TW202214639A

TW202214639A - 吡啶酮并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

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Publication number: TW202214639A
Application number: TW110121493A
Authority: TW
Inventors: 李心; 馮斌強; 白東棟; 賀峰; 陶維康
Original assignee: 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司; 大陸商上海恆瑞醫藥有限公司
Priority date: 2020-06-11
Filing date: 2021-06-11
Publication date: 2022-04-16
Also published as: AU2021287927A1; CN115605479B; US20230219951A1; WO2021249519A1; KR20230023672A; CA3180615A1; MX2022015531A; JP2023528925A; EP4166555A1; CN115605479A; BR112022024120A2

Abstract

本揭露係關於吡啶酮并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用。具體而言，本揭露係關於一種通式(I)所示的吡啶酮并嘧啶類衍生物、其製備方法及含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑的用途，特別是作為SOS1抑制劑的用途和在製備用於治療藉由對SOS1的抑制而改善的疾病、病況或病症的藥物中的用途。

Description

吡啶酮并嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用

本揭露屬於醫藥領域，係關於一種通式(I)所示的吡啶酮并嘧啶類衍生物、其製備方法、含有該衍生物的醫藥組成物以及其作為治療劑的用途，特別是作為SOS1抑制劑的用途和在製備用於治療藉由對SOS1的抑制而改善的疾病、病況或病症的藥物中的用途。

RAS是在腫瘤中突變率最高的致癌基因之一，約30%的人類惡性腫瘤與RAS基因的突變有關。RAS家族包括KRAS、NRAS和HRAS，其中，KRAS突變最為常見，約占85%。KRAS被激活以後，藉由以RAF-MEK-ERK、PI3K-AKT-mTOR及TIAM1-RAc為代表的眾多下游信號通路，調控細胞增殖、存活、遷移及代謝等多個方面的功能。KRAS基因突變後，蛋白持續處於活化狀態，導致下游信號通路持續激活而促進腫瘤發生。

由於KRAS蛋白表面缺乏傳統意義上的小分子結合位點，並與鳥苷酸有著超高親和力而極難被抑制，長久以來被認為是不可成藥的藥物靶點。但基於KRAS異常激活在癌症進展中的重要性和普遍性，KRAS一直並仍然是藥物開發非常關注的靶點。目前針對抑制KRAS通路的藥物開發思路主要有以下幾個方面：

針對KRAS G12C開發的小分子共價抑制劑，可以將G12C突變體不可逆地鎖定在失活狀態，目前安進和mirati公司的臨床I期數據都顯示了不俗的效果。但KRAS G12C的突變只是其諸多突變的一種，其他重要突變體諸如G12V、G12D、G12S、G12A、G13V/D等依然缺乏有效藥物。

在KRAS上尋找其他可以靶向更多突變體的位點：主要針對結合下游效應分子的位點/與蛋白分子激活相關的位點，目前都處於臨床前階段，對活性抑制的IC₅₀普遍在微莫耳級別。

針對KRAS下游信號蛋白的抑制：例如針對RAF、MEK、ERK等抑制劑的開發，目前臨床上單用多效果不佳。

針對KRAS上游通路的抑制：如SHP2的抑制劑等。

針對KRAS的修飾及定位：如法尼基轉移酶等阻斷KRAS的膜定位從而達到抑制其作用的效果。

藉由RNAi的方法敲低KRAS的表達。

總體而言，除了KRAS G12C抑制劑以外，目前仍缺乏對多種突變有效的廣譜KRAS抑制劑。而阻斷KRAS的激活分子與KRAS的結合，比如選擇性抑制SOS1--即鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF)的小分子抑制劑，能藉由干擾RAS-SOS1相互作用而阻斷KRAS的激活，能達到廣譜抑制KRAS活性的目的。

KARS蛋白是一種小GTP酶(small GTPase)，在細胞內，KRAS蛋白在失活狀態(與鳥苷二磷酸(GDP)結合)和激活狀態(與鳥苷三磷酸(GTP)結合)之間轉換。這種轉變受到鳥嘌呤核苷酸交換因子(GEF)和GTP酶激活蛋白(GAP)的調控。KRAS的GEF主要有三類，分別是SOS(sevenless son)1&2、 Ras-GRF和Ras-GRP，其中，後兩類只在神經員及白細胞中表達，只有SOS在多種組織中廣泛表達，被認為在RAS的激活中起到主導作用。由於SOS1的表達量較SOS2更高，且較SOS2的活性更強，目前針對SOS的研究主要集中在SOS1。SOS1對於KRAS蛋白的具體激活途徑如下：上游信號(如生長因子)激活膜表面受體後，藉由SHP2-Grb2激活SOS1，SOS1與KRAS結合，藉由引起一系列構象變化，催化KRAS與GDP的解離，進而與GTP結合，形成具有活性的KRAS-GTP。

先前已揭露的SOS1相關的專利有WO2018172250A1、WO2019055540A1、WO2019122129A1、US10501421B1、WO2018115380A1和WO2019201848A1等。

本揭露的目的在於提供一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

環A為芳基或雜芳基；

R¹選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、環烷基氧基、雜環基氧基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-NR⁵R⁶、硝基、環烷基、雜環基、芳基氧基、雜芳基氧基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、環烷基、雜環基、芳基氧基、雜芳基氧基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、側氧基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R²選自氫原子、鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥烷基、氰基、胺基和環烷基；

R³相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-(CH₂)_rNR⁵R⁶、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、-(CH₂)_sNR⁹R¹⁰、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁴選自氫原子、烷基和環烷基；其中，該烷基和環烷基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁵和R⁶相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；

R⁷選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基和雜環基；

R⁸相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；其中，該烷基、鹵烷基、環烷基和雜環基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁹和R¹⁰相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；

n為1、2、3或4；

p為0、1、2或3；

q為0、1、2或3；

r為0、1、2或3；且

s為0、1、2或3。

其中，

環A為芳基或雜芳基；

R¹選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、環烷基氧基、雜環基氧基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-NR⁵R⁶、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、- C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁴選自氫原子、烷基和環烷基；

R⁷選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基和雜環基；

R⁸選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；

n為1、2、3或4；

p為0、1、2或3；

q為0、1、2或3；

r為0、1、2或3；且

s為0、1、2或3。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，環A為芳基或雜芳基，較佳地，該芳基或雜芳基視需要與環烷基或雜環基稠合。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，環A為6至10員芳基；較佳為苯基或

。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，環A為苯基。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

R^3a、R^3b和R^3c相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-(CH₂)_rNR⁵R⁶、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、-(CH₂)_sNR⁹R¹⁰、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；較佳地，R^3a、R^3b和R^3c相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、鹵C_1-6烷基、羥基、氰基和胺基，其中，該C_1-6烷基和鹵C_1-6烷基視需要被選自鹵素、羥基和C_1-6烷氧基中的一個或多個取代基取代；

R¹、R²、R⁴、R⁵、R⁶、R⁹、R¹⁰、s和r如通式(I)化合物中所定義。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R⁴為氫原子或C_1-6烷基；較佳地，R⁴為氫原子。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中R¹選自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷基、鹵C_1-6烷氧基、C_1-6羥烷基、3至10員環烷基氧基、3至10員雜環基氧基、3至10員環烷基、3至10員雜環基、6至10員芳基和5至10員雜芳基，其中，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3至10員環烷基氧基、3至10員雜環基氧基、3至10員環烷基、3至10員雜環基、6至10員芳基和5至10員雜芳基視需要被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基、羥基、胺基、氰基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰和-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰中的一個或多個取代基取代；R⁷至R¹⁰、q和p如通式(I)化合物中所定義。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R¹為

或

；環B選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；較佳地，R¹選自

、

、

、

、

和

；Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

R^11a、R^11b、R^11c和R¹¹相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；

j為0、1或2；

k為1或2；

u為0、1、2、3、4或5；

v為0、1、2或3；

R⁷至R¹⁰、p和q如通式(I)中所定義。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R¹選自C_1-6烷氧基、

、

、

和

；R^11a、R^11b、R^11c和R¹¹相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；

v為0、1、2或3；

R⁷至R¹⁰、p和q如通式(I)中所定義。

、

、

、

、

、

、

和

；R⁰相同或不同，各自獨立地選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基、羥基、胺基、氰基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰和-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰；t為0、1、2、3或4；R⁷至R¹⁰、q和p如通式(I)化合物中所定義。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R²為C_1-6烷基；較佳為甲基。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R³相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、鹵C_1-6烷基、羥基、氰基和胺基，其中，該C_1-6烷基和鹵C_1-6烷基視需要被選自鹵素、羥基和C_1-6烷氧基中的一個或多個取代基取代。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，n為1、2或3；較佳地，n為2。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R⁷選自氫原子、烷基和鹵烷基；較佳地，R⁷選自C_1-6烷基和鹵C_1-6烷基。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R⁸相同或不同，且各自獨立地選自C_1-6烷基；其中，該C_1-6烷基視需要被鹵素或氰基中的一個或多個取代基取代。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R⁹和R¹⁰相同或不同，各自獨立地選自氫原子、C_1-6烷基和鹵C_1-6烷基。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，p為0。

在本揭露的一些較佳地實施方案中，一種通式(I)或通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，q為1。

表A 本揭露的通式(I)的典型化合物包括但不限於：

本揭露的另一方面係關於通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

環A、R²至R⁴和n如中所通式(I)化合物中所定義。

本揭露的另一方面係關於通式(IIA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

R²、R^3a、R^3b、R^3c和R⁴如中所通式(II)化合物中所定義。

本揭露的通式(IA)或(IIA)典型化合物包括但不限於：

本揭露的另一方面係關於通式(IB)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，Y為鹵素；較佳為Cl；

R²選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥烷基、氰基和環烷基；

R¹和R⁴如通式(I)化合物中所定義。

本揭露的通式(IB)的典型化合物包括但不限於：

本揭露的另一方面係關於一種製備通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與R¹-M反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

環A、R¹至R⁴和n如通式(I)化合物中所定義。

本揭露的另一方面係關於一種製備通式(IAA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IAB)化合物發生反應，得到通式(IAA)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3；

環A、R²至R⁴、R⁷至R¹⁰、p、q和n如通式(I)化合物中所定義。

通式(IAA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽發生氧化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

R¹為

；

Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3；

本揭露的另一方面係關於一種製備通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IIA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與R¹-M反應，得到通式(II)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

R¹、R²、R^3a、R^3b、R^3c和R⁴如通式(II)化合物中所定義。

本揭露的另一方面係關於一種製備通式(IIAA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IIA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IAB)化合物發生反應，得到通式(IIAA)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3；

R²、R^3a、R^3b、R^3c、R⁴、R⁷至R¹⁰、p和q如通式(II)化合物中所定義。

通式(IIAA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽發生氧化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

R¹為

；

Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3；

通式(IB)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IC)化合物發生反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

M為HCl；

y為0或1；

Y為鹵素；較佳為Cl；

環A、R¹至R⁴和n如通式(I)化合物中所定義。

通式(IB)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IIC)化合物發生反應，得到通式(II)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

M為HCl；

y為0或1；

Y為鹵素；較佳為Cl；

R¹、R²、R^3a、R^3b、R^3c和R⁴如通式(II)化合物中所定義。

本揭露的另一方面係關於一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的本揭露通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。

本揭露進一步係關於通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其阻轉異構體、互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，在製備用於抑制SOS1的藥物中的用途。

本揭露進一步係關於通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物在製備用於治療和/或預防癌症、炎症、RAS病、努南綜合症(NS)、伴有多斑的努南綜合症(NSML)、毛細血管畸形-動靜脈畸形綜合症(CM-AVM)、科斯特洛綜合症(CS)、心-面-皮膚綜合症(CFC)、萊格斯綜合症、遺傳性牙齦纖維瘤病、或其它增殖性疾病的藥物中的用途，較佳為在製備用於治療和/或預防癌症的藥物中的用途，特別地，該癌症選自黑色素瘤、皮膚癌、肝癌、腎癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、結腸直腸癌、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌、胰腺癌、真性紅細胞增多症、兒科腫瘤、子宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、輸尿管腫瘤、前列腺癌、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、白血病、頭頸瘤、子宮內膜癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神經細胞瘤、神經母細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤、星形細胞瘤、膠質母細胞瘤和膠質瘤；該RAS病較佳為1型神經纖維瘤病(NF1)；該肺癌較佳為非小細胞肺癌，進一步較佳為轉移性非小細胞肺癌；該白血病較佳為慢性淋巴細胞白血病或急性髓性白血病；該淋巴瘤較佳為彌漫性大B細胞淋巴瘤；該骨髓瘤較佳為多發性骨髓瘤；該骨瘤較佳為骨軟骨瘤；該肝癌較佳為肝細胞癌，該頭頸瘤較佳為頭頸鱗狀細胞癌，該肉瘤較佳為骨肉瘤，該結腸直腸癌較佳為結腸癌或直腸癌。

本揭露還係關於一種抑制SOS1的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物。

本揭露還係關於一種治療和/或預防SOS1介導的疾病的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物。

本揭露還係關於一種治療和/或預防癌症、炎症、RAS病、努南綜合症(NS)、伴有多斑的努南綜合症(NSML)、毛細血管畸形-動靜脈畸形綜合症(CM-AVM)、科斯特洛綜合症(CS)、心-面-皮膚綜合症(CFC)、萊格斯綜合症、遺傳性牙齦纖維瘤病、或其它增殖性疾病的方法，較佳為治療和/或預防癌症的方法，其包括給予所需患者治療有效量的通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物；其中，該癌症較佳為選自黑色素瘤、皮膚癌、肝癌、腎癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、結腸直腸癌、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌、胰腺癌、真性紅細胞增多症、兒科腫瘤、子宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、輸尿管腫瘤、前列腺癌、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、白血病、頭頸瘤、子宮內膜癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神經細胞瘤、神經母細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤、星形細胞瘤、膠質母細胞瘤和膠質瘤；該RAS病較佳為1型神經纖維瘤病(NF1)；該肺癌較佳為非小細胞肺癌，進一步較佳為轉移性非小細胞肺癌；該白血病較佳為慢性淋巴細胞白血病或急性髓性白血病；該淋巴瘤較佳為彌漫性大B細胞淋巴瘤；該骨髓瘤較佳為多發性骨髓瘤；該骨瘤較佳為骨軟骨瘤；該肝癌較佳為肝細胞癌，該頭頸瘤較佳為頭頸鱗狀細胞癌，該肉瘤較佳為骨肉瘤，該結腸直腸癌較佳為結腸癌或直腸癌。

本揭露進一步係關於一種通式(I)或通式(II)及表A示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽或包含其的醫藥組成物，其用作藥物。

本揭露還係關於通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其用作SOS1抑制劑。

本揭露還係關於通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療和/或預防SOS1介導的疾病。

本揭露還係關於通式(I)或通式(II)及表A所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體或其混合物形式或其可藥用的鹽，或包含其的醫藥組成物，其用於治療和/或預防癌症、炎症、RAS病、努南綜合症(NS)、伴有多斑的努南綜合症(NSML)、毛細血管畸形-動靜脈畸形綜合症(CM-AVM)、科斯特洛綜合症(CS)、心-面-皮膚綜合症(CFC)、萊格斯綜合症、遺傳性牙齦纖維瘤病、或其它增殖性疾病，較佳為用於治療和/或預防癌症；其中，該癌症較佳為選自黑色素瘤、皮膚癌、肝癌、腎癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、結腸直腸癌、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌、胰腺癌、真性紅細胞增多症、兒科腫瘤、子宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、輸尿管腫瘤、前列腺癌、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、白血病、頭頸瘤、子宮內膜癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神經細胞瘤、神經母細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤、星形細胞瘤、膠質母細胞瘤和膠質瘤；該RAS病較佳為1型神經纖維瘤病(NF1)；該肺癌較佳為非小細胞肺癌，進一步較佳為轉移性非小細胞肺癌；該白血病較佳為慢性淋巴細胞白血病或急性髓性白血病；該淋巴瘤較佳為彌漫性大B細胞淋巴瘤；該骨髓瘤較佳為多發性骨髓瘤；該骨瘤較佳為骨軟骨瘤；該肝癌較佳為肝細胞癌，該頭頸瘤較佳為頭頸鱗狀細胞癌，該肉瘤較佳為骨肉瘤，該結腸直腸癌較佳為結腸癌或直腸癌。

可將活性化合物製成適合於藉由任何適當途徑給藥的形式，藉由一般方法使用一種或多種藥學上可接受的載體来配製本揭露的組成物。因此，本揭露的活性化合物可以配製成用於口服給藥、注射(例如静脈內、肌肉內或皮下)給藥，吸入或吹入給藥的各種劑型。本揭露的化合物也可以配製成持續釋放劑型，例如片劑、硬或軟膠囊、水性或油性混懸液、乳劑、注射液、可分散性粉末或顆粒、栓劑、錠劑或糖漿。

作為一般性指導，活性化合物較佳是以單位劑量的方式，或者是以患者可以以單劑自我給藥的方式。本揭露化合物或組成物的單位劑量的表達方式可以是片劑、膠囊、扁囊劑、瓶裝藥水、藥粉、顆粒劑、錠劑、栓劑、再生藥粉或液體製劑。合適的單位劑量可以是0.1至1000mg。

本揭露的醫藥組成物除活性化合物外，可含有一種或多種輔料，該輔料選自以下成分：填充劑(稀釋劑)、黏合劑、潤濕劑、崩解劑或賦形劑等。根據給藥方法的不同，組成物可含有0.1至99重量%的活性化合物。

片劑含有活性成分和用於混合的適宜製備片劑的無毒的可藥用的賦形劑。這些賦形劑可以是惰性賦形劑、造粒劑、崩解劑、黏合劑和潤滑劑。這些片劑可以不包衣或可藉由掩蓋藥物的味道或在胃腸道中延遲崩解和吸收，因而在較長時間內提供緩釋作用的已知技術將其包衣。

也可用其中活性成分與惰性固體稀釋劑或其中活性成分與水溶性載體或油溶媒混合的軟明膠膠囊提供口服製劑。

水混懸液含有活性物質和用於混合的適宜製備水懸浮液的賦形劑。此類賦形劑是懸浮劑、分散劑或濕潤劑。水混懸液也可以含有一種或多種防腐劑、一種或多種著色劑、一種或多種矯味劑和一種或多種甜味劑。

油混懸液可藉由使活性成分懸浮於植物油，或礦物油配製而成。油懸浮液可含有增稠劑。可加入上述的甜味劑和矯味劑，以提供可口的製劑。可藉由加入抗氧化劑保存這些組成物。

本揭露的醫藥組成物也可以是水包油乳劑的形式。油相可以是植物油，或礦物油或其混合物。適宜的乳化劑可以是天然產生的磷脂，乳劑也可以含有甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧劑。此類製劑也可含有緩和劑、防腐劑、著色劑和抗氧劑。

本揭露的醫藥組成物可以是無菌注射水溶液形式。可以使用的可接受的溶媒或溶劑有水、林格氏液和等滲氯化鈉溶液。無菌注射製劑可以是其中活性成分溶於油相的無菌注射水包油微乳可藉由局部大量注射，將注射液或微乳注入患者的血流中。或者，最好按可保持本揭露化合物恆定循環濃度的方式給予溶液和微乳。為保持這種恆定濃度，可使用連續靜脈內遞藥裝置。這種裝置的實例是Deltec CADD-PLUS.TM.5400型靜脈注射泵。

本揭露的醫藥組成物可以是用於肌內和皮下給藥的無菌注射水或油混懸液的形式。可按已知技術，用上述那些適宜的分散劑或濕潤劑和懸浮劑配製該混懸液。無菌注射製劑也可以是在腸胃外可接受的無毒稀釋劑或溶劑中製備的無菌注射溶液或混懸液。此外，可方便地用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。為此目的，可使用任何調和固定油。此外，脂肪酸也可以製備注射劑。

可按用於直腸給藥的栓劑形式給予本揭露化合物。可藉由將藥物與在普通溫度下為固體但在直腸中為液體，因而在直腸中會溶化而釋放藥物的適宜的無刺激性賦形劑混合來製備這些醫藥組成物。

可藉由加入水來製備水混懸的可分散粉末和顆粒給予本揭露化合物。可藉由將活性成分與分散劑或濕潤劑、懸浮劑或一種或多種防腐劑混合來製備這些醫藥組成物。

如所屬技術領域中具有通常知識者所熟知的，藥物的給藥劑量依賴於多種因素，包括但並非界定於以下因素：所用具體化合物的活性、患者的年齡、患者的體重、患者的健康狀況、患者的行為、患者的飲食、給藥時間、給藥方式、排泄的速率、藥物的組合、疾病的嚴重性等；另外，最佳的治療方式如治療的模式、化合物的日用量或可藥用的鹽的種類可以根據傳統的治療方案來驗證。

術語定義

除非有相反陳述，在說明書和申請專利範圍中使用的術語具有下述含義。

術語「烷基」指飽和脂肪族烴基團，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳為含有1至12個(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12個)碳原子的烷基，更佳為含有1至6個碳原子的烷基。非限制性實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基、正庚基、2-甲基己基、3-甲基己基、4-甲基己基、5-甲基己基、2,3-二甲基戊基、2,4-二甲基戊基、2,2-二甲基戊基、3,3-二甲基戊基、2-乙基戊基、3-乙基戊基、正辛基、2,3-二甲基己基、2,4-二甲基己基、2,5-二甲基己基、2,2-二甲基己基、3,3-二甲基己基、4,4-二甲基己基、2-乙基己基、3-乙基己基、4-乙基己基、2-甲基-2-乙基戊基、2-甲基-3-乙基戊基、正壬基、2-甲基-2-乙基己基、2-甲基-3-乙基己基、2,2-二乙基戊基、正癸基、3,3-二乙基己基、2,2-二乙基己基，及其各種支鏈異構體等。更佳地是含有1至6個碳原子的低級烷基，非限制性實施例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第三丁基、第二丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、2,3-二甲基丁基等。烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為獨立地視需要選自D原子、鹵素、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基。

術語「伸烷基」指飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基，其為從母體烷的相同碳原子或兩個不同的碳原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基，其為包含1至20個碳原子的直鏈或支鏈基團，較佳為含有1至12個(例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12個)碳原子，更佳為含有1至6個碳原子的伸烷基。伸烷基的非限制性實例包括但不限於伸甲基(-CH₂-)、1,1-伸乙基(-CH(CH₃)-)、1,2-伸乙基(-CH₂CH₂)-、1,1-伸丙基(-CH(CH₂CH₃)-)、1,2-伸丙基(-CH₂CH(CH₃)-)、1,3-伸丙基(-CH₂CH₂CH₂-)、1,4-伸丁基(-CH₂CH₂CH₂CH₂-)等。伸烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為獨立地視需要選自烯基、炔基、烷氧基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、烷硫基、烷基胺基、鹵素、巰基、羥基、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基、環烷氧基、雜環烷氧基、環烷硫基、雜環烷硫基和側氧基中的一個或多個取代基。

術語「烯基」指分子中含有至少一個碳碳雙鍵的烷基化合物，其中，烷基的定義如上所述。較佳為含有2至12個(例如2、3、4、5、6、7、8、9、 10、11和12個)碳原子的烯基，更佳為含有2至6個碳原子的烯基。烯基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷氧基、鹵素、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基。

術語「炔基」指分子中含有至少一個碳碳三鍵的烷基化合物，其中，烷基的定義如上所述。較佳含有2至12個(例如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11和12個)碳原子的炔基，更佳為含有2至6個碳原子的炔基。炔基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自烷氧基、鹵素、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基。

術語「環烷基」指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，環烷基環包含3至20個碳原子，較佳為包含3至12個碳原子，較佳為包含3至10個碳原子(例如3、4、5、6、7、8、9或10個)，更佳為包含3至6個碳原子。單環環烷基的非限制性實例包括環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環己二烯基、環庚基、環庚三烯基、環辛基等；多環環烷基包括螺環、稠環和橋環的環烷基。

術語「螺環烷基」指5至20員，單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺環烷基分為單螺環烷基、雙螺環烷基或多螺環烷基，較佳為單螺環烷基和雙螺環烷基。更佳為3員/5員、3員/6員、4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺環烷基。螺環烷基的非限制性實例包括：

術語「稠環烷基」指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對碳原子的全碳多環基團，其中，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠環烷基，較佳為雙環或三環，更佳為5員/5員或5員/6員雙環烷基。稠環烷基的非限制性實例包括：

術語「橋環烷基」指5至20員，任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，其可以含有一個或多個雙鍵。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋環烷基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋環烷基的非限制性實例包括：

該環烷基環包括如上所述的環烷基(包括單環、螺環、稠環和橋環)稠合於芳基、雜芳基或雜環烷基環上，其中，與母體結構連接在一起的環為環烷基，非限制性實例包括

、

和

等；較佳為

和

環烷基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為獨立地視需要選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基。

術語「烷氧基」指-O-(烷基)，其中，烷基的定義如上所述。烷氧基的非限制性實例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基和丁氧基。烷氧基可以是視需要取代的或非取代的，當被取代時，其取代基較佳為一個或多個以下基團，其獨立地選自D原子、鹵素、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基。

術語「雜環基」指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其包含3至20個環原子，其中，一個或多個環原子為選自氮、氧和硫的雜原子，該硫可視需要被側氧(即形成亞碸或碸)，但不包括-O-O-、-O-S-或-S-S-的環部分，其餘環原子為碳。較佳為包含3至12個環原子，其中，1-4個(例如1、2、3和4個)是雜原子；更佳為包含3至10個環原子(例如3、4、5、6、7、8、9和10個)，其中，1-3是雜原子(例如1、2和3個)；更佳為包含3至6個環原子，其中，1-3個是雜原子；最佳為包含5或6個環原子，其中，1-3個是雜原子。單環雜環基的非限制性實例包括N雜環丁基、呋喃基、吡咯烷基、四氫吡喃基、3,6-二氫吡喃基、1,2,3,6-四氫吡啶基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌嗪基等。多環雜環基包括螺環、稠環和橋環的雜環基。

術語「螺雜環基」指5至20員，單環之間共用一個原子(稱螺原子) 的多環雜環基團，其中，一個或多個環原子為選自氮、氧和硫的雜原子，該硫可視需要被側氧(即形成亞碸或碸)，其餘環原子為碳。其可以含有一個或多個雙鍵。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據環與環之間共用螺原子的數目將螺雜環基分為單螺雜環基、雙螺雜環基或多螺雜環基，較佳為單螺雜環基和雙螺雜環基。更佳為4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/5員或5員/6員單螺雜環基。螺雜環基的非限制性實例包括：

術語「稠雜環基」指5至20員，系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，其中，一個或多個環原子為選自氮、氧和硫的雜原子，該硫可視需要被側氧(即形成亞碸或碸)，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環稠雜環基，較佳為雙環或三環，更佳為3員/4員、3員/5員、3員/6員、4員/4員、4員/5員、4員/6員、5員/4員、5員/5員、5員/6員、6員/3員、6員/4員、6員/5員和6員/6員的雙環稠雜環基。稠雜環基的非限制性實例包括：

術語「橋雜環基」指5至14員，任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，其可以含有一個或多個雙鍵，其中，一個或多個環原子為選自氮、氧和硫的雜原子，該硫可視需要被側氧(即形成亞碸或碸)，其餘環原子為碳。較佳為6至14員，更佳為7至10員(例如7、8、9或10員)。根據組成環的數目可以分為雙環、三環、四環或多環橋雜環基，較佳為雙環、三環或四環，更佳為雙環或三環。橋雜環基的非限制性實例包括：

該雜環基環包括如上所述的雜環基(包括單環、螺雜環、稠雜環和橋雜環)稠合於芳基、雜芳基或環烷基環上，其中，與母體結構連接在一起的環為雜環基，其非限制性實例包括：

和

等。

雜環基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其取代基可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為獨立地視需要選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基。

術語「芳基」指具有共軛的π電子體系的6至14員全碳單環或稠合多環(稠合多環是共享毗鄰碳原子對的環)基團，較佳為6至10員，例如苯基和萘基。該芳基環包括如上所述的芳基環稠合於雜芳基、雜環基或環烷基環上，其中，與母體結構連接在一起的環為芳基環，其非限制性實例包括：

芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳為獨立地視需要選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基、雜芳基中的一個或多個取代基。

術語「雜芳基」指包含1至4個(1、2、3和4個)雜原子、5至14個環原子的雜芳族體系，其中，雜原子選自氧、硫和氮。雜芳基較佳為5至10員(例如5、6、7、8、9或10員)，更佳為5員或6員，例如呋喃基、噻吩基、吡啶基、吡咯基、N-烷基吡咯基、嘧啶基、吡嗪基、達嗪基、咪唑基、吡唑基、三唑基、四唑基等。該雜芳基環包括如上述的雜芳基稠合於芳基、雜環基或環烷基環上，其中，與母體結構連接在一起的環為雜芳基環，其非限制性實例包括：

雜芳基可以是取代的或非取代的，當被取代時，其可以在任何可使用的連接點上被取代，該取代基較佳獨立地視需要選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、羥基、羥烷基、氰基、胺基、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基。

上述環烷基、雜環基、芳基和雜芳基包括從母體環原子上除去一個氫原子所衍生的殘基(即1價基團)，或從母體的相同環原子或兩個不同的環原子上除去兩個氫原子所衍生的殘基(即2價基團)即「二價環烷基」、「二價雜環基」、「伸芳基」、「伸雜芳基」。

術語「胺基保護基」是為了使分子其它部位進行反應時胺基保持不變，用易於脫去的基團對胺基進行保護。非限制性實施例包含(三甲基矽)乙氧基甲基、四氫吡喃基、第三丁氧羰基、乙醯基、苄基、烯丙基和對甲氧苄基等。這些基團可視需要地被選自鹵素、烷氧基和硝基中的1-3個取代基所取代。

術語「羥基保護基」是本領域已知的適當的用於羥基保護的基團，參見文獻(「ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis」，5^ThEd.T.W.Greene&P.G.M.Wuts)中的羥基保護基團。作為示例，較佳地，該羥基保護基可以是(C_1-10烷基或芳基)₃矽烷基，例如：三乙基矽基、三異丙基矽基、第三丁基二甲基矽基、第三丁基二苯基矽基等；可以是C_1-10烷基或取代烷基，較佳為烷氧基或芳基取代的烷基，更佳為C_1-6烷氧基取代的C_1-6烷基或苯基取代的C_1-6烷基，最佳為C_1-4烷氧基取代的C_1-4烷基，例如：甲基、第三丁基、烯丙基、苄基、甲氧基甲基(MOM)、乙氧基乙基、2-四氫吡喃基(THP)等；可以是(C_1-10烷基或芳香基)醯基，例如：甲醯基、乙醯基、苯甲醯基、對硝基苯甲醯基等；可以是(C_1-6烷基或C_6-10芳基)磺醯基；也可以是(C_1-6烷氧基或C_6-10芳基氧基)羰基。

術語「環烷基氧基」指環烷基-O-，其中，環烷基如上所定義。

術語「雜環基氧基」指雜環基-O-，其中，雜環基如上所定義。

術語「芳基氧基」指芳基-O-，其中，芳基如上所定義。

術語「雜芳基氧基」指雜芳基-O-，其中，雜芳基如上所定義。

術語「烷硫基」指烷基-S-，其中，烷基如上所定義。

術語「鹵烷基」指烷基被一個或多個鹵素取代，其中，烷基如上所定義。

術語「鹵烷氧基」指烷氧基被一個或多個鹵素取代，其中，烷氧基如上所定義。

術語「氘代烷基」指烷基被一個或多個氘原子取代，其中，烷基如上所定義。

術語「羥烷基」指烷基被一個或多個羥基取代，其中，烷基如上所定義。

術語「鹵素」指氟、氯、溴或碘。

術語「羥基」指-OH。

術語「巰基」指-SH。

術語「胺基」指-NH₂。

術語「氰基」指-CN。

術語「硝基」指-NO₂。

術語「側氧基」或「側氧」指「=O」。

術語「羰基」指C=O。

術語「羧基」指-C(O)OH。

術語「羧酸酯基」指-C(O)O(烷基)、-C(O)O(環烷基)、(烷基)C(O)O-或(環烷基)C(O)O-，其中，烷基和環烷基如上所定義。

本揭露還包括各種氘化形式的化合物。與碳原子連接的各個可用的氫原子可獨立地被氘原子替換。所屬技術領域中具有通常知識者能夠參考相關文獻合成氘化形式的化合物。在製備氘代形式的化合物時可使用市售的氘代起始物質，或它們可使用一般一般技術採用氘代試劑合成，氘代試劑包括但不限於氘代硼烷、三氘代硼烷四氫呋喃溶液、氘代氫化鋰鋁、氘代碘乙烷和氘代碘甲烷等。氘代物通常可以保留與未氘代的化合物相當的活性，並且當氘代在某些特定位點時可以取得更好的代謝穩定性，從而獲得某些治療優勢。

「視需要」或「視需要地」意味著隨後所描述的事件或環境可以但不必發生，該說明包括該事件或環境發生或不發生地場合。例如，「視需要被烷基取代的雜環基團」意味著烷基可以但不必須存在，該說明包括雜環基團被烷基取代的情形和雜環基團不被烷基取代的情形。

「取代的」指基團中的一個或多個氫原子，較佳為1至5個，更佳為1至3個氫原子彼此獨立地被相應數目的取代基取代。所屬技術領域中具有通常知識者能夠在不付出過多努力的情況下(藉由實驗或理論)確定可能或不可能的取代。例如，具有游離氫的胺基或羥基與具有不飽和(如烯屬)鍵的碳原子結合時可能是不穩定的。

「醫藥組成物」表示含有一種或多種本文所述化合物或其生理學上/可藥用的鹽或前體藥物與其他化學組分的混合物，以及其他組分例如生理學/可藥用的載體和賦形劑。醫藥組成物的目的是促進對生物體的給藥，利於活性成分的吸收進而發揮生物活性。

「可藥用的鹽」是指本揭露化合物的鹽，這類鹽用於哺乳動物體內時具有安全性和有效性，且具有應有的生物活性。可以在化合物的最終分離和純化過程中，或藉由使合適的基團與合適的鹼或酸反應來單獨製備鹽。通常用於形成藥學上可接受的鹽的鹼包括無機鹼，例如氫氧化鈉和氫氧化鉀，以及有機鹼，例如胺。通常用於形成藥學上可接受的鹽的酸包括無機酸以及有機酸。

針對藥物或藥理學活性劑而言，術語「治療有效量」是指無毒的但能達到預期效果的藥物或藥劑的足夠用量。有效量的確定因人而異，取決於受體的年齡和一般情況，也取決於具體的活性物質，個案中合適的有效量可以由所屬技術領域中具有通常知識者根據一般一般試驗確定。

本文所用的術語「溶劑化物」是指本揭露的化合物與一種或多種，較佳地為1-3種，無論是有機的還是無機的溶劑分子的物理結合。該物理結合包括氫鍵。在某些情況下，例如，當在結晶固體的晶格中摻入一種或多種，較佳1-3種溶劑分子時，溶劑化物將被分離。示例性的溶劑化物包括但不限於水合物、乙醇化物、甲醇化物和異丙醇化物。溶劑化方法是本領域公知的。

「前藥」是指可以在生理條件下，例如藉由在血液中水解，在體內轉化以產生活性原藥化合物。

本文所用的術語「藥學上可接受的」是指這些化合物、材料、組成物和/或劑型，在合理的醫學判斷範圍內，適用於與患者組織接觸而沒有過度毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或併發症，具有合理的獲益/風險比，並且對預期的用途是有效。

本文所使用的，單數形式的「一個」、「一種」和「該」包括複數引用，反之亦然，除非上下文另外明確指出。

當將術語「約」應用於諸如pH、濃度、溫度等的參數時，表明該參數可以變化±10%，並且有時更佳地在±5%之內。如所屬技術領域中具有通常知識者將理解的，當參數不是關鍵的時，通常僅出於說明目的給出數字，而不是限制。

本揭露的化合物還可包含其同位素衍生物。術語「同位素衍生物」指結構不同僅在於存在一種或多種同位素富集原子的化合物。例如，具有本揭露的結構，除了用「氘」或「氚」代替氫，或者用¹⁸F-氟標記(¹⁸F同位素)代替氟，或者用¹¹C-，¹³C-，或者¹⁴C-富集的碳(¹¹C-，¹³C-，或者¹⁴C-碳標記；¹¹C-，¹³C-，或者¹⁴C-同位素)代替碳原子的化合物處於本揭露的範圍內。這樣的化合物可用作例如生物學測定中的分析工具或探針，或者可以用作疾病的體內診斷成像示蹤劑，或者作為藥效學、藥動學或受體研究的示蹤劑。

本揭露化合物的合成方法

為了完成本揭露的目的，本揭露採用如下技術方案：

方案一

本揭露通式(I)所示的化合物或其鹽的製備方法，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽製備方法，包括以下步驟：

通式(IA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與R¹-M在鹼性條件和催化劑存在下發生反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

環A、R¹至R⁴和n如通式(I)中所定義。

方案二

通式(IA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IAB)化合物，在鹼性條件和催化劑存在下發生反應，得到通式(IAA)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

通式(IAA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，在催化劑和氧化劑存在下發生氧化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

R¹為

；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3；

方案三

本揭露通式(II)所示的化合物或其鹽的製備方法，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽製備方法，包括以下步驟：

通式(IIA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與R¹-M在鹼性條件和催化劑存在下發生反應，得到通式(II)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

R¹、R²、R^3a、R^3b、R^3c和R⁴如通式(II)化合物中所定義。

方案四

通式(IIA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IAB)化合物，在鹼性條件和催化劑存在下發生反應，得到通式(IIAA)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

通式(IIAA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，在催化劑和氧化劑存在下發生氧化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自

、

和氫原子；

Q選自氧原子、硫原子、

、NR^11a和CR^11bR^11c；

R¹為

；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3；

方案一至方案四中提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和1,8-二氮雜二環十一碳-7-烯，該無機鹼類包括但不限於氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、醋酸鈉、醋酸鉀、碳酸鉀或碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鋰和氫氧化鉀；較佳為碳酸鈉。

方案一至方案四中所用的催化劑包括但不限於四-三苯基膦鈀、二氯化鈀、醋酸鈀、[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物、1,1’-雙(二苄基磷)二氯二戊鐵鈀、三(二亞苄基丙酮)二鈀、碘化亞銅/L-脯胺酸等，當 M為

或

時，較佳地催化劑為[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物；當M為氫原子時，較佳地催化劑為碘化亞銅/L-脯胺酸。

方案二和方案四的氧化反應中所用的催化劑體系包括但不限於PhSiH/Mn(dpm)₂(或Mn(dpm)₃或Mn(acac)₂或Mn(TMHD)₃或Co(sdmg)₃)、四苯基卟啉錳(III)配合物/NaBH₄(或Pt-H₂)、四苯基卟啉鈷(II)配合物/NaBH₄(或EtNBH₄)、(二(水楊基-γ-亞胺基丙基)甲胺)鈷(II)/伯醇、Co(acac)₂、Co(salen)、Co(acacen)、BH₃；所用的氧化劑包括但不限於氧氣、空氣、過氧化氫等；

其中，Mn(dpm)₂為二(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)錳，Mn(dpm)₃為三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮)錳(CAS登記號為14324-99-3，又名：三(2,2,6,6-四甲基- 3,5-庚烯酸)錳)，Mn(acac)₂為二(乙醯丙酮)錳(II)(CAS登記號14024-58-9，又名乙醯丙酮錳)，Mn(TMHD)₃為三(二戊醯甲烷)錳(CAS14324-99-3)，Co(acac)₂為二(乙醯丙酮)鈷(II)(CAS登記號193620-63-2)、Co(salen)為N,N'-二(水楊基)乙二胺鈷(II)(CAS登記號14167-18-1)、Co(acacen)為N,N'-二(乙醯丙酮)乙二胺鈷(II)、Co(sdmg)₃為二(N-水楊亞基-2-胺基異丁酮)鈷酸鈉(CAS登記號704900-51-6)。

上述反應較佳為在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水、N,N-二甲基乙醯胺和N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

方案五

通式(IB)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IC)化合物，在鹼性條件下發生反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

M為HCl；

y為0或1；

Y為鹵素；較佳為Cl；

環A、R¹至R⁴和n如通式(I)中所定義。

方案六

通式(IB)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IIC)化合物，在鹼性條件下，在微波條件下發生反應，得到通式(II)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

M為HCl；

y為0或1；

Y為鹵素；較佳為Cl；

R¹、R²、R^3a、R^3b、R^3c和R⁴如通式(II)化合物中所定義。

方案五和方案六中提供鹼性條件的試劑包括有機鹼和無機鹼類，該有機鹼類包括但不限於三乙胺、N,N-二異丙基乙胺、正丁基鋰、二異丙基胺基鋰、醋酸鉀、第三丁醇鈉、第三丁醇鉀和1,8-二氮雜二環十一碳-7-烯，該無機鹼類包括但不限於氫化鈉、磷酸鉀、碳酸鈉、醋酸鈉、醋酸鉀、碳酸鉀或碳酸銫、氫氧化鈉、氫氧化鋰和氫氧化鉀；較佳為N,N-二異丙基乙胺。

上述反應較佳為在溶劑中進行，所用溶劑包括但不限於：醋酸、甲醇、乙醇、乙腈、正丁醇、甲苯、四氫呋喃、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯、正己烷、二甲基亞碸、1,4-二噁烷、乙二醇二甲醚、水、N,N-二甲基乙醯胺和N,N-二甲基甲醯胺及其混合物。

以下結合實施例用於進一步描述本揭露，但這些實施例並非限制著本揭露的範圍。

實施例

化合物的結構是藉由核磁共振(NMR)或/和質譜(MS)來確定的。NMR位移(δ)以10^-6(ppm)的單位給出。NMR的測定是用Bruker AVANCE-400核磁儀或BrukerAVANCENEO500M，測定溶劑為氘代二甲基亞碸(DMSO-d ₆)、氘代氯仿(CDCl₃)、氘代甲醇(CD₃OD)，內標為四甲基矽烷(TMS)。

MS的測定用Agilent 1200/1290 DAD-6110/6120 Quadrupole MS液質聯用儀(生產商：Agilent，MS型號：6110/6120 Quadrupole MS)、waters ACQuity UPLC-QD/SQD(生產商：waters，MS型號：waters ACQuity Qda Detector/waters SQ Detector)或THERMO Ultimate 3000-Q Exactive(生產商：THERMO，MS型號：THERMO Q Exactive)。

高效液相層析法(HPLC)分析使用Agilent HPLC 1200DAD、Agilent HPLC 1200VWD和Waters HPLC e2695-2489高效液相層析儀。

手性HPLC分析測定使用Agilent 1260 DAD高效液相層析儀。

高效液相製備使用Waters 2545-2767、Waters 2767-SQ Detecor2、Shimadzu LC-20AP和Gilson GX-281製備型層析儀。

手性製備使用Shimadzu LC-20AP製備型層析儀。

CombiFlash快速製備儀使用Combiflash Rf200(TELEDYNE ISCO)。

薄層層析矽膠板使用煙臺黃海HSGF254或青島GF254矽膠板，薄層層析法(TLC)使用的矽膠板採用的規格是0.15mm至0.2mm，薄層層析分離純化產品採用的規格是0.4mm至0.5mm。

矽膠管柱層析法一般使用煙臺黃海矽膠200至300目矽膠為載體。

激酶平均抑制率及IC₅₀值的測定用NovoStar酶標儀(德國BMG公司)。

本揭露的已知的起始原料可以採用或按照本領域已知的方法來合成，或可購買自ABCR GmbH & Co.KG，Acros Organics，Aldrich Chemical Company，韶遠化學科技(Accela ChemBio Inc)、達瑞化學品等公司。

實施例中無特殊說明，反應能夠均在氬氣氛或氮氣氛下進行。

氬氣氛或氮氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氬氣或氮氣氣球。

氫氣氛是指反應瓶連接一個約1L容積的氫氣氣球。

加壓氫化反應使用Parr 3916EKX型氫化儀和清藍QL-500型氫氣發生器或HC2-SS型氫化儀。

氫化反應通常抽真空，充入氫氣，反復操作3次。

微波反應使用CEM Discover-S 908860型微波反應器。

實施例中無特殊說明，溶液是指水溶液。

實施例中無特殊說明，反應的溫度為室溫，為20℃至30℃。

實施例中的反應進程的監測採用薄層層析法(TLC)，反應所使用的展開劑，純化化合物採用的管柱層析的沖提劑的體系和薄層層析法的展開劑體系包括：A：二氯甲烷/甲醇體系，B：正己烷/乙酸乙酯體系，C：石油醚/乙酸乙酯體系，溶劑的體積比根據化合物的極性不同而進行調節，也可以加入少量的三乙胺和醋酸等鹼性或酸性試劑進行調節。

實施例1

(R)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮1

第一步

4-氯-6-((4-甲氧基苄基)胺基)-2-甲基嘧啶-5-甲醛1b

將化合物4,6-二氯嘧啶-2-甲基-5-甲醛1a(2g，10.47mmol)，4-甲氧基苄胺(1.5g，10.95mmol)，三乙胺(2.11g，20.85mmol)溶於40mL二氯甲烷中，冰浴下攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮得到粗產物1b(3g)，產率：98.2%，產物不經純化，直接用於下一步反應。

MS m/z(ESI)：292.0[M+1]。

第二步

6-胺基-4-氯-8-(4-甲氧基苄基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮1c

將4-甲氧基苯甲醛(700mg，5.14mmol)，甘胺酸甲酯鹽酸鹽(645mg，5.14mmol)，三乙胺(1.2g，11.86mmol)溶於6mL甲醇中，攪拌反應8小時後，加入化合物1b(1.5g，5.14mmol)，攪拌反應14小時後，加入6mL 70%醋酸，45℃反應14小時，反應液冷卻至室溫，用飽和碳酸氫鈉溶液中和pH至8左右，乙酸乙酯萃取(30mL×2)，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系C純化得到標題化合物1c(260mg)，產率：15.3%。

MS m/z(ESI)：331.1[M+1]。

第三步

6-溴-4-氯-8-(4-甲氧基苄基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮1d

將溴化亞銅(234.2mg，1.63mmol)，亞硝酸異戊酯(191.2mg，1.63mmol)溶於5mL N,N-二甲基甲醯胺中，攪拌0.5小時後，加入化合物1c(180mg，0.54mmol)，攪拌反應14小時，反應液加水淬滅，乙酸乙酯萃取(10mL×3)，無水硫酸鈉乾燥，過濾並濃縮，用管柱層析以沖提劑體系C純化得到標題化合物1d(140mg)，產率：65.1%。

MS m/z(ESI)：394.0[M+1]。

第四步

(R)-6-溴-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-8-(4-甲氧基苄基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮1f

將化合物1d(60mg，0.15mmol)，化合物(R)-2-(3-(1-胺基乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟乙醇鹽酸鹽1e(58mg，0.23mmol，採用專利申請「US20190194192A1」中說明書第105頁的實施例B-5揭露的方法製備而得)，N,N-二異丙基乙胺(370mg，2.86mmol)溶於2mL N,N-二甲基乙醯胺，微波120℃反應2小時。冷卻，反應液減壓濃縮，用薄層層析法的展開劑體系C純化得到標題化合物1f(60mg)，產率：68.3%。

MS m/z(ESI)：577.1[M+1]。

第五步

(R)-6-溴-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮1g

將化合物1f(60mg，103.9μmol)溶於2mL三氟乙酸中，微波72℃反應0.5小時。反應液濃縮，得到標題化合物1g(47mg)，產率：98.9%。

MS m/z(ESI)：456.1[M+1]。

第六步

將化合物1g(47mg，102.7μmol)，化合物2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷(34mg，161.8μmol，上海韶遠試劑有限公司)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(13mg，15.9μmol)和無水碳酸鈉(46mg，434μmol)溶於2mL二噁烷和0.4mL水中，氬氣置換3次，80℃微波反應1小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，用高效液相製備純化所得標題化合物1(15mg)，產率：29.7%。

MS m/z(ESI)：461.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 8.21(s,1H),7.56(td,1H),7.45(td,1H),7.21(t,1H),6.64(tt,1H),5.80(q,1H),4.32(q,2H),4.03(td,2H),3.93(t,2H),2.57(dtd,2H),2.35(s,3H),1.64(d,3H)。

實施例2

(R)-6-(氮雜環丁烷-1-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮2

第一步

(R)-6-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-8-(4-甲氧基苄基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮2b

將化合物1d(130mg，0.33mmol)，化合物(R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙胺鹽酸鹽2a(111.5mg，0.49mmol，採用專利申請「WO2019122129A1」中說明書第141頁的實施例B-5揭露的方法製備而得)，N,N-二異丙基乙胺(638.6mg，4.94mmol)溶於2mL N,N-二甲基乙醯胺，微波120℃反應2小時。冷卻，反應液減壓濃縮，用薄層層析法的展開劑體系C純化得到標題化合物2b(105mg)，產率：58.2%。

MS m/z(ESI)：547.2[M+1]。

第二步

(R)-6-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮2c

將化合物2b(40mg，73.1μmol)溶於2mL三氟乙酸中，微波72℃反應0.5小時。反應液濃縮，得到標題化合物2c(30mg)，產率：96.2%。

MS m/z(ESI)：427.1[M+1]。

第三步

將化合物2c(30mg，70.2μmol)，化合物氮雜環丁烷(12mg，210.7μmol)溶於2mL二甲基亞碸中，依次加入碘化亞銅(13.4mg，70.2μmol)，L-脯胺酸(8.1mg，70.2μmol)，無水磷酸鉀(44.7mg，210.6μmol)，氮氣置換三次，加熱至110℃反應14小時。冷卻，過濾，濾液減壓濃縮，用高效液相製備純化所得標題化合物2(5mg)，產率：17.6%。

MS m/z(ESI)：404.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 7.55(t,1H),7.45(t,1H),7.21(t,1H),7.00(t,1H),5.77(d,1H),4.06(t,3H),2.34(t,2H),2.30(t,3H),2.18-2.15(m,1H),2.04-2.02(m,1H),1.62(d,3H)。

實施例3

(R)-4-((1-(3-胺基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)胺基)-6-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮3

採用實施例1中的合成路線，將第三步原料化合物1e替換為化合物(R)-1-(3-胺基-5-(三氟甲基)苯胺鹽酸鹽(採用專利申請「WO2018115380A1」中說明書第106頁的實施例B-6n揭露的方法製備而得)，製得化合物3(2mg)，產率：4.2%。

MS m/z(ESI)：446.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.19(s,1H),6.98-6.90(m,2H),6.82(s,1H),6.64(s,1H),5.58-5.55(m,1H),4.34-4.32(m,2H),3.95-3.92(m,2H),2.59-2.57(m,2H),2.41(s,3H),1.62(d,3H)。

實施例4

(R)-6-(1-乙醯基-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-4-((1-(3-胺基-5-(三氟甲基)苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮4

採用實施例1中的合成路線，將第三步原料化合物1e替換為化合物(R)-1-(3-胺基-5-(三氟甲基)苯胺鹽酸鹽(採用專利申請「WO2018115380A1」中說明書第106頁的實施例B-6n揭露的方法製備而得)，將第六步化合物2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷替換為化合物1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-基)乙酮，製得化合物4(5mg)，產率：10.6%。

MS m/z(ESI)：487.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.20(s,1H),6.98-6.95(m,2H),6.82(s,1H),6.38(s,1H),5.58-5.55(m,1H),4.25-4.22(m,2H),3.81-3.73(m,2H),2.68-2.66(m,2H),2.41(s,3H),2.19(d,3H),1.62(d,3H)。

實施例5

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮5

採用實施例1中的合成路線，將第三步原料化合物1e替換為化合物 2a，製得化合物5(5mg)，產率：17.7%。

MS m/z(ESI)：431.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.22(s,1H),7.61-7.59(m,1H),7.59-7.58(m,1H),7.27-7.25(m,1H),7.02(s,1H),6.75-6.72(m,1H),5.79-5.78(m,1H),4.35-4.34(m,2H),3.95-3.94(m,2H),2.59-2.56(m,2H),2.35(s,3H),1.66(d,3H)。

實施例6

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-6-(四氫-2H-吡喃-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮6

將化合物5(50mg，116μmol)溶於10mL甲醇中，加入10%的鈀碳催化劑(50mg)，用氫氣置換氣3次，攪拌反應16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液旋乾後用高效液相製備純化得到標題化合物6(10mg)，產率：19.9%。

MS m/z(ESI)：433.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.16(s,1H),7.61-7.58(m,1H),7.50-7.47(m,1H),7.27-7.25(m,1H),7.02(s,1H),5.82-5.78(m,1H),4.10-4.07(m,2H),3.64-3.59(m,2H),3.13-3.11(m,1H),2.35(s,3H),1.88-1.84(m,2H),1.79-1.75(m,2H),1.67(d, 3H)。

實施例7

(R)-6-(1-乙醯基-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-4-((1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮7

採用實施例1中的合成路線，將第六步化合物2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷替換為化合物1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-基)乙酮製得化合物7(15mg)，產率：17.3%。

MS m/z(ESI)：502.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 8.23(d,1H),7.57(t,1H),7.50-7.43(m,1H),7.22(t,1H),6.58-6.35(m,1H),5.81(q,1H),4.24(dq,2H),4.04(td,2H),3.81(t,5.81H),3.75(t,1H),2.68(s,1H),2.60(s,1H),2.37(s,3H),2.18(d,3H),1.65(dd,3H)。

實施例8

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮8

採用實施例1中的合成路線，將第三步原料化合物1e替換為化合物2a，第六步化合物2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷替換為化合物1-甲基-1H-吡唑-4-硼酸，製得化合物8(10mg)，產率：10%。

MS m/z(ESI)：429.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 8.64(s,1H),8.34(s,1H),8.12(s,1H),7.62(t,1H),7.49(t,1H),7.26(t,1H),7.14-6.92(t,1H),5.81(q,1H),3.96(s,3H),2.36(s,3H),1.69(d,3H)。

實施例9

4-(((R)-1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-6-(((R)-四氫呋喃-3-基)氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮9

第一步

4-胺基-6-氯-2-甲基嘧啶-5-甲醛9a

將化合物1a(700mg，3.66mmol)溶於30mL胺的1,4-二噁烷溶液中，攪拌反應14小時。反應液過濾濃縮得到粗產物9a(620mg)，產率：98.6%，產物不經純化，直接用於下一步反應。

MS m/z(ESI)：172.1[M+1]。

第二步

(R)-4-氯-2-甲基-6-((四氫呋喃-3-基)氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮9c

將化合物9a(380mg，2.2mmol)，化合物(R)-2-((四氫呋喃-3-基)氧基)乙酸乙酯9b(482.2mg，2.77mmol，採用公知方法「ACS Medicinal Chemistry Letters,2019,10(6),996-1001」製備而得)，溶於5mL四氫呋喃中，加入第三丁醇鉀(372.8mg，2.77mmol)，70℃反應14小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物9c(110mg)，產率：17.6%。

MS m/z(ESI)：282.1[M+1]。

第三步

將化合物9c(50mg，177.5μmol)，化合物1e(50mg，195.2mmol)，N,N-二異丙基乙胺(68.8mg，532.5mmol)溶於2mL N,N-二甲基乙醯胺，微波120℃反應2小時。冷卻，反應液減壓濃縮，用高效液相製備純化所得標題化合物9(13mg)，產率：15.7%。

MS m/z(ESI)：465.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 7.61(s,1H),7.60-7.54(m,1H),7.49-7.42(m,1H),7.21(t,1H),5.80(q,1H),5.13(ddt,1H),4.13-3.96(m,5H),3.92(td,4.2Hz,1H),2.36(s,3H),2.30(td,1H),2.27-2.21(m,1H),1.66(d,3H)。

實施例10

4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-6-(((S)-四氫呋喃-3-基)氧基)吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮10

採用實施例9中的合成路線，將第三步原料化合物1e替換為化合物2a，製得化合物10(31mg)，產率：42%。

MS m/z(ESI)：435.1[M+1]。

1H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 7.61-7.59(m,2H),7.50-7.47(m,1H),7.26-7.23(m,1H),7.13-6.91(t,1H),5.79-5.78(m,1H),5.14(m,1H),4.06-3.92(m,4H),2.34(s,3H),2.32-2.21(m,2H),1.67-1.66(d,3H)。

實施例11

4-(((R)-1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1s,4S)-4-羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮11-p1

4-(((R)-1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1r,4R)-4-羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮11-p2

第一步

4-(((R)-1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(4-羥基環己烷-1-烯-1-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮11a

將化合物1g(100mg，284.3μmol)，化合物3,6-二氫-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-2H-吡喃(76.5mg，341.2μmol，上海韶遠)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(23.1mg，28.4μmol)和無水碳酸鈉(55mg，518.3μmol)溶於5mL二噁烷和1mL水中，氬氣置換3次，80℃微波反應1小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物11a(90mg)，產率：66.7%。

MS m/z(ESI)：475.1[M+1]。

第二步

4-(((R)-1-(3-(1,1-二氟-2-羥乙基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1s,4S)-4- 羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮11-p1

將化合物11a(40mg，84.3mmol)溶於甲醇(10mL)，加入10%的鈀碳催化劑(30mg)，氫氣置換三次，攪拌反應16小時。用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用高效液相製備純化得到標題化合物5mg和8mg，產率：12.4%，19.9%。

單一構型化合物(較短保留時間)(5mg，12.4%)

MS m/z(ESI)：477.2[M+1]。

HPLC分析：保留時間10.2分鐘，純度：98.5%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-95%)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：8.15(s,1H),7.58-7.56(m,1H),7.48-7.46(m,1H),7.24-7.21(m,1H),5.80(q,1H),4.06-4.01(m,2H),3.65-3.62(m,1H),2.66-2.61(m,1H),2.36(s,3H),2.11-2.09(m,2H),2.00-1.98(m,2H),1.65-1.45(m,7H)。

單一構型化合物(較長保留時間)(8mg，19.9%)

MS m/z(ESI)：477.2[M+1]。

HPLC分析：保留時間10.89分鐘，純度：97.2%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-95%)。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：8.15(s,1H),7.60-7.58(m,1H),7.47-7.45(m,1H),7.24-7.21(m,1H),5.82(q,1H),4.10-4.04(m,3H),2.91-2.87(m,1H),2.36(s,3H),1.96-1.60(m,11H)。

實施例12

(R)-6-(1-乙醯基-4-羥基哌啶-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮12

第一步

(R)-6-(1-乙醯基-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮12a

將化合物2c(100mg，234.1μmol)，化合物1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-基)乙酮(71mg，282.7μmol，上海韶遠)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(26mg，31.8μmol)和無水碳酸鈉(50mg，468μmol)溶於5mL二噁烷和1mL水中，氬氣置換3次，80℃微波反應1小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物12a(100mg)，產率：90.6%。

MS m/z(ESI)：472.1[M+1]。

第二步

將化合物12a(100mg，212.1μmol)溶於二氯甲烷(0.5mL)和異丙醇(5mL)，加入乙醯丙酮錳(27mg，106.7μmol)，苯矽烷(31mg，286μmol)，氧氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液濃縮後用高效液相製備純化所得標題化合物12(30mg)，產率：28.9%。

MS m/z(ESI)：490.1[M+1]。

1H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.36(s,1H),7.62-7.59(m,1H),7.50-7.48(m,1H),7.27-7.24(m,1H),7.13-6.91(t,1H),5.83-5.78(m,1H),4.52-4.49(m,1H),3.87-3.84(m,1H),3.68-3.63(m,1H),3.18-3.12(m,1H),2.36(s,3H),2.34-2.19(m,2H),2.17(s,3H),1.96-1.82(m,2H),1.67-1.65(d,3H)。

實施例13

4-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基環己烷-3-烯-1-甲醯胺13

第一步

4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)環己烷-3-烯乙酸13b

將化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)環己烷-3-烯羧酸甲酯13a(1g，3.76mmol，上海畢得)，一水合氫氧化鋰(631mg，15mmol)溶於10mL四氫呋喃，2mL水，5mL甲醇的混合溶劑中，攪拌反應16小時，滴加2N鹽酸，調節pH至5-6，減壓濃縮至乾，得到標題化合物13b(1.8g)，不經純化直接下一步。

MS m/z(ESI)：251.1[M-1]。

第二步

N,N-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2二氧雜戊硼烷-2-基)環己烷-3-烯乙醯胺13c

將化合物13b(900mg，3.57mmol)，二甲胺鹽酸鹽(349mg，4.28mmol)溶於25mL N,N-二甲基甲醯胺，加入2-(7-偶氮苯并三唑)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯(1.76g，4.64mmol)，N,N-二異丙基乙胺(1.38g，10.71mmol)，攪拌反應16小時，減壓濃縮至乾，用管柱層析以沖提劑體系C純化得到標題化合物13c(800mg)，產率80%。

MS m/z(ESI)：280.1[M+1]。

第三步

將化合物2c(300mg，702.2μmol)，化合物13c(392mg，1.4mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(59mg，70μmol)和無水碳酸鈉(112mg，1.06mmol)溶於30mL二噁烷和3mL水中，氬氣置換3次，100℃反應3小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物13(200mg)，產率：57%。

MS m/z(ESI)：500.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.19(s,1H),7.60(t,1H),7.50(t,1H),7.26(t,1H),7.02(t,1H),6.33-6.30(m,1H),5.81(q,1H),3.18(s,3H),3.05-3.02(m,1H),2.99(s,3H),2.66-2.61(m,1H),2.55-2.46(m,3H),2.40(s,3H),2.00-1.96(m,1H),1.83-1.78(m,1H),1.65(d,3H)。

實施例14

(1S,4s)-4-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-4-羥基-N,N-二甲基環己烷甲醯胺14-p1(1R,4r)-4-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-4-羥基-N,N-二甲基環己烷甲醯胺14-p2

將化合物13(100mg，200μmol)溶於二氯甲烷(0.5mL)和異丙醇(5mL)，加入三(二戊醯甲烷)錳(37mg，146μmol)，苯矽烷(31mg，286μmol)，氧氣置換三次，攪拌反應16小時。反應液減壓濃縮，殘餘物用高效液相製備純化得到標題化合物10mg和15mg，產率：9.6%，14.5%。

單一構型化合物(較短保留時間)(10mg，9.6%)

MS m/z(ESI)：518.1[M+1]。

HPLC分析：保留時間10.6分鐘，純度：98.5%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-95%)。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 8.38(s,1H),7.63(t,1H),7.51(t,1H),7.27(t,1H),7.02(t,1H),5.83(q,1H),3.17(s,3H),2.97(s,3H),2.83-2.78(m,1H),2.36(s,3H),2.33-2.26(m,2H),2.13-2.08(m,2H),1.90-1.87(m,2H),1.69-1.67(m,2H),1.66(d,3H)。

單一構型化合物(較長保留時間)(15mg，14.5%)

MS m/z(ESI)：518.1[M+1]。

HPLC分析：保留時間11.89分鐘，純度：97.2%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-95%)。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 8.30(s,1H),7.63(t,1H),7.50(t,1H),7.27(t,1H),7.03(t,1H),5.83(q,1H),3.17(s,3H),2.98-2.97(m,1H),2.95(s,3H),2.60-2.53(m,2H),2.30(s,3H),2.05-2.00(m,2H),1.91-1.88(m,2H),1.73-1.67(m,2H),1.66(d,3H)。

實施例15

(R)-4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-N,N-二甲基環己烷甲醯胺15

將化合物13(50mg，100μmol)溶於甲醇(5mL)，加入10%的鈀碳催化劑(20mg)，氫氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮後用高效液相製備純化得到標題化合物15(5mg)，產率：10%。

MS m/z(ESI)：502.0[M+1]。

1H NMR(500MHz,CD₃OD)δ 8.13(s,1H),7.62(t,1H),7.50(t,1H), 7.27(t,1H),7.03(t,1H),5.81(q,1H),3.14(s,3H),3.08-3.06(m,1H),2.98(s,3H),2.95-2.91(m,1H),2.35(s,3H),2.05-1.98(m,4H),1.82-1.79(m,4H),1.67(d,3H)。

實施例16

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-二氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-6-嗎啡啉吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮16

將化合物2c(50mg，117μmol)，嗎啡啉(30mg，351μmol)，溶於5mL二甲亞碸中，加入碘化亞銅(22mg，117μmol)，L-脯胺酸(13mg，117μmol)，磷酸鉀(74mg，351μmol)，氮氣置換體系，110℃攪拌反應16小時，過濾，濾液減壓濃縮後用高效液相製備純化得到標題化合物16(20mg)，產率39%。

MS m/z(ESI)：434.0[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 7.60-7.56(m,2H),7.49-7.47(m,1H),7.26-7.23(m,1H),7.02(t,1H),5.81(q,1H),3.90-3.88(m,4H),3.23-3.19(m,4H),2.34(s,3H),1.67(d,3H)。

實施例17

(R)-3-(4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)哌啶-1-基)-3-側氧丙腈17

第一步

4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氫吡啶鹽酸鹽17b

將化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸第三丁酯17a(1g，3.23mmol，上海畢得)溶於4N鹽酸1,4-二噁烷溶液中，攪拌反應3小時。反應液減壓濃縮得到粗產物17b(790mg)，產率：99.4%，產物不經純化，直接用於下一步反應。

MS m/z(ESI)：210.1[M+1]。

第二步

3-側氧-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5,6-二氫吡啶 -1(2H)-基)丙腈17c

將化合物17b(789mg，3.23mmol)，氰基乙酸(302mg，3.55mmol，百靈威)溶解於N,N-二甲基甲醯胺(20mL)中，依次加入2-(7-偶氮苯并三唑)-N,N,N,N-四甲基脲六氟磷酸酯(1.47g，3.86mmol)與N,N-二異丙基乙胺(1.25g，9.67mmol)，攪拌反應16小時。反應液減壓濃縮，殘餘物用管柱層析以沖提劑體系A純化，得到標題化合物17c(800mg)，產率：89%。

MS m/z(ESI)：277.2[M+1]。

第三步

(R)-3-(4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)-3-側氧丙腈17d

將化合物2c(70mg，163.8μmol)，化合物17c(90mg，325.9μmol)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(13mg，15.9μmol)和無水碳酸鈉(34mg，320.8μmol)溶於5mL二噁烷和1mL水中，氮氣置換3次，80℃微波反應1小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物17d(80mg)，產率：98.3%。

MS m/z(ESI)：497.1[M+1]。

第四步

將化合物17d(100mg，201.4μmol)溶於甲醇(10mL)，加入10%的鈀碳催化劑(20mg)，氫氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮後用高效液相製備純化得到標題化合物17(10mg)，產率：10%。

MS m/z(ESI)：499.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.15(s,1H),7.57(t,1H),7.47(t,1H),7.23(t,1H),7.00(t,1H),5.76(qd,1H),4.71-4.66(m,2H),3.90(ddd,1H),3.37-3.32(m,1H),3.28(d,1H),3.12(tt,1H),2.83(td,1H),2.33(d,3H),2.10-2.00(m,1H),1.98-1.91(m,1H),1.73-1.61(m,5H)。

實施例18

4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1s,4S)-1,4-二羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮18-p1

4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1r,4R)-1,4-二羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮18-p2

第一步

(E)-3-(4-胺基-6-氯-2-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸甲酯18a

將化合物9a(5.8g，33.8mmol)，甲氧甲醯基亞甲基三苯基膦(11.3g，33.8mmol，上海畢得)溶解於四氫呋喃(100mL)中，70℃攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮，殘餘物用管柱層析以沖提劑體系A純化，得到標題化合物18a(6g)，產率：78%。

MS m/z(ESI)：228.2[M+1]。

第二步

(R,E)-3-(4-胺基-6-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基嘧啶-5-基)丙烯酸甲酯18b

將化合物18a(1g，4.39mmol)，化合物2a(1.09g，4.83mmol)，N,N-二異丙基乙胺(1.7g，13.1mmol)溶於2mL二甲亞碸中，微波130℃反應5小時。冷卻，反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，減壓濃縮，得到標題化合物18b(1.5g)粗產物，產率：89.8%，不經純化直接用於下一步反應。

MS m/z(ESI)：381.1[M+1]。

第三步

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮18c

將化合物18b(1.5g，3.94mmol)溶於甲醇(30mL)中，加入甲醇鈉(425mg，7.88mmol)，回流反應3小時。反應液減壓濃縮，殘餘物用管柱層析以沖提劑體系C純化，得到標題化合物18c(0.9g)，產率：65.5%。

MS m/z(ESI)：349.2[M+1]。

第四步

將化合物18c(1.8g，5.16μmol)溶解於四氫呋喃(50mL)中，加入N-溴代丁二醯亞胺(1.38g，7.75mmol)，40℃反應2小時。反應液降至室溫，加入飽和硫硫酸鈉淬滅，用乙酸乙酯萃取(20mL×3)，合併有機相，減壓濃縮，殘餘物用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物2c(1.1g)，產率：49.8%。

MS m/z(ESI)：428.2[M+1]。

第五步

4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(4-羥基環己基-1-烯-1-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮18d

將化合物2c(850mg，1.98mmol)，化合物4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)環己-3-烯醇(891.7mg，3.98mmol，上海韶遠)，[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯化鈀二氯甲烷絡合物(162.3mg，198.9μmol)和無水碳酸鈉(421.7mg，3.98mmol)溶於5mL二噁烷和1mL水中，氮氣置換3次，80℃反應14小時。冷卻至室溫，用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮，殘餘物用用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物18d(550mg)，產率：62.1%。

MS m/z(ESI)：445.2[M+1]。

第六步

將化合物18d(100mg，224.9μmol)溶於二氯甲烷(0.5mL)和異丙醇(5mL)，加入三(二戊醯甲烷)錳(40.8mg，67.4μmol)，苯矽烷(73mg，674μmol)，氧氣置換三次，攪拌反應16小時。反應液減壓濃縮，殘餘物用高效液相製備純化得到標題化合物18-p1(16mg)和18-p2(20mg)，產率：15.3%，19.2%。

單一構型化合物18-p1(較短保留時間)(16mg，15.3%)

MS m/z(ESI)：463.1[M+1]。

HPLC分析：保留時間11.2分鐘，純度：98.5%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mM碳酸氫銨)30%-50%)。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.35(s,1H),7.60(t,1H),7.50(d,1H),7.25(t,1H),7.14-6.92(t,1H),5.81(q,1H),3.67(tt,1H),2.35(s,3H),2.19(td,2H),1.95-1.81(m,6H),1.66(d,3H)。

單一構型化合物18-p2(較長保留時間)(20mg，19.2%)

MS m/z(ESI)：463.1[M+1]。

HPLC分析：保留時間12.1分鐘，純度：99.2%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-50%)。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.30(s,1H),7.60(t,1H),7.48(t,1H),7.25(t,1H),7.14-6.92(t,1H),5.81(q,1H),4.06(s,1H),2.34(d,5H),2.09(t,2H),1.83(s,2H),1.68(dd,5H)。

實施例19

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(4-羥基四氫-2H-吡喃-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮19

採用實施例12中的合成路線，將第一步原料化合物1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷-2-基)-5,6-二氫吡啶-1(2H)-基)乙酮替換為化合物2-(3,6-二氫-2H-吡喃-4-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜戊硼烷(上海畢得)，製得標題化合物19(38mg)，產率：77.6%。

MS m/z(ESI)：449.1[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.34(s,1H),7.62-7.59(m,1H),7.50-7.48(m,1H),7.27-7.24(m,1H),7.13-6.92(t,1H),5.83-5.79(m,1H),4.02-3.97(m,2H), 3.87-3.84(m,2H),2.42-2.37(m,2H),2.36(s,3H),1.82-1.80(m,2H),1.67-1.66(d,3H)。

實施例20

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(1-(2-甲氧基乙醯基)哌啶-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮20

第一步

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(1-(2-甲氧基乙醯基)-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮20a

採用實施例17中的合成路線，將第二步原料化合物氰基乙酸替換為化合物甲氧基乙酸，製得標題化合物20a(90mg)，產率：87.5%。

MS m/z(ESI)：502.1[M+1]。

第二步

將化合物20a(80mg，179.4μmol)溶於甲醇(10mL)，加入10%的鈀碳催化劑(20mg)，氫氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液減壓濃縮後用高效液相製備純化得到標題化合物20(15mg)，產率：16.5%。

MS m/z(ESI)：504.1[M+1]。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：8.15(s,1H),7.60-7.59(m,1H),7.50-7.49(m,1H),7.26-7.23(m,1H),7.13-7.03(m,1H),5.80(q,1H),4.72-4.70(m,1H),4.60(s,2H),4.26-4.20(m,2H),4.04-4.01(m,1H),3.37(s,3H),3.17-3.12(m,2H),2.83-2.78(m,1H),2.35(s,3H),2.04-1.96(m,2H),1.66(d,3H)。

實施例21

(R)-3-(4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-4-羥基哌啶-1-基)-3-側氧丙腈21

將化合物17d(130mg，261.8μmol)溶於二氯甲烷(0.5mL)和異丙醇(5mL)，加入乙醯丙酮錳(31.6mg，52.3μmol)，苯矽烷(56.6mg，523.6μmol)，氧氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液濃縮後用高效液相製備純化所得標題化合物21(20mg)，產率：14.8%。

MS m/z(ESI)：515.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 8.37(s,1H),7.60(t,1H),7.48(t,1H),7.25(t,1H),7.01(t,1H),5.80(q,1H),4.61(s,2H),4.52-4.43(m,1H),3.72-3.64(m,2H), 3.22(td,1H),2.38(dd,1H),2.36(s,3H),2.32(dt,1H),1.93(dt,1H),1.84(ddt,1H),1.66(d,3H)。

實施例22

rac-(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(1-(2-氟乙醯基)-4-羥基哌啶-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮22

第一步

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-(1-(2-氟乙醯基)-1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮22a

採用實施例17中的合成路線，將第二步原料化合物氰基乙酸替換為化合物氟乙酸(European Journal of Organic Chemistry,2014,2014,12,2451-2459)，製得標題化合物22a(120mg)，產率：87.5%。

MS m/z(ESI)：490.1[M+1]。

第二步

將化合物22a(120mg，245.2μmol)溶於二氯甲烷(0.5mL)和異丙醇 (5mL)，加入乙醯丙酮錳(74.1mg，122.5μmol)，苯矽烷(53mg，490μmol)，氧氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液濃縮後用高效液相製備純化所得標題化合物22(20mg)，產率：16%。

MS m/z(ESI)：508.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,DMSO-d ₆)：δ 8.44(d,1H),7.68(t,1H),7.50(d,1H),7.36-7.28(m,1H),7.18(d,1H),5.76(t,1H),5.56(s,1H),5.36-5.01(m,2H),4.30(d,1H),3.42(s,2H),3.01(s,1H),2.27(s,3H),2.00(d,1H),1.57(d,3H),1.27(d,2H)。

實施例23

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1,1-二氧基四氫-2H-硫吡喃-4-基)氧基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮23

第一步

2-((1,1-二氧基四氫-2H-硫吡喃-4-基)氧基)乙酸乙酯23b

將化合物4-羥基四氫-2H-硫吡喃1,1-二氧化物23a(1g，6.65mmol，上海畢得)溶於四氫呋喃(20mL)，冰浴下加入氫化鈉(399.4mg，9.98mmol)，保持溫度攪拌0.5小時，再加入溴乙酸乙酯(1.1g，6.65mmol)，自然升至室溫反應14小時，反應液中加入水淬滅，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相減壓濃縮，用矽膠管柱層析法以沖提劑體系C純化得到標題化合物23b(200mg)，產率：12.7%。

MS m/z(ESI)：237.2[M+1]。

第二步

採用實施例9中的合成路線，將第二步原料化合物9b換為化合物23b，將第三步原料化合物1e換為化合物2a，製得標題化合物23(5mg)，產率：11.5%。

MS m/z(ESI)：497.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)δ 7.59(s,1H),7.51(t,1H),7.28(s,1H),7.23(t,1H),6.93(t,1H),5.79(s,1H),5.00(s,1H),3.48(td,2H),3.00(d,2H),2.53(s,3H),2.48(s,2H),2.39(t,2H),1.73(d,3H)。

實施例24

6-(((S)-1-乙醯吡咯烷-3-基)氧基)-4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮24

第一步

(R)-1-乙醯吡咯烷-3-基4-甲基苯磺酸酯24b

將(R)-1-(3-羥基吡咯烷-1-基)乙酮24a(1g，7.74mmol)，4-二甲胺基吡啶(95mg，0.77mmol)，三乙胺(1.5g，14.8mmol)溶於20mL二氯甲烷中，加入4-甲苯磺醯氯(1.7g，8.9mmol)，攪拌反應3小時，反應液減壓濃縮後，殘餘物用管柱層析以沖提劑體系C純化得到標題化合物24b(800mg)，產率36.4%。

MS m/z(ESI)：284.0[M+1]。

第二步

6-(苄氧基)-4-氯-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮24c

將化合物9a(300mg，1.74mmol)，化合物2-苄氧基乙酸乙酯(425mg， 2.18mmol，上海韶遠)溶於5mL四氫呋喃中，加入第三丁醇鉀(246mg，2.19mmol)，回流反應3小時。冷卻至室溫，反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系C純化得到標題化合物24c(200mg)，產率：37.9%。

MS m/z(ESI)：302.1[M+1]。

第三步

(R)-6-(苄氧基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮24d

將化合物24c(200mg，662.8μmol)，化合物2a(130mg，687.2mmol)，N,N-二異丙基乙胺(172mg，1.33mmol)溶於2mL二甲亞碸，微波120℃反應2小時。冷卻，反應液中加入水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物24d(210mg)，產率：69.7%。

MS m/z(ESI)：455.1[M+1]。

第四步

(R)-(6-(苄氧基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯24e

將化合物24d(180mg，396mmol)，4-二甲胺基吡啶(50mg，0.40mmol)，溶於10mL二氯甲烷中，加入二碳酸二第三丁酯(100mg，0.45mmol)，攪拌反應14小時，反應液加入水，用乙酸乙酯萃取(10mL×3)，合併有機相，無水硫酸鈉乾燥，過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系C純化得到標題化合物24e(100mg)，產率：45.5%。

MS m/z(ESI)：555.2[M+1]。

第五步

(R)-(1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)(6-羥基-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)胺基甲酸第三丁酯24f

將化合物24e(100mg，180.3μmol)溶於甲醇(10mL)，加入10%的鈀碳催化劑(20mg)，氫氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液用矽藻土過濾，濾液旋乾後得到標題化合物24f(80mg)，產率：95.5%。

MS m/z(ESI)：465.1[M+1]。

第六步

(6-(((S)-1-乙醯吡咯烷-3-基)氧基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-4-基)((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基甲酸第三丁酯24g

將化合物24f(80mg，172.2μmol)溶於N,N-二甲基甲醯胺(5mL)，加入碳酸鉀(24mg，173.6mmol)和24b(45mg，158.8μmol)，加熱至60℃反應1小時。冷卻，過濾，濾液減壓濃縮，用管柱層析以沖提劑體系A純化得到標題化合物24g(50mg)，產率：50.4%。

MS m/z(ESI)：576.0[M+1]。

第七步

將化合物24g(50mg，86.8μmol)溶於2mL二氯甲烷中，加入1mL三氟醋酸酸，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮後殘餘物用5mL二氯甲烷和1mL甲醇溶解，加入固體碳酸氫鈉，攪拌10分鐘後，調節Ph至鹼性，過濾濃縮後用高效液相製備純化得到標題化合物24(3.2mg)，產率：7.7%。

MS m/z(ESI)：476.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CD₃OD)：δ 7.90-7.88(m,1H),7.67-7.64(m,1H),7.54-7.51(m,1H),7.30-7.27(m,1H),7.13-6.91(t,1H),5.87-5.86(m,1H),5.23-5.16(m,1H),3.95-3.57(m,4H),2.47(s,3H),2.46-2.14(m,2H),2.13-2.11(d,3H),1.73-1.71(d,3H)。

實施例25

rac-4-(((R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氫苯并呋喃-7-基)乙基)胺基)-6-((1s,4S)-1,4-二羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮25-p1

rac-4-(((R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氫苯并呋喃-7-基)乙基)胺基)-6-((1r,4R)-1,4-二羥基環己基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮25-p2

採用實施例18中的合成路線，將第二步原料化合物2a替換為化合物rac-(R)-1-(3,3-二氟-2,3-二氫苯并呋喃-7-基)乙胺鹽酸鹽(採用專利申請「US20190194192A1」中說明書第105頁的實施例B-5揭露的方法製備而得)，製得標題化合物25-p1(8mg)和25-p2(15mg)，產率：3.8%，7.2%。

單一構型化合物25-p1(較短保留時間)(8mg，3.8%)

MS m/z(ESI)：473.1[M+1]。

HPLC分析：保留時間10.5分鐘，純度：98.5%(層析管柱：SharpSil-T， Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-50%)。

H NMR(400MHz,CD₃OD)：8.31(s,1H),7.52-7.42(m,2H),7.08-7.05(m,1H),5.73(q,1H),4.74(t,2H),3.68-3.63(m,1H),2.37(s,3H),2.23-2.20(m,2H),1.91-1.84(m,6H),1.64(d,3H)。

單一構型化合物25-p2(較長保留時間)(15mg，7.2%)

MS m/z(ESI)：473.1[M+1]。

HPLC分析：保留時間11.3分鐘，純度：99.2%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：水(10mmol/L碳酸氫銨)/乙腈，梯度配比：水(10mmol/L碳酸氫銨)30%-50%)。

¹H NMR(400MHz,CD₃OD)：8.27(s,1H),7.52-7.42(m,2H),7.08-7.05(m,1H),5.74(q,1H),4.74(t,2H),4.06-4.05(m,1H),2.37-2.30(m,5H),2.12-2.06(m,2H),1.82-1.64(m,7H)。

實施例26

rac-(R)-6-((1-乙醯氮雜環丁烷-3-基)氧基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮26

第一步

3-(2-甲氧基-2-氧乙氧基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯26b

將3-羥基氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯26a(1g，5.77mmol，上海畢得)溶於四氫呋喃(20mL)，冰浴下加入氫化鈉(132.7mg，5.77mmol)，保持溫度攪拌0.5小時，再加入溴乙酸乙酯(883.2g，5.77mmol)，自然升至室溫反應14小時，反應液中加入水，二氯甲烷萃取(20mL×3)，合併有機相減壓濃縮，用矽膠管柱層析法以沖提劑體系C純化得到標題化合物26b(1g)，產率：70.6%。

MS m/z(ESI)：246.2[M+1]。

第二步

(R)-3-((4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)氧基)氮雜環丁烷-1-羧酸第三丁酯26c

採用實施例9中的合成路線，將第二步原料化合物9b換為化合物26b，將第三步原料化合物1e換為化合物2a，製得標題化合物26c(200mg)，產率：39.2%

MS m/z(ESI)：520.2[M+1]。

第三步

(R)-6-(氮雜環丁烷-3-基氧基)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮26d

將化合物26c(53mg，102μmol)溶於2mL二氯甲烷中，加入1mL三氟醋酸酸，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮後得到粗產物26d(40mg)，產率：93.5%，產物不經純化，直接用於下一步反應。

MS m/z(ESI)：420.2[M+1]。

第四步

將化合物26d(20mg，47.68μmol)和乙酸酐(4.9mg，47.68μmol)溶於2mL N,N-二甲基甲醯胺中，加入2-(7-偶氮苯并三唑)-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯(35.9mg，152.6mmol)，N,N-二異丙基乙胺(19.7mg，152.6mmol)，攪拌反應2小時。反應液減壓濃縮後用高效液相製備純化得到標題化合物26(10mg)，產率：45.4%。

MS m/z(ESI)：462.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)：δ 7.54(q,1H),7.51-7.46(m,1H),7.24-7.13(m,2H),6.63(t,1H),5.78(tt,1H),5.10(dddd,1H),4.52(dt,1H),4.43(ddd,2H),4.07(d,1H),2.49(s,3H),1.91(d,3H),1.64(t,3H)。

實施例27

(R)-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1-(2-氟乙醯基)壬二酸-3-基)氧基)-2-甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮27

採用實施例26中的合成路線，將第四步原料化合物乙酸酐替換為2-氟乙酸，製得標題化合物27(10mg)，產率：27.3%。

MS m/z(ESI)：480.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,CDCl₃)：δ 7.57-7.46(m,2H),7.25-7.13(m,1H),7.10-6.80(m,2H),6.16-5.94(m,1H),5.84-5.67(m,1H),5.22-5.10(m,1H),4.97-4.74(m,2H),4.74-4.58(m,1H),4.56-4.35(m,2H),4.25-4.10(m,1H),2.47(s,3H).1.7-1.62(m,3H)。

實施例28

4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1s,4S)-1,4-二羥基環己基)-2,8-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮28-p1

4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-6-((1r,4R)-1,4-二羥基環己基)-2,8-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮28-p2

第一步

(R)-6-溴-4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2,8-二甲基吡啶并[2,3-d]嘧啶-7(8H)-酮28a

採用實施例1中的合成路線，將第一步原料化合物4-甲氧基苄胺替換為甲胺鹽酸鹽，將第四步原料化合物1e替換為化合物2a，製得標題化合物28a(440mg)，產率：95.9%。

MS m/z(ESI)：441.2[M+1]。

第二步

採用實施例18中的第五步和第六步的合成路線，將第五步原料化合物2c替換為28a製得標題化合物28-p1(17mg)，28-p2(10mg)，產率：4.8%，2.8%。

單一構型化合物28-p1(較短保留時間)(17mg，4.8%)

MS m/z(ESI)：477.2[M+1]。

HPLC分析：保留時間11.3分鐘，純度：98.5%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：A-水(10mM碳酸氫銨)B-乙腈，梯度配比：A20%-55%)。

¹H NMR(500MHz,Methanol-d ₄)：δ 8.22(s,1 H),7.50(t,1 H),7.38(t,1 H),7.14(t,1 H),6.92(t,1 H),5.71(q,1 H),3.66-3.51(m,4 H),2.30(s,3 H),2.11-2.07(m,2 H),1.89-1.70(m,6 H),1.56(d,3 H)。

單一構型化合物28-p2(較長保留時間)(10mg，2.8%)

MS m/z(ESI)：477.2[M+1]。

HPLC分析：保留時間13.1分鐘，純度：97.2%(層析管柱：SharpSil-T，Prep 30*150mm；5μm；流動相：A-水(10mM碳酸氫銨)B-乙腈，梯度配比：A 20%-55%)。

¹H NMR(500MHz,Methanol-d ₄)：δ 8.28(s,1 H),7.60(t,1 H),7.49(t,1 H),7.25(t,1 H),7.02(t,1 H),5.82(q,1 H),4.07(t,1 H),3.72(s,3 H),2.41(s,3 H),2.32(qd,4 H),2.15-2.01(m,4 H),1.67(d,3 H)。

實施例29

(R)-4-(4-((1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-4-羥基-N-甲基環己烷-1-甲醯胺29

第一步

4-(4-(((R)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙基)胺基)-2-甲基-7-側氧-7,8-二氫吡啶并[2,3-d]嘧啶-6-基)-N-甲基環己-3-烯-1-甲醯胺29a

採用實施例13中的合成路線，將第二步原料化合物二甲胺鹽酸鹽替換為化合物甲胺鹽酸鹽，製得標題化合物29a(40mg)，產率：35.1%。

MS m/z(ESI)：486.2[M+1]。

第二步

將化合物29a(40mg，82.3μmol)溶於二氯甲烷(0.5mL)和異丙醇(5mL)，加入三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚烯酸)錳(15mg，24.7μmol)，苯矽烷(26.7mg，247.1μmol)，氧氣置換三次，攪拌反應16小時。將反應液濃縮後用高效液相製備純化所得標題化合物29(3mg)，產率：7.2%。

MS m/z(ESI)：504.2[M+1]。

¹H NMR(500MHz,Methanol-d ₄)：δ 8.28(s,1H),7.61(t,1H),7.49(t,1H),7.26(t,1H),7.19-6.84(t,1H),5.81(q,1H),2.75(s,3H),2.54-2.40(m,2H),2.36(s,3H),2.20(d,1H),2.13-2.02(m,2H),1.92(d,1H),1.84(dd,2H),1.74(d,1H),1.67(d,3H)。

測試例：

生物學評價

測試例1、本揭露化合物抑制KRAS蛋白各亞型G12D或G12V與SOS1蛋白間的相互作用能力。

以下方法用來測定化合物抑制KRAS蛋白各亞型G12D或G12V與SOS1蛋白間的相互作用能力。實驗方法簡述如下：

一、實驗材料及儀器

1. 生物素標記試劑盒(Dojindo,LK03)

2. GDP(SIGMA,G7127)

3. AlphaLISA谷胱甘肽受體珠(Glutathione Acceptor Beads)(PerkinElmer,AL109C)

4. AlphaScreen鏈黴親和素供體珠(Streptavidin Donor Beads)(PerkinElmer,6760002S)

5. 384-孔微孔板(PerkinElmer,6007290)

6. BSA(上海生工，A600332-0100)

7. 吐溫-20(Diamond,A100777-0500)

8. GST-TEV-SOS1(564-1049)(維亞生物科技，SOS1-191010)

9. KRas G12D和KrasG12V(由上海磐超生物科技有限公司生產提供)

10. 磷酸鹽緩衝體液(PBS)PH7.4(上海源培生物科技股份有限公司，B320)

11. 多功能酶標儀(PerkinElmer,Envision)

二、實驗步驟

實驗準備：

1. 實驗開始之前先配製實驗緩衝體：1 x PBS+0.1%BSA+0.05%吐溫20。

2. KRAS G12D和KRAS-G12V蛋白用生物素標記試劑盒进行生物素標記。

實驗步驟：

1. 先將生物素標記後的KRAS G12D或KRAS G12V蛋白分别與SOS1蛋白和GDP混合孵育備用。

2. 將AlphaLISA谷胱甘肽受体珠和AlphaScreen链鏈黴親和素供體珠在使用前1：1混合成40μg/mL備用。

3. 將化合物用實驗緩衝體配製成起始濃度为40μM，5倍梯度稀释，10个梯度系列濃度點。

4. 在384-孔微孔板孔板中，每孔加入10μl KRAS G12D或KRAS G12V蛋白與SOS1和GDP混合物和5μl稀釋好的化合物，室溫，避光孵育30分鐘。

5. 然後每孔加入5μl AlphaLISA谷胱甘肽受體珠和AlphaScreen鏈黴親和素供體珠混合物，室溫，避光孵育60分鐘。

6. 在多功能酶標儀上讀取螢光值。

7. 用Graphpad Prism計算得到化合物的IC₅₀值。

三、實驗數據

本揭露化合物抑制KRAS蛋白各亞型G12D或G12V與SOS1蛋白間的相互作用能力，測得的IC₅₀值見表1。

表1 本揭露化合物抑制KRAS蛋白各亞型G12D或G12V與SOS1蛋白間的相互作用能力的IC₅₀值。

結論：本揭露化合物能很好的抑制KRAS蛋白各亞型G12D或G12V與SOS1蛋白間的相互作用。

測試例2：H358細胞ERK磷酸化抑制實驗生物學評價

一、測試目的

本實驗藉由檢測化合物對細胞ERK磷酸化抑制作用，根據IC₅₀大小評價本揭露化合物對KRAS靶點(含G12C突變)的抑制作用。

二、實驗方法

H358細胞(ATCC，CRL-5807)用含有10%胎牛血清的RPMI1640(Hyclone，SH30809.01)完全培養基進行培養。實驗第一天，使用完全培養基將H358細胞以25,000個/孔的密度種於96孔板，每孔190μL細胞懸液，放置37℃，5% CO₂細胞培養箱培養過夜。第二天，每孔加入10μL用完全培養基配製的梯度稀釋的待測化合物，化合物的終濃度是從10μM開始進行5倍梯度稀釋的9個濃度點，設置含有0.1% DMSO的空白對照，孔板放置37℃，5% CO₂的細胞培養箱孵育1個小時。1小時後，取出96孔細胞培養板，吸掉培養基，每孔加入200μL PBS(上海源培生物科技股份有限公司，B320)洗一遍。吸掉PBS，每孔加入50μL含封閉液(blocking reagent，Cisbio，64KB1AAC)的裂解緩衝液(lysis buffer，Cisbio，64KL1FDF)，孔板放置振盪器上室溫震盪裂解40分鐘。裂解後用移液器吹打混勻，每孔各轉移16μL裂解液分別至兩塊HTRF 96孔檢測板(Cisbio，66PL96100)中，之後兩塊板分別加入4μL預混的phospho-ERK1/2抗體溶液(Cisbio，64AERPEG)或4μL預混的total-ERK1/2抗體溶液(Cisbio，64NRKPEG)。微孔板用封板膜密封，在微孔板離心機中離心1分鐘，室溫避光孵育過夜。第三天，使用PHERAstar多功能酶標儀(BMG Labtech，S/N 471-0361)讀取337nm波長激發，665nm和620nm波長發射的螢光值。

三、數據分析

用Graphpad Prism軟件根據化合物濃度和pERK/total ERK的比值計算化合物抑制活性的IC₅₀值，結果參見下表2。

表2 H358細胞ERK磷酸化抑制活性數據

結論：本揭露化合物對H358細胞ERK磷酸化具有很好的抑制活性。

測試例3：H358細胞增殖抑制實驗生物學評價

一、測試目的

藉由測試本揭露化合物對H358細胞的增殖抑制作用，評價本揭露化合物對KRAS靶點(含G12C突變)的抑制作用。

二、實驗方法

H358細胞(ATCC，CRL-5807)用完全培養基即含有10%胎牛血清(Corning，35-076-CV)的RPMI1640培養基(Hyclone，SH30809.01)進行培養。實驗第一天，使用完全培養基將H358細胞以1500個細胞/孔的密度種於96孔低吸附板(Corning，CLS7007-24EA)，每孔90μL細胞懸液，2000rpm室溫離心5分鐘後放置37℃，5% CO₂細胞培養箱培養過夜。第二天，每孔加入10μL用完全培養基配製的梯度稀釋的待測化合物，化合物的終濃度是從10μM開始進行5倍梯度稀釋的9個濃度點，設置含有0.1% DMSO的空白對照，孔板放置37℃，5% CO₂的細胞培養箱培養120小時。第七天，取出96孔細胞培養板，每孔加入50μL CellTiter-Glo® 3D Reagent(Promega，G9682)，室溫震盪25分鐘後，吹吸混勻並取出50ul轉移至白色不透底的96孔板(PE，6005290)中，使用多功能微孔板酶標儀(PerkinElmer，VICTOR 3)讀取發光信號值。

三、數據分析

用Graphpad Prism軟件計算化合物抑制活性的IC₅₀值，結果參見下表3。

表3 H358細胞增殖抑制活性數據

結論：本揭露化合物對H358細胞增殖具有很好的抑制作用。

測試例4：本揭露化合物對人肝微粒體CYP450酶的抑制作用

本揭露化合物對人肝微粒體CYP450酶的抑制作用採用如下實驗方法測定：

一、實驗材料及儀器

1. 磷酸緩衝液(20×PBS，購買自生工)；

2. NADPH(ACROS，A2646-71-1)；

3. 人肝微粒體(Corning Gentest，Cat No，452161，Lot No.905002,Donor35)；

4. ABI QTrap4000液质两用仪(AB Sciex)；

5. ZORBAX Extend-C18,3×50mm,3.5μm(美国安捷伦公司)；

6. CYP探針底物。

二、實驗步驟

1. 溶液配製

1)100mM磷酸緩衝液(PBS)的配製

取50mL濃度為2000mM的PBS溶液，加超純水950mL，稀釋至1000mL，混合均勻，再用pH計調溶液的pH至7.4，即得pH 7.4的PBS溶液，放置4℃冰箱保存(保存期限為6個月)。

2)NADPH溶液的配製

精密稱取NADPH粉末適量，加入PBS緩衝溶液溶解，配成濃度為5mM的溶液，備用(現配現用)。

3)肝微粒體溶液的配製

取人肝微粒體儲存液(濃度為20mg/mL)適量，用濃度為7.5mM的MgCl₂溶液稀釋至0.25mg/mL微粒體溶液，備用(現配現用)。

4)MgCl₂溶液的配製

稱取MgCl₂粉末適量，用PBS溶液配置成300mM的儲備液，置於4℃冰箱保存，備用。精密該溶液適量，加入100mM PBS溶液稀釋成7.5mM的工作液，即可(現配現用)。

5)受試化合物溶液的製備

a. 精密稱取適量的受試化合物標準品，加入DMSO配成濃度為30mM的儲備液，置於4℃冰箱保存。

b. 精密移取該儲備液適量，加入DMSO溶液適量稀釋成濃度為10、3、1、0.3、0.03和0.003mM的系列溶液I。精密移取上述系列溶液I適量，加入乙腈適量稀釋成濃度為3、1、0.3、0.1、0.03、0.003、0.0003mM的系列溶液II。精密移取上述系列溶液II適量，加入PBS適量稀釋成濃度為150、50、15、5、1.5、0.15、0.015μM的工作液，備用。

6)CYP探針底物和選擇性抑制劑的選擇

a. 探針底物儲備液的配製：稱取各探針底物適量，加入DMSO配製成儲備液，其濃度如下表4所示。

b. 探針底物工作液的配製：精密移取探針底物儲備液適量，加入PBS溶液稀釋200倍，得探針底物工作液，其濃度如下表4所示。

表4：

2. 肝微粒體孵育及樣品製備

反應體系中蛋白濃度，底物和抑制劑的濃度如下表5所示。

表5：

3. 操作過程

1)精密移取人肝微粒體溶液(0.25mg/mL)40μL，探針底物溶液20μL和受試化合物溶液20μL於96孔板中，在37℃水浴中預孵育5分鐘。

2)預孵育5分鐘後取出，加入20μL濃度為5mM的NADPH溶液，啟動反應，在37℃水浴中孵育30分鐘。每個樣本平行兩份。

3)孵育結束後，加入250μL含內標的乙腈溶液終止反應，800rpm搖10分鐘後，3700rpm離心10分鐘，精密移取上清液100μL加入80μL蒸餾水稀釋，並於800rpm搖10分鐘，吸取上清液進行LC-MS/MS分析。

數值經Graphpad Prism計算分別得到藥物對人肝微粒體CYP2C19 (S)-美芬妥英4’-羥基化和CYP3A4M咪達唑侖1-羥基化代謝抑制的IC₅₀值見表6。

表6：本揭露化合物對CYP2C19(S)-美芬妥英代謝位點和人肝微粒體CYP3A4M咪達唑侖代謝位點的IC₅₀值

結論：本揭露化合物30μM濃度範圍內不會發生基於CYP2C19(S)-美芬妥英4’-羥基化和CYP3A4M咪達唑侖1-羥基化代謝位點的代謝藥物相互作用。

測試例5：本揭露化合物對hERG鉀離子通道的作用

一、测试目的

应用手動膜片钳技術在转染hERG钾通道的稳定细胞株上测试本公开化合物对hERG钾电流的阻断作用

二、測試方法

1.細胞培養

本試驗所用的細胞為轉染有hERG cDNA與穩定表達hERG通道的CHO細胞系(由丹麥Sophion Bioscience公司提供)，細胞代數為P5。細胞培養在含有下列成分的培養基中(皆來源於Invitrogen)：Ham’s F12培養基，10%(v/v)滅活的胎牛血清，100μg/mL潮黴素B，100μg/mL遺傳黴素。

CHO hERG細胞生長於含上述培養液的培養皿中，並在37℃、含5% CO₂的培養箱中進行培養。電生理實驗之前24到48小時，CHO hERG細胞被轉移到放置於培養皿中的圓形玻璃片上，並在以上相同的培養液及培養條件下生長。每個圓形玻片上CHO hERG細胞的密度需要達到絕大多數細胞是獨立、單個的要求。

2. 實驗溶液

表7：細胞內液和外液的組成成分

表8：試劑詳細信息

3. 電生理記錄系統

本實驗採用手動膜片鉗系統(HEKA EPC-10信號放大器及數字轉換系統，購自德國HEKA Electronics)作全細胞電流的記錄。表面生長有CHO hERG細胞的圓形玻片被放置於倒置顯微鏡下的電生理記錄槽中。記錄槽內以細胞外液作持續灌流(大約每分鐘1毫升)。實驗過程採用一般一般全細胞膜片鉗電流記錄技術。如無特殊說明，實驗都是在一般一般室溫下進行(~25℃)。細胞鉗制在-80mV的電壓下。細胞鉗制電壓去極化到+20mV以激活hERG鉀通道，5秒後再鉗制到-50mV以消除失活並產生尾電流。尾電流峰值用作hERG電流大小的數值。上述步驟所記錄的hERG鉀電流在記錄槽內持續的細胞外液灌流下達到穩定後則可以疊加灌流待測試的藥物，直到藥物對hERG電流的抑制作用達到穩定狀態。一般以最近的連續3個電流記錄線重合作為判斷是否穩定狀態的標準。達到穩定態勢以後以細胞外液灌流沖洗直到hERG電流回復到加藥物之前的大小。一個細胞上可以測試一個或多個藥物，或者同一種藥物的多個濃度，但是在不同藥物之間需要以細胞外液沖洗。Cisapride(西沙必利，購自Sigma)被用於實驗中作為陽性對照以保證所使用的細胞質量正常。

4. 試驗步驟

為了取得化合物的IC₅₀，選擇下列濃度(30、10、3、1、0.3和0.1μM)來作測試。在試驗之前，用DMSO(Sigma)先將化合物配置為10mM DMSO貯備液，再以梯度稀釋的方式稀釋成3、1、0.3和0.1mM的貯備液，用細胞外液稀釋成最終的μM測試濃度。除了30μM化合物測試溶液中DMSO終濃度約為0.3%，其餘各濃度化合物溶液中DMSO的最終濃度都為0.1%。陽性對照Cisapride(西沙比利)的測試濃度為0.1μM。所有的化合物溶液都經過一般一般的5到10分鐘超聲和振盪以保證化合物完全溶解。

試驗數據由HEKA Patchmaster(V2x73.2)，Microsoft Excel以及Graphpad Prism 5.0提供的數據分析軟件進行分析。

5. 試驗結果

本公开化合物对hERG钾电流的阻断作用通过以上的试验进行测定，测得的IC₅₀值见表9。

表9：本揭露化合物對hERG鉀離子通道的阻斷作用的IC₅₀

結論：本揭露化合物對hERG的抑制作用弱，可降低由hERG通路引起的副作用。

測試例6：本揭露化合物在小鼠體內的藥物代謝動力學評價

1、摘要

以小鼠為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了小鼠灌胃(ig)給予化合物18-p1後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本揭露化合物在小鼠體內的藥物代謝動力學行為，評價其藥動學特徵。

2、試驗方案

2.1 試驗藥品

化合物18-p1

2.2 試驗動物

C57小鼠9隻，雌性，購自維通利華實驗動物有限公司，動物生產許可證號：SCXK(滬)2017-0005。

2.3 藥物配製

稱取一定量的化合物18-p1，加5%體積的DMSO和5%吐溫80(上海泰坦科技有限公司)使其溶解，然後加入90%生理鹽水配製成0.1mg/mL澄明溶液。

2.4 給藥

灌胃給藥：小鼠灌胃給藥，給藥劑量均為2.0mg/kg，給藥體積均為20.0mL/kg。

3. 操作

小鼠灌胃給藥化合物18-p1，於給藥前及給藥後0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、11.0、24.0小時由眼眶採血0.1mL，置EDTA-K2抗凝試管中，10000 rpm離心1分鐘(4℃)，1h內分離血漿，-20℃保存待測。採血至離心過程在冰浴條件下操作。

測定不同濃度的藥物給藥後小鼠血漿中的待測化合物含量：取給藥後各時刻的小鼠血漿10μL，加入甲醇200μL(含內標溶液喜樹鹼(100ng/mL))，渦旋混合1分鐘，離心10分鐘(18000轉/分鐘)，血漿樣品取上清液3μL進行LC/MS/MS分析。

4、藥物代謝動力學參數結果

表10：本揭露化合物在小鼠體內的藥物代謝動力學參數如下：

結論：本揭露化合物在小鼠體內具有很好的藥物代謝吸收活性，具有藥物代謝動力學優勢。

測試例7：本揭露化合物在裸鼠體內的藥物代謝動力學評價

1、摘要

以裸鼠為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了裸鼠灌胃(ig)給予化合物18-p1後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本揭露化合物在裸鼠體內的藥物代謝動力學行為，評價其藥動學特徵。

2、試驗方案

2.1 試驗藥品

化合物18-p1

2.2 試驗動物

BALB/C裸鼠9隻，雌性，灌胃給藥，購自維通利華實驗動物有限公司，動物生產許可證號：SCXK(滬)2017-0005。

2.3 藥物配製

稱取一定量的化合物18-p1，加0.5%體積的CMCNa使其溶解，然後加入99.5%生理鹽水配製成2.5mg/mL澄明溶液。

2.4 給藥

裸鼠灌胃給藥，給藥劑量均為50.0mg/kg，給藥體積均為20.0mL/kg。

3. 操作

裸鼠灌胃給藥化合物18-p1，於給藥前及給藥後0.25、0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、11.0、24.0小時由眼眶採血0.1mL，置EDTA-K2抗凝試管中，10000rpm離心1分鐘(4℃)，1h內分離血漿，-20℃保存待測。採血至離心過程在冰浴條件下操作。

測定不同濃度的藥物給藥後裸鼠血漿中的待測化合物含量：取給藥後各時刻的裸鼠血漿25μL，加入乙腈200μL(含內標溶液喜樹鹼(100ng/mL)50μL)，渦旋混合5分鐘，離心10分鐘(4000轉/分鐘)，血漿樣品取上清液0.5μL進行LC/MS/MS分析。

4、藥物代謝動力學參數結果

表11：本揭露化合物在裸鼠體內的藥物代謝動力學參數如下：

結論：本揭露化合物在裸鼠體內具有很好的藥物代謝吸收活性，具有藥物代謝動力學優勢。

測試例8：本揭露化合物在犬體內的藥物代謝動力學評價

1、摘要

以大為受試動物，應用LC/MS/MS法測定了犬灌胃(ig)給予化合物18-p1後不同時刻血漿中的藥物濃度。研究本揭露化合物在犬體內的藥物代謝動力學行為，評價其藥動學特徵。

2、試驗方案

2.1 試驗藥品

化合物18-p1

2.2 試驗動物

比格犬4隻，雌雄各半，禁食一夜。由動物儲備庫(999M-004)提供。所有動物均為體檢合格、無異常健康的比格犬。

2.3 藥物配製

稱取一定量的化合物18-p1，加5%體積的DMSO、20%體積PG和20% 體積PEG400使其溶解，然後加入55%生理鹽水配製成0.4mg/mL澄明溶液。

2.4 給藥

給藥劑量均為2.0mg/kg，給藥體積均為5.0mL/kg。

3. 操作

犬灌胃給藥化合物18-p1，於給藥前及給藥後0.25，0.5，1.0，2.0，4.0，6.0，8.0，12.0，24.0小時由頸靜脈或前肢靜脈採血1.0ml，置EDTA-K2抗凝試管中，10000rpm離心5分鐘(4℃)，1h內分離血漿，-80ºC保存待測。採血至離心過程在冰浴條件下操作。給藥後3h進食。

測定不同濃度的藥物給藥後犬血漿中的待測化合物含量：取給藥後各時刻的犬血漿25μL，加入乙腈200μL(含50μL內標溶液喜樹鹼(100ng/ml))，渦旋混合5分鐘，離心10分鐘(4000轉/分鐘)，血漿樣品取上清液0.3μL進行LC/MS/MS分析。

4、藥物代謝動力學參數結果

表12：本揭露化合物在犬體內的藥物代謝動力學參數如下：

結論：本揭露化合物在犬體內具有很好的藥物代謝吸收活性，具有藥物代謝動力學優勢。

Claims

一種通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

環A為芳基或雜芳基；

R¹選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、環烷基氧基、雜環基氧基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-NR⁵R⁶、硝基、環烷基、雜環基、芳基氧基、雜芳基氧基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、環烷基、雜環基、芳基氧基、雜芳基氧基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、側氧基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R²選自氫原子、鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥烷基、氰基、胺基和環烷基；

R³相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-(CH₂)_rNR⁵R⁶、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、-(CH₂)_sNR⁹R¹⁰、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁴選自氫原子、烷基和環烷基；其中，該烷基和環烷基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁵和R⁶相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；

R⁷選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、環烷基和雜環基；

R⁸相同或不同，且各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；其中，該烷基、鹵烷基、環烷基和雜環基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；

R⁹和R¹⁰相同或不同，各自獨立地選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；

n為1、2、3或4；

p為0、1、2或3；

q為0、1、2或3；

r為0、1、2或3；以及

s為0、1、2或3。
如請求項1所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R¹選自氫原子、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、環烷基氧基、雜環基氧基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、-NR⁵R⁶、硝基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、烷氧基、環烷基氧基、雜環基氧基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；R⁴選自氫原子、烷基和環烷基；R⁸選自氫原子、烷基、鹵烷基、羥烷基、羥基、胺基、環烷基和雜環基；R⁵、R⁶、R⁷、R⁹、R¹⁰、p和q如請求項1所定義。
如請求項1或2所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，環A為6至10員芳基；較佳為苯基或
。
如請求項1至3中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為通式(II)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

R^3a、R^3b和R^3c相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥烷基、烯基、炔基、羥基、氰基、胺基、- (CH₂)_rNR⁵R⁶、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基，其中，該烷基、鹵烷基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷基、鹵烷氧基、羥基、硝基、胺基、-(CH₂)_sNR⁹R¹⁰、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基中的一個或多個取代基取代；較佳地，R^3a、R^3b和R^3c相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、鹵C_1-6烷基、羥基、氰基和胺基，其中，該C_1-6烷基和鹵C_1-6烷基視需要被選自鹵素、羥基和C_1-6烷氧基中的一個或多個取代基取代；

R¹、R²、R⁴、R⁵、R⁶、R⁹、R¹⁰、s和r如請求項1所定義。
如請求項1至4中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R⁴為氫原子或C_1-6烷基；較佳地，R⁴為氫原子。
如請求項1至5中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R¹選自C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷基、鹵C_1-6烷氧基、C_1-6羥烷基、3至10員環烷基氧基、3至10員雜環基氧基、3至10員環烷基、3至10員雜環基、6至10員芳基和5至10員雜芳基，其中，該C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、3至10員環烷基氧基、3至10員雜環基氧基、3至10員環烷基、3至10員雜環基、6至10員芳基和5至10員雜芳基各自獨立地視需要被選自鹵素、C_1-6烷基、C_1-6烷氧基、鹵C_1-6烷氧基、羥基、胺基、氰基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰和-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰中的一個或多個取代基取代；R⁷至R¹⁰、q和p如請求項1所定義。
如請求項1至5中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R¹為
或
；環B選自環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；較佳地，R¹選自
、
、
、
、
和
；Q選自氧原子、硫原子、
、NR^11a 和CR^11bR^11c；

R^11a、R^11b、R^11c和R¹¹相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；

j為0、1或2；

k為1或2；

u為0、1、2、3、4或5；

v為0、1、2或3；

R⁷至R¹⁰、p和q如請求項1所定義。
如請求項1至7中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R²為C_1-6烷基。
如請求項1至3和5至8中任一項所述的通式(I)所示的化合物，或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其中，R³相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、C_1-6烷基、鹵C_1-6烷基、羥基、氰基和胺基，其中，該C_1-6烷基和鹵C_1-6烷基視需要被選自鹵素、羥基和C_1-6烷氧基中的一個或多個取代基取代。
如請求項1至9中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自以下任一化合物：
一種通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

環A、R²至R⁴和n如請求項1所定義。
如請求項11所述的通式(IA)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其選自以下任一化合物：
一種通式(IB)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽：

其中，Y為鹵素；較佳為Cl；

R²選自鹵素、烷基、鹵烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥烷基、氰基和環烷基；

R¹和R⁴如請求項1所定義。
如請求項13所述的通式(IB)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，其為：
一種製備通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與R¹-M反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

X為鹵素；較佳為Br；

M選自
、
和氫原子；

環A、R¹至R⁴和n如請求項1所定義。
一種製備通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IAA)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽發生氧化反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

R¹為
；

Q選自氧原子、硫原子、
、NR^11a和CR^11bR^11c；

R^11a、R^11b、R^11c和R¹¹相同或不同，各自獨立地選自氫原子、鹵素、烷基、烷氧基、鹵烷氧基、羥基、胺基、-C(O)(CH₂)_qOR⁷、-NHC(O)R⁸、-C(O)R⁸、-NR⁹R¹⁰、-C(O)(CH₂)_pNR⁹R¹⁰、硝基、氰基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基；

j為0、1或2；

k為1或2；

v為0、1、2或3：

環A、R²至R⁴、R⁷至R¹⁰、p、q和n如請求項1所定義。
一種製備通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽的方法，該方法包括以下步驟：

通式(IB)化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽與通式(IC)化合物發生反應，得到通式(I)的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽；

其中，

M為HCl；

y為0或1；

Y為鹵素；較佳為Cl；

環A、R¹至R⁴和n如請求項1所定義。
一種醫藥組成物，該醫藥組成物含有治療有效量的如請求項1至10中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽，以及一種或多種藥學上可接受的載體、稀釋劑或賦形劑。
如請求項1至10中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽或如請求項18所述的醫藥組成物在製備用於抑制SOS1的藥物中的用途。
如請求項1至10中任一項所述的通式(I)所示的化合物或其互變異構體、內消旋體、外消旋體、對映異構體、非對映異構體、或其混合物形式或其可藥用的鹽或如請求項18所述的醫藥組成物在製備用於治療和/或預防癌症、炎症、RAS病、努南綜合症(NS)、伴有多斑的努南綜合症(NSML)、毛細血管畸形-動靜脈畸形綜合症(CM-AVM)、科斯特洛綜合症(CS)、心-面-皮膚綜合症(CFC)、萊格斯綜合症、遺傳性牙齦纖維瘤病、或其它增殖性疾病的藥物中的用途，較佳為在製備用於治療和/或預防癌症的藥物中的用途。
如請求項20所述的用途，其中，該癌症選自黑色素瘤、皮膚癌、肝癌、腎癌、肺癌、鼻咽癌、胃癌、食道癌、結腸直腸癌、膽囊癌、膽管癌、絨毛膜上皮癌、胰腺癌、真性紅細胞增多症、兒科腫瘤、子宮頸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、尿路上皮癌、輸尿管腫瘤、前列腺癌、精原細胞瘤、睾丸腫瘤、白血病、頭頸瘤、子宮內膜癌、甲狀腺癌、淋巴瘤、肉瘤、骨瘤、成神經細胞瘤、神經母細胞瘤、腦瘤、骨髓瘤、星形細胞瘤、膠質母細胞瘤和膠質瘤；該肝癌較佳為肝細胞癌，該頭頸瘤較佳為頭頸鱗狀細胞癌，該肉瘤較佳為骨肉瘤，該結腸直腸癌較佳為結腸癌或直腸癌。