TW202317539A - 芳氨基衍生物雌激素受體調節劑及其用途 - Google Patents

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宋長偉
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王杰
唐平明
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Abstract

本發明公開一種式(I)所示的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽或它們的藥物組合物，及其在製備治療/預防ER介導的疾病的藥物中的用途，式(I)中各基團如說明書之定義。

Description

芳氨基衍生物雌激素受體調節劑及其用途
本發明涉及一種芳氨基衍生物雌激素受體調節劑，其在製備治療/預防ER相關疾病的藥物中的用途。
雌激素(Estrogen)包括雌酮(Estrone)、雌二醇(Estradiol)等，主要由卵巢分泌，少量由肝、腎上腺皮質及乳房分泌。作為雌性動物的主要性激素，雌激素促進女性附性器官成熟及第二性徵出現，並維持正常性欲及生殖功能。其作用主要是通過擴散進入細胞核，並和雌激素受體(Estrogen Receptor，ER)特異性結合而形成複合物，啟動的雌激素受體很快形成同源或異源二聚體，並與DNA增強子(Enhancer)包括雌激素應答元件(Estrogen Response Element，ERE)等結合，並召集其它轉錄因數形成轉錄起始複合物從而誘導轉錄。此外，啟動的雌激素受體還能召集轉錄輔助因數(Transcriptional co-factors)，並結合到位於靶基因啟動區的活化蛋白1(Activating Protein 1，AP-1)，從而調節基因轉錄活性。
雌激素受體(ER)是一種通過其與內源性雌激素的相互作用介導多種生物效應誘導的配體活化的轉錄調節蛋白。ER包含兩種亞型：分別由不同基因編碼的ER α和ER β。ER α和ER β在氨基酸水準上顯現高度的相似性，其在DNA結合結構域的相似度高達97％，配體結合結構域的相似度達56％，然而，在N末端僅有24％的低同源性。ER包含6個結構域(A-F)，組成4個主要的功能區，N端A/B域的功能區具有非配體依賴的轉錄啟動功能區AF-1，AF-1具有組成性啟動活性，通過與基礎轉錄因數、復活因數和其它轉錄因數的作用啟動標靶基因的轉錄，該區域有多個磷酸化位元點，有文獻報導AF-1的作用依賴於蛋白的磷酸化。C域組成的DNA結合結構域(DBD)具有高度的保守性，包含2個鋅指結構域，能特異性地結合到標靶DNA上，同時該結構域對受體的二聚化具有重要的作用。D域為鉸鏈區 ，連結DBD和配體結構域(LBD)，保守性較低(兩亞型間的同源性僅30％)。C端的E域組成配體結合結構域(LBD)，該結構域決定ER與雌激素、SERM(選擇性雌激素受體調節劑)、SERD(選擇性雌激素受體下調劑)等配體的特異性結合。LBD具有配體依賴的轉錄啟動功能區AF-2，與AF-1協同作用發揮ER受體啟動靶基因轉錄的功能。同時，LBD具有很強的二聚化介面，並在沒有配體的情況下仍能發揮作用，因此，LBD是受體發生二聚化的關鍵部位。
ER α主要分佈在子宮、卵巢、睾丸、垂體、腎、附睾和腎上腺中，而ER β主要分佈在前列腺、卵巢、肺、膀胱、腦和血管中。由於全激動劑或全拮抗劑都有較嚴重的副作用，選擇性雌激素受體調節劑SERM的研究應運而生。其“選擇性”是指SERM在某些組織如骨、肝、心血管系統ERβ集中區中表現為激動劑，而在另外一些組織如乳腺中表現為拮抗劑。其在子宮(ER α較顯著區)中可以是激動劑，也可以是拮抗劑。目前已上市的SERM包括他莫昔芬(Tamoxifen)、雷洛昔芬(Raloxifene)、苯卓昔芬(Bazedoxifene)、托瑞米芬(Toremifene)等，但研究發現目前已上市的SERM仍有嚴重的副作用，如他莫昔芬和托瑞米芬長期服用會引起子宮內膜增生、息肉和子宮內膜癌等，而雷洛昔芬常見的副作用包括潮熱、腿痛、乳房觸痛和靜脈栓塞等。因此研究並開發新型的化合物仍是亟需解決的問題。
選擇性雌激素受體降解劑(Selective Estrogen Receptor Degraders，SERDs)通過與雌激素受體結合並誘導其構象變化，導致疏水殘基暴露於分子表面，從而召集E3泛素連接酶。泛素連接酶通過修飾雌激素受體泛素化，並最終引導其至蛋白酶體而被降解。通過降解雌激素受體，我們可以更加徹底地阻滯雌激素信號傳導通路，並避免其召集轉錄啟動因數而成為“ 激動劑”。此外，SERD還可以降解突變的雌激素受體，從而避免抗藥性的出現。
氟維司群是目前被批准用於臨床使用的唯一SERD類藥物，用於治療ER+乳腺癌，但其成藥特性差，快速新陳代謝並且必須通過每月肌肉注射來施用，與體外研究中見到的完全ER降解相比，其限制了ER的有效降解(在臨床樣品中～50％ER降解)。
選擇性雌激素受體下調劑已顯示一定治療優勢，但仍然需要開發更多的可口服的SERD，使得候選藥物具有更加優異的特性，如療效更好、副作用更低、更優的藥代特性、給藥間隔更長等，從而更好的用於預防或治療雌激素受體相關疾病。但到目前為止，仍然沒有上市有效的口服ER降解劑，因此抑制活性高，毒性低的口服ER降解劑仍代表了一種未被滿足的臨床需求。
本發明的目的在於提供一種選擇性雌激素受體下調劑類化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，及其醫藥應用，所述化合物具有療效好、毒副作用低、安全性好、選擇性高、藥代動力學好、生物利用度高、對CYP酶無抑制的優點。
一種式(I)、(II)、(III)、(I’)、(II’)、(III’)、(II’-1)、(III’-1)、(II’-a)、(II’-a-1)、(II’-1a) 或(II’-1a-1) 所示的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，
Figure 02_image003
Figure 02_image004
Figure 02_image006
(I)                    (II)                        (III)
Figure 02_image008
Figure 02_image010
Figure 02_image012
(I’)                     (II’)                           (III’)
Figure 02_image014
Figure 02_image016
Figure 02_image018
(II’-1)                    (III’-1)                    (II’-a)
Figure 02_image020
Figure 02_image022
Figure 02_image024
(II’-a-1)              (II’-1a)                   (II’-1a-1)
其中，環A選自I-a或I-b；
Figure 02_image026
、
Figure 02_image028
；
在一些具體實施方式中，環A選自II-a或II-b：
Figure 02_image030
、
Figure 02_image032
X為N或CR x；在一些具體實施方式中，X為N、CH或CF；
a為0、1、2或3；在一些具體實施方式中，a為0、1或2；在一些具體實施方式中，a為1或2；
b為1或2；在一些具體實施方式中，a為1；在一些具體實施方式中，a為2；
Y為NR 8或CHR 8；
R 1為C 1-6烷基、C 2-6烯基或C 2-6炔基，所述R 1任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、-OC 1-4烷基、-NHC 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，其中，所述環烷基和雜環烷基任選進一步被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和-OC 1-4烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 1為C 1-4烷基，所述R 1任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、-OC 1-4烷基、-NHC 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，其中，所述環烷基和雜環烷基任選進一步被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和-OC 1-4烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 1為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基，所述R 1任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、OH、NH 2、-OC 1-4烷基、甲基氨基、二甲氨基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基、哌啶基和哌嗪基的基團取代；
每個R x獨立地為H、NH 2、OH、鹵素、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-NHC 1-4烷基或-OC 1-4烷基；在一些具體實施方式中，每個R x獨立地為H或鹵素；在一些具體實施方式中，每個R x獨立地為H、F、Cl、Br或I；
R 2、R 5、R 6、R 2’、R 5’和R 6’獨立地為H、CN、OH、NH 2、SH或鹵素；在一些具體實施方式中，R 2、R 5、R 6、R 2’、R 5’和R 6’獨立地為H、CN、OH、NH 2、SH、F、Cl、Br或I；
R 3、R 4獨立地為H、鹵素、SF 5、CN、-NR aSO 2R b、-SO 2NHR a、-P(=O)(R b) 2、或-NR aP(=O)(R b) 2；
R a為H或R b；
R b為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R b為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、苯基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基，所述R b任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、CN、NH 2、OH、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、環丙基、環丁基、環戊基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基的基團取代；
R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 3’和R 4’獨立地為H、-NHR c’、 OR d、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、F、Cl、Br、I、SF 5、CN、NH 2、OH、甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、環丁基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基，在鍵價允許的情況下，所述R 3’和R 4’ 任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、CN、NH 2、OH、甲基、乙基、丙基、環丙基、環丁基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基的基團取代；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 4-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成環丁基、環戊基、環己基，所述環丁基、環戊基、環己基任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、OH、甲基、乙基、丙基的基團取代；
在一些具體實施方式中，當b選自2時，R 3’和R 4’不同時選自H；
R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基；在一些具體實施方式中，R c為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基；
R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-COR e、-OH、-OC 1-4烷基或-SO 2Re；在一些具體實施方式中，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OH或-OC 1-4烷基；在一些具體實施方式中，R c’為乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、-COR e、-OH、甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙基氧基或-SO 2Re；
Re為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 4-6環烷基、-C 1-4烷基C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，Re為乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第三丁基、乙烯基、丙烯基、烯丙基、乙炔基、丙炔基、環丁基、環戊基、環己基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基；
R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代的C 1-4烷基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；進一步，R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代的C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R d為被環丙基、環丁基、環戊基、環己基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基取代的甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基或第三丁基；所述環丙基、環丁基、環戊基、環己基、吡唑基、呋喃基、咪唑基、噻唑基、異噻唑基、噁唑基、異噁唑基、嘧啶基、吡啶基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基和鹵代的甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基的基團取代；在一些具體實施方式中，R d為甲基、乙基、丙基、異丙基、一氟甲基、二氟甲基、三氟甲基；
R 7和R 7’為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基，所述烷基和環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、SH、C 1-4烷基和C 3-6環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 7和R 7’為H或C 1-4烷基；在一些具體實施方式中，R 7和R 7’為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、環丙基、環丁基、環戊基或環己基，所述R 7和R 7’ 任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、OH、SH、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基的基團取代；
R 8和R 8’獨立地為C 1-6烷基、-OR f、-SR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 8和R 8’獨立地為C 1-4烷基、-OR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R 8和R 8’獨立地為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、-OR f、-NHR f、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基，所述R 8和R 8’ 任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2、甲基、乙基、丙基、-CH 2OH、-CH 2CH 2OH、環丙基、環丁基、四氫呋喃基、哌啶基和哌嗪基的基團取代；
R f為H、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；在一些具體實施方式中，R f為H、甲基、乙基、丙基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基、哌啶基或哌嗪基，任選地被1-3個選自F、Cl、Br、I、OH、CN、NH 2、甲基、乙基、丙基、環丙基、環丁基、環戊基、環己基、四氫呋喃基、哌啶基和哌嗪基的基團取代；
在一些實施方案中，所述化合物需滿足：
(i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者
(ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中，
R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者
(iii)R 5為CN或鹵素；或者
(iv)R 8為-OR f、-SR f、-NHR f、C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；或者
(v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者
(vi)R 8’為-OR f，R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
在一些具體實施方式中，所述化合物需滿足：
(i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者
(ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中，
R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者
(iii)R 5為CN或鹵素；或者
(iv)R 8為-OR f、-NHR f、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；或者
(v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NHR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者
(vi)R 8’為-OR f、C 3-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代。
作為本發明的更具體的第一技術方案，式(I)、(I’)所示的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自I-a或I-b:
Figure 02_image026
、
Figure 02_image028
；
X為N或CR x；
a為0、1、2或3；
b為1或2；
Y為NR 8或CHR 8；
R 1為C 1-6烷基、C 2-6烯基或C 2-6炔基，所述R 1任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、-OC 1-4烷基、-NHC 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，其中，所述環烷基和雜環烷基任選進一步被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和-OC 1-4烷基的基團取代；
每個R x獨立地為H、NH 2、OH、鹵素、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-NHC 1-4烷基或-OC 1-4烷基；
R 2、R 5、R 6、R 2’、R 5’和R 6’獨立地為H、CN、OH、NH 2、SH或鹵素；
R 3、R 4獨立地為H、鹵素、SF 5、CN、-NR aSO 2R b、-SO 2NHR a、-P(=O)(R b) 2、-NR aP(=O)(R b) 2； R a為H或R b；
R b為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基，或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；
條件是，當b選自2時，R 3’和R 4’不同時選自H；
R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基；
R c’ 為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-COR e、-OH、-OC 1-4烷基或-SO 2Re；
Re為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 4-6環烷基、-C 1-4烷基C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；
R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代的C 1-4烷基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、或鹵代C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；
R 7和R 7’為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基，所述烷基和環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、SH、C 1-4烷基和C 3-6環烷基的基團取代；
R 8和R 8’獨立地為C 1-6烷基、-OR f、-SR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R f為H、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代。
作為本發明的更具體的第二技術方案，式(I)、(I’)所示的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，環A選自I-a或I-b:
Figure 02_image026
、
Figure 02_image028
；
X為N或CR x；
a為0、1、2或3；
b為1或2；
Y為NR 8或CHR 8；
R 1為C 1-6烷基、C 2-6烯基或C 2-6炔基，所述R 1任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、-OC 1-4烷基、-NHC 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，其中，所述環烷基和雜環烷基任選進一步被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和-OC 1-4烷基的基團取代；
每個R x獨立地為H、NH 2、OH、鹵素、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-NHC 1-4烷基或-OC 1-4烷基；
R 2、R 5、R 6、R 2’、R 5’和R 6’獨立地為H、CN、OH、NH 2、SH或鹵素；
R 3、R 4獨立地為H、鹵素、SF 5、CN、-NR aSO 2R b、-SO 2NHR a、-P(=O)(R b) 2、-NR aP(=O)(R b) 2； R a為H或R b；
R b為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基；
R c’ 為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-COR e、-OH、-OC 1-4烷基或-SO 2Re；
Re為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 4-6環烷基、-C 1-4烷基C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；
R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代的C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者R d為C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、或鹵代C 1-4烷基；
R 7和R 7’為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基，所述烷基和環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、SH、C 1-4烷基和C 3-6環烷基的基團取代；
R 8和R 8’獨立地為C 1-6烷基、-OR f、-SR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R f為H、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代。
作為本發明的更具體的第三技術方案，式(I)、(I’)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物滿足：
(i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者
(ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中，
R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者
(iii)R 5為CN或鹵素；或者
(iv)R 8為-OR f、-SR f、-NHR f、C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；或者
(v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者
(vi)R 8’為-OR f、C 3-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
其餘基團如前述第一、第二技術方案所述。
作為本發明的更具體的第四技術方案，式(I)、(I’)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物滿足：
(i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者
(ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中，
R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者
(iii)R 5為CN或鹵素；或者
(iv)R 8為-OR f、-SR f、-NHR f、C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；或者
(v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH；或者
(vi)R 8’為-OR f，R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
其餘基團如前述任一技術方案所述。
作為本發明的更具體的第五技術方案，式(I)、(I’)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II)、(II’)、(III’)或(III)的結構，
Figure 02_image010
Figure 02_image012
(II’)                  (III’)
Figure 02_image039
Figure 02_image041
(II)                      (III)
其中，環A選自II-a或II-b:
Figure 02_image030
、
Figure 02_image032
X為N或CR x；
Y為NR 8或CHR 8；
每個R x獨立地為H或鹵素；
其餘基團如前述任一技術方案所述。
作為本發明的更具體的第六技術方案，式(II’)、(II)、(III’)或(III)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，
其中，R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 4-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基的基團取代；
R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基；
R c’ 為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OH或-OC 1-4烷基；
R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代的C 1-4烷基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、或鹵代C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；
R 5獨立地為H、CN、OH或鹵素；
R 7為H或C 1-4烷基；
R 8和R 8’獨立地為C 1-4烷基、-OR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
條件是所述化合物滿足：
(i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者
(ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中，
R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者
(iii)R 5為CN或鹵素；或者
(iv)R 8為-OR f、-NHR f、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；或者
(v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NHR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH；
可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者
(vi)R 8’為-OR f、C 3-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
其餘基團如前述任一技術方案所述。
作為本發明的更具體的第七技術方案，式(II)、(II’)、(III’)或(III)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，
其中，R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基；
R c’ 為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OH或-OC 1-4烷基；
R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代的C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者，R d為C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、或鹵代C 1-4烷基；
R 5獨立地為H、CN、OH或鹵素；
R 7為H或C 1-4烷基；
R 8和R 8’獨立地為C 1-4烷基、-OR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
條件是所述化合物滿足：
(i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者
(ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中，
R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者
(iii)R 5為CN或鹵素；或者
(iv)R 8為-OR f、-NHR f、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；或者
(v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NHR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH；或者
(vi)R 8’為-OR f，R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；
其餘基團如前述任一技術方案所述。
作為本發明的更具體的第八技術方案，式(I)、(I’)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(III’-1)、(II’-1)的結構，
Figure 02_image016
(III’-1)
Figure 02_image014
(II’-1)
其中，環A選自II-a或II-b:
Figure 02_image030
、
Figure 02_image032
X為N或CR x；
Y為NR 8或CHR 8；
每個R x獨立地為H或鹵素；
條件是，R 3’和R 4’不同時選自H；
其餘基團如前述任一技術方案所述。
作為本發明的更具體的第九技術方案，式(I)、(I’)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II’-a)、(II’-a-1)的結構，
Figure 02_image018
(II’-a)
Figure 02_image020
(II’-a-1)
每個Rx獨立地為H或鹵素；
R 3’和R 4’獨立地為H、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、-O-CH 2-C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基、C 2-6烯基、C 2-6炔基，或者，R 3’和R 4’形成4元環烷基、5元環烷基；
條件是，R 3’和R 4’不同時選自H；
R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
進一步，
每個Rx獨立地為H或鹵素；
R 3’和R 4’獨立地為H、C 2-6烯基、C 2-6炔基，條件是，R 3’和R 4’不同時選自H；
R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3个选自N、S、O杂原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任选地被1-3个选自卤素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3个选自N、S、O杂原子的4-7元雜環烷基的基团取代。
作為本發明的更具體的第十技術方案，式(II’-a)、(II’-a-1)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，
每個Rx獨立地為H、F或Cl；在某些實施方案中，每個Rx獨立地為F、Cl；在某些實施方案中，每個Rx獨立地為F；
R 3’和R 4’獨立地為H、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、-O-CH 2-C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基、C 2-4烯基、C 2-4炔基；在某些實施方案中，R 3’和R 4’獨立地為H、C 2-4烯基、C 2-4炔基；在某些實施方案中，R 3’和R 4’獨立地為H、乙烯基、丙烯基、丁烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基；條件是，R 3’和R 4’不同時選自H；
R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為C 1-4烷基、C 3-4環烷基或含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1、2、3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-2烷基、-C 1-2烷基-OH、C 3-4環烷基和含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為C 1-4烷基，所述烷基任選地被1、2、3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-2烷基、-C 1-2烷基-OH、C 3-4環烷基和含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基，並任選地被1、2、3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-2烷基、-C 1-2烷基-OH、C 3-4環烷基和含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為C 1-4烷基，所述烷基被1、2、3个选自F、Cl、OH、CN、NH 2、甲基、羥基甲基、環丙基、氮雜環丁基、氧雜環丁基的基团取代。在某些實施方案中，R 8’獨立地為-CH 3、-CH 2F、-CHF 2、-CF 3、-CH 3、-CH 2Cl、-CHCl 2、-CCl 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2F、-CH 2CHF 2、-CH 2CF 3、-CH 2CH 2Cl、-CH 2CHCl 2、-CH 2CCl 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH 2CF 2CH 3、-CH 2CF 2CH 2OH、-CH 2CF 2CH 2F、-CH 2CF 2CHF 2、-CH 2CF 2CF 3、-CF 2CF 2CH 2OH、-CH(F)CF 2CH 2OH、-CH(F)CH(F)CH 2OH、- CH 2CCl 2CH 3、-CH 2CCl 2CH 2OH、-CH 2CCl 2CH 2Cl、-CH 2CF 2CH 2NH 2、-CH 2CF 2CH 2CN、 -CH 2C(CH 3) 2F、-CH 2CH 2CH 2CH 3、-CH 2C(CH 3) 2F、-CH 2C(CH 3) 2Cl、
Figure 02_image050
、
Figure 02_image052
。
作為本發明的更具體的第十一技術方案，式(I)、(I’)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II’-1a)、(II’-1a-1)的結構，
Figure 02_image022
(II’-1a)
Figure 02_image024
(II’-1a-1)
每個Rx獨立地為H或鹵素；
R 3’和R 4’獨立地為H、鹵代C 1-4烷基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素；或者
R 3’和R 4’一起形成環丁基；
R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
條件是，R 3’和R 4’不同時選自H；
進一步，
每個Rx獨立地為H或鹵素；
R 3’和R 4’獨立地為H、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素；
R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；
條件是，R 3’和R 4’不同時選自H。
作為本發明的更具體的第十二技術方案，式(II’-1a)、(II’-1a-1)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，
每個Rx獨立地為H、F或Cl；在某些實施方案中，每個Rx獨立地為F、Cl；在某些實施方案中，每個Rx獨立地為F；
R 3’和R 4’獨立地為H、C 2-4烯基、C 2-4炔基、鹵素；在某些實施方案中，R 3’和R 4’獨立地為H、乙烯基、丙烯基、丁烯基、乙炔基、丙炔基、丁炔基、F、Cl；條件是，R 3’和R 4’不同時選自H；
R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為C 1-4烷基、C 3-4環烷基或含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1、2、3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-2烷基、-C 1-2烷基-OH、C 3-4環烷基和含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為C 1-4烷基，所述烷基任選地被1、2、3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-2烷基、-C 1-2烷基-OH、C 3-4環烷基和含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基，並任選地被1、2、3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-2烷基、-C 1-2烷基-OH、C 3-4環烷基和含有1、2、3個選自N、S、O雜原子的4、5、6元雜環烷基的基團取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為C 1-4烷基，所述烷基被1、2、3个选自F、Cl、OH、CN、NH 2、甲基、羥基甲基、環丙基、氮雜環丁基、氧雜環丁基的基团取代；在某些實施方案中，R 8’獨立地為-CH 3、-CH 2F、-CHF 2、-CF 3、-CH 3、-CH 2Cl、-CHCl 2、-CCl 3、-CH 2CH 3、-CH 2CH 2F、-CH 2CHF 2、-CH 2CF 3、-CH 2CH 2Cl、-CH 2CHCl 2、-CH 2CCl 3、-CH 2CH 2CH 3、-CH 2CF 2CH 3、-CH 2CF 2CH 2OH、-CH 2CF 2CH 2F、-CH 2CF 2CHF 2、-CH 2CF 2CF 3、-CF 2CF 2CH 2OH、-CH(F)CF 2CH 2OH、-CH(F)CH(F)CH 2OH、-CH 2CCl 2CH 3、-CH 2CCl 2CH 2OH、-CH 2CCl 2CH 2Cl、-CH 2CF 2CH 2NH 2、-CH 2CF 2CH 2CN、 -CH 2C(CH 3) 2F、-CH 2CH 2CH 2CH 3、-CH 2C(CH 3) 2F、-CH 2C(CH 3) 2Cl、
Figure 02_image050
、
Figure 02_image052
。
作為本發明的更具體的第十三技術方案，式(II’-1a)、(II’-1a-1)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，
每個Rx獨立地為F；
R 3’和R 4’獨立地為H、二氟甲基、三氟甲基、乙烯基、丙烯基、乙炔基、丙炔基、F或Cl；在某些實施方案中，R 3’和R 4’獨立地為H、乙烯基、丙烯基、乙炔基、丙炔基、F或Cl；
R 8’獨立地為甲基、乙基、丙基，所述甲基、乙基、丙基被1、2或3个选自F、Cl、OH、CN、NH 2、甲基、羥基甲基、環丙基、氮雜環丁基、氧雜環丁基的基团取代;
條件是，R 3’和R 4’不同時選自H。
作為本發明的更具體的第十四技術方案，式(I)、(I’)、(II)、(II’)、(II’-1)、(III’-1)、(III’)、(III)、 (II’-a)、(II’-a-1)、(II’-1a) 或(II’-1a-1)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物選自以下結構之一：
Figure 02_image058
Figure 02_image060
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Figure 02_image074
Figure 02_image076
Figure 02_image078
。
作為本發明的更具體的第十五技術方案，式(I)、(I’)、(II)、(II’)、(II’-1)、(III’-1)、(III’)、(III) 、(II’-a)、(II’-a-1)、(II’-1a) 或(II’-1a-1)所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物選自以下結構之一：
Figure 02_image080
Figure 02_image082
Figure 02_image084
Figure 02_image086
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Figure 02_image100
Figure 02_image102
。
本發明還提供了一種藥物組合物，其含有前述第一至第十五技術方案任意一項所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。
進一步，所述的藥物組合物包含1-600mg的前述任一技術方案所述的化合物，其立體異構體、氘代物、溶劑化物、或藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。
進一步地，本發明還提供了前述任一實施方案所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽或藥物組合物在製備ER介導的疾病的藥物中的用途。
進一步地，ER介導的疾病包括但不限於乳腺癌、卵巢癌、子宮癌或宮頸癌。
本發明涉及一種藥物組合物或藥物製劑，所述的藥物組合物或藥物製劑包含治療有效量的本發明所述的化合物或者其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。該藥物組合物可以為單位制劑形式(單位制劑中主藥的量也被稱為“製劑規格”)。
本發明還提供了一種用於治療哺乳動物的疾病的方法，所述方法包括給予受試者治療有效量的前述任意一項技術方案所述的化合物，其立體異構體、氘代物、溶劑化物、或藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的輔料和/或載體，治療有效量較佳1-600mg；所述的疾病較佳ER介導的疾病，所述的疾病更較佳乳腺癌、卵巢癌、子宮癌或宮頸癌。
本發明還提供一種用於治療哺乳動物的疾病的方法，其包括向所述哺乳動物給予治療有效量的本發明所述的化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽或藥物組合物。一些實施方案中，本發明中所述哺乳動物包括人。
本申請中所述“有效量”或“治療有效量”是指給予足夠量的本申請公開的化合物，其將在某種程度上緩解所治療的疾病或病症(例如癌症)的一種或多種症狀。在一些實施方案中，結果是減少和/或緩和疾病的體征、症狀或原因，或生物系統的任何其它希望改變。例如，針對治療用途的“有效量”是提供臨床上顯著的疾病症狀降低所需的包含本申請公開的化合物的組合物的量。治療有效量的實例包括但不限於1-600mg、2-600mg、3-600mg、4-600mg、5-600mg、6-600mg、10-600mg、20-600mg、25-600mg、30-600mg、40-600mg、50-600mg、60-600mg、70-600mg、75-600mg、80-600mg、90-600mg、100-600mg、200-600mg、1-500mg、2-500mg、3-500mg、4-500mg、5-500mg、6-500mg、10-500mg、20-500mg、25-500mg、30-500mg、40-500mg、50-500mg、60-500mg、70-500mg、75-500mg、80-500mg、90-500mg、100-500mg、125-500mg、150-500mg、200-500mg、250-500mg、300-500mg、400-500mg、5-400mg、10-400mg、20-400mg、25-400mg、30-400mg、40-400mg、50-400mg、60-400mg、70-400mg、75-400mg、80-400mg、90-400mg、100-400mg、125-400mg、150-400mg、200-400mg、250-400mg、300-400mg、1-300mg、2-300mg、5-300mg、10-300mg、20-300mg、25-300mg、30-300mg、40-300mg、50-300mg、60-300mg、70-300mg、75-300mg、80-300mg、90-300mg、100-300mg、125-300mg、150-300mg、200-300mg、250-300mg、1-200mg、2-200mg、5-200mg、10-200mg、20-200mg、25-200mg、30-200mg、40-200mg、50-200mg、60-200mg、70-200mg、75-200mg、80-200mg、90-200mg、100-200mg、125-200mg、150-200mg；
本發明涉及一種藥物組合物或藥物製劑，所述的藥物組合物或藥物製劑包含治療有效量的本發明所述的化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽和輔料和/或載體。該藥物組合物可以為單位制劑形式(單位制劑中主藥的量也被稱為“製劑規格”)。在一些實施方案中，該藥物組合物包括但不限於:1mg、1.25mg、2.5mg、5mg、10mg、12.5mg、15mg、20mg、25mg、30mg、35mg、40mg、45mg、50mg、60mg、70mg、80mg、90mg、100mg、120mg、125mg、150mg、200mg、250mg、300mg、400mg、500mg、600mg的本發明化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽。
一種用於治療哺乳動物的疾病的方法，所述方法包括給予受試者治療有效量的本發明化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽，治療有效量較佳1-600mg，所述的疾病較佳乳腺癌、卵巢癌、子宮癌或宮頸癌。
一種用於治療哺乳動物的疾病的方法所述方法包括，將藥物本發明化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽以1-600mg/天的日劑量給予受試者，所述日劑量可以為單劑量或分劑量，在一些實施方案中，日劑量包括但不限於：1-600mg/天、1-500mg/天、1-400mg/天、1-300mg/天、1-250mg/天、1-200mg/天、1-150mg/天、1-125mg/天、1-100mg/天、1-80mg/天、1-60mg/天、1-40mg/天、1-20mg/天、5-600mg/天、5-500mg/天、5-400mg/天、5-300mg/天、5-250mg/天、5-200mg/天、5-150mg/天、5-125mg/天、5-100mg/天、5-80mg/天、5-60mg/天、5-40mg/天、5-20mg/天、5-90mg/天、5-70mg/天、5-50mg/天、5-30mg/天、10-600mg/天、10-500mg/天、10-400mg/天、10-300mg/天、10-250mg/天、10-200mg/天、10-150mg/天、10-125mg/天、10-100mg/天、10-80mg/天、10-60mg/天、10-40mg/天、10-20mg/天、10-90mg/天、10-70mg/天、10-50mg/天、10-30mg/天、20-600mg/天、20-500mg/天、20-400mg/天、20-300mg/天、20-200mg/天、20-100mg/天、20-80mg/天、20-60mg/天、20-40mg/天、50-600mg/天、50-500mg/天、50-450mg/天、50-400mg/天、50-350mg/天、50-50-300mg/天、50-250mg/天、50-200mg/天、50-150mg/天、50-100mg/天； 100-600mg/天、100-500mg/天、100-400mg/天、100-300mg/天、100-200mg/天；
在一些實施方案中，日劑量包括但不限於：1mg/天、2.5mg/天、5mg/天、10mg/天、12.5mg/天、15mg/天、20mg/天、25mg/天、30mg/天、35mg/天、40mg/天、45mg/天、50mg/天、60mg/天、70mg/天、80mg/天、90mg/天、100mg/天、120mg/天、150mg/天、200mg/天、250mg/天、300mg/天、400mg/天、500mg/天、600mg/天。
本發明涉及一種試劑盒，該試劑盒可以包括單劑量或多劑量形式的組合物，該試劑盒包含本發明化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽，本發明化合物的或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽量與上述藥物組合物中其量相同。
本發明中本發明化合物或者其立體異構體、氘代物、溶劑化物、藥學上可接受的鹽的量在每種情況下以游離鹼的形式換算。
“製劑規格”是指每一支、片或其他每一個單位制劑中含有主藥的重量。
合成路線
本領域技術人員可以結合已知的有機合成技術製備本發明的化合物，其起始原料為市售化學品和(或)化學文獻中所述的化合物。“市售化學品”是從正規商業來源獲得的，供應商包括：泰坦科技、安耐吉化學、上海德默、成都科龍化工、韶遠化學科技、南京藥石、藥明康德和百靈威科技等公司。
本領域的參考書和專著，詳細介紹了可用於製備本文所述化合物的反應物的合成，或提供了描述該製備方法的文章以供參考。這些參考書和專著包括：“Synthetic Organic Chemistry”, John Wiley & Sons, Inc., New York; S. R. Sandler et al., “Organic Functional Group Preparations,” 2nd Ed., Academic Press, New York, 1983; H. O. House, “Modern Synthetic Reactions”, 2nd Ed., W. A. Benjamin, Inc. Menlo Park, Calif. 1972; T. L. Gilchrist, “Heterocyclic Chemistry”, 2nd Ed., John Wiley & Sons, New York, 1992; J. March, “Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms and Structure”, 4th Ed., Wiley‑Interscience, New York, 1992; Fuhrhop, J. and Penzlin G. “Organic Synthesis: Concepts, Methods, Starting Materials”, Second, Revised and Enlarged Edition (1994) John Wiley & Sons ISBN: 3‑527-29074-5; Hoffman, R.V. “Organic Chemistry, An Intermediate Text” (1996) Oxford University Press, ISBN 0-19-509618-5; Larock, R. C. “Comprehensive Organic Transformations: A Guide to Functional Group Preparations” 2nd Edition (1999) Wiley-VCH, ISBN: 0-471-19031-4; March, J. “Advanced Organic Chemistry: Reactions, Mechanisms, and Structure” 4th Edition (1992) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-60180-2; Otera, J. (editor) “Modern Carbonyl Chemistry” (2000) Wiley-VCH, ISBN: 3-527-29871-1; Patai, S. “Patai’s 1992 Guide to the Chemistry of Functional Groups” (1992) Interscience ISBN: 0-471-93022-9; Solomons, T. W. G. “Organic Chemistry” 7th Edition (2000) John Wiley & Sons, ISBN: 0-471-19095-0; Stowell, J.C., “Intermediate Organic Chemistry” 2nd Edition (1993) Wiley-Interscience, ISBN: 0-471-57456-2; “Industrial Organic Chemicals: Starting Materials and Intermediates: An Ullmann’s Encyclopedia” (1999) John Wiley & Sons, ISBN: 3-527-29645-X, in 8 volumes; “Organic Reactions” (1942-2000) John Wiley & Sons, in over 55 volumes; and “Chemistry of Functional Groups” John Wiley & Sons, in 73 volumes.
通過美國化學會化學文摘社製備的已知化學物質的索引，可以選擇性地識別特定和類似的反應物，這些索引可在大多數公共圖書館和大學圖書館以及線上獲得。已知但在目錄中不可商購的化學品可選地由定制化學合成工廠製備，其中許多標準化學供應工廠(例如，上面列出的那些)提供定制合成服務。 製備和選擇本文所述化合物的藥用鹽的參考文獻是P. H. Stahl & C. G. Wermuth “Handbook of Pharmaceutical Salts”, Verlag Helvetica Chimica Acta, Zurich, 2002.
術語
在本發明未特殊說明的情況下，本發明的術語具有以下含義：
本發明所述基團和化合物中所涉及的碳、氫、氧、硫、氮或鹵素均包括它們的同位素，及本發明所述基團和化合物中所涉及的碳、氫、氧、硫、氮或鹵素任選進一步被一個或多個它們對應的同位素所替代，其中碳的同位素包括 12C、 13C和 14C，氫的同位素包括氕(H)、氘(氘，又稱為重氫)、氚(T，又稱為超重氫)，氧的同位素包括 16O、 17O和 18O，硫的同位素包括 32S、 33S、 34S和 36S，氮的同位素包括 14N和 15N，氟的同位素 19F，氯的同位素包括 35Cl和 37Cl，溴的同位素包括 79Br和 81Br。
“鹵素”在本文中是指F、Cl、Br、I、或者它們的同位素。
“鹵代”或“鹵素取代”是指被一個以上選自F、Cl、Br、I、或者它們的同位素取代，鹵素取代基數量的上限等於被取代基團可被取代的氫數之和，在未作特殊限定下，鹵素取代基數量為1至該上限之間的任意整數，當鹵素取代基數量大於1時，可以是相同或不同的鹵素進行取代。通常包括1-5個鹵素取代、1-3鹵素取代、1-2個鹵素取代、1個鹵素取代的情形。
“氘”是指氫(H)的同位素氘。
“氘代”或“氘代物”是指烷基、環烷基、亞烷基、芳基、雜芳基、巰基、雜環烷基、烯基、炔基等基團上的氫原子被至少一個氘原子取代的情形，氘代的數量上限等於被取代基團可被取代的氫數之和，在未作特殊限定下，氘代數量為1至該上限之間的任意整數，例如1-20個氘原子取代、1-10個氘原子取代、1-6個氘原子取代、1-3個氘原子取代、1-2個氘原子取代或1個氘原子取代。
“C x-y”基團是指包含x至y個碳原子的基團，比如“C 1-6烷基”指包含1-6個碳原子的烷基。
“烷基”是指一價的直鏈或支鏈飽和脂肪族烴基。通常為1至20個碳原子的烷基，或者1至8個碳原子的烷基，或者1至6個碳原子的烷基，或者1至4個碳原子的烷基。非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、新丁基、第三丁基、正戊基、異戊基、新戊基、正己基等，烷基可以進一步被取代基取代。
“鹵代烷基”是指烷基中的一個或多個氫被一個或多個鹵素原子(如氟、氯、溴、碘或其同位素)替代的情形，鹵素取代基的數量的上限等於烷基中可被取代的氫數之和，在未作特殊限定下，鹵素取代基數量為1至該上限之間的任意整數。通常烷基被1-5個鹵素取代、或者1-3鹵素取代、或者1-2個鹵素取代或1個鹵素取代；當鹵素取代基數量大於1時，可以是相同或不同的鹵素進行取代；具體示例包括但不限於-CF 3、-CH 2Cl、-CH 2CF 3、-CCl 2、CF 3等。
“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基。例如-O-C 1-8烷基、 -O-C 1-6烷基、-O-C 1-4烷基或-O-C 1-2烷基。具體的非限制性實施例包括甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、仲丁氧基、第三丁氧基、正戊氧基、正己氧基、環丙氧基和環丁氧基等；所述的烷氧基可以任選被取代基取代。
“鹵代烷氧基”是指-O-鹵代烷基。例如-O-鹵代C 1-8烷基、-O-鹵代C 1-6烷基、-O-鹵代C 1-4烷基或-O-鹵代C 1-2烷基；鹵素取代基的數量的上限等於被取代基團可被取代的氫數之和，在未作特殊限定下，鹵素取代基數量為1至該上限之間的任意整數，較佳1-5個鹵素取代、1-3鹵素取代、1-2個鹵素取代、1個鹵素取代；當鹵素取代基數量大於1時，可以是相同或不同的鹵素進行取代；非限制性實施例包括一氟甲氧基、二氟甲氧基、三氟甲氧基、二氟乙基氧基等。
“烯基”是指包含至少一個碳碳雙鍵(C＝C)的直鏈烴基或支鏈烴基，通常包含2至18個碳原子，如2至8個碳原子，進一步如2至6個碳原子，再進一步如2至4個碳原子，其示例包括但不限於乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、2-甲基-1-戊烯基、1-庚烯基、2-庚烯基、3-庚烯基、4-庚烯基、1-辛烯基、3-辛烯基、1-壬烯基、3-壬烯基、1-癸烯基、4-癸烯基、1,3-丁二烯、1,3-戊二烯、1,4-戊二烯和1,4-己二烯等；所述的烯基可以任選進一步被取代基取代。
“炔基”是指含有至少一個碳碳三鍵(C≡C)的直鏈烴基或支鏈烴基，通常包含2至18個碳原子，進一步包含2至8個碳原子，進一步包含2至6個碳原子，再進一步包含2至4個的碳原子，其示例包括但不限於乙炔基、1-丙炔基、2-丙炔基、丁炔基、2-丁炔基、3-丁炔基、1-甲基-2-丙炔基、4-戊炔基、3-戊炔基、1-甲基-2-丁炔基、2-己炔基、3-己炔基、2-庚炔基、3-庚炔基、4-庚炔基、3-辛炔基、3-壬炔基和4-癸炔基等；所述的炔基可以任選地被取代基取代。
“環烷基”是指飽和或部分不飽和的、不含環雜原子的、非芳香性的碳環烴基。環烷基可以是單環、雙環或多環，雙環或多環可以是並環、螺環、橋環或其組合形式，雙環或多環中可以包括一個及以上的芳環，但環系統整體不具有芳香性，連接位點可以在芳環上或非芳香環上。通常環烷基含有3至20個碳原子，進一步含有3-8個碳原子，更進一步含有3-6個碳原子；當為單環環烷基時，含有3-15個碳原子，或者3-10個碳原子，或者3-8個碳原子，或者3-6個碳原子；當為雙環或多環環烷基時，含有5-12個碳原子，或者含有5-11個碳原子，或者含有6-10個碳原子；非限制性實施例包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基、丁烯基、環戊烯基、環己烯基、
Figure 02_image104
、
Figure 02_image106
、
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、
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、
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、
Figure 02_image114
、
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、
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、
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、
Figure 02_image122
、
Figure 02_image124
、
Figure 02_image126
、
Figure 02_image128
等，環烷基可以任選地被取代基取代。
“芳基”是指具有芳香性不含有雜原子的碳環，包括單環芳基和稠環芳基。通常含有6至13個碳原子，進一步含有6至9個碳原子，進一步為苯基，非限制性實施例包含苯基、萘基、蒽基、菲基，芳基可以任選地被取代基取代。
“碳環”或“碳環基”是指飽和的、部分不飽和的、或芳香的碳環，其含義包括芳基和環烷基。碳環可以是單環、雙環或多環，雙環或多環包括橋環、並環和螺環以及它們的組合形式。碳環通常有3至12個碳原子，或者3-10個碳原子，或者3-6個碳原子。非限制性實施例中，單環碳環包括環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環庚基或苯基等，雙環橋環包括
Figure 02_image122
、
Figure 02_image124
、
Figure 02_image126
等，雙環並環包括
Figure 02_image133
、
Figure 02_image116
、
Figure 02_image118
、
Figure 02_image137
、
Figure 02_image139
和
Figure 02_image120
等，雙環螺環包括
Figure 02_image142
、
Figure 02_image144
、
Figure 02_image106
、
Figure 02_image108
、
Figure 02_image110
和
Figure 02_image112
等，碳環可以任選被取代基所取代。
“雜環烷基”是指包含1、2、3、或4個選自N、S、O雜原子的飽和或部分不飽和的非芳香性碳環。雜環烷基可以是單環、雙環或多環，雙環或多環可以是橋環、並環、螺環或其組合形式，雙環或多環中可以包括一個及以上的芳環或雜芳環，但環系統整體不具有芳香性，連接位點可以在芳香環上或非芳香環上。通常雜環烷基為3至20元環，當為單環雜環烷基時，通常為3至15元環，或者3-10元環，或者3-8元環，或者3-6元環；當為雙環或多環環雜環烷基時，通常為5-12元環，或者5-11元環，或者6-9元環。其中的雜原子N、S包括其氧化態。雜環烷基的非限制性實施例包括氮雜環丁基、嗎啉基、哌嗪基、哌啶基、四氫吡喃基、氧雜環丁基、吡喃基、氮雜環戊烯基、氮雜環己烯基、氧雜環戊烯基、氧雜環己烯基等，雜環烷基可以任選地被取代基取代。
“雜芳環”或“雜芳基”未特殊說明時，是指包含1至4個選自N、O或S及其氧化態的雜原子且具有芳香性的環，可以是單環、雙環或多環，雙環或多環可以是橋環、並環、螺環以及它們的組合形式；當為雙環或多環時，可以是雜芳基與芳基稠和，也可以是雜芳基與雜芳基的稠和，其中雜芳基或芳基均可為連接位點。非限制性實施例包括呋喃基、噻吩基、吡咯基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、吡啶基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、吲哚基、嘌呤基、
Figure 02_image150
、
Figure 02_image152
、
Figure 02_image154
、
Figure 02_image156
、
Figure 02_image158
、
Figure 02_image160
等；所述的雜芳基可以任選被取代基所取代。
“芳環”或“芳香環”的定義包括芳基和雜芳基，所述的芳環可以任選被取代基所取代。
“雜環”或“雜環基”是指飽和或不飽和的、芳香或者非芳香的、包含1至4個選自N、O或S及其氧化態的雜原子的環，其含義包括雜芳基和雜環烷基。雜環包括單環雜環、雙環橋雜環、雙環並雜環和雙環螺雜環或其組合形式。通常為3至12元雜環或者5至12元雜環，或者5至7元雜環。雜環基可以連接在雜原子或者碳原子上，非限制性實施例包括環氧乙基、氮雜環丙基、氧雜環丁基、氮雜環丁基、1,3-二氧戊環基、1,4-二氧戊環基、1,3-二氧六環基、哌嗪基、氮雜環庚基、吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡喃基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、咪唑基、哌啶基、哌叮基、嗎啉基、硫代嗎啉基、1,3-二噻基、二氫呋喃基、二氫吡喃基、二噻戊環基、四氫呋喃基、四氫吡咯基、四氫咪唑基、噁唑基、二氫噁唑基、四氫噁唑基、四氫噻唑基、四氫吡喃基、苯並咪唑基、苯並吡啶基、吡咯並吡啶基、苯並二氫呋喃基、氮雜二環[3.2.1]辛烷基、氮雜二環[5.2.0]壬烷基、氧雜三環[5.3.1.1]十二烷基、氮雜金剛烷基和氧雜螺[3.3]庚烷基、
Figure 02_image162
、
Figure 02_image164
、
Figure 02_image166
、
Figure 02_image168
、
Figure 02_image170
、
Figure 02_image172
、
Figure 02_image174
、
Figure 02_image176
、
Figure 02_image178
等，雜環可以任選被取代基所取代。
“亞雜環基”是指取代或未取代、飽和或不飽和、芳香或者非芳香的二價雜環基團。非限制性實施例包括
Figure 02_image180
、
Figure 02_image182
、
Figure 02_image184
、
Figure 02_image186
、
Figure 02_image188
等。
“螺環”是指環與環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，其可以包含0或1個以上的雙鍵或三鍵，可以含有0至5個選自N、O、S、P、Si及其氧化態的雜原子。通常螺環為6至14元環，或者6至12元環，或者6至10元環。通常螺環為三螺三(表示三元環螺三元環)、三螺四、三螺五、三螺六、四螺四、四螺五、四螺六、五螺五或者五螺六。螺環的其非限定性實例包括
Figure 02_image190
，所述的螺環可以任選被取代基所取代。
“並環”是指環與環共用毗鄰的兩個環原子和一個化學鍵的多環基團，可以含有一個或多個雙鍵或三鍵，並環可以含0至5個選自Ｎ、S、O、P、Si及其氧化態的雜原子。通常並環為5至20元環，或者5至14元環，或者5至12元環，或者5至10元環。通常並環為三並四環(表示三元環與四元環形成的並環，根據IUPC命名規則有可能是三元環作為基本環也可能是四元環作為基本環的並環，以下同理)、三並五環、三並六環，四並四環、四並五環、四並六環、五並五環、五並六環、六並六環。並環的非限定性實例包括嘌呤、喹啉、異喹啉、苯並吡喃、苯並呋喃、苯並噻吩、
Figure 02_image192
；所述的並環可以任選被取代基所取代。
“橋環”是指兩個環之間共用兩個不相鄰的環原子，可以含有1個或多個雙鍵或三鍵。橋環可以含0至5個選自Ｎ、S、O、P、Si及其氧化態的雜原子。通常橋環的環原子為5至20個，或者5至14個，或者5至12個，或者5至10個。橋環的非限定性實例包括金剛烷、
Figure 02_image194
Figure 02_image196
。
“取代”或“取代基”在未特殊說明時，是指在化學理論允許的位置發生任意取代，取代基個數符合化學鍵規則。示例性的取代基包括但不限於：C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 3-8雜烷基、C 5-12芳基、5-12元雜芳基、羥基、C 1-6烷氧基、C 5-12芳氧基、硫醇基、C 1-6烷硫基、氰基、鹵素、C 1-6烷硫代羰基、C 1-6烷氨基甲醯基、N-氨基甲醯基、硝基、甲矽烷基、亞磺醯基、磺醯基、亞碸、鹵代C 1-6烷基、鹵代C 1-6烷氧基、氨基、膦酸、-CO 2(C 1-6烷基)，-OC(=O)(C 1-6烷基)，-OCO 2(C 1-6烷基)，-C(=O)NH 2，-C(=O)N(C 1-6烷基) 2，-OC(=O)NH(C 1-6烷基)，-NHC(=O)(C 1-6烷基)，-N(C 1-6烷基)C(=O)(C 1-6烷基)，-NHCO 2(C 1-6烷基)，-NHC(=O)N(C 1-6烷基) 2，-HC(=O)NH(C 1-6烷基)，-NHC(=O)NH 2，-NHSO 2(C 1-6烷基)，-SO 2N(C 1-6烷基) 2，-SO 2NH(C 1-6烷基)，-SO 2NH 2，-SO 2C 1-6烷基等。
“任選”或“任選地”是指隨後所描述的事件或環境可以但不必須發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生的場合。如：“任選被F取代的烷基”指烷基可以但不必須被F取代，說明包括烷基被F取代的情形和烷基不被F取代的情形。
“藥學上可接受的鹽”是指本發明化合物保持游離酸或者游離鹼的生物有效性和特性，且所述的游離酸通過與無毒的無機鹼或者有機鹼，所述的游離鹼通過與無毒的無機酸或者有機酸反應獲得的鹽。
“藥物組合物”表示一種或多種本文所述化合物或其立體異構體、溶劑化物、氘代物藥學上可接受的鹽或共晶，與其他組成成分的混合物，其中其他組分包含生理學/藥學上可接受的載體和/賦形劑。
“載體”指的是：不會對生物體產生明顯刺激且不會消除所給予化合物的生物活性和特性，並能改變藥物進入人體的方式和在體內的分佈、控制藥物的釋放速度並將藥物輸送到靶向器官的體系，非限制性的實例包括微囊與微球、奈米粒、脂質體等。
“賦形劑”指的是：其本身並非治療劑，用作稀釋劑、輔料、粘合劑和/或媒介物，用於添加至藥物組合物中以改善其處置或儲存性質或允許或促進化合物或藥物組合物形成用於給藥的單位劑型。如本領域技術人員所已知的，藥用賦形劑可提供各種功能且可描述為潤濕劑、緩衝劑、助懸劑、潤滑劑、乳化劑、崩解劑、吸收劑、防腐劑、表面活性劑、著色劑、矯味劑及甜味劑。藥用賦形劑的實例包括但不限於：(1)糖，例如乳糖、葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，例如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；(3)纖維素及其衍生物，例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素、乙酸纖維素、羥丙基甲基纖維素、羥丙基纖維素、微晶纖維素及交聯羧甲基纖維素(例如交聯羧甲基纖維素鈉)；(4)黃蓍膠粉；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石；(8)賦形劑，例如可哥脂及栓劑蠟；(9)油，例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；(10)二醇，例如丙二醇；(11)多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露醇及聚乙二醇；(12)酯，例如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，例如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)海藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格溶液(Ringer’ssolution)；(19)乙醇；(20)pH緩衝溶液；(21)聚酯、聚碳酸酯和/或聚酐；及(22)其他用於藥物製劑中的無毒相容物質。
“立體異構體”是指由分子中原子在空間上排列方式不同所產生的異構體，包括順反異構體、對映異構體和構象異構體。
本發明的化合物還包括其互變異構體，例如當本發明闡述嘧啶環被OH取代的左側化合物時，也同時包括右側的互變異構體化合物。
Figure 02_image198
“溶劑化物”指本發明化合物或其鹽與分子間非共價力結合的化學計量或非化學計量的溶劑形成的物質。當溶劑為水時，則為水合物。
“共晶”是指活性藥物成分(API)和共晶形成物(CCF)在氫鍵或其他非共價鍵的作用下結合而成的晶體，其中API和CCF的純態在室溫下均為固體，並且各組分間存在固定的化學計量比。共晶是一種多組分晶體，既包含兩種中性固體之間形成的二元共晶，也包含中性固體與鹽或溶劑化物形成的多元共晶。
以下將通過實施例對本發明的內容進行詳細描述。實施例中未注明具體條件的，按照常規條件的實驗方法進行。所舉實施例是為了更好地對本發明的內容進行說明，但並不能理解為本發明的內容僅限於所舉實例。本領域常規技術人員根據上述發明內容對實施方案進行非本質的改進和調整，仍屬於本發明的保護範圍。
檢測方法
化合物的結構是通過核磁共振(NMR)或(和)質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用(Bruker Avance III 400和Bruker Avance 300) 核磁儀，測定溶劑為氘代二甲基亞碸 (DMSO-d 6)，氘代氯仿 (CDCl 3)，氘代甲醇 (CD 3OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)；
MS的測定用(Agilent 6120B(ESI) 和Agilent 6120B(APCI))；
HPLC的測定使用Agilent 1260DAD高壓液相色譜儀 (Zorbax SB-C18 100 × 4.6 mm,3.5 μM)；
薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254 或青島GF254 矽膠板，薄層色譜法 (TLC) 使用的矽膠板採用的規格是0.15 mm-0.20 mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4 mm - 0.5 mm；
柱層析一般使用煙臺黃海矽膠200-300目矽膠為載體。
縮寫或術語
PE：石油醚
EA：乙酸乙酯
MeOH：甲醇
THF：四氫呋喃
n-BuLi：丁基鋰
DCM：二氯甲烷
DMF：N,N-二甲基甲醯胺
DIPEA：N,N-二異丙基乙胺
BINAP：聯萘二苯基膦
Pd 2(dba)3：三(二亞苄基丙酮)二鈀
t-BuONa：第三丁醇鈉
Brettphos G3 Pd：甲烷磺酸(2-二環己基膦)-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯苯)(2'-氨基-1,1'-聯苯-2-基)鈀(II)
化合物的製備
中間體1：(S) -2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯甲醛(intermediate1)
(S)-2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)benzaldehyde(中間體1)
Figure 02_image200
第一步：
(S) -N-(4-(二乙氧基甲基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(1-B)
((S)-N-(4-(diethoxymethyl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine(1-B)
將1-A (5.0 g, 34 mmol)(合成步驟參照WO2021139756)，5-溴-2-(二乙氧基甲基)-1,3-二氟苯 (11.8 g, 40 mmol) (合成步驟參照WO2019245974)，碳酸銫(22.8 g, 70 mmol) XantPhos (2.9 g, 50 mmol)，Pd 2(dba) 3(2.3 g, 25 mmol)混合於單口瓶中，加入1,4-二氧六環(100 mL)，體系用氮氣置換三次，100 ℃下反應16小時。反應結束後冷卻至室溫，濃縮，加水稀釋(80 mL)，再用乙酸乙酯(60 mL × 3)萃取。合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮後矽膠柱層析分離(甲醇：二氯甲烷 (v/v )=0:1~1:20)得到目標化合物1-B (5.5 g, 45%)。
第二步：(S) -2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯甲醛(中間體1)
(S)-2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)benzaldehyde(intermediate1)
將1-B(5.5 g, 15 mmol)溶於甲苯(60 mL)中，加入三氟乙酸(8 mL)，室溫攪拌2小時。往體系中加水60 mL，攪拌十分鐘，分液。水相用飽和碳酸氫鈉溶液調pH=8~9，再用乙酸乙酯萃取(50 mL ×3)，合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得中間體1(淡黃色固體, 4.0 g, 93%)。
中間體2：5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)吡啶醛 (中間體2)
5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)picolinaldehyde
Figure 02_image202
第一步：5-溴-2-(二乙氧基)吡啶(2-B)
5-bromo-2-(diethoxymethyl)pyridine
在250 mL的三口瓶中加入2-A (10.00 g，53.76 mmol)，原甲酸三乙酯(15.94 g，107.52 mmol)，甲苯 (100 mL)溶解，氮氣置換3次，加入對甲苯磺酸 (0.93 g, 5.38 mmol)，室溫攪拌1 h，用碳酸氫鈉溶液(1M，100 mL)淬滅，室溫攪拌0.5 h，EA (2×100 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮得標題化合物2-B (12 g, 粗產品)，直接用於下一步反應。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ8.65 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 7.85(dd, 1H),7.51(d, 1H), 3.56-3.74 (m, 4H), 1.24 (t, 6H)。
第二步：6-(二乙氧基)-N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)吡啶-3-胺(2-D)
6-(diethoxymethyl)-N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)pyridin-3-amine
在100 mL的單口瓶中加入2-B (2 g，粗品)，2-C (1.22 g, 9.23 mmol)，碳酸銫(7.52 g, 23.07 mmol)，Xantphos (0.44 g, 0.77 mmol)，Pd 2(dba) 3(0.35 g,0.38 mmol)甲苯 (40 mL)溶解，100攝氏度反應12 h。過濾，濃縮，柱層析(二氯甲烷：甲醇(v/v)=100:1-10：1)純化得標題化合物2-D (1.3 g, 54%)。
第三步：5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)吡啶醛 (中間體2)
5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)picolinaldehyde
在100 mL的單口瓶中加入2-D (1.30 g，4.17mmol)，乙酸乙酯 (20 mL)溶解，加入2N鹽酸 (20 mL)，室溫攪拌1 h，靜置分液，水相用1N氫氧化鈉溶液調節pH~9，加入乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合併有機相，濃縮，得標題化合物中間體2(0.8 g, 80%)。
LC-MS (ESI): m/z = 238.1 [M+H] +。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.87 (s, 1H),8.05 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 6.81-6.84 (m, 1H), 4.80 (d, 1H),4.55(t, 1H), 4.44 (t, 1H), 4.15-4.23 (m, 1H), 3.76 (t, 2H), 3.01 (t, 2H), 2.63 (t, 2H), 1.70-1.83 (m, 2H)。
中間體3：5-((1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)吡啶醛 (中間體3)
5-((1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)picolinaldehyde
Figure 02_image204
第一步：(1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)第三丁氨基甲酸酯(3-B)
tert-butyl (1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)carbamate
在100 mL的三口瓶中加入3-A (4.00 g，21.48 mmol)，氟碘丙烷(6.06 g，32.22 mmol)，DIPEA (8.33g，64.44 mmol)，四氫呋喃 (40 mL)溶解，氮氣置換3次，室溫攪拌12 h，用水(50 mL)淬滅，室溫攪拌0.5 h，EA (2×50 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=100:1-3：1)純化得標題化合物3-B(4 g, 75.5%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ4.86 (s, 1H), 4.57 (t, 1H), 4.44 (t, 1H), 4.17(s, 1H),2.54-2.58 (m, 4H), 2.28 (s, 2H), 1.81-1.95 (m, 2H), 1.60 (s, 1H),1.44 (s, 9H)。
第二步：1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺
1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine(3-C)
在100 mL的三口瓶中加入3-B (3.00 g，12.18 mmol)，二氯甲烷 (30 mL)溶解，氮氣置換3次，加入三氟乙酸 (10 mL)，室溫攪拌1 h，濃縮得標題化合物3-C(5 g, 粗產品)，直接用於下一步反應。
第三步： 6-(二乙氧基)-N-(1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(3-E)
6-(diethoxymethyl)-N-(1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
在250 mL的單口瓶中加入3-C (5 g，粗品)，3-D (8 g, 30.75 mmol)，碳酸銫(30.06 g, 92.25 mmol)，Xantphos (1.78 g, 3.08 mmol)，Pd 2(dba) 3(1.41 g, 1.54 mmol)甲苯 (100 mL)溶解，100攝氏度反應12 h。過濾，濃縮，柱層析(二氯甲烷：甲醇(v/v)=100:1-10：1)純化得標題化合物3-E(0.8 g, 21%)。
第四步：5-((1-(3-fluoropropyl)吡咯基-3-基)氨基)吡啶醛(中間體3)
5-((1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)picolinaldehyde
在100 mL的單口瓶中加入3-E (0.8 g，2.46mmol)，乙酸乙酯 (20 mL)溶解，加入2N鹽酸 (20 mL)，室溫攪拌1 h，靜置分液，水相用1N氫氧化鈉溶液調節pH~9，加入乙酸乙酯(20mL×2)萃取，合併有機相，濃縮，得標題化合物中間體3 (0.35 g, 56%)。
LC-MS (ESI): m/z = 252.2 [M+H] +。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ9.87 (s, 1H),8.07 (d, 1H), 7.82 (d, 1H), 6.86-6.89 (m, 1H), 4.80 (d, 1H),4.59(t, 1H), 4.47 (t, 1H), 4.10 (s, 1H), 2.97-2.99 (m, 1H), 2.71-2.79 (m, 2H),2.66 (t, 2H),2.36-2.46 (m, 2H), 1.87-2.00 (m, 2H),1.72-1.79 (m, 1H)。
實施例1：1-環丙基-N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲磺醯胺(化合物1)
1-cyclopropyl-N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)methanesulfonamide (compound 1)
Figure 02_image206
Figure 02_image208
第一步：(R)-(1-(3-溴苯基)丙-2-基)氨基甲酸第三丁酯(1C)
tert-butyl (R)-(1-(3-bromophenyl)propan-2-yl)carbamate (1C)
在250 mL的三口瓶中加入1A (5.00 g，21.20 mmol)，THF (25 mL)溶解，乾冰乙醇浴冷卻體系到-60℃，氮氣置換3次，滴加n-BuLi (2.5 M，8.5 mL, 21.20 mmol)，保持該溫度攪拌1 h，滴加1B (5.30 g, 22.26 mmol)的THF(25 mL)溶液，升至0℃反應2 h，用檸檬酸溶液(1M，50 mL)淬滅，室溫攪拌0.5 h，EA (2×50 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮得標題化合物1C (11.0 g, 粗產品)，直接用於下一步反應。
第二步：(R)-1-(3-溴苯基)丙-2-胺 (1D)
(R)-1-(3-bromophenyl)propan-2-amine (1D)
在250 mL的單口瓶中加入1C (11.00 g，粗品)，MeOH (25 mL)溶解，加入氯化氫二氧六環溶液 (4 M，25 mL)，室溫反應2 h，濃縮，加入稀鹽酸(2 M，50 mL)溶解，EA (2× 50 mL) 萃取除去雜質，收集水相，用NaOH(20%)調節pH＞10，DCM (2× 50 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(二氯甲烷：甲醇(v/v)=20:1-10：1)純化得標題化合物1D(0.91 g, 20%)。
LC-MS (ESI): m/z = 214.0 [M+H] +。
第三步： (R)-N-(1-(3-溴苯基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙基-1-胺 (1F)
(R)-N-(1-(3-bromophenyl)propan-2-yl)-2-fluoro-2-methylpropan-1-amine (1F)
在50 mL的單口瓶中加入1D (0.50 g，2.34 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入DIPEA (0.53 g，4.09 mmol))和1E (0.60 g，2.69 mmol)，85℃反應18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-4：1)純化得標題化合物1F(0.50 g, 74%)。
LC-MS (ESI): m/z = 288.1 [M+H] +。
第四步：(R)-3-(2-((2-氟-2-甲基丙基)氨基)丙基)苯胺 (1H)
(R)-3-(2-((2-fluoro-2-methylpropyl)amino)propyl)aniline (1H)
在50 mL的單口瓶中加入1F (0.50 g，1.73 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入1G (0.31 g，1.73 mmol)、t-BuONa (0.25 g，2.59 mmol)、BINAP (54 mg，0.087 mmol)和Pd 2(dba) 3(25 mg，0.043 mmol)，氮氣置換三次，90℃反應4 h，冷卻至室溫，用HCl(1 M，20 mL)溶解，DCM(2× 20 mL)萃取除去雜質，收集水相用NaOH(2 M)調節pH＞10，EA(2× 20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-2：1)純化得標題化合物1H(0.35 g, 90%)。
1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ7.11 – 7.02 (m, 1H), 6.59 (dt, 1H), 6.55-6.52 (m, 2H), 3.60 (s, 2H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.84 – 2.58 (m, 3H), 2.51 (dd, 1H), 1.38 (s, 3H), 1.32 (s, 3H), 1.06 (d, 3H)。
第五步：(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺 (1J)
(1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-amine (1J)
在50 mL的單口瓶中加入1H (0.35 g，1.56 mmol)，乙酸 (5mL)和水(0.2mL)溶解，加入1I (0.69 g，3.12 mmol))，60℃反應18 h，濃縮，加入DCM(20 mL)溶解，HCl(1 M，20 mL)洗滌，收集水相，用NaOH(2 M)調節pH＞10，DCM (2× 20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物1J(0.31 g, 47%)。
LC-MS (ESI): m/z = 427.1 [M+H] +.
第六步： N-((1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6 –基)-1-環丙基甲磺醯胺 (1L)
N-((1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)-1-cyclopropylmethanesulfonamide (1L)
在50 mL的單口瓶中加入1J (0.31 g，0.73 mmol)，DCM (10 mL)溶解，加入吡啶 (0.23 g，2.92 mmol))和1K (0.34 g，2.19 mmol)，室溫反應18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物1L(0.21 g, 53%)。
LC-MS (ESI): m/z = 545.1 [M+H] +。
第七步：1-環丙基-N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基) 氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)甲磺醯胺(化合物1)
1-cyclopropyl-N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)methanesulfonamide (compound 1)
在50 mL的單口瓶中加入1L (0.21 g，0.38 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入1M (75 mg，0.57 mmol)、Cs 2CO 3(0.43 g，1.33 mmol)、xantphos (44 mg，0.076 mmol)和Pd 2(dba) 3(38 mg，0.038 mmol)，氮氣置換三次，110℃反應5 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC得標題化合物1 (15 mg, 6%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.12 min。
1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ6.93 (d, 1H), 6.87 (dd, 1H), 6.69 (d, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.00 (d, 2H), 5.00 (s, 1H), 4.57 (t, 1H), 4.45 (t, 1H), 4.17 (s, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.64 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.29 (dd, 1H), 3.03 (d, 2H), 2.86-2.82 (m, 2H), 2.51 (dd, 1H), 2.34 – 2.18 (m, 2H), 1.35-1.26 (m, 3H), 1.20 – 1.10 (m, 6H), 0.96 (d, 3H), 0.69 – 0.61 (m, 2H), 0.31-0.28 (m, 2H)。
LC-MS (ESI): m/z = 597.2 [M+H] +。
實施例2：N-(-2-(雙環[1.1.1]戊烷-1-基)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物2)
N-(2-(bicyclo[1.1.1]pentan-1-yl)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 2)
Figure 02_image210
第一步：1-(3-硝基苯基)丙烷-2-酮(2C)
1-(3-nitrophenyl)propan-2-one (2C)
氮氣保護下，將化合物2A(25 g, 181 mmol)溶解於乙腈(250 mL)與水(25 mL)，向其中加入水楊酸(2.5 g, 18.1 mmol)和化合物2B(18.12 g, 181 mmol)。劇烈攪拌五分鐘至均相，再加入亞硝酸第三丁酯(28 g, 271.5 mmol)，保持在20℃以下反應三個小時。加水(200 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(100 mL×3)萃取有機相。合併有機相柱層析分離(PE:EA=2:1)即可得到化合物2C(11.8 g, 36.39%)。
LC-MS (ESI): m/z =180.1 [M+H] +。
第二步：1-(3-氨基苯基)丙烷-2-酮(2D)
1-(3-aminophenyl)propan-2-one(2D)
將化合物2C(11.8 g, 65.8 mmol)溶解於甲苯(50 mL)與甲醇(50 mL)混合溶劑，向其中加入10%鈀碳(2.5 g)。室溫常壓加氫反應過夜。過濾除去不溶物，旋乾即可得到化合物2D(7.1 g, 72.26%)。
LC-MS (ESI): m/z =150.1 [M+H] +。
第三步：N-(3-(2-氧丙基)苯基)乙磺醯胺(2E)
N-(3-(2-oxopropyl)phenyl)ethanesulfonamide (2E)
將化合物2D(7.1 g, 47.59 mmol)溶解於二氯甲烷(70 mL)，向其中加入吡啶(5.65 g, 71.39 mmol)和乙基磺醯氯(6.73 g, 52.35 mmol)。升溫至50℃反應過夜。加水(50 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(50 mL×3)萃取有機相。合併有機相柱層析分離(PE:EA=2:1)即可得到化合物2E(11.8 g, 36.39%)。
LC-MS (ESI): m/z =242.1 [M+H] +。
第四步：N-(3-(2-(雙環[1.1.1]戊-1-基氨基)丙基)苯基)乙磺醯胺(2G)
N-(3-(2-(bicyclo[1.1.1]pentan-1-ylamino)propyl)phenyl)ethanesulfonamide (2G)
將化合物2F(4.64 g, 38.78 mmol)溶解於甲醇(50 mL)，向其中加入三乙胺(5 mL)升溫至50℃反應半小時。加入化合物2E(7.8 g, 32.32 mmol)。保持在該溫度繼續反應6個小時。再加入氰基硼氫化鈉(3.05 g, 48.48 mmol)，室溫下反應兩個小時。加水(50 ml)淬滅反應，乙酸乙酯(50 mL×3)萃取有機相。合併有機相柱層析分離(PE:EA=2:1)即可得到化合物2G (8.9 g, 89.28%)。
1H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ7.26 (t, 2H), 7.11 – 7.02 (m, 3H), 6.98 (t, 1H), 3.13 (d, 2H), 3.04 (p, 1H), 2.77 (dd, 1H), 2.57 (dd, 1H), 1.88 – 1.77 (m, 6H), 1.37 (t, 4H), 1.29 – 1.21 (m, 1H), 1.06 (d, 3H)。
第五步：N-(2-(雙環[1.1.1]戊烷-1-基)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(2H)
N-(2-(bicyclo[1.1.1]pentan-1-yl)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide (2H)
在50 mL的單口瓶中加入化合物2G(2.7 g, 8.75 mmol)，化合物1I(1.93 g, 8.75 mmol)，甲苯(30 mL)溶解，再加入醋酸(6 mL)。隨後升溫至110℃反應4個小時。減壓蒸餾除去溶劑，柱層析分離(PE:EA=3:1)得化合物2H(0.513 g，11.46%)。
LC-MS (ESI): m/z =511.1[M+H] +。
第六步：N-(2-(雙環[1.1.1]戊烷-1-基)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物2)
N-(2-(bicyclo[1.1.1]pentan-1-yl)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 2)
在100 mL的單口瓶中加入化合物2H(0.58 g, 1.13 mmol)，化合物1M(0.22 g, 1.69 mmol)，1,4-二氧六環(10 mL)溶解，再加入XantPhos(0.13 g, 0.23 mmol)，Pd 2(dba) 3(0.1 g, 0.11 mmol)，碳酸銫(1.1 g, 3.39 mmol)。隨後升溫至110℃反應4個小時。減壓蒸餾除去溶劑，製備分離得化合物 2(4 mg，0.63%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：13.12 min。
LC-MS (ESI): m/z =563.3[M+H] +。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ 9.58 (s, 1H), 6.93 – 6.85 (m, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.55 (d, 1H), 6.06 (d, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.91 (q, 1H), 3.65 – 3.56 (m, 2H), 3.56 – 3.46 (m, 1H), 3.11 (dd, 1H), 3.03 (q, 2H), 2.77 – 2.70 (m, 2H), 2.48 – 2.41 (m, 3H), 2.23 (s, 1H), 1.73 (dd, 3H), 1.64 (t, 2H), 1.53 (dd, 3H), 1.24 (s, 1H), 1.18 (t, 3H), 0.92 (d, 3H)。
實施例3： ((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)- 3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)二甲基氧化膦(化合物3)
((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)dimethylphosphine oxide(compound3)
Figure 02_image212
第一步：(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-6-碘-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉 (3B)
(1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-6-iodo-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinoline (3B)
在100 mL的三口瓶中加入1J (0.50 g，1.17 mmol)，乙腈 (10 mL)溶解，加入一水合對甲苯磺酸 (0.67 g，3.51 mmol)，冰浴冷卻至0℃，滴加亞硝酸鈉  (0.16 g，2.34 mmol)和碘化鉀 (0.49 g，2.92 mmol)的水溶液(2 mL)，滴完後保持該溫度攪拌0.5 h，自然升至室溫反應2 h，濃縮除去乙腈，加入飽和碳酸氫鈉溶液(20 mL)洗滌，二氯甲烷(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-4：1)分離得標題化合物3B (0.4 g, 64%)。
LC-MS (ESI): m/z = 538.0 [M+H] +。
第二步：((1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)二甲基氧磷 (3D)
((1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)dimethylphosphine oxide (3D)
在50 mL的單口瓶中加入3B (0.40 g，0.74 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入3C (58 mg，0.74mmol)、三乙胺(75 mg，0.74 mmol)、xantphos (86 mg，0.15 mmol)和Pd 2(dba) 3(68 mg，0.074mmol)， 氮氣置換三次，室溫反應3 h，用HCl(1 M，20 mL)溶解，二氯甲烷(2× 20mL)萃取除去雜質，收集水相用NaOH(2 M)調節pH＞10，乙酸乙酯(2× 20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(二氯甲烷：甲醇(v/v)=20:1-10：1)純化得標題化合物3D (0.11 g, 30%)。
LC-MS (ESI): m/z = 488.0 [M+H] +。
第三步：
((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-2-(2-氟-2-甲基丙基)- 3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)二甲基氧化膦(化合物3)
((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)dimethylphosphine oxide(compound 3)
在50 mL的單口瓶中加入3D (0.09 g，0.18 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入1M (48 mg，0.36 mmol)、Cs 2CO 3(0.47 g，1.44 mmol)、Brettphos G3 Pd (33 mg，0.036 mmol)，氮氣置換三次，105℃反應5 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC得標題化合物3 (30 mg, 31%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.80 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ7.53 – 7.45 (m, 1H), 7.44 – 7.32 (m, 1H), 6.82 (dd,  1H), 6.64 (d, 1H), 6.09 (d, 2H), 4.97 (s, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.38 (t, 1H), 3.91 (q, 1H), 3.65 – 3.50 (m, 3H), 3.18 (dd, 1H), 2.83 (t, 1H), 2.73 (t, 2H), 2.67 – 2.59 (m, 1H), 2.45 (t, 2H), 2.33-2.18 (m, 2H), 1.70-1.64 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.59 (s, 3H), 1.11 (dd, 6H), 0.92 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 540.3 [M+H]+。
實施例4： N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基) 氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-5-氟-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物4)
N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 4)
Figure 02_image214
第一步：(R)-(1-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-基)氨基甲酸第三丁酯(4C)
tert-butyl (R)-(1-(3-bromo-2-fluorophenyl)propan-2-yl)carbamate (4C)
在500 mL的三口瓶中加入4A (10.00 g，39.39 mmol)，THF (100 mL)溶解，乾冰乙醇浴冷卻體系到-60℃，氮氣置換3次，滴加n-BuLi (2.5 M，17.33 mL, 43.33 mmol)，保持該溫度攪拌1 h，滴加1B (5.94 g, 43.33 mmol)的THF(100 mL)溶液，升至0℃反應2 h，用檸檬酸溶液(1M，100 mL)淬滅，室溫攪拌0.5 h，EA (2×100 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮得標題化合物4C (15.0 g, 粗產品)，直接用於下一步反應。
第二步：(R)-1-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-胺 (4D)
(R)-1-(3-bromo-2-fluorophenyl)propan-2-amine (4D)
在250 mL的單口瓶中加入4C (15.00 g，粗品)，MeOH (50 mL)溶解，加入氯化氫二氧六環溶液 (4 M，50 mL)，室溫反應2 h，濃縮，加入稀鹽酸(2 M，50 mL)溶解，EA (2× 50 mL) 萃取除去雜質，收集水相，用NaOH(20%)調節pH＞10，DCM (2× 50 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(二氯甲烷：甲醇(v/v)=20:1-10：1)純化得標題化合物4D(2.6 g, 28%)。
LC-MS (ESI): m/z = 232.0 [M+H] +。
第三步： (R)-N-(1-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-基)-2-氟-2-甲基丙基-1-胺 (4F)
(R)-N-(1-(3-bromo-2-fluorophenyl)propan-2-yl)-2-fluoro-2-methylpropan-1-amine (4F)
在50 mL的單口瓶中加入4D (2.60 g，11.20 mmol)，二氧六環 (30 mL)溶解，加入DIPEA (4.36 g，33.6 mmol))和1E (2.57 g，12.32 mmol)，85℃反應18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-4：1)純化得標題化合物4F(1.20 g, 35%)。
LC-MS (ESI): m/z = 306.1 [M+H] +。
第四步：(R)-2-氟-3-(2-((2-氟-2-甲基丙基)氨基)丙基)苯胺 (4H)
(R)-2-fluoro-3-(2-((2-fluoro-2-methylpropyl)amino)propyl)aniline (4H)
在100 mL的單口瓶中加入4F (1.20 g，3.92 mmol)，二氧六環 (20 mL)溶解，加入1G (1.42 g，7.84 mmol)、t-BuONa (2.94 g，11.76 mmol)、BINAP (486.6 mg，0.784 mmol)和Pd 2(dba) 3(227.9 mg，0.392 mmol)，氮氣置換三次，90℃反應4 h，冷卻至室溫，用HCl(1 M，40 mL)溶解，DCM(2× 40 mL)萃取除去雜質，收集水相用NaOH(2 M)調節pH＞10，EA(2× 40 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-2：1)純化得標題化合物4H(0.85 g, 89%)。
LC-MS (ESI): m/z = 243.2 [M+H] +。
第五步：(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-5-氟-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺 (4J)
(1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-5-fluoro-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-amine (4J)
在100 mL的單口瓶中加入4H (0.85 g，3.51 mmol)，乙酸 (20 mL)和水(0.5 mL)溶解，加入1I (1.55 g，7.02 mmol)，65℃反應18 h，濃縮，加入DCM(20 mL)溶解，HCl(1 M，20 mL)洗滌，收集水相，用NaOH (2 M)調節pH＞10，DCM (2× 20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物4J(0.5 g, 32%)。
LC-MS (ESI): m/z = 445.1 [M+H] +。
第六步：N-((1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-5-氟-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6 –基)乙磺醯胺 (4L)
N-((1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-5-fluoro-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide (4L)
在100 mL的單口瓶中加入4J (0.26 g，0.58 mmol)，DCM (10 mL)溶解，加入吡啶 (0.18 g，2.32 mmol)和4K (0.22 g，1.74 mmol)，室溫反應18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物4L(0.22 g, 70%)。
LC-MS (ESI): m/z = 537.1 [M+H] +。
第七步：N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基) 氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-5-氟-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物4)
N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 4)
在50 mL的單口瓶中加入4L (0.22 g，0.41 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入1M (160 mg，1.23 mmol)、Cs 2CO 3(0.53 g，1.64 mmol)、xantphos (47.5 mg，0.082 mmol)和Pd 2(dba) 3(41 mg，0.041 mmol)，氮氣置換三次，110℃反應5 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC得標題化合物4(30 mg, 12%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.38 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ9.40 (s, 1H), 7.05 (t, 1H), 6.64 (d, 1H), 6.52 (d, 1H), 6.08 (d, 2H), 4.95 (s, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.38 (t, 1H), 3.95-3.85 (m, 1H), 3.60 (t, 2H), 3.55-3.47 (s, 1H), 3.04 (dd, 2H), 2.90-2.79 (m, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.65-2.60 (m, 1H), 2.45 (t, 2H), 2.30 - 2.18 (m, 1H), 1.71-1.57 (m, 2H), 1.25 (t, 3H), 1.12 (dd, 6H), 0.94 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 589.2 [M+H] +。
實施例5：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-6-乙炔基-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物5)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-6-ethynyl-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image216
第一步：第三丁基(R)-(1-(5-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(化合物5B)
tert-butyl (R)-(1-(5-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
將原料5-碘吲哚(10 g, 41.16 mmol)，氯化亞銅(3.5 g,35.7 mmol)，加入到150mL二氯甲烷中，置於0 oC下，氮氣保護，此溫度下滴加甲基氯化鎂(14mL, 1.5mol/l的THF 溶液)，然後反應1小時。之後在-20 oC下加入(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑烷-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物 (6.5 g, 27.42 mmol)，反應20小時。加入飽和氯化銨溶液淬滅反應，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)得到標題化合物5B (7.76 g, 產率54%)。
LCMS m/z =301.1 [M-100]。
第二步：(R) -1-(5-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-胺(化合物5C)
(R)-1-(5-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
將原料5B(3.0 g, 7.5 mmol)加入二氯甲烷(20 mL)中，然後加入三氟乙酸(5mL)，室溫攪拌1小時，濾液濃縮後得到標題化合物5C (5 g, 產率90%)。
LCMS m/z =301.1 [M+1]。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(5-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)丙烷-1-胺(化合物5D)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(5-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine
將試劑3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基三氟甲烷磺酸鹽(6.74 g, 13.98 mmol), 原料5C (4 g, 7.5 mmol)和DIPEA(3.64 g, 28.00 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(80 mL)中，加熱至100 oC攪拌16小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物5D (2 g,產率43%)。
LCMS m/z =633.1 [M+1]。
第四步：(R)-2,2-二氟-3-((1-(5-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)丙烷-1-醇(化合物5E)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(5-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
將原料5D (1.26 g, 1.99 mmol)溶於THF(20 mL)溶劑中，然後加入TBAF溶液(3.98 mL, 3.98 mmol, 1M)，室溫攪拌1小時，加水稀釋後，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)分離得到標題化合物5E (0.48 g,產率61%)。
LCMS m/z =395.1 [M+1]。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-6-碘-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物5F)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-6-iodo-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料5D (250 mg, 0.63 mmol)和原料5L(按照WO2019/245974合成方法得到)(190 mg, 0.69 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=5:1)得到標題化合物(200 mg,產率49%)。
LCMS m/z =649.1 [M+1]。
第六步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁胺基)苯基)-3-甲基-6-((三甲基矽基)乙炔基)-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物5G)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-6-((trimethylsilyl)ethynyl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料5F (250 mg, 0.39 mmol), 三甲基乙炔基矽(110 mg, 1.17 mmol)，三乙胺(390 mg, 0.39 mmol)，四三苯基膦鈀(45 mg, 0.039 mmol)和碘化亞銅(15 mg, 0.078 mmol)加入無水DMF(10 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至65 oC攪拌5小時，冷卻，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物5G (200 mg,產率83%)。
LCMS m/z =619.3 [M+1]。
第七步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-6-乙炔基-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物5)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-6-ethynyl-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料5G (40 mg, 0.065 mmol)溶解於無水甲醇(5 mL)溶劑中，室溫下加入碳酸鉀(18 mg, 0.13 mmol)，反應1小時後，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~5：1)得到標題化合物5 (5 mg,產率14%)。
LCMS m/z =547.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.54 (s, 1H), 7.10-7.16 (m, 2H), 6.08-6.13 (m, 2H), 5.15 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.01-4.07 (m, 1H), 3.73-3.80 (m, 3H), 3.58-3.63 (m, 1H), 3.42-3.52 (m, 1H), 3.20 (s, 1H), 3.09-3.17 (m, 1H), 2.94-2.99 (m, 3H), 2.71-2.82 (m, 1H), 2.56-2.65 (m, 3H), 1.69-1.82 (m, 2H), 1.14 (d, 3H)。
實施例6：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-6-乙烯基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物6)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-6-vinyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image218
將原料5F (150 mg, 0.23 mmol)，三丁基乙烯基錫(110 mg, 0.35 mmol)，碳酸鉀(48 mg, 0.35 mmol)，雙三苯基膦二氯化鈀(16 mg, 0.023 mmol)和四乙基氯化銨(76 mg, 0.46 mmol)加入無水DMF(10 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至100 oC攪拌3小時，冷卻，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物6 (60 mg,產率48%)。
LCMS m/z =549.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.42 (s, 1H), 7.13-7.19 (m, 2H), 6.76-6.83 (m, 1H), 6.08-6.13 (m, 2H), 5.60-5.65 (m, 1H), 5.14 (s, 1H), 5.01-5.04 (m, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.01-4.07 (m, 1H), 3.73-3.84 (m, 3H), 3.58-3.63 (m, 1H), 3.42-3.52 (m, 1H), 3.09-3.19 (m, 1H), 2.95-2.99 (m, 3H), 2.71-2.82 (m, 1H), 2.58-2.66 (m, 3H), 1.69-1.82 (m, 2H), 1.15 (d, 3H)。
實施例7：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3,7-二甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物7)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3,7-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 7)
Figure 02_image220
第一步：(R)-(1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)氨基甲酸第三丁酯(7C)
tert-butyl (R)-(1-(6-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate  (7C)
在500 mL的三口瓶中加入7A (8.0 g, 60.99 mmol)和氯化亞銅 (5.25 g, 53.06 mmol)無水二氯甲烷 (80 mL)溶解，冷卻至0攝氏度，滴加甲基溴化鎂 (17.7 mL, 3 M)，保溫反應1 h，冷卻至-20攝氏度，滴加7B (9.6 g, 40.25 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液，保持該溫度攪拌過夜，用10%的檸檬酸溶液(200 mL)淬滅，攪拌0.5 h，矽藻土過濾，二氯甲烷(2×100 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物7C (8.0 g, 45%)。
LC-MS (ESI): m/z = 289.3[M+H] +。
第二步：(R)-1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙基-2-胺 (7D)
(R)-1-(6-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-amine (7D)
在100 mL的三口瓶中加入7C (4.0 g, 13.87 mmol)，無水甲醇(20 mL)溶解，加入鹽酸二氧六環(20 mL)，室溫攪拌2 h，濃縮得標題化合物7D(2.61 g, 99%)。
LC-MS (ESI): m/z = 189.3 [M+H] +。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)丙-1-胺 (7E)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(6-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine (7E)
在100 mL的三口瓶中加入7D (2.6 g, 13.81 mmol)，二氧六環 (26 mL)和DMF (2 mL)溶解，加入5I (8.0 g, 16.57 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(5.35 g, 41.43 mmol)。90攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物7E (1.3 g, 18%)。
LC-MS (ESI): m/z = 521.3 [M+H] +。
第四步： (R)-2,2-二氟-3-((1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)丙基-1-醇 (7F)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(6-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol (7F)
在100 mL的三口瓶中加入7E (1.3 g, 2.5 mmol)，四氫呋喃 (10 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (5 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(20 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物7F (0.56 g, 79%)。
LC-MS (ESI): m/z = 283.2 [M+H] +。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3,7-二甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物7)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3,7-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 7)
在50 mL的單口瓶中加入7F (0.1 g, 0.35 mmol)，5L(按照WO2019/245974合成方法得到) (95 mg, 0.35 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物7 (45 mg, 24%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.60 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.33 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.76 (dd, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.09 (d, 2H), 5.22 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.93 (q, 1H), 3.75 – 3.53 (m, 4H), 3.51 – 3.38 (m, 2H), 3.16 – 2.99 (m, 1H), 2.82 – 2.71 (m, 3H), 2.62 (q, 1H), 2.46 (t, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.66 (dq, 2H), 1.06 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 537.3 [M+H] +。
實施例8：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-3,7-二甲基- 1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物8)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3,7-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 8)
Figure 02_image222
第一步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-3,7-二甲基- 1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物8)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3,7-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 8)
在50 mL的單口瓶中加入7F (0.13 g, 0.46 mmol)，中間體1 (0.13 g, 0.35 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物8 (100 mg, 39%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：11.20 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.33 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 6.97 (s, 1H), 6.76 (dd, 1H), 6.37 (d, 1H), 6.17 – 6.08 (m, 2H), 5.21 (s, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.83 (qd, 1H), 3.66 (q, 1H), 3.42 (dt, 2H), 3.15 – 2.96 (m, 1H), 2.84 – 2.73 (m, 2H), 2.71 – 2.57 (m, 2H), 2.48 – 2.38 (m, 4H), 2.34 (s, 4H), 2.24-2.15 (m, 1H), 1.87 – 1.72 (m, 2H), 1.62 – 1.47 (m, 1H), 1.06 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 551.3 [M+H] +。
實施例9：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3基)苯基)-3,6-二甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物9)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3,6-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image224
第一步：(R) -2,2-二氟-3-((1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)丙烷-1-醇(化合物9A)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
將原料5E (100 mg, 0.25 mmol), 三甲基環三硼氧烷 (78 mg, 0.63 mmol), 四三苯基膦鈀(35 mg, 0.030 mmol)和碳酸鉀(140 mg, 1.0 mmol)加入無水DMF(10 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至65 oC攪拌5小時，冷卻，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物9A (50 mg,產率28%)。
LCMS m/z =283.2 [M+1]。
第二步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-3,6-二甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物9)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3,6-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料9A(200 mg, 0.71 mmol)和原料5L (190 mg, 0.71 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=5:1)得到標題化合物9 (5 mg, 產率1%)。
LCMS m/z =537.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.35 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.06 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.68 (d, 1H), 6.10 (d, 2H), 5.02 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.90-3.97 (m, 1H), 3.61-3.71 (m, 3H), 3.39-3.46 (m, 2H), 3.01-3.12 (m, 1H), 2.72-2.80 (m, 3H), 2.58-2.67 (m, 2H), 2.43-2.46 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.97-2.01 (m, 1H), 1.59-1.70 (m, 2H), 1.06 (d, 3H)。
實施例10：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-6-甲氧基-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物10)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-6-methoxy-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 10)
Figure 02_image226
第一步：(R)-(1-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)氨基甲酸第三丁酯(10C)
tert-butyl (R)-(1-(5-methoxy-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate  (10C)
在250 mL的三口瓶中加入10A (5.0 g, 33.97 mmol)和氯化亞銅 (2.69 g, 27.18mmol)無水二氯甲烷 (50 mL)溶解，冷卻至0攝氏度，滴加甲基溴化鎂 (11.32 mL, 3 M)，保溫反應1 h，冷卻至-20攝氏度，滴加10B (5.64 g, 23.78 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液，保持該溫度攪拌過夜，用10%的檸檬酸溶液(100 mL)淬滅，攪拌0.5 h， 矽藻土過濾，二氯甲烷(2×100 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物10C (4.0 g, 38.5%)。
LC-MS (ESI): m/z = 305.2[M+H] +。
第二步：(R)-1-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙基-2-胺 (10D)
(R)-1-(5-methoxy-1H-indol-3-yl)propan-2-amine (10D)
在100 mL的三口瓶中加入10C (4.0 g, 13.14 mmol)，無水甲醇(20 mL)溶解，加入鹽酸二氧六環(20 mL)，室溫攪拌2 h，濃縮得標題化合物10D (3.0 g, 粗品)。
LC-MS (ESI): m/z = 205.3 [M+H] +。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)丙-1-胺 (10E)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(5-methoxy-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine (10E)
在100 mL的三口瓶中加入10D (3.0 g, 14.69 mmol)，二氧六環 (40 mL)溶解，加入5I (8.51 g, 17.63 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(5.70 g, 44.07 mmol)，90攝氏度攪拌12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物10E (3.5 g, 44.39%)。
LC-MS (ESI): m/z = 537.3 [M+H] +。
第四步：(R)-2,2-二氟-3-((1-(5-甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)丙基-1-醇 (10F)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(5-methoxy-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol (10F)
在10 mL的三口瓶中加入10E (0.70 g, 1.30 mmol)，四氫呋喃 (20 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (3.9 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(20 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物10F(0.32 g, 82%)。
LC-MS (ESI): m/z = 299.2 [M+H] +。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-6-甲氧基-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物10)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-6-methoxy-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 10)
在50 mL的單口瓶中加入10F (0.1 g, 0.34 mmol)，5L (110 mg, 0.41 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物10 (51 mg, 27.1%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用甲醇溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-65%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間15 min；滯留時間：8.40 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.32 (s, 1H), 7.06 (d, 1H), 6.87 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.62 (dd, 1H), 6.10 (d, 2H), 5.22 (t, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.91-3.96 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.60 - 3.63 (m, 3H), 3.37 - 3.47 (m, 2H), 3.01 - 3.13 (m, 1H), 2.72 - 2.83 (m, 3H), 2.56 - 2.66 (m, 1H), 2.46 (t, 3H), 1.58 - 1.69 (m, 2H), 1.06 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 553.3 [M+H] +。
實施例11：3-((1R,3R)-7-(環丙基甲基)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2氫-吡啶並[3,4]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物11)
3-((1R,3R)-7-(cyclopropylmethoxy)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image228
第一步：
(R)-(1-(6-(苄氧基)-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2-基) 氨基甲酸第三丁酯(11C)
tert-butyl (R)-(1-(6-(benzyloxy)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
在250 mL的三口瓶中加入11A (5.00 g，22.39 mmol)，氯化亞銅(2.35 g，23.7 mmol)，THF (50 mL)溶解，乾冰乙醇浴冷卻體系到0攝氏度，氮氣置換3次，滴加甲基溴化鎂 (2.5 M，9.48 mL, 23.70 mmol)，保持該溫度攪拌1 h，降溫至-20攝氏度滴加11B (2.5 g, 18.23 mmol)的THF(20 mL)溶液，保持該溫度攪拌12 h，用檸檬酸溶液(1M，100 mL)淬滅，室溫攪拌0.5 h，EA (2×100 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮得標題化合物11C (2.5 g, 粗產品)。
LC-MS (ESI): m/z = 381.2 [M+H] +。
第二步：(R)-(1-(6-羥基-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2-基) 氨基甲酸第三丁酯(11D)
tert-butyl (R)-(1-(6-hydroxy-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
在100 mL的單口瓶中加入11C (2.5 g，粗品)，MeOH (30 mL)溶解，加入濕鈀炭 (140 mg)，室溫反應12 h，過濾，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=20:1-1：1)純化得標題化合物11D(1.6 g, 83%)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.34 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.48-6.61 (t, 1H), 3.66-3.71 (t, 1H), 2.76-2.81 (m, 1H), 2.52-2.57 (t, 1H), 1.37 (s, 9H), 0.99 (d, 3H)。
第三步：(R)-(1-(6-環丙基-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2-基) 氨基甲酸第三丁酯(11F)
tert-butyl (R)-(1-(6-(cyclopropylmethoxy)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
在50 mL的單口瓶中加入11D (1.20 g，4.13mmol)，DMF (20 mL)溶解，加入碳酸銫 (4.04 g，12.39 mmol))和11E (0.56 g，4.13 mmol)，25攝氏度反應12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-4：1)純化得標題化合物11F(0.80 g, 56.2%)。
LC-MS (ESI): m/z = 345.2[M+H] +。
第四步：(R)-1-(6-環丙基-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2胺 (11G)
(R)-1-(6-(cyclopropylmethoxy)-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
在100 mL的單口瓶中加入11F (0.80 g，2.32 mmol)，二氯甲烷 (15 mL)溶解，加入三氟乙酸(5 mL)，25攝氏度反應2 h，濃縮得標題化合物11G(0.90 g, 粗品)。
LC-MS (ESI): m/z = 245.2 [M+H] +。
第五步：(R)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-N-(1-(6-環丙甲氧基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-胺(11I)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-N-(1-(6-(cyclopropylmethoxy)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-amine (11I)
在100 mL的三口瓶中加入11G (0.90 g, 3.68 mmol)，二氧六環 (20 mL)溶解，加入5I (2.66 g, 5.52 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(1.43, 11.04 mmol)，90攝氏度攪拌12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物11I(0.5 g,  24%)。
LC-MS (ESI): m/z = 577.1 [M+H] +。
第六步：(R)-3-((1-(6-環丙甲基氧-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)-2,2-二氟丙烷-1-醇  (11J)
(R)-3-((1-(6-(cyclopropylmethoxy)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)-2,2-difluoropropan-1-ol (11J)
在100 mL的三口瓶中加入11I (0.5 g, 0.87 mmol)，四氫呋喃 (10 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (2.61 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(20 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物11J(0.20 g, 67.9%)。
LC-MS (ESI): m/z = 338.2 [M+H] +。
第七步：3-((1R,3R)-7-(環丙基甲基)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2氫-吡啶並[3,4]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物11)
3-((1R,3R)-7-(cyclopropylmethoxy)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 11)
在50 mL的單口瓶中加入11J (50.00 mg, 0.15 mmol)，5L (49 mg, 0.18 mmol)，甲苯 (4 mL)溶解，加入乙酸 (1 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物11 (7 mg, 7.9%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.38 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.28 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 6.65-6.68 (m, 2H), 6.59 (dd, 1H), 6.09 (d, 2H), 5.21 (s, 1H), 5.01 (s, 1H),4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.89-3.97 (m, 1H), 3.76 (d, 2H), 3.58-3.68 (m, 3H), 3.36-3.44 (m, 3H), 3.00-3.11 (m, 1H), 2.71-2.78 (m, 3H), 2.59-2.66 (m, 1H), 2.43-2.47 (m, 2H), 1.58 - 1.71 (m, 2H), 1.15-1.25 (m, 1H), 1.05 (d, 3H), 0.52-0.57 (m, 2H), 0.28-0.32(m, 2H)。
LC-MS (ESI): m/z = 592.2 [M+H] +。
實施例12：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-7-(1氫-吡唑-4-基)-1,3,4,9-四氫-2氫-吡啶並[3,4]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物12)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-7-(1H-pyrazol-4-yl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 12)
Figure 02_image230
第一步：(R)-(1-(6-(苄氧基)-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2-基) 氨基甲酸第三丁酯(12C)
tert-butyl (R)-(1-(6-(benzyloxy)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
在250 mL的三口瓶中加入12A (5.00 g，22.39 mmol)，氯化亞銅(2.35 g，23.7 mmol)，THF (50 mL)溶解，乾冰乙醇浴冷卻體系到0攝氏度，氮氣置換3次，滴加甲基溴化鎂 (2.5 M，9.48 mL, 23.70 mmol)，保持該溫度攪拌1 h，降溫至-20攝氏度滴加12B (2.5 g, 18.23 mmol)的THF(20 mL)溶液，保持該溫度攪拌12 h，用檸檬酸溶液(1M，100 mL)淬滅，室溫攪拌0.5 h，EA (2×100 mL) 萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮得標題化合物12C (2.5 g, 粗產品)。
LC-MS (ESI): m/z = 381.2 [M+H] +。
第二步：(R)-(1-(6-羥基-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2-基) 氨基甲酸第三丁酯(12D)
tert-butyl (R)-(1-(6-hydroxy-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
在100 mL的單口瓶中加入12C (2.5 g，粗品)，MeOH (30 mL)溶解，加入濕鈀炭 (140 mg)，室溫反應12 h，過濾，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=20:1-1：1)純化得標題化合物12D(1.7 g, 85%)。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.34 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 7.29 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.65 (s, 1H), 6.48-6.61 (t, 1H), 3.66-3.71 (t, 1H), 2.76-2.81 (m, 1H), 2.52-2.57 (t, 1H), 1.37 (s, 9H), 0.99 (d, 3H)。
第三步：(R)-3-(2-((第三丁氧羰基)氨基)丙基)-1氫-吲哚-6-三氟甲磺基 (12E)
(R)-3-(2-((tert-butoxycarbonyl)amino)propyl)-1H-indol-6-yl trifluoromethanesulfonate
在50 mL的單口瓶中加入12D (1.70 g，5.85 mmol)，二氯甲烷 (20 mL)溶解，加入N-苯基雙(三氟甲烷磺醯)亞胺(4.18 g，11.7 mmol))和三乙胺 (1.18 g，11.7 mmol)，25攝氏度反應12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-4：1)純化得標題化合物12E (1.40 g, 56.6%)。
LC-MS (ESI): m/z = 423.2[M+H] +。
第四步：(R)-(1-(6-(1氫-吡唑-4-基)-1-氫-吲哚-3-基)丙烷-2基)氨基甲酸第三丁酯 (12G)
tert-butyl (R)-(1-(6-(1H-pyrazol-4-yl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
在100 mL的單口瓶中加入12E (1.30 g，3.08 mmol)，12F (0.32 g，3.70 mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(0.23 g，0.31 mmol)，1,4-二氧六環 (20 mL)溶解，加入水(4 mL)，90攝氏度反應12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-3：1)純化得標題化合物12G(0.70 g, 66.8%)。
LC-MS (ESI): m/z = 341.2 [M+H] +。
第五步：(R)-1-(6-(1氫-吡唑-4-基)-1氫-吲哚-3-基)丙烷-2胺 (12I)
(R)-1-(6-(1H-pyrazol-4-yl)-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
在100 mL的單口瓶中加入12G(0.70 g，2.05 mmol)，二氯甲烷 (15 mL)溶解，加入三氟乙酸(5 mL)，25攝氏度反應2 h，濃縮得標題化合物12I(0.50 g,粗品)。
LC-MS (ESI): m/z = 240.1 [M+H] +。
第六步：(R)- N-(1-(6-(1氫-吡唑-4-基)-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基) -2,2-二氟丙烷-1-胺(12J)
(R)-N-(1-(6-(1H-pyrazol-4-yl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoropropan-1-amine (12J)
在100 mL的三口瓶中加入12I (0.40 g, 1.66 mmol)，二氧六環 (20 mL)溶解，加入5I (1.60 g, 3.32 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(0.64 g, 4.98 mmol)，90攝氏度攪拌12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物12J (0.3 g, 31.6%)。
LC-MS (ESI): m/z = 573.2 [M+H] +。
第七步：(R)-3-((1-(6-(1氫-吡唑-4-基)-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)-2,2-二氟丙烷-1-醇 (12K)
(R)-3-((1-(6-(1H-pyrazol-4-yl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)-2,2-difluoropropan-1-ol (12K)
在100 mL的三口瓶中加入12J (0.30 g, 0.52 mmol)，四氫呋喃 (10 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (0.43 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(20 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物12K (0.16 g, 92.0%)。
LC-MS (ESI): m/z = 334.2 [M+H] +。
第七步： 3-((1R,3R) -1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基7-(1氫-吡唑-4-基)-1,3,4,9-四氫-2氫-吡啶並[3,4]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物12)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-7-(1H-pyrazol-4-yl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 12)
在50 mL的單口瓶中加入12K(110.0 mg, 0.33 mmol)，5L (110 mg, 0.40 mmol)，甲苯 (4 mL)溶解，加入乙酸 (1 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物12 (35 mg, 18.5%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.38 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.48 (s, 1H), 7.92 (s, 2H),7.34 (d, 2H), 7.19 (d, 1H), 6.67 (d, 1H), 6.11 (d, 2H), 5.22 (s, 1H), 5.05 (s, 1H),4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.91-3.97 (m, 1H), 3.60-3.64 (m, 3H), 3.36-3.49 (m, 3H), 3.03-3.113(m, 1H), 2.32-2.81 (m, 4H), 2.46(t, 3H), 1.58-1.70 (m, 2H), 1.07 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 589.2 [M+H] +。
實施例13：((1R,2R)-2-((1R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)環丙基)甲醇(化合物13)
((1R,2R)-2-((1R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)cyclopropyl)methanol(compound 13)
Figure 02_image232
第一步：((1R,2R)-2-(羥甲基)環丙基)氨基甲酸第三丁酯(13A)
tert-butyl ((1R,2R)-2-(hydroxymethyl)cyclopropyl)carbamate(13A)
將化合物(1R,2R)-2-((第三丁氧基羰基)氨基)環丙烷-1-羧酸第三丁酯(2.0 g，8.72mmol)溶於乙醇(40ml)中，加入無水氯化鈣(2.90 g，26.16mmol)，分批次加入硼氫化鈉(1.98 g，52.32mmol)，加完之後在室溫反應16小時，反應完畢後加入水淬滅反應，乙酸乙酯萃取，洗滌，乾燥，濃縮柱層析分離純化(沖提劑比例PE/EA=0%~50%)得到目標化合物13A(1.6 g，98.0%)。
LC-MS (ESI): m/z =210.1 [M+Na] +。
第二步：((1R,2R)-2-氨基環丙基)甲醇鹽酸鹽(13B)
((1R,2R)-2-aminocyclopropyl)methanol hydrochloride(13B)
將13A(1.60 g, 8.55 mmol)和二氯甲烷(20 ml)加入燒瓶中，再加入HCl/Dioxane(8 ml)，然後在室溫下反應3小時。LCMS檢測原料反應完全，有產物生成。濃縮得到粗品目標化合物13B (2.1g)。
LC-MS (ESI): m/z =88.2 [M+H] +。
第三步：((1R,2R)-2-((1-(1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)環丙基)甲醇(13C)
((1R,2R)-2-((1-(1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)cyclopropyl)methanol (13C)
將13B (1.8 g, 10.39 mmol)、吲哚-3-丙酮 (0.8 g, 8.31 mmol) 溶於甲醇(30 mL) 中，滴加冰乙酸 (0.62 g, 10.39 mmol)，室溫反應10分鐘。緩慢加入氰基硼氫化鈉 (1.96 g, 31.17 mmol)，室溫反應過夜。反應完全後，向反應液中加入飽和碳酸鉀溶液 (10 mL)和水(60 ml)，水相用乙酸乙酯萃取 (100 mL × 3)，合併有機相，有機相用水洗滌 (100 mL ×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮過矽膠柱(DCM:MeOH=0:1~10:1)得到目標化合物13C(0.51 g，20.1%)。
LC-MS (ESI): m/z =245.1 [M+H] +。
第四步： ((1R,2R)-2-((1R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)環丙基)甲醇(化合物13)
((1R,2R)-2-((1R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)cyclopropyl)methanol(compound 13)
將13C(100 mg, 0.41 mmol)和5L(111 mg, 0.41 mmol)加入燒瓶中，再加入甲苯(8 mL)和乙酸(2 mL)，然後在100度下反應0.5小時。LCMS檢測有產物生成。濃縮之後送去HPLC製備，製備HPLC分離方法：1.儀器：waters 2767製備液相；色譜柱: SunFire@ Prep C18(19mm×250mm)。2.樣品用0.45μm濾頭過濾，製成樣品液。3.製備色譜條件：a.流動相A, B組成：流動相A：乙腈；流動相B：水(含0.1%乙酸銨)。b.梯度沖提，流動相A 含量從5%-50%。c.流量25 mL/min。d沖提時間20min。滯留時間：8.57 min。製備液濃縮凍乾得到目標化合物13 (39 mg, 19.08%)。
LC-MS (ESI): m/z =499.2 [M+H] +。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.46 (s, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.17 (d, 1H), 6.98–6.89(m, 2H), 6.61 (d, 1H), 6.09 (d, 2H), 5.17 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.23 (t, 1H), 3.94 (q, 1H), 3.63 (s, 2H), 3.41 (t, 1H), 3.23–3.18 (m, 1H), 2.92 –2.79 (m, 4H), 2.76 –2.51 (m, 2H), 1.91 (s, 1H), 1.78 –1.61 (m, 2H), 1.13 (d, 3H), 0.71 (s, 1H), 0.50–0.42 (m, 2H)。
實施例14：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-7-乙炔基-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物14)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-7-ethynyl-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image234
第一步：第三丁基(R)-(1-(6-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基甲酸酯(化合物14B)
tert-butyl (R)-(1-(6-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
將原料6-碘代-1H-吲哚 (5.54 g, 22.80 mmol), 氯化亞銅(1.61 g, 21.38 mmol)加入二氯甲烷(100 mL)中，氮氣保護，0 oC下緩慢滴加甲基氯化鎂 (7mL, 21.28 mmmol, 1.5 mol/L)反應1小時。然後將溫度降至-20 oC，在此溫度下加入第三丁基(R)-4-甲基-1,2,3-惡硫唑烷-3-羧酸鹽2,2-二氧化物 (3.6 g, 15.19 mmol)反應16小時。將反應在0 oC下用1mol/L的檸檬酸鈉溶液淬滅並攪拌0.5小時，二氯甲烷萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物14B(4.0 g, 產率66%)。
LCMS m/z =345.0 [M-55]。
第二步：(R) -1-(6-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-胺(化合物14C)
(R)-1-(6-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
將原料14B(2 g加入二氯甲烷 (20 mL)中, 然後加入三氟甲酸(5mL)，室溫攪拌1小時，反應液直接濃縮得到標題化合物14C (2 g,產率100%)。
LCMS m/z =301.0 [M-100]。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基矽)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(6-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)丙烷-1-胺(化合物14D)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(6-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine
將原料14C (2 g, 6.67 mmol)，3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基三氟甲烷磺酸鹽 (4.82 g, 10.00 mmol)和N,N-二異丙基乙胺(3.47 g, 26.69mmol)溶解於二氧六環(60 mL)溶劑中，100 oC下反應16小時。反應完成後倒入水中(50ml)，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)得到標題化合物14D (2.0 g,產率48%)。
LCMS m/z =633.1 [M+1]。
第四步：(R) -2,2-二氟-3-((1-(6-碘-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)丙烷-1-醇(化合物14E)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(6-iodo-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
將原料14D (1 g，1.58 mmol)加入四氫呋喃 (20 mL)中，然後加入四丁基氟化銨(8ml, 3.16mmol)，室溫攪拌1小時。反應完成後倒入水中(50ml)，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)得到標題化合物14E (350 mg,產率48%)。
LCMS m/z =273.2 [M-121]。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-7-碘-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物14F)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-7-iodo-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料 14E (350 mg, 0.89 mmol)，2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯甲醛 5L (350 mg, 1.20 mmol)加入甲苯(4mL)和乙酸(1mL)溶液中，90 oC下反應3小時。反應液直接濃縮通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物14F (300 mg, 產率52%)。
LCMS m/z =512.0 [M-136]。
第六步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-7-乙炔基-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物14)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-7-ethynyl-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料 14F (300 mg, 0.46 mmol)，三甲基矽基乙炔 (182 mg, 1.86 mmol)，碘化亞銅(9.0 mg, 0.05 mmol)，三乙胺(10mg, 0.1 mmol)加入到N,N-二甲基甲醯胺溶液中(5ml)，置換氮氣3次後加入催化劑二(三苯基膦)二氯化鈀(60mg, 0.1 mmol)，之後在75 oC下反應16 小時。反應完成後倒入水中(25ml)，EA萃取，飽和食鹽水洗滌2次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後加入5 ml 甲醇中，然會加入碳酸鉀，室溫下攪拌1小時。先通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物14 (20 mg, 產率8%)。
LCMS m/z =410.1 [M-136]。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.73 (s, 1H), 7.37 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 7.03 (dd, J= 8.1, 1.1 Hz, 1H), 6.70 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.11 (d, J= 12.1 Hz, 2H), 5.22 (t, J= 5.7 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 4.51 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 4.39 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 3.99 – 3.91 (m, 1H), 3.63 (dd, J= 14.4, 7.8 Hz, 3H), 3.51 – 3.34 (m, 2H), 3.08 (q, J= 14.6 Hz, 1H), 2.82 (dd, J= 15.0, 4.7 Hz, 1H), 2.74 (t, J= 6.3 Hz, 2H), 2.69 – 2.52 (m, 2H), 2.46 (t, J= 7.0 Hz, 3H), 1.75 – 1.48 (m, 2H), 1.06 (d, J= 6.5 Hz, 3H)。
實施例15：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-5-氟-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物15)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image236
第一步：(R)-(1-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基甲酸第三丁酯(化合物15B)
tert-butyl (R)-(1-(5-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
將原料5-氟吲哚(10 g, 74.0 mmol)，氯化亞銅(5.86 g,59.2 mmol)，加入到150 mL二氯甲烷中，置於0 oC下，氮氣保護，此溫度下滴加甲基氯化鎂(59.2 mL, 1 mol/l的THF 溶液)，然後反應1小時。之後在-20 oC下加入(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑烷-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物 (11.76 g, 49.58 mmol)，反應20小時。加入飽和的檸檬酸溶液淬滅反應，再加入飽和的氯化銨溶液，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)得到標題化合物15B (11.5 g,產率53%)。
LCMS m/z =293.2 [M+1]。
第二步：(R) -1-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-胺(化合物15C)
(R)-1-(5-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
將原料15B (1.0 g, 3.42 mmol)加入二氯甲烷(5 mL)中，然後加入三氟乙酸(5mL)，室溫攪拌1小時，濾液濃縮後得到標題化合物15C (1 g,產率100%)。
LCMS m/z =193.2 [M+1]。
第三步：(R) -3-((第三丁基二苯基矽)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)丙烷-1-胺(化合物15D)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(5-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine
將試劑3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基三氟甲烷磺酸鹽(2.26 g, 4.68 mmol)，原料15C (0.6 g, 3.12 mmol)和DIPEA(1.21 g, 9.36 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(50 mL)中，加熱至100 oC攪拌6小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物15D (0.6 g,產率37%)。
LCMS m/z =525.2 [M+1]。
第四步：(R) -2,2-二氟-3-((1-(5-氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)丙烷-1-醇(化合物15E)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(5-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
將原料15D (0.6 g, 1.14 mmol)溶於THF(20 mL)溶劑中，然後加入TBAF溶液(2.28 mL, 2.28 mmol, 1M)，室溫攪拌2小時，加水稀釋後，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~1：4)分離得到標題化合物15E (0.3 g,產率92%)。
LCMS m/z =287.1 [M+1]。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-5-氟-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物15)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料15D (80 mg, 0.28 mmol)和中間體1 (80 mg, 0.28 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物15 (30 mg,產率19%)。
LCMS m/z =555.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.11-7.14 (m, 1H),7.02-7.05 (m, 1H), 6.72-6.77 (m, 1H), 6.13-6.16 (m, 2H), 5.14 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.92-3.98 (m, 1H), 3.73-3.84 (m, 1H), 3.58-3.64 (m, 1H), 3.45-3.51 (m, 1H), 3.09-3.19 (m, 1H), 2.92-2.96 (m, 2H), 2.74-2.82 (m, 2H), 2.51-2.71 (m, 5H), 2.27-2.36 (m, 1H), 1.84-1.87(m, 2H), 1.66-1.74 (m, 1H), 1.14 (d, 3H)。
實施例16：6-((1S,3R)-3,6-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物16)
6-((1S,3R)-3,6-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image238
第一步：(R)-(1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基甲酸第三丁酯(化合物16B)
tert-butyl (R)-(1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
將原料5-甲基吲哚(5 g, 38.12 mmol)，氯化亞銅(3.02 g,30.50 mmol)，加入到200 mL二氯甲烷中，置於0 oC下，氮氣保護，此溫度下滴加甲基氯化鎂(20.33 mL, 1.5mol/l的THF 溶液)，然後反應1小時。之後在-20 oC下加入(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑烷-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物 (6.06 g, 25.54 mmol)，反應20小時。加入飽和的檸檬酸溶液淬滅反應，再加入飽和的氯化銨溶液，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物16B (6.5 g,產率59%)。
LCMS m/z =289.2 [M+1]。
第二步：(R) -1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-胺(化合物16C)
(R)-1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
將原料16B(1.0 g, 3.47 mmol)加入二氯甲烷(5 mL)中，然後加入三氟乙酸(5 mL)，室溫攪拌1小時，濾液濃縮後得到標題化合物16C (1 g,產率100%)。
LCMS m/z =189.1 [M+1]。
第三步：(R) -1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙烷-2-胺(化合物16D)
(R)-1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl) propan-2-amine
將試劑2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(2.46 g, 10.62 mmol)，原料16C (1 g, 5.31 mmol)和DIPEA(2.06 g, 15.93 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(50 mL)中，加熱至100 oC攪拌8小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物16D (0.43 g,產率30%)。
LCMS m/z =271.1 [M+1]。
第四步：6-((1S,3R)-3,6-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)吡啶-3-胺(化合物16)
6-((1S,3R)-3,6-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料16D (80 mg, 0.3 mmol)和中間體3 (75 mg, 0.3 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物16 (20 mg,產率13%)。
LCMS m/z =508.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.84 (d, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.11 (d, 1H), 6.97-7.00 (m, 1H), 6.86-6.88 (m, 1H), 4.91 (s, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.97-4.02 (m, 1H), 3.34-3.49 (m, 2H), 2.86-3.04 (m, 3H), 2.74-2.80 (m, 1H),2.56-2.66(m, 4H), 2.50-2.54 (m, 1H),2.39 (s, 3H), 2.28-2.35 (m, 1H), 1.83-1.96 (m, 2H), 1.67-1.75 (m, 1H),1.17 (d, 3H)。
實施例17：(S)-N-(4-((1R,3R)-3,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物17)
(S)-N-(4-((1R,3R)-3,7-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
Figure 02_image240
第一步：(R)-(1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基甲酸第三丁酯(化合物17B)
tert-butyl (R)-(1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
將原料6-甲基吲哚(5 g, 38.12 mmol)，氯化亞銅(3.02 g,30.50 mmol)，加入到200 mL二氯甲烷中，置於0 oC下，氮氣保護，此溫度下滴加甲基氯化鎂(20.33 mL, 1.5mol/l的THF 溶液)，然後反應1小時。之後在-20 oC下加入(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑烷-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物 (6.06 g, 25.54 mmol)，反應20小時。加入飽和的檸檬酸溶液淬滅反應，再加入飽和的氯化銨溶液，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物17B (6.5 g,產率59%)。
LCMS m/z =289.2 [M+1]。
第二步：(R)-1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-胺(化合物17C)
(R)-1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
將原料17B(1.0 g, 3.47 mmol)加入二氯甲烷(5 mL)中，然後加入三氟乙酸(5 mL)，室溫攪拌1小時，濾液濃縮後得到標題化合物17C (1 g,產率100%)。
LCMS m/z =189.1 [M+1]。
第三步：(R) -1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙烷-2-胺(化合物17D)
(R)-1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl) propan-2-amine
將試劑2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(2.46 g, 10.62 mmol)，原料17C(1 g, 5.31 mmol)和DIPEA(2.06 g, 15.93 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(50 mL)中，加熱至100 oC攪拌8小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物17D(0.48 g,產率33%)。
LCMS m/z =271.1 [M+1]。
第四步：(S) -N-(4-((1R,3R)-3,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物17)
(S)-N-(4-((1R,3R)-3,7-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料17D(80 mg, 0.3 mmol)和中間體1 (86 mg, 0.3 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物17 (30 mg,產率19%)。
LCMS m/z =539.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.27 (d, 1H), 7.01(s, 1H), 6.80 (d, 1H),6.10-6.15 (m, 2H), 5.18 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.92-3.98 (m, 1H), 3.50-3.57 (m, 1H), 3.22-3.34 (m, 1H), 2.91-3.03 (m, 3H), 2.75-2.78 (m, 1H), 2.50-2.69 (m, 5H), 2.37 (s, 3H), 2.27-2.36 (m, 1H), 1.84-1.97 (m, 2H), 1.66-1.74 (m, 1H), 1.16 (d, 3H)。
實施例18:(S) -N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-6-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物18)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-6-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
Figure 02_image242
第一步：(R) -1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙烷-2-胺(化合物18A)
(R)-1-(5-fluoro-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl) propan-2-amine
將試劑2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(2.66 g, 11.48 mmol)，原料15C (1.1 g, 5.74 mmol)和DIPEA(2.23 g, 17.22 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(50 mL)中，加熱至100 oC攪拌8小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物18A (0.43 g,產率27%)。
LCMS m/z =275.1 [M+1]。
第二步：(S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-6-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物18)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-6-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料18A (80 mg, 0.29 mmol)和中間體1 (83 mg, 0.29 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物18 (30 mg,產率18%)。
LCMS m/z =543.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.12-7.15 (m, 1H), 7.03-7.06 (m, 1H), 6.73-6.78 (m, 1H),6.11-6.16 (m, 2H), 5.20 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.92-3.98 (m, 1H), 3.53-3.57 (m, 1H), 3.25-3.36 (m, 1H), 2.91-3.02 (m, 3H), 2.74-2.80 (m, 1H), 2.50-2.67 (m, 5H), 2.29-2.36 (m, 1H), 1.84-1.97 (m, 2H), 1.67-1.74 (m, 1H), 1.16 (d, 3H)。
實施例19：6-((1S,3R)-6-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物19)
6-((1S,3R)-6-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image244
第一步：6-((1S,3R)-6-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物19)
6-((1S,3R)-6-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料18A (80 mg, 0.29 mmol)和中間體3 (73 mg, 0.29 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物19 (30 mg,產率20%)。
LCMS m/z =508.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ 7.84 (d, 1H), 7.16-7.20 (m, 2H), 7.07-7.10 (m, 1H), 6.98-7.01(m, 1H),6.76-6.82 (m, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.97-4.03 (m, 1H), 3.35-3.47 (m, 2H), 2.94-3.06 (m, 2H), 2.85-2.90 (m, 1H), 2.77-2.81 (m, 1H), 2.52-2.68 (m, 5H),2.29-2.38 (m, 1H),1.84-1.97 (m, 2H), 1.67-1.75 (m, 1H), 1.18 (d, 3H)。
實施例20：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇  和
3-((1S,3S)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 (化合物20-1和20-2)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol and 3-((1S,3S)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 20-1 and 20-2)
Figure 02_image246
第一步：第三丁基雙環[4.2.0]八-1,3,5-三烯-3-基氨基甲酸酯 (20B)
tert-butyl bicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-3-ylcarbamate (20B)
在500 mL的單口瓶中加入20A (21.0 g, 114.7 mmol)，二氧六環 (200 mL)溶解，加入氨基甲酸第三丁酯 (16.1 g, 137.7 mmol) ，碳酸銫 (59.8 g, 183.6 mmol)，Xantphos (3.3 g, 5.74 mmol)，Pd 2(dba) 3(2.6 g, 2.9 mmol)，氮氣保護中100攝氏度攪拌18 h，矽藻土過濾，濃縮，柱層析分離(PE：EA=20：1)純化得標題化合物20B (20.0 g, 80%)。
LC-MS (ESI): m/z = 164.1[M-55] +。
第二步：雙環[4.2.0]八-1,3,5-三烯-3-胺 (20C)
bicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-3-amine (20C)
在500 mL的圓底燒瓶中加入20B (20.0 g, 91.2 mmol)，二氯甲烷 (100 mL)溶解，加入三氟乙酸 (25 mL)，室溫攪拌18 h，飽和碳酸氫鈉溶液洗滌pH=8-9，二氯甲烷 (2×200 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮得標題化合物20C(10.1 g, 93%)。
LC-MS (ESI): m/z = 120.2 [M+H] +。
第三步：4-碘雙環[4.2.0]八-1,3,5-三烯-3-胺(20D)
4-iodobicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-3-amine (20D)
在250 mL的圓底燒瓶中加入20C (9.0 g, 75.53 mmol)，乙腈 (45 mL)溶解，滴加NIS (17.0 g, 75.53 mmol)的乙腈 (90 mL)溶液，室溫攪拌3 h，濃縮，二氯甲烷 (200 mL)溶解，飽和硫代硫酸鈉溶液洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=20：1)純化得標題化合物20D (9.0 g, 49%)。
LC-MS (ESI): m/z = 246.0 [M+H] +。
第四步：乙基 (E)-4-((4-碘雙環[4.2.0] 八-1,3,5-三烯-3-基)胺基)巴豆-2-酯 (20E)
ethyl (E)-4-((4-iodobicyclo[4.2.0]octa-1,3,5-trien-3-yl)amino)but-2-enoate (20E)
在250 mL的圓底燒瓶中加入20D (9.0 g, 36.73 mmol)，DMF (70 mL)溶解，加入4-溴巴豆酸乙酯 (11.3 g, 58.77 mmol)、碳酸鉀 (15.2 g, 110.19 mmol)，60攝氏度攪拌18 h，加入水 (150 mL)，乙酸乙酯  (2×100 mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=20：1)純化得標題化合物20E(7.4 g, 56%)。
LC-MS (ESI): m/z = 358.0 [M+H] +。
第五步：2-(5,6-二氫-1H-環丁[f]吲哚-3-基)乙酸乙酯(20F)
ethyl 2-(5,6-dihydro-1H-cyclobuta[f]indol-3-yl)acetate (20F)
在250 mL的圓底燒瓶中加入20E (7.4 g, 20.72 mmol)，DMF (50 mL)溶解，加入醋酸鈀 (0.2 g, 1.04 mmol)、碳酸鉀 (5.7 g, 41.44 mmol)和三苯基膦 (0.5 g, 2.07 mmol)，氮氣保護中，75攝氏度攪拌18 h，加入水 (100 mL)，乙酸乙酯  (2×80 mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗滌， 無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=10：1-5：1)純化得標題化合物20F(3.6 g, 76%)。
LC-MS (ESI): m/z = 230.1[M+H] +。
第六步：2-(5,6-二氫-1H-環丁[f]吲哚-3-基)乙酸(20G)
2-(5,6-dihydro-1H-cyclobuta[f]indol-3-yl)acetic acid (20G)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20F (3.6 g, 15.70 mmol)，甲醇 (30 mL)溶解，加入氫氧化鋰 (1.1 g, 47.10 mmol)和水 (20 mL) ，室溫攪拌5 h，濃縮除去多餘甲醇，加入HCl (2 M)調節pH=5-6，乙酸乙酯  (2×80 mL)萃取，合併有機相，濃縮得標題化合物20G(2.9 g, 92%)。
LC-MS (ESI): m/z = 202.2[M+H] +。
第七步：2-(5,6-二氫-1H-環丁[f]吲哚-3-基)-N-甲氧基-N-甲基乙醯胺(20H)
2-(5,6-dihydro-1H-cyclobuta[f]indol-3-yl)-N-methoxy-N-methylacetamide (20H)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20G (2.9 g, 14.41 mmol)，THF (30 mL)和DMF (6 mL)溶解，加入二甲羥胺鹽酸鹽 (2.8 g, 28.82mmol)、二異丙基乙胺 (9.3 g, 72.05 mmol)，冰浴中滴加1-丙基磷酸酐 (13.8 g, 21.62 mmol)，室溫攪拌18 h，加入水 (50 mL), 乙酸乙酯  (2×50 mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=4：1)得標題化合物20H(2.9 g, 82%)。
LC-MS (ESI): m/z = 245.2[M+H] +。
第八步：1-(5,6-二氫-1H-環丁[f]吲哚-3-基)丙基-2-酮 (20I)
1-(5,6-dihydro-1H-cyclobuta[f]indol-3-yl)propan-2-one (20I)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20H (2.9 g, 11.87 mmol)，THF (20 mL)溶解，冰浴中滴加甲基溴化鎂 (3 M, 14.4 mL)，保持冰浴攪拌1 h，加入飽和氯化銨(50 mL)淬滅反應，乙酸乙酯  (2×50 mL)萃取，合併有機相， 無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=10：1)得標題化合物20I(1.6 g, 68%)。
LC-MS (ESI): m/z = 200.2[M+H] +。
第九步：3-((1-(5,6-二氫-1H-環丁[f]吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)-2,2-二氟丙基-1-醇(20 J)
3-((1-(5,6-dihydro-1H-cyclobuta[f]indol-3-yl)propan-2-yl)amino)-2,2-difluoropropan-1-ol (20J)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20I (0.6 g, 3.01 mmol)，無水甲醇 (10 mL)溶解，加入3-胺基-2,2-二氟丙基-1-醇 (0.5 g, 4.51 mmol)和乙酸 (0.18 g, 3.01 mmol)，室溫攪拌1 h，加入氰基硼氫化鈉 (0.28 g, 4.51 mmol)，繼續室溫攪拌過夜，濃縮，柱層析分離(PE：EA=1：1-EA)得標題化合物20J(0.85 g, 96%)。
LC-MS (ESI): m/z = 295.2[M+H] +。
第十步：3-(1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4, 6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇(20K)
3-(1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (20K)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20J (0.2 g, 0.68 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入5L (0.22 g, 0.82 mmol)和三氟乙酸 (78 mg, 0.68 mmol)， 70攝氏度攪拌10 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物20K (0.15 g, 40%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：12.0 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.32 (s, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.89 (d, 1H), 6.65 (d, 1H), 6.09 (d, 2H), 5.20 (t, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.96-3.91 (m, 1H), 3.63-3.60 (m, 3H), 3.48 – 3.33 (m, 2H), 3.09-3.05 (m, 5H), 2.79-2.71 (m, 3H), 2.69-2.60 (m, 1H), 2.48-2.46 (m, 3H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.05 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 549.2 [M+H] +。
第十一步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 和
3-((1S,3S)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 (化合物20-1和化合物20-2)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol and
3-((1S,3S)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 20-1 and compound 20-2)
化合物20K (0.15 g, 0.27 mmol)，經手性製備得標題化合物20-1 (46 mg, 滯留時間1.085 min)和化合物20-2(60 mg, 滯留時間1.558 min)，兩個化合物的絕對構型未確定，核磁和MS與消旋體一致。
儀器：Waters 150 MGM；色譜柱：Chiralpak Column；流動相：A：二氧化碳 and B：異丙醇；等度沖提：50% 流動相 B；流速：100mL /min；背壓：100 bar；柱溫：35 ℃；波長：220 nm沖提時間：5 min。
實施例21：2,2-二氟-3-((1S,3R)-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)丙-1-醇 和
2,2-二氟-3-((1R,3S)-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)丙-1-醇(化合物21-1和化合物21-2)
2,2-difluoro-3-((1S,3R)-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)propan-1-ol and
2,2-difluoro-3-((1R,3S)-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)propan-1-ol(compound 21-1 and compound 21-2)
Figure 02_image248
第一步：2,2-二氟-3-(1-(5-((1-(3-氟丙基)azetidin-3-基)氨基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)丙-1-醇 (21A)
2,2-difluoro-3-(1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)propan-1-ol (21A)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20J (0.15 g, 0.51 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入中間體2 (0.15g, 0.61 mmol)和三氟乙酸 (58 mg, 0.51 mmol)，70攝氏度攪拌2 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物21A (36 mg, 14%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：11.2 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.42 (s, 1H), 7.83 (d, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.98 – 6.91 (m, 2H), 6.84 (dd, 1H), 6.23 (d, 1H), 5.48 (t, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.00 – 3.88 (m, 1H), 3.78-3.74 (m, 2H), 3.63 (t, 2H), 3.26 – 3.17 (m, 1H), 3.11 (brs, 5H), 2.74 (t, 2H), 2.70 – 2.53 (m, 2H), 2.46 (t, 3H), 1.69-1.60 (m, 2H), 1.09 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 514.2 [M+H] +。
第二步：2,2-二氟-3-((1S,3R)-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)丙-1-醇 和
2,2-二氟-3-((1R,3S)-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)丙-1-醇(化合物21-1和化合物21-2)
2,2-difluoro-3-((1S,3R)-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)propan-1-ol and
2,2-difluoro-3-((1R,3S)-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)propan-1-ol(compound 21-1 and compound 21-2)
化合物21A (36 mg, 0.070 mmol)，經手性製備得標題化合物21-1 (10 mg，滯留時間1.129 min)和化合物21-2(11 mg，滯留時間1.652 min)，兩個化合物的絕對構型未確定，核磁和MS與消旋體一致。
儀器： Waters 150 MGM
色譜柱：Chiralpak Column
流動相：A：二氧化碳 and B：甲醇+乙腈(0.1%氨水)；等度沖提：50% 流動相 B；流速：100mL /min；背壓：100 bar；柱溫：35 ℃；波長：220 nm；沖提時間：6 min。
實施例22：N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-胺 和
N-(3,5-二氟-4-((1S,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-胺(化合物22-1和化合物22-2)
N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine and
N-(3,5-difluoro-4-((1S,3S)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine(compound 22-1 and compound 22-2)
Figure 02_image250
第一步： 1-(5,6-二氫-1H-環丁[f]吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙基-2-胺(22A)
1-(5,6-dihydro-1H-cyclobuta[f]indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine  (22A)
在100 mL的圓底燒瓶中加入20I (0.3 g, 1.51 mmol)，無水二氯甲烷 (10 mL)溶解，加入三氟乙胺 (0.3 g, 3.02 mmol)和乙酸 (91 mg, 1.51 mmol)，室溫攪拌1 h，加入三乙醯基硼氫化鈉 (0.64 g, 3.02 mmol)，繼續室溫攪拌過夜，加入水(10 mL)淬滅，二氯甲烷(2×10 mL)萃取，合併有機相，柱層析分離(PE：EA=5：1)得標題化合物22A(0.30 g, 70%)。
LC-MS (ESI): m/z = 283.2[M+H] +。
第二步：N-(3,5-二氟-4-(3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[ 3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-胺 (22B)
N-(3,5-difluoro-4-(3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine (22B)
在100 mL的圓底燒瓶中加入22A (0.25 g, 0.89 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入5L (0.29 g, 1.07 mmol)和三氟乙酸 (100 mg, 0.89 mmol)，70攝氏度攪拌18 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物22B (0.26 g, 54%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：11.6 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.38 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.90 (d, 1H), 6.68 (d, 1H), 6.15 – 6.01 (m, 2H), 5.08 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.96-3.91 (m, 1H), 3.66 – 3.55 (m, 2H), 3.45-3.36 (m, 2H), 3.10 (s, 4H), 3.00 – 2.84 (m, 1H), 2.80-2.71 (m, 3H), 2.55 (d, 1H), 2.46 (t, 2H), 1.71-1.60 (m, 2H), 1.09 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 537.2 [M+H] +。
第三步：N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-胺 和
N-(3,5-二氟-4-((1S,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-胺(化合物22-1和化合物22-2)
N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine and
N-(3,5-difluoro-4-((1S,3S)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine(compound 22-1 and compound 22-2)
化合物22B (0.26 g, 0.27 mmol)，經手性製備得標題化合物22-1 (100 mg，滯留時間1.691 min)和化合物22-2(90 mg，滯留時間1.929 min)，兩個化合物的絕對構型未確定，核磁和MS與消旋體一致。儀器：Waters 150 MGM；色譜柱：Chiralpak Column；流動相：A：二氧化碳 and B：異丙醇(0.1%氨水)；等度沖提：25% 流動相 B；流速：100mL /min；背壓：100 bar；柱溫：35 ℃；波長：220 nm；沖提時間：6.2 min。
實施例23：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-6-(三氟甲基)-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇(化合物23)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-6-(trifluoromethyl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 23)
Figure 02_image252
第一步： (R)-(1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)碳酸第三丁酯(23B)
tert-butyl (R)-(1-(5-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate (23B)
在500 mL的三口瓶中加入23A (5.1 g, 27.34 mmol)和氯化亞銅 (2.35 g, 23.70 mmol)，無水二氯甲烷 (80 mL)溶解，冷卻至0攝氏度，滴加MeMgCl (7.9 mL, 3 M)，保溫反應1 h，冷卻至-20攝氏度，滴加7B (2.5 g, 18.23 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液，保持該溫度攪拌過夜，用10%的檸檬酸溶液(200 mL)淬滅，攪拌0.5 h，矽藻土過濾，二氯甲烷(2×100 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(PE：EA=10：1-5：1)純化得標題化合物23B(2.7 g, 43%)。
1H NMR (400 MHz, CD 3Cl) δ 8.47 – 8.30 (m, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.12 (s, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.02 (s, 1H), 2.92 (d, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.15 (d, 3H)。
第二步：(R)-1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)丙基-2-胺(23C)
(R)-1-(5-(三氟甲基)-1H-indol-3-yl)propan-2-amine (23C)
在100 mL的三口瓶中加入23B (2.7 g, 7.89 mmol)，無水甲醇( 15 mL)溶解，加入鹽酸二氧六環(16 mL)，室溫攪拌2 h，濃縮得標題化合物23C (1.9 g, 99%)，直接用於下一步反應。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)丙基-1 -胺(23D)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(5-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine (23D)
在100 mL的三口瓶中加入23C (1.90 g, 7.84 mmol)，二氧六環 (20 mL)和DMF(2 mL)溶解，加入5I (4.54 g, 9.41 mmol)，DIPEA (3.04 g, 23.52 mmol)，90攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析(PE：EA=10：1-5：1)得標題化合物23D(1.3 g, 29%)。
LC-MS (ESI): m/z = 575.3 [M+H] +。
第四步：(R)-2,2-二氟-3-((1-(5-(三氟甲基)-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)丙基-1-醇(23E)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(5-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol (23E)
在100 mL的三口瓶中加入23D (1.3 g, 2.26 mmol)，四氫呋喃 (10 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (4.52 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(20 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(PE：EA=2：1)得標題化合物23E(0.60 g, 79%)。
LC-MS (ESI): m/z =337.1 [M+H] +。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-6-(三氟甲基)-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇(化合物23)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-6-(trifluoromethyl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 23)
在10 mL的微波管中加入23E (0.10 g, 0.30 mmol)，中間體1 (100 mg, 0.36 mmol)，甲苯 (4 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，微波120攝氏度攪拌2 h，濃縮，HPLC分離得標題化合物23 (10 mg, 5%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從45%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.1min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.06 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.42 – 7.24 (m, 2H), 6.42 (d, 1H), 6.15 (d, 2H), 5.24 (t, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.52 – 3.36 (m, 2H), 3.15-3.04 (m, 1H), 2.92 – 2.70 (m, 2H), 2.67-2.59 (m, 3H), 2.35 – 2.26 (m, 1H), 2.24-2.17 (m, 1H), 1.86-1.73 (m, 2H), 1.57-1.51 (m, 1H), 1.38 – 1.23 (m, 2H), 1.07 (d, 3H), 0.87 (t, 1H)。
LC-MS (ESI): m/z = 605.2 [M+H] +。
實施例24：6-((1S,3R)-3,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1 –基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物24)
6-((1S,3R)-3,7-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine(compound 24)
Figure 02_image254
第一步：(R)-1-(6-甲基-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙基-2-胺(24B)
(R)-1-(6-methyl-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine (24B)
在100 mL的三口瓶中加入24A (1.25 g, 6.64 mmol)，二氧六環 (15 mL)溶解，加入2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯 (1.85g, 7.97 mmol)，DIPEA (1.72 g, 13.28 mmol)，90攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析(PE：EA=10：1-5：1)得標題化合物24B (1.0 g, 56%)。
LC-MS (ESI): m/z = 537.2 [M+H] +。
第二步：6-((1S,3R)-3,7-二甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1 –基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物24)
6-((1S,3R)-3,7-dimethyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine(compound 24)
在100 mL的單口瓶中加入24B (81mg, 0.30 mmol)，中間體3 (110 mg, 0.45 mmol)，甲苯 (4 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，100攝氏度攪拌2 h，濃縮，HPLC分離得標題化合物24 (12 mg, 8%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：11.5 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.40 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.28 (d, 1H), 7.04 (d, 2H), 6.91 (d, 1H), 6.79 (d, 1H), 5.95 (d, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.54 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.55-3.51 (m, 1H), 3.04-2.98 (m, 2H), 2.83-2.79 (t, 1H), 2.67-2.60 (m , 2H), 2.37-2.33 (m, 5H), 2.20-2.17 (m, 2H), 1.85-1.76 (m, 2H), 1.56 (s, 1H), 1.25 (s, 1H), 1.13 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 504.3 [M+H] +。
實施例25：N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-5-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物25)
N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 25)
Figure 02_image256
第一步：(R)-1-(3-溴-2-氟苯基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺 (25B)
(R)-1-(3-bromo-2-fluorophenyl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine (25B)
在250 mL的三口瓶中加入25A (5.0 g, 21.54 mmol)，二氧六環 (50 mL)溶解，加入2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯 (6.25 g, 26.92mmol)，DIPEA (4.18 g, 32.31 mmol)，90攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析(PE：EA=30：1-20：1)得標題化合物25B (5.5 g, 81%)。
LC-MS (ESI): m/z =314.1 [M+H] +。
第二步：(R)-2-氟-3-(2-((2,2,2-三氟乙基)氨基)丙基)苯胺 (25C)
(R)-2-fluoro-3-(2-((2,2,2-trifluoroethyl)amino)propyl)aniline  (25C)
在100 mL的單口瓶中加入25B (5.5 g, 17.51mmol)，甲苯(36 mL)溶解，加入二苯甲胺 (6.4 g, 35.02 mmol) ，第三丁醇鈉 (5.1 g, 52.53 mmol)，BINAP (1.1 g, 1.75 mmol)，Pd 2(dba) 3(0.8 g, 0.88 mmol)，氮氣保護中90攝氏度攪拌18 h，加入HCl(2 M, 20 mL)，攪拌2 h, 矽藻土過濾，濃縮，柱層析分離(PE：EA=20：1)得得標題化合物25C (3.3 g, 75%)。
LC-MS (ESI): m/z =251.1 [M+H] +。
第三步：(1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-5-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-胺 (25D)
(1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-5-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-amine  (25D)
在100 mL的單口瓶中加入25C (1.0 g, 4.00 mmol)，二氧六環 (20 mL)溶解，加入4-溴-2,6-二氟苯甲醛 (1.77 g, 8.00 mmol) ，三氟乙酸 (0.46 g, 4.00 mmol)，氮氣保護中70攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析分離(PE：EA=10：1)得標題化合物25D (0.84 g, 46%)。
LC-MS (ESI): m/z = 453.0 [M+H] +。
第四步：N-((1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-5-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺 (25E)
N-((1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-5-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide  (25E)
在100 mL的單口瓶中加入25D (0.77 g, 1.70 mmol)，二氯甲烷 (10 mL)溶解，加入吡啶 (0.67 g, 8.50 mmol)，乙磺醯氯 (0.66 g, 5.10 mmol)，30攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析分離(PE：EA=5：1)得標題化合物25E(0.56 g, 60%)。
LC-MS (ESI): m/z = 545.1 [M+H] +。
第五步：N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基) 氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-5-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物25)
N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound  25)
在50 mL的單口瓶中加入25E (0.10 g, 0.18 mmol)，二氧六環(10 mL)溶解，1M (48 mg, 0.36 mmol)、碳酸銫 (0.15 g, 0.45 mmol)、Brettphos G3 Pd (16 mg, 0.018 mmol)，氮氣置換三次，105攝氏度反應4 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC純化，冷凍乾燥得標題化合物25(50 mg, 46%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.5 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 6.97 (t, 1H), 6.63 (d, 1H), 6.27 (d, 1H), 6.07 (d, 2H), 4.98 (s, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.93-3.89 (m, 1H), 3.66 – 3.55 (m, 2H), 3.40-3.30 (m, 2H), 2.89 – 2.63 (m, 6H), 2.59-2.55 (m, 1H), 2.47-2.43 (m, 2H), 1.70-1.58 (m, 2H), 1.11 (t, 3H), 1.02 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 597.2 [M+H] +。
實施例26：N-((1S,3R)-5-氟-1-(5-((1-(3-氟丙基) 氮雜環丁基-3-基)胺基)吡啶-2-基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物26)
N-((1S,3R)-5-fluoro-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamid(compound 26)
Figure 02_image258
第一步： (1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-5-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6- 胺(26A)
(1S,3R)-1-(5-bromopyridin-2-yl)-5-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-amine (26A)
在100 mL的單口瓶中加入25C (1.0 g, 4.00 mmol)，二氧六環 (20 mL)溶解，加入5-溴吡啶-2-甲醛 (1.49 g, 8.00 mmol) ，三氟乙酸 (0.46 g, 4.00 mmol)，氮氣保護中70攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析分離(PE：EA=10：1-5：1)得標題化合物26A(1.5 g, 90%)。
LC-MS (ESI): m/z = 418.1 [M+H] +。
第二步： N-((1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)-5-氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(26B)
N-((1S,3R)-1-(5-bromopyridin-2-yl)-5-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide (26B)
在100 mL的單口瓶中加入26A (0.80 g, 1.91 mmol)，二氯甲烷 (10 mL)溶解，加入吡啶 (0.76 g, 9.55 mmol) ，乙磺醯氯 (0.74 g, 5.73 mmol)，30攝氏度攪拌18 h，濃縮，柱層析分離(PE：EA=5：1)得標題化合物26B(0.27 g, 28%)。
LC-MS (ESI): m/z = 510.0 [M+H] +。
第三步：N-((1S,3R)-5-氟-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)吡啶-2-基)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物26)
N-((1S,3R)-5-fluoro-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamid(compound 26)
在50 mL的單口瓶中加入26B (0.10 g，0.20 mmol)，二氧六環(10 mL)溶解，1M (53 mg，0.40 mmol)、碳酸銫 (0.16 g，0.50 mmol)、Brettphos G3 Pd (18 mg，0.020 mmol)，氮氣置換三次，105攝氏度反應4 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC純化，冷凍乾燥得標題化合物26(18 mg, 16%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：11.2 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.01 (d, 1H), 9.54 (s, 1H), 7.83 (dd, 1H), 7.27 (d, 1H), 7.16 – 7.04 (m, 2H), 6.72 (d, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.60-4.55 (m, 2H), 4.49 – 4.27 (m, 3H), 4.10-4.04 (m, 1H), 3.88-3.86 (m, 1H), 3.58-3.51 (m, 1H), 3.38 – 3.26 (m, 3H), 3.08 (q, J = 7.3 Hz, 2H), 3.03-2.92 (m, 1H), 2.82-2.77 (m, 1H), 2.62-2.56 (m, 1H), 2.00 – 1.83 (m, 2H), 1.27 (t, 3H), 1.06 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 562.2 [M+H] +。
實施例27：N-((1S,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-5-氟-2-(2-氟-2-甲基丙基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物27)
N-((1S,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-2-(2-fluoro-2-methylpropyl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 27)
Figure 02_image260
第一步：(R)-(1-(3-溴-2-氟苯基)丙-2-基)-3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基-1-胺 (27B)
(R)-N-(1-(3-bromo-2-fluorophenyl)propan-2-yl)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoropropan-1-amine (27B)
在250 mL的單口瓶中加入27A (10 g，43.09 mmol)，二氧六環 (100 mL)溶解，加入DIPEA (16.71 g，129.27 mmol))和5I (2.57 g，12.32 mmol)，90攝氏度反應12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-4：1)純化得標題化合物27B (8g, 32.89%)。
LC-MS (ESI): m/z =564.1 [M+H] +。
第二步：(R)-3-(2-((3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基)氨基)丙基)-2-氟苯胺(27C)
(R)-3-(2-((3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoropropyl)amino)propyl)-2-fluoroaniline (27C)
在100 mL的單口瓶中加入27B (4 g，7.08 mmol)，二氧六環 (40 mL)溶解，加入4G (3.85 g，21.24 mmol)、t-BuONa (5.31 g，21.24 mmol)、BINAP (486.6 mg，0.78 mmol)和Pd 2(dba) 3(227.9 mg，0.39 mmol)，氮氣置換三次，90攝氏度反應4 h，冷卻至室溫，用HCl(1 M，40 mL)溶解，DCM(2× 40 mL)萃取除去雜質，收集水相用NaOH(2 M)調節pH＞10，EA(2× 40 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=10:1-2：1)純化得標題化合物27C (0.2 g, 粗品)。
LC-MS (ESI): m/z =501.2 [M+H] +。
第三步：(R)- 3-((1-(3-胺基-2-氟苯基)丙基-2-基)胺基)-2,2-二氟丙基-1-醇(27D)
(R)-3-((1-(3-amino-2-fluorophenyl)propan-2-yl)amino)-2,2-difluoropropan-1-ol
在10 mL的三口瓶中加入27C (2 g, 3.99 mmol)，四氫呋喃 (20 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (3.29 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(20 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物27D (0.5 g, 47.8%)。
LC-MS (ESI): m/z = 263.2 [M+H] +。
第四步：3-((1S,3R)-6-胺-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-5-氟-3-甲基-3,4-四氫異喹啉-2(1氫)-基-2,2-二氟丙基-1-胺醇(27E)
3-((1S,3R)-6-amino-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-5-fluoro-3-methyl-3,4-dihydroisoquinolin-2(1H)-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (27E)
在100 mL的單口瓶中加入27D (0.35 g，1.33 mmol)，乙酸 (2 mL)和1,4-二氧六環(20 mL)溶解，加入4I (0.59 g，2.66 mmol))，100攝氏度反應2 h，濃縮，加入DCM(20 mL)溶解，HCl(1 M，20 mL)洗滌，收集水相，用NaOH(2 M)調節pH＞10，DCM (2× 20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物27E(0.13 g, 21%)。
LC-MS (ESI): m/z = 465.1 [M+H] +。
第五步：N-((1S,3R)-1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-2-(2,2-二氟-3-羥丙基)-5-氟-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6 –基)乙磺醯胺 (27L)
N-((1S,3R)-1-(4-bromo-2,6-difluorophenyl)-2-(2,2-difluoro-3-hydroxypropyl)-5-fluoro-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide (27L)
在50 mL的單口瓶中加入27D (0.11 g，0.24 mmol)，DCM (10 mL)溶解，加入吡啶(0.076 g，0.96 mmol)和4K (0.093 g，0.72 mmol)，室溫反應18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物27L(70 mg, 52.3%)。
LC-MS (ESI): m/z = 557.1 [M+H] +。
第六步：N-((1S,3R)-2-(2,2-二氟-3-羥丙基)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)苯基)-5-氟-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物27)
N-((1S,3R)-2-(2,2-difluoro-3-hydroxypropyl)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-5-fluoro-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 27)
在50 mL的單口瓶中加入27L (0.06 g，0.11 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入1M (40 mg，0.3 mmol)、Cs 2CO 3(77 mg，0.3 mmol)、Brettphos G3 Pd (10 mg，0.01 mmol)，氮氣置換三次，100攝氏度反應5 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC得標題化合物27(15 mg, 22.4%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-80%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.38 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ7.07 (t, 1H), 6.68 (d, 1H), 6.58 (d, 1H), 6.09 (d, 2H), 5.23 (s, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.89-3.94 (m, 1H), 3.57-3.63 (m, 3H), 3.36-3.45 (m, 2H), 3.02-3.08 (m, 3H), 2.81-2.86 (m, 1H),2.73 (t, 2H), 2.54-2.66 (m, 2H), 2.45 (t, 2H), 1.91 (s, 2H), 1.59-1.69 (m, 2H), 1.25 (t, 3H), 1.00(d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 609.2 [M+H] +。
實施例28：N-((1S,3R)-2-(2,2-二氟-3-羥丙基)-5-氟-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)吡啶)-2-基) -3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物28)
N-((1S,3R)-2-(2,2-difluoro-3-hydroxypropyl)-5-fluoro-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 28)
Figure 02_image262
第一步：3-((1S,3R)-6-胺-1-(5-溴吡啶-2-基)-5-氟-3-甲基-3,4-四氫異喹啉-2(1氫)-基-2,2-二氟丙基-1-胺醇(28A)
3-((1S,3R)-6-amino-1-(5-bromopyridin-2-yl)-5-fluoro-3-methyl-3,4-dihydroisoquinolin-2(1H)-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (28A)
在100 mL的單口瓶中加入27B (0.4 g，1.53 mmol)，乙酸 (2 mL)和甲苯(20 mL)溶解，加入4I (0.57 g，3.06 mmol)，100攝氏度反應2 h，濃縮，加入DCM(20 mL)溶解，HCl(1 M，20 mL)洗滌，收集水相，用NaOH(2 M)調節pH＞10，DCM (2× 20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥0.5 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物28A(0.4 g, 61%)。
LC-MS (ESI): m/z = 430.1 [M+H] +。
第六步：N-((1S,3R)-1-(5-溴吡啶-2-基)- 2-(2,2-二氟-3-羥丙基)-5-氟-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6–基)乙磺醯胺 (28B)
N-((1S,3R)-1-(5-bromopyridin-2-yl)-2-(2,2-difluoro-3-hydroxypropyl)-5-fluoro-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide (28B)
在50 mL的單口瓶中加入28A (0.25 g，0.58 mmol)，DCM (10 mL)溶解，加入吡啶 (0.23 g，2.9 mmol))和4K (0.22 g，1.74 mmol)，室溫反應18 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯(v/v)=3:1-1：1)純化得標題化合物28B(100 mg, 33%)。
LC-MS (ESI): m/z = 522.1 [M+H] +。
第七步：N-((1S,3R)-2-(2,2-二氟-3-羥丙基)-5-氟-1-(5-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)胺基)吡啶)-2-基)-3-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙磺醯胺(化合物28)
N-((1S,3R)-2-(2,2-difluoro-3-hydroxypropyl)-5-fluoro-1-(5-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,2,3,4-tetrahydroisoquinolin-6-yl)ethanesulfonamide(compound 28)
在50 mL的單口瓶中加入28B (0.1 g，0.19 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入1M (75 mg，0.57 mmol)，Cs 2CO 3(110 mg，0.57 mmol)、Brettphos G3 Pd (17 mg，0.019 mmol)，氮氣置換三次，100攝氏度反應5 h，經矽藻土過濾，濃縮，製備HPLC得標題化合物28(15 mg, 13.8%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從20%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.38 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ8.80 (s, 1H), 7.74 (d, 1H), 7.08 (t, 1H), 6.99 (d, 1H), 6.83 (dd, 1H), 6.65 (d, 1H), 6.23 (d, 1H), 5.42 (s, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.88-3.96 (m, 1H), 3.61-3.69 (m, 4H), 2.98-3.14 (m, 4H), 2.73 (t, 2H), 2.58-2.69 (m, 2H), 2.46 (t, 3H), 1.58-1.69 (m, 2H), 1.24 (t, 3H), 1.01(d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 574.2 [M+H] +。
實施例29：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-7-三氟甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物29)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-7-(trifluoromethyl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 29)
Figure 02_image264
第一步：(R)-(1-(6-三氟甲基基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)氨基甲酸第三丁酯(29C)
tert-butyl (R)-(1-(6-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate (29C)
在250 mL的三口瓶中加入29A (5.0 g, 27.01 mmol)和氯化亞銅 (2.14 g, 21.61mmol)無水二氯甲烷 (50 mL)溶解，冷卻至0攝氏度，滴加甲基溴化鎂 (9.00mL, 3 M) ，保溫反應1 h，冷卻至-20攝氏度，滴加10B (4.49, 18.91 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液，保持該溫度攪拌過夜，用10%的檸檬酸溶液(100 mL)淬滅，攪拌0.5 h, 矽藻土過濾，二氯甲烷(2×100 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物29C(1.8 g, 19.5%)。
LC-MS (ESI): m/z = 343.2[M+H] +。
第二步：(R)-1-(6-三氟甲基-1H-吲哚-3-基)丙基-2-胺 (29D)
(R)-1-(6-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-amine (29D)
在100 mL的三口瓶中加入29C (1.8 g, 13.14 mmol)，無水甲醇(10 mL)溶解，加入鹽酸二氧六環(10 mL)，室溫攪拌2 h，濃縮得標題化合物29D(1.8 g, 粗品)。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(6-三氟甲基-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)丙-1-胺 (29E)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(6-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine (29E)
在100 mL的三口瓶中加入29D (1.8 g, 7.43 mmol)，二氧六環 (40 mL)溶解，加入5I (4.3 g, 8.92 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(2.88 g, 22.29 mmol)，90攝氏度攪拌12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物29E(1.2 g, 28.1%)。
LC-MS (ESI): m/z = 575.1 [M+H] +。
第四步：(R)-2,2-二氟-3-((1-(6-三氟甲基-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)丙基-1-醇 (29F)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(6-(trifluoromethyl)-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
在100 mL的三口瓶中加入29E (1.2 g, 2.09 mmol)，四氫呋喃 (20 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (6.27 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(50 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物29F(0.6 g, 85%)。
LC-MS (ESI): m/z = 337.2 [M+H] +。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-7-三氟甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物29)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-7-(trifluoromethyl)-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 29)
在50 mL的單口瓶中加入29F (0.1 g, 0.3 mmol)，中間體1 (100 mg, 0.3 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物29 (30 mg, 16.5%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用甲醇溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-65%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間15 min；滯留時間：8.40 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.04 (s, 1H), 7.58 (d, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.23 (d, 1H), 6.43 (d, 1H), 6.16 (d, 2H), 5.11 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.85 (s, 1H),3.60-3.70 (m, 1H), 3.38 - 3.50 (m, 2H), 3.04- 3.15 (m, 1H), 2.84 -2.88 (m, 1H), 2.75 (t, 1H), 2.56 - 2.65 (m, 3H), 2.43 - 2.46(m, 2H), 2.33 - 2.36 (m, 1H), 2.15 - 2.23 (m, 1H), 1.89 (s, 2H), 1.73- 1.87 (m, 2H), 1.08 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 605.1 [M+H] +。
實施例30: 3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 和
3-((1S,3S)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-1,3,4,6,7,9-六氫-2H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 (化合物30-1和化合物30-2)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol  and
3-((1S,3S)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-1,3,4,6,7,9-hexahydro-2H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (compound 30-1 and compound 30-2)
Figure 02_image266
第一步：6-碘-2,3-二氫-1-氫-茚-5-胺(30D)
6-iodo-2,3-dihydro-1H-inden-5-amine (30D)
在250 mL的圓底燒瓶中加入30C (5.0 g, 37.54 mmol)，乙腈 (50 mL)溶解，加NIS (8.45 g, 37.54 mmol)，室溫攪拌3 h，濃縮，二氯甲烷 (50 mL)溶解，飽和硫代硫酸鈉溶液洗滌，有機相用無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=20：1)純化得標題化合物30D (5.0 g, 51%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25 (s, 1H), 6.67(s, 1H), 2.75-2.95 (m, 4H), 2.01-2.04 (m, 2H)。
第二步：乙基 (E)-4-((6-碘-2,3-二氫-1氫-茚-5-基)胺基)巴豆-2-酯 (30E)
ethyl (Z)-4-((6-iodo-2,3-dihydro-1H-inden-5-yl)amino)but-2-enoate (30E)
在250 mL的圓底燒瓶中加入30D (5 g, 19.3 mmol)，DMF (50 mL)溶解，加入4-溴巴豆酸乙酯 (5.59 g, 28.95 mmol)、碳酸鉀 (8.0 g, 57.9 mmol)，70攝氏度攪拌18 h，加入水 (100 mL)，乙酸乙酯  (2×100 mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=20：1)純化得標題化合物30E(4 g, 55.8%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.29 (s, 1H), 7.00-7.05 (m, 1H), 6.50 (s, 1H), 6.03 (d, 1H),4.16-4.21 (m, 2H) , 3.99-4.01 (m, 2H) , 3.78-2.86 (m, 4H) ,2.00-2.07 (m, 2H) , 1.28 (t, 3H)。
第三步：2-(1,5,6,7-四氫環戊烷[f]吲哚-3-基)乙酸乙酯(30F)
ethyl 2-(1,5,6,7-tetrahydrocyclopenta[f]indol-3-yl)acetate (30F)
在250 mL的圓底燒瓶中加入30E (4 g,10.78 mmol)，DMF (50 mL)溶解，加入醋酸鈀 (0.12 g, 0.54 mmol)、碳酸鉀 (4.47 g, 32.34 mmol)和三苯基膦 (0.28 g, 1.08mmol)，氮氣保護中，75攝氏度攪拌18 h，加入水 (100 mL)，乙酸乙酯  (2×80 mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=10：1-5：1)純化得標題化合物30F(2.0 g, 72.2%)。
1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.88 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.07 (s, 1H), 4.13-4.19 (m, 2H) , 3.72 (s, 2H) ,2.95-3.29 (m, 4H) ,2.04-2.17 (m, 2H) , 1.25 (t, 3H)。
第四步：2-(1,5,6,7-四氫環戊烷[f]吲哚-3-基)乙酸(30G)
2-(1,5,6,7-tetrahydrocyclopenta[f]indol-3-yl)acetic acid (30G)
在100 mL的圓底燒瓶中加入30F (2 g, 8.22 mmol)，甲醇 (20 mL)溶解，加入氫氧化鋰 (0.59 g, 24.66 mmol)和水 (20 mL) ，室溫攪拌5 h，濃縮除去多餘甲醇，加入HCl (2 M)調節pH=5-6，乙酸乙酯  (2×80 mL)萃取，合併有機相，濃縮得標題化合物30G(1.5 g, 85%)。
LC-MS (ESI): m/z = 216.2[M+H] +。
第五步：2-(1,5,6,7-四氫環戊烷[f]吲哚-3-基)-N-甲氧基-N-甲基乙醯胺(30H)
N-methoxy-N-methyl-2-(1,5,6,7-tetrahydrocyclopenta[f]indol-3-yl)acetamide (30H)
在100 mL的圓底燒瓶中加入30G (1.5 g, 6.97 mmol)，THF (20 mL)溶解，加入二甲羥胺鹽酸鹽 (0.85 g, 13.94mmol)、二異丙基乙胺 (2.70 g, 27.91 mmol)，冰浴中滴加1-丙基磷酸酐 (6.65 g, 10.46 mmol)，室溫攪拌18 h，加入水 (50 mL), 乙酸乙酯  (2×50 mL)萃取，合併有機相，飽和食鹽水洗滌， 無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=4：1)得標題化合物30H(1.8 g, 99%)。
LC-MS (ESI): m/z = 259.2[M+H] +。
第六步：1-(1,5,6,7-四氫環戊烷[f]吲哚-3-基)丙基-2-酮 (30I)
1-(1,5,6,7-tetrahydrocyclopenta[f]indol-3-yl)propan-2-one (30I)
在100 mL的圓底燒瓶中加入30H (1.8g, 6.97 mmol)，THF (20 mL)溶解，冰浴中滴加甲基溴化鎂 (3 M, 4.65 mL)，保持冰浴攪拌1 h，加入飽和氯化銨(50 mL)淬滅反應, 乙酸乙酯  (2×50 mL)萃取，合併有機相， 無水硫酸鈉乾燥，柱層析分離(PE：EA=10：1)得標題化合物30I(1.6 g, 68%)。
LC-MS (ESI): m/z = 214.2[M+H] +。
第七步：3-((1-(1,5,6,7-四氫環戊烷[f]吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)-2,2-二氟丙基-1-醇(30J)
2,2-difluoro-3-((1-(1,5,6,7-tetrahydrocyclopenta[f]indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol (30J)
在100 mL的圓底燒瓶中加入30I (1.3 g, 6.1 mmol)，無水甲醇 (20 mL)溶解，加入3-胺基-2,2-二氟丙基-1-醇 (1.02 g, 9.15 mmol)和乙酸 (0.37 g, 6.1 mmol)，室溫攪拌1 h，加入氰基硼氫化鈉 (0.57 g, 9.15 mmol)，繼續室溫攪拌過夜，濃縮，柱層析分離(PE：EA=1：1-EA)得標題化合物30J(0.8 g, 42.5%)。
LC-MS (ESI): m/z = 309.2[M+H] +。
第八步：3-(1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-3,4,6,7,8,10-四氫環戊烷[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇(30K)
3-(1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-3,4,6,7,8,10-hexahydrocyclopenta[f]pyrido[3,4-b]indol-2(1H)-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol (30K)
在100 mL的圓底燒瓶中加入30J (0.8 g, 2.59 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入5L (0.71 g, 2.59 mmol)和三氟乙酸 (0.2 mL)，70攝氏度攪拌10 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物30K (0.3 g, 20%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：12.0 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.22 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.66 (d, 1H), 6.09 (d, 2H), 5.21 (t, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.89-3.96 (m, 1H), 3.59-3.70 (m, 3H), 3.34 - 3.45 (m, 2H), 3.00-3.11 (m, 1H), 2.86 (t, 4H), 2.71-2.81 (m, 3H), 2.56-2.66 (m, 1H), 2.46 (t, 3H), 1.97-2.04 (m, 2H), 1.58-1.71 (m, 2H), 1.05 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 563.2 [M+H] +。
第九步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-3,4,6,7,8,10-四氫環戊烷[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 和
3-((1S,3S)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-13,4,6,7,8,10-四氫環戊烷[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙-1-醇 (化合物30-1和化合物30-2)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-3,4,6,7,8,10-hexahydrocyclopenta[f]pyrido[3,4-b]indol-2(1H)-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol and
3-((1S,3S)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-3,4,6,7,8,10-hexahydrocyclopenta[f]pyrido[3,4-b]indol-2(1H)-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 30-1 and compound 30-2)
化合物30K (0.15 g, 0.27 mmol)，經手性製備得標題化合物30-1 (70 mg，滯留時間：10.0 min)和化合物30-2(50 mg，滯留時間：12.0 min)，兩個化合物的絕對構型未確定，核磁和MS與消旋體一致。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-75%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.0 min。儀器：Waters 150 MGM; 色譜柱：Chiralpak Column; 流動相：A：二氧化碳 and B：異丙醇; 等度沖提：50% 流動相 B; 流速：100mL /min;背壓：100 bar; 柱溫：35 ℃; 波長：220 nm; 沖提時間：5 min；滯留時間：12.0 min。
實施例31：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-7-氟-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物31)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-7-fluoro-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 31)
Figure 02_image268
第一步：(R)-(1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)氨基甲酸第三丁酯(31C)
tert-butyl (R)-(1-(6-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate  (31C)
在250 mL的三口瓶中加入31A (5.0 g, 37 mmol)和氯化亞銅 (2.93 g, 29.6mmol)無水二氯甲烷 (50 mL)溶解，冷卻至0攝氏度，滴加甲基溴化鎂 (12.33mL, 3 M)，保溫反應1 h，冷卻至-20攝氏度，滴加10B (6.15, 25.9 mmol)的二氯甲烷 (20 mL)溶液，保持該溫度攪拌過夜，用10%的檸檬酸溶液(100 mL)淬滅，攪拌0.5 h，矽藻土過濾，二氯甲烷(2×100 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物31C(5.4 g, 46%)。
LC-MS (ESI): m/z = 293.2[M+H] +。
第二步：(R)-1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)丙基-2-胺 (31D)
(R)-1-(6-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-amine (31D)
在100 mL的三口瓶中加入31C (1 g, 3.42mmol)，無水甲醇(10 mL)溶解，加入鹽酸二氧六環(10 mL)，室溫攪拌2 h，濃縮得標題化合物31D(1 g, 粗品)。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基甲矽烷基)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)丙-2-基)丙-1-胺 (31E)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(6-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine (31E)
在100 mL的三口瓶中加入31D (1 g, 5.2 mmol)，二氧六環 (40 mL)溶解，加入5I (3.01 g, 6.24 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(2.88 g, 22.29 mmol)，90攝氏度攪拌12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物31E(0.9 g, 33%)。
LC-MS (ESI): m/z = 525.1 [M+H] +。
第四步：(R)-2,2-二氟-3-((1-(6-氟-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)胺基)丙基-1-醇 (31F)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(6-fluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
在50 mL的三口瓶中加入31E (0.9 g, 1.72 mmol)，四氫呋喃 (20 mL)溶解，加入四丁基氟化銨 (5.16 mL，1 M)，室溫攪拌3 h，用水(50 mL)洗滌，乙酸乙酯(2×20 mL)萃取，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=2：1)純化得標題化合物31F(0.4 g, 81%)。
LC-MS (ESI): m/z = 287.2 [M+H] +。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)1-(3-氟丙基)四氫吡咯-3-基)氨基)苯基)-7-氟-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶並[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙基-1-醇(化合物31)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-7-fluoro-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol(compound 31)
在50 mL的單口瓶中加入31F (0.1 g, 0.35 mmol)，中間體1 (100 mg, 0.35 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物31 (30 mg, 15.5%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用甲醇溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-65%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間15 min；滯留時間：8.40 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.63 (s, 1H), 7.33-7.37 (m, 1H), 6.95 (dd, 1H), 6.76-6.81 (m, 1H), 6.39 (d, 1H), 6.14 (d, 2H), 5.22 (t, 1H), 5.03 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.84 (s, 1H),3.60-3.70 (m, 1H), 3.36 - 3.47 (m, 2H), 3.01- 3.12 (m, 1H), 2.73 -2.82 (m, 2H), 2.54 - 2.67 (m, 3H), 2.31 - 2.47(m, 3H), 2.15 - 2.24 (m, 1H), 1.89 (s, 2H), 1.74- 1.87 (m, 2H), 1.06 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 555.1 [M+H] +。
實施例32：(S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-7-氟-3-甲基-2(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1- (3-氟丙基)四氫吡咯-3-胺(化合物32 )
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-7-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine(compound 32)
Figure 02_image270
第一步：(R)-1-(6-氟-1氫-吲哚-3-基) -N-(2,2,2-三氟乙基)丙-2-胺 (32A)
(R)-1-(6-fluoro-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine (32A)
在100 mL的三口瓶中加入31D (0.6 g, 3.1 mmol)，二氧六環 (20 mL)溶解，加入2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯 (1.45 g, 6.2 mmol)，N,N-二異丙基乙胺(1.21 g, 9.3 mmol)，90攝氏度攪拌12 h，濃縮，柱層析(石油醚：乙酸乙酯=10：1-5：1)純化得標題化合物32A(0.35 g, 41%)。
LC-MS (ESI): m/z = 275.1 [M+H] +。
第二步：(S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-7-氟-3-甲基-2(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1- (3-氟丙基)四氫吡咯-3-胺(化合物32)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-7-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine(compound 32)
在50 mL的單口瓶中加入32A (0.15 g, 0.55 mmol)，中間體1 (160 mg, 0.55 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物32 (25 mg, 8.4%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用甲醇溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-65%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間15 min；滯留時間：8.40 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.68 (s, 1H), 7.34-7.38 (m, 1H), 6.96 (dd, 1H), 6.77-6.82 (m, 1H), 6.42 (d, 1H), 6.15 (d, 2H), 5.09 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.83 (s, 1H),3.46-3.72 (m, 2H), 2.90 - 3.00 (m, 1H), 2.74 -2.82 (m, 2H), 2.51 -2.68 (m, 2H), 2.38 - 2.48 (m, 3H), 2.33 - 2.36(m, 1H), 2.14 - 2.24(m, 1H), 1.74- 1.86 (m, 2H), 1.10 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 543.1 [M+H] +。
實施例33：6-((1S,3R)-7-氟-3-甲基-2(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S) -1- (3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物33)
6-((1S,3R)-7-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine(compound 33)
Figure 02_image272
第一步：6-((1S,3R)-7-氟-3-甲基-2(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S) -1- (3-氟丙基)四氫吡咯-3-基)吡啶-3-胺(化合物33)
6-((1S,3R)-7-fluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine(compound 33)
在50 mL的單口瓶中加入32A (0.05 g, 0.18 mmol)，中間體3 (45 mg, 0.18 mmol)，甲苯 (8 mL)溶解，加入乙酸 (2 mL)，氮氣保護中100攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC得標題化合物33(20 mg, 21.9%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用甲醇溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-65%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間15 min；滯留時間：8.40 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.69 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.36-7.39 (m, 1H), 7.08 (d, 1H), 7.02 (dd, 1H), 6.92 (dd, 1H), 6.77-6.82 (m, 1H), 5.96 (d, 1H), 4.89 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.85 (s, 1H),3.50-3.58 (m, 1H), 3.25 - 3.29 (m, 1H), 2.96 - 3.00 (m, 1H), 2.78 -2.82 (m, 2H), 2.54 - 2.65 (m, 3H), 2.40 - 2.47(m, 3H), 2.31 - 2.35(m, 1H), 1.73- 1.85 (m, 2H), 1.51 -1.58(m, 1H), 1.13 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 508.2 [M+H] +。
實施例34：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-7-乙烯基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物34)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-7-vinyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image274
第一步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)氨基)苯基)-3-甲基-7-乙烯基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物34)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-((1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)amino)phenyl)-3-methyl-7-vinyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料 14F(300 mg, 0.46 mmol)，三丁基乙烯基錫 (221 mg, 1.05 mmol)，四乙基氟化銨(130 mg, 1.58 mmol)，碳酸鉀(128mg, 1.86 mmol)加入到N,N-二甲基甲醯胺溶液中(5ml)，置換氮氣3次後加入催化劑二(三苯基膦)二氯化鈀(30mg, 0.05 mmol)，之後在100 oC下反應16 小時。反應完成後倒入水中(25ml)，EA萃取，飽和食鹽水洗滌2次，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後先通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物34 (25 mg, 產率10%)。
LCMS m/z = 412.3 [M-136]。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.57 (s, 1H), 7.34 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.13 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 6.81 – 6.64 (m, 2H), 6.10 (d, J= 12.0 Hz, 2H), 5.66 (d, J= 17.0 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 5.11 – 5.02 (m, 2H), 4.51 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 4.39 (t, J= 6.1 Hz, 1H), 3.94 (d, J= 6.5 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.49 – 3.36 (m, 2H), 3.08 (d, J= 14.5 Hz, 1H), 2.84 – 2.72 (m, 3H), 2.63 (d, J= 14.5 Hz, 1H), 2.55 (d, J= 5.6 Hz, 1H), 2.46 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 1.65 (dt, J= 25.2, 6.4 Hz, 2H), 1.07 (d, J= 6.6 Hz, 3H)。
實施例35：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-6,7-二氟-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物35)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-6,7-difluoro-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image276
第一步：(R)-(1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)丙基-2-基)氨基甲酸第三丁酯(化合物35B)
tert-butyl (R)-(1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)carbamate
將原料5,6-二氟吲哚(2.5 g, 16.34 mmol)，氯化亞銅(2.6 g,10.95 mmol)，加入到50 mL二氯甲烷中，置於0 oC下，氮氣保護，此溫度下滴加甲基氯化鎂(4.36 mL, 3 mol/l的THF 溶液)，然後反應1小時。之後在-20 oC下加入(R)-4-甲基-1,2,3-氧雜噻唑烷-3-羧酸第三丁酯2,2-二氧化物 (1.29 g, 13.07 mmol)，反應20小時。加入飽和的檸檬酸溶液淬滅反應，再加入飽和的氯化銨溶液，DCM萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物35B (1.6 g, 產率31%)。
LCMS m/z =311.1 [M+1]。
第二步：(R) -1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-胺(化合物35C)
(R)-1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-amine
將原料35B (1.6 g, 5.16 mmol)加入二氯甲烷(5 mL)中，然後加入三氟乙酸(3 mL)，直接濃縮至乾，然後加入飽和碳酸氫鈉水溶液，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後得到標題化合物35C (1 g,產率92%)。
LCMS m/z =211.1[M+1]。
第三步：(R)-3-((第三丁基二苯基矽)氧基)-N-(1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-胺 (化合物35D)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-N-(1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-amine
將試劑3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基三氟甲烷磺酸鹽(2.76 g, 5.71 mmol)，原料35C (1 g, 4.76 mmol)和DIPEA(1.85 g, 14.28 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(20 mL)中，加熱至100 oC攪拌6小時，冷卻，濃縮後粗產物直接加入矽膠拌樣，柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~4：1)分離得到標題化合物 35D (1.7 g,產率66%)。
LCMS m/z =543.2 [M+1]。
第四步：(R)-3-((1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物35E)
(R)-3-((1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料35D (1.7 g, 3.13 mmol)溶於THF(20 mL)溶劑中，然後加入TBAF溶液(6.26 mL, 6.26 mmol, 1M)，室溫攪拌2小時，加水稀釋後，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~1：4)分離得到標題化合物35E (0.85 g, 產率89%)。
LCMS m/z =305.1 [M+1]。
第五步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)苯基)-6,7-二氟-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物35)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-6,7-difluoro-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料35E (100 mg, 0.33 mmol)和中間體1 (94 mg, 0.33 mmol)加入甲苯(6 mL)和醋酸(1.5 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應4小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物35 (80 mg, 產率42%)。
LCMS m/z =573.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.16-7.20 (m, 1H),7.00-7.04 (m, 1H), 6.14-6.19 (m, 2H), 5.13 (s, 1H), 4.56 (t, 1H), 4.44 (t, 1H), 4.00-4.06 (m, 1H), 3.73-3.83 (m, 1H), 3.58-3.62 (m, 1H), 3.42-3.51 (m, 1H), 3.08-3.18 (m, 2H), 2.99-3.05 (m, 1H), 2.90-2.95 (m, 1H), 2.81-2.89 (m, 3H), 2.70-2.78 (m, 2H), 2.52-2.57 (m, 1H), 2.33-2.42 (m, 1H), 1.98-2.04 (m, 1H),1.90-1.96(m, 1H), 1.76-1.84 (m, 1H), 1.13 (d, 3H)。
實施例36: 6-((1S,3R)-6,7-二氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺 (化合物36)
6-((1S,3R)-6,7-difluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image278
第一步：(R)-1-(5,6-二氟-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)-丙基-2-胺 (化合物36A)
(R)-1-(5,6-difluoro-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine
將2,2,2-三氟乙基三氟甲磺酸酯 (1.32 g, 5.68 mmol)，原料35C (1 g, 4.72 mmol)，DIPEA(1.8 g,14.2 mmol)溶於1,4-二氧六環中，90℃下攪拌加熱3h。加水稀釋後，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~1：5)分離得到標題化合物36A (0.83 g, 產率60%)。
LCMS m/z =293.1 [M+1]。
第二步：6-((1S,3R)-6,7-二氟-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡咯)吡啶-3-胺 (化合物36)
6-((1S,3R)-6,7-difluoro-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料36A(400mg, 1.36 mmol)和中間體3苯甲醛(400 mg, 1.59 mmol)加入甲苯(6 mL)和醋酸(1.5 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應4小時，直接濃縮至乾，通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物36 (420 mg,產率42%)。
LCMS m/z =526.2 [M+1]。
1H NMR(400 MHz, DMSO)δ10.79-10.77(s,1H), 7.84-7.82(s, 1H), 7.39-7.35(dd,1H), 7.25-7.21(m,1H), 7.10-7.08(d,1H), 6.94-6.91(m,1H),5.97-5.95(d,1H),4.89 (t, 1H),4.56 (t, 1H), 4.44 (t, 1H), 4.00-4.06 (m, 1H), 3.59-3.48 (m, 1H),3.23-3.25(m,1H) 3.04-2.98 (m, 1H), 2.82-2.78 (m, 1H), 2.64-2.56 (m, 2H), 2.52-2.41 (m, 4H), 2.37-2.31 (m, 1H), 2.23-2.16 (m, 1H), 1.86-1.73 (m, 2H), 1.58-1.50 (m, 1H), 1.14-1.12 (d, 3H)。
實施例37: 2,2-二氟-3-((1S,3R)-6-氟-1-(5-(((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)氨基)吡啶-2-基)-3-甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶基[3,4-b]吲哚-2-基)丙烷-1-醇(化合物37)
2,2-difluoro-3-((1S,3R)-6-fluoro-1-(5-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)pyridin-2-yl)-3-methyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)propan-1-ol
Figure 02_image280
將原料15E (200 mg, 0.70 mmol)和中間體3 (180 mg, 0.70 mmol)加入甲苯(7 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物 37 (65 mg,產率18%)。
LCMS m/z =520.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.89 (d, 1H),7.19-7.22 (m, 1H), 7.10-7.13 (m, 1H), 7.06-7.08 (m, 1H), 6.96-6.99 (m, 1H), 6.79-6.85 (m, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.56 (t, 1H), 4.44 (t, 1H), 3.98-4.04 (m, 1H), 3.79 (t, 2H), 3.38-3.45 (m, 1H), 3.18-3.29 (m, 1H), 2.94-2.98 (m, 1H), 2.75-2.89 (m, 3H), 2.58-2.70 (m, 4H), 2.51-2.56 (m, 1H), 2.30-2.39 (m, 1H), 1.85-1.98(m, 2H), 1.68-1.76 (m, 1H), 1.19 (d, 3H)。
實施例38: (S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-6-氟-3-甲基-2-(2,2,3-三氟丙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物38)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-6-fluoro-3-methyl-2-(2,2,3-trifluoropropyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
Figure 02_image282
將原料化合物37 (100 mg, 0.18 mmol) 溶於乙腈(8 mL)溶液中，然後加入三乙胺(0.15 mL, 1.08 mmol)，三乙胺三氫氟酸鹽(0.059 mL, 0.36 mmol)和九氟丁基磺醯氟(0.063 mL, 0.36 mmol)，然後加熱至50 oC反應10小時，冷卻後，然後用飽和的碳酸氫鈉溶液洗滌，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過TLC純化分離(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物38 (60 mg,產率60%)。
LCMS m/z =557.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ10.66 (s, 1H), 7.11-7.19 (m, 2H), 6.79-6.84 (m, 1H), 6.42 (d, 1H), 6.16 (d, 2H), 5.06 (s, 1H), 4.45-4.73 (m, 3H), 4.42 (t, 1H), 3.82-3.86 (m, 1H), 3.36-3.41 (m, 1H), 3.11-3.22 (m, 1H), 2.68-2.82 (m, 3H), 2.58-2.64 (m, 1H), 2.52-2.55 (m, 1H), 2.38-2.47 (m, 3H), 2.33-2.36 (m, 1H), 2.15-2.23 (m, 1H), 1.73-1.86 (m, 2H), 1.49-1.55 (m, 1H), 1.08 (d, 3H)。
實施例39: 6-((1S,3R)-6-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)吡啶-3-胺(化合物39)
6-((1S,3R)-6-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image284
第一步：(R) -1-(5-碘-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙烷-2-胺(化合物39A)
(R)-1-(5-iodo-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine
將原料5C(1.7 g, 5.66 mmol)，原料2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(1.45 g, 6.25 mmol)和DIPEA(2.19 g, 16.98 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(30 mL)中，加熱至100 oC攪拌3小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物39A (2 g,產率92%)。
LCMS m/z =383.1 [M+1]。
第二步：N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基烷-3-基)-6-(1S,3R)-6-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物39B)
N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-((1S,3R)-6-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine
將原料39A(400 mg, 1.05 mmol)和中間體2 (270 mg, 1.16 mmol)加入甲苯(7 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物39B (500 mg, 產率79%)。
LCMS m/z =602.1 [M+1]。
第三步：N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)-6-((1S,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-6-((三甲基矽基)乙炔基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶基[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物39C)
N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-((1S,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-6-((trimethylsilyl)ethynyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine
將原料39B(530 mg, 0.88 mmol)，三甲基乙炔基矽(430 mg, 4.4 mmol)，三乙胺(180 mg, 1.76 mmol)，四三苯基膦鈀(100 mg, 0.088 mmol)和碘化亞銅(84 mg, 0.44 mmol)加入無水DMF(20 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至65 oC攪拌10小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物39C (450 mg, 產率89%)。
LCMS m/z =572.3 [M+1]。
第四步：6-((1S,3R)-6-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)吡啶-3-胺(化合物39)
6-((1S,3R)-6-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料39C(650 mg, 1.14 mmol)溶解於無水甲醇(10 mL)溶劑中，室溫下加入碳酸鉀(470 mg, 3.12 mmol)，反應3小時後，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物39 (100 mg, 產率17%)。
LCMS m/z =500.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ10.84 (s, 1H), 7.80 (d, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.25 (d, 1H), 7.08-7.13 (m, 2H), 6.88-6.91 (m, 1H), 6.26 (d, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.50 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.92-3.98 (m, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.61-3.65 (m, 2H), 3.51-3.57 (m, 1H), 3.25-3.29 (m, 1H), 2.98-3.06 (m, 1H), 2.72-2.75 (m, 2H), 2.63-2.68 (m, 1H), 2.53-2.57 (m, 1H), 2.46 (t, 2H), 1.60-1.71 (m, 2H), 1.13 (d, 3H)。
實施例40: 6-((1S,3R)-6-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物40)
6-((1S,3R)-6-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-(1-(3-fluoropropyl) pyrrolidin -3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image286
第一步：N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1S,3R)-6-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物40A)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1S,3R)-6-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine
將原料39A(400 mg, 1.05 mmol)和中間體3 (290 mg, 1.16 mmol)加入甲苯(7 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物40A (540 mg, 產率83%)。
LCMS m/z =616.1 [M+1]。
第二步：N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1S,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-6-((三甲基矽基)乙炔基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物40B)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1S,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-6-((trimethylsilyl)ethynyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine
將原料40A(540 mg, 0.88 mmol)，三甲基乙炔基矽(430 mg, 4.43 mmol)，三乙胺(180 mg, 1.76 mmol)，四三苯基膦鈀(100 mg, 0.088 mmol)和碘化亞銅(84 mg, 0.44 mmol)加入無水DMF(20 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至65 oC攪拌10小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物40B (450 mg, 產率87%)。
LCMS m/z =586.3 [M+1]。
第三步：6-((1S,3R)-6-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物40)
6-((1S,3R)-6-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料40B( 420 mg, 0.72 mmol)溶解於無水甲醇(10 mL)溶劑中，室溫下加入碳酸鉀(300 mg, 2.16 mmol)，反應3小時後，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物40 (100 mg,產率27%)。
LCMS m/z =514.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.86 (d, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.16-7.23 (m, 3H), 7.00-7.03 (m, 1H), 4.95 (s, 1H), 4.56 (t, 1H), 4.44 (t, 1H), 3.99-4.05 (m, 1H), 3.35-3.50 (m, 2H), 3.24 (s, 1H), 2.89-3.07 (m,3H), 2.76-2.82 (m, 1H), 2.58-2.68 (m, 4H), 2.51-2.55 (m, 1H), 2.30-2.39 (m, 1H), 1.85-1.98 (m, 2H), 1.68-1.76 (m, 1H), 1.20 (d, 3H)。
實施例41: (S)-N-(4-((1R,3R)-6-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物41)
(S)-N-(4-((1R,3R)-6-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
Figure 02_image288
第一步：(S) -N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-6-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(化合物41A)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-6-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料39A(400 mg, 1.05 mmol)和中間體1 (330 mg, 1.16 mmol)加入甲苯(7 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物41A (550 mg, 產率81%)。
LCMS m/z =651.1 [M+1]。
第二步：(S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-6-((三甲基矽基)乙炔基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(化合物41B)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-6-((trimethylsilyl)ethynyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料41A (550 mg, 0.85 mmol)，三甲基乙炔基矽(420 mg, 4.25 mmol)，三乙胺(180 mg, 1.76 mmol)，四三苯基膦鈀(100 mg, 0.088 mmol)和碘化亞銅(84 mg, 0.44 mmol)加入無水DMF(20 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至65 oC攪拌10小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物41B (400 mg, 產率76%)。
LCMS m/z =621.3 [M+1]。
第三步：(S)-N-(4-((1R,3R)-6-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物41)
(S)-N-(4-((1R,3R)-6-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料41B(450 mg, 0.72 mmol)溶解於無水甲醇(10 mL)溶劑中，室溫下加入碳酸鉀(300 mg, 2.16 mmol)，反應3小時後，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物41 (100 mg,產率25%)。
LCMS m/z =549.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ10.83 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.18-7.20 (m, 1H), 7.09-7.11 (m, 1H), 6.42 (d, 1H), 6.16 (d, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.77-3.93 (m, 2H), 3.38-3.46 (m, 2H), 2.90-3.01 (m, 1H), 2.74-2.84 (m, 2H), 2.55-2.64 (m, 3H), 2.38-2.47 (m, 2H), 2.33-2.36 (m, 1H), 2.15-2.24 (m, 1H), 1.75-1.86 (m, 2H), 1.49-1.57 (m, 1H), 1.11 (d, 3H)。
實施例42: 6-((1S,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)吡啶-3-胺(化合物42)
6-((1S,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image290
第一步：(R)-1-(6-碘-1H-吲哚-3-基)-N-(2,2,2-三氟乙基)丙烷-2-胺(化合物42)
(R)-1-(6-iodo-1H-indol-3-yl)-N-(2,2,2-trifluoroethyl)propan-2-amine
將試劑14C (1.7 g, 6.67 mmol)，原料2,2,2-三氟乙基三氟甲烷磺酸酯(1.55 g, 6.67 mmol)和DIPEA(1.73 g, 13.34 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(35 mL)中，加熱至100 oC攪拌2小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物42A (2 g,產率79%)。
LCMS m/z =383.1 [M+1]。
第二步：N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1S,3R)-7-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物42B)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1S,3R)-7-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine
將原料42A (400 mg, 1.05 mmol)和中間體2 (270 mg, 1.16 mmol)加入甲苯(8 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物42B (530 mg, 產率79%)。
LCMS m/z =602.1 [M+1]。
第三步：6-((1S,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-(1-(3-氟丙基)氮雜丁基-3-基)吡啶-3-胺(化合物42)
6-((1S,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料42B (530 mg, 0.88 mmol)，三甲基乙炔基矽(430 mg, 4.4 mmol)，三乙胺(180 mg, 1.76 mmol)，四三苯基膦鈀(100 mg, 0.088 mmol)和碘化亞銅(84 mg, 0.44 mmol)加入無水DMF(10 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至75 oC攪拌16小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到產品中間體後，溶於甲醇(10Ml )加入碳酸鉀(1 g)攪拌3小時,過濾，旋乾，通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)化合物 42 (100 mg,產率23%)。
LCMS m/z =500.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.79 (s, 1H), 7.80 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 7.07 (d, J= 15.0 Hz, 2H), 6.90 (dd, J= 8.5, 2.8 Hz, 1H), 6.27 (d, J= 6.9 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 4.39 (s, 1H), 3.92 (s, 2H), 3.65 (d, J= 6.4 Hz, 2H), 3.54 (dd, J= 15.8, 10.1 Hz, 1H), 3.02 (dd, J= 15.8, 9.7 Hz, 1H), 2.76 (s, 2H), 2.65 (dd, J= 15.8, 4.1 Hz, 1H), 2.55 (dd, J= 13.6, 7.4 Hz, 1H), 2.48 (s, 2H), 1.91 (s, 2H), 1.72 – 1.56 (m, 2H), 1.13 (d, J= 6.7 Hz, 3H)。
實施例43:(S)-N-(4-((1R,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物43)
(S)-N-(4-((1R,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
Figure 02_image292
第一步：(S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-7-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物43A)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-7-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料42A(400 mg, 1.05 mmol)和中間體1 (330 mg, 1.16 mmol)加入甲苯(8 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物43A (550 mg,產率81%)。
LCMS m/z =651.1 [M+1]。
第二步：(S)-N-(4-((1R,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-胺(化合物43)
(S)-N-(4-((1R,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
將原料43A (550 mg, 0.85 mmol)，三甲基乙炔基矽(420 mg, 4.25 mmol)，三乙胺(180 mg, 1.76 mmol)，四三苯基膦鈀(100 mg, 0.088 mmol)和碘化亞銅(84 mg, 0.44 mmol)加入無水DMF(10 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至75 oC攪拌16小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v)=1:0~10：1)得到產品中間體後，溶於甲醇(10Ml )加入碳酸鉀(1 g)攪拌3小時，過濾，旋乾，通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物43 (100 mg,產率21%)。
LCMS m/z =549.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.78 (s, 1H), 7.38 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.32 (s, 1H), 7.04 (dd, J= 8.1, 1.3 Hz, 1H), 6.43 (d, J= 6.7 Hz, 1H), 6.16 (d, J= 12.3 Hz, 2H), 5.12 (s, 1H), 4.54 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 4.42 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.52 – 3.35 (m, 2H), 3.04 – 2.88 (m, 1H), 2.86 – 2.72 (m, 2H), 2.60 (t, J= 6.4 Hz, 2H), 2.48 – 2.38 (m, 3H), 2.34 (dd, J= 9.4, 4.2 Hz, 1H), 2.19 (m, 1H), 1.80 (m, 2H), 1.59 – 1.45 (m, 1H), 1.10 (d, J= 6.6 Hz, 3H)。
實施例44: 6-((1S,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物44)
6-((1S,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
Figure 02_image294
第一步：N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1S,3R)-7-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物44A)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1S,3R)-7-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine
將原料42A(400 mg, 1.05 mmol)和中間體3 (290 mg, 1.16 mmol)加入甲苯(8 mL)和醋酸(2 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應3小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物44 A(600 mg,產率93%)。
LCMS m/z =616.1 [M+1]。
第二步：6-((1S,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯基-3-基)吡啶-3-胺(化合物44)
6-((1S,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)pyridin-3-amine
將原料44A(540 mg, 0.88 mmol)，三甲基乙炔基矽(430 mg, 4.43 mmol)，三乙胺(180 mg, 1.76 mmol)，四三苯基膦鈀(100 mg, 0.088 mmol)和碘化亞銅(84 mg, 0.44 mmol)加入無水DMF(10 mL)溶劑中，氮氣保護，加熱至75 oC攪拌16小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到產品中間體後，溶於甲醇(10Ml )加入碳酸鉀(1 g)攪拌3小時，過濾，旋乾，通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)標題化合物 44 (150 mg,產率32%)。
LCMS m/z =514.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10.79 (s, 1H), 7.84 (d, J= 2.7 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 6.9 Hz, 2H), 7.10 – 7.02 (m, 2H), 6.93 (m, 1H), 5.96 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.53 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 4.42 (t, J= 6.0 Hz, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.30 (s, 1H), 3.09 – 2.95 (m, 1H), 2.80 (dd, J= 9.2, 7.0 Hz, 1H), 2.70 – 2.53 (m, 3H), 2.49 – 2.40 (m, 3H), 2.33 (dd, J= 9.2, 4.6 Hz, 1H), 2.19 (m, 1H), 1.87 – 1.71 (m, 2H), 1.54 (m, 1H), 1.14 (d, J= 6.7 Hz, 3H)。
實施例45：(S) -N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-7-氟-3-甲基-2-(2,2,3-三氟丙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(化合物45)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-7-fluoro-3-methyl-2-(2,2,3-trifluoropropyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine (compound 45)
Figure 02_image296
將原料化合物29 (300 mg, 0.54 mmol)溶於乙腈(10 mL)溶液中，然後加入三乙胺(0.45 mL, 3.24 mmol)，三乙胺三氫氟酸鹽(0.18 mL, 1.08 mmol)和九氟丁基磺醯氟(0.18 mL, 1.08 mmol)，然後加熱至50 oC反應10小時，冷卻後，然後用飽和的碳酸氫鈉溶液洗滌，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過製備HPLC得標題化合物45 (80 mg, 26.7%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用甲醇溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從30%-65%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間15 min；滯留時間：8.40 min。
LCMS m/z =557.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.67 (s, 1H), 7.34-7.38 (m, 1H), 6.95-6.98 (m, 1H), 6.77-6.82 (m, 1H), 6.42 (d, 1H), 6.16 (d, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.15-4.77 (m, 3H), 4.42 (t, 1H), 3.83 (s, 1H), 3.35-3.41 (m, 1H), 3.11-3.22 (m, 1H), 2.72-2.84 (m, 3H), 2.58-2.64 (m, 1H), 2.52-2.55 (m, 1H), 2.32-2.48 (m, 3H), 2.15-2.24 (m, 1H), 1.74-1.86 (m, 2H), 1.49-1.57 (m, 1H), 1.07 (d, 3H)。
實施例46：N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)-6-((1S,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺和N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)-6-((1R,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)- 2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物46-1和化合物46-2)
N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-((1S,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine and N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-((1R,3S)-3-methyl-2- (2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine(compound 46-1 and compound 46-2)
Figure 02_image298
第一步：N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)-6-(3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺 (46B)
N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-(3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine (46 B)
在100 mL的圓底燒瓶中加入22A (0.21 g, 0.74 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入中間體2 (0.35 g, 1.48 mmol)和三氟乙酸 (84 mg, 0.74 mmol)，70攝氏度攪拌2 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物46B (0.16 g, 43%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.5 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ7.79 (d, 1H), 7.16 (d, 1H), 7.06 (d, 1H), 6.94 – 6.89 (m, 2H), 4.89 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 4.10-4.07 (m, 1H), 3.82 – 3.77 (m, 2H), 3.47 – 3.33 (m, 2H), 3.14-3.12 (m, 5H), 3.02-2.96 (m, 3H), 2.86 (dd, 1H), 2.64 (t, 2H), 2.62 – 2.52 (m, 2H), 1.82 – 1.66 (m, 2H), 1.16 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 502.3 [M+H] +。
第二步：N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)-6-((1S,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺和N-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁基-3-基)-6-((1R,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)- 2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物46-1和化合物46-2)
N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-((1S,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine and N-(1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-yl)-6-((1R,3S)-3-methyl-2- (2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine(compound 46-1 and compound 46-2)
化合物46B (0.16 g, 0.32 mmol)，經手性製備得標題化合物46-1 (90 mg, 滯留時間1.53 min)和化合物46-2(60 mg, 滯留時間2.04 min)，兩個化合物的絕對構型未確定，核磁和MS與消旋體一致。
儀器：Waters 150 MGM；色譜柱：Chiralpak Column；流動相：A：二氧化碳 和B：乙醇(0.1%氨水)；等度沖提：40% 流動相 B；流速：100mL /min；背壓：100 bar；柱溫：35 ℃；波長：220 nm；沖提時間：6.0 min。
實施例47：N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1S,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3, 4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺和 N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1R,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物47-1和化合物47-2)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1S,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine and N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1R,3S)-3- methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine(compound 47-1 and compound 47-2)
Figure 02_image300
第一步： N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-(3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7, 9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺 (47B)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-(3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine (47 B)
在100 mL的圓底燒瓶中加入22A (0.20 g, 0.71 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入中間體3 (0.18 g, 0.71 mmol)和三氟乙酸 (81 mg, 0.71 mmol)，70攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物47B (0.13 g, 36%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：11.2 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.39 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.90 (dd, 1H), 5.94 (d, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.56-3.49 (m, 1H), 3.11 (s, 4H), 3.02-2.96 (m, 1H), 2.82-2.78 (m, 1H), 2.70 – 2.53 (m, 3H), 2.49-2.46 (m, 4H), 2.35-2.32 (m, 1H), 2.21-2.16 (m, 1H), 1.84-1.75 (m, 2H), 1.57-1.52 (m, 1H), 1.12 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 516.3 [M+H] +。
第二步：N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1S,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3, 4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺和 N-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)-6-((1R,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3, 4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)吡啶-3-胺(化合物47-1和化合物47-2)
N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1S,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine and N-((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)-6-((1R,3S)-3- methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)pyridin-3-amine(compound 47-1 and compound 47-2)
化合物47B (0.13 g, 0.25 mmol)，經手性製備得標題化合物47-1 (56 mg)和化合物47-2 (48 mg)。
儀器：Waters 150 MGM；色譜柱：Chiralpak Column；流動相：A：二氧化碳 and B：乙醇(0.1%氨水)；等度沖提：35% 流動相 B；流速：100mL /min；背壓：100 bar；柱溫：35 ℃；波長：220 nm；沖提時間：3.0 min。
化合物47-1, , 滯留時間1.55 min, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.39 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.96 (d, 1H), 6.90 (dd, 1H), 5.94 (d, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.53 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.56-3.50 (m, 1H), 3.11 (s, 4H), 3.04 – 2.92 (m, 1H), 2.80 (t, 1H), 2.70 – 2.53 (m, 3H), 2.50-2.46 (m, 4H), 2.35-2.32 (m, 1H), 2.23-2.14 (m, 1H), 1.86-1.73 (m, 2H), 1.57-1.52 (m, 1H), 1.12 (d, 3H)。
化合物47-2, 滯留時間2.16 min, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.39 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.01 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 6.90 (dd, 1H), 5.94 (d, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.88-3.83 (m, 1H), 3.62 – 3.43 (m, 1H), 3.11 (s, 4H), 3.02-2.93 (m, 1H), 2.80 (dd, 1H), 2.68 – 2.51 (m, 3H), 2.52 – 2.38 (m, 4H), 2.35-2.31 (m, 1H), 2.23-2.14 (m, 1H), 1.89 – 1.70 (m, 2H), 1.60 – 1.48 (m, 1H), 1.12 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 516.3 [M+H] +。
實施例48： (S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺和(S)-N-(3,5-二氟-4-((1S,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(化合物48-1和化合物48-2)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine and (S)-N-(3,5-difluoro-4-((1S,3S)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine(compound 48-1 and compound 48-2)
Figure 02_image302
第一步：(S)-N-(3,5-二氟-4-(3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(48B)
(3S)-N-(3,5-difluoro-4-(3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine (48 B)
在100 mL的圓底燒瓶中加入22A (0.20 g, 0.71 mmol)，二氧六環 (10 mL)溶解，加入中間體1 (0.20 g, 0.71 mmol)和三氟乙酸 (81 mg, 0.71 mmol)，70攝氏度攪拌3 h，濃縮，製備HPLC分離得標題化合物48B (0.12 g, 31%)。
製備方法：儀器：waters 2767製備液相；色譜柱：SunFire@ Prep C18(19 mm×250 mm；樣品用DMF溶解，用0.45 μm濾頭過濾，製成樣品液；製備色譜條件：a. 流動相A, B組成：流動相A：乙腈，流動相B：水(含5 mM乙酸銨)；b. 梯度沖提，流動相A含量從40%-70%；c. 流量15 mL/min。d.沖提時間20 min；滯留時間：10.8 min。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.37 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 6.13 (d, 2H), 5.08 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.85-3.83 (m, 2H), 3.10 (s, 4H), 3.00 – 2.87 (m, 1H), 2.84 – 2.71 (m, 2H), 2.67 – 2.54 (m, 3H), 2.47 – 2.30 (m, 4H), 2.23 – 2.15 (m, 1H), 1.91 – 1.73 (m, 2H), 1.55-1.51 (m, 1H), 1.09 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 551.4 [M+H] +。
第二步：(S)-N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺和(S)-N-(3,5-二氟-4-((1S,3S)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,6,7,9-六氫-1H-環丁[f]吡啶並[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(化合物48-1和化合物48-2)
(S)-N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine and (S)-N-(3,5-difluoro-4-((1S,3S)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,6,7,9-hexahydro-1H-cyclobuta[f]pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine(compound 48-1 and compound 48-2)
化合物48B (0.12 g, 0.22 mmol)，經手性製備得標題化合物48-1 (55 mg)和化合物48-2 (51 mg)。
儀器：Waters 150 MGM；色譜柱：Chiralpak Column；流動相：A：二氧化碳 and B：異丙醇(0.1%氨水)；等度沖提：45% 流動相 B ；流速：70mL /min；背壓：100 bar；柱溫：35 ℃；波長：220 nm；沖提時間：7.5 min。
化合物48-1, 滯留時間2.06 min, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.38 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 6.13 (d, 2H), 5.08 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.51 – 3.32 (m, 2H), 3.10 (s, 4H), 2.96-2.90 (m, 1H), 2.80 – 2.71 (m, 2H), 2.69 – 2.53 (m, 2H), 2.46 – 2.27 (m, 4H), 2.22-2.17 (m, 1H), 1.85-1.75 (m, 2H), 1.55-1.51 (m, 1H), 1.09 (d, 3H)。
化合物48-2, 滯留時間2.29 min, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.37 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 6.38 (d, 1H), 6.13 (d, 2H), 5.08 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.84 (s, 1H), 3.51 – 3.32 (m, 2H), 3.10 (s, 4H), 2.96-2.90 (m, 1H), 2.82 – 2.72 (m, 2H), 2.69 – 2.54 (m, 2H), 2.48 – 2.31 (m, 4H), 2.21-2.16 (m, 1H), 1.91 – 1.72 (m, 2H), 1.55-1.51 (m, 1H), 1.09 (d, 3H)。
LC-MS (ESI): m/z = 551.4 [M+H] +。
實施例49：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)氨基)苯基)-3,6-二甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物49)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3,6-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
Figure 02_image304
第一步：(R) -3-((第三丁基二苯基矽)氧基)-2,2-二氟-N-(1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)丙烷-1-胺(化合物49A)
(R)-3-((tert-butyldiphenylsilyl)oxy)-2,2-difluoro-N-(1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)propan-1-amine
將試劑3-((第三丁基二苯基矽基)氧基)-2,2-二氟丙基三氟甲烷磺酸鹽(2.26 g, 4.68 mmol)，原料16C (0.68 g, 3.12 mmol)和DIPEA(1.21 g, 9.36 mmol)加入1,4-二氧六環溶劑(50 mL)中，加熱至100 oC攪拌6小時，冷卻，直接加入矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~5：1)分離得到標題化合物49A(0.59 g,產率36%)。
LCMS m/z =521.3 [M+1]。
第二步：(R)-2,2-二氟-3-((1-(5-甲基-1H-吲哚-3-基)丙烷-2-基)氨基)丙烷-1-醇(化合物49B)
(R)-2,2-difluoro-3-((1-(5-methyl-1H-indol-3-yl)propan-2-yl)amino)propan-1-ol
將原料49A (0.59 g, 1.14 mmol)溶於THF(20 mL)溶劑中，然後加入TBAF溶液(2.28 mL, 2.28 mmol, 1M)，室溫攪拌2小時，加水稀釋後，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(石油醚：乙酸乙酯 (v/v )=1:0~1：4)分離得到標題化合物49B (0.3 g,產率93%)。
LCMS m/z =283.2 [M+1]。
第三步：3-((1R,3R)-1-(2,6-二氟-4-((S)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-基)氨基)苯基)-3,6-二甲基-1,3,4,9-四氫-2H-吡啶[3,4-b]吲哚-2-基)-2,2-二氟丙烷-1-醇(化合物49)
3-((1R,3R)-1-(2,6-difluoro-4-(((S)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-yl)amino)phenyl)-3,6-dimethyl-1,3,4,9-tetrahydro-2H-pyrido[3,4-b]indol-2-yl)-2,2-difluoropropan-1-ol
將原料49B (19 mg, 0.28 mmol)和中間體1 (80 mg, 0.28 mmol)加入甲苯(4 mL)和醋酸(1 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應1小時，直接濃縮至乾，然後用飽和的碳酸氫鈉溶液洗滌，濾液濃縮後通過TLC純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物49 (30 mg,產率19%)。
LCMS m/z =551.3 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, CD 3OD) δ7.18 (s, 1H),7.07 (d, 1H),6.82-6.84(m, 1H), 6.12-6.15 (m, 2H), 5.13 (s, 1H), 4.54 (t, 1H), 4.42 (t, 1H), 3.91-3.97 (m, 1H), 3.73-3.84 (m, 1H), 3.57-3.62 (m, 1H), 3.45-3.50 (m, 1H), 3.09-3.16 (m, 1H), 2.90-2.96 (m, 2H), 2.72-2.79 (m, 2H), 2.50-2.67 (m, 5H), 2.39 (s, 3H), 2.27-2.35 (m, 1H), 1.83-1.97(m, 2H), 1.68-1.74 (m, 1H), 1.14 (d, 3H)。
實施例50：(S) -N-(4-((1R,3R)-3,6-二甲基-2-(2,2,3-三氟丙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)吡咯烷-3-胺(化合物50)
(S)-N-(4-((1R,3R)-3,6-dimethyl-2-(2,2,3-trifluoropropyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)pyrrolidin-3-amine
Figure 02_image306
將原料化合物49 (100 mg, 0.18 mmol) 溶於乙腈(8 mL)溶液中，然後加入三乙胺(0.15 mL, 1.08 mmol)，三乙胺三氫氟酸鹽(0.059 mL, 0.36 mmol)和九氟丁基磺醯氟(0.063 mL, 0.36 mmol)，然後加熱至50 oC反應10小時，冷卻後，然後用飽和的碳酸氫鈉溶液洗滌，EA萃取，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液濃縮後通過TLC純化分離(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物50 (50 mg,產率50%)。
LCMS m/z =553.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ10.39 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.07 (d, 1H), 6.81 (d, 1H), 6.40 (d, 1H), 6.15 (d, 2H), 5.04 (s, 1H), 4.47-4.73 (m, 3H), 4.42 (t, 1H), 3.82-3.86 (m, 1H), 3.34-3.42 (m, 1H), 3.10-3.21 (m, 1H), 2.67-2.82 (m, 3H), 2.58-2.64 (m, 1H), 2.51-2.54 (m, 1H), 2.38-2.49 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.34 (m, 1H), 2.15-2.23 (m, 1H), 1.73-1.86 (m, 2H), 1.49-1.57 (m, 1H), 1.07 (d, 3H)。
實施例51：N-((4-(1R,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁胺(化合物51)
N-(4-((1R,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine
Figure 02_image308
第一步：N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-7-碘-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁胺(化合物51A)
N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-7-iodo-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine
將原料42A(2 g, 5.23 mmol)和2,6-二氟-4-(1-(3-氟丙基)氮雜環丁烷-3-基)氨基)苯甲醛(中間體5L)(1.42 g, 5.23 mmol)加入甲苯(20 mL)和醋酸(6 mL) 混合溶劑中，然後加熱至95 oC反應5小時，直接濃縮至乾，然後用1M氫氧化鈉溶液洗滌，濃縮後通過矽膠柱層析純化(DCM:MeOH=10:1)得到標題化合物(2.9 g,產率87%)。
LCMS m/z =637.1 [M+1]。
第二步：N-(3,5-二氟-4-((1R,3R)-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-7-((三甲基矽基)乙炔基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁胺(化合物51B)
N-(3,5-difluoro-4-((1R,3R)-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-7-((trimethylsilyl)ethynyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)phenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine
將原料51A(1.5 g, 2.36 mmol)，三甲基乙炔基矽(1.16 g, 11.80 mmol)，三乙胺(0.48 g, 4.72 mmol)，四三苯基膦鈀(270 mg, 0.24 mmol)和碘化亞銅(220 mg, 1.18 mmol)加入無水DMF(20 mL)溶劑中，然後加入100 mL封管中，氮氣鼓吹一分鐘，加熱至70 oC攪拌8小時，冷卻，過濾，濾液減壓濃縮後加水稀釋，EA萃取，乾燥，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10：1)得到標題化合物(1.2 g,產率84%)。
LCMS m/z =607.3 [M+1]。
第三步：N-(4-((1R,3R)-7-乙炔基-3-甲基-2-(2,2,2-三氟乙基)-2,3,4,9-四氫-1H-吡啶[3,4-b]吲哚-1-基)-3,5-二氟苯基)-1-(3-氟丙基)氮雜環丁胺(化合物51)
N-(4-((1R,3R)-7-ethynyl-3-methyl-2-(2,2,2-trifluoroethyl)-2,3,4,9-tetrahydro-1H-pyrido[3,4-b]indol-1-yl)-3,5-difluorophenyl)-1-(3-fluoropropyl)azetidin-3-amine
將原料51B (1.2 g, 1.98 mmol)溶解於無水甲醇(20 mL)溶劑中，室溫下加入碳酸鉀(550 mg, 3.96 mmol)，反應3小時後，過濾，濾液濃縮後通過矽膠柱層析純化分離(二氯甲烷：無水甲醇 (v/v )=1:0~10:1)得到目標化合物(350 mg,產率33%)。
LCMS m/z =535.2 [M+1]。
1H NMR (400 MHz, DMSO- d 6) δ10.78 (s, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.31 (s, 1H), 7.02-7.05 (m, 1H), 6.72 (d, 1H), 6.12 (d, 2H), 5.12 (s, 1H), 4.51 (t, 1H), 4.39 (t, 1H), 3.93-3.96 (m, 1H), 3.92 (s, 1H), 3.60-3.63 (m, 2H), 3.38-3.44 (m, 2H), 2.89-3.01 (m, 1H), 2.79-2.84 (m, 1H), 2.73 (t, 2H), 2.55-2.60 (m, 1H), 2.46 (t, 2H), 1.59-1.70 (m, 2H), 1.10 (d, 3H)。
生物測試
1、化合物對MCF-7細胞增殖的抑制效應
乳腺癌細胞MCF-7購置於ATCC，細胞培養基皆為EMEM+10%FBS，培養於37 ºC，5% CO 2孵箱中。第一天收集處於指數生長期的細胞，用10% css-FBS無酚紅培養基將細胞激素剝奪培養3天。培養結束後，用10% css-FBS無酚紅培養基將細胞懸液調整為相應濃度鋪板，使細胞為1000個/孔，加入β-雌二醇和不同濃度的化合物，取一塊不加藥的板子作為Day0讀值RLU day0，以CellTiter-Glo 試劑盒測定，置於孵箱中培養繼續孵育7天。培養結束後，按照CellTiter-Glo試劑盒(Promega，G7573)操作說明，每孔加入50 µL預先融化並平衡到室溫的CellTiter-Glo 溶液，用微孔板震盪器混勻2分鐘，於室溫放置10分鐘後用酶標儀(PHERAstar FSX)測定螢光信號值。化學發光讀數使用origin9.2軟體，採用DoseResp函數計算化合物抑制細胞增殖的GI 50值(表1)。結果按照式(1)處理，計算出化合物各個濃度的抑制率，並使用origin9.2軟體，計算增殖率為50%時化合物的濃度GI 50值。其中RLU compound為藥物處理組的讀數，RLU control為溶劑對照組的平均值。
Growth % =(RLU compound- RLU day0) / (RLU control- RLU day0)×100     式(1)
結果：本發明化合物對MCF-7細胞增殖具有顯著抑制作用，實施例化合物對MCF-7細胞增殖的抑制活性的GI50值的小於100nM，部分優異的化合物對MCF-7細胞的GI 50值小於1nM，更優秀的化合物對MCF-7細胞的GI 50值小於0.03nM。其中，部分實施例的測試結果如表 1所示： 表1本發明化合物在對MCF-7細胞增殖的抑制活性的GI50值
化合物 MCF-7 GI 50(nM)
化合物35 ＜0.026
化合物38 ＜0.026
化合物43 0.219
化合物49 ＜0.026
結論：本發明化合物對MCF-7細胞增殖具有顯著抑制作用。
2、化合物對MCF-7及CAMA-1細胞中ERα的降解作用
乳腺癌細胞MCF-7及CAMA-1購置於ATCC，細胞培養基皆為EMEM+10%FBS，培養於37 ºC，5% CO 2孵箱中。第一天收集處於指數生長期的細胞，用10% css-FBS無酚紅培養基將細胞懸液調整為相應濃度鋪板，使細胞為300000個/孔，培養3天。3天后將孔內液體吸出，並加入含待測化合物的10% css-FBS無酚紅培養基，培養於37 ºC，5% CO 2孵箱中。24小時後，向每孔加入60μl RIPA裂解液(含1X蛋白酶抑制劑混合物(Protease Inhibitorcocktail))，於冰上裂解15分鐘後，12000g，4℃離心10分鐘。收集上清蛋白樣品，用BCA法進行蛋白定量。使用全自動蛋白質表達定量分析檢測ERα，實驗過程如下，將稀釋待測蛋白濃度至1.5 mg/mL。取4 μL稀釋後的蛋白樣品加入1 μL 5× Master Mix(試劑盒提供)，將配製好的樣品放在95 °C變性5分鐘，放在冰上待用。使用Antibody Diluent II(試劑盒提供)稀釋一抗，其中ERα(CST, 13258S)與β-actin(CST, 3700)抗體的稀釋比例分別為1:40和1:500，二抗為1:1混合羊抗小鼠和羊抗兔二抗，顯色液為1:1混合的Lumino-S和Peroxide。按照試劑盒說明書將配製好的試劑依次加入檢測板內，上機檢測。Western條帶處理使用全自動蛋白質表達定量分析軟體“Compass for SW”根據信號值自動類比western條帶。根據式(1)計算不同藥物濃度下，ERα相對於溶媒對照的占比。其中A compound為給藥組ERα相對峰面積，A solvent為溶媒對照組ERα相對峰面積。
ERα % = A compound/A solvent× 100  式(1)
DC 50計算：按照式(1)處理，並使用Graphpad Prism 8.0軟體，採用非線性四參數函數(Non linear regression (cruve fit))計算ERα降解率為50 %時的化合物濃度DC 50值(表1)。
結果：本發明化合物對MCF-7及CAMA-1細胞中ERα具有顯著抑制作用，實施例化合物對ERα的DC50值小於1μM。其中，部分實施例的測試結果如表 2 所示： 表2  MCF-7、CAMA-1細胞增中ERα降解活性
化合物 MCF-7
DC 50(nM) Dmax,%
化合物8 0.594 70%@100nM
化合物15 0.447 72 @100 nM
化合物18 0.47 70%@100nM
化合物22-1 1.13 69%@100nM
化合物31 0.244 77%@100nM
化合物32 1.23 88%@100nM
化合物35 0.269 68%@100nM
化合物38 1.7 72%@100nM
化合物49 0.726 70%@100nM
化合物51 0.712 68%@100nM
結論：本發明化合物對ERα活性具有顯著抑制作用。
3.大鼠藥代動力學測試
3.1試驗動物：雄性SD大鼠，220 g左右，6~8周龄，6只/化合物。购於成都達碩实验动物有限公司。
3.2試驗設計：试验当天，24只SD大鼠按体重随机分组。给药前1天禁食不禁水12~14h，给药后4h给食。 表3 給藥資訊
組別 數量 給藥資訊
雄性 受試物 給藥劑量 (mg/kg) 給藥濃度 (mg/mL) 給藥體積 (mL/kg) 採集樣本 給藥 方式
G1 3 WO2021228210 化合物4 2.5 0.5 5 血漿 靜脈
G2 3 10 1 10 血漿 灌胃
G3 3 化合物32 2.5 0.5 5 血漿 靜脈
G4 3 10 1 10 血漿 灌胃
G5 3 化合物18 2.5 0.5 5 血漿 靜脈
G6 3 10 1 10 血漿 灌胃
G7 3 化合物43 2.5 0.5 5 血漿 靜脈
G8 3 10 1 10 血漿 灌胃
注：靜脈給藥溶媒: 5%DMA+5%Solutol+90%Saline；灌胃給藥溶媒：0.5%MC
(DMA：二甲基乙醯胺；Solutol：聚乙二醇-15-羥基硬脂酸酯；Saline：生理鹽水；MC：甲基纖維素)
於給藥前及給藥後異氟烷麻醉經眼眶取血0.15 ml，置於EDTAK2離心管中，5000rpm，4 oC離心10min，收集血漿。靜脈組和灌胃組採血時間點均為：0, 5, 15, 30min, 1, 2, 4, 6, 8, 24 h。分析檢測前，所有樣品存於-80 oC，用LC-MS/MS對樣品進行定量分析。
測試結果見表4。 表4 化合物在大鼠血漿中的藥代動力學參數
受試化合物 給藥方式 CL (mL/min/kg) Vd ss(L/kg) AUC 0-t(hr*ng/mL) F (%)
WO2021228210化合物4 i.v. (2.5 mg/kg) 42.2±14 21.9±4.3 942±240 -
i.g. (10 mg/kg) - - 1493±48 39.6±1.3
化合物32 i.v. (2.5 mg/kg) 39.2±2.8 31.4±5.9 853±48 -
i.g. (10 mg/kg) - - 1966±469 57.6±14
化合物18 i.v. (2.5 mg/kg) 16.9±4.0 12.2±1.5 2074±294 -
i.g. (10 mg/kg) - - 4563±1042 55.0±13
化合物43 i.v. (2.5 mg/kg) 20.8±2.0 18.1±2.1 1568±143 -
i.g. (10 mg/kg) - - 3200±129 51.0±2.1
-：不適用。
結論：本專利中的化合物與已報到WO2021228210化合物4相比，在大鼠PK測試中現出優良的藥代動力學性質，暴露量、口服生物利用度等均具有一定優勢。
4.小鼠藥代動力學測試
4.1試驗動物：雄性ICR小鼠，20~25 g，18只/化合物。購於成都達碩實驗動物有限公司。
4.2試驗設計：試驗當天，72只ICR小鼠按體重隨機分組。給藥前1天禁食不禁水12~14h，給藥後4h給食。
表5 給藥資訊
組別 數量 給藥資訊
雄性 受試物 給藥劑量 (mg/kg) 給藥濃度 (mg/mL) 給藥體積 (mL/kg) 採集樣本 給藥 方式
G1 9 WO2021228210 化合物4 5 1 5 血漿 靜脈
G2 9 10 1 10 血漿 灌胃
G3 9 化合物32 5 1 5 血漿 靜脈
G4 9 10 1 10 血漿 灌胃
G5 9 化合物18 5 1 5 血漿 靜脈
G6 9 10 1 10 血漿 灌胃
G7 9 化合物43 5 1 5 血漿 靜脈
G8 9 10 1 10 血漿 灌胃
注：靜脈給藥溶媒: 5%DMA+5%Solutol+90%Saline；灌胃給藥溶媒：0.5%MC
(DMA：二甲基乙醯胺；Solutol：聚乙二醇-15-羥基硬脂酸酯；Saline：生理鹽水；MC：甲基纖維素)
於給藥前及給藥後異氟烷麻醉經眼眶取血0.06 mL，置於EDTAK2離心管中，5000rpm，4 oC離心10min，收集血漿。靜脈組和灌胃組採血時間點均為: 0, 5, 15, 30min, 1, 2, 4, 6, 8, 24 h。分析檢測前，所有樣品存於-80 oC，用LC-MS/MS對樣品進行定量分析。測試結果見表6。 表6 化合物在小鼠血漿中的藥代動力學參數
受試化合物 給藥方式 CL (mL/min/kg) Vd ss(L/kg) AUC 0-t(hr*ng/mL) F (%)
WO2021228210化合物4 i.v. (5 mg/kg) 15.3 28.2 5450 -
i.g. (10 mg/kg) - - 5695 52.3
化合物32 i.v. (5 mg/kg) 16.3 21.6 3356 -
i.g. (10 mg/kg) - - 4406 65.6
化合物18 i.v. (5 mg/kg) 15.0 18.2 3806 -
i.g. (10 mg/kg) - - 5654 74.3
化合物43 i.v. (5 mg/kg) 8.21 16.6 10153 -
i.g. (10 mg/kg) - - 10187 50.2
-：不適用。
結論： 本發明中的化合物與已報到WO2021228210化合物4相比，在小鼠PK測試中表現出優良的藥代動力學性質。
5.hERG鉀離子通道作用測試
實驗平臺：電生理手動膜片鉗系統
細胞系：穩定表達hERG 鉀離子通道的中國倉鼠卵巢(CHO)細胞系
實驗方法：穩定表達hERG 鉀通道的CHO (Chinese Hamster Ovary) 細胞，在室溫下用全細胞膜片鉗技術記錄hERG 鉀通道電流。玻璃微電極由玻璃電極毛胚 (BF150-86-10，Sutter) 經拉制儀拉製而成，灌注電極內液後的尖端電阻為2-5 MΩ左右，將玻璃微電極插入放大器探頭即可連接至膜片鉗放大器。鉗制電壓和資料記錄由pClamp 10 軟體通過電腦控制和記錄，採樣頻率為10 kHz，濾波頻率為2kHz。在得到全細胞記錄後，細胞鉗制在-80 mV，誘發hERG 鉀電流( I hERG) 的步階電壓從-80 mV 給予一個2 s 的去極化電壓到+20 mV，再複極化到-50 mV，持續1 s 後回到-80 mV。每10 s 給予此電壓刺激，確定hERG 鉀電流穩定後(至少1 分鐘) 開始給藥過程。化合物每個測試濃度至少給予 1 分鐘，每個濃度至少測試2個細胞 (n≥2)。
資料處理：資料分析處理採用pClamp 10，GraphPad Prism 5 和Excel 軟體。不同化合物濃度對hERG 鉀電流 (-50 mV 時誘發的hERG 尾電流峰值) 的抑制程度用以下公式計算： Inhibition % = [1 – ( I/ Io)]×100%
其中，Inhibition %代表化合物對hERG鉀電流的抑制百分率， I和 Io分別表示在加藥後和加藥前hERG 鉀電流的幅度。
化合物IC 50使用GraphPad Prism 5 軟體通過以下方程擬合計算得出： Y=Bottom + (Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))
其中，X為供試品檢測濃度的Log 值，Y為對應濃度下抑制百分率，Bottom和Top分別為最小和最大抑制百分率。
實驗結果：測試化合物對hERG鉀通道電流抑制作用的IC 50值見下表7： 表7 測試化合物對hERG鉀通道電流抑制活性
化合物 測試的最高濃度抑制率 IC 50(μM)
WO2021228210化合物4 97.65±1.26%@10 μM 0.7021
化合物32 100.20±0.74%@40 μM 4.14
化合物18 99.98±1.79%@40 μM 2.82
化合物43 98.28±0.93%@40 μM 12.3
結論： 本專利裡的化合物比已報到WO2021228210化合物4在hERG測試中更具有優勢。
6.CYP450酶抑制測試
本項研究的目的是應用體外測試體系評價受試物對人肝微粒體細胞色素P450(CYP)的5種同工酶(CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4)活性的影響。CYP450同工酶的特異性探針底物分別與人肝微粒體以及不同濃度的受試物共同孵育，加入還原型煙醯胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)啟動反應，在反應結束後，通過處理樣品並採用液相色譜-串聯質譜聯用(LC-MS/MS)法定量檢測特異性底物產生的代謝產物，測定CYP酶活性的變化，計算IC 50值，評價受試物對各CYP酶亞型的抑制潛能。
實驗結果：在測試條件下，孵育濃度為0~50/100 μM時，各化合物對CYP酶抑制作用的IC 50值見下表8： 表8 測試化合物對CYP酶抑制活性
CYP酶亞型/化合物 IC 50(μM)
WO2021228210化合物4 化合物32 化合物18 化合物43
CYP1A2 15.6 ＞100 ＞100 41.6
CYP2C9 15.6 19.5 20.0 ＞42.8
CYP2C19 19.1 NA NA ＞50
CYP2D6 13.8 23.4 34.1 21.5
CYP3A-M 12.8 18.9 15.7 ＞12.7
結論： 本發明的化合物比已報到WO2021228210化合物4在CYP測試中更具有優勢。
7. 小鼠MCF-7腦原位腫瘤模型生長的抑制實驗
細胞培養：MCF-7-Luc細胞（來源於藥明康得）體外培養，培養條件為添加10％胎牛血清以及含10μg/mL 重組胰島素的培養基，37 ºC，5%CO 2。一周常規傳代2次。當細胞維持在指數增長期時，收取細胞，計數，接種。
動物：BALB/c nude小鼠，雌性，6-8周齡，體重19-23克。由北京維通利華實驗動物技術有限公司提供。
腫瘤接種：麻醉小鼠，保定在腦立體定位儀上，消毒腦部皮膚。在頂骨和枕骨處切開約2 mm的矢狀切口，暴露頭骨，用25G尖針頭在前鹵右側2 mm及冠狀縫前側 1 mm處對頭骨穿孔。用注射器抽取細胞懸液，將針頭垂直穿入先前的穿孔3 mm深度，緩慢注射細胞懸液(3 µL，含有3×10 5個MCF-7-Luc 細胞及20% Matrigel，注射3分鐘)。注射結束後，滯留注射器1分鐘，再緩慢抽出以減少細胞液回流，用膠封住穿孔，復位頭皮，縫合切口，術後需繼續觀察動物至完全蘇醒。皮下植入17-beta-雌二醇片（0.36mg, 60 day release，innovrsrch，Cat#：SE-121-0.36mg）至少在細胞植入前一天。在接種細胞後第8天，依據小鼠體重隨機分組給藥，分組當天為Day0。
給藥：化合物18及化合物32給藥劑量為30mg/kg，口服給藥（PO），每天一次給藥（QD），每組8隻小鼠，所有組持續給藥56天。
實驗觀察和結束：
每週2次測量小鼠體重，以活體動物體內成像系統IVIS測定小鼠顱內MCF-luc螢光值。給藥49天后結束實驗，安樂死所有小鼠。
實驗結果：
見圖1、圖2。在小鼠腦原位MCF-7模型中，溶劑對照組在給藥35天后，體重出現持續下降，原因為顱內腫瘤進展，小鼠腫瘤負荷較重。本發明實施例化合物組小鼠體重平穩，狀態無異常，直到實驗終點，小鼠均未出現死亡，相對於溶劑對照組，實施例化合物對MCF-7腦原位腫瘤模型小鼠具有顯著的抑制作用。
無
圖1表示小鼠腦原位MCF-7模型中顱內螢光信號變化。
圖2表示小鼠腦原位MCF-7模型中小鼠體重變化率。
無
Figure 111126412-A0101-11-0002-2

Claims (17)

  1. 一種式(I)所示的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，
    Figure 03_image001
    (I) 其中，環A選自I-a或I-b:
    Figure 03_image026
    、
    Figure 03_image028
    ； X為N或CR x； a為0、1、2或3； b為1或2； Y為NR 8或CHR 8； R 1為C 1-6烷基、C 2-6烯基或C 2-6炔基，所述R 1任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、-OC 1-4烷基、-NHC 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，其中，所述環烷基和雜環烷基任選進一步被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和-OC 1-4烷基的基團取代； 每個R x獨立地為H、NH 2、OH、鹵素、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、-N(C 1-4烷基) 2、-NHC 1-4烷基或-OC 1-4烷基； R 2、R 5、R 6、R 2’、R 5’和R 6’獨立地為H、CN、OH、NH 2、SH或鹵素； R 3、R 4獨立地為H、鹵素、SF 5、CN、-NR aSO 2R b、-SO 2NHR a、-P(=O)(R b) 2、-NR aP(=O)(R b) 2； R a為H或R b； R b為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代； R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基，或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、苯基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代； 可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代； 條件是，當b選自2時，R 3’和R 4’不同時選自H； R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基； R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-COR e、-OH、-OC 1-4烷基或-SO 2R e； R e為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、C 4-6環烷基、-C 1-4烷基C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代； R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代的C 1-4烷基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、或鹵代C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代； R 7和R 7’為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基，所述烷基和環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、SH、C 1-4烷基和C 3-6環烷基的基團取代； R 8和R 8’獨立地為C 1-6烷基、-OR f、-SR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代； R f為H、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代。
  2. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中， (i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者 (ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中， R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者 (iii)R 5為CN或鹵素；或者 (iv)R 8為-OR f、-SR f、-NHR f、C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代；或者 (v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基，或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH； 可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者 (vi)R 8’為-OR f或C 3-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代； R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代。
  3. 根據請求項2所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II’)的結構，
    Figure 03_image313
    (II’) 其中，環A選自II-a或II-b:
    Figure 03_image030
    、
    Figure 03_image032
    X為N或CR x； Y為NR 8或CHR 8； 每個R x獨立地為H或鹵素。
  4. 根據請求項3所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽， 其中，R 3’和R 4’獨立地為H、-NR cR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、鹵素、SF 5、CN、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、烯基、炔基、環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代； 可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 4-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基的基團取代； R c為H、C 1-4烷基或C 3-6環烷基； R c’ 為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OH或-OC 1-4烷基； R d為被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代的C 1-4烷基、C 1-4烷基、鹵代C 1-4烷基、氘代C 1-4烷基、或鹵代C 1-4烷基，所述環烷基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代； R 5獨立地為H、CN、OH或鹵素； R 7為H或C 1-4烷基； R 8和R 8’獨立地為C 1-4烷基、-OR f、-NHR f、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代； R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代； 條件是所述化合物滿足： (i)R 3為-NR aSO 2R b、-SO 2NR a、CN或鹵素；或者 (ii)R 4為SF 5、-NR aSO 2R B、-SO 2NR a、-P(=O)(R b) 2或-NR aP(=O)(R b) 2，其中， R B為C 1-4烷基、C 3-6環烷基、苯基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基；當R B為所述烷基時進一步被1-3個選自鹵素、CN、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；當R B為所述環烷基、苯基、雜芳基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH和C 1-4烷基的基團取代；或者 (iii)R 5為CN或鹵素；或者 (iv)R 8為-OR f、-NHR f、C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，當R 8為所述烷基時進一步被C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基取代；當R 8為所述環烷基或雜環烷基時任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代；或者 (v)R 3’和R 4’中的至少一個為-NHR c’、OR d、C 2-6烯基、C 2-6炔基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5元雜芳基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烯基、炔基、雜芳基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、CN、NH 2、OH、C 1-4烷基、C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代，R c’為C 2-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基、-OC 1-4烷基或OH； 可選地，一個R 3’和一個R 4’與它們連接的原子一起形成C 3-8環烷基、或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-12元雜環烷基，所述環烷基或雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、NH 2、C 1-4烷基和鹵代C 1-4烷基的基團取代；或者 (vi)R 8’為-OR f、C 3-6環烷基，所述環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代； R f為C 1-4烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜環烷基的基團取代。
  5. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II’-1)的結構，
    Figure 03_image014
    (II’-1) 其中，環A選自II-a或II-b:
    Figure 03_image030
    、
    Figure 03_image032
    X為N或CR x； Y為NR 8或CHR 8； 每個R x獨立地為H或鹵素； 條件是，R 3’和R 4’不同時選自H。
  6. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II’-a)、式(II’-a-1)的結構，
    Figure 03_image018
    (II’-a)
    Figure 03_image020
    (II’-a-1) 每個Rx獨立地為H或鹵素； R 3’和R 4’獨立地為H、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、-O-CH 2-C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基、C 2-6烯基、C 2-6炔基，或者，R 3’和R 4’形成4元環烷基、5元環烷基； 條件是，R 3’和R 4’不同時選自H； R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代。
  7. 根據請求項6所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中， 每個Rx獨立地為H或F； R 3’和R 4’獨立地為H、C 1-4烷基、C 1-4烷氧基、-O-CH 2-C 3-6環烷基、含有1-3個選自N、S、O雜原子的5-6元雜芳基、C 2-4烯基、C 2-4炔基，條件是，R 3’和R 4’不同時選自H； R 8’獨立地為C 1-4烷基，所述烷基被1、2或3個選自F、Cl、OH、CN、NH 2、甲基、羥基甲基、環丙基、氮雜環丁基、氧雜環丁基的基團取代。
  8. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中，所述化合物具有式(II’-1a)、式(II’-1a-1)的結構，
    Figure 03_image022
    (II’-1a)
    Figure 03_image024
    (II’-1a-1) 每個Rx獨立地為H或鹵素； R 3’和R 4’獨立地為H、鹵代C 1-4烷基、C 1-6烷基、C 2-6烯基、C 2-6炔基或鹵素；或者 R 3’和R 4’一起形成環丁基； R 8’獨立地為C 1-6烷基、C 3-6環烷基或含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基，所述烷基、環烷基和雜環烷基任選地被1-3個選自鹵素、OH、CN、NH 2、C 1-4烷基、-C 1-4烷基-OH、C 3-6環烷基和含有1-3個選自N、S、O雜原子的4-7元雜環烷基的基團取代； 條件是，R 3’和R 4’不同時選自H。
  9. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中 每個Rx獨立地為F； R 3’和R 4’獨立地為H、二氟甲基、三氟甲基、乙烯基、丙烯基、乙炔基、丙炔基、F或Cl； R 8’獨立地為甲基、乙基或丙基，所述甲基、乙基或丙基被1、2或3個選自F、Cl、OH、CN、NH 2、甲基、羥基甲基、環丙基、氮雜環丁基或氧雜環丁基的基團取代; 條件是，R 3’和R 4’不同時選自H。
  10. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，其中 每個Rx獨立地為H或F； R 3’和R 4’獨立地為H、C 2-4烯基、C 2-4炔基、F或Cl； R 8’獨立地為C 1-4烷基，所述烷基被1、2或3個選自F、Cl、OH、CN、NH 2、甲基、羥基甲基、環丙基、氮雜環丁基或氧雜環丁基的基團取代； 條件是，R 3’和R 4’不同時選自H。
  11. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，所述化合物選自以下結構之一：
    Figure 03_image323
    Figure 03_image325
    Figure 03_image327
    Figure 03_image329
    Figure 03_image331
    Figure 03_image333
    Figure 03_image335
    Figure 03_image337
    Figure 03_image070
    Figure 03_image072
    Figure 03_image341
    Figure 03_image343
    Figure 03_image345
    。
  12. 根據請求項1所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，所述化合物選自以下結構之一：
    Figure 03_image347
    Figure 03_image349
    Figure 03_image351
    Figure 03_image353
    Figure 03_image355
    Figure 03_image357
    Figure 03_image359
    Figure 03_image361
    Figure 03_image363
    Figure 03_image365
    Figure 03_image367
    Figure 03_image369
    Figure 03_image371
    。
  13. 一種藥物組合物，其特徵在於，含有請求項1-12中任一項所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。
  14. 一種利用請求項1-12中任一項所述的化合物，其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，或者請求項13所述的藥物組合物在製備治療/預防ER介導的疾病的藥物中的用途。
  15. 根據請求項14所述的用途，其中ER介導的疾病選自乳腺癌、卵巢癌、子宮癌或宮頸癌。
  16. 一種藥物組合物或藥物製劑，所述的藥物組合物或藥物製劑包含選1-600mg的請求項1-12中任一項所述的化合物或者其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，以及藥學上可接受的輔料和/或載體。
  17. 一種用於治療哺乳動物的疾病的方法，所述方法包括給予受試者治療有效量的請求項1-12中任一項所述的化合物或者其立體異構體、溶劑化物、氘代物或藥學上可接受的鹽，治療有效量較佳1-600mg，所述的疾病較佳乳腺癌、卵巢癌、子宮癌或宮頸癌。
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