TW202322846A

TW202322846A - 新穎的il27受體促效劑及其使用方法

Info

Publication number: TW202322846A
Application number: TW111130634A
Authority: TW
Inventors: 艾里爾扎勒特斯基; 吳家曦; 張彤; 索科爾哈希納斯托; 尼可林布洛赫
Original assignee: 美商再生元醫藥公司
Priority date: 2021-08-16
Filing date: 2022-08-15
Publication date: 2023-06-16
Also published as: WO2023022965A2; KR20240046251A; WO2023022965A3; WO2023022965A9; CA3229369A1; US20230110958A1; AU2022331241A1

Abstract

本文係關於具有改良的治療概況之IL27受體促效劑。

Description

新穎的IL27受體促效劑及其使用方法

相關申請案之交互參照

本申請係聲請2021年8月16日申請的美國臨時申請案號63/233,651之優先權，其內容係以全文引用的方式併入本文中。

介白素-27(IL27或IL-27)為二個次單元：艾司坦-巴爾病毒(Epstein-Barr virus)誘導基因3(EBI3)和IL27 p28 (p28)所組成的異二聚體細胞激素。IL27在結構上係與IL27和IL6細胞激素家族相關。IL27經由與gp130和IL27Ra(WSX1)組成的受體複合物結合並媒介訊號傳遞，其係活化Janus激酶(JAK)-訊號轉導和轉錄活化因子(STAT)和絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)訊號傳遞(Kastelein et al., 2007, Annu Rev Immunol. 25:221–242)。

IL27最初經提出為一免疫增強細胞激素，然而後續的研究顯示IL27展現複雜的免疫調節功能(綜述於Fabbi et al., 2017, Mediators of Inflammation 42:1-14)。由於其多效活性，IL27與廣範圍的疾病、病症和症狀相關聯，包括發炎症狀和免疫相關病症。

在治療中使用IL27，及尤其是任何形式的重組IL27的缺點之一為其血清半衰期短。在活體內IL27活性的喪失可能是由於數種因素造成的，包括腎清除和蛋白水解降解。

藉由提升IL27的循環壽命(延遲清除)、溶解度和穩定性，具有一在治療期間全身暴露期間較佳耐受性之IL27受體促效劑應為有利的。帶有提升的治療指數和最小的副作用，同時以治療上有效劑量給藥的IL27受體促效劑應為更加有利的。本文解決了本領域中此項和其他相關需求。

本文提供了新穎的IL27受體促效劑。在特定方面，IL27受體促效劑解決了IL27治療的缺點，且其特徵為憑藉改善的半衰期及/或改善的安全性概況而改良的治療概況。在另外方面，IL27受體促效劑解決了與傳統重組IL27融合結構有關的聚集問題，例如包含p28、EBI3和Fc結構域的融合蛋白。本文之IL27受體促效劑典型地係包括或由IL27突變蛋白所組成，這些突變蛋白與天然IL27的不同之處在於p28和/或EBI3的一級胺基酸序列及/或包含通常不存在於IL27中的額外結構域或基團(moiety)。IL27受體(可與「IL27促效劑」交換使用)和突變蛋白典型地係包括一個或一對IL27單體，其各自係包括一p28及/或EBI3基團和一視情況存在的多聚化基團(例如，Fc結構域)、視情況存在的穩定化基團(例如人類血清白蛋白)及/或視情況存在的靶向基團(例如scFv)抗體)或靶向基團之組份(例如Fab靶向部分的VH結構域)，視情況地與一或多條另外的多肽鏈相連結(例如一包括另外多聚化基團(例如，Fc結構域)或靶向基團組份(例如，Fab靶向基團的VL結構域)之多肽鏈)。示例的IL27單體係揭示於‎5.2章節中。示例的IL27受體促效劑係揭示於‎5.2章節和經編號的實施例24至318，並描繪於圖3至6中。

本文進一步係提供併入有助於改善的治療概況之胺基酸取代的變體p28部分。示例的變體p28部分係揭示於5.3.2章節和經編號的實施例1至23中。

本文進一步係提供p28蛋白和EBI3蛋白。本文之某些IL27受體促效劑和突變蛋白係包括與EBI3蛋白連結的p28蛋白。

在特定方面，p28蛋白係包含一p28基團和一多聚化(例如，Fc)結構域。p28蛋白可包括一、二或更多條多肽鏈且典型地係配置來與EBI3基團結合，例如EBI3蛋白的EBI3基團。在某些實施例中，p28蛋白不包括EBI3基團。示例的p28蛋白係揭示於5.2章節和經編號的實施例319至326中。

在特定方面，EBI3蛋白係包括一EBI3基團和一多聚化(例如，Fc)結構域。EBI3蛋白可包括一、二或更多條多肽鏈且典型地係配置來與p28基團結合，例如p28蛋白的p28基團。在某些實施例中，EBI3蛋白不包括p28基團。示例的EBI3蛋白係揭示於5.2章節和經編號的實施例327至334中。

本文進一步係提供編碼本文之IL27受體促效劑、IL2突變蛋白、IL27單體、p28蛋白、EBI3蛋白、p28基團和EBI3基團的核酸。編碼由二條或更多條多肽鏈組成的IL27受體促效劑、IL27突變蛋白、P28蛋白之核酸可為單一核酸(例如，編碼所有多肽鏈之載體)或多數個核酸(例如，編碼不同多肽鏈之二或更多個載體)。本文進一步係提供經工程改造用以表現本文之核酸和IL27受體促效劑、IL27突變蛋白、IL27單體、p28蛋白、p28基團和EBI3基團的宿主細胞和細胞株。本文進一步係提供製造本文之IL27受體或促效劑、IL27突變蛋白、IL27單體、p28蛋白、EBI3蛋白、P28基團或EBI3基團的方法。示例的核酸、宿主細胞、細胞株和製造IL27受體促效劑、IL27突變蛋白、IL27單體、p28蛋白、EBI3蛋白、p28基團和EBI3基團之方法係描述於5.9章節和經編號的實例‎335至‎343中，見下文。

本文進一步係提供包括本文之IL27受體促效劑、IL27突變蛋白、IL27單體、p28蛋白、EBI3蛋白、p28基團和EBI3基團的醫藥組成物。示例的醫藥組成物係描述於5.10章節和經編號的實例344至346中，見下文。

本文中進一步係提供使用本文之IL27受體促效劑、IL27突變蛋白、IL27單體、p28蛋白、EBI3蛋白、p28基團、EBI3基團和醫藥組成物之方法，例如，用於調節免疫反應、治療自體免疫症狀及/或局部遞送IL27受體促效劑。示例的方法係描述於5.11章節和經編號的實施例347至355中，見下文。

5.1 定義

約，大約：術語「約」、「大約」及諸如此類係用於整個說明書之數字前用以表示該數字並非必須精確(例如，所占的分數，測量精確度及/或準確度、計時等之偏差)。應理解的是，在其中X為一數字的情況下，「約X」或「大約X」之揭示亦為「X」之揭示。因此，例如，在其中一序列與另一序列具有「約X%序列同一性」之實施例的揭示亦為其中該序列與另一序列具有「X%序列同一性」之實施例的揭示。

及，或：除非另有說明，否則「或」連接詞旨在以其正確的意義作為一布林邏輯運算子(Boolean logical operator)來使用，包括替代物中特徵之選擇(A或B，其中選擇A係與B互斥)和結合特徵之選擇(A或B，其中係選擇A和B二者)。在本文中的某些地方，術語「及/或」係用於同一目的，其不應理解為暗示「或」係用來指稱互斥的替代物。

抗原結合結構域或 ABD：術語「抗原結合結構域」或「ABD」如本文中所用係指能特異性、非共價和可逆性與標靶分子結合之靶向部分。

連結：術語「連結」在IL27受體促效劑或其組份的情況下(例如，IL27 EBI3基團；IL27 p28基團；靶向基團如抗體)係指二或更多條多肽鏈之間的功能關係。特言之，術語「連結」係指二或更多條多肽相互連結，例如藉由分子相互作用非共價連結或藉由一或更多個雙硫橋或化學交聯共價連結，從而產生一功能性的IL27受體促效劑。可能存在於本文之IL27受體促效劑中的連結實例包括(但不限於)IL27 EBI3和p28基團之間的連結、Fc區中同二聚體和異二聚體Fc結構域之間的連結、Fab或scFv中VH和VL區之間的連結、Fab中CH1和CL之間的連結、以及結構域經取代的Fab中CH3和CH3之間的連結。

二價：術語「二價」如本文中所用有關IL27受體促效劑中的IL27及/或靶向基團係指分別具有二個IL27異二聚體及/或靶向基團(亦即二個EBI3xp28異二聚體)之IL27受體促效劑。典型地，對IL27基團及/或靶向基團為二價的IL27受體促效劑為二聚體(同二聚體或異二聚體)。

癌症：術語「癌症」係指特徵為異常細胞不受控制(且通常快速)生長之疾病。癌細胞可局部或經由血流和淋巴系統擴散到身體的其他部位。本文中描述了各種癌症之實例並包括(但不限於)乳癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、皮膚癌、胰臟癌、結腸直腸癌、腎癌、肝癌、腦癌、腎上腺癌、自主神經節癌、膽道癌、骨癌、子宮內膜癌、眼癌、輸卵管癌、生殖道癌、大腸癌、腦膜癌、食道癌、腹膜癌、垂體癌、陰莖癌、胎盤癌、胸膜癌、唾液腺癌、小腸癌、胃癌、睪丸癌、胸腺癌、甲狀腺癌、上呼吸消化道癌、尿道癌、陰道癌、外陰癌、淋巴瘤、白血病、肺癌及諸如此類。

互補決定區或 CDR：術語「互補決定區」或「CDR」，如本文中所用，係指抗體可變區內賦予抗原特異性和結合親和力的胺基酸序列。一般而言，各重鏈可變區有三個CDR(CDR-H1、CDR-H2、HCDR-H3)，各輕鏈可變區有三個CDR(CDR1-L1、CDR-L2、CDR-L3)。可用於鑑別CDR邊際的示例性慣例包括例如Kabat定義、Chothia定義、ABM定義和IMGT定義。參見，例如Kabat, 1991, “Sequences of Proteins of Immunological Interest,” National Institutes of Health, Bethesda, Md. (Kabat numbering scheme)；Al-Lazikani et al., 1997, J. Mol. Biol. 273：927-948 (Chothia numbering scheme)；Martin et al., 1989, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86：9268-9272 (ABM numbering scheme)；及Lefranc et al., 2003, Dev. Comp. Immunol. 27：55-77 (IMGT numbering scheme)。公共資料庫亦可供用於鑑別抗體內的CDR序列。

EBI3基團或IL27 EBI3基團：術語「EBI3基團」和「IL27 EBI3基團」係指包括與哺乳動物，例如人類或鼠類，EBI3蛋白的p28結合部分具有至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性之胺基酸序列。人類EBI3的序列係具有Uniprot識別符Q14213(uniprot.org/uniprot/Q14213)。鼠類EBI3的序列係具有Uniprot識別符O35228(uniprot.org/uniprot/O35228)。

在某些實施例中，EBI3基團係包括一包含與成熟哺乳動物EBI3蛋白，例如人類或鼠類EBI3(例如，全長人類EBI3之胺基酸24至229)具有至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的胺基酸序列。

EBI3基團的另外實施例係描述於5.3.1章節中。

EBI3 多肽：術語「EBI3多肽」係指包括一EBI3基團的多肽(例如，如5.2章節中所述)。在某些實施例中，EBI3多肽為一融合多肽，例如，除了EBI3基團外亦包括Fc結構域之多肽。

EBI3 蛋白：術語「EBI3蛋白」係指包括EBI3基團的單體或多聚(例如，二聚)蛋白(例如，包括EBI3基團的Fc二聚體)。術語「EBI3蛋白」係包括EBI3多肽。

EC50：術語「EC50」係指一分子(例如IL27促效劑)的半數最大有效濃度，其係在特定的暴露時間後誘導基線和最大值之間的半數反應。EC50基本上係代表其中觀察到50%最大效應之抗體或IL27促效劑的濃度。在特定的實施例中，EC50係等於如7.1.2章節所述於一分析中得到的半數最大STAT3活化之IL27促效劑濃度。

表位：術語「表位」為被抗體或其他抗原結合部分所辨識之抗原(例如，標靶分子)的一部分。表位可為線性或構象。

Fab：術語「Fab」在本文之靶向基團的上下文中係指一對多肽鏈，第一條係包含抗體N端的可變重鏈(VH)結構域連接第一恆定結構域(文中稱為C1)，及第二條係包含抗體N-端之可變輕鏈(VL)結構域連接能夠與第一恆定結構域對應的第二恆定結構域(本文稱為C2)。在天然抗體中，VH為N-端連接重鏈的第一個恆定結構域(CH1)而VL為N端連接輕鏈恆定結構域(CL)。本文之Fab可根據天然方向排列或包括促進正確VH和VL配對之結構域取代或交換。例如，可以一對CH3結構域替換Fab中的成對的CH1和CL結構域用以促進異二聚體分子中正確修飾的Fab鏈配對。亦可以將CH1和CL對調，使得CH1與VL相連接，而CL與VH相連接，此種一般稱為Crossmab的組態。

Fc 結構域和 Fc 區：術語「Fc結構域」係指與另外重鏈之對應部配對的重鏈部。術語「Fc區」係指藉由二個重鏈Fc結構域連結所形成之抗體為基礎結合分子的區域。Fc區內的二個Fc結構域可彼此相同或不同。在天然抗體中，Fc結構域典型為相同的，但一或二個Fc結構域有利地可經修飾以允許異二聚化，例如，經由旋鈕在孔洞相互作用。再者，Fc結構域可包括來自多於一種免疫球蛋白同型的嵌合序列。

宿主細胞：術語「宿主細胞」如本文中所用係指已導入本發明核酸的細胞。術語「宿主細胞」和「重組宿主細胞」在本文中可互換使用。應理解的是，此等術語係指特定的主體細胞和此等細胞之子代或潛在子代。由於突變或環境影響可能在繼代中發生特定修飾，因此，此等子代實際上可能與親代細胞不相同，但仍包括在本文中所用的術語範圍內。典型的宿主細胞為真核宿主細胞，例如哺乳動物宿主細胞。示例的真核宿主細胞包括酵母和哺乳動物細胞，例如脊椎動物細胞，例如小鼠、大鼠、猴或人類細胞株，例如HKB11細胞、PER.C6細胞、HEK細胞或CHO細胞。

IL27促效劑或IL27受體促效劑：術語「IL27促效劑」和「IL27受體促效劑」在文中可交換使用，係指包括或由IL27突變蛋白所組成並具有IL27活性之分子。在一或多種活體外或活體內生物分析，例如描述於7.1.2章節中STAT3驅動的螢光素酶-為基礎之報導子分析中，IL27活性可大於、低於或等於野生型或重組IL27(例如人類或鼠類IL27)之活性。在各種實施例中，IL27促效劑，相對於重組的IL27，係具有範圍從5%至90%、從5%至85%、從5%至80%、從10%至80%、從15%至80%、從20%到80%、從25%到80%、從30%到80%、從35%到80%、從45%到80%、從50%到80%、從5%到70%、從10%到70%、從15%到70%、從20%到70%、從25%到70%、從30%到70%、從35%到70%、從45%到70%、或從50%到70%的活性。

IL27 基團 (moiety)：術語「IL27基團」如本文中所用係指一EBI3基團(例如，如5.3.1章節中所述)或p28基團(例如，如5.3.2章節中所述)。因此，相關術語「IL27基團內連接子」係指連接二個IL27基團，例如EBI3基團和p28基團的連接子。

IL27 單體或單體：術語單體或IL27單體如文中所用係指包括一第一多肽鏈之分子，該第一多肽鏈(a)係包括一EBI3基團和一p28基團且能與第二多肽鏈連結；(b)係包括一EBI3基團且能與第二多肽鏈上的一p28基團連結；(c)係包括一p28基團且能與第二多肽鏈上的一EBI3基團連結；(d)係包括一多聚化基團(例如，一Fc結構域)且能與第二多肽鏈上的對應多聚化基團(例如，另外的Fc結構域)連結；(e)係包括一穩定化基團(例如，人類血清蛋白)和一p28基團及/或一EBI3基團；或(f)上述(a)、(b)、(c)、(d)和(e)之任何組合。在某些實施例中，單體能經由EBI3/p28基團配對及/或經由多聚化基團(例如，Fc結構域)配對與其他單體連結。在某些實施例中，單體係經由絞鏈序列或Fc 結構域的其他部分形成連結。因此，本文之單體能與另外的單體連結，形成二聚體。二聚體可為同二聚體，其中各組成單體為相同的，或異二聚體，在該情況下各組成單體為不同的。如本文中所用，有關「單體」並不排除未包含EBI3、p28或多聚化基團之第二多肽鏈的存在，例如Fab結構域的輕鏈。因此，二個單體之「二聚體」可包括二條以上的多肽鏈，例如，可包括三或四條多肽鏈。

在某些實施例中，二或更多個IL27單體(例如，二、三或四個IL27單體)彼此相連結形成本文之IL27受體促效劑。在其他的實施例中，單一IL27單體形成本文之IL27受體促效劑。

IL27 突變蛋白：「IL27突變蛋白」為由一或更多條多肽鏈(一、二、三或四條多肽鏈)所組成的變體IL27分子，其包括一IL27 EBI3(稱「EBI3」)基團和一IL27 p28(「p28」)基團彼此相互連結，且與天然IL27不同之處在於(a)一級胺基酸序列及/或(b)和天然不與IL27連結的其他結構域相連結，例如(i)多聚化基團(例如，二聚化結構域，例如Fc結構域)及/或(ii)靶向基團及/或(iii)穩定化基團。

在某些實施例中，術語突變蛋白係指結構(a)有或無靶向基團及/或(b)有或無穩定化基團及/或(c)有或無多聚化基團。除非本文另有說明，否則在本文之IL27促效劑的上下文中，術語「IL27突變蛋白」有時係指變體IL27分子的核心組份，即EBI3和p28基團，且有時亦指多聚化基團，例如Fc結構域和任何/或連結的連接子基團，及/或穩定基團，例如人類血清白蛋白(HSA)，並且應了解的是，術語「IL27突變蛋白」亦延伸至包括額外特徵的IL27分子，例如，一或多個靶向基團、一或多個穩定基團、一或多個多聚化基團、一或多個連接子基團以及前述的任何組合。

因此，IL27突變蛋白可包括與野生型EBI3及/或p28相比具有一或多個胺基酸取代、刪除及/或插入的EBI3或p28基團。

在某些實施例中，IL27突變蛋白在其p28基團中具有一或多個突變。示例的突變，例如取代，係揭示於，尤其是5.3.2章節及其小節、表1及經編號的實施例1至23中。IL27突變蛋白的EBI3和p28次單元可包括在相同的多肽鏈中，或可包括在不同的多肽鏈中。本文之IL27突變蛋白和促效劑的示例組態係揭示於，尤其是圖3至6、5.2章節以及經編號的實施例24至318中。

IL27突變蛋白就EBI3和p28可為單價的(亦即，具有單一EBI3基團和單一p28基團)或就EBI3和p28為多價的(亦即，具有多個EBI3基團和p28基團)。在某些實施例中，IL27突變蛋白對於EBI3和p28為二價的(亦即，具有二個EBI3基團和二個p28基團)。當IL27突變蛋白就EBI3和p28為多價時，多個EBI3基團彼此可為相同或不同的及/或多個p28基團彼此可為相同或不同的。

相較於野生型IL27，IL27突變蛋白可具有改變的功能(例如，受體結合、親和力、細胞激素活性)及/或改變的藥物動力學。

主要組織相容性複合物和 MHC：這些術語係指天然生成的MHC分子、MHC分子的獨立鏈(例如，第I類MHC α(重)鏈、β2微球蛋白、第II類MHC α鏈和第II類MHC β鏈)、此類MHC分子鏈的獨立次單元(例如，第I類MHC α鏈的α1、α2、及/或α3次單元、第II類MHC α鏈的α1-α2次單元、第II類MHC β鏈的β1-β2次單元)以及部分(例如胜肽結合部分，例如肽結合槽)、突變體和其各種衍生物(包括融合蛋白)，其中此等部分、突變體和衍生物係保留展現抗原胜肽的能力，以供被T細胞受體(TCR)，例如抗原特異性TCR辨識。第I類MHC分子係包含由重鏈之α1和α2結構域所形成的肽結合槽，其可容納大約8至10個胺基酸的胜肽。儘管二類MHC皆結合一胜肽內約9個胺基酸(例如5至17個胺基酸)的核心，但第II類MHC胜肽結合槽的開放式性質(第II類MHC α多肽的α1結構域與第II類MHC β多肽的β1結構域結合)允許更廣範圍的胜肽長度。結合第II類MHC的胜肽長度通常在13至17個胺基酸之間變化，但較短或較長的長度並不少見。因此，胜肽可能會在第II類MHC胜肽結合槽內移動，在任何特定時間改變直接位於槽內的9-mer。本文中係使用特定MHC變體之習用鑑別。此等術語係涵蓋「人類白血球抗原」或「HLA」。

單價：術語「單價」如本文中所用有關IL27受體促效劑中的IL27及/或靶向基團係指分別僅具有單一IL27異二聚體(亦即，一EBI3xp28異二聚體)及/或靶向基團之IL27受體促效劑。

操作上連接：術語「操作上連接」如本文中所用係指多肽鏈之二或更多個區間的功能關係，其中該二或更多個區係相連接而得以產生一功能性多肽，或二或更多個核酸序列，例如，用以產生二個多肽組份之框內融合或將一調節序列連接至一編碼序列。

p28 基團或 IL27 p28 基團：術語「p28基團」和「IL27 p28基團」係指包括與哺乳動物，例如人類或鼠類，p28蛋白的IL27Ra (IL27Rα)結合部分及/或gp130結合部分具有至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性之胺基酸序列。全長的人類p28序列係具有Uniprot識別符Q8NEV9(uniprot.org/uniprot/Q8NEV9)。全長的鼠類p28序列係具有Uniprot識別符Q8K3I6(uniprot.org/uniprot/Q8K3I6)。

在某些實施例中，p28基團係包括一包含與成熟哺乳動物p28蛋白，例如人類或鼠類EBI3(例如，全長人類EBI3之胺基酸29至243)具有至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的胺基酸序列。

EBI3基團的另外實施例係描述於5.3.1章節中。

p28 多肽：術語「p28多肽」係指包括p28基團的多肽(例如，如5.3.2章節中所述)。在某些實施例中，p28多肽為一融合多肽，例如除了p28基團之外亦包括Fc結構域之多肽。

p28 蛋白：術語「p28蛋白」係指包括p28基團的單體或多聚(例如，二聚)蛋白(例如，包括p28基團的Fc二聚體)。術語「p28蛋白」係涵蓋p28多肽。

胜肽 -MHC 複合物、 pMHC 複合物、槽中胜肽 (peptide-in-groove)：「胜肽-MHC複合物」、「pMHC複合物」和「槽中胜肽」係指(i)MHC結構域(例如，人類MHC分子或其部分(例如，其胜肽結合槽和例如，其胞外部分)，(ii)抗原胜肽，及，任選地，(iii)β2微球蛋白結構域(例如，人類β2微球蛋白或其部分)，其中MHC結構域、抗原胜肽和視情況存在的β2微球蛋白結構域係以允許與T細胞受體特異性結合之方式加以複合。在某些實施例中，pMHC複合物係包含至少人類第I類HLA/人類β2微球蛋白分子及/或人類第II類HLA分子之胞外結構域。

單鏈 Fv 或 scFv：術語「單鏈Fv」或「scFv」如本文中所用係指包括抗體之VH和VL結構域之多肽鏈，其中這些結構域係以單一多肽鏈存在。

特異性 ( 或選擇性 ) 結合：術語「特異性(或選擇性)結合」如本文中所用係指靶向基團，例如抗體、或其抗原結合結構域(「ABD」)與標靶分子形成一複合物，其在生理狀況下為相當穩定的。特異性結合其特徵可為約5x10 ^-2M或更低(例如，低於5x10 ^-2M、低於10 ^-2M、低於5x10 ^-3M、低於10 ^-3M、低於5x10 ^-4M、低於10 ^-4M、低於5x10 ^-5M、低於10 ^-5M、低於5x10 ^-6M、低於10 ^-6M、低於5x10 ^-7M、低於10 ^-7M、低於5x10 ^-8M、低於10 ^-8M、低於5x10 ^-9M、低於10 ^-9M、或低於10 ^-10M)之K _D。測定抗體或抗體片段，例如IL27促效劑或組份靶向基團與標靶分子之結合親和力的方法已為本領域所熟知並包括，例如平衡透析、表面電漿共振(例如，Biacore分析)、螢光活化細胞分選(FACS)結合分析及類似方法。然而，與來自一物種之標靶分子特異性結合之包括一靶向基團或其ABD的本文IL27促效劑，對於來自一或多種其他物種的標靶分子可能具有與交叉反應性。

對象：術語「對象」係包括人類和非人類動物。非人類動物包括所有的脊椎動物，例如哺乳動物和非哺乳動物，例如非人類靈長類、綿羊、狗、牛、雞、兩棲類和爬蟲類。除非有標註，否則術語「病患」或「對象」在本文中可交換使用。

標靶分子：術語「標靶分子」如本文中所用係指在細胞表面上或胞外基質中表現的任何生物分子(例如，蛋白質、碳水化合物、脂質或其組合)其可與本文IL27促效劑中的靶向基團特異性結合。

靶向基團：術語「靶向基團」如文中所用係指任何分子或其結合部分(例如，免疫球蛋白或抗原結合片段)，其可在本文之IL27促效劑所定位的位置與細胞表面或胞外基質分子結合，例如在涉及一自體免疫疾病的淋巴細胞上。除了將IL27促效劑定位到特定位置之外，靶向基團亦可具有功能活性。例如，作為抗PD1抗體或其抗原結合部分的靶向基團亦可增強IL27突變蛋白的活性，及作為IL27受體組份的靶向基團可隔離和抑制IL27活性直到到達其目標細胞或組織。

治療：如文中所用，術語「治療」係指因投予一或多種本文之IL27促效劑所產生之降低或改善如本文中所述病症之進程、嚴重性及/或持續時間，或改善如本文中所述之症狀或病症，例如發炎或免疫病症之一或多個症候(較佳地，一或多個可辨別的症候)。在特定的實施例中，術語「治療」係指改善至少一病症，例如自體免疫病症之一個並不一定可由病人辨別的可測量身體參數。在其他的實施例中，術語「治療」係指在身體上，藉由，例如穩定可辨別的症狀，在生理上，藉由穩定生理參數，或二者，抑制一病症的進程。

腫瘤：術語「腫瘤」與術語「癌症」在本文中可交換使用，例如二個術語係涵蓋實體和液體，例如瀰漫或循環腫瘤。如本文中所用，術語「癌症」或「腫瘤」係包括癌前，以及惡性癌症和腫瘤。

腫瘤相關抗原：術語「腫瘤相關抗原」或「tumor-associated antigen，TAA」係指完全或作為片段(例如，MHC/肽)，表現在癌細胞表面上的分子(通常是蛋白質、碳水化合物、脂質或其某些組合)，且其可用於優先靶向針對癌細胞之藥劑。在某些實施例中，TAA為由正常細胞和癌細胞表現的標記，例如，譜系標記，例如B細胞上的CD19。在某些實施例中，TAA為一細胞表面分子，相較於正常細胞，係在癌細胞中過度表現，例如，1倍過度表現、2倍過度表現、3倍過度表現或更高。在某些實施例中，TAA為癌細胞中不適當合成的細胞表面分子，例如，相較於正常細胞上表現的分子，含有缺失、添加或突變的分子。在某些實施例中，TAA將完全或作為片段(例如MHC/肽)僅表現於癌細胞的細胞表面，而不會在正常細胞表面合成或表現。因此，術語「TAA」係涵蓋對癌細胞具特異性的抗原，有時在本領域中稱為腫瘤特異性抗原(「tumor-specific antigens，TSA」)。

通用輕鏈：術語「通用輕鏈」如本文中所用，在靶向基團之內容中係指能與靶向基團的重鏈區配對且亦能與其他重鏈區配對之輕鏈多肽。通用輕鏈亦稱為「普通輕鏈」。

VH：術語「VH」係指抗體的免疫球蛋白重鏈之可變區，包括scFv或Fab之重鏈。

VL：術語「VL」係指免疫球蛋白輕鏈之可變區，包括scFv或Fab之輕鏈。 5.2 IL27 受體促效劑

本文係提供包括或由IL27單體及/或IL27突變蛋白所組成之IL27促效劑。IL27促效劑係包括一EBI3基團和一p28基團，且與野生型IL27之差異係在於(a)一級胺基酸序列(例如，相較於EBI3及/或p28或任何前述組合，胺基酸插入、缺失或取代)及/或(b)和天然不與IL27連結的另外結構域連結，例如(i)多聚化基團(例如，二聚化結構域如Fc結構域)結構域及/或(ii)靶向基團及/或(iii)穩定基團(例如，人類血清白蛋白(HSA))。

在某些實施例中，本文之IL27受體促效劑、IL27突變蛋白和IL27單體可包括IL27受體序列，例如IL27Ra (IL27Rα)及/或gp130序列，第5.6章節及其小節中所述，其可減弱IL27受體促效劑治療之異位效應 (off-site effect)。

IL27受體促效劑或IL27突變蛋白可由一或多條多肽組成，例如一或多個IL27單體。在某些實施例中，IL27受體促效劑係由多數個(例如二個)包含EBI3或p28基團之IL27單體所組成，且在某些實施例中亦包括多聚化及/或穩定基團。

IL27受體促效劑、IL27突變蛋白或IL27單體可進一步包括一或多個靶向基團及/或一個或多個穩定基團及/或一或多個IL27R1基團及/或一或多個gp130基團。示例的多聚化基團係描述於5.4章節中並包括賦予IL27受體促效劑同二聚化或異二聚化能力的Fc結構域。示例的穩定基團係描述於5.5章節中並包括人類血清白蛋白(HSA)。游離的IL27具有拙劣的藥物動力學(血清半衰期小於約2 h)且，不受限於理論，咸信包括多聚化結構域，例如Fc結構域及/或穩定化基團，例如HSA，改善了血清穩定性和IL27受體促效劑的藥物動力學概況。因此，Fc結構域可為雙重目的之結構域，如5.5章節所述賦予穩定化基團之穩定性質。

示例的靶向基團係描述於5.7章節中並包括與細胞表面分子結合、與免疫細胞相關細胞表面分子結合、與腫瘤相關抗原結合，與腫瘤微環境抗原結合，或與腫瘤淋巴細胞結合，以及辨識腫瘤淋巴細胞的胜肽-MHC複合物之抗原結合結構域(例如，scFv或Fab)。

在某些實施例中，IL27受體促效劑係包括IL27Ra (IL27Rα)基團、gp130基團、或IL27Ra (IL27Rα基團)和gp130基團二者。示例的IL27Ra (IL27Rα)基團係描述於5.6.1章節中。

在某些實施例中，本文之IL27促效劑係由二個IL27單體所組成，視情況地與一或多條另外的多肽鏈(例如，包含Fab靶向基團之輕鏈的多肽鏈)連結。單體可為相同的，從而形成同二聚體，或為不同的，從而形成異二聚體。各IL27受體單體的多聚化基團可經配置共同二聚化。示例的多聚化基團係描述於5.4章節。

在某些實施例中，IL27突變蛋白或IL27受體促效劑可包括一或多個連接子序列，連接其一或多條多肽鏈的各種組份，例如(1)當存在於相同多肽鏈時，係藉由IL27基團內的連接子，連接IL27的EBI3基團和p28基團，(2)經由多聚化基團連接子連接EBI3基團和多聚化基團(例如，Fc結構域)，(3)經由多聚化基團連接子連接p28基團和多聚化結構域(例如，Fc結構域)，(4)多聚化結構域(例如，Fc結構域)和靶向基團或其組份(例如，scFv或Fab的重鏈)，(5)EBI3基團、p28基團、多聚化結構域或靶向基團或其組份和IL27Ra (IL27Ra)基團，(6)EBI3基團、p28基團、多聚化結構域或靶向基團或其組份和gp130基團，或(8)任何前述之組合。示例的連接子係描述於5.8章節中。

在某些實施例中，IL27促效劑係包括EBI3基團、p28基團和多聚化基團(例如，能夠與另外的Fc結構域同二聚化或異二聚化而形成Fc區之Fc結構域)及/或穩定化基團(例如，HSA)，其中EBI3基團和p28基團係經配置使其能相連結而形成功能性IL27受體促效劑。示例的IL27受體促效劑之組態，稱為IL27M2、IL27M3、IL27M4、IL27M5、IL27M6、IL27M7、IL27M8、IL27M9、IL27M10、IL27M11、IL27M12、IL27M13、IL27M14、IL27M15、IL27M16、IL27M17、IL27M18、IL27M19、IL27M20和IL27M21係如圖3至圖6中所描繪。

當IL27促效劑係包括多聚化基團例如Fc結構域時，EBI3及/或p28基團可融合至Fc區之Fc結構域的N端或C端。如圖3A至圖3G所示，命名為IL27M2、IL27M3、IL27M9、IL27M10、IL27M12、IL27M13、IL27M14和IL27M15的IL27促效劑係在Fc結構域的N端含有EBI3和p28基團。如圖4A至圖4G所示，命名為IL27M4、IL27M5、IL27M6、IL27M7、IL27M8、IL27M11、IL27M16、IL27M17、IL27M18和IL27M19的IL27促效劑係在Fc結構域的C端含有EBI3和p28基團。

大多數的IL27突變蛋白和IL27促效劑為多聚化的，例如藉由與存在不同多肽鏈上的EBI3基團及/或p28基團相連結及/或藉由經配置用於彼此相互連結之多聚化基團(例如，Fc 結構域)的連結二聚化。在某些實施例中，相連結的EBI3基團和p28基團係位於相同的多肽鏈上(例如，在分別如圖3A、3C、4A、4B、6B、6C、3D、3G、4D和4G所示之IL27M1、IL27M3、IL27M4、IL27M5、IL27M8、IL27M9、IL27M12、IL27M15、IL27M16和IL27M19中)。再者，當EBI3和p27結構域係存在相同的多肽鏈時，EBI3基團可以N端連接p28基團(例如，在分別如圖4A、6B、3D和3G所示之IL27M4、IL27M8、IL27M12和IL27M15中)或C端連接p28基團(例如，在分別如圖3C、4B和6C所示之IL27M3、IL27M5和IL27M9中)。

在其他實施例中，連結的EBI3基團和p28基團係位於經由多聚化基團(例如，形成Fc區的Fc結構域)連結的不同多肽鏈上(例如，在分別如圖3B、4C和6A所示之IL27M2、IL27M6和IL27M7中)。

在又一其他實施例中，連結的EBI3基團和p28基團係存在雙分子結構中，其中EBI3基團和p28基團係存在不同的多肽上，例如藉由將EBI多肽或EBI蛋白中的EBI3基團與p28多肽或p28蛋白中的p28基團連結(例如，分別如圖6C、6D、6E和5B中所示之IL27M9、IL27M10、IL27M11、IL27M21)。

本發明一般係指能與另外含有EBI3基團及/或p28基團及/或對應多聚化基團(例如，第二個Fc結構域)的多肽鏈結合，分別作為「單體」或「IL27單體」之含有EBI3基團及/或p28基團，及/或多聚化基團(例如，第一Fc結構域)的多肽鏈。術語「單體」亦涵蓋含有EBI3基團及/或p28基團，及/或穩定化基團(例如第一個HSA結構域)的多肽鏈。在某些實施例中，一包括穩定化基團的單體能經由二個單體的EBI3和p28基團與包括穩定化基團的另外單體(例如，第二個HSA結構域)連結。以下為某些本文IL27單體之說明性實例，係以N至C端的方向描述。各單體的個別元件係詳述於本文中，例如在下列小節和經編號的實施例中。

(1)示例單體1：IL27 p28基團–視情況存在的連接子–多聚化基團(參見，例如圖3B(左邊單體)、3E)。

(2)示例單體2：IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–多聚化基團(參見，例如圖3B，右邊單體)。

(3)示例單體3：視情況存在的靶向基團(例如，scFV)或靶向基團組份(例如，Fab之VH或VL)–視情況存在的連接子–多聚化基團– IL27 p28基團(參見，例如圖4C(左邊單體)、4E、6A(左邊單體)、6D(左側結構之右邊單體))。

(4)示例單體4：視情況存在的靶向基團(例如，scFV)或靶向基團組份(例如，Fab之VH或VL)–多聚化基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團(參見，例如圖4C(右邊單體)、6A(右邊單體)、6D(右側結構之左邊單體))。

(5)示例單體5：IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團–視情況存在的連接子–多聚化基團(參見，例如圖3A(二個單體)、3D(左邊單體)和3G)。

(6)示例單體6：IL27 p28基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–多聚化基團(參見，例如圖4C，二個單體)。

(7)示例單體7：視情況存在的靶向基團(例如，scFV)或靶向基團組份(例如，Fab之VH或VL)–視情況存在的連接子–多聚化基團–視情況存在的連接子-IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團(參見，例如圖4A (二個單體)、4D、6B (左邊單體))。

(8)示例單體8：視情況存在的靶向基團(例如，scFV)或靶向基團組份(例如，Fab之VH或VL)–視情況存在的連接子–多聚化基團– IL27 p28基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團(參見，例如圖4B(二個單體))。

(9)示例單體9：IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–穩定化基團(參見，例如圖5B，右邊多肽)。

(10)示例單體10：IL27 p28基團–視情況存在的連接子–穩定化基團(參見，例如圖5B，右邊多肽)。

(11)示例單體11：穩定化基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團。

(12)示例單體12：穩定化基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團。

(13)示例單體13：IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團–視情況存在的連接子–穩定化基團(參見，例如圖5A)。

(14)示例單體14：IL27 p28基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–穩定化基團。

(15)示例單體15：穩定化基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團。

(16)示例單體16：穩定化基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團。

其中本文指出一包括靶向基團組份之單體，且除非內容中另有規定，否則所指稱的單體係涵蓋與包括一對應靶向基團組份，例如，Fab的對應VL或VH的另外多肽鏈連結之單體。

示例的單體之示例性組合係提供於經編號的實施例31至79中。

在特定方面，L27促效劑係包括有或無視情況存在的靶向基團之具有IL27M2、IL27M3、IL27M4、IL27M5、IL27M6、IL27M12、IL27M13、IL27M14、IL27M15、IL27M16、IL27M17、IL27M18、IL27M19、IL27M20或IL27M21組態的IL27突變蛋白。在其他方面，IL27促效劑係包括一具有IL27M7、IL27M8、IL27M10或IL27M11組態的IL27突變蛋白並包括一標靶基團。

提及特定的IL27突變蛋白或IL27受體受體促效劑結構(例如IL27M1、IL27M2等)並不希望受限，而是作為IL27受體促效劑亞屬之通用結構的指標。因此，特定的IL27突變蛋白或IL27受體促效劑結構並非意在限制，例如形成IL27突變蛋白或IL27受體促效劑之多肽的特定胺基酸序列或胺基酸序列對。舉例來說，IL27M1係包括二條多肽(亦即，IL27單體)，其中第一多肽和第二多肽各自具有示例單體5之組態(IL27 EBI3基團–視情況存在的連接子–IL27 p28基團–視情況存在的連接子–多聚化基團)。在此實例中，各單體之EBI3基團可為任何本文中所述之EBI3基團。二個單體上的EBI3基團可為相同的，或可為不同的。同樣地，各單體的p28基團可為任何本文中所述之p28基團。二個單體上的p28基團可為相同的，或可為不同的。各單體之多聚化基團可為任何本文中所述之多聚化基團。二個單體上的多聚化基團(例如，Fc 結構域)可為相同的(例如，允許同二聚化)，或可為不同的(例如，允許異二聚化)。再者，連接子可存在或不存在，且當存在時可為相同或不同的。有鑑於本文，對於本領域具有通常知識者應為顯而易見的，IL27M_命名法因此係用於代表IL27促效劑亞屬之一般結構，其中各個種類係共享整體結構，但胺基酸序列可能不同，或有或無如上文在示例性單體之描述中所提供的視情況存在的基團(例如，視情況存在的靶向基團)。在某些情況下，包括一或多個視情況存在的基團(例如，靶向基團)的IL27促效劑係給予一不同的參照(例如，IL27M7)用以定義另一亞屬之IL27突變蛋白或IL27受體促效劑組態。有關示例單體，示例的IL27結構係如下所述。

(1) IL27M1：第一示例單體5與第二示例單體5連結(例如，如圖3A中所示)。

(2) IL27M2：示例單體1與示例單體2連結(例如，如圖3B中所示)。

(3) IL27M3：第一示例單體6與第二示例單體6連結(例如，如圖3C中所示)。

(4) IL27M4：第一示例單體7與第二示例單體7連結(例如，如圖4A中所示)。

(5) IL27M5：第一示例單體8與第二示例單體8連結(例如，如圖4B中所示)。

(6) IL27M6：示例單體3與示例單體4連結(例如，如圖4C中所示)。

(7) IL27M7：包括第一靶向基團或第一靶向基團組份之示例單體3，與包括第二靶向基團或第二靶向基團組份的示例單體4連結(例如，如圖6A中所示)，視情況地，其中當包括第一及/或第二靶向基團組份時，IL27M7進一步係包括能與第一靶向基團組份連結的第三靶向基團組份及/或能與第二靶向基團組份連結的第四靶向基團組份。

(8) IL27M8：包括第一靶向基團或第一靶向基團組份之示例單體7，與包括第二靶向部分或第二靶向基團組份和多聚化基團之多肽相連結(例如，如圖6B所示)，視情況地，其中當包括第一及/或第二靶向基團組份時，IL27M8進一步包括能與第一靶向基團組份連結的第三靶向基團組份及/或能與第二靶向基團組份連結的第四靶向基團組份。

(9) IL27M9：示例單體6與包括第一靶向基團或第一靶向基團組份之多肽和多聚化基團(例如，如圖6C所示)連結，視情況地，其中當包含第一靶向基團組份時，IL27M9進一步包括能與第一靶向基團組份連結的第二靶向基團組份。

(10) IL27M10：第一蛋白，係包括(i)示例單體1與(ii)包括第一靶向基團或第一靶向基團組份和多聚化基團之多肽連結；與第二蛋白相連結，而該第二蛋白係包括(i)示例單體2與(ii)包括第二靶向基團或第二靶向基團組份的多肽及多聚化基團連結(例如，如圖6D所示)，視情況地，其中當包括第一及/或第二靶向基團組份時，IL27M10進一步包括能與第一靶向基團組份連結的第三靶向基團組份及/或能與第二靶向基團組份連結的第四靶向基團組份。

(11) IL27M11：第一蛋白，係包括(i)包含第一靶向基團或第一靶向基團組份之示例單體3與(ii)包括第二靶向基團或第二靶向基團組份和多聚化基團之多肽連結；與第二蛋白相連結，該第二蛋白係包括(i)包含第三靶向基團或第三靶向基團組份之示例單體4與(ii)包括第四靶向基團或第四靶向基團組份和多聚化基團的多肽連結(例如，如圖6E所示)，視情況地，其中當包括第一、第二、第三及/或第四靶向基團組份時，IL27M11進一步包括能與第一靶向基團組份連結的第五靶向基團組份及/或能與第二靶向基團組份連結的第六靶向基團組份，及/或能與第三靶向基團組份連結的第七靶向基團組份及/或能與第四靶向基團組份連結的第八靶向基團組份。

(12) IL27M12：示例單體5與包括多聚化基團和視情況存在的第一靶向基團或靶向基團組份之多肽相連結(例如，如圖3D所示)，視情況地，其中當包括第一靶向基團組份時，IL27M12進一步包括能與第一靶向基團組份連結的第二靶向基團組份。

(13) IL27M13：第一示例單體1與第二示例單體1連結(例如，如圖3E所示)。

(14) IL27M14：具有能與第一示例單體1之p28基團連結之EBI3基團的第一示例單體1，與具有能與第二示例單體1之p28基團連結之EBI3基團的第二示例單體1相連結(例如，如圖3E所示)。

(15) IL27M15：示例單體5(例如，如圖3G所示)。

(16) IL27M16：示例單體7與包括多聚化基團和視情況存在的靶向基團或第一靶向基團組份之多肽相連結(圖4D)，視情況地，其中當包括第一靶向基團組份時，IL27M16進一步包括能與第一靶向基團組份連結的第二靶向基團組份。

(17) IL27M17：第一示例單體3與第二示例單體3連結(例如，如圖4E所示)。

(18) IL27M18：具有能與第一示例單體3之p28基團連結之EBI3基團的第一示例單體3，與具有能與第二示例單體3之p28基團連結之EBI3基團的第二示例單體3相連結(例如，如圖4F所示)。

(19) IL27M19：示例單體7(例如，如圖4G所示)。

(20) IL27M20：示例單體18或示例單體21(例如，如圖5A所示)。

(21) IL27M21：IL27M21一般具有如圖5B所示之組態。IL27M21之具體實施例包括(1)示例單體14與示例單體15相連結；(2)示例單體14與示例單體17相連結；(3)示例單體16與示例單體15相連結；及(4)示例單體16與示例單體17相連結。

在本文之IL27受體促效劑中，當靶向基團為一抗體之抗原結合結構域(「ABD」)時，各單體可包括一靶向基團組份(例如，重鏈可變區(VH)或輕鏈可變區(VL))和對應的(counterpart)靶向基團組份(例如，其中靶向基團為VH之VL)。靶向基團組份可與對應的靶向基團組份連結形成靶向基團。因此，單一單體可由二條多肽鏈組成，一多肽鏈帶有一靶向基團組份(例如，VH)而另一多肽鏈帶有一對應的靶向基團組份(例如VL)。因此，靶向基團本身可在分開的多肽鏈上包含重鏈和輕鏈可變結構域。例如，就包括一靶向基團的IL27受體促效劑而言，該單體可由多肽A和多肽B組成。多肽A可包括例如，從N-末端到C-末端：靶向基團的重鏈可變結構域(例如，靶向基團組份)–視情況存在的連接子–多聚化基團–視情況存在的連接子–IL27 EBI3基團–IL27 p28基團；而多肽B可包括靶向基團的輕鏈可變結構域(亦即，該對應的靶向基團組份)。靶向基團進一步係描述和定義於5.7章節和經編號的實施例259至315中。

或者，可使用scFv作為靶向基團，其中靶向基團的重鏈和輕鏈可變區係在單一多肽中彼此融合。

在各種實施例中，IL27受體促效劑不包括(a)IL27以外的細胞激素；(b)抗-IL27抗體或抗體片段；(c)抗-DNA抗體或抗體片段；(d)非結合抗體可變結構域；或此等二、三或所有四項之任何組合。

本文進一步係提供如圖3D和圖3E所示之雙分子IL27促效劑的EBI3蛋白和p28蛋白組份。此等多肽尤其可用於與彼此相結合，供組合治療且在本文中亦稱為IL27促效劑。

本文之IL27受體促效劑及/或本文IL27受體促效劑中的IL27突變蛋白及/或本文IL27受體促效劑中的IL27單體，相較於野生型IL27，可具有造成對IL27受體複合物(例如，包含gp130和IL27Ra (IL27Rα)的受體複合物)之結合親和力下降的胺基酸修飾。整體而言，本文之IL27受體促效劑及/或本文IL27受體促效劑中的IL27突變蛋白及/或本文IL27受體促效劑中的IL27單體，對於IL27受體複合物可具有正常或減弱的結合(亦即，降低的親和力)(例如，至高10倍、至高50倍、至高100倍、至高200倍、至高500倍、至高1000倍或至高5000倍)。經由EBI3及/或p28序列中的一或多個胺基酸取代及/或在IL27受體促效劑中包括一或多各IL27Ra (IL27Rα)基團可減弱結合。

在特定實施例中，本文之IL27受體促效劑、IL27突變蛋白及/或IL27單體在IL27 EBI3基團、IL27 p28基團或IL27 EBI3和p28基團二者中具有一或多個胺基酸取代，進而降低與IL27受體複合物結合，例如如5.6章節及其小節中所揭示。例如，在某些實施例中，相較於野生型人類IL27，IL27突變蛋白與人類IL27受體複合物的結合可減弱至高100倍至1000倍。

IL27與其受體複合物的結合親和力係藉由，例如表面電漿共振(SPR)技術(於Biacore儀器上分析)來分析(Liljeblad et al., 2000, Glyco J, 17：323-329)。

本文進一步係提供p28蛋白和EBI3蛋白。某些本文之IL27受體促效劑和突變蛋白係包括與EBI3蛋白連結的p28蛋白。

在某些實施例中，EBI3蛋白係由二條多肽所組成。在某些實施例中，EBI3蛋白係包括一包含(i)第一靶向基團、(ii)視情況存在的第一連接子和(iii)第一多聚化基團之第一多肽；以及一包含(i)EBI3基團，(ii)視情況存在的第二連接子，和(iii)與第一個多聚化基團連接的第二個多聚化基團之第二肽。圖6D右側的異二聚體係描繪一第一示例的EBI3蛋白。

在其他實施例中，EBI3蛋白係包括一包含(i)第一靶向基團、視情況存在的第一連接子和第一多聚化基團之第一多肽，以及一包含(i)第二靶向基團，(ii)視情況存在的第一連接子和(iii)第一多聚化基團之第二多肽；以及一包含(i)第二靶向基團，(ii)視情況存在的第二連接子，(iii)與第一多聚化基團連結的第二多聚基團，(iv)視情況存在的第三連接子，和(v)EBI3基團之第二多肽。圖6E右側的異二聚體係描繪第二示例的EBI3蛋白。

在特定方面，本文之EBI3蛋白係缺乏p28基團(但能與p28基團例如，p28蛋白中的p28基團連結)。

在某些實施例中，p28蛋白係由二條多肽所組成。在某些實施例中，p28蛋白係包括一包含(i)第一靶向基團，(ii)視情況存在的第一連接子和(iii)第一多聚化基團之第一多肽；和一包含(i)p28基團，(ii)視情況存在的第二連接子，和(iii)與第一個多聚化基團連結的第二個多聚化基團之第二多肽。圖6D左側的異二聚體係描繪第一示例的p28蛋白。

在其他實施例中，p28蛋白係包括一包含(i)第一靶向基團、視情況存在的第一連接子和第一多聚化基團之第一多肽，以及一包含(i)第二靶向基團，(ii)視情況存在的第一連接子和(iii)第一多聚化基團之第二多肽；以及一包含(i)第二靶向基團，(ii)視情況存在的第二連接子，(iii)與第一多聚化基團連結的第二多聚基團，(iv)視情況存在的第三連接子，和(v)p28基團之第二多肽。圖6E左側的異二聚體係描繪第二示例的EBI3蛋白。

在特定方面，本文之p28蛋白係缺乏EBI3基團(但能與EBI3基團例如，EBI3蛋白中的EBI3基團連結)。

p28蛋白典型地係配置為與EBI3基團，例如EBI3蛋白的EBI3基團相連結(參見，例如圖6D和圖6E)。EBI3蛋白典型地係配置為與p28基團，例如p28蛋白的p28基團(參見，例如圖6D和圖6E)相連結。本文之EBI3蛋白可與本文之p28蛋白相連結，形成IL27促效劑。

本文之IL27受體促效劑、EBI3蛋白和p28蛋白組份之進一步詳情係如下所示。 5.3 IL27 EBI3 和 p28 基團

本文係提供帶有EBI3和p28基團的IL27受體促效劑，其中EBI3和p28基團係具有野生型或變體EBI3和p28序列。本文進一步係提供帶有變體p28序列的p28基團。示例的EBI3基團係揭示於5.3.1章節中，而示例的p28基團係揭示於5.3.2章節中。

IL27為一由艾司坦-巴爾病毒誘導基因3(EBI3)和p28次單元所組成的異二聚體。因此，如本文中所用，術語「IL27結構域」係指EBI3基團及/或p28基團。

IL27結構域係涵蓋成熟的人類和非人類(例如，鼠類、大鼠、豬、非人類靈長類)EBI3和p28多肽，包括其同源物、變體和片段，以及具有例如，前導序列(例如，訊號胜肽)和前述的修飾形式之EBI3和p28多肽。在特定實施例中，相較於野生型或天然生成的IL27變體中的該等基團或結構域，本文之IL27促效劑係在EBI3基團或其p28結合結構域中，及/或在p28基團或其IL27Ra (IL27Rα)結合結構域及/或gp130結合結構域中具有一個或多個胺基酸修飾，例如，取代、缺失或插入。因此，術語「EBI3基團」和「p28基團」係涵蓋分別與成熟野生型人類、鼠類、豬或大鼠EBI3和p28序列基本上相似的蛋白，更佳地分別與成熟野生型人類EBI3和p28序列基本上相似的蛋白。

在各種實施例中，EBI3基團及/或p28基團係包括與人類、鼠類、豬或大鼠EBI3及/或p28基團序列具有至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%或100%序列同一性的胺基酸序列，例如分別在5.3.1章節和5.3.2章節中作為例示的序列。 5.3.1 EBI3 基團

EBI3最初係描述為在經艾司坦-巴爾病毒感染的B淋巴細胞中表現。EBI3結構係由一對串聯的修飾第III型纖連蛋白 (FnIII)結構域，稱為細胞激素結合結構域(CBD)所組成(參見圖1A)。此結構域典型地係含有二對涉及雙硫橋形成的半胱胺酸殘基及一特徵性WSXWS特徵基序(signature motif)。已知EBI3係以三種形式存在，其中一種為帶有p28的異二聚體。

本文IL27受體促效劑之各IL27 EBI3基團係包括一野生型或變體IL27 EBI3之p28-結合結構域。在某些實施例中，本文之IL27受體促效劑係包括單一IL27 EBI3基團(例如，在其中IL27受體促效劑對於IL27為單價之實施例中，位於第一單體或第二單體上的IL27EBI3基團)。在某些實施例中，本文係包括二個IL27EBI3基團(例如，在其中IL27受體促效劑對於IL27為二價之實施例中，位於第一單體上的第一IL27 EBI3基團和位於第二單體上的IL27 EBI3基團)。在此等實施例中，二個IL27 EBI3基團可相同，或其可不相同。

在某些實施例中，IL27 EBI3基團係或包括一包含與哺乳動物，例如人類或鼠類EBI3的p28結合結構域為至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的胺基酸序列。

在某些實施例中，EBI3的p28結合結構域係包括對應於全長人類EBI3之F97、E124、E159和D210的胺基酸。F97、E124、E159和D210預期係涉及EBI3與p28的結合(Rousseau et al., 2010, Proc Natl Acad Sci USA. 107(45)：19420-19425)。因此，在某些實施例中，EBI3的p28結合結構域係包括全長人類EBI3的胺基酸97至210，或另外的哺乳動物例如，鼠類，EBI3之同等胺基酸。

在某些實施例中，該哺乳動物EBI3為全長的人類EBI3。在其他實施例中，該哺乳動物的EBI3為成熟的人類EBI3。該人類EBI3之序列係具有Uniprot識別符Q14213(uniprot.org/uniprot/Q14213)。在某些實施例中，該哺乳動物EBI3基團為全長的鼠類EBI3。在某些實施例中，該哺乳動物EBI3為成熟的鼠類EBI3。該鼠類EBI3之序列係具有Uniprot識別符O35228(uniprot.org/uniprot/O35228)。

人類EBI3經合成為一229個胺基酸的前驅物多肽，從其移除20個胺基酸，以產生成熟分泌型EBI3。第一纖連蛋白III結構域係跨越EBI3的胺基酸24至130而第二纖連蛋白III結構域係跨越EBI3的胺基酸131至227。因此，在某些實施例中，本文之EBI3基團係包括全長的人類EBI3。在其他實施例中，本文之EBI3基團係包括成熟的人類EBI3，其係相當於如下文所示之229個胺基酸前驅物序列的位置21至229，或二個纖連蛋白結構域，其係相當於如下文所示之229個胺基酸前驅物序列的位置24至228： 10 20 30 40 50 MTPQLLLALV LWASCPPCSG RKGPPAALTL PRVQCRASRY PIAVDCSWTL 60 70 80 90 100 PPAPNSTSPV SFIATYRLGM AARGHSWPCL QQTPTSTSCT ITDVQLFSMA 110 120 130 140 150 PYVLNVTAVH PWGSSSSFVP FITEHIIKPD PPEGVRLSPL AERQLQVQWE 160 170 180 190 200 PPGSWPFPEI FSLKYWIRYK RQGAARFHRV GPIEATSFIL RAVRPRARYY 210 220 VQVAAQDLTD YGELSDWSLP ATATMSLGK (SEQ ID NO: 1).

全長的人類EBI3之胺基酸24為成熟的人類EBI3之胺基酸1。

天然存在的EBI3序列變體已有報導。具有歐洲核苷酸檔案(European Nucleotide Archive)登錄號AAA93193.1之EBI3序列在上文所示的胺基酸序列之144-145位置具有一QL→HV取代。SNP變體rs1803524係在174位置具有一A→V取代。SNP變體rs4740係在201位置具有一V→I取代。因此，本文之EBI3基團可含有前述變體之任何組合，例如，一、二或全部三個(1)144-145位置之QL→HV取代；(2)174位置之A→V取代；以及201位置之V→I取代。

人類EBI3係在胺基酸55和105含有潛在的N-連接糖基化位點。本文係涵蓋在N55及/或N105或其他物種之EBI3中的同等位點有或無N-連接聚醣之EBI3基團分子。

EBI3基團可在其N-端或C-端包括一胜肽標籤，例如，促進純化的胜肽標籤。在某些實施例中，該胜肽標籤為myc-myc-his (mmh)標籤。

在某些實施例中，該EBI3基團係包括一如5.1.1章節中所示的EBI3胺基酸序列。 5.3.2 p28 基團

p28為一帶有四螺旋束折疊之「長鏈」細胞激素；這四個螺旋從N端到C端係命名為A-D。p28含有同-或異二聚體指標的白胺酸拉鏈基序(參見圖1A)。通常發現p28係在活化的巨噬細胞和樹突細胞中與EBI3共表現，形成非共價連接的異二聚體。

本文之IL27受體促效劑之各IL27 p28基團係包括一野生型或變體IL27 p28基團。在某些實施例中，本文之IL27受體促效劑係包括單一IL27 p28基團(例如，在其中IL27受體促效劑對於IL27為單價之實施例中，位於第一單體或第二單體上的IL27EBI3基團)。在某些實施例中，本文之IL27受體促效劑係包括二個IL27 p28基團(例如，在其中IL27受體促效劑對於IL27為二價之實施例中，位於第一單體上的第一IL27 EBI3基團和位於第二單體上的IL27 EBI3基團)。在此等實施例中，二個IL27 EBI3基團可相同，或其可不相同。

在某些實施例中，IL27 EBI3基團係或包括一包含與哺乳動物，例如人類或鼠類p28之IL27Ra (IL27Rα)結合結構域為至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的胺基酸序列。

在某些實施例中，IL27Ra (IL27Rα)結合結構域係包含p28接觸位點2 (參見，例如Rousseau et al., 2010, Proc Natl Acad Sci USA. 107(45)：19420-19425)。接觸位點2係包括p28之αA和αC螺旋的溶劑-暴露殘基(Rousseau et al., 2010, Proc Natl Acad Sci USA. 107(45)：19420-19425)。在某些實施例中，p28的IL27Ra (IL27Rα)結合結構域係包括相當於於全長人類p28之H52、K56、S59、E60、W138、L142、R145、D146、R149和H150的胺基酸。在某些實施例中，p28的IL27Ra (IL27Rα)結合結構域係包括全長人類p28的胺基酸52至150，或另外哺乳動物，例如，鼠類，p28的同等胺基酸。

在某些實施例中，IL27 p28基團係或包括一包含與哺乳動物，例如人類或鼠類p28之gp130結合結構域為至少70%序列同一性，例如至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的胺基酸序列。

在某些實施例中，gp130結合結構域係包含p28接觸位點3(參見，例如Rousseau et al., 2010, Proc Natl Acad Sci USA. 107(45)：19420-19425)。接觸位點3係位於αD螺旋的N端並與一gp130的Ig結構域接合(Rousseau et al., 2010, Proc Natl Acad Sci USA. 107(45)：19420-19425)。在某些實施例中，p28的gp130結合結構域係包括相當於全長人類p28之W197、L200、L201、Y204和R205的胺基酸。在某些實施例中，p28的gp130結合結構域係包括全長人類p28之胺基酸197至205，或另外的哺乳動物，例如，鼠類，p28的同等胺基酸。在特定的實施例中，gp210結合結構域除了全長人類p28之W197、L200、L201、Y204和R205之外，進一步係包括L73和V76。因此，在特定的實施例中，p28的gp130結合結構域係包括全長人類p28的胺基酸73至205，或另外的哺乳動物，例如，鼠類，p28的同等胺基酸。

在某些實施例中，該哺乳動物p28為全長人類p28。在其他實施例中，該哺乳動物p28為成熟的人類p28。該人類p28之序列係具有Uniprot識別符Q8NEV9 (uniprot.org/uniprot/Q8NEV9)。在某些實施例中，該哺乳動物p28基團為全長鼠類p28。在某些實施例中，該哺乳動物p28為成熟的鼠類p28。該鼠類p28之序列係具有Uniprot識別符Q8K3I6 (uniprot.org/uniprot/Q8K3I6)。

人類p28經合成為一243個胺基酸的前驅物多肽，從其移除28個胺基酸，以產生成熟分泌型p28。因此，在某些實施例中，本文之p28基團係包括成熟的人類p28，其係相當於如下文所示之243-個胺基酸前驅物序列的位置29至243： 10 20 30 40 50 MGQTAGDLGW RLSLLLLPLL LVQAGVWGFP RPPGRPQL SL QELRREFTVS60 70 80 90 100 LHLARKLLSE VRGQAHRFAE SHLPGVNLYL LPLGEQLPD V SLTFQAWRRL110 120 130 140 150 SDPERLCFIS TTLQPFHALL GGLGTQGRW T NMERMQLWAM RLDLRDLQRH160 170 180 190 200 LRFQVLAAGF NLPEEEEEEE EEEEEERKGL LPGALGSALQ GPAQVSWPQ L210 220 230 240 LSTYRLLHSL ELVLSRAVRE LLLLSKAGHS VWPLGFPTLS PQP (SEQ ID NO: 2).

全長的人類p28之胺基酸29為成熟的人類p28之胺基酸1。

p28的四個螺旋(A、B、C和D)係如上以粗黑字體顯示。在某些實施例中，本文之p28基團係包括跨越p28之四個螺旋的區域，相當於上文所示之243個胺基酸前驅物序列的39至224位置。

天然存在的p28之序列變體已有報導。SNP變體rs17855740在位置59具有一S→A取代。SNP變體rs181206在位置119具有一L→P取代。因此，本文之p28基團可含有(1)在位置59之S→A取代及/或(2)位置119之L→P取代之一或二者。

在特定實施例中，IL27 p28基團係包括一或多個可降低與IL27Ra (IL27Rα)及/或gp130結合的胺基酸取代。例如，在某些實施例中，相較於野生型人類IL27 p28，IL27 p28基團與人類IL27Ra (IL27Rα)及/或gp130的結合可減弱至高1,000倍。在某些實施例中，相較於野生型人類IL27 p28，IL27 p28基團與人類IL27Ra (IL27Rα)及/或gp130的結合可減弱至高100倍、至高50倍、至高25倍、至高20倍、至高15倍、至高10倍或5倍。

示例的胺基酸取代包括，但不限於胺基酸H52、K56、S59、E60、L73、V76、W138、L142、R145、D146、R149、H150、W197、L200、L201、Y204和R205之取代，其中胺基酸位置係相對於全長人類IL27 p28胺基酸序列。成熟人類序列、全長鼠類序列和成熟鼠類序列中的對應胺基酸位置係提供於表1中。在特定的實施例中，在各鑑定殘基處之胺基酸係經丙胺酸取代。

表 1 IL27 p28 基團胺基酸取代
胺基酸 ( 人類 – 全長 )	胺基酸 ( 人類 – 成熟 )	胺基酸 ( 鼠類 – 全長 )	胺基酸 ( 鼠類 – 成熟 )
H52	H24	Y48	Y20
K56	K28	K52	K24
S59	S31	S55	S27
E60	E32	E56	E28
L73	L45	L69	L41
V76	V48	V72	V44
W138	W110	W134	W106
L142	L114	L138	L110
R145	R117	R141	R113
D146	D118	D142	D114
R149	R121	R145	R117
H150	H122	H146	H118
W197	W169	W195	W167
L200	L172	L198	L170
L201	L173	L199	L171
Y204	Y176	Y202	Y174
R205	R177	Q203	Q175

在全長人類p28 H52之一示例的胺基酸取代為H52A。

在全長人類p28 K56之一示例的胺基酸取代為K56A。

在全長人類p28 S59之一示例的胺基酸取代為S59A。

在全長人類p28 E60之一示例的胺基酸取代為E60A。

在全長人類p28 L73之一示例的胺基酸取代為L73A。

在全長人類p28 V76之一示例的胺基酸取代為V76A。

在全長人類p28 W138之一示例的胺基酸取代為W138A。

在全長人類p28 L142之一示例的胺基酸取代為L142A。

在全長人類p28 R145之一示例的胺基酸取代為R145A.

在全長人類p28 D146之一示例的胺基酸取代為D146A。

在全長人類p28 R149之一示例的胺基酸取代為R149A。

在全長人類p28 H150之一示例的胺基酸取代為H150A。

在全長人類p28 HW197之一示例的胺基酸取代為HW197A。

在全長人類p28 L200之一示例的胺基酸取代為L200A。

在全長人類p28 L201之一示例的胺基酸取代為L201A。

在在全長人類p28 Y204之一示例的胺基酸取代為Y204A。

在全長人類p28 R205之一示例的胺基酸取代為R205A。

在某些實施例中，p28基團係直接或間接，視情況存在的經由一連接子，與IL27Ra (IL27Rα) (亦即，IL27Ra (IL27Rα)基團)的IL27 p28結合結構域融合(例如，如‎5.8章節中所述)。當存在時，IL27Ra (IL27Rα)的IL27 p28結合結構域可以N端或C端連接IL27 p28基團。當p28基團係「直接」與IL27Ra (IL27Rα)的IL27 p28結合結構域融合時，該p28基團和IL27Ra (IL27Rα)的IL27p28結合結構域係相鄰位於相同的單體上，僅藉由一連接子(若存在)隔開。當p28基團係「間接」與IL27Ra (IL27Rα)的IL27 p28結合結構域融合時，該p28基團和IL27Ra (IL27Rα)的IL27 p28結合結構域係位於相同的單體上，藉由一或多個其他的結構域(例如，IL27 EBI3基團)隔開，或可位於獨立的單體上。

在某些實施例中，p28基團係直接或間接，視情況地經由一連接子(例如，如5.8章節中所述)，與gp 130的IL27 p28結合結構域(亦即gp130基團)融合。當存在時，gp 130的IL27 p28結合結構域可以N端或C端連接IL27 p28基團。當p28基團係「直接」與gp130的IL27 p28結合結構域融合時，p28基團和gp 130的IL27 p28結合結構域係相鄰地位於相同的單體上，則僅藉由一連接子(若存在)隔開。當p28基團係「間接」與gp 130的IL27 p28結合結構域融合時，該p28基團和gp 130的IL27 p28結合結構域位於相同的單體上藉由一或多個其他結構域(例如，IL27 EBI3基團)隔開，或位於不同的單體上。

人類p28含有數個潛在的O-連接的糖基化位點，但無N-連接的糖基化位點。鼠類p28在胺基酸85含有一潛在的N-連接的糖基化位點。本文係涵蓋有或無N-連接的聚醣及/或O-連接的聚醣之p28基團。

p28基團可在其N-端或C-端包括一胜肽標籤，例如，促進純化的胜肽標籤。在某些實施例中，該胜肽標籤為myc-myc-his (mmh)標籤。

在某些實施例中，該p28基團係包括一如5.1.1章節中所示的p28胺基酸序列。 5.4 多聚化基團 5.4.1 Fc 結構域

在某些實施例中，本文之IL27促效劑和IL27單體係包括一或多個多聚化基團。在特定實施例中，本文之IL27單體係包括單一多聚化基團(例如，單一Fc結構域)及/或本文之IL27促效劑係包括二個多聚化基團(例如，二個可相連結形成Fc區的Fc結構域)。

本文之IL27促效劑和IL27單體可包括衍生自任何適合物種，經連結用以形成一Fc區之Fc結構域或成對Fc結構域。在一實施例中，該Fc結構域係衍生自人類Fc結構域。在較佳的實施例中，本文之IL27促效劑或IL27單體的EBI3及/或p28基團係與一IgG Fc分子(例如，和IgGl或IgG4 Fc結構域)融合。

EBI3及/或p28基團可與Fc分子，例如，IgG Fc結構域的N-端或C-端融合(例如，如圖3和圖4中所示)。

本文之一實施例係關於包括二個Fc融合多肽單體的二聚體，其係藉由將一IL27結構域(例如，一EBI3及/或p28基團)與抗體的Fc區融合所製造，例如，藉由將EBI3基團及/或 p28基團與Fc結構域融合，其可在表現後形成能二聚化的IL27單體，或藉由將EBI3基團與第一Fc 結構域融合並將p28基團與第二Fc 結構域融合，其在表現後形成二個能二聚化之不同的IL27單體。二聚體可藉由例如將編碼融合蛋白的基因融合物插入一適當的表現載體中，在以重組表現載體所轉化的宿主細胞中表現基因融合物，並允許表現的融合蛋白組裝成很像抗體的分子所製造，據此在Fc結構域之間形成鏈間鍵用以產生二聚體。在某些實施例中，Fc二聚體多肽係含有一EBI3基團或p28基團，而IL27促效劑係藉由連結二個Fc結構域所形成。在其他實施例中，Fc二聚體多肽係在不同的Fc多肽單體或相同的Fc多肽單體上包括EBI3基團和p28基團二者。因此，在各種實施例中，本文之IL27促效劑係具有1：1、2：1或4：1的Fc結構域：EBI3基團或Fc結構域：p28基團化學計量比。

可併入IL27單體的Fc結構域可衍生自任何適合的抗體類別，包括IgA(包括lgA1和lgA2亞類)、IgD、IgE、IgG(包括IgG1、IgG2、IgG3和IgG4亞類)及IgM。在一實施例中，Fc結構域係衍生自IgG1、IgG2、IgG3或IgG4。在一實施例中，Fc結構域係衍生自IgG1。在一實施例中，Fc結構域係衍生自IgG4。

Fc區內的二個Fc結構域彼此可相同或不同。在天然的抗體中，Fc結構域典型為相同的，但就製造多特異性結合分子之目的，例如，本文之IL27促效劑，Fc結構域有利地可能不同，以便允許異二聚化，如下文5.4.2章節所述。

在天然的抗體中，IgA、IgD和IgG的重鏈Fc結構域係由二個重鏈恆定結構域(CH2和CH3)所組成，而IgE和IgM的重鏈Fc結構域係由三個重鏈恆定結構域(CH2、CH3和CH4)所組成。這些經二聚化用以產生Fc區。

在本文之IL27促效劑中，Fc區及/或其中的Fc結構域可為嵌合的，組合衍生自一或多種不同類別抗體之序列。因此，Fc區及/或其內的Fc結構域可包括來自一或多種不同類別抗體，例如一、二或三種不同類別的重鏈恆定結構域。

在一實施例中，該Fc區係包括衍生自IgG1的CH2和CH3結構域。

在一實施例中，該Fc區係包括衍生自IgG2的CH2和CH3結構域。

在一實施例中，該Fc區係包括衍生自IgG3的CH2和CH3結構域。

在一實施例中，該Fc區係包括衍生自IgG4的CH2和CH3結構域。

在一實施例中，該Fc區係包括來自IgM的CH4結構域，其典型地係位於CH3結構域的C-端。

在一實施例中，該Fc區係包括衍生自IgG的CH2和CH3結構域以及衍生自IgM的CH4結構域。

在另一實施例中，嵌合的Fc結構域可包含部分或全部衍生自人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4 CH2區的CH2序列，以及部分或全部衍生自人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4的CH3序列。如5.8.2.1章節所述，嵌合的Fc結構域亦可含有嵌合的絞鏈區。例如，嵌合的絞鏈可包括衍生自人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4絞鏈區的「上絞鏈」序列，與衍生自人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4絞鏈區的「下絞鏈」序列組合。可包括在文中所述之任何IL27突變蛋白中的嵌合Fc結構域之特定實例，從N-端到C-端係包括：[IgG4CH1]-[IgG4上絞鏈]-[IgG2下絞鏈]-[IgG4 CH2]-[IgG4 CH3]。可包括在文中所述之任何抗原結合分子中的嵌合Fc結構域的另外實例，從N-到C-末端係包括：[IgG1 CH1]-[IgG1上絞鏈]-[IgG2下絞鏈]-[IgG4 CH2]–[IgG1 CH3]。可包括在本發明之任何抗原結合分子中的嵌合Fc結構域之這些和其他實例係描述於WO2014/121087中。具有這些通用結構排列的嵌合Fc區及其變體可具有改變的Fc受體結合，其轉而影響Fc效應子功能。

應了解的是，用於製造本文IL27促效劑之Fc區的重鏈恆定結構域可包括天然生成的恆定結構域之變體。相較於野生型恆定結構域，此等變體可包括一或多項胺基酸變異。在一實例中，本文之Fc區係包括至少一個在序列上與野生型恆定結構域不同的恆定結構域。應了解的是，該變體恆定結構域可能比野生型恆定結構域更長或更短。較佳地，該變體恆定結構域與一野生型恆定結構域為至少60％相同或相似。在另外的實例中，該變體恆定結構域為至少70%相同或相似。在另外的實例中，該變體恆定結構域為至少80%相同或相似。在另外的實例中，該變體恆定結構域為至少90%相同或相似。在另外的實例中，該變體恆定結構域為至少95%相同或相似。

IgM和IgA係在人體中自然生成，作為普通H2L2抗體單元的共價多聚體。當IgM併入一J鏈時，其係生成為五聚體，或當其缺少J鏈時，其為六聚體。IgA係以單體和二聚體形式生成。IgM和IgA的重鏈具有18個胺基酸延伸至C端恆定結構域，稱為尾片。尾片係包括一個半胱胺酸殘基，在聚合物中的重鏈之間形成雙硫鍵，且咸信在多聚化中具有重要作用。尾片亦含有一糖基化位點。在特定的實施例中，本發明之IL27促效劑不包括尾片。

併入本文IL27促效劑之Fc結構域可包括一或多個改變蛋白功能性質的修飾，例如，結合Fc受體如FcRn或白血球受體，結合補體，修飾的雙硫鍵結構，或改變的糖基化模式。改變效應子功能的示例Fc修飾係描述於5.4.2章節中。

Fc結構域亦可經改變用以包括改進不對稱IL27促效劑的可製造性的修飾，例如藉由允許異二聚化，其為不同Fc結構域優先於相同Fc結構域的配對。異二聚化使IL27促效劑得以製造，其中不同多肽組份係藉由含有序列不同之Fc結構域的Fc區彼此相互連接。異二聚化策略之實例係舉例說明於5.4.2.1章節中。

或者，Fc結構域可為具有降低的連結能力之可溶性單體Fc結構域。參見，例如Helm et al., 1996, J. Biol. Chem. 271：7494-7500 and Ying et al., 2012, J Biol Chem. 287(23)：19399–19408。IL27促效劑仍可經由EBI3基團和p28基團的連結而二聚化。如美國專利公開案號2019/0367611中所述，一可溶性單體Fc結構域之實例係在相當於CH3中的T366及/或Y407位置包括胺基酸取代。如5.4.2章節中所述，單體Fc結構域可為任何Ig亞型並可包括降低效應子功能的額外取代。

如本文中所用，術語「Fc區」可包括有或無絞鏈序列的Fc結構域。在其中Fc區係包含一包含絞鏈結構域之重鏈恆定區的各種實施例中，絞鏈結構域內的位置233-236可為G、G、G和空位；G、G、空位和空位；G、空位，空位和空位；或全部空位，其中位置係以EU編號加以編碼。視情況地，重鏈恆定區從N端到C端係包括絞鏈結構域、CH2結構域和CH3結構域。視情況地，重鏈恆定區從N端到C端係包括CH1結構域、絞鏈結構域、CH2結構域和CH3結構域。視情況地，CH1區(若存在)、絞鏈區的其餘部分(若有)、CH2區和CH3區為相同的人類同型。視情況地，CH1區(若存在)、絞鏈區的其餘部分(若有)、CH2區和CH3區為人類IgG1。視情況地，CH1區(若存在)、絞鏈區的其餘部分(若有)、CH2區和CH3區為人類IgG2。視情況地，CH1區(若存在)、絞鏈區的其餘部分(若有)、CH2區和CH3區為人類IgG4。

視情況地，該恆定區係具有一經修飾的CH3結構域用以降低與蛋白A的結合。

可包括在本文之IL27突變蛋白中之Fc區的此等和其他實例係描述於2016/161010中。示例的絞鏈序列係闡述於5.8.2章節及其小節中。

應了解的是，上文提及的任何修飾可以任何適合的方式組合以達到所欲的功能性質及/或與其他修飾組合以改變IL27促效劑的性質。 5.4.2. 具有改變的效應子功能之 Fc 結構域

在某些實施例中，該Fc結構域係包括一或多個降低與Fc受體結合及/或效應子功能的胺基酸取代。

在一特定的實施例中，此Fc受體為Fcγ受體。在一實施例中，此Fc受體為人類Fc受體。在一實施例中，此Fc受體為活化的Fc受體。在一特定的實施例中，此Fc受體為一活化的人類Fcγ受體，更特言之人類FcγRIIIa、FcγRI或FcγRIIa，最特定為人類FcγRIIIa。在一實施例中，效應子功能係由下列一或多種群組中選出：補體依賴的細胞毒性作用(CDC)、抗體依賴的細胞媒介細胞毒性作用(ADCC)、抗體依賴的細胞吞噬作用(ADCP)，以及細胞激素分泌作用。在一特定的實施例中，此效應子功能為ADCC。

在一實施例中，Fc結構域(例如，IL27單體的Fc結構域)或Fc區(例如，可經連結形成Fc區的IL27受體促效劑的一或二個Fc結構域)係在選自E233、L234、L235、N297、P331和P329(根據Kabat EU索引編號)之群組的位置包括一胺基酸取代。在一更特定的實施例中，Fc結構域或Fc區係在選自L234、L235和P329(根據Kabat EU索引編號)之群組的位置上包括一胺基酸取代。在某些實施例中，Fc結構域或Fc區係包括胺基酸取代L234A和L235A(根據KabatEU索引編號)。在一此實施例中，該Fc結構域或Fc區為IgdFc結構域或Fc區，特言之人類IgdFc結構域或Fc區。在一實施例中，Fc結構域或Fc區係在位置P329包括一胺基酸取代。在一更特定的實施例中，該胺基酸取代為P329A或P329G，特言之P329G(根據Kabat EU索引編號)。在一具體實例中，Fc結構域或Fc區係在位置P329包括一胺基酸取代及在一選自E233、L234、L235、N297和P331(根據KabatEU索引編號)的位置包括另一胺基酸取代。在一更特定的實施例中，該另外的胺基酸取代為E233P、L234A、L235A、L235E、N297A、N297D或P331S。在一特定的實施例中，該Fc結構域或Fc區係在位置P329、L234和L235(根據KabatEU索引編號)包括胺基酸取代。在更特定的實施例中，Fc結構域係包括胺基酸突變L234A、L235A和P329G(「P329GLALA」、「PGLALA」或「LALAPG」)。

典型地，相同的一或多個胺基酸取代係存在Fc區之各自二個Fc結構域中。因此，在一特定的實施例中，Fc區的各Fc結構域係包括胺基酸取代L234A、L235A和P329G(Kabat EU索引編號)，亦即在Fc區的各第一和第二Fc結構域中，位於234位置的白胺酸殘基位係經一丙胺酸殘基取代(L234A)，位於235位置的白胺酸殘基係經一丙胺酸殘基取代(L235A)，位於329位置的脯胺酸殘基係經一甘胺酸殘基取代(P329G)(根據 Kabat EU索引編號)。

在一實施例中，該Fc結構域為IgG1 Fc結構域，特言之人類IgG1 Fc。在某些實施例中，IgG1 Fc 結構域為一包括D265A、N297A突變(EU編號) 之變體IgG1，用以降低效應子功能。

在另外的實施例中，該Fc結構域為一帶有降低與Fc受體結合的IgG4 Fc結構域。帶有降低與Fc受體結合之示例的IgG4 Fc結構域可包括選自下表2的胺基酸序列。在某些實施例中，該Fc結構域僅包括如下所示之序列的粗黑字體部分：：

表2
Fc 結構域	序列
SEQ ID NO：3 (WO2014/121087之SEQ ID NO：1)	Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
SEQ ID NO：4 (WO2014/121087之SEQ ID NO：2)	Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
SEQ ID NO：5 (WO2014/121087之SEQ ID NO：30)	Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
SEQ ID NO：6 (WO2014/121087之SEQ ID NO：31)	Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
SEQ ID NO：7 (WO2014/121087之SEQ ID NO：37)	Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Lys Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
SEQ ID NO：8 (WO2014/121087之SEQ ID NO：38)	Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro Pro Cys Pro Ala Pro Pro Val Ala Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

在一特定的實施例中，帶有降低的效應子功能之IgG4係包括SEQ ID NO：6 (WO2014/121087之SEQ ID NO：31)胺基酸序列的粗黑字體部分，在本文中有時稱為IgG4或hIgG4。

就作為異二聚體之本文IL27促效劑，可能併入上述變體IgG4 Fc序列的組合，例如包括一包含SEQ ID NO：5胺基酸序列(或其粗黑字體部分)之Fc結構域和一包含SEQ ID NO：7胺基酸序列(或其粗黑字體部分)之Fc結構域的Fc區，或包括一包含SEQ ID NO：6胺基酸序列(或其粗黑字體部分)之Fc結構域和包含SEQ ID NO:8胺基酸序列(或其粗黑字體部分)之Fc結構域的Fc區(分別相當於SEQ ID NO: 30、37、31和38)。

在一特定的實施例中，該Fc結構域係包括7.1.1章節中指稱為hIgG4的胺基酸序列。

在另外特定的實施例中，該Fc結構域係包括7.1.1章節指稱為hIgG1的胺基酸序列，其為一包括D265A、N297A突變(EU編號)用以降低效應子功能之以IgG1為基礎的變體Fc序列。 5.4.2.1. Fc 異二聚化變體

特定的IL27促效劑帶有二個Fc結構域之間的二聚化，其與天然免疫球蛋白不同，係操作上連接到不同的N端區，例如，一Fc結構域連接一Fab而另一Fc結構域連接一IL27結構域。二個Fc結構域之不充分異二聚化形成Fc區可能為增加所欲異二聚體分子產率之障礙，且代表了純化之挑戰。本領域中可取得的各種方法可用於增強可能存在本文之IL27促效劑中的Fc結構域之二聚化，例如，如EP 1870459A1號；美國專利第5,582,996號；美國專利第5,731,168號；美國專利第5,910,573號；美國專利第5,932,448號；美國專利第6,833,441號；美國專利第7,183,076號；美國專利申請公開案第2006204493A1號；及PCT公開案第WO 2009/089004A1號中所揭示。

本文係提供包括Fc異二聚體的IL27促效劑，亦即包括異源、不相同的Fc結構域之Fc區。典型地，Fc異二聚體中的各Fc結構域係包括一抗體的CH3結構域。該CH3結構域係衍生自任何同型、類別或亞類之抗體的恆定區，且較佳地，如前面章節所述，IgG(IgG1、IgG2、IgG3和IgG4)類別。

在CH3結構域之二條不同重鏈的異二聚化產生所欲的IL27促效劑，而相同重鏈的同二聚化則降低所欲IL27促效劑的產率。因此，在一較佳的實施例中，經連結形成本文之IL27促效劑的多肽將含有帶有修飾的CH3結構域，其相對於未修飾的Fc結構域係有利於異二聚體連結。

在一特定的實施例中，該促進Fc異二聚體形成之修飾為所謂的「旋鈕入孔洞(knob-into-hole)」或「旋鈕在孔洞(knob-in-hole)」修飾，包括在一個Fc結構域中的「旋鈕(knob)」修飾以及在另一Fc 結構域中的「孔洞(hole)」修飾。該旋鈕入孔洞技術係描述於例如，美國專利第5,731,168號；US 7,695,936；Ridgway et al., 1996, Prot Eng 9：617-621和Carter, 2001, Immunol Meth 248：7-15中。一般而言，該方法涉及在第一多肽的界面導入一突起(「旋鈕」)及在第二多肽的界面中導入對應的腔室(「孔洞」)，使得突起可定位在腔室中以便促進異二聚體形成並阻礙同二聚體形成。藉由以較大側鏈(例如，酪胺酸或色胺酸)替換來自第一多肽界面的小胺基酸側鏈來構建突起。藉由以較小側鏈(例如，丙胺酸或蘇胺酸)替換大胺基酸側鏈，在第二多肽的界面中製造與突起相同或相似大小的互補腔室。

因此，在某些實施例中，在Fc結構域之第一次單元的CH3結構域中的胺基酸殘基係經具有較大側鏈體積的胺基酸殘基取代，從而在第一次單元之CH3結構域內製造一突起，該突起可定位在第二次單元之CH3結構域內的腔室中，並將Fc結構域之第二次單元的CH3結構域中的胺基酸殘基以具有較小側鏈體積的胺基酸殘基取代，從而產生在第二次單元之CH3結構域內的腔室，在其內可定位第一次單元之CH3結構域內的突起。較佳地，該具有較大側鏈體積的胺基酸殘基係由下列組成之群組中選出：精胺酸(R)、苯丙胺酸(F)、酪胺酸(Y)和色胺酸(W)。較佳地，該具有較小側鏈體積的胺基酸殘基係由下列組成之群組中選出：丙胺酸(A)、絲胺酸(S)、蘇胺酸(T)和纈胺酸(V)。藉由改變編碼多肽的核酸，例如，藉由位點特異性突變，或藉由胜肽合成可製造突起和腔室。一示例的取代為Y470T。

在一特定的此類實施例中，在第一Fc結構域中，位置366的蘇胺酸殘基係經色胺酸殘基取代(T366W)，且在該Fc結構域中，位置407的酪胺酸殘基係經纈胺酸殘基取代(Y407V)，及視情況地位置366的蘇胺酸殘基係經絲胺酸殘基取代(T366S)及位置368的白胺酸殘基係經丙胺酸殘基取代(L368A)(根據Kabat EU索引編號)。在另一實施例中，在第一Fc結構域中另外地位置354的絲胺酸殘基係經半胱胺胺酸殘基取代(S354C)或位置356的麩胺酸殘基係經半胱胺酸殘基取代(E356C)(特言之位置354的絲胺酸殘基係經半胱胺酸殘基取代)，而在第二Fc結構域中，另外地位置349的酪胺酸殘基係經半胱胺酸殘基取代(Y349C)(根據Kabat EU索引編號)。在一特定的實施例中，第一Fc結構域係包括胺基酸取代S354C和T366W，而第二Fc結構域係包括胺基酸取代Y349C、T366S、L368A和Y407V(根據Kabat EU索引編號)。

在某些實施例中，靜電轉向(例如，描述於Gunasekaran et al., 2010, J Biol Chem 285(25)：19637-46中)可用於提升Fc區之第一和第二Fc結構域的連結。

作為替代，或除了使用經修飾用以提升異二聚化之Fc結構域之外，Fc結構域可經修飾而使其允許能選擇Fc異二聚體之純化策略。在一此實施例中，一多肽係包括一消除其與蛋白A結合之修飾的Fc結構域，因而能進行產生異二聚化蛋白之純化方法。參見，例如美國專利第8,586,713號。因此，IL27促效劑係包括一第一CH3結構域和一第二Ig CH3結構域，其中該第一和第二Ig CH3結構域彼此為至少一個胺基酸不相同，且相較於缺乏此胺基酸差異的對應IL27促效劑，其中該至少一個胺基酸差異係降低了IL27促效劑與蛋白A的結合。在一實施例中，第一CH3結構域係與蛋白A結合而第二CH3結構域係含有一降低或消除蛋白A結合之突變/修飾，例如H95R修飾(IMGT外顯子編號；EU編號為H435R)。第二CH3可進一步包括Y96F修飾(IMGT；EU為Y436F)。此類修飾在文中係稱為「星狀(star)」突變。 5.5 穩定化基團

本文之IL27促效劑可包括一可進一步延長IL27促效劑之活體內半衰期的穩定化基團。血清半衰期通常分為α期和β期。藉由加入適當的穩定化基團，可顯著提升任一或二個時期。例如，相對於不含有穩定化基團的對應IL27促效劑，穩定化基團可增加IL27促效劑的血清半衰期5、10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、120、150、200、400、600、800、1000%或更高。出於本文之目的，血清半衰期可指在人類或其他哺乳動物(例如，小鼠或非人類靈長類動物)中的半衰期。再者，確認在IL27促效劑中包括Fc結構域延長了IL27結構域的半衰期；在本文的內容中，術語「穩定化基團」係指Fc結構域/Fc區以外的基團。

野生型IL27具有小於2小時的血清半衰期。本文之IL27促效劑較佳地在人類及/或小鼠中具有至少約3小時、至少約4小時、至少約6小時、或至少約8小時的血清半衰期。在某些實施例中，本文之IL27促效劑具有至少10小時、至少12小時、至少15小時、至少18小時、至少24小時、至少36小時、至少48小時、至少約60小時、或至少約72小時的血清半衰期。

穩定基團包括聚氧化伸烷基基團(例如，聚乙二醇)、糖(例如，唾液酸)和耐受良好的蛋白基團(例如，運鐵蛋白和血清白蛋白)。

可用於本文之IL27促效劑中的其他穩定化基團包括該等描述於Kontermann et al., 2011, Current Opinion in Biotechnology 22：868-76中的穩定化基團。此等穩定化基團包括但不限於人類血清白蛋白融合物、人類血清白蛋白接合物、人類血清白蛋白結合劑(例如，Adnectin PKE、AlbudAb、來自蛋白G的白蛋白結合結構域)、XTEN融合物、PAS融合物(亦即，三種胺基酸脯胺酸、丙胺酸和絲胺酸為基礎的重組PEG模擬物)、碳水化合物接合物(例如，羥乙基澱粉(HES))、糖基化、聚唾液酸接合物和脂肪酸接合物。

因此，在某些實施例中，本文係提供包括一聚合糖作為穩定化基團的IL27促效劑。

血清白蛋白亦可經由具有與白蛋白非共價相互作用能力的模組進行半衰期延長。因此，本文之IL27促效劑可包括一白蛋白結合蛋白作為穩定化基團。白蛋白-結合蛋白可與一或多個本文IL27促效劑之其他組份接合或基因上融合。已知具有白蛋白結合活性的蛋白係來自特定細菌。例如，鏈球菌蛋白G係含有數個由大約50個胺基酸殘基所組成的小白蛋白結合結構域(6 kDa)。血清白蛋白結合蛋白的另外實例，例如該等描述於美國公開案號2007/0178082和2007/0269422之血清白蛋白結合蛋白。白蛋白結合結構域與蛋白融合導致半衰期顯著延長(參見Kontermann et al., 2011, Current Opinion in Biotechnology 22：868-76)。

在其他實施例中，如下文5.5.1章節中所述，該穩定化基團為人類血清白蛋白。參見，例如IL27M20和IL27M21(圖5A和圖5B)。在其他實施例中，該穩定化基團為運鐵蛋白。

在又一其他實施例中，如下文5.5.1章節中所述，該穩定化基團為聚乙二醇基團或另外的聚合物。

穩定化基團可在其N-端或C-端包括胜肽標籤，例如，促進純化的胜肽標籤。在某些實施例中，該胜肽標籤為myc-myc-his (mmh)標籤。

例如如下文5.8章節中所述，穩定化基團可經由連接子與一或多個本文IL27促效劑之其他組份相連接。 5.5.1. 人類血清白蛋白

在某些實施例中，本文之IL27促效劑係包括人類血清白蛋白(HSA)、其天然變體、其工程變體或其任一種片段。

EBI3及/或p28基團可與HSA的N-端或C-端融合(例如，如圖5A和圖5B所示)。在特定的實施例中，EBI3及/或p28基團係與HSA的N-端融合。

本文之一實施例係關於包含經由EBI3基團與p28基團的連結所製造的二個HSA多肽之二聚體，其中各EBI3基團和p28基團係與獨立的HSA多肽融合。

本文之另外的實施例係關於包含單一HSA多肽的單體，而該多肽已與EBI3基團和p28基團二者融合(例如，如圖5A所示)。在某些實施例中，該單體從N–至C-端係以下列順序排列：EBI3基團–視情況存在的連接子–p28基團–視情況存在的連接子–HSA。在其他的實施例中，該單體從N–至C-端係以下列順序排列：p28基團–視情況存在的連接子–EBI3 基團–視情況存在的連接子–HSA。

HSA多肽，或當IL27促效劑係包括二或更多條HSA多肽時的各HSA多肽，係包括野生型或變體HSA多肽，或其片段。變體可為天然變體或工程改造變體。

在某些實施例中，HSA多肽為或包括一包含與HSA為至少70%序列同一性，例如，至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性之胺基酸序列。

在某些實施例中，HSA多肽為全長的HSA。在其他的實施例中，HSA多肽為成熟的HSA。HSA之序列具有Uniprot識別符P02768 (uniprot.org/uniprot/P02768)。HSA經合成為一609個胺基酸的前驅物多肽，包括信號胜肽(胺基酸1至18)和前胜肽(胺基酸19至24)。成熟的HSA係包括胺基酸25至609。在某些實施例中，本文之HSA係包括全長的HSA。在其他的實施例中，本文之HSA係包括成熟的HSA。HSA之胺基酸序列係提供如下： 10 20 30 40 50 MKWVTFISLL FLFSSAYSRG VFRRDAHKSE VAHRFKDLGE ENFKALVLIA 60 70 80 90 100 FAQYLQQCPF EDHVKLVNEV TEFAKTCVAD ESAENCDKSL HTLFGDKLCT 110 120 130 140 150 VATLRETYGE MADCCAKQEP ERNECFLQHK DDNPNLPRLV RPEVDVMCTA 160 170 180 190 200 FHDNEETFLK KYLYEIARRH PYFYAPELLF FAKRYKAAFT ECCQAADKAA 210 220 230 240 250 CLLPKLDELR DEGKASSAKQ RLKCASLQKF GERAFKAWAV ARLSQRFPKA 260 270 280 290 300 EFAEVSKLVT DLTKVHTECC HGDLLECADD RADLAKYICE NQDSISSKLK 310 320 330 340 350 ECCEKPLLEK SHCIAEVEND EMPADLPSLA ADFVESKDVC KNYAEAKDVF 360 370 380 390 400 LGMFLYEYAR RHPDYSVVLL LRLAKTYETT LEKCCAAADP HECYAKVFDE 410 420 430 440 450 FKPLVEEPQN LIKQNCELFE QLGEYKFQNA LLVRYTKKVP QVSTPTLVEV 460 470 480 490 500 SRNLGKVGSK CCKHPEAKRM PCAEDYLSVV LNQLCVLHEK TPVSDRVTKC 510 520 530 540 550 CTESLVNRRP CFSALEVDET YVPKEFNAET FTFHADICTL SEKERQIKKQ 560 570 580 590 600 TALVELVKHK PKATKEQLKA VMDDFAAFVE KCCKADDKET CFAEEGKKLV AASQAALGL (SEQ ID NO: 9).

全長HSA之胺基酸25為成熟HSA之胺基酸1。

天然生成HSA變體的有效數目已有報導並彙整於uniprot.org/uniprot/P02768，其任一個皆可用於本文之穩定化基團中。 5.5.2. 聚乙二醇

在某些實施例中，IL27促效劑係包括聚乙二醇(PEG)或另外的親水性聚合物作為穩定化基團，例如乙二醇/丙二醇的共聚物、羧甲基纖維素、葡聚醣、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧戊環、聚-1,3,6-三㗁烷、乙烯/馬來酸酐共聚物、聚胺基酸(均聚物或無規共聚物)、葡聚醣或聚(正乙烯基吡咯烷酮)聚乙二醇、丙二醇均聚物、丙二醇/環氧乙烷共聚物、聚氧乙基化多元醇(例如甘油)、聚乙烯醇及其混合物。聚合物可為任何分子量，並可為支鏈或非支鏈。

PEG為一熟知的水溶性聚合物，其可從市面上購得或可根據本領域熟知的方法藉由乙二醇的開環聚合來製備(Sandler和Karo，Polymer Synthesis，Academic Press，New York , Vol. 3, pages 138-161)。術語「PEG」係廣泛用來涵蓋任何聚乙二醇分子，不考慮大小或PEG末端的修飾，並可用下式表示：X--O(CH ₂CH ₂O) _n-1CH ₂CH ₂OH，其中n為20至2300而X為H或端點修飾，例如C _1-4烷基。PEG可含有結合反應所必需，由分子的化學合成所產生的另外化學基團；或作為用於分子部分最佳距離之間隔子。此外，此一PEG可由一或多條連接一起的PEG側鏈所組成。具有一條以上PEG鏈的PEG稱為多臂或支鏈PEG。支鏈的PEG係描述於，例如，歐洲申請案號473084A和美國專利第5,932,462號中。

一或多個PEG分子可連接於IL27促效劑的不同位置，且此連接可藉由與胺、硫醇或其他適合的反應基團反應來進行。胺基團可為例如在IL27促效劑(或其組份)之N端所發現的初級胺或存在於胺基酸例如離胺酸或精胺酸中的胺基。

PEG化可藉由定點PEG化來進行，其中係將一適合的反應基團導入蛋白中用以製造一優先發生PEG化的位點。在某些實施例中，IL27促效劑係經修飾，在所欲位置導入半胱胺酸殘基，允許半胱胺酸上的定點PEG化。可將突變導入本文之IL27促效劑的編碼序列中，用以產生半胱胺酸殘基。此項可例如藉由將一或多個胺基酸殘基突變為半胱胺酸來進行。用於突變為半胱胺酸殘基的較佳胺基酸包括絲胺酸、蘇胺酸、丙胺酸和其他親水殘基。較佳地，欲突變為半胱胺酸的殘基為表面暴露的殘基。就以一級序列或三維結構為基礎，預測殘基的表面可及性之演算法已為本領域所熟知。IL27的三維結構係描述於，例如，Wang et al., 2005, Science 310(5751)：1159-63 中，並可用於鑑別可突變成半胱胺酸的表面暴露殘基。突變可經選擇用以避免破壞IL27與一或多個其受體之間的相互作用。可使用例如PEG-馬來醯亞胺、PEG-乙烯基碸、PEG-碘乙醯胺或PEG-鄰吡啶基二硫化物進行半胱胺酸殘基的PEG化。

PEG典型地係以適合與多肽上所欲位置偶合的適合活化基團活化。PEG化方法已為本領域所熟知並進一步描述於Zalipsky et al., “Use of Functionalized Poly(Ethylene Glycols) for Modification of Polypeptides” in Polyethylene Glycol Chemistry：Biotechnical and Biomedical Applications, J. M. Harris, Plenus Press, New York (1992)和Zalipsky, 1995, Advanced Drug Reviews 16：157-182中。

PEG基團的分子量可廣泛變化並可為支鏈或直鏈。典型地，PEG的重量平均分子量為約100道耳頓至約150,000道耳頓。PEG的示例重量平均分子量包括約20,000道耳頓、約40,000道耳頓、約60,000道耳頓和約80,000道耳頓。在特定的實施例中，PEG的分子量為40,000道耳頓。亦可使用具有任何上述之總分子量的支鏈形式PEG。在某些實施例中，PEG有二條支鏈。在其他實施例中，PEG具有四條支鏈。在另外的實施例中，PEG為雙-PEG(NOF Corporation，DE-200MA)，其中二條含IL27的多肽鏈為接合的。

本領域中已知的慣用分離和純化技術可用於純化PEG化的IL27促效劑，例如尺寸排阻(例如，凝膠過濾)和離子交換層析。亦可使用SDS-PAGE分離產物。可分離的產物包括單-、二-、三-、多-和非-PEG化的IL27促效劑，以及游離PEG。單PEG接合物的百分比可藉由在溶離波峰周圍匯集更廣的溶離份來控制，用以增加組成物中單PEG的百分比。大約90%的單PEG接合物係代表良好的產率和活性平衡。

在某些實施例中，PEG化的IL27促效劑較佳地將保留至少約25%、50%、60%、70%、80%、85%、90%、95%或100%之與未修飾IL27促效劑相關的生物活性。在某些實施例中，生物活性係指其與IL27Ra (IL27Rα)、gp130或包括IL27Ra (IL27Rα)和gp130之IL27二聚體結合的能力。與IL27受體或其組成份次單元之結合可藉由K _D、k _on或k _off來評估。 5.6.IL27Ra (IL27Rα) 和 gp130 基團

本文係提供帶有能結合本文之p28基團的IL27Ra (IL27Rα)及/或gp130基團之IL27受體促效劑。示例的IL27Ra (IL27Rα)基團係揭示於5.6.1章節，而示例的gp130基團係揭示於5.6.2章節中。

IL27受體為一由介白素-27受體次單元α (IL27Ra或IL27Rα)和gp130次單元所組成的異二聚體。因此，如本文中所用，術語「IL27受體基團」係指IL27Ra (IL27Rα)基團及/或gp130基團。

IL27受體基團係涵蓋成熟的人類和非人類(例如，鼠類、大鼠、豬、非人類靈長類動物) IL27Ra (IL27Ra)和gp130多肽，包括其同源物、變體和片段，以及具有，例如，前導序列(例如，訊號胜肽)，以及前述修飾形式之IL27Ra (IL27Rα)和gp130多肽。在特定的實施例中，相較於野生型或天然生成的IL27變體，本示文之IL27受體基團在IL27Ra (IL27Rα)基團和/或gp130基團的p28結合結構域中具有一或多個胺基酸修飾，例如取代、缺失或插入。因此，術語「IL27Ra基團」(亦稱為「IL27Rα基團」)和「gp130基團」分別涵蓋與成熟野生型人類、鼠類、豬或大鼠IL27Ra和gp130實質上相似序列的蛋白，更佳地分別與成熟野生型人類IL27Ra和gp130實質上相似序列的蛋白。在各種實施例中，IL27Ra結構域及/或gp130結構域係包括與人類、鼠類、豬或大鼠IL27Ra及/或gp130結構域序列為至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%、或100%序列同一性的胺基酸序列，例如該等分別在5.6.1章節和5.6.2章節中作為例示的序列。 5.6.1.IL27Ra (IL27Rα) 基團

IL27Ra或IL27Rα (先前稱為T細胞細胞激素受體(TCCR)或WSX-1)，最初在淋巴細胞(包括初始T細胞)鑑別出，並在活體外顯示與IL27結合。IL27Ra為一單通道第I型細胞激素受體膜蛋白且其結構係由(i)一包括三個修飾的第III型纖連蛋白(FnIII)結構域，稱為細胞激素結合結構域(CBD)之胞外結構域所組成(見圖1B)；(ii)單一螺旋跨膜結構域；和(iii)含有JAK相互作用及/或活化所需之Box1基序的細胞質結構域。CBD典型地係含有二對涉及雙硫鍵形成的半胱胺酸殘基和一特徵性的WSXWS特徵基序。亦已知IL27Ra係以可溶形式存在，至少在人類中，在其中其係以70/90kDa的N-糖基化蛋白經由金屬蛋白酶的蛋白水解從細胞中自發性釋放。該可溶形式可在活體外結合IL27，在活體內與IL27複合，並抑制IL27訊號傳遞。

本文之IL27受體促效劑視情況地係包括一或多個IL27Ra (IL27Rα)基團。各一或多個IL27Ra (IL27Rα)基團能結合本文之IL27 p28基團。IL27Ra (IL27Rα)基團為或包括一包含與哺乳動物的IL27 p28結合部分例如，人類或鼠類，IL27受體次單元α (IL27Ra或IL27Rα)為至少70%序列同一性，例如，至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性的胺基酸序列。IL27Ra的IL27 p28結合部分(IL27Rα)係包括或由受體次單元的胞外結構域或其p28結合片段所組成。人類IL27Ra (IL27Rα)之序列係具有Uniprot識別符Q6UWB1(uniprot.org/uniprot/Q6UWB1)，帶有構成胞外結構域的胺基酸33至516。鼠類IL27Ra (IL27Rα)的序列係具有Uniprot識別符O70394(uniprot.org/uniprot/O70394)，帶有構成胞外結構域的胺基酸25至510。

人類IL27Ra (IL27Rα)經合成為一636個胺基酸的前驅物多肽，從中移除32個胺基酸，以產生成熟的IL27Ra (IL27Rα)。IL27Ra (IL27Rα)的胞外結構域跨越胺基酸33至516並包括跨越IL27Ra (IL27Rα)之胺基酸131至231的第一纖連蛋白III結構域，跨越IL27Ra (IL27Rα)之胺基酸322至417的第二纖連蛋白III結構域，和跨越IL27Ra(IL27Rα)之胺基酸419至511的第三纖連蛋白III結構域。因此，在某些實施例中，本文之IL27Ra (IL27Rα)結構域係包括人類IL27Ra (IL27Rα)的胞外結構域，相當於下文所示的636個胺基酸前驅物序列之位置33至516，或三個纖連蛋白結構域，相當於下文所示的636個胺基酸前驅物序列之位置131至511： 10 20 30 40 50 MRGGRGAPFW LWPLPKLALL PLLWVLFQRT RPQGSAGPLQ CYGVGPLGDL 60 70 80 90 100 NCSWEPLGDL GAPSELHLQS QKYRSNKTQT VAVAAGRSWV AIPREQLTMS 110 120 130 140 150 DKLLVWGTKA GQPLWPPVFV NLETQMKPNA PRLGPDVDFS EDDPLEATVH 160 170 180 190 200 WAPPTWPSHK VLICQFHYRR CQEAAWTLLE PELKTIPLTP VEIQDLELAT 210 220 230 240 250 GYKVYGRCRM EKEEDLWGEW SPILSFQTPP SAPKDVWVSG NLCGTPGGEE 260 270 280 290 300 PLLLWKAPGP CVQVSYKVWF WVGGRELSPE GITCCCSLIP SGAEWARVSA 310 320 330 340 350 VNATSWEPLT NLSLVCLDSA SAPRSVAVSS IAGSTELLVT WQPGPGEPLE 360 370 380 390 400 HVVDWARDGD PLEKLNWVRL PPGNLSALLP GNFTVGVPYR ITVTAVSASG 410 420 430 440 450 LASASSVWGF REELAPLVGP TLWRLQDAPP GTPAIAWGEV PRHQLRGHLT 460 470 480 490 500 HYTLCAQSGT SPSVCMNVSG NTQSVTLPDL PWGPCELWVT ASTIAGQGPP 510 520 530 540 550 GPILRLHLPD NTLRWKVLPG ILFLWGLFLL GCGLSLATSG RCYHLRHKVL 560 570 580 590 600 PRWVWEKVPD PANSSSGQPH MEQVPEAQPL GDLPILEVEE MEPPPVMESS 610 620 630 QPAQATAPLD SGYEKHFLPT PEELGLLGPP RPQVLA (SEQ ID NO: 10).

在某些實施例中，IL27Ra (IL27Rα)基團係包括一哺乳動物，例如，人類或鼠類，IL27Ra (IL27Rα)之胞外結構域(或一包含與該胞外結構域為至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性的胺基酸序列)。

在特定方面，IL27Ra (IL27Rα)基團可包括或由與全長人類IL27Ra (IL27Rα)的胺基酸33至516(亦即Uniprot識別符Q6UWB1)具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列同一性的胺基酸序列所組成，視情況地其中結合部分係具有(a)至少160個胺基酸、至少161個胺基酸、至少162個胺基酸、至少164個胺基酸、或至少165個胺基酸及/或(b)至高251個、至高240個、至高230個、至高220個、至高210個、至高200個、至高190個、至高180、或至高170個來自全長人類IL27Ra (IL27Rα)之胺基酸33至516的胺基酸之胺基酸序列。在特定的實施例中，人類IL27Ra (IL27Rα)的部分係由上句中任一的(a)和(b)所界定，例如，來自人類IL27Ra (IL27Rα)的至少160個和至高180個胺基酸，來自人類IL27Ra (IL27Rα)的至少162和至高200個胺基酸，來自人類IL27Ra (IL27Rα)的至少160和至高220個胺基酸，來自人類IL27Ra (IL27Rα)的至少164和至高190個胺基酸等等及以此類推。

在某些實施例中，IL27Ra (IL27Rα)基團係包括或由與全長人類IL27Ra (IL27Rα)之胺基酸33至516具有至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%、或100%序列同一性的胺基酸序列所組成，有或無額外的至高5個胺基酸，至高10個胺基酸，至高15個胺基酸，至高20個胺基酸，至高30個胺基酸、或至高40個胺基酸C端與IL27Ra (IL27Rα)的胺基酸殘基516相連接。

當位於相同的單體時，含有IL27Ra (IL27Rα)基團的本文IL27受體促效劑可在IL27 p28基團的N–或C-端具有IL27Ra (IL27Rα)胞外結構域。在某些實施例中，含有IL27Ra (IL27Rα)基團的本文IL27受體促效劑係在IL27 p28基團的N–端具有IL27Ra (IL27Rα)胞外結構域。

人類IL27Ra (IL27Rα)在胺基酸51、76、302、311、373、382和467含有潛在的N-連接糖基化位點。本文係涵蓋在N51及/或N76及/或N302及/或N311及/或N373及/或N382及/或N467或其他物種之IL27Ra中的同等位點有或無N-連接聚醣之IL27Ra (IL27Rα)結構域分子。 5.6.2. gp130 基團

gp130經鑑別為一媒介IL27Ra (IL27Rα)回應IL27之胞內訊號傳遞所需之第I型細胞激素受體。第I類細胞激素受體其特徵為存有至少一個由二個類-第III型纖連蛋白(FNIII)結構域所組成的細胞激素結合結構域(CBM)。N-端結構域含有一組四個保守的半胱胺酸殘基，C-端結構域含有WSXWS基序或密切相關的序列。屬於此家族的受體係連接由四個緊密排列的α-螺旋所組成的螺旋細胞激素。gp130為一混雜的細胞激素受體，涉及包括IL27在內的至少八個細胞激素之轉導。gp130為「高」受體IL-6/IL-12家族的創始成員。

gp130的胞外部分係含有一類Ig結構域(D1)，接著一單一CBD (D2和D3)和三個FNIII結構域(D4、D5和D6)。保守的雙結構域CBD Ig-結構域以及三個FNIII結構域為活化所必需。

本文之IL27受體促效劑視情況地係包括一或多個gp130基團。各一或多個gp130基團能結合本文之IL27 p28基團。gp130基團為或包括一包含與哺乳動物，例如人類或鼠類，膜糖蛋白130(gp130)的IL27 p28結合部分為至少70%序列同一性，例如，至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性的胺基酸序列。gp130之IL27 p28結合部分係包括或由受體次單元的胞外結構域或其p28結合片段所組成。人類gp130之序列係具有Uniprot識別符P40189 (uniprot.org/uniprot/P40189)，帶有構成細胞外結構域之胺基酸23至619。鼠類gp130之序列係具有Uniprot識別符Q00560 (uniprot.org/uniprot/Q00560)，帶有構成細胞外結構域之胺基酸23至617。

人類gp130經合成為一918個胺基酸的前驅物多肽，從中移除22個胺基酸，以產生成熟的gp130。gp130的胞外結構域係跨越gp130的胺基酸23至619，包括跨越胺基酸26至120的類IgG結構域、跨越gp130之胺基酸125至216的第一纖連蛋白III結構域、跨越gp130之胺基酸224至324的第二纖連蛋白III結構域，跨越gp130之胺基酸329至424的第三纖連蛋白III結構域，跨越gp130之426至517胺基酸的第四纖連蛋白結構域和跨越gp130之胺基酸518至613的第五纖連蛋白結構域。因此，在某些實施例中，本文之gp130結構域係包括人類gp130的胞外結構域，其係相當於如下所示之918個胺基酸前驅物序列的位置23至619，或類IgG結構域和五個纖連蛋白結構域，其係相當於如下所示之918-胺基酸前驅物序列的位置26至613： 10 20 30 40 50 MLTLQTWLVQ ALFIFLTTES TGELLDPCGY ISPESPVVQL HSNFTAVCVL 60 70 80 90 100 KEKCMDYFHV NANYIVWKTN HFTIPKEQYT IINRTASSVT FTDIASLNIQ 110 120 130 140 150 LTCNILTFGQ LEQNVYGITI ISGLPPEKPK NLSCIVNEGK KMRCEWDGGR 160 170 180 190 200 ETHLETNFTL KSEWATHKFA DCKAKRDTPT SCTVDYSTVY FVNIEVWVEA 210 220 230 240 250 ENALGKVTSD HINFDPVYKV KPNPPHNLSV INSEELSSIL KLTWTNPSIK 260 270 280 290 300 SVIILKYNIQ YRTKDASTWS QIPPEDTAST RSSFTVQDLK PFTEYVFRIR 310 320 330 340 350 CMKEDGKGYW SDWSEEASGI TYEDRPSKAP SFWYKIDPSH TQGYRTVQLV 360 370 380 390 400 WKTLPPFEAN GKILDYEVTL TRWKSHLQNY TVNATKLTVN LTNDRYLATL 410 420 430 440 450 TVRNLVGKSD AAVLTIPACD FQATHPVMDL KAFPKDNMLW VEWTTPRESV 460 470 480 490 500 KKYILEWCVL SDKAPCITDW QQEDGTVHRT YLRGNLAESK CYLITVTPVY 510 520 530 540 550 ADGPGSPESI KAYLKQAPPS KGPTVRTKKV GKNEAVLEWD QLPVDVQNGF 560 570 580 590 600 IRNYTIFYRT IIGNETAVNV DSSHTEYTLS SLTSDTLYMV RMAAYTDEGG 610 620 630 640 650 KDGPEFTFTT PKFAQGEIEA IVVPVCLAFL LTTLLGVLFC FNKRDLIKKH 660 670 680 690 700 IWPNVPDPSK SHIAQWSPHT PPRHNFNSKD QMYSDGNFTD VSVVEIEAND 710 720 730 740 750 KKPFPEDLKS LDLFKKEKIN TEGHSSGIGG SSCMSSSRPS ISSSDENESS 760 770 780 790 800 QNTSSTVQYS TVVHSGYRHQ VPSVQVFSRS ESTQPLLDSE ERPEDLQLVD 810 820 830 840 850 HVDGGDGILP RQQYFKQNCS QHESSPDISH FERSKQVSSV NEEDFVRLKQ 860 870 880 890 900 QISDHISQSC GSGQMKMFQE VSAADAFGPG TEGQVERFET VGMEAATDEG 910 MPKSYLPQTV RQGGYMPQ (SEQ ID NO: 11).

在某些實施例中，gp130基團係包括一哺乳動物，例如，人類或鼠類，gp130之細胞外結構域(或一包含與該胞外結構域至少為70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%同一性的胺基酸序列)。

在特定方面，gp130基團可包括或由與全長人類gp130的胺基酸23至619(亦即Uniprot識別符P40189)具有至少70%、71%、72%、73%、74%、75%、76%、77%、78%、79%、80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、或99%序列同一性的胺基酸序列所組成，視情況地其中結合部分係具有(a)至少160個胺基酸、至少161個胺基酸、至少162個胺基酸、至少164個胺基酸、或至少165個胺基酸及/或(b)至高251個、至高240個、至高230個、至高220個、至高210個、至高200個、至高190個、至高180、或至高170個來自全長人類gp130之胺基酸33至516的胺基酸之胺基酸序列。在特定的實施例中，人類gp130的部分係由上句中任一的(a)和(b)所界定，例如，來自人類gp130的至少160個和至高180個胺基酸，來自人類gp130的至少162和至高200個胺基酸，來自人類gp130的至少160和至高220個胺基酸，來自人類gp130的至少164和至高190個胺基酸等等及以此類推。

在某些實施例中，gp130基團係包括或由與全長人類gp130之胺基酸23至619具有至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%、或100%序列同一性之的胺基酸序列所組成，有或無額外的至高5個胺基酸，至高10個胺基酸，至高15個胺基酸，至高20個胺基酸、至高30個胺基酸、或至高40個胺基酸C端與gp130的胺基酸殘基619相連接。

當位於相同的單體時，含有gp130基團的本文IL27受體促效劑可在IL27 p28基團的N–或C-端具有gp130胞外結構域。在某些實施例中，含有gp130基團的本揭示文IL27受體促效劑較佳地係在IL27 p28基團的N–端具有IL27Ra (IL27Rα)胞外結構域。

在蛋白的胞外結構域中已有報導多數個天然存在的gp130之序列變體(參見 www.uniprot.org/uniprot/EBI3189)。因此，本文gp130結構域可含有存在於一或多個天然變體中的胺基酸取代。示例的序列變體包括SNP變體rs2228044，其係在位置148具有一G→R取代；SNP變體rs199905033，其係在位置200具有一A→G取代；和SNP變體rs34417936，其係在位置499具有一V→I取代。

人類gp130含有多數個N-連接的糖基化位點。本文係涵蓋有或無N-連接聚醣之gp130結構域。 5.7. 靶向基 團

在本文之IL27促效劑中併入一或多個靶向基團允許了將高濃度IL27遞送至所欲的微環境或疾病反應性淋巴細胞，例如CD4+ CD8+ T淋巴細胞，在該處其可發揮定位化效應。

適合的靶向基團模式係描述於5.7.2章節和‎5.7.3章節中。靶向基團較佳地為一抗原結合基團，例如抗體或抗體的抗原結合片段，例如，如5.7.2.1章節中所述之scFv，或如5.7.2.2章節中所述之Fab。

在其他的實施例中，靶向基團為一胜肽-MHC複合物，如5.7.3章節中所述，例如，為腫瘤淋巴細胞所辨識的胜肽-MHC複合物。

某些IL27促效劑模式包含一個以上的靶向基團。當本文之IL27促效劑係包括二或更多個不同的靶向基團時(例如，具有圖3D或圖3E中圖示模式的IL27促效劑)，不同的靶向基團可適當地與相同的細胞(無論是與不同的多肽結合或是與相同多肽的不同表位結合)或組織類型結合。或者，不同的靶向基團可與不同的細胞或組織結合，且因為該結合使其接近彼此。

某些示例的靶向基團和模式係描述於下文中。 5.7.1. 標靶分子

抗體和抗原結合片段一般係與特定的抗原決定位結合並且能將IL27促效劑引導至標靶位置，例如引導至攜帶該抗原決定位之特定類型的疾病細胞。

經本文之IL27促效劑的靶向基團所辨識的標靶分子一般係於，例如免疫細胞的細胞表面上或組織的細胞表面上發現。

在免疫細胞的細胞表面上所發現的標靶分子之非限制性實例包括CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、XCR1、Clec9a和CD20。

在組織的細胞表面上所發現的標靶分子之非限制性實例包括MADCAM、a4b7整合素、TSHR和EpCam。

在某些實施例中，該靶向基團係與一細胞激素，例如IL27或其次單元結合。在某些實施例中，該靶向基團為一IL27受體之IL27-結合結構域。

在某些實施例中，該靶向基團為一胜肽-MHC複合物，例如一靶向自體反應性T細胞的胜肽-MHC複合物。

由本文之IL27受體促效劑所辨識的其他標靶分子可，例如，在活化的T細胞表面上，在腫瘤細胞表面上，在病毒-感染的細胞表面上，在其他罹病的細胞表面上，游離於血清中，在胞外基質(ECM)中，或存在鏢靶位置的免疫細胞，例如，腫瘤反應性淋巴細胞發現。在其中免疫細胞係以外源性施予下(例如，表現T細胞的嵌合抗原受體(「CAR」))，靶向基團可辨識該嵌合的抗原受體(CAR)或在CAR T細胞表面上所發現的另外分子。在各種實施例中，CAR係包括特異性辨識TAA或pMHC複合物的CDR或VH和VL序列(例如，以scFv之形式)。

示例的標靶分子有纖維母細胞活化蛋白(FAP)、肌腱蛋白(Tenascin)-C的A1結構域(TNC A1)、肌腱蛋白-C的A2結構域(TNC A2)、纖連蛋白的額外結構域B (EDB)、黑色素瘤-相關硫酸軟骨素蛋白聚醣(MCSP)、MART-1/Melan-A、gp100、二肽基胜肽酶IV(DPPIV)、腺苷去胺酶結合蛋白(ADAbp)、親環蛋白b、結腸直腸相關抗原(CRC)-C017-1A/GA733、癌胚抗原(CEA)及其致免疫表位CAP-1和CAP-2、etv6、aml1、前列腺特異性抗原(PSA)及其致免疫表位PSA-1、PSA-2和PSA-3、前列腺特異性膜抗原(PSMA)、T細胞受體/CD3-ζ鏈、MAGE-家族之腫瘤抗原(例如，MAGE-A1、MAGE-A2、MAGE-A3、MAGE-A4、MAGE-A5、MAGE-A6、MAGE-A7、MAGE-A8、MAGE-A9、MAGE-A10、MAGE-A11、MAGE-A12、MAGE-Xp2 (MAGE-B2)、MAGE-Xp3 (MAGE-B3)、MAGE-Xp4 (MAGE-B4)、MAGE-C1、MAGE-C2、MAGE-C3、MAGE-C4、MAGE-C5)、GAGE-家族之腫瘤抗原(例如，GAGE-1、GAGE-2、GAGE-3、GAGE-4、GAGE-5、GAGE-6、GAGE-7、GAGE-8、GAGE-9)、BAGE、RAGE、LAGE-1、NAG、GnT-V、MUM-1、CDK4、酪胺酸酶、p53、MUC家族、HER2/neu、p21ras、RCAS1、α-胎兒蛋白、E-鈣黏素(cadherin)、α-連環蛋白(catenin)、β-連環蛋白和γ-連環蛋白、p120ctn、gp100 Pmel117、PRAME、NY-ESO-1、cdc27、腺瘤性結腸息肉症蛋白(APC)、fodrin、連接蛋白37(Connexin 37)、Ig-獨特型(idiotype)、p15、gp75、GM2和GD2神經節苷脂、病毒產物例如人類乳突病毒蛋白、Smad家族之腫瘤抗原、Imp-1、P1A、EBV編碼的核抗原(EBNA)-1、腦肝糖磷酸化酶、SSX-1、SSX-2 (HOM-MEL-40)、SSX-1、SSX-4、SSX-5、SCP-1和CT-7、c-erbB-2、Her2、EGFR、IGF-1R、CD2 (T-細胞表面抗原)、CD3 (與TCR有關的異多聚體)、CD22 (B-細胞受體)、CD23 (低親和力IgE受體)、CD30 (細胞激素受體)、CD33 (骨髓細胞表面抗原)、CD40 (腫瘤壞死因子受體)、IL-6R-(IL6受體)、CD20、MCSP、PDGFβR (β-血小板衍生的生長因子受體)、ErbB2上皮細胞黏附分子(EpCAM)、EGFR變體 III (EGFRvIII)、CD19、二唾液酸神經節苷脂GD2、管腔-上皮黏蛋白、gp36、TAG-72、膠質瘤相關抗原、β-人類絨毛膜促性腺激素、α胎兒蛋白(AFP)、凝集素反應性AFP、甲狀腺球蛋白、MN-CA IX、人類端粒酶反轉錄酶、RU1、RU2(AS)、腸羧基酯酶、mut hsp70-2、M-CSF、前列腺酶、前列腺酶特異性抗原(PSA)、PAP、LAGA-1a、p53、前列腺素、PSMA、存活和端粒酶、前列腺-癌腫瘤抗原1 (PCTA-1)、ELF2M、嗜中性粒細胞彈性蛋白酶、ephrin B2、胰島素生長因子(IGF1)-I、IGF-II、IGFI受體、5T4、ROR1、Nkp30、NKG2D、腫瘤基質抗原、CA166-9、纖連蛋白之額外結構域A (EDA)和額外結構域B (EDB)及肌腱蛋白-C (TnC A1)的A1結構域。

病毒抗原之非限定實例包括EBV抗原(例如，艾司坦-巴爾病毒LMP-1)、C型肝炎病毒抗原(例如，C型肝炎病毒E2糖蛋白)、HIV抗原(例如，HIV gp160和HIV gp120)；CMV抗原；HPV特異性抗原，或流感病毒抗原(例如，流感病毒血球凝集素)。

ECM抗原的非限制性實例包括多配體聚醣(syndecan)、肝素酶(heparanase)、整合素(integrin)、骨橋蛋白(osteopontin)、鏈接(link)、鈣黏蛋白(cadherin)、層黏連蛋白(laminin)、層黏連蛋白EGF型、凝集素、纖連蛋白、纖連蛋白的額外結構域B (ED-B)、刻痕蛋白(notch)、肌腱蛋白、膠原蛋白和基質蛋白(matrixin)。

其他的標靶分子有腫瘤或病毒淋巴細胞之細胞表面分子，例如T細胞共刺激蛋白如CD27、CD28、4-1BB (CD137)、OX40、CD30、CD40、ICOS、淋巴細胞功能相關抗原1 (LFA-1)、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C和B7-H3。

在特定的實施例中，標靶分子為檢查點抑制劑，例如CTLA-4、PD1、PDL1、PDL2、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK1、CHK2。在特定實施例中，該標靶分子為PD1。在其他的實施例中，該標靶分子為LAG3。

在某些實施例中，靶向基團係靶向下表3中所列的示例標靶分子，以及有關靶向基團可作為基礎之示例的抗體或抗體序列。

表 3 示例的標靶分子
標靶	抗體名稱及 / 或結合序列
1-92-LFA-3	Amevive™ (alefacept)
5T4	GEN1044
1B型活化素受體	比馬魯單抗(Bimagrumab) 美國專利案號8,388,968 B2之VH：SEQ ID NO：107、109 美國專利案號8,388,968 B2之VL：SEQ ID NO：93、95
B7-H3	Obrindatamab (MGD009)
B7-H3 (CD276)	伊布妥組單抗(Enoblituzumab) (MGA271)
B7-H3 (CD276)	MGC018
B7-H3 (CD276)	MGA012
B7-H3 (CD276)	8H9
B7-H3 (CD276)	VH：US 2021/0171641 A1之SEQ ID NO：21、26或31之重鏈的VH序列 VL：US 2021/0171641 A1之SEQ ID NO：20、22或30之輕鏈的VL序列
B7-H3 (CD276)	VH：US 2019/0002563 A1之SEQ ID NO：21、29或37之重鏈的VH序列 VL：US 2019/0002563 A1之SEQ ID NO：17、25或33之輕鏈的VL序列
B7-H3 (CD276)	VH：美國專利案號10,640,563之SEQ ID NO：146、147或148之重鏈的VH序列 VL：美國專利案號10,640,563之SEQ ID NO：143、144或145之輕鏈的VL序列
BAFF/B淋巴細胞刺激劑	Benlysta™ (velimumab)
BAFF/B淋巴細胞刺激劑	VH：美國專利案號7,138,501之SEQ ID NO：327的胺基酸1至123 VL：美國專利案號7,138,501之SEQ ID NO：327的胺基酸139至249
BAFF/B淋巴細胞刺激劑	VH：美國專利案號7,605,236之SEQ ID NO：1321的胺基酸1至126 VL：美國專利案號7,605,236之SEQ ID NO：1049的胺基酸143至251
BAFF/B淋巴細胞刺激劑	貝利尤單抗(Belimumab)
BCMA	VH：US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 126之重鏈的VH序列 VL：US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 129或SEQ ID NO. 132之輕鏈的VL序列
CA125	Igobumab
CA125	OvaRex™ (奥曲果單抗(oregobumab))
鈣黏蛋白(Cadherin)	描述於美國公開案號US 2006/0039915之抗體
N-鈣黏蛋白	與美國公開案號US 2010/0278821之SEQ ID NO：10、17或18的胺基酸序列結合的抗體
CD3	卡妥索單抗(Catumaxomab)
CD3	厄妥索單抗(Ertumaxomab)
CD3	描述於WO2011121110A1之抗-PSMA抗-CD3抗體的CD3部分
CD3	US10266593B2中之抗-CD3抗體序列
CD3	US 8846042B2中之抗-CD3抗體序列
CD3	US 2016/0355600中之抗-CD3抗體序列
CD3	WO 2014/110601中之抗-CD3抗體序列
CD3	WO 2014/145806中之抗-CD3抗體序列
CD3	US 10,066,015中之抗-CD3抗體序列
CD3	WO 2019/034580中之抗-CD3抗體序列
CD3	WO 2014/056783中之抗-CD3抗體序列
CD3	WO 2013/055809 A1中之抗-CD3抗體序列
CD3	US 10,066,016中之抗-CD3抗體序列
CD3	US 2010/0150918中之抗-CD3抗體序列
CD3	MT110
CD3	阿卡帕單抗(Acapatamab) (AMG160)
CD3	AMG199
CD3	AMG330
CD3	AMG427
CD3	AMG562
CD3	AMG596
CD3	AMG673
CD3	AMG701
CD3	塔拉妥單抗(Tarlatamab) (AMG757)
CD3	AMG910
CD3	BAY2010112
CD3	AMG420
CD3	AMG424
CD3	AMG509
CD3	AMV564
CD3	APVO436
CD3	Alnuctamab (CC-93269)
CD3	ERY974
CD3	A-319
CD3	GEM333
CD3	GEM3PSCA
CD3	頭孢他單抗(Cevostamab)
CD3	瑞尼莫他單抗(Runimotamab)
CD3	GEN1044
CD3	依波利他單抗(Epcoritamab)
CD3	HPN424
CD3	ISB1302
CD3	ISB1342
CD3	IGM-2323
CD3	IMC-F106C
CD3	IMC-C103C
CD3	IMCnyeso
CD3	JNJ-63709178
CD3	JNJ-63898081
CD3	特立妥單抗(Teclistamab)
CD3	泰克單抗(Talquetamab)
CD3	JNJ-67571244
CD3	MGD007
CD3	奧洛他單抗(Orlotamab)
CD3	度伏妥昔單抗(Duvortuxizumab)
CD3	氟妥珠單抗(Flotetuzumab)
CD3	MCLA-117
CD3	PF-06671008
CD3	艾拉那他單抗(Elranatamab)
CD3	奧瑞昔單抗(Odronextamab)
CD3	REGN5458
CD3	REGN5459
CD3	REGN4018
CD3	格羅非單抗(Glofitamab)
CD3	RO6958688
CD3	SAR440234
CD3	TNB-383B
CD3	M802
CD3	Xmab13676
CD3	Xmab18087
CD3	維貝科他單抗(Vibecotamab)
CD3	尼伐他單抗(Nivatrotamab)
CD3	US20190211100中之抗-CD3抗體序列
CD3	EP1629011B中之抗-CD3抗體序列
CD3	揭示於US 2021/0206865 A1之SEQ ID NOS. 90和98的VH 揭示於US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 92和100的CDR-H1 揭示於US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 94和102的CDR-H2 揭示於US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 96和104的CDR-H3 揭示於US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 127或SEQ ID NO. 128的HC 揭示於US 2021/0206865 A1之SEQ ID NO. 129或SEQ ID NO. 132的LC
CD3	揭示於US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO：2的抗-CD3重鏈揭示於US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO. 5的抗-CD3 VH 揭示於US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO. 6的抗-CD3 VL 揭示於US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO. 10的抗-CD3 CDR-H1 揭示於US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO. 11的抗-CD3 CDR-H2 揭示於US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO. 12的抗-CD3 CDR-H3
CD3	揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO：92、102、112、122、132、142、156、166、176、186、196或206的抗-CD3 VH 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 93、103、113、123、133、143、157、167、177、187、197或207的抗-CD3 CDR-H1 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 94、104、114、124、134、144、158、168、178、188、198或208的抗-CD3 CDR-H2 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 95、105、115、125、135、145、159、169、179、189、199或209的抗-CD3 CDR-H3 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 96、106、116、126、136、146、152、162、172、182、192或202的抗-CD3 VL 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 97、107、117、127、137、147、153、163、173、183、193或203的抗-CD3 CDR-L1 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 98、108、118、128、138、148、154、164、174、184、194或204的抗-CD3 CDR-L2 揭示於US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO. 99、109、119、129、139、149、155、165、175、185、195或205的抗-CD3 CDR-L3
CD11a	Raptiva™ (依法珠單抗(efalizumab)) Werther et al., 1996, The Journal of Immunology 157(11)：4986-4995中的序列
CD19	Blincyto™ (博納吐單抗(blinatumomab))
CD19	SGN-CD19A
CD20	Bexxar™ (托西莫單抗(tositumomab)) VH：美國專利公開案US 2017/0002060 A1之SEQ ID NO：124之重鏈的VH序列 VL：美國專利公開案US 2017/0002060 A1之SEQ ID NO：125之輕鏈的VL序列
CD20	Zevalin™ (替伊莫單抗(ibritumomab tiuxetan)) VH：美國專利案號5,736,137之SEQ ID NO：9 VL：美國專利案號5,736,137之SEQ ID NO：6
CD20	Rituxan™ (利妥昔單抗(rituximab)) VH：美國專利案號5,736,137之SEQ ID NO：9 VL：美國專利案號5,736,137之SEQ ID NO：6
CD20	Ocrevus™ (奧瑞珠單抗(ocrelizumab))
CD20	奧卡拉珠單抗(Okaratuzumab)
CD20	Arzerra™(法木單抗) VH：美國專利案號8,529,902之SEQ ID NO：2 VL：美國專利案號8,529,902之SEQ ID NO：4
CD20	Gazyva™(奧比妥珠單抗)
CD20	VH： US 2021/0206870 A1之SEQ ID NO：4 VL：US 2021/0206870 A1之of SEQ ID NO：6
CD20	依波利他單抗(Epcoritamab)
CD22	貝利木單抗(Belimumab)
CD22	依帕妥珠單抗(Epratuzumab)
CD22	Besponsa ™ (奧加伊妥珠單抗(inotuzumab ozogamicin))
CD22	Lumoxiti ™ (帕西妥莫單抗(moxetumumab pasudox))
CD22	維汀匹那妥-單抗(pinatuzumab vedotin)
CD25	Zenapax™(達利珠單抗(daclizumab)) VH：美國專利案號7,060,269之SEQ ID NO：9 VL：美國專利案號7,060,269之SEQ ID NO：10
CD30	Adcetris™ (brentuximab vedotin) VH：美國專利案號7,090,843之SEQ ID NO：2 VL：美國專利案號7,090,843之SEQ ID NO：10
CD33	Myelotarg™ (吉妥珠單抗(gemtuzumab)) Man Sung, et al., 1993, Molecular immunology 30：1361-1367中的序列
CD33	林妥珠單抗(Lintuzumab)
CD38	Darzalex™ (達雷妥尤單抗(daratumumab) )
CD40	盧卡木單抗(Lukatumumab)
CD40	達西珠單抗(Dacetuzumab)
CD40L	Hu5c8(魯普利單抗(ruplizumab) )
CD44v6	美坦新-比伐珠單抗(vibatuzumab mertansine)
CD52	Campath™ (阿崙單抗(alemtuzumab)) VH：美國專利公開案US 2017/0002060 A1之SEQ ID NO：1 VL：美國專利公開案US 2017/0002060 A1 SEQ ID NO：2
CD70	Blenrep ™ (borsetuzumab mafodotin)
CD123	氟妥珠單抗(Flotetuzumab)
CD221	Tepezza ™ (teprotumumab)
CEA	Hybri-Ceaker® (戊酸替木單抗(altumomab pentetate)
CEA	Scintimun™ (貝西索單抗(besilesomab))
CEA	CEA-CIDE™ (labetuzumab))
CEA	CEA-Scan ™ (阿西莫單抗(arcitumomab))
CEA	hMN-15 美國專利案號8,771,690 B2之SEQ ID NOs：4-6的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3序列美國專利案號8,771,690 B2之SEQ ID NOs：1-3的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列
CEA	來自臨床試驗NCT02324257之RO6958688/RG7802的CEA結合部分
CEA	西比沙他單抗(Cibisatamab)
CEA	來自臨床試驗NCT01284231和NCT02291614之MEDI-565/MT110/AMG211的CEA結合部分 VH： PCT公開案號WO 2013/012414 A1之SEQ ID NO：49或51 VL： PCT公開案號WO 2013/012414 A1之SEQ ID NO：48
CEA	雷貝珠單抗(Rabetuzumab)
CEA	阿特珠單抗(Atezolizumab)
CEA	西比沙單抗(Cibisatamab)
CEA	MEDI-565 (AMG211、MT111)
CEA	RO6958688
CEA	VH：描述於WO2022/048883A1之SEQ ID No. 9 VL：描述於WO2022/048883A1之SEQ ID No. 10
CLDN18.2	AMG910
膠原蛋白α-4鏈	TRC093 (MT293)
膠原蛋白	描述於Liang, H. et al. A collagen-binding EGFR antibody fragment targeting tumors with a collagen-rich extracellular matrix. Sci. Rep. 5, 18205; doi: 10.1038/srep18205 (2016)之膠原蛋白結合抗體片段。
第I型膠原蛋白	西妥昔單抗(Cetuximab) (Erbitux)
第X型膠原蛋白	PCT公開案號WO 2019/020797之SEQ ID NO：1或2的胺基酸序列
第X型膠原蛋白	PCT公開案號WO 2014/180992之SEQ ID NO：1的胺基酸序列
第X型膠原蛋白	抗體X34，如描述於I. Girkontaite et al., “Immunolocalization of type X collagen in normal fetal and adult osteoarthritic cartilage with monoclonal antibodies,” Matrix Biol 15、231-238 (1996)
第X型膠原蛋白	由ThermoFisher Scientific公司以型號PA5-115039或PA5-116871或PA5-97603或PA5-49198所販售的抗體X53或1H8或ARC0659或JF0961膠原蛋白X多株抗體
第X型膠原蛋白	由RDI公司以型號RDI-COLL10abr所販售的抗體
補體C5	Soliris™ (依庫珠單抗(eculizumab)) VH：美國專利案號6,355,245之SEQ ID NO：10的胺基酸1至122 VL：美國專利案號6,355,245之SEQ ID NO：9的胺基酸3至110
CTLA-4	Yervoy™ (伊匹單抗(ipilimumab)) VH： WO 2001/014424 A2之SEQ ID NO：17 VL： WO 2001/014424 A2之SEQ ID NO：7
CTLA-4	(曲美木單抗(tremelimumab))
CTLA-4	Orencia™ (阿巴西普(abatacept))
DLL3	AMG757
EGFR	Erbitux™ (西妥昔單抗(cetuximab)) VH：美國專利案號6,217,866之SEQ ID NO：11 VL：美國專利案號6,217,866之SEQ ID NO：13
EGFR	Vectibix™ (帕尼單抗(panitumumab)) VH：美國專利案號6,235,883之SEQ ID NO：37 VL：美國專利案號6,235,883之SEQ ID NO：38
EGFR	扎魯木單抗(Zalutumumab) VH： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：64 VL： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：69
EGFR	馬帕木單抗(mapatumumab)
EGFR	馬妥珠單抗(matuzumab)
EGFR	尼妥珠單抗(nimotuzumab) VH： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：51 VL： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：56
EGFR	ICR62
EGFR	mAb 528
EGFR	CH806
EGFRv3	AMG596
EGFRv3	AMG404
EGFR/CD64	MDX-447
EpCAM	Panorex ™(依決洛單抗(edrecolomab)) VH： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：129 VL： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：134
EpCAM	阿德木單抗(Adecatumumab) VH： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：142 VL： WO 2018/140831 A2之SEQ ID NO：147
EpCAM	西莫白介素單抗(tucotuzumab celmoleukin)
EpCAM	泊西他珠單抗(citatuzumab bogatox)
EpCAM	EP1629013 B1 VH：SEQ ID NOs：80、84、88、92或96 VL：SEQ ID NOs：82、86、90、94或98
EpCAM	G8.8 HC：美國專利公開案No. US 2020/0317806 A1之SEQ ID NO：4 HL：美國專利公開案No. US 2020/0317806 A1之SEQ ID NO：3
EpCAM	VH： WO 2021/211510 A2之SEQ ID NOs：17至22 VL： WO 2021/211510 A2之SEQ ID NO：15至16
EpCAM	Removab ™(c卡妥昔單抗(atumaxomab))
EpCAM	Vicineum ™ (莫妥組單抗(oportuzumab monatox))
EpCAM	M701
RSV的F蛋白	Synagic™ (帕利珠單抗(palivizumab))
GD2	3F8
糖蛋白受體IIb/IIIa	ReoPro™ (阿昔單抗(abiciximab))
gpA33	MGD007
GPC3	ERY974
GUCY2C	PF-07062119
Heparanase	選自HP130、HP 239、HP 108.264、HP 115.140、HP 152.197、HP 110.662、HP 144.141、HP 108.371、HP 135.108、HP 151.316、HP 117.372、HP 37/33、HP3/17、HP 201或HP 102之抗體或描述於美國專利公開案US 2004/0170631之SEQ ID NO：1至11的胺基酸序列
Her2	Herceptin™ (曲妥珠單抗(trastuzumab))
Her2	Aldesleukin(普留淨(proleukine))
Her2	沙格司亭(Sargramustim)(leukine)
Her2	M802
Her2	Runimotamab (BTRC4017A、R07227780)
Her2	ISB1302
Her2-neu	Perjeta™ (帕妥珠單抗(pertuzumab)) VH： WO 2013/096812 A1之SEQ ID NO：16 VL： WO 2013/096812 A1之SEQ ID NO：15
Her2-neu	Rexomun™ (厄妥昔單抗(ertumaxomab))
IgE	Xolair™ (奧馬珠單抗(omalizumab))
IGFIR	(芬妥木單抗(figitumumab))
IL1β	Ilaris™(卡那單抗(canakinumab)) VH：美國專利案號7,446,175之SEQ ID NO：1 VL：美國專利案號7,446,175之SEQ ID NO：2
IL1Ra	Antril™、Kineret™ (阿那白滯素(ankinra))
IL2R	Simulect™(巴利昔單抗(basiliximab)) VH：美國專利案號6,383,487之SEQ ID NO：3 VL：美國專利案號6,383,487之SEQ ID NO：6
IL6	克拉扎珠單抗(Clazakizumab)
IL6受體	Actemra™ (托珠單抗(tocilizumab)) VH：美國專利案號7,479,543之SEQ ID NO：31 VL：美國專利案號7,479,543之SEQ ID NO：29
整合素α4	Tysabri™(那他珠單抗(natalizumab)) VH：美國專利案號5,840,299之SEQ ID NOs：11至13 VL：美國專利案號5,840,299之SEQ ID NOs：7至8
整合素α4 β7	Entyvio ™ (維多珠單抗(vedolizumab)) HC：美國專利公開案US 2012/0282249之SEQ ID NO：2 LC：美國專利公開案US 2012/0282249之SEQ ID NO：4
整合素α5 β1	VH：歐洲專利第1 755 659號之SEQ ID NO：2 VL：歐洲專利第1 755 659號之SEQ ID NO：4
整合素β1	VH：美國專利公開案US 2022/0089744之SEQ ID NO：2、6、8、10、12、14、29至43或91至100 VL：美國專利公開案US 2022/0089744之、SEQ ID NO：4、16、18、20、22、44至57或107至116
LAG3	Relatlimab (BMS-98016)
LAG3	Sym022
LAG3	HLX26
LAG3	TSR-033
LAG3	ABL501
LAG3	INCAGN02385
LAG3	弗安利單抗(Fianlimab)(REGN3767)
LAG3	RO7247669
LAG3	EMB-02
LAG3	FS118
LAG3	GSK2831781
LAG3	IBI323
LAG3	IBI110
LAG3	LAG525
LAG3	XmAb®22841
LAG3	LBL-007
LAG3	VH：美國專利案號9,902,772之SEQ ID NO：1、8、10或12 VL：美國專利案號9,902,772之SEQ ID NO：2、3、4、5、6、7、9、11、13或14
LAG3	VH：美國專利公開案US 2021/0095026之SEQ ID NO：182 VL：美國專利公開案US 2021/0095026之SEQ ID NO：88
LAG3	具有美國公開案US2022/0056126A1之SEQ ID NOs 23/24、3/4及11/12之VH/VL胺基酸序列的抗體
Laminin	來自Sigma Aldrich公司的Lam-89
Mesothelin	阿馬妥昔單抗(Amatuximab)
Mesothelin	HPN536
MUC1	克利妥珠單抗(civatuzumab tetraxetane)
MUC1	Pankomab ™ (加替珠單抗(gatipotuzumab))
MUC1	Femtumumab
MUC1	坎妥珠單抗(Cantuzumab ravtansine)
MUC16 (CA125)	具有任一下列來自US 2018/0118848A1之成對SEQ ID NO：18/26；82/858；98/170的胺基酸序列之VH和VL序列的抗-MUC16抗體
MUC17	AMG199
Nectin-4	恩弗妥單抗(Enfortumab) (ASP7465、ASG-22CE、ASG-22ME) VH： PCT公開案WO 2021/151984之SEQ ID NO：3 VL： PCT公開案WO 2021/151984之SEQ ID NO：4
Nectin-4	SBT290
Nectin-4	VH：美國專利案號11,274,160之SEQ ID NO：1 VL：美國專利案號11,274,160之SEQ ID NO：2
NGF	替尼珠單抗(tanezumab)
Osteopontin	HC： PCT公開案WO 2021/030209之SEQ ID NO：22 LC： PCT 公開案WO 2021/030209之SEQ ID NO：24
PD1	MDX-1106/BMS-936558(納武單抗(nivolumab))，一種帶有WHO Drug Information, Vol. 27, No. 1, pages 68-69 (2013)中所述結構之人類IgG4 mAb且其重鏈和輕鏈序列係揭示於美國公開案號US20190270812A1之圖7中
PD1	MK-3475(帕博利珠單抗(pembrolizumab))，一種帶有WHO Drug Information, Vol. 27, No. 2, pages 161-162 (2013)中所述結構之人源化IgG4 mAb且其重鏈和輕鏈序列係揭示於美國公開案號US20190270812A1之圖6中
PD1	REGN2810(如美國公開案號20150203579中H4H7798N所揭示)
PD1	抗-PD1抗體，其係具有相當於下列美國專利案號11,034,765 B2之SEQ ID NO的CDR H1-H3和CDR L1-L3序列： a)分別為SEQ ID NOs：18、19、20、21、22和23； b)分別為SEQ ID NOs：24、25、26、27、28和29； c)分別為SEQ ID NOs：30、31、32、33、34和35； d)分別為SEQ ID NOs：36、37、38、39、40和41； e)分別為SEQ ID NOs：42、43、44、45、46和47； f)分別為SEQ ID NOs：48、49、50、51、52和53； g)分別為SEQ ID NOs：54、55、56、57、58和59；及 h)分別為SEQ ID NOs：60、61、62、63、64和65；
PD1	揭示於PCT公開案WO2015112800A1之表1至3中的抗-PD1抗體，其係包括(但不限於)具有成對VH/VL之抗-PD1抗體，而該VH/VL係具有PCT公開案WO2015112800A1之SEQ ID NOs：2/10、18/26、34/42、50/58、66/74、82/90、98/106、1 14/122、130/138、146/154、162/170、178/186、194/202、210/202、218/202、226/202、234/202、242/202、250/202、258/202、266/202、274/202、282/202、290/202、298/186、306/186和314/186
PD1	揭示於美國專利案號10,294,299 B2之抗-PD1抗體，係具有下列成對SEQ ID NO之重鏈和輕鏈可變結構域： SEQ ID NOs. 164/178 SEQ ID NOs. 165/179 SEQ ID NOs. 166/180 SEQ ID NOs. 167/181 SEQ ID NOs. 168/182 SEQ ID NOs. 169/183 SEQ ID NOs. 170/184 SEQ ID NOs. 171/185 SEQ ID NOs. 172/186 SEQ ID NOs. 173/187 SEQ ID NOs. 174/188 SEQ ID NOs. 175/189 SEQ ID NOs. 176/190 SEQ ID NOs. 177/190
PD1	MEDI-0680 (AMP-514)
PD1	PDR001
PD1	BGB-108
PD1	h409A11，描述於WO2008/156712中
PD1	h409A16，描述於WO2008/156712中
PD1	h409A17，描述於WO2008/156712中
PD1	描述於美國專利案號7488802之抗-PD1抗體
PD1	描述於美國專利案號7521051之抗-PD1抗體
PD1	描述於美國專利案號8008449之抗-PD1抗體
PD1	描述於美國專利案號8354509之抗-PD1抗體
PD1	描述於美國專利案號8168757之抗-PD1抗體
PD1	描述於PCT公開案號 W02004/004771之抗-PD1抗體
PD1	描述於PCT公開案號W02004/056875之抗-PD1抗體
PD1	描述於PCT公開案號W02004/072286之抗-PD1抗體
PD1	描述於美國公開案號US2011/0271358之抗-PD1抗體
PDL1	度伐魯單抗(Durvalumab)(MEDI4736)
PDL1	阿替利珠單抗(Atezolizumab) (Tecentriq, MPDL3280A))
PDL1	MDX 1105 (BMS-936559)
PDL1	Avelumab
PDL1	ZKAB001(首克注利單抗(Socazolimab))
PDL1	TQB2450
PDL1	MEDI4736
PDL1	HLX20
PDL1	KN035
PDL1	LY3434172
PDL1	LY3300054
PDL1	LDP
PDL1	EMB-09
PDL1	ABL501
PDL1	INBRX-105
PDL1	SHR-1210
PDL1	STI-3031 (IMC-001)
PDL1	MPDL3280A (RG7446)
PDL1	KN035
PDL1	BGB-A333
PDL1	HLX301
PDL1	Y101D
PDL1	ES101
PDL1	IBI322
PDL1	恩沃利單抗(Envafolimab)
PDL1	VH：美國專利案號11,168,144之SEQ ID NO：46、48、50或52 VL：美國專利案號11,168,144之SEQ ID NO：58、137或12
PDL1	VH：美國專利案號11,208,486之SEQ ID NO：23、124、126、127、128、130、140或145 VL：美國專利案號11,208,486之SEQ ID NO：24或125
磷脂醯絲胺酸	巴維昔單抗(bavituximab)
PSCA	GEM3PSCA
PSMA	huJ591
PSMA	具有任一下列來自WO 2017/023761A1之成對的SEQ ID NO：2/1642；10/1642；18/1642；26/1642；34/1642；42/1642；50/1642；58/1642；66/1642；74/1642；82/1642；90/1642；98/1642；106/1642；1 14/1642；122/130；和138/146之VH和VL序列的抗-PSMA抗體
PSMA	一種抗體，例如：描述於WO2003034903A2之PSMA 3.7、PSMA 3.8、PSMA 3.9、PSMA 3.11、PSMA 5.4、PSMA 7.1、PSMA 7.3、PSMA 10.3、PSMA 1.8.3、PSMA A3.1.3、PSMA A3.3.1、Abgenix 4.248.2、Abgenix 4.360.3、Abgenix 4.7.1、Abgenix 4.4.1、Abgenix 4.177.3、Abgenix 4.16.1、Abgenix 4.22.3、Abgenix 4.28.3、Abgenix 4.40.2、Abgenix 4.48.3、Abgenix 4.49.1、Abgenix 4.209.3、Abgemx 4.219.3、Abgenix 4.288.1、Abgenix 4.333.1、Abgemx 4.54.1、Abgenix 4.153.1、Abgenix 4.232.3、Abgenix 4.292.3、Abgenix 4.304.1、Abgenix 4.78.1和Abgenix 4.152.1 一種雜交瘤細胞株，例如：描述於WO 2003/034903A2之PSMA 3.7 (PTA-3257)、PSMA 3.8、PSMA 3.9 (PTA–3258)、PSMA 3.11 (PTA-3269)、PSMA 5.4 (PTA-3268)、PSMA 7.1 (PTA-3292)、PSMA 7.3 (PTA-3293)、PSMA 10.3 (PTA-3247) 、PSMA 1.8.3 (PTA-3906)、PSMA A3.1.3 (PTA–3904)、PSMA A3.3.1 (PTA-3905)、Abgenix 4.248.2 (PTA-4427)、Abgenix 4.360.3 (PTA–4428)、Abgenix 4.7.1 (PTA-4429)、Abgenix 4.4.1 (PTA-4556)、Abgenix 4.177.3 (PTA-4557)、Abgenix 4.16.1 (PTA-4357)、Abgenix 4.22.3 (PTA-4358)、Abgenix 4.28.3 (PTA-4359)、Abgenix 4.40.2 (PTA-4360)、Abgenix 4.48.3 (PTA-4361)、Abgenix 4.49.1 (PTA-4362)、Abgenix 4.209.3 (PTA-4365)、Abgenix 4.219.3 (PTA-4366)、Abgenix 4.288.1 (PTA-4367)、Abgenix 4.333.1 (PTA-4368)、Abgenix 4.54.1 (PTA-4363)、Abgenix 4.153.1 (PTA-4388)、Abgenix 4.232.3 (PTA-4389)、Abgenix 4.292.3 (PTA-4390)、Abgenix 4.304.1 (PTA-4391)、Abgenix 4.78.1 (PTA-4652)和Abgemx 4.152.1(PTA-4653) 描述於WO 2003/034903A2中之SEQ ID NOs：2至7的VH 描述於WO 2003/034903A2中之SEQ ID NOs：8至13的VL
PMSA	描述於WO 2011/121110A1之VH：SEQ ID NOs：225、239、253、267、281、295、309、323、337、351、365、379、393、407、421、435、449、463、477、491、505、519、533、547、561、575、589、603或617 描述於WO 2011/121110A1之VL SEQ ID NOs：230、244、258、272、286、300、314、328、342、356、370、384、398、412、426、440、454、468、482、496、510、524、538、552、566、580、594、608或622 描述於WO 2011/121110A1之VH和VL SEQ ID Nos：235、249、263、277、291、305、319、333、347、361、375、389、403、417、431、445、459、473、487、501、515、529、543、557、571、585、599、613或627
PMSA	一抗-PMSA抗體，其係具有任一US 2022/0119525 A1之SEQ ID NOs：229至312的VL胺基酸序列及一US 2022/0119525 A1之SEQ ID NO：217的VH
PMSA	ES414
PMSA	BAY2010112 (帕妥昔單抗(pasotuxizumab))
PMSA	CCW702
PMSA	JNJ-63898081
PMSA	CC-1
PMSA	阿卡帕單抗(Acapatamab)
PSMA	HPN424
RAAG12	RAV12
RANKL	Prolia™ (地舒單抗(denosumab)) VH：美國專利公開案2017/0002060之SEQ ID NO：51 VL：美國專利公開案2017/0002060之SEQ ID NO：52
SLAMF7	Empliciti™ (埃羅妥珠單抗(elotuzumab))
SSTR2	XmAb®18087
STEAP1	描述於US20210179731A1之VHCDR1 SEQ ID NOs：14、33、182、184或185 描述於US20210179731A1之VHCDR2 SEQ ID NOs：15、21、34、182、184或185 描述於 US20210179731A1之VHCDR3 SEQ ID NOs：16和35 描述於 US20210179731A1之VH SEQ ID NOs：182或184 描述於US20210179731A1之VLCDR1 SEQ ID NOs：11或30 描述於US20210179731A1之VLCDR2 SEQ ID NOs：12或31 描述於US20210179731A1之VLCDR3 SEQ ID NOs：13或32 描述於US20210179731A1之VL SEQ ID NOs：183或186
STEAP1	AMG509
STEAP2	具有選自下列SEQ ID NO之CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3、CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3序列的抗-STEAP 2抗體：美國專利案號10,772,972 B2之(1) 4-6-8-12-14-16；(2) 20-22-24-28-30-32；(3) 36-38-40-44-46-48；(4) 52-54-56-60-62-64；(5) 68-70-72-60-62-64；(6) 76-78-80-60-62-64；(7) 84-86-88-60-62-64；(8) 92-94-96-60-62-64；(9) 100-102-104-60-62-64；(10) 108-110-112-116-118-120；(11) 124-126-128-132-134-136；(12) 140-142-144-148-150-152；(13) 156-158-160-164-166-168；(14) 172-174-176-180-182-184；(15) 188-190-192-196-198-200；(16) 204-206-208-212-214-216；(17) 220-222-224-228-230-232；(18) 236-238-240-244-246-248；(19) 252-254-256-260-262-264；(20) 268-270-272-276-278-280；(21) 284-286-288-292-294-296；(22) 300-302-304-308-310-312；(23) 316-318-320-324-326-328；(24) 332-334-336-340-342-344；(25) 348-350-352-356-358-360；(26) 364-366-368-372-374-376；和(27) 380-382-384-388-390-392 抗-STEAP 2抗體，其係具有(a)一包括任一美國專利案號10,772,972 B2之SEQ ID NOs：2、18、34、50、66、74、82、90、98、106、122、138、154、170、186、202、218、234、250、266、282、298、314、330、346、362和378之胺基酸序列的VH；及(b)一包括任一美國專利案號10,772,972 B2之SEQ ID NOs：10、26、42、58、114、130、146、162、178、194、210、226、242、258、274、290、306、322、338、354、370、和386之胺基酸序列的VL。抗-STEAP 2抗體，其係具有一包括任何下列美國專利案號10,772,972 B2之成對SEQ ID NO之胺基酸序列的VH/VL對：2/10；18/26、34/42、50/58、66/58、74/58、82/58、90/58、98/58、106/114、122/130、138/146、154/162、170/178、186/194、202/210、218/226、234/242、250/258、266/274、282/290、298/306、314/322、330/338、346/354、362/370、和378/386
Syndecan-1 (CD 138)	描述於Wijdenes et al., 1996,Br. J. Haematol., 94：318-323中的B-B4抗體
Syndecan-4	描述於歐洲專利公開案EP 2 603 236之SEQ ID NO：1之胺基酸93和121的胺基酸序列或SEQ ID NO：2之胺基酸92和122的胺基酸序列
TCRαβ	揭示於US 2012/0034221之BMA031序列
TCRγδ	揭示於US 5,980,892之6TCS1抗體
TGFβ	GC1008
TNFR	Enbrel™ (依那西普(etanercept))
TNFα	Remicade™ (英夫利昔單抗(infliximab)) VH：國際專利公開案WO201/3087911 A1之SEQ ID NO：2 VH：國際專利公開案WO2013/ A1087911之SEQ ID NO：3
TNFα	Humira™ (阿達木單抗(adalimumab)) VH：美國專利案號6,258,562之SEQ ID NO：4 VL：美國專利案號6,258,562之SEQ ID NO：3
TNFα	Cimzia™(塞妥珠單抗(certolizumab pegol)) VH：美國專利案號7,012,135之SEQ ID NO：14 VL：美國專利案號7,012,135之SEQ ID NO：9
TNFα	Simponi™(戈利木單抗(golimumab)) VH：美國專利案號7,250,165之SEQ ID NO：7 VL：美國專利案號7,250,165之SEQ ID NO：8
VEGF	Avastin™(貝伐珠單抗(bevacizumab)) VH：美國專利案號7,060,269之SEQ ID NO：9 VL：美國專利案號7,060,269之SEQ ID NO：10
VEGF	Lucentis™(雷珠單抗(ranibizumab)) VH：美國專利案號9,914,770之SEQ ID NO：4 VL：美國專利案號9,914,770之SEQ ID NO：2

在某些方面，靶向基團係和上述抗體，包括表3中所列的抗體，競爭與標靶分子結合。在另外方面，靶向基團係包括具有上述抗體，包括表3中所列的抗體之CDR序列的CDR。在某些實施例中，靶向基團係包括上述抗體，包括表3中所列的抗體之全部6個CDR序列。在其他實施例中，靶向基團係包括至少此抗體之重鏈CDR序列(CDR-H1、CDR-H2、CDR-H3)和通用輕鏈之輕鏈CDR序列。在另外方面，靶向基團係包括一包含上文所述抗體例如，表3中抗體之VH胺基酸序列的VH。在某些實施例中，靶向基團進一步係包括一包含上文所述抗體例如，表3中抗體之VL胺基酸序列的VL。在其他的實施例中，靶向基團進一步係包括一通用輕鏈VL序列。

在某些實施例中，檢查點抑制劑靶向基團對於配體-受體結合為非阻斷或阻斷性拙劣的。非阻斷性或阻斷性拙劣的抗-PD1抗體之實例包括具有下列VH/VL胺基酸序列之抗體：PCT公開案號WO2015/112800A1之SEQ ID NOs：2/10；美國專利案號11,034,765 B2之SEQ ID NOs：16/17；美國專利案號10,294,299 B2之SEQ ID NOs. 164/178、165/179、166/180、167/181、168/182、169/183、170/184、171/185、172/186、173/187、174/188、175/189、176/190和177/190。非阻斷性或阻斷性拙劣的抗-LAG3抗體之實例包括具有美國公開案US2022/0056126A1之SEQ ID NO 23/24、3/4和11/12之VH/VL胺基酸序列的抗體。 5.7.2. 抗體和抗原結合結構域

在特定方面，靶向基團可為保留與抗原決定位特異性結合之任何類型的抗體或其片段。在一實施例中，此抗原結合基團為一全長的抗體。在一實施例中，此抗原結合基團為一免疫球蛋白分子，特言之IgG類免疫球蛋白分子，更特言之IgG ₁或IgG ₄免疫球蛋白分子。抗體片段包括，但不限於VH(或V _H)片段、VL(或V _L)片段、Fab片段、F(ab') ₂片段、scFv片段、Fv片段、微型抗體、雙抗體、三抗體和四抗體。在特定的實施例中，抗體的抗原結合片段為scFv或Fab，例如與CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、XCR1、Clec9a、CD20、MACCAM、a4b7整合素、TSHR和EpCam結合的scFv或Fab。 5.7.2.1.scFv

單鏈Fv或「scFv」抗體片段係包括單一多肽鏈中的VH和VL結構域，能以單鏈多肽表現並保留衍生該等單鏈Fv或「scFv」抗體片段之完整抗體的特異性。一般而言，此scFv多肽進一步係包括一介於VH和VL結構域之間的多肽連接子，其能使scFv形成用於標靶結合之所欲結構。適合連接scFV之VH和VL鏈的連接子之實例為5.8章節中所確立的連接子。

除非有指出，否則如本文中所用，scFv可具有任一順序的VL和VH可變區，例如就多肽的N-端和C-端而言，scFv可包括VL-連接子-VH或可包括VH-連接子-VL。

此scFv可包括來自任何適合物種的VH和VL序列，例如鼠類、人類或人源化VH和VL序列。

就製造一scFv-編碼核酸，VH和VL-編碼DNA片段係操作上連接另一編碼一連接子之片段，例如編碼任何如5.8章節中所述的連接子(典型地含有胺基酸甘胺酸和絲胺酸之重複序列，例如胺基酸序列(Gly4~Ser) ₃，使得VH和VL序列可以連續的單鏈蛋白表現，其中VL和VH區係藉由彈性連接子連結(參見，例如，Bird et al., 1988, Science 242：423-426；Huston et al.,1988, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85：5879-5883；McCafferty et al.,1990, Nature 348：552-554)。 5.7.2.2.Fab

Fab結構域傳統上係使用酵素，例如木瓜酵素，從藉由免疫球蛋白分子的蛋白裂解來製造。在本文之IL27促效劑中，此Fab結構域典型地係經重組表現作為IL27促效劑之部分。

Fab結構域可包括來自任何適合物種的恆定區和可變區序列，且因此可為鼠類、嵌合、人類或人源化。

Fab結構域典型地係包括連附VH結構域之CH1結構域，而該結構域係與連附VL結構域的CL結構域配對。在一野生型的免疫球蛋白中，VH結構域係與VL結構域配對用以建構Fv區，而CH1結構域係與CL結構域配對進一步安定該結合模組。二個恆定區域之間的雙硫鍵可進一步安定該Fab結構域。

就本文之IL27促效劑，特言之當IL27含有二個不同的Fab結構域且輕鏈不是普通或通用輕鏈時，有利的係使用Fab異二聚化策略以允許屬於相同Fab之Fab結構域的正確連結並最小化屬於不同Fab之Fab結構域的異常配對。例如，可使用下表4中所示的Fab異二聚化策略：

表 4 Fab 異二聚化策略
策略	VH	CH1	VL	CL	參考文獻
CrossMabCH1-CL	WT	CL結構域	WT	CH1結構域	Schaefer et al ., 2011, Cancer Cell 2011；20：472-86；PMID：22014573.
正交Fab VHVRD1CH1CRD2 –VLVRD1CλCRD2	39K, 62E	H172A, F174G	1R, 38D, (36F)	L135Y, S176W	Lewis et al ., 2014, Nat Biotechnol 32：191-8
正交Fab VHVRD2CH1wt –VLVRD2Cλwt	39Y	WT	38R	WT	Lewis et al ., 2014, Nat Biotechnol 32：191-8
TCR CαCβ	39K	TCR Cα	38D	TCR Cβ	Wu et al ., 2015, MAbs 7：364-76
CR3	WT	T192E	WT	N137K, S114A	Golay at al., 2016, J Immunol 196：3199-211.
MUT4	WT	L143Q, S188V	WT	V133T, S176V	Golay at al., 2016, J Immunol 196：3199-211.
DuetMab	WT	F126C	WT	S121C	Mazor et al ., 2015, MAbs 7：377-89；Mazor et al ., 2015, MAbs 7：461-669.
結構域交換	WT	CH3+旋鈕或孔洞突變	WT	CH3+孔洞或旋鈕突變	Wozniak-Knopp et al ., 2018, PLoSONE13(4)：e0195442

因此，在特定的實施例中，二個Fab之多肽間的正確連結可藉由相互交換Fab的VL和VH結構域或相互交換CH1和CL結構域來提升，例如，如WO 2009/080251中所述。

正確的Fab配對亦可藉由在CH1結構域中導入一或多個胺基酸修飾或在Fab之CL結構域中導入一或多個胺基酸修飾及/或在VH結構域中導入一或多個胺基酸修飾和在VL結構域中導入一或多個胺基酸修飾，加以提升。經修飾的胺基酸典型地為VH：VL和CH1：CL界面的部份，使得Fab組份相互優先配對，而不是與其他Fab的組份配對。

在一實施例中，此一或多個胺基酸修飾係局限於如Kabat殘基之編號所示的可變(VH、VL)和恆定結構域(CH1、CL)區之保守性框架殘基。Almagro, 2008, Frontiers In Bioscience 13：1619-1633提供了以Kaba、Chothia和IMGT編號排列為基礎之框架殘基的定義。

在一實施例中，在VH和CH1及/或VL和CL結構域中所導入的修飾為彼此互補的。在重鏈和輕鏈界面的互補性可以立體和疏水性接觸、靜電/電荷相互作用或各種相互作用的組合為基礎來達成。蛋白界面間的互補性係就鎖和鑰匙配合，旋鈕(knob)入孔洞(hole)，突出和凹洞，供體和受體等，廣泛地描述於文獻中，全部皆意味著二個相互作用界面間結構和化學匹配的性質。

在一實施例中，此一或多個導入的修飾係導入一跨越Fab組份之界面的新氫鍵。在一實施例中，此一或多個導入的修飾係導入一跨越Fab組份之界面的新鹽橋。作為例示的取代係描述於WO 2014/150973和WO 2014/082179中，其內容係以引用的方式併入。

在某些實施例中，Fab結構域係包括一CH1結構域中的192E取代和CL結構域中的114A和137K取代，其係在CH1和CL結構域之間導入一鹽橋(參見，例如Golay et al., 2016, J Immunol 196：3199-211)。

在某些實施例中，Fab結構域係包括CH1結構域中的143Q和188V取代及CL結構域中的113T和176V取代，其係用於交換CH1和CL結構域之間接觸的疏水和極性區(參見，例如Golay et al., 2016, J Immunol 196：3199-211)。

在某些實施例中，Fab結構域可在某些或所有的VH、CH1、VL、CL結構域中包括修飾用以導入正交Fab界面，提升正確的Fab結構域組配(Lewis et al., 2014 Nature Biotechnology 32：191-198)。在一實施例中，係在VH結構域中導入39K、62E修飾，在CH1結構域中導入H172A、F174G修飾，在VL結構域中導入1R、38D、(36F)修飾，及在CL結構域中導入L135Y、S176W修飾。在另外的實施例中，係在VH結構域中導入39Y修飾及在VL結構域中導入38R修飾。

Fab結構域亦可經修飾以一工程改造的雙硫鍵置換原生的CH1：CL雙硫鍵，藉此增加Fab組份配對的效率。例如，工程改造的雙硫鍵可藉由在CH1結構域中導入一126C及在CL結構域中導入一121C來導入(參見，例如Mazor et al., 2015, MAbs 7：377-89)。

Fab結構域亦可藉由以提升正確組配之替代結構域置換CH1結構域和CL結構域來加以修飾。例如，Wu et al., 2015, MAbs 7：364-76描述了以T細胞受體的恆定結構域取代CH1結構域，及以T細胞受體的b結構域取代CL結構域，並藉由在VL結構域中導入一38D修飾和在VH結構域中導入一39K修飾，以VL和VH結構域之間的另外電荷-電荷相互作用與這些區域取代配對。

替代的，或除此之外，使用Fab異二聚化策略提升正確的VH–VL配對，普通輕鏈(亦稱為通用輕鏈)的VL可用於本文IL27促效劑之各Fab VL區。在各種實施例中，相較於應用原來的同源VL，應用如文中所述的普通輕鏈降低了不適當的IL27促效劑種類的數目。在各種實施例中，IL27促效劑之VL結構域係從包括一普通輕鏈之單特異性抗體來鑑別。在各種實施例中，IL27促效劑的VH區係包括在活體內於小鼠B細胞內重排之人類重鏈可變基因片段，其先前已經工程改造用以表現一限制人類輕鏈組庫或單一人類輕鏈，與人類重鏈同源及回應暴露於感興趣抗原，產生含有多數個與其中一或二個可能的人類VL同源的人類VH之抗體組庫，其中該抗體組庫對感興趣抗原係具有特異性。普通輕鏈為該等衍生自重排的人類Vκ1-39Jκ5序列或重排的人類Vκ3-20Jκ1序列之輕鏈，並包括體細胞突變(例如，親和力成熟)版本。參見，例如，美國專利第10,412,940號。 5.7.3. 胜肽 -MHC 融合

本文IL27促效劑之靶向基團可為胜肽-MHC複合物(「pMHC」複合物)，例如，與第I類MHC結構域複合的胜肽或與第II類MHC結構域複合的胜肽，視情況地與β2微球蛋白結構域複合。

天然生成的MHC係由人類6號染色體上的一簇基因所編碼。MHC係包括(但不限於)HLA特異性，例如A(例如，A1-A74)、B(例如，B1-B77)、C(例如，C1-C11)、D(例如，D1-D26)、DR(例如，DR1-DR8)、DQ(例如，DQ1-DQ9)和DP(例如，DP1-DP6)。HLA特異性包括A1、A2、A3、All、A23、A24、A28、A30、A33、B7、B8、B35、B44、B53、B60、B62、DR1、DR2、DR3、DR4、DR7、DR8和DR11。

天然生成的第I類MHC分子係結合衍生自蛋白水解降解蛋白之胜肽。因此所獲得的小胜肽被轉運至內質網，在該處其與新生的第I類MHC分子連結，之後通過高爾基體並展現在細胞表面供細胞毒性T淋巴細胞辨識。

天然生成的第I類MHC分子係由與β2微球蛋白連結的α(重)鏈所組成。該重鏈係由次單元α1-α3所組成。β2微球蛋白和重鏈的α3次單元相連結。在特定的實施例中，β2微球蛋白和α3次單元係藉由共價結合相連結。在特定的實施例中，β2微球蛋白和α3次單元為非共價連結。重鏈的α1和α2次單元折疊形成一個凹槽，供胜肽，例如抗原決定位展現並由TCR辨識。

第I類分子一般係與長度約為8至9個胺基酸(例如，7至11個胺基酸)的胜肽連結。所有的人類皆具有3至6種不同的第I類分子，其各自可結合許多不同類型的胜肽。在一特定的實施例中，第I類MHC多肽為選自HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-E、HLA-F和HLA-G組成之群組的人類第I類MHC多肽。

在某些實施例中，靶向基團係包括無跨膜結構域之第I類MHC α重鏈胞外結構域(人類α1、α2、及/或α3結構域)。在某些實施例中，該第I類α重鏈多肽為HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-E、HLA-F、HLA-G、HLA-K或HLA-L。在某些實施例中，HLA-A序列可為一HLA-A*0201序列。

pMHC複合物中的胜肽可具有可與例如以MHC第I類分子呈現相連結之胜肽的胺基酸序列。在特定的實施例中，該序列可包括6至20個連續的胺基酸。在特定的實施例中，胜肽序列可為蛋白片段的序列，其中該蛋白係衍生自，例如，細胞表面蛋白的一部分，例如與免疫細胞或與組織連結的細胞表面蛋白，且其中該胜肽可與第I類MHC重鏈結合。

在某些實施例中，pMHC複合物靶向基團係包括(i)抗原胜肽；(ii)第I類MHC多肽或其片段、突變體或衍生物(例如，胞外結構域)，及視情況地，(iii)β2微球蛋白多肽或其片段、突變體或衍生物。例如，pMHC複合物從N端到C端可包括，(i)抗原胜肽，(ii)β2M序列，和(iii)第I類α(重)鏈序列。或者，pMHC複合物從N端到C端可包括，(i)抗原胜肽，(ii)第I類α(重)鏈序列，和(iii)β2M序列。

在一特定的實施例中，抗原胜肽和MHC序列及/或MHC序列和β2M結構域係經由胜肽連接子彼此相連接，例如，如5.8章節中所述。在某些實施例中，單鏈pMHC複合物可在胜肽片段和β2微球蛋白片段之間包括一第一彈性連接子。例如，連接子可從胜肽的羧基端延伸並將胜肽的羧基端與β2微球蛋白片段的胺基端相連接。在某些實施例中，連接子係經建構，允許該胜肽折疊進入結合槽中，產生功能性pMHC複合物。在某些實施例中，此連接子可包括至少3個胺基酸，至高約15個胺基酸(例如，20個胺基酸)。pMHC連接子可包括插入β2微球蛋白和MHC I重鏈片段之間的第二彈性連接子。例如，連接子可從β2微球蛋白片段的羧基端延伸並將β2微球蛋白片段的羧基端與MHC I重鏈片段的氨基端相連接。在特定的實施例中，β2微球蛋白和MHC I重鏈可折疊進入結合槽中，產生一可進行提升T細胞擴增功能的分子。

當β2M存在時，pMHC複合物可包括β2M和第I 類MHC α重鏈結構域中的突變，使得可在彼等之間形成雙硫鍵。可經半胱胺酸取代而允許二個結構域之間雙硫鍵結合之作為示例的胺基酸對係確立於在下表5中或如PCT公開案WO/2015195531所述，其係以全文引用的方式併入本文中：

表 5
β2M 結構域	MHC 結構域
12	236
12	237
8	234
10	235
24	236
28	232
98	192
99	234
3	120
31	96
53	35
60	96
60	122
63	27
R3	G120
H31	Q96
D53	R35
W60	Q96
W60	D122
Y63	Y27
K6	E232
Q8	R234
Y10	P235
S11	Q242
N24	A236
S28	E232
D98	H192
M99	R234
R12	G237

在另外的實施例中，單鏈pMHC複合物可包括一經由雙硫橋(亦即，二個半胱胺酸之間的雙硫鍵)與第I類MHC α(重)鏈之胜肽共價連接。參見，例如美國專利第8,992,937號和第8,895,020號，其各自係以全文引用的方式併入本文中。在特定的實施例中，雙硫鍵係包括位於從胜肽羧基端延伸之連接子內的第一半胱胺酸，以及位於第I類MHC重鏈(例如，具有抗原胜肽之非共價結合位置之第I類MHC α(重)鏈)內的第二半胱胺酸。在特定的實施例中，第二半胱胺酸可為第I類MHC α(重)鏈中的突變(添加或取代)。較佳地，pMHC複合物可包含一相連的多肽鏈和雙硫橋。或者，pMHC複合物可包括二條經由雙硫橋鍵作為唯一共價鍵聯所連附之相連多肽鏈。在某些實施例中，該連接序列除了半胱胺酸外可包括至少一個胺基酸，包括一或多個甘胺酸、一或多個丙胺酸及/或一或多個絲胺酸。在某些實施例中，單鏈分子從N端至C端係包括第I類MHC胜肽(例如，抗原肽)、包含一第一半胱胺酸之第一連接子、β2微球蛋白序列、第二連接子、及包含第二半胱胺酸之第I類MHC重鏈序列，其中第一半胱胺酸和第二半胱胺酸係包含雙硫橋鍵。在某些實施例中，第二半胱胺酸為由下列組成之群組中選出的第I類MHC重鏈之胺基酸的取代：T80C、Y84C和N86C (Y84C係指成熟蛋白中位置108的突變，其中成熟蛋白係缺乏訊號序列。或者，當蛋白仍包括24聚體訊號序列時，該位置取而代之係稱為Y108C)。

在特定的實施例中，若pMHC複合物在胜肽之C端與β2微球蛋白間延伸的Gly-Ser連接子中包括一第一半胱胺酸且在近端重鏈位置中包括一第二半胱胺酸，則該雙硫橋鍵可連接pMHC複合物之第I類凹槽中的胜肽。

當存在時，β2微球蛋白序列可包括一全長(人類或非人類)β2微球蛋白序列。在特定的實施例中，β2微球蛋白係缺乏前導胜肽序列。因此，β2微球蛋白序列可包括約99個胺基酸。一示例的人類β2微球蛋白序列為Genbank登錄號AF072097.1。

作為第I型MHC-為基礎的pMHC複合物之替代物，本文之IL27促效劑可包括一第II類MHC-為基礎的pMHC複合物作為靶向基團。第II類MHC-為基礎的pMHC複合物一般係包括第I類MHC多肽或其片段、突變體或衍生物。在一特定的實施例中，MHC係包括第II類MHC分子之α及β多肽或其片段、突變體或衍生物。在一特定的實施例中，α及β多肽係藉由一胜肽連接子相連接。在一特定的實施例中，MHC係包括由下列組成之群中選出的人類第II類MHC分子之α及β多肽：HLA-DP、HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DM和HLA-DO。

第II類MHC分子一般係由二條多肽鏈α及β所組成。該等鏈可來自DP、DQ或DR基因群。有大約40種已知的不同人類第II類MHC分子。全部皆具有相同的基本結構但在其分子結構有細微變化。第II類MHC分子係結合長度為13至18個胺基酸之胜肽。

在某些實施例中，pMHC複合物係包括一或多條第II類MHC α鏈或其胞外部分。在某些實施例中，第II類α鏈為HLA-DMA、HLA-DOA、HLA-DPA、HLA-DQA或HLA-DRA。

在其他的實施例中，pMHC複合物係包括一或多條第II類MHC β鏈或其胞外部分。在某些實施例中，第II類鏈β為HLA-DMB、HLA-DOB、HLA-DPB、HLA-DQB or HLA-DRB。

pMHC複合物中的胜肽可為任何能以使得pMHC複合物可與TCR結合之方式，例如特異性方式與MHC蛋白結合的胜肽。

實例包括藉由水解所產生的胜肽以及最典型地經合成所產生的胜肽，包括隨機產生的胜肽、經特定設計的胜肽，以及其中在數條胜肽中至少某些胺基酸位置為保守的而其餘位置為隨機的胜肽。

在自然界中，藉由水解所產生的胜肽係在抗原與MHC蛋白結合之前進行水解。第I類MHC典型地係呈現衍生自細胞之細胞質中有效合成之蛋白的胜肽。相反的，第II類MHC典型地係呈現衍生自進入細胞內吞路徑之外源性蛋白或衍生自ER中所合成之蛋白的胜肽。胞內運輸允許胜肽能與MHC蛋白連結。

胜肽與MHC胜肽結合溝之結合可控制MHC及/或由TCR所辨識之胜肽胺基酸殘基，或由如本文中所揭示之經基因改造之動物產生的pMHC-結合蛋白之空間排列。此空間控制部分係由於胜肽與MHC蛋白之間所形成的氫鍵。以胜肽如何與各種MHC結合之知識為基準，可決定主要的MHC錨定胺基酸及在不同胜肽之間不同的表面暴露胺基酸。在某些實施例中，MHC-結合胜肽之長度為5至40個胺基酸殘基，例如6至30個胺基酸殘基，例如8至20個胺基酸殘基，例如9至11個胺基酸殘基，包括長度為5至40個胺基酸之間以整個整數遞增之任何大小的胜肽(亦即，5、6、7、8、9...40)。當天然地第II類MHC結合胜肽係在約9至40個胺基酸變化的同時，在幾乎所有情況，在無喪失MHC結合活性或T細胞辨識之下，胜肽可經截短至9至11個胺基酸核心。

就自體免疫疾病之治療，與MHC結合的胜肽可與自體免疫抗原連結。此等胜肽的實例包括與類風濕性關節炎相關的人軟骨糖蛋白-39胜肽(參見，例如Steenbakkers et al., 2003, J. Immunol. 170：5719–5727，與第I型糖尿病有關的胰島素胜肽(參見，例如Zhang et al., 2014, Proc. Nat’l Acad. Sci. USA 111(7) 2656-2661；與多發性硬化症有關的髓鞘鹼性蛋白胜肽(Krogsgaard et al., 2000, J Exp Med. 191(8)：1395–1412)，以及與乳糜瀉有關的麩質胜肽(參見，例如Hoydahl et al., 2019, Gastroenterology. 156(5)：1428–1439.e10)。 5.8. 連接子

在特定方面，本文係提供IL27促效劑其中二或更多個IL27促效劑組份係藉由一胜肽連接子彼此相連接。舉例而言且非限制，連接子可用於連接(a)IL27結構域和Fc結構域；(b)IL27結構域和HSA多肽；(c)IL27結構域和靶向基團；(d)Fc結構域和靶向基團(例如，Fab結構域或scFv)；(e)靶向基團內的不同結構域(例如，scFv中的VH和VL結構域)；及/或(f)二個IL27結構域(例如，p28基團和EBI3基團)。

胜肽連接子範圍可從2個胺基酸至60個或更多個胺基酸，且在特定方面，一胜肽連接子長度範圍係從3個胺基酸至50個胺基酸，從4個至30個胺基酸，從5個至25個胺基酸，從10個至25個胺基酸，10個胺基酸至60個胺基酸，從12個胺基酸至20個胺基酸，從20個胺基酸至50個胺基酸，或從25個胺基酸至35個胺基酸。

在特定方面，胜肽連接子長度為至少5個胺基酸，至少6個胺基酸，至少7個胺基酸，及視情況地長度為至高30個胺基酸，至高40個胺基酸，至高50個胺基酸、或至高60個胺基酸。

在某些實施例中，連接子長度範圍係從5個胺基酸至50個胺基酸，例如長度範圍從5個至50個、從5個至45個、從5個至40個、從5個至35個、從5個至30個、從5個至25個、或從5個至20個胺基酸。在前述其他的實施例中，連接子長度範圍係從6個胺基酸至50個胺基酸，例如長度範圍從6個至50個、從6個至45個、從6個至40個、從6個至35個、從6個至30個、從6個至25個、或從6個至20個胺基酸。又在前述其他的實施例中，連接子長度範圍係從7個胺基酸至50個胺基酸，例如長度範圍從7個至50個、從7個至45個、從7個至40個、從7個至35個、從7個至30個、從7個至25個、或從7個至20個胺基酸。

帶電(例如，帶電親水性連接子)及/或彈性連接子為特佳的。

可用於本文IL27受體促效劑之彈性連接子的實例包括該等由Chen et al., 2013, Adv Drug Deliv Rev. 65(10)：1357-1369和Klein et al., 2014, Protein Engineering, Design & Selection 27(10)：325-330所揭示的彈性連接子。特別有用的彈性連接子為或包括甘胺酸和絲胺酸的重複單元，例如GnS或SGn之單體或多聚體，其中n為1至10之整數，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一實施例中，該連接子為或包括G4S(SEQ ID NO：38)之單體或多聚體，例如(GGGGS)n(SEQ ID NO：81)。

聚甘胺酸連接子可適合地用於本文之IL27受體促效劑。在某些實施例中，該胜肽連接子係包括二個連續的甘胺酸(2Gly)，三個連續的甘胺酸(3Gly)，四個連續的甘胺酸(4Gly (SEQ ID NO：82))，五個連續的甘胺酸(5Gly (SEQ ID NO：83))，六個連續的甘胺酸(6Gly (SEQ ID NO：84))，七個連續的甘胺酸(7Gly (SEQ ID NO：85))，八個連續的甘胺酸(8Gly (SEQ ID NO：86))或九個連續的甘胺酸(9Gly (SEQ ID NO：87))。 5.8.1. pMHC 連接子

就pMHC複合物，適合的連接子範圍可以從1個胺基酸(例如，Gly)至20個胺基酸，從2個胺基酸至15個胺基酸，從3個胺基酸至12個胺基酸，包括4個胺基酸至10個胺基酸胺基酸、5個胺基酸至9個胺基酸、6個胺基酸至8個胺基酸、或7個胺基酸至8個胺基酸，並可為1、2、3、4、5、6或7個胺基酸。除了上述連接子之外，pMHC連接子係包括甘胺酸聚合物(G)n、甘胺酸-絲胺酸聚合物(包括，例如，(GS)n、(GSGGS)n(SEQ ID NO：88)和(GGGS)n(SEQ ID NO：89)，其中n為至少1之整數)、甘胺酸-丙胺酸聚合物、丙胺酸-絲胺酸聚合物以及本領域中已知的其他彈性連接子。可使用甘胺酸和甘胺酸-絲胺酸聚合物；Gly和Ser二者為相對非結構化，且因此可作為組份之間的中性繫鏈。可使用甘胺酸聚合物；甘胺酸甚至比丙胺酸明顯可進入更多的φ-ψ(phi-psi)空間，並且比具有較長側鏈的殘基限制少得多(參見Scheraga, 1992, Rev. Computational Chem. 1 1173-142, incorporated herein in its entirety by reference)。示例的連接子包括(但不限於)包含下列之胺基酸序列：GGSG (SEQ ID NO：12)、GGSGG (SEQ ID NO：13)、GSGSG (SEQ ID NO：14)、GSGGG (SEQ ID NO：15)、GGGSG (SEQ ID NO：16)、GSSSG (SEQ ID NO：17)、GCGASGGGGSGGGGS (SEQ ID NO：18)、GGGGSGGGGS (SEQ ID NO：19)、GGGASGGGGSGGGGS (SEQ ID NO：20)、GGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO：21)、GGGASGGGGS (SEQ ID NO：22)、、GGGGSGGGGSGGGGSGGGGS (SEQ ID NO：23)、GCGGS (SEQ ID NO：24)及諸如此類。在某些實施例中，連接子多肽係包括可與存在pMHC複合物之另外部分中的半胱胺酸殘基形成雙硫鍵之半胱胺酸殘基。在特定的實施例中，該連接子係包括胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO:24)。G ₄S連接子中的甘胺酸經半胱胺酸取代可導致雙硫鍵形成，例如在HLA.A2中帶有一對應半胱胺酸取代的MHC靶向基團，其可穩定MHC複合物中的MHC胜肽。 5.8.2. 絞鏈序列

在其他的實施例中，本文之IL27促效劑係包括一絞鏈區之連接子。特言之，當IL27促效劑含有一免疫球蛋白為基礎的靶向基團時，該絞鏈可用於連接靶向基團，例如，Fab結構域與多聚化結構域，例如Fc結構域。即使在缺乏靶向基團時，絞鏈序列可用來穩定IL27促效劑二聚體。

絞鏈區可為天然的或經修飾的絞鏈區。絞鏈區典型地係在Fc區的N-端發現。

原生的絞鏈區為一般可在天然生成抗體中Fab和Fc結構域之間發現的絞鏈區。修飾的絞鏈區為長度及/或組成與原生絞鏈區不相同的任何絞鏈。此等絞鏈可包括來自其他物種的絞鏈區，例如人類、小鼠、大鼠、兔、鯊、豬、倉鼠、駱駝、大羊駝或山羊絞鏈區。其他修飾的絞鏈區可包括衍生自不同類型或亞型抗體之重鏈Fc區的完整絞鏈區。另一種選擇，此修飾的絞鏈區可包括部分天然絞鏈或其中各重複的單元係衍生自天然絞鏈區的重複單元。在另一替代的選擇中，天然絞鏈區可藉由將一或多個半胱胺酸或其他殘基轉變成中性殘基，例如絲胺酸或丙胺酸來改變，或藉由將適當置入的殘基轉變成半胱胺酸殘基來改變。藉由此等方法，絞鏈區中的半胱胺酸殘基數目可增加或減少。其他修飾的絞鏈區可完全為合成的或可經設計而具有所欲的性質，例如長度、半胱胺酸組成和彈性。

許多修飾的絞鏈區已描述於，例如美國專利第5,677,425號、WO99/15549、WO2005/003170、WO2005/003169、WO2005/003170、WO98/25971和WO2005/003171中且這些專利係以引用的方式併入本文中。

在各種實施例中，絞鏈結構域內的位置233至236可為G、G、G和空位；G、G、空位和空位；G、空位、空位和空位；或全部為空位，其中位置號碼係以EU編號。

在某些實施例中，本文之IL27突變蛋白係包括一相對於相同同型(例如，人類IgG1或人類IgG4)之野生型絞鏈結構域，對Fcγ受體之結合親和力降低的修飾絞鏈結構域。

在一實施例中，本文二聚體IL27促效劑之其中一條或二條鏈的Fc結構域係在其N-端具有完整的絞鏈區。

在一實施例中，本文二聚體IL27促效劑之其中一條或二條鏈的Fc結構域和絞鏈區係衍生自IgG4且該絞鏈區係包括修飾的CPPC序列(SEQ ID NO：25)。相較於含有CPPC序列(SEQ ID NO：25)的IgG1，人類IgG4之核心絞鏈區係含有CPSC序列(SEQ ID NO：26)。存在IgG4序列中的絲胺酸殘基使得此區的彈性增加，且因此一定比例的分子在相同蛋白鏈內形成雙硫鍵(鏈內雙硫鍵)，而不是與IgG分子中的另一重鏈橋連而形成鏈間雙硫鍵。(Angel et al., 1993, Mol Immunol 30(1)：105-108)。將絲胺酸殘基換成脯胺酸得到如同IgG1的相同核心序列，得以在IgG4絞鏈區中完全形成鏈間雙硫鍵，因此降低純化產物的異質性。此經改變的同型係稱為IgG4P。 5.8.1.2. 嵌合的絞鏈序列

絞鏈區可為嵌合的絞鏈區。

例如，嵌合的絞鏈可包括衍生自人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4絞鏈區之「上絞鏈」序列，與衍生自人類IgG1、人類IgG2或人類IgG4絞鏈區之「下絞鏈」序列組合。

在特定的實施例中，嵌合的絞鏈區係包括胺基酸序列EPKSCDKTHTCPPCPAPPVA(SEQ ID NO：27；WO2014/121087之SEQ ID NO：8，其係以全文引用的方式併入本文中)或ESKYGPPCPPCPAPPVA(SEQ ID NO：28；WO2014/121087之SEQ ID NO：9)。此等嵌合的絞鏈序列可適當與gG4 CH2區連接(例如，藉由併入一IgG4 Fc結構域，例如人類或鼠類Fc結構域，其可進一步在CH2及/或CH3區中經修飾用以降低效應子功能，例如，如5.4.2章節中所述)。 5.8.2.2. 具有降低的效應子功能之絞鏈序列

在另外的實施例中，絞鏈區可經修飾用以降低效應子功能，例如，如WO2016161010A2中所述(其係以全文引用的方式併入本文中)。在各種實施例中，此修飾絞鏈區的位置233至236為G、G、G和空位；G、G、空位和空位；G、空位、空位和空位；或全部為空位，其中位置號碼係以EU編號(如WO2016161010A2的圖1中所示)。這些片段可以GGG-、GG--、G---或----表示，「-」係代表空位。

在標準的人類IgG2中位置236為空位，但在其他標準的人類IgG同型中則為佔用的。在全部四種人類同型中，位置233至235係被G以外的殘基佔據(如WO2016161010A2之圖1中所示)。

位置233至236內的絞鏈修飾可與被P佔據之位置228組合。位置228天然地在人類IgG1和IgG2中係被P佔據，但在人類IgG4中係被S佔據而在人類IgG3中係被R佔據。IgG4抗體中的S228P突變在穩定IgG4抗體和降低外源性和內源性抗體間的成對重鏈輕鏈之交換為有利的。較佳地位置226至229係分別被C、P、P和C佔據。

作為例示的絞鏈區係具有殘基226至236，有時候稱為中(或核心)和下絞鏈，其係由指定為GGG-(233-236)、GG--(233-236)、G---(233-236)和無G(233-236)之修飾的絞鏈序列所佔據。視情況地，此絞鏈區胺基酸序列係包括CPPCPAPGGG-GPSVF (SEQ NO：29； WO2016161010A2之SEQ ID NO：1)、CPPCPAPGG--GPSVF (SEQ ID NO：30； WO2016161010A2之SEQ ID NO：2)、CPPCPAPG---GPSVF (SEQ ID NO：31； WO2016161010A2之SEQ ID NO：3)或CPPCPAP----GPSVF (SEQ ID NO：32； WO2016161010A2之SEQ ID NO：4)。

上述之修飾絞鏈區可併入重鏈恆定區，而該重鏈恆定區典型地係包括CH2和CH3結構域，且可具有位於指定區側邊的另外絞鏈片段(例如，上絞鏈)。雖然此等存在的另外恆定區片段可為不同的同型之雜交體，但典型地為相同的同型，較佳地人類同型。此等另外的人類恆定區片段之同型較佳地為人類IgG4，但亦可為人類IgG1、IgG2或IgG3或其中結構域為不同之同型的其雜交體。作為例示的人類IgG1、IgG2和IgG4之序列係如WO2016161010A2之圖2-4中所示。

在特定的實施例中，此修飾的絞鏈序列可與IgG4 CH2區連接(例如藉由併入IgG4 Fc結構域，例如人類或鼠類Fc結構域，其可進一步在CH2及/或CH3區經修飾用以降低效應子功能，例如，如5.4.2.章節中所述)。 5.9. 核酸和宿主細胞

在另外方面，本文係提供編碼本文之IL27促效劑的核酸。在某些實施例中，IL27促效劑係由單一核酸所編碼。在其他實施例中，例如在異二聚體分子或包括由一條以上的多肽鏈所組成的靶向基團之分子的情況下，該IL27促效劑可由多數個(例如二、三、四或更多個)核酸所編碼。

單一核酸可編碼包括單一多肽鏈的IL27促效劑，包括二或多條多肽鏈的MBM，或包括二條以上多肽鏈的IL27促效劑之一部份(例如，單一核酸可編碼包括三、四或更多條多肽鏈之IL27促效劑的二條多肽，或包括四或更多條多肽鏈之IL27促效劑的三條多肽)。就表現的個別控制而言，編碼二或更多條多肽鏈的開放閱讀框可在個別轉錄調節元件(例如，啟動子及/或增強子)之控制下。編碼二或更多條多肽鏈的開放閱讀框亦可藉由相同的轉錄調節元件控制，由內部核糖體進入位點(IRES)序列隔開供轉譯成獨立的多肽。

在某些實施例中，包括二或更多條多肽鏈的IL27促效劑係由二或更多個核酸所編碼。編碼IL27促效劑的核酸數目可等於或低於IL27促效劑中多肽鏈的數目(例如，當一條以上的多肽鏈係由單一核酸所編碼時)。

本文之核酸可為DNA或RNA(例如，mRNA)。

在另外方面，本文係提供含有本文核酸之宿主細胞和載體。此等核酸可存在單一載體中或存在相同宿主細胞或個別宿主細胞的個別的載體中，如下文更詳細說明。 5.9.1. 載體

本文係提供包括編碼文中所述之IL27促效劑或IL27促效劑組份，例如二聚體IL27促效劑之一或二條多肽鏈的核苷酸序列之載體。此等載體係包括，但不限於病毒、質體、黏質體、λ噬菌體或酵母菌人工染色體(YAC)。

可運用許多的載體系統。例如，其中一種載體係利用衍生自動物病毒，例如，舉例而言，牛乳突病毒、多瘤病毒、腺病毒、牛痘病毒、桿狀病毒、反轉錄病毒(勞斯肉瘤病毒(Rous Sarcoma virus)、MMTV或MOMLV)或SV40病毒之DNA元件。另一類載體係利用衍生自RNA病毒，例如塞姆利基森林病毒(Semliki Forest virus)、東方馬腦炎病毒和黃病毒的RNA元件。

另外，可藉由導入一或多個允許選擇轉染宿主細胞之標記來選擇已穩定整合DNA至其染色體中的細胞。此標記可提供，例如，質子移動作用給營養缺陷的宿主、殺微生物劑阻抗性(例如，抗生素)，或對重金屬，例如銅或諸如此類之阻抗性。可選擇標記基因可直接連接所欲表現的DNA序列，或藉由共轉化導入到相同細胞。就mRNA之最佳合成亦可能需要另外的元件。這些元件可包括剪接訊號，以及轉錄啟動子、增強子和終止訊號。

一但含有該結構的表現載體或DNA序列已備妥供表現，則表現載體可轉染或導入到適當的宿主細胞。此項可運用各種技術來完成，例如，舉例而言，原生質融合、磷酸鈣沉澱、電穿孔、反轉錄病毒轉導、病毒轉染、基因槍、脂質為基礎的轉染或其他習用的技術。用於培養所產生的轉染細胞和用於回收所表現多肽之方法及條件已為熟習本項技術者所知，且依照特定的表現載體和所用的哺乳動物細胞，以本說明書為基準，可變化或最佳化。 5.9.2. 細胞

本文亦提供包括本文核酸之宿主細胞。

在一實施例中，此宿主細胞係經基因工程改造而包括一或多個文中所述的核酸。

在一實施例中，此宿主細胞細係藉由使用表現匣加以基因工程改造。詞語「表現匣」係指能在與此序列相容的宿主中使基因表現之核苷酸序列。此等表現匣可包括一啟動子，有或無內含子之開放閱讀框和終止訊號。亦可使用必要的或有助於進行表現之另外的因子，例如，舉例而言，誘導性啟動子。

本文亦提供包括文中所述之載體的宿主細胞。

此細胞可為，但不限於，真核細胞、細菌細胞、昆蟲細胞或人類細胞。適合的真核細胞包括，但不限於Vero細胞、HeLa細胞、COS細胞、CHO細胞、HEK293細胞、BHK細胞和MDCKII細胞。適合的昆蟲細胞包括，但不限於Sf9細胞。 5.10. 醫藥組成物 5.10.1. 包括 IL27 促效劑 多肽的醫藥組成物

本文之IL27促效劑可為包括IL27促效劑和一或多種載劑、賦形劑及/或稀釋劑之組成物形式。組成物可針對特定用途調配，例如用於獸藥用途或人類的醫藥用途。組成物的形式(例如，乾粉、液體調配物等)和所用的賦形劑、稀釋劑及/或載劑將依照所希望的IL27促效劑用途，及治療用途，給藥模式而定。

就治療用途，組成物可以包括一醫藥上可接受載劑之無菌醫藥組成物的部份來供應。此組成物可為任何適合的形式(依照將其投予病患之所欲方法而定)。此醫藥組成物可藉由各種路徑投予病患，例如口服、經皮、皮下、鼻內、靜脈內、肌肉內、鞘內或局部地。在任何特定案例中最適合的給藥路徑將依照特定抗體、對象和疾病性質與嚴重度以及該對象的身體狀況而定。典型地，此醫藥組成物將以靜脈內或皮下給藥。

醫藥組成物方便地可以每劑含有預定量之本揭示文IL27促效劑的單位劑型存在。包括在單位劑量內的IL27促效劑之量將依照所欲治療的疾病以及本領域中熟知的其他因子而定。此等單位劑型可為含有一適用於單一給藥之IL27促效劑量的凍乾粉末，或為液體形式。乾粉單位劑型可包裝成帶有注射器、適合量之稀釋劑及/或可用於給藥的其他組份之套組。液體形式的單位劑量方便地可以預充填一適用於單一給藥之IL27促效劑量的注射器形式來供應。

醫藥組成物亦可以含有適用於多次給藥之IL27促效劑量的散裝形式來供應。

醫藥組成物可藉由將具有所欲純度之IL27促效劑與視情況地典型用於本項技術之醫藥上可接受載劑、賦形劑或安定劑(其全部在文中係稱為「載劑」)，亦即緩衝劑、安定劑、防腐劑、等張劑、非離子清潔劑、抗氧化劑和其他的各式各樣添加劑混合來製備成凍乾調配物或水溶液供儲存。參見，Remington’s Pharmaceutical Sciences, 16th edition (Osol, ed. 1980)。此等添加劑在所用的劑量和濃度上對於接受者應為無毒的。

緩衝劑係幫助維持近似生理條件之範圍內的pH。其可以廣泛的各種濃度存在，但典型地將以從約2 mM至約50 mM之濃度範圍存在。適合本文使用的緩衝劑包括有機和無機酸及其鹽類，例如檸檬酸鹽緩衝劑(例如，檸檬酸二氫鈉-檸檬酸二鈉混合物、檸檬酸-檸檬酸三鈉混合物、檸檬酸-檸檬酸二氫鈉混合物等)，琥珀酸鹽緩衝劑(例如琥珀酸-琥珀酸一鈉混合物、琥珀酸-氫氧化鈉混合物、琥珀酸-琥珀酸二鈉混合物等)，酒石酸鹽緩衝劑(例如，酒石酸-酒石酸鈉混合物、酒石酸-酒石酸鉀混合物、酒石酸-氫氧化鈉混合物等)，延胡索酸鹽緩衝劑(例如，延胡索酸-延胡索酸一鈉混合物、延胡索酸-延胡索酸二鈉混合物、延胡索酸一鈉-延胡索酸二鈉混合物等)，葡萄糖酸鹽緩衝劑(例如，葡萄糖酸-葡萄糖酸鈉混合物、葡萄糖酸-氫氧化鈉混合物、葡萄糖酸-葡萄糖酸鉀混合物等)，草酸鹽緩衝劑(例如，草酸-草酸鈉混合物、草酸-氫氧化鈉混合物、草酸-草酸鉀混合物等)，乳酸鹽緩衝劑(例如，乳酸-乳酸鈉混合物、乳酸-氫氧化鈉混合物、乳酸-乳酸鉀混合物等)及乙酸鹽緩衝液(例如，乙酸-乙酸鈉混合物、乙酸-氫氧化鈉混合物等)。另外，可使用磷酸鹽緩衝劑、組胺酸緩衝劑和三甲基胺鹽類，例如Tris。

可加入防腐劑延緩微生物生長，且可以範圍從約0.2%至1 %(w/v)之量加入。適合本揭示文使用的防腐劑包括酚、苯甲醇、間甲酚、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸丙酯、十八烷基二甲基苄基氯化銨、苯紮氯銨鹵化物(benzalconium halide)(例如氯化物、溴化物和碘化物)、氯化六甲二銨(hexamethonium chloride)和對羥基苯甲酸烷基酯，例如對羥基苯甲酸甲酯或丙酯、鄰苯二酚、間苯二酚、環己醇和3-戊醇。等張劑，有時候稱為「安定劑」，可加入用以確保本文之液體組成物的等張性，並包括多元糖醇，例如三元或更高級糖醇，例如甘油、赤蘚醇、阿拉伯糖醇、木糖醇、山梨糖醇和甘露醇。安定劑係指種類廣泛的賦形劑，其功能範圍係從填充劑至溶解治療劑或幫助防止變性或黏附在器壁之添加劑。典型的安定劑可為多元糖醇(列舉於上)；胺基酸，例如精胺酸、離胺酸、甘胺酸、麩醯胺酸、天門冬醯胺酸、組胺酸、丙胺酸、鳥胺酸、L-白胺酸、2-苯丙胺酸、麩胺酸、蘇胺酸等，有機糖類或糖醇，例如乳糖、海藻糖、水蘇糖、甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、核糖醇、肌醇、半乳糖醇、甘油及諸如此類，包括環醇類，例如肌醇；聚乙二醇；胺基酸聚合物；含硫還原劑，例如尿素、麩胱甘肽、硫辛酸、巰基乙酸鈉、硫甘油、a-巰基甘油和硫代硫酸鈉；低分子量多肽(例如10個或更少殘基的多肽)；蛋白，例如人類血清白蛋白、牛血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水聚合物，例如聚乙烯吡咯酮，單醣類，例如木糖、甘露糖、果糖、葡萄糖；雙醣類，例如乳糖、麥芽糖、蔗糖和海藻糖；及三醣類，例如棉子糖；及多醣類，例如右旋糖酐。安定劑可以範圍從0.5至10 wt %之IL27促效劑重量之量存在。

可加入非離子界面活性劑或清潔劑(亦稱為「濕化劑」)幫助溶解糖蛋白以及保護糖蛋白防止攪動引發的聚集作用，其亦允許調配物暴露於剪切表面應力而不會造成蛋白變性。適合的非離子界面活性劑包括聚山梨醇酯(20、80等)、泊洛沙姆(polyoxamer) (184、188等)及複合多元醇(pluronic polyol)。非離子界面活性劑可以約0.05 mg/mL至約1.0 mg/mL範圍存在，例如約0.07 mg/mL至約0.2 mg/mL。

另外的各式各樣賦形劑包括體積膨脹劑(例如，澱粉)，螯合劑(例如，EDTA)，抗氧化劑(例如，抗壞血酸、甲硫胺酸、維生素E)和共溶劑。 5.10.2. 用於遞送 IL27 促效劑 編碼核酸之醫藥組成物

本文之IL27激動劑可藉由任何可用於基因治療的方法來遞送，例如以mRNA或於適合的啟動子控制下經由編碼IL27促效劑的病毒載體。

示例的病毒載體包括重組腺病毒和腺相關病毒載體(rAAV)。rAAV載體係以缺陷型和非病原性細小病毒第2型腺相關病毒為基礎。大多數的此等載體係衍生自僅保留轉殖基因表現匣側邊的AAV反向末端重複序列的質體。由於整合至轉導細胞的基因體中，有效的基因轉移和穩定的轉殖基因遞送為該載體系統的關鍵特徵。可用於遞送IL27轉殖基因AAV1、AAV2、AAV3、AAV4、AAV5、AAV6、AAV8、AAV 8.2、AAV9和AAV rh10的AAV血清型以及假型AAV，例如AAV2/8、AAV2/5和AAV2/6。

AAV可在臨床規模上藉有許多不同的方法製造。可使用的系統之實例包括(1)哺乳動物細胞中的質體DNA轉染，(2)穩定哺乳動物細胞株之Ad感染，(3)以重組單純皰疹病毒(rHSV)感染哺乳動物細胞，以及(4)以重組桿狀病毒感染昆蟲細胞(Sf9細胞)(Penaud-Budloo et al., 2018, Mol Ther Methods Clin Dev. 8：166-180之綜述)。

可以高效價製造複製缺陷重組腺病毒載體(Ad)並容易感染許多不同的細胞類型。大多數腺病毒載體係經工程改造，使得轉殖基因取代AdEla、Elb、及/或E3基因；隨後，該複製缺陷載體在人類293細胞中繁殖，以反式提供了刪除基因功能。Ad載體可在活體內轉導多種類型的組織，包括不分裂的分化細胞，例如該等在肝臟、腎臟和肌肉中發現的細胞。習知的Ad載體具有大的承載力。

包裝細胞係用來形成能感染宿主細胞的病毒顆粒。此等細胞包括包裝腺病毒的293細胞和包裝反轉錄病毒的w2細胞或PA317細胞。用於基因治療的病毒載體通常係由將核酸載體包裝到病毒顆粒中的生產細胞株所產生。載體典型地係含有包裝和隨後整合到宿主中所需的最小病毒序列(若適用)、其他經編碼所欲表達蛋白之表現匣所置換的病毒序列。缺失的病毒功能係由包裝細胞以反式提供。例如，用於基因治療的AAV載體典型地僅具有包裝和整合至宿主基因體中所需之來自AAV基因體的反向末端重複(ITR)序列。病毒DNA係包裝在一個細胞株中，其係含有一編碼其他AAV基因，亦即rep和cap，但缺乏ITR序列之輔助質體。以腺病毒感染該細胞株亦作為輔助感染。輔助病毒係促進AAV載體的複製及來自輔助質粒之AAV基因表現。由於缺乏ITR序列，輔助質體並未大量包裝。可藉由例如腺病毒比AAV更敏感的熱處理來減少腺病毒的污染。

核酸分子(例如，mRNA)或病毒可調配成醫藥組成物中的唯一藥物活性成分，或可與用於特定病症治療的其他活性劑組合。視情況地，本文中所提供的組成物中可以包括其他藥劑、醫藥劑、載劑、佐劑、稀釋劑。例如，任何一或多種的潤濕劑、乳化劑和潤滑劑，例如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、脫模劑、包膜劑、甜味劑、調味劑和芳香劑、防腐劑、抗氧化劑、螯合劑和惰性氣體亦可存在組成物中。可包括在組成物中的示例性其他試劑和賦形劑包括，例如，水溶性抗氧化劑，例如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、焦亞硫酸鈉、亞硫酸鈉；油溶性抗氧化劑，例如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基化羥基茴香醚(BHA)、丁基化羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚；以及金屬螯合劑，如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸和磷酸。 5.11. 治療適應症和治療方法

本文之IL27促效劑可用於可以IL27治療的症狀，例如，發炎和免疫相關的症狀和病症，例如，自體免疫病症。

在某些實施例中，本文係提供一種以靶向所欲微環境或疾病反應性淋巴細胞之IL27受體促效劑來治療發炎或免疫(例如，自體免疫)症狀的方法，該方法係包括於一有此需要之對象中投予一如本文中所述的IL27受體促效劑或醫藥組成物，其中該IL27受體促效劑係包括一辨識表現在疾病微環境的標靶分子或以疾病反應性淋巴細胞為靶向的靶向基團。

本文進一步係提供醫局部遞送IL27蛋白的方法，該方法係包括將如本文中所述之IL27受體促效劑或醫藥組成物投予一對象，其中該IL27受體促效劑係包括一辨識由組織所表現的靶向基團，而該組織為IL27受體促效劑所局部遞送之組織。如本文中所用，術語「局部遞送」並不需要局部給藥，而是表示IL27受體促效劑在給藥後係選擇性地定位於感興趣之組織。

本文進一步係提供一投予該對象具有降低的全身暴露及/或降低的全身毒性之IL27治療的方法，該方法係包括投予該對象如本文中所述之IL27受體促效劑或醫藥組成物形式的IL27治療方法。因此，前述方法係藉由將IL27受體促效劑優先靶向特定標靶細胞或組織及/或減弱及/或遮蔽IL27基團直到在希望活動的位置，得以進行具有降低的脫靶副作用之IL27治療。

本文係提供進一步係提供在標靶細胞或組織中局部調節免疫反應的方法，該方法係包括將如文中所述之具有一或多個能與表現在疾病微環境中或由疾病反應性淋巴細胞表現的標靶分子結合之靶向基團的IL27促效劑或醫藥組成物投予一對象。然後，IL27受體促效劑可在該標靶組織中針對至少一細胞類型調節免疫反應。

在某些實施例中，給藥並非侷限於該組織。例如，給藥可為全身或皮下給藥。

在特定的實施例中，本文之IL27促效劑所治療的症狀為自體免疫症狀、移植排斥(例如，器官或骨髓移植排斥)、創傷後免疫反應、傳染性疾病(例如，寄生蟲感染)或移植物抗宿主病。自體免疫症狀之特定實例包括關節炎、類風濕性關節炎、乾癬關節炎、幼年特發性關節炎、多發性硬化症、全身性紅斑性狼瘡(SLE)、重症肌無力、幼年型糖尿病、第1型糖尿病、格林-巴利症候群(Guillain-Barre syndrome)、橋本氏腦炎(Hashimoto's encephalitis)、橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、僵直性脊椎炎、乾癬、休格倫氏症候群(sjogren's syndrome)、血管炎、腎小球腎炎、自體免疫性甲狀腺炎、白塞病(Behcet’s disease)、克隆氏症(Crohn’s disease)、潰瘍性結腸炎、大皰性類天皰瘡、結節病、乾癬、魚鱗癬、葛瑞夫茲氏眼病變(Graves ophthalmopathy)、發炎性腸疾病、愛迪生氏病(Addison's disease)、白斑症、氣喘、硬皮病、全身性硬化症或過敏性氣喘。

本文之IL27促效劑一般將以有效達到希望目的之量來使用。就用於治療或預防疾病症狀，本文之IL27促效劑或其醫藥組成物係以治療上有效量來給藥或施用。決定治療上有效量係完全在熟習本項技術者的能力範圍內，尤其是根據本文中所提供的詳細揭示內容。具有通常知識者可容易了解，在許多情況下，以IL27促效劑治療可能無法提供治癒，但可能僅提供部分利益。在某些實施例中，具有某些利益的生理變化亦視為治療上有利的。因此，術語「有效量」和「治療上有效量」係涵蓋賦予部分利益之劑量和給劑療法。

需要治療的對象、病患或個體典型地為哺乳動物，更特言之為人類。就疾病的預防或治療，本文之IL27促效劑的適當劑量(當單獨使用或與一或多種其他另外的治療劑組合時)將取決於所欲治療疾病的類型、給藥路徑、病患體重、特定的IL27促效劑、疾病的嚴重度和病程、抗體是否係就預防或治療目的給藥、先前或同時的治療干預、病患的臨床病史和對IL27促效劑的反應，以及主治醫師的判斷。無論如何，負責給藥的醫師將決定組成物中活性成份的濃度和就個別對象的適當劑量。本文中考量了各種給劑療程，包括，但不限於，在各種時間點的單次或多次給藥、團注給藥和脈衝輸注。

未接合的IL27促效劑之單次給藥範圍可從約50,000 IU/kg至約1,000,000 IU/kg或更多，更典型地為約600,000 IU/kg的IL27促效劑。此項可每天重複數次(例如，2至3次)，持續數天(例如，大約連續3至5天)，然後可在休息一段時間後(例如，大約7至14天)重複一或多次。因此，治療上有效量可包括在一段時間內僅單次給藥或多次給藥(例如，約20至30次之約600,000 IU/kg IL27促效劑的單獨給藥，每次係在約10至20天的期間內給藥)。

同樣地，IL27促效劑劑適當地係一次或以一系列治療投予病患者。依照疾病的類型和嚴重度，約1 μg/kg至15 mg/kg(例如，0.1 mg/kg至10 mg/kg)的IL27促效劑可為投予病患的起始候選劑量，無論是，例如，藉由一或多次個別給藥，或藉由連續輸注。依照上文所提之因素，一典型的每日劑量範圍可從約1 μg/kg至100 mg/kg或更高。就數天或更長時間的重複給藥，依照症狀，一般應會持續治療直到出現抑制所欲的疾病症狀。一IL27促效劑之示例劑量將在約0.005 mg/kg至約10 mg/kg的範圍內。在其他非限制性實例中，劑量亦可包括每次給藥約1 μg/kg/體重、約5 μg/kg/體重、約10 μg/kg/體重、約50 μg/kg/體重、約100 μg/kg/體重、約200 μg/kg/體重、約350μ g/kg/體重、約500 μg/kg/體重、約1 mg/kg/體重、約5 mg/kg/體重，約10 mg/kg/體重，約50 mg/kg/體重，約100 mg/kg/體重，約200 mg/kg/體重，約350 mg/kg/體重，約500 mg/kg/體重，至約1000 mg/kg/體重或更多，以及其中可衍生的任何範圍。在可從文中所列數字衍生範圍之非限制性實例中，依照上述數字，可投予約5 mg/kg/體重至約100 mg/kg/體重、約5 μg/kg/體重至約500 mg/kg/體重之範圍等。因此，可投予病患一或多個約0.5 mg/kg、2.0 mg/kg、5.0 mg/kg或10 mg/kg(或其任何組合)之劑量。此等劑量可間歇給藥，例如，每週或每三週(例如，使得患者接受約二至約二十劑，或例如，約六劑IL27促效劑)。可投予起初較高的負荷劑量，接著一或多個較低劑量。然而，其他劑量療法可能為有用的。此療法的進程可容易藉由習知技術和分析來監測。

就全身給藥，治療上有效劑量最初可從活體外分析，例如細胞培養分析來估算。然後可在動物模型中條配劑量用以達到包括如於細胞培養中所測定之EC50的循環濃度範圍。此等資訊可用於更準確地測定人體中的有用劑量。

最初劑量亦可使用本項技術熟知的技術從活體內數據，例如動物模型中估算。本領域具有通常知識者應可以動物數據為基礎容易地最適化對人體的給藥。

劑量和間隔可個別調整用以提供足以維持治療效用之IL27促效劑的血漿量。通常藉由注射給藥之病患劑量範圍為約0.1至50 mg/kg/天，典型地為約0.5至1 mg/kg/天。治療上有效的血漿量可藉由每天投予多個劑量來進行。血漿中的量可例如，藉由ELISA HPLC來測量。

在局部給藥或選擇性攝入的情況下，IL27促效劑的有效局部濃度可能與血漿濃度無關。本領域具有通常知識者將能在無需過度實驗下最適化治療上有效的局部劑量。

本文中所述的IL27促效劑之治療上有效劑量一般將在無造成實質毒性下提供治療利益。IL27促效劑的毒性和治療效用可藉由細胞培養或實驗動物中的標準醫藥程序來測定。細胞培養分析和動物研究可用來測定LD50 (50%群體之致死劑量)和ED50 (50% 群體之治療上有效劑量)。毒性和治療效用之間的劑量比為治療指數，其可以LD50/ED50比值來表示。展現較大治療指數之IL27促效劑為較佳的。在一實施例中，根據本文之IL27促效劑展現出高治療指數。從細胞培養分析和動物研究中所獲得的數據可用於調配適用於人類之劑量範圍。劑量較佳地係在包括具有極小毒性或無毒性之ED50的循環濃度範圍內。依照各種因素，例如，所用的劑型、所用的給藥路徑、該對象的症狀及諸如此類，劑量可在此範圍內變化。確切的調配物、給藥途徑和劑量可由個別醫師基於病患的症狀做選擇。(參見，例如Fingl et al., 1975, In：The Pharmacological Basis of Therapeutics, Ch. 1, p. 1，其係以全文引用的方式併入本文中)。

以本文之IL27促效劑治療病患的主治醫師應知曉如何以及何時因毒性、器官功能障礙及諸如此類而終止、中斷或調整給藥。相反地，若臨床反應不足(排除毒性)，主治醫師亦應知曉將治療調整至較高的量。在管理感興趣病症時，給藥劑量之幅度將隨著所欲治療之症狀的嚴重度、給藥路徑及諸如此類而變。症狀的嚴重度可，例如，部分藉由標準的預後評估方法來評估。再者，劑量和可能的給劑頻率亦將根據個別病患的年齡、體重和反應而變。 5.12. 組合治療

根據本文之IL27促效劑可在治療中與一或多種其他另外的藥劑組合給藥。例如，本文之IL27促效劑可與至少一另外的治療劑共同投予。術語「治療劑」係涵蓋治療需要此治療之對象之症候或疾病所投予的任何藥劑。此另外的治療劑可包括任何適用於所欲治療之特定適應症的活性成份，較佳地該等相互不會有不利影響之具有互補活性的活性成份。

IL27促效劑一般係以與本文中所述相同的劑量和給藥路徑，或以本文中所述劑量之約1%至99%，或以經驗上/臨床上確定為適合的任何劑量和任何途徑來使用。

就免疫和發炎症狀的治療，本文之IL27促效劑可與免疫抑制或免疫調節治療組合使用。免疫抑制治療的非限制性實例包括免疫抑制化合物，例如環孢菌素A(cyclosporin A)、環磷醯胺(cyclophosphamide)、FK506、他克莫司(tacrolimus)、皮質類固醇、硫唑嘌呤(azathioprine)、黴酚酸酯(mycophenolate mofetil)、西羅莫司(sirolimus)、雷帕黴素(rapamycin)、雷帕黴素類似物、脫氧肝素(deoxyspagarin)、潑尼松(prednisone)及諸如此類。

上述此等組合治療包括組合給藥(其中二或多種治療劑係包含在相同或個別的組成物中)和個別給藥，在該情況下，本文IL27促效劑之給藥可在投予該另外的治療劑及/或佐劑之前，同時，及/或之後。 6. 經編號的實施例

在已經說明和描述了各種具體實施例的同時，應了解，在不悖離本文之精神和範圍下可進行各種改變。本文係藉由下列之經編號的實施例作為例示。除非另有說明，否則在上述詳細說明中所描述的任何概念、態樣及/或實施例之特徵係比照適用於任何下列的經編號的實施例。

在下文經編號的實施例和隨後的申請專利範圍之較佳方面中，EBI3基團、p28基團、Fc結構域及其變體較佳地係包括人類EBI3、人類p28、人類Fc結構域及其變體的胺基酸序列，例如與此人類序列具有至少約90%、至少約95%、至少約96%、至少約97%、至少約98%、至少約99%、或100%序列同一性的變體。 1. 一種包括變體p28結構域之p28基團，其中該變體p28結構域： (a) 係具有與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα結合結構域具有至少90%、至少95%、或至少97%序列同一性之胺基酸序列並在下列對應位置包括一或多個胺基酸取代： (i) 全長人類p28之胺基酸H52或全長鼠類p28之胺基酸Y48，其中該取代視情況地為丙胺酸； (ii) 全長人類p28之胺基酸K56或全長鼠類p28之胺基酸K52，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iii) 全長人類p28之胺基酸S59或全長鼠類p28之胺基酸S55，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iv) 全長人類p28之胺基酸E60或全長鼠類p28之胺基酸E56，其中該取代視情況地為丙胺酸； (v) 全長人類p28之胺基酸W138或全長鼠類p28之胺基酸W134，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vi) 全長人類p28之胺基酸L142或全長鼠類p28之胺基酸L138，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vii) 全長人類p28之胺基酸R145或全長鼠類p28之胺基酸R141，其中該取代視情況地為丙胺酸； (viii)全長人類p28之胺基酸D146或全長鼠類p28之胺基酸D142，其中該取代視情況地為丙胺酸； (ix) 全長人類p28之胺基酸R149或全長鼠類p28之胺基酸R145，其中該取代視情況地為丙胺酸； (x) 全長人類p28之胺基酸H150或全長鼠類p28之胺基酸H146，其中該取代視情況地為丙胺酸；或 (xi) (a)(i)至(a)(x)之任何組合；及/或 (b) 係具有與成熟人類或鼠類p28之gp130結合結構域具有至少90%、至少95%、或至少97%序列同一性之胺基酸序列並在下列對應位置包括一或多個胺基酸取代： (i) 全長人類p28之胺基酸L73或全長鼠類p28之胺基酸L69，其中該取代視情況地為丙胺酸； (ii) 全長人類p28之胺基酸V76或全長鼠類p28之胺基酸V72，其中該取代視情況地為丙胺酸；； (iii) 全長人類p28之胺基酸W197或全長鼠類p28之胺基酸W195，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iv) 全長人類p28之胺基酸L200或全長鼠類p28之胺基酸L198，其中該取代視情況地為丙胺酸； (v) 全長人類p28之胺基酸L201或全長鼠類p28之胺基酸L199，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vi) 全長人類p28之胺基酸Y204或全長鼠類p28之胺基酸Y202，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vii) 全長人類p28之胺基酸R205或全長鼠類p28之胺基酸Q203，其中該取代視情況地為丙胺酸；或 (viii) (b)(i)至(b)(vii)之任何組合。 2. 如實施例1之p28基團，其中該p28基團係具有單一變體p28結構域。 3. 如實施例1或實施例‎2之p28基團，其中該p28基團無EBI3結構域。 4. 如實施例1至‎3中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之於胺基酸H52或全長鼠類p28之胺基酸Y48的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 5. 如實施例1至‎4中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸K56或全長鼠類p28之胺基酸K52的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 6. 如實施例1至5中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸S59或全長鼠類p28之胺基酸S55的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 7. 如實施例1至6中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸E60或全長鼠類p28之胺基酸E56的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 8. 如實施例1至7中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸L73或全長鼠類p28之胺基酸L69的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 9. 如實施例1至8中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸V76或全長鼠類p28之胺基酸V72的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 10. 如實施例1至9中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸W138或全長鼠類p28之胺基酸W134的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 11. 如實施例1至10中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸L142或全長鼠類p28之胺基酸L138的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 12. 如實施例1至‎11中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸R145或全長鼠類p28之胺基酸R141的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 13. 如實施例1至12中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸D146或全長鼠類p28之胺基酸D142的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 14. 如實施例1至13中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸R149或全長鼠類p28之胺基酸R145的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 15. 如實施例1至14中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸H150或全長鼠類p28之胺基酸H146的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 16. 如實施例1至15中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸W197或全長鼠類p28之胺基酸W195的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 17. 如實施例1至‎16中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸L200或全長鼠類p28之胺基酸L198的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 18. 如實施例1至17中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28胺基酸L201之或全長鼠類p28之胺基酸L199的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 19. 如實施例1至18中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸Y204或全長鼠類p28之胺基酸Y202的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 20. 如實施例1至‎19中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸R205或全長鼠類p28之胺基酸Q203的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸。 21. 如實施例1至3中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸L200或全長鼠類p28之胺基酸L198；及全長人類p28之胺基酸L201或全長鼠類p28之胺基酸L199的位置包括胺基酸取代，其中各取代視情況地為丙胺酸。 22. 如實施例1至‎3中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸Y204或全長鼠類p28之胺基酸Y202；及全長人類p28之胺基酸R205或全長鼠類p28之胺基酸Q203的位置包括胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸，其中各取代視情況地為丙胺酸。 23. 如實施例1至3中任一例之p28基團，其係在相當於全長人類p28之胺基酸L142或全長鼠類p28之胺基酸L138；全長人類p28之胺基酸R149或全長鼠類p28之胺基酸R145；及全長人類p28之胺基酸H150或全長鼠類p28之胺基酸H146的位置包括一胺基酸取代，其中該取代視情況地為丙胺酸，其中各取代視情況地為丙胺酸。 24. 一種IL27受體促效劑，係包括 (a) 一p28基團，該p28基團係包含一p28之IL27Rα結合結構域及/或gp130結合結構域，視情況地其中該p28基團為一根據實施例1至23中任一例之p28基團；及 (b) 一EBI3基團，該EBI3基團係包含一EBI3之p28結合結構域；或 (c) 如(a)中所定義之p28基團及如(b)中所定義之EBI3基團二者。 25. 一種IL27受體促效劑，其視情況地為包括一、二或更多個IL27單體之根據實施例24的IL27受體促效劑。 26. 一種IL27受體促效劑，其視情況地為一包括二個IL27單體之根據實施例25的IL27促效劑，而該等單體係具有示例單體1之組態。 27. 如實施例26之IL27受體促效劑，其中各p28基團係與EBI3基團相連結。 28. 如實施例27之IL27受體促效劑‎，其中各EBI3基團係包括一myc-myc-his (mmh)標籤。 29. 如實施例28之IL27受體促效劑，該mmh標籤係以N-端連接各EBI3。 30. 如實施例28之IL27受體促效劑，該mmh標籤係以C-端連接各EBI3。 31. 一種IL27受體促效劑，其視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，係包括一具有示例單體1之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體2之組態的第二IL27單體。 32. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體1之組態的第一IL27單體以及一包含能與示例單體1連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 33. 如實施例32之IL27受體促效劑，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括 (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開； (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 34. 如實施例33之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 35. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體2之組態的第一IL27單體以及一包含能與示例單體2連結的多聚化基團之獨立多肽鏈。 36. 如實施例35之IL27受體促效劑‎，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開；或 (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 37. 如實施例36之IL27受體促效劑‎，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 38. 一種IL27受體促效劑，其視情況地為一包括二個IL27單體之根據實施例25的IL27促效劑，而該IL27單體係具有示例單體3之組態。 39. 如實施例38之IL27受體促效劑‎，其中各p28基團係與EBI3基團相連結。 40. 如實施例39之IL27受體促效劑，其中各EBI3基團係包括一myc-myc-his (mmh)標籤。 41. 如實施例40之IL27受體促效劑，該mmh標籤係以N-端連接各EBI3。 42. 如實施例40之IL27受體促效劑，該mmh標籤係以C-端連接各EBI3。 43. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體3之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體4之組態的第二IL27單體。 44. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據具體實例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體3之組態的第一IL27單體以及一包含能與示例單體3連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 45. 如實施例44之IL27受體促效劑‎44，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開；或 (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 46. 如實施例45之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 47. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體4之組態的第一IL27單體以及一包含能與示例單體4連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 48. 如實施例53之IL27受體促效劑，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開；或 (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 49. 如實施例48之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 50. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體5之組態的IL27單體。 51. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括二個具有示例單體5之組態的IL27單體。 52. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體5之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體6之組態的第二IL27單體。 53. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體5之組態的IL27單體以及一包含能與示例單體5連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 54. 如實施例53之IL27受體促效劑‎，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開；或 (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 55. 如實施例33之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 56. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體6之組態的IL27單體。 57. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括二個具有示例單體6之組態的IL27單體。 58. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體6之組態的IL27單體以及一包含能與示例單體6連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 59. 如實施例58之IL27受體促效劑，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開； (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 60. 如實施例59之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 61. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體7之組態的IL27單體。 62. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括二個具有示例單體7之組態的IL27單體。 63. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體7之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體8之組態的第二IL27單體。 64. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體7之組態的IL27單體以及一包含能與示例單體7連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 65. 如實施例64之IL27受體促效劑，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開；或 (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 66. 如實施例33之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 67. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體8之組態的IL27單體。 68. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括二個具有示例單體8之組態的IL27單體。 69. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體8之組態的第一IL27單體以及一包含能與示例單體8連結之多聚化基團的獨立多肽鏈。 70. 如實施例69之IL27受體促效劑‎，其中該獨立的多肽鏈進一步係包括： (a) 一靶向基團或靶向基團組份，視情況地，其中(i)該靶向基團或靶向基團組份係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該靶向基團或靶向基團組份和該多聚化基團係由一連接子隔開；或 (b) 一用於結合標靶分子或其組份之工具，視情況地，其中(i)該用於結合標靶分子或其組份之工具係以N-端連接該多聚化基團及/或(ii)該用於結合標靶分子或其組份之工具和該多聚化基團係由一連接子隔開。 71. 如實施例70之IL27受體促效劑，其中： (a) 該靶向基團組份係與對應的靶向基團組份相連結(例如，VH與VL)；或 (b) 該用於結合標靶分子之工具的組份係與對應的組份相連結而形成供結合該標靶分子之工具。 72. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體9之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體10之組態的第二IL27單體。 73. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體9之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體12之組態的第二IL27單體。 74. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體11之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體10之組態的第二IL27單體。 75. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體11之組態的第一IL27單體以及一具有示例單體12之組態的第二IL27單體。 76. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體13之組態的IL27單體。 77. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體14之組態的IL27單體。 78. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體15之組態的IL27單體。 79. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括一具有示例單體16之組態的IL27單體。 80. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括如實施例33之IL27受體促效劑和如實施例36之IL27受體促效劑，其中該如實施例33之IL27受體促效劑的p28基團係與如實施例36之IL27受體促效劑的EBI3基團相連結。 81. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括如實施例45之IL27受體促效劑和如實施例48之IL27受體促效劑，其中該如實施例45之IL27受體促效劑的p28基團係與如實施例48之IL27受體促效劑的EBI3基團相連結。 82. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例25的IL27促效劑，其係包括： (a) 一包括下列之第一多肽鏈： (i) 視情況存在的，一第一多聚化基團； (ii) 視情況存在的，(A)一第一靶向基團或第一靶向基團組份或(B)一用於與標靶分子或其組份結合的第一工具；及 (iii) 視情況存在的，一穩定化基團；和 (b) 一包括下列之第二多肽鏈： (i) 視情況存在的，一第二多聚化基團； (ii) 視情況存在的，(A)一第二靶向基團或第二靶向基團組份或(B)一用於與標靶分子或其組份結合的第二工具；和 (iii) 視情況存在的，一第二穩定化基團； (c) 一第一p28基團，其視情況地為一如實施例1至23中任一例所定義之p28基團；及 (d) 一第一EBI3基團。 83. 如實施例82之IL27受體促效劑，其對於IL27為二價的。 84. 如實施例82或實施例83之IL27受體促效劑‎，其中： (a) 該第一多肽係包括該第一p28基團和第一EBI3基團；及 (b) 該第二多肽係包括一第二p28基團和第二p28基團，其視情況地為一如實施例1至23中任一例所定義之p28基團。 85. 如實施例82至84中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一IL27單體和一第二IL27單體。 86. 如實施例85之IL27受體促效劑，其中該第一IL27單體和該第二IL27單體為不同的。 87. 如實施例85之IL27受體促效劑，其中該第一IL27單體和第二IL27單體為相同的。 88. 如實施例84至87中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團且其中該第一p28基團和第一EBI3基團係以N-端連接第一多聚化基團，而該第二p28基團和第二EBI3基團係以N-連接第二多聚化基團。 89. 如實施例84至87中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團且其中該第一p28基團和第一EBI3基團係以C-端連接第一多聚化基團，而該第二p28基團和第二EBI3基團係以C-連接第二多聚化基團。 90. 如實施例84至89中任一例之IL促效劑，其中該第一EBI3基團係以N-端連接第一p28基團，而該第二EBI3基團係以N-端連接第二IL27基團的p28基團。 91. 如實施例84至89中任一例之IL促效劑，其中該第一EBI3基團係以C-端連接第一p28基團，而該第二EBI3基團係以C-端連接第二IL27基團的p28基團。 92. 如實施例84至91中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團且其中： (a) 該第一多聚化基團和任一第一EBI3基團或第一p28基團係經由一第一多聚化基團連接子相連接；及 (b) 該第二多聚化基團和任一第二EBI3基團或第二p28基團係經由一第二多聚化基團連接子相連接。 93. 如實施例92之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 94. 如實施例92或實施例93之IL27受體促效劑‎，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 95. 如實施例92至94中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子係包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)。 96. 如實施例92至95中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子為或包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 97. 如實施例96之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 98. 如實施例84至97中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團和第一p28基團係經由一第一IL27基團內的連接子相連接，而該第二EBI3基團和第二p28基團係經由一第二IL27基團內的連接子相連接。 99. 如實施例98之IL27受體促效劑‎，其中各第一IL27基團內的連接子和第二IL27基團內的連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 100. 如實施例98或99之IL27受體促效劑，其中各第一IL27基團內的連接子和第二IL27基團內的連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 101. 如實施例98至100中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一IL27基團內的連接子和第二IL27基團內的連接子係包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)。 102. 如實施例98至101中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一IL27基團內的連接子和第二IL27基團內的連接子為或包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 103. 如實施例102之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 104. 如實施例82之IL27受體促效劑，其對於IL27為單價的。 105. 如實施例104之IL27受體促效劑‎，其中： (a) 該第一多肽係包括該第一p28基團，其視情況地為如實施例1至23中任一例所定義之p28基團；及 (b) 該第二多肽係包括該第一EBI3基團。 106. 如實施例105之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，且其中該第一EBI3基團係以N-端連接該第一多聚化基團且該第一p28基團係以N-端連接該第二多聚化基團。 107. 如實施例105之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，且其中該第一EBI3基團係以C-端連接該第一多聚化基團且該第一p28基團係以C-端連接該第二多聚化基團。 108. 如實施例105至107中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團且其中： (a) 該第一多聚化基團和第一EBI3基團係經由一第一多聚化基團連接子相連接；及 (b) 該第二多聚化基團和第一p28基團係經由一第二多聚化基團連接子相連接。 109. 如實施例108之IL27受體促效劑‎，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 110. 如實施例108或實施例109之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 111. 如實施例108至110中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子係包括胺基酸序列G ₄S (SEQ ID NO：38)。 112. 如實施例108至111中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子為或包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 113. 如實施例112之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 114. 如實施例104之IL27受體促效劑，其中： (a) 該第一多肽係包括該第一EBI3基團和第一28基團；及 (b) 該第二多肽係缺乏EBI3基團和p28基團。 115. 如實施例114之IL27受體促效劑‎，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，且其中該第一EBI3基團和第一p28基團係以N-端連接該第一多聚化基團。 116. 如實施例114之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，且其中該第一EBI3基團和第一p28基團係以C-端連接該第一多聚化基團。 117. 如實施例114至116中任一例之IL27促效劑，其中該第一EBI3基團係以N-端連接該第一 p28基團。 118. 如實施例114至116中任一例之IL27促效劑，其中該第一EBI3基團係以C-端連接該第一p28基團。 119. 如實施例114至118中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，且其中該第一多聚化基團和任一EBI3基團或第一p28基團係經由一第一多聚化基團連接子相連接。 120. 如實施例119之IL27受體促效劑‎，其中該第一多聚化基團連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 121. 如實施例119或具體實例120之IL27受體促效劑，其中該第一多聚化基團連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 122. 如實施例119至121中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一多聚化基團連接子係包括胺基酸序列G ₄S (SEQ ID NO：38)。 123. 如實施例119至122中任一例之IL27受體促效劑，其中各第一多聚化基團連接子和第二多聚化基團連接子為或包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 124. 如實施例123之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 125. 如實施例114至124中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團和第一p28基團係經由一IL27基團內連接子相連接。 126. 如實施例125之IL27受體促效劑‎125，其中該IL27基團內連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 127. 如實施例125或126之IL27促效劑，其中該第一IL27基團內連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 128. 如實施例125至127中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一IL27基團內連接子係包括胺基酸序列G ₄S。 129. 如實施例125至128中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一IL27基團內連接子為或包括胺基酸序列G ₄S之重複序列。 130. 如實施例129之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S之重複序列。 131. 如實施例82至130中任一例之IL27促效劑，其係具有1：1之多聚化基團：EBI3基團理想配比(stoichiometry)。 132. 如實施例82至130中任一例之IL27促效劑，其係具有2：1之多聚化基團：p28基團理想配比。 133. 如實施例82至130中任一例之IL27促效劑，其係具有4：1之多聚化基團：p28基團理想配比。 134. 如實施例82至133中任一例之IL27促效劑，其係具有1：1之Fc結構域：p28基團理想配比。 135. 如實施例82至133中任一例之IL27促效劑，其係具有2：1之Fc結構域：EBI3基團理想配比。 136. 如實施例82至133中任一例之IL27促效劑，其係具有4：1之Fc結構域：EBI3基團理想配比。 137. 一種IL27受體促效劑，視情況地為根據實施例25之IL27促效劑，其係包括一包含下列之多肽鏈： (a) 一穩定化基團；及 (b) 一EBI3基團、一p28基團，或EBI3基團和p28基團二者，視情況地，其中該p28基團係如實施例1至23中任一例所定義者。 138. 如實施例137之IL27受體促效劑，其對於IL27為單價的。 139. 如實施例137或實施例138之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團和 p28基團係以N-端連接該穩定化基團。 140. 如實施例137至139中任一例之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團和 p28基團係以C-端連接該穩定化基團。 141. 如實施例137至140中任一例之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團係以N-端連接該p28基團。 142. 如實施例137至140中任一例之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團係以C-端連接該p28基團。 143. 如實施例137至142中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團和任一EBI3基團或p28基團係經由一穩定化基團連接子相連接。 144. 如實施例143之IL27受體促效劑‎，其中該穩定化基團連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 145. 如實施例143或實施例144之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 146. 如實施例143至145中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團連接子係包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)。 147. 如實施例143至146中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團連接子為或包括胺基酸序列G ₄S (SEQ ID NO：38)之重複序列。 148. 如實施例147之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 149. 如實施例137至148中任一例之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團和該p28基團係經由一IL27基團內連接子相連接。 150. 如實施例149之IL27受體促效劑，其中該IL27基團內連接子長度為至少5個或至少10個胺基酸。 151. 如實施例149或實施例150之IL27受體促效劑，其中該IL27基團內連接子為或包括一甘胺酸-絲胺酸連接子。 152. 如實施例149至151中任一例之IL27受體促效劑，其中該IL27基團內連接子係包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)。 153. 如實施例143至146中任一例之IL27受體促效劑，其中該IL27基團內連接子為或包括胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 154. 如實施例153之IL27受體促效劑，其中該重複序列係包括2、3、4、5、6或更多個胺基酸序列G ₄S(SEQ ID NO：38)之重複序列。 155. 如實施例82至130中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域或其變體具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 156. 如實施例82至155中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 157. 如實施例82至156中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 158. 如實施例82至157中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 159. 如實施例82至158中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 160. 如實施例82至159中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 161. 如實施例82至160中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3或其變體具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 162. 如實施例82至161中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 163. 如實施例82至162中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 164. 如實施例82至163中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 165. 如實施例82至164中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 166. 如實施例82至165中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 167. 如實施例82至166中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα結合結構域及/或成熟人類或鼠類p28之gp130結合結構域具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列，視情況地，其中該p28基團係如實施例1至23中任一例所定義者。 168. 如實施例82至167中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 169. 如實施例82至168中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 170. 如實施例82至169中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 171. 如實施例82至170中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 172. 如實施例82至171中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 173. 如實施例82至172中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 174. 如實施例82至173中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 175. 如實施例82至174中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 176. 如實施例82至175中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 177. 如實施例82至176中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 178. 如實施例82至177中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團係具有一與成熟人類或鼠類p28具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 179. 如實施例84至178中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域或其變體具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 180. 如實施例84至179中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 181. 如實施例84至180中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 182. 如實施例84至181中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 183. 如實施例84至182中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 184. 如實施例84至183中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3之p28結合結構域具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 185. 如實施例84至184中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3或其變體具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 186. 如實施例84至185中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 187. 如實施例84至186中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 188. 如實施例84至187中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 189. 如實施例84至188中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 190. 如實施例84至189中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二EBI3基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類EBI3具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 191. 如實施例84至190中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28之IL27Rα結合結構域及/或成熟人類或成熟鼠類p28之gp130結合結構域具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列，視情況地，其中該p28基團係如實施例1至23中任一例所定義者。 192. 如實施例84至191中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 193. 如實施例84至192中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 194. 如實施例84至193中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 195. 如實施例84至194中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 196. 如實施例84至195中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28之IL27Rα及/或gp130結合結構域具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 197. 如實施例84至196中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 198. 如實施例84至197中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。 199. 如實施例84至198中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28具有至少約95%序列同一性的胺基酸序列。 200. 如實施例84至199中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28具有至少約97%序列同一性的胺基酸序列。 201. 如實施例84至200中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28具有至少約98%序列同一性的胺基酸序列。 202. 如實施例84至201中任一例之IL27受體促效劑，其中該第二p28基團係具有一與成熟人類或成熟鼠類p28具有至少約99%序列同一性的胺基酸序列。 203. 如實施例82至202中任一例之IL27受體促效劑，其中第一多肽和第二多肽二者皆不包括IL27(例如，p28或EBI3)基團以外的細胞激素基團。 204. 如實施例82至203中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括至少一胺基酸取代。 205. 如實施例82至204中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基52(例如，全長鼠類p28殘基48)的位置具有一胺基酸取代。 206. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例205之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基52 (例如，全長鼠類p28殘基48)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基52 (例如，全長鼠類p28殘基48)的位置具有一丙胺酸取代。 207. 如實施例82至206中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基56(例如，全長鼠類p28殘基52)的位置具有一胺基酸取代。 208. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例207之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基56(例如，全長鼠類p28殘基52)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基56(例如，全長鼠類p28殘基52)的位置具有一丙胺酸取代。 209. 如實施例82至208中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基59(例如，全長鼠類p28殘基55)的位置具有一胺基酸取代。 210. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例209之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基59(例如，全長鼠類p28殘基55)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基59(例如，全長鼠類p28殘基55)的位置具有一丙胺酸取代。 211. 如實施例82至210中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基60(例如，全長鼠類p28殘基56)的位置具有一胺基酸取代。 212. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例211之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基60(例如，全長鼠類p28殘基56)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基60(例如，全長鼠類p28殘基56)的位置具有一丙胺酸取代。 213. 如實施例82至212中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基73(例如，全長鼠類p28殘基69)的位置具有一胺基酸取代。 214. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例213之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基73(例如，全長鼠類p28殘基69)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基73(例如，全長鼠類p28殘基69)的位置具有一丙胺酸取代。 215. 如實施例82至214中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基76(例如，全長鼠類p28殘基72)的位置具有一胺基酸取代。 216. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例215之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基76(例如，全長鼠類p28殘基72)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基76(例如，全長鼠類p28殘基72)的位置具有一丙胺酸取代。 217. 如實施例82至216中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基138(例如，全長鼠類p28殘基134)的位置具有一胺基酸取代。 218. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例217之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基138(例如，全長鼠類p28殘基134)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基138(例如，全長鼠類p28殘基134)的位置具有一丙胺酸取代。 219. 如實施例82至218中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基142(例如，全長鼠類p28殘基138)的位置具有一胺基酸取代。 220. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例219之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基142(例如，全長鼠類p28殘基138)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基142(例如，全長鼠類p28殘基138)的位置具有一丙胺酸取代。 221. 如實施例82至220中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基145(例如，全長鼠類p28殘基141)的位置具有一胺基酸取代。 222. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例221之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基145(例如，全長鼠類p28殘基141)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基145(例如，全長鼠類p28殘基141)的位置具有一丙胺酸取代。 223. 如實施例82至222中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基146(例如，全長鼠類p28殘基142)的位置具有一胺基酸取代。 224. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例223之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基146(例如，全長鼠類p28殘基142)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基146(例如，全長鼠類p28殘基142)的位置具有一丙胺酸取代。 225. 如實施例82至224中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基149(例如，全長鼠類p28殘基145)的位置具有一胺基酸取代。 226. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例225之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基149(例如，全長鼠類p28殘基145)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基149(例如，全長鼠類p28殘基145)的位置具有一丙胺酸取代。 227. 如實施例82至226中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基150(例如，全長鼠類p28殘基146)的位置具有一胺基酸取代。 228. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例227之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基150(例如，全長鼠類p28殘基146)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基150(例如，全長鼠類p28殘基146)的位置具有一丙胺酸取代。 229. 如實施例82至228中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基197(例如，全長鼠類p28殘基195)的位置具有一胺基酸取代。 230. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例229之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基197(例如，全長鼠類p28殘基195)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基197(例如，全長鼠類p28殘基195)的位置具有一丙胺酸取代。 231. 如實施例82至230中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基200(例如，全長鼠類p28殘基198)的位置具有一胺基酸取代。 232. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例231之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基200(例如，全長鼠類p28殘基198)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基200(例如，全長鼠類p28殘基198)的位置具有一丙胺酸取代。 233. 如實施例82至232中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基201(例如，全長鼠類p28殘基199)的位置具有一胺基酸取代。 234. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例233之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基201(例如，全長鼠類p28殘基199)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基200(例如，全長鼠類p28殘基199)的位置具有一丙胺酸取代。 235. 如實施例82至234中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基204(例如，全長鼠類p28殘基202)的位置具有一胺基酸取代。 236. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例235之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基204(例如，全長鼠類p28殘基202)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基204(例如，全長鼠類p28殘基202)的位置具有一丙胺酸取代。 237. 如實施例82至236中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一p28基團，以及該第二p28基團(若存在)係包括一p28結構域，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基205(例如，全長鼠類p28殘基203)的位置具有一胺基酸取代。 238. 一種IL27受體促效劑，視情況地為一根據實施例237之IL27受體促效劑，其係包括一包含p28結構域之第一p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基205(例如，全長鼠類p28殘基203)的位置具有一丙胺酸取代，且其視情況地進一步係包括一包含p28結構域之第二p28基團，而該p28結構域係在相當於全長人類p28之殘基205(例如，全長鼠類p28殘基203)的位置具有一丙胺酸取代。 239. 如實施例24至238中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，其中該第一多聚化基團和該第二多聚化基團係經配置用來共同二聚化。 240. 如實施例24至239中任一例之IL27受體促效劑，其係包括一第一多聚化基團和一第二多聚化基團，其中該第一多聚化基團和該第二多聚化基團各自為或包括一Fc結構域。 241. 如實施例240之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域係包括一絞鏈結構域。 242. 如實施例240或實施例241之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域為一IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc結構域。 243. 如實施例240至242中任一例之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域具有降低的效應子功能。 244. 如實施例240至243中任一例之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域為一IgG4 Fc結構域。 245. 如實施例240至244中任一例之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域係包括胺基酸序列ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO：80)或其一部分。 246. 如實施例82至245中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團為人類血清白蛋白或其天然變體、人類血清白蛋白結合劑、XTEN、PAS、碳水化合物、聚唾液酸、親水性聚合物或脂肪酸。 247. 如實施例246之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團係具有一與人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約90%、至少約95%、至少約97%、至少約98%、或至少約99%之胺基酸序列。 248. 如實施例247之IL27受體促效劑‎，其中該穩定化基團係具有一與成熟的人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約90%序列同一性之胺基酸序列。 249. 如實施例247或實施例248之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團係具有一與成熟的人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約95%序列同一性之胺基酸序列。 250. 如實施例247至249中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團係具有一與成熟的人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約97%序列同一性之胺基酸序列。 251. 如實施例247至250中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團係具有一與成熟的人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約98%序列同一性之胺基酸序列。 252. 如實施例247至251中任一例之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團係具有一與成熟的人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約99%序列同一性之胺基酸序列。 253. 如實施例246之IL27受體促效劑‎，其中該穩定化基團為一人類血清白蛋白結合劑。 254. 如實施例247之IL27受體促效劑，其中該人類血清白蛋白結合劑為Adnectin PKE、AlbudAb或白蛋白結合結構域。 255. 如實施例247之IL27受體促效劑，其中該穩定化基團為親水性聚合物。 256. 如實施例255之IL27受體促效劑，其中該親水性聚合物為聚乙二醇(PEG)。 257. 如實施例256之IL27受體促效劑‎，其中該PEG係具有範圍從約7.5 kDa至約80 kDa之分子量。 258. 如實施例257之IL27受體促效劑‎，其中該PEG係具有範圍從約30 kDa至約80 kDa之分子量，視情況地其中該分子量為約50 kDa。 259. 如實施例24至258中任一例之IL27受體促效劑，其係包括(A)一第一靶向基團或(B)一用於結合標靶分子之第一工具。 260. 如實施例259之IL27受體促效劑‎，其係包括： (a) 在第一多肽鏈上的第一靶向基團組份且進一步係包括一第三靶向基團組份，其係用來與第一靶向基團組份連結而形成第一靶向基團，其中該第三靶向基團組份並非該第一多肽或該第二多肽的部份；或 (b) 用於與第一多肽鏈上的標靶分子結合之一第一工具的組份以及一並非該第一多肽或該第二多肽之部分的配對組份。 261. 如實施例24至260中任一例之IL27受體促效劑，其係包括(A)一第二靶向基團或(B)一用於結合標靶分子之第二工具。 262. 如實施例261之IL27受體促效劑，其係包括： (a) 在第二多肽鏈上的第二靶向基團組份且進一步係包括一第四靶向基團組份，其係配置用來與第二靶向基團組份連結而形成第二靶向基團，其中該第四靶向基團組份並非該第一多肽或該第二多肽的部份；或 (b) 用於與第一多肽鏈上的標靶分子結合之一第二工具的組份以及一並非該第一多肽或該第二多肽之部分的配對組份。 263. 如實施例259至262中任一例之IL27受體，其中 (a) (i) 該第一靶向基團或第一靶向基團組份，若存在於第一多肽鏈上，係以N端連接第一多聚化基團；或 (ii) 該用於結合標靶分子或其組份的第一工具，若存在於第一多肽鏈上，係以N端連接第一多聚化基團；及/或 (b) (i) 該第二靶向基團或第二靶向基團組份，若存在於第二多肽鏈上，係以N端連接第二多聚化基團；或 (ii) 該用於結合標靶分子或其組份的第二工具，若存在於第二多肽鏈上，係以N端連接第一多聚化基團。 264. 如實施例259至262中任一例之IL27受體，其中 (a) (i) 該第一多肽鏈上之用於結合標靶分子或其組份的第一工具，若存在於第一多肽鏈上，係以C端連接第一多聚化基團；或 (ii) 該用於結合標靶分子或其組份的第一工具，若存在於第一多肽鏈上，係以C端連接第一多聚化基團；及/或 (b) (i) 該第二靶向基團或第二靶向基團組份，若存在於第二多肽鏈上，係以C端連接第一多聚化基團；或 (ii) 該用於結合標靶分子或其組份的第二工具，若存在於第二多肽鏈上，係以C端連接第二多聚化基團；若存在於第一多肽鏈上，係以N端連接第一多聚化基團至第一多聚化基團。 265. 如實施例259至264中任一例之IL27受體促效劑，其係包括(A)一第一靶向基團或用於結合一標靶分子之第一工具及/或(B)一第二靶向基團或用於結合一標靶分子之第二工具，且其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二標靶分子或第一工具： (a) 係與疾病相關的，例如，腫瘤、發炎或自體免疫疾病相關的抗原結合； (b) 係與疾病微環境，例如腫瘤、發炎或自體免疫疾病微環境結合； (c) 係與疾病反應性，例如腫瘤、發炎或自體免疫疾病反應性、淋巴細胞之細胞表面分子結合； (d) 係與檢查點抑制劑結合； (e) 係與胜肽-MHC複合物結合； (f) 為一胜肽-MHC複合物； (g) 係與自體免疫反應相關或以其為靶向之抗原結合；或 (h) 係獨立選自上述(a)至(g)。 266. 如實施例265之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具和該第二靶向基團或第二工具為相同的。 267. 如實施例265或實施例266之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與疾病相關的，例如腫瘤、發炎或自體免疫疾病相關的抗原結合。 268. 如實施例265至267中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與纖維母細胞活化蛋白(FAP)、肌腱蛋白(Tenascin)-C的A1結構域(TNC A1)、肌腱蛋白-C的A2結構域(TNC A2)、纖連蛋白的額外結構域B(EDB)、黑色素瘤-相關硫酸軟骨素蛋白聚醣(MCSP)、MART-1/Melan-A、gp100、二肽基胜肽酶IV(DPPIV)、腺苷去氨酶結合蛋白(ADAbp)、親環蛋白b、結腸直腸相關抗原(CRC)-C017-1A/GA733、癌胚抗原(CEA)及其致免疫表位CAP-1和CAP-2、etv6、aml1、前列腺特異性抗原(PSA)及其致免疫表位PSA-1、PSA-2和PSA-3、前列腺特異性膜抗原(PSMA)、T細胞受體/CD3-ζ鏈、MAGE-家族之腫瘤抗原(例如，MAGE-A1、MAGE-A2、MAGE-A3、MAGE-A4、MAGE-A5、MAGE-A6、MAGE-A7、MAGE-A8、MAGE-A9、MAGE-A10、MAGE-A11、MAGE-A12、MAGE-Xp2 (MAGE-B2)、MAGE-Xp3 (MAGE-B3)、MAGE-Xp4 (MAGE-B4)、MAGE-C1、MAGE-C2、MAGE-C3、MAGE-C4、MAGE-C5)、GAGE-家族之腫瘤抗原(例如，GAGE-1、GAGE-2、GAGE-3、GAGE-4、GAGE-5、GAGE-6、GAGE-7、GAGE-8、GAGE-9)、BAGE、RAGE、LAGE-1、NAG、GnT-V、MUM-1、CDK4、酪胺酸酶、p53、MUC家族、HER2/neu、p21ras、RCAS1、α-胎兒蛋白、E-鈣黏素(cadherin)、α-連環蛋白(catenin)、β-連環蛋白和γ-連環蛋白、p120ctn、gp100 Pmel117、PRAME、NY-ESO-1、cdc27、腺瘤性結腸息肉症蛋白(APC)、fodrin、連接蛋白37(Connexin 37)、Ig-獨特型(idiotype)、p15、gp75、GM2和GD2神經節苷脂、病毒產物例如人類乳突病毒蛋白、Smad家族之腫瘤抗原、Imp-1、P1A、EBV編碼的核抗原(EBNA)-1、腦肝糖磷酸化酶、SSX-1、SSX-2 (HOM-MEL-40)、SSX-1、SSX-4、SSX-5、SCP-1和CT-7、c-erbB-2、Her2、EGFR、IGF-1R、CD2 (T-細胞表面抗原)、CD3 (與TCR有關的異多聚體)、CD22 (B-細胞受體)、CD23 (低親和力IgE受體)、CD30 (細胞激素受體)、CD33 (骨髓細胞表面抗原)、CD40 (腫瘤壞死因子受體)、IL-6R-(IL6受體)、CD20、MCSP、PDGFβR (β-血小板衍生的生長因子受體)、ErbB2上皮細胞黏附分子(EpCAM)、EGFR變體 III (EGFRvIII)、CD19、二唾液酸神經節苷脂GD2、管腔-上皮黏蛋白、gp36、TAG-72、膠質瘤相關抗原、β-人類絨毛膜促性腺激素、α胎兒蛋白(AFP)、凝集素反應性AFP、甲狀腺球蛋白、MN-CA IX、人類端粒酶反轉錄酶、RU1、RU2(AS)、腸羧基酯酶、mut hsp70-2、M-CSF、前列腺酶、前列腺酶特異性抗原(PSA)、PAP、LAGA-1a、p53、前列腺素、PSMA、存活和端粒酶、前列腺-癌腫瘤抗原1 (PCTA-1)、ELF2M、嗜中性粒細胞彈性蛋白酶、ephrin B2、胰島素生長因子(IGF1)-I、IGF-II、IGFI受體、5T4、ROR1、Nkp30、NKG2D、腫瘤基質抗原、CA166-9、纖連蛋白之額外結構域A(EDA)和額外結構域B (EDB)及肌腱蛋白-C (TnC A1)的A1結構域結合。 269. 如實施例265至268中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與一病毒抗原結合。 270. 如實施例265至269中任一例之IL27受體促效劑，其中該病毒抗體為艾司坦-巴爾病毒LMP-1、C型肝炎病毒E2糖蛋白、HIV gp160或HIV gp120、HPV E6、HPV E7、CMV早期膜抗原(EMA)或CMV晚期膜抗原(LMA)。 271. 如實施例265至267中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與疾病，例如，腫瘤、發炎或自體免疫疾病微環境抗原結合。 272. 如實施例271之IL27受體促效劑‎，其中該疾病，例如，腫瘤、發炎或自體免疫疾病微環境抗原為一胞外基質蛋白。 273. 如實施例272之IL27受體促效劑，其中該胞外基質蛋白為多配體聚醣(syndecan)、肝素酶(heparanase)、整合素、骨橋蛋白(osteopontin)、鏈接(link)、鈣黏蛋白(cadherin)、層黏連蛋白(laminin)、層黏連蛋白EGF型、凝集素、纖連蛋白、刻痕蛋白(notch)、肌腱蛋白、膠原蛋白和基質蛋白(matrixin)。 274. 如實施例265至267中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與疾病反應性，例如，腫瘤、發炎或自體免疫疾病反應性、淋巴細胞之細胞表面分子結合。 275. 如實施例274之IL27受體促效劑，其中該細胞表面分子為CD27、CD28、4-1BB (CD137)、OX40、CD30、CD40、PD1、ICOS、淋巴細胞功能相關抗原-1 (LFA-1)、CD2、CD7、LIGHT、NKG2C、LAG3、TIM3或B7-H3。 276. 如實施例275之IL27受體促效劑‎，其中該細胞表面分子為PD1。 277. 如實施例276之IL27受體促效劑，第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具為抗-PD1抗體或其抗原結合片段。 278. 如實施例277之IL27受體促效劑，其中該抗-PD1抗體或其抗原結合片段係抑制PD1訊號傳遞。 279. 如實施例277之IL27受體促效劑，其中該抗-PD1抗體或其抗原結合片段不會抑制PD1訊號傳遞。 280. 如實施例275之IL27受體促效劑‎，其中該細胞表面分子為LAG3。 281. 如實施例275之IL27受體促效劑，其中該細胞表面分子為MADCAM、a4b7、整合素、TSHR或Epcam。 282. 如實施例265之IL27受體促效劑‎，其中第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與檢查點抑制劑結合。 283. 如實施例281之IL27受體促效劑，其中該檢查點抑制劑為CTLA-4、PD1、PDL1、PDL2、PD1、B7-H3、B7-H4、BTLA、HVEM、TIM3、GAL9、LAG3、VISTA、KIR、2B4、CD160、CGEN-15049、CHK1、VISTA、PSGL1或CHK2。 284. 如實施例283之IL27受體促效劑，其中該檢查點抑制劑為PD1。 285. 如實施例284之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具為抗-PD1抗體或其抗原結合片段。 286. 如實施例285之IL27受體促效劑，其中該抗-PD1抗體或其抗原結合片段係抑制PD1訊號傳遞。 287. 如實施例285之IL27受體促效劑，其中該抗-PD1抗體或其抗原結合片段不會抑制PD1訊號傳遞。 288. 如實施例283之IL27受體促效劑‎，其中該檢查點抑制劑為LAG3。 289. 如實施例284之IL27受體促效劑，其中第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與MHC-胜肽複合物結合。 290. 如實施例289之IL27受體促效劑，其中胜肽-MHC複合物中的胜肽係包括一腫瘤抗原。 291. 如實施例290之IL27受體促效劑‎，其中腫瘤新生抗原為衍生自下列的LCMV：胜肽gp33-41、APF (126-134)、BALF(276-284)、CEA (571-579)、CMV pp65 (495-503)、FLU-M1 (58-66)、gp100 (154-162)、gp100 (209-217)、HBV Core (18-27)、Her2/neu (369-377；V2v9)；HPV E7 (11-20)、HPV E7 (11-19)、HPV E7 (82-90)、KLK4 (11-19)、LMP1 (125-133)、MAG-A3 (112-120)、NYESO1 (157-165、C165A)、NYESO1 (157-165、C165V)、p54 WT (264-272)、PAP-3 (136-143)、PSMA (4-12)、PSMA (135-145)、Survivin (96-014)、酪胺酸酶(369-377、371D)或WT1 (126-134)。 292. 如實施例289至291中任一例之IL27受體促效劑，其中第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係包括一具有互補決定區(「CDR」)之抗體或其抗原結合片段，而該CDR係包括： (a) 一CDR-H1，其係具有一選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：4、20、36、52、68、84、100、1 16、132、148、164、180、196、212、220、236、252、268、284、300、316、332、348、364、380、396、412、428、444、460、476、492、508和524的胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中； (b) 一CDR-H2，其係具有一選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：6、22、38、54、70、86、102、1 18、134、150、166、182、198、214、222、238、254、270、286、302、318、334、350、366、382、414、430、446、462、478、494、510和526的胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中； (c) 一CDR-H3，其係具有一選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：8、24、40、56、72、88、104、120、136、152、168、184、200、216、224、240、256、272、288、304、320、336、352、368、384、400、416、432、448、464、480、496、512和528的胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中； (d) 一CDR-L1，其係具有一選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：12、28、44、60、76、92、108、124、140、156、172、188、204、204、228、244、260、276、292、308、324、340、356、372、388、404、420、436、452、468、484、500、516和532的胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中； (e) 一CDR-L2，其係具有一選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：14、30、46、62、78、94、1 10、126、142、158、174、190、206、230、246、262、278、294、310、326、342、358、374、390、406、422、438、454、470、486、502、518和534的胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中；及 (f) 一CDR-L3，其係具有一選自國際專利公開案號SEQ ID NOs：16、32、48、64、80、96、1 12、128、144、160、176、192、208、232、248、264、280、296、312、328、344、360、376、392、408、424、440、456、472、488、504、520和536的胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中。 293. 如實施例292之IL27受體促效劑，其中該抗體或抗原結合片段係具有選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：2/10、18/26、34/42、50/58、66/74、82/90、98/106、1 14/122、130/138、146/154、162/170、178/186、194/202、210/202、218/226、234/242、250/258、266/274、282/290、298/306、314/322、330/338、346/354、362/370、378/386、394/402、410/418、426/434、442/450、458/466、474/482、490/498、506/514和522/530的VH-VL胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中。 294. 如實施例293之IL27受體促效劑，其中該抗體或抗原結合片段係具有選自國際專利公開案號WO 2019005897 A1之任何SEQ ID NO：2/10、34/42、82/90、194/202、282/290和506/514的VH-VL胺基酸序列，該專利係以引用的方式併入本文中。 295. 如實施例265或實施例266之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與自體免疫相關或自體免疫標靶所靶向之抗原相結合。 296. 如實施例295之IL27受體促效劑，其中該胜肽係衍生自麥醇溶蛋白(gliadin)、GAD 65、IA-2、胰島素B鏈、乙酸格拉替雷(glatiramer acetate)(GA)、乙醯膽鹼受體 (AChR)、p205、胰島素、甲狀腺刺激素、酪胺酸酶、TRP I、或髓鞘抗原。 297. 如實施例296之IL27受體促效劑，其中該胜肽係衍生自IL-4R、IL-6R或DLL4。 298. 如實施例265或實施例266之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具係與免疫細胞結合。 299. 如實施例298之IL27受體促效劑‎，其中該免疫細胞為T淋巴細胞、B淋巴細胞或樹突細胞。 300. 如實施例299之IL27受體促效劑，其中該免疫細胞為T淋巴細胞且該標靶為CD2、CD3、CD4、CD7、CD8、XCR1、Clec9a或CD20。 301. 如實施例265至300中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具為一抗體或其抗原結合片段。 302. 如實施例265至301中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具為一Fab。 303. 如實施例265至301中任一例之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具為一scFv。 304. 如實施例265或實施例266之IL27受體促效劑，其中該第一靶向基團或第一工具及/或第二靶向基團或第二工具為一胜肽-MHC複合物。 305. 如實施例304之IL27受體促效劑，其中該胜肽-MHC複合物係與腫瘤淋巴細胞的T細胞受體結合。 306. 如實施例304或實施例305之IL27受體促效劑，其中胜肽-MHC複合物中的胜肽係包括一腫瘤新生抗原。 307. 如實施例306之IL27受體促效劑‎，其中該腫瘤新生抗原為LCMV衍生胜肽gp33-41、APF(126-134)、BALF(276-284)、CEA(571-579)、CMV pp65 (495-503)、FLU-M1 (58-66)、gp100 (154-162)、gp100 (209-217)、HBV Core 18-27)、Her2/neu (369-377；V2v9)；HPV E7 (11-20)、HPV E7 (11-19)、HPV E7 (82-90)、KLK4 (11-19)、LMP (125-133)、MAG-A3 (112-120)、NYESO1 (157-165、C165A)、NYESO1 (157-165、C165V)、p54 WT (264-272)、PAP-3 (136-143)、PSMA (4-12)、PSMA (135-145)、Survivin (96-014)、酪胺酸酶 (369-377、371D)或WT1 (126-134)。 308. 如實施例304之IL27受體促效劑，其中該胜肽-MHC複合物中的胜肽係包括一病毒抗原。 309. 如實施例308之IL27受體促效劑‎，其中該病毒抗原為CMVpp65或HPV16E7。 310. 如實施例304至309中任一例之IL27受體促效劑，其中該胜肽-MHC複合物進一步係包括β2微球蛋白或其片段。 311. 如實施例310之IL27受體促效劑，其中該胜肽MHC複合物係包括第I型MHC結構域。 312. 如實施例311之IL27受體促效劑，其中該胜肽MHC複合物，從N-端至C-端的方向，係包括一MHC胜肽、一連接子、一β2-微球蛋白結構域、一連接子及一第I型MHC結構域。 313. 如實施例312之IL27受體促效劑‎，其中該連接MHC胜肽和β2-微球蛋白結構域之連接子係包括胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：24)。 314. 如實施例304至309中任一例之IL27受體促效劑，其中該胜肽-MHC複合物不包括β2微球蛋白或其片段。 315. 如實施例314之IL27受體促效劑‎，其中該胜肽MHC複合物係包括一第II型MHC結構域。 316. 如實施例2至315中任一例之IL27受體促效劑，進一步係包括一IL27受體次單元或其IL27結合部分。 317. 如實施例276之IL27受體促效劑，其中該IL27受體次單元為IL27Ra (IL27Rα)。 318. 如實施例276之IL27受體促效劑，其中該IL27受體次單元為gp130。 319. 一種p28蛋白，係包括： (a) 一第一多肽，其係包括： (i) 一第一靶向基團(或其組份)或用於結合一標靶分子(或其組份)之第一工具； (ii) 一任選之第一連接子；和 (iii) 一第一多聚化基團；及 (b) 一第二多肽，其係包括： (i) 一p28基團，其視情況地為如實施例1至23中任一例所定義之p28基團； (ii) 一任選之第二連接子；和 (iii) 一與第一多聚化基團連結的第二多聚化基團。 320. 如實施例319之p28蛋白，其中該第一靶向基團或第一工具為一Fab。 321. 如實施例319之p28蛋白，其中該第一靶向基團或第一工具為一scFv。 322. 一種p28蛋白，係包括： (a) 一第一多肽，其係包括： (i) 一第一靶向基團(或其組份)或用於結合一標靶分子(或其組份)之第一工具； (ii) 一任選之第一連接子；和 (iii) 一第一多聚化基團；及 (b) 一第二多肽，其係包括： (i) 一第二靶向基團(或其組份)或用於結合一標靶分子(或其組份)之第二工具； (ii) 一任選之第二連接子； (iii) 一與第一多聚化基團連結的第二多聚化基團； (iv) 一任選之第三連接子；和 (v) 一p28基團，其視情況地為如實施例1至23中任一例所定義之p28基團。 323. 如實施例322之p28蛋白，其中該第一靶向基團(或第一工具)和第二靶向基團(或第二工具)為Fab。 324. 如實施例322之p28蛋白，其中該第一靶向基團(或第一工具)和第二靶向基團(或第二工具)為scFv。 325. 如實施例322至324中任一例之p28蛋白，其中該第一和第二靶向基團(或第一和第二工具)為相同的。 326. 如實施例319至325中任一例之p28蛋白，其係缺乏EBI3基團。 327. 一種EBI3蛋白，係包括： (a) 一第一多肽，其係包括： (i) 一EBI3基團； (ii) 一任選之第一連接子；和 (iii) 一第一多聚化基團；及 (b) 一第二多肽，其係包括： (i) 一第一靶向基團(或其組份)或用於結合一標靶分子(或其組份)之第一工具； (ii) 一任選之第二連接子；和 (iii) 一與第一多聚化基團連結的第二多聚化基團。 328. 如實施例327之EBI3蛋白，其中該第一靶向基團或第一工具為一Fab。 329. 如實施例327之EBI3蛋白，其中該第一靶向基團或第一工具為一scFv。 330. 一種EBI3蛋白，係包括： (a) 一第一多肽，其係包括： (i) 一第一靶向基團(或其組份)或用於結合一標靶分子(或其組份)之第一工具； (ii) 一任選之連接子； (iii)一第一多聚化基團； (iv) 一任選之第二連接子；和 (v) 一EIB3基團；及 (b) 一第二多肽，其係包括： (i) 一第二靶向基團(或其組份)或用於結合一標靶分子(或其組份)之第二工具； (ii) 一任選之第三連接子；和 (iii)一與第一多聚化基團連結的第二多聚化基團。 331. 如實施例330之EBI3蛋白，其中該第一靶向基團(或第一工具)和第二靶向基團(或第二工具)為Fab。 332. 如實施例330之EBI3蛋白，其中該第一靶向基團(或第一工具)和第二靶向基團 (或第二工具)為scFv。 333. 如實施例330至332中任一項之EBI3蛋白，其中該第一靶向基團(或第一工具)和第二靶向基團 (或第二工具)為相同的。 334. 如實施例330至333中任一例之EBI3蛋白，其係缺乏p28基團。 335. 一種或多數種編碼任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑的核酸。 336. 一種或多數種編碼如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白的核酸。 337. 一種或多數種編碼如實施例1至23及327至334中任一例之EBI3蛋白的核酸。 338. 一種宿主細胞，其係經工程改造用以表現任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑或如實施例335之核酸或多數種核酸。 339. 一種宿主細胞，其係經工程改造用以表現如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白或如實施例336之核酸或多數種核酸。 340. 一種宿主細胞，其係經工程改造用以表現如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白或如實施例337之核酸或多數種核酸。 341. 一種製造任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑的方法，其係包括培養如實施例338之宿主細胞並回收由其表現的IL27促效劑。 342. 一種製造如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白的方法，其係包括培養如實施例339之宿主細胞並回收由其表現的p28蛋白。 343. 一種製造如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白的方法，其係包括培養如實施例340之宿主細胞並回收由其表現的EBI3蛋白。 344. 一種醫藥組成物，其係包括任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑和一賦形劑。 345. 一種醫藥組成物，其係包括如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白和一賦形劑。 346. 一種醫藥組成物，其係包括如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白和一賦形劑。 347. 一種調節免疫反應或治療自體免疫症狀之方法，其係包括投予一有此需要的對象： (a) 任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑； (b) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白； (c) 如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白； (d) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白與如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白的組合； (e) 如實施例344至346中任一例之醫藥組成物；或 (f) 如實施例345之醫藥組成物與如實施例346之醫藥組成物的組合。 348. 一種靶向治療發炎或免疫症狀之方法，其係包括投予一有此需要的對象： (a) 任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑； (b) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白； (c) 如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白； (d) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白與如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白的組合； (e) 如實施例344至346中任一例之醫藥組成物；或 (f) 如實施例345之醫藥組成物與如實施例346之醫藥組成物的組合，其中該IL27受體促效劑、p28蛋白、EBI3蛋白係包括一或二個靶向基團(一或二個與標靶分子結合的工具)，視情況地，其中一或二個靶向基團(或一或二個用於與標靶分子結合的工具)係如前述實施例中任一例所定義者或如5.7章節所述。 349. 一種局部化遞送IL27蛋白、p28蛋白或EBI3蛋白或其組合之方法，係包括投予一有此需要之對象： (a) 任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑； (b) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白； (c) 如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白； (d) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白與如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白的組合； (e) 如實施例344至346中任一例之醫藥組成物；或 (f) 如實施例345之醫藥組成物與如實施例346之醫藥組成物的組合，其中該IL27受體促效劑、p28蛋白、EBI3蛋白或其組合係包括一或二個靶向基團，視情況地，其中一或二個靶向基團(或一或二個用於與標靶分子結合的工具)係如前述實施例中任一例所定義或如5.7章節所述。 350. 一種將具有降低的全身暴露及/或降低的全身毒性之IL27治法投予一對象的方法，係包括對該對象投予： (a) 任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑； (b) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白； (c) 如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白； (d) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白與如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白的組合； (e) 如實施例344至346中任一例之醫藥組成物；或 (f) 如實施例345之醫藥組成物與如實施例346之醫藥組成物的組合，視情況地，其中該IL27受體促效劑、p28蛋白、EBI3蛋白或其組合(a)係包括一或二個靶向基團，視情況地，其中一或二個靶向基團係如前述實施例中任一例所定義或如5.7章節所述及/或(b)一IL27(例如，p28及/或EBI3)基團，其係經由突變及/或遮蔽(例如，藉由IL27受體)或如5.6章節所述減弱。 351. 一種於一目標組織局部調節調免疫反應之方法，其係包括投予一有此需一的對象： (a) 任何前述實施例，例如實施例24至318中任一例之IL27促效劑； (b) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白； (c) 如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白； (d) 如實施例1至23及319至326中任一例之p28蛋白與如實施例327至334中任一例之EBI3蛋白的組合； (e) 如實施例344至346中任一例之醫藥組成物；或 (f) 如實施例345之醫藥組成物與如實施例346之醫藥組成物的組合，視情況地，其中該IL27受體促效劑、p28蛋白、EBI3蛋白或其組合(a)係包括一或二個靶向基團，視情況地，其中一或二個靶向基團係如前述實施例中任一例所定義或如5.7章節所述及/或(b)一IL27(例如，p28及/或EBI3)基團，其係經由突變及/或遮蔽(例如，藉由IL27受體)或如5.6章節所述減弱。 352. 如實施例347至351中任一例之方法，其中該方法係用於治療及/或其中該對象係患有自體免疫症狀。 353. 如實施例352之方法，其中該自體免疫症狀為關節炎、類風濕性關節炎、乾癬關節炎、幼年特發性關節炎、多發性硬化症、全身性紅斑性狼瘡(SLE)、重症肌無力、幼年型糖尿病、第1型糖尿病、格林-巴利症候群(Guillain-Barre syndrome)、橋本氏腦炎(Hashimoto's encephalitis)、橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、僵直性脊椎炎、乾癬、休格倫氏症候群(sjogren's syndrome)、血管炎、腎小球腎炎、自體免疫性甲狀腺炎、白塞病(Behcet’s disease)、克隆氏症(Crohn’s disease)、潰瘍性結腸炎、大皰性類天皰瘡、結節病、乾癬、魚鱗癬、葛瑞夫茲氏眼病變(Graves ophthalmopathy)、發炎性腸疾病、愛迪生氏病(Addison's disease)、白斑症、氣喘、硬皮病、全身性硬化症或過敏性氣喘。 354. 如實施例347至352中任一例之方法，其中該給藥為全身性的，視情況地靜脈內給藥。 355. 如實施例347至352中任一例之方法，其中該給藥為皮下給藥。 7. 實例 7.1. 材料和方法 7.1.1. 製造 IL27 促效劑

產生列於下表6中之編碼IL27和IL27之突變蛋白(識別為IL27M_)的結構和Fc對照物。請注意，本文中IL27M1至IL27M21和相關示意圖的描述(例如，在圖3B至3G、4A至4G、5A至5B和6A至6E以及5.2章節中)旨在描述整體IL27促效劑結構而非任何特定的胺基酸序列。因此，在這些實例中提及與特定胺基酸序列(或成對的胺基酸序列)相關的特定突變蛋白結構(例如，IL27M1、IL27M2等)並非旨在限制，而是作為特定胺基酸序列(或成對的胺基酸序列)結構。因此，IL27M__命名法係為了區分IL27促效劑之屬別的通用結構組態。

IL27突變蛋白結構係包括鼠類或人類IL27、IgG1或IgG4 Fc結構域的不同組態，以及來自不同G ₄S(SEQ ID NO：38)或G ₃S(SEQ ID NO：90)重複序列之不同長度的連接子：

人類 EBI3 ：(SEQ ID NO：33)	MTPQLLLALVLWASCPPCSGRKGPPAALTLPRVQCRASRYPIAVDCSWTLPPAPNSTSPVSFIATYRLGMAARGHSWPCLQQTPTSTSCTITDVQLFSMAPYVLNVTAVHPWGSSSSFVPFITEHIIKPDPPEGVRLSPLAERQLQVQWEPPGSWPFPEIFSLKYWIRYKRQGAARFHRVGPIEATSFILRAVRPRARYYVQVAAQDLTDYGELSDWSLPATATMSLGK
人類 p28 ：(SEQ ID NO：34)	MGQTAGDLGWRLSLLLLPLLLVQAGVWGFPRPPGRPQLSLQELRREFTVSLHLARKLLSEVRGQAHRFAESHLPGVNLYLLPLGEQLPDVSLTFQAWRRLSDPERLCFISTTLQPFHALLGGLGTQGRWTNMERMQLWAMRLDLRDLQRHLRFQVLAAGFNLPEEEEEEEEEEEEERKGLLPGALGSALQGPAQVSWPQLLSTYRLLHSLELVLSRAVRELLLLSKAGHSVWPLGFPTLSPQP
鼠類 EBI3 ：(SEQ ID NO：35)	MSKLLFLSLALWASRSPGYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKP
鼠類 p28 ：(SEQ ID NO：36)	MGQVTGDLGWRLSLLLLPLLLVQAGSWGFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
mIgG1-Fc(SEQ ID NO：37) 具有N276D, N278D之IgG1	VPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK
G ₄S ：(SEQ ID NO：38)	GGGGS

藉由過渡性轉染將結構表現於Expi293FTM細胞(Thermo Fisher Scientific)。使用帶有 HiTrapTM Protein G HP或MabSelect SuRe pcc管柱(Cytiva)的ProteinMaker系統(Protein BioSolutions，Gaithersburg，MD)純化Expi293FTM上清液中的蛋白。在單步驟溶析後，抗體被中和，透析至含5%甘油的最終磷酸鹽緩衝液緩衝鹽水(PBS)，分成等分並儲存於-80°C。

表6
SEQ ID	分子 / 通用結構	字號	示例的實施例之說明	示例的實施例之序列
SEQ ID NO：39	IL27	mIL27	重組的鼠類IL27(得自R&D Systems型號#2700-ML-010/CF) 小鼠EBI3-(GGGS) ₄-小鼠p28-6-His標籤	YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGSGGGSGGGSGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSHHHHHH
SEQ ID NO：40	IL27	hIL27	重組的人類IL27(得自R&D Systems型號#2526-IL-010/CF) 人類EBI3–GSGSSRGGSGSGGSGGGGSKL-人類p28-6-His標籤	RKGPPAALTLPRVQCRASRYPIAVDCSWTLPPAPNSTSPVSFIATYRLGMAARGHSWPCLQQTPTSTSCTITDVQLFSMAPYVLNVTAVHPWGSSSSFVPFITEHIIKPDPPEGVRLSPLAERQLQVQWEPPGSWPFPEIFSLKYWIRYKRQGAARFHRVGPIEATSFILRAVRPRARYYVQVAAQDLTDYGELSDWSLPATATMSLGKGSGSSRGGSGSGGSGGGGSKLAGVWGFPRPPGRPQLSLQELRREFTVSLHLARKLLSEVRGQAHRFAESHLPGVNLYLLPLGEQLPDVSLTFQAWRRLSDPERLCFISTTLQPFHALLGGLGTQGRWTNMERMQLWAMRLDLRDLQRHLRFQVLAAGFNLPEEEEEEEEEEEEERKGLLPGALGSALQGPAQVSWPQLLSTYRLLHSLELVLSRAVRELLLLSKAGHSVWPLGFPTLSPQPHHHHHH
SEQ ID NO：41	IL27M1	IL27突變蛋白1	小鼠EBI3-(GGGS) ₄-p28–(GGGGS) ₃-Fc Fc為WO2014/121087之SEQ ID NO：31，其為一具有降低的效應子功能之IgG4	YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGSGGGSGGGSGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
SEQ ID NO：42	IL27M2-A鏈	IL27突變蛋白2之A鏈	小鼠p28-(GGGGS) ₃-Fc 隱藏T245W突變(旋鈕(Knob))之Fc hIgG4	FPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
SEQ ID NO：43	IL27M2-B鏈	IL27突變蛋白2之B鏈	小鼠EBI3-(GGGGS) ₃-Fc Fc hIgG4隱藏/星狀帶有T245S、L247V、Y286V突變(孔洞(Hole))	YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO：44	IL27M3		二價p28-EBI3-Fc Fc為人類IgG4s	FPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
SEQ ID NO：45	IL27M4		二價Fc-EBI3-p28 Fc為人類IgG4s	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：46	IL27M5		二價Fc-p28-EBI3 Fc為人類IgG4s	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKP
SEQ ID NO：47	IL27M6-A鏈	Fc-p28	與Fc-EBI3異二聚化，形成單價Fc-p28xEBI3 Fc為人類IgG4s(旋鈕(Knob))	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：48	IL27M6-B鏈	Fc-EBI3	與Fc-p28異二聚化，形成單價Fc-p28xEBI3 Fc為人類IgG4s(孔洞(Hole)/星狀(Star))	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKP
SEQ ID NO：49	IL27M12-A鏈	EBI3-p28-Fc(旋鈕)	與IgG4sFc(孔洞/星狀)異二聚化，形成單價EBI3-p28 x Fc Fc為人類IgG4s(旋鈕)	YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
SEQ ID NO：50	IL27M13	p28-Fc	二價p28-Fc Fc為人類IgG4s	FPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK
	IL27M14		IL27M13(p28-Fc)和EBI3-mmh之間的2：2複合物
SEQ ID NO：51	IL27M16-A鏈	Fc-EBI3-p28(旋鈕)	與IgG4sFc(孔洞/星狀)異二聚化，形成單價Fc x EBI3-p28 Fc為人類IgG4s(旋鈕)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：52	IL27M17	Fc-p28	二價Fc-p28 Fc為人類IgG4s	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
	IL27M18		IL27M17 (Fc-p28)和EBI3-mmh之間的2：2複合物
SEQ ID NO：53	IL27M20		EBI3-p28-HSA-mmh	YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSDAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGLEQKLISEEDLGGEQKLISEEDLHHHHHH
SEQ ID NO：54	IL27M21-A鏈	p28-HSA		FPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSGGGGSGGGGSGGGGSDAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGLEQKLISEEDLGGEQKLISEEDLHHHHHH
SEQ ID NO：55	IL27M21-B鏈	EBI3-has		YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSDAHKSEVAHRFKDLGEENFKALVLIAFAQYLQQCPFEDHVKLVNEVTEFAKTCVADESAENCDKSLHTLFGDKLCTVATLRETYGEMADCCAKQEPERNECFLQHKDDNPNLPRLVRPEVDVMCTAFHDNEETFLKKYLYEIARRHPYFYAPELLFFAKRYKAAFTECCQAADKAACLLPKLDELRDEGKASSAKQRLKCASLQKFGERAFKAWAVARLSQRFPKAEFAEVSKLVTDLTKVHTECCHGDLLECADDRADLAKYICENQDSISSKLKECCEKPLLEKSHCIAEVENDEMPADLPSLAADFVESKDVCKNYAEAKDVFLGMFLYEYARRHPDYSVVLLLRLAKTYETTLEKCCAAADPHECYAKVFDEFKPLVEEPQNLIKQNCELFEQLGEYKFQNALLVRYTKKVPQVSTPTLVEVSRNLGKVGSKCCKHPEAKRMPCAEDYLSVVLNQLCVLHEKTPVSDRVTKCCTESLVNRRPCFSALEVDETYVPKEFNAETFTFHADICTLSEKERQIKKQTALVELVKHKPKATKEQLKAVMDDFAAFVEKCCKADDKETCFAEEGKKLVAASQAALGLEQKLISEEDLGGEQKLISEEDLHHHHHH
SEQ ID NO：56			EBI3-mmh	YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPEQKLISEEDLGGEQKLISEEDLHHHHHH
SEQ ID NO：57			IgG4sFc(孔洞/星狀)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO：58	IL27M22	mEB13-mp28 hIgG1 Fc		YTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDSDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK
SEQ ID NO：59	IL27M23-Chain A	IL27M16 (Y202A, Q203A)	與IgG4sFc(孔洞/星狀)異二聚化，形成單價Fc x EB13-p28 (Y202A、Q203A) Fc為人類IgG4s(旋鈕)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTAALLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：60	IL27M24-A鏈	IL27M16 (K52A)	與IgG4sFc(孔洞/星狀)異二聚化，形成單價Fc x EB13-p28 (K52A) Fc為人類IgG4s(旋鈕)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARALLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：61	IL27M25-A鏈	IL27M16 (L138A、R145A、H146A)	與IgG4sFc(孔洞/星狀)異二聚化，形成單價Fc x EB13-p28 (L138A、R145A、H146A ) Fc為人類IgG4s(旋鈕)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRADLRDLHAALRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：62	IL27M26-A鏈	IL27M16 (L198A、L199A)	與IgG4sFc(孔洞/星狀)異二聚化，形成單價Fc x EB13-p28 (L198A、L199A) Fc為人類IgG4s(旋鈕)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQAAYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NO：63	IL27M27-A鏈	IL27M16 (W195A)	與IgG4sFc(孔洞/星狀) 異二聚化，形成單價Fc x EB13-p28 (W195A) Fc為人類IgG4s(旋鈕)	ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSAPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS
SEQ ID NOs：64、65、66		同型-IL27(L98A、L99A)	CH1-CH3序列為人類IgG4s(旋鈕x孔洞/星狀)	重鏈 -A ， VH+hIgG4s(旋鈕 – SEQ ID NO ： 64) ：QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGRTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAIYYCARHRVTRTADSFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQAAYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS 重鏈 -B ， VH+hIgG4s( 孔洞 / 星狀 – SEQ ID NO ： 65) ：QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGRTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAIYYCARHRVTRTADSFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 輕鏈， CH+ 人類 κ(SEQ ID NO ： 66) ：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDINNYLNWYQQKTGKAPKFLIYDASNLETGVSSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDVGTYYCHQYGDLPYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs： 67、68、69		抗mPD1-IL27(L98A、L99A)	CH1-CH3序列為人類IgG4s(旋鈕x孔洞/星狀)	重鏈 -A ， VH+hIgG4s( 旋鈕 – SEQ ID NO ： 67) ：抗-mPD1序列–視情況存在的連接子–ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQAAYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS 重鏈 -B ， VH+hIgG4s( 孔洞 / 星狀 – SEQ ID NO ： 68) ：抗-mPD1序列–視情況存在的連接子–ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 輕鏈， CH+ 人類 κ(SEQ ID NO ： 69) ：DIVMTQGTLPNPVPSGESVSITCRSSKSLLYSDGKTYLNWYLQRPGQSPQLLIYWMSTRASGVSDRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDVGIYYCQQGLEFPTFGGGTKLELKTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs： 67、68、70		抗hPD1-IL27(L98A、L99A)	CH1-CH3序列為人類IgG4s(旋鈕x孔洞/星狀)	重鏈 -A ， VH+hIgG4s( 旋鈕 – SEQ ID NO ： 67) ：抗-mPD1序列–視情況存在的連接子–ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRLDLRDLHRHLRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQAAYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS 重鏈 -B ， VH+hIgG4s( 孔洞 / 星狀 – SEQ ID NO ： 68) ：抗-mPD1序列–視情況存在的連接子–ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 輕鏈， CH+ 人類 κ(SEQ ID NO ： 70) ：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs：71、65、66		同型-IL27(L138A、R145A、H146A)	CH1-CH3序列為人類IgG4s(旋鈕x孔洞/星狀)	重鏈 -A ， VH+hIgG4s( 旋鈕 – SEQ ID NO ： 71) ：QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGRTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAIYYCARHRVTRTADSFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRADLRDLHAALRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS 重鏈 -B ， VH+hIgG4s( 孔洞 / 星狀 –SEQ ID NO ： 65) ：QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGRTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAIYYCARHRVTRTADSFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 輕鏈， CH + 人類 κ(SEQ ID NO ： 66) ：DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDINNYLNWYQQKTGKAPKFLIYDASNLETGVSSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDVGTYYCHQYGDLPYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs：72、73、69		抗mPD1–IL27(L138A、R145A、H146A)	CH1-CH3序列為人類IgG4s(旋鈕x孔洞/星狀)	重鏈 -A ， VH+hIgG4s( 旋鈕 – SEQ ID NO ： 72) ：EVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITSSYRWNWIRKFPGNRLEWMGYINSAGISNYNPSLKRRISITRDTSKNQFFLQVNSVTTEDAATYYCARSDNMGTTPFTYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRADLRDLHAALRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS 重鏈 -B ， VH+hIgG4s( 孔洞 / 星狀 –SEQ ID NO ： 73) ：EVQLQESGPGLVKPSQSLSLTCSVTGYSITSSYRWNWIRKFPGNRLEWMGYINSAGISNYNPSLKRRISITRDTSKNQFFLQVNSVTTEDAATYYCARSDNMGTTPFTYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 輕鏈， CH + 人類 κ(SEQ ID NO ： 69) ：DIVMTQGTLPNPVPSGESVSITCRSSKSLLYSDGKTYLNWYLQRPGQSPQLLIYWMSTRASGVSDRFSGSGSGTDFTLKISGVEAEDVGIYYCQQGLEFPTFGGGTKLELKTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs：74、75、70)		抗hPD1–IL27(L138A、R145A、H146A)	CH1-CH3序列為人類IgG4s(旋鈕x孔洞/星狀)	重鏈 -A ， VH+hIgG4s( 旋鈕 – SEQ ID NO ： 74) ：QVQLVQSGAEVKRPGSSVKVSCKVSGVTFRNFAIIWVRQAPGQGLEWMGGIIPFFSAANYAQSFQGRVTITPDESTSTAFMELASLRSEDTAVYYCAREGERGHTYGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLWCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGKGGGGSGGGGSGGGGSYTETALVALSQPRVQCHASRYPVAVDCSWTPLQAPNSTRSTSFIATYRLGVATQQQSQPCLQRSPQASRCTIPDVHLFSTVPYMLNVTAVHPGGASSSLLAFVAERIIKPDPPEGVRLRTAGQRLQVLWHPPASWPFPDIFSLKYRLRYRRRGASHFRQVGPIEATTFTLRNSKPHAKYCIQVSAQDLTDYGKPSDWSLPGQVESAPHKPGGGGSGGGGSGGGGSGGGGSFPTDPLSLQELRREFTVSLYLARKLLSEVQGYVHSFAESRLPGVNLDLLPLGYHLPNVSLTFQAWHHLSDSERLCFLATTLRPFPAMLGGLGTQGTWTSSEREQLWAMRADLRDLHAALRFQVLAAGFKCSKEEEDKEEEEEEEEEEKKLPLGALGGPNQVSSQVSWPQLLYTYQLLHSLELVLSRAVRDLLLLSLPRRPGSAWDS 重鏈 -B ， VH+hIgG4s ( 孔洞 / 星狀 –SEQ ID NO ： 75) ：QVQLVQSGAEVKRPGSSVKVSCKVSGVTFRNFAIIWVRQAPGQGLEWMGGIIPFFSAANYAQSFQGRVTITPDESTSTAFMELASLRSEDTAVYYCAREGERGHTYGFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLSCAVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLVSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNRFTQKSLSLSPGK 輕鏈， CH+ 人類 κ ： ( SEQ ID NO ： 70)DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs：76、77	mIgG1	N/A (帶有鼠類IgG1序列之對照抗體)	鼠類IgG1 Fc同型對照	重鏈；可變區 ( VR) + mIgG1 (SEQ ID NO ： 76) ：QVQLQESGPGLVAPSQSLSITCTVSGFSLTTFGVHWVRQSPGKGLEWLGVIWADETTNYNSALMSRLSISKDNSKSQVFLKMNGLRTDDTAIYSCARSKVSYYFDYWGRGTTLTVSSAKTTPPSVYPLAPGSAAQTNSMVTLGCLVKGYFPEPVTVTWNSGSLSSGVHTFPAVLQSDLYTLSSSVTVPSSTWPSETVTCNVAHPASSTKVDKKIVPRDCGCKPCICTVPEVSSVFIFPPKPKDVLTITLTPKVTCVVVDISKDDPEVQFSWFVDDVEVHTAQTQPREEQFNSTFRSVSELPIMHQDWLNGKEFKCRVNSAAFPAPIEKTISKTKGRPKAPQVYTIPPPKEQMAKDKVSLTCMITDFFPEDITVEWQWNGQPAENYKNTQPIMDTDGSYFVYSKLNVQKSNWEAGNTFTCSVLHEGLHNHHTEKSLSHSPGK 輕鏈； VR+ 小鼠 κ (SEQ ID NO ： 77)NIMMTQSPSSLPVSPGEKVTMNCKSSRSVLYSLNQKNYLAWYQQKPGQSPKLLIYWASTRESGVPDRFTGSGSGTDFSLTISSVQAEDLAVYYCHQYLSSWTFGGGTKLEIKRADAAPTVSIFPPSSEQLTSGGASVVCFLNNFYPKDINVKWKIDGSERQNGVLNSWTDQDSKDSTYSMSSTLTLTKDEYERHNSYTCEATHKTSTSPIVKSFNRGEC
SEQ ID NOs：78、70	hIgG4s	N/A (帶有hIgG4s序列之對照抗體)	人類IgG4 Fc同型對照 Fc為IgG4s	重鏈 VR+hIgG4s(SEQ ID NO ： 78)EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTLSTYAMTWVRQAPGKGLEWVSAINYRAANTWYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRDEDTAVYYCAQDRVIIKDYYVMDVWGQGTTVTVSSASTKGPSVFPLAPCSRSTSESTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTKTYTCNVDHKPSNTKVDKRVESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK 輕鏈 VR+ 人類 κ (SEQ ID NO ： 70)DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISSYLNWYQQKPGKAPKLLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYCQQSYSTPPITFGQGTRLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC
SEQ ID NOs：79、66	hIgG1	N/A(帶有hIgG1序列之對照抗體)	抗-FelD1人類IgG1 Fc同型對照	重鏈 ( SEQ ID NO ： 79)QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSISSYYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGRTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAIYYCARHRVTRTADSFDYWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK 輕鏈 (SEQ ID NO ： 66)DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCQASQDINNYLNWYQQKTGKAPKFLIYDASNLETGVSSRFSGSGSGTDFTFTISSLQPEDVGTYYCHQYGDLPYTFGQGTKLEIKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC

7.1.2. STAT3- 報導子分析之測量

將小鼠肥大細胞株MC/9以編碼STAT3驅動的螢光素酶報導子之慢病毒載體轉導，單細胞選殖並重新命名為MC9/STAT3-Luc。隨後，使用CRISPR/Cas9技術敲除IL27Rα，並將生成的細胞株MC9/STAT3-Luc/IL27Rα KO藉由流式細胞儀驗證。將MC9/STAT3-Luc(ACL8878)細胞以分析培養基(RPMI + 10% FBS + 1% P/S/G + 50 µM BME + 36 µg/mL L-天門冬醯胺酸 +1% NEAA)培養至隔夜(O/N)。將細胞離心並再懸浮於分析培養基中。每孔以50 μL植入5x10 ⁴個MC9報導子細胞。將重組IL27(R&D Systems 型號2700-ML-010/CF)、EBI3-p28-Fc(二價)或EBI3-p28-Fc(單價)結構或同型對照(H4sH10154P3，亦稱為REGN7540)以50 nM再懸浮(2x)，然後依循11點滴定稀釋(其中第12點並無蛋白)。每孔加入50 μL滴定液，雙重複，至最終體積100 μL。將細胞於37°C培養5.5小時。加入100 μL OneGlo，並在室溫培養3分鐘。於Envision 盤式判讀儀上偵測螢光素酶活性。 7.1.3. IL27嵌合 體和突變蛋白結合之流式細胞術評估

將MC9/STAT3-Luc和MC9/STAT3-Luc/IL27Rα KO細胞在FACS緩衝液(PBS+2% FBS)中與Fc受體阻斷抗體(Biolegend，#156604)預結合，之後與500 nM 9點1：5滴定結合，其中第9點缺少IL27-Fc嵌合體。將細胞在冰上培養30分鐘後，將其以FACS緩衝液清洗一次然後以5 µg/mL AF647接合的F(ab')2 山羊抗人類Fcg特異性抗體(Jackson Immunoresearch, #109-606-170)於冰上另再培養30分鐘。接著，將細胞清洗一次，以1：500溶於PBS的活力標記物(Invitrogen，#L34970)培養30分鐘，清洗一次並以Cytofix (BD，#554655)固定。使用Beckman Cytoflex™ 儀器藉由流式細胞術評估細胞。將所產生的數據作圖用以代表ahuFC訊號的幾何平均螢光強度(MFI)。 7.1.4. pSTAT1 之流式細胞術評估

從原生C57Bl/6小鼠中收集脾臟，並經由70 μm過濾器解離，產生單細胞懸浮液。使用ACK緩衝液(Lonza型號10-548E)裂解紅血球細胞。藉由負向選擇微珠富集(Miltenyi型號130-104-454)分離總CD4+ T細胞並植入含有1:1比例之抗-CD3/抗-CD28 T細胞活化微珠(Gibco by Life Technologies，型號：11453D)的T25燒瓶中。將細胞於37°C培養72小時。使用磁體去除微珠並將細胞以2x10 ⁷/mL再懸浮於0.5% BSA/RPMI中，及以50 uL/孔植入96孔盤中。將細胞於冰上靜置30分鐘，之後以重組的IL27(R&D Systems型號2700-ML-010/CF)、EBI3-p28-Fc (二價)或EBI3-p28-Fc (單價)結構於37°C刺激20分鐘。將細胞立即藉由加入等體積的4% PFA於冰上固定20分鍾。將細胞以Biolegend細胞染色緩衝液(Biolegend cat#420201)清洗二次，之後以90%甲醇固定。將細胞以細胞染色緩衝液清洗二次並於細胞染色緩衝液中染色至隔夜。藉由流式細胞術使用LSR Fortessa (BD Biosciences)評估細胞。使用來自所指來源之下列抗小鼠抗原的單株抗體進行染色：BD Biosciences：pSTAT1 (4a，型號562985)、pSTAT3 (4/P-STAT3，型號612569)、Fc Block (93，型號101302)。Biolegend：CD8a (53-6.7，型號100730)、CD45 (30-F11，型號103140)、CD4 (RM4-5，型號100529)、CD3 (17A2，型號100236)。Thermo Fisher：Live Dead Fixable Dye(型號L34962)。 7.1.5. 活體外 T 細胞極化

從原生C57Bl/6小鼠中收集脾臟，並經由70 μm過濾器解離，產生單細胞懸浮液。使用ACK緩衝液(Lonza型號10-548E)裂解紅血球細胞。藉由負向選擇微珠富集(Miltenyi型號130-104-454)分離總CD4+ T細胞並在所指刺激物(Th0：10 ug/mL 抗-IFNg (BioXcell型號BE0055) + 10 μg/mL 抗-IL4 (BioXcell型號BE0045)、Th2：10 ug/mL 抗-IFNg + 50 μg/mL rIL4 (eBiosciences型號BMS338)、Th17：10 μg/mL 抗-IFNg + 10 μg/mL 抗-IL4 + 1 ng/mL rhTGFb (R&D Systems240-B-002)+10 ng/mL rIL6 (eBiosciences型號RMIL6I)) +/–50 ng/mL所指IL27結構之存在下植入塗覆抗-CD3/抗-CD28抗體(Tonbo型號70-0031-U500，70-0281-500U)的96孔盤。將細胞於37°C培養4天，在72小時時補充新鮮培養基和試劑。以PBS清洗細胞並以細胞染色緩衝液對表面標記進行染色。依製造商的說明，以eBioscience細胞內固定&通透化緩衝液組(eBiosciences型號88-8824-00)將細胞清洗、固定及胞內染色。使用LSR Fortessa (BD Biosciences)藉由流式細胞術評估細胞。使用來自所指來源之下列抗小鼠抗原的單株抗體進行染色：BD Biosciences：Gata3 (L50-823，型號560405)、Fc Block (2.4G2，型號553142)。Biolegend：CD8a (53-6.7，型號100714)、CD45 (30-F11，型號103138)、CD4 (RM4-5，型號100547)、TCRb (H57-597，型號109243))。Thermo Fisher：Live Dead Fixable Dye (型號L34962)、Foxp3 (FJK-16s，型號56-5773-82)。 7.2. 實例 1 ： STAT3 報導子分析中 IL27 突變蛋白的活性

以如7.1.2章節中所描述之STAT3報導子細胞為基礎的生物分析評估重組IL27突變蛋白刺激IL27受體之能力。

以重組人類和鼠類IL27、IL27突變蛋白或人IgG4s同型對照培養之工程改造報導子細胞MCSTAT3-Luc細胞的活化曲線，係如圖7A所示。圖7B和7C係顯示EBI3-p28-Fc二價形式(例如，IL27M1之組態)和EBI3xp28 Fc單價形式(例如，IL27M2之組態)之尺寸排除跡線。

當報導子細胞以對照蛋白處理時，並未偵測到螢光素酶活性增加。相反的，以鼠類IL27培養報導子細胞MC/STAT3-Lu引發螢光素酶活性，EC50值約為6.3x10 ^-12M。以鼠類IL27突變蛋白培養MC9/STAT3-Luc亦引發螢光素酶活性，EC50值約為4.8x10 ^-10M和3.2x10 ^-12M。因此，EBI3-p28-Fc(單價)訊號傳遞與野生型IL27相類似，但EBI3-p28-Fc(二價)訊號傳遞則無。相較於單價形式(EBI3-p28-Fc(單價))，突變蛋白的二價形式(EBI3-p28-Fc(二價))展現更高程度的聚集。 7.3. 實例 2 ： pSTAT1 分析中 IL27 突變蛋白 之活性

以如7.1.3章節中所描述之pSTAT1-流式細胞術生物分析評估重組IL27突變蛋白刺激IL27受體之能力。

以重組IL27和IL27突變蛋白培養之CD4+ T-細胞的MFI曲線，係如圖8所示。

以鼠類IL27和EBI3-P28-FC(單價)培養CD4+ T細胞，引發STAT1磷酸化，EC50值分別為約24.4 ng/mL和22.37 ng/mL。相反的，以EBI3-p28-Fc(二價) (EC50值為約1999 ng/mL)處理的細胞未見到STAT1磷酸化增加，其再次顯示EBI3-p28-Fc(單價)訊號號傳遞與野生型IL27相類似，但EBI3-p28-Fc(二價)訊號傳遞則無。 7.4. 實例 3 ： IL27 突變蛋白之粒度分離

應用尺寸排阻超高效液相層析(SE-UPLC)評估不同突變蛋白的寡聚狀態。SEC分析係於Waters Acquity UPLC H-Class系統上進行。將10 µg的各蛋白樣本注射至Acquity BEH SEC管柱(200 Å, 1.7 µm, 4.6 x 300 mm)。流速設定在0.3 ml/min。移動相緩衝液含有10 mM磷酸鈉、500 mM NaCl，pH 7.0。監測280 nm的UV吸光度。

IL27突變蛋白之SE-UPLC跡線係如圖9A至圖9L所示。如SE-UPLC跡線上顯著的HMW種類所顯示的，大多數的IL27突變蛋白展現高度的大小異質性。相較於二價形式，單價形式的IL27突變蛋白以較低的寡聚化顯示更有利的穩定性概況。 7.5. 實例 4 ： IL27 報導子分析中 IL27 突變蛋白的活性

以一報導子分析評估重組IL27突變蛋白引發STAT3活性之能力。簡言之，植入5 x 10 ⁴個MC9細胞並以IL27突變蛋白(11點滴定)培養5h 30min，然後讀取讀數(螢光素酶分析)。

劑量反應曲線係如圖10A至圖10C所示，而所計算的EC50值和引發倍數係如下表7所示。單價IL27形式比二價IL27形式具有更高的效力。

表 7 小鼠 IL27 、小鼠 Fc-mIL27 、 IL27-Fc 、 HSA-IL27 和 IL27-HSA 標記蛋白之 IL27 報導子分析 EC50 和引發倍數
突變蛋白組態	結構	引發倍數 *	EC50 (M)
	mIL27	2.86	4.62E-12
IL27M1	mEB13-mp28-Fc	2.95	1.01E-09
IL27M3	mp28-mEB13-Fc	3.02	8.63E-10
IL27M12	mEB13-mp28 x Fc	2.68	1.22E-11
IL27M13	mp28-Fc	1.11	ND
IL27M4	Fc-mEB13-mp28	2.78	4.71E-10
IL27M5	Fc-mp28-mEB13	2.91	4.19E-10
IL27M6	Fc-mp28 x mEB13	2.80	3.21E-11
IL27M16	Fc x mEB13-mp28	2.76	1.18E-11
IL27M17	Fc-mp28	1.16	ND
IL27M14	mEB13-mmh x mp28-Fc	2.71	2.81E-10
IL27M18	mEB13-mmh x Fc-mp28	2.86	2.36E-10
IL27M22	mEB13-mp28 hIgG1 Fc	3.95	6.08E-10
IL27M20	mEB13-mp28-HSA	2.79	2.87E-12
IL27M21	mEB13-HSA x mp28-HSA	2.70	8.35E-11

ND：未測定，因為未觀察到濃度依賴的反應。 *引發倍數係定義為相對於缺乏重組蛋白之平均RLU，在受試的劑量範圍內之最高平均RLU值。 7.6. 實例 5 ： IL27 報導子分析中 IL27 突變蛋白的活性

以編碼干擾素γ活化序列(GAS)驅動的螢光素酶報導子之慢病毒載體轉導人類漿細胞株NCI-H929，並重新命名為NCI-H929/GAS-Luc。藉由將NCI-H928-Fc以IL27、人類EBI328-Fc (二價)或人類hEB13 x hp (單價)滴定培養，評估重組人類IL27突變蛋白引發STAT1-驅動的報導子活性之能力。劑量反應曲線係如圖11所示，而所計算的EC50值和引發倍數係如下表8所示。

表 8 人類 IL27 、單價 (IL27M12) 和雙價 (IL27M1) IL27-Fc 之 IL27 報導子分析 EC50 及引發倍數
突變蛋白組態	結構	引發倍數 *	EC50 (M)
	hIL27	12.34	3.34E-10
IL27M1	hEB13-hp28-Fc	15.23	5.35E-09
IL27M12	hEB13 x hp28-Fc	14.27	1.27E-10

*引發倍數係定義為相對於缺乏重組蛋白之平均RLU，在受試的劑量範圍內之最高平均RLU值。 7.7. 實例 6 ：活體外 T- 細胞極化中 IL27 突變蛋白之活性

如7.1.5章節所描述評估在鼠類T細胞極化期間重組IL2‎7突變蛋白抑制GATA-3表現之能力。

在所指刺激物的存在下，以重組IL27和IL27突變蛋白一起培養CD4+ T細胞之MFI曲線係如圖12所示。

以鼠類IL27和EBI3-p28-Fc (單價)培養D4+ T細胞抑制了Th2-特異性GATA-3轉錄因子之表現。相反的，在以IL27突變蛋白EBI3-p28-Fc (二價)處理的細胞中並無見到GATA-3抑制，其再次顯示EBI3-Fc (單價)訊號傳遞係與野生型IL27相類似，但EBI3-p28-Fc(二價)訊號傳遞則無。 7.8. 實例 7 ： 活體外 T- 細胞極化中 IL27 突變蛋白之活性

以一活體外T細胞極化分析評估在Th2極化期間重組IL27突變蛋白抑制Gata3表現之能力(10 ug/mL抗-IFNg + 50 ng/mL IL-4)。參考圖13A至圖13C，相較於重組的IL27，EBI3-p28-HSA和Fc x EB13-p28在活體外Th0-、Th2-、Th17–細胞極化期間提升了PDL表現且在活體外Th2極化期間抑制Gata3表現。 7.9. 實例 8 ：評估 IL27 突變蛋白之活體外 PK

在活體內評估重組IL27突變蛋白的PK。將C57BL/6小鼠以腹膜內注射10 ug Fc x EB13-p28或EBI3-p28-HSA。在治療後2、6、24和48小時收集血清。進行ELISA用以定量在各時間點血清中各別的IL-27突變蛋白量。圖14。 7.10. 實例 9 ：鑑別涉及受體結合的 IL27p28 殘基

小鼠IL27p28 (SEQ ID NO：36)和人類IL27p28 (SEQ ID NO：34)的序列比對係如圖15所示，箭頭表示所選的胺基酸取代之位點。

以一報導子分析評估重組小鼠IL27突變蛋白引發STAT3活性的能力。簡言之，植入2.5x10 ⁴個細胞並以IL27突變蛋白培養5h (11點滴定)然後讀取讀數(螢光素酶)。劑量反應曲線係如圖16所示，而所計算的EC50值和引發倍數係如下表9所示。推定位點2和位點3的突變二者影響了IL27生物活性。

表 9 小鼠 IL27 、單價 Fc-IL27 和 Fc-IL27 突變蛋白之 IL27 報導子分析 EC50 及引發倍數 IL27
突變蛋白組態	結構	引發倍數 *	EC50 (M)
	mIL27	5.25	3.22E-12
IL27M16	Fc x EB13-p28	5.62	1.16E-11
IL27M27	Fc x EB13-p28 (W195A)	1.20	NC
IL27M26	Fc x EB13-p28 (L198A、L199A)	2.80	3.85E-10
IL27M23	Fc x EB13-p28 (Y202A_Q203A)	5.34	1.98E-11
IL27M24	Fc x EB13-p28 (K52A)	5.59	1.18E-11
IL27M25	Fc x EB13-p28 (L138A_R145A_H146A)	4.35	NC

NC：未計算，因為數據不符合4參數邏輯方程式 *引發倍數係定義為相對於缺乏重組蛋白之平均RLU，在受試的劑量範圍內之最高平均RLU值。

研究mIL27位點2和位點3突變蛋白在初級人類T細胞中的作用。結果係如圖17A至圖17D所示。mIL27在人體細胞上比hIL27更活躍。相較於WT mIL27，mIL27位點2和位點3突變蛋白在初級人類T細胞中顯示pSTAT1和pSTAT3下降。

進行流式結合分析用以研究mIL27突變蛋白與野生型和mIL27Rα敲除細胞之結合。簡言之，將MC9/STAT3-Luc和MC9/STAT3-Luc/IL27Ra KO細胞與IL27突變蛋白植入(8點滴定)，在冰上染色30分鐘，接著以二級Fab2抗-人類IgG Fc特異性AF647培養，然後藉由流式細胞術分析。曲線係如圖18A至圖18B所示。在位點3突變蛋白與野生型細胞具有類似結合的同時，位點2突變蛋白則具有降低的結合。再者，IL27Rα敲除破壞了野生型而顯示IL27高親和力結合之位點3突變蛋白結合，可能係由位點2所媒介。 7.11. 實例 10 ： IL27 突變蛋白之靶向

吾等研究了靶標驅動的Ab-IL27捕捉用以允許Ab靶向的IL27訊號傳遞。將MC9/Stat3-Luc細胞經工程改造用以穩定表現小鼠PD1 (胺基酸M1-L288，登錄號NP_032824.1)或人類PD1 (胺基酸M1-L288，登錄號NP_005009.2，具有2Q→E突變)並分別重新命名為MC9/STAT3-Luc/mPD1和MC9/STAT3-Luc/hPD1。PD1靶向基團係用於靶向非表現PD1 (負對照，圖19A/C/E/G)、小鼠PD 1(圖19B/F)或人類PD1 (圖19D/H)表現細胞中的IL27位點2和位點3突變蛋白，以及使用報導子分析評估其引發STAT3活性的能力。簡言之，植入2.5 x 10 ⁴個細胞並以IL27突變蛋白培養(12點滴定，其中第12點未含有突變蛋白)5小時，然後讀取讀數(螢光素酶)。曲線係如圖19A至圖19H所示，當使用標靶(PD1)表現細胞上的PD1靶向基團靶定時，IL27位點2突變蛋白係具有增加的效力。 8. 引述的參考文獻

本申請案中所引述的所有公開案、專利、專利申請案和其他文件係就所有目的以全文引用的方式併入本文中，其引用程度就如同將各個個別公開案、專利或專利申請案或其他文件個別地特定就所有目的以全文引用的方式併入。在併入文中的一或多個參考文獻之教導和本揭示文之間有不一致的情況下，係以本說明書之教導為主。

無

圖 1A 至圖 1B為IL27異二聚體(圖1A)和異二聚IL27受體(圖1B)之示意圖。

圖 2為野生型IL27異二聚體之示意圖。

圖 3A 至圖 3G係說明本文IL27促效劑稱為IL27M1至IL27M3和IL27M12至IL27M15之實施例的各種方向。在其中一個CH3結構域中的三角形係指二個CH3為不同的且含有一或更多個允許異二聚化之突變(例如，旋鈕在孔洞(knob-in-hole)突變，星狀突變等)。此等圖例意在描繪包含在IL27促效劑中的結構域之組態，包括N-至C-端順序，且無意表達特定的序列、尺寸或三維結構。

圖 4A 至圖 4G係說明本文IL27促效劑稱為IL27M4至IL27M6和IL27M16至IL27M19之實施例的另外方向。在其中一個CH3結構域中的三角形係指二個CH3為不同的且含有一或更多個允許異二聚化之突變(例如，旋鈕在孔洞突變，星狀突變等)。此等圖例意在描繪包含在IL27促效劑中的結構域之組態，包括N-至C-端順序，且無意表達特定的序列、尺寸或三維結構。

圖 5A 至圖 5B係說明本文IL27促效劑稱為IL27M20(圖5A)和IL27M21(圖5B)，包括人類血清白蛋白(HSA)之實施例的另外方向。此等圖例意在描繪包含在IL27促效劑中的結構域之組態，且無意表達特定的序列、尺寸或三維結構。

圖 6A 至圖 6E係說明本文IL27促效劑稱為IL27M7至IL27M11之實施例的另外方向。在其中一個CH3結構域中的星號係指二個CH3為不同的且含有一或更多個允許異二聚化之突變(例如，旋鈕在孔洞突變，星狀突變等)。此等圖例意在描繪包含在IL27促效劑中的結構域之組態，包括N-至C-端順序，且無意表達特定的序列、尺寸或三維結構。

圖 7A 至圖 7C係說明在STAT3-媒介的螢光素酶報導子活性和IL27突變蛋白之聚集概況的活性。重組的IL27和IL27突變蛋白在工程改造的MC9/STAT3-Luc報導子細胞中增加了STAT3-反應元件驅動的螢光素酶活性。黑色實心圓代表市售的鼠類IL27(購自R&D Systems)，閉合實心三角形代表EBI3 x p28-Fc(單價)(一具有IL27M2方向之IL27促效劑的實例)，閉合實心正方形代表EBI3-p28-Fc(二價)(一具有IL27M1方向之IL27促效劑的實例)(圖7A)。EBI3 x p28-Fc(單價)之SE-UPLC之概況係如圖7B中所示而EBI3-p28-Fc (二價)之聚集概況係如圖7C中所示。

圖 8係說明IL27突變蛋白對分離自初始脾臟的CD4+ T細胞中STAT1磷酸化的活性。重組的IL27和EBI3 x p28-Fc(單價)而非EBI3-p28-Fc(二價)誘導分離自初始脾臟之CD4+ T細胞中pSTAT1劑量依賴性的增加。圓圈代表市售的鼠類IL27(購自R&D Systems)，正方形代表EBI3-p28-Fc(二價)，三角形代表EBI3 x p28-Fc(單價)。

圖 9A 至圖 9L係說明本文之IL27促效劑的SE-UPLC跡線。圖9A和9B：IL27促效劑的IL27結構域為人類來源的。圖9C至圖9L：IL27促效劑的IL27結構域為鼠類來源的。

圖 10A 至圖 10C係說明在一IL27報導子分析中本文之IL27促效劑對小鼠細胞株的活性。MC9/STAT3-Luc細胞係以滴定的mIL27單體IL2 Fc融合物(圖10A)或二聚體IL27 Fc融合物(圖10B)或IL27 HSA融合物(圖10C)一起培養。

圖 11係說明在一IL27報導子分析中本文之IL27促效劑對人類細胞株的活性。將NCI-H929/GAS-Luc細胞以滴定的人類IL27(虛線與實心圓)或單價(hEBI3xhp28-Fc(例如，具有IL27M2組態)；實線與正方形)或二價(hEBI3-hp28 -Fc(例如，具有IL27M1組態)；實線與三角形)IL27-Fc一起培養。5 h和30 min後，藉由發光讀數評估STAT1活性。

圖 12係說明IL27突變蛋白對初始CD4+小鼠T細胞的Th0、Th2和Th17極化之活性。如藉由在Th2極化誘導條件下Th2相關轉錄因子Gata3之表達降低所測(Th0：10ug/mL 抗-IFNg + 10ug/mL 抗-IL-4)，Th2：10ug/mL 抗-IFNg + 50ng/mL rIL-4，Th17：10 ug/mL 抗-IFNg + 10 ug/mL 抗-IFNg -IL-4 + 1 ng/mL rhTGFb + 10 ng/mL rIL-6)，重組的IL27和EBI3 x p28-Fc(單價)而非EBI3-p28-Fc(二價)可抑制初始CD4+小鼠T細胞的Th2極化。

圖 13A 至圖 13C係說明如在活體外小鼠T細胞極化分析中所評估的，本文之重組IL27突變蛋白在Th2極化期間抑制Gata3表現的能力(10 ug/mL抗-IFNg+50 ng/mL IL-4)。(圖13A)係顯示在CD4+ T細胞上顯現Gata3表現之流式細胞圖。(圖13B)定量Gata3 MFI。(圖13C)以一活體外小鼠T細胞極化分析評估本文之重組IL27突變蛋白在T細胞極化條件下促進PDL1表現的能力(Th0: 10 ug/mL抗-IFNg + 10ug/mL抗-IL-4)、Th2：10 ug/mL抗-IFNg + 50 ng/mL rIL-4、Th17：10 ug/mL抗-IFNg + 10 ug/mL抗-IL-4 + 1 ng/mL rhTGFb + 10 ng/mL rIL-6)。

圖 14係說明在活體內評估之本文重組IL27突變蛋白的PK。將C57BL/6小鼠經腹膜內以10 ug之所示重組IL27突變蛋白治療。在治療後2、6、24和48小時收集血清。進行ELISA (duoset小鼠IL27 p28 ELISA；R&D Systems)用以定量每個時間點血清中各別的IL27突變蛋白量。

圖 15A 至圖 15C係說明IL27和IL27受體複合物之間相互作用的模型(圖15A)、發生在IL27 p28上的受體結合位點之三維模型(圖 15B)以及小鼠IL27p28(SEQ ID NO: 36)和人類IL27p28(SEQ ID NO: 34)(圖 15C)之序列比對。實線箭頭表示涉及受體結合之結合位點2中的突變位點。虛線箭頭表示涉及受體結合之結合位點3中的突變位點。

圖 16係說明就mIL27位點2和位點3突變蛋白之IL27報導子分析。將MC9/STAT3-Luc以滴定的mIL27或單價 Fc-IL27突變蛋白一起培養，5 h後，藉由發光讀數評估STAT3活性。右側圖為左側圖上之虛線框包圍部分的放大視圖。

圖 17A 至圖 17D係說明在初級人類T細胞中mIL27位點2和位點3突變蛋白之活性。

圖 18A 至圖 18B係說明mIL27位點2和位點3突變蛋白與小鼠報導子細胞MC9/STAT3-Luc(圖18A)和IL27Ra敲除衍生物之流式結合(圖18B)。

圖 19A 至圖 19H係說明IL27突變蛋白靶向標靶表現細胞(圖B、D、F和H)與非表現細胞(圖A、C、E和G)的效力。

無

Claims

一種IL27受體促效劑，其對於IL27為單價的並包括： (a) 一p28基團(moiety)，其係包含一p28之IL27Rα結合結構域及/或一gp130結合結構域； (b) 一EBI3基團，其係包含一EBI3之p28結合結構域； (c) 一第一多聚化基團或一第一穩定化基團；及 (d) 視情況存在的一第一靶向基團。
如請求項1所述之IL27受體促效劑，其係包括一第一穩定化基團。
如請求項2所述之IL27受體促效劑，其係包括一具有示例單體13組態之IL27單體，其中示例單體13係包括： (a) EBI3基團； (b) 一視情況存在的連接子； (c) p28基團； (d) 一視情況存在的連接子；及 (e) 第一穩定化基團。
如請求項1所述之IL27受體促效劑，其係包括一第一穩定化基團和一第二穩定化基團。
如請求項4所述之IL27受體促效劑，其係包括一具有示例單體9組態之第一IL27單體和一具有示例單體10組態之第二IL27單體，其中 (a) 示例單體9係包括： (i) EBI3基團； (ii) 一視情況存在的連接子；和 (iii) 第一穩定化基團；及 (b) 示例單體10係包括： (i) p28基團； (ii) 一視情況存在的連接子；和 (iii) 第一穩定化基團。
如請求項2至5中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該第一穩定化基團及該第二穩定化基團(若存在)係具有一與成熟人類血清白蛋白或其天然變體具有至少約90%序列同一性之胺基酸序列。
如請求項1所述之IL27受體促效劑，其係包括一具有示例單體7組態之IL27單體，其中示例單體7係包括： (a) 視情況地，第一靶向基團或第一靶向基團組份，其係與在一獨立的多肽鏈上之對應的第一靶向基團組份相連結； (b) 一視情況存在的連接子； (c) 第一多聚化基團； (d) EBI3基團； (e) 一視情況存在的連接子；及 (f) p28基團。
如請求項1或請求項7所述之IL27受體促效劑，其係包括該第一多聚化基團和一第二多聚化基團。
如請求項8所述之IL27受體促效劑，其進一步係包括一獨立的多肽鏈，該多肽鏈係包括： (a) 第二多聚化基團，其能與該示例單體連結；及 (b) 視情況地，第二靶向基團或第二靶向基團組份，其係與在一獨立的多肽鏈上之對應的第二靶向基團組份相連結。
如請求項8或請求項9所述之IL27受體促效劑，其中該第一多聚化基團和該第二多聚化基團各自為或包括一Fc結構域。
如請求項10所述之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域係包括一絞鏈結構域。
如請求項10或請求項11所述之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域為一IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc結構域。
如請求項10至12中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域係具有降低的效應子功能。
如請求項10至13中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域為一IgG4 Fc結構域。
如請求項10至14中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該Fc結構域係包括胺基酸序列ESKYGPPCPPCPAPPVAGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGK (SEQ ID NO：80)或其一部分。
如請求項1至15中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團係具有一與成熟人類EBI3之p28結合結構域具有至少約90%序列同一性之胺基酸序列。
如請求項16所述之IL27受體促效劑，其中該EBI3基團係具有一與成熟人類EBI3具有至少約90%序列同一性之胺基酸序列。
如請求項1至17中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該p28基團係具有一與成熟人類p28之IL27Rα結合結構域及/或成熟人類p28之gp130結合結構域具有至少約90%序列同一性的胺基酸序列。
如請求項18所述之IL27受體促效劑，其中該p28基團係具有一與成熟人類p28具有至少約90%序列同一性之胺基酸序列。
如請求項1至19中任一項所述之IL27受體促效劑，其中該p28基團係具有一變體p28結構域，而該p28結構域： (a) 係包括一與成熟人類之IL27Rα結合結構域具有至少約90%序列同一性以及在下列對應位置包括一或多個胺基酸取代之胺基酸序列： (i) 全長人類p28之胺基酸H52或全長鼠類p28之胺基酸Y48，其中該取代視情況地為丙胺酸； (ii) 全長人類p28之胺基酸K56或全長鼠類p28之胺基酸K52，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iii) 全長人類p28之胺基酸S59或全長鼠類p28之胺基酸S55，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iv) 全長人類p28之胺基酸E60或全長鼠類p28之胺基酸E56，其中該取代視情況地為丙胺酸； (v) 全長人類p28之胺基酸W138或全長鼠類p28之胺基酸W134，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vi) 全長人類p28之胺基酸L142或全長鼠類p28之胺基酸L138，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vii) 全長人類p28之胺基酸R145或全長鼠類p28之胺基酸R141，其中該取代視情況地為丙胺酸； (viii) 全長人類p28之胺基酸D146或全長鼠類p28之胺基酸D142，其中該取代視情況地為丙胺酸； (ix) 全長人類p28之胺基酸R149或全長鼠類p28之胺基酸R145，其中該取代視情況地為丙胺酸； (x) 全長人類p28之胺基酸H150或全長鼠類p28之胺基酸H146，其中該取代視情況地為丙胺酸；或 (xi) (a)(i)至(a)(x)之任何組合；及/或 (b) 係包括一與成熟人類之gp130結合結構域具有至少約90%序列同一性以及在下列對應位置包括一或多個胺基酸取代之胺基酸序列： (i) 全長人類p28之胺基酸L73或全長鼠類p28之胺基酸L69，其中該取代視情況地為丙胺酸； (ii) 全長人類p28之胺基酸V76或全長鼠類p28之胺基酸V72，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iii) 全長人類p28之胺基酸W197或全長鼠類p28之胺基酸W195，其中該取代視情況地為丙胺酸； (iv) 全長人類p28之胺基酸L200或全長鼠類p28之胺基酸L198，其中該取代視情況地為丙胺酸； (v) 全長人類p28之胺基酸L201或全長鼠類p28之胺基酸L199，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vi) 全長人類p28之胺基酸Y204或全長鼠類p28之胺基酸Y202，其中該取代視情況地為丙胺酸； (vii) 全長人類p28之胺基酸R205或全長鼠類p28之胺基酸Q203，其中該取代視情況地為丙胺酸；或 (viii) (b)(i)至(b)(vii)之任何組合。
一或多數種核酸，其係編碼如請求項1至20中任一項所述之IL27促效劑。
一種宿主細胞，其係經工程改造用以表現如請求項1至20中任一項所述之IL27促效劑或如請求項21所述之一或多數種核酸。
一種製造如請求項1至20中任一項所述之IL27促效劑的方法，其係包括培養如請求項22所述之宿主細胞並藉此回收表現的IL27促效劑。
一種醫藥組成物，其係包括如請求項1至20中任一項所述之IL27促效劑和一賦形劑。
一種(a)調節免疫反應；(b)治療自體免疫症狀；及/或(c)將具有降低的全身暴露及/或降低的全身毒性之IL27治法投予一對象之方法，其係包括對有此需要的對象投予如請求項1至20中任一項所述之IL27促效劑或如請求項24所述之醫藥組成物。
如請求項25所述之方法，其為一治療自體免疫症狀之方法。
如請求項26所述之方法，其中該自體免疫症狀為關節炎、類風濕性關節炎、乾癬關節炎、幼年特發性關節炎、多發性硬化症、全身性紅斑性狼瘡(SLE)、重症肌無力、幼年型糖尿病、第1型糖尿病、格林-巴利症候群(Guillain-Barre syndrome)、橋本氏腦炎(Hashimoto's encephalitis)、橋本氏甲狀腺炎(Hashimoto’s thyroiditis)、僵直性脊椎炎、乾癬、休格倫氏症候群(sjogren's syndrome)、血管炎、腎小球腎炎、自體免疫性甲狀腺炎、白塞病(Behcet’s disease)、克隆氏症(Crohn’s disease)、潰瘍性結腸炎、大皰性類天皰瘡、結節病、乾癬、魚鱗癬、葛瑞夫茲氏眼病變(Graves ophthalmopathy)、發炎性腸疾病、愛迪生氏病(Addison's disease)、白斑症、氣喘、硬皮病、全身性硬化症或過敏性氣喘。
一種如文所述之發明，例如，如經編號的實施例1至355中任一例所定義者。