為自嗜酸乳桿菌AC-69菌株發酵液取得的備用液，Lane 8為自長雙歧桿菌Gold-01菌株發酵液取得的備用液，Lane 9為自兩歧雙歧桿菌eq-01菌株發酵液取得的備用液，Lane 10為自乳酸乳球菌CO-17菌株發酵液取得的備用液，Lane 11為混合溶液。由此可知，長雙歧桿菌536、副乾酪乳桿菌PA-88、短雙歧桿菌FL-01、嗜酸乳桿菌AC-69、長雙歧桿菌Gold-01、兩歧雙歧桿菌eq-01、及乳酸乳球菌CO-17均可將大豆苷元或豆奶轉化成雌馬酚，且相較已知可產生雌馬酚的菌株長雙歧桿菌536（請見J. Funct. Foods 2012, 4, 736-745），副乾酪乳桿菌PA-88、短雙歧桿菌FL-01、嗜酸乳桿菌AC-69、長雙歧桿菌Gold-01、兩歧雙歧桿菌eq-01、及乳酸乳球菌CO-17可產生更多的雌馬酚。
綜上所述，本發明所提的微生物可大量地將大豆苷元或豆奶轉化成雌馬酚，因此極有潛力應用於雌馬酚的生產。
惟以上所述者，僅為本發明之較佳實施例，但不能以此限定本發明實施之範圍；故，凡依本發明申請專利範圍及發明說明書內容所作之簡單的等效改變與修飾，皆仍屬本發明專利涵蓋之範圍內。
無
圖1為一化學反應式示意圖，說明腸內細菌代謝大豆苷元轉化成雌馬酚的過程；
圖2為一薄層色層分析結果圖，呈現雌馬酚與金雀異黃酮的分離，其中藍色箭頭所指為對應於雌馬酚的條帶，紅色箭頭所指為對應於金雀異黃酮的條帶；以及
圖3為一薄層色層分析結果圖，比較不同益生菌菌株將大豆苷元或豆奶轉化成雌馬酚的程度，其中藍色箭頭所指為對應於雌馬酚的條帶，紅色箭頭所指為對應於金雀異黃酮的條帶。
1、TW中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心 2022/01/13 BCRC 911091；
2、TW中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心 2022/02/16 BCRC 911111；
3、TW中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心 2022/02/16 BCRC 911107；
4、TW中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心 2022/02/16 BCRC 911109；
5、TW中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心 2022/02/16 BCRC 911110；
6、TW中華民國 食品工業發展研究所生物資源保存及研究中心 2022/03/18 BCRC 911117。
Claims (10)
- 一種可產生雌馬酚的益生菌菌株，係包括： 副乾酪乳桿菌（ Lactobacillus paracasei）PA-88（寄存編號：BCRC 911091）、短雙歧桿菌（ Bifidobacterium breve）FL-01（寄存編號：BCRC 911111）、嗜酸乳桿菌（ Lactobacillus acidophilus）AC-69（寄存編號：BCRC 911107）、長雙歧桿菌（ Bifidobacterium longum）Gold-01（寄存編號：BCRC 911109）、兩歧雙歧桿菌（ Bifidobacterium bifidium）eq-01（寄存編號：BCRC 911110）、或乳酸乳球菌（ Lactoccus lactics）CO-17（寄存編號：BCRC 911117）。
- 一種產生雌馬酚的方法，係包括： 於大豆苷元或雌馬酚之前軀體的存在下培養副乾酪乳桿菌PA-88、短雙歧桿菌FL-01、嗜酸乳桿菌AC-69、長雙歧桿菌Gold-01、兩歧雙歧桿菌eq-01、及乳酸乳球菌CO-17之一或任意組合。
- 如請求項2所述之方法，其中該培養步驟包括： 將該等菌株之一或任意組合培養於一含該大豆苷元或該雌馬酚之前軀體的基質中，該基質為MRS Broth、牛奶、果汁、或豆奶。
- 如請求項2所述之產生雌馬酚的方法，其中該培養步驟的溫度為30至40℃，該培養步驟的時間為60至84小時，該培養步驟的pH值為4.3至5.5。
- 如請求項3所述之產生雌馬酚的方法，其中該等菌株之一或任意組合於該基質的培養起始濃度為1x10 6至1x10 8cfu/mL，且於每1克的該大豆苷元或雌馬酚之前軀體的存在下，該等菌株之一或任意組合的培養起始總菌株量為1x10 7至1x10 8cfu。
- 如請求項5所述之產生雌馬酚的方法，其中該培養步驟的溫度為30℃，時間為72小時，pH值為5.0。
- 一種副乾酪乳桿菌PA-88、短雙歧桿菌FL-01、嗜酸乳桿菌AC-69、長雙歧桿菌Gold-01、兩歧雙歧桿菌eq-01、及乳酸乳球菌CO-17之一或任意組合的用途，係為用於製備產生雌馬酚的食品、飲品、或藥品。
- 一種可食用的組合物，係包括： 副乾酪乳桿菌PA-88、短雙歧桿菌FL-01、嗜酸乳桿菌AC-69、長雙歧桿菌Gold-01、兩歧雙歧桿菌eq-01、及乳酸乳球菌CO-17之一或任意組合；以及 大豆苷元或雌馬酚的前軀體。
- 如請求項8所述之組合物，其中於每1克的該大豆苷元或該雌馬酚之前軀體的存在下，該等菌株之一或任意組合的總菌株量為1x10 7至1x10 8cfu。
- 一種如請求項8或9所述之組合物的用途，係為用於製備產生雌馬酚的組合物。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW111113809A TWI802367B (zh) | 2022-04-12 | 2022-04-12 | 可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| TW111113809A TWI802367B (zh) | 2022-04-12 | 2022-04-12 | 可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TWI802367B TWI802367B (zh) | 2023-05-11 |
| TW202339714A true TW202339714A (zh) | 2023-10-16 |
Family
ID=87424498
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TW111113809A TWI802367B (zh) | 2022-04-12 | 2022-04-12 | 可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| TW (1) | TWI802367B (zh) |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2019118281A (ja) * | 2017-12-28 | 2019-07-22 | ハイドロックス株式会社 | ケフィア粒構成菌産生物 |
-
2022
- 2022-04-12 TW TW111113809A patent/TWI802367B/zh active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| TWI802367B (zh) | 2023-05-11 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US10286026B2 (en) | Probiotic fermented cereal compositions and methods for treatment of gastrointestinal diseases caused by pro-inflammatory bacteria | |
| WO2006041930A2 (en) | Synbiotics | |
| TW201705969A (zh) | 新穎馬利乳酸桿菌ａｐｓ１及其用途 | |
| CN109251877A (zh) | 一种具有减脂等功能的纳豆芽孢杆菌Bn-SJLH001益生作用及其应用 | |
| CN108402453A (zh) | 红心火龙果发酵液、红心火龙果酵素及保健饮品 | |
| Senevirathne et al. | Growth performance, nutrient utilization, and health of dairy calves supplemented with condensed whey solubles | |
| JP2010104241A (ja) | Ｓ−エクオールの製法およびそれに用いる微生物 | |
| Mishra et al. | Bio-nutritional aspects of Tungrymbai, an ethnic functional fermented soy food of Khasi Hills, Meghalaya, India | |
| TW202339714A (zh) | 可產生雌馬酚的益生菌菌株及其相關應用 | |
| US20090196867A1 (en) | Soy kefir powder and uses thereof | |
| CN109527308A (zh) | 一种具有调理肠胃功能的益生菌饮品及其制备方法 | |
| TWI766184B (zh) | 一種植物乳桿菌及其製備植物性凝態優格、改善腸道菌相的用途 | |
| AU2013201442B2 (en) | Treatment of IBD and IBS using both probiotic bacteria and fermented cereal as treatment effectors | |
| WO2018123910A1 (ja) | 男性ホルモン増加促進用組成物 | |
| KR20110118329A (ko) | 발효 당침지 검정콩 스낵의 제조방법 | |
| Sharma | Role of phytases from lactic acid bacterial species in level upgradation of bioavailable micronutrients in food applications | |
| WO2022243933A1 (en) | Nutraceutical composition with probiotics, prebiotics and palm date pulp | |
| JP2016037475A (ja) | レストレスレッグス症候群改善用組成物 | |
| WO2021038320A1 (en) | An animal and livestock feed supplement | |
| CN112616922A (zh) | 缓解非酒精性脂肪肝的发酵乳制品及其制备方法 | |
| Larkin et al. | Increased probiotic or prebiotic (resistant starch) intake does not significantly affect isoflavone bioavailability in subjects consuming a high soy diet. | |
| CA2645749A1 (en) | Soy kefir powder and uses thereof |