KR20220140731A - 키나아제 억제제로 작용하는 다환성 화합물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 키나아제 억제제로서의 다환 화합물을 제공한다. 구체적으로, 본 발명은 하기 식 (I)로 표시되는 구조의 화합물(각 기의 정의는 명세서에 기재된 바와 같음), 식 (I)의 화합물을 포함하는 약학적 조성물 및 상기 화합물, 및 이러한 화합물의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물 등을 제공한다. 이는 CDK 및/또는 TRK를 포함한 다양한 키나아제를 효과적으로 억제함으로써, 각종 종양 등과 관련된 다양한 질환을 치료하는 역할을 한다.
Figure pct00062

(I)

Description

키나아제 억제제로 작용하는 다환성 화합물
본 발명은 약물 화학 분야에 관한 것으로; 구체적으로, 본 발명은 트리시클릭 헤테로아릴기를 포함하는 신규 유도체, 이의 합성 방법 및 종양 등에 관련된 다양한 질환의 치료를 위한 약물 제조에서 CDK 및/또는 TRK를 포함하는 다양한 키나아제 억제제로서의 이의 응용에 관한 것이다.
악성 종양으로도 불리는 암은, 세계에서 발병률 및 사망률이 제일 높은 질환 중의 하나로, 세포가 비정상적으로 증식 및 전이되어, 발병 후 짧은 시간 내 또는 상대적으로 짧은 시간 내에 확산되어 전이되는 특징을 가진다. 전통적인 치료 방안은 수술적 치료(절제 조건을 만족시키는 경우), 방사선 요법, 화학 요법을 포함한다. 최근 개발된 표적 치료법은, 독성과 부작용을 줄이고, 생존율을 향상시키는 등의 장점이 있다. 그러나 표적 약물을 일정 시간 사용하면 또한 내성이 생겨, 암세포가 비정상적으로 빠르게 성장하고 확산된다. 일반적인 암으로는 혈액암, 폐암, 유방암, 간암, 방광암, 직장암, 위암 등이 있다.
세포 주기의 조절은 주로 일련의 세린/트레오닌 키나아제의 영향을 받는데, 이러한 세린/트레오닌 키나아제는 사이클린 단백질 의존성 키나아제(Cyclin-dependent kinase, CDK)라고도 불리우며, 이들은 이에 대응되는 조절 서브유닛인 사이클린(cyclins)과 결합하여, 세포 주기의 진행, 유전 정보의 전사 및 세포의 정상적인 분열 및 증식을 촉진한다. 인간의 CDK 패밀리에는 20여종의 아형이 있고, 다양한 기능에 따라 주로 두 가지 유형으로 나뉜다. 한 유형의 CDK는 CDK2/4/6 등과 같은 세포 주기를 조절하고; 다른 유형의 CDK는 CDK7/9 등과 같은 전사 조절/RNA 가공에 참여한다. CDK 키나아제는 사이클린 단백질에 결합되어 특정 복합체를 형성함으로써 활성화된다. 많은 인간의 암에서, CDK는 과도하게 활성화되거나 CDK를 억제하는 단백질이 작용하지 않아, 암세포의 비정상적인 증식과 분열을 초래한다. 따라서, CDK는 항종양 약물의 중요한 표적이 된다.
CDK2 및 CDK4/6는 세포 주기의 핵심 조절 인자이다. 세포 휴지 상태(G0기)에서, 전사 인자 E2F의 전사 활성은 망막모 세포종 단백질(Rb)에 의해 억제된다. 세포가 분열 신호에 의해 자극을 받으면, 세포는 G1기에 진입한다. G1기에서, 세포 사이클린D(CyclinD)는 CDK4/6에 결합하여 활성화되고, 활성화된 CDK4/6는Rb를 인산화하여, E2F를 활성화한다. 이때 E2F는 Rb 단백질과의 결합을 유지하지만, CCNE1, CCNA2, CCNB1 및 CDK2와 같은 단백질을 전사할 수 있다. G1기 후기(제한점 이후)에서, CyclinE는 CDK2에 결합하여 활성화되고, CDK2는Rb를 추가로 인산화하여, Rb가 완전히 방출되고 E2F가 활성화되며, E2F는 다음으로 CyclinA 및 CyclinE 등의 S기 단백질의 전사를 유도한다. CDK2/CyclinA 및 CDK1 등은Rb 단백질의 인산화를 유지하여, 세포 분열의 진행을 확보한다. CDK2/CyclinA는 S/G2기의 변환 과정을 보조한다. 따라서, CDK2 및 CDK4/6의 키나아제 활성을 억제하면, 세포 주기의 과정을 차단하고, 종양 증식을 억제하는 목적을 달성할 수 있다. CDK4/6 억제제 팔보시클립(Palbociclib), 리보시클립(Ribociclib), 아베마시클립(Abemaciclib)은 시판 승인을 받았지만, 현재 효과적인 CDK2 억제제가 없다. CDK9는 RNA 전사 과정을 조절하며, CDK9와 대응되는 Cyclin은 순방향 전사 신장 인자 복합체-b(P-TEFb)를 형성한다. 대부분의 CDK9는 CyclinT1에 결합하고, 소량의 CDK9만 CyclinT2a, CyclinT2b 및 CyclinK에 결합한다. CDK9는 P-TEF 복합체 중의 촉매 서브유닛으로, RNA 중합효소II의 C 말단 도메인을 인산화하고, MYC 및 MCL-1 등과 같은 다양한 암 유전자의RNA 전사 신장 과정을 촉진할 수 있다. MYC 및 MCL-1은 다양한 암 유형에서 모두 유의하게 비정상적인 과발현을 보이지만, 현재 효과적인 표적 억제제가 없다. 이 밖에, CDK9/CyclinK 복합체는 세포 복제 압력에서 게놈 안정성을 유지하는 데 중요한 역할을 한다. CDK9의 과발현은 다양한 혈액 종양, 폐암, 간암, 유방암, 결장암, 방광암 및 뇌종양 등과 밀접한 관련이 있다. CDK9는 인간 면역결핍 바이러스(HIV)의 복제에서도 중요한 역할을 한다. CDK9/CyclinT1는RNA 중합효소II를 인산화하고, 중합효소 및 HIV 핵심 단백질 Tat의 활성화 도메인 간의 상호작용을 촉진하며, HIV-1의 전사 과정을 자극한다. 따라서, CDK9의 촉매 활성을 억제하면, MYC등 암 유전자의 전사를 억제하고, 암세포의 성장과 생존을 제어하며, 및 HIV 바이러스의 복제 등을 억제할 수 있다.
CDK16는 인간의 다양한 세포 및 조직 유형에서 발현되며, 뇌와 고환에서 가장 많이 발현된다. CDK16의 활성화는 CyclinY에 따라 다르다. CDK16의 녹아웃은 마우스의 정상적인 성장에 영향을 미치지 않지만, 수컷 마우스의 불임을 유발하여 CDK16이 정자 생성에 매우 중요한 역할을 한다는 것을 나타낸다. CDK16의 과발현은 폐암 및 간암과 같은 다양한 암세포의 성장 및 침윤을 촉진할 수 있으며, 이러한 효과는 CDK16에 의한 종양 억제 인자 p27의 하향조절과 관련이 있을 수 있다.
CDK5는 CDK 패밀리의 비교적 특수한 단백질로, 비록 단백질 서열은 기타 CDK 구성원과 많은 유사성을 갖지만, CDK5의 주요 기능은 p35 및 p39등과 같은 비사이클린(Cyclin) 단백질에 의존한다. CDK5는 인간의 많은 조직에서 발현되지만, 이의 활성화 인자 p35 및 p39등은 대부분 뉴런에서 발현되기 때문에, 그 기능은 주로 신경계에 집중된다. Tau, Axin, CRMP2 및Neurofilament 등과 같은 다양한 뉴런 단백질을 인산화함으로써, CDK5는 뉴런 이동, 축삭 성장, 신경 시냅스 형성, 기억 형성 및 통증 인식 등과 같은 다양한 뉴런의 생리 기능을 조절할 수 있다. 신경퇴행성 환자의 뉴런에서, CDK5는 p35의 스플라이소솜(Spliceosome) p25와 보다 안정적으로 결합되고, 비정상적으로 활성화되어, 신경 세포의 퇴행 및 사멸을 일으킨다. 이 밖에, CDK5는 면역 반응, 혈관 신생, 세포 주기 조절, DNA 손상 반응, 세포 노화 및 세포 사멸 등에서도 일정한 역할을 한다. 따라서, CDK5는 점차 항 신경 퇴행성 질환 및 암 등에 대한 중요한 표적이 되고 있다.
신경 영양 인자 수용체 키나아제(NeuroTrophinReceptor Kinase, NTRK) 패밀리는 TRKA, TRKB 및 TRKC를 포함하고, 이들은 각각 NTRK1, NTRK2 및 nTRK3 유전자에 의해 암호화되며, 일반적으로 신경조직에서 발현된다. TRK 수용체는 다양한 신경 영양 인자에 의해 활성화될 수 있고, 여기서, NGF는 주로 TRKA를 활성화하며, BDNF 및 nT-4/5는 주로 TRKB를 활성화하고, BT-3 인자는 주로 TRKC를 활성화한다. TRK가 해당 리간드에 결합된 후, 이량체화, 인산화가 일어나, 하류의 PI3K/AKT, RAS/RAF/MEK 및 PLC-gamma 등과 같은 신호 전달 경로를 활성화하여 세포의 증식과 생존을 촉진한다.
NTRK 유전자 융합 돌연변이는 다양한 암과 관련이 있는 것으로 입증되었으며, 유전자 융합을 통해 NTRK 유전자(주로 NTRK1 및 nTRK3)는 다른 유전자와 융합된 후, 전사되고, 지속적으로 활성화된 TRK 단백질로 번역되어, TRK 융합 돌연변이의 종양 세포의 성장과 증식을 구동한다. NTRK 융합 돌연변이의 확률은 전체 성인암의 약 0.31%, 전체 청소년 암의 0.34%를 차지하며, NTRK3의 융합 돌연변이는 분비성 유방암, 섬유육종, 침샘암 등과 같은 일부 희귀 종양에서 자주 볼 수 있고, NTRK1 돌연변이는 주로 폐선암, 결장암 등과 같은 일반적인 암 유형에서 발견되며 돌연변이 발생률이 비교적 낮다. 이 밖에, NGF-TRKA 신호 전달 경로의 과도한 활성화는 염증성 통증 및 암성 통증의 발병 메커니즘에도 중요한 역할을 한다.
결론적으로, 서로 다른 아형에 대한 CDK, TRK 등 신규 키나아제 억제제의 개발은 중요한 의미가 있다.
본 발명은 CDK, TRK 등 다양한 키나아제의 억제에 사용될 수 있는 신규 키나아제 억제제를 제공한다.
본 발명의 제1 양태에 따르면, 하기 식 (I)로 표시되는 구조의 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물을 제공한다.
Figure pct00001
(I)
“*”는 키랄 중심을 나타내고;
X는 수소, 중수소, 할로겐, C1-4 알킬, OR1, NR1R2, 또는 NR1C(O)R3이며;
각각의 R은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이거나; 또는 2개의 R이 동일한 탄소 원자에 동시에 연결될 때, 상기 2개의 R은 이에 연결된 탄소 원자와 선택적으로 함께 카르보닐기(C=O)를 형성할 수 있으며;
G는 NRf, O, S, S(O), S(O)2 또는 CRgRg이고;
p는 0, 1, 2, 또는 3이며;
m 및 n은 각각 독립적으로 0, 1, 2, 또는 3이고; 전제 조건은 m 및 n은 동시에 0이 될 수 없는 것이며;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이고;
R3은 C1-4 알킬, C2-4 알케닐(alkenyl), 또는 C2-4 알키닐(alkynyl)이며;
Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 시아노 치환된 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬(cycloalkyl), 4-8원 헤테로시클릴, 아릴(aryl), 헤테로아릴(heteroaryl), C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, S(O)2R4, 또는 S(O)2NR1R2이고;
각각의 Rg는 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 카르보닐기(C=O)를 형성하거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 3-8원 고리 구조를 형성하고, 해당 고리 구조는 N, O, S로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 헤테로원자를 선택적으로 포함하며;
R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고;
여기서, 각각의 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 그리고 각각 독립적으로 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, CN, NO2, OR1, SR1, NR1R2, C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R4, 또는 S(O)2R4이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되는 1-3개의 치환기에 의해 치환되며, 전제 조건은 형성된 화학 구조는 안정적이고 의미가 있다는 것이고; 여기서, R1, R2, R4의 정의는 상술한 바와 같으며;
특별한 설명이 없는 한, 상기 아릴은 6-12개의 탄소 원자를 포함하는 방향족기이고; 헤테로아릴은 5-15원 헤테로방향족기이며; 고리 구조는 헤테로원자를 포함하거나 포함하지 않는 포화 또는 불포화 시클릭기이다.
다른 바람직한 예에서, “*”는 키랄 중심을 나타내고;
X는 수소, 중수소, 할로겐, C1-4 알킬, OR1, NR1R2, 또는 NR1C(O)R3이며;
각각의 R은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이거나; 또는 2개의 R이 동일한 탄소 원자에 동시에 연결될 때, 상기 2개의 R은 이에 연결된 탄소 원자와 선택적으로 함께 카르보닐기(C=O)를 형성할 수 있으며;
G는 NRf, O, S, S(O), S(O)2 또는 CRgRg이고;
p는 0, 1, 2, 또는 3이며;
m 및 n은 각각 독립적으로 1, 2, 또는 3이고;
R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이며;
R3은 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, 또는 C2-4 알키닐이고;
Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, 또는 S(O)2R4이며;
각각의 Rg는 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 카르보닐기(C=O)를 형성하거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 3-8원 고리 구조를 형성하고, 해당 고리 구조는 N, O, S로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 헤테로원자를 선택적으로 포함하며;
R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고;
각각의 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 그리고 각각 독립적으로 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, CN, NO2, OR1, SR1, NR1R2, C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R4, 또는 S(O)2R4로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되는 1-3개의 치환기에 의해 치환되며, 전제 조건은 형성된 화학 구조는 안정적이고 의미가 있다는 것이고; 여기서, R1, R2, R4의 정의는 상술한 바와 같으며;
특별한 설명이 없는 한, 상기 아릴은 6-12개의 탄소 원자를 포함하는 방향족기이고; 헤테로아릴은 5-15원 헤테로방향족기이며; 고리 구조는 헤테로원자를 포함하거나 포함하지 않는 포화 또는 불포화 시클릭기이다.
다른 바람직한 예에서, 상기 4-8원 헤테로시클릴은 4-6원 헤테로시클릴이다.
다른 바람직한 예에서, 식 (I)은,
Figure pct00002
또는
Figure pct00003
(II) (III)이며,
“*”는 키랄 중심을 나타내고;
X, R, G, p, m, 및 n의 정의는 본 발명의 제1 양태에 기재된 바와 같다.
다른 바람직한 예에서, X는 수소, 할로겐, C1-4 알킬이고; R은 수소이거나, 또는 2개의 R은 이에 연결된 탄소 원자와 함께 카르보닐기(C=O)를 형성한다.
다른 바람직한 예에서, G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서, Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, 또는 S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴이다.
다른 바람직한 예에서, 상기
Figure pct00004
는 4 또는 6원 고리이다.
다른 바람직한 예에서, 식 (I)은,
Figure pct00005
(IV)이며,
“*”는 키랄 중심을 나타내고;
X는 수소, 할로겐, C1-4 알킬이며;
G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴이다.
다른 바람직한 예에서, 식 (I)은,
Figure pct00006
(V)이며,
“*”는 키랄 중심을 나타내고;
X는 수소, 할로겐, C1-4 알킬이며;
G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서, Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴이다.
다른 바람직한 예에서, Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 시아노 치환된 C1-4 알킬, C3-8 시클로알킬, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬이다.
다른 바람직한 예에서, 각각의 Rg는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐이다.
다른 바람직한 예에서, 식 (IV) 또는 식 (V)에서,
“*”는 키랄 중심을 나타내고;
X는 수소, 불소, 또는 메틸(methyl)이며;
G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서Rf는 수소, 메틸, 에틸, CH2CF3, CH2CN, 시클로프로필, C(O)CH3, 또는 S(O)2CH3이고; 각각의 Rg는 각각 독립적으로 수소 또는 불소이다.
다른 바람직한 예에서, 상기 식 (I)의 화합물은,
Figure pct00007
Figure pct00008
Figure pct00009
Figure pct00010
Figure pct00011
로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 또는 이에 대응되는 거울상 이성질체의 혼합물이다.
다른 바람직한 예에서, 상기 염은 염산염이다.
본 발명의 제2 양태에 따르면, 약학적 조성물을 제공하고, 상기 약학적 조성물은 유효량의 본 발명의 제1 양태에 따른 식 I 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물을 포함한다.
다른 바람직한 예에서, 상기 약학적 조성물은 (i) 유효량의 본 발명의 제1 양태에 따른 식 I 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물; 및 (ii) 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함한다.
본 발명의 제3 양태에 따르면, 본 발명의 제1 양태에 따른 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물, 또는 본 발명의 제2 양태에 따른 약학적 조성물의 용도를 제공하고,
(a) 키나아제 활성 또는 발현량과 관련된 질환 치료용 약물의 제조;
(b) 키나아제 표적 억제제의 제조; 및/또는
(c) 체외 키나아제 활성의 비치료적 억제;에 사용되며,
여기서 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명의 제4 양태에 따르면, 본 발명의 제1 양태에 따른 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염 및 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물, 또는 본 발명의 제2 양태에 따른 약학적 조성물의 용도를 제공하고, 키나아제 억제제로 사용되거나, 또는 키나아제 고발현과 관련된 질환을 치료하는 데 사용할 수 있고; 여기서, 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명의 제5 양태에 따르면, 키나아제 활성을 억제하는 방법을 제공하고, 상기 방법은 본 발명의 제1 양태에 따른 식 I 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물의 억제 유효량을 억제 대상에 투여하거나, 또는 본 발명의 제2 양태에 따른 약학적 조성물의 억제 유효량을 억제 대상에 투여하는 단계를 포함하고; 여기서, 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 예에서, 상기 질환은 DNA 및 RNA 바이러스 감염, B세포 림프종, 단핵구 백혈병, 비종대성 적혈구 증가증(splenomegalic polycythemia), 과호산구 증가 증후군, 본태성 혈소판 감소증, 전신성 거대세포 질환, 혈액 종양, 고형 종양, 신경 퇴행성 질환으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
다른 바람직한 예에서, 상기 질환은 알레르기성 천식, 골수 섬유화, 류마티스 관절염, 염증성 통증, 암성 통증, 후천성 면역 결핍증, 헤르페스 바이러스 및 인플루엔자 바이러스, 분비성 유방암, 섬유육종, 침샘암, 간암, 직장암, 방광암, 인후암, 비소세포폐암, 소세포폐암, 폐선암, 폐편평세포암, 유방암, 전립선암, 교세포종, 난소암, 두경부편평세포암, 자궁경부암, 식도암, 신장암, 췌장암, 결장암, 피부암, 림프종, 위암, 다발성 골수암, 뇌종양, 폐암, 알츠하이머병, 파킨슨병으로 이루어진 군으로부터 선택된다.
본 발명의 제6 양태에 따르면, 본 발명의 제1 양태에 따른 화합물의 제조 방법을 제공하고, 상기 방법은,
Figure pct00012
불활성 용매에서, 식 Ia의 화합물을 식 Ib의 화합물과 반응시켜, 식 I의 화합물을 획득하는 단계를 포함한다.
다른 바람직한 예에서, 상기 방법은,
Figure pct00013
(1) 불활성 용매에서, 식 1-A3의 화합물로 탈보호를 수행하여 식 1-A3-a의 화합물을 획득하는 단계;
(2) 불활성 용매에서, 식 1-A3-a의 화합물을 식 1-A3-b의 화합물과 환원성 아민화 반응시켜, 식 1-A4의 화합물을 획득하는 단계; 및
(3) 불활성 용매에서, 식 1-A4의 화합물로 환원 반응을 수행하여 식 Ia의 화합물을 획득하는 단계를 더 포함한다.
본 발명의 주요 이점은 다음과 같다.
1. 식 I로 표시되는 화합물을 제공한다.
2. 신규 구조의 CDK, TRK(CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK9, CDK16 및 TRKA, TRKB, TRKC등을 포함함) 등 키나아제 억제제 및 이의 제조 및 응용을 제공하고, 상기 억제제는 저농도에서 상기 단백질 키나아제의 활성을 억제할 수 있다.
3. CDK, TRK 등의 키나아제 활성과 관련된 질환을 치료하는 약학적 조성물을 제공한다.
4.경구 흡수가 양호한 CDK, TRK등의 키나아제 억제제를 제공한다.
본 발명자는 장기적이고 심층적인 연구 끝에 예기치 않게 신규 구조의 키나아제 억제제로서의 다환 화합물, 및 이들의 제조 방법 및 응용을 발견하였다. 본 발명의 화합물은 CDK, TRK등을 포함하는 다양한 키나아제 활성과 관련된 여러 질환의 치료에 적용될 수 있다. 상기 발견에 기반하여, 본 발명자는 본 발명을 완성하였다.
용어
특별히 설명되지 않는 한, 본문에서 언급되는 “또는”은 "및/또는”과 같은 의미를 가진다 (“또는” 및 "와”를 의미한다).
특별히 설명되지 않는 한, 본 발명의 화합물 중에서, 각각의 키랄 탄소 원자(카이랄 중심)는 선택적으로 R 배열 또는 S 배열, 또는 R 배열 및 S 배열의 혼합물일 수 있다.
본문에서 사용된 바와 같이, 독립적으로 또는 기타 치환기의 일부일 때 용어 "알킬기”는 탄소 원자를 포함하는 직쇄 (즉, 무측쇄) 또는 측쇄 포화 탄화수소기, 또는 직쇄와 측쇄가 조합된 라디칼이다. 알킬기 앞에 있는 탄소 원자수가 한정될 때, 상기의 알킬기는 1-10개의 탄소 원자를 함유하는 것을 의미한다. 예를 들어, C1-8알킬기는 메틸기, 에틸기, 프로필기, 이소프로필기, 부틸기, 이소부틸기, sec-부틸기, tert-부틸기 또는 유사한 라디칼을 포함하는 1-8개의 탄소 원자를 함유하는 알킬기를 의미한다.
본문에서 사용된 바와 같이, 독립적으로 또는 기타 치환기의 일부일 때 용어“알케닐기”는 직쇄 또는 측쇄를 의미하며 적어도 하나의 탄소 - 탄소 이중 결합을 가지는 탄소 사슬 라디칼을 의미한다. 알케닐기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 알케닐기 앞에 가지는 탄소 원자수가 한정될 때(예를 들어, C2-8), 상기 알케닐기는 2-8개의 탄소 원자를 함유한다. 예를 들어 C2-8알케닐기는 2-8개의 탄소 원자를 함유하는 것을 의미하며 알케닐기는 에틸알케닐기, 프로필알케닐기, 1,2-부틸알케닐기, 2,3-부틸알케닐기, 부틸디알케닐기 또는 유사한 라디칼을 포함한다.
본문에서 사용된 바와 같이, 독립적으로 또는 기타 치환기의 일부일 때 용어“알키닐기”는 적어도 하나의 탄소 - 탄소 삼중 결합을 가지는 지방족 탄화수소 라디칼을 의미한다. 상기 알키닐기는 직쇄 또는 측쇄 또는 이의 조합일 수 있다. 알키닐기 앞에 가지는 탄소 원자수가 한정될 때(예를 들어, C2-8알키닐기), 상기 알키닐기는 2-8개의 탄소 원자를 함유한다. 예를 들어, 용어“C2-8알키닐기”는 2-8개의 탄소 원자를 함유하는 직쇄 또는 측쇄 알키닐기를 의미하며, 에틸알키닐기, 프로필알키닐기, 이소프로필알키닐기, 부틸알키닐기, 이소부틸알키닐기, sec-부틸알키닐기, tert-부틸알키닐기 또는 유사한 라디칼을 포함한다.
본문에서 사용된 바와 같이, 독립적으로 또는 기타 치환기의 일부일 때, 용어“시클로알킬기”는 부분적으로 포화된 단일 고리, 이중 고리 또는 다중 고리(축합 고리, 브리지 고리 또는 스피로 고리)계의 라디칼이다. 어느 시클로알킬기 앞에 가지는 탄소 원자수가 한정될 때(예를 들어, C3-10) 상기 시클로알킬기는 3-10개의 탄소 원자를 함유하는 것을 의미한다. 일부 바람직한 실시예에 있어서, 용어“C3-8시클로알킬기”는 3-8개의 탄소 원자를 가지는 포화 또는 부분적으로 포화된 단일 고리 또는 디시클로알킬기를 의미하며 시클로프로필기, 시클로부틸기, 시클로펜틸기, 시클로헵틸기 또는 이와 유사한 라디칼을 포함한다. "스피로시클로알킬기”는 단일 고리 사이에 한개의 탄소 원자(스피로 원자라고 지칭)를 고유하는 이중 고리 또는 다중 고리 라디칼을 의미하며, 이는 하나 또는 복수의 이중 결합을 함유할 수 있으나 완전히 공액된 ð전자 시스템을 가지는 고리는 없다. "브리지 시클로알킬기”는 임의의 두개 고리가 직접적으로 연결되지 않은 두개의 탄소 원자를 공유하는 올 카본(all-cabon) 다중 고리 라디칼을 의미한다. 이는 하나 또는 복수 개의 이중 결합을 함유할 수 있으나 완전히 공액된 ð전자 시스템을 가지는 고리는 없다. 상기 시클로알킬기가 함유하는 원소 전체가 탄소 원자이다. 이하는 시클로알킬기의 일부 예이며, 본 발명은 이하 시클로알킬기에 의해 제한되지 않는다.
Figure pct00014
특별히 상반되는 서술이 없는 한 하기의 명세서와 청구항의 용어는 하기와 같은 의미를 가진다. "아릴기”는 공액된 ð전자 시스템을 가지는 올 카본 단일 고리 또는 축합 다중 고리(즉 인접한 탄소 원자 쌍을 공유하는 고리) 라디칼을 의미하고 예를 들어 페닐기(phenyl group)와 나프탈기(naphthyl group)이다. 상기 아릴고리는 기타 고리형 라디칼(포화와 불포화 고리를 포함)에 축합될 수 있으나 질소, 산소 또는 유황과 같은 헤테로 원자를 함유할 수 없으며 동시에 모체를 연결하는 위치는 반드시 공액 ð전자 시스템을 가지는 고리의 탄소 원자에 있어야 한다. 아릴기는 치환 또는 비치환될 수 있다. 하기는 아릴기의 일부 예이며 본 발명은 하기의 아릴기에 제한되지 않는다.
Figure pct00015
"헤테로아릴"은 하나 이상의 헤테로원자를 함유하는 헤테로방향족 기를 지칭한다. 본 명세서에서 언급된 헤테로원자는 산소, 황 및 질소를 포함한다. 예를 들어, 푸릴, 티에닐, 피리딜, 피라졸릴, 피롤릴, N-알킬피롤릴, 피리미디닐, 피라지닐, 이미다졸릴, 테트라졸릴 등. 헤테로아릴 고리는 아릴, 헤테로시클릴 또는 시클로알킬 고리에 융합될 수 있으며, 여기서 모 구조에 부착된 고리는 헤테로아릴 고리이다. 방향족 모노사이클릭 또는 폴리사이클릭 그룹(질소, 산소 및 황으로부터 선택적으로 선택됨), 또는 아릴 그룹에 융합된 헤테로사이클릭 그룹(질소, 산소 및 황에서 선택적으로 선택된 하나 이상의 헤테로원자를 포함)을 함유하는 폴리사이클릭 그룹이 형성되고 부착 부위가 아릴기. 헤테로아릴 기는 임의로 치환되거나 치환되지 않을 수 있다. 하기는 헤테로아릴기의 일부 예이며, 본 발명은 하기 헤테로아릴기로 제한되지 않는다. 이 중 마지막 3개의 헤테로아릴기는 본 발명의 초점인 삼환식 헤테로아릴기이다.
Figure pct00016
Figure pct00017
“헤테로아릴기”는 하나 내지 복수 개의 헤테로 원자의 헤테로 방향족 라디칼을 의미한다. 여기서 의미하는 헤테로 원자는 산소, 유황과 질소를 포함한다. 예를 들어, 퓨라닐(furyl furyl), 티에닐(thienyl group), 피리딜기(pyridyl group), 피라졸일기(pyrazolyl group), 피롤일기(pyrrolyl group), N-알킬피롤일기(N-alkylpyrrolyl), 피리미디닐기(pyrimidiny group), 피라지닐기(pyrazinyl group), 이미다졸기 (imidazole group), 테트라졸기 (tetrazol group)등을 포함한다. 상기 헤테로아릴기는 아릴기, 헤테로시클로기 또는 시클로알킬 고리에 축합될 수 있으나, 여기서, 모체 구조와 함께 연결하는 고리는 헤테로아릴 고리이다. 헤테로아릴기는 선택적으로 치환 또는 비치환된 것일 수 있다. 하기는 헤테로아릴기의 일부 예이며, 본 발명은 하기의 헤테로아릴기에 의해 제한되지 않는다.
여기서, 마지막 세 개의 헤테로아릴기는 삼중 고리 헤테로아릴기이며, 본 발명의 중점이다.
Figure pct00018
본문에서 사용된 바와 같이, 독립적으로 또는 기타 치환기의 일부일 때 용어“할로겐”은 F, Cl, Br과 I를 의미한다.
본문에서 사용된 바와 같이, 용어“치환”("임의의” 수식이 있거나 없을 때)은 특정 라디칼 상의 하나 또는 복수 개의 수소 원자가 특정된 치환기에 의해 치환된 것을 의미한다. 특정된 치환기는 앞에서 상응하게 설명한 치환기 또는 각 실시예에서 나타난 치환기이다. 특별히 설명되지 않는 한, 어느 임의로 치환된 라디칼은 상기 라디칼의 임의의 치환될 수 있는 위치에 특정된 그룹으로부터 선택되는 치환기를 가지고 상기 치환기는 각 위치에서 같거나 상이할 수 있다. 고리형 치환기 예를 들어, 헤테로시클로기는 시클로알킬기와 같은 다른 하나의 고리와 잇닿아 있을 수 있어 스피로 이중 고리계를 형성한다. 당업자는 본 발명에 의해 예상되는 치환기의 조합은 그런 안정한 또는 화학적으로 실현 가능한 조합임을 이해해야 한다. 상기 치환기는 예를 들어, C1-8알킬기, C2-8알케닐기, C2-8알키닐기, C3-8시클로알킬기, 3- 내지 12-원 헤테로시클로기, 아릴기, 헤테로아릴기, 할로겐, 히드록실기, 카르복실기(-COOH), C1-8알데히드기, C2-10아실기, C2-10에스테르기, 아미노기이다(이에 한정되지 않음).
편의상 및 통상적인 이해와 부합되기 위하여, 용어“임의의 치환” 또는 "선택적으로 치환”은 치환기에 의해 치환될 수 있는 위치에 적용되고 화학적으로 실현할 수 없는 치환은 포함하지 않는다.
특별히 설명되지 않는 한, 본문에서 사용된 용어“약학적으로 허용 가능한 염”은 대상(예를 들어, 사람)의 조직과 접촉하여 적절하지 않는 부작용을 발생시키지 않는 염을 의미한다. 일부 실시예에서 본 발명의 어느 화합물의 약학적으로 허용 가능한 염은 산성을 가지는 라디칼의 본 발명의 화합물의 염(예를 들어, 칼륨염, 나트륨염, 마그네슘염, 칼슘염) 또는 염기성 라디칼을 가지는 라디칼의 본 발명의 화합물의 염(예를 들어, 황산염, 염산염, 인산염, 질산염, 탄산염)을 포함한다.
용도:
본 발명은 식 (I)의 화합물, 또는 이들의 중수소화 형태, 이들의 약학적으로 허용 가능한 염, 광학 이성질체(거울상 이성질체 또는 부분입체 이성질체가 존재하는 경우), 수화물, 용매화물, 또는 키나아제 활성을 억제하기 위한 식 (I)로 표시되는 화합물, 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물을 포함하는 약학적 조성물의 용도를 제공한다. 여기서, 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK 를 포함하지만 이에 한정되지 않는다.
본 발명의 화합물은 키나아제 억제제로 사용될 수 있으며, 바람직하게, 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK이다.
암 환자의 몸에서, 위에서 언급된 다양한 단백질 키나아제의 발현 또는 활성이 현저히 증가한다. 이러한 과발현 및/또는 비정상적인 단백질 키나아제 활성 수준은 종양의 발병과 직접적인 관련이 있다. 본 발명의 화합물은 이러한 단백질 키나아제의 단일 및/또는 이중 억제제이다. 이러한 단백질 키나아제의 활성을 조절하여 질환을 예방, 완화 또는 치유한다. 상기 질환은 알레르기성 천식, 골수 섬유화, 류마티스 관절염, 염증성 통증, 암성 통증, 후천성 면역 결핍증, 헤르페스 바이러스 및 인플루엔자 바이러스 등 DNA 및 RNA 바이러스 감염, B세포 림프종, 단핵구 백혈병, 비종대성 적혈구 증가증, 과호산구 증가 증후군, 본태성 혈소판 감소증, 전신성 거대세포 질환, 분비성 유방암, 섬유육종, 침샘암, 간암, 직장암, 방광암, 인후암, 비소세포폐암, 소세포폐암, 폐선암, 폐편평세포암, 유방암, 전립선암, 교세포종, 난소암, 두경부편평세포암, 자궁경부암, 식도암, 신장암, 췌장암, 결장암, 피부암, 림프종, 위암, 뇌종양, 폐암, 다발성 골수암 등 다양한 혈액 종양 및 고형 종양, 및 알츠하이머병 및 파킨슨병 등 신경 퇴행성 질환을 포함한다.
어떤 관점에서 보면, 다중 표적 키나아제 억제제는 여러 상이한 키나아제를 동시에 간섭하고, 생성된 항종양 효과는 종종 부가성을 가지므로, 다양한 암을 보다 효과적으로 치료할 수 있는 가능성을 가지고 있다.
본 발명의 화합물은 다른 소분자 약물 또는 PD-1 억제제(예를 들어, Opdivo® 및 Keytruda®)와 같은 생물학적 제제와의 조합 약물로서 다양한 암 및 관련 질환을 치료할 수 있다.
본 발명의 화합물 및 이의 중수소화 형태, 및 약학적으로 허용 가능한 염 또는 이의 이성질체(존재하는 경우) 또는 이의 수화물 및/또는 조성물은 약학적으로 허용되는 부형제 또는 담체와 함께 제형화될 수 있으며, 획득된 조성물은 인간 또는 동물에게 투여되어 질병, 증상 및 질환을 치료하는데 사용될 수 있다. 조성물은 정제, 환제, 현탁제, 용액제, 유제, 캡슐, 에어로졸, 멸균 주사 용액, 멸균 분말 등일 수 있다. 바람직한 실시형태에서, 상기 약학적 조성물은 경구 투여에 적합한 제형이고, 정제, 용액제, 현탁액, 캡슐제, 과립제, 분제를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 환자에게 투여되는 본 발명의 화합물 또는 약학적 조성물의 양은 고정되어 있지 않으며, 일반적으로 약학적 유효량으로 투여된다. 동시에, 실제 투여되는 화합물의 양은 치료하는 질병, 선택된 투여 경로, 실제 투여되는 화합물, 환자의 개인 상황 등을 포함하여 실제 상황에 따라 의사가 결정할 수 있다. 본 발명의 화합물의 투여량은 치료의 특정 용도, 투여 방식, 환자 상태, 의사의 판단에 의해 결정된다. 약학적 조성물에서 본 발명의 화합물의 비율 또는 농도는 투여량, 물리 화학적 특성, 투여 경로 등을 포함하는 다양한 인자에 의해 결정된다.
이해해야 할 것은, 본 발명의 범위 내에서 본 발명의 상기 각 기술 특징과 하기(예를 들어, 실시예)에서 구체적으로 설명되는 각 기술 특징 사이는 서로 결합되어 신규하거나 바람직한 기술적 해결수단을 구성할 수 있다.
화합물의 일반 합성 방법
본 발명의 식 I의 화합물은 아래 방법을 통해 제조할 수 있다.
반응식 1:
Figure pct00019
불활성 용매에서, (Ia) 화합물을 (Ib)와 반응시켜 (I) 화합물을 획득하고;
상기 각 식에서, 각 기의 정의는 상술한 바와 같다. 각 단계의 시약 및 조건은 이러한 제조 방법을 위한 당업계의 통상적인 시약 또는 조건을 선택할 수 있으며, 본 발명의 화합물 구조가 개시된 후, 상기 선택은 당업자가 당업계의 지식에 따라 수행할 수 있다.
보다 구체적으로, 본 발명의 일반식 I로 표시되는 화합물은 다음과 같은 방법으로 제조할 수 있으나, 상기 방법의 조건, 예를 들어, 반응물, 용매, 염기, 화합물의 사용량, 반응 온도, 반응에 필요한 시간 등은 아래의 해석에 한정되지 않는다. 본 발명의 화합물은 본 명세서에 기재되거나 당업계에 공지된 다양한 합성 방법을 선택적으로 조합하여 편리하게 제조할 수도 있으며, 이러한 조합은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 당업자에 의해 용이하게 수행될 수 있다.
본 발명의 제조 방법에서, 각 반응은 일반적으로 불활성 용매에서, 일반적으로 -20 ℃ ~ 150 ℃(바람직하게는 0 ℃ ~ 120 ℃)의 반응 온도에서 수행된다. 각 단계의 반응 시간은 일반적으로 0.5h ~ 48h이고, 바람직하게는 2h ~ 12h이다.
화합물 IIa 및 IIIa은 화합물 I의 일부분이다. 반응식 2는 화합물 IIa 및 IIIa의 일반적인 합성 방법을 설명한다.
반응식 2:
Figure pct00020
상기 반응식 1-2에서 X, R, G, m, n, p의 정의는 본 발명의 제1 양태에서 표현된 것과 동일하다.
중간체 Ib는 Journal of Medicinal Chemistry, 2005, 2371-2387 및 여기에 인용된 문헌에 따라 제조되었다.
약물 조성물과 투여 방법
본 발명의 화합물은 일련의 단백질 키나제에 대해 우수한 억제 활성을 갖기 때문에, 본 발명의 화합물 및 그의 다양한 결정 형태, 광학 이성질체, 제약상 허용되는 무기 또는 유기 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화된 화합물 또는 용매화물 및 본 발명의 화합물을 주성분으로 하는 약학적 조성물은 CDK 및 TRK와 같은 키나제의 활성 또는 발현과 관련된 질병의 치료, 예방 및 완화에 사용될 수 있다.
본 발명의 약물 조성물은 안전한 유효량 범위 내의 본 발명의 화합물 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염 및 허용 가능한 부형제 또는 담체를 포함한다. 여기서, "안전한 유효량”은 심한 부작용을 발생하지 않으며 화합물의 량이 병세가 뚜렷하게 개선될 수 있는 량을 의미한다. 통상적으로 약물 조성물은 본 발명의 화합물 1-2000 mg /제를 포함하고 더욱 바람직하게는 본 발명의 화합물5-200 mg /제를 포함한다. 비교적 바람직하게는 상기 “일제”는 하나의 캡슐 또는 알약이다.
“약학적으로 허용 가능한 담체”는 하나 또는 복수의 상용성 고체 또는 액체 충진제 또는 겔 물질을 의미하고, 이들은 인간에게 사용하기 적합하며 충분한 순도와 충분히 낮은 독성을 가져야한다. "상용성”은 조성물 중의 각 성분이 본 발명의 화합물 및 이들 사이에 서로 혼합될 수 있으나 화합물의 약효를 뚜렷하게 저하시키지 않는것을 의미한다. 약학적으로 허용되는 담체 부분의 예는 충전제(또는 희석제), 붕해제, 윤활제, 결합제, 염기를 포함하지만 이에 제한되지는 않습니다, 유화제, 습윤제, 착색제, 향료, 안정제, 항산화제, 방부제, 발열원이 없는 물 등이 있다.
본 발명의 화합물 또는 약물 조성물의 투여 방식은 특별히 제한되지 않고 전형적인 투여 방식은 경구 투여, 종양 내, 직장, 비경구(정맥 내, 근육 내 또는 피하), 국소 투여를 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다.
경구 투여를 위한 고형 제형은 캡슐, 정제, 환제, 분말 및 과립을 포함한다. 이러한 고체 투여 형태에서, 활성 화합물은 하나 이상의 통상적인 불활성 부형제(또는 담체)와 혼합된다. 캡슐, 정제 및 알약에서 제형은 완충제를 함유할 수도 있습니다.정제, 슈가필(Sugar pill), 캡슐제, 환제 및 과립제와 같은 고체 제형은 케이싱(casing) 및 당업계에서 공지된 재료와 같은 포장재와 쉘소재를 채용할 수 있다. 이들은 불투명제를 포함할 수 있고 이런 조성물 중의 활성 화합물 또는 화합물의 방출은 소화도내의 어느 부분에서 연장되어 방출될 수 있다. 채용할 수 있는 포매성분의 구현예는 중합물질과 왁스계 물질이다. 필요 시 활성물질은 상기 부형제 중의 하나 또는 복수와 미스로 캡슐 형식을 형성할 수 있다.
이러한 불활성 희석제 외에, 조성물은 습윤제 유화제, 현탁제, 감미제, 교미제 및 향료와 같은 보조제를 포함할 수 있다.
활성 화합물 외에도 현탁액에는 현탁제가 포함될 수 있습니다.
비경구 주사를 위한 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 무균수, 무수 용액, 분산액, 현탁액 또는 에멀전 및 다시 무균의 주사 용액으로 용해되는 용액 또는 분산액의 무균분말을 포함할 수 있다. 적합한 함수와 비수성 담체, 희석제, 용매 또는 부형제는 물, 에탄올, 폴리올 및 이들의 적합한 혼합물을 포함한다.
국부 투여에 사용되는 본 발명의 화합물의 제형은 연고제, 산제, 패치, 스프레이, 흡입제를 포함한다. 활성 성분은 무균 조건에서 생리 학적으로 허용 가능한 담체 및 임의의 방부제, 완충액 또는 필요 시 필요할 수 있는 추진제와 함께 혼합한다.
본 발명의 화합물은 단독 투여 또는 기타 약학적으로 허용 가능한 화합물과 병용 투여할 수 있다.
약물 조성물을 사용시, 안전한 유효량의 본 발명의 화합물을 치료가 필요한 표유동물(예:사람)에 적용한다. 여기서, 사용시 정량(dosage)은 약학적으로 유효한 투여량이고 체중이 60 kg인 사람은 통상적으로 일 투여량이1 ~ 2000 mg이며 바람직하게는 5 ~ 50 mg이다. 구체적인 정량은 또한 숙련된 의사의 숙련도 내에서 투여 경로, 환자의 건강 상황 등 요소를 고려해야 한다.
본 발명의 주요 이점은 다음과 같다.
1. 식 I로 표시되는 화합물을 제공한다.
2. 신규 구조의 CDK, TRK(CDK2, CDK4, CDK5, CDK6, CDK9, CDK16 및 TRKA, TRKB, TRKC등을 포함함) 등 키나아제 억제제 및 이의 제조 및 응용을 제공하고, 상기 억제제는 저농도에서 상기 단백질 키나아제의 활성을 억제할 수 있다.
3. CDK, TRK 등의 키나아제 활성과 관련된 질환을 치료하는 약학적 조성물을 제공한다.
4.경구 흡수가 양호한 CDK, TRK등의 키나아제 억제제를 제공한다.
실시예 1: 화합물 1S의 제조
Figure pct00021
화합물 1S-a(600 mg, 2.21 mmol)를 메탄올(20 mL)에 용해시킨 다음, 테트라하이드로피라논(1S-b, 265 mg, 2.65 mmol) 및 트리에틸아민(224 mg, 2.21 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 50 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 그 다음, 실온에서 소듐 시아노보로하이드라이드(208 mg, 3.31 mmol)를 첨가하고 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 감압 하에 반응 혼합물로부터 메탄올을 제거한 다음, 물(10 mL)을 첨가하고, 다음 디클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켰다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:아세트산에틸 = 1:1)하여, 황색 고체 화합물 1S-c(580 mg, 수율 82%)를 획득하였다. MS m/z 320.4 [M+H]+.
실온에서 화합물 1S-c(580 mg, 1.82 mmol)의 메탄올(15 mL) 용액에 팔라듐 탄소 촉매(10%, 70 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 50:1)하여 갈색 고체 화합물 1S-d(460 mg, 수율 88%)를 획득하였다. MS m/z 290.4 [M+H]+.
화합물 1S-d(200 mg, 0.69 mmol)와 Ib (230 mg, 0.69 mmol)를 톨루엔(6 mL)에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 90 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 80:1)하여 황색 고체 화합물 1S (290 mg, 수율 75%)를 획득하였다. MS m/z 559.8 [M+H]+.
화합물 1S(290 mg, 0.52 mmol)를 디클로로메탄(10 mL)에 용해시키고, 아이스배스 하에 염산 메탄올 용액(4.0M, 0.13 mL, 0.52 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 감압 농축하여 용매를 제거하였다. 획득한 조생성물에 물(5 mL)을 첨가한 다음, 동결 건조하여 황색 고체 화합물 1S 염산염(290 mg)을 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.77 (s, 1H), 7.16 (s, 1H), 6.99 (s, 2H), 5.90-5.75 (m, 1H), 4.37 (dd, J = 10.9, 2.4 Hz, 1H), 4.17 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 4.11-4.04 (m, 3H), 3.82-3.70 (m, 2H), 3.63-3.49 (m, 2H), 3.45 (t, J = 11.5 Hz, 2H), 3.29-3.22 (m, 1H), 3.20-3.06 (m, 1H), 2.96 (t, J = 11.8 Hz, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.30-2.19 (m, 2H), 2.18-2.10 (m, 2H), 2.01-1.76 (m, 6H), 1.67-1.53 (m, 2H) ppm. MS m/z 559.8 [M+H]+.
실시예 2: 화합물 2S의 제조
Figure pct00022
화합물 1S-a(500 mg, 1.84 mmol), N-메틸피페리돈(2S-a, 416 mg, 3.68 mmol) 및 아세트산 2방울을 메탄올(15 mL)에 첨가하고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(231 mg, 3.68 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 감압 하에 반응 혼합물로부터 메탄올을 제거한 다음, 물(10 mL)을 첨가하고, 다음 디클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켰다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄: 메탄올 = 30:1)하여 황색 고체 화합물 2S-b (500 mg)을 획득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다.
실온에서 메탄올(15 mL)에 화합물 2S-b(500 mg, 1.50 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 70 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 갈색 고체 화합물 2S-c (280 mg, 수율 62%)를 획득하였다.
화합물 2S-c(280 mg, 0.93 mmol) 및 Ib(310 mg, 0.93 mmol)를 톨루엔(8 mL)에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 90 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 2S (180 mg, 수율 34%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.86 ( bs, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.91-5.70 (m, 1H), 4.23 (dd, J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 3.89 (dd, J = 10.5, 9.0 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.00 -2.88 (m, 3H), 2.79 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.59 - 2.53 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.34-2.16 (m, 7H), 2.14 (s, 3H), 1.94-1.73 (m, 9H), 1.62-1.51(m, 2H), 1.48-1.36 (m, 2H) ppm. MS m/z 572.8 [M+H]+.
화합물 2S(180 mg, 0.31 mmol)를 디클로로메탄(10 mL)에 용해시키고, 아이스배스 하에 염산 메탄올 용액(4.0M, 0.08 mL, 0.32 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 감압 농축하여 용매를 제거하였다. 획득한 조생성물에 물(5 mL)을 첨가한 다음, 동결 건조하여 황색 고체 화합물 2S 염산염(185 mg)을 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.79 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.05-6.97 (m, 2H), 5.92-5.80 (m, 1H), 4.42-4.35 (m, 1H), 4.19 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 4.11-4.07 (m, 1H), 3.81-3.71 (m, 4H), 3.68-3.54 (m, 2H), 3.21-3.11 (m, 4H), 3.06-3.00 (m, 1H), 2.92 (s, 3H), 2.58-2.50 (m, 2H), 2.47 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.32-2.23 (m, 2H), 2.22-2.11 (m, 2H), 1.98-1.77 (m, 4H), 1.67-1.56 (m, 2H) ppm. MS m/z 572.8 [M+H]+.
실시예 3: 화합물 2R의 제조
Figure pct00023
화합물 2R-a(100 mg, 0.43 mmol), N-메틸-4-피페리돈(2S-a, 144 mg, 1.28 mmol) 및 아세트산 2방울의 메탄올(6 mL) 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(80 mg, 1.28 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 2R-b(200 mg)를 획득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다. MS m/z 333.5 [M+H]+.
실온에서 메탄올(6 mL)에 화합물 2R-b(200 mg, 0.60 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 80 mg)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하고 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 유상 화합물 2R-c(93 mg, 2단계 수율 72%)를 획득하였다. MS m/z 303.5 [M+H]+.
화합물 2R-c(50 mg, 0.17 mmol) 및 화합물Ib(55 mg, 0.17 mmol)의 톨루엔(1 mL) 혼합물을 밀봉된 튜브에 넣고, 100 ℃로 가열하여 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 2R(43 mg, 수율 45%)을 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.87 (bs, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.91-5.70 (m, 1H), 4.23 (dd, J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 3.89 (dd, J = 10.4, 9.1 Hz, 1H), 3.69 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.02-2.89 (m, 3H), 2.80 (d, J = 11.0 Hz, 2H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.34-2.15 (m, 7H), 2.14 (s, 3H), 1.95-1.68 (m, 9H), 1.63-1.52 (m, 2H), 1.48-1.36 (m, 2H) ppm. MS m/z 572.8 [M+H]+.
실시예 4: 화합물 3S의 제조
Figure pct00024
화합물 1S-a(1g, 4.25 mmol)를 메탄올(20 mL)에 용해시킨 다음, N-tert-부톡시카르보닐-4-피페리돈(3S-a, 2.54g, 12.75 mmol) 및 아세트산 4방울을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(801 mg, 12.75 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 감압 하에 반응 혼합물로부터 메탄올을 제거한 다음, 물(10 mL)을 첨가하고, 다음 디클로로메탄(3 x 20 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켰다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 3S-b(1.39g, 수율 78%)를 획득하였다. MS m/z 419.5 [M+H]+.
실온에서 메탄올(5 mL)에 화합물 3S-b(190 mg, 0.45 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 60 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 40:1)하여 황색 고체 화합물 3S-c(80 mg, 수율 45%)를 획득하였다. MS m/z 389.5 [M+H]+.
화합물 3S-c(80 mg, 0.21 mmol) 및 Ib(69 mg, 0.21 mmol)를 톨루엔(1 mL)에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 90 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 30:1)하여 황색 고체 화합물 3S-d(30 mg, 수율 22%)를 획득하였다. MS m/z 658.8 [M+H]+.
화합물 3S-d(30 mg, 0.45 mmol)를 메탄올(2 mL)에 용해시키고, 아이스배스 하에 디옥산 염산염 용액(4.0 M, 1.1 mL, 4.4 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 감압 농축하고 용매를 제거하였다. 획득한 농축 용액에 포화탄산수소나트륨 용액을 첨가하여 pH를 7~8로 조절한 후, 디클로로메탄(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켰다. 획득한 조생성물을 분취 박판 크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 3S(13 mg, 수율 51%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.70 (s, 1H), 7.11 (bs, 1H), 7.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.97 (dd, J = 9.0, 2.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.20 (dd, J = 10.0, 2.0 Hz, 1H), 4.03 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 3.67 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.22-3.10 (m, 3H), 3.03 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.89 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.82-2.75 (m, 1H), 2.61 (t, J = 11.5 Hz, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.54-2.47 (m, 1H), 2.44-2.39 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 2H), 2.07 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 1.99-1.89 (m, 2H), 1.86-1.79 (m, 4H), 1.67-1.56 (m, 2H), 1.49-1.38 (m, 2H) ppm. MS m/z 558.8 [M+H]+.
실시예 5: 화합물 4S의 제조
Figure pct00025
화합물 3S-b(500 mg, 1.19 mmol)를 메탄올(10 mL)에 용해시키고, 아이스배스 하에 디옥산 염산염 용액(4.0M, 3 mL, 12 mmol)을 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반한 다음 감압 농축하고 용매를 제거하여 황색 조생성물 화합물 4S-a(500 mg)를 획득하였다. 상기 조생성물 화합물을 다음 반응에 직접 사용하였다. MS m/z 319.5 [M+H]+.
화합물 4S-a(140 mg, 0.36 mmol)를 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, DIPEA(0.2 mL, 1.32 mmol) 및 요오도에탄(137 mg, 0.88 mmol)을 천천히 적가하였다. 상기 반응 혼합물을 50 ℃ 조건에서 밤새 반응시켰다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 유상 화합물 4S-b(56 mg, 수율 45%)를 획득하였다. MS m/z 347.5 [M+H]+.
실온에서 메탄올(3 mL)에 화합물 4S-b(56 mg, 0.16 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 30 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 4S-c(36 mg, 수율 70%)를 획득하였다. MS m/z 317.5 [M+H]+.
화합물 4S-c(36 mg, 0.11 mmol) 및 Ib(45 mg, 0.14 mmol)를 톨루엔(1 mL)에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 90 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 분취 박판 크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 30:1)하여 황색 고체 화합물 4S(25 mg, 수율 38%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.70 (s, 1H), 7.23 (bs, 1H), 7.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.95 (dd, J = 9.0, 2.5 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.19 (dd, J = 10.5, 2.5 Hz, 1H), 4.02 (dd, J = 10.5, 9.5 Hz, 1H), 3.66 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.17-3.10 (m, 1H), 3.07 (d, J = 10.5 Hz, 2H), 3.01 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 2.86 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 2.81-2.75 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.54-2.42 (m, 3H), 2.39-2.27 (m, 3H), 2.34 (s, 3H), 2.08 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.05-1.75 (m, 8H), 1.70-1.56 (m, 4H), 1.13 (t, J = 7.0 Hz, 3H) ppm. MS m/z 586.8 [M+H]+.
실시예 6: 화합물 5S의 제조
Figure pct00026
0 ℃에서 화합물 4S-a(200 mg, 0.63 mmol)의 디클로로메탄(5 mL) 용액에 DIPEA(0.3 mL, 1.88 mmol)를 첨가하고, 다음 아세틸 클로라이드(98 mg, 1.26 mmol)의 디클로로메탄(1.0 mL) 희석액을 천천히 적가하였다. 적가 완료 후, 반응액을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액에 물(10 mL)을 첨가한 후, 디클로로메탄(3 x 10 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수(20 mL)로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과 후 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 30:1)하여 황색 고체 화합물 5S-a(170 mg, 수율 92%)를 획득하였다. MS m/z 361.5 [M+H]+.
실온에서 메탄올(3 mL)에 화합물 5S-a(170 mg, 0.47 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 60 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 5S-b(130 mg, 수율 83%)를 획득하였다. MS m/z 331.5 [M+H]+.
화합물 5S-b(65 mg, 0.20 mmol) 및 Ib(79 mg, 0.24 mmol)를 톨루엔(1 mL)에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 90 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 분취 박판 크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 5S(15 mg, 수율 13%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.18 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.02-5.83 (m, 1H), 4.57 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.25 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.04-3.92 (m, 2H), 3.78 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.19-2.99 (m, 4H), 2.78-2.59 (m, 3H), 2.58-2.50 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.38-2.25 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.17-2.08 (m, 1H), 2.11 (s, 3H), 2.05-1.89 (m, 4H), 1.87-1.78 (m, 2H), 1.68-1.59 (m, 2H), 1.56-1.49 (m, 1H), 1.45-1.37 (m, 1H) ppm. MS m/z 600.8 [M+H]+.
실시예 7: 화합물 6S의 제조
Figure pct00027
화합물 6S-a(250 mg, 1.06 mmol), 1-시클로프로필-4-피페리돈(6S-b, 444 mg, 3.19 mmol) 및 아세트산의 메탄올(15 mL) 혼합물 2방울을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(200 mg, 3.19 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 6S-c(200 mg, 수율 53%)를 획득하였다. MS m/z 359.4 [M+H]+.
실온에서 메탄올(8 mL)에 화합물 6S-c(200 mg, 0.56 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 80 mg)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 유상 화합물 6S-d(128 mg, 수율 70%)를 획득하였다. MS m/z 329.5 [M+H]+.
화합물 6S-d(88 mg, 0.27 mmol) 및 화합물Ib(89 mg, 0.27 mmol)의 톨루엔(1.5 mL) 혼합물을 밀봉된 튜브에 넣고, 100 ℃로 가열하여 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 6S(96 mg, 수율 60%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.87 (bs, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.91-5.76 (m, 1H), 4.22 (dd, J = 10.5, 2.2 Hz, 1H), 3.93-3.84 (m, 1H), 3.69 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.04-2.78 (m, 5H), 2.58-2.51 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.37-2.06 (m, 6H), 2.29 (s, 3H), 1.95-1.83 (m, 3H), 1.81-1.68 (m, 4H), 1.61-1.52 (m, 3H), 1.41-1.27 (m, 2H), 0.43-0.34 (m, 2H), 0.32-0.21 (m, 2H) ppm. MS m/z 598.8 [M+H]+.
실시예 8: 화합물 7S의 제조
Figure pct00028
화합물 6S-a(500 mg, 2.13 mmol), 1-Boc-3-azetidinone(7S-a, 1.09g, 6.38 mmol) 및 아세트산의 메탄올(10 mL) 혼합물 4방울을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(400 mg, 6.38 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 7S-b (1.24g)를 획득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다. MS m/z 391.4 [M+H]+.
실온에서 화합물 7S-b(1.24g, 3.18 mmol)를 메탄올(15 mL)에 용해시킨 다음, HCl 메탄올 용액(4.0M, 4 mL)을 적가하였다. 상기 혼합물을 60 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하여 대부분의 메탄올을 제거한 다음, 포화탄산수소나트륨용액을 첨가하여 pH를 7~8로 조절하고, 다음 감압 농축하여 물을 제거하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 10:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 7S-c(410 mg, 2단계 수율 66%)를 획득하였다. MS m/z 291.3 [M+H]+.
화합물 7S-c(410 mg, 1.41 mmol), 파라포름알데히드(127 mg, 4.24 mmol) 및 아세트산의 메탄올(8 mL) 혼합물 3방울을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(266 mg, 4.24 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 2시간 동안 교반하였다. TLC로 반응을 모니터링하여 일부 원료가 남아 있으면, 반응을 중지하였다. 반응 혼합물을 여과하여, 여액을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 조생성물인 황색 고체 화합물 7S-d(254 mg, 순도 80%, 수율 47%)를 획득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다. MS m/z 305.3 [M+H]+.
실온에서 메탄올(3 mL)에 화합물 7S-d(100 mg, 0.28 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 80 mg)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 7S-e(47 mg, 수율 51%)를 획득하였다. MS m/z 275.4 [M+H]+.
화합물 7S-e(47 mg, 0.17 mmol) 및 화합물 Ib(57 mg, 0.17 mmol)의 톨루엔(1.5 mL) 혼합물을 밀봉된 튜브에 넣고, 100 ℃로 가열하여 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 분취 박판 크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄: 메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 7S(5 mg, 수율 5%)를 획득하였다. MS m/z 544.7 [M+H]+.
실시예 9: 화합물 8S의 제조
Figure pct00029
화합물 8S-a(100 mg, 0.42 mmol), 8S-b(91 mg, 0.42 mmol) 및 수산화칼륨(71 mg, 1.26 mmol)을 디메틸 설폭사이드(5 mL)에 용해시키고, 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 60 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 냉각시킨 다음, 이를 얼음물에 붓고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 다시 디클로로메탄(3 x 25 mL)로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켰다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(석유 에테르:아세트산에틸 = 10:1)하여 황색 고체 화합물 8S-c(64 mg, 수율 37%) 및 황색 고체 화합물 8S-d(64 mg, 수율 37%)를 획득하였다. 8S-c: 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.03 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.26-4.15 (m, 2H), 3.86-3.78 (m, 2H), 3.60 (dd, J = 13.8, 4.1 Hz, 1H), 3.52-3.36 (m, 2H), 3.29-3.15 (m, 2H), 1.48 (s, 9H); 8S-d: 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.94 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.49-4.44 (m, 1H), 4.28-4.04 (m, 3H), 3.71 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.22-3.15 (m, 1H), 3.10-3.01 (m, 1H), 2.88-2.79 (m, 1H), 2.66-2.57 (m, 1H), 1.49 (s, 9H) ppm.
화합물 8S-c(64 mg, 0.16 mmol), 테트라메틸주석(56 mg, 0.31 mmol), 테트라키스트리페닐포스핀팔라듐(9 mg, 0.01 mmol) 및 염화리튬(13 mg, 0.31 mmol)의 N, N-디메틸포름아미드(2 mL) 혼합물을 90 ℃로 가열하고, 밤새 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(석유 에테르:아세트산에틸 = 10:1)하여 황색 고체 화합물 8S-e(33 mg, 수율 60%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.65 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.24-4.14 (m, 2H), 3.89-3.78 (m, 2H), 3.60-3.49 (m, 1H), 3.39-3.30 (m, 1H), 3.28-3.18 (m, 1H), 3.10-2.98 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 1.48 (s, 9H).
화합물 8S-e(200 mg, 0.57 mmol)를 메탄올(2 mL)에 용해시키고, 아이스배스 하에 염산 메탄올 용액(1 mL, 4M)을 적가하였다. 적가 완료 후, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축한 후, 포화 중탄산나트륨 수용액(10 mL)을 첨가하고, 아세트산에틸(3 x 10 mL)로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과 후 감압 농축하여 황색 고체 화합물 8S-f(100 mg, 수율 70%)를 획득하였다. MS m/z 250.3 [M+H]+.
화합물 8S-f(100 mg, 0.40 mmol), N-메틸피페리돈(2S-a, 227 mg, 2.00 mmol) 및 아세트산의 메탄올(5 mL) 혼합물 2방울을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(75 mg, 1.21 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 농축한 후, 디클로로메탄(3 x 15 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과 후 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 30:1)하여 황색 고체 화합물 8S-g(140 mg)를 획득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다. MS m/z 347.4 [M+H]+.
실온에서 메탄올(5 mL)에 화합물 8S-g(101 mg, 0.29 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 20 mg)를 첨가하였다. 상기 반응 혼합물을 실온에서 수소 분위기 하에 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 50:1)하여 갈색 고체 화합물 8S-h(63 mg, 수율 68%)를 획득하였다. MS m/z 317.4 [M+H]+.
화합물 8S-h(53 mg, 0.17 mmol) 및 Ib(56 mg, 0.17 mmol)를 톨루엔(1 mL)에 용해시켰다. 상기 반응 혼합물을 100 ℃에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 분취 박판 크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 8S(12 mg, 수율 12%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.72 (s, 1H), 7.15 (bs, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.96 (s, 1H), 5.93-5.84 (m, 1H), 4.60 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 4.00 (dd, J = 10.6, 2.8 Hz, 1H), 3.19 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 3.13-3.01 (m, 3H), 2.92-2.85 (m, 2H), 2.82 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.46-2.39 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.30 (m, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.04-1.73 (m, 9H), 1.69-1.55 (m, 3H) ppm. MS m/z 586.8 [M+H]+.
실시예 10: 화합물 9S의 제조
Figure pct00030
화합물 9S-a(1.0g, 5.65 mmol), 8S-b(1.22g, 5.65 mmol) 및 수산화칼륨(950 mg, 16.94 mmol)을 디메틸 설폭사이드(15 mL)에 용해시키고, 우선 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 60 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 냉각시킨 다음, 이를 얼음물에 붓고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 획득한 혼합물은 다시 디클로로메탄(3 x 30 mL)으로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켜 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(석유 에테르:아세트산에틸:디클로로메탄 = 5:1:1)하여 황색 고체 화합물 9S-b(1.45g, 수율 73%)를 획득하였다. MS m/z 354.4 [M+H]+.
실온에서 화합물 9S-b(1.45g, 4.10 mmol)를 메탄올(15 mL)에 용해시킨 다음, HCl 메탄올 용액(4.0M, 4 mL)을 적가하였다. 획득한 혼합물을 60 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 10:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 9S-c(1.25g, 수율 100%)를 획득하였다. MS m/z 254.3 [M+H]+.
화합물 9S-c(500 mg, 1.73 mmol), N-메틸-4-피페리돈(2S-a, 587 mg, 5.18 mmol) 및 아세트산의 메탄올(8 mL) 혼합물 4방울을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 그 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(326 mg, 5.18 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 9S-d(704 mg)를 획득하고, 이를 다음 반응에 직접 사용하였다. MS m/z 351.4 [M+H]+.
실온에서 메탄올(3 mL)에 화합물 9S-d(80 mg, 0.23 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 80 mg)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 그 다음, 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 유상 화합물 9S-e(50 mg, 수율 68%)를 획득하였다. MS m/z 321.5 [M+H]+.
화합물 9S-e(50 mg, 0.16 mmol) 및 화합물 Ib(52 mg, 0.16 mmol)의 톨루엔(1.5 mL) 혼합물을 밀봉된 튜브에 넣고, 100 ℃로 가열하여 밤새 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 9S(13 mg, 수율 14%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.72 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.07 (dd, J = 14.6, 2.5 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.91-5.79 (m, 1H), 4.17-4.08 (m, 2H), 3.79-3.68 (m, 1H), 3.27-3.19 (m, 1H), 3.13-3.03 (m, 3H), 2.89-2.77 (m, 2H), 2.66-2.58 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.49-2.27 (m, 7H), 2.36 (s, 3H), 2.04-1.93 (m, 3H), 1.92-1.80 (m, 6H), 1.73-1.59 (m, 3H) ppm. MS m/z 590.8 [M+H]+.
실시예 11: 화합물 10S의 제조
Figure pct00031
화합물 10S-a(2.95g, 13.6 mmol) 및 화합물 10S-b(2.17g, 13.6 mmol)를 DMSO(30 mL)에 용해시킨 다음, KOH(2.30g, 40.9 mmol)를 첨가하였다. 실온에서 화합물 10S-a의 출발점이 사라질 때까지 교반하였다. 60 ℃로 가열하여 밤새 교반하고, 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 물을 첨가하여 반응을 종료하고, 혼합물을 아세트산에틸로 추출하였다. 합한 유기상을 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과 및 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(석유 에테르:아세트산에틸 = 1:1)로 분리 정제하여 화합물 10S-c(2.30g, 50%)를 획득하였다. MS m/z 336.4 [M+H]+，280.4[M-55]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.83-7.75 (m, 1H), 7.65 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 4.29 (dd, J = 11.0, 3.0 Hz, 1H), 4.27-4.01 (m, 2H), 3.98 (dd, J = 11.0, 8.0 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.36-3.27 (m, 1H), 3.12-2.99 (m, 1H), 2.98-2.89 (m, 1H), 2.76-2.53 (m, 1H), 1.48 (s, 9H) ppm.
화합물 10S-c(6.10g, 18.19 mmol)를 메탄올(100 mL)에 용해시킨 다음, 7% 탄소상 팔라듐(500 mg)을 첨가하고, 수소 분위기 하에 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하고, 반응액을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하며, 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올:암모니아수 = 30:1:0.3)로 정제하여 화합물 10S-d(4.70g, 85%)를 획득하였다. MS m/z 306.4 [M+H]+. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.64 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.32 (dd, J = 8.5, 2.6 Hz, 1H), 6.29 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 4.23-4.01 (m, 3H), 3.96 (dd, J = 10.6, 9.0 Hz, 1H), 3.56 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 3.15-2.90 (m, 2H), 2.71-2.49 (m, 2H), 1.48 (s, 9H) ppm.
화합물 10S-d(4.7g, 15.39 mmol) 및 화합물 Ib(5.64g, 16.93 mmol)를 톨루엔(30 mL)에 용해시키고, 90 ℃~100 ℃에서 밤새 가열 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 실온에서 냉각하고 여과하였다. 필터 케이크를 아세트산에틸로 세척하여 황색 고체 조생성물을 획득하였다. 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피(디클로로메탄:메탄올:암모니아수 = 50:1:0.5)로 정제하여 황색 고체의 화합물 10S-e(5.30g, 60%)를 획득하였다. MS m/z 575.7 [M+H]+.
화합물 10S-e(5.30g, 9.22 mmol)를 메탄올(60 mL)에 용해시킨 다음, 염산 메탄올 용액(4M, 10 mL)을 첨가하고, 40 ℃에서 3시간 동안 가열 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응액을 감압 농축한 후, 포화탄산수소나트륨용액을 첨가하여 pH를 염기성으로 조절하고, 디클로로메탄으로 추출하여, 유기층을 합한 후 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과, 감압 농축하여 화합물 10S-f(4.30g, 98%)를 획득하였다. MS m/z 475.6 [M+H]+.
화합물 10S-f(200 mg, 0.42 mmol), 1-Boc-3-azetidinone 10S-g(108 mg, 0.63 mmol) 및 염화아연(172 mg, 1.26 mmol)을 순차적으로 메탄올(7 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(80 mg, 1.26 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 10S-h(250 mg, 수율 94%)를 획득하였다. MS m/z 630.6 [M+H]+.
화합물 10S-h(250 mg, 0.40 mmol)를 메탄올(8 mL)에 용해시킨 다음, HCl의 다이옥산 용액(4.0M, 1.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 혼합물을 소량의 메탄올에 용해시키고, 암모니아수로 중화시키며, 다시 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 6:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 10S(173 mg, 수율 82%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.19 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.98 (dd, J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.98-5.89 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 10.6, 2.6 Hz, 1H), 4.06-3.93 (m, 4H), 3.79 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.44-3.37 (m, 1H), 3.14-3.08 (m, 1H), 2.98-2.94 (m, 1H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.78-2.72 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.47-2.44 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.27 (m, 2H), 2.24-2.16 (m, 1H), 1.99-1.90 (m, 2H), 1.88-1.77 (m, 3H), 1.68-1.59 (m, 2H) ppm. MS m/z 530.4 [M+H]+.
실시예 12: 화합물 11S의 제조
Figure pct00032
화합물 10S(20 mg, 0.04 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(7 mg, 0.06 mmol)을 디클로로메탄(4 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 아세틸 클로라이드(3 mg, 0.04 mmol)의 디클로로메탄(1 mL) 희석액을 천천히 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 11S(20 mg, 수율 93%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.19-7.17 (m, 1H), 6.97 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.99-5.88 (m, 1H), 4.31-4.22 (m, 2H), 4.11 (dd, J = 9.1, 5.0 Hz, 1H), 4.08-4.02 (m, 1H), 4.01-3.96 (m, 1H), 3.87 (dd, J = 10.3, 5.1 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.27-3.21 (m, 1H), 3.14-3.08 (m, 1H), 3.03-2.97 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.78-2.71 (m, 1H), 2.48 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.28 (m, 2H), 2.25-2.18 (m, 1H), 1.96-1.92 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.88-1.78 (m, 3H), 1.68-1.60 (m, 2H) ppm. MS m/z 572.7 [M+H]+.
실시예 13: 화합물 12S의 제조
Figure pct00033
화합물 10S(10 mg, 0.02 mmol), 사이클로프로필보론산12S-a (3 mg, 0.04 mmol), 구리 아세테이트(3 mg, 0.02 mmol), 2, 2'-비피리딘(3 mg, 0.081 mmol) 및 탄산나트륨(3 mg, 0.037 mmol)을 1, 2-디클로로에탄(3 mL)에 용해시키고, 공기 중에서 70 ℃로 가열하여 2시간 동안 반응시켰다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하고, 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 상기 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 12S(1.7 mg, 수율 16%)를 획득하였다. MS m/z 570.6 [M+H]+.
실시예 14: 화합물 13S의 제조
Figure pct00034
화합물 10S-f(30 mg, 0.06 mmol), 3-옥세타논 13S-a(5 mg, 0.06 mmol) 및 염화아연(17 mg, 0.13 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(12 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄: 메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 13S(18 mg, 수율 54%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.88 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.08 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.84 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.62-4.52 (m, 2H), 4.50-4.40 (m, 2H), 4.24 (dd, J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.94-3.85 (m, 1H), 3.73 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 3.50-3.40 (m, 1H), 3.07-2.96 (m, 1H), 2.81 (dd, J = 19.5, 10.4 Hz, 2H), 2.67-2.56 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.26-2.17 (m, 2H), 2.09-2.00 (m, 1H), 1.88 (s, 2H), 1.76 (s, 2H), 1.64 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 1.60-1.51 (m, 2H) ppm. MS m/z 531.6 [M+H]+.
실시예 15: 화합물 14S의 제조
Figure pct00035
화합물 10S(20 mg, 0.04 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(7 mg, 0.06 mmol)을 디클로로메탄(4 mL)에 용해시키고, 0 ℃에서 메탄설포닐 클로라이드(4 mg, 0.04 mmol)의 디클로로메탄(1 mL) 희석액을 천천히 적가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄: 메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 14S(21 mg, 수율 92%)를 획득하다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.88 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.18 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.89-5.79 (m, 1H), 4.24 (dd, J = 10.6, 2.6 Hz, 1H), 3.94-3.71 (m, 6H), 3.25-3.18 (m, 1H), 3.01 (s, 3H), 2.99-2.97 (m, 1H), 2.87 (dd, J = 20.6, 10.5 Hz, 2H), 2.64-2.57 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.27-2.19 (m, 2H), 2.14-2.06 (m, 1H), 1.93-1.84 (m, 2H), 1.81-1.68 (m, 3H), 1.62-1.55 (m, 2H) ppm. MS m/z 608.8 [M+H]+.
실시예 16: 화합물 15S의 제조
Figure pct00036
화합물 10S-f(15 mg, 0.03 mmol), 3, 3-디플루오로사이클로부타논 15S-a(5 mg, 0.05 mmol) 및 염화아연(13 mg, 0.09 mmol)을 순차적으로 메탄올(4 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(6 mg, 0.09 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄: 메탄올 = 30:1)하여 황색 고체 화합물 15S (2 mg, 수율 11%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 7.16 (s, 2H), 6.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.89-5.80 (m, 1H), 4.23 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.08-3.97 (m, 1H), 3.78-3.65 (m, 1H), 3.24-3.11 (m, 1H), 3.04-2.92 (m, 1H), 2.87-2.66 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.26 (m, 2H), 2.25-2.13 (m, 1H), 2.00-1.90 (m, 2H), 1.88-1.79 (m, 2H), 1.68-1.51 (m, 6H) ppm. MS m/z 565.6 [M+H]+.
실시예 17: 화합물 16S의 제조
Figure pct00037
화합물 10S-f(80 mg, 0.17 mmol), N-Boc-4-피페리돈 3S-a(50 mg, 0.25 mmol) 및 염화아연(69 mg, 0.51 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(32 mg, 0.51 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1)하여 황색 고체 화합물 16S-a(91 mg, 수율 82%)를 획득하였다. MS m/z 658.7 [M+H]+.
화합물 16S-a(91 mg, 0.14 mmol)를 메탄올(4 mL)에 용해시킨 다음, HCl의 다이옥산 용액(4.0M, 1 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 혼합물을 소량의 메탄올에 용해시키고, 암모니아수로 중화한 후, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 16S-b(58 mg, 수율 75%)를 획득하였다. MS m/z 558.6 [M+H]+.
화합물 16S-b(20 mg, 0.04 mmol), 16S-c(10 mg, 0.04 mmol) 및 디이소프로필에틸아민(9 mg, 0.07 mmol)을 N, N-디메틸포름아미드(2 mL)에 용해시키고, 반응 혼합물을 80 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1)하여 황색 고체 화합물 16S(16 mg, 수율 70%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.17 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.7, 2.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.97-5.89 (m, 1H), 4.24 (dd, J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.97 (dd, J = 10.5, 9.0 Hz, 1H), 3.75 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.14-2.98 (m, 7H), 2.75-2.67 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.46-2.42 (m, 1H), 2.39 (t, J = 11.1 Hz, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.27 (m, 3H), 2.03 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.96-1.78 (m, 6H), 1.68-1.55 (m, 4H) ppm. MS m/z 640.8 [M+H]+.
실시예 18: 화합물 17S의 제조
Figure pct00038
화합물 16S-b(20 mg, 0.04 mmol) 및 브로모아세토니트릴 17S-a(5 mg, 0.04 mmol)를 테트라하이드로퓨란(2 mL)에 용해시키고, 반응 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 분취 실리카겔 박층 크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1)하여 황색 고체 화합물 17S(12 mg, 수율 56%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.87 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.90-5.77 (m, 1H), 4.24 (dd, J = 10.6, 2.4 Hz, 1H), 3.90 (dd, J = 10.5, 9.0 Hz, 1H), 3.72-3.66 (m, 3H), 3.01-2.89 (m, 3H), 2.83 (d, J = 11.2 Hz, 2H), 2.58-2.52 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.35-2.31 (m, 1H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.20 (m, 3H), 2.16 (t, J = 10.8 Hz, 2H), 1.93-1.84 (m, 3H), 1.82-1.73 (m, 4H), 1.62-1.54 (m, 2H), 1.51-1.39 (m, 2H) ppm. MS m/z 597.8 [M+H]+.
실시예 19: 화합물 18S의 제조
Figure pct00039
화합물 10S-f(15 mg, 0.03 mmol), 사이클로부타논 18S-a(3 mg, 0.05 mmol) 및 염화아연(13 mg, 0.09 mmol)을 순차적으로 메탄올(4 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(6 mg, 0.09 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 80 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1)하여 황색 고체 화합물 18S (11 mg, 수율 66%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6) δ 9.87 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.87-5.78 (m, 1H), 4.25 (dd, J = 10.6, 2.6 Hz, 1H), 3.89 (dd, J = 10.5, 9.1 Hz, 1H), 3.70 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.99-2.92 (m, 1H), 2.86 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.81 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.77-2.69 (m, 1H), 2.59-2.52 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.19 (m, 2H), 2.02-1.73 (m, 8H), 1.69-1.50 (m, 5H), 1.27-1.22 (m, 1H) ppm. MS m/z 529.7 [M+H]+.
실시예 20: 화합물 19S의 제조
Figure pct00040
화합물 19S-a(3.0g, 12.61 mmol), 19S-b(2.73g, 12.61 mmol) 및 수산화칼륨(2.12g, 37.82 mmol)을 디메틸 설폭사이드(40 mL)에 용해시키고, 실온에서 3시간 동안 교반한 다음, 60 ℃에서 3시간 동안 교반하였다. 반응이 완료된 후, 반응 혼합물을 냉각시킨 다음, 이를 얼음물에 붓고, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 혼합물을 다시 디클로로메탄(3 x 40 mL)으로 추출하고, 포화 식염수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시키며, 여과된 여액은 감압 농축시켰다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(석유 에테르:아세트산에틸:디클로로메탄 = 15:1:1)하여 황색 고체 화합물 19S-c(1.07g, 수율 20%)를 획득하였다.
실온에서 메탄올(6 mL)에 화합물 19S-c(500 mg, 1.21 mmol) 및 팔라듐 탄소 촉매(10%, 150 mg)를 첨가하고, 상기 반응 혼합물을 실온과 1기압의 수소 분위기 하에 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 셀라이트로 여과하였다. 여액을 감압 농축하여 조생성물을 획득하였다. 그 다음, 상기 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:아세트산에틸 = 4:1)하여 회백색 고체 화합물 19S-d(235 mg, 수율 64%)를 획득하였다. MS m/z 306.4 [M+H]+.
화합물 19S-d(235 mg, 0.77 mmol) 및 화합물 Ib(257 mg, 0.77 mmol)의 톨루엔(6 mL) 혼합물을 밀봉된 튜브에 넣고, 100 ℃로 가열하여5시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하고, 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:아세트산에틸 = 2:1)하여 황색 고체 화합물 19S-e(200 mg, 수율 45%)를 획득하였다. MS m/z 575.8 [M+H]+.
화합물 19S-e(200 mg, 0.35 mmol)를 메탄올(2 mL)에 용해시킨 다음, HCl의 다이옥산 용액(4.0M, 2 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 혼합물을 소량의 메탄올에 용해시키고, 암모니아수로 중화한 후, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 19S-f(140 mg, 수율 85%)를 획득하였다.
화합물 19S-f(20 mg, 0.04 mmol), 19S-g(5 mg, 0.04 mmol) 및 염화아연(12 mg, 0.08 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(8 mg, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 19S(10.44 mg, 수율 43%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 5.92-5.83 (m, 1H), 4.19 (dd, J = 10.5, 2.7 Hz, 1H), 4.03-3.95 (m, 1H), 3.65 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 3.22-3.15 (m, 2H), 3.11-3.01 (m, 1H), 2.99 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.90-2.78 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.50-2.45 (m, 1H), 2.44-2.37 (m, 3H), 2.36 (s, 3H), 2.32-2.22 (m, 4H), 2.11-2.02 (m, 2H), 2.01-1.71 (m, 10H) ppm. MS m/z 572.7 [M+H]+.
실시예 21: 화합물 20S의 제조
Figure pct00041
화합물 19S-f(30 mg, 0.06 mmol), N-tert-부톡시카르보닐-4-피페리돈(13 mg, 0.06 mmol) 및 염화아연(17 mg, 0.13 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(12 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 20S-b(25 mg, 수율 60%)를 획득하였다. MS m/z 658.3 [M+H]+.
화합물 20S-b(25 mg, 0.04 mmol)를 메탄올(2 mL)에 용해시킨 다음, HCl의 다이옥산 용액(4.0M, 1.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 혼합물을 소량의 메탄올에 용해시키고, 암모니아수로 중화한 후, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 20S(12.8 mg, 수율 60%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.82 (s, 1H), 7.17 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.88-6.81 (m, 1H), 6.69 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.01-5.90 (m, 1H), 4.23 (dd, J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.99-3.91 (m, 1H), 3.73 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 3.41-3.35 (m, 3H), 3.13-3.06 (m, 2H), 3.01 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.95-2.86 (m, 2H), 2.79-2.72 (m, 1H), 2.62-2.55 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33-2.23 (m, 2H), 2.10-2.01 (m, 3H), 2.01-1.88 (m, 2H), 1.81 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 1.75-1.65 (m, 2H), 1.63-1.55 (m, 2H) ppm. MS m/z 558.6 [M+H]+.
실시예 22: 화합물 21S의 제조
Figure pct00042
화합물 19S-f(20 mg, 0.04 mmol), 화합물 21S-a(6 mg, 0.04 mmol) 및 염화아연(12 mg, 0.08 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(8 mg, 0.13 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 21S(15.30 mg, 수율 60%)를 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CDCl3) δ 8.71 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 7.11 (s, 1H), 6.86-6.72 (m, 2H), 5.93-5.71 (m, 1H), 4.74-4.65 (m, 1H), 4.21 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 4.06-3.96 (m, 1H), 3.90 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 3.76-3.68 (m, 1H), 3.28-2.80 (m, 5H), 2.69-2.55 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.34-2.25 (m, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.04-1.77 (m, 7H), 1.78-1.54 (m, 5H) ppm. MS m/z 600.8 [M+H]+.
실시예 23: 화합물 1R의 제조
Figure pct00043
화합물 1R-a는 특허 WO2017101763의 방법을 사용하여 합성하였다.
화합물 1R-a(30 mg, 0.06 mmol), 테트라하이드로피라논1R-b(9 mg, 0.06 mmol) 및 염화아연(17 mg, 0.13 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(12 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄: 메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 1R(15 mg, 수율 42%)을 획득하였다. 1H NMR (500MHz, DMSO-d 6 ) δ 9.88 (s, 1H), 8.90 (s, 1H), 7.16 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.88-5.80 (m, 1H), 4.24 (dd, J = 10.5, 2.4 Hz, 1H), 4.02-3.85 (m, 3H), 3.71 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 3.33-3.23 (m, 2H), 3.06-2.86 (m, 3H), 2.63-2.54 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 2.26-2.17 (m, 2H), 2.01-1.85 (m, 4H), 1.82-1.68 (m, 4H), 1.65-1.52 (m, 2H), 1.51-1.34 (m, 2H) ppm. MS m/z 559.8 [M+H]+.
실시예 24: 화합물 3R의 제조
Figure pct00044
화합물 1R-a(30 mg, 0.06 mmol), 1-Boc-4-피페리돈 3R-a(12 mg, 0.06 mmol) 및 염화아연(17 mg, 0.13 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(12 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 3R-b(25 mg, 수율 60%)를 획득하였다. MS m/z 658.3 [M+H]+.
화합물 3R-b(25 mg, 0.04 mmol)를 메탄올(2 mL)에 용해시킨 다음, HCl의 다이옥산 용액(4.0M, 1.5 mL)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 40 ℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각시킨 다음, 감압 농축하였다. 획득한 혼합물을 소량의 메탄올에 용해시키고, 암모니아수로 중화한 후, 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 15:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 3R(9 mg, 수율 42%)을 획득하였다. 1H NMR (500MHz, MeOD-d 4) δ 8.72 (s, 1H), 7.07 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 9.0, 2.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 5.92-5.75 (m, 1H), 4.14 (dd, J = 10.5, 2.6 Hz, 1H), 3.98-3.82 (m, 1H), 3.66 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.16-3.06 (m, 2H), 3.04-2.87 (m, 3H), 2.66-2.55 (m, 3H), 2.40 (s, 3H), 2.36-2.31 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.24-2.15 (m, 2H), 1.95 (t, J = 21.3, 10.6 Hz, 2H), 1.92-1.78 (m, 4H), 1.77-1.67 (m, 2H), 1.61-1.49 (m, 2H), 1.49-1.37 (m, 2H) ppm. MS m/z 558.6 [M+H]+.
실시예 25: 화합물 5R의 제조
Figure pct00045
화합물 1R-a(30 mg, 0.06 mmol), N-아세틸-4-피페리돈5R-a(9 mg, 0.06 mmol) 및 염화아연(17 mg, 0.13 mmol)을 순차적으로 메탄올(5 mL)에 용해시킨 다음, 소듐 시아노보로하이드라이드(12 mg, 0.19 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 75 ℃에서 1시간 동안 교반하였다. 반응이 완료될 때까지 TLC로 모니터링하였다. 반응 혼합물을 감압 농축하였다. 획득한 조생성물을 실리카겔 컬럼크로마토그래피로 분리 정제(디클로로메탄:메탄올 = 20:1, 2% 암모니아수)하여 황색 고체 화합물 5R(14 mg, 수율 37%)을 획득하였다. 1H NMR (500MHz, CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 7.17 (d, J =2.4 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.7, 1.9 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 5.99-5.87 (m, 1H), 4.53 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 4.24 (d, J =9.8 Hz, 1H), 4.05-3.92 (m, 2H), 3.76 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.15-2.95 (m, 4H), 2.76-2.55 (m, 3H), 2.54-2.50 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 2.35-2.26 (m, 5H), 2.11-2.02(m, 4H), 2.02-1.88 (m, 4H), 1.88-1.77 (m, 2H), 1.70-1.58 (m, 2H) ppm, 1.55-1.48(m, 1H), 1.43-1.36(m, 1H). MS m/z 600.8 [M+H]+.
실시예 26:
1) CDK2, CDK4, CDK6 키나아제 활성 억제 실험
Caliper 이동성 변화 분석 기술(Caliper mobility shift assay)을 사용하여 CDK2/CycA2, CDK4/CycD3 및 CDK6/cycD3 단백질 키나아제 활성을 측정하였다. 화합물을 DMSO에 용해시킨 다음, 키나아제 버퍼(CDK2/CycA2 and CDK6/cycD3은 50MM HEPES (pH 7.5), 10MM MgCl2, 0.0015% Brij-35, and 2 mM dithiothreitol를 사용하고; CDK4/CycD3은 20MM HEPES (pH 7.5), 10MM MgCl2, 0.01% Triton X-100, and 2 mM dithiothreitol를 사용함)로 희석하고, 384웰 플레이트에 반응 최종 농도의 5배인 화합물(10% DMSO) 5μl를 첨가하였다. 2.5배 효소 용액을 10μl첨가한 다음, 실온에서 10분 동안 배양한 다음, 2.5배 기질 용액(해당 효소 및 ATP 농도 CDK2/CycA2 12 nM, ATP Km 39 μM; CDK4/CycD3 10 nM, ATP Km 221 μM; CDK6/cycD3 15 nM, ATP Km 800μM) 10μl를 첨가하였다. 28 ℃에서 각각(60분 CDK2, 180분 CDK4, 60분 CDK6) 배양한 다음, 정지 용액(100MM HEPES(pH 7.5), 0.015% Brij-35, 0.2% Coating Reagent #3, 50MM EDTA) 25μl를 첨가하여 반응을 종료하였다. Caliper EZ Reader II(Caliper Life Sciences)에서 전환율 데이터를 판독하였다. 전환율을 억제율 데이터(%억제율 = (max-전환율)/(max-min)*100)로 전환하였다. 여기서 max는 DMSO 대조군의 전환율을 의미하고, min는 효소 활성이 없는 대조군의 전환율을 의미한다. 화합물 농도 및 억제율을 가로 좌표와 세로 좌표로 하여 곡선을 그리고, XLFit excel add-in version4.3.1 소프트웨어를 사용하여 곡선을 피팅하고 IC50을 계산하였다. 일부 대표적인 화합물의 활성은 표 1에 도시된 바와 같다.
2) TRKA 키나아제 활성 억제 실험
Caliper 이동성 변화 분석 기술(Caliper mobility shift assay)을 사용하여 TRKA 단백질 키나아제 활성을 측정하였다. 화합물을 DMSO로 용해시켜 10MM스톡 용액을 조제하였다. 1x 키나아제 반응 버퍼를 조제하고, 버퍼 구배를 사용하여 화합물을 희석하였다. 피험 화합물로서 분액기 Echo 550을 사용하여 타깃 플레이트 3573으로 250nl의 100x 최종 농도의 화합물을 옮겼다. 1x 키나아제 버퍼로 2.5x 최종 농도의 키나아제 용액을 조제하였다. 화합물 웰 및 양성 대조군 웰에 2.5x 최종 농도 키나아제 용액 10μl을 각각 첨가하고; 음성 대조군 웰에 10μl의 1x 키나아제 버퍼를 첨가하였다. 1000rpm에서 30s 동안 원심분리하고, 반응 플레이트를 진탕하고 균일하게 혼합한 후, 실온에서 10min 동안 배양하였다. 1x 키나아제 버퍼로 5/3배 최종 농도 ATP 및 키나아제 기질의 혼합 용액을 조제하였다. ATP와 기질의 혼합물 15μL을 최종 농도의 5/3배로 첨가하여, 반응을 시작하였다. 384웰 플레이트를 1000rpm에서 30초 동안 원심분리하고, 진탕하여 균일하게 혼합한 후, 해당 시간 동안 실온에서 배양하였다. 30μl의 정지검출액을 첨가하여 키나아제 반응을 중지하고, 1000rpm에서 30s 동안 원심분리하고 진탕하여 균일하게 혼합한 후, Caliper EZ Reader로 전환율 데이터를 판독하였다. 전환율을 억제율 데이터(% 억제율 = (max DMSO 웰 전환율-화합물 샘플 전환율)/(max DMSO 웰 전환율-min 음성 대조군 전환율)*100)로 전환하였다. 여기서, max는 DMSO 대조군의 전환율을 의미하고, min는 효소 활성이 없는 대조군의 전환율을 의미한다. 화합물 농도 및 억제율을 가로 좌표와 세로 좌표로 하여 곡선을 그리고, XLFit excel add-in version4.3.1 소프트웨어를 사용하여 곡선을 피팅하고 IC50을 계산하였다. 일부 대표적인 화합물의 활성은 표 1에 도시된 바와 같다.
3) CDK5, CDK9, CDK16 키나아제 활성 억제 실험
ADP-Glo Kinase Assay를 사용하여 CDK5/p35NCK, CDK9/CycT1 및 CDK16/CycY 단백질 키나아제 활성을 측정하였다. 양성 약물 및 테스트 화합물(10MM 스톡 용액)을 100% DMSO로 25배 희석하고, 96 웰 희석 플레이트에서 4배로 동일하게 희석하였으며, 49μl의 키나아제 반응 버퍼(1 mM Tris, 20MM MgCl2, 0.10% BSA, and 0.5 mM DTT)에 1μl의 화합물을 첨가하고, 마이크로 웰 플레이트 셰이커에서 20Min 동안 진탕하였다. 2μl의 2x 키나아제를 384 반응 플레이트에 옮기고, 384 반응 플레이트에 1μl의 테스트 화합물을 첨가하였으며, 1000rpm/min에서 1 min 동안 원심분리하고, 25 ℃에서 10Min 동안 배양하였다. 1μl 4x 기질 혼합물을 384 반응 플레이트에 옮기고, 1000rpm/min에서 1 min 동안 원심분리하였으며, 25 ℃에서 60Min 동안 배양하였다. 4μl ADP-Glo를 384 반응 플레이트에 옮기고, 1000rpm/min에서 1 min 동안 원심분리하였으며, 25 ℃에서 40Min 동안 배양하였다. 8μl Detection용액을 384 반응 플레이트에 옮기고, 1000rpm/min에서 1 min 동안 원심분리하였으며, 25 ℃에서 40Min 동안 배양하였다. Biotek 다기능 평판 판독기를 사용하여 RLU(Relative luminescence unit) 신호를 판독하였다. 신호 강도는 키나아제의 활성 정도를 특성화하기 위해 사용된다. 화합물 억제율 데이터:%억제율 = [1-(화합물 RLU 평균값-양성 대조군 RLU 평균값)/(음성 대조군 RLU 평균값-양성 대조군 RLU 평균값)]*100. 농도의 log값을 X축으로 하고, 백분율 억제율을 Y축으로 하며, 분석 소프트웨어GraphPad Prism 5의 log(inhibitor) vs.Response -Variable slope를 사용하여 용량-반응 곡선을 피팅함으로써, 효소 활성에 대한 각 화합물의 IC50값을 획득하였다. 일부 대표적인 화합물의 활성은 표 1에 도시된 바와 같다.
표 1. CDK2, CDK4, CDK6, CDK5, CDK9, CDK16 및 TRKA 키나아제 활성 억제(IC 50 , nM)
Figure pct00046
a 화합물은 염산염이다.
결과는 본 발명의 화합물이 선행기술의 CDK4/6 선택적 억제제 팔보시클립(Palbociclib)(Ref-A)에 필적하는 CDK4 및CDK6 억제 활성을 가지는 동시에, CDK2, CDK5, CDK9, CDK16 및 TRKA 키나아제에 대한 강력한 억제 활성을 가지며, 다중 표적 키나아제 억제제임을 보여준다.
실시예 27. 래트 체내의 약동학적 연구
기기: Waters에서 생산된 XEVO TQ-S 액체 질량 분석기, 모든 측정 데이터는 Masslynx V4.1 소프트웨어로 수집 및 처리되며, Microsoft Excel을 사용하여 데이터를 계산 및 처리하였다. WinNonLin 8.0 소프트웨어를 사용하여, 약동학적 파라미터를 통계적 모멘트 방법으로 계산하였다. 주로 동역학 파라미터 Tmax, T1/2, Cmax, AUClast 등을 포함한다. 컬럼: ACQUITY UPLC BEH C18(2.1 mm×50 mm, 1.7 μm); 컬럼 온도40 ℃; 이동상 A는 물(0.1% 포름산)이고, 이동상 B는 아세토니트릴이며, 유속은 0.350 mL/min이고, 구배 용리법을 사용하며, 용리 구배는 0.50min: 10%B; 1.50min: 10%B; 2.30min: 95%B; 2.31min: 10%B; 3.00min: stop이고, 주입량: 5 μL이다.
동물: 체중 범위가 200-220g인 수컷 SD 래트 3마리를 구입 후 실험동물센터 실험실에서 2일 동안 사육하여 사용하였고, 투여 전 12시간 및 투여 후 4시간 동안 금식하였으며, 실험 기간 동안 물은 자유롭게 마시도록 하였다. 혈액 샘플은 래트의 위내 투여 후 미리 결정된 시점에서 채취되었다.
비히클: 0.5% Methycellulose(0.4% Tween 80 및 1% 에탄올이 포함된 수용액). 위내 직접 투여 용액의 조제: 화합물을 정밀하게 칭량하여 용매에 첨가하고, 상온에서 5분 동안 초음파 처리하여 약품을 완전히 용해시켜 0.3 mg/mL의 약액으로 조제하였다.
약물 샘플: 본 발명 특허의 식 (I)로 표시되는 구조의 대표적인 화합물로, 일반적으로 유사한 구조의 샘플(분자량 차이는 2단위 이상임)을 여러 개 취하고, 정확하게 칭량하여, 투여(cassette PK)한다. 이를 통해 여러 화합물을 동시에 스크리닝하고, 이들의 경구 흡수율을 비교할 수 있다. 또한 단일 투여로 래트에서 약물 샘플의 약동학을 연구하였다.
위내 직접 투여 후 각각 0.25, 0.5, 1, 2, 4, 9, 12 및 24 시간에 안와 혈액을 채취하여, 헤파린 나트륨을 처리한 시험관에 넣고, 원심분리 후 상청 혈장을 채취하여 LC-MS/MS 분석에 사용하였다.
화합물을 정확하게 칭량하여 상이한 농도로 조제하고, 질량 분석기에서 정량 분석을 수행하여 표준 곡선을 구축한 다음, 상기 혈장 내 화합물의 농도를 데스트하여, 다른 시점의 화합물 농도를 획득하였다. 측정된 모든 데이터는 관련 소프트웨어에 의해 수집 및 처리되고, 약동학적 파라미터는 통계적 모멘트 방법(주로 동역학 파라미터 Tmax, T1/2, Cmax, AUClast 등을 포함함)으로 계산하였다. 일부 대표적인 화합물의 파라미터는 표 2에 도시된 바와 같다.
표 2: 래트의 약동학적 파라미터
Figure pct00047
a 화합물은 염산염이다.
결과는 래트에서 본 발명의 화합물의 경구 흡수 성능이 선행기술(WO2017101763)의 화합물 7S(Ref-B)보다 현저히 우수함을 보여준다.
Ref-A 및 Ref-B의 구조는 하기 식으로 표시된 바와 같다.
Figure pct00048
Figure pct00049
Ref-A(Palbociclib) Ref-B (WO2017101763 Compound 7S)
본 발명의 화합물은 CDK4/CDK6에 대한 억제 활성 외에도, 다른 CDK 아형(CDK2, CDK5, CDK9, CDK16 포함)에 대해서도 양호한 억제 활성을 가지므로, pan-CDK 억제제인 동시에, TRK 키나아제에 대해서도 양호한 억제 활성을 가진다. 그러나 선행기술에는 이러한 화합물이 상기 CDK 아형 및 TRK 키나아제에 대한 억제 활성을 갖는다는 것이 기재되지 않았다.
이 밖에, 본 발명의 화합물은 또한 CDK 억제제로서 당업계에 존재하는 이러한 화합물과 비교하여 상당히 개선된 약동학적 특성을 갖는다. 투여 후, 래트에서 본 발명의 화합물의 피크 혈장 농도 및 노출량이 유의하게 증가하여, 본 발명의 화합물이 보다 낮은 용량으로 투여될 수 있음을 시사한다
본 발명에 언급된 모든 문헌은 참고로서 각 문서가 참조로 별도로 인용되듯이 본 발명에 인용된다. 또한 본 발명의 통상적인 기술자는 본 발명에 대해 여러 가지 변경 또는 수정을 할 수 있으며, 이러한 균등물도 첨부된 청구 범위에 의해 한정된 범위 내에 있다.

Claims (19)

  1. 하기 식 (I)로 표시되는 구조의 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물로서,
    Figure pct00050

    (I)
    “*”는 키랄 중심을 나타내고;
    X는 수소, 중수소, 할로겐, C1-4 알킬, OR1, NR1R2, 또는 NR1C(O)R3이며;
    각각의 R은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이거나; 또는 2개의 R이 동일한 탄소 원자에 동시에 연결될 때, 상기 2개의 R은 이에 연결된 탄소 원자와 선택적으로 함께 카르보닐기(C=O)를 형성할 수 있으며;
    G는 NRf, O, S, S(O), S(O)2 또는 CRgRg이고;
    p는 0, 1, 2, 또는 3이며;
    m 및 n은 각각 독립적으로 0, 1, 2, 또는 3이고; 전제 조건은 m 및 n은 동시에 0이 될 수 없는 것이며;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이고;
    R3은 C1-4 알킬, C2-4 알케닐(alkenyl), 또는 C2-4 알키닐(alkynyl)이며;
    Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 시아노 치환된 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬(cycloalkyl), 4-8원 헤테로시클릴, 아릴(aryl), 헤테로아릴(heteroaryl), C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, S(O)2R4, 또는 S(O)2NR1R2이고;
    각각의 Rg는 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 카르보닐기(C=O)를 형성하거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 3-8원 고리 구조를 형성하고, 해당 고리 구조는 N, O, S로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 헤테로원자를 선택적으로 포함하며;
    R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고;
    여기서, 각각의 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 그리고 각각 독립적으로 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, CN, NO2, OR1, SR1, NR1R2, C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R4, 또는S(O)2R4 로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되는 1-3개의 치환기에 의해 치환되며, 전제 조건은 형성된 화학 구조는 안정적이고 의미가 있다는 것이고; 여기서, R1, R2, R4의 정의는 상술한 바와 같으며;
    특별한 설명이 없는 한, 상기 아릴은 6-12개의 탄소 원자를 포함하는 방향족기이고; 헤테로아릴은 5-15원 헤테로방향족기이며; 고리 구조는 헤테로원자를 포함하거나 포함하지 않는 포화 또는 불포화 시클릭기인 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  2. 제1항에 있어서,
    “*”는 키랄 중심을 나타내고;
    X는 수소, 중수소, 할로겐, C1-4 알킬, OR1, NR1R2, 또는 NR1C(O)R3이며;
    각각의 R은 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이거나; 또는 2개의 R이 동일한 탄소 원자에 동시에 연결될 때, 상기 2개의 R은 이에 연결된 탄소 원자와 선택적으로 함께 카르보닐기(C=O)를 형성할 수 있으며;
    G는 NRf, O, S, S(O), S(O)2 또는 CRgRg이고;
    p는 0, 1, 2, 또는 3이며;
    m 및 n은 각각 독립적으로 1, 2, 또는 3이고;
    R1 및 R2는 각각 독립적으로 수소 또는 C1-4 알킬이며;
    R3은 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, 또는 C2-4 알키닐이고;
    Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, 또는 S(O)2R4이며;
    각각의 Rg는 수소, 할로겐, 또는 C1-4 알킬로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 카르보닐기(C=O)를 형성하거나; 또는 2개의 Rg는 이에 연결된 탄소 원자와 함께 3-8원 고리 구조를 형성하고, 해당 고리 구조는 N, O, S로부터 선택된 0, 1 또는 2개의 헤테로원자를 선택적으로 포함하며;
    R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 또는 헤테로아릴이고;
    각각의 상기 알킬, 알케닐, 알키닐, 시클로알킬, 헤테로시클릴, 아릴 및 헤테로아릴은 선택적으로 그리고 각각 독립적으로 할로겐, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 3-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, CN, NO2, OR1, SR1, NR1R2, C(O)R4, C(O)OR1, C(O)NR1R2, NR1C(O)R4, 또는S(O)2R4로 이루어진 군으로부터 각각 독립적으로 선택되는 1-3개의 치환기에 의해 치환되며, 전제 조건은 형성된 화학 구조는 안정적이고 의미가 있다는 것이고; 여기서, R1, R2, R4의 정의는 상술한 바와 같으며;
    특별한 설명이 없는 한, 상기 아릴은 6-12개의 탄소 원자를 포함하는 방향족기이고; 헤테로아릴은 5-15원 헤테로방향족기이며; 고리 구조는 헤테로원자를 포함하거나 포함하지 않는 포화 또는 불포화 시클릭기인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  3. 제1항에 있어서,
    식 (I)은,
    Figure pct00051
    또는
    Figure pct00052

    (II) (III)이며,
    “*”는 키랄 중심을 나타내고;
    X, R, G, p, m, 및 n의 정의는 제1항에 기재된 바와 같은 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
    X는 수소, 할로겐, C1-4 알킬이고; R은 수소이거나, 또는 2개의 R은 이에 연결된 탄소 원자와 함께 카르보닐기(C=O)를 형성하는 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  5. 제1항 내지 제4항 중 어느 한 항에 있어서,
    G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서, Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  6. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (I)은,
    Figure pct00053

    (IV)이며,
    “*”는 키랄 중심을 나타내고;
    X는 수소, 할로겐, C1-4 알킬이며;
    G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서, Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  7. 제1항 내지 제5항 중 어느 한 항에 있어서,
    식 (I)은,
    Figure pct00054

    (V)이며,
    “*”는 키랄 중심을 나타내고;
    X는 수소, 할로겐, C1-4 알킬이며;
    G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서, Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, C3-8 시클로알킬, 4-8원 헤테로시클릴, 아릴, 헤테로아릴, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬, C2-4 알케닐, C2-4 알키닐, C3-8 시클로알킬, 또는 4-8원 헤테로시클릴인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  8. 제6항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    Rf는 수소, C1-4 알킬, C1-4 할로알킬, 시아노 치환된 C1-4 알킬, C3-8 시클로알킬, C(O)R4, 또는S(O)2R4이고; 여기서 R4는 C1-4 알킬인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  9. 제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서,
    각각의 Rg는 각각 독립적으로 수소 또는 할로겐인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  10. 제6항 또는 제7항에 있어서,
    식 (IV) 또는 식 (V)에서,
    “*”는 키랄 중심을 나타내고;
    X는 수소, 불소, 또는 메틸(methyl)이며;
    G는 NRf, O, 또는 CRgRg이고; m 및 n은 각각 독립적으로 1 또는 2이며; 여기서, Rf는 수소, 메틸, 에틸, CH2CF3, CH2CN, 시클로프로필, C(O)CH3, 또는 S(O)2CH3이고; 각각의 Rg는 각각 독립적으로 수소 또는 불소인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  11. 제1항에 있어서,
    상기 식 (I)의 화합물은,
    Figure pct00055

    Figure pct00056

    Figure pct00057

    Figure pct00058

    Figure pct00059

    로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물, 또는 이에 대응되는 거울상 이성질체의 혼합물인 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서,
    상기 염은 염산염인 것을 특징으로 하는 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물.
  13. 약학적 조성물로서,
    상기 약학적 조성물은 유효량의 제1항 내지 제12항에 따른 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물을 포함하는 것을 특징으로 하는 약학적 조성물.
  14. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물, 또는 제13항에 따른 약학적 조성물의 용도로서,
    (a) 키나아제 활성 또는 발현량과 관련된 질환 치료용 약물의 제조;
    (b) 키나아제 표적 억제제의 제조; 및/또는
    (c) 체외 키나아제 활성의 비치료적 억제;에 사용되고,
    여기서 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
  15. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 따른 화합물, 또는 이의 광학 이성질체, 약학적으로 허용 가능한 염, 전구약물, 중수소화 형태, 수화물, 용매화물, 또는 제13항에 따른 약학적 조성물의 용도로서,
    키나아제 억제제로 사용되거나, 키나아제 고발현과 관련된 질환을 치료하는 데 사용할 수 있고; 여기서, 상기 키나아제는 CDK 및/또는 TRK로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
  16. 제15항에 있어서,
    상기 질환은 DNA 및 RNA 바이러스 감염, B세포 림프종, 단핵구 백혈병, 비종대성 적혈구 증가증（splenomegalic polycythemia）, 과호산구 증가 증후군, 본태성 혈소판 감소증, 전신성 거대세포 질환, 혈액 종양, 고형 종양, 신경 퇴행성 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는것을 특징으로 하는 용도.
  17. 제15항에 있어서,
    상기 질환은 알레르기성 천식, 골수 섬유화, 류마티스 관절염, 염증성 통증, 암성 통증, 후천성 면역 결핍증, 헤르페스 바이러스 및 인플루엔자 바이러스, 분비성 유방암, 섬유육종, 침샘암, 간암, 직장암, 방광암, 인후암, 비소세포폐암, 소세포폐암, 폐선암, 폐편평세포암, 유방암, 전립선암, 교세포종, 난소암, 두경부편평세포암, 자궁경부암, 식도암, 신장암, 췌장암, 결장암, 피부암, 림프종, 위암, 다발성 골수암, 뇌종양, 폐암, 알츠하이머병, 파킨슨병으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것을 특징으로 하는 용도.
  18. 제1항에 따른 화합물의 제조 방법으로서,
    상기 방법은,
    Figure pct00060

    불활성 용매에서, 식 Ia의 화합물을 식 Ib의 화합물과 반응시켜, 식 I의 화합물을 획득하는 단계를 포함하는 화합물의 제조 방법.
  19. 제18항에 있어서,
    상기 방법은,
    Figure pct00061

    (1) 불활성 용매에서, 식 1-A3의 화합물로 탈보호를 수행하여 식 1-A3-a의 화합물을 획득하는 단계;
    (2) 불활성 용매에서, 식 1-A3-a의 화합물을 식 1-A3-b의 화합물과 환원성 아민화 반응시켜, 식 1-A4의 화합물을 획득하는 단계; 및
    (3) 불활성 용매에서, 식 1-A4의 화합물로 환원 반응을 수행하여 식 Ia의 화합물을 획득하는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 화합물의 제조 방법.
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