TW202210473A

TW202210473A - Ｇｌｐ－１ｒ促效劑之鹽和晶型及其用途

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Publication number: TW202210473A
Application number: TW110119087A
Authority: TW
Inventors: 蔣萌; 陳貝貝; 旭東魏; 文革鐘
Original assignee: 大陸商上海齊魯銳格醫藥研發有限公司
Priority date: 2020-05-27
Filing date: 2021-05-26
Publication date: 2022-03-16
Also published as: US20230203023A1; JP2023527997A; CN115867546A; EP4157832B1; CA3179890A1; AU2021281237A1; WO2021242817A1; EP4157832A1

Abstract

本揭露係揭露由以下結構式表示之化合物I以及化合物II的各種鹽型式以及其對應的醫藥組成物。

本揭露以各種性質上的與物理的量測描述1：1化合物I托立斯鹽(tris salt)、1：1化合物II托立斯鹽以及1：1化合物II檸檬酸鹽的特定單晶形。另揭露特定晶形的製備方式。本揭露同時提供於個體中治療第二型糖尿病、糖尿病前期、肥胖症、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪性肝炎以及心血管疾病的方法。

Description

GLP-1R促效劑之鹽和晶形及其用途

[相關申請的交叉引用]

本申請主張於2020年5月27日申請的第PCT/CN2020/092530號國際專利申請的優先權，其全部內容以引用的方式併入本文中。

本揭露係關於可用於治療第二型糖尿病、糖尿病前期、肥胖症、非酒精性脂肪肝病、非酒精性脂肪性肝炎以及心血管疾病的GLP-1R促效劑之鹽和晶形與其對應的醫藥組成物。

GLP-1為腸內L細胞反應食物攝取所分泌的30個胺基酸長度之腸促胰液激素。已顯示GLP-1以生理及葡萄糖依賴性方式刺激胰島素分泌、降低升糖素分泌、抑制胃排空、降低食欲及刺激β細胞增生。在非臨床試驗中，GLP-1經由刺激重要的葡萄糖依賴性胰島素分泌基因的轉錄及促進β細胞新生以促進持續的β細胞適性(Meier等人，《生物藥物(Biodrugs.)》17(2)：93-102,2013)。

在健康的個體中，GLP-1刺激胰臟的葡萄糖依賴性胰島素的分泌，使周邊的葡萄糖吸收增加，在調節餐後血糖含量有重要的作用。GLP- 1另抑制升糖素分泌，使肝臟葡萄糖排出量降低。再者，GLP-1還延遲胃排空及減慢小腸運動而延遲食物吸收。在患有T2DM的人中，餐後GLP-1不會正常上升或上升量減少(Vilsboll等人，《糖尿病(Diabetes.)》50：609-613,2001)。

Hoist(《生理學評論(Physiol.Rev.)》87：1409,2007)及Meier(《自然評論內分泌學(Nat.Rev.Endocrinol.)》8：728,2012)描述GLP-1受體促效劑(例如GLP-1、利拉魯肽及exendin-4)有3種降低空腹及餐後葡萄糖(FPG及PPG)以改善T2DM患者血糖控制的主要藥理活性：(i)葡萄糖依賴性胰島素分泌增加(改善的第一及第二期)，(ii)在高血糖狀況下的升糖素活性抑制，(iii)延遲胃排空速率，延緩飲食衍生的葡萄糖的吸收。

本文引用國際專利申請第PCT/CN2019/119373號所揭示的高效GLP-1促效劑內容，此兩種促效劑的結構揭露如下並以「化合物I」和「化合物II」稱之：

化合物I之化學名稱為(S)-2-((4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)-氧基)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯并[d]-咪唑-6-羧酸。

化合物II之化學名稱為(S)-2-((6-((4-氰基-2-氟苯甲基)氧基)-3',6'-二氫-[2,4'-聯吡啶]-1'(2'H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]咪唑-6-羧酸。

如化合物I或化合物II的藥學活性劑的成功開發通常需要具有合成後能方便地分離與純化的固體型態，可適用於大規模製造，能以較長的期限保存並最低限度的吸收水分、分解或轉化為其他固體型態，並適用於給藥後個體能迅速地吸收的劑型(如能溶解於水以及胃液中)等性質。

本文現發現1：1化合物I托立斯鹽(tris salt)，1：1化合物II托立斯鹽以及1：1化合物II檸檬酸鹽可在定義明確的條件下結晶出預期的結晶形式(見實施例3-7)。此三種鹽於水以及模擬胃液中也具有良好的溶解度及固體穩定性(見表2和7-1)，具有高起始融點。同時1：1化合物I托立斯鹽和1：1化合物II托立斯鹽也適用於大規模合成。

所述「1：1」係指酸(檸檬酸)/鹼(參(羥甲)胺基甲院)與化合物I/化合物II之間的莫耳比。由於檸檬酸上的三個羧酸基以及化合物II中的兩個鹼性氮原子，化合物可能有多種可行的化學計量。化合物(I)的1：1檸檬酸鹽於本文內稱為「1：1化合物I檸檬酸鹽」。

於一方面，本揭露本揭露提供一種化合物I與參(羥甲)胺基甲烷(tris-(hydroxymethyl)aminomethane)的莫耳比為1：1的化合物I的托立斯鹽(tris salt)。如上述，此鹽於本文內亦稱為「1：1化合物I托立斯鹽」。

於另一方面，本揭露提供一種化合物II與參(羥甲)胺基甲烷(tris-(hydroxymethyl)aminomethane)的莫耳比為1：1的化合物II的托立斯鹽(tris salt)。如上述，此鹽於本文內亦稱為「1：1化合物II托立斯鹽」。

於另一方面，本揭露提供一種化合物II與檸檬酸的莫耳比為1：1的化合物II的檸檬酸鹽。如上述，此鹽於本文內稱為「1：1化合物II檸檬酸鹽」。

於另一方面，本揭露提供一種包含1：1化合物I托立斯鹽(或1：1化合物II托立斯鹽或1：1化合物II檸檬酸鹽)以及藥學上可接受之載劑的醫藥組成物。

本揭露提供一種治療心血管代謝及相關疾病的方法，投給治療有效量的本揭露之鹽或其對應的醫藥組成物予需要此治療的個體本揭露。

本揭露同時提供上述提及的任一方法中的本揭露之鹽或其醫藥組成物之用途。於一實施例中，提供一種用於本揭露所述的任一方法所使用的本揭露之鹽或其醫藥組成物。在另一實施例中，提供一種包含本揭露之鹽或其醫藥組成物用於製造本揭露提及的任一方法的藥物之用途。

應理解，本揭露的任何實施例，包括僅在實例或請求項中描述的實施例，或僅在說明書的一個部分中描述的實施例，可以與本揭露另外一個或多個實施例組合，只要此類組合並不明顯被排除或不恰當。

圖1展示1：1化合物I托立斯鹽(A型)的X射線粉末繞射(X-ray Powder Diffraction(XRPD))圖譜。

圖2A展示1：1化合物I托立斯鹽(A型)的熱重分析 (Thermogravimetric Analysis(TGA))溫度記錄圖。

圖2B展示1：1化合物I托立斯鹽(A型)的微差掃描熱量法分析(Differential Scanning Calorimetry Analysis(DSC))溫度記錄圖。

圖3展示1：1化合物I托立斯鹽(A型)的單結晶X射線繞射(Single Crystal X-Ray Diffraction(SCXRD))圖譜。

圖4展示1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)的X射線粉末繞射(X-ray Powder Diffraction(XRPD))圖譜。

圖5A展示1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)的熱重分析(Thermogravimetric Analysis(TGA))溫度記錄圖。

附圖5B展示1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)的微差掃描熱量法分析(Differential Scanning Calorimetry Analysis(DSC))溫度記錄圖。

附圖6展示1：1化合物II托立斯鹽(B型)的X射線粉末繞射(X-ray Powder Diffraction(XRPD))圖譜。

附圖7A展示1：1化合物II托立斯鹽(B型)的熱重分析(Thermogravimetric Analysis(TGA))溫度記錄圖。

附圖7B展示1：1化合物II托立斯鹽(B型)的微差掃描熱量法分析(Differential Scanning Calorimetry Analysis(DSC))溫度記錄圖。

附圖8展示1：1化合物II托立斯鹽(G型)的X射線粉末繞射(X-ray Powder Diffraction(XRPD))圖譜。

附圖9展示1：1化合物II托立斯鹽(G型)的熱重分析(Thermogravimetric Analysis(TGA))溫度記錄圖。

附圖10展示1：1化合物II托立斯鹽(G型)的微差掃描熱量法分析(Differential Scanning Calorimetry Analysis(DSC))溫度記錄圖。

本揭露係關於化合物I的一種新穎托立斯鹽(即1：1托立斯鹽)，化合物II的一種新穎托立斯鹽(即1：1托立斯鹽)及化合物II的一種新穎檸檬鹽(即1：1檸檬酸鹽)以及前述各自的多晶型。

「水合型式(Hydrated form)」指的是一種游離鹼形式的化合物I或化合物II的固體或結晶形式，或一種作為固體或晶體組成部分的水與游離鹼形式的化合物(I)或其對應的鹽以化學計量比率(例如化合物(I)：水莫耳比為1：1或1：2)結合的鹽。「非水合型式(Unhydrated form)」指的是水與化合物(I)或化合物(I)對應的鹽的游離鹼之間不存在化學計量比率的型態，以及實質上不存在水(以卡爾費雪滴定(Karl Fischer analysis)測量少於重量的10%)的固體型態。本揭露所揭露之新穎固體型態包括水合型式以及非水合型式。

如本文所使用，「結晶(crystalline)」指的是具有結晶結構的固體，其中，各分子具有高度同質的規則的三維結構。

所揭露之化合物I的鹽和/或化合物II的鹽結晶可以是單晶形的晶體或不同單結晶形式的晶體混合物。單晶形係指化合物I(或化合物II)為一個單一結晶體或每個晶體具有相同結晶型式的複數個結晶體集合。

本揭露的化合物I/化合物II的鹽的結晶形式中，至少有特定重量百分比的1：1化合物I/化合物II的鹽為單晶形。以化合物I/化合物II 的鹽的重量為計，包含85%、86%，87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%、99.5%、99.9%，或70%至75%、75%至80%、80%至85%、85%至90%、90%至95%、95%至100%、70至80%、80至90%、90至100%的特定重量百分比為單晶型。應理解，所有包含在這些值與範圍內的值與範圍應囊括在本揭露內。

當結晶狀化合物I/化合物II的鹽以化合物I/化合物II的鹽的特定晶形百分比定義時，其剩餘部分由非晶質型以及/或一或多種所定義的特定型態之外的晶形所組成。單晶形的實例包含本文內探討的由一或多個性質定性的1：1化合物I托立斯鹽(A型)、1：1化合物II托立斯鹽(B和G型)，以及1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)。

化合物I以及化合物II皆具有手性中心。本文揭露的鹽以及多晶型中的化合物I和化合物II相較於其他立體異構物具有至少80%、90%、99%或99.9%重量百分比的純度(即，該立體異構物重量除以所有立體異構物重量的比率)。

本文揭露之結晶狀化合物I/化合物II的鹽於2θ對應角峰位置展示了帶有銳鋒及平坦基線的高強度的獨特XRPD圖譜，意指具高結晶狀之物質(如圖1)。

1：1化合物I托立斯鹽結晶形式的定性

於一實施例中，化合物I托立斯鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在17.5°、20.1°、20.7°、21.1°和22.6°±0.2的峰。在另一實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個(或四個)選自於2θ在17.5°、20.1°、20.7°、21.1°和22.6°± 0.2的峰。而於另一個實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、14.8°、17.5°、18.8°、20.1°、20.7°、21.1°和22.6°±0.2的峰。而於另一個實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、8.1°、12.8°、14.8°、16.3°、17.5°、18.8°、19.3°、20.1°、20.7°、21.1°、22.6°、25.1°以及25.8°±0.2的峰。而於另一個實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜與圖1實質上相同。

眾所周知在結晶學領域中，對任一已知的晶形，其角峰位置由於如溫度變化、樣品置換以及有無內部標準等因素可能有些微的改變。在本揭露中，角峰位置的變異為2θ在±0.2。除此之外，已知晶形的相對峰值強度由於在製備XRPD分析的樣品時結晶狀尺寸及非隨機結晶狀方向的不同可能有所改變，該變異解釋了上述因素，不阻礙晶形的明確鑑別，此為該領域所熟知。

在另一實施例中，1：1化合物I托立斯鹽A型經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter(DSC))定性之峰相轉變溫度為173±3℃(例如174.3℃)。

1：1化合物II檸檬酸鹽結晶形式的定性

於一實施例中，1：1化合物II檸檬酸鹽為一單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在5.4°、9.4°、12.4、14.3以及17.8°±0.2的峰；在另一實施例中，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個(或四個)選自於2θ在5.4°、9.4°、12.4°、14.3°以及17.8°±0.2的峰；而於另一個實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在5.4°、9.4°、10.8°、12.4°、14.3°、16.2°、17.8°、19.6°以及24.9° ±0.2的峰值。而於另一個實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在5.4°、9.4°、10.8°、12.4°、14.3°、16.2°、17.8°、18.8°、19.6°、23.6°以及24.9°±0.2的峰。而於另一個實施例中，A型經X射線粉末繞射定性之圖譜與圖4實質上相同。

在另一實施例中，1：1化合物I托立斯鹽A型經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter(DSC))定性之峰相轉變溫度為170±3℃(例如169.9℃)。

1：1化合物II托立斯鹽結晶形式的定性

於一實施例中，1：1化合物II托立斯鹽為一單結晶形式，B型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、14.7°、18.8°、20.1°、以及23.1°±0.2的峰；在另一實施例中，B型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個(或四個)選自於2θ在4.1°、14.7°、18.8°、20.1°以及23.1°±0.2的峰，而於另一個實施例中，B型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、8.2°、14.7°、16.4°、18.8°、20.1°、20.7°、21.3°以及23.1°±0.2的峰。而於另一個實施例中，B型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、8.2°、14.7°、16.4°、18.8°、19.1°、20.1°、20.7°、21.3°、23.1°、24.1°以及25.4°±0.2的峰。而於另一個實施例中，B型經X射線粉末繞射定性之圖譜與圖6實質上相同。

在另一實施例中，1：1化合物II托立斯鹽B型經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter(DSC))定性之峰相轉變溫度為168±4℃(例如170.3℃)。

於一實施例中，1：1化合物II托立斯鹽為一單結晶形式， G型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°、以及18.5°±0.2的峰；在另一實施例中，G型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個(或四個)選自於2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°以及18.5°±0.2的峰。而於另一個實施例中，G型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°、18.5°、21.5°、23.7°以及24.1°±0.2的峰。而於另一個實施例中，G型經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°、18.0°、18.5°、20.8°、21.5°、23.7°以及24.1°±0.2的峰。而於另一個實施例中，G型經X射線粉末繞射定性之圖譜與圖8實質上相同。

在另一實施例中，1：1化合物II托立斯鹽G型經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter(DSC))定性之峰相轉變溫度為129.5±4℃。

醫藥組成物

在另一實施例中，本揭露包括醫藥組成物。這類醫藥組成物包本揭露化合物I(或化合物II)之鹽和藥學上可接受的載劑，也可存在其它的藥理活性物質。

如本文所使用的「藥學上可接受的載劑」包含任何及所有的溶劑、分散介質、包膜、抗細菌劑及抗真菌劑、等滲劑及吸收延遲劑及生理上可相容的類似物。藥學上可接受的載劑的實例包含水、鹽水、磷酸鹽緩衝鹽水、葡萄糖、甘油、乙醇及類似物中的一或多者及其組合，且可在所述組成物中包含等滲劑，例如糖、氯化鈉或例如甘露醇或山梨醇的多元醇。藥學上可接受的物質，例如潤濕劑或少量輔助物質例如潤濕劑或乳化劑、保存劑或緩衝劑，提高抗體或抗體部分的存儲壽命或有效性。

本揭露之組成物可呈多種形式。這些形式包含(例如)液體、半固體及固體劑型，例如液體溶液(例如可注射及可輸液溶液)、分散液或懸浮液、片劑、丸劑、粉劑、脂質體及栓劑。所述形式取決於既定給藥模式及治療應用而定。

典型的組成物為注射型及輸液型溶液，例如類似於那些通常用於人類被動免疫的抗體組成物。一種給藥模式為腸胃外給藥，例如靜脈內、皮下、腹膜內、肌肉內。在另一實施例中，所述抗體通過靜脈內輸液或注射給藥。在又一實施例中，所述抗體通過肌肉內或皮下注射給藥。

固體劑型的經口給藥可以是如個別單元呈現，例如硬或軟膠囊、丸劑、扁囊劑、菱形錠或錠劑，各含有預定量的至少一種本揭露化合物。在另一實施例中，經口給藥可呈粉末或顆粒形式。在另一實施例中，口服劑型為舌下形式，例如菱形錠。在這類固體劑型中，上述任一化學式的化合物通常與一或多種佐劑組合。這類膠囊或錠劑可含有控制釋放的劑型，膠囊、錠劑及丸劑的劑型也可包括緩衝劑或由腸溶衣製備。

在另一實施例中，口服給藥可呈液體劑型。用於口服給藥的液體劑型包含如含有本領域中常使用的惰性稀釋劑(例如水)的藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿及酏劑。這類組成物也可包含佐劑，例如潤濕劑、乳化劑、懸浮劑、調味劑(例如甜味劑)及/或芳香劑。

在另一實施例中，本揭露包括腸胃外劑型。

“腸胃外給藥”包括例如皮下注射、靜脈內注射、腹腔內注射、肌肉內注射、胸骨內注射及輸液。注射型製劑(即無菌注射型水性或油性懸浮液)可根據已知的技術使用適合的分散劑、潤濕劑及/或懸浮劑配製。

在另一實施例中，本揭露包括局部用劑型。

“局部給藥”包括例如經皮給藥，例如經由經皮貼片或離子電滲裝置、眼內給藥或鼻內或吸入給藥。用於局部給藥的組成物還包含例如局部用凝膠、噴霧、軟膏及乳膏。局部給藥劑型可包含會提高活性成分通過皮膚或其感受區域的吸收或穿透的化合物。當本揭露化合物以經皮裝置給藥時，將使用儲集器及多孔膜類型或固體基質類別的貼片完成給藥。出於此目的的典型劑型包含凝膠、水凝膠、乳液、溶液、乳膏、軟膏、撒布粉、敷料、泡沫、薄膜、皮膚貼片、薄片、植入物、海綿、纖維、繃帶及微乳劑。亦可使用脂質體。典型載劑包含醇、水、礦物油、液態石蠟脂、白石蠟脂、甘油、聚乙二醇及丙二醇。可包括滲透增強劑，參見(例如)Finnin及Morgan，《藥物科學雜誌(J.Pharm.Sci.)》,88：955-958，1999。

適於眼睛局部給藥的劑型包含例如眼藥水，其中將本揭露化合物溶解或懸浮於適合的載劑中。適合於經眼或經耳給藥的典型劑型可於等滲、經調整pH的無菌鹽水中呈微粉化懸浮液或溶液的滴劑形式。適合於經眼及經耳給藥的其它配製物包含軟膏、生物可降解(即可吸收凝膠海綿、膠原蛋白)及非生物可降解(即聚矽氧)植入物、薄片、鏡片及微粒或囊泡系統，例如泡囊體(niosome)或脂質體。例如交聯的聚丙烯酸、聚乙烯醇、玻尿酸、纖維素聚合物(例如羥丙基甲基纖維素、羥乙基纖維素或甲基纖維素)或異元多醣聚合物(例如結蘭膠)的聚合物，可一併包含防腐劑(例如羥基氯苯胺)。這類劑型也可通過電離子透入法遞輸。

用於鼻內給藥或以吸入給藥的本揭露化合物以泵噴霧容器中的溶液或懸浮液形式由患者擠壓或泵吸，或以使用適宜推進劑的施壓容器或氣霧器的氣溶膠噴霧的形式方便地傳遞。適合於鼻內給藥的劑型通常以乾粉吸入器的乾粉形式(可以是單獨的；或例如與乳糖乾燥摻合的混合物，或例如與磷脂(例如磷脂醯膽鹼)混合的混合型組份粒子)，或以氣霧器的氣溶膠噴霧形式使用或不使用適合的推進劑(例如1,1,1,2-四氟乙烷或1,1,1,2,3,3,3-七氟丙烷)的施壓容器、泵、噴霧器、霧化器(較佳為使用電流體動力產生細霧的霧化器)給藥。用於鼻內的粉末可包括生物粘著劑，例如聚葡萄胺糖或環糊精。

在另一實施例中，本揭露包括直腸劑型。這類直腸劑型可例如為栓劑形式。可可脂為傳統栓劑基底，但可視需求使用各種替代物。

也可使用在醫藥領域中已知的其它載劑材料及給藥模式。本揭露的藥物組成物可藉由藥學上任何已熟知的技術，諸如，有效的調配劑型及給藥程序而製備。

上述關於有效的調配劑型及給藥程序的考量為本領域中所熟知的且描述於標準教科書中。藥物的劑型調配論述於例如以下文獻中：Hoover,John E.，《雷明頓藥物科學(Remington's Pharmaceutical Sciences)》,Mack Publishing Co.,Easton,Pa.,1975；Liberman等人編，《藥物劑型(Pharmaceutical Dosage Forms)》,Marcel Decker,New York,N.Y.,1980；及Kibbe等人編，《藥用賦形劑手冊(Handbook of Pharmaceutical Excipients)》(第3版)，美國藥學會，Washington,1999。

治療方法

“個體”為一哺乳動物，最好是人類，但也可以是需要獸醫治療時的動物例如，陪伴動物(例如狗，貓以及其他類似動物)，家禽(如牛，羊，豬，馬及其他類似動物)，和實驗動物(如大鼠，小鼠，天竺鼠以及其他動物)。

以本揭露化合物有效劑量對個體有效的“治療”方案可能包含單一給藥，或其他的多種實施方式。治療期的長度由多種因素決定，例如疾病的嚴重程度、受治患者的年齡、本揭露化合物的濃度與活性以及上述因素之結合。同時也應意識到化合物用於治療或預防的有效劑量可能因治療或預防方案增加或減少。經由本領域已知的標準診斷分析方式，可容易地發現並變化劑量。在某些情況下，可能需要長期給藥。

在一個方面中，本揭露提供一種如本文所述的化合物I(或化合物II)的鹽類，其用於預防及/或治療本文所論述的心臟代謝及相關疾病，包含T2DM、糖尿病前期、NASH及心血管疾病。

在另一方面中，本揭露提供需要此類預防及/或治療的個體中一種疾病的治療方法，該疾病係適用GLP-1R促效劑治療，所述方法包括向所述個體給予如本文所述的化合物I(或化合物II)的治療有效量的鹽類。

在另一方面中，本揭露提供一種如本文所述的化合物I(或化合物II)的鹽類，其用於製造一種適用GLP-1R促效劑治療的疾病或症狀的藥物。

在另一方面中，本揭露提供一種如本文所述的化合物I(或化合物II)的鹽類，其用於治療適用GLP-1R促效劑治療的疾病或症狀。

在另一方面中，本揭露提供一種用於治療適用GLP-1R促效劑治療的疾病或症狀的藥物組成物，所述藥物組成物包括如本文所述的化合物I(或化合物II)的鹽類。

本揭露還提供一種藥物組成物，其包括如本文所述的化合物I(或化合物II)的鹽類，所述藥物組成物用於治療及/或預防本文所述的心臟代謝及相關疾病，包含T2DM、糖尿病前期、NASH及心血管疾病。

在另一方面中，本揭露提供如本文所述的化合物I(或化合物II)的鹽類，其用於治療及/或治療心臟代謝及相關疾病，包含糖尿病(T1D及/或T2DM，包含糖尿病前期)、特發性T1D(第1b型)、成人潛伏性自身免疫性糖尿病(latent autoimmune diabetes in adults，LADA)、早發型T2DM(early-onset T2DM，EOD)、青少年非典型糖尿病(youth-onset atypical diabetes，YOAD)、年青人成年型糖尿病(maturity onset diabetes of the young，MODY)、營養不良相關糖尿病、妊娠糖尿病、高血糖症、胰島素抗性、肝臟胰島素抗性、葡萄糖耐受不良、糖尿病神經病變、糖尿病腎病變、腎疾病(例如急性腎病症、腎小管功能障礙、近端小管的促發炎變化)、糖尿病視網膜病變、脂肪細胞功能障礙、內臟脂肪囤積、睡眠呼吸暫停、肥胖症(包含下丘腦性肥胖症及單基因性肥胖症)及相關共病(例如骨關節炎及尿失禁)、飲食異常(包含暴食症候群、神經性貪食症及症候群型肥胖症(syndromic obesity)，例如普威二氏症候群(Prader-Willi)及Bardet-Biedl二氏症候群(Bardet-Biedl syndrome))、使用其它藥劑(例如使用類固醇及抗精神病藥)引起的增重、過度嗜糖、異常血脂症(包含高脂血症、高甘油三酯血症、總膽固醇增加、高LDL膽固醇及低HDL膽固醇)、高胰島素血症、NAFLD(包含相關疾病，例如脂肪變性、NASH、纖維變性、硬化及肝細胞癌)、心血管疾病、動脈粥樣硬化(包含冠狀動脈疾病)、周邊血管疾病、高血壓、內皮功能障礙、血管順應性不良、充血性心臟衰竭、心肌梗塞(例如壞死及細胞凋亡)、中風、出血性中風、缺血性中風、創傷性腦損傷、肺性高血壓、血管成形術後再狹窄、間歇性跛行、餐後血脂症、代謝性酸中毒、酮症、關節炎、骨質疏鬆症、帕金森氏症、左心室肥厚、周邊動脈疾病、黃斑部病變、白內障、腎小球硬化、慢性腎衰竭、代謝性症候群、X症候群、經前症候群、心絞痛、血栓症、動脈粥樣硬化、短暫性腦缺血發作、血管再狹窄、葡萄糖代謝不良、空腹血糖不良症狀、高尿酸血症、痛風、勃起功能障礙、皮膚及結締組織病症、牛皮癬、足部潰瘍、潰瘍性結腸炎、apo B高脂蛋白血症、阿茲海默症、精神分裂症、認知功能受損、發炎性腸病、短腸症候群、克隆氏症、結腸炎、腸躁症候群、多囊性卵巢症候群的預防或治療以及成癮(例如酒精及/或藥物濫用)的治療。

在某些實施例中，所述疾病或病症是肥胖症、飲食異常、使用其它藥劑引起的增重、過度嗜糖及異常血脂症。

在某些實施例中，所述疾病或病症是肥胖症。

在某些實施例中，所述疾病或病症是糖尿病前期。

在某些實施例中，所述疾病或病症是T2DM。

在某些實施例中，所述疾病或病症是NASH。

在某些實施例中，所述疾病或病症是NAFLD。

在某些實施例中，所述疾病或病症是心血管疾病，例如高血壓。

在另一方面中，本揭露提供一種以減少β-抑制蛋白/抑制蛋白-2的募集而增強或刺激GLP-1R介導的cAMP信號傳導的方法，其包括給予如本文所述任一實施例中所定義的任一上述化學式(例如式I、II-A、III-A及IV-A)的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構物、溶劑合物或水合物。這是部分基於出人意料地發現與天然GLP-1R配體GLP-1相比，本揭露化合物在作為GLP-1R介導的cAMP信號傳導的完全促效劑時，同時也是β-抑制蛋白募集至經活化的GLP-1R的部分促效劑，因為本揭露化合物對經活化的GLP-1R的最高β-抑制蛋白募集低於GLP-1的最高β-抑制蛋白募集。這類用於cAMP信號傳導的GLP-1R部分促效劑及/或偏向性促效劑可提供更持久的cAMP信號傳導活性，而具有更好的功效及更低的副作用。

因此，本揭露的方法可有益於治療本文所述的任何疾病或症狀，例如第II型糖尿病(T2D)及相關疾病。

在某些實施例中，所述治療產生血糖效益不會同時增加GI副作用，或至少降低GI副作用的增加程度，例如

心、嘔吐或腹瀉。在某些實施例中，與正常或增強的β-抑制蛋白募集(例如藉由GLP-1的β-抑制蛋白募集)對照治療相比，所述治療具有更大的耐受性。

給藥及劑量

一般而言，本揭露化合物係以有效治療如本文所述的症狀的量給藥。本揭露化合物可以化合物本身或者以藥學上可接受的鹽給藥。在說明給藥及劑量時，所述化合物本身或其藥學上可接受的鹽將簡稱為本揭露化合物。

本揭露化合物係由任何適合的途徑以適於此途徑的藥物組成物形式及對所欲治療有效的劑量給藥。本揭露化合物可經口、直腸、陰道、腸胃外或局部給藥。

本揭露化合物可經口給藥。經口給藥可包含吞服，使化合物進入腸胃道，或可使用頰內或舌下給藥，藉此使化合物從嘴巴直接進入血流中。

在另一實施例中，本揭露化合物亦可直接投藥至血流中、肌肉中或內部器官中。適合於腸胃外給藥的方式包含靜脈內、動脈內、腹膜內、脊髓內、心室內、尿道內、胸骨內、顱內、肌肉內及皮下。適合於腸胃外給藥的裝置包含針(包含微針)注射器、無針注射器及輸液技術。

在另一實施例中，本揭露化合物亦可局部給藥至皮膚或黏膜，亦即經皮或穿皮給藥。在另一實施例中，本揭露化合物亦可經鼻內或以吸入給藥。在另一實施例中，本揭露化合物亦可經直腸或陰道給藥。在另一實施例中，本揭露化合物亦可直接給藥至眼或耳。

本揭露化合物及/或含有所述化合物的組成物的劑量方案係基於許多因素，包含患者的類型、年齡、體重、性別及醫學症狀、症狀的嚴重性、給藥途徑及所使用的特定化合物的活性。因此，劑量方案可廣泛地變化。在一實施例中，用於治療本文所討論的適應症狀的本揭露化合物的每日總劑量通常為約0.001mg/kg至約100mg/kg(即以每公斤體重計的本揭露化合物毫克量)。在另一實施例中，本揭露化合物的每日總劑量為約0.01mg/kg至約30mg/kg，且在另一實施例中為約0.03mg/kg至約10mg/kg，且於又一實施例中為約0.1mg/kg至約3mg/kg。在一天內多次重複給藥本揭露化合物並不罕見(通常不超過4次)。若需要，通常可使用每天多個劑量以增加每日總劑量。在某些實施例中，患者是人類，例如患有本文中其它部分所描述可治療的疾病適應症或病症中的一種的人類。

對於經口給藥，組成物可以錠劑形式提供，其含有對患者進行症狀調整的劑量的0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、30.0、50.0、75.0、100、125、150、175、200、250及500毫克活性成分。藥物通常含有約0.01mg至約500mg活性成分，或在另一實施例中為約1mg至約100mg活性成分。在固定速率的輸液期間，靜脈內投藥的劑量可在約0.01至約10毫克/公斤/分鐘的範圍內。

根據本揭露的適合個體或患者包含哺乳動物個體，包含人類或非人類哺乳動物，例如靈長類動物、齧齒動物(小鼠、大鼠、倉鼠、兔等)。在一個實施例中，人類為適合的個體。人類個體可為任何性別及處於任何發育階段。在某些實施例中，人類是小於18歲、15歲或約14歲、12歲、10歲或小於5歲的兒童。

共同給藥

本揭露化合物可單獨地或與其它的治療劑組合使用。本揭露提供如本文所定義的用途、方法或組成物中的任一者，其中本文上述化學式的化合物的任何實施例的任一化合物或其藥學上可接受的鹽，或所述化合物或鹽的藥學上可接受的溶劑合物，是與本文所討論的一種或多種其它治療劑組合使用。

兩種或多種化合物“組合”給藥是指所有的化合物在足夠接近的時間內給藥，使各者可在相同的時間框架內產生生物性效應。一種藥劑的存在可改變其它化合物的生物性效應。所述兩種或多種化合物可同時、並行或依序給藥。另外，同時給藥可經由給藥前混合所述化合物或在相同的時間點但以單獨的劑型在相同或不同的給藥部位上給予化合物進行。

“並行給藥”、“共同給藥”、“同時給藥”及“同時地給藥”的用語是指所述化合物係以組合給藥。

在另一實施例中，本揭露提供治療方法，其包含將本揭露化合物與一種或多種其它的藥劑組合給藥，其中所述一種或多種其它的藥劑可選自本文所討論的藥劑。

在一個實施例中，本揭露化合物與抗糖尿病藥劑一起給藥，所述抗糖尿病藥劑包含但不限於雙胍(例如二甲雙胍)、磺醯脲(例如甲苯磺丁脲(tolbutamide)、格列苯脲(glibenclamide)、格列齊特(gliclazide)、氯磺丙脲(chlorpropamide)、妥拉磺脲(tolazamide)、乙醯苯磺醯環己脲(acetohexamide)、格列吡脲(glyclopyramide)、格列美吡拉(glimepiride)或克吡噻(glipizide)、唑烷二酮類(thiazolidinedione)(例如吡格列酮(pioglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)或洛貝格列酮(lobeglitazone))、格列紮(glitazar)(例如沙格列紮(saroglitazar)、阿格列紮(aleglitazar)、莫格列紮(muraglitazar)或替格列紮(tesaglitazar))、美格替耐(meglitinide)(例如那格列奈(nateglinide)、雷帕格列奈(repaglinide)、二肽基肽酶4(DPP-4)抑制劑(例如西他列汀(sitagliptin)、維格列汀(vildagliptin)、沙克列汀(saxagliptin)、林那列汀(linagliptin)、吉密列汀(gemigliptin)、阿那列汀(anagliptin)、替格列汀(teneligliptin)、阿格列汀(alogliptin)、翠拉列汀(trelagliptin)、杜特列汀(dutogliptin)或歐馬列汀(omarigliptin))、格列酮(glitazone)(例如匹格列酮(pioglitazone)、羅格列酮(rosiglitazone)、貝拉格列酮(balaglitazone)、瑞沃格列酮(rivoglitazone)或洛貝格列酮(lobeglitazone))、鈉-葡萄糖連結的轉運蛋白2(SGLT2)抑制劑(例如恩格列淨(empagliflozin)、卡格列淨(canagliflozin)、達格列淨(dapagliflozin)、艾格列淨(ipragliflozin)、艾格列淨(Ipragliflozin)、托格列淨(tofogliflozin)、依碳酸舍格列淨(sergliflozin etabonate)、依碳酸瑞格列淨(remogliflozin etabonate)或依格列淨(ertugliflozin)、SGLTL1抑制劑、GPR40促效劑(FFAR1/FFA1促效劑，例如法斯利方(fasiglifam))、葡萄糖依賴性促胰島素肽(GIP)及其類似物、α葡萄糖苷酶抑制劑(例如伏格列波糖(voglibose)、阿卡波糖或米格列醇(miglitol))或胰島素或胰島素類似物，包含具體指明的藥劑的藥學上可接受的鹽及所述藥劑及鹽的藥學上可接受的溶劑合物。

在另一實施例中，本揭露化合物與抗肥胖劑一起給藥，所述抗肥胖劑包含但不限於肽YY或其類似物、神經肽Y受體第2型(NPYR2)促效劑、NPYR1或NPYR5拮抗劑、大麻素受體第1型(CB1R)拮抗劑、脂肪酶抑制劑(例如奧利司他(orlistat))、人類前胰島肽(human proislet peptide)(HIP)、黑皮質素受體4促效劑(例如司美諾肽(setmelanotide))、黑色素凝集激素受體1拮抗劑、法尼醇(farnesoid)X受體(FXR)促效劑(例如奧貝膽酸(obeticholic acid))、唑尼沙胺(zonisamide)、苯丁胺(phentermine)(單獨或與托比拉邁(topiramate)組合)、正腎上腺素/多巴胺再吸收抑制劑(例如丁胺苯丙酮(buproprion))、類鴉片受體拮抗劑(例如納曲酮(naltrexone))、正腎上腺素/多巴胺再吸收抑制劑與類鴉片受體拮抗劑的組合(例如丁胺苯丙酮與納曲酮的組合)、GDF-15類似物、西布曲明(sibutramine)、膽囊收縮素促效劑、澱粉素及其類似物(例如普蘭林肽 (pramlintide))、瘦素及其類似物(例如美曲普汀(metroleptin))、血清素啟動劑(serotonergic agent)(例如氯卡色林(lorcaserin))、甲硫胺酸胺肽酶2(MetAP2)抑制劑(例如貝洛拉尼(beloranib)或ZGN-1061)、苯甲曲秦(phendimetrazine)、安非拉酮(diethylpropion)、苄非他明(benzphetamine)、SGLT2抑制劑(例如恩格列淨(empagliflozin)、卡格列淨(canagliflozin)、達格列淨(dapagliflozin)、艾格列淨(ipragliflozin)、艾格列淨(Ipragliflozin)、托格列淨(tofogliflozin)、依碳酸舍格列淨(sergliflozin etabonate)、依碳酸瑞格列淨(remogliflozin etabonate)或依格列淨(ertugliflozin))、SGLTL1抑制劑、雙SGLT2/SGLT1抑制劑、成纖維細胞生長因子受體(FGFR)調節劑、AMP活化的蛋白激酶(AMPK)啟動劑、生物素、MAS受體調節劑或升糖素受體促效劑(單獨或與另一GLP-1R促效劑(例如利拉魯肽、艾塞那肽、杜拉魯肽、阿必魯肽、利塞那肽或希馬魯肽)的組合)，包含具體指明的藥劑的藥學上可接受的鹽及所述藥劑及鹽的藥學上可接受的溶劑合物。

在另一實施例中，本揭露化合物與治療NASH的藥劑一起給藥，所述藥劑包含但不限於PF-05221304、FXR促效劑(例如奧貝膽酸)、PPAR α/δ促效劑(例如艾拉非諾(elafibranor))、合成脂肪酸-膽酸共軛物(例如阿拉曲(aramchol))、凋亡蛋白酶抑制劑(例如恩利卡生(emricasan))、抗離胺醯基氧化酶同系物2(LOXL2)單株抗體(例如辛圖珠單抗(simtuzumab))、半乳糖凝集素3抑制劑(例如GR-MD-02)、MAPK5抑制劑(例如GS-4997)、趨化激素受體2(CCR2)與CCR5的雙重拮抗劑(例如森尼韋若(cenicriviroc))、成纖維細胞生長因子21(FGF21)促效劑(例如BMS- 986036)、白三烯D4(LTD4)受體拮抗劑(例如泰魯司特(tipelukast))、菸鹼酸類似物(例如ARI 3037MO)、ASBT抑制劑(例如沃利巴特(volixibat))、乙醯基-CoA羧酶(ACC)抑制劑(例如NDI 010976)、己酮糖磷酸酶(ketohexokinase)(KHK)抑制劑、二乙醯基甘油醇乙醯基轉移酶2(DGAT2)抑制劑、CB1受體促效劑、抗CB1R抗體或細胞凋亡信號調節激酶1(ASK1)抑制劑，包含具體指明的藥劑的藥學上可接受的鹽及所述藥劑及鹽的藥學上可接受的溶劑合物。

本揭露的這些藥劑及化合物可與藥學上可接受的載劑組合，例如鹽水、林格氏溶液、葡萄糖溶液及類似者。特定劑量方案(即劑量、時程及重複)取決於特定個體及所述個體的病史而定。

可接受的載劑、賦形劑或穩定劑在所使用的劑量及濃度下對接受者無毒性，且可包括緩衝劑，例如磷酸鹽、檸檬酸鹽及其它的有機酸；鹽，例如氯化鈉；抗氧化劑，包含抗壞血酸及甲硫胺酸；防腐劑(例如氯化十八烷基二甲基苯甲銨；六甲氯銨；羥基氯苯胺、氯化苄乙氧銨、酚、丁醇或苯甲醇、對羥苯甲酸烷酯(例如對羥苯甲酸甲酯或對羥苯甲酸丙酯)；兒茶酚；間苯二酚；環己醇；3-戊醇及間-甲酚)；低分子量(少於約10個殘基)多肽；蛋白質，例如血清白蛋白、明膠或免疫球蛋白；親水性聚合物，例如聚乙烯基吡咯啶酮；胺基酸，例如甘胺酸、穀胺醯胺、天冬醯胺、組胺酸、精胺酸或離胺酸；單醣、雙醣及其它碳水化合物，包含葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合劑，例如EDTA；糖，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；鹽形成相對離子，例如鈉；金屬錯合物(例如Zn-蛋白錯合物)及/或非離子性介面活性劑，例如TWEEN^TM、PLURONICS^TM或聚乙二醇(PEG)。含有本揭露這些試劑及/或化合物的脂質體以本領域中已知的方法製備，例如美國專利案第4,485,045及4,544,545號中所述。具有提高的循環時間的脂質體公開於美國專利案第5,013,556號中。特別有用的脂質體可經由包括磷脂醯膽鹼、膽固醇及經PEG衍生的磷脂醯乙醇胺(PEG-PE)的脂質組成物以反相蒸發方法以產生。脂質體經擠壓通過特定孔徑大小的濾網以得到具有所需直徑的脂質體。

本揭露的這些藥劑及/或化合物也可包封在例如以凝聚技術或介面聚合所製備的微膠囊中，例如分別為膠體藥物遞輸系統(例如脂質體、白蛋白微球、微乳液、奈米粒子及奈米膠囊)的羥甲基纖維素或明膠微膠囊及巨乳液的聚(甲基丙烯酸甲酯)微膠囊。這類技術公開於《雷明頓：藥學科學與實踐(Remington,The Science and Practice of Pharmacy)》，第20版，Mack Publishing(2000)。

可使用持續釋放型製劑。持續釋放型製劑的合適實例包含含有上述任一化學式的化合物的固體疏水性聚合物的半透性基質，所述基質呈成形物件的形式，例如膜或微膠囊。持續釋放型基質的實例包含聚酯、水凝膠(例如聚甲基丙烯酸-2-羥基乙酯或聚乙烯醇、聚乳酸(美國專利案第3,773,919號)、L-谷胺酸與7-L-谷胺酸乙酯的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯酯、例如於LUPRON DEPOT^TM(由乳酸-羥乙酸共聚物及利普安(leuprolide acetate)所組成的可注射微球)中使用的可降解的乳酸-羥乙酸共聚物、蔗糖乙酸異丁酯及聚-D-(-)-3-羥基丁酸。

用於靜脈內給藥的配製物必須為無菌。這可以經由例如無菌過濾薄膜過濾而輕易地實現。本揭露化合物通常放於具有無菌出入口的容器中，例如具有以皮下注射針可刺穿的塞子的靜脈內溶液袋或小瓶。

適合的乳液可使用市售脂肪乳液製備，例如Intralipid^TM、Liposyn^TM、Infonutrol^TM、Lipofundin^TM及Lipiphysan^TM。可將活性成分溶解在預混合的乳液組成物中，或者溶解在油中(例如大豆油、紅花子油、棉籽油、芝麻油、玉米油或杏仁油)，且在與磷脂(例如卵磷脂、大豆磷脂或大豆卵磷脂)及水混合時形成乳液。應理解，可添加其它的成分(例如甘油或葡萄糖)以調整乳液的滲壓性。適合的乳液通常含有最多20%的油，例如介於5%與20%之間。脂肪乳液可包括介於0.1μm與1.0μm之間，特別是0.1μm至0.5μm之間的脂肪滴，且pH在5.5至8.0的範圍內。

乳液組成物可以是將本揭露化合物與Intralipid^TM或其組分(大豆油、卵磷脂、甘油及水)混合而製備的組成物。

用於吸入或吹入的組成物包含在藥學上可接受的水性或有機溶劑或其混合物中的溶液及懸浮液，以及粉末。液體或固體組成物可含有如上文提出的適合的藥學上可接受的賦形劑。在一些實施例中，所述組成物經口或鼻呼吸途徑給藥以達局部或全身性效用。在較佳為無菌的藥學上可接受的溶劑中的組成物可經由氣體而氣霧化。經氣霧化的溶液可自氣霧化裝置直接吸入或可將氣霧化裝置附接至面罩、帷幕或間歇性正壓呼吸機。溶液、懸浮液或粉末組成物可使用以適當的方式遞輸配製物的裝置給藥，較佳地經口或鼻。

套組

本揭露的另一方面提供包括有上述任一化學式的化合物或包括本揭露任一上述化學式的化合物或的藥物組成物的套組。除了本揭露上述任一化學式的化合物或其藥物組成物之外，套組可包含診斷或治療劑。套組也可包含診斷或治療方法的用法說明。在一些實施例中，套劑組包含上述任一化學式的化合物或其藥物組成物以及診斷試劑。在其它實施例中，試劑組包含上述任一化學式的化合物或其藥物組成物。

在又一實施例中，本揭露包括適於執行本文所述治療方法的套組。在一個實施例中，所述套組含有第一劑型，其包括有足以進行本揭露的方法的數量的一種或多種本揭露化合物。在另一實施例中，所述試劑組包括足以進行本揭露方法的數量的一種或多種本揭露化合物以及用於所述劑型的容器。

製備

上述任一化學式的化合物可使用合成有機化學領域的熟知技藝者常見的通用知識，以下文所述的通用及特定的方法製備。這類常見通用知識可見於標準的參考書中，例如《綜合有機化學(Comprehensive Organic Chemistry)》,Barton及Ollis編，Elsevier；《綜合有機轉化：官能團製備指南(Comprehensive Organic Transformations：A Guide to Functional Group Preparations)》,Larock，約翰威利國際出版公司(John Wiley and Sons)；及《有機合成方法綱要(Compendium of Organic Synthetic Methods)》，第I到XII卷(Wiley-Interscience出版)。本文所使用的起始材料為市售的材料或經本領域中已知的慣例方法製備。

在上述任一化學式的化合物的製備中，應注意到本文所述的一些製備方法可能需要保護遠端官能團(例如在上述前驅物化學式中任一者的伯胺、仲胺、羧基)。這類保護的需求取決於遠端官能團的性質以及製備方法的條件而改變。這類保護的需求容易由本領域的技術人員確定。這類保護/去保護方法的使用也在本技術領域範圍內。有關保護基及其用途的總體描述，請參見Greene，《有機合成中的保護基(Protective Groups in Organic Synthesis)》，約翰威利國際出版公司，紐約，1991。

例如，某些化合物含有伯胺或羧酸官能團，如果未經保護，其可能干擾分子其它位點的反應。因此，可使用可在後續步驟移除的適當的保護基將這類官能團保護。適用於胺及羧酸保護的保護基包含那些常用於肽合成的保護基(例如用於胺的N-叔丁氧基羰基(Boc)、苯甲氧基羰基(Cbz)及9-芴基亞甲氧基羰基(Fmoc)，以及用於羧酸的低碳烷酯或苯甲酯)，其在所述反應條件下通常不具有化學反應性，且通常無需上述任一化學式的化合物中的其它官能團的化學改變即可移除。

下文所述的流程意欲提供在本揭露化合物的製備中所使用的方法的概括說明。本揭露的一些化合物可含有具有立體化學名稱(R)或(S)的單一或多個手性中心。本領域的技術人員將明白所有的合成轉換可以類似的方式進行，不論材料是否為對映異構性富集的或消旋性。而且，所欲光學活性材料的解析可使用例如本文及化學參考文獻中所述的熟知方法在順序中任何所要的點上發生。

經由本文所述方法所製備的胺化合物可用經保護的2-溴乙酸酯在適當的鹼(例如K₂CO₃、Et₃N、NaH或LiHMDS)存在下於極性非質子性溶劑中(例如但不限於DMF、DMAc、DMSO或NMP)烷基化以產出化合物。可進行標準的酯水解以提供酸。如果Pg²為叔丁基，則可使用標準的酸去保護方法例如TFA/DCM、HCl/1,4-二

烷、HCl/EtOAc或其他適宜條件)產出酸。

實驗

溶劑之縮寫如下表所示。

分析條件

X射線粉末繞射(XRPD)

XRPD分析使用PANalytical Empyrean/X' Pert3 X射線粉末繞射儀中，使用的XRPD參數如下表所示。

XRPD參數

單結晶X射線繞射(SCXRD)

SCXRD設備參數

熱重分析與微差掃描熱量法(TGA& DSC)

熱重分析(TGA)數據使用TA Instruments的TA Q5000/Discovery 5500 TGA蒐集。微差掃描熱量法(DSC)於TA Instruments的TA Q2000/Discovery 2500 DSC上操作。參數細節如下表所列。

TGA和DSC測試參數

¹ H-核磁共振光譜( ¹ H-NMR)

¹H液態核磁共振光譜數據為使用DMSO-_d6於Bruker 400M核磁共振光譜儀蒐集。

動態水分蒸氣吸附(DVS)

動態水分蒸氣吸附(DVS)是經由SMS(Surface Measurement Systems)DVS Intrinsic測量。相對溼度25℃以氯化鋰、硝酸鎂及氯化鉀的潮解點進行校正。DVS測試參數如下表所列。

DVS測試參數

高效液相層析法(HPLC)

使用Agilent 1260 HPLC，層析條件如下表所示。

層析條件與參數

實例1. 合成(S)-2-((4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)-氧代)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]-咪唑-6-羧酸(化合物I)

步驟1

添加叔-丁基4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二

硼戊環-2-基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸酯(1.9g，6.4mmol)以及碳酸銫(Cs₂CO₃)(3.8g，11.6mmol)和[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(Pd(dppf)Cl₂)(416mg，0.58mmol)至1,4-二

烷(50ml)中的3-溴苯酚(1.0g，5.8mmol)溶液。將反應混合物在氮氣下於90℃攪拌8小時。將反應混合物經由矽藻土過濾得到溶液，加入水(150ml)稀釋並用乙酸乙酯(150ml×3)萃取，將此結合有機物以鹽水洗滌(150ml×3)，乾燥並真空濃縮取得粗產物。粗產物利用製備型薄層層析法(Pre-TLC)(PE：EA=2：1)純化得到白色固體的叔-丁基4-(3-羥基苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸酯(1.51g，94%產率)。LCMS：[M+H]⁺=221，滯留時間(10mM NH₄HCO₃)=1.81分鐘。

步驟2

添加1-(溴甲基)-4-氯-2-氟苯(223mg，1.0mmol)以及三(二亞苄基丙酮)二鈀(91.5mg，0.1mmol)以及BINAP(62.2mg，0.1mmol)至1,4-二

烷(10ml)溶液中的叔-丁基4-(3-羥基苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸酯(275mg，1.0mmol)。將反應混合物在氮氣下於100℃攪拌8小時。冷卻反應至室溫後加入水(150ml)稀釋並用乙酸乙酯((150ml×3))萃取，將此結合有機物以鹽水洗滌(150ml×3)，乾燥並真空濃縮取得粗產物。粗產物利用製備型薄層層析法(PE：EA=3：1)純化得到黃色油狀的叔-丁基4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸酯(241mg，57.8%產率)。LCMS：[M+H]⁺=363，滯留時間(10mM NH4HCO3)=2.04分鐘。

步驟3

加入鹽酸/1,4-二

烷(1.2mL)至二氯甲烷(10mL)中的叔-丁基4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-羧酸酯(322mg，0.77mmol)溶液。將反應混合物於室溫攪拌2小時。反應加入水(50mL)稀釋並用乙酸乙酯(50mlx3)萃取。將此結合有機物以鹽水洗滌(50ml×3)，乾燥並真空濃縮取得粗產物，粗產物利用製備型薄層層析法(PE：EA=5：1)純化得到黃色油狀4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-1,2,3,6-四氫吡啶(198mg)。LCMS：[M+H]⁺=318，滯留時間(10mM NH4HCO3)=1.61分鐘。

步驟4

添加叔-丁基(S)-2-(氯甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並 [d]咪唑-6-羧酸酯(85mg，0.28mmol)以及N，N-二異丙基乙基胺(DIPEA)(0.3mL，1.4mol)至1,4-二

烷(10mL)中的4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-1,2,3,6-四氫吡啶(90mg，0.28mmol)於溶液。將混合物於90℃攪拌3小時。反應加入水(100mL)稀釋並用乙酸乙酯(100ml×3)萃取。將此結合有機層以鹽水洗滌(100ml×3)，乾燥並真空濃縮取得粗產物，粗產物利用製備型薄層層析法純化得到黃色固體的叔-丁基(S)-2-((4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]咪唑-6-羧酸酯(80mg，46%產率)。LCMS：[M+H]⁺=618，滯留時間(10mM NH4HCO3)=2.36分鐘。

步驟5

添加三氟乙酸(TFA)(2mL，26.93mmol)至二氯甲烷(DCM)(12mL)中的叔-丁基(S)-2-((4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]咪唑-6-羧酸酯(80mg，0.13mmol)溶液。將混合物於室溫攪拌3小時。反應經由真空濃縮得到粗產物並將其以製備型高效液相層析法(碳酸氫銨，NH₄HCO₃)純化得到白色固體的(S)-2-((4-(3-((4-氯-2-氟苯甲基)氧代)苯基)-3,6-二氫吡啶-1(2H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]咪唑-6-羧酸(18.5mg，25%產率)。LCMS：[M+H]⁺=562.0，滯留時間(10mM NH4HCO3)=1.40分鐘。

¹H NMR(400MHz,MeOD)δ 8.21-8.20(brs,1 H),7.97(dd,J=8.5,1.4Hz,1 H),7.62(d,J=8.5Hz,1 H),7.54(t,J=8.2Hz,1 H),7.25(ddd,J=6.3,5.6,2.0Hz,3 H),7.11-7.02(m,2 H),6.89(dd,J=7.3, 1.9Hz,1 H),6.13-6.12(brs,1 H),5.28(dd,J=9.4,5.0Hz,1 H),5.13(s,2 H),4.92(d,J=7.1Hz,1 H),4.77-4.71(m,1 H),4.63(dd,J=13.4,8.2Hz,1 H),4.53-4.46(m,1 H),4.14(d,J=13.6Hz,1 H),4.03(d,J=13.6Hz,1 H),3.25(d,J=2.4Hz,2 H),2.80(ddd,J=22.5,12.9,7.2Hz,3 H),2.62-2.48(m,3 H)。

實例2. 合成(S)-2-((6-((4-氰基-2-氟苯甲基)氧代)-3',6'-二氫-[2,4'-聯吡啶]-1'(2'H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]咪唑-6-羧酸(化合物II)

步驟1

於10-15℃之間分次添加3-氟-4-(羥甲基)苯甲腈(28.1g，186.5mmol)至叔丁醇鉀(31.3g，279.7mmol)於四氫呋喃(500mL)的攪拌懸浮液。將混合物於15℃攪拌45分鐘並分次添加2,6-二氯吡啶(23.0g，155.4mmol)後於15℃攪拌18小時。將混合物倒入氯化銨水溶液(1000mL)。加入乙酸乙酯(1000mL)並將混合物攪拌15分鐘。將混合物經由矽藻土墊過濾。將有機層分離並以乙酸乙酯(2×600mL)萃取水溶液層。將此結合有機層以鹽水洗滌(500ml)，以硫酸鈉乾燥以及在減壓環境下過濾與濃縮。粗產物以矽膠管柱層析法純化(PE/EtOAc=10/1)得到淡黃色固體的4-((6-氯吡啶-2-氧基)甲基)-3-氟苯甲腈(26.0g，64%產率)。

¹H NMR(400MHz,CDCl3)δ 7.67-7.63(t,J=7.6Hz,1H),7.59-7.55(t,J=7.6Hz,1H),7.49-7.46(dd,J1=8.0Hz,J2=1.2Hz,1H),7.40-7.37(dd,J1=9.2Hz,J2=1.2Hz,1H),6.97-6.95(d,J=7.6Hz,1H),6.75-6.73(d,J=8.4Hz,1H),5.48(s,2H)。

步驟1a

將4-[(6-氯-2-吡啶基)氧代甲基]-3-氟-苯甲腈(1g，3.81mmol)，叔-丁基4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二

硼戊環-2-基)-3,6-二氫-2H-吡啶-1-羧酸酯(1.29g，4.19mmol)，[1,1'-雙(二苯基膦)二茂鐵]二氯化鈀(278.3mg，0.38mmol)，以及碳酸氫鈉(479.69mg，5.71mmol)於二

烷(20mL)和水(4g，222.22mmol)中的混合物在氮氣環境下於90℃攪拌2小時直到液相層析指示反應已完成。將反應混合物以含乙酸乙酯的矽藻土過濾，並將結合有機物以真空濃縮並以矽膠管柱層析法純化(Hexanes/EtOAc=0~11%)得到所需產物淡黃色液體的叔-丁基4-[6-[(4-氰基-2-氟-苯基)甲氧基]-2-吡啶基]-3,6-二氫-2H-吡啶-1-羧酸酯(1.5g，3.63mmol，95.4%產率)。LCMS：[M+H]⁺=410.1；滯留時間(10mM NH4HCO3)=2.22 分鐘。

步驟2

緩慢添加三氟乙酸(TFA)(7.40g，64.90mmol，5mL)至叔-丁基4-[6-[(4-氰基-2-氟-苯基)甲氧基]-2-吡啶基]-3,6-二氫-2H-吡啶-1-羧酸酯(1.5g，3.66mmol)於二氯甲烷(DCM)(20mL)中的溶液。將反應物於28℃攪拌2小時。待液相層析指示反應已完成後，將反應混合物以真空濃縮得到淡黃色液體的粗產物3-氟-4-[[6-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-吡啶基]氧代甲基]苯甲腈(1.8g，3.94mmol)三氟乙酸鹽。粗產物無須進一步純化直接於下一個步驟中使用。LCMS：[M+H]+=310.1；滯留時間(0.01% TFA)=1.42分鐘。

步驟3

將3-氟-4-[[6-(1,2,3,6-四氫吡啶-4-基)-2-吡啶基]氧代甲基]-苯甲腈(340mg，0.80mmol)，叔-丁基2-(氯甲基)-3-[[(2S)-

丁環-2-基]甲基]苯並咪唑-5-羧酸酯(225mg，670mmol，其生產合成公開於國際申請WO2018/109607中，所述申請以引用的方式併入本文中)，以及N,N-二異丙基乙基胺(DIPEA)(216.42mg，1.67mmol)於二

烷(10mL)的混合物於90℃攪拌1小時直到液相層析指示反應已完成，將反應混合物真空濃縮並以矽膠管柱層析法純化(Hexanes/EtOAc=20：1)純化得到所需產物淡棕色液體的叔-丁基2-[[4-[6-[(4-氰基-2-氟-苯基)甲氧基]-2-吡啶基]-3,6-二氫-2H-吡啶-1-基]甲基]-3-[[(2S)-

丁環-2-基]甲基]苯並咪唑-5-羧酸酯(366mg，0.31mmol)。LCMS：[M+H]⁺=610.0；滯留時間(10mM NH₄HCO₃)=1.87分鐘。

步驟4

緩慢添加三氟乙酸(2.96g，25.96mmol，2mL)於二氯甲烷(2mL)中的溶液至叔-丁基2-[[4-[6-[(4-氰基-2-氟-苯基)甲氧基]-2-吡啶基]-3,6-二氫-2H-吡啶-1-基]甲基]-3-[[(2S)-

丁環-2-基]甲基]苯並咪唑-5-羧酸酯(180mg，0.30mmol)於二氯甲烷(6mL)中的溶液於28℃並攪拌1小時。待液相層析判斷反應已完成後，將反應混合物以真空濃縮，粗產物以製備型高效液相層析法(10mM NH₄HCO₃)純化得到白色固體(S)-2-((6-((4-氰基-2-氟苯甲基)氧代)-3',6'-二氫-[2,4'-聯吡啶]-1'(2'H)-基)甲基)-1-(

丁環-2-基甲基)-1H-苯並[d]咪唑-6-羧酸(54mg，33%產率)。LCMS：[M+H]+=554.2；滯留時間(10mM NH₄HCO₃)=1.42分鐘。

¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ 12.73-12.72(brs,1 H),8.27-8.26(brs,1 H),7.90(d,J=10.3Hz,1 H),7.81(dd,J=8.5,1.5Hz,1 H),7.69(dt,J=13.2,8.0Hz,4 H),7.10(d,J=7.5Hz,1 H),6.85-6.61(m,2 H),5.49(s,2 H),5.15-5.02(m,1 H),4.80(dd,J=15.2,7.3Hz,1 H),4.71-4.60(m,1 H),4.40(ddt,J=11.9,8.9,6.0Hz,2 H),4.07(d,J=13.5Hz,1 H),3.91(d,J=13.5Hz,1 H),3.28-3.17(m,2 H),2.73(d,J=2.5Hz,2 H),2.70-2.60(m,1 H),2.43-2.42(m,2 H),2.44-2.34(m,1 H)。

實例3. 1：1化合物I托立斯鹽(A型)結晶型態的製備與定性

3.1.1 製備方法

將500.9mg的游離型化合物I溶解於20mL的丙酮/水(9：1，v：v)溶液。同時將同等莫耳的托立斯(Tris)(107.9mg)溶解於2.5mL的水。將得到的托立斯溶液逐滴添加入游離型化合物I的溶液並於室溫下攪拌(RT，~1000rpm)。將得到的漿液持續於室溫下攪拌17小時，後冷卻至 5℃再攪拌4小時。利用離心分離混合物中的固體並於室溫真空乾燥20小時以得到445.9mg的所需產物(~73.2%產率)。

得到的固體產物進一步由XRPD進行定性(FIG.1以及Table 1)。

TGA結果顯示上昇至150℃時質量流失為3.2%且DSC結果顯示於112.0℃以及174.3℃(峰值溫度)的兩個吸熱峰(FIG.2B)。

¹H液態核磁共振光譜顯示托立斯/游離型的莫耳比率為1.0：1並且無觀察到殘餘溶劑。以VH-XRPD以及單結晶結構測定分析1：1化合物I托立斯鹽(A型)後確認其為單一水合物，在相對溼度

30%的環境下可能脫水。因此建議1：1化合物I托立斯鹽(A型)保存於20~30℃且相對濕度

40%的環境以避免脫水作用。

3.1.2 替代製備方法

以製漿/溶液結晶作用嘗試多次製備1：1化合物I托立斯鹽(A型)。製備結果整理於表A與表B。定性細節整理於表C。

托立斯鹽A型(樣品ID 1)的再製備為將等同莫耳的游離型化合物I與托立斯置於THF一天製漿，接著於室溫下真空乾燥~2.5天。真空乾燥後樣品的結晶度明顯降低。TGA/DSC曲線顯示上昇至150℃時7.1%的質量流失以及位於89.4℃以及170.5℃(峰值溫度)的兩個吸熱峰。¹H核磁共振光譜顯示托立斯/游離型化合物的莫耳比率為1.0：1，且剩餘THF/游離型化合物的莫耳比率為0.62：1(6.1%，重量百分比)。HPLC測量托立斯鹽A型(樣品ID 1)的純度為93.87面積百分比。

托立斯鹽A型(樣品ID 3)的再製備為將15mg的游離型化合物I與等同莫耳的托立斯作為起始物質經溶液結晶作用取得。TGA/DSC曲線顯示上昇至150℃時7.8%的質量流失以及位於98.2℃以及174.6℃(峰值溫度)的兩個吸熱峰。¹H核磁共振光譜顯示托立斯/游離型化合物的莫耳比率為1.0：1，且剩餘丙酮/游離型化合物的莫耳比率為0.04：1(0.3%，重量百分比)。HPLC測量托立斯鹽A型(樣品ID 3)的純度為97.46面積百分比。

托立斯鹽A型(樣品ID 4)的再製備為將500mg的游離型化合物I與等同莫耳的托立斯作為起始物質經溶液結晶作用取得。TGA/DSC曲線顯示上昇至150℃時6.1%的質量流失以及位於90.9℃以及174.2℃(峰值溫度)的兩個吸熱峰。¹H核磁共振光譜顯示Tris/游離型化合物的莫耳比率為0.9：1，且剩餘丙酮/游離型化合物的莫耳比率為0.04：1(0.3%，重量百分比)。HPLC測量托立斯鹽A型(樣品ID 4)的純度為98.04面積百分比。因其莫耳比率不為1：1，此批樣品未進一步用於配方研究。

托立斯鹽A型(樣品ID 5)的製備為將500mg的游離型化合物I與等同莫耳的托立斯作為起始物質經溶液結晶作用取得。TGA/DSC曲線顯示上昇至150℃時3.2%的質量流失以及位於112.0℃以及174.3℃(峰值溫度)的兩個吸熱峰。托立斯核磁共振光譜顯示托立斯/游離型化合物的莫耳比率為1.0：1，且剩餘丙酮/游離型化合物的莫耳比率為0.05：1(0.4%，重量百分比)。HPLC測量托立斯鹽A型(樣品ID 5)的純度為98.16面積百分比。

3.2 單結晶生成

SCXRD定性的單結晶1：1化合物I托立斯鹽(A型)為經由慢蒸散實驗取得。實驗細節如下說明。

將15.0mg的1：1化合物I托立斯鹽(A型)起始物質加入至3-mL玻璃瓶並添加1.0mL ACN/MeOH(1：1，v：v)溶劑混合物。經超音波清洗機震盪以加速溶解後，將懸浮液過濾。將得到的澄清液轉移至乾淨的4-mL殼小瓶。殼小瓶以PE蓋密封並刺一小洞。然後將其放置在實驗通風櫃中於室溫進行慢蒸散。經過2天的慢蒸散後觀察到桿狀結晶。

如單結晶X射線結晶法所證明，A型單結晶構造內的不對稱單位組成包含一個化合物I負離子，一個托立斯正離子以及一個水分子。進一步確認了A型為一種1：1化合物I托立斯鹽的單一水合物。

3.3 動態溶解度(Kinetic Solubility)

I)生物相關介質與pH緩衝液製備

模擬胃液(SGF)

秤量100mg的氯化鈉以及50mg的Triton X-100至50mL的容量瓶。加入適量的純水並用超音波震盪使所有固體完全溶解。加入約68μL的12M HCl以及與目標體積相近的足量純水並調整pH到1.8。以純水稀釋至目標體積，混和均勻並用pH指示計測量檢查pH值。

禁食狀態模擬腸胃液(FaSSIF)

秤量170mg的磷酸二氫鈉、21mg的氫氧化鈉以及310mg的氯化鈉，110mg的SIF粉末到50mL的容量瓶。加入適量的純水並用超音波震盪使所有固體完全溶解。添加與目標體積相近的足量純水並調整pH到6.5。以純水稀釋至目標體積，混和均勻並用pH指示計測量檢查pH值。

飽食狀態模擬腸胃液(FeSSIF)

秤量0.41mL的冰醋酸，202mg的氫氧化鈉以及594mg的氯化鈉，560mg的SIF粉末到50mL的容量瓶。加入適量的純水使所有固體完全溶解。添加與目標體積相近的足量純水並調整pH到5.0。以純水稀釋至目標體積，混和均勻並用pH指示計測量檢查pH值。

pH 8.0緩衝液

秤量302.5mg的托立斯到50mL的容量瓶。添加與目標體積相近的足量純水並調整pH到8.0。以純水稀釋至目標體積，混和均勻並用pH指示計測量檢查pH值。

II)動態溶解度測試

動態溶解度以1/4/24小時於水以及三種生物相關介質(SGF，FaSSIF以及FeSSIF)中進行評估。將3~4mg的固體化合物懸浮於3mL的各種培養液中(固體含量：1mg/mL，使用游離型化合物計算)取得懸浮液。接著將懸浮液於37℃翻動(25rpm)1/4/24小時。於每一個時間節點離心(12000rpm，2分鐘)取出~1.0mL的懸浮液並透過0.45μm的PTFE薄膜過濾取得上清液以用於HPLC及pH檢測。剩餘固體顆粒用於XRPD分析。細節成果整理於表2。

基於溶解度評估的結果，1：1化合物托立斯鹽(A型)於水中的溶解度較佳。游離型以及托立斯鹽A型在FaSSIF以及FeSSIF於1小時後展示了近似的溶解度。溶解度測試後在SGF內以及XRPD的結果內觀察到1：1化合物托立斯鹽(A型)的型態改變。因為樣品為懸浮態，純度的降低僅供參考。

3.4.1 固體穩定性評估(I/II)

為了評估1：1化合物I托立斯鹽(A型)以及游離型非晶質的物理與化學穩定性，樣品分別放置於60℃一天以及25℃/60%相對溼度或40℃/75%相對溼度一週的環境條件。由XRPD以及HPLC對這些固體進行定性並整理結果於下表3中。經過一週後沒有觀察到型態改變。1：1化合物I托立斯鹽(A型)相較於游離型非晶質於各個條件中皆展示了更佳的化學穩定性。

3.4.2. 固體穩定性評估(II/II)

將固體狀態的1：1化合物I托立斯鹽(A型)放置於常溫或40℃/75%相對溼度的環境條件下1或3天進一步評估其化學穩定性。HPLC純度以及重量純度由HPLC進行三重覆測試並整理結果於表4。1：1化合物I托立斯鹽(A型)於各個條件中皆展示了更佳的化學穩定性。

3.5 溶液穩定性評估

於常溫下以SGF(pH 1.8)以及pH 8.0緩衝液評估1：1化合物I托立斯鹽(A型)的溶液穩定度。準備濃度為0.01mg/mL的澄清液體並放置於常溫下6小時，1天及5天。pH 1.8之溶液在1天後並無觀察到明顯的降解作用，然而pH 8.0之溶液的純度明顯降低。HPLC純度以及pH值整理於表5以及表6中。

3.6 吸濕性

為了調查受濕度影響的固體穩定性，於25℃相對溼度0%以及95%的條件蒐集1：1化合物I托立斯鹽(A型)的DVS吸附等溫線圖。於25℃相對溼度80%的條件下觀察到2.77%的水吸收量。考慮到1：1化合物I托立斯鹽(A型)為一種水合物且可能在低濕度的情形下脫水，DVS測試同時也於20℃以及30℃進行以進一步確定適合的保存狀態及避免脫水現象。結果的細節整理於表7。於DVS測試後沒有觀察到型態改變。結合VH-XRPD以及DVS的結果：20~30℃以及相對溼度

40%的環境條件適宜1：1化合物I托立斯鹽(A型)的貯存。

3.7 同素異形體檢測

於不同條件下使用不同的溶液結晶作用或固體躍遷方法對1：1化合物I托立斯鹽(A型)進行同素異形體檢測的實驗，包括添加抗溶劑，添加逆反應抗溶劑，慢蒸散，慢冷卻，於室溫製漿，於50℃製漿，於5-50℃循環製漿，氣-固擴散作用，氣-液擴散作用，聚合物誘導結晶作用，以及研磨。

檢測結果顯示1：1化合物I托立斯鹽(A型)在大多數的條件下並無變化，顯示A型為安定之結構。

實例4. 1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)結晶型態的製備與定性

4.1.1 製備方法

混合15mg的游離型化合物II以及5.21mg於丙酮中的檸檬酸。將得到的漿液於室溫攪拌3天，緊接著於室溫真空乾燥~12小時。

對得到的固體產物進一步以XRPD定性(FIG.4以及表8)

TGA結果(FIG.5A)顯示上昇至150℃質量流失為2.6%且DSC結果(FIG.5B)顯示一處於169.9℃(峰值溫度)的吸熱峰以及一處於173.3℃(峰值溫度)的放熱峰。

4.1.2 替代製備方法

以製漿/溶液結晶作用嘗試多次製備1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)。製備結果整理於表9與表10。詳細定性結果整理於表11。

1：1化合物II檸檬酸鹽A型(樣品ID 1)的再製備為將等同莫耳的起始物質與檸檬酸置於丙酮一天製漿，緊接著於室溫真空乾燥~1.5天。TGA/DSC曲線顯示1.4%上昇至150℃時的質量流失以及一處位於171.9℃(峰值溫度)的吸熱峰以及一處於175.5℃(峰值溫度)的放熱峰。¹H核磁共振光譜顯示檸檬酸/游離型化合物的莫耳比率為1.0：1(檸檬酸以及游離型的NMR訊號重疊，於計算中將游離型的積分減去)，且剩餘丙酮/游離型化合物的莫耳比率為0.16：1(1.2%，重量百分比)。1：1化合物II檸檬酸鹽A型(樣品ID 1)的HPLC純度經測為97.73面積百分比。

使用15mg的游離型化合物與檸檬酸(莫耳比率為1：1，酸/游離型)經溶液結晶作用取得1：1化合物II檸檬酸鹽A型(樣品ID 2)作為起始物質。TGA/DSC曲線顯示3.1%上昇至150℃時的質量流失以及一處位於169.9℃(峰值溫度)的吸熱峰以及一處於173.6℃(峰值溫度)的放熱峰。¹H核磁共振光譜顯示檸檬酸/游離型化合物的莫耳比率為1.0：1(於計算中減去游離型的積分)，且剩餘丙酮/游離型化合物的莫耳比率為0.09：1(0.9%，重量百分比)。1：1化合物II檸檬酸鹽A型(樣品ID 2)的HPLC純度經測為97.05面積百分比。

使用500mg的游離型化合物與檸檬酸(莫耳比率為1：1，酸/游離型)經溶液結晶作用取得1：1化合物II檸檬酸鹽A型(樣品ID 3)作為起始物質。TGA/DSC曲線顯示2.5%上昇至150℃時的質量流失以及一處位於166.6℃(峰值溫度)的吸熱峰以及一處於171.1℃(峰值溫度)的放熱峰。核磁共振氫譜顯示檸檬酸/游離型化合物的莫耳比率為1.0：1(於計算中減去游離型的積分)，且剩餘丙酮/游離型化合物的莫耳比率為0.08：1(0.6%，重量百分比)。1：1化合物II檸檬酸鹽A型(樣品ID 3)的HPLC純度經測為96.66面積百分比。

實例5. 1：1化合物II托立斯鹽(B型)結晶型態的製備與定性

5.1.1 製備方法

批次A：

1)於N₂氣體環境下，將一反應器裝滿丙酮(10L，10.0V)。伴隨著攪動加入1.0Kg的游離型化合物II(1.0eq)至反應器。調整溫度至23℃，於0.2μm微孔隙濾紙過濾前，將獲得的混合物攪拌0.5小時。蒐集過濾物。

2)於N₂氣體環境下，將過濾物轉移至反應器。添加10L的乙酸乙酯(10.0V)至反應器。調整溫度至21℃。於1.5小時內添加一托立斯溶液(218.8g的Tris(1.0eq)溶解於2L的軟水(2.0V))至反應器。攪拌混合物1小時。

3)以離心分離混合物。以乙酸乙酯(2L，2.0V)洗滌餅狀物並蒐集濾餅。

4)於70℃真空乾燥濾餅16小時獲得米白色1.03Kg的1：1化合物II托立斯鹽(B型)。

批次B：

1)於N₂氣體環境下，將一反應器裝滿丙酮(21.5L，10.0V)。伴隨著攪動加入2.15Kg的游離型化合物II(1.0eq)至反應器。調整溫度至25℃，於0.2μm微孔隙濾紙過濾前，將獲得的混合物攪拌0.5小時。蒐集過濾物。

2)於N₂氣體環境下，將過濾物轉移至反應器。添加21.5L的乙酸乙酯(10.0V)至反應器。調整溫度至21℃。於3小時內添加一托立斯溶液(470.4g的托立斯(1.0eq)溶解於4.3L的軟水(2.0V))至反應器。攪拌混合物1.5小時。

3)以離心分離混合物。以乙酸乙酯(4.3L，2.0V)洗滌餅狀物並蒐集濾餅。

4)於70℃真空乾燥濾餅16小時取得米白色2.45Kg的1：1化合物II托立斯鹽(B型)。

批次C：

1)將批次A與批次B取得的1：1化合物II托立斯鹽(B型)取3.45Kg(1.0eq)以3.45L的軟水(1V)混合。於N₂氣體環境下，伴隨著攪動將混合物加入一裝滿44.9L乙酸乙酯(13V)的反應器。調整溫度至25℃，並攪拌得到的混合物1個小時。

2)以離心分離混合物。以乙酸乙酯(6.9L，2.0V)洗滌餅狀物並蒐集濾餅。

3)於70℃真空乾燥濾餅16小時取得米白色3.45Kg的1：1化合物II托立斯鹽(B型)。

以XRPD定性批次C的1：1化合物II托立斯鹽(B型)(FIG.6以及表5-1)。TGA結果顯示3.7%上昇至150℃時的質量流失(FIG.7A)以及DSC結果顯示於116.1℃以及170.3℃(峰值溫度)的兩處吸熱峰(FIG.7B)。

以VH-XRPD對1：1化合物II托立斯鹽(B型)進行進一步確認。VH-XRPD顯示B型托立斯鹽與氮氣在相對濕度10%時轉換為新的型態，並且在暴露於一般環境條件(相對溼度40%)後轉變回來。結合定性的結果，可以相信1：1化合物II托立斯鹽(B型)為一水合物，可能於相對濕度

10%時脫水。

5.1.2 替代製備方法

於THF/MTBE(1：4，v：v)中攪拌游離型化合物II以及托立斯(莫耳比率1：0.95)的混合物7天，並於室溫真空乾燥~3小時以取得1：1化合物II托立斯鹽(B型)。

實例6. 1：1化合物II托立斯鹽(G型)結晶型態的製備與定性

6.1 製備方法

溶解15mg的1：1化合物II托立斯鹽(B型)於0.1mL的 NMP以生成一清澈溶液。逐滴添加乙腈(CH₃CN)至溶液中可見沉澱物析出。以離心分離出固體物，加熱至105℃並冷卻至室溫以取得1：1化合物II托立斯鹽(G型)。

以XRPD進一步定性獲得的固體(FIG.8以及表6-1)

TGA結果顯示上昇至150℃時質量流失為11.75%(FIG.9)

DSC結果顯示於50.9℃以及129.5℃(峰值溫度)的兩處吸熱峰。(FIG.10)

實例7. 1：1化合物II托立斯鹽(B型)與1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)的結晶型態定性

對1：1化合物II托立斯鹽(B型)與1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)以動態溶解度，固體穩定性，以及溶液穩定性進行評估。同時也評估游離型化合物II作為對照。此外，兩者的吸濕性也以DVS進行評估。

7.1 動態溶解度

動態溶解度以1/4/24小時於水以及三種生物相關介質(SGF，FaSSIF以及FeSSIF)中對1：1化合物II檸檬酸鹽，1：1化合物II托立斯鹽，以及游離型化合物II進行評估。將3~4mg的固體物懸浮於3mL的每種培養液中(固體物含量：1mg/mL，使用游離型化合物計算)取得懸浮液。而後將懸浮液於37℃翻動(25rpm)1/4/24小時。於每一個時間節點離心(12000rpm，2分鐘)取出~1.0mL的懸浮液並透過0.45μm的PTFE薄膜過濾取得上清液以用於HPLC及pH檢測。剩餘固體物用於XRPD分析。詳細結果整理於表7-1。基於溶解度評估的結果，1：1化合物II檸檬鹽(A型)以及1：1化合物II托立斯鹽(B型)在SGF，FaSSIF以及FeSSIF於1小時中展示了近似的溶解度，並高於游離型化合物的表現。1：1化合物II托立斯鹽(B型)展示了較佳的於水溶解度。因全部樣品皆為懸浮態，純度的結果僅供參考。

7.2.1 固體穩定性評估(I/II)

為了評估1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)，1：1化合物II托立斯鹽(B型)以及游離型化合物的物理與化學穩定性，樣品分別貯存在60℃1天以及25℃/60%相對溼度或40℃/75%相對溼度1週的條件下。這些固體由XRPD以及HPLC進行定性，結果整理於表7-2-1中。經XRPD結果以及HPLC層析圖證明，於一週後並沒有觀測到型態改變。1：1化合物 II檸檬酸鹽(A型)以及1：1化合物II托立斯鹽(B型)相較於游離型的化合物II展示了更佳的化學穩定性。

7.2.2 固體穩定性評估(II/II)

將固體狀態的1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)以及1：1化合物II托立斯鹽(B型)放置於常溫或40℃/75%相對溼度的環境條件下1或3天進一步評估其化學穩定性。HPLC純度以及重量純度由HPLC進行三重覆測試並整理結果於表7-2-2。1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)以及1：1化合物II托立斯鹽(B型)於評估條件中展示了相似的化學穩定性。

7.3 溶液穩定性評估

於常溫下以SGF(pH 1.8)以及pH 8.0緩衝液評估1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)以及1：1化合物II托立斯鹽(B型)的溶液穩定度。準備兩種濃度(0.01mg/mL，0.05mg/mL)的澄清液體並放置於常溫下6小時、1天及5天或6小時、1天、3天及7天。兩種鹽類皆於pH8.0溶液中展示了較佳的穩定性，然pH 1.8之溶液的純度於1天後有些微下降。測試之HPLC純度以及pH值結果整理於表7-3-1到7-3-4中。

7.4 吸濕性

為了調查受濕度影響的固體穩定性，於25℃相對溼度0%以及95%的條件下蒐集1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)以及1：1化合物II托立斯鹽(B型)的DVS吸附等溫線圖。結果整理於表7-4。於25℃/相對溼度 80%的條件下，觀察到1：1化合物II檸檬酸鹽(A型)0.71%的水吸收量。在週期2的吸水曲線中觀察到，1：1化合物II托立斯鹽(B型)的水吸收量於0%到10%相對濕度時增加了2.47%。於10%到80%相對濕度間水吸收量增加了0.97%。在DVS測試後兩種鹽類皆未觀察到型態改變。

Claims

一種化合物I的托立斯鹽，其中化合物I由以下結構式表示：

其中化合物I與參(羥甲)胺基甲烷的莫耳比率為1：1
如請求項1之托立斯鹽，其中托立斯鹽為結晶。
如請求項1之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式。
如請求項2或3之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單一水合物。
如請求項2或3之托立斯鹽，其中托立斯鹽為未溶劑化的。
如請求項4之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個選自於2θ在17.5°、20.1°、20.7°、21.1°、和22.6°±0.2的峰。
如請求項4之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在17.5°、20.1°、20.7°、21.1°以及22.6°±0.2的峰。
如請求項4之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、14.8°、17.5°、18.8°、20.1°、20.7°、21.1°以及22.6°±0.2的峰。
如請求項4之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，A 型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、8.1°、12.8°、14.8°、16.3°、17.5°、18.8°、19.3°、20.1°、20.7°、21.1°，22.6°、25.1°以及25.8°±0.2的峰。
如請求項6至9中任一項之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，A型，經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter，DSC)定性之峰相轉變溫度為173±3℃。
如請求項6至10中任一項之托立斯鹽，其中托立斯鹽至少重量百分比90%為單結晶形式A型。
一種化合物II的托立斯鹽，其中化合物II由以下結構式表示：

其中化合物II與參(羥甲)胺基甲烷的莫耳比率為1：1。
如請求項12之托立斯鹽，其中托立斯鹽為結晶。
如請求項13之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式。
如請求項13或14之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單一水合物。
如請求項13或14之托立斯鹽，其中托立斯鹽為未溶劑化的。
如請求項14或15之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，B型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個選自於2θ在4.1°、4.7°、18.8°、20.1°以及23.1°±0.2的峰。
如請求項14或15之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，B型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、14.7°、17.5°、18.8°、20.1°以及23.1°±0.2的峰。
如請求項14或15之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，B型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、8.2°、14.7°、16.4°、18.8°、20.1°、20.7°、21.3°以及23.1°±0.2的峰。
如請求項14或15之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，B型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在4.1°、8.2°、14.7°、16.4°、18.8°、19.1°、20.1°、20.7°、21.3°、23.1°、24.1°以及25.4°±0.2的峰。
如請求項17至20中任一項之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，B型，經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter，DSC)定性之峰相轉變溫度為168±4℃。
如請求項17至21中任一項之托立斯鹽，其中托立斯鹽至少重量百分比90%為單結晶形式B型。
如請求項14之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，G型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個選自於2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°以及18.5°±0.2的峰。
如請求項14之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，G型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4° 以及18.5°±0.2的峰。
如請求項14之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，G型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°、18.5°、21.5°、23.7°以及24.1°±0.2的峰。
如請求項14之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，G型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在6.2°、7.6°、13.1°、13.4°、18.0°、18.5°、20.8°、21.5°、23.7°以及24.1°±0.2的峰。
如請求項23至26中任一項之托立斯鹽，其中托立斯鹽為單結晶形式，G型，經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter，DSC)定性之峰相轉變溫度為129.5±4℃。
如請求項23至27中任一項之托立斯鹽，其中托立斯鹽至少重量百分比90%為單結晶形式G型。
一種化合物II的檸檬酸鹽，其中化合物II由以下結構式表示：

其中化合物II與檸檬酸的莫耳比率為1：1。
如請求項29之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為結晶。
如請求項30之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為單結晶形式。
如請求項31之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為單結晶形式，A 型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含至少三個選自於2θ在5.4°、9.4°、12.4°、14.3°以及17.8°±0.2的峰。
如請求項31之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在5.4°、9.4°、12.4°、14.3°以及17.8°±0.2的峰。
如請求項31之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在5.4°、9.4°、10.8°、12.4°、14.3°、16.2°、17.8°、19.6°以及24.9°±0.2的峰。
如請求項31之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為單結晶形式，A型，經X射線粉末繞射定性之圖譜中包含2θ在5.4°、9.4°、10.8°、12.4°、14.3°、16.2°、17.8°、18.8°、19.6°、23.6°以及24.9°±0.2的峰。
如請求項32至35中任一項之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽為單結晶形式，A型，經微差掃描熱量儀(differential scanning calorimeter，DSC)定性之峰相轉變溫度為170±3℃。
如請求項32至36中任一項之檸檬酸鹽，其中檸檬酸鹽至少重量百分比90%為單結晶形式A型。
一種藥物組成物，其包括請求項1至37中任一項所述的化合物，以及藥學上可接受的載劑。
一種治療心臟代謝及相關疾病的方法，其包括向需要這類治療的個體給予治療有效量的請求項1至37中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構物、溶劑合物或水合物或根據請求項38所述的藥物組成物，其中所述疾病是T1D、T2DM、糖尿病前期、特發性T1D、 LADA、EOD、YOAD、MODY、營養不良相關性糖尿病、妊娠糖尿病、高血糖症、胰島素抗性、肝臟胰島素抗性、葡萄糖耐受不良、糖尿病神經病變、糖尿病腎病變、腎疾病、糖尿病視網膜病變、脂肪細胞功能障礙、內臟脂肪囤積、睡眠呼吸暫停、肥胖症、飲食異常、使用其它藥劑引起的增重、過度嗜糖、異常血脂症、高胰島素血症、NAFLD、NASH、纖維變性、硬化、肝細胞癌、心血管疾病、動脈粥樣硬化、冠狀動脈疾病、周邊血管疾病、高血壓、內皮功能障礙、血管順應性不良、充血性心臟衰竭、心肌梗塞、中風、出血性中風、缺血性中風、創傷性腦損傷、肺性高血壓、血管成形術後再狹窄、間歇性跛行、餐後血脂症、代謝性酸中毒、酮症、關節炎、骨質疏鬆症、帕金森氏症、左心室肥厚、周邊動脈疾病、黃斑部病變、白內障、腎小球硬化、慢性腎衰竭、代謝性症候群、X症候群、經前症候群、心絞痛、血栓症、動脈粥樣硬化、短暫性腦缺血發作、血管再狹窄、葡萄糖代謝不良、空腹血糖不良症狀、高尿酸血症、痛風、勃起功能障礙、皮膚及結締組織病症、牛皮癬、足部潰瘍、潰瘍性結腸炎、apo B高脂蛋白血症、阿茲海默症、精神分裂症、認知功能受損、發炎性腸病、短腸症候群、克隆氏症、結腸炎、腸躁症候群、多囊性卵巢症候群的預防或治療以及成癮的治療。
一種治療有效量的根據請求項1至37中任一項所述的化合物或其藥學上可接受的鹽、立體異構物、溶劑合物或水合物或根據請求項38所述的藥物組成物的用途，其用於製造用以治療患有心臟代謝及相關疾病的有需要的個體的藥劑，其中所述疾病是T1D、T2DM、糖尿病前期、特發性T1D、LADA、EOD、YOAD、MODY、營養不良相關性糖尿病、妊娠糖尿病、高血糖症、胰島素抗性、肝臟胰島素抗性、葡萄糖耐受不良、糖尿病神經病變、糖尿病腎病變、腎疾病、糖尿病視網膜病變、脂肪細胞功能障礙、內臟脂肪囤積、睡眠呼吸暫停、肥胖症、飲食異常、使用其它藥劑引起的增重、過度嗜糖、異常血脂症、高胰島素血症、NAFLD、NASH、纖維變性、硬化、肝細胞癌、心血管疾病、動脈粥樣硬化、冠狀動脈疾病、周邊血管疾病、高血壓、內皮功能障礙、血管順應性不良、充血性心臟衰竭、心肌梗塞、中風、出血性中風、缺血性中風、創傷性腦損傷、肺性高血壓、血管成形術後再狹窄、間歇性跛行、餐後血脂症、代謝性酸中毒、酮症、關節炎、骨質疏鬆症、帕金森氏症、左心室肥厚、周邊動脈疾病、黃斑部病變、白內障、腎小球硬化、慢性腎衰竭、代謝性症候群、X症候群、經前症候群、心絞痛、血栓症、動脈粥樣硬化、短暫性腦缺血發作、血管再狹窄、葡萄糖代謝不良、空腹血糖不良症狀、高尿酸血症、痛風、勃起功能障礙、皮膚及結締組織病症、牛皮癬、足部潰瘍、潰瘍性結腸炎、apo B高脂蛋白血症、阿茲海默症、精神分裂症、認知功能受損、發炎性腸病、短腸症候群、克隆氏症、結腸炎、腸躁症候群、多囊性卵巢症候群的預防或治療以及成癮的治療。