TW202210097A

TW202210097A - 用於治療肝臟疾病之組合療法

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Publication number: TW202210097A
Application number: TW110120215A
Authority: TW
Inventors: 康士坦汀史蒂芬德杰裘斯; 布萊恩約翰麥科爾甘; 羅伯特保羅邁爾斯; 甘蓋哈瑞曼尼薩拉曼尼安; 萊納梅奇歐森; 摩藤韓森
Original assignee: 美商基利科學股份有限公司; 丹麥商諾沃諾迪士克公司
Priority date: 2020-06-04
Filing date: 2021-06-03
Publication date: 2022-03-16
Also published as: US20220047678A1

Abstract

本發明係關於一種治療非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向患有NASH之個體投與包含司美魯肽(semaglutide)、弗可司他(firsocostat)及/或西洛菲索(cilofexor)之組合療法。

Description

用於治療肝臟疾病之組合療法

本發明係關於預防及/或治療肝臟疾病，諸如非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法。

肝臟疾病一般基於疾病之持續時間分類為急性或慢性。肝臟疾病可由感染、損傷、暴露至藥物或毒性化合物、過量飲酒或濫用、食物中雜質及血液中正常物質之異常累積、自體免疫過程、遺傳缺陷(諸如血色病)或未知原因引起。

肝臟疾病為全世界死亡之首要原因。特定言之，高脂肪飲食以與肝炎相似方式損害肝臟。美國肝臟基金會(American Liver Foundation)估計超過20%之人群患有非酒精性脂肪肝病(NAFLD)。肥胖、不健康飲食及久坐生活方式可促進NAFLD之高流行率。認為NAFLD覆蓋一系列疾病活動且以肝臟中之脂肪累積(肝性脂肪變性)開始。當放任未治療時，NAFLD可進展至具有嚴重不良效應之非酒精性脂肪肝炎(NASH)。一旦NASH發展，其引起肝臟隨時間腫脹及瘢痕(即，發展肝硬化)。

除了不良飲食，NAFLD具有若干其他已知原因。例如，NAFLD可由某些藥劑，諸如胺碘酮(amiodarone)、抗病毒藥物(例如，核苷類似物)、阿司匹林(aspirin) (罕見地作為兒童雷氏(Reye's)症候群之一部分)、皮質類固醇(corticosteroid)、胺甲喋呤(methotrexate)、他莫西芬(tamoxifen)或四環素(tetracycline)引起。亦已知遺傳起作用，因為已識別此易感性之兩個遺傳突變。

雖然初步報告表明，積極生活方式改變可預防或逆轉肝臟損傷，但是不存在針對NAFLD或NASH之有效醫學治療。因此，仍存在對提供治療肝臟疾病之新穎有效醫藥劑之需求。

本文中揭示治療及/或預防個體之非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向該個體投與a)以每週一次0.1至3 mg之劑量之司美魯肽及b)以每日一次15至25 mg之劑量之弗可司他。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自15 mg、18 mg、20 mg、22 mg及25 mg之劑量投與弗可司他。於一些實施例中，該方法包括以每日一次20 mg之劑量投與弗可司他。於一些實施例中，該方法進一步包括以每日一次20至120 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括以每日一次選自20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mg、100 mg、110 mg及120 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括以每日一次30 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括投與以30 mg之劑量之西洛菲索及以20 mg之劑量之弗可司他。於一些實施例中，該方法包括以每日一次100 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括投與以100 mg之劑量之西洛菲索及以20 mg之劑量之弗可司他。於一些實施例中，該西洛菲索及弗可司他係呈組合固體劑型提供。

於一些實施例中，治療NASH之方法包括向患有NASH之個體投與a)以每週一次0.1至3 mg之劑量之司美魯肽；b)以每日一次20 mg之劑量之弗可司他；及c)以每日一次30 mg之劑量之西洛菲索。

於一些實施例中，該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之劑量投與司美魯肽。於一些實施例中，該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與司美魯肽。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自0.24 mg、0.50 mg、1.0 mg、1.7 mg及2.4 mg之劑量投與司美魯肽。於一些實施例中，該方法包括以每週一次0.24 mg之劑量投與司美魯肽持續四週，接著以每週一次0.50 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.0 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.7 mg之劑量持續四週，接著以每週一次2.4 mg之劑量持續至少四週。

於一些實施例中，該方法包括治療該個體持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，該方法包括治療該個體持續該個體之生命之持續時間。

本文中亦揭示治療及/或預防個體之非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向該個體投與a)以每週一次0.1至3 mg之劑量之司美魯肽；及b)以每日一次20至120 mg之劑量之西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之劑量投與司美魯肽。於一些實施例中，該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與司美魯肽。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自0.24 mg、0.50 mg、1.0 mg、1.7 mg及2.4 mg之劑量投與司美魯肽。於一些實施例中，該方法包括以每週一次0.24 mg之劑量投與司美魯肽持續四週，接著以每週一次0.50 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.0 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.7 mg之劑量持續四週，接著以每週一次2.4 mg之劑量持續至少四週。於一些實施例中，該方法包括以每日一次選自20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mg、100 mg、110 mg及120 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括以每日一次30 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括以每日一次100 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括治療該個體持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，該方法包括治療該個體持續該個體之生命之持續時間。

於各種實施例中，司美魯肽係藉由皮下注射投與。於各種實施例中，弗可司他係經口投與。於各種實施例中，西洛菲索係經口投與。

於一些實施例中，該個體在治療之前顯示纖維化之徵兆。於一些實施例中，該個體在治療之前具有＜0.75之FibroTest®分數。於一些實施例中，該個體在治療之前具有≥10%脂肪變性。脂肪變性可(例如)藉由MRI-PDFF測定。於一些實施例中，該個體在治療之前具有肝臟硬度≥7 kPa。於一些實施例中，肝臟硬度係藉由FibroScan®測定。於一些實施例中，該個體在治療之前經診斷患有NASH。於一些實施例中，該個體在治療之前使用肝臟活組織檢查經診斷患有NASH。於一些實施例中，該個體患有2型糖尿病。

於各種實施例中，該個體在治療之前在基線時間點時具有下列實驗室參數中之一或多者： a)丙胺酸轉胺酶(ALT)含量≤5x正常值上限(ULN)； b)估計腎小球過濾速率(eGFR) ≥ 30 mL/min； c) HbA1c ≤ 9.5%； d)血清果糖胺≤ 381 µmol； e) INR ≤ 1.2； f)血小板計數≥ 100,000/µL； g)總膽紅素＜1.3x正常值上限(ULN)；及/或 h)降血鈣素≤ 100 ng/L。於一些實施例中，eGFR係藉由MDRD研究方程式計算得。

於一些實施例中，eGFR於治療後與在治療之前在基線時間點時之eGFR相比提高持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

於一些實施例中，脂肪變性於治療後與在治療之前在基線時間點時之脂肪變性相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，脂肪變性與在治療之前在基線時間點時之個體之脂肪變性相比減少持續個體之生命之持續時間。於一些實施例中，脂肪變性係藉由MRI-PDFF或CAP量測。

於一些實施例中，肝臟硬度於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝臟硬度相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，肝臟硬度與在治療之前在基線時間點時之個體之肝臟硬度相比減少持續個體之生命之持續時間。於一些實施例中，肝臟硬度係藉由MRE或FibroScan®量測。

於一些實施例中，選自ALT、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)之至少一個實驗室參數於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，選自ALT、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)之至少一個實驗室參數與在治療之前在基線時間點時之個體之ALT、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)相比減少持續個體之生命之持續時間。

於一些實施例中，該個體之增強型肝纖維化(ELF)測試分數及/或FibroTest®測試分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自測試分數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，增強型肝纖維化測試分數及/或FibroTest®測試分數與在治療之前在基線時間點時之個體之增強型肝纖維化測試分數及/或FibroTest®測試分數相比減少持續個體之生命之持續時間。

於一些實施例中，該個體之甘油三酯含量、LDL膽固醇含量、總膽固醇含量、HbA_1c 、空腹血糖含量、空腹胰島素含量及/或HOMA-IR於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自測試分數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

於一些實施例中，該個體之體重於治療後與在治療之前在基線時間點時之個體之體重相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

於一些實施例中，該個體之FAST分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之FAST分數相比減少至少0.1、至少0.2或至少0.3持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

定義及一般參數

如本說明書中所用，下列術語及短語一般意欲具有如下闡述之含義，除了在某種程度上使用其另有指定之背景外。

本文中提及「約」值或參數包含(及描述)針對該值或參數本身之實施例。於某些實施例中，術語「約」包含指定量±10%。於其他實施例中，術語「約」包含指定量±5%。於某些其他實施例中，術語「約」包含指定量± 1%。同樣，術語「約X」包含「X」之描述。同樣，除非上下文另有明確指定，否則單數形式「一」及「該」包含複數個提及物。因此，例如，提及「該化合物」包含複數個此等化合物及提及「該檢定」包含提及一或多個檢定及熟習此項技術者已知之其等效物。

本文中說明地描述之揭示內容可在不存在本文中未具體揭示之任何要素、限制下適宜實踐。因此，例如，術語「包括」、「包含」、「含有」等應解釋性而非限制性地解讀。此外，本文中採用之術語及表達已作為描述之術語使用而非限制性，及沒有使用排除所示及所述特徵之任何等效物或其部分之此等術語及表述之意圖，但是應知曉，各種修改於所主張發明之範圍內係可能。

於一些實施例中，本發明之化合物可呈「前藥」之形式。術語「前藥」於醫藥領域中經定義為藥物之生物不活潑衍生物，其在向人體投與後根據一些化學或酶促路徑轉化成生物活性親本藥物。前藥之實例包括酯化羧酸。

於人類肝臟中，UDP-葡糖苷酸轉移酶在具有胺基、胺甲醯基、硫基(巰基)或羥基之某些化合物上作用以通過糖苷鍵結合尿苷二磷酸-α-D-葡萄糖醛酸，或於II期代謝過程中將具有羧基或羥基之化合物酯化。本發明之化合物可經葡萄糖醛酸化，換言之，結合至葡萄糖醛酸，以形成葡糖苷酸，特定言之(β-D)葡糖苷酸。

形成膽汁之一個步驟為個別膽汁酸與胺基酸，特定言之甘胺酸或胺基乙磺酸結合。本發明之化合物可與甘胺酸或胺基乙磺酸在可取代位置處結合。

本發明之化合物可呈醫藥上可接受之鹽之形式。術語「醫藥上可接受之鹽」係指自醫藥上可接受之無毒鹼或酸(包括無機鹼或酸及有機鹼或酸)製備之鹽。假使本發明之化合物含有一或多個酸性或鹼性基團，本發明亦包含其對應醫藥上或毒理學上可接受之鹽，特定言之其醫藥上可利用之鹽。因此，含有酸性基團之本發明之化合物可在此等基團上存在及可根據本發明使用，例如，呈鹼金屬鹽、鹼土金屬鹽或銨鹽。此等鹽之更精確實例包括鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽或與氨或有機胺，諸如例如，乙胺、乙醇胺、三乙醇胺、胺基酸或熟習此項技術者已知之其他鹼之鹽。含有一或多個鹼性基團(即，可質子化之基團)之本發明之化合物可存在及可根據本發明以其與無機或有機酸之加成鹽之形式使用。適宜酸之實例包括鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸、硝酸、甲磺酸、對甲苯磺酸、萘二磺酸、草酸、乙酸、酒石酸、乳酸、水楊酸、苯甲酸、甲酸、丙酸、特戊酸、二乙基乙酸、丙二酸、琥珀酸、庚二酸、富馬酸、馬來酸、蘋果酸、胺基磺酸、苯基丙酸、葡糖酸、抗壞血酸、異菸鹼酸、檸檬酸、己二酸、及熟習此項技術者已知之其他酸。

若本發明之化合物於分子中同時含有酸性及鹼性基團，則除了提及之鹽形式外，本發明亦包含內鹽或甜菜鹼(兩性離子)。相應鹽可藉由熟習此項技術者已知之習用方法，例如，藉由使此等於溶劑或分散劑中與有機或無機酸或鹼接觸，或藉由與其他鹽進行陰離子交換或陽離子交換獲得。

本發明亦包含本發明化合物之所有鹽，由於低生理相容性，其不直接適用於醫藥，但是其可(例如)作為化合物反應或製備醫藥上可接受之鹽之中間體使用。可用於與基本化合物反應以形成醫藥上可接受之鹽(各自酸加成或鹼加成鹽)之酸及鹼係熟習此項技術者已知。相似地，自基本化合物(在發明上)製備醫藥上可接受之鹽之方法係熟習此項技術者已知及揭示於(例如) Berge等人，Journal of Pharmaceutical Science，1977年1月，第66卷，第1期及其他來源中。

此外，本文中所揭示之化合物可經受互變異構。在化合物或其前藥之互變異構，例如，酮-烯醇互變異構可發生之情況下，個別形式，如例如，酮及烯醇形式以及以任何比率之其混合物各於本發明之範圍內。針對立體異構體，如例如，對映異構體、順式/反式異構體、非對映異構體、構象異構體及類似者同樣適用。

另外，本發明之化合物可以溶劑化物之形式存在，諸如包含水作為溶劑化物之彼等或醫藥上可接受之溶劑化物(諸如醇，特定言之乙醇)。「溶劑化物」藉由溶劑與化合物之相互作用形成。

於某些實施例中，提供本文中所述化合物或其醫藥上可接受之鹽或混合物之光學異構體、外消旋體、或其其他混合物。若所需，則異構體可藉由此項技術中熟知方法，例如，藉由液相層析法分離。於彼等情況下，單一對映異構體或非對映異構體(即，光學活性形式)可藉由不對稱合成或藉由解析獲得。解析可(例如)藉由習知方法，諸如在存在解析劑下結晶，或使用(例如)對掌性高壓液相層析法(HPLC)管柱之層析法實現。

「立體異構體」係指由藉由相同鍵鍵結之相同原子組成但是具有不同三維結構之化合物，其係不可交換。本發明考慮各種立體異構體及其混合物及包含「對映異構體」，其係指其分子為彼此之不可疊加鏡像之兩個立體異構體。「非對映異構體」為具有至少兩個不對稱原子，但是其非彼此之鏡像之立體異構體。

於一些實施例中，本文中所揭示之化合物及其醫藥上可接受之鹽可包含不對稱中心及因此可產生可根據絕對立體化學定義為(R)或(S)或針對胺基酸(D)或(L)之對映異構體、非對映異構體及其他立體異構體形式。一些實施例包含所有此等可能異構體，以及其外消旋及光學純形式。光學活性(+)及(-)、(R)及(S)或(D)及(L)異構體可使用對掌性合成子或對掌性試劑製備，或使用習知技術，例如，層析法及分級結晶解析。用於製備/分離個別對映異構體之習知技術包括自適宜光學純前驅體對掌性合成或外消旋物(或鹽或衍生物之外消旋物)使用(例如)對掌性高壓液相層析法(HPLC)之解析。當本文中所述化合物含有烯族雙鍵或其他幾何不對稱中心時，及除非另有指定，否則意圖該等化合物包含E及Z幾何異構體二者。

包含本文中所述化合物或其醫藥上可接受之鹽、異構體或混合物之本文中所提供之組合物可包含外消旋混合物，或含有對映異構體過量之一種對映異構體之混合物或單一非對映異構體或非對映異構體混合物。此等化合物之所有此等異構形式明確地包含於本文中，如同明確且個別地列出各及每個異構形式般。

本文中提供之任何式或結構亦意在表示未標記形式以及化合物之同位素標記形式。同位素標記化合物具有藉由本文中提供之式描述之結構，不同之處在於一或多個原子經具有選定原子質量或質量數之原子置換。可併入本發明化合物中之同位素之實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，諸如，但不限於² H (氘，D)、³ H (氚)、¹¹ C、¹³ C、¹⁴ C、¹⁵ N、¹⁸ F、³¹ P、³² P、³⁵ S、³⁶ Cl及¹²⁵ I。本發明之各種同位素標記化合物，例如，併入放射性同位素(諸如³ H、¹³ C及¹⁴ C)之彼等。此等同位素標記化合物可用於代謝研究、反應動力學研究、包含藥物或受質組織分佈檢定之檢測或成像技術(諸如正電子發射斷層掃描術(PET)或單光子發射電腦斷層掃描術(SPECT))或患者之放射性治療中。本發明之同位素標記化合物及其前藥一般可藉由進行反應圖或以下所述之實例及製法中所揭示之程序藉由用現成同位素標記試劑取代非同位素標記試劑來製備。

本發明亦包含本文中所揭示化合物之「氘代類似物」，其中連接至碳原子之1至n個氫經氘置換，其中n為分子中之氫之數目。此等化合物可展示對代謝之增加之抗性及因此可用於當向哺乳動物(例如，人類)投與時增加任何式(I)化合物之半衰期。參見，例如，Foster，「Deuterium Isotope Effects in Studies of Drug Metabolism,」Trends Pharmacol. Sci. 5(12):524-527 (1984)。此等化合物藉由此項技術中熟知方法，例如，藉由採用起始物質(其中一或多個氫經氘置換)合成。

本發明之氘標記或取代之治療性化合物可具有與分佈、代謝及排泄(ADME)相關之有益DMPK (藥物代謝及藥物動力學)性質。經較重同位素(諸如氘)取代可提供自更大代謝穩定性產生之某些治療優點，例如，增加之活體內半衰期、降低之劑量需求及/或治療指數之改善。經18F標記之化合物可用於PET或SPECT研究。

此較重同位素(具體而言氘)之濃度可藉由同位素濃化因子定義。於本發明之化合物中，未特別指定為特定同位素之任何原子意在表示該原子之任何穩定同位素。除非另有指定，否則當位置經特別指定為「H」或「氫」時，該位置應理解為具有以其天然豐度同位素組成之氫。因此，於本發明之化合物中，特別指定為氘(D)之任何原子意在表示氘。

此外，本發明提供醫藥組合物，其包含本發明化合物，或其前藥化合物，或其醫藥上可接受之鹽或溶劑化物作為活性成分連同醫藥上可接受之載劑。

「醫藥組合物」意指一或多種活性成分，及組成載劑之一或多種惰性成分，以及自該等成分中之任兩者或多者之組合、複合或聚集，或自該等成分中之一或多者之解離，或自該等成分中之一或多者之其他類型之反應或相互作用直接或間接產生之任何產物。因此，本發明之醫藥組合物可包含藉由將本發明之至少一種化合物及醫藥上可接受之載劑混合製得之任何組合物。

如本文中所用，「醫藥上可接受之載劑」包括賦形劑或劑，諸如溶劑、稀釋劑、分散介質、塗層、抗細菌劑及抗真菌劑、等滲及吸收延遲劑及對所揭示化合物或其使用無害之類似者。使用此等載劑及劑製備醫藥活性物質之組合物係此項技術中熟知(參見，例如，Remington’sPharmaceutical Sciences , Mace Publishing Co., Philadelphia, PA第17版(1985)；及Modern Pharmaceutics , Marcel Dekker, Inc.第3版(G.S. Banker及C.T. Rhodes編輯)。

術語「治療上有效量」及「有效量」可互換使用及係指當以一或多個劑量向有需要此治療之患者(例如，人類)投與時，足以實現如下所定義之治療之化合物之量。治療上有效量將取決於以下變化：患者、正在治療之疾病、患者之體重及/或年齡、疾病之嚴重度或如由有資格開處方者或護理者確定之投與方式。

術語「治療(treatment/treating)」意指出於以下目的投與化合物或其醫藥上可接受之鹽：(i)延遲疾病之發作，即，引起疾病之臨床症狀不發展或延遲其發展；(ii)抑制疾病，即，抑制臨床症狀之發展；及/或(iii)緩解疾病，即，引起臨床症狀或其嚴重度之消退。肝臟疾病

肝臟疾病可涉及肝之急性或慢性損傷，取決於病狀之原因及嚴重度。肝損傷可藉由感染、損傷、暴露至藥物或毒性化合物(諸如醇或食物中之雜質)、血液中之正常物質之異常累積、自體免疫過程、遺傳缺陷(諸如血色病)或其他未知原因誘導。示例性肝臟疾病包括(但不限於)肝硬化、非酒精性脂肪肝病(NAFLD) (包括非酒精性脂肪肝炎(NASH))、酒精性脂肪肝炎(ASH)、原發性膽汁性肝硬化(PBC)、原發性硬化性膽管炎(PSC)及肝炎(包括病毒性及酒精性肝炎二者)。

NAFLD之特徵在於肝細胞中之脂肪之過量累積及通常與代謝症候群(例如，2型糖尿病、胰島素抗性、高脂血症及高血壓)之特徵相關聯。NAFLD之發生率正在增加，由於增加之肥胖頻率。若放任未治療，則NAFLD可進展為非酒精性脂肪肝炎(NASH)，其中發炎於脂肪變性肝臟中發展，從而潛在導致纖維化形成。NAFLD患者之子集(約20%)發展NASH。

NASH之組織學特徵在於脂肪變性、肝細胞腫脹及發炎，其可導致肝臟瘢痕(即，纖維化)。診斷患有NASH之患者可進展為晚期肝纖維化及最終肝硬化伴肝衰竭，其潛在可需要肝臟移植。NASH已成為末期肝臟疾病及肝硬化之主要原因中之一者。弗可司他

弗可司他為乙醯基coA羧酶(ACC)抑制劑，其具有式(I)之結構：

，或其醫藥上可接受之鹽。

如本文中所用，及在不存在特別提及弗可司他之特定醫藥上可接受之鹽及/或溶劑化物下，任何劑量(無論是以(例如)毫克或以重量%表示)應視作提及弗可司他之量，即，以下之量：

。

因此，例如，提及「25 mg弗可司他或其醫藥上可接受之鹽及/或溶劑化物」意指提供與25 mg弗可司他游離酸相同量之弗可司他的弗可司他或其醫藥上可接受之鹽及/或溶劑化物的量。

本文中提供之呈固體口服劑型之弗可司他之量一般為約10 mg至約30 mg，例如約15 mg至約25 mg，及更典型地約18 mg至約22 mg。於一些實施例中，本文中提供之呈固體口服劑型之弗可司他之量一般介於10 mg與30 mg之間，例如於15 mg至25 mg之範圍內，及更典型地介於18 mg與22 mg之間。於一些實施例中，本文中提供之呈固體口服劑型之弗可司他之量為20 mg。

於一些實施例中，弗可司他以進一步包含西洛菲索之組合產品提供。於一些實施例中，該組合產品呈固體口服劑型。

式(I)化合物可使用熟習此項技術者已知之方法，諸如述於PCT公開案第WO 2013/071169號(化合物I-246；亦參見美國公開案第2013/0123231號)中之彼等來合成及表徵。

ACC催化乙醯基-CoA之ATP依賴性羧化以形成丙二醯基-CoA。分兩個半反應(生物素羧化酶(BC)反應及羧基轉移酶(CT)反應)進行之此反應為脂肪酸(FA)生物合成中之首個承諾步驟及為該路徑之速率限制反應。除了其作為FA生物合成中之受質作用以外，丙二醯基-CoA (ACC催化反應之產物)亦於通過肉毒鹼棕櫚醯基轉移酶I (CPT-I) (催化粒線體FA氧化之首個承諾步驟之酶)之變構抑制來控制粒線體FA攝取中起著重要調節作用。因此，丙二醯基-CoA為用於控制動物之FA產生及利用對飲食改變之反應及更改之營養需求(例如，在運動期間)的重要代謝信號，及於控制在肝臟及骨骼肌中之碳水化合物與脂肪利用之間之切換中起著重要作用(Harwood, Expert Opin Ther Targets, 2005, 9: 267-281)。

「ACC抑制劑」係指能結合且抑制ACC之劑。ACC抑制劑可充當ACC之抑制劑或部分抑制劑。ACC抑制劑之活性可藉由此項技術中已知方法，諸如述於及引用於美國專利第8,969,557號及/或美國專利公開案第2016/0108061號之彼等量測。西洛菲索

西洛菲索為法尼醇X活化受體(FXR)促效劑，其具有式(II)之結構：

，或其醫藥上可接受之鹽。

如本文中所用，及在不存在特別提及西洛菲索之特定醫藥上可接受之鹽及/或溶劑化物下，任何劑量(無論以(例如)毫克或以重量%表示)應視作提及西洛菲索之量，即，以下之量：

。

因此，例如，提及「25 mg西洛菲索或其醫藥上可接受之鹽及/或溶劑化物」意指提供與25 mg西洛菲索游離酸相同量之西洛菲索的西洛菲索或其醫藥上可接受之鹽及/或溶劑化物的量。

本文中提供之呈固體口服劑型之西洛菲索之量一般為約10 mg至約200 mg，例如約20 mg至約150 mg，及更典型地約25 mg至約35 mg或約90 mg至約110 mg。於一些實施例中，本文中提供之呈固體口服劑型之西洛菲索之量一般介於10 mg與200 mg之間，例如於20 mg至150 mg之範圍內，及更典型地介於25 mg與35 mg之間或介於90 mg與110 mg之間。於一些實施例中，本文中提供之呈固體口服劑型之西洛菲索之量為30 mg或100 mg。於某些實施例中，該固體口服劑型含有30 mg西洛菲索，例如，如約36.2 mg之西洛菲索胺丁三醇鹽。於某些實施例中，該固體口服劑型含有100 mg西洛菲索，例如，如約120.6 mg之西洛菲索胺丁三醇鹽。

於一些實施例中，該西洛菲索以進一步包含弗可司他之組合產品提供。於一些實施例中，該組合產品呈固體口服劑型。

式(II)化合物可使用熟習此項技術者已知之方法，諸如述於美國公開案第2014/0221659號之彼等合成及表徵。

FXR，通常亦稱作NR1H4 (核受體亞家族1，組H，成員4)，當提及人類受體時，為核激素受體。FXR與多重生物功能相關聯。FXR主要於肝臟及整個完整胃腸道中表現，但是亦於腎、腎上腺及卵巢中發現。FXR係與控制細胞內基因表現相關聯及可涉及旁分泌及內分泌信號傳導。於腸及肝臟中，FXR作為膽汁酸穩態及肝臟脂肪生成之調節劑起作用。FXR亦與枯氏(Kupffer)細胞及肝臟之肝竇內皮細胞相關聯，其中據信其具有與發炎、纖維化及門靜脈高壓相關之功能。

「FXR促效劑」係指能結合且活化FXR之任何劑。FXR促效劑可充當FXR之促效劑或部分促效劑。FXR促效劑之活性可藉由若干不同方法量測，例如，於活體外檢定中使用螢光共振能量轉移(FRET)無細胞分析，如於Pellicciari等人，Journal of Medicinal Chemistry, 2002年第15卷，第45期:3569-72中所述。西洛菲索 / 弗可司他組合產品

本文中提供之包含弗可司他及西洛菲索之組合之固體口服劑型中之弗可司他之量一般介於10 mg與30 mg之間，例如於15 mg至25 mg之範圍內，及更典型地介於18 mg與22 mg之間。於一些實施例中，本文中提供之包含弗可司他及西洛菲索之組合之組合產品固體口服劑型中之弗可司他之量為20 mg。

本文中提供之包含弗可司他及西洛菲索之組合之固體口服劑型中之西洛菲索之量一般介於10 mg與200 mg之間，例如於20 mg至150 mg之範圍內，及更典型地介於25 mg與35 mg之間或介於90 mg與110 mg之間。於一些實施例中，本文中提供之包含弗可司他及西洛菲索之組合之固體口服劑型中之西洛菲索之量為30 mg或100 mg。於某些實施例中，該固體口服劑型含有30 mg西洛菲索，例如，如約36.2 mg西洛菲索胺丁三醇鹽。於某些實施例中，該固體口服劑型含有100 mg西洛菲索，例如，如約120.6 mg西洛菲索胺丁三醇鹽。

於一些實施例中，該固體口服劑型含有30 mg之劑量之西洛菲索 及以20 mg之劑量之弗可司他。於一些實施例中，該固體口服劑型含有100 mg之劑量之西洛菲索 及以20 mg之劑量之弗可司他。司美魯肽

司美魯肽為具有如圖1中所示之結構之類胰高血糖素肽-1 (GLP-1)受體促效劑(或GLP-1類似物)。參見Lau等人，J. Med. Chem . 2015, 58: 1370-7380。司美魯肽可使用熟習此項技術者已知之方法，諸如述於美國專利第8,129,343號中之彼等製備。

類胰高血糖素肽-1 (GLP-1 )為37個胺基酸肽，其藉由腸L-細胞分泌及對食物攝入反應而釋放至身體循環。GLP-1之血漿濃度自約15 pmol/L之空腹含量上升至40 pmol/L之餐後峰值含量。除了促胰島素效應外，GLP-1抑制胰高血糖素分泌，延遲胃排空(Wettergren A.等人，Dig Dis Sci 1993, 38:665-73)及可增強外周葡萄糖處置(D'Alessio, D.A.等人，J. Clin Invest 1994, 93:2293-6)。GLP-1肽具有快速清除期及短半衰期。因此，已開發治療性GLP-1類似物(諸如司美魯肽)以延長其於活體內之持續時間。司美魯肽目前經FDA批准及以Ozempic®銷售用於治療2型糖尿病。治療肝臟疾病之方法

本文中提供治療及/或預防有需要患者之非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向該患者投與a)治療上有效量之弗可司他及治療上有效量之司美魯肽，b)治療上有效量之西洛菲索及治療上有效量之司美魯肽，或c)治療上有效量之弗可司他、治療上有效量之西洛菲索及治療上有效量之司美魯肽。

於一些實施例中，治療及/或預防NASH之方法包括以每週一次0.1至3 mg之劑量投與司美魯肽及以每日一次15至25 mg之劑量投與弗可司他。於一些實施例中，司美魯肽以每週一次0.24至2.4 mg之劑量，諸如以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自0.24 mg、0.50 mg、1.0 mg、1.7 mg及2.4 mg之劑量投與司美魯肽。該遞增劑量可為(例如) 0.24 mg之劑量持續四週，接著0.50 mg之劑量持續四週，接著1.0 mg之劑量持續四週，接著1.7 mg之劑量持續四週，接著2.4 mg之劑量持續四週。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自15 mg、18 mg、20 mg、22 mg及25 mg之劑量投與弗可司他。於一些實施例中，弗可司他以每日一次20 mg之劑量投與。於各種實施例中，該方法進一步包括以每日一次20至120 mg之劑量，諸如以每日一次30 mg之劑量或每日一次100 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，該方法包括以每日一次選自20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mg、100 mg、110 mg及120 mg之劑量投與西洛菲索。

於一些實施例中，治療及/或預防NASH之方法包括以每週一次0.1至3 mg之劑量投與司美魯肽及以每日一次20至120 mg之劑量投與西洛菲索。於一些實施例中，司美魯肽以每週一次0.24至2.4 mg之劑量，諸如以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自0.24 mg、0.50 mg、1.0 mg、1.7 mg及2.4 mg之劑量投與司美魯肽。該遞增劑量可為(例如) 0.24 mg之劑量持續四週，接著0.50 mg之劑量持續四週，接著1.0 mg之劑量持續四週，接著1.7 mg之劑量持續四週，接著2.4 mg之劑量持續至少四週。於一些實施例中，西洛菲索以每日一次20至120 mg之劑量，諸如以每日一次30 mg之劑量或每日一次100 mg之劑量投與。

於一些實施例中，治療及/或預防NASH之方法包括向有需要此治療之患有NASH之個體以每週一次0.1至3 mg之劑量投與司美魯肽及以每日一次20至120 mg之劑量投與西洛菲索及以每日一次15至25 mg之劑量投與弗可司他。於一些實施例中，司美魯肽以每週一次0.24至2.4 mg之劑量，諸如以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自0.24 mg、0.50 mg、1.0 mg、1.7 mg及2.4 mg之劑量投與司美魯肽。該遞增劑量可為(例如) 0.24 mg之劑量持續四週，接著0.50 mg之劑量持續四週，接著1.0 mg之劑量持續四週，接著1.7 mg之劑量持續四週，接著2.4 mg之劑量持續至少四週。於一些實施例中，該方法包括以每週一次選自15 mg、18 mg、20 mg、22 mg及25 mg之劑量投與弗可司他。於一些實施例中，西洛菲索以每日一次20至120 mg之劑量，諸如以每日一次30 mg之劑量或每日一次100 mg之劑量投與。於一些實施例中，該方法包括以每日一次選自20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg、70 mg、80 mg、90 mg、100 mg、110 mg及120 mg之劑量投與西洛菲索。

於各種實施例中，司美魯肽係藉由注射(諸如皮下注射)投與。於各種實施例中，西洛菲索及/或弗可司他係經口投與。

於各種實施例中，西洛菲索及弗可司他以固定劑量組合產品經口投與。

活動肝臟疾病(諸如NASH)之存在可藉由各種實驗室參數檢測。例如，已知在臨床上接受之正常範圍以上之丙胺酸轉胺酶(ALT)及天冬胺酸轉胺酶(AST)含量指示正在持續的肝損傷。肝臟疾病患者針對ALT及AST之血液含量之常規監測臨床上用於量測在醫學治療期間肝臟疾病之進展。升高之ALT及AST降低至接受之正常範圍內被視作患者之肝臟損傷之嚴重度降低之臨床證據。指示存在肝臟疾病之另外血液參數包括低於正常範圍之估計腎小球過濾速率(eGFR) (於一些實施例中，正常範圍為90或更高，或80或更高，或70或更高，或60及更高)；高於正常範圍之血紅素A1c (HbA1C) (於一些實施例中，正常範圍介於4%與6%之間)；高於正常範圍之血清果糖胺(於一些實施例中，當血清白蛋白為5 g/dL時，正常範圍為200至285 µmol/L)；高於正常之凝血酶原時間(PT)，其表示為國際標準化比率(INR) (於一些實施例中，正常INR係小於或等於1.2)；低於正常範圍之血小板計數(於一些實施例中，正常範圍為150,000至450,000個血小板/µL)；高於正常範圍之總膽紅素(於一些實施例中，正常範圍為0.2至1.2 mg/dL，或0.2至1.9 mg/dL)；及高於正常範圍之降血鈣素(於一些實施例中，正常範圍於女性中係小於5 pg/mL及於男性中係小於8.4 pg/mL)。肝臟疾病之其他指標包括肝硬化、纖維化及纖維生成。

於一些實施例中，本文中所提供之方法減少脂肪變性，減少肝臟硬度，減少肝纖維化，提高eGFR及/或減少選自丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)之一或多個實驗室參數。於一些實施例中，本文中所提供之方法減少個體之甘油三酯含量、LDL膽固醇含量及/或總膽固醇含量。於各種實施例中，該減少於治療後觀察到持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，該減少於治療後觀察到持續個體之生命之持續時間。

量測肝臟中之脂肪變性之方法係此項技術中已知，及包括(例如) MRI-PDFF及使用(例如) FibroScan®之受控衰減參數(CAP)分數。FibroScan®為使用超音波以測定肝臟中之瘢痕(纖維化)及脂肪變性之程度之非侵入性測試。於一些實施例中，個體在治療之前具有≥5%脂肪變性，例如，如由MRI-PDFF所測定。於一些實施例中，個體在治療之前具有≥10%脂肪變性，例如，如由MRI-PDFF所測定。於一些實施例中，個體在治療之前具有＞215之CAP分數。於一些實施例中，脂肪變性於本文中所提供之治療後減少至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%。於一些實施例中，脂肪變性於本文中所提供之治療後與在治療之前在基線時間點時之脂肪變性相比減少至少約5%、至少約10%或至少約20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，於治療後，個體之CAP分數減少至少5 dB/m、至少10 dB/m、至少15 dB/m、至少20 dB/m、至少25 dB/m、至少30 dB/m、至少35 dB/m、至少35 dB/m、至少40 dB/m、至少45 dB/m、至少50 dB/m、至少55 dB/m或至少60 dB/m。於一些實施例中，於治療後，個體之CAP分數係小於300、小於290、小於280、小於270、小於260、小於250、小於240、小於230或小於220。於一些實施例中，於治療後，個體之CAP分數等於或小於215。於一些實施例中，於治療後，相對MRI-PDFF中值於治療後與在治療之前在基線時間點時之MRI-PDFF相比減少至少30%、至少40%或至少50%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

量測肝臟硬度之方法係此項技術中已知及包括(例如)磁共振彈性成像(MRE)及FibroScan®。於一些實施例中，個體在治療之前具有肝臟硬度≥7 kPa。於一些實施例中，肝臟硬度於本文中所提供之治療後減少至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%。於一些實施例中，肝臟硬度於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝臟硬度相比減少至少25%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週或至少96週。於一些實施例中，於治療後，個體之肝臟硬度係小於25 kPa、小於20 kPa、小於15 kPa、小於10 kPa或小於7 kPa。於一些實施例中，於治療後，個體之肝臟硬度減少至少2 kPa、至少3 kPa、至少4 kPa、至少5 kPa、至少6 kPa、至少7 kPa、至少8 kPa、至少9 kPa或至少10 kPa。

量測肝纖維化之方法係此項技術中已知，及包括(例如)增強型肝纖維化(ELF)測試及其分量(包括(例如) TIMP金屬肽酶抑制劑1 (TIMP1)、前膠原III N-端前肽(PIII-NP)及透明質酸)、FibroScan®及FibroTest® (亦稱作FibroSure®)。FibroSure®為經設計以評估患有慢性病毒性B型或C型肝炎、酒精性肝臟疾病及代謝性脂肪肝炎之患者(針對超重、患有糖尿病或高脂血症之彼等)之肝纖維化之血清生物標誌物測試。於一些實施例中，個體在治療之前具有纖維化之證據。於一些實施例中，個體在治療之前具有F2或更高之纖維化分數，如由FibroScan®所測定。於一些實施例中，個體在治療之前具有F3或F4之纖維化分數，如由FibroScan®所測定。於一些實施例中，肝纖維化於本文中所提供之治療後減少至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%。於一些實施例中，肝纖維化於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自測試分數相比減少至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於一些實施例中，於治療後，個體之纖維化分數於治療後降低一個等級，或兩個等級或三個等級。於一些實施例中，個體之纖維化分數於治療後自F2降低至F1或F0。於一些實施例中，個體之纖維化分數於治療後自F3降低至F2、F1或F0。於一些實施例中，個體之纖維化分數於治療後自F4降低至F3、F2、F1或F0。於一些實施例中，個體之肝纖維化係使用增強型肝纖維化(ELF)測試分數或FibroTest®測試分數測定，及該ELF測試分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之ELF測試分數相比減少至少0.3、至少0.4或至少0.5持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

量測肝臟疾病之各種臨床標誌物，諸如丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)、鹼性磷酸酶(ALP)、甘油三酯、LDL膽固醇及總膽固醇之方法係此項技術者已知。於一些實施例中，個體在治療之前具有丙胺酸轉胺酶(ALT)含量≤5x正常值上限(ULN)。於一些實施例中，個體在治療之前具有膽紅素含量≤1.3x ULN。臨床標誌物之ULN可基於參考群體測定。於一些實施例中，肝臟疾病之一或多種臨床標誌物之含量於本文中所提供之治療後減少至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%。於一些實施例中，於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比，ALT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L；AST減少至少10 U/L或至少20 U/L；GGT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L；及/或ALP減少至少5 U/L或至少10 U/L持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週或至少96週。

量測估計腎小球過濾速率(eGFR)之方法係此項技術中已知，及包括(例如)量測肌酸酐清除率及使用腎病之飲食修改(MDRD)研究方程式計算eGFR： eGFR (mL/min/1.73 m²) = 175 ×血清肌酸酐^-1.154 × (年齡)^-0.203 × (若為非裔美國人1.212) × (若女性0.742)。於一些實施例中，該個體在治療之前具有≥30 mL/min，但是小於60 mL/min之eGFR。於一些實施例中，本文中所提供之方法提高eGFR。於各種實施例中，該提高於治療後觀察到持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。於各種實施例中，該提高於治療後觀察到持續個體之生命之持續時間。於一些實施例中，個體之eGFR於本文中所提供之治療後提高至少約5%、至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約30%、至少約35%、至少約40%、至少約45%、至少約50%、至少約55%、至少約60%、至少約65%、至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%或至少約95%。於一些實施例中，於治療後，個體之eGFR為至少40 mL/min、至少50 mL/min、至少60 mL/min、至少70 mL/min、至少80 mL/min、至少90 mL/min或至少100 mL/min。於一些實施例中，於治療後，個體之eGFR提高至少10 mL/min、至少15 mL/min、至少20 mL/min、至少25 mL/min或至少30 mL/min。於一些實施例中，個體之eGFR於治療後與在治療之前在基線時間點時之個體之eGFR相比提高至少20 mL/min持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

FibroScan-AST (FAST)分數組合藉由TE量測之肝臟硬度、藉由CAP量測之脂肪變性及血清AST用於患有NASH及≥F2纖維化之患者之非侵入性識別。於一些實施例中，個體之FAST分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之FAST分數相比減少至少0.1、至少0.2或至少0.3持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

於一些實施例中，個體之體重於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自測試分數相比減少至少5%持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。

已觀察到，於表觀遺傳測試中患有NASH之患者比健康患者平均大約2.8歲。因此，於一個實施例中，用於治療NASH之所揭示方法可用於減慢、改善或逆轉表觀遺傳年齡或由於NASH之老齡化效應。於另一實施例中，所揭示方法可用於改善或逆轉由於NASH之老齡化效應。醫藥組合物

於一些實施例中，該方法包括投與可注射司美魯肽。注射用司美魯肽溶液為無色或幾乎無色液體，無渾濁及基本上無粒子物質，及具有表1中所示之組成。表1.

成分	功能	藥典
原料藥
司美魯肽	活性成分	Novo Nordisk A/S
其他成分
磷酸氫二鈉二水合物	緩衝劑	USP/Ph. Eur
丙二醇	等滲劑	USP/JP/Ph. Eur
苯酚	防腐劑	USP/JP/Ph. Eur
HCl	pH調整	USP/JP/Ph. Eur
NaOH	pH調整	USP/JP/Ph. Eur
注射用水	溶劑	USP/JP/Ph. Eur

於一些實施例中，弗可司他及/或西洛菲索係經口投與。

於一些實施例中，弗可司他可呈20 mg錠劑投與。除了活性成分外，弗可司他錠劑可含有下列不活潑成分中之一或多者：乳糖單水合物、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂、聚乙烯醇、二氧化鈦、聚乙二醇、及滑石。於一些實施例中，弗可司他錠劑可含有乳糖單水合物、微晶纖維素、交聯羧甲基纖維素鈉、硬脂酸鎂、聚乙烯醇、二氧化鈦、聚乙二醇、及滑石作為不活潑成分。

於一些實施例中，西洛菲索可呈100 mg及/或30 mg (呈游離形式等效物)錠劑投與。該錠劑可含有西洛菲索(胺丁三醇鹽)、一或多種不活潑成分，包括甘露醇、微晶纖維素、交聯聚維酮、硬脂酸鎂及一或多種膜塗覆材料(包括聚乙烯醇、聚乙二醇、二氧化鈦、滑石、黃色氧化鐵及黑色氧化鐵)。於一些實施例中，西洛菲索錠劑可含有甘露醇、微晶纖維素、交聯聚維酮及硬脂酸鎂作為不活潑成分及聚乙烯醇、聚乙二醇、二氧化鈦、滑石、黃色氧化鐵及黑色氧化鐵作為膜塗覆材料。

於一些實施例中，西洛菲索及弗可司他可呈西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑投與，該等錠劑為固定劑量組合產品，其含有30 mg西洛菲索(游離形式等效物)及20 mg弗可司他，及一或多種不活潑成分，包括甘露醇、微晶纖維素、交聯聚維酮、硬脂酸鎂及一或多種膜塗層材料(包括聚乙烯醇、聚乙二醇、二氧化鈦、滑石、黃色氧化鐵及紅色氧化鐵)。

用於本文中所提供之藥物之醫藥組合物可呈適用於投與途徑之形式。調配物可以單位劑型方便地存在及可藉由藥劑學技術中熟知之方法中之任一者製備。技術及調配物一般見於Remington之Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co., Easton, PA)中。此等方法包括將活性成分與構成一或多種輔助成分之載劑締合之步驟。一般而言，調配物藉由將活性成分與液體載劑或細分固體載體或二者均勻且密切地締合，及然後若必要，則使產品成型來製備。

於各種實施例中，針對口服使用，可製備錠劑、糖錠、口含錠、水性或油性懸浮液、可分散粉末或顆粒、乳液、硬或軟膠囊、糖漿或酏劑。預期用於口服使用之組合物可根據此項技術已知之用於製造醫藥組合物之任何方法製備及此等組合物可含有一或多種劑，包括甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑以提供可口製劑。含有活性成分與適用於製造錠劑之無毒醫藥上可接受之賦形劑混合之錠劑係可接受。此等賦形劑可為(例如)惰性稀釋劑，諸如，例如，碳酸鈣或碳酸鈉、乳糖、乳糖單水合物、交聯羧甲基纖維素鈉、聚維酮、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑及崩解劑，諸如，例如，玉米澱粉或藻酸；黏合劑，諸如，例如，纖維素、微晶纖維素、澱粉、明膠或阿拉伯膠；及潤滑劑，諸如，例如，硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑可未經塗覆或可藉由包括微膠囊化之已知技術塗覆以延遲於胃腸道中之崩解及吸收及從而提供歷時更長時間之持續作用。例如，可採用延時材料，諸如，例如，單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯單獨或與蠟一起。

用於口服使用之調配物亦可呈硬明膠膠囊(其中將活性成分與惰性固體稀釋劑(例如磷酸鈣或高嶺土)混合)，或呈軟明膠膠囊(其中將活性成分與水或油性介質(諸如，例如，花生油、液體石蠟或橄欖油)混合)存在。

本發明之水性懸浮液可含有活性材料與適用於製造水性懸浮液之賦形劑混合。適宜賦形劑包括懸浮劑，諸如，例如，羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯啶酮、黃蓍膠及阿拉伯膠，及分散或潤濕劑，諸如，例如，天然產生之磷脂(例如，卵磷脂)、環氧烷烴與脂肪酸之縮合產物(例如，硬脂酸聚氧乙烯酯)、環氧乙烷與長鏈脂族醇之縮合產物(例如，十七乙烯氧基鯨蠟醇)、環氧乙烷與衍生自脂肪酸及己糖醇酐之部分酯之縮合產物(例如，聚氧乙烯失水山梨糖醇單油酸酯)。水性分散液亦可含有一或多種防腐劑(諸如，例如，對羥基苯甲酸乙酯或正丙酯)、一或多種著色劑、一或多種調味劑及一或多種甜味劑(諸如，例如，蔗糖或糖精)。

油性懸浮液可藉由將活性成分懸浮於植物油(諸如，例如，花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油)或礦物油(諸如，例如，液體石蠟)中來調配。口服懸浮液可含有增稠劑，諸如，例如，蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。可添加甜味劑(諸如，例如，以上闡述之彼等)及調味劑以提供可口口服製劑。此等組合物可藉由添加抗氧化劑(諸如，例如，抗壞血酸)保存。

適用於藉由添加水製備水性懸浮液之本發明之可分散粉末及顆粒提供活性成分與分散或潤濕劑、懸浮劑及一或多種防腐劑之混合物。適宜分散或潤濕劑及懸浮劑藉由以上揭示之彼等例示。另外賦形劑，例如甜味劑、調味劑及著色劑亦可存在。

本發明之醫藥組合物亦可呈水包油乳液之形式。油相可為植物油(諸如，例如，橄欖油或花生油)、礦物油(諸如，例如，液體石蠟)或此等之混合物。適宜乳化劑包括天然產生之膠(諸如，例如，阿拉伯膠及黃蓍膠)、天然產生之磷脂(諸如大豆卵磷脂)、衍生自脂肪酸及己糖醇酐之酯或部分酯(諸如，例如，失水山梨糖醇單油酸酯)及此等部分酯與環氧乙烷之縮合產物(諸如，例如，聚氧乙烯脫水山梨糖醇單油酸酯)。乳液亦可含有甜味劑及調味劑。糖漿及酏劑可利用甜味劑(諸如，例如，甘油、山梨糖醇或蔗糖)調配。此等調配物亦可含有緩和劑、防腐劑、調味劑或著色劑。

本發明之醫藥組合物可呈無菌可注射製劑，諸如，例如，無菌可注射水性或油性懸浮液之形式。此懸浮液可根據已知技術使用以上提及之彼等適宜分散或潤濕劑及懸浮劑調配。該無菌可注射製劑亦可為含於無毒非經腸可接受稀釋劑或溶劑中之無菌可注射溶液或懸浮液，諸如，例如，含於1,3-丁二醇中之溶液或呈凍乾粉末製備。可採用之可接受媒劑及溶劑為水、林格氏(Ringer’s)溶液及等滲氯化鈉溶液。此外，可習知採用無菌固定油作為溶劑或懸浮介質。出於此目的，可採用任何溫和固定油，包括合成單甘油酯或二甘油酯。此外，脂肪酸(諸如，例如，油酸)同樣可用於製備可注射劑。

可與載劑物質組合以產生單一劑型之活性成分之量將取決於所治療之宿主及特定投與模式(諸如口服投與或皮下注射)變化。例如，意在向人類口服投與之緩釋調配物可含有約1至1000 mg活性物質化合物與適宜及方便量之載劑物質，其可自總組合物之約5至約95% (重量:重量)變化。可製備醫藥組合物以提供用於投與之可容易量測量。例如，意在用於靜脈內輸注之水溶液可含有約3至500 µg活性成分/毫升溶液以便適宜體積以約30 mL/hr之速率之輸注可發生。當調配用於皮下投與時，該調配物通常約一個月兩次投與約2至約4個月之時間段。

適用於非經腸投與之調配物包含水性及非水性無菌注射溶液，其可含有抗氧化劑、緩衝劑、抑菌劑及致使調配物與預期接受者之血液等滲之溶質；及水性及非水性無菌懸浮液，其可包含懸浮劑及增稠劑。

調配物可於單位劑量或多劑量容器，例如，密封安瓿及小瓶中存在，及可儲存於冷凍乾燥(凍乾)條件下，僅要求在使用之前立即添加無菌液體載劑，例如注射用水。臨時注射溶液及懸浮液自無菌粉末、顆粒及先前所述類型之錠劑製備。較佳單位劑量調配物為含有如上文所詳述之活性成分之每日劑量或單位每日子劑量，或其適宜分率之彼等。實例

包含下列實例以證實本發明之特定實施例。熟習此項技術者應瞭解，下列實例中所揭示之技術表示於實踐本發明中良好起作用之技術，及因此可認為構成其實務之特定模式。然而，根據本發明，熟習此項技術者應瞭解，此等實例係示例性且非詳盡。可在不背離本發明之精神及範圍下，於揭示之特定實施例中作出許多變化及仍獲得相似結果。實例 1 ：評價患有 NASH 之個體之組合療法之臨床研究 A. 研究設計之概觀

此為評價患有NASH之個體之單藥療法及組合方案之安全性、耐受性及功效的概念驗證，開放標籤式研究。將滿足該研究之進入標準之個體以1:1:1:1:1比率隨機分配至5個治療組中之1者，於各組中具有約20個個體，如圖2中所示。隨機分組藉由如由醫學史確定或若先前未經診斷，則基於篩選實驗室值(血紅素A1c [HbA1c] ≥ 6.5%)之2型糖尿病之存在或不存在分層。該研究可持續至多35週，其包含2週篩選期，2週預治療期，至多24週治療期及7週隨訪期。B. 個體群體

此研究招募具有非酒精性脂肪肝病(NAFLD)之臨床診斷之約100個個體，其中篩選FibroTest® ＜ 0.75 (除非所有歷史肝臟活組織檢查不揭示肝硬化)，具有≥ 10%脂肪變性之篩選MRI-PDFF (如由中心讀者所評估)及具有肝臟硬度≥ 7 kPa之篩選FibroScan®，或於篩選訪問日之6個月內具有歷史肝臟活組織檢查符合NASH (經定義為存在脂肪變性、發炎及腫脹)與根據NASH臨床研究網路(CRN)分類(或等效物)之2至3期纖維化的個體。納入標準

為參與該研究，個體必須滿足所有下列納入標準。 1)介於18至75歲(含)之間之男性及女性，基於篩選訪問日； 2)個體必須滿足所有下列條件： a)非酒精性脂肪肝病(NAFLD)之臨床診斷； b)除非所有先前歷史肝臟活組織檢查不揭示肝硬化，否則篩選FibroTest® ＜ 0.75。於患有吉爾伯特氏(Gilbert’s)症候群或溶血之個體中，FibroTest®係使用直接膽紅素代替總膽紅素計算得； c)具有≥ 10%脂肪變性之篩選MRI-PDFF，如由中心讀者所評估。若由中心讀者認為可接受，則可使用於篩選訪問日之4週內之歷史MRI-PDFF； d)具有肝臟硬度≥ 7 kPa之篩選FibroScan®。於篩選訪問日之4週內之歷史FibroScan®係可接受；或 e)於篩選訪問日之6個月內之歷史肝臟活組織檢查符合NASH (經定義為存在脂肪變性、發炎及腫脹)與根據NASH臨床研究網路(CRN)分類(或等效物)之2至3期纖維化，如由醫學監測者所審查； 3)個體在篩選訪問時具有下列實驗室參數，如由中心實驗室所測定： a)丙胺酸轉胺酶(ALT) ≤ 5 x ULN； b) eGFR≥ 30毫升/分鐘(mL/min)，如由MDRD研究方程式所計算得； c) HbA1c ≤ 9.5% (或若不能導出HbA1c，則血清果糖胺≤ 381 μmol)； d)除非由於治療性抗凝療法，否則INR ≤ 1.2； e)血小板計數≥ 100,000/μL； f)除非替代病因學，諸如存在吉爾伯特氏症候群，否則總膽紅素＜ 1.3 x ULN； g)降血鈣素≤ 100 ng/L； 4)身體質量指數(BMI) ＞ 23 kg/m² 且體重＞ 60 kg； 5)針對育齡女性個體要求陰性血清妊娠測試。排除標準

自該研究排除滿足下列標準中之任一者之個體： 1)於篩選訪問日之6個月內登記在案之體重損失＞ 5%； 2)任何歷史肝臟活組織檢查符合肝硬化； 3)針對男性，飲酒大於21 oz/週或針對女性14 oz/週(1 oz/30 mL之酒精存在於1 12 oz/360 mL啤酒、1 4 oz/120 mL葡萄酒及1 oz/30 mL 40%酒精度中)； 4)任何代償失調肝臟疾病，包括腹水、肝性腦病或靜脈曲張出血之歷史； 5) 其他原因之肝臟疾病，包括(但不限於)：酒精性肝臟疾病、B型肝炎、C型肝炎、自體免疫性病症(例如，原發性膽汁性膽管炎[PBC]、原發性硬化性膽管炎[PSC]、自體免疫性肝炎)、藥物誘導之肝毒性、威爾森氏病(Wilson disease)、需要治療之臨床顯著鐵超載或α-1-抗胰蛋白酶缺陷； 6)肝臟移植史； 7)肝細胞癌史； 8)於過去2年或在研究期間計劃減重手術； 9)慢性B型肝炎(HbsAg陽性)； 10)慢性C型肝炎(HCV RNA陽性)。在篩選訪問日之前小於2年治癒HCV感染之個體係不合格； 11)HIV Ab陽性； 12)如由下列中之任一者所定義之不穩定心血管疾病： a)於篩選訪問日之前之6個月內不穩定心絞痛、心肌梗塞、冠狀動脈旁路移植手術或冠狀血管成形術； b)於篩選訪問日之前之6個月內短暫缺血性發作或腦血管意外； c)症狀性阻塞性心臟瓣膜病或肥厚型心肌病； d)症狀性充血性心臟衰竭； e)未控制或復發室性心動過速或需要自動可植入心臟複律去顫器(AICD)之其他心律不整。允許穩定受控制之心房顫動； f)於篩選訪問日之前之6個月內針對確診之心血管疾病之急診室訪問或住院； 13)於篩選訪問日之5年內惡性腫瘤史，其中下列例外： a)經適當治療之子宮頸原位癌； b)經適當治療之基底或鱗狀細胞癌或其他局部非黑色素瘤皮膚癌。 14)於篩選訪問日之前之過去180天內存在急性胰炎； 15)慢性胰炎之歷史或存在； 16) 1型糖尿病之存在或歷史； 17)針對在篩選訪問日之前或在篩選訪問實驗室診斷患有2型糖尿病之個體(經定義為HbA1c ≥6.5%)，個體必須不具有未控制及潛在不穩定視網膜病或黃斑病之證據，如由以下所測定： a)於篩選訪問日之前之90天內進行之眼底檢查。若自此歷史眼底檢查根據研究者之意見，存在個體之視覺功能之惡化，則必須重複眼底檢查；或 b)在篩選訪問日與招募(第-14天)之間進行之眼底檢查。除非使用特定用於非擴張檢查之數位眼底攝影術，否則於以上情況二者中需要藥理學瞳孔擴張； 18)多發性內分泌腫瘤2型或髓樣甲狀腺癌之個人或一度親屬史； 19)於篩選訪問日之前之90天時間內利用GLP-1 RA治療； 20)在篩選訪問日之前之至少180天及在篩選訪問日與招募(第-14天)之間之時間內處於≥800 IU/天之維生素E方案之個體必須處於穩定劑量(經定義為無處方劑量之變化、新的含維生素E之藥劑或停藥)； 21)在篩選訪問日之前之至少90天及在篩選訪問日與招募(第-14天)之間之時間內服用抗糖尿病藥劑之個體必須處於穩定劑量。C. 藥物產品 司美魯肽

注射用司美魯肽溶液具有以上表1中所示之組成。注射用司美魯肽溶液為無色或幾乎無色液體，無渾濁及基本上無粒子物質。針對司美魯肽之PDS290筆式注射器(FlexTouch®)為集成填充有司美魯肽3.0 mg/mL之3 mL筆芯之撥一劑(dial-a-dose)預填充裝置。該筆式注射器可以1之增量自1至80劑步長遞送劑量。使用者可上下撥動以調整劑量。西洛菲索及弗可司他

西洛菲索以100 mg及30 mg強度錠劑提供，如本文中所述。弗可司他以含有20 mg弗可司他之圓形平面薄膜塗覆之白色錠劑提供，如本文中所述。D. 劑量及投與

個體每週約相同時間利用PDS290筆式注射器經皮下服用司美魯肽。個體每天約相同時間服用弗可司他及/或西洛菲索錠劑(若適用)，隨食物或不隨食物，用水整體吞下。

研究藥物給藥及投與係如下，基於如圖2中所概述之治療組隨機分組：治療組 A ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽。治療組 B ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽，每日一次經口投與一個弗可司他20 mg錠劑，不考慮食物。治療組 C ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽，每日一次經口投與一個西洛菲索30 mg錠劑，不考慮食物。治療組 D ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽，每日一次經口投與一個西洛菲索100 mg錠劑，不考慮食物。治療組 E ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽，每日一次經口投與一個弗可司他20 mg錠劑及每日一次經口投與一個西洛菲索30 mg錠劑，均不考慮食物。

於隨機分組後，司美魯肽以8 (0.24 mg)之起始值開始持續前4週，及隨後該值每4週增加。司美魯肽劑量遞增量表示於表2中。表 2. 司美魯肽劑量遞增時程表

產品	劑量 (mg)	體積 ( μL)	持續時間
司美魯肽3.0 mg/mL	0.24	80	1至4週
司美魯肽3.0 mg/mL	0.50	170	5至8週
司美魯肽3.0 mg/mL	1.0	340	9至12週
司美魯肽3.0 mg/mL	1.7	570	13至16週
司美魯肽3.0 mg/mL	2.4	800	17至24週

若由於胃腸不良事件或如由研究者所判斷之其他原因，個體不耐受計劃之4週劑量遞增方案，則允許該個體在個別劑量步驟停留更長時間。E. 評估 臨床實驗室分析物

一般而言，個體在血液樣品收集之前禁食(無食物或飲料，除了水)約10小時。

評價下列化學分析物：丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、鹼性磷酸酶(ALP)、碳酸氫鹽、血尿素氮(BUN)、肌酸激酶(CPK)、鈣、氯化物、肌酸酐、葡萄糖、鎂、磷、鉀、鈉、總及直接膽紅素、總蛋白質、尿酸及γ-麩胺醯基轉移酶(GGT)。

量測下列血液學因素：血球比容(Hct)、血紅素(Hb)、血小板計數、紅血球計數(RBC)、具有分化之白血球計數(WBC) (絕對及百分比)，包括淋巴細胞、單核細胞、嗜中性白血球、嗜酸性白血球、嗜鹼性白血球及紅血球平均體積(MCV)。凝血小組包括INR、凝血酶原時間(PT)及部分凝血激酶時間(PTT)。

另外測試包括HIV-1 (對HIV-1 RNA之反射)、HBV (HBsAg)、HCV (對HCV RNA之反射)血清學、胰島素抗性之穩態模型評估(HOMA-IR，基於空腹血糖及胰島素)、如藉由MDRD計算之eGFR、HbA1c、C-肽、降血鈣素、胰島素、血脂小組、基因組樣品收集、ELF™測試及FibroTest®。生物標誌物測試包括(但不限於) C-反應性蛋白(CRP)、NMR LipoProfile®、阿樸脂蛋白及脂聯素。肌酸酐清除率 /eGFR

估計腎小球過濾速率(eGFR)藉由肌酸酐清除率測定，其藉由腎病之飲食修改(MDRD)研究方程式計算得： eGFR (mL/min/1.73 m²) = 175 ×血清肌酸酐^-1.154 × (年齡)^-0.203 × (若非裔美國人，則1.212) × (若女性，則0.742)。

在應用該公式之前，將以µmol/L之血清肌酸酐圓整至零位小數及藉由乘以0.01131轉換成mg/dL。在應用公式之前，將以mg/dL之肌酸酐圓整至2位小數。重新脂肪生成 (DNL)

為分析研究藥物之藥效學效應，個體在第154天開始至第160天每天三次飲用45 mL氘化水。在第154天、第157天、第161天及第168天獲得動力學生物標誌物樣品。評估涉及分析DNL值；具體而言，在給藥後與給藥前氘化水負載期之間自基線之變化(絕對及相對)。Child-Pugh (CP) 分數

Child-Pugh (CP)分數係用於評估慢性肝病，主要肝硬化之預後。MRE 及 MRI-PDFF

肝臟硬度在篩選訪問第84天(第12週)及第168天(第24週)時，藉由MRE (剪切波60 Hz)及MRI-PDFF評估。FibroScan®

在篩選訪問第84天(第12週)及第168天(第24週)時進行FibroScan®檢查及評估中值肝臟硬度(單位千帕(kPa))、四份位距/中值(IQR/M)、及成功率(有效拍攝數/拍攝總數)。在適用之情況下，自FibroScan®檢查記錄中值CAP及CAP之四分位距值。另外篩選

在篩選及第168天(第24週)訪問時，進行標準12-導聯心電圖(ECG)評估。研究者針對任何臨床顯著異常審查ECG以確保個體安全性。

針對患有2型糖尿病之個體(自醫療史或自篩選，血紅素A1c≥6.5%)，在篩選時進行眼底檢查。眼底檢查要求兩個瞳孔之藥理學擴張或使用特定用於非擴張檢查之數位眼底攝影術。

亦評估健康相關之生活品質。慢性肝病問卷-非酒精性脂肪肝病(CLDQ-NAFLD)提問與肝臟疾病及具體而言NAFLD相關之問題，以量測患有慢性肝病之個體之健康相關之生活品質。EuroQol五維(EQ-5D)問卷非疾病特異性，但是為由EuroQol組開發之健康狀態之標準量度以針對臨床及經濟評價提供健康之簡單通用量度。工具由EQ-5D描述系統及EQ視覺模擬量表(VAS)組成。該描述部分包含5個維度(移動、自理、日常活動、疼痛/不適及焦慮/抑鬱)。此等5個維度各者具有5個等級(沒問題、輕微問題、中度問題、嚴重問題及失能)。將5個維度各者之結果組合至5位數以描述個體之健康狀態。VAS以0至100 mm VAS量表記錄個體之健康，其中0指示「你可想像之最差健康」及100指示「你可想像之最佳健康」。F. 終點

此研究之主要終點為研究藥物於患有NASH之個體中之安全性及耐受性。

此研究之探索性終點包括纖維化及脂肪變性之非侵入性量度，包括： ● 脂肪變性自基線之變化，如由MRI-PDFF所量測； ● 脂肪變性自基線之變化，如由CAP所量測； ● 肝臟硬度自基線之變化，如由MRE所量測； ● 肝臟硬度自基線之變化，如由FibroScan®所量測； ● 重新脂肪生成(DNL)、纖維生成及發炎之標誌物之動力學參數自基線之變化； ● 肝臟損傷及功能之標誌物(包括ALT、AST、膽紅素、GGT及ALP)自基線之變化； ● 纖維化之非侵入性標誌物(包括ELF™測試分數及FibroTest®)自基線之變化； ● HOMA-IR、HbA1c、血脂譜及收縮及舒張壓自基線之變化； ● 體重自基線之變化；及 ● 基於(例如) CLDQ-NAFLD及EQ-5D之健康相關之生活品質終點自基線之變化。

以上終點之基線係在研究之第一次治療之前。

分析動力學生物標誌物以評價研究藥物之藥效學效應。評估涉及分析重新脂肪生成(DNL)值；具體而言，在給藥後與給藥前氘化水負載期之間自基線之變化(絕對及相對)。針對其他生物標誌物，藉由提供生物標誌物表現之描述統計學及藉由治療在各採樣時間自基線之變化來進行探索性分析。可計算點估計及95%信賴區間。亦可進行探索性分析以評價個別探索性生物標誌物或生物標誌物之組合與臨床測量值及其他風險因素之關聯。G. 數據及結果 參與者

若年齡18至75歲之患者於篩選之6個月內具有歷史肝臟活組織檢查，根據NASH臨床研究網路(CRN)分類符合NASH (經定義為存在脂肪變性、發炎及腫脹)與2或3期纖維化，或若其滿足以下之所有四種標準：NAFLD之臨床診斷、具有≥10%脂肪變性之磁共振成像質子密度脂肪分數(MRI-PDFF)、藉由瞬時彈性成像(TE；FibroScan®, Echosens, Paris, France)之肝臟硬度≥7 kPa (符合纖維化)及FibroTest® ＜0.75 (排斥肝硬化)，則其納入係有資格。其他納入標準包括丙胺酸轉胺酶(ALT) ≤5 ×正常上限，HbA_1c ≤9.5%，體重＞60 kg，及身體質量指數(BMI) ＞23 kg/m²。關鍵排除標準包括於篩選之前之6個月內符合肝硬化之歷史肝臟活組織檢查、代償失調肝臟疾病史、肝臟移植或肝細胞癌、其他原因之肝臟疾病、過量飲酒(針對男性，＞21 oz/週或針對女性，14 oz/週)、不穩定心血管疾病、或體重損失＞5%。某些有資格標準於以上納入標準及排除標準 部分中列出。所有參與者在任何試驗相關活動之前提供書面知情同意。隨機分組及掩蔽

將患者隨機分組(1:1:1:1:1)成五個治療組中之一者：司美魯肽單藥療法、司美魯肽加上西洛菲索30 mg (SEMA + CILO 30)、司美魯肽加上西洛菲索100 mg (SEMA + CILO 100)、司美魯肽加上弗可司他20 mg (SEMA + FIR)或司美魯肽加上西洛菲索30 mg加上弗可司他20 mg (SEMA + CILO + FIR)。互動式移動/網路應答系統(IXRS)係用於集中隨機分組及治療分配。隨機分組由2型糖尿病之存在或不存在分層。治療係開放標籤的。程序

試驗由2週篩選期、2週預治療期、24週治療期及7週隨訪期組成(圖3)。

司美魯肽每週一次利用預填充之筆式注射器藉由皮下注射投與及以0.24 mg之起始劑量開始，其以4週間隔增加(至0.5 mg、1.0 mg及1.7 mg)直至達到2.4 mg之建議目標劑量(向前自第17週)。鼓勵可不耐受計劃之劑量遞增時程表之患者延長任何單一劑量步驟持續最多再一週，及重新嘗試劑量遞增至2.4 mg至少一次。每日一次經口提供西洛菲索及弗可司他，伴隨或不伴隨食物。

在篩選時(或在篩選之前之4週內)及在第12週及24週時進行成像評估(MRI-PDFF，藉由2-D磁共振彈性成像[MRE]及TE之肝臟硬度)。由有經驗操作者進行TE，及如先前所述藉由中心讀者分析MRI-PDFF及MRE影像[Patel等人，Hepatology. 2020;72(1):58-71；Loomba等人，Gastroenterology. 2018;155(5):1463-1473；Loomba等人，Hepatology. 2020年11月10日. doi: 10.1002/hep.31622]。針對臨床實驗室值，在篩選時、基線及每4週直至第24週收集血清樣品；在篩選時、基線及第12週及24週評估血液生物標誌物。結果

安全性評估包括不良事件、臨床實驗室評估、生命體徵、心電圖(ECG)及身體檢查。臨床及實驗室不良事件係使用管理活動之醫學詞典(MedDRA)版本23.0編碼。

所有功效終點係探索性及包含肝脂肪變性在第24週自基線之變化，如藉由MRI-PDFF及受控衰減參數(CAP；FibroScan®)所量測。亦評估具有MRI-PDFF之≥5%絕對減少及≥30%相對減少之患者之比例。除了此等協定限定之分析外，事後評估包括在第24週時具有MRI-PDFF之≥50%相對減少及MRI-PDFF標準化(定義為＜5%)之患者之比例。評價肝臟生物化學(ALT、天冬胺酸轉胺酶[AST]、鹼性磷酸酶[ALP]、γ-麩胺醯基轉移酶[GGT]、總及直接膽紅素)、血小板、白蛋白、國際標準化比率(INR)、末期肝臟疾病模型(MELD)分數、纖維化(包括增強型肝纖維化(ELF))測試分數之NIT(及具有≥0.5單位減少之患者之比例)、FibroSure/Fibro測試分數及發炎及細胞凋亡之標誌物(C反應性蛋白[CRP]，CK-18 M30)之變化。肝臟硬度之變化藉由TE及MRE評估，包括具有藉由TE之肝臟硬度相對減少≥25%之患者的比例。亦事後評估FibroScan-AST (FAST)分數的變化，該分數組合藉由TE量測之肝臟硬度、藉由CAP之脂肪變性及血清AST用於患有NASH及≥F2纖維化之患者之非侵入性識別[Newsome Lancet Gastroenterol Hepatol. 2020年4月;5(4):362-373]。最後，評估代謝參數(體重、BMI、HbA_1c 、空腹血糖、空腹胰島素、胰島素抗性之穩態模型評估[HOMA-IR])、血壓、估計腎小球過濾速率(eGFR)及血清肌酸酐。統計分析

由於此試驗之探索性，樣品大小係基於利用先前研究之臨床經驗而非正式檢力計算。

對包含服用任何研究藥物之至少一個劑量之所有患者之安全性分析集進行安全性分析。對包含接受任何研究藥物之至少一個劑量之所有隨機分組患者之全分析集(FAS)進行功效分析。因為所有給藥個體經隨機分組，所以此等兩個分析集包含相同患者。

所有協定限定之功效分析係探索性及提供描述統計學。事後進行組合方案與司美魯肽單藥療法之間之比較分析。針對自基線至第24週之變化之評價，使用具有針對基線值及糖尿病狀態之調整之協方差分析(ANCOVA)，及計算最小二乘(LS)平均值、LS平均差、相關聯之95%信賴區間(CI)及p值。二元反應者之比例藉由費希爾(Fisher’s)精確檢驗比較。

進行此等參數之敏感性分析，排除於研究藥物之最後一次劑量後超過30天收集成像數據之患者。

報告名義p-值。在0.05之顯著性水平下進行所有比較。所有分析係基於觀察到之數據及使用SAS版本9.4 (SAS; Cary, NC)進行。結果

篩選總計209名患者及將彼等患者中之108名隨機分組為利用SEMA (司美魯肽) (n=21)、SEMA + CILO 30 (n=22)、SEMA + CILO 100 (n=22)、SEMA + FIR (n=22)或SEMA + FIR + CILO 30 (n=21)治療24週。經隨機分組之所有108名患者接受任何研究藥物之至少一個劑量。92名患者(85%)完成研究藥物治療及96名(89%)完成該研究(圖4)。各組之大多數患者具有90至100%之治療依從率。總之，89名患者(82%)達成2.4 mg之司美魯肽目標劑量，在司美魯肽單獨或組合療法或跨組合組之間不具有有意義差異。

跨治療組，大多數患者為女性(68.5%)、白人(85.2%)及患有2型糖尿病(54.6%)；中值(Q1至Q3)年齡為54歲(48至61)。在基線時，NIT符合輕度至中度纖維化(中值ELF 9.4 [8.9, 9.9]；及藉由TE之肝臟硬度9.3 kPa [7.7, 12.0])及中度至嚴重脂肪變性(中值MRI-PDFF 17.9% [12.0, 24.3])。基線人口統計學及臨床特徵在組之間相似(表3)，雖然與司美魯肽組相比，於組合組中之中值體重及藉由TE之肝臟硬度更高，且血清ALT及AST更低。表 3 基線人口統計學及臨床特徵

	司美魯肽 2.4 mg (n=21)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 100 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 20 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg + 弗可司他 20 mg (n=21)
人口統計學
年齡，歲	57 (51, 61)	53 (46, 58)	58 (46, 61)	53 (47, 60)	53 (49, 61)
女性，n (%)	15 (71)	16 (73)	13 (59)	15 (68)	15 (71)
種族，白人，n (%)	17 (81)	18 (82)	19 (86)	19 (86)	19 (90)
種族，西班牙裔，n (%)	8 (38)	5 (23)	7 (32)	12 (55)	11 (52)
代謝參數
體重，kg	91.4 (77.2, 104.8)	87.9 (80.7, 115.3)	98.4 (83.1, 114.3)	91.3 (79.7, 112.7)	113.0 (92.9, 116.2)
身體質量指數，kg/m²	33.2 (30.9, 36.4)	34.0 (32.7, 36.0)	34.1 (29.7, 39.4)	33.5 (30.2, 37.9)	39.5 (34.3, 43.0)
糖尿病，n (%)	11 (52)	12 (55)	12 (55)	13 (59)	11 (52)
空腹血糖， mg/dL	104 (98, 120)	110 (98, 132)	117 (94, 153)	111 (92, 136)	118 (100, 148)
HbA_1c , %	6.1 (5.8, 6.7)	6.3 (5.7, 7.7)	6.5 (5.6, 7.8)	6.3 (5.9, 7.3)	6.3 (5.9, 7.5)
總膽固醇，mg/dL	188 (159, 219)	168 (157, 205)	170 (152, 190)	169 (154, 190)	178 (151, 211)
LDL膽固醇，mg/dL	101 (85, 129)	91 (72, 112)	87 (71, 111)	103 (71, 113)	107 (81, 134)
HDL膽固醇，mg/dL	44 (37, 53)	40 (36, 51)	42 (37, 49)	43 (40, 48)	40 (36, 44)
VLDL膽固醇，mg/dL	33 (21, 42)	35 (23, 46)	36 (27, 45)	32 (23, 42)	31 (26, 39)
甘油三酯，mg/dL	167 (104, 230)	179 (114, 260)	177 (137, 225)	160 (116, 212)	155 (131, 197)
肝臟損傷及功能之標誌物
ALT，U/L	60 (48, 98)	53 (40, 86)	40 (24, 74)	45 (29, 76)	42 (35, 70)
AST，U/L	50 (36, 61)	41 (31, 57)	27 (22, 53)	43 (26, 51)	34 (27, 44)
ALP，U/L	78 (62, 92)	79 (63, 94)	82 (68, 103)	82 (64, 105)	78 (62, 97)
GGT，U/L	35 (30, 56)	71 (32, 105)	33 (25, 81)	38 (26, 94)	33 (22, 48)
總膽紅素，mg/dL	0.5 (0.4, 0.7)	0.5 (0.4, 0.7)	0.5 (0.3, 0.7)	0.4 (0.4, 0.6)	0.4 (0.3, 0.5)
血小板，x10³ /μL	258 (214, 322)	254 (235, 293)	274 (238, 338)	265 (228, 314)	262 (218, 311)
脂肪變性及纖維化之非侵入性標誌物
MRI-PDFF，%	15.3 (9.9, 19.5)	19.3 (13.5, 27.1)	18.0 (14.5, 23.9)	18.1 (12.5, 24.3)	15.9 (12.3, 25.4)
藉由TE之CAP，dB/m	319 (294, 364)	347 (319, 370)	359 (323, 389)	350 (325, 374)	336 (324, 376)
藉由TE之肝臟硬度，kPa	7.7 (7.2, 10.0)	8.8 (7.6, 14.1)	10.5 (7.6, 12.5)	9.4 (8.1, 11.3)	10.7 (8.8, 12.3)
藉由MRE之肝臟硬度，kPa	2.8 (2.4, 3.3)	3.0 (2.3, 3.8)	2.5 (2.4, 3.0)	3.0 (2.6, 3.8)	2.9 (2.6, 3.6)
ELF分數	9.6 (9.0, 10.1)	9.4 (8.8, 10.1)	9.4 (8.9, 9.7)	9.4 (8.6, 9.9)	9.4 (8.9, 9.9)
FAST分數	0.56 (0.50, 0.69)	0.61 (0.42, 0.71)	0.47 (0.24, 0.76)	0.56 (0.33, 0.69)	0.53 (0.39, 0.66)

連續參數為中值(Q1, Q3)。 ALT，丙胺酸轉胺酶；ALP，鹼性磷酸酶；AST，天冬胺酸轉胺酶；BMI，身體質量指數；CAP，受控衰減參數；eGFR，估計腎小球過濾速率；ELF，增強型肝纖維化；FAST，FibroScan-AST；GGT，γ-麩胺醯基轉移酶；HbA_1c ，血紅素A_1c ；HDL，高密度脂蛋白；HOMA-IR，胰島素抗性之穩態模型評估；LDL，低密度脂蛋白；MRE，磁共振彈性成像；MRI-PDFF，磁共振成像質子密度脂肪分數；TE，瞬時彈性成像；VLDL，極低密度脂蛋白。表 4. 不良事件、實驗室異常及 血清脂質 變化

	司美魯肽 2.4 mg (n=21)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 100 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 弗可司他 20 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg + 弗可司他 20 mg (n=21)
安全性概觀
任何不良事件	17 (81)	18 (82)	16 (73)	19 (86)	19 (90)
≥2級不良事件	10 (48)	9 (41)	9 (41)	10 (45)	10 (48)
治療相關不良事件	13 (62)	17 (77)	11 (50)	15 (68)	15 (71)
治療相關≥2級不良事件	4 (19)	3 (14)	7 (32)	7 (32)	5 (24)
嚴重不良事件	1 (5)	0	1 (5)	0	0
導致任何研究藥物之停藥之不良事件	3 (14)	1 (5)	1 (5)	2 (9)	1 (5)
死亡	0	0	0	0	0
最常見不良事件 ( 任何治療組中之＞10% 個體 )
噁心	9 (43)	8 (36)	6 (27)	3 (14)	14 (67)
腹瀉	5 (24)	5 (23)	1 (5)	4 (18)	3 (14)
便秘	2 (10)	5 (23)	3 (14)	2 (9)	5 (24)
食慾減少	4 (19)	6 (27)	0	4 (18)	3 (14)
嘔吐	2 (10)	2 (9)	1 (5)	2 (9)	6 (29)
腹痛	1 (5)	1 (5)	1 (5)	4 (18)	2 (10)
疲勞	2 (10)	3 (14)	1 (5)	1 (5)	2 (10)
頭暈	2 (10)	3 (14)	2 (9)	1 (5)	0
上腹部痛	3 (14)	1 (5)	0	1 (5)	2 (10)
關節痛	5 (24)	0	2 (9)	0	0
頭痛	1 (5)	1 (5)	1 (5)	3 (14)	1 (5)
低血糖	0	4 (18)*	0	2 (9)	0
腸胃炎	0	0	3 (14)	1 (5)	1 (5)
胃食管逆流病	0	1 (5)	0	4 (18)	0
早飽腹感	1 (5)	0	0	3 (14)	0
腹脹	0	0	0	3 (14)	0
受關注之不良事件
瘙癢	0	1 (5)	2 (9)	0	2 (10)
實驗室異常
3級	0	0	0	1 (5)^†	0
4級	0	0	2 (9)^‡	0	0
自基線至第 24 週之脂質變化，最小二乘平均值變化 (95% CI)
總膽固醇，mg/dL	–15 (–29, –1)	–9 (–21, 3)	15 (2, 29)^§	–7 (–20, 6)	3 (–10, 16)
LDL膽固醇，mg/dL	–9 (–22, 4)	0 (–11, 12)	23 (11, 36)^§	–5 (–17, 7)	7 (–6, 21)
HDL膽固醇，mg/dL	–1 (–3, 2)	–2 (–4, 0)	–4 (–7, –1)	–5 (–8, –3)^§	–5 (–8, –2)^§
VLDL膽固醇，mg/dL	–7 (–12, –2)	–5 (–9, –1)	–5 (–9, 0)	4 (0, 8)^§	1 (–4, 5)^§
甘油三酯，mg/dL	–28 (–60, 4)	–43 (–72, –14)	–16 (–47, 15)	15 (–16, 46)	26 (–7, 58)^§

數據為n (%)，除了脂質變化。*一名患者報告經歷低血糖，但是無低血糖發作(定義為血漿葡萄糖含量≤70 mg/dL)。^† 具有基線二級升高之(487 mg/dL)之患者在第4週時3級高甘油三酯血症(577 mg/dL)。^‡ 於2名患者中4級肌酸磷酸激酶升高，非歸因於研究藥物。^§ p＜0.05相對於單獨司美魯肽。 CI，信賴區間；HDL，高密度脂蛋白；LDL，低密度脂蛋白；VLDL，極低密度脂蛋白。安全性評估

大多數患者經歷至少一個不良事件，跨治療組觀察到相似比率(73%至90%；表4)。大多數不良事件為1級或2級嚴重度；≥2級事件之比率跨組亦相似(41%至48%)。最常見報告之不良事件為胃腸，包括噁心、腹瀉、便秘及食慾減少。於司美魯肽+弗可司他+西洛菲索組相對於單獨司美魯肽中觀察到更高比率之噁心；然而，此不導致增加之治療停藥。於僅5名患者(均服用西洛菲索)中觀察到瘙癢(一名[4.5%]於司美魯肽+西洛菲索30組中，兩名[9.1%]於司美魯肽+西洛菲索100組中，及兩名[9.5%]於司美魯肽+弗可司他+西洛菲索組中)。所有瘙癢事件係輕度且無一導致治療停藥。10個低血糖發作於5名患者(4.6%)中報告；均為1級或2級嚴重度及僅於一名患者中要求司美魯肽之劑量修改。

僅2名患者具有嚴重不良事件，一名於司美魯肽組中(3級腹瀉及嘔吐)及一名於司美魯肽+西洛菲索100組中(3級胰炎)；於兩名患者中，停藥研究藥物。總之，8名患者(7.4%)停藥任何研究藥物及15名患者(13.9%)需要劑量修改或由於不良事件，主要胃腸性質之任何研究藥物之中斷。由於不良事件之藥物停藥於組合組相對於司美魯肽單藥療法中不增加。在試驗期間無死亡發生。

血清脂質在基線與第24週之間之變化概述於表4中。司美魯肽導致甘油三酯及總膽固醇、LDL膽固醇及VLDL膽固醇之提高。雖然LDL膽固醇於司美魯肽+西洛菲索100組中在第24週增加，但是於利用西洛菲索30 mg治療之患者中未觀察到變化。於含有弗可司他之組中觀察到甘油三酯之增加，包括於司美魯肽+弗可司他組中之患有3級高甘油三酯血症之一名患者。於此患者中，甘油三酯自基線時之487 mg/dL (2級)增加至第4週時之577 mg/dL (3級)，之後該患者仍服用研究藥物，無進一步3級或4級甘油三酯升高。另外，≥3級實驗室異常於司美魯肽+西洛菲索100組中之兩名患者中報告；二者為認為與研究治療無關之血液肌酸磷酸激酶之4級增加。未觀察到藥物相關肝毒性之證據。在第24週，跨治療組觀察到1至10 bpm之心率之中值增加，不具有異常或臨床顯著ECG發現結果或生命體徵之其他臨床相關變化。探索性功效終點 藉由 MRI-PDFF 及 CAP 之肝脂肪變性

如由MRI-PDFF量測之肝脂肪變性自基線至第24週之變化示於圖5A中。與司美魯肽單藥療法組(LS平均值變化：-8.0%)相比，於組合治療組中觀察到更大絕對降低(LS平均值變化範圍：-9.8%至-11.0%)。此差異在司美魯肽與司美魯肽+弗可司他組之間係統計上顯著(p=0.0353)。於排除具有於研究藥物之最後一次劑量後至少30天收集之成像數據之患者的敏感性分析中觀察到相似結果，雖然於此分析中在司美魯肽與司美魯肽+弗可司他+西洛菲索組之間之差異(LS平均值範圍：-8.6%相對於-12.6%)亦係顯著(p=0.0078) (圖6A至C)。

於組合組(-55.7至-59.4%)相對於利用司美魯肽單藥療法(-46.2%)中觀察到MRI-PDFF在第24週之更大的中值相對減少。組合組中之更多患者與司美魯肽組相比達成≥30%及≥50%之MRI-PDFF之相對減少(圖5B)。肝臟脂肪之≥5%絕對減少由司美魯肽組中64.7%之患者相對於組合組中76.5%至94.4%達成(圖5C)。肝臟脂肪於在基線時具有≥5%肝臟脂肪之患者中藉由MRI-PDFF標準化至＜5%由38.1%至41.2%之利用組合治療之患者相對於29.4%之利用司美魯肽者達成(圖5C)。

當藉由CAP評估時，亦觀察到肝脂肪變性之改善，具有與利用司美魯肽之21 dB/m相比，組合組之中值減少為52至80 dB/m (圖7)。此等減少針對司美魯肽+弗可司他(p=0.0034)及司美魯肽+西洛菲索30 (p=0.0379)組相對於司美魯肽係統計上顯著。肝臟生物化學

跨治療組，觀察到血清ALT及AST自基線之減少(圖8A及8B)。與司美魯肽單藥療法相比，所有組合組具有ALT之顯著更大提高；司美魯肽+弗可司他及司美魯肽+弗可司他+西洛菲索組亦具有AST之顯著更大降低。ALT於具有升高基線水平之患者中之標準化於司美魯肽組中之50%患者及於治療組中之86%與100%之間報告。其他肝臟生物化學參數之變化概述於表5及表6中。表 5. 肝臟及代謝生物標誌物自基線至第 24 週之變化

	司美魯肽 2.4 mg (N=21)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg (N=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 100 mg (N=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 20 mg (N=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg + 弗可司他 20 mg (N=21)
纖維化之非侵入性標誌物
藉由MRE之肝臟硬度，kPa	n=18 -0.13 (-0.40, 0.14)	n=19 -0.20 (-0.46, 0.06)	n=14 0.06 (-0.24, 0.36)	n=18 -0.20 (-0.47, 0.06)	n=17 -0.03 (-0.30, 0.25)
ELF分數	n=16 -0.56 (-0.86, -0.27)	n=19 -0.46 (-0.73, -0.19)	n=17 -0.47 (-0.76, -0.19)	n=17 -0.59 (-0.87, -0.30)	n=17 -0.42 (-0.70, -0.13)
具有≥0.5之ELF減少之患者，n (%)	11 (69)	8 (42)	8 (47)	10 (59)	7 (41)
FibroSure/Fibro測試分數	n=16 0 (-0.04, 0.04)	n=19 -0.05 (-0.09, -0.02)	n=17 -0.03 (-0.07, 0.01)	n=18 -0.01 (-0.05, 0.03)	n=17 -0.04 (-0.09, 0)
發炎及肝細胞凋亡之生物標誌物
C-反應性蛋白，mg/dL	n=16 -0.23 (-0.42, -0.04)	n=20 -0.13 (-0.30, 0.04)	n=17 0.05 (-0.13, 0.24)*	n=18 -0.01 (-0.19, 0.17)	n=17 -0.19 (-0.38, -0.01)
CK-18 M30，U/L	n=16 -179 (-252, -107)	n=20 -259 (-323, -194)	n=17 -213 (-284, -143)	n=18 -312 (-381, -243)*	n=17 -247 (-318, -176)
代謝參數
體重，kg	n=15 -7.0 (-9.9, -4.0)	n=20 -11.0 (-13.5, -8.4)*	n=17 -9.9 (-12.6, -7.1)	n=18 -8.3 (-11.0, -5.6)	n=18 -7.7 (-10.4, -4.9)
體重，%^†	-7.6 (-9.2, -4.2)	-8.6 (-13.3, -6.0)	-9.6 (-14.7, -6.3)	-7.6 (-11.7, -4.1)	-7.0 (-10.3, -3.7)
具有≥10體重損失之患者，n (%)	3 (20%)	9 (45%)	8 (47%)	5 (28%)	5 (28%)
身體質量指數，kg/m²	n=15 -2.6 (-3.7, -1.6)	n=20 -4.0 (-4.9, -3.2)*	n=17 -3.7 (-4.7, -2.7)	n=18 -3.0 (-4.0, -2.1)	n=18 -2.5 (-3.5, -1.5)
空腹血糖，mg/dL	n=16 -31 (-40, -23)	n=20 -22 (-30, -14)	n=17 -18 (-26, -10)*	n=18 -32 (-40, -23)	n=16 -23 (-31, -14)
HbA_1c , % 於患有2型糖尿病之患者中	n=16 -1.0 (-1.2, -0.7) n=7 -1.4 (-1.8, -1.0)	n=19 -1.1 (-1.3, -0.9) n=10 -1.7 (-2.0, -1.3)	n=17 -1.0 (-1.2, -0.8) n=8 -1.2 (-1.6, -0.8)	n=18 -1.2 (-1.4, -1.0) n=12 -1.7 (-2.0, -1.4)	n=17 -1.0 (-1.2, -0.8) n=10 -1.4 (-1.8, -1.1)

除非另有指定，否則數據為最小二乘平均值(95% CI)。*p＜0.05相對於單獨司美魯肽。^† 針對體重損失%之數據為中值(Q1, Q3)。最小二乘平均值95% CI及p值自在第24週時自基線變化之ANCOVA模型估計，針對基線值及基線糖尿病狀態調整該模型。 CI，信賴區間；CK，細胞角蛋白；ELF，增強型肝纖維化；HbA_1c ，血紅素A_1c ；MRE，磁共振彈性成像表 6. 另外肝生物標誌物及代謝參數自基線至第 24 週之變化

	司美魯肽 2.4 mg (n=21)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 100 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 弗可司他 20 mg (n=22)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg + 弗可司他 20 mg (n=21)
肝臟損傷及功能之標誌物
ALP，U/L	-7 (-20, 6)	-2 (-13, 9)	20 (8, 32)*	3 (-8, 15)	17 (5, 29)*
GGT，U/L	-22 (-38, -6)	-40 (-54, -26)	-25 (-41, -9)	-21 (-36, -6)	-23 (-38, -8)
總膽紅素，mg/dL	0 (-0.1, 0.1)	0 (-0.1, 0.1)	0 (-0.1, 0.1)	0 (-0.1, 0.1)	-0.1 (-0.2, 0)
直接膽紅素，mg/dL	0.01 (-0.02, 0.04)	-0.02 (-0.04, 0.01)	-0.04 (-0.07, -0.01)	-0.01 (-0.04, 0.02)	-0.05 (-0.08, -0.02)*
白蛋白，g/dL	0 (-0.1, 0.1)	0.1 (0, 0.2)	0 (-0.1, 0.1)	0 (-0.1, 0.1)	-0.1 (-0.2, 0)
國際標準化比率	0 (0, 0)	-0.1 (-0.1, 0)	-0.1 (-0.1, 0)*	0 (-0.1, 0)	-0.1 (-0.1, 0)
MELD分數	0 (0, 1)	0 (0, 0)	0 (0, 0)	0 (-1, 0)	0 (-1, 0)
纖維化及脂肪變性之非侵入性標誌物
ELF分數分量：
透明質酸，ng/mL	-16.3 (-37.2, 4.6)	-16.4 (-35.4, 2.5)	-11.2 (-31.3, 9.0)	-12.6 (-32.7, 7.6)	-12.9 (-33.0, 7.2)
TIMP1，ng/mL	-28.8 (-48.3, -9.4)	-41.4 (-59.3, -23.5)	-15.0 (-33.8, 3.9)	-43.4 (-62.4, -24.4)	-29.1 (-48.0, -10.2)
PIIINP，ng/mL	-2.8 (-3.8, -1.7)	-3.5 (-4.5, -2.6)	-2.4 (-3.4, -1.4)	-3.2 (-4.3, -2.2)	-2.6 (-3.6, -1.6)
FibroSure/Fibro測試分數分量：
α2巨球蛋白，mg/dL	1 (-12, 15)	1 (-11, 13)	1 (-12, 14)	18 (5, 31)	1 (-12, 14)
結合珠蛋白，mg/dL	4 (-19, 28)	13 (-8, 34)	19 (-5, 42)	25 (2, 48)	34 (11, 57)
載脂蛋白A1，mg/dL	-9 (-18, -1)	-17 (-24, -10)	-19 (-27, -11)	-13 (-21, -5)	-19 (-27, -11)
血糖控制標誌物
HOMA-IR	-3.5 (-5.3, -1.7)	-3.9 (-5.5, -2.2)	-2.3 (-4.1, -0.6)	-3.8 (-5.5, -2.1)	-2.5 (-4.3, -0.7)
空腹胰島素，uIU/mL	-8.5 (-14.6, -2.5)	-10.6 (-16.0, -5.2)	-6.3 (-12.1, -0.5)	-8.2 (-13.9, -2.5)	-4.6 (-10.6, 1.5)
腎功能標誌物
eGFR，mL/min/1.73 m²	-6.6 (-13.4, 0.3)	-2.1 (-8.1, 3.8)	-2.6 (-9.0, 3.8)	-2.0 (-8.3, 4.3)	1.1 (-5.3, 7.6)
肌酸酐，mg/dL	0.07 (0, 0.14)	0.02 (-0.04, 0.08)	0.05 (-0.01, 0.11)	0 (-0.06, 0.06)	-0.02 (-0.08, 0.04)

除非另有指定，否則數據為基於針對基線及2型糖尿病狀態調整之ANCOVA模型之最小二乘平均值(95% CI)。* p＜0.05相對於單獨司美魯肽。 ALP，鹼性磷酸酶；APRI，天冬胺酸轉胺酶與血小板比率指數；CI，信賴區間；eGFR，估計腎小球過濾速率；GGT，γ-麩胺醯基轉移酶；HOMA-IR，胰島素抗體之穩態模型評估；MELD，末期肝臟疾病模型；NAFLD，非酒精性脂肪肝病；PIIINP，前膠原III胺基端前肽；TIMP1，金屬蛋白酶之組織抑制劑纖維化之 NIT 、其他生物標誌物及 生活品質

肝臟硬度藉由TE之減少跨治療組係相似；LS平均值變化範圍自-2.29至-3.74 kPa (圖8C)。自基線至第24週之最大減少於兩個含弗可司他之組(司美魯肽+弗可司他，-3.50 kPa；司美魯肽+弗可司他+西洛菲索，-3.74 kPa)中觀察到。具有藉由TE之肝臟硬度自基線至第24週≥25%相對減少之患者之比例於組合組(50%至60%)與司美魯肽組(36%)中相比更高(圖9)。藉由MRE之肝臟硬度在基線與第24週之間不變化及在治療組之間未觀察到顯著差異(表5)。

在第24週，於所有組中觀察到ELF分數自基線之統計上顯著降低(自0.42至0.59個單位)；在組之間未觀察到顯著差異(表5)。於表6中報告個別ELF分量之變化。於事後分析中，除了司美魯肽+西洛菲索100之所有組合導致FAST分數與司美魯肽相比之顯著更大提高(圖8D)。亦觀察到FibroSure/FibroTest自基線至第24週之降低；然而，在司美魯肽組與組合療法之間不存在顯著差異(表5；表6)。

在第24週於所有治療組中觀察到CK-18 M30 (肝細胞凋亡之生物標誌物)之血清含量自基線之減少；此等減少於司美魯肽+弗可司他組中相對於司美魯肽單藥療法(p=0.0102)顯著更大。除了經司美魯肽+西洛菲索100治療之患者，CRP於所有治療組中下降。

體重自基線至第24週之相對減少跨組相似(利用司美魯肽，-7.6，利用組合，-7.0至-9.6%) (表5)。在第24週具有≥10%體重損失之患者之比例範圍利用司美魯肽自20%至28%，利用組合至47%。HbA_1c 在第24週之減少跨治療組相似(-1.0至-1.2%) (表5)。針對患者報告之結果中之任一者未觀察到健康相關生活品質跨治療組之一致改善模式(表7)。表7.生活品質分數自基線至第24週之變化

	司美魯肽 2.4 mg (n=16)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg (n=21)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 100 mg (n=18)	司美魯肽 2.4 mg + 弗可司他 20 mg (n=19)	司美魯肽 2.4 mg + 西洛菲索 30 mg + 弗可司他 20 mg (n=19)
CLDQ-NAFLD	0.2 (-0.6, 0.6)	-0.1 (-0.4, 0.3)	0.1 (-0.3, 0.5)	0.0 (-0.8, 1.0)	0.3 (-0.5, 0.5)
EQ-5D，n (%) 移動性：改善無變化惡化	0 16 (100) 0	4 (19.0) 15 (71.4) 2 (9.5)	1 (5.6) 11 (61.1) 6 (33.3)	4 (21.1) 13 (68.4) 2 (10.5)	2 (10.5) 14 (73.7) 3 (15.8)
自理改善無變化惡化	1 (6.3) 14 (87.5) 1 (6.3)	1 (4.8) 19 (90.5) 1 (4.8)	0 18 (100) 0	1 (5.3) 16 (84.2) 2 (10.5)	1 (5.3) 18 (94.7) 0
日常活動改善無變化惡化	1 (6.3) 12 (75. 0) 3 (18.8)	4 (19.0) 15 (71.4) 2 (9.5)	1 (5.6) 11 (61.1) 6 (33.3)	1 (5.3) 15 (78.9) 3 (15.8)	2 (10.5) 14 (73.7) 3 (15.8)
疼痛/不適改善無變化惡化	3 (18.8) 10 (62.5) 3 (18.8)	4 (19.0) 12 (57.1) 5 (23.8)	5 (27.8) 11 (61.1) 2 (11.1)	5 (26.3) 11 (57.9) 3 (15.8)	4 (21.1) 10 (52.6) 5 (26.3)
焦慮/抑鬱改善無變化惡化	5 (31.3) 8 (50.0) 3 (18.8)	2 (9.5) 13 (61.9) 6 (28.6)	3 (16.7) 15 (83.3) 0	5 (26.3) 9 (47.4) 5 (26.3)	6 (31.6) 10 (52.6) 3 (15.8)
EQ VAS	5 (0, 8)	8 (0, 15)	0 (-5, 7)	0 (-10, 10)	5 (0, 10)

數據為CLDQ-NAFLD及EQ VAS之中值(Q1, Q3)變化。 CLDQ-NAFLD，慢性肝病問卷-非酒精性脂肪肝病；EQ-5D，EuroQol 5維，EQ VAS = EuroQol視覺模擬量表討論

於患有NASH及輕度至中度纖維化之患者之此隨機試驗中，利用司美魯肽與西洛菲索及/或弗可司他組合治療係良好耐受及與當與單獨司美魯肽相比時，如藉由MRI-PDFF及CAP所量測之肝脂肪變性、如藉由TE、FAST分數所量測之肝臟硬度及血清ALT及AST之改善相關聯。

包含司美魯肽、西洛菲索及/或弗可司他之組合之耐受性與司美魯肽單藥療法相似。最多不良事件為輕度至中度嚴重度，由於不良事件之治療停藥係罕見，及僅兩名患者具有嚴重不良事件。最頻繁不良事件為胃腸，特定言之，噁心、腹瀉、便秘及食慾減少。由於不良事件之停藥及胃腸事件之比率利用組合與利用單獨司美魯肽相比不增加。瘙癢(與NASH及FXR促效劑療法二者相關聯之不良事件)之發生率[Patel等人，Hepatology. 2020;72(1):58-71；Younossi等人，Hepatol Commun. 2020;4(11):1637-1650]係低的，於65名經西洛菲索治療之患者之僅5名中發生(7.7%)。瘙癢事件係輕度及無一者導致治療之停藥。

利用FXR促效劑及ACC抑制劑二者之治療與包含LDL膽固醇及甘油三酯之血清脂質之相應增加相關聯[Loomba等人，Gastroenterology. 2018;155(5):1463-1473；Younossi等人，Lancet. 2019;394(10215):2184-2196；Patel等人，Hepatology. 2020;72(1):58-71；Loomba等人，Hepatology. 2020 Nov 10. doi: 10.1002/hep.31622]。先前研究已顯示，ACC抑制劑相關之高甘油三酯血症於具有預先存在之血脂異常之患者中最大及可經由使用貝特(fibrate)及/或魚油緩和[Loomba等人，Gastroenterology. 2018;155(5):1463-1473；Loomba等人，Hepatology. 2020年11月10日. doi: 10.1002/hep.31622]。相比之下，利用司美魯肽治療觀察到血清脂質之改善[Newsome. Lancet Gastroenterol Hepatol. 2020年4月；5(4):362-373]。總膽固醇、LDL膽固醇及甘油三酯利用司美魯肽單藥療法減少。此等益處一般利用添加西洛菲索及/或弗可司他至司美魯肽中降低。與來自先前研究之數據相比，弗可司他相關之高甘油三酯血症藉由添加司美魯肽而相對緩和[Loomba等人，Gastroenterology. 2018;155(5):1463-1473；Loomba等人，Hepatology. 2020年11月10日. doi: 10.1002/hep.31622]。

與司美魯肽單藥療法相比，包含西洛菲索及/或弗可司他之組合導致藉由MRI-PDFF及CAP評估之肝脂肪變性之更大減少。早在開始治療後12週時觀察到此等有益效應。鑑於直至向前第17週未達到司美魯肽之2.4 mg目標劑量，可期望以長期治療，肝脂肪變性之進一步減少，如於先前安慰劑對照之試驗中於患有NAFLD之67名患者中利用司美魯肽單藥療法在24與48週之間所觀察到[Flint等人，2020]。此外，與司美魯肽相比，更多利用組合治療之患者達成≥30%及≥50%之MRI-PDFF減少。於治療24週後，86%利用組合治療之患者具有≥30%之MRI-PDFF改善及40%具有肝臟脂肪之標準化(＜5%)。此等改善在NASH試驗報告之最大者中及具有與組織學反應(包括NASH解決及纖維化改善)之增加之可能性相關聯之量級[Loomba等人，Hepatology. 2020c;72(4):1219-1229；Loomba等人，J Hepatol 2020d;73:S56 (AS077)；Stine等人，Clin Gastroenterol Hepatol. 2020:S1542-3565(20)31220-9]。

所有組合與肝臟生物化學之改善相關聯，該等改善與利用司美魯肽單藥療法觀察到之彼等相似或更大。於所有組合組中觀察到ALT之更大減少，及ALT之標準化於86%至100%之跨此等組之患者中發生。約60%至70%患者在第24週具有ALT之≥17 U/L減少(數據未顯示)，與組織學改善相關聯之臨限值[Loomba等人，Hepatology. 2020c;72(4):1219-1229]。此外，觀察到CK-18 M30 (肝細胞凋亡之生物標誌物)以及CRP (發炎之生物標誌物)自基線之減少。

雖然壞死性發炎活動為NASH中之纖維化進展之關鍵驅動子，但是纖維化為肝臟相關致病率及死亡率之主要決定因素[Angulo等人，Gastroenterology. 2015;149(2):389-97.e10；Sanyal等人，Hepatology. 2019;70(6):1913-1927]。利用單獨司美魯肽及於與西洛菲索及弗可司他之組合中觀察到對纖維化之多個NIT之有益效果。例如，ELF改善跨所有組相似及範圍自0.42至0.59單位。相似地，於所有組中觀察到藉由TE之肝臟硬度改善，於經弗可司他治療之患者中具有朝向更大減少之趨勢。此外，組合組中之更高比例之患者具有≥25%之肝臟硬度相對減少。雖然該試驗缺少抗纖維化效應之組織學驗證之肝臟活組織檢查，但是此等量級之ELF及肝臟硬度之變化與患有由於NASH之晚期纖維化之患者之疾病進展之減少速率相關聯[Sanayl等人2019; Harrison等人2020]。此外，吾人觀察到FAST分數，藉由TE之肝臟硬度及CAP及血清AST之組合於組合組中相對於單獨司美魯肽之顯著更大降低[Newsome等人，Hepatol. 2020年4月；5(4):362-373；Boursier等人，J Hepatol 2020; 73: AS075]。基於FAST用於識別具有纖維化(≥F2)及活性壞死性發炎活動(NAS≥4)之NASH患者中之效用，此等發現結果增加對此等組合療法之潛力之支持。

利用單獨司美魯肽及與西洛菲索及/或弗可司他組合治療亦導致代謝參數(包括體重及血糖控制)之改善。體重於所有組中下降，其中跨組7%至9.6%之體重損失%。此量級之體重損失與NASH之組織學改善相關聯[Vilar-Gomez Gastroenterology. 2015;149(2):367-78.e5]。跨組之相似體重損失指示，利用組合之肝臟脂肪、FAST、ALT及AST之更大減少不藉由利用西洛菲索及/或弗可司他之另外體重減少介導，及支持FXR促效及ACC抑制與利用司美魯肽之GLP-1受體促效之互補性。於此試驗中觀察到之體重變化與於2型糖尿病及肥胖中關於司美魯肽之先前觀察結果一致[Sorli等人，Lancet Diabetes Endocrinol. 2017;5(4):251-260；O’Neil等人，Lancet. 2018;392(10148):637-649]。於司美魯肽於NASH中之2期試驗中，於利用最高劑量之司美魯肽(0.4 mg每日一次)之72週療法後觀察到13%之平均體重損失[Newsome等人，Lancet Gastroenterol Hepatol. 2020年4月；5(4):362-373]，其類似於目前試驗中利用之2.4 mg每週目標劑量。基於此等數據，將期望利用長期司美魯肽療法之另外體重損失，尤其考慮到直至試驗之第17週未達到司美魯肽之目標劑量。所有組經歷血糖參數，包括空腹血糖及HbA_1c 之改善，後者在患有2型糖尿病之患者中範圍自-1.2至-1.7%。總之，於此2期試驗中，司美魯肽與西洛菲索及/或弗可司他組合於具有由於NASH之輕度至中度纖維化之患者中良好耐受。組合治療導致肝脂肪變性、肝臟生物化學及若干代謝及肝生物標誌物(包括纖維化之NIT)較單獨利用司美魯肽達成者更大的改善。實例 2 ：評價西洛菲索及弗可司他之固定劑量組合於患有 NASH 之個體中之臨床研究 A. 研究設計之概觀

此為2期隨機雙盲雙啞安慰劑對照之研究，其評價司美魯肽(SEMA)、西洛菲索/弗可司他(CILO/FIR)及其組合於具有由於NASH之代償性肝硬化之個體中之功效及安全性。將滿足研究之進入標準之個體以3:3:3:2比率隨機分配至3個活性治療組(SEMA + CILO/FIR，單獨SEMA，單獨CILO/FIR)中之1者或安慰劑匹配(PTM)，如圖10中所示。隨機分組藉由如由醫學史確定或若先前未經診斷，則基於篩選實驗室值(即，HbA1c ≥6.5%或空腹血糖≥126 mg/dL，基於重複測試證實)之2型糖尿病之存在或不存在及藉由增強型肝纖維化(ELF)分數(在篩選期間≥11.30或＜11.30)分層。個體經治療72週。總研究持續時間為至多85週，包含至多8週篩選，72週治療期及5週隨訪期。B. 個體群體

此研究將招募具有由於NASH之代償肝硬化之約440名個體。在研究結束之前停藥之個體不經替換。個體必須滿足有資格參與此研究之所有下列納入標準。納入標準 1.介於18至80歲(含)之間之男性及女性，基於篩選訪問日 2.由於NASH之肝硬化(F4)，如由下列中之一者所定義： a)於篩選之180天內之歷史肝臟活組織檢查，根據中心病理學家之意見，其係可評價及符合肝硬化(F4)及NASH (經定義為根據NAS存在脂肪變性≥ 1級，肝細胞腫脹等級≥ 1及小葉發炎≥ 1級) 或 b)於不具有有資格歷史肝臟活組織檢查之個體中，若在篩選時FibroScan ≥ 9.9 kPa，則可進行篩選肝臟活組織檢查。根據中心病理學家之意見，篩選肝臟活組織檢查必須係可評價及滿足如納入標準3a中所指定之組織學標準)。或 c)於具有在篩選之前超過180天完成之歷史肝臟活組織檢查之個體中，其符合肝硬化(F4)及NASH，如由本地讀者所確定，可進行篩選肝臟活組織檢查。根據中心病理學家之意見，篩選肝臟活組織檢查必須係可評價及滿足如納入標準3a中所指定之組織學標準)。 3.在篩選訪問時下列實驗室參數，如由中心實驗室所測定： a)估計腎小球過濾速率(eGFR) ≥ 30 mL/min/1.73 m² ，如由腎病之飲食修改(MDRD)方程式計算以估計肌酸酐清除率(CLcr) b) HbA1c ≤ 10% (或若HbA1c不可定量，則血清果糖胺≤ 400 μmol/L) c)血紅素＞ 10.6 g/dL d)除非由於治療性抗凝，否則INR ≤ 1.4 e)總膽紅素≤ 1.3 x ULN (除非由於替代病因學，諸如吉爾伯特氏症候群或溶血性貧血) f)血小板計數≥ 125,000/μL g)血清甘油三酯含量≤ 250 mg/dL。若起始篩選值係＞250 mg/dL，則可在篩選期期間再測試甘油三酯。在第1天之前空腹血清甘油三酯必須證實係≤ 250 mg/dL。高甘油三酯血症之管理可在篩選期期間在研究者裁量下開始或修改。 h)ALT ＜ 5 X ULN 4.在篩選時BMI ≥ 23 kg/m² 排除標準

滿足下列排除標準中之任一者之個體不具有招募進入於此研究中之資格： 1.根據研究者之意見，任何代償失調肝臟疾病，包括臨床相關腹水、肝性腦病(HE)或靜脈曲張出血之歷史， 2.除非由於替代病因學(諸如吉爾伯特氏症候群或治療性抗凝)，否則在篩選時Child-Pugh (CP)分數＞ 6 3.除非由於替代病因學(諸如治療性抗凝)，否則在篩選時末期肝臟疾病模型(MELD)分數＞12 4.慢性HBV感染(HbsAg陽性) 5.慢性HCV感染(HCV抗體及HCV RNA陽性)。在篩選訪問之前少於2年治癒HCV感染之個體係沒有資格。 6.基於醫療史及/或肝臟組織學之中心病理學家審查之肝臟疾病之其他原因，包括(但不限於)：酒精性肝病、自體免疫性病症(例如，PBC、PSC、自體免疫性肝炎)、藥物誘導之肝毒性、威爾森氏病、臨床顯著鐵超載或α-1-抗胰蛋白酶缺陷 7.肝臟移植史； 8. HCC之目前或先前史 9. HIV感染 10.於篩選之180天內體重損失＞10%，或在用於資格之活組織檢查日與篩選日之間＞5% 11.在篩選之前之2年內之任何減重手術或程序或在篩選之前之任何時間之吸收不良型體重損失手術(例如，Roux-en-Y或遠側胃旁路) 12.可導致研究藥物之吸收不良之腸切除史 13.根據研究者之意見，包括下列中之任一者之計劃之冠狀動脈、頸動脈或外周動脈介入或不穩定心血管疾病： a)於篩選之前之180天內不穩定心絞痛、心肌梗塞、冠狀動脈旁路移植手術或冠狀血管成形術 b)於篩選之前之180天內短暫缺血性發作或腦血管意外 c)症狀性心臟瓣膜病或肥厚型心肌病 d)症狀性充血性心臟衰竭 e)未控制或復發室性心動過速或需要自動可植入心臟複律去顫器之心律不整。允許穩定控制之心房顫動。 f)於篩選之前之180天內針對確診之心血管疾病之急診室訪問或住院 14.於篩選之前之180天內，根據研究者之意見之未經控制之慢性肺病(例如，慢性阻塞性肺病、間質性肺病)史 15.習慣飲用大於21個單位/週之酒精之男性或習慣飲用大於14個單位/週之酒精之女性(一個單位等於12 oz/360 mL啤酒、4 oz/120 mL葡萄酒或1 oz/30 mL烈酒) 16.除非由於處方藥物(例如，氧可酮(oxycodone)、哌醋甲酯)，否則在篩選時針對安非他明(amphetamine)、可卡因或鴉片劑(例如，海洛因、嗎啡)之陽性尿液藥物篩選及由研究者審查處方及診斷及批准。在篩選之前接受穩定美沙酮(methadone)或丁丙諾啡(buprenorphine)維持治療持續至少180天之個體可包含於該研究中 17.在招募之前使用任何禁止的合併用藥 a)在歷史或篩選肝臟活組織檢查之前，處於維生素E方案≥ 800 IU/天或吡格列酮(pioglitazone)之個體根據研究者之意見必須處於穩定劑量至少180天 b)在歷史或篩選肝臟活組織檢查之前，服用抗糖尿病藥物之個體根據研究者之意見必須處於穩定劑量至少90天 18.於篩選之5年內之惡性腫瘤史，具有下列例外： a)經適當治療之子宮頸原位癌 b)經適當治療之基底或鱗狀細胞癌或其他局部非黑色素瘤皮膚癌 19.針對在篩選訪問日之前或基於篩選訪問結果(HbA1c ≥6.5%或空腹血糖≥ 126 mg/dL，基於重複測試證實)診斷患有2型糖尿病之個體，個體必須不具有未控制及潛在不穩定視網膜病或黃斑病之證據，如由在篩選訪問日之前之起始90天至第1天進行之眼底檢查所確定。若自歷史眼底檢查根據研究者之意見，存在個體之視覺功能之惡化，則必須在第1天之前重複眼底檢查用於有資格。除非使用特定用於非擴張檢查之數位眼底攝影術，否則需要藥理學瞳孔擴張 20.在篩選訪問日之前之180天時間內急性胰炎 21.慢性胰炎之歷史或存在 22. 1型糖尿病之存在或歷史 23.多發性內分泌腺瘤2型或髓樣甲狀腺癌之個人或一度親屬史 24.自篩選訪問之前之90天及自歷史定量肝臟活組織檢查(若適用)日之前之90天之時間內利用GLP-1 RA (包含司美魯肽)治療C. 藥物產品 司美魯肽

注射用司美魯肽溶液具有以上表1中所示之組成。注射用司美魯肽溶液為無色或幾乎無色液體，無渾濁及基本上無粒子物質。針對司美魯肽之PDS290筆式注射器(FlexTouch®)為集成填充有司美魯肽3.0 mg/mL之3 mL筆芯之撥一劑預填充裝置。該筆式注射器可以1之增量自1至80劑步長遞送劑量。使用者可上下撥動以調整劑量。西洛菲索及弗可司他

西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑係呈固定劑量組合錠劑提供，如本文中所述。D. 劑量及投與

個體每週約相同時間利用PDS290筆式注射器經皮下服用司美魯肽。個體每天約相同時間服用西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑(若適用)，隨食物或不隨食物，用水整體吞下。應指導服用伴隨酸還原劑(包括H2-受體拮抗劑)之個體隨食物服用西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑。

研究藥物給藥及投與係如下，基於如圖10中所概述之治療組隨機分組：治療組 A ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽3.0 mg/mL及每日一次經口投與一片西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑，均不考慮食物治療組 B ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與司美魯肽3.0 mg/mL及每日一次經口投與一片PTM 西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑，均不考慮食物治療組 C ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與PTM司美魯肽3.0 mg/mL及每日一次經口投與一片西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑，均不考慮食物治療組 D ：每週一次利用預填充筆式注射器經皮下投與PTM司美魯肽3.0 mg/mL及每日一次經口投與一片PTM西洛菲索/弗可司他30 mg/20 mg錠劑，均不考慮食物。

於隨機分組後，司美魯肽以如預填充筆式注射器之劑量計數器上所示之8之起始值(0.24 mg)開始持續前4週(4個劑量)，及隨後該值每4週增加。司美魯肽劑量遞增量表示於表8中。表 8. 司美魯肽劑量遞增時程表

產品	劑量 (mg)	體積 (µL)	持續時間
司美魯肽3.0 mg/mL	0.24	80	第1天*上至第4週
司美魯肽3.0 mg/mL	0.50	170	第4週上至第8週
司美魯肽3.0 mg/mL	1.0	340	第8週上至第12週
司美魯肽3.0 mg/mL	1.7	570	第12週上至第16週
司美魯肽3.0 mg/mL	2.4	800	第16週上至第72週

*個體在第1天現場服用第一劑研究藥物。

若由於GI AE或如由研究者所判斷之其他原因，個體不耐受計劃之4週劑量遞增方案，則該個體可在任何劑量水平停留更長時間。E. 評估 臨床實驗室分析物

評價下列化學分析物：丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、白蛋白、鹼性磷酸酶(ALP)、碳酸氫鹽、血尿素氮(BUN)、鈣、氯化物、肌酸酐(對血清酶肌酸酐之反射，若適用)、乳酸脫氫酶、鎂、磷、鉀、鈉、總及直接膽紅素、總蛋白質、尿酸及γ-麩胺醯基轉移酶(GGT)。

評價下列血糖小組：胰島素、胰島素抗性之穩態模型評估(基於空腹血糖及胰島素之HOMA-IR)及C-肽。

評價下列脂質小組：藉由Friedewald計算之甘油三酯、總膽固醇、高密度脂質(HDL)、非HDL、低密度脂質(LDL)及極低密度脂質(VLDL)。

另外測試包括HbA1c (對血清果糖胺之反射，若適用)、HIV-1 (對HIV-1 RNA之反射)、HBV (HBsAg)、HCV (對HCV RNA之反射)血清學、胰島素抗性之穩態模型評估(HOMA-IR，基於空腹血糖及胰島素)、如藉由MDRD計算之eGFR、尿液藥物篩選(針對安非他明、可卡因、鴉片)、血清妊娠測試、血清促卵泡激素(FSH)測試、反射直接LDL (若甘油三酯係＞ 400 mg/dL)、CK及視情況可選的基因組測試；生物標誌物測試包括(但不限於) C-反應性蛋白、NMR LipoProfile®、ELF、CK18 M30、CK18 M65、ProC3、CTXIII、總血清膽酸、阿樸脂蛋白及潛在地，肝基因及蛋白質之含量；針對微量白蛋白、肌酸酐、微量白蛋白/肌酸酐比率之尿液樣品；在篩選時，針對安非他明、可卡因、美沙酮及鴉片劑；尿液妊娠測試(對血清β人類絨膜促性腺激素之反射)及儲存用於將來生物標誌物測試

針對藥物動力學評估，收集單一PK血漿樣品及存檔用於西洛菲索及弗可司他(及其代謝物，若適用)之PK分析。在第4週(15分鐘至3小時給藥後)、第24週(任何時間)、第48週(給藥前)、第60週(給藥後15分鐘至3小時)及第72週(給藥前)收集樣品。針對在第4、48、60及72週之PK採樣，應提醒個體不服用其口服研究藥物直至在其臨床訪問時建議服用。

針對患有2型糖尿病(自醫學史或自篩選，血紅素A1c≥6.5%)之個體，在篩選時進行眼底檢查。眼底檢查需要兩個瞳孔之藥理學擴張或使用特定用於非擴張檢查之數位眼底攝影術。臨床肝臟評估

MELD及CP分數係源自在各訪問時獲得之中心實驗室值。MELD係使用下列公式計算： MELD分數= 10 * ([0.378 * ln(總膽紅素mg/dL)] + [1.12 * ln(INR)] + [0.957 * ln(血清肌酸酐mg/dL)] + 0.643)

Child–Pugh (CP)分數係用於評估慢性肝病，主要肝硬化之預後。肌酸酐清除率 /eGFR

估計腎小球過濾速率(eGFR)藉由肌酸酐清除率測定，其藉由腎病之飲食修改(MDRD)研究方程式計算： eGFR (mL/min/1.73 m²) = 175 ×血清肌酸酐^-1.154 × (年齡)^-0.203 × (若非裔美國人，則1.212) × (若女性，則0.742)。

在應用該公式之前，將以µmol/L之血清肌酸酐圓整至零位小數及藉由乘以0.01131轉換成mg/dL。在應用公式之前，將以mg/dL之肌酸酐圓整至2位小數。FibroScan®

藉由瞬時彈性成像(FibroScan®)量測肝臟硬度。在篩選訪問第24、48及72週時進行FibroScan檢查及評估中值肝臟硬度(單位千帕(kPa))、四份位距/中值(IQR/M)、及成功率(有效拍攝數/拍攝總數)。在適用之情況下，自FibroScan®檢查記錄中值CAP及CAP之四分位距值。肝臟活組織檢查

當可確保纖維化及其他組織學參數之精確分期時，應獲取長度至少2.0 cm之肝臟活組織檢查樣品。若篩選或第72週肝臟活組織檢查由中心病理學家視作不可評價時，可將其重複。第72週肝臟活組織檢查結果對研究者及個體係盲的。超音波

在篩選訪問時進行肝細胞癌(HCC)監視之腹部超音波，雖然於篩選訪問之90天內之歷史超音波係可接受。應在第24、48及72週時再次進行腹部超音波，及可在研究者之裁量下在ET訪問時進行。ECG

在篩選時及在第168天(第24週)訪問時進行標準12-導聯心電圖(ECG)評估。研究者針對任何臨床上顯著異常審查ECG以確保個體安全性。

此外，可使用標準問卷評估患者報告之結果量度。患者亦可接受生活方式諮詢及關於遵守研究程序之諮詢。F. 終點

此研究之主要目標為評價司美魯肽與西洛菲索/弗可司他之組合是否引起具有由於NASH之代償性肝硬化之個體之纖維化改善及NASH解決。

此研究之次要目標係如下： ● 藉由與利用單獨西洛菲索/弗可司他治療之個體相比證實司美魯肽對利用司美魯肽與西洛菲索/弗可司他之組合治療之個體之NASH解決的貢獻； ● 藉由與利用單獨司美魯肽治療之個體相比證實西洛菲索/弗可司他對利用司美魯肽與西洛菲索/弗可司他之組合治療之個體之纖維化改善的貢獻。

此研究之探索性目標係如下： ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他及其組合於具有由於NASH之代償性肝硬化之個體中之安全性及耐受性； ● 評價司美魯肽與西洛菲索/弗可司他之組合是否引起纖維化改善及NASH解決； ● 評價司美魯肽或西洛菲索/弗可司他單獨是否引起纖維化改善及/或NASH解決； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合是否引起肝脂肪變性、肝細胞腫脹及/或小葉發炎之改善，如由非酒精性脂肪肝病(NAFLD)活動分數(NAS)所量測； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合是否引起NASH之組織學參數(包括纖維化及壞死性發炎活動)之改善，如由機器學習方法所量測； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合是否導致纖維化之非侵入性標誌物(包括藉由FibroScan量測之肝臟硬度及ELF測試分數)之改善； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合是否引起藉由CAP藉由FibroScan量測之肝臟脂肪變性之改善； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合是否導致肝臟損傷及功能之標誌物(包括ALT、AST、膽紅素及GGT)之改善； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他及其組合對心血管疾病之代謝參數及風險因素，包括胰島素抗性、高脂血、肥胖及血壓之影響； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他及其組合對患者報告之結果量度(PRO)之影響； ● 評價司美魯肽、西洛菲索/弗可司他及其組合於具有由於NASH值代償性肝硬化之個體中之藥物動力學。

共同主要終點為： ● 在第72週於司美魯肽+西洛菲索/弗可司他相對於安慰劑組中之≥ 1階段之纖維化改善(根據NASH CRN分類)而無NASH之惡化(經定義為肝細胞腫脹或小葉發炎之≥ 1點增加)； ● 在第72週於司美魯肽+西洛菲索/弗可司他相對於安慰劑組中之NASH解決(經定義為0或1之小葉發炎及0之肝細胞腫脹)。

此研究之次要終點係如下： ● 在第72週於司美魯肽+西洛菲索/弗可司他相對於利用單獨司美魯肽治療之個體中之NASH解決； ● 在第72週於司美魯肽+西洛菲索/弗可司他相對於利用單獨司美魯肽治療之個體中之≥ 1階段之纖維化改善(根據NASH CRN分類)而無NASH之惡化。

受關注之探索性終點係如下： ● 在第72週於利用司美魯肽或西洛菲索/弗可司他相對於安慰劑治療之個體中之NASH解決； ● 在第72週於利用司美魯肽或西洛菲索/弗可司他相對於安慰劑治療之個體中≥1階段之纖維化改善而無NASH之惡化； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之NASH解決及≥1階段之纖維化改善； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之NAS及脂肪變性、小葉發炎、肝細胞腫脹及其他組織學特徵之個別分量自基線之變化； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之NASH之組織學參數(包括纖維化及壞死性發炎活動，如藉由機器學習方法所量測)自基線之變化； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之肝臟硬度自基線之變化，如由FibroScan所量測； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之ELF測試分數自基線之變化； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之藉由CAP藉由FibroScan量測之肝臟脂肪變性自基線之變化； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之心血管疾病之代謝參數及風險因素(包括胰島素抗性、高脂血、肥胖及血壓)自基線之變化； ● 在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之脂質參數(包括總膽固醇、LDL及空腹甘油三酯)自基線之變化； ●在第72週於利用司美魯肽、西洛菲索/弗可司他或其組合相對於安慰劑治療之個體中之PRO自基線之變化。

在各採樣時間按劑量組提供生物標誌物表現之描述性統計及自基線之變化。可計算點估計及95%信賴區間。亦可進行探索性分析以評價個別探索性生物標誌物或生物標誌物之組合之關聯。

除非另有指定，否則本文中所用之所有技術及科學術語具有與本發明從屬之一般技術者通常所理解相同之含義。

因此，應瞭解，雖然本發明已藉由較佳實施例及視情況可選的特徵特定揭示，但是本文中所揭示之其中所實施之對本發明之修改、改善及變化可訴諸於熟習此項技術者，及認為此等修改、改善及變化於本發明之範圍內。本文中所提供之材料、方法及實例代表較佳實施例，係示例性，且不意在限制本發明之範圍。

應瞭解，雖然已結合以上實施例描述本發明，但是上述描述及實例意在說明而不限制本發明之範圍。本發明之範圍內之其他態樣、優點及修改將對熟習本發明從屬之技術者顯然。

圖 1 顯示司美魯肽之結構。

圖 2 為概述實例1中所述之臨床研究中之不同治療組之圖表。

圖 3 顯示試驗設計，其中CAP意指受控衰減參數；LS為肝臟硬度；MRE為磁共振彈性成像；MRI-PDFF為磁共振成像質子密度脂肪分數；SEMA為司美魯肽；QW為每週一次；及VCTE為振動控制之瞬時彈性成像。

圖 4 顯示實例1研究中招募之個體之試驗概況。

圖 5A 至 C 顯示藉由MRI-PDFF評估之肝脂肪變性自基線至第24週之變化。LS_平均值變化係基於針對基線及糖尿病狀態調整之ANCOVA模型。ANCOVA為協方差分析。CI為信賴區間。LS_平均值為最小二乘平均值。MRI-PDFF為磁共振成像質子密度脂肪分數。圖 5A 顯示肝脂肪變性之絕對變化。圖 5B 顯示具有≥30%及50%之MRI-PDFF相對減少之患者之比例。圖 5C 顯示具有肝脂肪標準化(＜5%)及≥5%之MRI-PDFF絕對減少之患者之比例。

圖 6A 至 C 顯示敏感性分析，其顯示藉由患者之磁共振成像質子密度脂肪分數之肝脂肪變性自基線至第24週之變化，其中於試驗藥物之最後一次劑量後之30天內收集成像數據。圖 6A 顯示自基線之絕對變化。圖 6B 顯示具有≥30%及50%之MRI-PDFF相對減少之患者之比例。圖 6C 顯示具有肝脂肪標準化(＜5%)及≥5%之MRI-PDFF絕對減少之患者之比例。

圖 7 顯示藉由受控衰減參數量測之肝脂肪變性自基線至第24週之變化。

圖 8A 至 D 顯示丙胺酸轉胺酶(圖 10A )、天冬胺酸轉胺酶(圖 10B )、藉由瞬時彈性成像(圖 10C )及FibroScan-AST (FAST)分數(圖 10D )之肝臟硬度自基線至第24週之變化。

圖 9 顯示藉由瞬時彈性成像具有≥25%之肝臟硬度相對減少之患者之比例。

圖 10 為概述實例2中所述之臨床研究中之不同治療組之圖表。

Claims

一種治療非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向有需要此治療之患有NASH之個體投與： a)以每週一次0.1至3 mg之劑量之司美魯肽(semaglutide)；及 b)以每日一次15至25 mg之劑量之弗可司他(firsocostat)。
如請求項1之方法，其中該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之劑量投與司美魯肽。
如請求項2之方法，其中該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與司美魯肽。
如請求項1至3中任一項之方法，其中該方法包括以每週一次0.24 mg之劑量投與司美魯肽持續四週，接著以每週一次0.50 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.0 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.7 mg之劑量持續四週，接著以每週一次2.4 mg之劑量持續至少四週。
如請求項1至4中任一項之方法，其中司美魯肽係經皮下注射投與。
如請求項1至5中任一項之方法，其中該方法包括以每日一次20 mg之劑量投與弗可司他。
如請求項1至6中任一項之方法，其中弗可司他係經口投與。
如請求項1至7中任一項之方法，其中該方法進一步包括以每日一次20至120 mg之劑量投與西洛菲索(cilofexor)。
如請求項8之方法，其中該方法包括以每日一次30 mg之劑量投與西洛菲索。
如請求項9之方法，其中該方法包括投與30 mg之劑量之西洛菲索及20 mg之劑量之弗可司他。
如請求項8之方法，其中該方法包括以每日一次100 mg之劑量投與西洛菲索。
如請求項11之方法，其中該方法包括投與以100 mg之劑量之西洛菲索及以20 mg之劑量之弗可司他。
如請求項8至12中任一項之方法，其中該西洛菲索係經口投與。
如請求項8至12中任一項之方法，其中該西洛菲索及弗可司他呈組合固體劑型提供。
如前述請求項中任一項之方法，其中該方法包括治療該個體持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體在治療之前顯示纖維化之徵兆。
如前述請求項中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有＜0.75之FibroTest®分數。
如前述請求項中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有≥ 10%脂肪變性。
如請求項18之方法，其中脂肪變性係藉由MRI-PDFF測定。
如前述請求項中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有肝臟硬度≥7 kPa。
如請求項20之方法，其中肝臟硬度係藉由FibroScan®測定。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體在治療之前經診斷患有NASH。
如前述請求項中任一項之方法，其中在治療之前，該個體使用肝臟活組織檢查經診斷患有NASH。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體患有2型糖尿病。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體在治療之前在基線時間點時具有下列實驗室參數中之一或多者： a)丙胺酸轉胺酶(ALT)含量≤5x正常值上限(ULN)； b)估計腎小球過濾速率(eGFR) ≥30 mL/min； c) HbA1c ≤9.5%； d)血清果糖胺≤381 µmol； e) INR ≤1.2； f)血小板計數≥100,000/µL； g)總膽紅素＜1.3x正常值上限(ULN)；及/或 h)降血鈣素≤100 ng/L。
如請求項25之方法，其中eGFR係藉由MDRD研究方程式計算。
如前述請求項中任一項之方法，其中eGFR於治療後與在治療之前在基線時間點時之eGFR相比提高至少20 mL/min持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如前述請求項中任一項之方法，其中脂肪變性於治療後與在治療之前在基線時間點時之脂肪變性相比減少至少5%、至少10%或至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項28之方法，其中脂肪變性係藉由MRI-PDFF或來自FibroScan®之CAP分數量測。
如請求項29之方法，其中相對MRI-PDFF中值於治療後與在治療之前在基線時間點時之MRI-PDFF相比減少至少30%、至少40%或至少50%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如前述請求項中任一項之方法，其中肝臟硬度於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝臟硬度相比減少至少25%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週。
如請求項31之方法，其中肝臟硬度係藉由MRE或FibroScan®量測。
如前述請求項中任一項之方法，其中選自丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)之至少一個實驗室參數於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週。
如請求項33之方法，其中：於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週， a) ALT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L； b) AST減少至少10 U/L或至少20 U/L； c) GGT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L；及/或 d) ALP減少至少5 U/L或至少10 U/L。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體之肝纖維化於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝纖維化相比減少至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項35之方法，其中肝纖維化係使用增強型肝纖維化(ELF)測試分數或FibroTest®測試分數測定。
如請求項36之方法，其中肝纖維化係使用ELF測試分數測定，及該ELF測試分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之ELF測試分數相比減少至少0.3、至少0.4或至少0.5持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體之甘油三酯含量、LDL膽固醇含量、總膽固醇含量、HbA_1c 、空腹血糖含量、空腹胰島素含量及/或HOMA-IR於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自含量相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體之體重於治療後與在治療之前在基線時間點時之個體之體重相比減少至少5%持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如前述請求項中任一項之方法，其中該個體之FAST分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之FAST分數相比減少至少0.1、至少0.2或至少0.3持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
一種治療非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向有需要此治療之患有之NASH之個體投與： a)以每週一次0.1至3 mg之劑量之司美魯肽；及 b)以每日一次20至120 mg之劑量之西洛菲索。
如請求項41之方法，其中該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之劑量投與司美魯肽。
如請求項42之方法，其中該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與司美魯肽。
如請求項41至43中任一項之方法，其中該方法包括以每週一次0.24 mg之劑量投與司美魯肽持續四週，接著以每週一次0.50 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.0 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.7 mg之劑量持續四週，接著以每週一次2.4 mg之劑量持續至少四週。
如請求項41至44中任一項之方法，其中司美魯肽係藉由皮下注射投與。
如請求項41至45中任一項之方法，其中該方法包括以每日一次30 mg之劑量投與西洛菲索。
如請求項41至45中任一項之方法，其中該方法包括以每日一次100 mg之劑量投與西洛菲索。
如請求項41至47中任一項之方法，其中西洛菲索係經口投與。
如請求項41至48中任一項之方法，其中該方法包括治療該個體持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項41至49中任一項之方法，其中該個體在治療之前顯示纖維化之徵兆。
如請求項41至50中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有＜0.75之FibroTest®分數。
如請求項41至51中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有≥10%脂肪變性。
如請求項52之方法，其中脂肪變性係藉由MRI-PDFF測定。
如請求項41至53中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有肝臟硬度≥7 kPa。
如請求項54之方法，其中肝臟硬度係藉由FibroScan®測定。
如請求項41至55中任一項之方法，其中該個體在治療之前經診斷患有NASH。
如請求項41至56中任一項之方法，其中在治療之前，該個體使用肝臟活組織檢查經診斷患有NASH。
如請求項41至57中任一項之方法，其中該個體患有2型糖尿病。
如請求項41至58中任一項之方法，其中該個體在治療之前在基線時間點時具有下列實驗室參數中之一或多者： a)丙胺酸轉胺酶(ALT)含量≤5x正常值上限(ULN)； b)估計腎小球過濾速率(eGFR) ≥30 mL/min； c) HbA1c ≤ 9.5%； d)血清果糖胺≤381 µmol； e) INR ≤1.2； f)血小板計數≥100,000/µL； g)總膽紅素＜1.3x正常值上限(ULN)；及/或 h)降血鈣素≤100 ng/L。
如請求項59之方法，其中eGFR係藉由MDRD研究方程式計算。
如請求項41至60中任一項之方法，其中eGFR於治療後與在治療之前在基線時間點時之eGFR相比提高至少20 mL/min持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項41至61中任一項之方法，其中脂肪變性於治療後與在治療之前在基線時間點時之脂肪變性相比減少至少5%、至少10%或至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項62之方法，其中脂肪變性係藉由MRI-PDFF或來自FibroScan®之CAP分數量測。
如請求項63之方法，其中相對MRI-PDFF中值於治療後與在治療之前在基線時間點時之MRI-PDFF相比減少至少30%、至少40%或至少50%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項41至64中任一項之方法，其中肝臟硬度於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝臟硬度相比減少至少25%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項65之方法，其中肝臟硬度係藉由MRE或FibroScan®量測。
如請求項41至66中任一項之方法，其中選自丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)之至少一個實驗室參數於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週或更久。
如請求項67之方法，其中：於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週， a) ALT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L； b) AST減少至少10 U/L或至少20 U/L； c) GGT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L；及/或 d) ALP減少至少5 U/L或至少10 U/L。
如請求項41至68中任一項之方法，其中該個體之肝纖維化於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝纖維化相比減少至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項69之方法，其中肝纖維化係使用增強型肝纖維化(ELF)測試分數或FibroTest®測試分數測定。
如請求項70之方法，其中肝纖維化係使用ELF測試分數測定，及該ELF測試分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之ELF測試分數相比減少至少0.3、至少0.4或至少0.5持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項41至71中任一項之方法，其中該個體之甘油三酯含量、LDL膽固醇含量、總膽固醇含量、HbA_1c 、空腹血糖含量、空腹胰島素含量及/或HOMA-IR於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自含量相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項41至72中任一項之方法，其中該個體之體重於治療後與在治療之前在基線時間點時之個體之體重相比減少至少5%持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項41至73中任一項之方法，其中該個體之FAST分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之FAST分數相比減少至少0.1、至少0.2或至少0.3持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
一種治療非酒精性脂肪肝炎(NASH)之方法，其包括向有需要此治療之患有NASH之個體投與： a)以每週一次0.1至3 mg之劑量之司美魯肽； b)以每日一次20 mg之劑量之弗可司他；及 c)以每日一次30 mg之劑量之西洛菲索。
如請求項75之方法，其中該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之劑量投與司美魯肽。
如請求項76之方法，其中該方法包括以每週一次0.24至2.4 mg之遞增劑量投與司美魯肽。
如請求項77之方法，其中該方法包括以每週一次0.24 mg之劑量投與司美魯肽持續四週，接著以每週一次0.50 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.0 mg之劑量持續四週，接著以每週一次1.7 mg之劑量持續四週，接著以每週一次2.4 mg之劑量持續至少四週。
如請求項75至78中任一項之方法，其中司美魯肽係藉由皮下注射投與。
如請求項75至79中任一項之方法，其中弗可司他係經口投與。
如請求項75至80中任一項之方法，其中西洛菲索係經口投與。
如請求項75至81中任一項之方法，其中西洛菲索及弗可司他係呈組合固體劑型提供。
如請求項75至82中任一項之方法，其中該方法包括治療該個體持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項75至83中任一項之方法，其中該個體在治療之前顯示纖維化之徵兆。
如請求項75至84中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有＜0.75之FibroTest®分數。
如請求項75至85中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有≥10%脂肪變性。
如請求項86之方法，其中脂肪變性係藉由MRI-PDFF測定。
如請求項75至87中任一項之方法，其中在治療之前，該個體具有肝臟硬度≥9.9 kPa。
如請求項88之方法，其中肝臟硬度係藉由FibroScan®測定。
如請求項75至89中任一項之方法，其中該個體在治療之前經診斷患有NASH。
如請求項75至90中任一項之方法，其中在治療之前，該個體使用肝臟活組織檢查經診斷患有NASH。
如請求項75至91中任一項之方法，其中在治療之前，該個體使用肝臟活組織檢查經診斷患有肝硬化(F4)及NASH。
如請求項92之方法，其中NASH經定義為根據NAS，脂肪變性等級≥1，肝細胞腫脹等級≥1，及小葉發炎等級≥1之存在。
如請求項75至93中任一項之方法，其中該個體患有2型糖尿病。
如請求項75至94中任一項之方法，其中該個體在治療之前在基線時間點時具有下列實驗室參數中之一或多者： a)丙胺酸轉胺酶(ALT)含量≤5x正常值上限(ULN)； b)估計腎小球過濾速率(eGFR) ≥30 mL/min； c) HbA1c ≤10%； d)血清果糖胺≤400 µmol； e) INR ≤1.4； f)血小板計數≥125,000/µL； g)總膽紅素＜1.3x正常值上限(ULN)；及/或 h)血清甘油三酯含量≤250 mg/dL。
如請求項95之方法，其中eGFR係藉由MDRD研究方程式計算。
如請求項75至96中任一項之方法，其中eGFR於治療後與在治療之前在基線時間點時之eGFR相比提高至少20 mL/min持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項75至97中任一項之方法，其中脂肪變性於治療後與在治療之前在基線時間點時之脂肪變性相比減少至少5%、至少10%或至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項98之方法，其中脂肪變性係藉由MRI-PDFF或來自FibroScan®之CAP分數量測。
如請求項99之方法，其中相對MRI-PDFF中值於治療後與在治療之前在基線時間點時之MRI-PDFF相比減少至少30%、至少40%或至少50%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項75至100中任一項之方法，其中肝臟硬度於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝臟硬度相比減少至少25%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週。
如請求項101之方法，其中肝臟硬度係藉由MRE或FibroScan®量測。
如請求項75至102中任一項之方法，其中選自丙胺酸轉胺酶(ALT)、天冬胺酸轉胺酶(AST)、膽紅素、γ-麩胺醯基轉肽酶(GGT)及鹼性磷酸酶(ALP)之至少一個實驗室參數於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週。
如請求項103之方法，其中：於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自實驗室參數相比持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週， a) ALT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L； b) AST減少至少10 U/L或至少20 U/L； c) GGT減少至少10 U/L、至少20 U/L或至少30 U/L；及/或 d) ALP減少至少5 U/L或至少10 U/L。
如請求項75至104中任一項之方法，其中該個體之肝纖維化於治療後與在治療之前在基線時間點時之肝纖維化相比減少至少20%持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項105之方法，其中肝纖維化係使用增強型肝纖維化(ELF)測試分數或FibroTest®測試分數測定。
如請求項106之方法，其中肝纖維化係使用ELF測試分數測定，及該ELF測試分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之ELF測試分數相比減少至少0.3、至少0.4或至少0.5持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項75至107中任一項之方法，其中該個體之甘油三酯含量、LDL膽固醇含量、總膽固醇含量、HbA_1c 、空腹血糖含量、空腹胰島素含量及/或HOMA-IR於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自測試分數相比減少持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、或至少96週。
如請求項75至108中任一項之方法，其中該個體之體重於治療後與在治療之前在基線時間點時之各自測試分數相比減少至少5%持續至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。
如請求項75至109中任一項之方法，其中該個體之FAST分數於治療後與在治療之前在基線時間點時之FAST分數相比減少至少0.1、至少0.2或至少0.3持續至少10週、至少12週、至少16週、至少20週、至少24週、至少36週、至少48週、至少60週、至少72週、至少84週、至少96週或更久。