TW202140472A - 作為激酶抑制劑的多環化合物 - Google Patents

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Abstract

本發明提供了一類作為激酶抑制劑的多環化合物。具體地，本發明提供了如下式(I)所示結構的化合物(各基團定義如說明書中所述)、含有式(I)化合物的藥物組合物及所述化合物，以及這些化合物的同位素衍生物，手性異構體，不同的鹽，前藥，製劑等等。其能夠有效抑制包括CDK和/或TRK在內的多種激酶，從而起到治療各種腫瘤等相關多種疾病的作用。

Description

作為激酶抑制劑的多環化合物
本發明涉及藥物化學領域；具體地說，本發明涉及一類新型含有三環雜芳基的衍生物，其合成方法及其作為一種包括CDK和/或TRK在內的多種激酶抑制劑在製備藥物用於治療腫瘤等相關多種疾病中的應用。
癌症亦稱惡性腫瘤，是世界上發病率和死亡率最高的疾病之一，其特點是細胞異常增殖及轉移，在發病後短時間內或相對短時間內擴散，轉移。傳統的治療方案包括手術治療(如果符合切除條件)、放療、化療。近年來發展起來的靶向治療法，有降低毒性和負作用，及提高生存率等優點。但在使用靶向藥物一段時間後又會產生抗藥性，之後癌細胞的生長擴散就會異常迅猛。常見的癌症有：血癌、肺癌、乳腺癌、肝癌、膀胱癌、直腸癌、胃癌等。
細胞週期的調控主要受一系列絲胺酸/蘇胺酸激酶的影響，這類絲胺酸/蘇胺酸激酶又被稱作細胞週期蛋白依賴性激酶(Cyclin-dependent kinase, CDK)，它們通過與其相對應的調節亞基週期素(cyclins)相結合，推動細胞週期的進行、遺傳訊息的轉錄和細胞的正常分裂增殖。人的CDK家族有20多種亞型，根據不同的功能主要分為兩大類：一類CDK調控細胞週期，如CDK2/4/6等；一類CDK參與轉錄調控/RNA加工，如CDK7/9等。CDK激酶結合到細胞週期素蛋白上，形成特定的複合體，從而被激活。在許多人類癌症中，CDK過度活躍或抑制CDK的蛋白質不起作用，導致癌細胞的異常增殖分裂。因此，CDK成為抗腫瘤藥物的重要靶標。
CDK2和CDK4/6是細胞週期的關鍵調節因子。在細胞靜息狀態（G0期）下，轉錄因子E2F的轉錄活性被視網膜母細胞瘤蛋白（Rb）抑制。當細胞接受分裂訊號刺激時，細胞進入G1期。在G1期，細胞週期素D（CyclinD）結合並激活CDK4/6，激活的CDK4/6磷酸化Rb，導致E2F的激活。此時E2F保持和Rb蛋白的結合，但是可以轉錄CCNE1、CCNA2、CCNB1和CDK2等蛋白。在G1期後期（限制點之後），CyclinE結合並激活CDK2，CDK2進一步磷酸化Rb，導致Rb徹底釋放和激活E2F，E2F接下來誘導CyclinA和CyclinE等S期蛋白的轉錄。CDK2/CyclinA和CDK1等維持Rb蛋白的磷酸化，確保細胞分裂的進程。CDK2/CyclinA輔助S/G2期的轉換過程。因此，抑制CDK2和CDK4/6的激酶活性，可以阻滯細胞週期的進程，達到抑制腫瘤增殖的目的。CDK4/6抑制劑Palbociclib、Ribociclib、Abemaciclib已獲批上市，目前尚無有效的CDK2抑制劑。CDK9主要調控RNA轉錄過程，CDK9和相對應的Cyclin形成正向轉錄延長因子複合體-b（P-TEFb）。大部分的CDK9結合CyclinT1，只有少量CDK9結合CyclinT2a、CyclinT2b和CyclinK。CDK9是P-TEF複合體中的催化亞基，可以磷酸化RNA聚合酶II的C末端結構域，促進多種癌基因的RNA轉錄延長過程，如MYC和MCL-1等。MYC和MCL-1在多種癌症種類中都有明顯的異常過表達，但是目前尚沒有有效的靶向抑制劑。另外，在細胞複製壓力下，CDK9/CyclinK複合體對維持基因組穩定性也起著重要的作用。CDK9的過表達和多種血液瘤、肺癌，肝癌、乳腺癌、結腸癌、膀胱癌和腦瘤等密切相關。在人免疫缺陷型病毒（HIV）的複製中，CDK9也起著重要的作用。CDK9/CyclinT1磷酸化RNA聚合酶II，促進聚合酶和HIV關鍵蛋白Tat激活結構域的相互作用，刺激HIV-1的轉錄過程。因此，抑制CDK9的催化活性可以抑制MYC等癌基因的轉錄，控制癌細胞的生長和存活，以及控制HIV病毒的複製等。
CDK16在人的多種細胞和組織類型中都有表達，表達最高的組織是腦部和睾丸。CDK16的激活依賴CyclinY。敲除CDK16不會影響小鼠的正常生長，但是會導致雄性小鼠不育，說明CDK16對精子生成起著很重要的作用。CDK16的過表達可以促進多種癌細胞，如肺癌和肝癌等的生長和侵襲，這種作用可能和CDK16下調腫瘤抑制因子p27有關。
CDK5是CDK家族中一個比較特殊的蛋白，儘管蛋白序列和其他CDK成員有很多相似性，但是CDK5的主要功能依賴於非Cyclin蛋白，如p35和p39等。CDK5在人的很多組織中都有表達，但它的激活因子p35和p39等大部分表達在神經元中，所以它的功能主要集中在神經系統中。通過磷酸化多種神經元蛋白，如Tau、Axin、CRMP2和Neurofilament等，CDK5可以調控多種神經元的生理功能，如神經元遷移、軸突生長、神經突觸形成、記憶形成和疼痛感知等。在神經退化性患者的神經元中，CDK5更穩定地結合p35的剪切體p25，發生異常激活，導致神經細胞的退化和死亡。此外，CDK5在免疫響應、血管生成、細胞週期調控、DNA損傷應答、細胞衰老和凋亡等方面也發揮著一定的作用。因此，CDK5逐漸成為抗神經退化性疾病和癌症等的重要靶標。
神經營養因子受體激酶（NeuroTrophin Receptor Kinase，NTRK）家族包含TRKA、TRKB和TRKC，它們分別由NTRK1、NTRK2和NTRK3基因編碼，通常在神經組織中表達。TRK受體可以被多種神經營養因子激活，其中NGF主要激活TRKA，BDNF和NT-4/5主要激活TRKB，BT-3因子主要激活TRKC。TRK結合相應的配體後，會發生二聚化、磷酸化，進而激活下游的PI3K/AKT、RAS/RAF/MEK和PLC-gamma等訊號通路，促進細胞增殖和存活。
NTRK基因融合突變被證明與多種癌症相關，基因融合使得NTRK基因(主要是NTRK1和NTRK3)與其他的基因融合在一起，繼而轉錄，翻譯為持續性激活的TRK蛋白，驅動TRK融合突變的腫瘤細胞的生長和增殖。NTRK融合突變概率約占成人癌症總數的0.31%和青少年癌症總數的0.34%，NTRK3的融合突變在一些罕見腫瘤，如分泌性乳腺癌、纖維肉瘤、唾液腺癌等比較常見，NTRK1突變主要存在於肺腺癌，結腸癌等常見的癌症種類中，突變發生率比較低。另外，NGF-TRKA訊號通路的過度激活在炎症性疼痛和癌痛的發病機制中也起著重要的作用。
綜上所述，開發新型、針對不同亞型的CDK、TRK等激酶抑制劑具有重要的意義。
因此，本發明提供一類新型的激酶抑制劑，所述的抑制劑可以用於CDK、TRKA等多種激酶的抑制。
本發明的第一方面，提供了一種如下式(I)所示結構的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物：
Figure 02_image001
(I)
“*”表示手性中心；
X為氫、氘、鹵素、C1-4 烷基、OR1 、NR1 R2 、或NR1 C(O)R3 ；
各個R各自獨立為氫或C1-4 烷基；或當兩個R同時連接到同一個碳原子上時，這兩個R與其相連的碳原子可以任選共同形成羰基(C=O)；
G為NRf 、O、S、S(O)、S(O)2 或CRg Rg ；
p為0、1、2、或3；
m和n各自獨立為0、1、2、或3；前提條件是m和n不能同時為0；
R1 和R2 各自獨立為氫或C1-4 烷基；
R3 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、或C2-4 炔基；
Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、氰基取代C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 、S(O)2 R4 、或S(O)2 NR1 R2 ；
各個Rg 各自獨立地選自下組：氫、鹵素、或C1-4 烷基；或兩個Rg 與其相連的碳原子共同形成羰基(C=O)；或兩個Rg 與其連接的碳原子一起形成3-至8-員環狀結構，此環狀結構任選地含有0、1或2個選自N、O、S的雜原子；
R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、或雜芳基；
其中，各個上述的烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地且各自獨立地被1-3個各自獨立地選自下組的取代基取代：鹵素、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、3-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、CN、NO2 、OR1 、SR1 、NR1 R2 、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 、NR1 C(O)R4 、或S(O)2 R4 ，前提條件是所形成的化學結構是穩定的和有意義的；其中，R1 、R2 、R4 的定義如上所述；
除非特別說明，上述的芳基為含有6-12個碳原子的芳香基團；雜芳基為5-至15-員雜芳香基團；環狀結構為飽和的或不飽和的、含雜原子或不含雜原子的環狀基團。
在另一優選例中，“*”表示手性中心；
X為氫、氘、鹵素、C1-4 烷基、OR1 、NR1 R2 、或NR1 C(O)R3 ；
各個R各自獨立為氫或C1-4 烷基；或當兩個R同時連接到同一個碳原子上時，這兩個R與其相連的碳原子可以任選共同形成羰基(C=O)；
G為NRf 、O、S、S(O)、S(O)2 或CRg Rg ；
p為0、1、2、或3；
m和n各自獨立為1、2、或3；
R1 和R2 各自獨立為氫或C1-4 烷基；
R3 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、或C2-4 炔基；
Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 ，或S(O)2 R4 ；
各個Rg 各自獨立地選自下組：氫、鹵素、或C1-4 烷基；或兩個Rg 與其相連的碳原子共同形成羰基(C=O)；或兩個Rg 與其連接的碳原子一起形成3-至8-員環狀結構，此環狀結構任選地含有0、1或2個選自N、O、S的雜原子；
R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、或雜芳基；
其中，各個上述的烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地且各自獨立地被1-3個各自獨立地選自下組的取代基取代：鹵素、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、3-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、CN、NO2 、OR1 、SR1 、NR1 R2 、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 、NR1 C(O)R4 、或S(O)2 R4 ，前提條件是所形成的化學結構是穩定的和有意義的；其中，R1 、R2 、R4 的定義如上所述；
除非特別說明，上述的芳基為含有6-12個碳原子的芳香基團；雜芳基為5-至15-員雜芳香基團；環狀結構為飽和的或不飽和的、含雜原子或不含雜原子的環狀基團。
在另一優選例中，所述的4-至8-員雜環基為4-至6-員雜環基。
在另一優選例中，式(I)為：
Figure 02_image003
Figure 02_image005
(II)                        (III)
“*”表示手性中心；
X、R、G、p、m、和n的定義如本發明第一方面中所述。
在另一優選例中，X為氫、鹵素、C1-4 烷基；R為氫，或兩個R與其相連的碳原子共同形成羰基(C=O)。
在另一優選例中，G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基。
在另一優選例中，所述的
Figure 02_image007
為4或6員環。
在另一優選例中，式(I)為：
Figure 02_image009
（IV）
“*”表示手性中心；
X為氫、鹵素、C1-4 烷基；
G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基。
在另一優選例中，式(I)為：
Figure 02_image011
（V）
“*”表示手性中心；
X為氫、鹵素、C1-4 烷基；
G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基。
在另一優選例中，Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、氰基取代C1-4 烷基、C3-8 環烷基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基。
在另一優選例中，各個Rg 各自獨立為氫或鹵素。
在另一優選例中，式（IV）中：
“*”表示手性中心；
X為氫、氟、或甲基；
G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、甲基、乙基、CH2 CF3 、CH2 CN、環丙烷基、C(O)CH3 、或S(O)2 CH3 ；各個Rg 各自獨立為氫或氟。
在另一優選例中，所述的式(I)化合物選自下組：
Figure 02_image013
Figure 02_image015
Figure 02_image017
Figure 02_image019
Figure 02_image021
本發明的第二方面，提供了一種如本發明第一方面所述的化合物、或其光學異構體、藥學上可接受的鹽、前藥、氘代形式、水合物、溶劑合物的用途，用於：
(a) 製備治療與激酶活性或表達量相關的疾病的藥物；
(b) 製備激酶靶向抑制劑；和/或
(c) 體外非治療性地抑制激酶的活性；
其中，所述的激酶選自下組：CDK和/或TRK。
本發明的第三方面，提供了一種如本發明第一方面所述的化合物、或其光學異構體、藥學上可接受的鹽及前藥、氘代形式、水合物、溶劑合物的用途，作為激酶抑制劑，或用於治療與激酶高表達相關的疾病；其中，所述的激酶選自下組：CDK和/或TRK。
本發明的第四方面，提供了一種藥物組合物，所述的藥物組合物包括：(i) 有效量的如本發明第一方面所述的式I化合物、或其光學異構體，藥學上可接受的鹽、前藥、氘代形式、水合物、溶劑合物；和(ii) 藥學上可接受的載體。
本發明的第五方面，提供了一種抑制激酶活性的方法，所述方法包括步驟：對抑制對象施用抑制有效量的如本發明第一方面所述的式I化合物、或其光學異構體、藥學上可接受的鹽、前藥、氘代形式、水合物、溶劑合物、或對抑制對象施用抑制有效量的如本發明第八方面所述的藥物組合物；其中，所述的激酶選自下組：CDK和/或TRK。
本發明的第六方面，提供了一種如本發明第一方面所述化合物的製備方法，該方法包括步驟：
Figure 02_image023
在惰性溶劑中，用式Ia化合物與式Ib化合物反應，得到式I化合物。
在另一優選例中，所述的方法還包括步驟：
Figure 02_image025
(1) 在惰性溶劑中，用式1-A3化合物進行脫保護，得到式1-A3-a化合物；
(2) 在惰性溶劑中，用式1-A3-a化合物與式1-A3-b化合物進行還原胺化反應，得到式1-A4化合物；
(3) 在惰性溶劑中，用式1-A4化合物進行還原反應，得到式Ia化合物。
應理解，在本發明範圍內中，本發明的上述各技術特徵和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特徵之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限於篇幅，在此不再一一累述。
本發明人經過長期而深入的研究，意外地發現了一類結構新穎的作為激酶抑制劑的多環化合物，以及它們的製備方法和應用。本發明化合物可以應用於與包括CDK、TRK等在內的多種激酶活性相關的各種疾病的治療。基於上述發現，發明人完成了本發明。
術語
除特別說明之處，本文中提到的“或”具有與“和/或”相同的意義(指“或”以及“和”)。
除特別說明之處，本發明的所有化合物之中，各手性碳原子(手性中心)可以任選地為R構型或S構型，或R構型和S構型的混合物。
如本文所用，在單獨或作為其他取代基一部分時，術語“烷基”指只含碳原子的直鏈(即，無支鏈)或支鏈飽和烴基，或直鏈和支鏈組合的基團。當烷基前具有碳原子數限定(如C1-10 )時，指所述的烷基含有1-10個碳原子。例如，C1-8 烷基指含有1-8個碳原子的烷基，包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、或類似基團。
如本文所用，在單獨或作為其他取代基一部分時，術語“烯基”是指直鏈或支鏈，具有至少一個碳-碳雙鍵的碳鏈基團。烯基可以是取代的或未取代的。當烯基前具有碳原子數限定(如C2-8 )時，指所述的烯基含有2-8個碳原子。例如，C2-8 烯基指含有2-8個碳原子烯基，包括乙烯基、丙烯基、1,2-丁烯基、2,3-丁烯基、丁二烯基、或類似基團。
如本文所用，在單獨或作為其他取代基一部分時，術語“炔基”是指具有至少一個碳-碳三鍵的脂肪族碳氫基團。所述的炔基可以是直鏈或支鏈的，或其組合。當炔基前具有碳原子數限定(如C2-8 炔基)時，指所述的炔基含有2-8個碳原子。例如，術語“C2-8 炔基”指具有2-8個碳原子的直鏈或支鏈炔基，包括乙炔基、丙炔基、異丙炔基、丁炔基、異丁炔基、第二丁炔基、第三丁炔基、或類似基團。
如本文所用，在單獨或作為其他取代基一部分時，術語“環烷基”指具有飽和的或部分飽和的單環，二環或多環(稠環、橋環或螺環)環系基團。當某個環烷基前具有碳原子數限定(如C3-10 )時，指所述的環烷基含有3-10個碳原子。在一些優選實施例中，術語“C3-8 環烷基”指具有3-8個碳原子的飽和或部分飽和的單環或二環烷基，包括環丙基、環丁基、環戊基、環庚基、或類似基團。“螺環烷基”指單環之間共用一個碳原子(稱螺原子)的二環或多環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。“稠環烷基”指系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對碳原子的全碳二環或多環基團，其中一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。“橋環烷基”指任意兩個環共用兩個不直接連接的碳原子的全碳多環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統。所述環烷基所含原子全部為碳原子。如下是環烷基的一些例子，本發明並不僅局限下述的環烷基。
Figure 02_image027
除非有相反陳述，否則下列用在說明書和申請專利範圍中的術語具有下述含義。“芳基”指具有共軛的π電子體系的全碳單環或稠合多環(也就是共享毗鄰碳原子對的環)基團，例如苯基和萘基。所述芳基環可以稠合於其它環狀基團(包括飽和和不飽和環)，但不能含有雜原子如氮、氧或硫，同時連接母體的點必須在具有共軛的π電子體系的環上的碳原子上。芳基可以是取代的或未取代的。如下是芳基的一些例子，本發明並不僅局限下述的芳基。
Figure 02_image029
“雜芳基”指包含一個到多個雜原子（任選自氮、氧和硫）的具有芳香性的單環或多環基團，或者包含雜環基（含一個到多個雜原子任選自氮、氧和硫）與芳基稠合形成的多環基團，且連接位點位於芳基上。雜芳基可以是任選取代的或未取代的。如下是雜芳基的一些例子，本發明並不僅局限下述的雜芳基。
Figure 02_image031
“雜環基”指飽和或部分不飽和單環或多環環狀烴取代基，其中一個或多個環原子選自氮、氧或硫，其餘環原子為碳。單環雜環基的非限制性實施例包含吡咯烷基、哌啶基、哌𠯤基、嗎啉基、硫代嗎啉基、升哌𠯤基。多環雜環基指包括螺環、稠環和橋環的雜環基。“螺環雜環基”指系統中的每個環與體系中的其他環之間共用一個原子(稱螺原子)的多環雜環基團，其中一個或多個環原子選自氮、氧或硫，其餘環原子為碳。“稠環雜環基”指系統中的每個環與體系中的其他環共享毗鄰的一對原子的多環雜環基團，一個或多個環可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，而且其中一個或多個環原子選自氮、氧或硫，其餘環原子為碳。“橋環雜環基”指任意兩個環共用兩個不直接連接的原子的多環雜環基團，這些可以含有一個或多個雙鍵，但沒有一個環具有完全共軛的π電子系統，而且其中一個或多個環原子選自氮、氧或硫，其餘環原子為碳。如果雜環基裡同時有飽和環和芳環存在(比如說飽和環和芳環稠合在一起)，連接到母體的點一定是在飽和的環上。注：當連接到母體的點在芳環上時，稱為雜芳基，不稱為雜環基。如下是雜環基的一些例子，本發明並不僅局限下述的雜環基。
Figure 02_image033
如本文所用，在單獨或作為其他取代基一部分時，術語“鹵素”指F、Cl、Br和I。
如本文所用，術語“取代”(在有或無“任意地”修飾時)指特定的基團上的一個或多個氫原子被特定的取代基所取代。特定的取代基為在前文中相應描述的取代基，或各實施例中所出現的取代基。除非特別說明，某個任意取代的基團可以在該基團的任何可取代的位點上具有一個選自特定組的取代基，所述的取代基在各個位置上可以是相同或不同的。環狀取代基，例如雜環基，可以與另一個環相連，例如環烷基，從而形成螺二環系，即兩個環具有一個共用碳原子。本領域技術人員應理解，本發明所預期的取代基的組合是那些穩定的或化學上可實現的組合。所述取代基例如(但並不限於)：C1-8 烷基、C2-8 烯基、C2-8 炔基、C3-8 環烷基、3-至12-員雜環基，芳基、雜芳基、鹵素、羥基、羧基(-COOH)、C1-8 醛基、C2-10 醯基、C2-10 酯基、胺基。
為了方便以及符合常規理解，術語“任意取代”或“任選取代”只適用於能夠被取代基所取代的位點，而不包括那些化學上不能實現的取代。
如本文所用，除非特別說明，術語“藥學上可接受的鹽”指適合與對象(例如，人)的組織接觸，而不會產生不適度的副作用的鹽。在一些實施例中，本發明的某一化合物的藥學上可接受的鹽包括具有酸性基團的本發明的化合物的鹽(例如：鉀鹽、鈉鹽、鎂鹽、鈣鹽)或具有鹼性基團的本發明的化合物的鹽(例如：硫酸鹽、鹽酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、碳酸鹽)。
用途：
本發明提供了一類式(I)的化合物，或它們的氘代形式、它們的鹽、異構體(對映異構體或非對映異構體，如果存在的情況下)、水合物、可藥用載體或賦形劑用於抑制激酶活性的用途，其中，所述的激酶包括但並不限於CDK和/或TRK。
本發明化合物可用作激酶抑制劑，優選地，所述的激酶為CDK和/或TRK。
在癌症病人體內，上述所提到的各種蛋白激酶的表達或活性都明顯增高。這些過度表達和/或異常的蛋白激酶活性水平與腫瘤的發生發展直接關聯。本發明化合物是這些蛋白激酶的單一和/或雙重抑制劑。通過調節這些蛋白激酶活性得到預防、緩解或治癒疾病。所指疾病包括過敏性哮喘、骨髓纖維化、類風濕性關節炎、炎症性疼痛、癌痛、愛滋病、孢疹病毒和流感病毒等DNA和RNA病毒感染、B細胞淋巴瘤、單核細胞白血病、脾大性紅細胞增多、嗜酸性白細胞增多綜合症、原發性血小板減少症、系統性巨細胞疾病、分泌性乳腺癌、纖維肉瘤、唾液腺癌、肝癌、直腸癌、膀胱癌、咽喉癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、肺鱗癌、乳腺癌、前列腺癌、神經膠質細胞瘤、卵巢癌、頭頸部鱗癌、子宮頸癌、食管癌、腎癌、胰腺癌、結腸癌、皮膚癌、淋巴瘤、胃癌、腦瘤、肺癌、多發性骨髓癌等各種血液瘤和實體瘤，以及阿茲海默症和帕金森等神經退化性疾病。
從某種角度上說，多靶點激酶抑制劑同時干擾幾種不同的激酶，所產生的抗腫瘤效果往往具有疊加性，因此具有更有效治療各種癌症的潛力。
本發明化合物可與其它小分子藥物或生物製劑如PD-1抑制劑(如Opdivo® 和Keytruda® )作為組合藥物治療各種癌症及相關疾病。
可將本發明化合物及其氘代形式，以及藥學上可接受的鹽或其異構體(如果存在的情況下)或其水合物和/或組合物與藥學上可接受的賦形劑或載體配製在一起，得到的組合物可在給予人或動物，用於治療病症、症狀和疾病。組合物可以是：片劑、丸劑、混懸劑、溶液劑、乳劑、膠囊、氣霧劑、無菌注射液。無菌粉末等。一些實施例中，藥學上可接受的賦形劑包括微晶纖維素、乳糖、檸檬酸鈉、碳酸鈣、磷酸氫鈣、甘露醇、羥丙基-β-環糊精、β-環糊精(增加)、甘胺酸、崩解劑(如澱粉、交聯羧甲基纖維素鈉、複合矽酸鹽和高分子聚乙二醇)，造粒黏合劑(如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠和阿拉伯膠)和潤滑劑(如硬脂酸鎂、甘油和滑石粉)。在優選的實施方式中，所述藥物組合物是適於口服的劑型，包括但不限於片劑、溶液劑、混懸液、膠囊劑、顆粒劑、粉劑。向患者施用本發明化合物或藥物組合物的量不固定，通常按藥用有效量給藥。同時，實際給予的化合物的量可由醫師根據實際情況決定，包括治療的病症、選擇的給藥途徑、給予的實際化合物、患者的個體情況等。本發明化合物的劑量取決於治療的具體用途、給藥方式、患者狀態、醫師判斷。本發明化合物在藥物組合物中的比例或濃度取決於多種因素，包括劑量、理化性質、給藥途徑等。
應理解，在本發明範圍內中，本發明的上述各技術特徵和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特徵之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。
化合物的通用合成方法
本發明的式I化合物可以通過以下方法製備得到：
反應式 1:
Figure 02_image023
在惰性溶劑中，用(Ia)化合物與(Ib)反應，得到(I)化合物；
上述各式中，各基團的定義如上文中所述。各步驟的試劑和條件可以選用本領域進行該類製備方法常規的試劑或條件，在本發明的化合物結構公開後，上述選擇可以由本領域技術人員根據本領域知識進行。
更具體地，本發明通式I所示化合物可通過如下的方法製得，然而該方法的條件，例如反應物、溶劑、鹼、所用化合物的量、反應溫度、反應所需時間等不限於下面的解釋。本發明化合物還可以任選將在本說明書中描述的或本領域已知的各種合成方法組合起來而方便的製得，這樣的組合可由本發明所屬領域的技術人員容易地進行。
在本發明的製備方法中，各反應通常在惰性溶劑中，反應溫度通常為-20～150℃ (優選0～120℃)下進行。各步反應時間通常為0.5～48 h，較佳地為2～12 h。
化合物IIa 和IIIa 是化合物I 的一部分。反應式2 描述了化合物IIa 和IIIa 的通用合成方法：
反應式 2:
Figure 02_image036
上述反應式1 -2 中X、R、G、m、n、p的定義與本發明第一方面中表述相同。
中間體Ib 是根據Journal of Medicinal Chemistry, 2005, 2371-2387及裡面所引用的文獻來製備的。
藥物組合物和施用方法
由於本發明化合物具有優異的對一系列蛋白激酶的抑制活性，因此本發明化合物及其各種晶型，藥學上可接受的無機或有機鹽，水合物或溶劑合物，以及含有本發明化合物為主要活性成分的藥物組合物可用於治療、預防以及緩解與CDK、TRK等激酶活性或表達量相關的疾病。
本發明的藥物組合物包含安全有效量範圍內的本發明化合物或其藥理上可接受的鹽及藥理上可以接受的賦形劑或載體。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明顯改善病情，而不至於產生嚴重的副作用。通常，藥物組合物含有1-2000mg本發明化合物/劑，更佳地，含有5-200mg本發明化合物/劑。較佳地，所述的“一劑”為一個膠囊或藥片。
“藥學上可以接受的載體”指的是：一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物質，它們適合於人使用，而且必須有足夠的純度和足夠低的毒性。“相容性”在此指的是組合物中各組份能和本發明的化合物以及它們之間相互摻和，而不明顯降低化合物的藥效。藥學上可以接受的載體部分例子有纖維素及其衍生物(如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素鈉、纖維素乙酸酯等)、明膠、滑石、固體潤滑劑(如硬脂酸、硬脂酸鎂)、硫酸鈣、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄欖油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化劑(如吐溫®)、潤濕劑(如十二烷基硫酸鈉)、著色劑、調味劑、穩定劑、抗氧化劑、防腐劑、無熱原水等。
本發明化合物或藥物組合物的施用方式沒有特別限制，代表性的施用方式包括(但並不限於)：口服、瘤內、直腸、腸胃外(靜脈內、肌肉內或皮下)、和局部給藥。
用於口服給藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、散劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種常規惰性賦形劑(或載體)混合，如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，或與下述成分混合：(a) 填料或增容劑，例如，澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和矽酸；(b) 黏合劑，例如，羥甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯膠；(c) 保濕劑，例如，甘油；(d) 崩解劑，例如，瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯澱粉或木薯澱粉、藻酸、某些複合矽酸鹽、和碳酸鈉；(e) 緩溶劑，例如石蠟；(f) 吸收加速劑，例如，季胺化合物；(g) 潤濕劑，例如鯨蠟醇和單硬脂酸甘油酯；(h) 吸附劑，例如，高嶺土；和(i) 潤滑劑，例如，滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉，或其混合物。膠囊劑、片劑和丸劑中，劑型也可包含緩衝劑。
固體劑型如片劑、糖丸、膠囊劑、丸劑和顆粒劑可採用包衣和殼材製備，如腸衣和其它本領域公知的材料。它們可包含不透明劑，並且，這種組合物中活性化合物或化合物的釋放可以延遲的方式在消化道內的某一部分中釋放。可採用的包埋組分的實例是聚合物質和蠟類物質。必要時，活性化合物也可與上述賦形劑中的一種或多種形成微膠囊形式。
用於口服給藥的液體劑型包括藥學上可接受的乳液、溶液、懸浮液、糖漿或酊劑。除了活性化合物外，液體劑型可包含本領域中常規採用的惰性稀釋劑，如水或其它溶劑，增溶劑和乳化劑，例知，乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲醯胺以及油，特別是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油或這些物質的混合物等。
除了這些惰性稀釋劑外，組合物也可包含助劑，如潤濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、矯味劑和香料。
除了活性化合物外，懸浮液可包含懸浮劑，例如，乙氧基化異十八烷醇、聚氧乙烯山梨醇和脫水山梨醇酯、微晶纖維素、甲醇鋁和瓊脂或這些物質的混合物等。
用於腸胃外注射的組合物可包含生理上可接受的無菌含水或無水溶液、分散液、懸浮液或乳液，和用於重新溶解成無菌的可注射溶液或分散液的無菌粉末。適宜的含水和非水載體、稀釋劑、溶劑或賦形劑包括水、乙醇、多元醇及其適宜的混合物。
用於局部給藥的本發明化合物的劑型包括軟膏劑、散劑、貼劑、噴射劑和吸入劑。活性成分在無菌條件下與生理上可接受的載體及任何防腐劑、緩衝劑，或必要時可能需要的推進劑一起混合。
本發明化合物可以單獨給藥，或者與其他藥學上可接受的化合物聯合給藥。
使用藥物組合物時，是將安全有效量的本發明化合物適用於需要治療的人或動物，其中施用時劑量為藥學上認為的有效給藥劑量，對於60kg體重的人而言，日給藥劑量通常為1～2000mg，優選5～500mg。當然，具體劑量還應考慮給藥途徑、病人健康狀況等因素，這些都是熟練醫師技能範圍之內的。
本發明的主要優點包括：
1. 提供了一種如式I所示的化合物。
2. 提供了一種結構新穎的CDK、TRK（包括CDK2、CDK4、CDK5、CDK6、CDK9、CDK16和TRKA、TRKB、TRKC等）等激酶抑制劑及其製備和應用，所述的抑制劑在低濃度下即可抑制上述蛋白激酶的活性。
3. 提供了一類治療與CDK、TRK等激酶活性相關疾病的藥物組合物。
4. 提供了一種口服吸收良好的CDK、TRK等激酶抑制劑。
下面結合具體實施例，進一步闡述本發明。應理解，這些實施例僅用於說明本發明而不用於限制本發明的範圍。下列實施例中未注明具體條件的實驗方法，通常按照常規條件，或按照製造廠商所建議的條件。除非另外說明，否則百分比和份數按重量計算。
實施例 1: 化合物 1S 的製備
Figure 02_image038
將化合物1S-a （600 mg，2.21 mmol）溶於甲醇（20 mL）中，再加入四氫吡喃酮（1S-b ，265 mg，2.65 mmol）和三乙胺（224 mg，2.21 mmol）。該反應混合物在50℃下攪拌2小時。隨後在室溫下加入氰基硼氫化鈉（208 mg, 3.31 mmol）並攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓除去甲醇，然後加水（10 mL），再用二氯甲烷萃取（3 × 20 mL）。合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:乙酸乙酯 = 1:1）得黃色固體化合物1S-c （580 mg, 收率82 %）。MSm/z 320.4 [M+H]+ 。
室溫下向化合物1S-c (580 mg, 1.82 mmol)的甲醇（15 mL）溶液中加入鈀碳催化劑(10%, 70 mg)。該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 50:1）得到棕色固體化合物1S-d (460 mg, 收率88 %)。MSm/z 290.4 [M+H]+ 。
將化合物1S-d (200 mg, 0.69 mmol)和Ib (230 mg, 0.69 mmol)溶於甲苯（6 mL）中。該反應混合物在90℃下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。待反應液冷卻至室溫後，減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 80:1）得到黃色固體化合物1S (290 mg, 收率75%)。MSm/z 559.8 [M+H]+ 。
將化合物1S (290 mg, 0.52 mmol)溶於二氯甲烷（10 mL）中，冰浴下加入鹽酸甲醇溶液（4.0 M, 0.13 mL, 0.52 mmol）。該反應混合物在室溫下攪拌1小時後減壓濃縮除去溶劑。所得粗品加水（5 mL）後再凍乾得到黃色固體化合物1S 鹽酸鹽 (290 mg)。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.77 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.90-5.75 (m, 1H), 4.37 (dd,J = 10.9, 2.4 Hz, 1H), 4.17 (d,J = 13.2 Hz, 1H), 4.11-4.04 (m, 3H), 3.82-3.70 (m, 2H), 3.63-3.49 (m, 2H), 3.45 (t,J = 11.5 Hz, 2H), 3.29-3.22 (m, 1H), 3.20-3.06 (m, 1H), 2.96 (t,J = 11.8 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 2H), 2.18-2.10 (m, 2H), 2.01-1.76 (m, 6H), 1.67-1.53 (m, 2H) ppm。
實施例 2: 化合物 2S 的製備
Figure 02_image040
將化合物1S-a (500 mg, 1.84 mmol)、N -甲基哌啶酮（2S-a , 416 mg, 3.68 mmol）和2滴醋酸加入甲醇（15 mL）中並在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（231 mg, 3.68 mmol），反應混合物在室溫下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓除去甲醇，然後加水（10 mL），再用二氯甲烷萃取（3 × 20 mL）。合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 30:1）得到黃色固體化合物2S-b (500 mg)直接用於下一步反應。
室溫下向甲醇（15 mL）中加入化合物2S-b (500 mg, 1.50 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 70 mg)。該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到棕色固體化合物2S-c (280 mg, 收率62%)。
將化合物2S-c (280 mg, 0.93 mmol)和Ib (310 mg, 0.93 mmol)溶於甲苯（8 mL）中。該反應混合物在90℃下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。待反應液冷卻至室溫後，減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物2S (180 mg, 收率34%)。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.86 ( bs, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d,J = 2.1 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.91–5.70 (m, 1H), 4.23 (dd,J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 3.89 (dd,J = 10.5, 9.0 Hz, 1H), 3.69 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 3.0–2.88 (m, 3H), 2.79 (d,J = 11.2 Hz, 2H), 2.59–2.53 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.34–2.16 (m, 7H), 2.14 (s, 3H), 1.94–1.73 (m, 9H), 1.62–1.51 (m, 2H), 1.48–1.36 (m, 2H) ppm。MSm/z 572.6 [M+H]+ 。
將化合物2S (180 mg, 0.31 mmol)溶於二氯甲烷（10 mL）中，冰浴下加入鹽酸甲醇溶液（4.0 M, 0.08 mL, 0.32 mmol）。該反應混合物在室溫下攪拌1小時後減壓濃縮除去溶劑。所得粗品加水（5 mL）後再凍乾得到黃色固體化合物2S 鹽酸鹽 (185 mg)。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.79 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.05-6.97 (m, 2H), 5.92-5.80 (m, 1H), 4.42-4.35 (m, 1H), 4.19 (d,J = 13.0 Hz, 1H), 4.11-4.07 (m, 1H), 3.81-3.71 (m, 4H), 3.68-3.54 (m, 2H), 3.21-3.11 (m, 4H), 3.06-3.00 (m, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.58-2.50 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.32-2.23 (m, 2H), 2.22-2.11 (m, 2H), 1.98-1.77 (m, 4H), 1.67-1.56 (m, 2H) ppm。MSm/z 572.8 [M+H]+ 。
實施例 3: 化合物 2R 的製備
Figure 02_image042
將化合物2R-a (100 mg, 0.43 mmol)，N -甲基-4-哌啶酮（2S-a , 144 mg, 1.28 mmol）和2滴醋酸的甲醇（6 mL）混合液在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（80 mg, 1.28 mmol），反應混合物在室溫下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物2R-b (200 mg)直接用於下一步反應。MSm/z 333.5 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（6 mL）中加入化合物2R-b (200 mg, 0.60 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 80 mg)，該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液經減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色油狀化合物2R-c (93 mg, 兩步收率72%)。MSm/z 303.5 [M+H]+ 。
將化合物2R-c (50 mg, 0.17 mmol)和化合物Ib (55 mg, 0.17 mmol)的甲苯（1 mL）混合液置於封管中，加熱至100℃攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物2R (43 mg, 收率45%)。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 (bs, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.91-5.70 (m, 1H), 4.23 (dd,J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 3.89 (dd,J = 10.4, 9.1 Hz, 1H), 3.69 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 3.02-2.89 (m, 3H), 2.80 (d,J = 11.0 Hz, 2H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.34-2.15 (m, 7H), 2.14 (s, 3H), 1.95-1.68 (m, 9H), 1.63-1.52 (m, 2H), 1.48-1.36 (m, 2H) ppm。MSm/z 572.8 [M+H]+ 。
實施例 4: 化合物 3S 的製備
Figure 02_image044
將化合物1S-a （1 g, 4.25 mmol）溶於甲醇（20 mL）中，再加入N -第三丁氧羰基-4-哌啶酮（3S-a , 2.54 g, 12.75 mmol）和4滴醋酸。該反應混合物在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（801 mg, 12.75 mmol）反應混合物在室溫下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓除去甲醇，然後加入水（10 mL），再用二氯甲烷萃取（3 × 20 mL）。合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得黃色固體化合物3S-b （1.39 g, 收率78 %）。MSm/z 419.5 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（5 mL）中加入化合物3S-b (190 mg, 0.45 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 60 mg)。該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 40:1）得到黃色固體化合物3S-c (80 mg, 收率45 %)。MSm/z 389.5 [M+H]+ 。
將化合物3S-c (80 mg, 0.21 mmol)和Ib (69 mg, 0.21 mmol)溶於甲苯（1 mL）中。該反應混合物在90℃下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。待反應液冷卻至室溫後，減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 30:1）得到黃色固體化合物3S-d (30 mg, 收率22%)。MSm/z 658.8 [M+H]+ 。
將化合物3S-d (30 mg, 0.45 mmol)溶於甲醇（2 mL）中，冰浴下加入鹽酸二氧六環溶液（4.0 M, 1.1 mL, 4.4 mmol）。該反應混合物在室溫下攪拌1小時後減壓濃縮除去溶劑。向所得濃縮液中加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至7~8，再用二氯甲烷萃取（3 × 10 mL）。合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮。所得粗品經製備型薄板層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得黃色固體3S （13 mg, 收率51%）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.70 (s, 1H), 7.11 (bs, 1H), 7.11 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 6.97 (dd,J = 9.0, 2.5 Hz, 1H), 6.76 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.20 (dd,J = 10.0, 2.0 Hz, 1H), 4.03 (t,J = 10.0 Hz, 1H), 3.67 (d,J = 12.0 Hz, 1H), 3.22-3.10 (m, 3H), 3.03 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 2.89 (d,J = 10.5 Hz, 1H), 2.82-2.75 (m, 1H), 2.61 (t,J = 11.5 Hz, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.54-2.47 (m, 1H), 2.44-2.39 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 2H), 2.07 (t,J = 10.8 Hz, 1H), 1.99-1.89 (m, 2H), 1.86-1.79 (m, 4H), 1.67-1.56 (m, 2H), 1.49-1.38 (m, 2H) ppm。MSm/z 558.8 [M+H]+ 。
實施例 5: 化合物 4S 的製備
Figure 02_image046
將化合物3S-b (500 mg, 1.19 mmol)溶於甲醇（10 mL）中，冰浴下加入鹽酸二氧六環溶液（4.0 M, 3 mL, 12 mmol）。該反應混合物在室溫下攪拌1小時後減壓濃縮除去溶劑得到黃色粗品化合物4S-a (500 mg)。該粗品化合物直接用於下一步反應。MSm/z 319.5 [M+H]+ 。
將化合物4S-a (140 mg, 0.36 mmol)溶於甲醇（5 mL）中，再緩慢滴加DIPEA (0.2 mL, 1.32 mmol)和碘乙烷（137 mg, 0.88 mmol）。該反應混合液在50℃條件下反應過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色油狀化合物4S-b (56 mg, 收率45%)。MSm/z 347.5 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（3 mL）中加入化合物4S-b (56 mg, 0.16 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 30 mg)。該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物4S-c (36 mg, 收率70 %)。MSm/z 317.5 [M+H]+ 。
將化合物4S-c (36 mg, 0.11 mmol)和Ib (45 mg, 0.14 mmol)溶於甲苯（1 mL）中。該反應混合物在90℃下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。待反應液冷卻至室溫後，減壓濃縮。所得粗品經製備型薄板層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 30:1）得到黃色固體化合物4S (25 mg, 收率38%)。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.70 (s, 1H), 7.23 (bs, 1H), 7.11 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 6.95 (dd,J = 9.0, 2.5 Hz, 1H), 6.76 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.19 (dd,J = 10.5, 2.5 Hz, 1H), 4.02 (dd,J = 10.5, 9.5 Hz, 1H), 3.66 (d,J = 11.5 Hz, 1H), 3.17-3.10 (m, 1H), 3.07 (d,J = 10.5 Hz, 2H), 3.01 (d,J = 9.5 Hz, 1H), 2.86 (d,J = 10.0 Hz, 1H), 2.81-2.75 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.54-2.42 (m, 3H), 2.39-2.27 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.08 (t,J = 10.8 Hz, 1H), 2.05-1.75 (m, 8H), 1.70-1.56 (m, 4H), 1.13 (t,J = 7.0 Hz, 3H) ppm。MSm/z 586.8 [M+H]+ 。
實施例 6: 化合物 5S 的製備
Figure 02_image048
在0℃下向化合物4S-a (200 mg, 0.63 mmol)的二氯甲烷（5 mL）溶液中加入DIPEA (0.3 mL, 1.88 mmol)，接著緩慢滴加乙醯氯（98 mg，1.26 mmol）的二氯甲烷(1.0 mL)稀釋液。滴加完畢後，將反應液在室溫下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應液中加入水 (10 mL)，再用二氯甲烷 (3 x 10 mL)萃取。合併的有機相用飽和食鹽水（20 mL）洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 30:1）得到黃色固體化合物5S-a (170 mg, 收率92%)。MSm/z 361.5 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（3 mL）中加入化合物5S-a (170 mg, 0.47 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 60 mg)。該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物5S-b (130 mg, 收率83 %)。MSm/z 331.5 [M+H]+ 。
將化合物5S-b (65 mg, 0.20 mmol)和Ib (79 mg, 0.24 mmol)溶於甲苯（1 mL）中。該反應混合物在90℃下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。待反應液冷卻至室溫後，減壓濃縮。所得粗品經製備型薄板層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物5S (15 mg, 收率13%)。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.18 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.97 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 6.83 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 6.02-5.83 (m, 1H), 4.57 (d,J = 12.5 Hz, 1H), 4.25 (d,J = 10.0 Hz, 1H), 4.04-3.92 (m, 2H), 3.78 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 3.19-2.99 (m, 4H), 2.78-2.59 (m, 3H), 2.58-2.50 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.38-2.25 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.17-2.08 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.05-1.89 (m, 4H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.68-1.59 (m, 2H), 1.56-1.49 (m, 1H), 1.45-1.37 (m, 1H) ppm。MSm/z 600.8 [M+H]+ 。
實施例 7: 化合物 6S 的製備
Figure 02_image050
將化合物6S-a (250 mg, 1.06 mmol)，1-環丙基-4-哌啶酮（6S-b , 444 mg, 3.19 mmol）和2滴醋酸的甲醇（15 mL）混合液在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（200 mg, 3.19 mmol），反應混合物在室溫下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物6S-c (200 mg, 收率53%)。MSm/z 359.4 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（8 mL）中加入化合物6S-c (200 mg, 0.56 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 80 mg)，該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液經減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色油狀化合物6S-d (128 mg, 收率70%)。MSm/z 329.5 [M+H]+ 。
將化合物6S-d (88 mg, 0.27 mmol)和化合物Ib (89 mg, 0.27 mmol)的甲苯（1.5 mL）混合液置於封管中，加熱至100℃攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物6S (96 mg, 收率60%)。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 (bs, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.06 (d,J = 8.3 Hz, 1H), 6.81 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.91-5.76 (m, 1H), 4.22 (dd,J = 10.5, 2.2 Hz, 1H), 3.93-3.84 (m, 1H), 3.69 (d,J = 11.0 Hz, 1H), 3.04-2.78 (m, 5H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.37-2.06 (m, 6H), 2.29 (s, 3H), 1.95-1.83 (m, 3H), 1.81-1.68 (m, 4H), 1.61-1.52 (m, 3H), 1.41-1.27 (m, 2H), 0.43-0.34 (m, 2H), 0.32-0.21 (m, 2H) ppm。MSm/z 598.8 [M+H]+ 。
實施例 8: 化合物 7S 的製備
Figure 02_image052
將化合物6S-a (500 mg, 2.13 mmol)，1-Boc-3-氮雜環丁酮（7S-a , 1.09 g, 6.38 mmol）和4滴醋酸的甲醇（10 mL）混合液在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（400 mg, 6.38 mmol），反應混合物在室溫下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物7S-b (1.24 g)直接用於下一步反應。MSm/z 391.4 [M+H]+ 。
室溫下將化合物7S-b (1.24 g, 3.18 mmol)溶於甲醇（15 mL）中，再滴加HCl甲醇溶液（4.0 M, 4 mL）。該混合液在60℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮除去大部分甲醇，再加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH到7~8，再減壓濃縮除去水。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 10:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物7S-c (410 mg, 兩步收率66%)。MSm/z 291.3 [M+H]+ 。
將化合物7S-c (410 mg, 1.41 mmol)，多聚甲醛（127 mg, 4.24 mmol）和3滴醋酸的甲醇（8 mL）混合液在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（266 mg, 4.24 mmol），反應混合物在室溫下攪拌2小時。TLC監測反應還有部分原料剩餘，停止反應。將反應混合液過濾，濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到粗品黃色固體化合物7S-d (254 mg, 純度80%, 收率47%)直接用於下一步反應。MSm/z 305.3 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（3 mL）中加入化合物7S-d (100 mg, 0.28 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 80 mg)，該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液經減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物7S-e (47 mg, 收率51%)。MSm/z 275.4 [M+H]+ 。
將化合物7S-e (47 mg, 0.17 mmol)和化合物Ib (57 mg, 0.17 mmol)的甲苯（1.5 mL）混合液置於封管中，加熱至100℃攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合液冷卻至室溫後減壓濃縮。所得粗品經製備型薄板層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物7S (5 mg, 收率5%)。MSm/z 544.7 [M+H]+ 。
實施例 9: 化合物 8S 的製備
Figure 02_image054
化合物8S- a (100 mg, 0.42 mmol)、8S- b (91 mg, 0.42 mmol)和氫氧化鉀（71 mg, 1.26 mmol）溶於二甲亞碸（5 mL）中，室溫下攪拌3小時，再在60℃下攪拌3小時。反應完畢後，待反應混合物冷卻後將其倒入冰水中，室溫下攪拌1小時。混合物再用二氯甲烷萃取（3 x 25 mL）。合併的有機相經飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（石油醚:乙酸乙酯 = 10:1）得到黃色固體化合物8S-c (64 mg, 收率37%)和黃色固體化合物8S-d (64 mg, 收率37%)。8S-c :1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.03 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.71 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.86-3.78 (m, 2H), 3.60 (dd,J = 13.8, 4.1 Hz, 1H), 3.52-3.36 (m, 2H), 3.29-3.15 (m, 2H), 1.48 (s, 9H);8S-d :1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 7.94 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.63 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 4.49-4.44 (m, 1H), 4.28-4.04 (m, 3H), 3.71 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 3.22-3.15 (m, 1H), 3.10-3.01 (m, 1H), 2.88-2.79 (m, 1H), 2.66-2.57 (m, 1H), 1.49 (s, 9H) ppm。
將化合物8S-c (64 mg, 0.16 mmol)、四甲基錫（56 mg, 0.31 mmol）、四三苯基膦鈀（9 mg, 0.01 mmol）和氯化鋰（13 mg, 0.31 mmol）的N, N-二甲基甲醯胺（2 mL）混合液加熱至90℃，攪拌過夜。反應完畢後，將反應混合物過濾，濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（石油醚：乙酸乙酯 = 10:1）得到黃色固體化合物8S-e (33 mg, 收率60%)。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 7.65 (d,J = 2.5 Hz, 1H), 7.59 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 4.24-4.14 (m, 2H), 3.89-3.78 (m, 2H), 3.60-3.49 (m, 1H), 3.39-3.30 (m, 1H), 3.28-3.18 (m, 1H), 3.10-2.98 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 1.48 (s, 9H)。
將化合物8S-e (200 mg, 0.57 mmol)溶於甲醇（2 mL）中，冰浴下滴加鹽酸甲醇溶液（1 mL, 4 M）。滴加完畢後，室溫攪拌1小時。TLC檢測反應完全。反應混合物減壓濃縮，再加入飽和碳酸氫鈉水溶液（10 mL），用乙酸乙酯（3 x 10 mL）萃取。合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後減壓濃縮得到黃色固體化合物8S-f (100 mg, 收率70%)。MSm/z 250.3 [M+H]+ 。
將化合物8S-f (100 mg, 0.40 mmol)、N -甲基哌啶酮 (2S-a , 227 mg, 2.00 mmol)和2滴醋酸的甲醇（5 mL）混合液在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（75 mg, 1.21 mmol），反應混合物在室溫下攪拌過夜。反應完畢後，反應混合物減壓濃縮，再經二氯甲烷萃取（3 × 15 mL）。合併的有機相用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 30:1）得到黃色固體化合物8S-g (140 mg)直接用於下一步反應。MSm/z 347.4 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（5 mL）中加入化合物8S-g (101 mg, 0.29 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 20 mg)。該反應混合物在室溫氫氣氛圍下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 50:1）得到棕色固體化合物8S-h (63 mg, 收率68%)。MSm/z 317.4 [M+H]+ 。
將化合物8S-h (53 mg, 0.17 mmol)和Ib (56 mg, 0.17 mmol)溶於甲苯（1 mL）中。該反應混合物在100℃下攪拌過夜。TLC監測反應完畢。待反應液冷卻至室溫後，減壓濃縮。所得粗品經製備型薄板層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物8S (12 mg, 收率12%)。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.72 (s, 1H), 7.15 (bs, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.93-5.84 (m, 1H), 4.60 (t,J = 10.7 Hz, 1H), 4.00 (dd,J = 10.6, 2.8 Hz, 1H), 3.19 (d,J = 10.5 Hz, 1H), 3.13-3.01 (m, 3H), 2.92-2.85 (m, 2H), 2.82 (d,J = 11.5 Hz, 2H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.46-2.39 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.30 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.04-1.73 (m, 9H), 1.69-1.55 (m, 3H) ppm。MSm/z 586.8 [M+H]+ 。
實施例 10: 化合物 9S 的製備
Figure 02_image056
將化合物9S-a (1.0 g, 5.65 mmol)、8S-b (1.22 g, 5.65 mmol)和氫氧化鉀（950 mg, 16.94 mmol）溶於二甲亞碸（15 mL）中，先室溫下攪拌3小時，再在60℃下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。待反應混合物冷卻後將其倒入冰水中，室溫下攪拌1小時。所得混合物再用二氯甲烷萃取（3 × 30 mL）。合併的有機相經飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（石油醚:乙酸乙酯:二氯甲烷 = 5:1:1）得到黃色固體化合物9S-b (1.45 g, 收率73%)。MSm/z 354.4 [M+H]+ 。
室溫下將化合物9S-b (1.45 g, 4.10 mmol)溶於甲醇（15 mL）中，再滴加HCl甲醇溶液（4.0 M, 4 mL）。所得混合液在60℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合物減壓濃縮得到粗品。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 10:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物9S-c (1.25 g, 收率100%)。MSm/z 254.3 [M+H]+ 。
將化合物9S-c (500 mg, 1.73 mmol)、N -甲基-4-哌啶酮（2S-a , 587 mg, 5.18 mmol）和4滴醋酸的甲醇（8 mL）混合液在室溫下攪拌1小時。隨後加入氰基硼氫化鈉（326 mg, 5.18 mmol），反應混合物在室溫下攪拌過夜。反應完畢後，反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物9S-d (704 mg)直接用於下一步反應。MSm/z 351.4 [M+H]+ 。
室溫下向甲醇（3 mL）中加入化合物9S-d (80 mg, 0.23 mmol)和鈀碳催化劑(10%, 80 mg)，該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌1小時。TLC監測反應完成。反應混合物經過矽藻土過濾，濾液經減壓濃縮得到粗品。隨後該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色油狀化合物9S-e (50 mg, 收率68%)。MSm/z 321.5 [M+H]+ 。
將化合物9S-e (50 mg, 0.16 mmol)和化合物Ib (52 mg, 0.16 mmol)的甲苯（1.5 mL）混合液置於封管中，加熱至100℃攪拌過夜。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物9S (13 mg, 收率14%)。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.72 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.07 (dd,J = 14.6, 2.5 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.91-5.79 (m, 1H), 4.17-4.08 (m, 2H), 3.79-3.68 (m, 1H), 3.27-3.19 (m, 1H), 3.13-3.03 (m, 3H), 2.89-2.77 (m, 2H), 2.66-2.58 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.49-2.27 (m, 7H), 2.36 (s, 3H), 2.04-1.93 (m, 3H), 1.92-1.80 (m, 6H), 1.73-1.59 (m, 3H) ppm。MSm/z 590.8 [M+H]+ 。
實施例 11: 化合物 10S 的製備
Figure 02_image058
將化合物10S-a （2.95g，13.6mmol）和化合物10S-b （2.17g，13.6mmol）溶於DMSO（30mL）中，再加入KOH（2.30g，40.9mmol）。室溫攪拌至化合物10S-a 原料點消失。加熱至60℃攪拌過夜，TLC監測反應完畢。加水終止反應，將混合物用乙酸乙酯萃取。合併的有機相經飽和食鹽水洗滌、無水硫酸鈉乾燥、過濾和減壓濃縮得粗品。粗品經矽膠柱層析（石油醚:乙酸乙酯 = 1:1）分離純化得化合物10S-c （2.30g，50%）。MSm/z 336.4 [M+H]+ ，280.4[M-55]+ 。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 )δ 7.83-7.75 (m, 1H), 7.65 (d,J = 2.6 Hz, 1H), 6.75 (d,J = 9.1 Hz, 1H), 4.29 (dd,J = 11.0, 3.0 Hz, 1H), 4.27-4.01 (m, 2H), 3.98 (dd,J = 11.0, 8.0 Hz, 1H), 3.78 (d,J = 11.4 Hz, 1H), 3.36-3.27 (m, 1H), 3.12-2.99 (m, 1H), 2.98-2.89 (m, 1H), 2.76-2.53 (m, 1H), 1.48 (s, 9H) ppm。
將化合物10S-c （6.10g，18.19mmol）溶於甲醇（100mL）中，再加入7% 鈀碳（500mg），氫氣氛圍下室溫攪拌1小時。TLC監測反應完畢，將反應液經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮得粗品，粗品經矽膠柱層析（二氯甲烷:甲醇:氨水 = 30:1:0.3）純化得化合物10S-d 4.70g，85%）。MSm/z 306.4 [M+H]+ 。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 6.64 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 6.32 (dd,J = 8.5, 2.6 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.23-4.01 (m, 3H), 3.96 (dd,J = 10.6, 9.0 Hz, 1H), 3.56 (d,J = 11.3 Hz, 1H), 3.15-2.90 (m, 2H), 2.71-2.49 (m, 2H), 1.48 (s, 9H) ppm。
將化合物10S-d （4.7g，15.39mmol）和化合物Ib （5.64g，16.93mmol）溶於甲苯（30mL）中，90~100℃加熱攪拌過夜。TLC監測反應完畢。將反應液冷卻至室溫並過濾。濾餅以乙酸乙酯洗滌，得黃色固體粗品。粗品經矽膠柱層析（二氯甲烷:甲醇:氨水 = 50:1:0.5）純化得化合物10S-e 黃色固體（5.30g，60%）。MSm/z 575.7 [M+H]+ 。
將化合物10S-e （5.30g，9.22mmol）溶於甲醇（60mL）中，再加入鹽酸甲醇溶液（4M，10mL），40℃加熱攪拌3小時。TLC監測反應完畢。將反應液減壓濃縮，再加入飽和碳酸氫鈉溶液調節pH至鹼性，以二氯甲烷萃取，有機層合併後以飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鈉乾燥，過濾，減壓濃縮得化合物10S-f （4.30g，98%）。MSm/z 475.6 [M+H]+ 。
將化合物10S-f （200 mg, 0.42 mmol）、1-Boc-3-氮雜環丁酮10S-g （108 mg, 0.63 mmol）和氯化鋅（172 mg, 1.26 mmol）依次溶於甲醇（7 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（80 mg, 1.26 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物10S-h （250 mg, 收率94%）。MSm/z 630.6 [M+H]+ 。
將化合物10S-h （250 mg, 0.40 mmol)溶於甲醇（8 mL）中，再加入HCl的二氧六環溶液（4.0 M, 1.5 mL）。反應混合物在40℃下攪拌2小時。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。將所得混合物溶於少量甲醇中，用氨水中和，再減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 6:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物10S （173 mg, 收率82%）。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.19 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 6.98 (dd,J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 6.84 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 5.98-5.89 (m, 1H), 4.25 (dd,J = 10.6, 2.6 Hz, 1H), 4.06-3.93 (m, 4H), 3.79 (d,J = 11.8 Hz, 1H), 3.44-3.37 (m, 1H), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.98-2.94 (m, 1H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.47-2.44 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.27 (m, 2H), 2.24-2.16 (m, 1H), 1.99-1.90 (m, 2H), 1.88-1.77 (m, 3H), 1.68-1.59 (m, 2H) ppm。MSm/z 530.4 [M+H]+ 。
實施例 12: 化合物 11S 的製備
Figure 02_image060
將化合物10S （20 mg, 0.04 mmol)和二異丙基乙基胺（7 mg, 0.06 mmol）溶於二氯甲烷（4 mL）中，0℃下緩慢滴加乙醯氯（3 mg, 0.04 mmol）的二氯甲烷（1 mL）稀釋液。反應混合液在室溫下攪拌1小時。反應完畢後，反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物11S （20 mg, 收率93%)。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.19-7.17 (m, 1H), 6.97 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 6.84 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 5.99-5.88 (m, 1H), 4.31-4.22 (m, 2H), 4.11 (dd,J = 9.1, 5.0 Hz, 1H), 4.08-4.02 (m, 1H), 4.01-3.96 (m, 1H), 3.87 (dd,J = 10.3, 5.1 Hz, 1H), 3.78 (d,J = 12.1 Hz, 1H), 3.27-3.21 (m, 1H), 3.14-3.08 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.78-2.71 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.28 (m, 2H), 2.25-2.18 (m, 1H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.88-1.78 (m, 3H), 1.68-1.60 (m, 2H) ppm。MSm/z 572.7 [M+H]+ 。
實施例 13: 化合物 12S 的製備
Figure 02_image062
將化合物10S （10 mg, 0.02 mmol）、環丙基硼酸12S-a （3 mg, 0.04 mmol）、醋酸銅（3 mg, 0.02 mmol）、2,2'-聯吡啶（3 mg, 0.081mmol）和碳酸鈉（3 mg, 0.037 mmol）溶於1,2-二氯乙烷（3 mL）中,空氣中敞口加熱至70℃反應兩小時。TLC監測反應完畢。將反應混合物經矽藻土過濾，濾液減壓濃縮後得粗品。該得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物12S （1.7 mg, 收率16%）。MSm/z 570.6 [M+H]+ 。
實施例 14: 化合物 13S 的製備
Figure 02_image064
將化合物10S-f （30 mg, 0.06 mmol）、3-氧雜環丁酮13S-a （5 mg, 0.06 mmol）和氯化鋅（17 mg, 0.13 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（12 mg, 0.19 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物13S （18 mg, 收率54%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.88 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.08 (d,J = 7.5 Hz, 1H), 6.84 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.62-4.52 (m, 2H), 4.50-4.40 (m, 2H), 4.24 (dd,J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.94-3.85 (m, 1H), 3.73 (d,J = 11.8 Hz, 1H), 3.50-3.40 (m, 1H), 3.07-2.96 (m, 1H), 2.81 (dd,J = 19.5, 10.4 Hz, 2H), 2.67-2.56 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.26-2.17 (m, 2H), 2.09-2.00 (m, 1H), 1.88 (s, 2H), 1.76 (s, 2H), 1.64 (t,J = 10.6 Hz, 1H), 1.60-1.51 (m, 2H) ppm。MSm/z 531.6 [M+H]+ 。
實施例 15: 化合物 14S 的製備
Figure 02_image066
將化合物10S （20 mg, 0.04 mmol)和二異丙基乙基胺（7 mg, 0.06 mmol）溶於二氯甲烷（4 mL）中，0℃下緩慢滴加甲磺醯氯（4 mg, 0.04 mmol）的二氯甲烷（1 mL）稀釋液。反應混合液在室溫下攪拌1小時。反應完畢後，反應混合物減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物14S （21 mg, 收率92%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.88 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.18 (d,J = 1.9 Hz, 1H), 7.08 (d,J = 8.2 Hz, 1H), 6.85 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.89-5.79 (m, 1H), 4.24 (dd,J = 10.6, 2.6 Hz, 1H), 3.94-3.71 (m, 6H), 3.25-3.18 (m, 1H), 3.01 (s, 3H), 2.99-2.97 (m, 1H), 2.87 (dd,J = 20.6, 10.5 Hz, 2H), 2.64-2.57 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.27-2.19 (m, 2H), 2.14-2.06 (m, 1H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.81-1.68 (m, 3H), 1.62-1.55 (m, 2H) ppm。MSm/z 608.8 [M+H]+ 。
實施例 16: 化合物 15S 的製備
Figure 02_image068
化合物10S-f （15 mg, 0.03 mmol）、3,3-二氟環丁酮15S-a （5 mg, 0.05 mmol）和氯化鋅（13 mg, 0.09 mmol）依次溶於甲醇（4 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（6 mg, 0.09 mmol）。反應混合液在80℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 30:1）得到黃色固體化合物15S (2 mg, 收率11%）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.71 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 6.97 (d,J = 8.8 Hz, 1H), 6.77 (d,J = 8.6 Hz, 1H), 5.89-5.80 (m, 1H), 4.23 (d,J = 10.3 Hz, 1H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.78-3.65 (m, 1H), 3.24-3.11 (m, 1H), 3.04-2.92 (m, 1H), 2.87-2.66 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.26 (m, 2H), 2.25-2.13 (m, 1H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.88-1.79 (m, 2H), 1.68-1.51 (m, 6H) ppm。MSm/z 565.6 [M+H]+ 。
實施例 17: 化合物 16S 的製備
Figure 02_image070
化合物10S-f （80 mg, 0.17 mmol）、N -Boc-4-哌啶酮3S-a （50 mg, 0.25 mmol）和氯化鋅（69 mg, 0.51 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（32 mg, 0.51 mmol）。反應混合液在80℃下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 15:1）得到黃色固體化合物16S-a （91 mg, 收率82%）。MSm/z 658.7 [M+H]+ 。
將化合物16S-a （91 mg, 0.14 mmol）溶於甲醇（4 mL）中，再加入HCl的二氧六環溶液（4.0 M, 1 mL）。反應混合物在40℃下攪拌2小時。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。將所得混合物溶於少量甲醇中，用氨水中和，再減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 15:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物16S-b （58 mg, 收率75%）。MSm/z 558.6 [M+H]+ 。
將化合物16S-b （20 mg, 0.04 mmol）、16S-c （10 mg, 0.04 mmol）和二異丙基乙基胺（9 mg, 0.07 mmol）溶於N ,N -二甲基甲醯胺（2 mL）中，反應混合液在80℃下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 15:1）得到黃色固體化合物16S （16 mg, 收率70%）。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.17 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd,J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.97-5.89 (m, 1H), 4.24 (dd,J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.97 (dd,J = 10.5, 9.0 Hz, 1H), 3.75 (d,J = 11.7 Hz, 1H), 3.14-2.98 (m, 7H), 2.75-2.67 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.46-2.42 (m, 1H), 2.39 (t,J = 11.1 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.27 (m, 3H), 2.03 (t,J = 10.7 Hz, 1H), 1.96-1.78 (m, 6H), 1.68-1.55 (m, 4H) ppm。MSm/z 640.8 [M+H]+ 。
實施例 18: 化合物 17S 的製備
Figure 02_image072
將化合物16S-b （20 mg, 0.04 mmol）和溴乙腈17S-a （5 mg, 0.04 mmol）溶於四氫呋喃（2 mL）中，反應混合液在室溫下攪拌3小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經製備型矽膠薄層色譜分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1）得到黃色固體化合物17S （12 mg, 收率56%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d,J = 8.0 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.90-5.77 (m, 1H), 4.24 (dd,J = 10.6, 2.4 Hz, 1H), 3.90 (dd,J = 10.5, 9.0 Hz, 1H), 3.72-3.66 (m, 3H), 3.01-2.89 (m, 3H), 2.83 (d,J = 11.2 Hz, 2H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.35-2.31 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.20 (m, 3H), 2.16 (t,J = 10.8 Hz, 2H), 1.93-1.84 (m, 3H), 1.82-1.73 (m, 4H), 1.62-1.54 (m, 2H), 1.51-1.39 (m, 2H) ppm。MSm/z 597.8 [M+H]+ 。
實施例 19: 化合物 18S 的製備
Figure 02_image074
化合物10S-f （15 mg, 0.03 mmol）、環丁酮18S-a （3 mg, 0.05 mmol）和氯化鋅（13 mg, 0.09 mmol）依次溶於甲醇（4 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（6 mg, 0.09 mmol）。反應混合液在80℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷：甲醇 = 15:1）得到黃色固體化合物18S (11 mg, 收率66%)。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.87 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d,J = 7.8 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.87-5.78 (m, 1H), 4.25 (dd,J = 10.6, 2.6 Hz, 1H), 3.89 (dd,J = 10.5, 9.1 Hz, 1H), 3.70 (d,J = 11.6 Hz, 1H), 2.99-2.92 (m, 1H), 2.86 (d,J = 11.7 Hz, 1H), 2.81 (d,J = 10.2 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.19 (m, 2H), 2.02-1.73 (m, 8H), 1.69-1.50 (m, 5H), 1.27-1.22 (m, 1H) ppm。MSm/z 529.7 [M+H]+ 。
實施例 20: 化合物 19S 的製備
Figure 02_image076
化合物19S-a (3.0 g, 12.61 mmol)、19S-b (2.73 g, 12.61 mmol)和氫氧化鉀 (2.12 g, 37.82 mmol)溶於二甲亞碸（40 mL）中，室溫下攪拌3小時，再在60℃下攪拌3小時。反應完畢後，待反應混合物冷卻後將其倒入冰水中，室溫下攪拌1小時。混合物再經二氯甲烷萃取（3x40 mL）、飽和食鹽水洗滌、無水硫酸鈉乾燥，過濾後濾液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（石油醚:乙酸乙酯:二氯甲烷 = 15:1:1）得到黃色固體化合物19S-c (1.07 g, 收率20%)。
室溫下向甲醇（6 mL）中加入化合物19S-c （500 mg, 1.21 mmol）和鈀碳催化劑（10%, 150 mg），該反應混合物在室溫和1大氣壓的氫氣氛圍下攪拌1小時。TLC監測反應完成。反應混合物經過矽藻土過濾。濾液經減壓濃縮得到粗品。隨後該粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:乙酸乙酯 = 4:1）得到灰白色固體化合物19S-d （235 mg, 收率64%）。MSm/z 306.4 [M+H]+ 。
將化合物19S-d （235 mg, 0.77 mmol）和化合物Ib （257 mg, 0.77 mmol）的甲苯（6 mL）混合液置於封管中，加熱至100℃攪拌5小時。TLC監測反應完畢，反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:乙酸乙酯 = 2:1）得到黃色固體化合物19S-e （200 mg, 收率45%）。MSm/z 575.8 [M+H]+ 。
將化合物19S-e （200 mg, 0.35 mmol)溶於甲醇（2 mL）中，再加入HCl的二氧六環溶液（4.0 M, 2 mL）。反應混合物在40℃下攪拌2小時。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。將所得混合物溶於少量甲醇中，用氨水中和，再減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 15:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物19S-f （140 mg, 收率85%）。
化合物19S-f （20 mg, 0.04 mmol）、19S-g （5 mg, 0.04 mmol）和氯化鋅（12 mg, 0.08 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（8 mg, 0.13 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物19S （10.44 mg, 收率43%）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.71 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 5.92-5.83 (m, 1H), 4.19 (dd,J = 10.5, 2.7 Hz, 1H), 4.03-3.95 (m, 1H), 3.65 (d,J = 11.2 Hz, 1H), 3.22-3.15 (m, 2H), 3.11-3.01 (m, 1H), 2.99 (d,J = 10.2 Hz, 1H), 2.90-2.78 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.50-2.45 (m, 1H), 2.44-2.37 (m, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.32-2.22 (m, 4H), 2.11-2.02 (m, 2H), 2.01-1.71 (m, 10H) ppm。MSm/z 572.7 [M+H]+ 。
實施例 21: 化合物 20S 的製備
Figure 02_image078
化合物19S-f （30 mg, 0.06 mmol）、N -第三丁氧羰基-4-哌啶酮（13 mg, 0.06 mmol）和氯化鋅（17 mg, 0.13 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（12 mg, 0.19 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物20S-b （25 mg, 收率60%）。MSm/z 658.3 [M+H]+ 。
將化合物20S-b （25 mg, 0.04 mmol)溶於甲醇（2 mL）中，再加入HCl的二氧六環溶液（4.0 M, 1.5 mL）。反應混合物在40℃下攪拌2小時。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。將所得混合物溶於少量甲醇中，用氨水中和，再減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 15:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物20S （12.8 mg, 收率60%）。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.17 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.88-6.81 (m, 1H), 6.69 (d,J = 8.5 Hz, 1H), 6.01-5.90 (m, 1H), 4.23 (dd,J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.99-3.91 (m, 1H), 3.73 (d,J = 11.5 Hz, 1H), 3.41-3.35 (m, 3H), 3.13-3.06 (m, 2H), 3.01 (d,J = 10.5 Hz, 1H), 2.95-2.86 (m, 2H), 2.79-2.72 (m, 1H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.23 (m, 2H), 2.10-2.01 (m, 3H), 2.01-1.88 (m, 2H), 1.81 (d,J = 4.8 Hz, 2H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.63-1.55 (m, 2H) ppm。MSm/z 558.6 [M+H]+ 。
實施例 22: 化合物 21S 的製備
Figure 02_image080
化合物19S-f （20 mg, 0.04 mmol）、化合物21S-a （6 mg, 0.04 mmol）和氯化鋅（12 mg, 0.08 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（8 mg, 0.13 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物21S （15.30 mg, 收率60%）。1 H NMR (500 MHz, CDCl3 ) δ 8.71 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.86-6.72 (m, 2H), 5.93-5.71 (m, 1H), 4.74-4.65 (m, 1H), 4.21 (d,J = 9.6 Hz, 1H), 4.06-3.96 (m, 1H), 3.90 (d,J = 12.8 Hz, 1H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.28-2.80 (m, 5H), 2.69-2.55 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.04-1.77 (m, 7H), 1.78-1.54 (m, 5H) ppm。MSm/z 600.8 [M+H]+ 。
實施例 23: 化合物 1R 的製備
Figure 02_image082
化合物1R-a 採用專利WO2017101763中的方法合成。
將化合物1R-a （30 mg, 0.06 mmol）、四氫吡喃酮1R-b （9 mg, 0.06 mmol）和氯化鋅（17 mg, 0.13 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（12 mg, 0.19 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物1R （15 mg, 收率42%）。1 H NMR (500 MHz, DMSO-d6 ) δ 9.88 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d,J = 7.7 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.24 (dd,J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 4.02-3.85 (m, 3H), 3.71 (d,J = 11.7 Hz, 1H), 3.33-3.23 (m, 2H), 3.06-2.86 (m, 3H), 2.63-2.54 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.17 (m, 2H), 2.01-1.85 (m, 4H), 1.82-1.68 (m, 4H), 1.65-1.52 (m, 2H), 1.51-1.34 (m, 2H) ppm。MSm/z 559.8 [M+H]+ 。
實施例 24: 化合物 3R 的製備
Figure 02_image084
化合物1R-a （30 mg, 0.06 mmol）、1-Boc-4-哌啶酮3R-a （12 mg, 0.06 mmol）和氯化鋅（17 mg, 0.13 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（12 mg, 0.19 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物3R-b （25 mg, 收率60%）。MSm/z 658.3 [M+H]+ 。
將化合物3R-b （25 mg, 0.04 mmol)溶於甲醇（2 mL）中，再加入HCl的二氧六環溶液（4.0 M, 1.5 mL）。反應混合物在40℃下攪拌2小時。TLC監測反應完畢。反應混合物冷卻至室溫後減壓濃縮。將所得混合物溶於少量甲醇中，用氨水中和，再減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 15:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物3R （9 mg, 收率42%）。1 H NMR (500 MHz, MeOD-d 4 ) δ 8.72 (s, 1H), 7.07 (d,J = 2.0 Hz, 1H), 6.86 (dd,J = 9.0, 2.0 Hz, 1H), 6.73 (d,J = 9.0 Hz, 1H), 5.92-5.75 (m, 1H), 4.14 (dd,J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.98-3.82 (m, 1H), 3.66 (d,J = 11.6 Hz, 1H), 3.16-3.06 (m, 2H), 3.04-2.87 (m, 3H), 2.66-2.55 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.36-2.31 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.24-2.15 (m, 2H), 1.95 (t,J = 21.3, 10.6 Hz, 2H), 1.92-1.78 (m, 4H), 1.77-1.67 (m, 2H), 1.61-1.49 (m, 2H), 1.49-1.37 (m, 2H) ppm。MSm/z 558.6 [M+H]+ 。
實施例 25: 化合物 5R 的製備
Figure 02_image086
將化合物1R-a （30 mg, 0.06 mmol），N -乙醯基-4-哌啶酮5R-a （9 mg, 0.06 mmol）和氯化鋅（17 mg, 0.13 mmol）依次溶於甲醇（5 mL）中，再加入氰基硼氫化鈉（12 mg, 0.19 mmol）。反應混合液在75℃下攪拌1小時。TLC監測反應完畢。反應混合液減壓濃縮。所得粗品經矽膠柱層析分離純化（二氯甲烷:甲醇 = 20:1, 2%氨水）得到黃色固體化合物5R （14 mg, 收率37%）。1 H NMR (500 MHz, CD3 OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.17 (d,J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd,J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 6.82 (d,J = 8.9 Hz, 1H), 5.99-5.87 (m, 1H), 4.62-4.51 (m, 1H), 4.24 (dd,J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 4.05-3.92 (m, 2H), 3.76 (dd,J = 14.1, 4.7 Hz, 1H), 3.15-2.95 (m, 5H), 2.76-2.55 (m, 4H), 2.54-2.50 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.33-2.26 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.09-2.02 (m, 1H), 2.02-1.88 (m, 4H), 1.88-1.77 (m, 2H), 1.70-1.58 (m, 2H) ppm。MSm/z 600.8 [M+H]+ 。
實施例 26:
1 ） CDK2 、 CDK4 、 CDK6 激酶活性抑制實驗
採用Caliper遷移率變動檢測技術 (Caliper mobility shift assay)測定CDK2/CycA2, CDK4/CycD3和CDK6/cycD3蛋白激酶活性。將化合物用DMSO溶解後用激酶緩衝液稀釋(CDK2/CycA2 and CDK6/cycD3 用50 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2 , 0.0015% Brij-35, and 2 mM dithiothreitol；CDK4/CycD3 用 20 mM HEPES (pH 7.5), 10 mM MgCl2 , 0.01% Triton X-100, and 2 mM dithiothreitol)，在384孔板中加入5 µL的5倍反應終濃度的化合物(10%DMSO)。加入10 µL的2.5倍酶溶液後在室溫下孵育10分鐘，再加入10 µL的2.5倍底物溶液(相應酶和底物濃度CDK2/CycA2 12 nM, ATP Km 39 µM; CDK4/CycD3 10 nM, ATP Km 221 µM; CDK6/cycD3 15 nM, ATP Km 800µM)。 28℃下各自孵育(60分鐘 CDK2, 180分鐘 CDK4, 60分鐘 CDK6)後加25 µL終止液(100 mM HEPES(pH 7.5), 0.015% Brij-35，0.2% Coating Reagent #3，50 mM EDTA)終止反應。Caliper EZ Reader II (Caliper Life Sciences)上讀取轉化率數據。把轉化率轉化成抑制率數據(%抑制率 = (max-轉化率)/(max-min)*100)。其中max是指DMSO對照的轉化率，min是指無酶活對照的轉化率。以化合物濃度和抑制率為橫縱坐標，繪製曲線，使用XLFit excel add-in version4.3.1軟體擬合曲線並計算IC50 。部分代表性化合物的活性如表1所示。
2 ） TRKA 激酶活性抑制實驗
採用Caliper遷移率變動檢測技術(Caliper mobility shift assay)測定TRKA蛋白激酶活性。將化合物用DMSO溶解，配置成10 mM儲液。配製1x激酶反應緩衝液，使用緩衝液梯度稀釋化合物。受試化合物使用分液器Echo 550向目的板3573轉移250 nL 100x終濃度的化合物。用1x激酶緩衝液配製2.5x終濃度的激酶溶液。在化合物孔和陽性對照孔分別加入10 µL的2.5x終濃度的激酶溶液；在陰性對照孔中加10 µL的1x激酶緩衝液。1000 rpm離心30 s，反應板振盪混勻後室溫孵育10 min。用1x 激酶緩衝液配製5/3倍終濃度的ATP和激酶底物的混合溶液。加入15 µL的5/3倍終濃度的ATP和底物的混合溶液，起始反應。將384孔板1000 rpm離心30 s，振盪混勻後，室溫孵育相應的時間。加入30 µL終止檢測液停止激酶反應，1000 rpm離心30 s，振盪混勻，用Caliper EZ Reader讀取轉化率數據。把轉化率轉化成抑制率數據(%抑制率 = (max DMSO孔轉化率-化合物樣品轉化率)/(max DMSO孔轉化率-min陰性對照轉化率)*100)。其中max是指DMSO對照的轉化率，min是指無酶活對照的轉化率。以化合物濃度和抑制率為橫縱坐標，繪製曲線，使用XLFit excel add-in version4.3.1軟體擬合曲線並計算IC50 。部分代表性化合物的活性如表1所示。
3 ） CDK5 、 CDK9 、 CDK16 激酶活性抑制實驗
採用ADP-Glo Kinase Assay測定CDK5/p35NCK，CDK9/CycT1和 CDK16/CycY蛋白激酶活性。用100% DMSO將陽性藥和待測化合物(10 mM儲液)25倍稀釋，在96孔稀釋板中進行4倍等比稀釋，取1 µL的化合物加入49 µL的激酶反應緩衝液(1 mM Tris, 20 mM MgCl2 , 0.10% BSA, and 0.5 mM DTT)中，在微孔板振盪器上震盪20 min。轉移2 µL的2x激酶到384反應板中，加入1 µL的待測化合物到384反應板中，1000 rpm/min，離心1 min，25℃孵育10 min。轉移1 µL 4x底物混合物到384反應板中，1000 rpm/min，離心1 min，25℃孵育60 min。轉移4 µL ADP-Glo到384反應板中1000 rpm/min，離心1 min，25℃孵育40 min。轉移8 µL Detection溶液到384反應板中1000 rpm/min，離心1 min，25℃孵育40 min。使用Biotek多功能讀板機讀取RLU(Relative luminescence unit)訊號。訊號強度用於表徵激酶的活性程度。化合物抑制率數據：%抑制率 = [1-(化合物RLU平均值-陽性對照RLU平均值)/(陰性對照RLU平均值-陽性對照RLU平均值)]*100。以濃度的log值作為X軸，百分比抑制率為Y軸，採用分析軟體GraphPad Prism 5的log(inhibitor) vs. response -Variable slope擬合量效曲線，從而得出各個化合物對酶活性的IC50 值。部分代表性化合物的活性如表1所示。
表1 CDK2、CDK4、CDK6、CDK5、CDK9、CDK16和TRKA激酶活性抑制(IC50 ，nM)
化合物 CDK2 CDK4 CDK6 CDK5 CDK9 CDK16 TRKA
Ref-A a ≥2000 ＜10 ＜20 ＜50 ≥300 ≥2000 ≥400
1S a ＜100 ＜10 ＜20        
1R ＜100 ＜10 ＜20 ＜100 ＜50 ＜100 ＜10
2S a ＜100 ＜10 ＜10 ＜50 ＜20 ＜100 ＜10
2R ＜100 ＜10 ＜10       ＜10
3S ＜100 ＜10 ＜10 ＜100 ＜20 ＜50 ＜10
3R ＜100 ＜10 ＜10        
4S ＜100 ＜10 ＜10 ＜100 ＜20 ＜100 ＜10
5S ＜100 ＜10 ＜10        
5R ＜100 ＜10 ＜20 ＜200 ＜50 ＜200 ＜10
6S ＜100 ＜10 ＜10        
7S ＜100 ＜10 ＜10 ＜100 ＜50 ＜100 ＜10
8S ＜500 ＜20 ＜100        
9S ＜500 ＜10 ＜50        
10S ＜100 ＜10 ＜10        
11S ＜100 ＜10 ＜20       ＜10
12S ＜100 ＜10 ＜10        
13S ＜100 ＜10 ＜20        
14S ＜100 ＜10 ＜20        
15S ＜1000 ＜50         ＜100
16S ＜500 ＜10          
17S ＜100 ＜10          
18S ＜500 ＜10          
19S ＜500 ＜100          
20S ＜500            
21S ＜500            
a 化合物為鹽酸鹽
結果顯示，本發明化合物具有與現有技術中的CDK4/6選擇性抑制劑Palbociclib（Ref-A）具有相當的CDK4和CDK6抑制活性，同時對於CDK2、CDK5、CDK9、CDK16和TRKA激酶也有較強的抑制活性，是一種多靶點激酶抑制劑。
實施例 27 大鼠體內的藥物動力學研究
儀器：Waters生產的XEVO TQ-S液質聯用儀，所有的測定數據由MassLynx V4.1軟體採集並處理，用Microsoft Excel計算和處理數據。用WinNonlin 8.0軟體，採用統計矩法進行藥代動力學參數計算。主要包括動力學參數Tmax 、T1/2 、Cmax 、AUClast 等。色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm，1.7 μm)；柱溫40℃；流動相A為水(0.1%甲酸)，流動相B為乙腈，流速為0.350毫升/分鐘，採用梯度洗脫，洗脫梯度為0.50min：10%B；1.50min：10%B；2.30min：95%B；2.31min：10%B；3.00min：stop。進樣量：5 μL。
動物：SD雄性大鼠3隻，體重範圍200-220 g，購入後在實驗動物中心實驗室飼養2天後使用，給藥前12小時及給藥後4小時內禁食，試驗期間自由飲水。大鼠灌胃後按既定的時間內點取血樣。
溶媒：0.5% Methycellulose (含0.4% Tween 80和1%乙醇的水溶液)。灌胃給藥溶液的配製：精密稱量化合物，加入溶媒中，常溫下超聲5分鐘使藥品完全溶解，配製成0.3 毫克/毫升的藥液。
藥物樣品：本發明專利式(I)所示結構的代表性化合物，一般採取多個結構類似的樣品(分子量相差在2個單位以上)，準確稱量，一起給藥(cassette PK)。這樣可以同時篩選多個化合物，比較它們的口服吸收率。也採用單一給藥來研究藥物樣品在大鼠體內的藥物動力學。
灌胃給藥後分別於0.25、0.5、1、2、4、9、12和24 小時眼眶取血，置於肝素鈉處理的試管中，離心後取上清液血漿用於LC-MS/MS分析。
準確稱量化合物配製成不同的濃度，在質譜上進行定量分析，從而建立起標準曲線，然後測試上述血漿裡化合物的濃度，得出不同時間點的化合物濃度。所有的測定數據由相關的軟體採集並處理，採用統計矩法進行藥代動力學參數計算(主要包括動力學參數Tmax 、T1/2 、Cmax 、AUClast 等)。部分代表性化合物的動力學參數如表2所示。
表2 大鼠體內的藥物動力學參數
化合物 口服劑量 Tmax (小時) T1/2 (小時) Cmax (奈克/毫升) AUC(0-24) (奈克/毫升*小時)
Ref-B a 3 毫克/公斤 3.33 6.71 13.92 108.22
1R 3 毫克/公斤 2.00 2.96 43.35 273.69
1S a 3 毫克/公斤 3.00 6.41 37.27 191.95
2S a 3 毫克/公斤 13.33 ＞12 114.03 1910.48
3S 3 毫克/公斤 5.33 5.68 85.70 1225.68
4S 3 毫克/公斤 12.00 10.74 250.01 3772.01
5R 3 毫克/公斤 6.67 2.91 438.45 4350.29
5S 3 毫克/公斤 6.00 2.18 266.46 2478.44
6S 3 毫克/公斤 6.67 4.31 54.90 661.99
7S 3 毫克/公斤 9.33 3.19 133.08 1938.26
9S 3 毫克/公斤 12.00 15.6 42.54 697.09
11S 3 毫克/公斤 2.00 2.61 424.29 2996.59
13S 3 毫克/公斤 1.83 1.95 169.07 860.14
14S 3 毫克/公斤 1.33 1.84 441.8 2032.14
a 該化合物為鹽酸鹽
結果顯示，本發明化合物在大鼠中的口服吸收性能顯著優於現有技術（WO2017101763）中的化合物7S (Ref-B)。
Ref-A和Ref-B的結構如下式所示：
Figure 02_image088
Figure 02_image090
Ref-A（Palbociclib）     Ref-B (WO2017101763 Compound7S )
本發明的化合物除針對CDK4/CDK6具有抑制活性之外，對於其他CDK亞型（包括CDK2、CDK5、CDK9、CDK16）也具有良好的抑制活性，因此是一種pan-CDK抑制劑，同時對TRK激酶也具有良好的抑制活性。而現有技術中未記載該類化合物對於上述CDK亞型及TRK激酶具有抑制活性。
此外，相較於本領域中現有的作為CDK抑制劑的該類化合物，本發明的化合物還具有顯著改進的藥代動力學性能。在給藥後，本發明化合物在大鼠體內的暴露量明顯提升，提示本發明化合物可以在更低的劑量下用藥。
在本發明提及的所有文獻都在本申請中引用作為參考，就如同每一篇文獻被單獨引用作為參考那樣。此外應理解，在閱讀了本發明的上述講授內容之後，本領域技術人員可以對本發明作各種改動或修改，這些等價形式同樣落於本申請所附申請專利範圍所限定的範圍。
Figure 110101014-A0101-11-0001-1

Claims (20)

  1. 一種如下式(I)所示結構的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物：
    Figure 03_image001
    (I) “*”表示手性中心； X為氫、氘、鹵素、C1-4 烷基、OR1 、NR1 R2 、或NR1 C(O)R3 ； 各個R各自獨立為氫或C1-4 烷基；或當兩個R同時連接到同一個碳原子上時，這兩個R與其相連的碳原子可以任選共同形成羰基(C=O)； G為NRf 、O、S、S(O)、S(O)2 或CRg Rg ； p為0、1、2、或3； m和n各自獨立為0、1、2、或3；前提條件是m和n不能同時為0； R1 和R2 各自獨立為氫或C1-4 烷基； R3 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、或C2-4 炔基； Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、氰基取代C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 、S(O)2 R4 、或S(O)2 NR1 R2 ； 各個Rg 各自獨立地選自下組：氫、鹵素、或C1-4 烷基；或兩個Rg 與其相連的碳原子共同形成羰基(C=O)；或兩個Rg 與其連接的碳原子一起形成3-至8-員環狀結構，此環狀結構任選地含有0、1或2個選自N、O、S的雜原子； R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、或雜芳基； 其中，各個上述的烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地且各自獨立地被1-3個各自獨立地選自下組的取代基取代：鹵素、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、3-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、CN、NO2 、OR1 、SR1 、NR1 R2 、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 、NR1 C(O)R4 、或S(O)2 R4 ，前提條件是所形成的化學結構是穩定的和有意義的；其中，R1 、R2 、R4 的定義如上所述； 除非特別說明，上述的芳基為含有6-12個碳原子的芳香基團；雜芳基為5-至15-員雜芳香基團；環狀結構為飽和的或不飽和的、含雜原子或不含雜原子的環狀基團。
  2. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於， X為氫、氘、鹵素、C1-4 烷基、OR1 、NR1 R2 、或NR1 C(O)R3 ； 各個R各自獨立為氫或C1-4 烷基；或當兩個R同時連接到同一個碳原子上時，這兩個R與其相連的碳原子可以任選共同形成羰基(C=O)； G為NRf 、O、S、S(O)、S(O)2 或CRg Rg ； p為0、1、2、或3； m和n各自獨立為1、2、或3； R1 和R2 各自獨立為氫或C1-4 烷基； R3 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、或C2-4 炔基； Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 ，或S(O)2 R4 ； 各個Rg 各自獨立地選自下組：氫、鹵素、或C1-4 烷基；或兩個Rg 與其相連的碳原子共同形成羰基(C=O)；或兩個Rg 與其連接的碳原子一起形成3-至8-員環狀結構，此環狀結構任選地含有0、1或2個選自N、O、S的雜原子； R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、或雜芳基； 其中，各個上述的烷基、烯基、炔基、環烷基、雜環基、芳基和雜芳基任選地且各自獨立地被1-3個各自獨立地選自下組的取代基取代：鹵素、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、3-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、CN、NO2 、OR1 、SR1 、NR1 R2 、C(O)R4 、C(O)OR1 、C(O)NR1 R2 、NR1 C(O)R4 、或S(O)2 R4 ，前提條件是所形成的化學結構是穩定的和有意義的；其中，R1 、R2 、R4 的定義如上所述； 除非特別說明，上述的芳基為含有6-12個碳原子的芳香基團；雜芳基為5-至15-員雜芳香基團；環狀結構為飽和的或不飽和的、含雜原子或不含雜原子的環狀基團。
  3. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，式(I)為：
    Figure 03_image003
    Figure 03_image005
    (II)                     (III) “*”表示手性中心； X、R、G、p、m、和n的定義如請求項1中所述。
  4. 如請求項1-3中任一項所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，X為氫、鹵素、C1-4 烷基；R為氫，或兩個R與其相連的碳原子共同形成羰基(C=O)。
  5. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基。
  6. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，式(I)為：
    Figure 03_image009
    （IV） “*”表示手性中心； X為氫、鹵素、C1-4 烷基； G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基。
  7. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，式(I)為：
    Figure 03_image011
    （V） “*”表示手性中心； X為氫、鹵素、C1-4 烷基； G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基、芳基、雜芳基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基、C2-4 烯基、C2-4 炔基、C3-8 環烷基、4-至8-員雜環基。
  8. 如請求項6或7所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，Rf 為氫、C1-4 烷基、C1-4 鹵代烷基、氰基取代C1-4 烷基、C3-8 環烷基、C(O)R4 、或S(O)2 R4 ；其中R4 為C1-4 烷基。
  9. 如請求項5-7中任一項所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，各個Rg 各自獨立為氫或鹵素。
  10. 如請求項6或7所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於： 在式（IV）或式（V）中： “*”表示手性中心； X為氫、氟、或甲基； G為NRf 、O、或CRg Rg ；m和n各自獨立為1或2；其中Rf 為氫、甲基、乙基、CH2 CF3 、CH2 CN、環丙烷基、C(O)CH3 、或S(O)2 CH3 ；各個Rg 各自獨立為氫或氟。
  11. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，所述的式(I)化合物為選自下組的化合物，或其與對應的光學異構體的混合物：
    Figure 03_image013
    Figure 03_image015
    Figure 03_image017
    Figure 03_image019
    Figure 03_image098
    。
  12. 如請求項1所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，其特徵在於，所述的鹽為鹽酸鹽。
  13. 一種如請求項1-12中任一項所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物的用途，其特徵在於，用於： (a) 製備治療與激酶活性或表達量相關的疾病的藥物； (b) 製備激酶靶向抑制劑；和/或 (c) 體外非治療性地抑制激酶的活性； 其中，所述的激酶選自下組：CDK和/或TRK。
  14. 一種如請求項1-12任一所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物的用途，其特徵在於，可作為激酶抑制劑，或用於治療與激酶高表達相關的疾病；其中，所述的激酶選自下組：CDK和/或TRK。
  15. 如請求項14所述的用途，其特徵在於，所述的疾病選自下組：DNA和RNA病毒感染、B細胞淋巴瘤、單核細胞白血病、脾大性紅細胞增多、嗜酸性白細胞增多綜合症、原發性血小板減少症、系統性巨細胞疾病、血液瘤、實體瘤。
  16. 如請求項14所述的用途，其特徵在於，所述的疾病選自下組：過敏性哮喘、骨髓纖維化、類風濕性關節炎、炎症性疼痛、癌痛、愛滋病、孢疹病毒和流感病毒、分泌性乳腺癌、纖維肉瘤、唾液腺癌、肝癌、直腸癌、膀胱癌、咽喉癌、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、肺腺癌、肺鱗癌、乳腺癌、前列腺癌、神經膠質細胞瘤、卵巢癌、頭頸部鱗癌、子宮頸癌、食管癌、腎癌、胰腺癌、結腸癌、皮膚癌、淋巴瘤、胃癌、多發性骨髓癌等各種，以及阿茲海默症和帕金森等神經退化性疾病、腦瘤、肺癌。
  17. 一種藥物組合物，其特徵在於，所述的藥物組合物包括有效量的如請求項1-12中任一項所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物。
  18. 一種抑制激酶活性的方法，其特徵在於，包括步驟：對抑制對象施用抑制有效量的如請求項1-11中任一項所述的化合物，或其光學異構體，藥學上可接受的鹽，前藥，氘代形式，水合物，溶劑合物，或對抑制對象施用抑制有效量的如請求項17所述的藥物組合物；其中，所述的激酶選自下組：CDK和/或TRK。
  19. 一種如請求項1所述的化合物的製備方法，該方法包括步驟：
    Figure 03_image023
    在惰性溶劑中，用式Ia化合物與式Ib化合物反應，得到式I化合物。
  20. 如請求項19所述的方法，其特徵在於，所述的方法還包括步驟：
    Figure 03_image025
    (1) 在惰性溶劑中，用式1-A3化合物進行脫保護，得到式1-A3-a化合物； (2) 在惰性溶劑中，用式1-A3-a化合物與式1-A3-b化合物進行還原胺化反應，得到式1-A4化合物； (3) 在惰性溶劑中，用式1-A4化合物進行還原反應，得到式Ia化合物。
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