TW202308701A - 抗體偶聯藥物的製備方法及應用 - Google Patents

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Abstract

本揭露關於一種抗體偶聯藥物的製備方法及應用。具體關於一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，以及該化合物及相關的抗體偶聯藥物的製備方法和在製備治療癌症的藥物中的用途。

Description

抗體偶聯藥物的製備方法及應用
本揭露關於生物醫藥領域，具體的關於一種抗體偶聯藥物的製備方法及應用。
作為新型的靶向治療藥物，抗體藥物偶聯物(Antibody Drug Conjugate,ADC)藉由適當的載體將藥物靶向輸送到疾患部位。然而，受制於抗體及高活性細胞毒性藥物技術的制約，有限數量的抗體藥物偶聯物獲得批准上市，抗體藥物偶聯物在腫瘤治療領域的應用急需快速發展。
細胞毒物對ADC藥物發揮作用是必不可少的，喜樹鹼類藥物應用前景巨大，上市ADC藥物Trodelvy和Enhertu即為分別採用喜樹鹼類藥物SN38和DX-8951f作為彈頭分子。然而藉由喜樹鹼類藥物最終製備得到的ADC都極大改變了單抗的屬性，穩定性和半衰期都有較大程度衰減。雖然在DESTINY-Breast03臨床研究中，Enhertu確認的客觀緩解率(ORR)達到79.7%，然而根據DS8201-A-J101臨床研究顯示對於HER2低表達乳腺癌，Enhertu確認的客觀緩解率(ORR)為37.0%，治療有效率明顯低於高表達或中表達的乳腺癌。此外，ADC藥物在毒副作用上出現了新的症狀，如藥物Enhertu出現了肺炎和間 質性肺病等副作用。WO 2020233174 A1公開了一類含有纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)-PAB連接子的喜樹鹼類化合物，然而該分子無法與抗體偶聯後獲得質量合格的ADC分子(合格的ADC產品中聚體含量需要小於5%)。因此，本領域迫切需要提供更為合適的基於喜樹鹼類藥物(如依沙替康、貝洛替康等)的抗體偶聯藥物，實現高效、簡單、實用的化學製備與偶聯，並且改善現有抗體偶聯藥物的藥學性質、代謝性質、藥效及安全性等，如提高ADC分子穩定性、提高治療窗口等。
本揭露提供了一種抗體偶聯藥物、其中間體、製備方法及應用。本揭露的抗體偶聯藥物，可以實現細胞毒性藥物在ADC領域的廣泛應用，治療腫瘤疾病。本揭露的主要技術效果在於：提供的新型連接子，可藉由特定的化學方法將疏水性極強的抗腫瘤藥物，如拓撲異構酶抑制劑依沙替康、貝洛替康等與抗體進行偶聯，所獲得的偶聯物具有高親水性和穩定性，相較於傳統的ADC連接子，本揭露提供的連接子在較高載藥量時抗體偶聯物不易產生聚體；相較於同類ADC藥物，本揭露釋放後的毒素分子為拓撲異構酶抑制劑依沙替康、貝洛替康原型分子，藉由測試表明該藥物分子較同類ADC藥物所釋放的藥物衍生物具有更好的生物活性、安全性以及其它藥物相關性質。因此，本揭露可以提高藥物體內半衰期以及藥物在腫瘤組織的濃度，從而提到藥物的抗腫瘤活性和/或提高整體藥物治療窗口。
一方面，本揭露提供了一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中所述化合物包含式(C-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0003-1
其中，Q1包含連接體，
L1包含-L1a-C(=O)-，
其中，L1a選自以下組：視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基、視需要取代的亞(伸)烯基、視需要取代的亞(伸)炔基、視需要取代的亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)脂雜環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基；
L2包含視需要取代的多肽殘基，
L3包含視需要取代的間隔基團，
其中，L2和/或L3包含視需要取代的聚肌胺酸殘基，
T包含藥物單元，
Ab為能夠結合Trop-2的配體，m為1-8的數。
另一方面，本揭露提供了一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
其中，所述化合物包含選自以下組的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0004-2
Figure 111116237-A0202-12-0004-3
Figure 111116237-A0202-12-0004-4
Figure 111116237-A0202-12-0004-5
Figure 111116237-A0202-12-0004-6
Figure 111116237-A0202-12-0005-7
Figure 111116237-A0202-12-0005-8
 和
Figure 111116237-A0202-12-0005-9
 Ab為能夠結合Trop-2的配體，m為1-8的數。
另一方面，本揭露提供了一種醫藥組成物，其含有本揭露任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，以及視需要地藥學上可接受的載體。
另一方面，本揭露提供了含有本揭露任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，和/或本揭露所述的醫藥組成物在製備用於治療和/或預防腫瘤的藥物中的用途。
另一方面，本揭露提供了一種抗體-藥物偶聯物，所述的抗體-藥物偶聯物藉由本揭露的化合物與抗體進行偶聯形成的。
在一種實施方式中，本揭露的偶聯物共價連接有一個或多個藥物組分。
在一種實施方式中，本揭露的抗體和藥物是藉由共價方式(例如，可以藉由分別共價連接於連接子上)進行偶聯。
另一方面，本揭露提供一種抗體-藥物偶聯物的製備方法，藉由該抗體或抗體片斷鉸鏈區的二硫鏈還原生成一對半胱胺酸殘基，並藉由該半胱胺酸殘基中巰基與本揭露中化合物的連接基團，例如馬來醯亞胺基發生取代反應，進而將本揭露的化合物連接於該抗體或抗體片段的半胱胺酸巰基上，獲得抗體-藥物偶聯物，藥物抗體偶聯率DAR(例如本揭露中的m)根據反應條件進行控制，例如常見為2~8之間。
另一方面，本揭露中m表示細胞毒性藥物分子與Ab的莫耳比(又稱DAR，即藥物抗體偶聯比率)，m可為整數或小數，可以理解為是：單個單株抗體分子與細胞毒性藥物偶聯後得到的抗體偶聯藥物中的藥物分子與單株抗體分子的莫耳比的平均值，一般可以採用疏水層析(Hydrophobic-Interaction Chromatography，HIC)、反相高效液相色譜(Reverse phase HPLC,RP-HPLC)、聚丙烯醯胺-SDS凝膠電泳(SDS PAGE，electrophoresis)、液相質譜(liquid chromatograph-mass spectrometer，LC-MS)、紫外/可見光譜法(UV/Vis)等方式測定得到。
另一方面，本揭露提供一種製備本揭露的化合物的方法，其包含以下步驟：
使帶有胺基保護基團N1的胺基酸活性酯與胺基酸接觸，獲得中間體M1；在縮合劑如EEDQ(2-乙氧基-1-乙氧碳醯基-1,2-二氫喹啉)存在下，使該中間體M1與取代/非取代對胺基苄醇接觸，獲得中間體M2；脫除該中間體M2的該N1，獲得中間體M3；使該中間體M3與含有馬亞醯亞胺基團的化合物接觸，獲得中間體M4；使該中間體M4與雙(4-硝基苯基)碳酸酯接觸，獲得中間體M5；使該中間體M5與藥物單元接觸。
在一種實施方式中，該N1包含芴基甲氧基羰基。
在一種實施方式中，當製備該L2被包含聚肌胺酸殘基的結構取代的該化合物時，使包含胺基保護基團N2的中間體與三氟乙酸接觸後，再與乙醯化的多聚肌胺酸接觸。
在一種實施方式中，該N2包含第三丁氧羰基。
另一方面，本揭露提供一種製備本揭露的化合物的方法，其包含以下步驟：在適於在配體和化合物之間形成鍵的條件下，使該配體與本揭露的化合物接觸。
在一種實施方式中，該配體與本揭露的化合物在緩衝液與有機溶劑混合液中接觸。
在一種實施方式中，該配體與本揭露的化合物在約0至約37℃下接觸。
在一種實施方式中，在使該配體與本揭露的化合物接觸之前包含以下步驟：將該配體與還原試劑在緩衝液中反應，得到經還原後的該配體。
在一種實施方式中，在得到經還原後的該配體之後，且在使該配體與本揭露的化合物接觸之前包含以下步驟：去除該還原試劑。
在一種實施方式中，該去除該還原試劑包含將反應產物進行過脫鹽管柱和/或超濾。
在一種實施方式中，該還原試劑選自以下組：三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)、beta-巰基乙醇、beta-巰基乙胺鹽酸鹽和二硫蘇糖醇(DTT)。
在一種實施方式中，該緩衝液選自以下組：磷酸二氫鉀-氫氧化鈉(KH2PO4-NaOH)/氯化鈉(NaCl)/二乙基三胺五乙酸(DTPA)緩衝液、磷酸氫二鈉-檸檬酸/氯化鈉(NaCl)/二乙基三胺五乙酸(DTPA)、硼酸-硼砂/氯化鈉(NaCl)/二乙基三胺五乙酸(DTPA)、組胺酸-氫氧化鈉/氯化鈉(NaCl)/二乙基三胺五乙酸(DTPA)和PBS/二乙基三胺五乙酸(DTPA)。
在一種實施方式中，該有機溶劑選自以下組：乙腈(ACN)、二甲基甲醯胺(DMF)、二甲基乙醯胺(DMA)和二甲基亞碸(DMSO)。
在一種實施方式中，該有機溶劑在該緩衝液與有機溶劑混合液中的體積占比不超過30%。
本揭露發現本揭露中的抗體-藥物偶聯物，與傳統抗體-藥物偶聯物相比，由於依沙替康、貝洛替康類藥物疏水性過大，而聚肌胺酸的引入可以大大增加偶聯物的親水性，從而從整體上使得所獲得抗體-藥物偶聯物更加穩定性，不易聚合。此外，本揭露提供了胺基甲酸酯，且能在酶切後發生快速的1,6-消除從而釋放藥物，具有更好的體外與體內的穩定性與生物活性。基於上述發現，完成了本揭露。
所屬技術領域具有通常知識者能夠從下文的詳細描述中容易地洞察到本揭露的其它方面和優勢。下文的詳細描述中僅顯示和描述了本揭露的示例性實施方式。如所屬技術領域具有通常知識者將認識到的，本揭露的內容使 得所屬技術領域具有通常知識者能夠對所公開的具體實施方式進行改動而不脫離本揭露所涉及發明的精神和範圍。相應地，本揭露的圖式和說明書中的描述僅僅是示例性的，而非為限制性的。
本揭露所涉及的發明的具體特徵如所附申請專利範圍所顯示。藉由參考下文中詳細描述的示例性實施方式和圖式能夠更好地理解本揭露所涉及發明的特點和優勢。對圖式簡要說明如下：
圖1顯示的是本揭露抗體偶聯物1的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖2顯示的是本揭露抗體偶聯物2的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖3顯示的是本揭露抗體偶聯物2的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖4顯示的是本揭露抗體偶聯物3的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖5顯示的是本揭露抗體偶聯物4的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖6顯示的是本揭露抗體偶聯物4的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖7顯示的是本揭露抗體偶聯物5的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖8顯示的是本揭露抗體偶聯物5的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖9顯示的是本揭露抗體偶聯物6的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖10顯示的是本揭露抗體偶聯物6的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖11顯示的是本揭露抗體偶聯物7的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖12顯示的是本揭露抗體偶聯物7的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖13顯示的是本揭露抗體偶聯物8的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖14顯示的是本揭露抗體偶聯物8的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖15顯示的是本揭露抗體偶聯物9的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖16顯示的是本揭露抗體偶聯物9的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖17顯示的是本揭露抗體偶聯物10的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖18顯示的是本揭露抗體偶聯物10的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖19顯示的是本揭露抗體偶聯物11的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖20顯示的是本揭露抗體偶聯物11的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖21顯示的是本揭露抗體偶聯物12的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖22顯示的是本揭露抗體偶聯物12的疏水作用高效液相色譜圖(HIC-HPLC)；
圖23顯示的是本揭露部分抗體偶聯物的加速穩定性實驗濃度變化圖；
圖24顯示的是本揭露部分抗體偶聯物的加速穩定性實驗聚體增加變化圖；
圖25顯示的是本揭露抗體偶聯物13的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖26顯示的是本揭露抗體偶聯物14的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖27顯示的是本揭露抗體偶聯物15的尺寸排阻層析(SEC-HPLC)色譜圖；
圖28顯示的是本揭露部分抗體偶聯物在人肺鱗癌細胞NCI-H2170體內藥效結果對比圖；
圖29顯示的是本揭露部分抗體偶聯物在人肺鱗癌細胞NCI-H2170體內藥效實驗中小鼠體重變化圖。
以下由特定的具體實施例說明本揭露發明的實施方式，熟悉此技術的人士可由本說明書所公開的內容容易地瞭解本揭露發明的其他優點及效果。
術語定義
在本揭露中，術語“配體”通常指能識別和結合目標細胞相關的抗原或受體的大分子化合物。配體的作用可以是將藥物呈遞給與配體結合的目標細胞群，這些配體包括但不限於蛋白類激素、凝集素、生長因子、抗體或其他能與細胞、受體和/或抗原結合的分子。在本揭露中，配體可以表示為Ab，配體抗原藉由配體上的雜原子與連接單元形成連接鍵，可以為抗體或其抗原結合片段，該抗體可以選自嵌合抗體、人源化抗體、全人抗體或鼠源抗體；該抗體可以是單株抗體。例如該抗體可以是，靶向選自以下組的靶點的抗體或其抗原結合片段：HER2。
在本揭露中，術語“烷基”通常是指烷除去氫原子所衍生的殘基。烷基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的。術語“烷基”通常指飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其具有從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去氫原子所衍生的殘基，其可以為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，例 如含有1至12個碳原子，例如含有1至6個碳原子的鏈烷基。烷基的非限制性實例包括但不限於甲基、乙基、丙基、丙基、丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的，例如當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基可以獨立地視需要選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基和側氧基中的一個或多個取代基所取代，例如可以是氫、氕、氘、氚、鹵素、-NO2、-CN、-OH、-SH、-NH2、-C(O)H、-CO2H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH2C(O)H、-S(O)H、-S(O)2H、-C(O)NH2、-SO2NH2、-OC(O)H、-N(H)SO2H或C1-6脂肪族基團。
在本揭露中，術語“亞(伸)烷基”通常指飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其具有2個從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其可以為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，例如，術語“亞甲基”可以是指1個碳原子的基團除去兩個氫原子所衍生的殘基。亞甲基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的；例如含有1至12個碳原子，例如含有1至6個碳原子的亞烷基。亞(伸)烷基的非限制性實例包括但不限於亞甲基(-CH2-)、1,1-亞乙基(-CH(CH3)-)、1,2-伸乙基(-CH2CH2)-、1,1-亞丙基(-CH(CH2CH3)-)、1,2-伸丙基(-CH2CH(CH3)-)、1,3-伸丙基(-CH2CH2CH2-)、1,4-伸丁基(-CH2CH2CH2CH2-)和1,5-伸丁基(-CH2CH2CH2CH2CH2-)等。亞(伸)烷基可以是取代的或非取代的，替代或者非替代的，例如當被取代時，取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基可以獨立地視需要選自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基和側氧基中的一 個或多個取代基所取代，例如可以是氫、氕、氘、氚、鹵素、-NO2、-CN、-OH、-SH、-NH2、-C(O)H、-CO2H、-C(O)C(O)H、-C(O)CH2C(O)H、-S(O)H、-S(O)2H、-C(O)NH2、-SO2NH2、-OC(O)H、-N(H)SO2H或C1-6脂肪族基團。亞甲基或亞烷基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“烯基”通常是指含有一個或多個雙鍵的直鏈或支鏈烴基。烯基的示例性實例包括烯丙基、高烯丙基、乙烯基、巴豆基、丁烯基、戊烯基和己烯基等。具有一個以上雙鍵的C2-6鏈烯基的示例性實例包括丁二烯基、戊二烯基、己二烯基和己三烯基以及它們的支化形式。不飽和鍵(雙鍵)的位置可以是在碳鏈的任何一個位置。烯基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“亞(伸)烯基”通常是指具有從烯烴的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。例如，可以是亞(伸)烯丙基、亞(伸)乙烯基、亞(伸)丁烯基、亞(伸)戊烯基和亞(伸)己烯基等。亞(伸)烯基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“炔基”通常是指不飽和直鏈或支鏈炔基，例如乙炔基、1-丙炔基、炔丙基、丁炔基等。炔基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“亞(伸)炔基”通常是指具有從炔烴的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。例如，可以是亞(伸)乙炔基、亞(伸)丙炔基、亞(伸)炔丙基、亞(伸)丁炔基等。亞(伸)炔基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“芳基”通常是指具有芳環上除去一個氫原子所衍生的殘基。術語“芳環”可以指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)，可以為6至10員，例如苯和萘。該芳環可以稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環 為芳基環。芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以為一個或多個以下基團，其獨立地選自以下組：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、和雜環烷硫基。芳基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“亞(伸)芳基”通常是指具有從芳環的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。例如，可以是亞(伸)苯基和亞(伸)萘基。亞(伸)芳基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“雜芳基”通常是指具有從雜芳環的碳原子上除去一個氫原子所衍生的殘基。術語“雜芳環”指包含1至4個雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中雜原子可以選自以下組：氧、硫和氮。雜芳基可以為5至10員，可以為5員或6員，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、咪唑基、四唑基等。該雜芳基環可以稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中與母體結構連接在一起的環為雜芳基環。雜芳基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，取代基可以為一個或多個以下基團，其獨立地選自以下組：烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環烷基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、和雜環烷硫基。雜芳基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“亞(伸)雜芳基”通常是指具有從雜芳環的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。例如，可以是亞(伸)呋喃基、亞(伸)噻吩基、亞(伸)吡啶基、亞(伸)吡咯基、亞(伸)嘧啶基、亞(伸)吡嗪基、亞(伸)咪唑基、亞(伸)四唑基等。亞(伸)雜芳基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“脂環基”通常是指具有從脂肪環的相同碳原子或多個不同的碳原子上除去氫原子所衍生的殘基。術語“環烷”通常指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴，碳環包含3至20個碳原子，可以包含3至12個碳原子，可以包含3至10個碳原子，可以包含3至8個碳原子。脂環基的非限制性實例包括環丙烷基、環丁烷基、環戊烷基、環戊烯基、環己烷基、環己烯基、環己二烯基、環庚烷基、環庚三烯基、環辛烷基等；多環碳環可以包括螺環、稠環和橋環的碳環。脂環基可以是取代的或非取代的。在本揭露中，術語“碳環基”通常是指具有碳環的碳原子上除去一個氫原子所衍生的殘基。術語“碳環”通常指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴，碳環包含3至20個碳原子，可以包含3至12個碳原子，可以包含3至10個碳原子，可以包含3至8個碳原子。單環碳環的非限制性實例包括環丙烷、環丁烷、環戊烷、環戊烯、環己烷、環己烯、環己二烯、環庚烷、環庚三烯、環辛烷等；多環碳環可以包括螺環、稠環和橋環的碳環。碳環基可以是取代的或非取代的。在某些情形下，脂環和碳環可以相互替代使用。
在本揭露中，術語“部分不飽和的”通常是指環狀結構中環分子間至少含一個雙鍵或三鍵。術語“部分不飽和”涵蓋帶有多處不飽和的環狀結構，但並非意在包括本揭露所定義的芳環或雜芳環。術語"不飽和的"表示部分具有一個或多個不飽和度。
在本揭露中，術語“亞(伸)脂環基”通常是指具有從脂環的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。例如，可以是亞(伸)環丙烷基、亞(伸)環丁烷基、亞(伸)環戊烷基、亞(伸)環戊烯基、亞(伸)環己烷基、亞(伸)環己烯基、亞(伸) 環己二烯基、亞(伸)環庚烷基、亞(伸)環庚三烯基、亞(伸)環辛烷基等；多環碳環可以包括螺環、稠環和橋環的碳環。亞(伸)脂環基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“脂雜環基”通常是指穩定的不具有芳香性的3員-7員單環碳環結構，融合的7員-10員雙環雜環結構或橋聯的6員-10員雙環雜環結構，這些環狀結構即可以是飽和的，也可以是部分飽和的，除碳原子外，這些環狀結構中還含有一個或多個雜原子，其中雜原子可以選自以下組：氧、硫和氮。例如是含有1-4個上述定義的雜原子。當用來表示脂雜環環狀結構上的原子時，術語“氮”可以包括發生過取代反應的氮。例如，脂雜環基可以包含“雜環烷基”，雜環烷基可以指穩定的不具有芳香性的3員-7員單環烷結構，融合的7員-10員雙環雜環結構或橋聯的6員-10員雙環雜環結構，除碳原子外，這些環狀結構中還含有一個或多個雜原子，其中雜原子可以選自以下組：氧、硫和氮。例如是含有1-4個上述定義的雜原子。雜環烷基可以是取代的或非取代的。脂雜環基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“亞脂雜環基”通常是指具有從脂雜環的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基。亞脂雜環基可以是取代的或非取代的。
在本揭露中，術語“視需要”或“視需要地”通常是指隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，“視需要被烷基取代的雜環基團”意味著烷基可以但不必須存在，該說明可以包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。
在本揭露中，術語“取代的”通常是指基團中的一個或多個氫原子，例如為最多5個，例如為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。取代基僅處在它們的可能的化學位置，所屬技術領域具有通常知識者能夠在不 付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。
在本揭露中，如所屬技術領域具有通常知識者可知的，“烷基”、“烯基”、“環烷基”等之類的術語可以在名稱前加一個標識表示在特定情況下基團中存在的原子數，例如，C1-C4烷基，C3-C7環烷氧基，C1-C4烷基羰基胺基等，“C”後所跟下標數字表示在基團中存在的碳原子數。例如，C3烷基是指具有三個碳原子的烷基(例如，正丙基，異丙基)；C1-10中，基團的成員可具有落入1-10範圍內的任何數目的碳原子。
基團中的一個或多個氫原子，例如為最多5個，例如為1~3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。取代基僅處在它們的可能的化學位置，所屬技術領域具有通常知識者能夠在不付出過多努力的情況下確定(藉由實驗或理論)可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。
在本揭露中，術語“化合物”通常指具有兩種或兩種以上不同元素的物質。例如，本揭露的化合物可以是有機化合物，例如本揭露的化合物可以是分子量500以下的化合物，可以是分子量1000以下的化合物，也可以是分子量1000以上的化合物，也可以是10000以上、100000以上的化合物。在本揭露中，化合物還可以是指藉由化學鍵相連的化合物，例如可以是一個或多個分子量1000以下的分子藉由化學鍵與生物大分子相連的化合物，該生物大分子可以是高聚糖、蛋白、核酸、多肽等。例如本揭露的化合物可以包括蛋白質與一個或多個分子量1000以下的分子相連的化合物，可以是包括蛋白質與一個或多個分子 量10000以下的分子相連的化合物，可以是包括蛋白質與一個或多個分子量100000以下的分子相連的化合物。
在本揭露中，術語“包含”通常是指包括明確指定的特徵，但不排除其他要素。術語“以上”、“以下”通常是指包含本數的情況。
在本揭露中，術語“約”通常是指在指定數值以上或以下0.5%-10%的範圍內變動，例如在指定數值以上或以下0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%、5%、5.5%、6%、6.5%、7%、7.5%、8%、8.5%、9%、9.5%、或10%的範圍內變動。
在本揭露中，本揭露的化合物包含化合物的其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、和/或非對映異構體。在本揭露中，術語“非對映異構體”通常是指具有兩個或更多個手性中心並且其分子不是彼此的鏡像的立體異構體。非對映異構體可以具有不同的物理性質，例如、熔點、沸點、波譜性質和反應性。在本揭露中，術語“互變異構體”或“互變異構形式”可互換使用，通常是指可藉由低能壘(low energy barrier)互相轉化的不同能量的結構異構體。例如，質子互變異構體(protontautomer)(也稱為質子移變互變異構體(prototropic tautomer))包括藉由質子遷移進行的互相轉化，諸如酮-烯醇異構化和亞胺-烯胺異構化。價鍵互變異構體(valence tautomer)包括藉由一些成鍵電子的重組進行的互相轉化。在本揭露中，術語“內消旋體”通常是指分子內含有不對稱性的原子，但具有對稱因素而使分子內總旋光度為零。術語"外消旋體"或"外消旋混合物"是指由等莫耳量的兩種對映異構體物質構成的組成物。
在本揭露中，本揭露的化合物的某些原子可能以一種以上的同位素形式出現。例如，氫可能以氕(1H)、氘(2H)和氚(3H)的形式存在，碳可 能以三種不同的同位素(12C、13C和14C)自然存在。可併入本揭露化合物中的同位素示例還包括但不限於15N、18O、17O、18F、32P、33P、129I、131I、123I、124I、125I，或者類似的同位素。因此，相對於這些同位素的自然豐度，本揭露的化合物可富集在一種或多種這些同位素中。如所屬技術領域具有通常知識者所知，此類同位素富集化合物可用於多種用途。例如，用重同位素如氘(2H)替代可能會提供某些治療優勢，這可以是由於更高的代謝穩定性。例如，氘(2H)的自然豐度約為0.015%。因此，自然界中大約每6500個氫原子，就有一個氘原子。因此，本揭露的含氘化合物在一個或多個位置(視情況而定)的氘豐度大於0.015%。除非另有指明，否則本揭露所述的結構還可以包括僅在是否存在一個或多個同位素富集原子方面存在差別的化合物。舉例而言，除了氫原子被氘或氚所取代，或碳原子被碳13或碳14所取代之外，其餘部分均與本揭露結構一致的化合物均在本揭露的範圍之內。
在本揭露中，術語“醫藥組成物”通常是指含有一種或多種本揭露所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物可以是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。常規的醫藥組成物的製備可以見本領域常用技術。
在本揭露中，術語“藥學上可接受的鹽”或“可藥用的鹽”通常是指本揭露化合物或配體-藥物偶聯物的鹽，或本揭露中所述的化合物的鹽，這類鹽用於哺乳動物體內時可以具有安全性和/或有效性，且可以具有應有的生物活性，本揭露抗體-抗體藥物偶聯化合物可以與酸形成鹽，藥學上可接受的鹽的非限制性實例包括：鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、檸檬酸鹽、乙 酸鹽、琥珀酸鹽、抗壞血酸鹽、草酸鹽、硝酸鹽、梨酸鹽、磷酸氫鹽、磷酸二氫鹽、水楊酸鹽、檸檬酸氫鹽、酒石酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、或對甲苯磺酸鹽。
在本揭露中，術語“偶聯物”通常是指本揭露的化合物藉由一個或多個化學反應而製備的化合物，或者藉由諸如橋接(bridge)，間隔物(spacer)，或連接部分等的一個或多個連接結構彼此連接。
在本揭露中，術語“藥學上可接受的載體”通常是指給予治療劑，例如抗體或多肽、基因和其它治療劑的載體。該術語指本身不誘導對接受組成物的個體有害的抗體產生並且可以給予而不產生過度毒性的任何藥物載體。例如，藥學上可接受的載體(carrier)可以與基因工程中用於包含目標基因的核酸載體(vector)相區分。合適的載體可以是大的、代謝緩慢的大分子，例如蛋白質、多糖、聚乳酸、聚乙醇酸、多聚胺基酸、胺基酸共聚物、脂質聚集物和滅活的病毒顆粒。所屬技術領域具有通常知識者熟知這些載體。治療組成物中藥學上可接受的載體可包括液體，例如水、鹽水、甘油和乙醇。這些載體中也可存在輔助物質，例如潤濕劑或乳化劑、pH緩衝物質等。
在本揭露中，術語“Trop2”、“TROP2”通常是指單程跨膜I型細胞膜蛋白。在本揭露中，術語“Trop2”還可涵蓋Trop 2的同源物、變體和同工型，包括剪接同工型。術語“Trop”還包括具有Trop 2同源物、變體和同工型中的一個或多個序列的蛋白，以及該序列的片段，只要是該變體蛋白(包括同工型)。Trop2可以是人Trop2。例如，Uniprot登錄號P09758提供了Trop2和序列的描述。
在本揭露中，術語“HER2”通常是指人表皮生長因子受體2(HER2)。例如，術語“HER2”指來自任何人來源的任何天然HER2。該術語還涵 蓋“全長”和未加工的HER2以及源自細胞中加工的任何形式的HER2(例如成熟蛋白)。該術語還涵蓋HER2的天然發生變體和同等型，例如剪接變體或等位變體。例如，Uniprot登錄號P04626提供了HER2和序列的描述。
在本揭露中，術語“Nectin-4”通常是指黏附分子4。例如，術語“Nectin-4”指來自任何人來源的任何天然Nectin-4。該術語還涵蓋“全長”和未加工的Nectin-4以及源自細胞中加工的任何形式的Nectin-4(例如成熟蛋白)。該術語還涵蓋Nectin-4的天然發生變體和同等型，例如剪接變體或等位變體。例如，Uniprot登錄號Q96NY8提供了Nectin-4和序列的描述。
在本揭露中，術語“嵌合抗體(chimeric antibody)”通常是指鼠源性抗體的可變區與人抗體的恆定區融合而成的抗體，可以減輕鼠源性抗體誘發的免疫應答反應。建立嵌合抗體，可以建立分泌鼠源性特異性單抗的融合瘤，然後從鼠融合瘤細胞中選殖可變區基因，可以根據需要選殖人抗體的恆定區基因，將鼠可變區基因與人恆定區基因連接成嵌合基因後插入表達載體中，可以在真核系統或原核系統中表達嵌合抗體分子。
在本揭露中，術語“人源化抗體(humanized antibody)”，也稱為CDR移植抗體(CDR-grafted antibody)，通常是指將鼠的CDR序列移植到人的抗體可變區框架，即不同類型的人種系抗體框架序列中產生的抗體。可以克服嵌合抗體由於攜帶大量鼠蛋白成分，從而誘導的異源性反應。此類構架序列可以從包括種系抗體基因序列的公共DNA數據庫或公開的參考文獻獲得。如人重鏈和輕鏈可變區基因的種系DNA序列可以在“VBase”人種系序列數據庫。
在本揭露中，術語“全人源抗體”、“全人抗體”或“完全人源抗體”，也稱“全人源單株抗體”，其抗體的可變區和恆定區可以都是人源的，去除免疫原 性和毒副作用。單株抗體的發展經歷了四個階段，分別為：鼠源性單株抗體、嵌合性單株抗體、人源化單株抗體和全人源單株抗體。本揭露所述抗體或配體可以為全人源單株抗體。全人抗體製備的相關技術可以為：人融合瘤技術、EBV轉化B淋巴細胞技術、噬菌體顯示技術(phage display)、轉基因小鼠抗體製備技術(transgenic mouse)和單個B細胞抗體製備技術等。
在本揭露中，術語“CDR”通常是指抗體的可變結構域內主要促成抗原結合的6個高變區之一。該6個CDR的最常用的定義之一由Kabat E.A.等人，Chothia等人和MacCallum等人提供。如本揭露中使用的，CDR的Kabat定義可以應用於輕鏈可變結構域的CDR1、CDR2和CDR3(CDR L1、CDR L2、CDR L3或L1、L2、L3)，以及重鏈可變結構域的CDR1、CDR2和CDR3(CDR H1、CDR H2、CDR H3或H1、H2、H3)。
在本揭露中，術語“能夠與巰基偶聯的基團”通常是指該化合物A具有巰基，該化合物B具有能夠與巰基偶聯的基團，化合物B藉由能夠與巰基偶聯的基團與化合物A的巰基反應，可以以此實現化合物A與化合物B的連接。
在本揭露中，術語“連接體”通常是指一端與一個基團連接而另一端與另一個基團相連的化學結構片段或鍵，也可以連接其他連接體後再與藥物和/或配體相連。該直接或間接連接配體可以是指該基團藉由共價鍵直接連接配體，也可以是藉由連接體連接配體。例如，連接體可以是本揭露所述的Q1所示的結構。例如，可以使用包含酸不穩定接頭結構(例如腙)、蛋白酶敏感(例如肽酶敏感)接頭結構、光不穩定接頭結構、二甲基接頭結構、或含二硫化物接頭結構的化學結構片段或鍵作為連接體。
在本揭露中，術語“連接基團”通常是指具有與另一個基團相連的能力的基團。例如，具有連接基團的化合物，可以藉由該連接基團與另一個基團的偶聯反應，實現該化合物與另一個基團的連接。例如，馬來醯亞胺基團可以作為連接基團。
在本揭露中，術語“藥物單元”通常是指直接或間接綴合抗體或抗原結合片段以形成免疫綴合物的化學部分。例如，“藥物單元”包括但不限於文中描述的抗腫瘤活性的化合物。例如藥物單元包括拓撲異構酶抑制劑。
在本揭露中，術語“抗腫瘤活性的化合物”通常是指具有使腫瘤細胞的增殖速率、存活力或轉移活性的降低的能力的化合物。例如，抗腫瘤活性可以由治療期間出現的異常細胞的生長速率減少或腫瘤尺寸穩定或縮減顯示的，或與在無治療情況下對照相比因治療所致的存活期更長顯示的。抗腫瘤活性可使用公認的體外或體內腫瘤模型評估，例如異種移植模型。
在本發明的部分實施方案中，偶聯物中的生物活性分子為具體有抗腫瘤活性的化合物，具體例如：放射性同位素，例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212或Lu的放射性同位素；金屬配合物，例如金屬鉑配合物(如奧沙利鉑)或金屬金配合物；糖肽類抗生素，例如博來黴素或平陽黴素；拓撲異構酶抑制劑；干擾DNA合成的藥物，例如甲胺蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、吉西他濱、巰嘌呤、噴司他丁、氟達拉濱、克拉屈濱或奈拉濱等；作用於結構蛋白的藥物，例如微管蛋白抑制劑(諸如長春花生物鹼類、長春新鹼、長春鹼、紫杉醇類、美登素類、澳瑞他汀類、微管蛋白(Tubulysin)B或艾瑞布林等)；腫瘤信號通路抑制劑，例如絲胺酸/蘇胺酸激酶抑制劑、酪胺酸 激酶抑制劑、天冬胺酸激酶抑制劑或組胺酸激酶抑制劑等；蛋白酶體抑制劑；表觀遺傳相關靶點抑制劑；腫瘤新生血管生成抑制劑；細胞週期蛋白抑制劑；
在本揭露中，術語“拓撲異構酶抑制劑”通常是指包括拓撲異構酶I抑制劑和拓撲異構酶II抑制劑的化合物或其衍生物。拓撲異構酶I抑制劑的實例包括但不限於喜樹鹼及其類似物；拓撲異構酶II抑制劑(諸如放線菌素D、阿黴素、多柔比星、多卡米星、柔紅黴素、米托蒽醌、鬼臼毒素或依託泊苷等)。拓撲異構酶(topoisomerase)可以是指藉由切斷DNA的一條或兩條鏈中的磷酸二酯鍵，然後重新纏繞和封口來更正DNA連環數的酶。
在本揭露中，術語“喜樹鹼類似物”通常是指與喜樹鹼結構類似或衍生自喜樹鹼的化合物。例如，喜樹鹼的結構可以在CAS登錄號7689-03-4中記載。例如，喜樹鹼類似物可以是指伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)。術語“非喜樹鹼類拓撲異構酶I抑制劑”通常是指吲哚哢唑類、茚并異喹啉酮類、苯并菲啶類以及二苯并萘啶酮類具有拓撲異構酶I抑制活性的雜環分子，主要指Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
在本揭露中，術語與某靶點“表達相關”的疾病通常是指該疾病的發生和/或進展與該靶點的表達水平有關聯。例如，相對於來自組織或器官的正常細胞的表達水平，來自疾病區如患者的特定組織或器官內的細胞中某個靶點的表達水平提高，即高表達的。或者例如，相對於來自組織或器官的正常細胞的表達水平，來自疾病區如患者的特定組織或器官內的細胞中某個靶點的表達水平降低，即低表達的。或者例如，來自疾病區如患者的特定組織或器官內的細胞表達某個靶點，即陽性的。或者例如，來自疾病區如患者的特定組織或器官內的 細胞不表達某個靶點，即陰性的。例如，靶點表達的特徵可以由本領域已知的標準測定確定。
在本揭露中，術語“有效量”通常是指治療劑治療、緩解或預防目標疾病或狀況的量，或是表現出可檢測的治療或預防效果的量。對於某一對象的精確有效量取決於該對象的體型和健康狀況、病症的性質和程度、以及選擇給予的治療劑和/或治療劑的組合。因此，預先指定準確的有效量是沒用的。然而，對於某給定的狀況而言，可以用常規實驗來確定該有效量，臨床醫師是能夠判斷出來的。
除非特別說明，本揭露中，所有出現的化合物均意在包括所有可能的光學異構體，如單一手性的化合物，或各種不同手性化合物的混合物(即外消旋體)。本揭露的所有化合物之中，各手性碳原子可以視需要地為R構型或S構型，或R構型和S構型的混合物。
如本文所用，術語“本揭露化合物”指本揭露的化合物。該術語還包括本揭露化合物的各種晶型形式、藥學上可接受的鹽、水合物或溶劑合物。
當本文中使用商品名時，該商品名意在包括商品名產品製劑、其相應的仿製藥，以及商品名產品的活性藥物組分。
如本文所用，“抗體”以其最廣泛的含義使用並且特別覆蓋單株抗體、多株抗體、二聚體、多聚體、多特異性抗體(例如雙特異性抗體)和抗體片段，只要它們表現出所需的生物活性。抗體可以為鼠、人、人源化、嵌合的抗體或來源於其它物種。抗體為由能夠識別和結合特異性抗原的免疫系統產生的蛋白質。靶抗原一般具有由多種抗體的CDRs識別的大量結合位點，也稱作表位。特異性結合不同表位的各抗體具有不同的結構。因此，一種抗原可以具有一種以上相應 的抗體。抗體包括全-長免疫球蛋白分子或全-長免疫球蛋白分子的免疫活性部分，即含有特異性結合所關注靶標的抗原或其部分的分子，這類靶標包括，但不限於癌細胞或產生與自身免疫性疾病相關的自身免疫抗體的細胞。本揭露描述的免疫球蛋白可以具有免疫球蛋白分子的任意類型(例如IgG、IgE、IgM、IgD和IgA)、類別(例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2)或亞類。免疫球蛋白可以來源於任意的物種。然而，在一個方面中，免疫球蛋白來源於人、鼠或兔。“抗體片段”可以包含全長抗體的一部分，一般為其抗原結合區或可變區。抗體片段的實例包括：Fab、Fab’、F(ab’)2和Fv片段；雙抗體；線性抗體；微抗體(minibody)；Fab表達文庫製備的片段；抗-獨特型(抗-Id)抗體；CDR(互補決定區)；和以免疫特異性方式結合癌細胞抗原、病毒抗原或微生物抗原的上述任意的表位-結合片段；單鏈抗體分子；和由抗體片段形成的多特異性抗體。本揭露中組成抗體藥物偶聯物的抗體可以保持其原有野生狀態時的抗原結合能力。因此，本揭露中的抗體可以，例如可以專一性地，與抗原結合。涉及的抗原包括，例如，腫瘤相關抗原(TAA)，細胞表面受體蛋白和其他細胞表面分子，細胞存活調節因子，細胞增殖調節因子，與組織生長與分化相關的分子(如已知或預知的具有功能性的)，淋巴因子，細胞因子，參與細胞循環調節的分子，參與血管生成的分子，以及與血管生成有關的分子(如已知抗體結合的抗原可以是上述分類中一個或一個子集，而其它的子集則包含其它的具有特殊性質的分子/抗原(與目標抗原相比)。應用在抗體藥物偶聯物中的抗體包括，但不局限於，針對細胞表面受體和腫瘤相關抗原的抗體。這樣的腫瘤相關抗原是業內所熟知的，可以藉由業內熟知的抗體製備方法和信息來製備。這些目標物能夠特異性地表達在一種或多種 癌症細胞表面，而在一種或多種非癌細胞表面表達很少或不表達。通常，相對於非癌細胞表面而言，這樣的腫瘤相關多肽在癌細胞表面可以更加過度表達。
在本揭露中，術語“恩諾單抗”通常是指一種靶向Nectin-4的抗體。例如，恩諾單抗(Enfortumab)可以記載在WO2017042210A1中。在本揭露中，恩諾單抗可以是指任何一種包含恩諾單抗的重鏈可變區CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3的抗體或抗原結合片段。在本揭露中，恩諾單抗可以是指任何一種包含恩諾單抗的重鏈可變區和輕鏈可變區的抗體或抗原結合片段。
在本揭露中，術語“帕妥珠單抗”通常是指一種靶向HER2的抗體。例如，帕妥珠單抗(Pertuzumab)可以記載在WO2014172371A2中。在本揭露中，帕妥珠單抗可以是指任何一種包含帕妥珠單抗的重鏈可變區CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3的抗體或抗原結合片段。在本揭露中，帕妥珠單抗可以是指任何一種包含帕妥珠單抗的重鏈可變區和輕鏈可變區的抗體或抗原結合片段。
在本揭露中，術語“曲妥珠單抗”通常是指一種靶向HER2的抗體。例如，曲妥珠單抗(Trastuzumab)可以記載在US20060275305A1中。在本揭露中，曲妥珠單抗可以是指任何一種包含曲妥珠單抗的重鏈可變區CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3的抗體或抗原結合片段。在本揭露中，曲妥珠單抗可以是指任何一種包含曲妥珠單抗的重鏈可變區和輕鏈可變區的抗體或抗原結合片段。
在本揭露中，術語“賽妥珠單抗”通常是指一種靶向TROP2的抗體。例如，賽妥珠單抗(Sacituzumab，hRS7)可以記載在WO2003074566中。在本揭露中，賽妥珠單抗可以是指任何一種包含賽妥珠單抗的重鏈可變區CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3的抗體或抗原結合片段。在本揭露中，賽妥珠單 抗可以是指任何一種包含賽妥珠單抗的重鏈可變區和輕鏈可變區的抗體或抗原結合片段。
在本揭露中，術語“帕曲妥單抗(Patritumab)”通常是指一種靶向HER3的抗體。例如，帕曲妥單抗可以記載在CN102174105B中。在本揭露中，帕曲妥單抗可以是指任何一種包含帕曲妥單抗的重鏈可變區CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3的抗體或抗原結合片段。在本揭露中，帕曲妥單抗可以是指任何一種包含帕曲妥單抗的重鏈可變區和輕鏈可變區的抗體或抗原結合片段。
在本揭露中，術語“抗體H01L02”通常是指一種靶向CDH6的抗體。例如，單株抗體H01L02可以記載在WO2018212136、US20200171163A1中。例如，H01L02單抗可以是藥物DS6000所採用的單抗。在本揭露中，H01L02單抗可以是指任何一種包含H01L02單抗的重鏈可變區CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3的抗體或抗原結合片段。在本揭露中，H01L02單抗可以是指任何一種包含H01L02單抗的重鏈可變區和輕鏈可變區的抗體或抗原結合片段。
在本揭露中，術語“多肽殘基”通常是指包含一個或多個胺基酸殘基連接而成的殘基。例如，多肽殘基中的一個或多個胺基酸可以是視需要取代的。例如，本揭露的多肽殘基可以選自以下組：苯丙胺酸-賴胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)、纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)、谷胺酸-纈胺酸-丙胺酸(Glu-Val-Ala)、谷胺酸-纈胺酸-瓜胺酸(Glu-Val-Cit)、纈胺酸-賴胺酸(Val-Lys)、丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸(Ala-Ala-Ala)、丙胺酸-丙胺酸-天冬醯胺(Ala-Ala-Asn)和甘胺酸-甘胺酸-苯丙胺酸-甘胺酸(Gly-Gly-Phe-Gly)。
在本揭露中，術語“聚乙二醇基”通常是指包含一個或多個乙二醇殘基連接而成的殘基。例如，聚乙二醇基可以包含-(CH2CH2O)p-，其中p為至少為1的數。例如本揭露中的聚乙二醇基可以是視需要取代的。
在本揭露中，術語“甘醇基”通常是指聚乙二醇基。例如本揭露中的甘醇基可以是視需要取代的。例如，甘醇基之前的數字可以表示甘醇基的乙二醇單元的數量，例如二甘醇基可以是指兩個乙二醇聚合的殘基。
在本揭露中，術語“聚肌胺酸殘基”通常是指包含一個或多個肌胺酸殘基連接而成的殘基。例如，聚肌胺酸殘基可以包含-(COCH2N(CH3))q-，其中q為至少為1的數。例如本揭露中的聚肌胺酸殘基可以是視需要取代的。例如，包含聚肌胺酸殘基的結構可以是
Figure 111116237-A0202-12-0029-10
，其中n2為4至18的數。
在本揭露中，術語“十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳”通常是指一種物質分析表徵技術。例如十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳(SDS-PAGE)可以檢測物質分子量的大小。
在本揭露中，術語“疏水層析”通常是指一種基於的是物質疏水差異的分析技術。
在本揭露中，術語“液相質譜”通常是指一種鑑定物質組分的分析方法。例如液相質譜可以藉由液相色譜-質譜聯用分析待測物質的分子量。
在本揭露中，術語“腫瘤”通常是指任何新的病理性的組織增生。對於本揭露來說，血管生成是腫瘤特徵的一部分。腫瘤可能是良性的，也可能是惡性的。術語“腫瘤”一般用於指良性或惡性的腫瘤，而術語“癌”一般用於指惡性腫瘤，可以是轉移癌，也可以是非轉移癌。可用本揭露的方法診斷的腫瘤選自以 下組：乳腺癌、卵巢癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性淋巴細胞性白血病、間變性大細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、惡性黑色素瘤、鱗狀細胞癌、膠質母細胞瘤、腎細胞癌、胃腸道腫瘤、胰腺癌、前列腺癌、直結腸、胃癌、神經膠質瘤和間皮瘤。用於研究時，可藉由所屬技術領域具有通常知識者熟知的方法從易於獲得的資源中將這些組織分離出來。
[發明詳述]
一方面，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0030-11
其中，Q1可以包含連接體，
L1可以包含-L1a-C(=O)-，
其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基、視需要取代的亞(伸)烯基、視需要取代的亞(伸)炔基、視需要取代的亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)脂雜環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基；
L2可以包含視需要取代的多肽殘基，
L3可以包含視需要取代的間隔基團，例如，本揭露的間隔基團可以是具有自降解能力。例如本揭露的間隔基團可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0031-12
，或視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0031-13
。
其中，L2和/或L3可以包含視需要取代的聚肌胺酸殘基，
T可以包含藥物單元，
Ab可以為能夠結合Trop-2的配體，m可以為1-8的數。
另一方面，本揭露還提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2-M)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0031-14
其中，Q1可以包含連接體，
L1可以包含-L1a-C(=O)-，
其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基、視需要取代的亞(伸)烯基、視需要取代的亞(伸)炔基、視需要取代的亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)脂雜環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基；
L2可以包含視需要取代的多肽殘基，
L3可以包含視需要取代的間隔基團，例如，本揭露的間隔基團可以是具有自降解能力。例如本揭露的間隔基團可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0032-15
，或視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0032-16
。
其中，L2和/或L3可以包含視需要取代的結構單元-X，
T可以包含藥物單元，
Ab可以為能夠結合Trop-2的配體，m可以為1-8的數。
例如，其中，L3選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0032-17
，和視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0032-18
。
例如，其中，L3的苯環可以被視需要取代的結構單元-X取代。例如，該結構單元-X可以選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0032-19
，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該C1-C8烷 基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代。
例如，其中，L3的苯環可以被視需要取代的結構單元-X取代。例如，該結構單元-X可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0033-20
，其中X1選自以下組：C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子，該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代。
例如，其中，結構單元-X為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0033-21
。
例如，本揭露提供一種化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2-M2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0033-22
其中，L可以含視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基和視需要取代的亞(伸)脂環基；R1可以為視需要取代的異丙基或視需要取代的苄基；R2可以為視需要取代的甲基、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0033-23
或視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0034-24
；R3可以為氫或R5；其中，R5可以為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0034-25
，T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，其中，Q1可以包含與巰基偶聯後的連接體。
例如，其中，Q1可以選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0034-26
、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0034-27
、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0034-28
、和視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0034-29
。
例如，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的C1-C7的亞(伸)烷基、視需要取代的二甘醇基至八甘醇基、視需要取代的C3-C6亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基。
例如，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的亞甲基、視需要取代的亞(伸)乙基、視需要取代的亞(伸)丙基、視需要取代的亞(伸)丁基、視需要取代的亞(伸)戊基、視需要取代的二甘醇基、視需要取代的四甘醇基、視需要取代的六甘醇基、視需要取代的八甘醇基和視需要取代的亞(伸)環己基。
例如，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的亞甲基、視需要取代的亞(伸)乙基、視需要取代的亞(伸)丙基、視需要取代的亞(伸)丁基、和視需要取代的亞(伸)戊基。
例如，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的二甘醇基、視需要取代的三甘醇基、視需要取代的四甘醇基、視需要取代的五甘醇基、視需要取代的六甘醇基、視需要取代的七甘醇基、和視需要取代的八甘醇基。
例如，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的亞(伸)環丙基、視需要取代的亞(伸)環丁基和視需要取代的亞(伸)環己基。
例如，其中，L2可以包含視需要取代的選自以下組的胺基酸構成的多肽殘基：苯丙胺酸、異亮胺酸、亮胺酸、色胺酸、纈胺酸、甲硫胺酸、酪胺酸、丙胺酸、蘇胺酸、組胺酸、絲胺酸、穀胺醯胺、精胺酸、賴胺酸、天冬醯胺、谷胺酸、脯胺酸、瓜胺酸、天冬胺酸和甘胺酸。
例如，其中，L2可以包含視需要取代的選自以下組的胺基酸構成的多肽殘基：甘胺酸、苯丙胺酸、纈胺酸、丙胺酸、精胺酸、瓜胺酸、天冬胺酸、天冬醯胺和賴胺酸。
例如，其中，L2可以包含視需要取代的選自以下組的多肽殘基：苯丙胺酸-賴胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)、纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)、谷胺酸-纈胺酸-丙胺酸(Glu-Val-Ala)、谷胺酸-纈胺酸-瓜胺酸(Glu-Val-Cit)、纈胺酸-賴胺酸(Val-Lys)、丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸(Ala-Ala-Ala)、丙胺酸-丙胺酸-天冬醯胺(Ala-Ala-Asn)和甘胺酸-甘胺酸-苯丙胺酸-甘胺酸(Gly-Gly-Phe-Gly)。
例如，其中，L2可以包含視需要取代的選自以下組的多肽殘基：苯丙胺酸-賴胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)、纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)和纈胺酸-賴胺酸(Val-Lys)。
例如，其中，當L2包含賴胺酸殘基時，該賴胺酸殘基可以被包含聚肌胺酸殘基的結構R1取代。
例如，L2包含的任意的H可以被R1取代。
例如，其中，該R1可以為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0036-30
，其中n1為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
例如，其中，n1可以為4至18、8至18、4至12或8至12。例如，其中，n1可以為4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18。
例如，其中，L3選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0036-31
，和視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0036-32
。
例如，其中，L3的苯環可以被包含聚肌胺酸殘基的結構R2取代。
例如，L3的苯環包含的任意的H可以被R2取代。
例如，其中，L3的苯環與視需要取代的聚肌胺酸殘基藉由結構單元-X-連接，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0036-33
，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3為共價鍵或選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該 C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代。
例如，L3的苯環與視需要取代的聚肌胺酸殘基藉由結構單元-X-連接，結構單元-X-選自，但不局限於：
Figure 111116237-A0202-12-0037-34
、
Figure 111116237-A0202-12-0037-35
，其中X1選自以下組：C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子，該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代。
例如，其中，結構單元-X-為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0037-36
，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
Figure 111116237-A0202-12-0037-37
，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
例如，其中，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0037-38
，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3為共價鍵或 選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
Figure 111116237-A0202-12-0038-39
，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
例如，其中，結構單元-X-為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0038-40
，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
Figure 111116237-A0202-12-0038-41
，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
例如，其中，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0038-42
，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3為共價鍵或選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的 直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
Figure 111116237-A0202-12-0039-43
，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
例如，其中，n2可以為4至18、8至18、4至12或8至12。例如，其中，n2可以為4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17或18。
例如，其中，T可以包含具有抗腫瘤活性的化合物。
例如，其中，T可以包含拓撲異構酶抑制劑。
例如，其中，T可以包含喜樹鹼類及非喜樹鹼類拓撲異構酶I抑制劑。
例如，其中，T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，其中，T可以選自以下組的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0039-44
，
Figure 111116237-A0202-12-0039-45
和
Figure 111116237-A0202-12-0039-46
。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0040-48
其中，Q1可以包含與巰基偶聯後的連接體，
L1可以包含-L1a-C(=O)-，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的C1-C7的亞(伸)烷基、視需要取代的二甘醇基至八甘醇基、視需要取代的C3-C6亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基；
L2可以包含視需要取代的選自以下組的胺基酸構成的多肽殘基：甘胺酸、苯丙胺酸、纈胺酸、丙胺酸、精胺酸、瓜胺酸、天冬胺酸、天冬醯胺和賴胺酸，
L3可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0040-49
，
Figure 111116237-A0202-12-0040-50
，
其中，L2可以包含聚肌胺酸殘基，
T可以包含拓撲異構酶抑制劑。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0040-51
其中，Q1可以包含與巰基偶聯後的連接體，
L1可以包含-L1a-C(=O)-，其中，L1a可以選自以下組：視需要取代的C1-C7的亞(伸)烷基、視需要取代的二甘醇基至八甘醇基、視需要取代的C3-C6亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基；
L2可以包含視需要取代的選自以下組的胺基酸構成的多肽殘基：甘胺酸、苯丙胺酸、纈胺酸、丙胺酸、精胺酸、瓜胺酸、天冬胺酸、天冬醯胺和賴胺酸，
L3可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0041-52
，
Figure 111116237-A0202-12-0041-53
，
其中，L3可以包含聚肌胺酸殘基，
T可以包含拓撲異構酶抑制劑。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0041-54
其中，Q1可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0041-55
，
L1可以包含-L1a-C(=O)-，其中，L1a可以包含視需要取代的C1-C7的亞烷基；
L2可以包含選自以下組的結構：苯丙胺酸-賴胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)、纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)和纈胺酸-賴胺酸(Val-Lys)，
L3可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0041-56
，
Figure 111116237-A0202-12-0041-57
，
其中，L2可以包含賴胺酸殘基，且該賴胺酸殘基可以被視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-58
取代，其中n1為4至18的數，
T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0042-59
其中，Q1可以選自以下組：視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-60
、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-61
、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-62
、和視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-63
，
L1可以包含-L1a-C(=O)-，其中，L1a可以包含視需要取代的C1-C7的亞烷基；
L2可以包含選自以下組的結構：苯丙胺酸-賴胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)、纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)和纈胺酸-賴胺酸(Val-Lys)，
L3可以包含視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-64
，
Figure 111116237-A0202-12-0042-65
，
其中，L3可以被視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0042-66
取代，其中n2為4至18的數，
T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，本揭露提供一種化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C2-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0043-67
其中，L可以含視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基和視需要取代的亞(伸)脂環基；R1可以為視需要取代的異丙基或視需要取代的苄基；R2可以為視需要取代的甲基、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0043-68
或視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0043-69
；R3可以為氫或視需要取代的甲基；其中，R2可以被視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0043-70
取代，其中n1為4至18的數，T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C2-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0044-71
其中，L可以含視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基和視需要取代的亞(伸)脂環基；R1可以為視需要取代的異丙基或視需要取代的苄基；R2可以為視需要取代的甲基、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0044-72
或視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0044-73
；R3可以為氫或視需要取代的甲基；其中，R2可以被視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0044-74
取代，其中n2為4至18的數，T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C2-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0044-75
其中，L可以含視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基和視需要取代的亞(伸)脂環基；R1可以為視需要取代的異丙基或視需要取代的苄基；R2可以為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0044-76
；R3可以為氫或視需要取代的甲 基；其中，R4可以為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0045-77
，其中n1為4至18的數，T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，本揭露提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物可以包含式(C2-Trop-2)所示的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0045-78
其中，L可以含視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基和視需要取代的亞(伸)脂環基；R1可以為視需要取代的異丙基或視需要取代的苄基；R2可以為視需要取代的甲基、視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0045-79
或視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0045-80
；R3可以為氫或R5；其中，R5可以為視需要取代的
Figure 111116237-A0202-12-0045-81
，其中n2為4至18的數，T可以包含伊沙替康(Exatecan，CAS登錄號171335-80-1)和/或貝洛替康(Belotecan，CAS登錄號256411-32-2)和/或Genz-644282(CAS登錄號529488-28-6)。
例如，其中該Ab可以包含抗Trop-2抗體或其抗原結合片段。
例如，其中該抗體可以選自以下組：鼠源抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源抗體。
例如，其中該抗體可以包含單株抗體。
例如，其中該抗體可以包含雙特異性抗體。
例如，其中該抗原結合片段可以選自以下組：Fab、Fab'、Fv片段、F(ab')2、F(ab)2、scFv、di-scFv、VHH和dAb。
例如，其中該Ab的重鏈HCDR1、HCDR2和HCDR3和輕鏈LCDR1、LCDR2和LCDR3分別包含抗Trop-2抗體的重鏈HCDR1、HCDR2和HCDR3和輕鏈LCDR1、LCDR2和LCDR3。
例如，其中該Ab的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL分別包含抗Trop-2抗體的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL。
例如，其中該Ab的重鏈和輕鏈分別包含抗Trop-2抗體的重鏈和輕鏈。
例如，其中該Ab可以包含賽妥珠單抗(Sacituzumab，hRS7)。
例如，其中該m可以藉由選自以下組的方法測定：疏水層析、十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳和液相質譜。例如，m作為單個單株抗體分子與細胞毒性藥物偶聯後得到的抗體偶聯藥物中的藥物分子與單株抗體分子的莫耳比的平均值，m可以為1-8的整數或小數，例如，m可以為約1至約2、約1至約3、約1至約4、約1至約5、約1至約6、約1至約7或約1至約8；例如，m可以為約2至約8、約3至約8、約4至約8、約5至約8、約6至約8、約7至約8，或約1、約2、約3、約4、約5、約6、約7或約8。
另一方面，本揭露還提供一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
其中，該化合物包含選自以下組的結構：
Figure 111116237-A0202-12-0047-82
Figure 111116237-A0202-12-0047-83
Figure 111116237-A0202-12-0047-84
Figure 111116237-A0202-12-0047-85
Figure 111116237-A0202-12-0047-86
Figure 111116237-A0202-12-0048-87
Figure 111116237-A0202-12-0048-88
 和
Figure 111116237-A0202-12-0048-89
 Ab為能夠結合Trop-2的配體，m為1-8的數。
本揭露所述配體可以是蛋白類激素、凝集素、生長因子、抗體或其他能與細胞、受體和/或抗原結合的分子。例如，本揭露的配體可以是抗Trop-2抗體或其抗原結合片段。
在本揭露中，該配體包含抗體輕鏈可變區VL中的至少一個CDR。本揭露所述CDR可以是根據Kabat定義的；也可以是根據Chothia定義的，各種方式定義的CDR序列均包含在本揭露的保護範圍之內。
例如，本揭露的抗原結合蛋白可以是包含重鏈可變區的CDR1-3和輕鏈可變區的CDR1-3，其中重鏈可變區的CDR1-3和輕鏈可變區的CDR1-3 可以分別為賽妥珠單抗(Sacituzumab)的重鏈可變區的CDR1-3和輕鏈可變區CDR1-3。例如，本揭露的抗原結合蛋白可以具有結合TROP2的結合能力。
例如，本揭露的抗原結合蛋白可以是包含重鏈可變區和輕鏈可變區，其中重鏈可變區和輕鏈可變區可以分別為賽妥珠單抗(Sacituzumab)的重鏈可變區的和輕鏈可變區。例如，本揭露的抗原結合蛋白可以具有結合TROP2的結合能力。
例如，本揭露的抗原結合蛋白可以是包含重鏈和輕鏈，其中重鏈和輕鏈可以分別為賽妥珠單抗(Sacituzumab)的重鏈的和輕鏈。
例如，賽妥珠單抗(Sacituzumab)的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：1所示，賽妥珠單抗(Sacituzumab)的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：2所示。
作為驗證本揭露化合物顯著的優勢，例如本揭露的配體可以為：例如，賽妥珠單抗(Sacituzumab)的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：1所示，賽妥珠單抗(Sacituzumab)的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：2所示。例如，曲妥珠單抗(Trastuzumab)的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：3所示，曲妥珠單抗(Trastuzumab)的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：4所示。例如，帕妥珠單抗(Pertuzumab)的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：5所示，帕妥珠單抗(Pertuzumab)的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：6所示。例如，恩諾單抗(Enfortumab)的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：7所示，恩諾單抗(Enfortumab)的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：8所示。例如，帕曲妥單抗(Patritumab)的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：9所示，帕曲妥單抗(Patritumab)的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：10所示。例如，抗體H01L02 的重鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：11所示，抗體H01L02的輕鏈胺基酸序列可以如SEQ ID NO：12所示。
本揭露的抗體可以利用該領域廣為周知的技術製備，例如融合瘤方法、重組DNA技術、噬菌體展示技術、合成技術或該等技術的組合、或該領域己知的其它技術。變體可以是指抗體的胺基酸序列突變體，以及天然多肽的共價衍生物，條件是保留了與天然多肽相當的生物活性。胺基酸序列突變體與天然胺基酸序列的差異一般在於天然胺基酸序列中的一個活多個胺基酸被取代或在多肽序列中缺失和/或插入一個或多個胺基酸。缺失突變體包括天然多肽的片段和N端和/或C端截短突變體。通常胺基酸序列突變體與天然序列相比至少具有70%、75%、80%、85%、90%、95%、98%或99%以上的同源性。
由於本揭露提供的抗體-藥物偶聯物可以靶向瞄準特殊的細胞群體，與細胞表面特異蛋白(抗原)結合，從而藉由結合物內吞或藥物滲入使得藥物以活性形式釋放到細胞內，因此，本揭露的抗體-藥物偶聯物可以用於治療目標疾病，本揭露的抗體-藥物偶聯物可以以治療有效量，藉由合適的途徑給予受試者(例如人)。需要治療的受試者可以是有風險，或懷疑患有與特定抗原的活性或表達量有關病症的患者。這樣的患者可以藉由常規體檢來鑑定。
當用本揭露的抗體-藥物偶聯物治療時，可以藉由本領域常規的方法進行遞送。例如，它可以藉由使用脂質體，水凝膠，環糊精，生物可降解的納米膠囊，或生物黏附性微球被引入到細胞中。或者，該核酸或載體可在本地藉由直接注射或藉由使用輸注泵遞送。其它方法可以包括藉由使用綴合物和生物可降解的聚合物的使用各種運輸和載體系統。
一方面，本揭露提供一種醫藥組成物，其可以含有本揭露中任一項所述的化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，以及可以包含視需要地藥學上可接受的載體。
申請所述的醫藥組成物除活性化合物外，可以含有一種或多種輔料，該輔料可以選自以下組的成分：填充劑(稀釋劑)、黏合劑、潤濕劑、崩解劑和賦形劑等。根據給藥方法的不同，組成物可以含有0.1至99重量%的活性化合物。
含活性成分的醫藥組成物可以是適用於口服的形式，例如片劑、糖錠劑、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊，或糖漿劑。可以按照本領域任何已知製備藥用組成物的方法製備口服組成物，該組成物可以含有黏合劑、填充劑、潤滑劑、崩解劑或藥學上可接受的潤濕劑等，該組成物還可以含有一種或多種選自以下組的成分：甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑。
水懸浮液可以含有活性物質和用於混合的適宜製備的水懸浮液的賦形劑。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑，例如一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑。油混懸液可以藉由使活性成分懸浮於植物油中配製而成。油懸浮液可以含有增稠劑。還可以加入上述的甜味劑和矯味劑。
醫藥組成物還可以是用於製備水混懸液的可分散粉末和顆粒提供活性成分，藉由加入水混合分散劑、濕潤劑、懸浮劑或防腐劑中的一種或多種。也可加入其他賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。藉由加入抗氧化劑例如抗壞血酸保存這些組成物。本揭露的醫藥組成物也可以是水包油乳劑的形式。
醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶劑有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相的無菌注射水包油微乳。例如將活性成分溶於大豆油和卵磷脂的混合物中。然後可以將油溶液加入水和甘油的混合物中處理形成微乳。可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，可以按可保持本揭露化合物恆定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恆定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。例如，該裝置可以是靜脈注射泵。
醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述本揭露所述適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在腸胃外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液。或者，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。
可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本揭露化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。此類物質包括可可脂、甘油明膠、氫化植物油、各種分子量的聚乙二醇和聚乙二醇的脂肪酸酯的混合物。
如所屬技術領域具有通常知識者所熟知的，藥物的給藥劑量依賴於多種因素，包括但並非限定於以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行為、患者的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、本揭露所述化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽、和/或化合物或其互變異構體、內消旋體、外 消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其可藥用的鹽的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。
本揭露的醫藥組成物可以含有安全有效量的本揭露的抗體-藥物偶聯物以及藥學上可接受的載體。這類載體可以包括(但並不限於)：鹽水、緩衝液、葡萄糖、水、甘油、乙醇、及其組合。通常藥物製劑應與給藥方式相匹配，本揭露的醫藥組成物可以被製成溶液劑形式，例如用生理鹽水或含有葡萄糖和其他輔劑的水溶液藉由常規方法進行製備。該醫藥組成物可以在無菌條件下製造。活性成分的給藥量可以是治療有效量。
本揭露所述的抗體-藥物偶聯物的有效量可以隨給藥的模式和待治療的疾病的嚴重程度等而變化。有效量的選擇可以由所屬技術領域具有通常知識者根據各種因素來確定(例如藉由臨床試驗)。該因素可以包括但不限於：該雙功能抗體偶聯物的藥物代謝動力學參數例如生物利用率、代謝、半衰期等；患者所要治療的疾病的嚴重程度、患者的體重、患者的免疫狀況、給藥的途徑等。通常，當本揭露的抗體-藥物偶聯物每天以合適的劑量給予，可以得到令人滿意的效果。例如，由治療狀況的迫切要求，可以每天給予若干次分開的劑量，或將劑量按比例地減少。
本揭露化合物可以單獨給藥，或者可以與其他藥學上可接受的治療劑聯合給藥。使用醫藥組成物時，可以是將安全有效量的本揭露化合物適用於需要治療的哺乳動物(如人)，其中施用時劑量可以為藥學上認為的有效給藥劑量，具體劑量還可以考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素。
本揭露提供一種本揭露的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的 鹽、前藥或溶劑合物，和/或本揭露的醫藥組成物在製備可以用於治療和/或預防腫瘤的藥物中的用途。例如，該腫瘤可以選自與以下組靶點表達相關的腫瘤：HER2。例如，該與該靶點表達相關的腫瘤包含該靶點高表達的腫瘤和/或該靶點陽性的腫瘤。例如，該腫瘤包含實體腫瘤和/或血液腫瘤。例如，該腫瘤選自以下組：乳腺癌、卵巢癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性淋巴細胞性白血病、間變性大細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、惡性黑色素瘤、鱗狀細胞癌、膠質母細胞瘤、腎細胞癌、胃腸道腫瘤、胰腺癌、前列腺癌、直結腸、胃癌、神經膠質瘤和間皮瘤。
本揭露提供一種本揭露的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，和/或本揭露的醫藥組成物，其可以用於治療和/或預防腫瘤的藥物中的用途。例如，該腫瘤可以選自與以下組靶點表達相關的腫瘤：HER2。例如，該與該靶點表達相關的腫瘤包含該靶點高表達的腫瘤和/或該靶點陽性的腫瘤。例如，該腫瘤包含實體腫瘤和/或血液腫瘤。例如，該腫瘤選自以下組：乳腺癌、卵巢癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性淋巴細胞性白血病、間變性大細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、惡性黑色素瘤、鱗狀細胞癌、膠質母細胞瘤、腎細胞癌、胃腸道腫瘤、胰腺癌、前列腺癌、直結腸、胃癌、神經膠質瘤和間皮瘤。
本揭露提供一種預防和/或治療腫瘤的方法，可以包括向受試者施用本揭露的化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式，或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，和/或本揭露的醫藥組成物。例如，該腫瘤可以選自與以下組靶點表達相關的腫瘤： HER2。例如，該與該靶點表達相關的腫瘤包含該靶點高表達的腫瘤和/或該靶點陽性的腫瘤。例如，該腫瘤包含實體腫瘤和/或血液腫瘤。例如，該腫瘤選自以下組：乳腺癌、卵巢癌、非霍奇金淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、急性淋巴細胞性白血病、間變性大細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、前列腺癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、惡性黑色素瘤、鱗狀細胞癌、膠質母細胞瘤、腎細胞癌、胃腸道腫瘤、胰腺癌、前列腺癌、直結腸、胃癌、神經膠質瘤和間皮瘤。
不欲被任何理論所限，下文中的實施例僅僅是為了闡釋本揭露的化合物、製備方法和用途等，而不用於限制本揭露發明的範圍。
[實施例]
實施例1 化合物的合成與製備
本揭露所述的原料為市售產品，或者藉由本領域已知的方法製備或根據本文該方法製備。其中，Fmoc是9-芴基甲氧基羰基保護基(9-fluorenylmethyloxycarbonyl)，Boc是第三丁氧基羰基保護基(tert-butoxycarbonyl)，TBDMS/TBS是第三丁基二甲基矽基保護基(tert-butyldimethylsilyl)。
化合物(A-1)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0055-90
合成路線：
Figure 111116237-A0202-12-0056-91
步驟1：中間體1-1的合成
Fmoc-Val-OSu(100g,229mmol)溶解於500毫升四氫呋喃中，分別加入Nε-(第三丁氧基羰基)-L-賴胺酸(59.3g,241mmol)與碳酸氫鈉(20.21g,241mmol)在500毫升的水溶液。反應液室溫攪拌48小時，檢測反應結束。反應液用1N稀鹽酸調節pH至6左右，並加入500毫升乙酸乙酯萃取，分離有機相後再經水和飽和鹽水各洗一次後，無水硫酸鈉乾燥，蒸乾。剩餘物經甲基第三丁基醚再結晶 後得產物1-1(107克，收率82%)為白色固體。LC-MS(ESI,m/z)理論值：567.29，實測值：568.26(M+H)。
步驟2：中間體1-2的合成
將中間體1-1(60g,106mmol)溶解於二氯甲烷與甲醇(v：v=2：1，900毫升)的混合溶劑中。室溫下加入對胺基苄醇(19.52g,159mmol)，後再加入EEDQ(39.2g,159mmol)。反應液室溫攪拌24小時，反應液減壓蒸乾，加入乙醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體1-2(51克，收率72%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：672.35，實測值：673.37(M+H)。
步驟3：中間體1-3的合成
將中間體1-2(50g,74.3mmol)溶解於370毫升DMF中。室溫下加入二乙胺(78ml,743mmol)。反應液室溫攪拌2小時，反應液減壓蒸乾，加入乙酸乙酸、乙醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體1-3(31.5克，收率94%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：450.28，實測值：451.32(M+H)。
步驟4：中間體1-4的合成
將中間體1-3(5g,11.10mmol)溶解於100毫升DMF中，室溫入加入馬來醯亞胺基乙酸琥珀醯亞胺(2.80g,11.10mmol)，反應液室溫攪拌過夜，反應液減壓蒸乾，加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體1-4，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：587.30，實測值：588.31(M+H)。
步驟5：中間體1-5的合成
將中間體1-4(2g,3.40mmol)溶解於40毫升DMF中，室溫下分別加入DIPEA(1.189ml,6.81mmol)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(1.553g,5.10mmol)。氬氣 下室溫攪拌過夜，加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體1-5，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：752.30，實測值：753.31(M+H)。
步驟6：中間體1-6的合成
將中間體1-5(142mg,0.188mmol)溶解於400μL無水DMF中，加入100μL無水吡啶，後再加入依沙替康甲磺酸鹽(購自上海皓元，100mg,0.188mmol)與HOBt(25.4mg,0.188mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，反應液經反相HPLC製備純化得中間體1-6(80mg，收率40%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1048.43，實測值：1045.45(M+H)。
步驟7：化合物(A-1)的合成
將中間體1-6(100mg,0.095mmol)溶解於1mL無水二氯甲烷中，冰浴下加入500μL三氟乙酸後，恢復至室溫攪拌30分鐘，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得終產物化合物(A-1)(70mg，收率77%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1048.43，實測值：1045.45(M+H)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：948.38，實測值：949.37(M+H)。
化合物(A-2)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0058-92
化合物(A-2)的合成與化合物(A-1)的合成步驟相同，只是將其中步驟4中的原料馬來醯亞胺基乙酸琥珀醯亞胺替換為6-(馬來醯亞胺基)己酸琥珀醯亞 胺酯，經過數步反應得產物(A-2)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1004.44，實測值：1005.45(M+H)。
化合物(A-3)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0059-93
將化合物(A-1)(100mg,0.105mmol)溶解於1毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH，97mg,0.126mmol)，HATU(48mg,0.126mmol)和DIPEA(37μL,0.211mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得終產物化合物(A-3)(87mg，收率49%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1700.76，實測值：1701.78(M+H)。
化合物(A-4)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0059-94
將化合物(A-2)(100mg,0.099mmol)溶解於1毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH，92mg,119mmol)，HATU(45mg,119mmol)和DIPEA(35μL,0.199mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得終產物化合物(A-4)(95mg，收率54%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1756.83，實測值：1757.85(M+H)。
化合物(A-5)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0060-95
化合物(A-5)的合成與化合物(A-4)的合成步驟相同，只是將最後一個步驟中的乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH)替換為乙醯化-4聚肌胺酸(Ac-Sar4-COOH)，經過數步反應得產物(A-5)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1330.60，實測值：1331.61(M+H)。
化合物(A-6)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0060-96
化合物(A-6)的合成與化合物(A-4)的合成步驟相同，只是將步驟6中的依沙替康甲磺酸鹽替換為貝洛替康鹽酸鹽(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-6)為白色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1754.87，實測值：1755.88(M+H)。
化合物(A-7)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0060-97
化合物(A-7)的合成與化合物(A-4)的合成步驟相同，只是將步驟1中的Fmoc-Val-OSu替換為Fmoc-Phe-OSu，經過數步反應得產物(A-7)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1804.83，實測值：1805.85(M+H)。
化合物(A-8)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0061-98
化合物(A-8)的合成與化合物(A-7)的合成步驟相同，只是將步驟6中的依沙替康甲磺酸鹽替換為貝洛替康鹽酸鹽(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-8)為白色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1802.87，實測值：1803.86(M+H)。
化合物(A-9)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0061-100
合成路線：
Figure 111116237-A0202-12-0062-101
步驟1：中間體9-1的合成
將中間體9-1A(1.3g,2.69mmol)與9-1B(1.35g,2.69mmol)溶解於二氯甲烷與甲醇(v：v=2：1，90毫升)的混合溶劑中。室溫下加入對EEDQ(800mg,3.23mmol)。反應液室溫攪拌24小時，反應液減壓蒸乾，經管柱層析獲得9-1(1.8g，收率69%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：966.49，實測值：967.50(M+H)。
步驟2：中間體9-2的合成
將中間體9-1(900mg,0.93mmol)溶解於20毫升無水四氫呋喃中，氬氣氛下冰浴冷卻，加入氫氟酸吡啶複合物(1.8g,18.61mmol)，反應液在0度下攪拌2小時，加入水萃滅反應，二氯甲烷萃取，分離出有機層，無水硫酸鈉乾燥，經管柱層析獲得中間體9-2(610mg，收率77%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：852.41，實測值：853.43(M+H)。
步驟3：中間體9-3的合成
將中間體9-2(600mg,0.703mmol)溶解於4毫升無水DMF中，室溫下分別加入DIPEA(0.84ml,1.05mmol)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(321mg,1.05mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，減壓蒸去溶劑，後加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體9-3，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1017.41，實測值：1018.38(M+H)。
步驟4：中間體9-4的合成
將中間體9-3(300mg,0.295mmol)溶解於400μL無水DMF中，加入100μL無水吡啶，後再加入依沙替康甲磺酸鹽(購自上海皓元，157mg,0.295mmol)與HOBt(40mg,0.295mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，反應液經反相HPLC製備 純化得中間體9-4(160mg，收率41%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1313.54，實測值：1314.51(M+H)。
步驟5：中間體9-5的合成
將中間體9-4(150mg,0.114mmol)溶解於1毫升DMF中。室溫下加入二乙胺(120μL,1.14mmol)。反應液室溫攪拌2小時，反應液減壓蒸乾獲得中間體9-5，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1091.48，實測值：1092.51(M+H)。
步驟6：中間體9-6的合成
將化合物9-5(120mg,0.110mmol)溶解於1毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH，102mg,0.132mmol)，HATU(50mg,0.132mmol)和DIPEA(38μL,0.22mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得中間體化合物9-6(105mg，收率52%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1843.86，實測值：1844.84(M+H)。
步驟7：化合物(A-9)的合成
將中間體9-6(100mg,0.054mmol)溶解於1mL無水二氯甲烷中，冰浴下加入500μL三氟乙酸後，恢復至室溫攪拌30分鐘，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得終產物化合物(A-9)(57mg，收率60%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1048.43，實測值：1045.45(M+H)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1743.81，實測值：1744.85(M+H)。
化合物(A-10)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0065-102
化合物(A-10)的合成與化合物(A-9)的合成步驟相同，只是將步驟4中的依沙替康甲磺酸鹽替換為貝洛替康鹽酸鹽(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-10)為白色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1741.85，實測值：1742.83(M+H)。
化合物(A-11)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0065-103
合成路線：
Figure 111116237-A0202-12-0066-104
步驟1：中間體11-1的合成
將中間體11-1A(Mc-Val-Ala-OH，購自上海皓元化學，2.4g,6.29mmol)與11-1B(3.18g,6.29mmol)溶解於二氯甲烷與甲醇(v：v=2：1，90毫升)的混合溶劑中。室溫下加入對EEDQ(1.86g,7.55mmol)。反應液室溫攪拌24小時，反應液 減壓蒸乾，經管柱層析獲得11-1(3.9g，收率71%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：867.46，實測值：868.49(M+H)。
步驟2：中間體11-2的合成
將中間體11-1(2g,2.3mmol)溶解於50毫升無水四氫呋喃中，氬氣氛下冰浴冷卻，加入氫氟酸吡啶複合物(4.6g,46mmol)，反應液在0度下攪拌2小時，加入水萃滅反應，二氯甲烷萃取，分離出有機層，無水硫酸鈉乾燥，經管柱層析獲得中間體11-2(1.1g，收率76%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：629.34，實測值：630.31(M+H)。
步驟3：中間體11-3的合成
將中間體11-2(700mg,1.11mmol)溶解於4毫升無水DMF中，室溫下分別加入DIPEA(0.39ml,2.23mmol)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(406mg,1.33mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，減壓蒸去溶劑，後加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體11-3，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：794.35，實測值：795.41(M+H)。
步驟4：中間體11-4的合成
將中間體11-3(300mg,0.44mmol)溶解於400μL無水DMF中，加入100μL無水吡啶，後再加入依沙替康甲磺酸鹽(購自上海皓元，234mg,0.44mmol)與HOBt(60mg,0.44mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，反應液經反相HPLC製備純化得中間體11-4(230mg，收率48%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1090.48，實測值：1091.53(M+H)。
步驟5：中間體11-5的合成
將中間體11-4(200mg,0.183mmol)溶解於1mL無水二氯甲烷中，冰浴下加入300μL三氟乙酸後，恢復至室溫攪拌30分鐘，減壓除去溶劑得終產物得中間體11-5的三氟乙酸鹽，未經進一步純化直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：990.43，實測值：991.47(M+H)。
步驟6：化合物(A-11)的合成
將化合物11-5(120mg,0.109mmol)溶解於1毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH，84mg,0.109mmol)，HATU(50mg,0.130mmol)和DIPEA(38μL,0.22mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得化合物(A-11)(74mg，收率38%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1742.81，實測值：1743.85(M+H)。
化合物(A-12)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0068-105
化合物(A-12)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟6中的原料化合物Ac-Sar10-COOH替換為Ac-Sar4-COOH，經過數步反應得產物(A-12)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1316.59，實測值：1317.62(M+H)。
化合物(A-13)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0069-106
化合物(A-13)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟1中的原料化合物11-1A替換為Mc-Val-Cit-OH(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-13)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1828.86，實測值：1829.88(M+H)。
化合物(A-14)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0069-107
化合物(A-14)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟1中的原料化合物11-1A(Mc-VA-OH)替換為Mc-GGFG-OH(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-13)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1890.84，實測值：1891.90(M+H)。
化合物(A-15)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0070-108
合成路線：
Figure 111116237-A0202-12-0070-109
步驟1：中間體15-2的合成
將中間體15-1A(2.3g,8.57mmol)與15-1B(3.74g,8.57mmol)溶解於二氯甲烷與甲醇(v：v=2：1，90毫升)的混合溶劑中。室溫下加入對EEDQ(4.24g,17.15mmol)。反應液室溫攪拌24小時，反應液減壓蒸乾，經管柱層析獲得中間體15-2(3.23g,4.70mmol,54.9% yield)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：686.27，實測值：687.21(M+H)。
步驟2：中間體15-3的合成
將中間體15-2(2.3g,3.35mmol)溶解於40毫升無水DMF中，室溫下分別加入DIPEA(1.170ml,6.70mmol)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(1.528g,5.02mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，減壓蒸去溶劑，後加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體15-3(2.1g,2.465mmol，收率73.6%)，直接用於下一步反應。
步驟3：中間體15-4的合成
將中間體15-3(400mg,0.470mmol)溶解於4mL無水DMF中，加入1mL無水吡啶，後再加入依沙替康游離鹼(購自上海皓元化學)(204mg,0.470mmol)與HOBt(63.4mg,0.470mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，反應液蒸乾後，管柱層析純化(DCM：MeOH=30：1)得中間體15-4(244mg,0.213mmol，收率45.3%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1147.41，實測值：1148.48(M+H)。
步驟4：中間體15-5的合成
將中間體15-4(200mg,0.183mmol)溶解於1mL無水二氯甲烷中，冰浴下加入300μL三氟乙酸後，恢復至室溫攪拌30分鐘，減壓除去溶劑得終產物得中間體15-5的三氟乙酸鹽，未經進一步純化直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1047.36，實測值：1048.40(M+H)。
步驟5：化合物A-15的合成
將中間體化合物15-5(150mg,0.131mmol)溶解於1毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH)(101mg,0.131mmol)，DIPEA(114μl,0.654mmol)和HATU(74.6mg,0.196mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得化合物A-15(107mg,0.059mmol，收率45.4%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1799.74，實測值：1800.77(M+H)。
化合物(A-16)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0072-110
化合物(A-16)的合成與化合物(A-15)的合成步驟相同，只是將步驟3中的依沙替康甲磺酸鹽替換為貝洛替康鹽酸鹽(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-16)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1797.78，實測值：1798.81(M+H)。
化合物(A-17)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0072-111
化合物(A-17)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟4中的依沙替康甲磺酸鹽替換為Genz-644282(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-17)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1714.80，實測值：1715.83(M+H)。
化合物(A-18)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0073-112
合成路線：
Figure 111116237-A0202-12-0073-113
步驟1：中間體18-2的合成
將中間體18-1A(購自上海畢得醫藥，4.94g,14.82mmol)與15-1B(依據WO2016038383中的方法合成，6.04g,14.82mmol)溶解於二氯甲烷與甲醇(v：v=2：1，120毫升)的混合溶劑中。室溫下加入對EEDQ(7.33g,29.6mmol)。反應液室溫攪拌24小時，反應液減壓蒸乾，產物經乙醚攪拌過濾後真空乾燥得中間體18-2(6.3g,59% yield)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：726.40，實測值：727.41(M+H)。
步驟2：中間體18-3的合成
將中間體18-2(3.0g,4.13mmol)溶解於50毫升THF中，加入10%Pd-C(800mg)，常壓氫化8小時後，TLC檢測反應完全，過濾除去鈀碳，反應液蒸乾後直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：636.36，實測值：637.34(M+H)。
步驟3：中間體18-4的合成
將中間體化合物18-3(2.6g,4.08mmol)溶解於100毫升無水DMF中，分別加入N-(2-胺基乙基)馬來醯亞胺鹽酸鹽(721mg,4.08mmol)，DIPEA(1.42mL,8.17mmol)和HATU(2.0g,5.31mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經管柱層析純化得化合物18-4(2.2g,71% yield)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：758.40，實測值：759.42(M+H)。
步驟4：中間體18-5的合成
將中間體18-4(1.0g,1.32mmol)溶解於20毫升無水四氫呋喃中，氬氣氛下冰浴冷卻，加入氫氟酸吡啶複合物(2.6g,26.4mmol)，反應液在0度下攪拌2小時，加入水萃滅反應，二氯甲烷萃取，分離出有機層，無水硫酸鈉乾燥，經管 柱層析獲得中間體18-5(570mg，收率67%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：644.32，實測值：645.35(M+H)。
步驟5：中間體18-6的合成
將中間體18-5(500mg,0.776mmol)溶解於10毫升無水DMF中，室溫下分別加入DIPEA(271μl,1.55mmol)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(236mg0.776mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，減壓蒸去溶劑，後加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體18-6(530mg,84% yield)，直接用於下一步反應。
步驟6：中間體18-7的合成
將中間體18-6(400mg,0.494mmol)溶解於4mL無水DMF中，加入1mL無水吡啶，後再加入依沙替康甲磺酸鹽(購自上海皓元，263mg,0.494mmol)與HOBt(66.7mg,0.494mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，反應液經反相HPLC製備純化得中間體18-7(320mg，收率58%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1105.46，實測值：1106.48(M+H)。
步驟7：中間體18-8的合成
將中間體15-4(300mg,0.27mmol)溶解於3mL無水二氯甲烷中，冰浴下加入1mL三氟乙酸後，恢復至室溫攪拌30分鐘，減壓除去溶劑得終產物得中間體18-8的三氟乙酸鹽，未經進一步純化直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1005.40，實測值：1006.41(M+H)。
步驟8：化合物A-18的合成
將中間體化合物15-5(300mg,0.268mmol)溶解於5毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH)(206mg,0.268mmol)，DIPEA(94 μl,0.536mmol)和HATU(122mg,0.321mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得化合物A-18(170mg,36% yield)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1757.78，實測值：1758.82(M+H)。
化合物(A-19)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0076-114
化合物(A-19)的合成與化合物(A-18)的合成步驟相同，只是將步驟3中的N-(2-胺基乙基)馬來醯亞胺鹽酸鹽替換為2-(甲基磺醯基)苯并[d]噻唑-6-胺，經過數步反應得產物(A-19)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1845.73，實測值：1846.75(M+H)。
化合物(A-20)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0076-115
化合物(A-20)的合成與化合物(A-18)的合成步驟相同，只是將步驟3中的N-(2-胺基乙基)馬來醯亞胺鹽酸鹽替換為4-(5-(甲基磺醯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苯胺，經過數步反應得產物(A-20)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1856.76，實測值：1857.80(M+H)。
化合物(A-21)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0077-116
化合物(A-21)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟1中的中間體
Figure 111116237-A0202-12-0077-119
替換為
Figure 111116237-A0202-12-0077-120
，經過數步反應得產物(A-21)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1742.81，實測值：1743.85(M+H)。
化合物(A-22)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0077-117
化合物(A-22)的合成與化合物(A-21)的合成步驟相同，只是將步驟1中的原料化合物Mc-Val-Ala-OH替換為Mc-Val-Cit-OH，經過數步反應得產物(A-22)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1828.86，實測值：1829.87(M+H)。
化合物(A-23)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0077-118
化合物(A-23)的合成與化合物(A-21)的合成步驟相同，只是將步驟1中的原料化合物Mc-Val-Ala-OH替換為Mc-GGFG-OH，經過數步反應得產物(A-23)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1890.84，實測值：1891.86(M+H)。
化合物(A-28)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0078-121
合成路線：
Figure 111116237-A0202-12-0078-123
步驟1：中間體28-1的合成
稱取6-亞硝基苯并呋喃-1(3H)-酮(10g,55.8mmol)與(2-胺基乙基)胺甲酸第三丁酯(9.84g,61.4mmol)在100毫升圓底燒瓶中，加熱至90度攪拌過夜。加入甲基第三丁基醚(MTBE)攪拌，過濾，固體用MTBE洗滌多次後，真空乾燥獲得中間體28-1(13.6g，收率72%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：339.14，實測值：340.17(M+H)。
步驟2：中間體28-2的合成
將中間體28-1(10g,29.5mmol)與咪唑(8.02g,118mmol)溶解於300毫升二氯甲烷中，冰浴冷卻下加入TBS-Cl(6.66g,44.2mmol)，室溫下攪拌過夜。反應液加入水淬滅反應，分離有機相後再經水和飽和鹽水各洗一次後，無水硫酸鈉乾燥，蒸乾。粗品管柱層析純化得中間體28-2(12.3g，收率92%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：453.23，實測值：454.33(M+H)。
步驟3：中間體28-3的合成
將中間體28-2(6.0g,13.23mmol)溶解於THF：EtOH(1：1)(500mL)，氬氣下加入1克10% Pd-C，再加入甲酸銨(8.34g,132mmol)。室溫攪拌過夜，過濾除去鈀碳，蒸乾濾液，加入二氯甲烷與水，分離有機相後再經水和飽和鹽水各洗一次後，無水硫酸鈉乾燥，蒸乾，得中間體28-3(5.6g,100%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：423.26，實測值：424.31(M+H)。
步驟4：中間體28-4的合成
將中間體28-3(5.5g,12.98mmol)與Fmoc-Val-Alal-OH(5.33g,12.98mmol)溶解於二氯甲烷與甲醇(v：v=2：1，300毫升)的混合溶劑中。室溫下加入EEDQ(4.82g,19.47mmol)。反應液室溫攪拌24小時，反應液減壓蒸乾，加入乙醚攪拌 至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體28-4(6.4克，收率60%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：815.43，實測值：816.48(M+H)。
步驟5：中間體28-5的合成
將中間體28-4(6.0g,7.35mmol)溶解於100毫升DMF中。室溫下加入二乙胺(7.68ml,73.5mmol)。反應液室溫攪拌2小時，反應液減壓蒸乾，加入乙酸乙酸、乙醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體28-5(4.3克，收率98%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：593.36，實測值：594.40(M+H)。
步驟6：中間體28-6的合成
將中間體28-5(4.0g,6.74mmol)溶解於100毫升DMF中，室溫入加入馬來醯亞胺基乙酸琥珀醯亞胺(2.07g,6.74mmol)，反應液室溫攪拌過夜，反應液減壓蒸乾，加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體28-6，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：786.43，實測值：787.45(M+H)。
步驟7：中間體28-7的合成
將中間體28-6(3.5g,4.45mmol)溶解於100毫升無水四氫呋喃中，氬氣氛下冰浴冷卻，加入氫氟酸吡啶複合物(8.8g,89mmol)，反應液在0度下攪拌2小時，加入水萃滅反應，二氯甲烷萃取，分離出有機層，無水硫酸鈉乾燥，經管柱層析獲得中間體28-7(1.6g，收率53%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：672.35，實測值：673.37(M+H)。
步驟8：中間體28-8的合成
將中間體28-7(1.0g,1.49mmol)溶解於20毫升無水DMF中，室溫下分別加入DIPEA(0.519ml,2.97mmol)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯(678mg,2.23mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，減壓蒸去溶劑，後加入甲基第三丁基醚攪拌至固體析出，過濾，固體用乙醚淋洗數次，固體乾燥後獲得中間體28-8，直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：837.35，實測值：838.36(M+H)。
步驟9：中間體28-9的合成
將中間體28-8(300mg,0.358mmol)溶解於4mL無水DMF中，加入1mL無水吡啶，後再加入依沙替康甲磺酸鹽(購自上海皓元，190mg,0.358mmol)與HOBt(55mg,0.358mmol)。氬氣下室溫攪拌過夜，反應液經反相HPLC製備純化得中間體28-9(234mg，收率58%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1133.49，實測值：1134.52(M+H)。
步驟10：中間體28-10的合成
將中間體28-10(200mg,0.176mmol)溶解於1mL無水二氯甲烷中，冰浴下加入300μL三氟乙酸後，恢復至室溫攪拌30分鐘，減壓除去溶劑得終產物得中間體28-10的三氟乙酸鹽，未經進一步純化直接用於下一步反應。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1033.43，實測值：1034.45(M+H)。
步驟11：化合物A28的合成
將步驟10中所獲得的化合物28-10溶解於1毫升無水DMF中，分別加入乙醯化-10聚肌胺酸(Ac-Sar10-COOH，136mg,0.176mmol)，HATU(87mg,0.229mmol)和DIPEA(154μL,0.88mmol)後，室溫攪拌過夜，減壓除去溶劑得終產物，後經反相HPLC製備純化得化合物(A-11)(135mg，收率43%)。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1785.82，實測值：1786.85(M+H)。
化合物(A-29)的合成
Figure 111116237-A0202-12-0082-124
化合物(A-29)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟4中的依沙替康甲磺酸鹽替換為貝洛替康鹽酸鹽(購自上海皓元化學)，經過數步反應得產物(A-29)為白色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1740.85，實測值：1741.82(M+H)。
A-11分子對應的PEG衍生物AP-1的合成
Figure 111116237-A0202-12-0082-125
化合物(AP-1)的合成與化合物(A-11)的合成步驟相同，只是將步驟1中的原料化合物Ac-Sar10-COOH替換為m-PEG8-acid(CAS 1093647-41-6)，經過數步反應得產物(AP-1)為米色無定形粉末。LC-MS(ESI,m/z)理論值：1384.64，實測值：1385.66(M+H)。
對照品MC-Val-Cit-PABC-DX8951的合成
參照文獻WO2020233174A1方法，Mc-Val-Cit-OH(購自上海皓元化學)與雙(4-硝基苯基)碳酸酯反應，獲得活化硝基酯後並進一步與依沙替康甲磺酸鹽(購自上海皓元)反應獲得對照品化合物MC-Val-Cit-PAB-DX8951。
實施例2 ADC製備的通用方法
將抗體或抗原結合片段，例如將靶向HER2的Trastuzumab原液(重鏈序列如SEQ ID NO：3所示，輕鏈序列如SEQ ID NO：4所示)和/或例如靶向Trop-2的hRS7單抗(Sacituzumab)，用50mM磷酸二氫鉀-氫氧化鈉(KH2PO4-NaOH)/150mM氯化鈉(NaCl)/1mM二乙基三胺五乙酸(DTPA)，pH 7反應緩衝液稀釋至2mg/mL，加入6.0倍過量莫耳比的三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)，反應液於35℃攪動2.5小時。
將上述反應液冷至8℃，未經純化加入適量的二甲基乙醯胺(DMA)，再分別加入6-15倍過量莫耳比的對照品藥物分子或藥物連接子綴合物A1~A29(10mg/ml預先溶在DMA中)，保證反應體系中DMA的體積占比不超過20%，於37℃攪動3小時進行偶聯。
採用脫鹽管柱將偶聯反應混合物用pH 6.0的組胺酸-醋酸/蔗糖凝膠過濾純化，根據UV280紫外吸收值收集出峰樣品。然後經由0.15微米孔徑的過濾裝置除菌，-60℃保存。
抗體偶聯物1(對照ADC1)的製備
參照上述通用方法將10倍過量的對照品MC-Val-Cit-PAB-DX8951與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物1，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖1，聚體1的比例約為26%，聚體2的比例約為20%。藉由UV分析獲得載藥量(DAR)約為4~5。
抗體偶聯物2(對照ADC2)的製備
參照上述通用方法將12倍過量的對照品Deruxtecan(購自上海皓元化學)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物2，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖2，聚體的比例約為2%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖3。
抗體偶聯物3的製備
參照上述通用方法將8倍過量化合物(A-2)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物3，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖4。聚體1的比例約為6.8%，聚體2的比例約為7.7%。藉由UV分析獲得載藥量(DAR)約為6~7。
抗體偶聯物4的製備
參照上述通用方法將將12倍過量化合物(A-4)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得載藥量(DAR)約為7~8的抗體偶聯物4，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖5。聚體1的比例約為0.3%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖6。
抗體偶聯物5的製備
參照上述通用方法將12倍過量化合物(A-11)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物5，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖7，抗體偶聯物5單體的純度為99.41%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖8。
抗體偶聯物6的製備
參照上述通用方法將12倍過量化合物(A-14)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物6，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖9，抗體偶聯物6單體的純度為99.60%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖10。
抗體偶聯物7的製備
參照上述通用方法將15倍過量化合物(A-24)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物7，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖11，抗體偶聯物7單體的純度為96.36%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖12。
抗體偶聯物8(對照ADC3)的製備
參照上述通用方法將12倍過量的化合物AP-1與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物8，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖13，抗體偶聯物7單體的純度為97.92%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖14。
抗體偶聯物9的製備
參照上述通用方法將12倍過量化合物(A-11)與還原後的Patritumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物9，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖15，抗體偶聯物9單體的純度為97.92%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖16。
抗體偶聯物10的製備
參照上述通用方法將12倍過量化合物(A-11)與還原後的H01L02單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物10，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖17，抗體偶聯物10單體的純度為99.10%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖18。
抗體偶聯物11的製備
參照上述通用方法將12倍過量化合物(A-28)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物11，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖19，抗體偶聯物11單體的純度為99.59%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖20。
抗體偶聯物12的製備
參照上述通用方法將12倍過量化合物(A-29)與還原後的Trastuzumab單抗偶聯獲得對應的抗體偶聯物12，藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖21，抗體偶聯物12單體的純度為99.67%。藉由疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析獲得載藥量(DAR)約為7-8，分析圖譜見圖22。
抗體偶聯物13的製備
將靶向Trop-2的hRS7單抗原液透析換液至50mM磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉(NaH2PO4-Na2HPO4)/50mM氯化鈉(NaCl)，pH7.0緩衝液中。測量溶液中單抗濃度後用上述緩衝液稀釋抗體至5mg/mL。將反應管置於冰浴中冷卻降溫10分鐘。加入2.5倍莫耳比的三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)，反應液於4℃攪拌過夜。在上述未純化的反應液中繼續加入適量的二甲基乙醯胺(DMA)，再分別加 入6.0倍過量莫耳比的對照品藥物分子或藥物連接子綴合物A-11(10mM預先溶在DMA中)，保證反應體系中DMA的體積占比不超過10%，於4℃攪動2小時進行偶聯。偶聯結束後，向反應液中加入4.0倍莫耳比的半胱胺酸(Cysteine)小分子消耗過量的藥物連接子綴合物A-11，反應於4℃攪動30分鐘進行淬滅。採用脫鹽管柱將偶聯反應混合物用pH 5.5的組胺酸-醋酸/氯化鈉過濾純化，收集濾出樣品。向樣品中加入十分之一體積的活性炭-組胺酸-醋酸/氯化鈉的懸濁液(300mg/mL)，室溫攪動2小時充分吸收游離藥物小分子。然後經由0.22微米孔徑的過濾裝置除菌，-80℃保存。藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖25，抗體偶聯物13單體的純度為98.95%。
抗體-藥物偶聯物中的偶聯藥物濃度可以藉由測量抗體-藥物偶聯物水溶液在280nm和370nm兩種波長下的紫外吸光度來計算，然後進行如下計算。
在任何給定波長處的總吸光度等於系統中所有吸收光的化學物質的吸光度之和(吸光可加和性)。因此，基於抗體與藥物偶聯前後抗體與藥物的莫耳吸收係數不發生變化的假設，抗體-藥物偶聯物中抗體濃度與藥物濃度由下式表示。
A280=AD,280+AA,280=εD,280CD+εA,280CA (1)
A370=AD,370+AA,370=εD,370CD+εA,370CA (2)
其中，A280代表抗體-藥物偶聯物溶液在280nm下的吸光度，A370代表抗體-藥物偶聯物溶液在370nm下的吸光度。AD,280代表藥物連接子綴合物在280nm下的吸光度，AD,370代表藥物連接子綴合物在370nm下的吸光度。AA,280代表抗體在280nm下的吸光度，AA,370代表抗體在370nm下的吸光度。 εD,280代表藥物連接子綴合物在280nm下的莫耳吸收係數，εD,370代表藥物連接子綴合物在370nm下的莫耳吸收係數，εA,280代表抗體在280nm下的莫耳吸收係數，εA,370代表抗體在370nm下的莫耳吸收係數。CD代表抗體-藥物偶聯物溶液中藥物連接子綴合物的濃度，CA代表抗體-藥物偶聯物溶液中抗體的濃度。
εA,280可以藉由已知的計算方法從抗體的胺基酸序列中估計(Protein Science,1995,vol.4,2411-2423)，εA,370一般為零。藉由藥物連接子綴合物在一定莫耳濃度下溶液的吸光度，根據Lambert-Beer定律，得到εD,280和εD,370。藉由酶標儀或紫外分光光度計測出A280和A370的數值，並將上述4個莫耳吸收係數的值帶入聯立方程(1)和(2)中，可計算出CA和CD的值。則每個抗體分子中偶聯藥物分子的平均數目DAR=CD/CA。化合物A-11的紫外吸光係數為εD,280=6480，εD,370=16483，並用於本例中藥物抗體偶聯比的計算，抗體偶聯物13的DAR值約為4.0。
抗體偶聯物14的製備
將靶向Trop-2的hRS7單抗原液透析換液至50mM磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉(NaH2PO4-Na2HPO4)/50mM氯化鈉(NaCl)，pH7.0緩衝液中。測量溶液中單抗濃度後用上述緩衝液稀釋抗體至5mg/mL。將反應管置於冰浴中冷卻降溫10分鐘。加入2.5倍莫耳比的三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)，反應液於4℃攪拌過夜。在上述未純化的反應液中繼續加入適量的二甲基乙醯胺(DMA)，再分別加入6.0倍過量莫耳比的對照品藥物分子或藥物連接子綴合物A-14(10mM預先溶在DMA中)，保證反應體系中DMA的體積占比不超過10%，於4℃攪動2小時進行偶聯。偶聯結束後，向反應液中加入4.0倍莫耳比的半胱胺酸(Cysteine)小分子消耗過量的藥物連接子綴合物A-14，反應於4℃攪動30分鐘進行淬滅。 採用脫鹽管柱將偶聯反應混合物用pH 5.5的組胺酸-醋酸/氯化鈉過濾純化，收集濾出樣品。向樣品中加入十分之一體積的活性炭-組胺酸-醋酸/氯化鈉的懸濁液(300mg/mL)，室溫攪動2小時充分吸收游離藥物小分子。然後經由0.22微米孔徑的過濾裝置除菌，-80℃保存。藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖26，抗體偶聯物14單體的純度為98.20%。化合物A-14的紫外吸光係數為εD,280=5932，εD,370=14997，並用於本例中藥物抗體偶聯比的計算，抗體偶聯物14的DAR值約為4.2。
抗體偶聯物15的製備
將靶向Trop-2的hRS7單抗原液透析換液至50mM磷酸二氫鈉-磷酸氫二鈉(NaH2PO4-Na2HPO4)/50mM氯化鈉(NaCl)，pH7.0緩衝液中。測量溶液中單抗濃度後用上述緩衝液稀釋抗體至5mg/mL。將反應管置於冰浴中冷卻降溫10分鐘。加入2.5倍莫耳比的三(2-羧乙基)膦鹽酸鹽(TCEP)，反應液於4℃攪拌過夜。在上述未純化的反應液中繼續加入適量的二甲基乙醯胺(DMA)，再分別加入6.0倍過量莫耳比的對照品藥物分子或藥物連接子綴合物A-24(10mM預先溶在DMA中)，保證反應體系中DMA的體積占比不超過10%，於4℃攪動2小時進行偶聯。偶聯結束後，向反應液中加入4.0倍莫耳比的半胱胺酸(Cysteine)小分子消耗過量的藥物連接子綴合物A-24，反應於4℃攪動30分鐘進行淬滅。採用脫鹽管柱將偶聯反應混合物用pH 5.5的組胺酸-醋酸/氯化鈉過濾純化，收集濾出樣品。向樣品中加入十分之一體積的活性炭-組胺酸-醋酸/氯化鈉的懸濁液(300mg/mL)，室溫攪動2小時充分吸收游離藥物小分子。然後經由0.22微米孔徑的過濾裝置除菌，-80℃保存。藉由尺寸排阻層析(SEC-HPLC)分析聚合體的含量，分析圖譜見圖27，抗體偶聯物15單體的純度為96.36%。化合物A-24 的紫外吸光係數為εD,280=4723，εD,370=12467，並用於本例中藥物抗體偶聯比的計算，抗體偶聯物15的DAR值約為4.0。
本揭露的化合物以及其製備的ADC對比對照分子製備的ADC分子在更高載藥量的情況下單體純度更高，提示該類ADC分子具有更佳的穩定性。此外，疏水作用高效液相色譜(HIC-HPLC)分析結果顯示該本揭露的ADC分子較對照分子有更低的保留時間，與祼抗更接近，提示該類ADC分子具有更佳的親水性，在體內可能具有更長的半衰期與更強的體內藥效。
實施例3 抗體偶聯物穩定性實驗測試
基於喜樹鹼類拓撲異構酶抑制劑的ADC藥物如Sacituzumab govitecan (Trodelvy)與Trastuzumab Deruxtecan(Enhertu)通常情況下具有較高的藥物抗體荷載比(DAR)，由於喜樹鹼類分子具有芳香稠環類結構，具有較強的疏水性性，具得該類ADC分子的穩定性必然受到一定影響。本發明所製備的ADC在特定位置引入了聚肌胺酸肽鏈，具有更好的“屏障效應”，可能具有較好的穩定性，我們設計了抗體穩定性加速試驗來驗證這一假設。
比較的分子包括：
1．曲妥珠單抗
2．抗體偶聯物2
3．抗體偶聯物5
4．抗體偶聯物6
5．抗體偶聯物7
5．抗體偶聯物8
我們將待測分子樣品用製劑緩衝液(20mM Histidine-acetic acid,150mM NaCl,pH 5.5)稀釋至濃度為5毫克/毫升，取50μL直接進行測試或放置於55℃水浴鍋中分別孵育1小時、2小時、5小時、24小時、48小時與72小時之後再進行測試(穩定性加速實驗)。分別藉由UV法檢測樣品濃度變化，以及在安捷倫1260 Infinity II生物惰性液相色譜系統上採用TSK-GEL SWXL3000分子排阻色譜管柱對樣品中的正常結構ADC分子(主峰)、聚合分子的含量進行定量分析。
HPLC的流動相為200mM磷酸鹽緩衝液(pH 7.0)+150mM KCl+15% IPA，管柱溫25℃，進樣體積為7μL，流速為0.75毫升/分鐘，UV檢測波長280nm和370nm。
樣品濃度變化統計結果如圖23所示，我們發現曲妥珠單抗與其對應的抗體偶聯藥物5、抗體偶聯藥物6均具有較好的熱穩定性，0-72小時過程中濃度變化差異較小，而抗體偶聯藥物2、抗體偶聯藥物7與抗體偶聯藥物8的樣品在24小時後出現ADC濃度快速下降並發生沉澱現象，從而導致樣品濃度快速下降。
進一步藉由分子排阻色譜對上述加速穩定性實驗樣品中的聚合分子增加比例變化結果進行分析，統計結果如圖24所示，與樣品濃度變化趨勢一致，樣品穩定性從高到低排序為曲妥珠單抗
Figure 111116237-A0202-12-0091-214
抗體偶聯物5>抗體偶聯物6>抗體偶聯物7>抗體偶聯物8
Figure 111116237-A0202-12-0091-215
抗體偶聯物2。
上述結果驗證了本發明特定位置的親水性聚肌胺酸肽鏈具有“屏障效應”為抗體藥物偶聯物分子帶來了“意想不到”的穩定性提高的效果。
實施例4 體外細胞毒活性測試
選擇人肺鱗癌細胞NCI-H2170與LK-2，人乳腺癌細胞MDA-MB-231作為本次實驗體外活性檢測用細胞株，藉由流式細胞技術(FACS)測定上述人腫瘤細胞表面TROP2抗原表達量情況(藉由rMFI表示)，同時觀察抗體偶聯物13、DS-1062a(對照藥物，參照US11173213B2中描述方法進行製備)、hIgG-deruxtecan偶聯物、hIgG-A-11偶聯物對細胞殺傷的量效情況。抗體偶聯藥物加樣後終濃度設定500nM為起始濃度，500~0.1nM設計系列9個濃度(5倍比稀釋)，觀察120小時的殺傷(或抑制)變化，化學發光染色(Luminescent Cell Viability Assay)，讀取熒光數據後計算IC50。
如表1所示，抗體偶聯物13、DS-1062a(對照藥物)均能明顯抑制腫瘤細胞增殖，顯著強於陰性對陽藥物IgG-deruxtecan偶聯物、IgG A-1偶聯物，本發明的抗體偶聯物13明顯優於臨床藥物DS-1062a。
表1
Figure 111116237-A0202-12-0092-126
綜合以上活性測試結果看，本揭露的化合物製備得的ADC均表現良好的體外抗腫瘤活性，特別對於相關抗原低表達的腫瘤細胞本揭露的抗體偶聯物優勢更為明顯。
實施例5 體內抗腫瘤功效測定
可以在體內測量本發明的組合的功效，即在齧齒類動物中植入癌細胞的同種異體移植物或異種移植物，並用該組合處理腫瘤。將受試小鼠用藥物或對照處 理，並監測數週或更長時間以測量到達腫瘤倍增的時間、對數細胞殺傷和腫瘤抑制。
體內抗腫瘤實驗
將作為人肺鱗癌細胞NCI-H2170(ATCC)懸浮於生理鹽水，將4×107個細胞向雌性裸鼠的右體側部皮下移植，在第6天隨機實施分組。將分組日作為第0天，在第0天，分別以5mg/kg的用量向尾靜脈內給予抗體偶聯物13，DS-1062a(陽性對照藥物)、hIgG-A-11偶聯物作為陰性對照組。
結果示於圖28，對於人肺鱗癌細胞NCI-H2170，給予5mg/kg的DS-1062a、抗體偶聯物13均顯示出抗腫瘤活性，5mg/kg單次給藥劑量下，抗體偶聯物13的抑瘤活性顯著強於對照藥物DS-1062a。此外從小鼠體重變化趨勢來看(圖29)，提示抗體偶聯物13安全性良好。
從活性測試結果看，本揭露的化合物製備得的ADC均表現出一定的體內抗腫瘤活性，與對照樣品相比可以顯示出顯著更強的抗腫瘤活性。荷瘤小鼠對以上藥物均能很好耐受，沒有體重減輕等症狀發生。
前述詳細說明是以解釋和舉例的方式提供的，並非要限制所附申請專利範圍的範圍。目前本揭露所列舉的實施方式的多種變化對所屬技術領域具有通常知識者來說是顯而易見的，且保留在所附的申請專利範圍和其等同方案的範圍內。
<110> 大陸商上海匯連生物醫藥有限公司(Shanghai Huilian Bio-Pharm Co.,Ltd)
<120> 抗體偶聯藥物的製備方法及應用
<130> 0223-PA-004TW
<160> 12
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 賽妥珠單抗(Sacituzumab)重鏈
<400> 1
Figure 111116237-A0202-12-0094-127
Figure 111116237-A0202-12-0095-128
<210> 2
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 賽妥珠單抗(Sacituzumab)輕鏈
<400> 2
Figure 111116237-A0202-12-0096-129
<210> 3
<211> 449
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 曲妥珠單抗(Trastuzumab)重鏈
<400> 3
Figure 111116237-A0202-12-0097-130
Figure 111116237-A0202-12-0098-131
<210> 4
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 曲妥珠單抗(Trastuzumab)輕鏈
<400> 4
Figure 111116237-A0202-12-0098-132
Figure 111116237-A0202-12-0099-133
<210> 5
<211> 448
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 帕妥珠單抗(Pertuzumab)重鏈
<400> 5
Figure 111116237-A0202-12-0099-134
Figure 111116237-A0202-12-0100-135
Figure 111116237-A0202-12-0101-136
<210> 6
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 帕妥珠單抗(Pertuzumab)輕鏈
<400> 6
Figure 111116237-A0202-12-0101-137
Figure 111116237-A0202-12-0102-138
<210> 7
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 恩諾單抗(Enfortumab)重鏈
<400> 7
Figure 111116237-A0202-12-0102-139
Figure 111116237-A0202-12-0103-140
Figure 111116237-A0202-12-0104-141
<210> 8
<211> 214
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 恩諾單抗(Enfortumab)輕鏈
<400> 8
Figure 111116237-A0202-12-0104-142
Figure 111116237-A0202-12-0105-143
<210> 9
<211> 447
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 帕曲妥單抗(Patritumab)重鏈
<400> 9
Figure 111116237-A0202-12-0105-144
Figure 111116237-A0202-12-0106-145
<210> 10
<211> 220
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> 帕曲妥單抗(Patritumab)輕鏈
<400> 10
Figure 111116237-A0202-12-0107-146
<210> 11
<211> 451
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> H01L02重鏈
<400> 11
Figure 111116237-A0202-12-0108-147
Figure 111116237-A0202-12-0109-148
<210> 12
<211> 213
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial Sequence)
<220>
<223> H01L02輕鏈
<400> 12
Figure 111116237-A0202-12-0109-149
Figure 111116237-A0202-12-0110-150

Claims (43)

  1. 一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，其中該化合物包含式(C-Trop-2)所示的結構：
    Figure 111116237-A0202-13-0001-151
    其中，Q1包含連接體，
    L1包含-L1a-C(=O)-，
    其中，L1a選自以下組：視需要取代的亞(伸)烷基、視需要取代的聚乙二醇基、視需要取代的亞(伸)烯基、視需要取代的亞(伸)炔基、視需要取代的亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)脂雜環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基；
    L2包含視需要取代的多肽殘基，
    L3包含視需要取代的間隔基團，
    其中，L2和/或L3包含視需要取代的聚肌胺酸殘基，
    T包含藥物單元，
    Ab為能夠結合Trop-2的配體，m為1-8的數。
  2. 如請求項1所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，Q1包含與巰基偶聯後的連接體。
  3. 如請求項1或2所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，Q1選自以下組：視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0002-152
    、視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0002-153
    、視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0002-154
    、和視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0002-155
    。
  4. 如請求項1至3中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L1a選自以下組：視需要取代的C1-C7的亞(伸)烷基、視需要取代的二甘醇基至八甘醇基、視需要取代的C3-C6亞(伸)脂環基、視需要取代的亞(伸)芳基和視需要取代的亞(伸)雜芳基。
  5. 如請求項1至4中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L1a選自以下組：視需要取代的亞甲基、視需要取代的亞(伸)乙基、視需要取代的亞(伸)丙基、視需要取代的亞(伸)丁基、視需要取代的亞(伸)戊基、視需要取代的二甘醇基、視需要取代的四甘醇基、視需要取代的六甘醇基、視需要取代的八甘醇基和視需要取代的亞(伸)環己基。
  6. 如請求項1至5中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L2包含視需要取代的選自以下組的胺基酸構成的多肽殘基：苯丙胺酸、異亮胺酸、亮胺酸、色胺酸、纈胺酸、甲硫胺酸、酪胺酸、丙胺酸、蘇胺酸、組胺酸、絲胺酸、穀胺醯胺、精胺酸、賴胺酸、天冬醯胺、谷胺酸、脯胺酸、瓜胺酸、天冬胺酸和甘胺酸。
  7. 如請求項1至6中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L2包含視需要取代的選自以下組的胺基酸構成的多肽殘基：甘胺酸、苯丙胺酸、纈胺酸、丙胺酸、精胺酸、瓜胺酸、天冬胺酸、天冬醯胺和賴胺酸。
  8. 如請求項1至7中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L2包含視需要取代的選自以下組的多肽殘基：苯丙胺酸-賴胺酸(Phe-Lys)、纈胺酸-丙胺酸(Val-Ala)、纈胺酸-瓜胺酸(Val-Cit)、谷胺酸-纈胺酸-丙胺酸(Glu-Val-Ala)、谷胺酸-纈胺酸-瓜胺酸(Glu-Val-Cit)、纈胺酸-賴胺酸(Val-Lys)、丙胺酸-丙胺酸-丙胺酸(Ala-Ala-Ala)、丙胺酸-丙胺酸-天冬醯胺(Ala-Ala-Asn)和甘胺酸-甘胺酸-苯丙胺酸-甘胺酸(Gly-Gly-Phe-Gly)。
  9. 如請求項1至8中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，當L2包含賴胺酸殘基時，該賴胺酸殘基被包含聚肌胺酸殘基的結構R1取代。
  10. 如請求項9所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，該R1為視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0004-156
    ，其中n1為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
  11. 如請求項10所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，n1為4至18。
  12. 如請求項1至11中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L3選自以下組：視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0004-157
    ，和視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0004-158
    。
  13. 如請求項1至12中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L3的苯環與視需要取代的聚肌胺酸殘基藉由結構單元-X-連接，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0005-159
    ，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3為共價鍵或選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代。
  14. 如請求項1至13中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，L3的苯環與視需要取代的聚肌胺酸殘基藉由結構單元-X-連接，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0005-160
    、和視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0005-161
    ，其中X1選自以下組：C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，所述雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子，該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地 選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代。
  15. 如請求項13或14所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，結構單元-X-為視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0006-162
    ，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
    Figure 111116237-A0202-13-0006-163
    ，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
  16. 如請求項13至15中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0006-164
    ，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3為共價鍵或選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包 含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
    Figure 111116237-A0202-13-0007-165
    ，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
  17. 如請求項13或14所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，結構單元-X-為視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0007-166
    ，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
    Figure 111116237-A0202-13-0007-167
    ，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
  18. 如請求項13、14和17中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，結構單元-X-選自以下組：視需要取代的
    Figure 111116237-A0202-13-0007-168
    ，其中X1選自以下組：羰基、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X2選自以下組：氫、C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；其中X3為共價鍵或選自以下組：氫、C1- C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基，該雜烷基包含選自N、O或者S的1-3個原子；該C1-C8烷基、C1-C8烷氧基、C1-C6環烷基、包含1-8個原子的直鏈雜烷基、和包含1-8個原子的直鏈-環狀雜烷基各自獨立地視需要地被選自氘代、鹵素、氰基、硝基、胺基、烷基、羧基、烷氧基或環烷基的一個或者多個取代基取代，該視需要取代的聚肌胺酸殘基包含
    Figure 111116237-A0202-13-0008-169
    ，其中n2為4至18的數，R選自以下組：C1-C6烷基、C1-C6環烷基、和C1-C6烷氧基。
  19. 如請求項15至18中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，n2為4至18。
  20. 如請求項1至19中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，T包含具有抗腫瘤活性的化合物。
  21. 如請求項1至20中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，T包含拓撲異構酶抑制劑。
  22. 如請求項1至21中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，T包含喜樹鹼類及非喜樹鹼類拓撲異構酶I抑制劑。
  23. 如請求項1至22中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，T選自以下組的結構：
    Figure 111116237-A0202-13-0009-170
    ，
    Figure 111116237-A0202-13-0009-171
    和
    Figure 111116237-A0202-13-0009-172
    。
  24. 如請求項1至23中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab包含抗Trop-2抗體或其抗原結合片段。
  25. 如請求項24所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該抗體選自以下組：鼠源抗體、嵌合抗體、人源化抗體和全人源抗體。
  26. 如請求項24或25所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該抗體包含單株抗體。
  27. 如請求項24至26中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該抗體包含雙特異性抗體。
  28. 如請求項24至27中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該抗原結合片段選自以下組：Fab、Fab'、Fv片段、F(ab')2、F(ab)2、scFv、di-scFv、VHH和dAb。
  29. 如請求項1至28中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab的重鏈HCDR1、HCDR2和HCDR3和輕鏈LCDR1、LCDR2和LCDR3分別包含抗Trop-2抗體的重鏈HCDR1、HCDR2和HCDR3和輕鏈LCDR1、LCDR2和LCDR3。
  30. 如請求項1至29中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab的重鏈HCDR1、HCDR2和HCDR3和輕鏈LCDR1、LCDR2和LCDR3分別包含hRS7的重鏈HCDR1、HCDR2和HCDR3和輕鏈LCDR1、LCDR2和LCDR3。
  31. 如請求項1至30中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL分別包含抗Trop-2抗體的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL。
  32. 如請求項1至31中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL分別包含hRS7的重鏈可變區VH和輕鏈可變區VL。
  33. 如請求項1至32中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab的重鏈和輕鏈分別包含抗Trop-2抗體的重鏈和輕鏈。
  34. 如請求項1至33中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab的重鏈和輕鏈分別包含hRS7的重鏈和輕鏈。
  35. 如請求項1至34中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該Ab包含hRS7。
  36. 如請求項1至35中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中該m藉由選自以下組的方法測定：疏水層析、十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳和液相質譜。
  37. 一種化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，
    其中，該化合物包含選自以下組的結構：
    Figure 111116237-A0202-13-0012-173
    Figure 111116237-A0202-13-0012-174
    Figure 111116237-A0202-13-0012-175
    Figure 111116237-A0202-13-0013-176
    Figure 111116237-A0202-13-0013-177
    Figure 111116237-A0202-13-0013-178
    Figure 111116237-A0202-13-0013-179
     和
    Figure 111116237-A0202-13-0013-180
    Ab為能夠結合Trop-2的配體，m為1-8的數。
  38. 一種醫藥組成物，其含有如請求項1至37中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物，以及視需要地藥學上可接受的載體。
  39. 一種含有如請求項1至37中任一項所述的化合物、或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式、或其藥學上可接受的鹽、前藥或溶劑合物、和/或如請求項38所述的醫藥組成物在製備用於治療和/或預防腫瘤的藥物中的用途。
  40. 如請求項39所述的用途，其中該腫瘤與Trop-2表達相關的腫瘤。
  41. 如請求項40所述的用途，其中與該靶點表達相關的腫瘤包含該靶點高表達的腫瘤和/或該靶點陽性的腫瘤。
  42. 如請求項39至41中任一項所述的用途，其中該腫瘤包含實體腫瘤和/或血液腫瘤。
  43. 如請求項39至42中任一項所述的用途，其中該腫瘤選自以下組：肺癌、尿道癌、大腸癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、胃腸道間質瘤、宮頸癌、食道癌、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、結腸癌、直腸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、子宮癌、唾液腺癌、腎癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、或肉瘤。肺癌、尿道癌、大腸癌、前列腺癌、卵巢癌、胰腺癌、乳腺癌、膀胱癌、胃癌、胃腸道間質瘤、宮頸癌、食道癌、鱗狀細胞癌、腹膜癌、肝癌、肝細胞癌、結腸癌、直 腸癌、結腸直腸癌、子宮內膜癌、子宮癌、唾液腺癌、腎癌、外陰癌、甲狀腺癌、陰莖癌、白血病、惡性淋巴瘤、漿細胞瘤、骨髓瘤、和肉瘤。
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