TW202321211A

TW202321211A - 菸鹼醯胺ripk1抑制劑

Info

Publication number: TW202321211A
Application number: TW111129732A
Authority: TW
Inventors: 凱文派翠克庫薩克; 麥可傑樂霍門; 大衛安卓金斯曼; 山米歐斯曼; 詹姆士派翠克史丹布利; 瑪麗亞安娜史塔西亞雅吉莉亞迪; 席雅瑞歐萊利; 漢娜德克斯特; 尤恩弗黛希; 高雷史提夫聖
Original assignee: 美商艾伯維有限公司
Priority date: 2021-08-10
Filing date: 2022-08-08
Publication date: 2023-06-01
Also published as: KR20230163568A; WO2023018643A1; US11767310B2; JP2023549007A; JP7406672B2; CA3219155A1; US20230127127A1; EP4301744A1; JP2024037892A; BR112023025850A2; AU2022328136A1; IL308349A; AR126733A1; CN117460722A; CO2023017151A2

Abstract

本文提供可用作RIPK1抑制劑之式（ I）化合物及其醫藥學上可接受之鹽以及包括其之醫藥組合物。亦提供使用及製備方法。

Description

菸鹼醯胺RIPK1抑制劑

受體相互作用蛋白激酶（RIPK1）為參與誘導壞死性凋亡、細胞凋亡及促炎性細胞介素產生之關鍵發炎調節劑。壞死性凋亡為經調節細胞死亡之促炎性形式，其特徵在於細胞膜破裂及胞內內容物釋放至局部細胞環境中。稱為損傷相關分子模式（DAMP）之胞內內容物活化各種免疫細胞，從而導致發炎反應發生及促成額外細胞死亡之發炎性細胞介素產生，因此驅動了發炎循環。研究最多的由RIPK1進行之壞死性凋亡誘導路徑為腫瘤壞死因子（TNF）路徑，但RIPK1亦參與由其他TNF超家族成員（FAS/TRAIL）及鐸樣受體（TLR；TLR3/TLR4）進行之壞死性凋亡誘導。RIPK1磷酸化引起後續RIPK3磷酸化及澱粉狀蛋白結構形成，隨後募集且活化假激酶MLKL（混合譜系激酶域樣），假激酶MLKL係壞死性細胞死亡之重要組成部分。RIPK1抑制與對此壞死性誘導事件級聯及隨後發生之發炎反應之抑制相關。參見例如Li等人, 《發炎性腸病及其他腸病中之壞死性凋亡（Necroptosis in inflammatory bowel disease and other intestinal diseases）》.《世界臨床病例期刊（ World J. Clin.Cases）》 (2018) 6(14):745-752。因此，需要研發另外的可用於治療潰瘍性結腸炎之RIPK1抑制劑。

本文描述式（ I）化合物及其醫藥學上可接受之鹽：

其中： R ¹為氫，或 R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂OR ^P1、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2，其中R ^P1在每種情況下獨立地選自由氫及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，且R ^P2為經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ^2A及R ^2B各自獨立地為氫或鹵基；各R ³獨立地選自由鹵基及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中n為0、1或2； R ^N1為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ⁴獨立地選自由氫、-OR ^4A及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中R ^4A為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ⁵獨立地選自由氫、-OR ^5A及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中R ^5A為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基；環G為5員雜芳基環，其中各G ¹、G ²、G ³及G ⁴獨立地為CH、CR ^G1、N、NR ^N2、O或S，其限制條件為G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少一者為N、NR ^N2、O或S，且其中G ¹、G ²、G ³及G ⁴中不超過兩者為O或S； R ^G1在每種情況下獨立地選自由鹵基、-OR ^G2、-NR ⁷、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基或經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組，其中R ^G2為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基；或兩個鄰接R ^G1基團連同其所連接之原子一起形成稠合的經取代或未經取代之5-6員碳環基或稠合的經取代或未經取代之5-6員雜環基；或鄰接R ^G1基團及R ^N2基團連同其所連接之原子一起形成稠合的經取代或未經取代之5-6員雜環基；各R ^N2獨立地選自由氫、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基及經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組；各R ⁷獨立地選自由氫、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基及經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組；且經取代或未經取代在每種情況下係視情況且獨立地經0、1、2或3個選自由鹵基、-OH、-O(C _1-4烷基)及-O(C _1-4鹵烷基)組成之群組之取代基取代。

在某些實施例中，在環G中，G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少一者為N或NR ^N2。

在某些實施例中，在環G中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2。

在某些實施例中，在環G中，G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少兩者為N或NR ^N2。

在某些實施例中，環G為二唑。在某些該等實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2。

在另外實施例中，環G為三唑。在某些該等實施例中，G ²、G ³及G ⁴各自獨立地為N或NR ^N2。

在某些實施例中，R ^N2為烷基或鹵烷基。

在某些實施例中，G ¹及G ²中之一者為CR ^G1。在某些該等實施例中，R ^G1為甲基或環丙基。

在某些實施例中，R ⁴為氫。

在某些實施例中，R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基。

在另外實施例中，R ⁵為氫、甲基、甲氧基或二氟甲基。在再另外實施例中，R ⁵為氫。

在某些實施例中，R ^N1為氫或甲基。舉例而言，在一些實施例中，R ^N1為氫；可替代地，在一些實施例中，R ^N1為甲基。

在某些實施例中，R ^2A及R ^2B各自為氫。

在某些實施例中，R ^2A及R ^2B中之一者為氫且另一者為氟。

在某些實施例中，n為0或1。

在某些實施例中，n為1。在某些該等實施例中，R ³為鹵基。

在替代實施例中，n為0。

在某些實施例中，R ¹為氫。

在替代實施例中，R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。舉例而言，R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在另外該等實施例中，各R ^P1為氫。可替代地，各R ^P1可為未經取代之C _1-4烷基。

在某些實施例中，化合物選自下表：

；或其醫藥學上可接受之鹽。

本文亦提供包括式（ I）化合物之醫藥組合物。

相關申請案

本申請案主張2021年8月10日申請之美國臨時專利申請案第63/231,590號之優先權，該案之內容特此以引用之方式併入。 (i) 化合物 本文描述式（ I）化合物及其醫藥學上可接受之鹽；

或其醫藥學上可接受之鹽；其中： R ¹為氫，或 R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂OR ^P1、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2，其中R ^P1在每種情況下獨立地選自由氫及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，且R ^P2為經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ^2A及R ^2B各自獨立地為氫或鹵基；各R ³獨立地選自由鹵基及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中n為0、1或2； R ^N1為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ⁴獨立地選自由氫、-OR ^4A及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中R ^4A為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ⁵獨立地選自由氫、-OR ^5A及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中R ^5A為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基；環G為5員雜芳基環，其中各G ¹、G ²、G ³及G ⁴獨立地為CH、CR ^G1、N、NR ^N2、O或S，其限制條件為G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少一者為N、NR ^N2、O或S，且其中G ¹、G ²、G ³及G ⁴中不超過兩者為O或S； R ^G1在每種情況下獨立地選自由鹵基、-OR ^G2、-NR ⁷、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基或經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組，其中R ^G2為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基；或兩個鄰接R ^G1基團連同其所連接之原子一起形成稠合的經取代或未經取代之5-6員碳環基或稠合的經取代或未經取代之5-6員雜環基；或鄰接R ^G1基團及R ^N2基團連同其所連接之原子一起形成稠合的經取代或未經取代之5-6員雜環基；各R ^N2獨立地選自由氫、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基及經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組；各R ⁷獨立地選自由氫、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基及經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組；且經取代或未經取代在每種情況下係視情況且獨立地經0、1、2或3個選自由鹵基、-OH、-O(C _1-4烷基)及-O(C _1-4鹵烷基)組成之群組之取代基取代。

式（ I）化合物可選擇性結合至且抑制RIPK1（參見圖 1；《分析及活性資料中之RIPK1結合分析（RIPK1 Binding Assay in Assays and Activity Data）》）。本發明化合物可藉由抑制RIPK1來阻止TNF誘導之壞死性凋亡（參見《分析及活性資料中之U937 TNF/zVAD細胞毒性細胞分析（U937 TNF/zVAD Cytotoxicity Cell Assay in Assays and Activity Data）》）。

式（ I）化合物可進一步包括一或多個立體中心。在某些實施例中，該化合物包括處於與基團OR ¹連接之碳上之立體中心。舉例而言，在某些實施例中，該化合物為式（ I-a）立體異構體或其醫藥學上可接受之鹽。在某些實施例中，該化合物為式（ I-b）立體異構體或其醫藥學上可接受之鹽。

環 G

在某些該等實施例中，環G為二唑。在某些該等實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2。

在某些實施例中，R ^N2為烷基或鹵烷基。

在某些實施例中，例如，其中G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少一者為N或NR ^N2或其中環G為二唑，G ¹及G ²中之一者為CR ^G1。在某些該等實施例中，R ^G1為甲基或環丙基。

例示性式

基團包含但不限於

。 R ⁴ 及 R ⁵

在某些實施例中，R ⁴為氫。

在某些實施例中，R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基。

在某些實施例中，R ⁵為氫、甲基、甲氧基或二氟甲基。舉例而言，R ⁵可為氫。 R ^N1

在某些實施例中，R ^N1為氫或甲基。舉例而言，R ^N1可為氫。可替代地，R ^N1為甲基。 R ^2A 及 R ^2B

在某些實施例中，R ^2A及R ^2B各自為氫。可替代地，R ^2A及R ^2B中之一者為氫且另一者為氟。 R ³ 及 n

在某些實施例中，n為0或1。

在一些實施例中，n為1。在某些該等實施例中，R ³為鹵基。可替代地，n為0。 R ¹

在某些實施例中，R ¹為氫。

可替代地，R ¹可為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。舉例而言，在一些實施例中，R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。舉例而言，各R ^P1可為氫。可替代地，各R ^P1可為未經取代之C _1-4烷基。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為1；R ³為鹵基；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為1；R ³為鹵基；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為1；R ³為鹵基；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B中之一者為氫且另一者為氟；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B中之一者為氫且另一者為氟；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B中之一者為氫且另一者為氟；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、甲基、甲氧基或二氟甲基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、甲基、甲氧基或二氟甲基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、甲基、甲氧基或二氟甲基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、甲基、甲氧基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、甲基、甲氧基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、甲基、甲氧基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。

在式（ I）之某些實施例中，G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。在某些該等實施例中，各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。在某些較佳實施例中，各R ^P1為H。

在式（ I）之某些實施例中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2；G ¹為CR ^G1；R ^G1為甲基或環丙基；R ⁴為氫；R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基；R ^N1為氫或甲基；R ^2A及R ^2B各自為氫；n為0或1；且R ¹為氫。

在某些實施例中，該化合物選自由以下組成之群組： ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)-5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((1-(三氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)-5-((1-環丙基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺； ( S)-5-((1-環丁基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺； N-((2 R,3 S)-3-氟-2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)-5-((6,7-二氫-4 H-吡唑并[5,1-c][1,4]

-3-基)乙炔基)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺； ( R)-6-(二氟甲基)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-(氧雜環丁烷-3-基)-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)-5-((5-環丙基-1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺； ( S)- N-(3-(3-氟苯基)-2-羥丙基)- N-甲基-5-((1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)-6-甲氧基- N-甲基-5-((1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N,6-二甲基-5-((1-甲基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-甲基噻唑-5-基)乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)-6-甲基-5-(噻唑-5-基乙炔基)菸鹼醯胺； ( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-甲基

唑-5-基)乙炔基)菸鹼醯胺； (1-(5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基)磷酸( S)-二-三級丁酯；二氫磷酸( S)-1-(5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯；乙酸( S)-1-(5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯；甘胺酸( S)-1-(5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯； (1-( N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基)磷酸( S)-二-三級丁酯；二氫磷酸( S)-1-( N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯；乙酸( S)-1-( N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯；甘胺酸( S)-1-( N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯；及 (S)-5-((1-(二氟甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺。上文所列之化合物名稱係根據PerkinElmer ChemDraw 19.1.1.21或21.0.0.28版由結構產生。

在某些實施例中，式（I）化合物選自由以下組成之群組：

及其醫藥學上可接受之鹽。 (ii) 醫藥組合物及使用方法

在另一態樣中，本發明係關於包括治療有效量之式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之載劑的醫藥組合物。

式（ I）化合物、其醫藥學上可接受之鹽及包括其之醫藥組合物可用於治療患有例如與RIPK1活性抑制相關之疾病及病況之各種疾病及病況的個體。舉例而言，在一些實施例中，本發明化合物可用於治療潰瘍性結腸炎。進一步提供用於例如用以治療潰瘍性結腸炎之藥劑中的式（ I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽或包括其之組合物。 (iii) 製備方法

本文進一步提供製備式（ I）化合物及其鹽之例示性方法。參見例如下文方案 1-4及實例。

在某些態樣中，可經由雜芳基與末端炔烴之間的交叉偶合反應製造其中R ¹為H之式（ I）化合物及其鹽（參見例如方案1及2）。

方案1描繪藉由在足以產生式（ I）化合物之偶合條件下使包括末端炔基之式（ A）化合物與包括經離去基LG ¹取代之吡啶基之式（ B）化合物偶合來製造其中R ¹為H之式（ I）化合物或其鹽的方法。在某些實施例中，離去基LG ¹為鹵基（例如氯、溴、碘）或經活化羥基（例如-OTf、-OTs、-OMs或-OBs）。在某些實施例中，偶合條件包括Pd(II)催化劑、視情況選用之配位體及鹼。舉例而言，Pd(II)催化劑可為雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）、氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀(II)（XPhos Pd G2），配位體可為2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos），且鹼可為Cs ₂CO ₃。在其他實施例中，偶合條件包括Pd(0)催化劑、視情況選用之配位體及鹼。舉例而言，Pd(0)催化劑可為雙(三-三級丁基膦)鈀(0)且鹼可為磷酸鉀。在某些實施例中，偶合條件進一步包括例如CuI之銅鹽。

方案2描繪藉由在足以產生式（ I）化合物之偶合條件下使包括離去基LG ²之式（ C）化合物與包括經末端炔基取代之吡啶基之式（ D）化合物偶合來製造其中R ¹為H之式（ I）化合物或其鹽的方法。在某些實施例中，離去基LG ²為鹵基（例如氯、溴、碘）或經活化羥基（例如-OTf、-OTs、-OMs或-OBs）。在某些實施例中，偶合條件包括Pd(II)催化劑、視情況選用之配位體及鹼。舉例而言，Pd(II)催化劑可為雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）、氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀(II)（XPhos Pd G2），配位體可為2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos），且鹼可為Cs ₂CO ₃。在其他實施例中，偶合條件包括Pd(0)催化劑、視情況選用之配位體及鹼。舉例而言，Pd(0)催化劑可為雙(三-三級丁基膦)鈀(0)且鹼可為磷酸鉀。在某些實施例中，偶合條件進一步包括例如CuI之銅鹽。

在某些態樣中，可經由醯胺偶合反應製造式（ I）化合物及其鹽（參見例如方案3）。

方案3描繪藉由在足以產生式（ I）化合物之偶合條件下使包括結合至羰基之離去基LG ³之式（ E）化合物與包括胺基-NHR ^N1之式（ F）化合物偶合來製造其中R ¹為H之式（ I）化合物或其鹽的方法。在某些實施例中，離去基LG ³為鹵基（例如氯、溴、碘）、羥基或經活化羥基（例如-OTf、-OTs、-OMs或-OBs）。在某些實施例中，偶合條件包括醯胺偶合劑及鹼。在某些實施例中，醯胺偶合劑為1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽（HATU）、N,N'-羰基二咪唑（CDI）、2-(1H-苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基銨四氟硼酸鹽（TBTU），在某些實施例中，鹼為 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）或三甲胺（TEA）。

在某些實施例中，可藉由其中-OR ¹羥基經例如磷酸酯基取代之反應製造其中R ¹不為H之式（ I）化合物。

方案4描繪藉由在足以產生其中R ¹為-P(=O)(OR ^P) ₂之化合物之條件下使羥基與含磷劑反應來製造其中R ¹為-P(=O)(OR ^P) ₂之式（ I）化合物或其鹽的方法。在一些實施例中，含磷劑為胺基亞磷酸酯（例如二乙基胺基亞磷酸二-三級丁酯）。方案 1

方案 2

方案 3

方案 4

例證

為了可更全面地理解本揭示案，闡述以下實例。應理解，此等實例僅出於說明之目的且不解釋為以任何方式限制本揭示案。

通篇使用之本領域中熟習此項技術者熟知之常見縮寫包含表A中之縮寫。表A.縮寫

縮寫	定義
NMR	核磁共振
s	單重峰
br s	寬單重峰
d	二重峰
br d	寬二重峰
t	三重峰
br t	寬三重峰
q	四重峰
m	多重峰
br m	寬多重峰
dd	雙二重峰
br dd	寬雙二重峰
ddd	雙雙二重峰
dt	雙三重峰
dtd	雙三二重峰
tt	三重三重峰
min	分鐘
h	小時
mL	毫升
µL	微升
L	升
g	公克
mg	毫克
mmol	毫莫耳
M	莫耳濃度（莫耳/升）
µM	微莫耳濃度
nM	奈莫耳濃度
ppm	百萬分率
HPLC	高壓液相層析法
UPLC®或UHPLC	超高效液相層析法
LC/MS或LCMS	液相層析-質譜法
MS	質譜法
ATP	三磷酸腺苷
BSA	牛血清白蛋白
EDTA	乙二胺四乙酸
DTT	二硫蘇糖醇
FRET	螢光能量轉移
HEPES	(4-(2-羥乙基)-1-哌乙磺酸)
IC ₅₀	半數最大抑制濃度
Boc	三級丁氧基羧基
MOM	甲氧基甲基
PMBM	對甲氧基苯甲基甲基
THP	四氫哌喃基
XPhos	2-二環己基膦基-2,4,6-三異丙基聯苯
XPhos Pd G2	氯(2-二環己基膦基-2´,4´,6´-三異丙基-1,1´-聯苯)[2-(2´-胺基-1,1´-聯苯)]鈀(II)
R _t	滯留時間

分析方法

除非另外說明，否則所有 ¹H NMR資料收集於Varian 400 MHz Mercury增強版, Inova或400-MR儀器上且化學位移以百萬分率（ppm）引述。HPLC（高壓液相層析法）、UPLC（超高效液相層析法）及LC/質譜法（LC/MS）條件係使用如表B中所提供之方法字母進行引用。

表B.
方法	條件
aa	LC/MS：梯度為在1.6分鐘內5-60%移動相B，隨後至2.2分鐘時，60-95%移動相B，且在95%移動相B下保持0.1分鐘（1.0毫升/分鐘流動速率）。移動相A為10 mM乙酸銨（NH ₄OAc），移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）。用於層析之管柱為2.1×30 mm Waters Cortecs C18管柱（1.6 µm粒子）。在質譜法中，偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）偵測以及正/負電噴霧電離。
bb	LC/MS：梯度為在15分鐘內5-95%移動相B（1.0毫升/分鐘流動速率）。移動相A為0.1%甲酸水溶液，移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）。用於層析之管柱為2.1×30 mm Waters X-Select UPLC C18（1.7 µm粒子）。偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）偵測以及正/負電噴霧電離。
cc	LC/MS：梯度為在4分鐘內5-95%移動相B（1.0毫升/分鐘流動速率）。移動相A為0.1%甲酸水溶液，移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）。用於層析之管柱為4.6×30 mm Waters X-Select UPLC C18（2.5 µm粒子）。偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）偵測以及正/負電噴霧電離。
dd	LC/MS：梯度為5-95%移動相B，持續3分鐘（2.5毫升/分鐘流動速率）。移動相A為0.1%銨水溶液，移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）。用於層析之管柱為4.6×30 mm Waters X-Bridge BEH C18（2.5 µm粒子）。偵測方法為UV（254 nm）以及正/負電噴霧電離。
ee	LC/MS：梯度為5-95%移動相B，持續3分鐘（2.5毫升/分鐘流動速率）。移動相A為0.1%甲酸，移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）與0.1%甲酸。用於層析之管柱為4.6×30 mm X-Select CSH C18 XP（2.5 µm粒子）。偵測方法為UV（254 nm）以及正/負電噴霧電離。
ff	LC/MS（梯度為在0.40分鐘內5%移動相B及在0.40-3.00分鐘時5-95%移動相B，在95%移動相B上保持1.00分鐘，及隨後在0.01分鐘內95-5%移動相B，流動速率為1.0毫升/分鐘。移動相A為0.037%三氟乙酸水溶液，移動相B為0.018%三氟乙酸/乙腈。用於層析之管柱為Kinetex C18 50×2.1 mm管柱（5 μm粒子）。偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）偵測以及正電噴霧電離。MS範圍為100-1000。

a	UPLC：梯度為在3分鐘內5-95%移動相B（0.77毫升/分鐘流動速率）。移動相A為0.1%銨水溶液，移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）。用於層析之管柱為2.1×30 mm Waters Acquity BEH C18。偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）以及正/負電噴霧電離。
b	UPLC：梯度為在3分鐘內5-95%移動相B（0.77毫升/分鐘流動速率）。移動相A為0.1%甲酸水溶液，移動相B為HPLC級乙腈（MeCN）與0.1%甲酸。用於層析之管柱為2.1×30 mm Waters Acquity CSH C18。偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）以及正/負電噴霧電離。
c	HPLC：梯度為在0.40分鐘內5%移動相B及在0.40-3.00分鐘時5-95%移動相B，在95%移動相B上保持1分鐘，及隨後在0.01分鐘內95-5%移動相B；流動速率為1.0毫升/分鐘。移動相A為0.037%三氟乙酸水溶液，移動相B為0.018%三氟乙酸/乙腈。用於層析之管柱為Kinetex C18 50×2.1 mm管柱（5 μm粒子）。偵測方法為二極體陣列（DAD）及蒸發光散射（ELSD）偵測以及正電噴霧電離。MS範圍為100-1000。
d	逆相HPLC：用於層析之管柱為Luna-C18 2.0×30 mm（3 μm粒子）。偵測方法為二極體陣列（DAD）。MS模式為正電噴霧電離。MS範圍為100-1000。移動相A為0.037%三氟乙酸（TFA）水溶液，且移動相B為0.018% TFA/HPLC級乙腈。梯度為在2分鐘內5-95%移動相B，在0.01分鐘內0.5%移動相B，5-95%移動相B（0.01-1.00分鐘），95-100%移動相B（1.00-1.80分鐘），在1.81分鐘內5%移動相B，且在5%移動相B下保持0.19分鐘。流動速率為1.0毫升/分鐘（0.00-1.80分鐘）及1.2毫升/分鐘（1.81-2.00分鐘）。

合成中間物 1 號製劑： ( S)-1- 胺基 -3- 苯基丙 -2- 醇

步驟 1 ： ( S)-2- 羥基 -3- 苯基丙醯胺。將亞硫醯氯（397 g，3340 mmol）逐滴添加至經冷卻至約-20℃之甲醇（1.50 L）中。添加( S)-2-羥基-3-苯基丙酸（150 g，903 mmol），且在室溫下攪拌混合物約2小時。將混合物真空濃縮，且將所得粗酸氯化物添加至7 N氨/甲醇溶液（1.50 L，903 mmol）中。將混合物在室溫下攪拌約12小時，之後將混合物真空濃縮，得到標題產物（140 g，產率93%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 2.44（br d, J=3.55 Hz, 1H）, 2.85（dd, J=13.94, 8.68 Hz, 1H）, 3.18（dd, J=13.94, 4.16 Hz, 1H）, 4.20-4.32（m, 1H）, 5.46（br s, 1H）, 6.31（br s, 1H）, 7.15-7.34（m, 5H）。

步驟 2 ： ( S)-1- 胺基 -3- 苯基丙 -2- 醇。在室溫下向( S)-2-羥基-3-苯基丙醯胺（140 g，848 mmol）於四氫呋喃（THF）（1.40 L）中之溶液中逐滴添加硼烷-二甲硫複合物（424 mL，4470 mmol）。一旦添加完成，則將混合物在約70℃下攪拌約12小時。隨後，將混合物冷卻至室溫，小心地用甲醇（20 mL）淬滅，且真空濃縮，得到標題化合物（105 g，產率81%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 2.61（dd, J=12.72, 8.07 Hz, 1H）, 2.75-2.79（m, 2H）, 2.87（dd, J=12.72, 3.42 Hz, 1H）, 3.73-3.82（m, 1H）, 7.18-7.40（m, 5H）。 2 號製劑： ( S)-1-( 甲胺基 )-3- 苯基丙 -2- 醇

步驟 1 ： ( S)-2- 羥基 -3- 苯基丙醯胺。在室溫下向2-羥基-3-苯基丙酸( S)-甲酯（110 g，549 mmol）於甲醇（1.00 L）中之溶液中逐滴添加甲胺（1373 mL，2747 mmol）。一旦添加完成，則將混合物在室溫下攪拌約8小時。將混合物減壓濃縮，得到粗油，隨後將其用石油醚/乙酸乙酯之混合物（10:1；800 mL）濕磨約4小時。藉由真空過濾回收所得產物且在真空下乾燥，得到標題化合物（80 g，73%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 2.81（d, J=5.01 Hz, 3H）, 2.83-2.91（m, 1H）, 3.24（dd, J=13.69, 3.91 Hz, 1H）, 4.29（dd, J=8.56, 3.91 Hz, 1H）, 6.58（br s, 1H）, 7.23-7.30（m, 3H）, 7.31-7.37（m, 2H）。

步驟 2 ： ( S)-1-( 甲胺基 )-3- 苯基丙 -2- 醇。在約5℃下向( S)-2-羥基 -N-甲基-3-苯基丙醯胺（70 g，391 mmol）於四氫呋喃（THF）（700 mL）中之溶液中逐滴添加硼烷-二甲硫複合物（117 mL，1172 mmol）。一旦添加完成，則將混合物在室溫下攪拌約1小時，且隨後將其加熱至約70℃且攪拌約12小時。隨後，將混合物冷卻至約10℃，且逐滴添加甲醇（500 mL），同時維持內部溫度在約10℃至30℃之間。隨後，逐滴添加HCl/甲醇溶液（4M，2 L)且將所得混合物在室溫下攪拌約12小時。將混合物濃縮，且將殘餘物分配在水（400 mL）與二氯甲烷（DCM）（400 mL）之間。將水相用二氯甲烷（DCM）（400 mL）洗滌，且隨後藉由緩慢添加6 N Aq（水性）NaOH將其中和至約pH＝12。用2-甲基四氫呋喃（2-MeTHF）（3 × 400 mL）萃取水溶液。使合併有機相經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物，將其用石油醚（120 mL）濕磨4小時。藉由過濾收集產物且濃縮，得到標題化合物（54.9 g，85%）； ¹H NMR（400 MHz, 甲醇- d ₄ ）δ 2.35（s, 3H）, 2.47-2.60（m, 2H）, 2.71-2.76（m, 2H）, 3.90（dtd, J=8.54, 6.64, 3.53 Hz, 1H）, 7.10-7.32（m, 5H）。 3 號製劑 ： (1 S,2 R )- 3- 胺基 -1- 氟 -1- 苯基丙 -2- 醇

步驟 1 ： (1 R,2 R)-1- 苯基丙烷 -1,2,3- 三醇。向經冷卻至約0℃之桂皮醇（5.58 mL，43.2 mmol）、水（94 mL）、三級丁醇（94 mL）之混合物中添加Sharpless不對稱二羥基化AD-MIX-BETA（62.5 g，43.2 mmol）及甲磺醯胺（6.17 g，64.8 mmol），且將混合物攪拌約16小時。添加10%硫代硫酸鈉水溶液（150 mL）及乙酸乙酯（EtOAc）（125 mL）且攪拌約30分鐘。用EtOAc（2×125 mL）萃取水相。將合併有機相用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-100% EtOAc/庚烷溶離來純化粗材料，得到標題化合物（4.5 g，26.8 mmol，產率61.9%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ ppm 3.21 - 3.30（m, 1 H）3.37 - 3.55（m, 2 H）3.69 - 3.77（m, 1 H）3.79 - 4.05（m, 2 H）4.61（dd, J=6.79, 3.36 Hz, 1 H）7.27（br s, 5 H）。

步驟 2 ： 4- 甲基苯磺酸 (2 R,3 R)-2,3- 二羥基 -3- 苯基丙酯。向(1 R,2 R)-1-苯基丙烷-1,2,3-三醇（4.5 g，26.8 mmol）於甲苯（80 mL）中之混合物中添加氧化二丁基錫（0.133 g，0.535 mmol）。將混合物加熱至回流20分鐘且將混合物冷卻至室溫。冷卻後，將混合物減壓濃縮。添加無水二氯甲烷（DCM）（53.5 mL）、對甲苯磺醯氯（5.10 g，26.8 mmol）及三乙胺（TEA）（3.73 mL，26.8 mmol），且將反應物在室溫下在N ₂下攪拌約16小時。藉由添加水淬滅混合物，且用DCM（3×75 mL）萃取溶液。將合併有機相用水洗滌，乾燥（Na ₂SO ₄）且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-50%乙酸乙酯（EtOAc）/庚烷溶離來純化粗材料，得到標題化合物（5.5 g，17.06 mmol，產率63.8%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 3.81-3.98（m, 2H）, 4.00-4.10（m, 1H）, 4.03-4.09（m, 1H）, 4.10-4.17（m, 1H）, 4.67（br d, J=5.07 Hz, 1H）, 7.16-7.35（m, 8H）, 7.76（d, J=7.94 Hz, 2H）。

步驟 3 ： (1 R,2 R)-3- 疊氮基 -1- 苯基丙烷 -1,2- 二醇。將4-甲基苯磺酸(2 R,3 R)-2,3-二羥基-3-苯基丙酯（5.5 g，17.06 mmol）及疊氮化鈉（2.218 g，34.1 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（85 mL）中之混合物在約80℃下加熱約3小時。將反應混合物冷卻，且隨後分配在EtOAc（250 mL）及水（200 mL）之間。分離各層後，用EtOAc（2×100 mL）萃取水相。將合併有機相用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0%-100% EtOAc/庚烷溶離來純化粗材料，得到標題化合物（2.98 g，90%）； ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 7.37 - 7.21（m, 5H）, 5.37（dd, J= 4.7, 0.9 Hz, 1H）, 5.23（d, J= 5.6 Hz, 1H）, 4.50（t, J= 5.0 Hz, 1H）, 3.77 - 3.67（m, 1H）, 3.12（dd, J= 12.7, 3.3 Hz, 1H）, 2.98（dd, J= 12.7, 7.8 Hz, 1H）。

步驟 4 ： (4 S,5 S)-4-( 疊氮基甲基 )-5- 苯基 -1,3,2- 二氧硫雜環戊烷 2,2- 二氧化物。在約0℃下將亞硫醯氯（2.252 mL，30.8 mmol）添加至(1 R,2 R)-3-疊氮基-1-苯基丙烷-1,2-二醇（2.98 g，15.42 mmol）及吡啶（3.74 mL，46.3 mmol）於二氯甲烷（DCM）（154 mL）中之溶液中，且將混合物在約0℃下攪拌1小時。添加飽和CuSO ₄水溶液（75 mL），且用DCM（3 × 75 mL）萃取混合物。將合併有機層用鹽水洗滌，乾燥（Na ₂SO ₄），過濾且濃縮。將所得材料溶解在乙腈（MeCN）（100 mL）及DCM（100 mL）中，且將溶液冷卻至0℃。添加過碘酸鈉（6.53 g，30.5 mmol）、氯化釕(III)水合物（0.069 g，0.305 mmol）及水（150 mL），且將混合物在0℃下攪拌2小時。添加二乙醚（120 mL），且用水（50 mL）、飽和NaHCO ₃水溶液（2×50 mL）及鹽水（2×50 mL）洗滌混合物。將有機層乾燥（MgSO ₄）且濃縮，得到標題化合物（3.5 g，90%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 7.52 - 7.42（m, 5H）, 5.76（d, J= 8.9 Hz, 1H）, 4.91（ddd, J= 8.7, 4.4, 3.4 Hz, 1H）, 3.79（dd, J= 14.3, 3.3 Hz, 1H）, 3.54（dd, J= 14.3, 4.4 Hz, 1H）。

步驟 5 ： (1 S,2 R)-3- 疊氮基 -1- 氟 -1- 苯基丙 -2- 醇。在約0℃下將已在4Å分子篩上經乾燥之氟化四-N-丁基銨（TBAF）（78 mL，78 mmol）及乙腈（MeCN）（100 mL）之混合物添加至(4 S,5 S)-4-(疊氮基甲基)-5-苯基-1,3,2-二氧硫雜環戊烷2,2-二氧化物（10 g，39.2 mmol）於MeCN（100 mL）中之溶液中。將所得混合物在0℃下攪拌1小時。將反應混合物濃縮，且將所得粗產物溶解在四氫呋喃（THF）（100 mL）中。在0℃下H ₂O（0.776 mL，43.1 mmol）及H ₂SO ₄（2.297 mL，43.1 mmol）。將所得混合物在室溫下攪拌約12小時。用乙酸乙酯（EtOAc）（150 mL×2）萃取所得混合物。將有機相用鹽水（75 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥且濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-100% EtOAc/石油醚溶離來純化粗材料，得到標題化合物（50 g，35%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ ppm: 2.00（d, J=5.14 Hz, 1 H）3.53（dd, J=5.01, 1.22 Hz, 2 H）4.02 - 4.11（m, 1 H）5.27 - 5.52（m, 1 H）7.37 - 7.46（m, 5 H）。

步驟 6 ： (1 S,2 R )- 3- 胺基 -1- 氟 -1- 苯基丙 -2- 醇。向配備有3向氣密活栓之100 mL圓底燒瓶中裝入(1S,2R)-3-疊氮基-1-氟-1-苯基丙-2-醇（0.684 g，3.50 mmol）及林德拉催化劑（Lindlar Catalyst）（鈀，5 wt %於碳酸鈣上，染鉛毒）（0.373 g，0.175 mmol）/甲醇（20 mL）。將所得懸浮液在氫氣（氣球）氛圍下在室溫下攪拌隔夜。使懸浮液經由矽藻土墊過濾，用甲醇沖洗，且將濾液減壓濃縮，得到標題化合物（0.55 g，3.25 mmol，產率93%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 7.46 - 7.26（m, 5H）, 5.40（dd, J= 46.8, 5.6 Hz, 1H）, 3.88 - 3.76（m, 1H）, 2.99 - 2.81（m, 2H）, 1.78（br s, 3H）。 4 號製劑： (S)-1-(3- 氟苯基 )-3-( 甲胺基 ) 丙 -2- 醇

步驟 1 ： (S)-3-(3- 氟苯基 )-2- 羥基丙酸。在約0℃下將NaNO ₂（2.26 g，32.8 mmol）於H ₂O（21.6 mL）中之溶液逐滴添加至(S)-2-胺基-3-(3-氟苯基)丙酸（2.0 g，10.92 mmol）於H ₂O（50 mL）及乙酸（AcOH）（15 mL）中之經攪拌溶液中。將混合物升溫至室溫且攪拌約20小時。逐滴添加甲胺（2 M於四氫呋喃（THF）中，22 mL，43.7 mmol）且將混合物在室溫下攪拌約1小時。隨後，將混合物真空濃縮以移除THF，且將所得水性混合物萃取至乙酸乙酯（EtOAc）（3×30 mL）中。將合併有機層用飽和NaCl水溶液（30 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥且真空濃縮，得到標題化合物（20.11 g，產率100%）； ¹H NMR（500 MHz, 氯仿- d）δ 7.32 - 7.26（m, 1H）, 7.09 - 6.95（m, 3H）, 4.53（dd, J= 7.1, 4.2 Hz, 1H）, 3.21（dd, J= 14.1, 4.2 Hz, 1H）, 3.01（dd, J= 14.1, 7.0 Hz, 1H）。

步驟 2 ： (S)-3-(3- 氟苯基 )-2- 羥基 -N- 甲基丙醯胺。在約-20℃下將亞硫醯氯（2.87 mL，39.3 mmol）逐滴添加至甲醇（10 mL）中，且添加(S)-3-(3-氟苯基)-2-羥基丙酸（2.01 g，10.91 mmol）於甲醇（5.00 mL）中之溶液。將混合物在室溫下攪拌約2小時。將混合物真空濃縮且將殘餘物溶解在甲胺（33%於乙醇中，14 mL，109 mmol）中且在室溫下攪拌約2小時。真空移除溶劑，且藉由矽膠急驟層析法（0-10%甲醇/DCM）純化殘餘物，得到標題化合物（1.67 g，產率70%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.15分鐘；MS m/z198（M+H） ⁺。

步驟 3 ： (S)-1-(3- 氟苯基 )-3-( 甲胺基 ) 丙 -2- 醇。將(S)-3-(3-氟苯基)-2-羥基-N-甲基丙醯胺（1.67 g，8.47 mmol）於四氫呋喃（THF）（45 mL）中之溶液加熱至約65℃，且添加硼烷二甲硫複合物（BH ₃•SMe ₂）（2.4 mL，25.4 mmol）。將所得混合物攪拌約3小時。將反應混合物冷卻至室溫且經由逐滴添加甲醇（15 mL）淬滅，且真空移除溶劑。將殘餘物裝載至強陽離子交換（SCX）管柱上且用甲醇（100 mL）洗滌。用0.7 M NH ₃/甲醇（100 mL）溶離產物，且真空移除溶劑，得到標題化合物（999 mg，61%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 0.32分鐘；MS m/z184（M+H） ⁺。 5 號製劑： 3- 溴 -6,7- 二氫 -4 H- 吡唑并 [5,1- c][1,4]

步驟 1 ： 2-((4- 溴 -1-((2-( 三甲基甲矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 基 ) 甲氧基 ) 乙酸乙酯。將4-溴-1 H-吡唑-5-甲酸甲酯（10.0 g，48.8 mmol）分批添加至氫化鈉（60%於礦物油中）（2.05 g，51.2 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（200 mL）中之懸浮液中，在約0℃下攪拌。將所得懸浮液在約0℃下攪拌約15分鐘，此時逐滴添加2-(三甲基矽基)乙氧基甲基氯化物（10.4 mL，58.5 mmol）（Me =甲基）。將所得溶液在約0℃下攪拌約1小時。將反應物用冰水（250 mL）淬滅且用乙酸乙酯（EtOAc）（3 x 100 mL）萃取。將合併有機相用鹽水（250 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且減壓濃縮。將所得產物混合物溶解在四氫呋喃（THF）（50.0 mL）中且逐滴添加至在約0℃下經冷卻之氫化鋁鋰（LAH）（1.37 g，36.1 mmol）於THF（150 mL）中之經攪拌混合物中。將所得懸浮液在約0℃下攪拌約2小時。藉由小心添加水（1.5 mL）、接著添加5 N NaOH水溶液（1.5 mL）及更多水（3 mL）來在0℃下淬滅反應混合物。用二乙醚（100 mL）稀釋混合物，添加MgSO ₄（約25 g）且將懸浮液攪拌約30分鐘。使反應混合物經由矽藻土墊過濾，用EtOAc沖洗。將濾液濃縮，且藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-50% EtOAc/庚烷溶離來純化殘餘物，得到產物混合物（10.7 g）。將混合物溶解在THF（174 mL）中，添加溴乙酸乙酯（6.11 g，36.6 mmol），且將溶液冷卻至約0℃。添加氫化鈉（60%於礦物油中）（1.46 g，36.6 mmol）且將所得懸浮液在約0℃下攪拌約3小時。繼續在室溫下攪拌約16小時，之後將反應物冷卻至約0℃且用水（約50 mL）淬滅。用EtOAc（3 × 75 mL）萃取混合物，且將合併有機相用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，且減壓濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-50% EtOAc/庚烷溶離來純化粗材料，得到標題化合物（7.76 g，產率56.7%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 7.48（s, 1 H）, 5.51 - 5.66（m, 2 H）, 4.76（s, 2 H）, 4.23（q, J=7.21 Hz, 2 H）, 4.03 - 4.12（m, 2 H）, 3.51 - 3.64（m, 2 H）, 1.30（t, J=7.09 Hz, 3 H）, 0.82 - 0.96（m, 2 H）, 0.02（s, 9 H）。

步驟 2 ： 2-((4- 溴 -1-((2-( 三甲基矽基 ) 乙氧基 ) 甲基 )-1 H- 吡唑 -3- 基 ) 甲氧基 ) 乙醇。向在冰浴中經冷卻之氫化鋰鋁（LAH）（0.562 g，14.8 mmol）於四氫呋喃（THF）（80 mL）中之懸浮液中添加2-((4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-基)甲氧基)乙酸乙酯（7.76 g，19.73 mmol）於THF（20 mL）中之溶液，且將所得溶液攪拌約20分鐘。添加水（約0.5 mL），接著添加5 N NaOH水溶液（0.5 mL）、額外水（約1 mL）及二乙醚（50 mL）。將混合物攪拌約10分鐘；添加MgSO ₄（約20 g）且將懸浮液攪拌30分鐘。使懸浮液經由矽藻土墊過濾，將其用乙酸乙酯（EtOAc）洗滌。將合併濾液減壓濃縮，得到標題化合物（6.83 g，產率99%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 7.59（s, 1 H）, 5.37（s, 2 H）, 4.60（s, 2 H）, 3.71 - 3.77（m, 2 H）, 3.63 - 3.67（m, 2 H）, 3.52 - 3.60（m, 2 H）, 2.37（br t, J=6.11 Hz, 1 H）, 0.85 - 0.97（m, 2 H）, 0.03 - 0.01（m, 9 H）。

步驟 3 ： 2-((4- 溴 -1 H- 吡唑 -3- 基 ) 甲氧基 ) 乙醇。用濃HCl水溶液（39 mL，78 mmol）處理2-((4-溴-1-((2-(三甲基矽基)乙氧基)甲基)-1 H-吡唑-3-基)甲氧基)乙醇（6.83 g，19.4 mmol）於乙醇（100 mL）中之溶液，且在約60℃下加熱溶液。約20小時之後，將反應物冷卻至室溫且隨後減壓濃縮。添加飽和NaHCO ₃水溶液（75 mL）且將混合物攪拌約20分鐘。用乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 50 mL）萃取混合物，且將合併有機相用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，且減壓濃縮，得到標題化合物（3.87 g，產率90%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 7.52（s, 1 H）, 4.62（s, 2 H）, 3.77 - 3.81（m, 2 H）, 3.65 - 3.68（m, 2 H）。

步驟 4 ： 3- 溴 -6,7- 二氫 -4 H- 吡唑并 [5,1- c][1,4]

。在約50℃下用經由注射器逐滴添加之N,N,N',N'-四甲基偶氮基二甲醯胺（0.389 g，2.26 mmol）處理2-((4-溴-1 H-吡唑-3-基)甲氧基)乙醇（0.250 g，1.13 mmol）及三-N-丁基膦（0.558 mL，2.26 mmol）於甲苯（12 mL）中之溶液。將所得溶液在室溫下攪拌約20分鐘，之後用水（1 mL）淬滅反應物。將反應混合物減壓濃縮，且藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-100%乙酸乙酯（EtOAc）/庚烷溶離來純化殘餘物，得到標題化合物（0.103 g，產率45%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 7.46（s, 1 H）, 4.76（s, 2 H）, 4.14 - 4.20（m, 2 H）, 4.07 - 4.13（m, 2 H）。 6 號製劑： (S)-5- 氯 -6-( 二氟甲基 )-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基菸鹼醯胺

步驟 1 ： 5- 氯 -6-( 羥甲基 ) 菸鹼酸甲酯。將3-氯吡啶-2,5-二甲酸二甲酯（2.0 g，8.71 mmol）溶解在四氫呋喃（THF) /甲醇（1:2，60 mL）中且冷卻至約0℃。添加CaCl ₂(7.8 g，70 mmol）且將反應混合物攪拌約30分鐘。逐份添加硼氫化鈉（NaBH ₄）（0.832 g，22 mmol）且將反應物在約0℃下攪拌約3小時。將反應物用二氯甲烷（DCM）（50 mL）稀釋且傾倒至冰冷H ₂O（100 mL）中。分離各層且將水層萃取至DCM（2 × 25 mL）中。將合併有機相用飽和NaCl水溶液（2 × 25 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥且真空移除溶劑，得到標題化合物（1.0 g，產率54%）。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 9.00（d, J= 1.8 Hz, 1H）, 8.29（d, J= 1.8 Hz, 1H）, 5.42（t, J= 6.0 Hz, 1H）, 4.71（d, J= 6.1 Hz, 2H）, 3.91（s, 3H）。

步驟 2 ： 5- 溴 -6- 甲醯基菸鹼酸甲酯。向5-溴-6-(羥甲基)菸鹼酸甲酯（0.723 g，2.94 mmol）於二氯甲烷（DCM）（10 mL）中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷（Dess-Martin periodinane）(1.87 g，4.41 mmol），且將反應混合物在室溫下攪拌約18小時。向此中添加飽和NaHCO ₃水溶液/1M Na ₂S ₂O ₃水溶液之混合物（1:1，50 mL）且攪拌雙相混合物直至澄清。分離各相，且用二氯甲烷（DCM）（2 × 50 mL）洗滌水相。使合併有機相經MgSO ₄乾燥且真空移除溶劑，得到標題化合物（0.623 g，產率83%）。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 10.16（s, 1H）, 9.18（d, J= 1.8 Hz, 1H）, 8.48（d, J= 1.5 Hz 1H）, 3.95（s, 3H）。

步驟 3 ： 5- 氯 -6-( 二氟甲基 ) 菸鹼酸甲酯。向5-氯-6-甲醯基菸鹼酸甲酯（0.623 mg，3.12 mmol）於氯仿（30 mL）中之經攪拌溶液中添加Deoxo-Fluor ^®（50%於甲苯中，2.9 mL，7.80 mmol），且將混合物在約45℃下攪拌約24小時。經由添加飽和NaHCO ₃水溶液（10 mL）淬滅反應物，用H ₂O（10 mL）稀釋且萃取至二氯甲烷（DCM）（3 × 10 mL）中。使合併有機層經MgSO ₄乾燥，過濾且真空移除溶劑。經由矽膠急驟管柱層析法，用0-60%乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷溶離來純化殘餘物，得到標題化合物（0.433 g，產率60%）。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 9.10（d, J= 1.8 Hz, 1H）, 8.50（d t, J= 1.7, 0.8 Hz, 1H）, 7.28（t, J= 52.9 Hz, 1H）, 3.94（s, 3H）。

步驟 4 ： 5- 氯 -6-( 二氟甲基 ) 菸鹼酸。將5-氯-6-(二氟甲基)菸鹼酸甲酯（0.200 g，0.71 mmol）懸浮於甲醇（2 mL）中，且添加2M NaOH水溶液（1 mL，2.00 mmol）。將反應混合物在室溫下攪拌約3小時。逐滴添加1M HCl水溶液直至pH為2，且將混合物萃取至乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 5 mL）中。使合併有機相經MgSO ₄乾燥，且真空移除溶劑，得到標題化合物（0.141 g，產率91%）。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 14.03（s, 1H）, 9.08（d, J= 1.7 Hz, 1H）, 8.46（d, J= 1.8 Hz, 1H）, 7.27（t, J= 53.0 Hz, 1H）。

步驟 5 ： (S)-5- 氯 -6-( 二氟甲基 )-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基菸鹼醯胺。將5-氯-6-(二氟甲基)菸鹼酸（0.141 g，0.68 mmol）、(S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（0.123 mg，0.75 mmol）（2號製劑）、4-甲基

啉（0.187 mL，1.70 mmol）、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC.HCl）（195 mg，1.02 mmol）及1-羥基苯并三唑（HOBt）水合物（156 mg，1.02 mmol）之混合物溶解在 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（5 mL）中且在室溫下攪拌約18小時。將反應混合物用乙酸乙酯（EtOAc）（10 mL）稀釋且依序用飽和NH ₄Cl水溶液（10 mL）、飽和NaHCO ₃水溶液（10 mL）及飽和NaCl水溶液（3 × 10 mL）洗滌。使有機相經MgSO ₄乾燥且真空移除溶劑。粗殘餘物不經進一步純化即使用。LC/MS（表B，方法dd）R _t = 1.89分鐘；MS m/z：355（M+H) ⁺。 7 號製劑： 4- 溴 -2-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-2H-1,2,3- 三唑

步驟 1 ： 4,5- 二溴 -2-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-2H-1,2,3- 三唑。向4,5-二溴-2H-1,2,3-三唑（500 mg，2.20 mmol）及3-碘氧雜環丁烷（0.213 mL，2.42 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（20 mL）中之混合物中添加Cs ₂CO ₃（2.1 g，6.45 mmol）。將混合物在約120℃下攪拌約18小時。將混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯（EtOAc）（200 mL）稀釋且用H ₂O（3 × 100 mL）、飽和NaCl水溶液（2 × 200 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法（0-100% EtOAc/異己烷）來純化材料，得到標題化合物（529 mg，產率81%）； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 5.90 - 5.81（m, 1H）, 4.97（t, J= 7.4 Hz, 2H）, 4.88（t, J = 6.5 Hz, 2H）。

步驟 2 ： 4- 溴 -2-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-2H-1,2,3- 三唑。向小瓶中添加4,5-二溴-2-(氧雜環丁烷-3-基)-2H-1,2,3-三唑（250 mg，0.88 mmol）及四氫呋喃（THF）（4 mL）。將混合物冷卻至約-30℃。逐滴添加異丙基氯化鎂（ iPrMgCl）（2M於THF中，1.3 mL，2.65 mmol），且經約3小時將混合物升溫至室溫。用飽和NH ₄Cl水溶液（20 mL）淬滅混合物，且將水層萃取至乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 20 mL）中。將有機層用飽和NaCl水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且真空蒸發溶劑，得到標題化合物（125 mg，產率56%）； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.11（s, 1H）, 5.90 - 5.82（m, 1H）, 5.01 - 4.95（m, 2H）, 4.91 - 4.86（m, 2H）。 8 號製劑 ： ( S)-5- 溴 - N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基菸鹼醯 胺

向5-溴菸鹼酸（7.52 g，37.2 mmol）於二氯甲烷（DCM）（130 mL）及 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（200 µL）中之經攪拌懸浮液中添加草醯氯於二氯甲烷（DCM）中之溶液（2M；37.2 mL，74.5 mmol）。將混合物在室溫下攪拌約2小時，之後將其真空濃縮。將殘餘物溶解在四氫呋喃（THF）（150 mL）中，且在冰浴中冷卻所得混合物，之後添加( S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（6.15 g，37.2 mmol）及 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（19.5 mL，112 mmol）於THF（20 mL）中之混合物。將反應混合物在室溫下攪拌約1小時，之後添加乙酸乙酯（EtOAc）（50 mL）、甲基三級丁醚（MTBE）（50 mL）及NaHCO ₃（100 mL）。分離各層，且真空濃縮有機物。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-100% EtOAc/庚烷之梯度溶離來純化所得粗材料，得到標題化合物（11 g，產率85%）；在90℃下之 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.70（d, J= 2.3 Hz, 1H）, 8.54（d, J= 1.9 Hz, 1H）, 8.01（t, J= 2.0 Hz, 1H）, 7.21（d t, J= 31.1, 7.5 Hz, 5H）, 4.76（s, 1H）, 4.02（s, 1H）, 3.27（d, J= 21.5 Hz, 2H）, 3.00（s, 3H）, 2.65（s, 2H）。 9 號製劑 ： (S)-5- 乙炔基 -N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基菸鹼醯 胺

步驟 1 ： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基 -5-(( 三甲基矽基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺。將(S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（4.0 g，8.93 mmol）（8號製劑）、乙炔基三甲基矽烷（2.5 mL，17.87 mmol）、雙(三苯基膦)-鈀(II)二氯化物（Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂）（0.753 g，1.07 mmol）、CuI（0.340 g，1.79 mmol）及Et ₃N（8.7 mL，62.5 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（60 mL）中之混合物以N ₂充氣，隨後加熱至約90℃達約2小時。將混合物冷卻至室溫，經由矽藻土過濾且用乙酸乙酯（EtOAc）（200 mL）洗滌。將濾液用EtOAc（200 mL）及H ₂O (600 mL）稀釋，且分離各層。將水層萃取至EtOAc（2 × 300 mL）中，且將合併有機層用飽和NaCl水溶液（2 × 300 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾，且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法（0-100% EtOAc/異己烷）來純化所得材料，得到標題化合物（3.3 g，產率91%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 2.35分鐘；MS m/z367（M+H) ⁺。

步驟 2 ： (S)-5- 乙炔基 -N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基菸鹼醯胺。向(S)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基-5-((三甲基矽基)乙炔基)菸鹼醯胺（3.3 g，9.00 mmol）於四氫呋喃（THF）（30 mL）中之經攪拌溶液中添加四-N-丁基氟化銨（TBAF）（1 M於THF中）（11.70 mL，11.70 mmol），且將混合物在室溫下攪拌約1小時。將混合物溶解在乙酸乙酯（EtOAc）（150 mL）中且用H ₂O（150 mL）及飽和NaCl水溶液（150 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥，過濾且真空濃縮，得到棕色油，藉由矽膠急驟層析法（0-100% EtOAc/異己烷）將其純化，得到標題化合物（2.3 g，產率76%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.65分鐘；MS m/z295（M+H) ⁺。 10 號製劑： 4- 乙炔基 -1- 甲基 -1 H- 吡唑

向4-碘-1-甲基-1 H-吡唑（20 g，96 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（120 mL）中之溶液中添加乙炔基三甲基矽烷（13.2 g，135 mmol）、碘化銅(I)（1.282 g，6.73 mmol）、三苯基膦（PPh ₃）（5.04 g，19.23 mmol）、二異丙胺（12.6 g，125 mmol）及乙酸鈀(II)（Pd(OAc) ₂）（1.30 g，5.77 mmol）。將混合物在N ₂下在約60℃下攪拌約1小時。冷卻至室溫之後，將混合物傾倒至水（200 mL）中且用乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 200 mL）萃取。將有機層合併且用鹽水（200 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且減壓濃縮。將殘餘物用甲基三級丁醚（MTBE）濕磨，且將所得懸浮液過濾以移除固體。用甲基三級丁醚（MTBE）沖洗固體，且將合併濾液真空濃縮。將所得粗產物溶解在甲醇（200 mL）中，添加K ₂CO ₃（1.55 g，11.2 mmol），且將混合物在室溫下攪拌約1小時。將此混合物傾倒至水（200 mL）中且用EtOAc（3 × 100 mL）萃取。將有機層合併且用鹽水（100 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析法，用0-25% EtOAc/石油醚溶離來純化所得粗材料，得到標題化合物（5.0 g，產率42%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 3.00（s, 1H）, 3.89（s, 3H）, 7.49-7.54（m, 1H）, 7.60（s, 1H）。 11 號製劑： 6- 甲基 -5-((1- 甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸

將4-乙炔基-1-甲基-1 H-吡唑（10號製劑）（1.175 g，9.96 mmol）、5-溴-6-甲基菸鹼酸（2.080 g，9.63 mmol）、甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II）（XPhos Pd G3）（0.060 g，0.071 mmol）及Cs ₂CO ₃（3.760 g，11.54 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（20 mL）中之混合物以N ₂充氣約5分鐘。將反應混合物在N ₂下在約70℃下攪拌約3小時。將反應混合物冷卻至室溫，添加水（40 mL），且用1 M HCl（水溶液）（~20 mL）將混合物酸化至pH ~2。過濾沈澱物，且隨後將固體用水（30 mL）洗滌且在真空烘箱中乾燥，得到標題化合物（2.18 g，產率89%）。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 13.45（s, 1H）, 8.87（d, J= 2.1 Hz, 1H）, 8.17（d, J= 2.2 Hz, 1H）, 8.15（s, 1H）, 7.75（d, J= 0.7 Hz, 1H）, 3.87（s, 3H）, 2.68（s, 3H）。 12 號製劑： 5-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸

將5-溴菸鹼酸（1.59 g，7.87 mmol）、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（0.375 g，0.79 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（0.102 g，0.39 mmol）及Cs ₂CO ₃（3.1 g，9.45 mmol）添加至燒瓶中且溶解在 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（30 mL）中。添加含4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑（10號製劑）（1.0 g，9.45 mmol）之DMF (5 mL），且將反應混合物在約70℃下攪拌約3小時。將混合物冷卻至室溫且真空移除溶劑。用H ₂O（60 mL）及乙酸乙酯（EtOAc）（60 mL）稀釋殘餘物。分離各層，且用1M HCl水溶液將水相酸化至pH 2。將所得固體過濾且乾燥，得到標題化合物（1.66 g，產率90%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.42分鐘；MS m/z228（M+H) ⁺。 13 號製劑： 5-((1-( 二氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸

步驟 1 ： 1-( 二氟甲基 )-4-(( 三甲基矽基 ) 乙炔基 )-1H- 吡唑。將1-(二氟甲基)-4-碘-1 H-吡唑（10.0 g，41.0 mmol）、乙炔基三甲基矽烷（6.04 g，61.5 mmol）及甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)（XPhos Pd G3）（0.173 g，0.205 mmol）於四氫呋喃（THF）（100 mL）中之懸浮液以N ₂充氣約15分鐘。添加二異丙胺（11.68 mL，82 mmol）及碘化銅(I)（0.020 g，0.10 mmol）。將所得混合物在約65℃下攪拌約12小時。將混合物用甲基三級丁醚（MTBE）/乙酸乙酯（EtOAc）（1:1；50 mL）稀釋且用水（100 mL）及飽和NaCl（100 mL）洗滌。使有機層經Na ₂SO ₄乾燥，過濾且濃縮。藉由在約160℃下進行真空蒸餾來蒸餾粗材料，得到標題化合物（4.0 g，產率44%）； ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 0.21-0.28（m, 9H）, 6.94-7.36（m, 1H）, 7.69-7.77（m, 1H）, 7.95（s, 1H）。

步驟 2 ： 5-((1-( 二氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸。將1-(二氟甲基)-4-((三甲基矽基)乙炔基)-1 H-吡唑（73.8 g，317 mmol）、5-溴菸鹼酸（40 g，198 mmol）、Cs ₂CO ₃(77 g，238 mmol）及甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)（XPhos Pd G3）（1.676 g，1.980 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（500 mL）中之混合物在N ₂充氣下攪拌約10分鐘，之後添加四丁基氟化銨（218 mL，218 mmol），且將混合物在N ₂下在約60℃下攪拌約12小時。將混合物減壓濃縮且用水（500 mL）稀釋。將水相用甲基三級丁醚（3 × 250 mL）萃取，且隨後用5N HCl水溶液將水層調節至約3之pH。經由真空過濾收集所得固體且真空乾燥，得到標題化合物（47.5 g，產率91%）； ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ = 14.40 - 12.47（m, 1H）, 9.04（d, J= 2.0 Hz, 1H）, 8.92（d, J= 2.5 Hz, 1H）, 8.73（s, 1H）, 8.31（t, J= 2.3 Hz, 1H）, 8.12（s, 1H）, 8.02 - 7.70（m, 1H）。 14 號製劑： 5-((2- 甲基 -2H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸

步驟 1 ： 2- 甲基 -4-(( 三甲基矽基 ) 乙炔基 )-2 H-1,2,3- 三唑。將4-溴-2-甲基-2 H-1,2,3-三唑（500 mg，3.09 mmol）、乙炔基三甲基矽烷（1.283 mL，9.26 mmol）、三乙胺（TEA）（0.860 mL，6.17 mmol）、碘化銅(I)（29.4 mg，0.154 mmol）及肆(三苯基膦)鈀(0)（Pd(PPh ₃) ₄）（178 mg，0.154 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（6 mL）中之混合物用N ₂脫氣5分鐘，隨後加熱至約100℃達約1小時。將混合物真空濃縮且藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-50%產率之乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷溶離來純化，得到標題化合物（438 mg，產率63%）； ¹H NMR（500 MHz, 氯仿- d）δ 7.63（s, 1H）, 4.17（s, 3H）, 0.25（s, 9H）。

步驟 2 ： 5-((2- 甲基 -2 H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸甲酯。向含有5-溴菸鹼酸甲酯（1.142 g，5.29 mmol）、2-甲基-4-((三甲基矽基)乙炔基)-2 H-1,2,3-三唑（1.517 g，6.35 mmol）、三乙胺（TEA）（5.16 mL，37.0 mmol）、碘化銅(I)（0.101 g，0.529 mmol）及雙(三苯基膦)鈀(II)二氯化物（Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂）（0.371 g，0.529 mmol）之小瓶中添加 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（15 mL），且將混合物用氮氣脫氣5分鐘，隨後添加含1 M四-N-丁基氟化銨（TBAF）之四氫呋喃（THF）（7.93 mL，7.93 mmol），且將混合物脫氣30秒，隨後加熱至100℃達1小時。將混合物濃縮，隨後溶解在乙酸乙酯（EtOAc）（100 mL）中且用飽和碳酸氫鈉（水溶液）（100 mL）洗滌。用EtOAc（2 × 50 mL）進一步萃取水層，且用水（100 mL）洗滌合併有機層。使用Na ₂SO ₄乾燥有機層，過濾且濃縮，得到棕色油，藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-60% EtOAc/異己烷溶離來將其純化，得到標題化合物（0.978 g，產率69%）； ¹H NMR（500 MHz, 氯仿- d）δ 9.17（d, J= 2.1 Hz, 1H）, 8.92（d, J= 2.1 Hz, 1H）, 8.43（t, J= 2.1 Hz, 1H）, 7.76（s, 1H）, 4.24（s, 3H）, 3.98（s, 3H）。

步驟 3 ： 5-((2- 甲基 -2H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸。向含有5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸甲酯（54 g，223 mmol）/四氫呋喃（THF）（540 mL）及水（90 mL）之燒瓶中添加NaOH（13.37 g，334 mmol），且將混合物在室溫下攪拌3小時。將混合物濃縮，用1 M HCl（水溶液）（~10 mL）酸化至pH 2。將所得沈澱物過濾且在真空烘箱中乾燥隔夜，得到標題化合物（49 g，產率91%）； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 9.14（s, 1H）, 9.06（s, 1H）, 8.37（s, 1H）, 8.15（s, 1H）, 4.70 br（s, 1H）, 4.21（s, 3H）。 15 號製劑： 5-((1-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸

將三乙胺（TEA）（0.745 mL，5.34 mmol）、碘化銅(I)（0.051 g，0.267 mmol）、肆(三苯基膦)鈀(0)（Pd(PPh ₃) ₄）（0.309 g，0.267 mmol）、4-碘-1-(三氟甲基)-1 H-吡唑（1 g，2.67 mmol）及乙炔基三甲基矽烷（1.110 mL，8.02 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（8 mL）中之混合物以N ₂充氣5分鐘，且隨後加熱至約100℃達約3小時。將混合物冷卻至室溫，真空濃縮且經由矽膠塞使用50%乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷之沖洗液進行過濾。將濾液濃縮且將殘餘物溶解在乙腈（MeCN）（30 mL）中，且添加CsF（0.848 g，5.58 mmol）、5-溴菸鹼酸甲酯（1.005 g，4.65 mmol）、二環己基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦（0.222 g，0.465 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（0.060 g，0.233 mmol）及Cs ₂CO ₃（2.275 g，6.98 mmol）。將混合物以N ₂充氣且在N ₂下在約70℃下攪拌約16小時。將反應物冷卻至室溫且將混合物在減壓下吸附至矽藻土（~25 g）中，之後藉由矽膠急驟管柱層析法，用10-20% EtOAc/己烷溶離來純化，獲得5-((1-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸甲酯（530 mg）。將此材料溶解在四氫呋喃（THF）（8.0 mL）中，向其中添加LiOH（43 mg，1.8 mmol）於水（2.0 mL）中之溶液，且將混合物在室溫下攪拌約16小時。將反應混合物減壓濃縮且用1 M鹽酸酸化剩餘溶液。藉由過濾收集所得沈澱物且用水（5 mL）及己烷（10 mL）洗滌，且隨後真空乾燥，獲得標題化合物（479 mg，產率94%）。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 9.02（s, 1H）, 8.94（d, J= 1.9 Hz, 1H）, 8.61（d, J= 2.2 Hz, 1H）, 8.28（t, J= 0.9 Hz, 1H）, 8.20（t, J= 2.1 Hz, 1H）。 16 號製劑： 5-((1- 環丙基 -1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼酸

將4-溴-1-環丙基-1 H-吡唑（660 mg，3.53 mmol）及乙炔基三甲基矽烷（1.8 mL，12.99 mmol）於乙腈（MeCN）（4 mL）中之溶液添加至碘化銅(I)（16 mg，0.084 mmol）、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（205 mg，0.430 mmol）、PdCl ₂(MeCN) ₂（60 mg，0.231 mmol）及 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（1.5 mL，8.59 mmol）於乙腈（MeCN）（8 mL）中之N ₂充氣溶液中且加熱至70℃。約2小時之後，添加藉由N ₂充氣進行脫氣之二環己基(2',4',6'-三異丙基-[1,1'-聯苯]-2-基)膦（XPhos）（205 mg，0.430 mmol）、PdCl ₂(MeCN) ₂（60 mg，0.231 mmol）及Cs ₂CO ₃（1150 mg，3.53 mmol）於乙腈（MeCN）（3 mL）中之混合物，接著添加乙炔基三甲基矽烷（1.8 mL，12.99 mmol），且將混合物在約70℃下加熱約16小時。將溶液冷卻至室溫且經由矽膠用1:1己烷/乙酸乙酯（EtOAc）之洗滌液（20 mL）進行過濾，且將濾液減壓濃縮。將粗材料溶解在乙腈（MeCN）（12.5 mL）及CsF（536 mg，3.53 mmol）中，添加5-溴菸鹼酸甲酯（635 mg，2.94 mmol）、X-Phos（140 mg，0.294 mmol）、PdCl ₂(MeCN) ₂（38.1 mg，0.147 mmol）及Cs ₂CO ₃(1437 mg，4.41 mmol）。用N ₂充氣使反應混合物脫氣，且隨後在約70℃下加熱約4小時。將反應物減壓濃縮至矽藻土（~15 mL）上且藉由矽膠急驟管柱層析法，用20-70% EtOAc/己烷溶離來純化，獲得所期望的甲酯（564 mg）。將含LiOH（76 mg，3.17 mmol）之水（4 mL）添加至粗甲酯（564 mg，2.110 mmol）於四氫呋喃（THF）（12 mL）中之溶液中且將其在室溫下攪拌2小時，隨後減壓濃縮，獲得標題化合物（545 mg，產率70%）； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.87（d, J= 1.9 Hz, 1H）, 8.53（d, J= 2.2 Hz, 1H）, 8.22（s, 1H）, 8.12（t, J= 2.0 Hz, 1H）, 7.72（s, 1H）, 3.77 (t t, J= 7.4, 3.9 Hz, 1H）, 1.08（t, J= 3.6 Hz, 2H）, 0.98（dd, J= 7.4, 2.5 Hz, 2H）。未觀測到酸質子。 17 號製劑 ： 5- 溴 - N-((2 R,3 S)-3- 氟 -2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基菸鹼醯胺

步驟 1 ： 5- 溴 - N-((2 R,3 S)-3- 氟 -2- 羥基 -3- 苯丙基 ) 菸鹼醯胺。向配備有橡膠隔片及氮氣入口針之50 mL圓底燒瓶中裝入5-溴菸鹼酸（0.322 g，1.60 mmol）、(1 S,2 R)-3-胺基-1-氟-1-苯基丙-2-醇（3號製劑）（0.270 g，1.60 mmol）（5號製劑)、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC.HCl）（0.459 g，2.39 mmol）、1-羥基苯并三唑（HOBt）水合物（0.367 g，2.39 mmol）、 N,N-二異丙基乙胺（DIEA）（0.836 mL，4.79 mmol）及 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（15 mL）。將所得溶液在室溫下攪拌約16小時。將反應混合物分配在乙酸乙酯（50 mL）與飽和NaHCO ₃（50 mL）之間。在分離各層之後，用乙酸乙酯（EtOAc）（2 × 25 mL）萃取水層。將合併有機層用鹽水洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法，用0-100% EtOAc/庚烷溶離來純化粗殘餘物，得到標題化合物（0.44 g，產率78%）；LC/MS（表B，方法aa）R _t = 1.02分鐘；MS m/z：353及355（M+H) ⁺。

步驟 2 ： 5- 溴 - N-((2 R,3 S)-3- 氟 -3- 苯基 -2-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 丙基 )- 菸鹼醯胺 .向圓底燒瓶中裝入5-溴- N-((2 R,3 S)-3-氟-2-羥基-3-苯丙基)菸鹼醯胺（0.44 g，1.25 mmol）、4-二甲胺基吡啶（DMAP）（0.076 g，0.623 mmol）、三乙胺（TEA）（1.04 mL，7.47 mmol）、三乙基氯矽烷（SiEt ₃-Cl）（0.316 mL，1.87 mmol）及二氯甲烷（DCM）（10 mL）。將反應物在0℃下攪拌約3小時。將反應物與飽和NaHCO ₃水溶液（10 mL）及水（10 mL）以及乙酸乙酯（EtOAc）（50 mL）一起分配。將有機層分離且用EtOAc（20 mL）萃取水層。將合併有機層用鹽水（20 mL）洗滌，經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮，得到標題化合物（0.63 g，產率100%）；LC/MS（表B，方法aa）R _t = 2.04分鐘；MS m/z：467及469（M+H) ⁺。

步驟 3 ： 5- 溴 - N-((2 R,3 S)-3- 氟 -3- 苯基 -2-(( 三乙基矽基 ) 氧基 ) 丙基 )- N- 甲基菸鹼醯胺。在0℃下用含60%氫化鈉之礦物油（0.032 g，0.807 mmol）處理5-溴- N-((2 R,3 S)-3-氟-3-苯基-2-((三乙基矽基)氧基)-丙基)菸鹼醯胺（0.410 g，0.807 mmol）及碘甲烷（MeI)（0.101 mL，1.61 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（10 mL）中之溶液。將所得懸浮液在0℃下攪拌約1小時。將反應物用飽和NH ₄Cl（20 mL）淬滅，用水稀釋且用乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 30 mL）萃取。使有機層經硫酸鈉乾燥，過濾且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法，用0-100% EtOAc/庚烷溶離來純化粗殘餘物，得到標題化合物（0.32 g，產率82%）；LC/MS（表B，方法aa）R _t = 2.05分鐘；MS m/z：481及483（M+H) ⁺。

步驟 4 ： 5- 溴 - N-((2 R,3 S)-3- 氟 -2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基菸鹼醯胺。在0℃下用含1 M四-N-丁基氟化銨之THF（0.73 mL，0.73 mmol）處理5-溴- N-((2 R,3 S)-3-氟-3-苯基-2-((三乙基矽基)氧基)-丙基)- N-甲基-菸鹼醯胺（0.32 g，0.66 mmol）及四氫呋喃（THF）（10 mL）之溶液。將反應物在0℃下攪拌約2小時。在0℃下藉由添加飽和NH ₄Cl（20 mL）淬滅反應物。用乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 20 mL）萃取混合物。將合併有機層用鹽水（75 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法，用0-100% EtOAc/庚烷溶離來純化粗殘餘物，得到標題化合物（0.29 g，產率95%）；LC/MS（表B，方法aa）R _t = 1.07分鐘；MS m/z：367及369（M+H) ⁺。 18 號製劑： (S)-5- 溴 -N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-6- 甲氧基 -N- 甲基菸鹼醯胺

向5-溴-6-甲氧基菸鹼酸（0.300 g，1.29 mmol）及(S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（0.214 g，1.29 mmol）於二氯甲烷（DCM）（13 mL）中之經攪拌溶液中添加 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（0.677 mL，3.88 mmol），接著添加1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽（HATU）（0.737 g，1.94 mmol），且將混合物在室溫下攪拌約18小時。將混合物濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-100%乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷）純化，得到標題化合物（0.66 g，產率94%）；LC/MS（表B，方法b）R _t= 1.99分鐘；MS m/z379及381（M+H) ⁺。 19 號製劑 ： (S)-5- 溴 -N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N,6- 二甲基菸鹼醯 胺

向5-溴-6-甲基菸鹼酸（1.0 g，4.66 mmol）、1-羥基苯并三唑（HOBt）水合物（324 mg，2.12 mmol）及1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC.HCl）（1.0 g，5.51 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（10 mL）中之溶液中添加 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（0.740 mL，4.24 mmol），將溶液攪拌約5分鐘，且隨後添加(S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（700 mg，4.24 mmol）。將反應物在室溫下攪拌約20小時且真空濃縮溶劑。將殘餘物分配在乙酸乙酯（EtOAc）（50 mL）與H ₂O（50 mL）之間，分離各層，且將水相萃取至EtOAc（2 × 50 mL）中。隨後，將合併有機物用飽和NaCl水溶液（2 × 50 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法（0-100%乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷）純化粗製物，得到標題化合物（411 mg，產率24%）；LC/MS（表B，方法a）R _t= 1.79分鐘；MS m/z364及366（M+H) ⁺。 20 號製劑： (S)-5- 溴 -N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-6- 甲基菸鹼醯 胺

將5-溴-6-甲基菸鹼酸（2.7 g，13.2 mmol）、(S)-1-胺基-3-苯基丙-2-醇（2 g，13 mmol）、1-(3-二甲胺基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC.HCl）（3.3 g，17.2 mmol）及1-羥基苯并三唑（HOBt）水合物（2.6 g，17.2 mmol）之混合物溶解在 N, N-二甲基甲醯胺（DMF）中。一次性添加 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（5.8 mL，33.1 mmol）。將所得溶液在室溫下攪拌約16小時。添加飽和NaHCO ₃水溶液（150 mL）及乙酸乙酯（EtOAc）（150 mL），且分離各相。用EtOAc（3 × 25 mL）萃取水相。將合併有機相用鹽水（2 × 100 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，過濾，且減壓濃縮。藉由矽膠管柱層析法，用0-100% EtOAc/庚烷溶離來純化殘餘物，得到標題化合物（2.3 g，產率49%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ 2.55（s, 3H）, 2.62-2.70（m, 1H）, 2.72-2.80（m, 1H）, 3.25（ddd, J= 13.63, 8.07, 5.20 Hz, 1H）, 3.45（br s, 1H）, 3.62（ddd, J= 13.82, 6.36, 3.18 Hz, 1H）, 3.93-4.00（m, 1H）, 7.02-7.12（m, 3H）, 7.16-7.23（m, 2H）, 8.08（d, J= 1.83 Hz, 1H）, 8.62（d, J= 1.71 Hz, 1H）。 21 號製劑： 5- 乙炔基 -2- 甲基

唑

向2-甲基

唑-5-甲醛（0.10 g，0.94 mmol）及K ₂CO ₃（0.26 g，1.87 mmol）於甲醇（MeOH）（3 mL）中之經攪拌溶液中添加含二甲基(1-二偶氮基-2-側氧基丙基)膦酸酯（0.21 g，0.94 mmol）之MeOH（1 mL）。將混合物在室溫下攪拌約18小時且隨後經由矽藻土用MeOH（10 mL）沖洗進行過濾。將溶液小心地真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-50% EtOAc/異己烷）來純化殘餘物，得到標題化合物（0.17 g，產率52%）； ¹H NMR（500 MHz, 氯仿- d）δ 7.17（s, 1H）, 3.56（s, 1H）, 2.47（s, 3H）。 合成實例 1 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基 -5-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺

將(S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（0.45 g，1.29 mmol）（8號製劑）、4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑（10號製劑）（0.31 g，2.92 mmol）、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（60 mg，0.13 mmol）、雙(乙腈)-二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（20 mg，0.08 mmol）及Cs ₂CO ₃（0.51 g，1.57 mmol）溶解在乙腈（MeCN）（21 mL）中，且將混合物以N ₂充氣10分鐘。隨後，將所得混合物在約70℃下攪拌約3小時。將混合物冷卻且經由矽藻土用乙酸乙酯（EtOAc）（60 mL）徹底沖洗進行過濾。真空移除溶劑，且藉由矽膠急驟層析法（0-10%甲醇/ EtOAc）純化殘餘物，得到標題化合物（0.25 g，產率49%）。LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.77分鐘；MS m/z375（M+H) ⁺； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.65（d, J= 2.0 Hz, 1H）, 8.50（d, J= 2.0 Hz, 1H）, 8.04（s, 1H）, 7.82（s, 1H）, 7.68（s, 1H）, 7.29 - 7.12（m, 5H）, 4.75（br s, 1H）, 4.02（br s, 1H）, 3.88（s, 3H）, 3.36 - 3.26（m, 2H）, 3.00（s, 3H）, 2.70 - 2.61（m, 2H）。 2 號實例： ( S)-5-((1-( 二氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )- N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基菸鹼醯胺

將5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸（13號製劑）（95 g，361 mmol）、 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（189 mL，1083 mmol）及1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽（HATU）（151 g，397 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（1.00 L）中之混合物在室溫下攪拌約0.5小時。隨後，添加( S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（59.6 g，361 mmol），且將混合物在室溫下攪拌約12小時。將混合物傾倒至水（2.00 L）中且用乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 800 mL）萃取。將有機相用鹽水（1.50 L）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥且減壓濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-100% EtOAc/石油醚溶離來純化所得材料，得到標題化合物（98 g，產率66%）；LC/MS （表B，方法aa）R _t = 1.21分鐘；MS m/z：411（M+H) ⁺； ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ = 8.78 - 8.66（m, 2H）, 8.62 - 8.50（m, 1H）, 8.12（d, J= 6.4 Hz, 1H）, 8.03 - 7.69（m, 2H）, 7.30 - 7.07（m, 5H）, 5.17 - 4.95（m, 1H）, 4.06（br d, J= 2.9 Hz, 1H）, 3.89（br d, J= 5.4 Hz, 1H）, 3.58（br dd, J= 3.9, 13.2 Hz, 1H）, 3.41 - 3.35（m, 1H）, 3.20 - 3.11（m, 1H）, 2.98（br d, J= 14.7 Hz, 3H）, 2.81 - 2.72（m, 1H）, 2.71 - 2.63（m, 1H）。 3 號實例： ( S)- N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基 -5-((2- 甲基 -2 H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺

向含有5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸（14號製劑）（23 g，101 mmol）/四氫呋喃（THF）（115 mL）之燒瓶中添加N,N'-羰基二咪唑（CDI）（24.51 g，151 mmol），且將混合物在室溫下攪拌約5小時。將反應物添加至( S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（27.8 g，151 mmol）及三乙胺（TEA）（28.1 mL，202 mmol）於四氫呋喃（THF）（115 mL）中之溶液中。將反應物在25℃下攪拌2小時。藉由LC/MS完成反應。將反應物用水（50 mL）稀釋且用乙酸乙酯（EtOAc）（300 mL）萃取。將有機層用15%檸檬酸（300 mL）、鹽水（500 mL）洗滌，乾燥，過濾且濃縮，得到殘餘物，藉由矽膠急驟層析法石油醚:EtOAc =100:1~0:1將其純化，得到標題化合物（70 g，183 mmol，產率產率91%）。（表B，方法bb）R _t = 4.24分鐘；MS m/z：376（M+H) ⁺ ； ¹H NMR（500 MHz 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.75（s, 1H）, 8.58（s, 1H）, 8.03（s, 1H）, 7.94（s, 1H）, 7.33 - 7.09（m, 5H）, 4.84 - 4.68（寬m, 1H）, 4.21（s, 3H）, 4.10 - 3.96（寬m, 1H）, 3.53 - 3.19（寬m, 2H）, 3.01（s, 3H）, 2.75 - 2.59（寬m, 2H）。 4 號實例： ( S)- N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基 -5-((1-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯 胺

將2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異釒尿四氟硼酸鹽（TBTU）（859 mg，2.67 mmol）添加至( S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（441 mg，2.67 mmol）、5-((1-(三氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸（15號製劑）（500 mg，1.778 mmol）及 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（0.932 mL，5.33 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（12.4 mL）中之溶液中，在室溫下攪拌約36小時。添加乙酸乙酯（EtOAc）（10 mL），且將混合物用水（2 × 10 mL）及鹽水（10 mL）洗滌，經硫酸鎂乾燥且隨後減壓濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用50-100%乙酸乙酯（EtOAc）/己烷溶離來純化粗產物，得到標題化合物（655 mg，產率78%）；（表B，方法aa）R _t = 1.38分鐘；MS m/z：429（M+H) ⁺ ； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 9.05（d, J= 9.7 Hz, 1H）, 8.87 - 8.50（m, 2H）, 8.30（d, J= 8.0 Hz, 1H）, 8.05 - 7.81（m, 2H）, 7.39 - 7.01（m, 5H）, 5.07（dd, J= 76.1, 5.6 Hz, 1H）, 4.07（d, J= 8.9 Hz, 0.5H）, 3.90（d, J= 8.8 Hz, 0.5H）, 3.58（dd, J= 13.3, 4.1 Hz, 0.5H）, 3.42 - 3.33（m, 0.5H）, 3.16（dd, J= 6.3, 3.6 Hz, 1H）, 2.99（d, J= 18.2 Hz, 3H）, 2.74（s, 0.5H）, 2.72 - 2.61（m, 0.5H）。 5 號實例： ( S)- N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基 -5-((1-( 三氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯 胺

將1-[雙(二甲胺基)亞甲基]-1H-1,2,3-三唑并[4,5-b]吡啶鎓3-氧化物六氟磷酸鹽（HATU）（882 mg，2.319 mmol）、5-((1-環丙基-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸（16號製劑）（534 mg，2.109 mmol）、( S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（2號製劑）（383 mg，2.319 mmol）及 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（1.105 mL，6.33 mmol）於二氯甲烷（DCM）（20 mL）及四氫呋喃（THF）（10 mL）中之溶液且在室溫下攪拌約16小時。隨後，添加額外 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（1.105 mL，6.33 mmol）、( S)-1-(甲胺基)-3-苯基丙-2-醇（160 mg，0.968 mmol）及HATU（882 mg，2.319 mmol），且將混合物在室溫下攪拌2小時。隨後，將反應混合物用DCM（50 mL）稀釋，用飽和氯化銨水溶液（2 × 50 mL）洗滌。使有機部分經硫酸鎂乾燥，過濾且減壓濃縮。藉由矽膠急驟管柱層析法，用0-6%甲醇/二氯甲烷（DCM）溶離來純化所得粗材料，獲得標題化合物（460 mg，產率52%）。（表B，方法cc）R _t = 1.89分鐘；MS m/z：401（M+H) ⁺ ； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.67（dd, J= 31.1, 2.0 Hz, 1H）, 8.53（dd, J= 33.8, 2.0 Hz, 1H）, 8.25（d, J= 8.5 Hz, 1H）, 7.88 (dt, J= 53.3, 2.1 Hz, 1H）, 7.74（d, J= 7.5 Hz, 1H）, 7.29（d, J= 4.5 Hz, 2H）, 7.23 - 7.08（m, 2H）, 5.06（dd, J= 70.9, 5.6 Hz, 1H）, 4.10 - 3.84（m, 1H）, 3.78 (dh, J= 6.9, 3.3 Hz, 1H）, 3.69 - 3.51（m, 1H）, 3.43 - 3.33（m, 1H）, 3.21 - 3.09（m, 2H）, 2.98（d, J= 18.2 Hz, 3H）, 2.80 - 2.62（m, 1H）, 1.13 - 1.04（m, 2H）, 1.04 - 0.96（m, 2H）。 6 號實例 .( S)-5-((1- 環丁基 -1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )- N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基菸鹼醯 胺

向配備有隔蓋、裝備有氮氣入口針之7 mL反應小瓶中裝入含( S)-5-乙炔基- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺（9號製劑）（0.140 g，0.476 mmol）、4-溴-1-環丁基-1 H-吡唑（0.096 g，0.476 mmol）、磷酸鉀（0.121 g，0.571 mmol）及雙(三-三級丁基膦)鈀(0)（0.012 g，0.024 mmol）之四氫呋喃（THF）（2 mL）。將反應混合物以氮氣充氣約20分鐘且隨後在約50℃下加熱約10小時。將反應物冷卻至室溫。使反應物經由矽藻土墊過濾，隨後用乙酸乙酯（EtOAc）沖洗濾餅。將濾液真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法，用0-100% EtOAc/庚烷、接著0-5%甲醇/EtOAc溶離來純化粗殘餘物。將溶離液真空濃縮，得到標題化合物（0.056 g，產率28%）；LC/MS（表B，方法aa）R _t = 1.33分鐘；MS m/z：415（M+H) ⁺； ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.67（d, J= 24.6 Hz, 1H）, 8.52（d, J= 26.4 Hz, 1H）, 8.27（d, J= 6.6 Hz, 1H）, 7.96 - 7.71（m, 2H）, 7.34 - 7.05（m, 5H）, 5.16-4.92（m, 1H）, 4.11-3.83（m, 1H）, 3.23 - 3.07（m, 1H）, 2.98（d, J= 14.1 Hz, 3H）, 2.79 - 2.62（m, 1H）, 2.48-2.43（m, 7H）, 1.88 - 1.71（m, 2H）。 7 號實例： N -((2 R,3 S)-3- 氟 -2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基 -5-((1- 甲基 -1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯 胺

向配備有隔蓋且裝備有氮氣入口針之20 mL反應小瓶中裝入4-乙炔基-1-甲基-1 H-吡唑（10號製劑）（0.105 g，0.987 mmol）、5-溴- N-((2 R,3 S)-3-氟-2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（17號製劑）（0.29 g，0.79 mmol）、氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯苯)]鈀(II)（XPhos Pd G2）（0.031 g，0.039 mmol）及碳酸銫（0.322 g，0.987 mmol）。用氮氣清洗反應物。添加乙腈（MeCN）（3.95 mL）且將混合物以氮氣充氣。將反應混合物在約65℃下加熱約3小時。將反應物冷卻至室溫。使反應物經由矽藻土墊過濾，隨後用乙酸乙酯（EtOAc）沖洗濾餅。將濾液真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法，用0-100% EtOAc/庚烷溶離來純化粗殘餘物。真空乾燥材料，得到標題化合物（0.139 g，產率45%）；LC/MS（表B，方法aa）R _t = 1.04分鐘；MS m/z：393（M+H) ⁺； ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.66（d, J= 35.0 Hz, 1H）, 8.49（d, J= 30.1 Hz, 1H）, 8.13（d, J= 5.5 Hz, 1H）, 7.84（d, J= 39.3 Hz, 1H）, 7.73（s, 1H）, 7.48-7.23（m, 5H）, 5.67 - 5.16（m, 2H）, 4.31 - 4.00（m, 1H）, 3.87（s, 3H）, 3.39-3.19（m, 2H）, 2.98（d, J= 20.7 Hz, 3H）。 8 號實例： ( S)-5-((6,7- 二氫 -4 H- 吡唑并 [5,1- c][1,4]

-3- 基 ) 乙炔基 )- N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )- N- 甲基菸鹼醯 胺

向反應小瓶中裝入( S)-5-乙炔基- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基菸鹼醯胺（9號製劑）（0.192 g，0.652 mmol）、3-溴-6,7-二氫-4 H-吡唑并[5,1- c][1,4]

（5號製劑）（0.301 g，0.652 mmol）、K ₃PO ₄（0.166 g，0.783 mmol）、雙(三-三級丁基膦)鈀(0)（Pd(P-tBu ₃) ₂）（0.017 g，0.033 mmol）及四氫呋喃（THF）（2.2 mL）。將反應混合物以N ₂充氣約20分鐘，隨後加熱至約50℃達約20小時。將反應混合物冷卻至室溫且經由矽藻土墊過濾。用乙酸乙酯（EtOAc）沖洗濾餅，且將合併濾液真空濃縮。經由急驟層析法（0%-100%乙酸乙酯（EtOAc）/庚烷，隨後0至5%甲醇/EtOAc）純化粗分離物，獲得標題產物（0.12 g，產率44%）。LC/MS（表B，方法aa）R _t = 1.04分鐘；MS m/z：417（M+H) ⁺。 ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）（存在旋轉異構體）δ：8.74 - 8.61（m, 1H）, 8.60 - 8.46（m, 1H）, 7.97 - 7.81（m, 1H）, 7.81 - 7.73（m, 1H）, 7.33 - 7.25（m, 2H）, 7.25 - 7.06（m, 3H）, 5.16 - 4.88（m, 3H）, 4.18 - 3.83（m, 5H）, 3.62 - 3.33（m, 1H）, 3.21 - 3.10（m, 1H）, 3.03 - 2.93（m, 3H）, 2.81 - 2.52（m, 2H）。 9 號實例： (S)-6-( 二氟甲基 )-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基 -5-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺

將(S)-5-氯-6-(二氟甲基)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（100 mg，0.28 mmol）（6號製劑）、4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑（10號製劑）（30 mg，0.28 mmol）、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（27 mg，0.06 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（7.31 mg，0.03 mmol）及Cs ₂CO ₃（184 mg，0.56 mmol）溶解在乙腈（MeCN）（2 mL）中，且將反應混合物以N ₂充氣10分鐘。隨後，將所得混合物在約70℃下攪拌約3小時。將反應物冷卻，且真空移除溶劑。使殘餘物進行矽膠急驟管柱層析法，用0-10%甲醇/二氯甲烷（DCM）溶離，得到標題化合物（54 mg，產率43%）。LC/MS（表B，方法dd）R _t = 1.85分鐘；MS m/z：425（M+H) ⁺； ¹H NMR (500 MHz, 90℃, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.59（s, 1H）, 8.09（s, 1H）, 7.98（s, 1H）, 7.72（s, 1H）, 7.36 - 6.97（m, 6H）, 4.80（br s, 1H）, 4.04（s, 1H）, 3.90（br s, 3H）, 3.30（br s, 1H）, 3.02（br s, 4H) 2.71（br s, 2H）。 10 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基 -5-((2-( 氧雜環丁烷 -3- 基 )-2H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯 胺

向小瓶中添加(S)-5-乙炔基-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（9號製劑）（0.120 g，0.41 mmol）、4-溴-2-(氧雜環丁烷-3-基)-2H-1,2,3-三唑（7號製劑）（0.125 g，0.61 mmol）、Cs ₂CO ₃（0.398 g，1.22 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（5 mg，0.02 mmol）及2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（19 mg，0.04 mmol），且將小瓶抽空且回填N ₂（× 3）。向小瓶中添加乙腈（MeCN）（3.2 mL）且將混合物以N ₂充氣約5分鐘，隨後加熱至約70℃達約18小時。將混合物冷卻至室溫，經由矽藻土過濾且用乙酸乙酯（EtOAc）（40 mL）洗滌。將溶液真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-5%甲醇/二氯甲烷（DCM））純化兩次。將固體用甲基三級丁醚（MTBE）濕磨，隨後乾燥，得到標題化合物（13 mg，產率7%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.77分鐘；MS m/z418（M+H) ⁺； ¹H NMR (500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.78（s, 1H）, 8.61（s, 1H）, 8.20（s, 1H）, 7.98（s, 1H）, 7.30 - 7.11（m, 5H）, 5.93 - 5.86（m, 1H）, 5.08 - 5.03（m, 2H）, 5.00 - 4.96（m, 2H）, 4.83 - 4.71（m, 1H）, 4.11 - 3.97（m, 1H）, 3.45 - 3.24（m, 2H）, 3.02（s, 3H）, 2.76 - 2.60（m, 2H）。 11 號實例： (S)-5-((5- 環丙基 -1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基菸鹼醯胺

向小瓶中添加(S)-5-乙炔基-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（9號製劑）（60 mg，0.20 mmol）、4-溴-5-環丙基-1-甲基-1H-吡唑（82 mg，0.41 mmol）、Cs ₂CO ₃（199 mg，0.61 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（5 mg，0.019 mmol）及2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（19 mg，0.04 mmol），且將小瓶抽空且回填N ₂（× 3）。向小瓶中添加乙腈（MeCN）（2 mL），且將混合物以N ₂充氣約5分鐘，隨後加熱至約70℃達約4小時。將混合物經由矽藻土用乙酸乙酯（EtOAc）（10 mL）沖洗進行過濾。將溶液真空濃縮且經由矽膠急驟層析法（0-100%乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷）純化，得到標題化合物（16 mg，產率18%）；LC/MS（表B，方法b）R _t= 1.21分鐘；MS m/z415（M+H) ⁺； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.63（d, J= 2.0 Hz, 1H）, 8.50（d, J= 2.0 Hz, 1H）, 7.80（d, J= 2.1 Hz, 1H）, 7.53（s, 1H）, 7.27 - 7.13（m, 5H）, 4.76（br s, 1H）, 4.08 - 4.02（m, 1H）, 3.86（s, 3H）, 3.44 - 3.35（m, 2H）, 3.01（s, 3H）, 2.67 - 2.62（m, 2H）, 1.97（ddd, J= 13.8, 8.1, 5.7 Hz, 1H）, 1.13 - 1.04（m, 4H）。 12 號實例： (S)-N-(3-(3- 氟苯基 )-2- 羥丙基 )-N- 甲基 -5-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺

在室溫下將2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異釒尿四氟硼酸鹽（TBTU）（127 mg，0.393 mmol）添加至(S)-1-(3-氟苯基)-3-(甲胺基)丙-2-醇（4號製劑）（60 mg，0.327 mmol）、5-((1-甲基-1H-吡唑-4-基)乙炔基)菸鹼酸（12號製劑）（74.4 mg，0.327 mmol）及 N, N-二異丙基乙胺（DIEA）（0.172 mL，0.982 mmol）於 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（2 mL）中之溶液中，且攪拌約18小時。用乙酸乙酯（EtOAc）（10 mL）及飽和NH ₄Cl水溶液（10 mL）稀釋混合物，且分離各層。將有機層用飽和NaCl水溶液（3 × 10 mL）洗滌，經MgSO ₄乾燥且真空濃縮。藉由矽膠急驟層析法（0-10%甲醇/二氯甲烷（DCM））、接著逆相層析法（15-75%乙腈（MeCN）/H ₂O（+ 0.1%碳酸氫銨））純化粗材料，得到標題化合物（72 mg，產率53%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.74分鐘；MS m/z393（M+H) ⁺。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.66（d, J = 2.0 Hz, 1H）, 8.52（d, J= 2.0 Hz, 1H）, 8.04（s, 1H）, 7.84（s, 1H）, 7.68（s, 1H）, 7.28（q, J= 7.5 Hz, 1H）, 7.04（s, 2H）, 6.99 - 6.94（m, 1H）, 4.82（br s, 1H）, 4.04（br s, 1H）, 3.89（s, 3H）, 3.44 - 3.27（m, 2H）, 3.01（s, 3H）, 2.76 - 2.61（m, 2H）。 13 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-6- 甲氧基 -N- 甲基 -5-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯 胺

向燒瓶中添加(S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-6-甲氧基-N-甲基菸鹼醯胺（18號製劑）（0.220 g，0.464 mmol）、Cs ₂CO ₃（0.189 g，0.580 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（6 mg，0.023 mmol）、XPhos（0.022 g，0.046 mmol）及乙腈（MeCN）（4 mL）。將反應物以N ₂充氣10分鐘，且添加含4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑（10號製劑）（0.075 g，0.707 mmol）之乙腈（MeCN）（1 mL）。隨後，將反應物加熱至約75℃達約30分鐘。將混合物真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-100%乙酸乙酯（EtOAc）/異己烷）純化，得到無色油。將油溶解在甲醇（1 mL）及乙酸（AcOH）（0.2 mL）中且裝載至強陽離子交換（SCX）墊上。用甲醇（20 mL）、接著0.7 M NH ₃/甲醇（20 mL）洗滌墊。將鹼性溶液濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-10%甲醇/二氯甲烷（DCM））純化，得到標題化合物（25 mg，產率13%）；LC/MS（表B，方法b）R _t= 1.86分鐘；MS m/z405（M+H) ⁺； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.16（d, J= 2.3 Hz, 1H）, 8.00（s, 1H）, 7.78（d, J= 2.3 Hz, 1H）, 7.64（s, 1H）, 7.28 - 7.12（m, 5H）, 4.71（d, J= 5.6 Hz, 1H）, 3.99（s, 3H）, 3.87（s, 3H）, 3.39（s, 1H）, 3.32（dd, J= 13.8, 8.4 Hz, 1H）, 3.01（s, 3H）, 2.70 - 2.60（m, 2H）。 14 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N,6- 二甲基 -5-((1- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯 胺

將(S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N,6-二甲基菸鹼醯胺（19號製劑）（130 mg，0.358 mmol）、4-乙炔基-1-甲基-1H-吡唑（10號製劑）（76 mg，0.716 mmol）、2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（17 mg，0.036 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（5 mg，0.018 mmol）及Cs ₂CO ₃（140 mg，0.429 mmol）溶解在乙腈（MeCN）（6 mL）中，且將混合物以N ₂充氣約10分鐘。隨後，將混合物在約70℃下攪拌約3小時。將反應物冷卻且經由矽藻土墊用乙酸乙酯（EtOAc）（20 mL）沖洗進行過濾。真空移除溶劑，且將殘餘物預吸附至矽藻土中且藉由矽膠急驟層析法（0-10%甲醇/二氯甲烷（DCM））純化，得到標題化合物（106 mg，產率75%）；LC/MS（表B，方法a）R _t= 1.73分鐘；MS m/z389（M+H) ⁺。 ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.38（d, J= 2.1 Hz, 1H）, 8.04（s, 1H）, 7.74（d, J= 2.1 Hz, 1H）, 7.67（s, 1H）, 7.27 - 7.13（m, 5H）, 4.81 - 4.61（m, 1H）, 4.08 - 3.97（m, 1H）, 3.88（s, 3H）, 3.49 - 3.23（m, 2H）, 3.00（s, 3H）, 2.71 - 2.66（m, 2H）, 2.64（s, 3H）。 15 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基 -5-((2- 甲基噻唑 -5- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺

向小瓶中添加5-溴-2-甲基噻唑（181 mg，1.02 mmol）、(S)-5-乙炔基-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（9號製劑）（150 mg，0.51 mmol）、Cs ₂CO ₃（498 mg，1.53 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（9.3 mg，0.04 mmol）及2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（24.3 mg，0.05 mmol），且將小瓶抽空且回填N ₂（× 3）。向小瓶中添加乙腈（5 mL）且將混合物以N ₂充氣約5分鐘，隨後加熱至約85℃達約3小時。將混合物經由矽藻土用乙酸乙酯（EtOAc）（40 mL）沖洗進行過濾。將溶液真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-5%甲醇/二氯甲烷（DCM））純化，得到殘餘物，將其用甲基三級丁醚（MTBE）濕磨且乾燥，得到標題化合物（50 mg，產率24%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.89分鐘；MS m/z392（M+H) ⁺； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.73（s, 1H）, 8.57（s, 1H）, 7.96（s, 1H）, 7.92（s, 1H）, 7.30 - 7.10（m, 5H）, 4.82 - 4.70（寬m, 1H）, 4.10 - 3.95（寬m, 1H）, 3.51 - 3.21（寬m, 2H）, 3.01（s, 3H）, 2.71（s, 3H）, 2.73 - 2.58（寬m, 2H）。 16 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-6- 甲基 -5-( 噻唑 -5- 基乙炔基 ) 菸鹼醯胺

向小瓶中裝入5-乙炔基噻唑（30.6 mg，0.28 mmol）、(S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-6-甲基菸鹼醯胺（20號製劑）（70 mg，0.20 mmol）及CuI（7.6 mg，0.04 mmol），且將小瓶抽空且回填N ₂（× 3）。添加 N,N-二甲基甲醯胺（DMF）（3 mL）及Et ₃N（498 mg，1.53 mmol）且將反應混合物以N ₂充氣約15分鐘。添加雙(三苯基膦)鈀(II)二氯化物（Pd(PPh ₃) ₂Cl ₂）（16.9 mg，0.02 mmol）且將反應混合物加熱至約90℃達約18小時。將混合物經由矽藻土用乙酸乙酯（EtOAc）（10 mL）沖洗進行過濾。將溶液真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（0-10%甲醇/二氯甲烷（DCM））來純化殘餘物，得到標題化合物（17 mg，產率21%）；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 2.03分鐘；MS m/z378（M+H) ⁺； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 9.23（s, 1H）, 8.88（d, J = 2.3 Hz, 1H）, 8.64（t, J = 5.7 Hz, 1H）, 8.33（d, J = 2.3 Hz, 1H）, 8.31（s, 1H）, 7.31 - 7.21（m, 4H）, 7.21 - 7.14（m, 1H）, 4.92（d, J = 5.4 Hz, 1H）, 3.92 - 3.84（m, 1H）, 3.38 - 3.29（m, 1H）, 3.25 - 3.18（m, 1H）, 2.76（dd, J = 13.6, 5.0 Hz, 1H）, 2.69（s, 3H）, 2.65（dd, J = 13.7, 7.6 Hz, 1H）。 17 號實例： (S)-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基 -5-((2- 甲基

唑 -5- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺

將(S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-6-甲基菸鹼醯胺（20號製劑）（318 mg，0.91 mmol）、Cs ₂CO ₃（365 mg，1.1 mmol）、雙(乙腈)二氯鈀(II)（Pd(MeCN) ₂Cl ₂）（12 mg，0.05 mmol）及2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯苯（X-Phos）（43 mg，0.09 mmol）溶解在MeCN (9 mL）中，且添加5-乙炔基-2-甲基

唑（21號製劑）（0.19 g，0.91 mmol）於MeCN (1 mL）中之溶液。將反應混合物以N ₂充氣約5分鐘，且隨後加熱至約60℃達約3小時。使混合物經由矽藻土過濾，真空濃縮溶劑，且藉由矽膠急驟層析法（0-10% MeOH/DCM）純化所得殘餘物，得到標題化合物（25 mg，7%)；LC/MS（表B，方法ee）R _t= 1.92分鐘；MS m/z376（M+H) ⁺； ¹H NMR（500 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ，在90℃下）δ 8.79 - 8.72（m, 1H）, 8.59（d, J = 2.1 Hz, 1H）, 7.94（s, 1H）, 7.49（s, 1H）, 7.21 (dt, J = 31.1, 7.3 Hz, 5H）, 4.76（br s, 1H）, 4.02（br s, 1H）, 3.30（br s, 2H）, 3.01（s, 3H）, 2.64（d, J = 9.1 Hz, 2H）, 2.48（s, 3H）。 18 及 19 號實例： (1-(5-((1-( 二氟甲基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )-N- 甲基菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基 ) 磷酸 ( S)- 二 - 三級丁酯（ 18 號實例）及二氫磷酸 (S)-1-(5-((1-( 二氟甲基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )-N- 甲基菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基酯（ 19 號實例）

在20℃下在N ₂下向( S)-5-((1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（2號實例）（500 mg，1.22 mmol）於 N-甲基-2-吡咯啶酮（1000 mL）中之溶液中一次性添加二乙基胺基亞磷酸二-三級丁酯（304 mg，1.22 mmol）及1 H-四唑（10.8 mL，4.87 mmol）。將混合物在40℃下攪拌3小時。在0℃下將過氧化氫（5.0 mL，49 mmol）添加至溶液中，且將混合物再攪拌2小時。將混合物傾倒至飽和Na ₂SO ₃（75 mL）中且用乙酸乙酯（EtOAc）（3 × 100 mL）萃取。將有機相用鹽水（100 mL）洗滌，經Na ₂SO ₄乾燥，減壓濃縮，得到粗磷酸三級丁酯，對其進行矽膠層析（石油醚:乙酸乙酯=1:1-1:4)，得到(1-(5-((1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基)磷酸( S)-二-三級丁酯（ 18 號實例）（384 mg，0.64 mmol，產率52%）。LC/MS（表B，方法aa）R _t = 1,73分鐘；MS m/z：545.20 (M-tBu) ⁺； ¹H NMR（400 MHz, DMSO- d ₆ ）δ 8.76 - 8.40（m, 3H）, 8.15 - 7.60（m, 3H）, 7.27-7.01（m, 5H）, 4.78-4.46（br m, 1H）, 3.75-2.72（m, 7H）, 1.50-1.18（m, 18H）。tBu =三級丁基；Et =乙基。

向燒瓶中裝入(1-(5-((1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基)磷酸( S)-二-三級丁酯（ 18 號實例）（381 mg，.632 mmol）、二氯甲烷（DCM）（5 mL）及三氟乙酸（TFA）（0.61 mL，7.9 mmol），且在室溫下攪拌大致19小時。將混合物減壓濃縮，隨後經由逆相液相層析法（Atlantis ^®Prep T3 Phenomenex 5 μm 19 × 50 mm管柱，5至95乙腈（MeCN）:水（甲酸緩衝劑），在1毫升/分鐘下）純化，得到標題化合物 19 號實例（230 mg，0.47 mmol，產率74%）。LC/MS（表B，方法ff）R _t = 1.96分鐘；MS m/z：491.0（M+H) ⁺； ¹H NMR（400 MHz, DMSO- d ₆ ）δ 8.78 - 8.69（m, 1H）, 8.65 - 8.57（m, 1H）, 8.44（d, J= 1.0 Hz, 1H）, 8.14 - 8.08（m, 1H）, 8.03 - 7.99（m, 1H）, 7.97（s, 1H）, 7.88 - 7.84（m, 1H）, 7.76（s, 1H）, 7.73 - 7.69（m, 1H）, 7.35 - 7.28（m, 2H）, 7.27 - 7.21（m, 1H）, 7.19 - 7.12（m, 1H）, 7.03（br d, J= 7.5 Hz, 1H）, 4.80 - 4.73（m, 1H）, 4.52 - 4.45（m, 1H）, 3.84 - 3.76（m, 1H）, 3.66（br d, J= 13.5 Hz, 1H）, 3.33（br dd, J= 9.5, 13.5 Hz, 1H）, 3.27 - 3.11（m, 1H）, 3.08 - 3.00（m, 1H）, 2.97（s, 1H）, 2.95（br s, 1H）, 2.92（s, 2H）, 2.90 - 2.85（m, 1H）, 2.79 - 2.69（m, 1H）, 2.07（s, 1H）, 1.78（s, 1H）, 1.74（s, 1H）。 20 號實例：乙酸 ( S)-1-(5-((1-( 二氟甲基 )-1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )- N- 甲基菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基酯

向( S)-5-((1-(二氟甲基)-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（2號實例）（2.00 g，4.87 mmol）於20 mL二氯甲烷中之溶液中添加三乙胺（2.38 mL，17.1 mmol）、乙酸酐（1.0 mL，11 mmol）及4-二甲胺基吡啶（0.095 g，0.78 mmol）。將混合物在20℃下攪拌2小時。此時之後，將混合物傾倒至飽和氯化銨中。將有機相用鹽水（50 mL）萃取，經硫酸鈉乾燥，且濃縮。藉由製備型HPLC（表B，方法c）純化所得殘餘物，得到標題化合物（1.0 g，2.1 mmol，產率44%）。 ¹H NMR（400 MHz, 氯仿- d）δ = 8.74（br s, 1H）, 8.54（s, 1H）, 8.06（s, 1H）, 7.82（s, 1H）, 7.75（br s, 1H）, 7.38 - 7.28（m, 2H）, 7.24 - 7.03（m, 3H）, 5.58 - 5.21（m, 1H）, 4.02 - 3.89（m, 1H）, 3.64 - 3.55（m, 1H）, 3.54 - 3.45（m, 1H）, 3.40 - 3.26（m, 1H）, 3.13 - 2.93（m, 5H）, 2.89 - 2.78（m, 1H）, 2.69 - 2.53（m, 1H）, 2.14 - 1.99（m, 3H）。 21 號實例： 2- 胺基乙酸 ( S)-1-(5-((1-( 二氟甲基 )-1 H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )- N- 甲基菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基酯 , 鹽酸

向2-((三級丁氧基羰基)胺基)乙酸（0.854 g，4.87 mmol）於5.0 mL乙腈中之溶液中添加( S)-5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-3-基)乙炔基)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（2號實例）（2.0 g，4.9 mmol）、 N, N'-二環己基碳化二亞胺（DCC）（1.05 g，5.08 mmol）及4-二甲胺基吡啶（DMAP）（0.015 g，0.12 mmol）。將混合物在20℃下攪拌12小時。此時之後，將反應混合物過濾，且將濾液真空濃縮，得到粗中間物(三級丁氧基羰基)甘胺酸( S)-1-(5-((1-(二氟甲基)-1 H-吡唑-4-基)乙炔基)- N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯（2.4 g，4.2 mmol），隨後將其溶解在乙酸乙酯（15 mL）中。添加含氯化氫溶液之乙酸乙酯（4M，20 mL），且將反應混合物在20℃下攪拌30分鐘。此時之後，將混合物在壓力下濃縮，得到殘餘物，藉由製備型HPLC（表B，方法c；R _t = 2,13分鐘）將其純化，得到標題化合物（1.2 g，2.3 mmol，產率54%）。 ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ = 8.88 - 8.70（m, 2H）, 8.61（d, J= 1.5 Hz, 1H）, 8.57 - 8.42（m, 3H）, 8.19 - 8.09（m, 1H）, 8.09 - 7.74（m, 2H）, 7.37 - 7.29（m, 3H）, 7.28 - 7.15（m, 2H）, 7.08（br d, J= 6.5 Hz, 1H）, 5.54 - 5.17（m, 1H）, 3.86 - 3.62（m, 2H）, 3.70 - 3.62（m, 1H）, 3.52 - 3.38（m, 1H）, 3.09 - 3.00（m, 1H）, 2.99（s, 1H）, 2.96（s, 2H）, 2.95 - 2.89（m, 1H）, 2.82 - 2.66（m, 1H）。tBu =三級丁基。 22 號及 23 號實例： (1-( N- 甲基 -5-((2- 甲基 -5-2 H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基 ) 磷酸 ( S)- 二 - 三級丁酯（ 22 號實例）及 ( S) (1-( N- 甲基 -5-((2- 甲基 -2 H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基 ) 二氫磷酸酯（ 23 號實例）

在20℃下在氮氣下向( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺（3號實例）（2.00 g，5.33 mmol）於40 mL N-甲基吡咯啶中之溶液中一次性添加二乙基胺基亞磷酸二-三級丁酯（20.0 mL，5.33 mmol）及1 H-四唑（1.493 g，21.31 mmol），且攪拌2小時。此時之後，在0℃下將過氧化氫（20.0 mL，555 mmol）添加至溶液中。將混合物在20℃下攪拌1小時，且移除等分試樣且藉由LC-MS進行分析。LC-MS顯示，起始材料被完全消耗掉且偵測到所期望的產物（磷酸酯）。藉由在10℃下添加20 mL亞硫酸鈉淬滅所得混合物，且隨後攪拌30分鐘。將混合物傾倒至冰水中，隨後添加飽和亞硫酸鈉溶液直至pH=7。將乙酸乙酯（200 mL）添加至混合物中，攪動混合物，且分離各層。重複此過程三次。將有機層濃縮，且粗(1-(N-甲基-5-((2-甲基-2H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基)磷酸( S)-二-三級丁酯（ 22 號實例）不經進一步純化即用於下一步驟中。tBu =三級丁基；Et =乙基。

在20℃下在氮氣下向(1-(N-甲基-5-((2-甲基-2H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基)磷酸( S)-二-三級丁酯（ 22 號實例）（2 g，3.52 mmol）於15 mL二氯甲烷中之溶液中添加三氟乙酸（TFA）（5 mL，64.9 mmol）。將混合物攪拌2小時。此時之後，將反應物濃縮且藉由逆相管柱層析法（表B，方法d）純化，得到標題化合物（ 23 號實例）（930 mg，2.00 mmol，產率56.8%）。 ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.45-8.83（m, 2H）, 7.80-8.17（m, 2H）, 7.21-7.35（m, 3H）, 7.00-7.19（m, 2H）, 4.43-4.82（m, 1H）, 4.17-4.29（m, 3H）, 3.31-3.70（m, 1H）, 2.72-3.26（m, 6H）。 24 號實例：乙酸 ( S)-1-( N- 甲基 -5-((2- 甲基 -2 H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基酯

在20℃下在氮氣下向( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺（3號實例）（1.50 g，4.00 mmol）於30 mL二氯甲烷中之溶液中一次性添加三乙胺（1.89 mL，13.6 mmol）及乙酸酐（0.857 g，8.39 mmol）。將混合物在20℃下攪拌12小時。此時之後，用50 mL水淬滅反應物。分離有機水層，且用二氯甲烷（3 × 10 mL）萃取水相。將有機層合併，經硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮，且藉由急驟層析法（20-50% EtOAc/己烷）分離產物，得到標題化合物（1.20 g，2.86 mmol，產率71.6%）。 ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.79（s, 1H）, 8.55（d, J=1.75 Hz, 1H）, 8.06（s, 1H）, 7.90（s, 1H）, 7.10-7.34（m, 5H）, 5.24-5.42（m, 1H）, 4.21（s, 3H）, 3.47-3.70（m, 2H）, 2.97（s, 3H）, 2.76-2.95（m, 2H）, 1.96（s, 3H）。 25 號實例： 2- 胺基乙酸 ( S)-1-( N- 甲基 -5-((2- 甲基 -2 H-1,2,3- 三唑 -4- 基 ) 乙炔基 ) 菸鹼醯胺基 )-3- 苯基丙 -2- 基酯 , 鹽酸

在25℃下向2-((三級丁氧基羰基)胺基)乙酸（0.933 g，5.33 mmol）於5.0 mL乙腈中之攪拌溶液中添加(( S)- N-(2-羥基-3-苯丙基)- N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺（3號實例）（2.00 g，5.33 mmol）。添加 N,N'-二環己基碳化二亞胺（DCC）（1.37 g，6.66 mmol），接著緩慢添加4-二甲胺基吡啶（DMAP）之5.3 mL乙腈溶液（0.020 g，0.16 mmol），將反應溫度保持在20-25℃之間。將懸浮液在25℃下攪拌2小時。此時之後，將反應混合物過濾。將濾液濃縮，且藉由矽膠急驟層析法（石油醚:乙酸乙酯= 4:1~1:1）純化所得殘餘物，得到粗中間物2-((三級丁氧基羰基)-胺基)乙酸( S)-1-( N-甲基-5-((2-甲基-2 H-1,2,3-三唑-4-基)乙炔基)菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯（2.2 g，3.9 mmol，產率74%)，隨後將其溶解在乙酸乙酯（10 mL）中。將含氯化氫溶液之乙酸乙酯（4M，20 mL，80 mmol）添加至溶液中，且將混合物在25℃下攪拌1小時。將所得懸浮液真空乾燥，得到標題化合物（1.38 g，2.85 mmol，產率69.1%）。 ¹H NMR（400 MHz, 二甲亞碸- d ₆ ）δ 8.80（s, 1H）, 8.60（br s, 1H）, 8.47（br s, 3H）, 8.08（s, 1H）, 7.97（br s, 1H）, 7.16-7.35（m, 5H）, 5.25-5.57（m, 1H）, 4.63（br s, 6H）, 4.21（s, 3H）, 3.65-3.79（m, 3H）, 2.80-3.06（m, 5H）。tBu =三級丁基。

26 號實例： (S)-5-((1-( 二氟甲基 )-5- 甲基 -1H- 吡唑 -4- 基 ) 乙炔基 )-N-(2- 羥基 -3- 苯丙基 )-N- 甲基菸鹼醯胺

在約室溫下將( S)-5-溴-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（15 g，43.0 mmol）（8號製劑）、N,N-二甲基吡啶-4-胺（0.525 g，4.30 mmol）及吡啶（17.37 mL，215 mmol）合併於二氯甲烷（DCM）（150 mL）中。逐滴添加乙酸酐（5.26 g，51.5 mmol）。約4小時之後，添加甲基三級丁醚（MTBE）（300 mL）及飽和硫酸銅（200 mL），將有機物分離且用水（2 × 100 mL）洗滌，乾燥（Na ₂SO ₄），過濾且真空濃縮，得到呈油狀之乙酸( S)-1-(5-溴-N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯（16.8 g，43.0 mmol，100%產率)。LC/MS（方法aa）R _t = 1.31分鐘；MS m/z：391.18, 393.16（M+H) ⁺。

在約室溫下將乙酸( S)-1-(5-溴-N-甲基菸鹼醯胺基)-3-苯基丙-2-基酯（12.8 g，32.7 mmol）、乙炔基三甲基矽烷（9.64 g，98 mmol）、二異丙胺（9.33 mL，65.4 mmol）合併於二甲基甲醯胺（DMF）（60 mL）中。添加3A分子篩。約2小時之後，添加碘化銅(I)（0.062 g，0.327 mmol）及雙(三苯基膦)鈀(II)氯化物（0.230 g，0.327 mmol）。將反應混合物升溫至約80℃。約6小時之後，將混合物冷卻至室溫。添加飽和NaHCO ₃（100 mL）及甲基三級丁醚（MTBE）（100 mL）以及半胱胺酸（2 g），且在約室溫下攪拌反應混合物。約4小時之後，使混合物經由矽藻土過濾，且將有機物分離，用鹽水（50 mL）洗滌且真空濃縮。在約室溫下將粗炔烴溶解在甲醇（MeOH）（100 mL）中，且添加碳酸鉀（9.04 g，65.4 mmol）。約4小時之後，將混合物部分真空濃縮。添加甲基三級丁醚及乙酸乙酯（MTBE/EtOAc）（1:1）（100 mL）以及水（50 mL）。將有機物分離，真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（SiO ₂）（EtOAc/Hep）純化，得到呈油狀之( S)-5-乙炔基-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（6.8 g，23.10 mmol，產率70.6%）。HPLC方法aa：R _t = 0.94分鐘；MS m/z：295.3（M+H) ⁺。

將( S)-5-乙炔基-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（6.8 g，23.10 mmol）、4-溴-1-(二氟甲基)-5-甲基-1H-吡唑（5.36 g，25.4 mmol）、二異丙胺（6.59 mL，46.2 mmol）、碘化銅(I)（0.044 g，0.231 mmol）及甲磺酸根基(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-胺基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)（0.196 g，0.231 mmol）合併於二甲基甲醯胺（DMF）（70 mL）中。將反應混合物以氮氣充氣。10分鐘之後，將反應混合物加熱至80℃。4小時之後，冷卻至室溫。將混合物用甲基三級丁醚及乙酸乙酯（MTBE/EtOAc）（1:1）（20 mL）以及水（20 mL）稀釋，且添加半胱胺酸（500 mg）。攪拌4小時之後，將有機物過濾且分離，用鹽水（10 mL）洗滌，真空濃縮且藉由矽膠急驟層析法（SiO ₂）（EtOAc/Hep）純化。將產物溶離份合併且真空濃縮。將殘餘物溶解在甲基三級丁醚MTBE（20 mL）中且添加庚烷直至溶液混濁。攪拌20小時之後，收集固體且真空乾燥，得到呈白色固體狀之( S)-5-((1-(二氟甲基)-5-甲基-1H-吡唑-4-基)乙炔基)-N-(2-羥基-3-苯丙基)-N-甲基菸鹼醯胺（5.8 g，13.66 mmol，產率59.2%）。HPLC方法aa：R _t = 1.28分鐘；MS m/z：425.3（M+H) ⁺。 ¹H NMR（400 MHz, DMSO- d ₆）δ 8.77 - 8.65（m, 1H）, 8.58 - 8.47（m, 1H）, 8.01 - 7.67（m, 2H）, 7.30 - 7.04（m, 6H）, 5.10 - 4.90（m, 1H）, 4.09 - 3.81（m, 1H）, 3.59 - 3.29（m, 1H）, 3.16 - 3.07（m, 1H）, 2.99 - 2.91（m, 4H）, 2.78 - 2.59（m, 1H）, 2.56 - 2.51（m, 3H）。 分析及活性資料 RIPK1 結合分析

測試化合物自重組人類RIPK1置換螢光探針之能力。測試化合物RIPK1結合（IC ₅₀）資料提供於表C中。

重組人類RIPK1（1-375）係如Harris等人, 《ACS藥物化學快報（ACS Med. Chem. Letters）》 (2013) 4:1238-1243（輔助資訊）中所描述來製備，以下係例外：（i）代替使用來自NM_003804.3之基因序列，該基因係經密碼子最佳化而合成用於BEV表現系統，及（ii）將該基因選殖至載體pFastBac1而非pDEST8中。

由已知結合至RIPK1之化合物合成含有俄勒岡綠（Oregon green）螢光團之螢光探針。

在含有50 mM N-2-羥乙基哌

- N'-2-乙磺酸（HEPES）（pH 7.5）、10 mM MgCl ₂、1 mM乙二胺四乙酸（EDTA）及0.01% BRIJ-35（聚氧乙烯（23）月桂醚）之緩衝劑中執行分析。在二甲亞碸（DMSO）中使測試化合物溶合，最終濃度係自100 μM至0.000095 μM經4倍連續稀釋，進行技術重複，至空384孔盤中。將重組RIPK1（2.5 nM最終濃度）添加至孔中且在室溫下與測試化合物一起培育1小時。隨後，將含有螢光探針（5 nM最終濃度）及LanthaScreen Tb-抗GST抗體（賽默飛世爾科技（Thermofisher Scientific）；5 nM最終濃度）之溶液添加至各孔中，其中Tb-抗GST抗體結合至重組RIPK1之GST部分且向螢光探針提供對應FRET對。將盤在室溫下培育1小時且在Envision盤讀取器上使用時間分解FRET協定進行讀取。將資料標準化且使用來自Dotmatics之研究進行分析。 U937 TNF/zVAD 細胞毒性細胞分析

測試化合物阻止U937細胞中TNF誘導之壞死性凋亡的能力。用TNF及凋亡蛋白酶抑制劑zVAD-FMK進行之處理引起RIPK1活化及磷酸化及後續RIPK3及MLKL（混合譜系激酶域樣假激酶）磷酸化，從而引起對經量測為細胞活力降低之壞死性細胞死亡的誘導。U937 TNF/zVAD誘導之細胞毒性（IC ₅₀）資料指示測試化合物抑制RIPK1之能力，提供於表C中。先前已描述類似U937分析協定；參見例如Harris等人, 《ACS藥物化學快報》 (2013) 4:1238-1243及輔助資訊。

在二甲亞碸（DMSO）中使測試化合物溶合，且自10 μM至0.0005 μM進行3倍連續稀釋，進行技術重複，至空384孔盤中。將U937細胞以500,000個細胞/毫升之濃度再懸浮於含有10%熱失活胎牛血清（FBS）之新鮮RPMI（洛斯維·帕克紀念研究所（Roswell Park Memorial Institute））1640生長培養基中，且接種至含有化合物之384孔盤中，且在37℃下培育1小時。培育之後，在37℃下用TNFα（10 ng/mL最終濃度）及Z-VAD FMK（N-苯甲氧基羰基-Val-Ala-Asp（O-Me）氟甲酮；20 µM最終濃度）攻擊細胞16-20小時。與TNFα/Z-VAD一起培育之後，用Cell Titer-Glo溶解細胞且培育5-10分鐘。隨後，在Envision盤讀取器上讀取盤。將資料標準化且用來自Dotmatics之研究進行分析。

表C.
實例	RIPK1 結合 IC ₅₀ （µM ）	U937 TNF/zVAD 誘導之細胞毒性 IC ₅₀ （µM ）
1	0.011	0.034
2	0.004	0.011
3	0.036	0.196
4	0.030	0.199
5	0.014	0.049
6	0.003	0.006
7	0.007	0.009
8	0.006	0.013
9	0.018	0.029
10	0.043	0.380
11	0.002	0.005
12	0.013	0.020
13	0.095	0.382
14	0.008	0.018
15	25	--
16	0.515	2.580
17	0.032	0.146
26	0.0018	0.003

選擇性資料

在篩檢平台中測試化合物結合至數百種人類激酶及其疾病相關突變變異體之能力。結合親和力提供於表D中。

方法 .篩檢方法使用固體載體上之固定配位體、加DNA標籤之激酶及測試化合物。結合激酶活性位點且直接（空間上）或間接（別位地）阻止激酶結合至固體載體上之固定配位體的測試化合物將減少在固體載體上所捕捉之激酶的量。反之，不結合激酶之測試化合物對在固體載體上所捕捉之激酶的量無影響。篩檢「命中」係藉由使用偵測激酶相關DNA標記之定量、精確及超敏qPCR方法量測測試化合物相對於對照樣本中所捕捉之激酶的量來鑑別。以類似方式，藉由量測隨測試化合物濃度而變之在固體載體上所捕捉之激酶的量來計算測試化合物-激酶相互作用之解離常數（K _d）。

激酶分析 . 對於大多數分析，加激酶標籤之T7噬菌體菌株並行地生長於衍生自BL21菌株之大腸桿菌宿主中的24孔區塊中。大腸桿菌生長至對數期且自冷凍儲備液感染T7噬菌體（感染倍率= 0.4）且在32℃下搖動培育直至溶解（90-150分鐘）。將溶解物離心（6,000×g）且過濾（0.2 μm）以移除細胞碎片。在HEK-293細胞中產生剩餘激酶且隨後加DNA標籤以用於qPCR偵測。經鏈黴抗生物素蛋白塗佈之磁珠在室溫下經生物素標記小分子配位體處理30分鐘，產生用於激酶分析之親和樹脂。用過量生物素阻斷經配位之珠粒，且用阻斷緩衝劑（SeaBlock（Pierce），1% BSA、0.05% Tween 20、1 mM DTT）進行洗滌以移除未結合配位體且減少非特異性噬菌體結合。藉由在1×結合緩衝劑（20% SeaBlock、0.17×PBS、0.05% Tween 20、6 mM DTT）中合併激酶、經配位之親和珠粒及測試化合物來組裝結合反應。將測試化合物製備為含40×儲備液之100% DMSO且直接稀釋至分析中。所有反應皆在聚丙烯384孔盤中以0.02 mL之最終體積執行。將分析盤在室溫下搖動培育1小時，且用洗滌緩衝劑（1×PBS、0.05% Tween 20）洗滌親和珠粒。隨後，將珠粒再懸浮於溶離緩衝劑（1×PBS、0.05% Tween 20、0.5 μM非生物素標記親和配位體）中，且在室溫下搖動培育30分鐘。藉由qPCR來量測溶離液中之激酶濃度。

對照百分比計算 . 篩檢呈100 nM濃度之化合物，且結合相互作用結果以對照百分比形式示於下表D中，其中數值愈低指示命中愈強。對照百分比計算示於下文。陰性對照為DMSO（100%對照），且對照化合物用作陽性對照（0%對照）。

表 D.

	2 號化合物	19 號化合物
DiscoveRx 基因符號	在100 nM 化合物濃度下之對照百分比	在100 nM 化合物濃度下之對照百分比
AAK1	96	100
ABL1（E255K）-磷醯基化	86	91
ABL1（F317I）-非磷醯基化	100	100
ABL1（F317I）-磷醯基化	100	98
ABL1（F317L）-非磷醯基化	100	100
ABL1（F317L）-磷醯基化	82	88
ABL1（H396P）-非磷醯基化	88	96
ABL1（H396P）-磷醯基化	94	93
ABL1（M351T）-磷醯基化	86	97
ABL1（Q252H）-非磷醯基化	92	100
ABL1（Q252H）-磷醯基化	99	99
ABL1（T315I）-非磷醯基化	100	97
ABL1（T315I）-磷醯基化	80	92
ABL1（Y253F）-磷醯基化	100	100
ABL1-非磷醯基化	72	96
ABL1-磷醯基化	79	78
ABL2	100	98
ACVR1	100	100
ACVR1B	100	100
ACVR2A	94	100
ACVR2B	91	99
ACVRL1	100	100
ADCK3	100	100
ADCK4	100	100
AKT1	100	100
AKT2	99	90
AKT3	100	100
ALK	100	100
ALK（C1156Y）	100	100
ALK（L1196M）	100	100
AMPK-α1	100	100
AMPK-α2	89	100
ANKK1	100	100
ARK5	100	100
ASK1	88	100
ASK2	100	98
AURKA	100	100
AURKB	100	90
AURKC	100	100
AXL	100	96
BIKE	100	100
BLK	85	96
BMPR1A	86	94
BMPR1B	98	99
BMPR2	100	89
BMX	100	100
BRAF	100	100
BRAF（V600E）	97	97
BRK	100	100
BRSK1	99	99
BRSK2	96	95
BTK	100	96
BUB1	93	85
CAMK1	100	62
CAMK1B	82	83
CAMK1D	100	74
CAMK1G	93	100
CAMK2A	97	100
CAMK2B	100	92
CAMK2D	100	100
CAMK2G	94	100
CAMK4	100	100
CAMKK1	100	100
CAMKK2	99	100
CASK	99	94
CDC2L1	100	100
CDC2L2	100	100
CDC2L5	100	100
CDK11	4.8	92
CDK2	100	100
CDK3	100	100
CDK4	100	93
CDK4-週期蛋白D1	100	97
CDK4-週期蛋白D3	100	100
CDK5	100	100
CDK7	100	100
CDK8	10	98
CDK9	100	100
CDKL1	100	100
CDKL2	100	95
CDKL3	100	97
CDKL5	93	86
CHEK1	100	100
CHEK2	100	100
CIT	98	95
CLK1	100	100
CLK2	95	100
CLK3	97	93
CLK4	92	100
CSF1R	100	100
CSF1R-自動抑制	99	99
CSK	98	93
CSNK1A1	100	92
CSNK1A1L	100	97
CSNK1D	100	100
CSNK1E	67	74
CSNK1G1	100	100
CSNK1G2	100	95
CSNK1G3	99	100
CSNK2A1	98	98
CSNK2A2	100	100
CTK	100	90
DAPK1	100	100
DAPK2	100	90
DAPK3	100	97
DCAMKL1	100	100
DCAMKL2	100	100
DCAMKL3	100	100
DDR1	100	100
DDR2	100	100
DLK	100	100
DMPK	100	100
DMPK2	97	96
DRAK1	95	100
DRAK2	100	100
DYRK1A	90	85
DYRK1B	97	79
DYRK2	100	97
EGFR	93	100
EGFR（E746-A750del）	100	94
EGFR（G719C）	100	77
EGFR（G719S）	100	72
EGFR（L747-E749del, A750P）	100	84
EGFR（L747-S752del, P753S）	100	97
EGFR（L747-T751del,Sins）	100	79
EGFR（L858R）	100	94
EGFR（L858R,T790M）	83	94
EGFR（L861Q）	100	86
EGFR（S752-I759del）	100	100
EGFR（T790M）	100	100
EIF2AK1	100	96
EPHA1	100	100
EPHA2	100	100
EPHA3	100	100
EPHA4	97	96
EPHA5	100	100
EPHA6	100	100
EPHA7	97	96
EPHA8	99	100
EPHB1	100	100
EPHB2	100	100
EPHB3	100	100
EPHB4	100	100
EPHB6	100	100
ERBB2	70	65
ERBB3	100	100
ERBB4	94	93
ERK1	97	95
ERK2	100	100
ERK3	100	100
ERK4	100	100
ERK5	100	100
ERK8	100	100
ERN1	100	93
FAK	100	100
FER	100	96
FES	100	100
FGFR1	94	95
FGFR2	100	100
FGFR3	100	100
FGFR3（G697C）	100	100
FGFR4	100	100
FGR	100	99
FLT1	100	100
FLT3	100	100
FLT3（D835H）	100	100
FLT3（D835V）	100	100
FLT3（D835Y）	100	100
FLT3（ITD）	100	100
FLT3（ITD,D835V）	100	100
FLT3（ITD,F691L）	98	97
FLT3（K663Q）	100	100
FLT3（N841I）	99	96
FLT3（R834Q）	100	100
FLT3-自動抑制	95	96
FLT4	100	100
FRK	100	100
FYN	100	100
GAK	100	100
GCN2（Kin.Dom.2,S808G）	95	97
GRK1	100	98
GRK2	96	79
GRK3	82	81
GRK4	100	100
GRK7	100	100
GSK3A	100	100
GSK3B	100	98
HASPIN	86	83
HCK	100	100
HIPK1	72	82
HIPK2	99	79
HIPK3	100	88
HIPK4	100	100
HPK1	78	92
HUNK	82	96
ICK	100	93
IGF1R	100	98
IKK-α	100	99
IKK-β	96	96
IKK-ε	100	94
INSR	100	100
INSRR	100	100
IRAK1	91	86
IRAK3	96	92
IRAK4	91	83
ITK	99	100
JAK1（JH1域-催化性）	100	100
JAK1（JH2域-假激酶）	93	86
JAK2（JH1域-催化性）	100	100
JAK3（JH1域-催化性）	100	100
JNK1	92	87
JNK2	91	92
JNK3	83	86
KIT	100	99
KIT（A829P）	100	99
KIT（D816H）	100	98
KIT（D816V）	100	100
KIT（L576P）	100	98
KIT（V559D）	100	96
KIT（V559D,T670I）	97	100
KIT（V559D,V654A）	94	100
KIT-自動抑制	94	94
LATS1	100	88
LATS2	98	100
LCK	100	95
LIMK1	100	100
LIMK2	95	93
LKB1	70	79
LOK	100	100
LRRK2	100	81
LRRK2（G2019S）	100	93
LTK	100	100
LYN	71	80
LZK	99	99
MAK	100	100
MAP3K1	100	100
MAP3K15	100	97
MAP3K2	99	95
MAP3K3	96	92
MAP3K4	100	100
MAP4K2	88	83
MAP4K3	100	100
MAP4K4	92	95
MAP4K5	87	95
MAPKAPK2	100	100
MAPKAPK5	94	96
MARK1	100	96
MARK2	96	100
MARK3	98	97
MARK4	91	94
MAST1	100	97
MEK1	98	99
MEK2	99	98
MEK3	94	79
MEK4	100	100
MEK5	89	87
MEK6	100	96
MELK	77	83
MERTK	100	100
MET	100	100
MET（M1250T）	100	100
MET（Y1235D）	98	99
MINK	100	100
MKK7	98	96
MKNK1	96	91
MKNK2	82	79
MLCK	100	100
MLK1	100	96
MLK2	66	69
MLK3	95	89
MRCKA	100	100
MRCKB	95	100
MST1	100	100
MST1R	98	92
MST2	100	99
MST3	100	100
MST4	97	84
MTOR	73	67
MUSK	100	100
MYLK	87	86
MYLK2	100	96
MYLK4	99	100
MYO3A	99	93
MYO3B	95	79
NDR1	100	100
NDR2	94	84
NEK1	100	100
NEK10	91	100
NEK11	100	95
NEK2	100	100
NEK3	96	96
NEK4	100	100
NEK5	100	94
NEK6	100	100
NEK7	100	99
NEK9	100	100
NIK	84	88
NIM1	89	89
NLK	100	100
OSR1	88	89
p38-α	100	100
p38-β	100	97
p38-δ	100	100
p38-γ	100	88
PAK1	100	100
PAK2	97	92
PAK3	71	100
PAK4	98	98
PAK6	85	80
PAK7	100	100
PCTK1	91	84
PCTK2	100	100
PCTK3	100	100
PDGFRA	73	85
PDGFRB	100	100
PDPK1	99	100
PFCDPK1（惡性瘧原蟲）	95	96
PFPK5（惡性瘧原蟲）	90	100
PFTAIRE2	100	100
PFTK1	100	100
PHKG1	100	100
PHKG2	100	100
PIK3C2B	100	100
PIK3C2G	85	78
PIK3CA	100	100
PIK3CA（C420R）	83	86
PIK3CA（E542K）	89	81
PIK3CA（E545A）	89	94
PIK3CA（E545K）	91	85
PIK3CA（H1047L）	85	71
PIK3CA（H1047Y）	71	72
PIK3CA（I800L）	96	87
PIK3CA（M1043I）	92	85
PIK3CA（Q546K）	96	88
PIK3CB	100	95
PIK3CD	99	85
PIK3CG	100	100
PIK4CB	100	98
PIKFYVE	57	57
PIM1	98	100
PIM2	95	100
PIM3	100	100
PIP5K1A	100	92
PIP5K1C	100	85
PIP5K2B	100	95
PIP5K2C	63	74
PKAC-α	94	94
PKAC-β	92	100
PKMYT1	99	100
PKN1	91	100
PKN2	97	100
PKNB（結核桿菌）	100	100
PLK1	87	87
PLK2	98	91
PLK3	97	92
PLK4	100	100
PRKCD	98	94
PRKCE	72	68
PRKCH	100	91
PRKCI	96	92
PRKCQ	94	98
PRKD1	100	100
PRKD2	79	100
PRKD3	100	100
PRKG1	92	100
PRKG2	100	97
PRKR	100	97
PRKX	100	100
PRP4	89	82
PYK2	100	100
QSK	88	85
RAF1	100	100
RET	100	100
RET（M918T）	100	100
RET（V804L）	100	100
RET（V804M）	100	100
RIOK1	100	100
RIOK2	95	95
RIOK3	100	100
RIPK1	26	91
RIPK2	100	100
RIPK4	100	100
RIPK5	100	96
ROCK1	100	100
ROCK2	100	100
ROS1	100	91
RPS6KA4（Kin.Dom.1-N端）	97	100
RPS6KA4（Kin.Dom.2-C端）	97	100
RPS6KA5（Kin.Dom.1-N端）	91	100
RPS6KA5（Kin.Dom.2-C端）	95	90
RSK1（Kin.Dom.1-N端）	96	100
RSK1（Kin.Dom.2-C端）	100	100
RSK2（Kin.Dom.1-N端）	100	94
RSK2（Kin.Dom.2-C端）	100	100
RSK3（Kin.Dom.1-N端）	97	100
RSK3（Kin.Dom.2-C端）	100	100
RSK4（Kin.Dom.1-N端）	100	93
RSK4（Kin.Dom.2-C端）	100	100
S6K1	95	95
SBK1	97	95
SGK	96	90
SgK110	81	77
SGK2	100	93
SGK3	100	100
SIK	100	100
SIK2	89	96
SLK	99	97
SNARK	99	99
SNRK	100	100
SRC	97	100
SRMS	100	96
SRPK1	100	100
SRPK2	93	100
SRPK3	90	100
STK16	98	92
STK33	88	100
STK35	99	100
STK36	100	100
STK39	100	100
SYK	97	93
TAK1	97	95
TAOK1	100	100
TAOK2	84	77
TAOK3	92	85
TBK1	79	84
TEC	99	93
TESK1	100	100
TGFBR1	100	100
TGFBR2	100	100
TIE1	100	100
TIE2	100	88
TLK1	100	100
TLK2	100	100
TNIK	100	100
TNK1	100	100
TNK2	100	100
TNNI3K	100	100
TRKA	100	81
TRKB	100	94
TRKC	100	68
TRPM6	99	95
TSSK1B	88	76
TSSK3	82	100
TTK	100	82
TXK	100	100
TYK2（JH1域-催化性）	100	100
TYK2（JH2域-假激酶）	100	90
TYRO3	99	100
ULK1	100	100
ULK2	100	94
ULK3	97	96
VEGFR2	96	97
VPS34	87	90
VRK2	91	95
WEE1	92	100
WEE2	100	100
WNK1	93	94
WNK2	100	100
WNK3	100	100
WNK4	84	81
YANK1	100	100
YANK2	100	95
YANK3	67	54
YES	100	100
YSK1	100	97
YSK4	99	90
ZAK	100	100
ZAP70	98	98

基於表D中之結合親和力，計算各化合物之選擇性評分（S-評分）作為化合物選擇性之定量量度。藉由將與化合物結合之激酶數目除以不同測試激酶總數目來計算S-評分，突變變異體除外。選擇性評分值可使用Ctrl%作為效力臨限值來計算，如下文所示，且提供描繪化合物選擇性之定量方法以便於比較不同化合物。

S（10）=（Ctrl% ＜ 35之非突變激酶數目）/（測試非突變激酶數目）。

S（35）=（Ctrl% ＜ 10之非突變激酶數目）/（測試非突變激酶數目）。

S（35）=（Ctrl% ＜ 1之非突變激酶數目）/（測試非突變激酶數目）。

結果示於表E中。表 E.

化合物	選擇性評分類型	命中數目	非突變激酶數目	篩檢濃度（nM ）	選擇性評分
2號化合物	S（35）	3	403	100	0.007
2號化合物	S（10）	1	403	100	0.002
2號化合物	S（1）	0	403	100	0
19號化合物	S（35）	0	403	100	0
19號化合物	S（10）	0	403	100	0
19號化合物	S（1）	0	403	100	0

前驅藥生物轉化

磷酸酶經獨特組織特異性同功異型物模糊地表現且為含磷酸酯前驅藥轉化中之關鍵催化劑。為了判定本發明之例示性磷酸酯前驅藥化合物是否酶促轉化成相關物種中之親本分子，將前驅藥化合物與獲自小鼠、大鼠、犬、猴及人類之腸S9細胞溶離份一起培育。

將磷酸酯前驅藥在含有3 mM氯化鎂、來自小鼠、大鼠、犬、猴或人類之腸S9蛋白（0.01及25 mg/mL（小鼠、大鼠、人類，表F））之Tris-Cl緩衝劑（pH 7.4）中培育（1 μM）至多2小時。在不存在及存在1 mM磷酸酶抑制劑正釩酸鈉之情況下進行培育。藉由LC-MS/MS監測前驅藥耗乏及親體形成且以內部標準物標準化為分析物峰面積比。表 F.如藉由腸S9細胞溶離份中之前驅藥消失所量測之活體外內部清除率。

	Clint （微升/ 分鐘/ 毫克腸S9 蛋白）（0.25 毫克/ 毫升）	Clint （微升/ 分鐘/ 毫克腸S9 蛋白）（0.01 毫克/ 毫升）
實例	人類	大鼠	小鼠	人類	大鼠	小鼠
19	296	42.4	54.7	1608.5	＜ 137 ^**	116.8
21	592.9	901.6	＞ 4166.5 ^*	815.9	2599.5	11160
23	243.4	36.7	23.3	1180.2	＜ 137 ^**	＜ 137 ^**
25	410	393.8	＞ 1640.7 ^*	378.1	1087.6	6821.9

^*-值為合格的，此係因為Clint由2時間點曲線產生 ^**-基於2小時培育後的15%殘留評估合格值表 G.如藉由腸S9細胞溶離份中之19號實例消失所量測之活體外內部清除率。

	Clint （微升/ 分鐘/ 毫克腸S9 蛋白）（0.25 毫克/ 毫升）
實驗	人類	猴	犬	大鼠	小鼠
1	246	87.5	331	25.6	43.1
2	228	60.3	387	16.9	74.6
3	235	60.7	397	50.6	42.2
平均值	236.3	69.5	371.7	31	53.3
SD	9.1	15.6	35.6	17.5	18.5

值呈現為以微升/分鐘/毫克腸S9蛋白為單位之Clint。表 H.如藉由腸S9細胞溶離份中之21號實例消失所量測之活體外內部清除率。

	Clint （微升/ 分鐘/ 毫克腸S9 蛋白）（0.25 毫克/ 毫升）
實驗	人類	猴	犬	大鼠	小鼠
1	391	89.6	5.62	396	＞ 480*
2	400	91.3	16.1	719	＞ 480*
3	355	90.7	14.3	750	＞ 480*
平均值	382	90.5	12.0	622	＞ 480*
SD	24.3	0.861	5.62	196

值呈現為以微升/分鐘/毫克腸S9蛋白為單位之Clint。 ^*-值為合格的，此係因為CLint由2時間點曲線產生表 I.如藉由腸S9細胞溶離份中之23號實例消失所量測之活體外內部清除率。

	Clint （微升/ 分鐘/ 毫克腸S9 蛋白）（0.25 毫克/ 毫升）
實驗	人類	猴	犬	大鼠	小鼠
1	199	55.4	354	29.1	26.2
2	241	47.7	369	33.8	34.3
3	203	48.1	345	28.2	31.3
平均值	214	50.4	356	30.4	30.6
SD	23.3	4.35	12.4	3.04	4.07

值呈現為以微升/分鐘/毫克腸S9蛋白為單位之Clint。 ^*-值為合格的，此係因為CLint由2時間點曲線產生表 J.如藉由腸S9細胞溶離份中之25號實例消失所量測之活體外內部清除率。

	Clint （微升/ 分鐘/ 毫克腸S9 蛋白）（0.25 毫克/ 毫升）
實驗	人類	猴	犬	大鼠	小鼠
1	272	38.1	10.2	217	＞ 480*
2	294	49.0	14.4	318	＞ 480*
3	293	40.7	11.5	299	＞ 480*
平均值	286	42.6	12.0	278	＞ 480*
SD	12.7	5.66	2.14	53.8

值呈現為以微升/分鐘/毫克腸S9蛋白為單位之Clint。 ^*-值為合格的，此係因為CLint由2時間點曲線產生 其他實施例

本申請案提及各種頒予之專利、公開專利申請案、期刊文章及其他出版物，其中之各者均以引用之方式併入本文中。

前述內容已描述本揭示案之某些非限制性實施例。本領域中一般熟習此項技術者應瞭解，可在不脫離如以下申請專利範圍中所定義之本揭示案之精神或範疇之情況下對本說明書作出各種改變及修改。

無

圖 1描繪式（ I）化合物之模型化結合模式，其中R ¹為氫，在RIPK1之ATP（三磷酸腺苷）結合袋中，為所觀測到之RIPK1結合活性及優於其他激酶之選擇性提供工作假設。特定言之且在不希望受任何特定理論束縛之情況下，咸信若干相互作用充當用於結合之錨定點，自右至左：（1）除了與His136之側鏈環進行邊緣至面芳族相互作用之外，末端苯基環亦填充親脂性後袋體積；（2）羥基與Val76殘基之骨幹羰基進行氫鍵相互作用；（3）羰基與DLG模體（Asp156-Leu157-Gly158）之骨幹Asp156殘基進行氫鍵相互作用；及（4）雜芳基環（命名為「環G」）之供電子基團與鉸鏈區中之Met95殘基之骨幹NH進行相互作用。儘管DLG模體對於RIPK1並非獨特的，但僅在激酶小子集中發現到；實際上，大部分激酶包括DFG（Asp-Phe-Gly）模體。在不希望受任何特定理論束縛之情況下，進一步假設，除更善於適應的DLG模體（其缺乏龐大苯丙胺酸環）之存在之外，親脂性袋之形狀及與His136殘基之相互作用亦能藉由貢獻於且適應總彎曲結合構形而驅動RIPK1選擇性，藉此允許更特異性RIPK1接觸及結合。

圖 2含有基於例如19之峰面積比顯示前驅藥損耗之圖。亦顯示1 mM正釩酸鹽對磷酸酶活性之抑制，如藉由對受質耗乏之作用所展現。

圖 3含有基於例如19之峰面積比顯示親體形成之圖。亦顯示1 mM正釩酸鹽對磷酸酶活性之抑制，如藉由對親體形成之作用所展現。定義

下文更詳細地描述特定官能基及化學術語之定義。化學元素係根據元素週期表（Periodic Table of the Elements）, CAS版本, 《物理化學手冊（Handbook of Chemistry and Physics）》, 第75版, 內封面來標識，且特定官能基一般如其中所描述來定義。另外，有機化學之一般原理以及特定官能部分及反應性描述於以下中：《有機化學（ Organic Chemistry）》, Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito, 1999；Smith及March 《March高級有機化學（ March ' s Advanced Organic Chemistry）》, 第5版, 約翰威立公司（John Wiley & Sons, Inc.）, New York, 2001；Larock, 《綜合有機轉化（ Comprehensive Organic Transformations）》, VCH Publishers公司, New York, 1989；及Carruthers, 《一些現代有機合成方法（ Some Modern Methods of Organic Synthesis）》, 第3版, 劍橋大學出版社（Cambridge University Press）, Cambridge, 1987。

本文所描述之化合物可包括一或多個不對稱中心，且因此可以例如對映異構體及/或非對映異構體及/或幾何（順式/反式或E/Z）異構體之各種立體異構形式存在於組合物中。舉例而言，組合物可包括立體異構體混合物，包含外消旋（相等）混合物、富集一或多種立體異構體之混合物，或可包括呈實質上純的（＞99%）形式之個別立體異構體。如本文所使用之「富集（enriched）」係指包括相比於可存在於組合物中之（多種）其他立體異構體總和而言大於（＞）50%之一種立體異構體的組合物。在某些實施例中，組合物可包括相比於可存在於組合物中之（多種）其他立體異構體總和而言＞60%、＞65%、＞70%、＞75%、＞80%、＞85%、＞90%、＞91%、＞92%、＞93%、＞94%、＞95%、＞96%、＞97%、＞98%、＞99%、＞99.5%、＞99.9%或甚至至多100%之一種立體異構體；或可包括相比於可存在於組合物中之（多種）其他立體異構體總和而言0%或小於（＜）0.1%、＜0.5%、＜1%、＜2%、＜3%、＜4%、＜5%、＜6%、＜7%、＜8%、＜9%、＜10%、＜15%、＜20%、＜25%、＜30%、＜35%、＜40%、＜45%或＜50%之一種立體異構體。為簡單起見，若（多種）立體異構體以（多種）醫藥學上可接受之鹽形式提供於組合物中，則計算（多種）立體異構體中之任一者之富集量係基於游離鹼形式之假設量。在某些實施例中，組合物富集其（ S）-對映異構體。在其他實施例中，組合物富集其（ R）-對映異構體。

除非另外說明，否則本文所描繪之結構亦意在包含僅在存在一或多個經同位素富集之原子之情況下有所不同的化合物。舉例而言，除氫經氘或氚置換、 ¹⁹F經 ¹⁸F置換、碳經 ¹³C或 ¹⁴C富集之碳置換及/或氧原子經 ¹⁸O置換以外具有本發明結構之化合物在本揭示案之範疇內。

當列舉值之範圍時，其意欲涵蓋在該範圍內之各值及子範圍。舉例而言，「C _1-6烷基」意欲涵蓋C ₁、C ₂、C ₃、C ₄、C ₅、C ₆、C _1-6、C _1-5、C _1-4、C _1-3、C _1-2、C _2-6、C _2-5、C _2-4、C _2-3、C _3-6、C _3-5、C _3-4、C _4-6、C _4-5及C _5-6烷基。

「烷基（alkyl）」係指具有1至4個碳原子之直鏈或分支鏈飽和烴基（「C _1-4烷基」）之單價基團。在一些實施例中，烷基具有1至3個碳原子（「C _1-3烷基」）。在一些實施例中，烷基具有1至2個碳原子（「C _1-2烷基」）。在一些實施例中，烷基具有1個碳原子（「C ₁烷基」）。C _1-4烷基之實例包含甲基（C ₁）、乙基（C ₂）、正丙基（C ₃）、異丙基（C ₃）、正丁基（C ₄）、三級丁基（C ₄）、二級丁基（C ₄）及異丁基（C ₄）。

「鹵烷基（haloalkyl）」為其中氫原子中之一或多者獨立地經例如氟、溴、氯或碘之鹵素置換之烷基。「全鹵烷基（perhaloalkyl）」為鹵烷基子集，且係指其中所有氫原子皆獨立地經例如氟、溴、氯或碘之鹵素置換之烷基。在一些實施例中，鹵烷基部分具有1至4個碳原子（「C _1-4鹵烷基」）。在一些實施例中，鹵烷基部分具有1至3個碳原子（「C _1-3鹵烷基」）。在一些實施例中，鹵烷基部分具有1至2個碳原子（「C _1-2鹵烷基」）。在一些實施例中，所有鹵烷基氫原子經氟置換以提供全氟烷基。鹵烷基之實例包含-CF ₃、-CHF ₂、-CFH ₂、-CF ₂CF ₃、-CH ₂CF ₃、-CF ₂CF ₂CF ₃、-CCl ₃、-CFCl ₂及-CF ₂Cl。

「碳環基（carbocyclyl）」或「碳環（carbocyclic）」係指具有3至6個環碳原子（「C _3-6碳環基」）及零個環雜原子之單環、非芳族、3至6員環系統之單價基團。在一些實施例中，碳環基具有3至4個環碳原子（「C _3-4碳環基」）。在一些實施例中，碳環基具有4至6個環碳原子（「C _4-6碳環基」）。在一些實施例中，碳環基具有5至6個環碳原子（「C _5-6碳環基」）。例示性C _3-6碳環基包含但不限於環丙基（C ₃）、環丙烯基（C ₃）、環丁基（C ₄）、環丁烯基（C ₄）、環戊基（C ₅）、環戊烯基（C ₅）、環己基（C ₆）、環己烯基（C ₆）及環己二烯基（C ₆）。

「雜環基（heterocyclyl）」或「雜環（heterocyclic）」係指具有環碳原子及1至3個環雜原子之單環、非芳族、4至6員環系統之單價基團，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫（「4至6員雜環基」）。例示性含有1個雜原子之4員雜環基包含但不限於氮雜環丁烷基、氧雜環丁烷基及硫雜環丁烷基。例示性含有1個雜原子之5員雜環基包含但不限於四氫呋喃基、二氫呋喃基、四氫噻吩基、二氫噻吩基、吡咯啶基及二氫吡咯基。例示性含有2個雜原子之5員雜環基包含但不限於二氧戊環基、氧硫雜環戊烷基及二硫雜環戊烷基。例示性含有3個雜原子之5員雜環基包含但不限於三唑啉基、

二唑啉基及噻二唑啉基。例示性含有1個雜原子之6員雜環基包含但不限於哌啶基、四氫哌喃基、二氫吡啶基及噻烷基。例示性含有2個雜原子之6員雜環基包含但不限於哌

基、

啉基、二噻烷基及二氧雜環己烷基。例示性含有3個雜原子之6員雜環基包含但不限於三氮雜環己烷基。

「5員雜芳基（5-membered heteroaryl）」係指5員單環4n+2芳環系統（例如在環狀陣列中共用6個pi電子）之基團，在芳環系統中設置有環碳原子及1-3個環雜原子，其中各雜原子獨立地選自氮、氧及硫。在含有一或多個氮原子之雜芳基中，化合價准許時，連接點可為碳原子或氮原子。在一些實施例中，5員雜芳基具有1-3個選自氮、氧及硫之環雜原子。在一些實施例中，5員雜芳基具有2個選自氮、氧及硫之環雜原子。在一些實施例中，5員雜芳基具有1個選自氮、氧及硫之環雜原子。例示性含有1個雜原子之5員雜芳基包含但不限於吡咯基、呋喃基及噻吩基。例示性含有2個雜原子之5員雜芳基包含但不限於咪唑基、吡唑基、

唑基、異

唑基、噻唑基及異噻唑基。例示性含有3個雜原子之5員雜芳基包含但不限於三唑基、

二唑基及噻二唑基。

「鹵基（halo）」係指氟（fluorine/fluoro，-F）、氯（chlorine/chloro，-Cl）、溴（bromine/bromo，-Br）或碘（iodine/iodo，-I）。

「經取代（substituted）」意謂規定基團或部分攜帶一或多個取代基。在任一基團可攜帶多個取代基且多種可能取代基被提供之情況下，取代基經獨立地選擇且不必相同。例示性取代基包含但不限於羥基、鹵基、氰基、硝基、硫醇、烷基、烯基、碳環基、雜環基、雜芳基、芳基、雜芳基烷基、芳烷基、烷氧基、磷酸根、膦酸根、胺基、醯胺基、羧酸根及酯。

「未經取代（unsubstituted）」意謂規定基團不攜帶取代基。

「視情況且獨立地經取代（optionally and independently substituted）」意謂規定基團可經或可不經一或多個取代基進一步取代，且若存在超過一個取代基，則彼等取代基不必相同。

「鹽（salt）」係指任何及所有鹽，且由鹼性化合物與無機酸或有機酸或酸性化合物與無機鹼或有機鹼發生離子複合以得到電子中性化合物而產生。「醫藥學上可接受之鹽（pharmaceutically acceptable salt）」係指在合理醫學判斷範疇內適用於與人類及低等動物之組織接觸而無過度毒性、刺激、過敏反應及其類似反應且與合理效益/風險比相稱的彼等鹽。亦參見Berge等人, 《藥物科學期刊（ J. Pharmaceutical Sciences）》 (1977) 66:1-19。化合物之「游離鹼」為化合物之中性及無鹽形式。在某些實施例中，式（ I）化合物可為鹽（例如醫藥學上可接受之鹽）。在某些實施例中，例如在不提及醫藥學上可接受之鹽之情況下，式（ I）化合物可以游離鹼形式存在。

「離去基（leaving group）」係指在異質鍵斷裂中與一對電子一起離開之分子片段，其中分子片段為陰離子或中性分子。「離去基」亦指經由交叉偶合反應離開之分子片段。在異質鍵斷裂中與一對電子一起離開之例示性離去基包含但不限於鹵基（例如氯、溴、碘）及諸如經三氟甲磺醯基活化之羥基（-OTf）、經4-甲苯磺醯基活化之羥基（-OTs）、經甲磺醯基活化之羥基（-OMs）、經苯磺醯基活化之羥基（-OBs）或-OS(O) ₂OCH ₃之經活化羥基。經由交叉偶合反應離開之例示性離去基包含但不限於酉朋酸（boronic acid）或酉朋酸酯（例如二氧硼口東基團，例如四甲基二氧硼口東）、三烷基錫烷（例如(R') ₃Sn-，其中R'為C _1-3烷基）及鹵基（例如氯、溴、碘）。

羥基保護基在本領域中眾所周知且包含《有機合成中之保護基（ Protecting Groups in Organic Synthesis）》, T. W. Greene及P. G. M. Wuts, 第3版, 約翰威立, 1999中詳細描述之羥基保護基。如本文所使用之例示性「羥基保護基」包含但不限於甲氧基甲基（MOM）、甲硫基甲基（MTM）、三級丁基硫甲基、(苯基二甲基矽基)甲氧基甲基（SMOM）、苯甲氧基甲基（BOM）、對甲氧基苯甲氧基甲基（PMBM）、(4-甲氧基苯氧基)甲基（對AOM）、愈創木酚甲基（GUM）、三級丁氧基甲基、4-戊烯氧基甲基（POM）、矽烷氧基甲基、2-甲氧基乙氧基甲基（MEM）、2,2,2-三氯乙氧基甲基、雙(2-氯乙氧基)甲基、2-(三甲基矽基)乙氧基甲基（SEMOR）、四氫哌喃基（THP）、3-溴四氫哌喃基、四氫硫哌喃基、1-甲氧基環己基、4-甲氧基四氫哌喃基（MTHP）、4-甲氧基四氫硫哌喃基、1-[(2-氯-4-甲基)苯基]-4-甲氧基哌啶-4-基（CTMP）、烯丙基、苯甲基（Bn）、對甲氧基苯甲基、3,4-二甲氧基苯甲基、鄰硝基苯甲基、對硝基苯甲基、對鹵基苯甲基、2,6-二氯苯甲基、對氰基苯甲基、對苯基苯甲基、二苯甲基、三苯甲基、三甲基矽基（TMS）、三乙基矽基（TES）、三異丙基矽基（TIPS）、二甲基異丙基矽基（IPDMS）、二乙基異丙基矽基（DEIPS）、二甲基己基矽基、三級丁基二甲基矽基（TBDMS）、三級丁基二苯基矽基（TBDPS）、三苯甲基矽基、三苯基矽基、二苯基甲基矽基（DPMS）、三級丁基甲氧基苯基矽基（TBMPS）、乙酸酯、氯乙酸酯、二氯乙酸酯、三氯乙酸酯、三氟乙酸酯、甲氧基乙酸酯、三苯基甲氧基乙酸酯、苯氧基乙酸酯、對氯苯氧基乙酸酯、碳酸甲酯、碳酸9-芴基甲酯（Fmoc）、碳酸乙酯、碳酸2,2,2-三氯乙酯（Troc）、碳酸2-(三甲基矽基)乙酯（TMSEC）、碳酸2-(苯磺醯基)乙酯（Psec）、碳酸2-(三苯基磷鎓基)乙酯（Peoc）、碳酸異丁酯、碳酸乙烯酯、碳酸烯丙酯、碳酸三級丁酯（BOC）、碳酸對硝基苯酯、碳酸苯甲酯、碳酸對甲氧基苯甲酯、碳酸3,4-二甲氧基苯甲酯、碳酸鄰硝基苯甲酯及碳酸對硝基苯甲酯。

「個體（subject）」係指哺乳動物，且包含但不限於人類（亦即任何年齡群之男性或女性，例如小兒個體（例如嬰兒、兒童、青少年）或成人個體（例如年輕人、中年人或老年人））及/或例如靈長類動物（例如食蟹獼猴、恆河猴）、貓及/或犬之其他非人類哺乳動物。

「治療（treat/treating/treatment）」係指當個體患有疾病時發生且降低疾病嚴重程度或阻滯或減緩疾病或相關症狀惡化之行為。

化合物或其醫藥學上可接受之鹽之「有效量（effective amount）」為單獨或與其他療法組合在個體所患疾病之治療中提供治療效益或延緩與個體所患疾病相關之一或多種症狀或將其減至最輕的量。

Claims

一種式（ I）化合物：
或其醫藥學上可接受之鹽；其中： R ¹為氫，或 R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂OR ^P1、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2，其中R ^P1在每種情況下獨立地選自由氫及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，且R ^P2為經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ^2A及R ^2B各自獨立地為氫或鹵基；各R ³獨立地選自由鹵基及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中n為0、1或2； R ^N1為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ⁴獨立地選自由氫、-OR ^4A及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中R ^4A為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基； R ⁵獨立地選自由氫、-OR ^5A及經取代或未經取代之C _1-4烷基組成之群組，其中R ^5A為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基；環G為5員雜芳基環，其中各G ¹、G ²、G ³及G ⁴獨立地為CH、CR ^G1、N、NR ^N2、O或S，其限制條件為G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少一者為N、NR ^N2、O或S，且其中G ¹、G ²、G ³及G ⁴中不超過兩者為O或S； R ^G1在每種情況下獨立地選自由鹵基、-OR ^G2、-NR ⁷、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基或經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組，其中R ^G2為氫或經取代或未經取代之C _1-4烷基；或兩個鄰接R ^G1基團連同其所連接之原子一起形成稠合的經取代或未經取代之5-6員碳環基或稠合的經取代或未經取代之5-6員雜環基；或鄰接R ^G1基團及R ^N2基團連同其所連接之原子一起形成稠合的經取代或未經取代之5-6員雜環基；各R ^N2獨立地選自由氫、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基及經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組；各R ⁷獨立地選自由氫、經取代或未經取代之C _1-4烷基、經取代或未經取代之3-4員碳環基及經取代或未經取代之4員雜環基組成之群組；且經取代或未經取代在每種情況下係視情況且獨立地經0、1、2或3個選自由鹵基、-OH、-O(C _1-4烷基)及-O(C _1-4鹵烷基)組成之群組之取代基取代。
如請求項1之化合物，其中在環G中，G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少一者為N或NR ^N2。
如請求項2之化合物，其中在環G中，G ²或G ³中之至少一者為N或NR ^N2。
如請求項1或2之化合物，其中在環G中，G ¹、G ²、G ³及G ⁴中之至少兩者為N或NR ^N2。
如請求項1至4中任一項之化合物，其中環G為二唑。
如請求項5之化合物，其中G ²及G ³各自獨立地為N或NR ^N2。
如請求項1至4中任一項之化合物，其中環G為三唑。
如請求項7之化合物，其中G ²、G ³及G ⁴各自獨立地為N或NR ^N2。
如請求項1至8中任一項之化合物，其中R ^N2為烷基或鹵烷基。
如請求項1至6中任一項之化合物，其中G ¹及G ²中之一者為CR ^G1。
如請求項10之化合物，其中R ^G1為甲基或環丙基。
如請求項1至11中任一項之化合物，其中R ⁴為氫。
如請求項1至12中任一項之化合物，其中R ⁵為氫、烷氧基或鹵烷基。
如請求項1至12中任一項之化合物，其中R ⁵為氫、甲基、甲氧基或二氟甲基。
如請求項14之化合物，其中R ⁵為氫。
如請求項1至15中任一項之化合物，其中R ^N1為氫或甲基。
如請求項16之化合物，其中R ^N1為氫。
如請求項16之化合物，其中R ^N1為甲基。
如請求項1至18中任一項之化合物，其中R ^2A及R ^2B各自為氫。
如請求項1至18中任一項之化合物，其中R ^2A及R ^2B中之一者為氫且另一者為氟。
如請求項1至20中任一項之化合物，其中n為0或1。
如請求項21之化合物，其中n為1。
如請求項22之化合物，其中R ³為鹵基。
如請求項21之化合物，其中n為0。
如請求項1至24中任一項之化合物，其中R ¹為氫。
如請求項1至24中任一項之化合物，其中R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂、-C(=O)CH ₂N(R ^P1) ₂或-C(=O)R ^P2。
如請求項26之化合物，其中R ¹為-P(=O)(OR ^P1) ₂。
如請求項27之化合物，其中各R ^P1獨立地選自由氫及未經取代之C _1-4烷基組成之群組。
如請求項28之化合物，其中各R ^P1為氫。
如請求項28之化合物，其中各R ^P1為未經取代之C _1-4烷基。
如請求項1之化合物，其選自下表：

；或其醫藥學上可接受之鹽。
一種醫藥組合物，其包括治療有效量之式（I）化合物或其醫藥學上可接受之鹽以及醫藥學上可接受之載劑。