TW202140036A - 治療性多烯巨環內酯(polyene macrolide)之醫藥組合物及其使用方法 - Google Patents

Abstract

本發明揭示包括複數個奈米粒子之醫藥組合物，該複數個奈米粒子包括具有以下結構之化合物：

Description

治療性多烯巨環內酯(POLYENE　MACROLIDE)之醫藥組合物及其使用方法

本發明係關於醫藥組合物及其使用方法。

巨環內酯抗生素包括鍵結至一或多個去氧糖之巨環內酯環。巨環內酯抗生素之醫學應用常常受其有限存放期及達成有效遞送之困難限制。

具有以下結構之化合物為治療性多烯巨環內酯：

。

需要包括化合物1 或其醫藥學上可接受之鹽之新型調配物。

在一個態樣中，本發明提供包括複數個奈米粒子之醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含或包括活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，活性醫藥成分為

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，醫藥組合物進一步包括醫藥學上可接受之聚合物賦形劑。在一些實施例中，複數個奈米粒子包含醫藥學上可接受之聚合物賦形劑。在一些實施例中，活性醫藥成分經奈米囊封。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯)或聚磷腈。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯)。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸乙基己酯)、聚(氰基丙烯酸乙酯)、聚(氰基丙烯酸正己酯)、聚(氰基丙烯酸4-甲基戊酯)、聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)、聚(氰基丙烯酸丁酯)或聚(氰基丙烯酸辛酯)。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸乙基己酯)。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(乳酸-共-乙醇酸)。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為蛋白質(例如酪蛋白、白蛋白(例如人類血清白蛋白、牛血清白蛋白或卵白蛋白)、絲蛋白、明膠或其組合)。在一些實施例中，蛋白質與活性醫藥成分之重量比為1:1至20:1 (例如5:1至20:1、1:1至5:1、5:1至10:1或10:1至20:1)。

在一些實施例中，本發明提供包含複數個奈米粒子之醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含聚(氰基丙烯酸乙基己酯)及活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，本發明提供包含複數個奈米粒子之醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含聚(乳酸-共-乙醇酸)及活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，本發明提供包含複數個奈米粒子之醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含酪蛋白、白蛋白、絲蛋白、明膠或其組合及活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為白蛋白(例如人類血清白蛋白、牛血清白蛋白或卵白蛋白)。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為絲蛋白。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為明膠。在一些實施例中，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為酪蛋白。

在一些實施例中，醫藥組合物為經凍乾組合物。在一些實施例中，醫藥組合物進一步包括複數個微氣泡。

在另一態樣中，本發明提供包含複數個微氣泡及複數個奈米粒子之醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，該化合物為

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，奈米粒子包含聚(氰基丙烯酸烷酯)、聚磷腈或聚(乳酸-共-乙醇酸)。

在一些實施例中，微氣泡包含全氟碳、烴、氟化硫氣體、空氣、空氣組分或其混合物。在一些實施例中，微氣泡包含氮氣(N₂ )、氧氣(O₂ )、氬氣(Ar)、二氧化碳(CO₂ )、氦氣(He)、氖氣(Ne)、甲烷(CH₄ )或其混合物。在一些實施例中，微氣泡包含全氟碳。在一些實施例中，微氣泡包含空氣或其組分。在一些實施例中，複數個奈米粒子之至少一部分與微氣泡表面締合(舉例而言，醫藥組合物為皮克林(Pickering)乳液)。

在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含表面活性蛋白(例如白蛋白(例如人類血清白蛋白或牛血清白蛋白))。在一些實施例中，醫藥組合物包含0.1%至2% (例如0.4%至0.6%，例如0.5%) (w/w)表面活性蛋白(例如白蛋白(例如人類血清白蛋白或牛血清白蛋白))。

在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之界面活性劑。在一些實施例中，醫藥學上可接受之界面活性劑為非離子界面活性劑。在一些實施例中，醫藥學上可接受之界面活性劑為聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、山梨糖醇酯、聚山梨糖醇酯、聚乙氧基化蓖麻油、聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物或其組合。在一些實施例中，醫藥學上可接受之界面活性劑為聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪酸酯或其組合。在一些實施例中，聚氧乙烯脂肪酸酯為聚氧乙基化12-羥硬脂酸。在一些實施例中，聚氧乙烯醚為聚氧乙烯月桂醚。

在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之穩定劑。在一些實施例中，醫藥學上可接受之穩定劑為香草精、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基甲氧苯或維生素E。在一些實施例中，醫藥學上可接受之穩定劑為香草精。在一些實施例中，相對於粒子質量而言，醫藥組合物包含0.1%-10% (較佳0.5%-8%或更佳1%-5%) (w/w)醫藥學上可接受之穩定劑。

在一些實施例中，醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之油。在一些實施例中，醫藥學上可接受之油選自由以下組成之群：中鏈三酸甘油酯、長鏈三酸甘油酯及其組合。在一些實施例中，醫藥學上可接受之油為一或多種中鏈三酸甘油酯。在一些實施例中，一或多種中鏈三酸甘油酯選自由以下組成之群：米格列醇(Miglyol)、卡普特(Captex)及克利索夫(Kollisolv)。在一些實施例中，相對於粒子質量而言，醫藥組合物包含0.5%-5% (w/w)醫藥學上可接受之油。

在一些實施例中，如藉由動態光散射所量測，複數個奈米粒子具有20-200 nm (較佳40-100 nm)之平均數目平均直徑。在一些實施例中，如藉由奈米粒子追蹤分析所量測，複數個奈米粒子具有30-150 nm (較佳80-100 nm)之平均數目平均直徑。在一些實施例中，例如在經調配用於經口投與之醫藥組合物中，複數個奈米粒子之多分散性指數為0.5或更小(例如0.3或更小)。在一些實施例中，例如在經調配用於非經腸(例如靜脈內)投與之醫藥組合物中，複數個奈米粒子之多分散性指數為0.3或更小(例如0.2或更小)。

在一些實施例中，醫藥組合物為水性組合物。在一些實施例中，醫藥組合物之pH為4.0至8.0 (舉例而言，pH為5.0至7.0)。

在一些實施例中，醫藥組合物包含共溶劑(例如極性有機溶劑)。在一些實施例中，極性有機溶劑為二甲亞碸、N-甲基-2-吡咯啶酮、N,N-二甲基甲醯胺或其組合。

在某些較佳實施例中，醫藥組合物為包含N-甲基吡咯啶酮及作為聚(乳酸-共-乙醇酸)之醫藥學上可接受之聚合物賦形劑的水性組合物。

在某些較佳實施例中，醫藥組合物為包含聚(氰基丙烯酸乙基己酯)、香草精及6-O-棕櫚醯基-L-抗壞血酸之水性組合物。

在一些實施例中，醫藥組合物為包含以下之水性組合物：聚(氰基丙烯酸乙基己酯)；香草精；6-O-棕櫚醯基-L-抗壞血酸；聚氧乙基化12-羥硬脂酸(例如克利弗(Kolliphor) HS 15)；聚氧乙烯月桂醚(例如布里傑(Brij) L23)；及中鏈三酸甘油酯(例如米格列醇)。

在一些實施例中，醫藥組合物為包含聚(乳酸-共-乙醇酸)、N-甲基-2-吡咯啶酮及聚山梨糖醇酯之水性組合物。

在一些實施例中，醫藥組合物為包含聚(乳酸-共-乙醇酸)、N,N-二甲基甲醯胺及聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物之水性組合物。

在一些實施例中，如藉由液相層析所量測，醫藥組合物包含1%-15% (例如2%-15%；較佳3%-10%；更佳3.5%-10%；或又更佳3%-6%) (乾重/乾重)活性醫藥成分。在一些實施例中，如藉由液相層析所量測，醫藥組合物包含4.5%至5.5% (乾重/乾重)活性醫藥成分。在一些實施例中，如藉由液相層析所量測，醫藥組合物包含1.5%至5.5% (例如1.5%至3.0%) (乾重/乾重)活性醫藥成分。在一些實施例中，如藉由液相層析所量測，醫藥組合物包含5%至10% (乾重/乾重)活性醫藥成分。

在另一態樣中，本發明提供治療有需要之個體之方法，該方法包含向個體投與治療有效量之本文所描述之醫藥組合物。在另一態樣中，本發明提供本文所描述之複數個奈米粒子或本文所描述之醫藥組合物用於製造用以治療有需要之個體之藥劑的用途。在另一態樣中，本發明提供用於治療有需要之個體之本文所描述之醫藥組合物。

在一些實施例中，個體患有由以下造成之真菌感染：念珠菌(Candida )屬、隱球菌(Cryptococcus )屬、麴菌(Aspergillus )屬、炭疽刺盤孢菌(Colletotrichum )屬、地絲菌(Geotrichum )屬、黑酵母樣真菌(Hormonema )屬、油瓶黴(Lecythophora )屬、擬青黴(Paecilomyces )屬、青黴菌(Penicillium )屬、紅酵母(Rhodotorula )屬、鐮菌(Fusarium )屬、酵母菌(Saccharomyces )屬、木黴(Trichoderma )屬、髮癬菌(Trichophyton )屬、小帚樣黴菌(Scopularilopsis )屬、組織漿菌(Histoplasma )屬、芽生菌(Blastomyces )屬或球孢子菌(Cocciodioides )屬。在一些實施例中，個體患有由以下造成之真菌感染：念珠菌屬、麴菌屬或隱球菌屬。在一些實施例中，個體患有由唑類抗性麴菌屬造成之真菌感染。

在一些實施例中，醫藥組合物係靜脈內、藉由吸入、鼻內、經口、舌下、經頰、經皮、皮內、肌內、陰道內、非經腸、動脈內、顱內、鞘內、皮下、眼眶內、心室內、脊椎內、腹膜內或局部投與。

在又另一態樣中，本發明提供向個體之目標部位遞送治療有效量之化合物1 、化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽的方法，該方法包含向個體投與本文所描述之醫藥組合物。在又另一態樣中，本發明提供本文所描述之醫藥組合物用於製造用以向個體之目標部位遞送治療有效量之化合物1 、化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽之藥劑的用途。在又另一態樣中，本發明提供用於向個體之目標部位遞送治療有效量之化合物1 、化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽的本文所描述之醫藥組合物。

在一些實施例中，醫藥組合物係靜脈內投與。在一些實施例中，目標部位為個體之肺。

在再另一態樣中，本發明提供產生複數個奈米粒子之方法，該複數個奈米粒子包含醫藥學上可接受之聚合物賦形劑及具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽； 該方法包含使於一液體中之該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑之單體前驅體與該化合物或其醫藥學上可接受之鹽聚合，該液體包含該單體前驅體，其中該聚合步驟產生該複數個奈米粒子。

在一些實施例中，化合物具有以下結構：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，液體進一步包含醫藥學上可接受之界面活性劑。在一些實施例中，醫藥學上可接受之界面活性劑為非離子界面活性劑。

在一些實施例中，液體進一步包含醫藥學上可接受之穩定劑。在一些實施例中，液體進一步包含醫藥學上可接受之油。

在一些實施例中，單體前驅體為氰基丙烯酸烷酯，且醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯)。

在一些實施例中，如藉由動態光散射所量測，複數個奈米粒子具有20-200 nm (較佳40-100 nm)之平均數目平均直徑。在一些實施例中，如藉由奈米粒子追蹤分析(NTA)所量測，複數個奈米粒子具有30-150 nm (較佳80-100 nm)之平均數目平均直徑。

在一些實施例中，液體為水性組合物。在一些實施例中，液體之pH為0.5至8.0 (舉例而言，pH為0.5至3.0)。在一些實施例中，液體之pH為2.0至8.0 (較佳地，pH為3.0至7.0)。

在一些實施例中，該方法進一步包括添加複數個微氣泡。在一些實施例中，該方法進一步包括對複數個奈米粒子進行凍乾。在一些實施例中，該方法進一步包含用去離子水對複數個奈米粒子進行透析。在一些實施例中，該方法進一步包含將液體之pH調整至在4.0至8.0範圍內(較佳在5.0至7.0範圍內)。

在一些實施例中，調整pH之步驟係在聚合步驟期間執行。定義

如本文所使用之術語「約」表示在術語「約」之後的值之±10%範圍內的值。

如本文所使用之術語「(乾重/乾重)」百分比係指不包括液體醫藥學上可接受之載劑之組合物中之成分的重量百分比。(乾重/乾重)百分比可使用例如液相層析來量測。

如本文所使用之術語「奈米粒子」表示如藉由動態光散射所量測，具有小於1000 nm之Z-平均直徑的粒子群體。

如本文所使用之術語「醫藥組合物」表示用醫藥學上可接受之賦形劑調配且用作用於治療哺乳動物之疾病之治療方案的一部分的組合物。

如本文所使用之術語「醫藥劑型」表示意欲不經進一步改質(例如不經液體溶劑稀釋、不懸浮於液體溶劑中或不溶解於液體溶劑中)即按原樣投與至個體的彼等醫藥組合物。

如本文所使用之術語「醫藥學上可接受之賦形劑」係指除本文所描述之一或多種活性劑以外之任何成分(例如能夠使一或多種活性劑懸浮或溶解之媒劑)且其具有在患者中實質上無毒及實質上不發炎之特性。賦形劑可包括例如抗氧化劑、崩解劑、染料(色料)、潤膚劑、乳化劑、填充劑(稀釋劑)、調味劑、芳香劑、防腐劑、印刷油墨、吸附劑、懸浮劑或分散劑、甜味劑、液體溶劑及緩衝劑。

如本文所使用之術語「醫藥學上可接受之鹽」係指在合理醫學判斷之範疇內適用於與人類及動物之組織接觸使用而無異常毒性、刺激、過敏反應及其類似者且與合理效益/風險比相稱之彼等鹽。醫藥學上可接受之鹽為此項技術中已知的。舉例而言，醫藥學上可接受之鹽描述於以下中：Berge等人,J. Pharmaceutical Sciences 66:1-19, 1977及Pharmaceutical Salts: Properties, Selection, and Use , (編者P.H.  Stahl及C.G.  Wermuth), Wiley-VCH, 2008。鹽可在最終分離及純化本文所描述之化合物期間原位製備或藉由使游離鹼基團與合適有機酸反應分開製備。用於形成該等鹽之合適酸之實例包括乙酸、天冬胺酸、苯磺酸、苯甲酸、雙碳酸、雙硫酸、雙酒石酸、丁酸、依地酸鈣、樟腦磺酸、碳酸、氯苯甲酸、檸檬酸、依地酸、乙二磺酸、十二烷基磺酸(estolic)、乙磺基(esyl)、乙磺酸、甲酸、反丁烯二酸、葡庚酸、葡萄糖酸、麩胺酸、乙內醯胺苯胂酸、環己胺磺酸、己基間苯二酸、海巴胺酸、氫溴酸、鹽酸、氫碘酸、羥基萘甲酸、羥乙基磺酸、乳酸、乳糖酸、順丁烯二酸、蘋果酸、丙二酸、苦杏仁酸、甲磺酸、甲基硝酸、甲基硫酸、黏液酸、黏康酸、萘磺酸、硝酸、草酸、對硝基甲磺酸、撲酸、泛酸、磷酸、單氫磷酸、二氫磷酸、鄰苯二甲酸、聚半乳糖醛酸、丙酸、柳酸、硬脂酸、丁二酸、胺基磺酸、對胺基苯磺酸、磺酸、硫酸、鞣酸、酒石酸、茶氯酸(teoclic)及甲苯磺酸。麩胺酸鹽為尤其較佳的。

如本文所使用之術語「個體」表示如由合格專業人員(例如醫生或護士醫師)用或不用此項技術中已知之一或多個來自個體之一或多個樣品之實驗室測試所確定，患有疾病、病症或病況或處於疾病、病症或病況風險下之人類或非人類動物(例如哺乳動物)。疾病、病症及病況之非限制性實例包括由以下造成之真菌感染：念珠菌屬、隱球菌屬、麴菌屬、炭疽刺盤孢菌屬、地絲菌屬、黑酵母樣真菌屬、油瓶黴屬、擬青黴屬、青黴菌屬、紅酵母屬、鐮菌屬、酵母菌屬、木黴屬、髮癬菌屬及小帚樣黴菌屬。較佳地，真菌感染係由念珠菌屬、麴菌屬或隱球菌屬造成。更佳地，真菌感染係由唑類抗性麴菌屬造成。

如本文所使用之「治療(Treatment/treating)」係指意欲改善、減輕、穩定、預防或治癒疾病、病症或病況之個體的醫學管理。此術語包括積極治療(針對改善疾病、病症或病況之治療)；病因治療(針對相關疾病、病症或病況之病因之治療)；姑息性治療(經設計用於緩解疾病、病症或病況之症狀之治療)；預防性治療(針對最小化或部分或完全抑制相關疾病、病症或病況之發展的治療)；及支持性治療(用於補充另一療法之治療)。

一般而言，本發明提供包括複數個奈米粒子之醫藥組合物及其使用方法。本發明之醫藥組合物包括複數個奈米粒子，該複數個奈米粒子包括活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在一些實施例中，活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

本文所描述之奈米粒子可包括聚合物賦形劑(例如聚合物奈米粒子)或可包括脂質(例如脂質奈米粒子，諸如脂質體、微胞等)。

本文所描述之奈米粒子可包括脂質，例如磷脂(例如磷脂醯膽鹼、磷脂酸、磷脂醯絲胺酸、磷脂醯乙醇胺或磷脂醯甘油)。在一些實施例中，本文所描述之奈米粒子包括作為磷脂醯膽鹼(例如二棕櫚醯基磷脂醯膽鹼、二硬脂醯基磷脂醯膽鹼、卵磷脂醯膽鹼及大豆磷脂醯膽鹼)或磷脂醯甘油(例如二棕櫚醯基磷脂醯甘油、二硬脂醯基磷脂醯甘油、二月桂基磷脂醯甘油或二肉豆蔻醯基磷脂醯甘油)的磷脂。舉例而言，脂質(例如磷脂)可將活性醫藥成分囊封於囊泡或微胞中。

較佳地，本文所描述之醫藥組合物包括醫藥學上可接受之聚合物賦形劑(例如聚(氰基丙烯酸烷酯)、聚(乳酸-共-乙醇酸)或蛋白質(例如白蛋白、絲蛋白、明膠、酪蛋白或其組合))。有利地，本文所描述之醫藥組合物可展現商業上可接受之存放期。在不希望受理論束縛之情況下，化合物1 (例如化合物1A )或其醫藥學上可接受之鹽於醫藥學上可接受之聚合物賦形劑中之囊封可為化合物1 (例如化合物1A )或其醫藥學上可接受之鹽提供足夠穩定性以具有商業上可接受之存放期。舉例而言，本文所描述之醫藥組合物可在4℃下儲存兩週之後保留90%至110%標籤劑量之化合物1 (例如化合物1A )或其醫藥學上可接受之鹽。

如藉由液相層析所量測，本文所描述之醫藥組合物可含有至少2%、較佳至少3%且特定言之至少5% (乾重/乾重)化合物1 或其醫藥學上可接受之鹽(例如化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽)。如藉由液相層析所量測，本文所描述之醫藥組合物可含有至少2% (例如至少2.5%、至少3%、至少3.5%、至少4%、至少4.5%、至少5%、至少5.5%、至少6%、至少6.5%、至少7%、至少7.5%、至少8%、至少8.5%、至少9%或至少9.5%) (乾重/乾重)化合物1 或其醫藥學上可接受之鹽(例如化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽)。如藉由液相層析所量測，本文所描述之醫藥組合物可含有至多15%、較佳至多12%且特定言之至多10% (乾重/乾重)化合物1 或其醫藥學上可接受之鹽(例如化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽)。如藉由液相層析所量測，範圍之非限制性實例包括2%-15%、較佳3%-10%且特定言之3%-6% (例如3.5%-15%、4%-15%、4.5%-15%、5%-15%、5.5%-15%、6%-15%、6.5%-15%、7%-15%、7.5%-15%、8%-15%、8.5%-15%、9%-15%、9.5%-15%、3%-10%、3.5%-10%、4%-10%、4.5%-10%、5%-10%、5.5%-10%、6%-10%、6.5%-10%、7%-10%、7.5%-10%、8%-10%、8.5%-10%、9%-10%、9.5%-10%、3%-7.5%、3.5%-7.5%、4%-7.5%、4.5%-7.5%、5%-7.5%、5.5%-7.5%、6%-7.5%、6.5%-7.5%、7%-7.5%、3%-5%、3.5%-5%、4%-5%或4.5%-5%) (乾重/乾重)化合物1 或其醫藥學上可接受之鹽(例如化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽)。

本文所描述之醫藥組合物含有複數個奈米粒子。如藉由動態光散射所量測，複數個奈米粒子可具有例如20-200 nm之平均數目平均直徑(較佳地，平均數目平均直徑為40-100 nm)。較佳地，如藉由奈米粒子追蹤分析(NTA)所量測，複數個奈米粒子具有30-150 nm之平均數目平均直徑(更佳地，平均數目平均直徑為80-100 nm)。

本文所描述之醫藥組合物包括一或多種醫藥學上可接受之賦形劑(例如醫藥學上可接受之聚合物賦形劑)、界面活性劑(例如非離子界面活性劑)、穩定劑、載劑(例如油)及/或調味劑。

在本文所描述之醫藥組合物中，聚合物賦形劑可用於例如囊封活性醫藥成分。醫藥學上可接受之聚合物賦形劑之非限制性實例包括聚(氰基丙烯酸烷酯)、聚(乳酸-共-乙醇酸)、兩親媒性聚磷腈及蛋白質。較佳地，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯) (例如聚(氰基丙烯酸乙基己酯)、聚(氰基丙烯酸乙酯)、聚(氰基丙烯酸正己酯)、聚(氰基丙烯酸4-甲基戊酯)、聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)、聚(氰基丙烯酸丁酯)或聚(氰基丙烯酸辛酯))。更佳地，醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸乙基己酯) (例如聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯))。較佳蛋白質包括白蛋白、絲蛋白、明膠、酪蛋白及其組合。

包括聚(氰基丙烯酸烷酯)之奈米粒子可藉由在包括化合物1 、1A 或其醫藥學上可接受之鹽之組合物中聚合氰基丙烯酸烷酯單體來原位製備。製備聚(氰基丙烯酸烷酯)奈米粒子之方法可包括例如藉由引入親水性聚合物來定製奈米特定表面，該等親水性聚合物例如包括醫藥學上可接受之聚合物賦形劑及例如具有能夠與醫藥學上可接受之聚合物賦形劑前驅體(例如產生醫藥學上可接受之聚合物賦形劑之單體)反應之反應性部分的界面活性劑。單體之聚合可使用此類界面活性劑引發。可替代地，單體之聚合可使用聚合引發劑來引發，該聚合引發劑諸如為偶氮引發劑(例如2,2'-偶氮雙(異丁腈)、二甲基2,2'-偶氮雙(2-甲基丙酸酯)、2,2'-偶氮雙(4-甲氧基-2,4-二甲基戊腈)、2,2'-偶氮雙(2-甲基丁腈)、1,1'-偶氮雙(環己烷-1-腈)或2,2'-偶氮雙(N-丁基-2-甲基丙醯胺))。在一些實施例中，本文所描述之醫藥組合物包括奈米粒子，該等奈米粒子包括醫藥學上可接受之聚合物賦形劑及作為化合物1 、1A 或其醫藥學上可接受之鹽的活性醫藥成分。較佳地，奈米粒子塗佈有聚乙二醇(PEG)。有利地，塗佈於奈米粒子上之PEG可減少例如藉由免疫系統進行之清除。

界面活性劑可用於使醫藥組合物針對例如結晶及機械應力(諸如攪動及/或剪切)穩定。界面活性劑可為非離子或離子的。非離子界面活性劑之非限制性實例包括聚氧乙烯醚、聚氧乙烯酯(例如聚氧乙烯脂肪酸酯)、山梨糖醇酯、聚山梨糖醇酯、山梨糖醇、乙氧基化酚、乙氧基化二酚、聚乙氧基化蓖麻油、聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物(例如泊洛沙姆(poloxamer))、泊洛沙胺(poloxamine)、脂肪酸單甘油脂、脂肪酸二甘油酯、多醣(例如玻尿酸或唾液酸)、蛋白質(例如白蛋白或酪蛋白)及其組合。較佳地，界面活性劑為聚氧乙烯醚或聚山梨糖醇酯。更佳地，界面活性劑為聚氧乙基化12-羥硬脂酸(例如克利弗HS 15)、聚氧乙烯月桂醚(例如布里傑L23)或其組合。離子界面活性劑之非限制性實例包括例如十二烷基硫酸鈉、月桂基硫酸鈉、磺基丁二酸鹽及脂肪酸鹽。

界面活性劑可共價連接至聚合物賦形劑。在一非限制性實例中，本文所描述之界面活性劑可包括於溶劑、活性劑及聚合物賦形劑之單體的混合物中。因此，界面活性劑(例如界面活性劑中之游離-OH基團)可引發單體(例如氰基丙烯酸烷酯)之聚合以將活性劑囊封於經界面活性劑塗佈之奈米粒子(例如經PEG塗佈之奈米粒子)中。

穩定劑可用於使醫藥組合物針對例如氧化應激穩定。穩定劑之非限制性實例包括香草精、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基甲氧苯、維生素E及6-O-棕櫚醯基-L-抗壞血酸。較佳地，穩定劑為香草精。相對於粒子質量而言，醫藥組合物可包括例如0.1%-10%、較佳0.5%-8%且特定言之1%-5% (例如0.1%-9%、0.1%-8%、0.1%-7%、0.1%-6%、0.1%-5%、0.1%-4%、0.1%-3%、0.1%-2%、0.1%-1%、0.1%-0.5%、0.2%-10%、0.2%-9%、0.2%-8%、0.2%-7%、0.2%-6%、0.2%-5%、0.2%-4%、0.2%-3%、0.2%-2%、0.2%-1%、0.2%-0.5%、0.5%-10%、0.5%-9%、0.5%-8%、0.5%-7%、0.5%-6%、0.5%-5%、0.5%-4%、0.5%-3%、0.5%-2%、0.5%-1%、1%-10%、1%-9%、1%-8%、1%-7%、1%-6%、1%-5%、1%-4%、1%-3%、1%-2%、2%-10%、2%-9%、2%-8%、2%-7%、2%-6%、2%-5%、2%-4%、2%-3%、3%-10%、3%-9%、3%-8%、3%-7%、3%-6%、3%-5%、3%-4%、4%-10%、4%-9%、4%-8%、4%-7%、4%-6%、4%-5%、5%-10%、5%-9%、5%-8%、5%-7%、5%-6%或5%) (w/w)穩定劑。

載劑可用於使活性醫藥成分懸浮或溶解於醫藥組合物中。載劑亦可用於防止調配物製備期間之奧氏熟化(Ostwald ripening)。懸浮或溶解載劑可為水性載劑，例如水或鹽水(例如等張鹽水)。另外醫藥學上可接受之載劑之非限制性實例包括醫藥學上可接受之油，例如中鏈三酸甘油酯、長鏈三酸甘油酯或其組合。較佳地，醫藥學上可接受之油為一或多種中鏈三酸甘油酯(例如米格列醇、卡普特及克利索夫)。相對於粒子質量而言，醫藥組合物可包括例如0.5-5%、較佳1-5%且特定言之2-3% (例如0.5%-5%、0.5%-4.5%、0.5%-4%、0.5%-3.5%、0.5%-3%、0.5%-2.5%、0.5%-2%、0.5%-1.5%、0.5%-1%、1%-5%、1%-4.5%、1%-4%、1%-3.5%、1%-3%、1%-2.5%、1%-2%、1%-1.5%、1.5%-5%、1.5%-4.5%、1.5%-4%、1.5%-3.5%、1.5%-3%、1.5%-2.5%、1.5%-2%、2%-5%、2%-4.5%、2%-4%、2%-3.5%、2%-3%、2%-2.5%、2.5%-5%、2.5%-4.5%、2.5%-4%、2.5%-3.5%、2.5%-3%、3%-5%、3%-4.5%、3%-4%、3%-3.5%、3.5%-5%、3.5%-4.5%、3.5%-4%、4%-5%、4%-4.5%或4.5%-5%) (w/w)醫藥學上可接受之油。

對於經口投與之醫藥組合物，可包括調味劑以使其更適口。可使用任何有效調味劑。調味劑可為天然調味劑、人工調味劑或其混合物。調味劑產生將有助於減少活性成分之非所需味道之風味。在一個實施例中，調味劑可產生薄荷、薄荷醇、蜂蜜檸檬、橙子、檸檬青檸、葡萄、蔓越橘、香草漿果、泡泡糖或櫻桃之風味。調味劑可為天然或人工甜味劑，例如為蔗糖、甘草酸銨(Magnasweet)、蔗糖素、木糖醇、糖精鈉、賽克拉美(cyclamate)、阿斯巴甜(aspartame)、乙醯磺胺酸及其鹽。

本文所描述之醫藥組合物可為水性組合物(例如懸浮液)。醫藥組合物之pH可為例如4.0至8.0 (較佳5.0至7.0)。可替代地，醫藥組合物可為經凍乾組合物。經凍乾組合物可在使用之前經復原以產生水性組合物。

本文所描述之醫藥組合物可用於治療有需要之個體。治療個體之方法包括向個體投與治療有效量之本文所描述之醫藥組合物。個體可能患有例如由以下造成之真菌感染(例如侵入性真菌感染)：念珠菌屬、隱球菌屬、麴菌屬、炭疽刺盤孢菌屬、地絲菌屬、黑酵母樣真菌屬、油瓶黴屬、擬青黴屬、青黴菌屬、紅酵母屬、鐮菌屬、酵母菌屬、木黴屬、髮癬菌屬、小帚樣黴菌屬、組織漿菌屬、芽生菌屬或球孢子菌屬。除慢性阻塞性肺病(COPD)、氣喘、囊腫纖維化、慢性肺麴菌病、自實體器官移植之恢復、自血液科移植之恢復及癌症化學療法之後的免疫抑制中之一或多者以外，個體亦可能患有真菌感染(例如侵入性真菌感染)。較佳地，真菌感染係由念珠菌屬、麴菌屬或隱球菌屬造成。更佳地，真菌感染係由唑類抗性麴菌屬造成。

本文所描述之醫藥組合物可以單次劑量或以多次劑量投與至個體。當投與多次劑量時，劑量可彼此間隔例如1-24小時、1-7天、1-4週或1-12個月。醫藥組合物可根據時程投與，或醫藥組合物可不按預定時程投與。應理解，對於任何特定個體，具體劑量方案應根據個體需要及投與醫藥組合物或監督投與醫藥組合物之人員的專業判斷來隨時間推移加以調整。

儘管主治醫師最終決定適當量及給藥方案，但舉例而言，本發明化合物之有效量可為本文所描述之活性醫藥成分(API)中之任一者的例如在0.05 mg與3000 mg之間的總日劑量。可替代地，劑量可使用患者之體重來計算。

在本發明方法中，在向個體投與多次劑量之醫藥組合物期間之時間段可變。在一些實施例中，經1-7天、1-12週或1-3個月之時間段向個體投與一定劑量之醫藥組合物。在一些實施例中，經例如4-11個月或1-30年之時間段向個體投與醫藥組合物。在一些實施例中，在症狀發作時向個體投與醫藥組合物。在此等實施例中之任一個中，所投與之醫藥組合物之量可在投與時間段期間變化。當每天投與醫藥組合物時，投與可例如每天發生1-12次。

本文所描述之醫藥組合物之例示性投與途徑包括靜脈內、吸入、鼻內、經口、舌下、經頰、經皮、皮內、肌內、陰道內、非經腸、動脈內、顱內、鞘內、皮下、眼眶內、心室內、脊椎內、腹膜內及局部投與。較佳地，投與途徑為靜脈內。

本文所描述之醫藥組合物包括經調配用於靜脈內或動脈內投與之醫藥組合物。本文所描述之醫藥組合物可包括本文所描述之微氣泡及奈米粒子。較佳地，包括微氣泡及奈米粒子之醫藥組合物經調配用於靜脈內投與。有利地，包括本文所描述之微氣泡及奈米粒子之醫藥組合物可有助於將化合物1 或1A 靶向遞送至目標組織(例如肺及/或心臟)。

醫藥組合物可包括微氣泡，例如任何常規市售對比微氣泡，諸如阿布內克斯(Albunex) (GE Healthcare)、奧普替森(Optison) (GE Healthcare)、示卓安(Sonazoid) (GE Healthcare)、聲諾維(Sonovue) (Bracco)或熟習此項技術者已知之其他常規對比微氣泡。在一些醫藥組合物中，微氣泡表面可與奈米粒子締合。該等微氣泡可例如在如本文所描述之奈米粒子溶液中產生。有利地，奈米粒子可對微氣泡之表面具有穩定作用。微氣泡可為例如填充有氣體或其前驅體之微氣泡。氣體可包括或可為例如全氟碳、烴(例如甲烷)、氟化硫(例如SF₆ )、鹵素、空氣、空氣組分(例如氮氣(N₂ )、氧氣(O₂ )、氬氣(Ar)、二氧化碳(CO₂ )、氦氣(He)或氖氣(Ne))或其混合物。較佳地，氣體為全氟碳、空氣、空氣組分(例如氮氣(N₂ )、氧氣(O₂ )、氬氣(Ar)、二氧化碳(CO₂ )、氦氣(He)或氖氣(Ne))或其混合物。更佳地，氣體為全氟碳。

在不希望受理論束縛之情況下，氣體於微氣泡中之溶解性可影響微氣泡在血液中循環之能力及積聚於呼吸系統中之能力。舉例而言，填充有全氟碳氣體之微氣泡可具有經延長之循環時間。在不希望受理論束縛之情況下，經延長之循環時間可歸因於全氟碳於血液中之低溶解性。本文所描述之醫藥組合物可包括有包括例如全氟碳之氣體的微氣泡。可替代地，氣體可為例如空氣或其組分。可替代地，氣體可為例如氟化硫氣體，較佳為六氟化硫(SF₆ )氣體。

市售微氣泡通常以藉由脂質、蛋白質及/或其他界面活性劑之殼層穩定之氣態微氣泡懸浮液之形式提供。微氣泡可例如用諸如蛋白質、聚合物、脂質、界面活性劑或其混合物之表面活性化合物製成。一或多種表面活性化合物可使微氣泡穩定。表面活性蛋白質之較佳非限制性實例為白蛋白(例如人類或牛血清白蛋白或來自其他合適之生物相容性白蛋白源，包括合成白蛋白)及酪蛋白。表面活性脂質之較佳非限制性實例為磷脂。微氣泡亦可含有例如額外穩定劑及賦形劑，例如膽固醇或聚氧乙烯-聚氧丙烯。

本文所描述之醫藥組合物可包括例如改質劑。改質劑可改質醫藥組合物之組分之間的相互作用。改質劑可在微氣泡及/或表面活性化合物與奈米粒子之間形成複合物或交聯物，例如藉此提高醫藥組合物之穩定性。改質劑可例如在表面活性化合物與奈米粒子之間引入相互作用。改質劑可為例如脲(H₂ N-CO-NH₂ )。較佳地，醫藥組合物包括作為表面活性化合物之蛋白質(較佳酪蛋白)及作為改質劑之脲。脲可充當用於蛋白質之變性劑。在不希望受理論束縛之情況下，咸信脲可能干擾參與蛋白質摺疊之氫鍵。脲亦可與酸基在奈米粒子表面上形成複合物且改質奈米粒子之親水性。

在包括表面活性化合物(例如蛋白質)及脲之醫藥組合物中，遞送至目標組織之活性劑之量得到增加。藉由在表面活性化合物與奈米粒子之間引入較強相互作用，脲可使微氣泡穩定。在不受理論束縛之情況下，咸信改質微氣泡、表面活性化合物及/或奈米粒子可增強醫藥組合物中微氣泡與奈米粒子之間的締合穩定性。隨著微氣泡與奈米粒子之間的締合增強，遞送至目標肺組織之奈米粒子數目可大於缺乏增強微氣泡與奈米粒子之間的締合之試劑的組合物的奈米粒子數目。

包括微氣泡及奈米粒子之本文所描述之醫藥組合物可為皮克林乳液(Pickering emulsion)。疏水性固體粒子可強有力地吸附在例如油-水之不可混溶流體之間的介面處，因此形成皮克林乳液-藉由固體奈米粒子或微粒穩定之乳液。因此，與微氣泡表面締合之奈米粒子可使組合物以皮克林乳液形式穩定。有利地，本文所描述之醫藥組合物可藉由調配物進一步以皮克林乳液形式穩定。與奈米粒子締合之微氣泡之平均直徑可為例如0.5 μm至30 μm (例如1-10 μm)。微氣泡直徑可例如藉由使用ImageJ影像分析器進行之微氣泡影像二維分析來量測。

另外，例如除微氣泡表面締合之奈米粒子之外，本文所描述之醫藥組合物亦可包括游離奈米粒子。本文所描述之醫藥組合物可包括與本文所描述之微氣泡締合之奈米粒子以及本文所描述之游離奈米粒子。

包括本文所描述之微氣泡及奈米粒子之醫藥組合物可例如根據包括組合本文所描述之氣體或微氣泡與奈米粒子之方法來製備。舉例而言，奈米粒子可處於溶液中。奈米粒子可如本文所描述原位製備，或可自乾燥組合物復原。

包括本文所描述之微氣泡及奈米粒子之醫藥組合物可例如根據包括以下之方法來製備： a.將本文所描述之微氣泡及本文所描述之奈米粒子添加至溶液中，及 b.混合該溶液以產生醫藥組合物。

可替代地，包括本文所描述之微氣泡及奈米粒子之醫藥組合物可例如根據包括以下之方法來製備： a.合成本文所描述之奈米粒子, b.組合奈米粒子與表面活性化合物， c.將氣體添加至溶液中，及 d.混合該溶液以產生醫藥組合物。

在一些實施例中，溶液經混合(例如攪拌) 2秒至60分鐘(例如1-10分鐘)。例如超音波處理、機械攪拌、微流控、振盪等之溶液混合方法為此項技術中已知的。在用於含微氣泡調配物之一些製備方法中，組合物可經脫氣，之後添加微氣泡氣體。脫氣方法為此項技術中已知的；脫氣方法之非限制性實例包括例如音波處理及冷凍-泵-解凍脫氣。

本文所描述之醫藥組合物包括經調配用於經口投與之醫藥組合物(「口服劑型」)。口服劑型可例如呈含有活性醫藥成分及一或多種醫藥學上可接受之賦形劑之錠劑、膠囊、液體懸浮液、散劑、顆粒或小丸劑的形式。此等賦形劑可為例如惰性稀釋劑或填充劑；粒化劑及崩解劑；黏合劑；及潤滑劑、助滑劑、抗黏著劑、著色劑、調味劑、塑化劑、保濕劑、緩衝劑及其類似試劑。

用於經口使用之受控釋放組合物可經建構以藉由控制活性醫藥成分之溶解及/或擴散來釋放活性藥物。溶解或擴散控制釋放可藉由適當塗佈含有API之錠劑、膠囊、小丸劑、顆粒或粒子或藉由將含有API之粒子併入適當基質中來達成。在一些實施例中，組合物包括生物可降解、pH及/或溫度敏感性聚合物塗層。舉例而言，口服劑型可包括活性醫藥成分(例如本文所描述之奈米粒子)。

本文所描述之醫藥組合物可使用本文所描述之技術及方法以及此項技術中已知之技術及方法來製備。

本發明之特點進一步在於產生複數個奈米粒子之方法，該複數個奈米粒子包括活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

特定言之，複數個奈米粒子可包括例如醫藥學上可接受之聚合物賦形劑。

因此，該方法包括使於一液體中之醫藥學上可接受之聚合物賦形劑之單體前驅體與化合物或其醫藥學上可接受之鹽聚合，該液體包括該單體前驅體。聚合步驟產生複數個奈米粒子。

在一些實施例中，活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

， 或其醫藥學上可接受之鹽。

在本文所描述之生產方法中，液體可進一步包括醫藥學上可接受之界面活性劑(例如非離子界面活性劑，諸如聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、山梨糖醇酯、聚山梨糖醇酯、聚乙氧基化蓖麻油、聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物或其組合)。較佳地，醫藥學上可接受之界面活性劑為聚氧乙烯醚(例如聚氧乙烯月桂醚)、聚氧乙烯脂肪酸酯(例如聚氧乙基化12-羥硬脂酸)或其組合。

在本文所描述之生產方法中，液體可進一步包括醫藥學上可接受之穩定劑(例如香草精、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基甲氧苯或維生素E)。較佳地，醫藥學上可接受之穩定劑為香草精。

在本文所描述之生產方法中，液體可進一步包括醫藥學上可接受之油(例如，選自由中鏈三酸甘油酯、長鏈三酸甘油酯及其組合組成之群之油)。較佳地，醫藥學上可接受之油為一或多種中鏈三酸甘油酯(例如米格列醇、卡普特及克利索夫)。

在本文所描述之生產方法中，單體前驅體可為例如氰基丙烯酸烷酯(例如氰基丙烯酸乙基己酯)，且醫藥學上可接受之聚合物賦形劑可為例如聚(氰基丙烯酸烷酯) (例如聚(氰基丙烯酸乙基己酯))。

在本文所描述之生產方法中，如藉由動態光散射所量測，複數個奈米粒子可具有20-200 nm (例如40-100 nm)之平均數目平均直徑。在本文所描述之生產方法中，如藉由奈米粒子追蹤分析所量測，複數個奈米粒子可具有30-150 nm (例如80-100 nm)之平均數目平均直徑。

液體可為例如水性組合物(例如具有0.5至8.0之pH (例如0.5至3.0、2.0至8.0或3.0至7.0之pH)之水性組合物)。

生產方法可進一步包括對複數個奈米粒子進行凍乾之步驟。另外地或可替代地，生產方法可進一步包括用去離子水對複數個奈米粒子進行透析之步驟。

在本文所描述之生產方法中，液體之pH可視需要加以調整。舉例而言，液體之pH可經調整至在4.0至8.0 (例如5.0至7.0)範圍內。在一些實施例中，調整pH之步驟係在聚合步驟期間執行。在其他實施例中，調整pH之步驟係在聚合步驟之前或之後執行。

以下實例意圖說明本發明。該等實例不意圖以任何方式限制本發明。

實例實例 1. 製備聚磷腈奈米顆粒組合物 使用分子量為7 kDa至11 kDa之4-胺基苯甲酸乙酯(CAS：94-09-7)及聚乙烯乙醇取代(8至13個重複單元)之兩親媒性聚磷腈(POPZ)聚合物(SINTEF)。將11 mg化合物1A (定製)溶解於11 mL DMF及100 mg POPZ中。在室溫下在嚴格攪拌下將溶液逐滴添加至11 mL蒸餾水中。在一次位移之情況下，用蒸餾水對樣品進行透析。對粒子溶液進行凍乾以產生具有10% (w/w)之理論化合物1A 負載量之乾燥奈米粒子粉末。

實例 2. 製備 pH = 2 之 聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 製備含有於12 mL 0.01 M HCl (pH 2)中之PEG穩定劑克利弗HS 15 (0.12 g)及布里傑L23 (0.12 g)之水溶液。製備含有溶解於氰基丙烯酸2-乙基己酯(0.8 g)以及穩定劑(0.05 g香草精及15 μL米格列醇812)中之0.096 g化合物1A (定製)之溶液，且在室溫下保持攪拌2小時。

將兩種溶液在冰上混合且在超音波處理器(50%振幅)上均質化3分鐘，其中每30秒暫停10秒。在室溫下在旋轉器上聚合奈米乳液三小時。用0.1 M NaOH將pH調整至pH 6，且在室溫下進一步聚合隔夜(在旋轉器上)。用蒸餾水對粒子樣品進行透析。最終產物為液體懸浮液。理論負載量為10% (w/w)。

實例 3. 製備 pH = 4 之 聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於水溶液含有0.1 mM HCl (pH = 4)代替0.01 M HCl。

實例 4. 製備 pH = 1 之 聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於水溶液含有0.1 M HCl (pH = 1)代替0.01 M HCl。

實例 5. 在 無布里傑 L23 情況下 製備聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2-4中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於所含有之水溶液不含有布里傑L23且克利弗HS 15之量加倍。

實例 6. 在有更多香草精情況下製備聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2-5中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於香草精之量增加至0.1 g。

實例 7. 在有更多香草精情況下製備聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2-5中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於香草精之量減少至0.025 g。

實例 8. 製備 pH = 2 、 理論負載量 = 14.8% 之 聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於化合物1A 之理論負載量為14.8% (w/w)。化合物1A 之所量測最終負載量為3.3% (w/w)。

實例 9. 製備 pH = 3 、 理論負載量 = 14.8% 之 聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例2中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於(1)水溶液含有1 mM HCl (pH = 3)代替0.01 M HCl，及(2)化合物1A 之理論負載量為14.8% (w/w)。化合物1A 之所量測最終負載量為3.6% (w/w)。

實例 10. 製備 pH = 4 、 理論負載量 = 14.8% 之 聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米顆粒組合物 使用與實例3中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於化合物1A 之理論負載量為14.8% (w/w)。化合物1A 之所量測最終負載量為3.8% (w/w)。

實例 11. 奈米顆粒組合物之物理化學表徵 在磷酸鹽緩衝劑(pH 7)中使用動態光散射(Malvern Zetasizer及奈米粒子追蹤分析器(NTA))量測尺寸及尺寸分佈。藉由在50℃下對三個樣品等分試樣進行乾燥隔夜來測定乾重。稱重/移液三個樣品等分試樣，溶解於DMSO中且稀釋來測定藥物負載量及穩定性以進行LC-DAD-QTOF分析。使用三個雙性黴素B USP樣品作為標準物來測定化合物1A 之濃度。LC-QTOF方法為： 移動相：0.1%甲酸[A]及乙腈[B] HPLC系統：具有連接至QTOF之1290 DAD之Agilent 1290 HPLC系統 管柱：北極星(Polaris) 3 C18，150 × 2 mm，3 μm (Varian) 管柱恆溫器：30℃ 流動速率：0.3 ml/min 注射體積：2 μL 波長：385 nm以用於量測化合物1A /AMB，掃描190-600 nm 軟體：MassHunter定性分析B.0.600 後置時間：5 min 在負電噴霧模式(ESI-)中操作QTOF

HPLC梯度示於表1中。表 1

HPLC梯度：
時間 (min)	移動相 B %
0	4.8
20	61.8
22	80.0
22.5	4.8
23.0	結束

尺寸及尺寸分佈 奈米粒子尺寸、尺寸分佈、乾重及藥物負載量概述於表2中。表 2

調配物實例	1	2	3
Z平均平均直徑(nm)1	143	158	214
平均數目平均直徑(nm)1	85	48	40
尺寸多分散性指數(PDI)1	0.18	0.25	0.33
數目平均(模式)直徑(nm)2	74	78	82
數目平均(平均)直徑(nm)2	87	103	64
乾重(g)或(mg/mL)3	0.071 g	2.14 mg/mL	1.04 mg/mL
化合物1A 負載量[% (w/w)]	1.07	2.8	3.9

¹ 如藉由Zetasizer所量測；² 如藉由NTA所量測；³ 實例1粒子經凍乾，且實例2及3粒子經透析，藉此分別產生乾燥材料(g)及水性懸浮液(mg/mL)。

表3提供藉由NTA量測之粒度分佈細節。表 3

調配物實例	1	2	3
平均直徑(nm)	87.3	103	82.4
模式直徑(nm)	73.5	78	64.6
標準差(nm)	22.2	35.8	30.6
D10 (nm)	64	71	57.4
D50 (nm)	83.1	92.9	73.4
D90 (nm)	114.4	152.3	118

藥物負載量及穩定性 在來自實例1之組合物中，粒子中之42 mol%多烯為化合物1A 。化合物1A 之負載量為1.1% (w/w)，且總多烯負載量為2.5% (w/w)。

發現來自實例2之組合物含有與實例1中之多烯雜質相同、但含量較低之多烯雜質，此係因為總多烯之10%對應於在實例1中所發現之相同主要多烯雜質。液體樣品中之化合物1A 之濃度為0.59 mg/mL，使粒子中之化合物1A 負載量為2.8% (w/w)。

在實例3之組合物中，未觀測到化合物1A 之明顯降解。液體樣品中之化合物1A 之濃度為0.40 mg/mL，使粒子中之化合物1A 負載量為3.9% (w/w)。儘管可觀測到少量微小多烯雜質，但其濃度過低而不能測定其質量。聚 ( 氰基丙烯酸 2- 乙基己酯 ) 奈米粒子中之 化合物1A 之長期穩定性 在製備之後兩週再分析實例3組合物。藉由在λ = 385 nm下之UV，未觀測到歸因於兩週4℃下之儲存的降解。

較長時間段及不同溫度及濕度位準可用於測試組合物之存放期。

實例 12. 實例 3 組合物之功效 使用最低抑制濃度分析測定組合物之功效，且報導給予指標生物之50%生長抑制之活性化合物的濃度(MIC50)。在具有用於各條件之兩個(馬-欣二氏培養基(Müller-Hinton medium))或三個平行(M19-培養基)細胞培養物的孔盤中執行分析。

細胞培養基 ：不具有NaCl之馬-欣二氏及M19。指標生物 ：白色念珠菌 ATCC 10231 活性化合物之儲備溶液及對照 ： •  雙性黴素B (USP)：在孔中以最高濃度接種2.5 μg/mL之後，將真空乾燥粉末溶解於DMSO中直至2.5 mg/mL，得到最終濃度。 •  化合物1A (定製)：在孔中以最高濃度接種2.5 μg/mL化合物1A 之後，將粉末溶解於DMSO中直至2.5 mg/mL，得到最終濃度。假定批料為70%純。 •  實例3組合物：調配物為具有18 mg/mL奈米粒子之懸浮液。將懸浮液在培養基及白色念珠菌接種物中稀釋至5 μg/mL化合物1A 及130 μg/mL聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯)之最終濃度。由此溶液製備10份稀釋液，得到最低濃度之0.009 µg/ml化合物1A 。 •  空聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)粒子：空聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)粒子用作參考物。以與實例2及3中之方式相同之方式產生空聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)，不同之處在於其係以pH 1製備，且香草精濃度為10% (w/w)。以與實例3相同之方式稀釋粒子。所測試之最高聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)濃度為130 μg/mL。

在OD600下執行生長量測。

如實例11中所描述，發現化合物1A 在實例3組合物中穩定。此材料在針對白色念珠菌之活體外功效分析中經測試以驗證活性化合物以足以在與純化合物1A 相同之程度上抑制白色念珠菌之速率自粒子釋放。

在M19培養基中量測之MIC50值高於在馬-欣二氏培養基中量測之MIC50值，此係因為菌株在M19-培養基中生長得更快。整晚手動量測盤。於M19培養基及馬-欣二氏培養基中之兩種分析均顯示，實例3組合物之MIC50比純化合物1A 之MIC50高2-2.5倍。作為對照，在M19培養基中測試空聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)粒子之抑制。未觀測到白色念珠菌ATCC 10231 之生長抑制直至130 μg/mL濃度之聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)，該濃度為最高測試濃度。最高實例3組合物測試濃度(5 μg/mL)含有130 μg/ml聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯)。表 4.

	MIC50 (μg/mL)
	M19 培養基	馬 - 欣二氏培養基
雙性黴素B	0.34	0.04
實例3	0.38	0.15
化合物1A	0.18	0.06

實例 13 負載染料之奈米粒子之產生及表徵：製備包括化合物1 或其醫藥學上可接受之鹽(例如化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽)之其他奈米粒子。舉例而言，藉由如下之微乳液方法製備聚合物或脂質之經PEG塗佈及負載染料之奈米粒子： 聚合物奈米粒子：製備由氰基丙烯酸烷酯(例如氰基丙烯酸正丁酯)、醫藥學上可接受之油(例如米格列醇)與所添加之近紅外染料(例如DIR)之混合物組成的油相。隨後，將含有一或多種界面活性劑(例如布里傑L23及/或克利弗HS 15)之水相添加至油相中。可使用諸如克利弗HS 15之特定界面活性劑作為聚合引發劑，因此產生共價連接至聚乙二醇之聚合物賦形劑(例如聚(氰基丙烯酸烷酯))。藉由混合油與水相來製備水中油型乳液。用水性流體對分散液進行透析(例如用Spectra/Por透析膜MWCO 100,000 Da)以移除未併入奈米粒子中之界面活性劑。 脂質奈米粒子：對由脂質(例如硬脂酸及棕櫚酸異丙酯)之混合物及醫藥學上可接受之油(例如米格列醇)與所添加之近紅外染料(例如DIR)之混合物組成的脂質相進行預加熱直至熔融。製備由蒸餾水及添加劑(例如界面活性劑(例如卵磷脂80H及Andean QDP Ultra))組成之水相。混合脂質與水相。 負載化合物1A 之奈米粒子之例示性產生及表徵：藉由如下之微乳液方法製備經PEG塗佈及負載化合物1A 之聚(氰基丙烯酸烷酯)奈米粒子：製備含有氰基丙烯酸烷酯(例如氰基丙烯酸2-乙基丁酯)、醫藥學上可接受之油(例如米格列醇)及化合物1A 之油相。製備含有界面活性劑(例如布里傑L23及克利弗HS 15)之水相。克利弗HS 15亦可充當聚合引發劑。藉由混合油與水相來製備水中油型乳液。用水性流體對分散液進行深入地透析以移除未與粒子締合之界面活性劑(例如用透析膜，MWCO 100,000 Da)。

可使用動態光散射(例如Zetasizer)以測定流體動力學直徑、流體動力學直徑分佈及ζ電位。可在充分乾燥之後測定最終溶液之乾重含量(奈米粒子濃度)。為了計算經囊封藥物之量，自粒子提取藥物內容物，且藉由使用LC-MS/MS方法定量化合物1A 之經提取量。動態光散射方法通常顯示負載藥物之奈米粒子之奈米粒子尺寸(z平均)。

經奈米粒子穩定之微氣泡之產生及表徵： 如下產生與奈米粒子締合之充氣微氣泡：製備含有表面活性化合物(例如2% (w/w)酪蛋白)之溶液。使負載化合物1A 之聚乙二醇化奈米粒子(例如實例2、3及8-10或此實例中所描述之奈米粒子)與酪蛋白溶液混合。用氣體(例如空氣或全氟丙烷)使溶液飽和。在充氣氛圍下使用隔片密封小瓶。在用於含微氣泡調配物之一些製備方法中，組合物可經脫氣，之後添加微氣泡氣體。

使用20×相差物鏡及細胞計數器(血球計)自光顯微鏡影像測定所得經奈米粒子穩定之微氣泡的平均尺寸及濃度。對微氣泡進行計數，且藉由使用ImageJ影像分析器分析影像來計算尺寸。

使用螢光顯微法(使用相同類型之僅囊封代替藥物之螢光染料之奈米粒子)及電子顯微法以確認，奈米粒子與微氣泡締合，從而形成穩定(單)層。

實例 14 在此研究中，例如在健康動物(例如小鼠)中評估與奈米粒子締合之微氣泡用於靶向肺之特定藥物遞送的潛力。用藉由奈米粒子穩定之充氣微氣泡達成高局部濃度。

方法 研究經設計成各組中有一隻動物。根據如實例13中所描述之程序研發且使用經近紅外螢光染料標記之奈米粒子。使用完整動物成像器，在小動物內部定位此等奈米粒子。

在實驗中，若需要處死測試動物，則可給予動物麻醉，將其用於實驗，且在醒過來之前將其處死。在動物設施處儲存期間，監測動物福祉，且隨意給予動物食物及水。

動物實驗： 1.隨機選擇動物，稱重且給予提供完全麻醉之溶液(例如芬太尼(fentanyl)/美托咪啶(medetomidine)/咪達唑侖(midazolam)/水(2:1:2:5))之皮下注射。 2.置放導管，允許靜脈內注射。 3.注射所需氣泡。 4.使動物睡所需時間，之後將其安樂死。 5.隨後可收取肺、肝、腎及脾。 6.可使用完整動物成像器(例如Pearl)使來自器官之螢光成像。

奈米粒子： 為了執行動物實驗，使用近紅外標記之奈米粒子。

在僅含有奈米粒子之對照之後，測試包括與微氣泡締合之奈米粒子之醫藥組合物(例如如實例13中所描述)，其中微氣泡含有氣體(例如全氟丙烷)。

為了直接比較結果，使來自複數隻動物(例如三隻)之肺一起成像。

具有脂質奈米粒子之微氣泡： 產生具有脂質奈米粒子之微氣泡且對其進行測試。

測試肺積聚之穩定性以評估奈米粒子是否保留在肺中或再分佈至其他器官。隨後，檢查在所需時間量(例如注射之後1 h及2 h)之後的動物(例如兩隻)中的生物分佈。

肺中之奈米粒子之高局部濃度有益於將活性醫藥成分靶向遞送至肺組織。

實例 15 在此研究中，在到達肺之靶向藥物遞送中測試藉由奈米粒子穩定之充氣微氣泡。例如在健康小鼠中執行研究。

方法 如實例13中所描述製備經螢光染料(例如近紅外染料)標記之奈米粒子。使用完整動物成像器，在小動物內部定位此等奈米粒子。

在實驗中，若需要處死測試動物，則可給予動物麻醉，將其用於實驗，且在醒過來之前將其處死。

經奈米粒子穩定之微氣泡之產生：如下產生與奈米粒子締合之充氣微氣泡：

製備含有表面活性化合物(例如2% (w/w)酪蛋白)之溶液。使負載染料之聚乙二醇化NP與酪蛋白溶液混合。用氣體(例如六氟化硫或全氟丙烷)使溶液飽和。一次性添加改質劑(例如脲)以便進一步促進微氣泡與奈米粒子之間的締合。在充氣氛圍下使用隔片密封小瓶。如實例10中所描述執行動物實驗。對各動物靜脈內注射例如以下中之任一者： A)藉由聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯)奈米粒子穩定之填充全氟丙烷之微氣泡。 B)藉由聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯)奈米粒子穩定之具有脲之填充全氟丙烷之微氣泡。 C)藉由聚(氰基丙烯酸2-乙基己酯)奈米粒子穩定之填充六氟化硫之微氣泡。

在注射之後，獲取影像，且使用螢光強度評估填充藥物之奈米粒子在測試動物肺中之生物分佈。

實例 16 如藉由最低抑制濃度(MIC)及最低殺真菌濃度(MFC)所量測，測試化合物1A 針對一組廣泛的酵母菌及絲狀真菌菌株之功效。測試作為比較物之雙性黴素B、卡泊芬淨、氟康那唑及伏立康唑。

材料：分離株係自醫學真菌學中心(Center for Medical Mycology)處之培養物保藏中心取得且包括以下中之各者之20個菌株：白色念珠菌、光滑念珠菌(C. glabrata )、近平滑念珠菌(C. parapsilosis )、熱帶念珠菌(C. tropicalis )、新型隱球菌(Cryptococcus neoformans )、薰煙色麴菌(Aspergillus fumigatus )、黑麴菌(A. niger )、土麴菌(A. terreus )、鐮菌屬及毛黴菌(mucormycete ) (根黴菌屬(Rhizopus spp. )及白黴菌屬(Mucor spp. ))。亦包括克魯斯念珠菌(C. krusei )、土麴菌及青黴菌屬中之各者之10個菌株及擬青黴屬之5個菌株。該組含有具有已知之相對於其他現行抗真菌劑而言高之MIC的17個念珠菌菌株；亦包括最新臨床菌株。測試亦包括15個二型性真菌分離株。

最低抑制濃度：根據分別用於酵母菌及絲狀真菌之易感性測試之臨床及實驗室標準協會(Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI) M27-A3及M38-A2標準執行MIC測試(將隱球菌分離株培育72 h)。對於酵母菌菌株，培育溫度及時間分別為35℃及24-48 h，且接種物尺寸為0.5-2.5 × 10³ 個CFU/ml。對於絲狀菌株，接種物尺寸為0.4-5 × 10⁴ 個CFU/ml，且培育時間為菌株及藥物特定的。除使用YNB用於隱球菌之外，RPMI 1640始終為測試培養基。在24 h及48 h培育之後，在50%及100%處記錄化合物1A 之抑制終點；將針對麴菌菌株之卡泊芬淨結果讀取為最低有效濃度(MEC)，亦即相較於對照之匯合生長而言引起小型、圓形、緊密生長之最低濃度。

最低殺真菌濃度：根據先前由以下描述之修正執行MFC測定：Canton等人,Diagn. Microbiol. Infect. Dis. , 45:203-206, 2003以及Ghannoum及Isham,Infectious Diseases in Clinical Practice , 15(4):250-253, 2007。具體言之，將來自MIC分析之各透明孔之總內容物繼代培養至馬鈴薯右旋糖瓊脂上。為了避免抗真菌殘留，使等分試樣浸泡至瓊脂中且隨後一旦乾燥，則劃線分離，因此自藥物源移除細胞。殺真菌活性定義為相對於起始接種物計數而言每毫升之菌落形成單位(CFU)之數目減少≥ 99.9%，而抑真菌活性定義為減少＜ 99.9%。若藥物之MFC/MIC比為≤ 4，則其視為殺真菌的，或若比為＞ 4，則其視為抑真菌的。若MIC及MFC值在2個稀釋度內，則其視為等效的。

終點測定：與生長對照相比，所有化合物1A MIC終點皆在50%及100%抑制兩者下加以記錄。儘管化合物1A 確實顯示針對所有擬青黴屬及近平滑念珠菌菌株之50%及100%抑制兩者，但下文報導在100%抑制終點處之所有MIC值。

培育時間測定：在培育24小時及48小時之後記錄暴露於化合物1A 之後的生長抑制。此中例外係毛黴菌，其由於快速生長速率而僅在24 h讀取；及隱球菌菌株，其在72 h之後讀取以與所有其他比較物之培育期一致。在所測試之種屬中之任一者中，在24 h及在48 h記錄之MIC值之間均未發現差異。然而，由於青黴菌屬及擬青黴屬之一些菌株在MIC分析中在24小時不顯示可見生長，因此下文報導在48 h培育時間點之所有MIC值。

結果 針對念珠菌菌株之MIC及MFC測定：表5顯示針對白色念珠菌之化合物1A 及比較物的MIC及MFC資料，該等白色念珠菌包括氟康那唑易感菌株(n = 13)及氟康那唑抗性菌株(n = 7)兩者。MIC₅₀ 定義為抑制50%測試菌株之最低濃度且MIC₉₀ 定義為抑制90%測試菌株之最低濃度。MFC₅₀ 定義為殺滅50%測試菌株之最低濃度且MFC₉₀ 定義為殺滅90%測試菌株之最低濃度。表 5.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
氟康那唑抗性n = 7
範圍	1-2	1-＞4	0.25-1	0.5-1	0.125-2	0.5-＞32	32-＞32	＞32	＜0.06-＞32	16-＞32
MIC/MFC50	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
MIC/MFC90	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
氟康那唑易感n = 13
範圍	0.125-1	0.125-1	0.125-0.5	0.125-1	0.125-0.25	0.5-32	0.125-0.5	8-＞32	＜0.06-0.06	＞32
MIC/MFC50	0.5	0.5	0.25	0.25	0.25	0.25	0.25	＞32	0.6	＞32
MIC/MFC90	1	1	0.5	1	0.25	2	0.25	＞32	0.06	＞32

表6顯示化合物1A 及比較物針對光滑念珠菌菌株之殺真菌活性。表 6.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.25-2	0.5-2	0.125-1	0.5-1	0.25-8	1-＞32	2-＞64	＞64	0.06-＞32	＞32
MIC/MFC50	1	1	0.5	0.5	0.5	1	8	＞64	0.25	＞32
MIC/MFC90	2	2	0.5	1	2	32	＞64	＞64	4	＞32

表7顯示所有針對克魯斯念珠菌菌株之藥物的MIC及MFC資料。表 7.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-2	0.5-2	0.5-1	1	0.5-16	2-＞32	2-32	＞64	＜0.06-0.5	2-＞8
MIC/MFC50	1	1	0.5	1	1	2	16	＞64	0.125	＞8
MIC/MFC90	2	2	1	1	4	8	32	＞64	0.25	＞8

表8顯示針對近平滑念珠菌之殺真菌活性。表 8.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.25-2	0.25-2	0.125-1	0.5-2	0.25-2	2-＞32	0.25-＞64	＞64	＜0.06-＞32	1-＞32
MIC/MFC50	0.25	0.5	0.25	1	0.5	＞32	0.5	＞64	＜0.06	＞32
MIC/MFC90	2	2	0.5	1	2	＞32	0.5	＞64	0.06	＞32

表9顯示化合物1A 及比較物針對熱帶念珠菌之殺真菌活性。表 9.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-8	0.5-16	0.25-0.5	0.25-1	0.06-2	0.5-＞32	0.25-2	＞64	＜0.06-1	＞32
MIC/MFC50	1	1	0.25	0.5	0.25	32	0.25	＞64	0.06	＞32
MIC/MFC90	8	8	0.5	1	0.5	＞32	0.5	＞64	0.06	＞32

表10概述針對所有念珠菌菌株之化合物1A 及比較物的MIC及MFC資料。表 10.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.125-8	0.125-16	0.125-1	0.125-2	0.06-16	0.5-＞32	0.125-＞32	8-＞32	＜0.06-＞32	1-＞32
MIC/MFC50	1	1	0.5	0.5	0.5	16	0.5	＞32	0.06	＞32
MIC/MFC90	2	2	0.5	1	2	＞32	＞32	＞32	1	＞32

針對隱球菌菌株之MIC及MFC測定 表11展現化合物1A 及其比較物針對新型隱球菌菌株的活性。表 11.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-2	0.5-＞4	0.06-1	0.25-2	1-16	16-＞32	＜0.06-16	2	＜0.06-0.25	0.06-＞0.5
MIC/MFC50	1	1	0.25	0.5	16	＞32	2	＞64	＜0.06	＞0.5
MIC/MFC90	1	＞4	0.5	1	16	＞32	8	＞64	0.125	＞0.5

針對麴菌菌株之MIC及MFC測定 表12-15顯示針對個別麴菌屬之化合物1A 及比較物的MIC及MFC資料。表16為所有測試麴菌菌株之MIC及MFC資料的概述。表 12.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	1-4	2-＞4	1-8	1-＞32	0.125-8	8-＞32	32-＞64	＞64	0.25-4	1-＞16
MIC/MFC50	2	4	8	8	0.25	＞32	＞64	＞64	1	4
MIC/MFC90	2	＞4	8	＞32	0.5	＞32	＞64	＞64	2	＞16

表 13.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	1-2	1-＞4	1-2	1-＞8	0.25-1	32-＞32	64	64	0.25-2	1-＞8
MIC/MFC50	1	2	1	＞8	0.25	＞32	64	64	0.5	8
MIC/MFC90	2	＞4	2	＞8	0.5	＞32	64	64	1	＞8

表 14.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	1-2	2-＞4	0.25-2	0.25-＞8	0.125-2	16-＞32	32-＞64	＞64	0.06-8	0.5-＞8
MIC/MFC50	2	2	1	2	0.125	＞32	＞64	＞64	1	＞8
MIC/MFC90	2	4	1	＞8	0.25	＞32	＞64	＞64	4	＞8

表 15.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-4	2-＞4	0.25-16	2-＞32	0.25-1	32-＞32	4-＞64	＞64	0.25-2	1-＞4
MIC/MFC50	2	＞4	8	＞32	0.25	＞32	64	＞64	0.5	＞4
MIC/MFC90	4	＞4	8	＞32	0.5	＞32	＞64	＞64	0.5	＞4

表 16.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-4	1-＞4	0.25-16	0.25-＞8	0.125-8	8-＞32	4-＞64	＞64	0.06-8	0.5-＞8
MIC/MFC50	2	4	1	＞8	0.25	＞32	＞64	＞64	0.5	＞8
MIC/MFC90	2	＞4	8	＞8	0.5	＞32	＞64	＞64	2	＞8

針對治療困難/罕見真菌之MIC及MFC測定 表17顯示鐮菌菌株之MIC及MFC資料。表 17.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	1-4	1-4	0.5-2	1-4	1-64	＞32	8-＞64	＞64	2-＞32	8-＞32
MIC/MFC50	2	2	1	2	32	＞32	＞64	＞64	16	32
MIC/MFC90	4	＞4	2	2	32	＞32	＞64	＞64	＞32	＞32

表18顯示鐮菌菌株之MIC及MFC資料。表 18.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	1-4	1-＞4	0.25-2	0.5-＞8	32-＞32	＞32	＞32	＞32	8-＞16	16-＞16
MIC/MFC50	2	2	0.5	1	＞32	＞32	＞32	＞32	16	＞16
MIC/MFC90	4	＞4	2	8	＞32	＞32	＞32	＞32	＞16	＞16

針對青黴菌及擬青黴菌株之結果可分別見於表19及20中。表20僅含有濃度範圍，此係因為擬青黴菌株之數目(5個)太少而不能計算MIC₅₀ 及MIC₉₀ 值。表 19.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-2	2-＞4	0.5-4	1-＞8	0.25-＞32	16-＞32	1-＞64	64-＞64	0.5-＞32	1-＞32
MIC/MFC50	2	2	1	4	4	＞32	＞64	＞64	4	＞32
MIC/MFC90	2	4	2	＞8	32	＞32	＞64	＞64	＞32	＞32

表 20.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	0.5-＞4	4-＞4	0.25-＞8	＞4	1-＞32	32-＞32	32-＞64	＞64	0.125-2	1-＞8
MIC/MFC50	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A
MIC/MFC90	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A	N/A

針對二型性真菌之MIC及MFC測定 表21顯示皮炎芽生菌(Blastomyces dermatitidis )、粗球孢子菌(Coccidioides immitis )及莢膜組織漿菌(Histoplasma capsulatum )菌株之MIC資料。不在此等真菌上執行MFC，此係因為此等真菌為有限真菌，不存在針對其之用於執行MFC之標準化方法。表 21.

	1A MIC	1A MFC	安畢黴MIC	安畢黴MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
範圍	＜ 0.03-0.25	ND	＜ 0.03-0.125	ND	0.03-0.5	ND	2-32	ND	＜ 0.03-0.125	ND

ND =由於缺乏標準化方法，因此未加以測定

針對具有相對於其他抗真菌劑而言高之MIC之其他念珠菌菌株的MIC及MFC測定 表22比較針對具有相對於非多烯比較物而言高之MIC之念珠菌菌株(n = l7)之化合物1A 的MIC資料。表 22.

種屬	1A MIC	1A MFC	卡泊芬淨MIC	卡泊芬淨MFC	氟康那唑MIC	氟康那唑MFC	伏立康唑MIC	伏立康唑MFC
白色	2	2			＞64	＞64	32	＞32
白色	1	1			＞32	＞32
白色	1	1			＞32	＞32
白色	1	1			32	＞32
白色	1	1	1	32	＞32	＞32
白色	1	1	1	＞32	32	＞32	＞0.06	16
白色	1	＞4	2	＞32	＞32	＞32	0.5	＞32
光滑	1	1	2	32	32	＞64	1	＞32
光滑	1	1	1	32	2	＞64	＞32	＞32
光滑	1	1			＞64	＞64	1	＞32
光滑	1	1	2	16	＞64	＞64	1	＞32
光滑	1	1	4	＞32	8	＞64	0.25	＞32
光滑	2	2	8	32	64	＞64	2	＞32
克魯斯	0.5	2	16	＞32	16	＞64
近平滑	0.5	0.5	2	＞32	0.25	＞64	0.06	＞32
近平滑	0.5	0.5	2	＞32	0.5	＞64	0.06	＞32
近平滑	1	1	2	＞32	1	＞64	＞32	＞32

實例 17 在免疫功能不全鼠類模型中之播散麴菌病治療中，測試化合物1A 之功效且與安畢黴、伏立康唑及卡泊芬淨進行比較。

使用各約30 g之雌性CD-1小鼠(Charles River Laboratories, Wilmington, MA)作為模型。將動物房間之環境控制設定成維持16℃至22℃之溫度、30%-70%之相對濕度及12:12亮-暗循環。

製備標準接種物 生物：薰煙色麴菌AF9l係自CWRU醫學真菌學中心之培養物保藏中心獲得。在馬鈴薯右旋糖瓊脂(PDA)盤中繼代培養來自冷凍儲備液之細胞。隨後，使用具有0.05%吐溫(Tween) 80之無菌鹽水收取細胞，離心，且用生理鹽水(0.85% NaCl)洗滌三次。使用血球計製備1 × 10⁷ 個攻毒接種物。

接種物計數之驗證：為了檢查接種物計數，將薰煙色麴菌處理分生孢子懸浮液之十倍稀釋液塗鋪至PDA培養基上。在37℃下將盤培育2-4天且測定菌落計數。

免疫抑制：小鼠以以下劑量接受皮下環磷醯胺：感染前4天150 mg/kg，感染前1天100 mg/kg，及接種後2天100 mg/kg。在攻毒當天，自來自各組之一隻小鼠收集血液以進行白血球計數來驗證免疫抑制。

感染：用含1 × 10⁷ 個分生孢子之0.1 ml生理鹽水攻毒各小鼠(經由尾部靜脈)。在成功地IV給藥接種物且確認接種物之後動物視為經感染(參見章節7d)。使用組織真菌負荷及存活作為指標，對於組織真菌負荷使用5隻小鼠/組(隨機選擇)且對於存活使用10隻小鼠/組來評估治療組及對照組之功效。

測試化合物：發起人提供測試物品，亦即化合物1A (批料ELN EXP-11-AJ1675，效力928 mg/g)。其係在含有5%水性葡萄糖之5%二甲亞碸(DMSO)之溶液中靜脈內投與，該溶液係於使用當天由儲存於-20℃下之化合物1A 於DMSO中之儲備溶液製備。比較物(安畢黴、伏立康唑及卡泊芬淨)係由醫學真菌學中心自藥房購買。根據製造商說明書將其溶解於無菌水中，且獲取含有所選劑量之等分試樣。

在此報導中，安畢黴之劑量及濃度表示為雙性黴素B之含量。

治療組：將經感染小鼠隨機分為以下組(對於組織真菌負荷5隻/組且對於存活10隻/組)。

實驗I -治療組如下：1.0 mg/kg化合物1A 、0.5 mg/kg化合物1A 、7.5 mg/kg安畢黴、3.5 mg/kg安畢黴、7.5 mg/kg伏立康唑、1.0 mg/kg卡泊芬淨、媒劑(含有5%水性葡萄糖之5% DMSO)；及未經治療對照組。

實驗II -治療組如下：1.0 mg/kg化合物1A 、0.5 mg/kg化合物1A 、1.0 mg/kg安畢黴、0.5 mg/kg安畢黴；及未經治療對照組。所有治療皆靜脈內給予。

治療時程：在接種後兩小時開始，治療動物達七天時段。化合物1A 及卡泊芬淨一天給予一次，安畢黴在實驗I中每隔一天給予一次且在實驗II中每天給予。由於伏立康唑之快速清除，因此其一天給予兩次，間隔8 h。

組織真菌負荷：在治療最後一天之後一天處死小鼠；隨後以無菌方式移除腎及肺且稱重。將組織均質化且連續稀釋於磷酸鹽緩衝鹽水中。在PDA盤上培養均質物48 h以測定菌落形成單位(CFU)；組織真菌負荷表示為CFU/公克組織。

存活分析：監測經感染小鼠，且每天記錄兩次任何疾病徵象(亦即嗜睡、體重減輕、一般成長遲緩)或死亡，直至接種後28天。亦每天記錄各治療組之平均體重。對無法進食/飲水之瀕死動物進行安樂死。

統計分析：使用卡普蘭-麥爾(Kaplan-Meier)比較存活差異，且使用非參數獨立曼-懷特尼(Mann-Whitney)統計檢定比較腎或肺中之平均CFU。＜ 0.05之P 值視為統計學上顯著的。

結果 活體外活性：表23顯示化合物1A 及比較藥劑以及雙性黴素B針對薰煙色麴菌AF9 l (感染菌株)之活體外活性。表 23

	1A	安畢黴	雙性黴素B	伏立康唑	卡泊芬淨
MIC (μg/mL)	2	4	2	1	0.25 (MEC)
MFC (μg/mL)	2	N/A	16	＞ 8	＞ 16

實驗I 存活：在圖1中，存活係作為在治療第一天一組中之動物總數目百分比給出。

腎組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表24)。腎真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。

肺組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表24)。肺真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。表 24.

	平均log CFU ±標準差
治療	腎	肺
0.5 mg/kg1A	3.16 ± 0.40	3.46 ± 0.49
1.0 mg/kg1A	0.51 ± 1.02	0.55 ± 1.10
3.5 mg/kg安畢黴	0.45 ± 1.00	0.47 ± 1.06
7.5 mg/kg安畢黴	0.98 ± 1.34	1.11 ± 1.52
7.5 mg/kg伏立康唑	3.19 ± 0.59	3.38 ± 0.45
1.0 mg/kg卡泊芬淨	3.11 ± 0.62	3.41 ± 0.64
媒劑對照	3.40 ± 0.18	3.56 ± 0.19
未經治療對照	3.34 ± 0.39	3.52 ± 0.20

實驗II 存活：如圖2中可見，存活係作為相對於在治療第一天一組中之動物總數目而言之百分比給出。

腎組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表25)。腎真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。

肺組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表25)。肺真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。表 25.

	平均log CFU ±標準差
治療	腎	肺
0.5 mg/kg1A	2.93 ± 0.73	2.75 ± 0.93
1.0 mg/kg1A	1.16 ± 1.10*	1.17 ± 1.15*
0.5 mg/kg安畢黴	3.13 ± 0.94	2.37 ± 0.17
1.0 mg/kg安畢黴	2.72 ± 1.06	2.26 ± 0.34
未經治療對照	3.31 ± 0.37	3.30 ± 0.25

*當與未經治療對照組、經0.5 mg/kg安畢黴治療組及經0.5 mg/kg1A 治療組相比時，P 值＜ 0.05。

實例 18 在免疫功能不全鼠類模型中之播散念珠菌病治療中，評估化合物1A 相較於安畢黴、伏立康唑、氟康那唑及卡泊芬淨而言之功效。

使用各約20 g之雌性BALB/c小鼠(Charles River Laboratories, Wilmington, MA)作為模型。將動物房間之環境控制設定成維持16℃至22℃之溫度、30%-70%之相對濕度及12:12亮-暗循環。

標準接種物生物之製備：臨床白色念珠菌SC5314菌株係自CMM培養物保藏中心獲得且用作感染真菌。將白色念珠菌塗鋪於薩蒲洛(Sabouraud)右旋糖瓊脂(SDA)上且在37℃下培育2天。藉由離心收取白色念珠菌細胞且進行生理鹽水(0.85% NaCl)洗滌。使用血球計製備5 × 10⁵ 個攻毒接種物。

接種物計數之驗證：為了檢查接種物計數，將白色念珠菌處理分生孢子懸浮液之十倍稀釋液塗鋪至SDA培養基上。在37℃下將盤培育2天且測定菌落計數。

免疫抑制：小鼠以以下劑量接受皮下環磷醯胺：感染前4天150 mg/kg，感染前1天100 mg/kg，及接種後2天100 mg/kg。在攻毒當天，自來自各組之一隻小鼠收集血液以進行白血球計數來驗證免疫抑制。

感染：用含1 × 10⁴ 個芽生孢子之0.1 ml生理鹽水攻毒各小鼠(經由尾部靜脈)。在成功地IV給藥接種物且確認接種物之後動物視為經感染。使用組織真菌負荷及存活作為指標，對於組織真菌負荷使用5隻小鼠/組且對於存活使用10隻小鼠/組來評估治療組及對照組之功效。實驗I之組織負荷組及存活組係分別在兩個不同時機執行。

測試化合物：發起人提供測試物品，亦即化合物1A (批料ELN Exp-11-AJ1675，效力928 mg/g)。其係在含有5%水性葡萄糖之5%二甲亞碸(DMSO)之溶液中靜脈內投與，該溶液係於使用當天由儲存於-20℃下之化合物1A 於DMSO中之儲備溶液製備。比較物(安畢黴、伏立康唑、卡泊芬淨及氟康那唑)係由醫學真菌學中心自藥房購買。根據製造商說明書將其溶解於無菌水中，且獲取含有所選劑量之等分試樣。

在此報導中，安畢黴之劑量及濃度表示為雙性黴素B之含量。

治療組：將經感染小鼠隨機分為以下組(對於組織真菌負荷5隻/組且對於存活10隻/組)。

實驗I -治療組如下：0.7 mg/kg化合物1A 、0.35 mg/kg化合物1A 、5.4 mg/kg安畢黴、2.7 mg/kg安畢黴、4 mg/kg伏立康唑、0.35 mg/kg卡泊芬淨、6 mg/kg氟康那唑、媒劑(含有5%水性葡萄糖之5% DMSO)；及未經治療對照組。

實驗II -治療組如下：0.7 mg/kg化合物1A 、0.35 mg/kg化合物1A 、0.7 mg/kg安畢黴、0.35 mg/kg安畢黴；及未經治療對照組。所有治療皆靜脈內給予。

治療時程：在接種後兩小時開始，治療動物達七天時段。除伏立康唑之外，治療一天給予一次。由於伏立康唑之快速清除，因此其一天給予兩次，間隔8小時。

組織真菌負荷：在治療最後一天之後一天處死小鼠，以無菌方式移除腎及腦且稱重。將組織均質化且連續稀釋於磷酸鹽緩衝鹽水中。在SDA盤上培養均質物48小時以測定菌落形成單位(CFU)；組織真菌負荷表示為CFU/公克組織。

存活分析：監測經感染小鼠，且每天記錄兩次任何疾病徵象(亦即嗜睡、體重減輕、一般成長遲緩)或死亡，直至接種後28天。亦每天記錄各治療組之平均體重。對無法進食/飲水之瀕死動物進行安樂死。

統計分析：使用非參數獨立曼-懷特尼檢定比較腎或腦中之平均log CFU差異。使用卡普蘭-麥爾檢定比較存活差異。＜ 0.05之P值視為統計學上顯著的。

結果 活體外活性：表26顯示化合物1A 及比較藥劑以及雙性黴素B針對白色念珠菌SC5314 (感染菌株)之活體外活性。表 26.

	1A	安畢黴	雙性黴素B	伏立康唑	氟康那唑	卡泊芬淨
MIC (μg/mL)	0.5	0.5	0.125	0.008	0.25	0.25 (MEC)
MFC (μg/mL)	0.5	N/A	0.25	＞ 32	＞ 64	32

實驗I 存活：在圖3中，存活係作為在治療第一天一組中之動物總數目百分比給出。

腎組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表27)。腎真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。

腦組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表27)。腦真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。表 27.

	平均log CFU ±標準差
治療	腎	腦
0.35 mg/kg1A	3.16 ± 1.41	2.92 ± 1.21
0.7 mg/kg1A	2.66 ± 2.11	3.59 ± 1.20
2.7 mg/kg安畢黴	0.59 ± 0.93	0.14 ± 0.31
5.4 mg/kg安畢黴	0.51 ± 2.76	2.01 ± 0.82
4 mg/kg伏立康唑	3.45 ± 1.15	3.42 ± 2.30
0.35 mg/kg卡泊芬淨	3.22 ± 1.26	1.22 ± 1.87
6 mg/kg氟康那唑	3.87 ± 1.53	1.28 ± 1.95
媒劑對照	4.46 ± 0.56	3.39 ± 2.31
未經治療對照	4.62 ± 0.59	3.48 ± 1.36

實驗II 存活：在圖4中，存活係作為相對於在治療第一天一組中之動物總數目而言之百分比給出。

腎組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表28)。腎真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。

腦組織真菌負荷：組織真菌負荷係在最後一次治療之後一天加以評估或在瀕死動物之情況下在死亡之後立即加以評估(表28)。腦真菌負荷經分析且作為平均log CFU ±標準差給出。表 28.

	平均log CFU ±標準差
治療	腎	腦
0.35 mg/kg1A	3.53 ± 0.63	3.55 ± 1.26
0.7 mg/kg1A	2.99 ± 1.05a,b	2.97 ± 2.04
0.35 mg/kg安畢黴	4.33 ± 0.50	4.04 ± 0.31
0.7 mg/kg安畢黴	4.27 ± 0.67	3.84 ± 0.68
未經治療對照	4.57 ± 0.22	4.19 ± 0.84

^a 當與未經治療對照組相比時，P 值＜ 0.05。^b 當與經安畢黴0.35治療組相比時，P 值＜ 0.05。

實例 19 已總共產生74批粒子；此等批次中之26批已使用PACA產生且48批已使用聚(乳酸-共-乙醇酸) (PLGA)產生。

已使用直徑、多分散性指數(PDI)及於懸浮液中之穩定性作為準則來評估粒子品質。特定言之，所製備之粒子如下經表徵為表現良好的、可接受的及表現不佳的： 表現良好的粒子調配物為具有＜ 200 nm之z平均直徑、＜ 0.3之PDI且不具有可見黏聚物之穩定懸浮液； 可接受的粒子調配物為具有＞ 0.3l之PDI之穩定懸浮液；且 表現不佳的粒子調配物為容易發生相分離及沈降之不穩定懸浮液。

此實例中所產生之調配物之概述提供於表29中。表 29.

編號	調配物	調配物特性	編號	調配物	調配物特性
1	POPZ	表現良好	45	PEHCA	可接受
2	PACA	表現不佳	46	PLGA、2% Plu F68、NMP	表現不佳
3	PACA	可接受	47	PLGA、2% Plu F127、NMP	表現良好
4	PACA	表現不佳	48	PLGA、4% Plu F127、NMP	表現良好
5	PACA	可接受	49	PLGA、2%吐溫80、NMP	表現良好
6	PACA	可接受	50	PLGA、2% Plu F68、50% NMP於DMSO中	新製時表現良好、在透析之後表現不佳
7	PACA	可接受	51	PLGA、2% Plu F127、50% NMP於DMSO中	表現良好
8	PACA	可接受	52	PLGA、4% Plu F127、50% NMP於DMSO中	表現良好
9	PACA	表現不佳	53	PLGA、2%吐溫80、50% NMP於DMSO中	新製時表現良好、在透析之後表現不佳
10	PEHCA	表現不佳	54	PLGA、4% Plu F127、50% NMP於DMSO中	新製時表現良好、在透析之後表現不佳
11	PEHCA	表現不佳	55	PEHCA與1% V65及20%克利弗之聚合	在離心之後可接受
12	PEHCA	表現不佳	56	PEHCA與5% V65及20%克利弗之聚合	在離心之後可接受
13	PEHCA	表現不佳	57	PEHCA與5% V65及20%克利弗以及5%香草精之聚合	表現不佳
14	PEHCA pH 1	表現良好	58	PEHCA與5% V65及20%克利弗、5%香草精以及10%化合物1A 之聚合	表現良好
15	PEHCA pH 2	表現良好	59	2% PVA、NMP、5%化合物1A 、5%香草精	表現良好
16	PEHCA pH 3	表現不佳	60	4% PVA、NMP、5%化合物1A 、5%香草精	表現不佳
17	PEHCA pH 4	表現不佳	61	2% F68、NMP、5%化合物1A 、5%香草精	表現不佳
18	PEHCA pH 4	表現不佳	62	2% PVA、NMP、10%化合物1A	表現不佳
19	PEHCA、5%香草精pH 2	可接受	63	4% PVA、NMP、10%化合物1A	表現不佳
20	PEHCA、5%香草精pH 2、丙酮	可接受	64	2% F68、NMP、10%化合物1A	表現不佳
21	PEHCA、5%香草精pH 2、丙酮	表現不佳	65	PLGA、2% Plu F127、香草精、NMP	表現良好
22	PEHCA、5%香草精pH 2	可接受	66	PLGA、4% Plu F127、香草精、NMP	表現良好
23	PEHCA、5%香草精pH 2、丙酮	表現不佳	67	2%吐溫80、香草精、NMP	表現良好
24	PEHCA、5%香草精pH 2、丙酮	表現不佳	68	4%吐溫80、香草精、NMP	表現良好
25	相容性研究脂質		69	PLGA、2% Plu F127、NMP	表現良好
26	測試奈米總成PLGA	表現不佳	70	PLGA、4% Plu F127、NMP	表現良好
27	經擴展之相容性研究脂質及油		71	2%吐溫80、NMP	表現良好
28	PLGA粒子合成	表現良好	72	4%吐溫80、NMP	表現良好
29	PLGA、2% PVA、NMP	可接受	73	PLGA、2% Plu F127、DMF	可接受
30	PLGA、1% Plu F68、NMP	表現不佳	74	PLGA、4% Plu F127、DMF	可接受
31	PLGA、2% PVA、10% NMP於丙酮中	表現不佳	75	2%吐溫80、DMF	可接受
32	PLGA、2% Plu F68、10% NMP於丙酮中	表現不佳	76	4%吐溫80、DMF	可接受
33	PLGA、1% Plu F68、10% NMP於丙酮中	表現不佳	77	PEHCA、香草精、化合物1A 、克利弗	表現良好
34	PLGA	表現不佳	78	PEHCA、1,6-HBCA、香草精、化合物1A 、克利弗	表現良好
35	PLGA	表現不佳	79	PEHCA、香草精、化合物1A 、克利弗、布里傑	表現良好
36	PLGA	表現不佳	80	PEHCA、1,6-HBCA、香草精、化合物1A 、克利弗	表現不佳
37	PLGA	表現不佳	81	PEHCA、香草精、化合物1A 、克利弗、布里傑	表現不佳
38	PLGA	表現不佳	82	PEHCA、香草精、化合物1A 、克利弗、布里傑	表現不佳
39	PLGA	表現不佳	83	PEHCA、瑞香草醌、化合物1A 、克利弗、布里傑	表現不佳
40	PLGA	表現不佳	84	PEHCA、瑞香草醌、化合物1A 、克利弗、布里傑	表現不佳
41	PLGA	表現不佳	85	甲醇/氯仿、2% Plu	表現不佳
42	PEHCA	可接受	86	甲醇/氯仿、4% Plu	表現不佳
43	PEHCA	表現不佳	87	甲醇/氯仿、2%吐溫80	表現不佳
44	PEHCA	可接受	88	甲醇/氯仿、4%吐溫80	表現不佳

使用以下組分製備調配物45。

水相	量	單位
克利弗HS 15	0.048	g
布里傑L23	0.048	g
10 mM HCl. pH 2	4.8	g
6-O-棕櫚醯基-L-抗壞血酸	0.0048
有機相
氰基丙烯酸2-乙基己酯	0.32	g
化合物1A	0.0384	g
香草精	0.04	g
米格列醇812	0.0056	g
總計：	5.30	g

使用以下組分製備調配物49。

	量	單位
有機相
化合物1A	0.005	g
聚(乳酸交酯-共-乙交酯)	0.05	g
N -甲基-2-吡咯啶酮	2.5	ml
水相(pH 7)
吐溫-80	0,05	g
DI水	2.5	ml

使用以下組分製備調配物73。

	量	單位
有機相
化合物1A	0.0025	g
聚(乳酸交酯-共-乙交酯)	0.05	g
N ,N -二甲基甲醯胺	2.5	ml
水相(pH 7)
普洛尼克(Pluronic) F127	0.05	g
DIW	2.5	ml

用於此實例中之聚(乳酸交酯-共-乙交酯)具有50:50之乳酸交酯-乙交酯比，經酯封端，且具有38000-54000 Da之重量平均分子量。

PACA 粒子 如下文所描述，用於產生PACA粒子之多個參數變化。

單體：不同類型之PACA單體用於囊封化合物1A 。目標為在不開始聚合反應之情況下將化合物1A 溶解於油相中。聚(氰基丙烯酸乙基己酯) (PEHCA)與化合物1A 一起工作。亦測試聚(氰基丙烯酸丁酯) (PEBCA)。在此等測試期間，發現化合物1A 引發PEBCA之聚合且所得粒子不符合要求。

pH：在低pH (例如pH = 1)下之粒子聚合產生具有優良特性(尺寸、尺寸分佈及膠體穩定性)之粒子。由於在低pH下之化合物1A 氧化，因此利用較高pH 4。發現化合物1A 在產生期間於油相中之滯留降低其對pH之敏感性。測試較低pH位準以判定粒子是否具有較高負載量及負載效率。此等調配物之LC-DAD-QTOF分析表明，未發生降解，且因此pH並非化合物1A 穩定性之關鍵參數。

界面活性劑：布里傑L35與克利弗HS15之混合物通常用於整個本文所描述之測試中。發現克利弗引發聚合過程。

穩定劑：測試抗壞血酸對化合物1A 在溶液中之穩定性的影響。在聚合期間，向水相中添加抗壞血酸。發現化合物1A 在高濃度抗壞血酸下經化學脫水。發現高濃度抗壞血酸降低化合物1A 之穩定性。

測試香草精對化合物1A 之穩定性之影響。在具有及不具有香草精之情況下執行一系列實驗。在此等實驗中，發現香草精有助於化合物1A 溶解。亦觀測到添加香草精會降低化合物1A /丙烯酸酯懸浮液之穩定性。針對此影響之一個可能性說明可為化合物1A 在油相中之溶解性提高，此係因為觀測到經溶解之化合物1A 與未經溶解之化合物1A 相比更易於與丙烯酸酯單體反應。

一般而言，PACA粒子之成分含有： •  水相：布里傑L35、克利弗HS15及用於調整pH之HCl •  油相：丙烯酸酯單體(氰基丙烯酸乙基己酯、氰基丙烯酸乙基丁酯、氰基丙烯酸1-庚酯及氰基丙烯酸2-苯基乙酯/氰基丙烯酸丁酯)、米格列醇、香草精、化合物1A 。氰基丙烯酸1-庚酯及氰基丙烯酸2-苯基乙酯/氰基丙烯酸丁酯不能溶解化合物1A 。

關鍵發現： •  PACA粒子可使化合物1A (經測試2週)在懸浮液中穩定。 •  香草精對化合物1A 具有溶解作用。 •  PACA粒子可在低pH下產生而不會造成不可接受之位準之化合物1A 分解。 •  抗壞血酸及6-O-棕櫚醯基-L-抗壞血酸、水溶性抗氧化劑未能在所測試之抗壞血酸濃度下提高化合物1A 穩定性。

化合物1A 之表現最佳的PACA調配物中之一者的LC-UV跡線示於圖5中。

PLGA 粒子 已對作為用於化合物1A 之媒劑之PLGA奈米粒子進行研究。PLGA具有某些優於PACA之有利特性。舉例而言，PLGA聚合物預先形成。此意謂聚合物賦形劑不涉及反應性相關問題。另外，PLGA允許使用有機溶劑，藉此准許化合物1A 在囊封之前完全溶解。

用於製備本文所描述之PLGA粒子之方法為奈米沈澱。此程序涉及向含有界面活性劑之水溶液中緩慢添加有機相(含有PLGA、化合物1A 及例如香草精之其他視情況選用之疏水性成分)。可替代地，可例如藉由在流過微流體通道之連續流中混合固定比率之有機相與水相來使用微流控。

在PLGA粒子之初始測試期間，已在磁力驅動攪拌下將有機相添加至水溶液中。吾等在1-3種不同濃度下測試四種不同界面活性劑。另外，吾等已測試多種有機溶劑及有機溶劑混合物。測試條件概述於表30中。

表30提供PLGA產生期間之測試條件概述。化合物1A 百分比表示理論最大乾重負載量。表 30.

	NMP	NMP	NMP、5%香草精	10% NMP於丙酮中	10% NMP於乙醇中	10% NMP於DMSO中	50% NMP於DMSO中	DMF
2% PVA	10%化合物1A 2	-	5%化合物1A 1	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	-
4% PVA	10%化合物1A 3	-	5%化合物1A 3	-	-	-	-	-
1% F68	10%化合物1A 3	-	-	10%化合物1A 3	-	-	-	-
2% F68	10%化合物1A 2	-	5%化合物1A 3	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	-
2% F127	10%化合物1A 1	5%化合物1A 1	5%化合物1A 1	-	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	10%化合物1A 3	5%化合物1A 4
4% F127	10%化合物1A 1	5%化合物1A 1	5%化合物1A 1	-	-	-	-	5%化合物1A 4
2%吐溫80	10%化合物1A 1	5%化合物1A 1	5%化合物1A 1	-	-	-	-	5%化合物1A 4
4%吐溫80	5%化合物1A 4	5%化合物1A 1	5%化合物1A 1	-	-	-	-	5%化合物1A 4

¹ 調配物為表現良好的調配物；² 調配物為可接受的³ 調配物為表現不佳的調配物⁴ 此調配物無可用資料。

現行所達成之化合物1A 之最大負載量為2.4%，然而，吾等希望將此負載量增加至＞ 5%。

一般而言，PLGA粒子包括： •  水相：聚(乙烯醇) (PVA)、普洛尼克F68 (F68)、普洛尼克F127 (F127)、吐溫80。濃度係以(w/v)%形式給出。 •  有機相：有機溶劑、化合物1A 及潛在之其他疏水性賦形劑(例如香草精) 關鍵發現： •  NMP為用於製備PLGA粒子之表現最佳的溶劑。 •  普洛尼克F127及吐溫80為用於製備本文所描述之PLGA粒子之表現最佳的界面活性劑中之一些。 •  香草精並不增加PLGA粒子之藥物負載量。 •  化合物1A 在粒子產生期間仍穩定。 •  化合物1A 在最終懸浮液中之濃度低，此係歸因於其在產生期間稀釋。化合物1A 之濃度可藉由切向流過濾來增加。

化合物1A 之表現最佳的PLGA調配物中之一者的LC-UV跡線示於圖6中。

脂質粒子 對作為用於化合物1A 之媒劑之基於脂質的粒子進行研究。化合物1A 在不同脂質及油中之溶解性研究係如下清單中所示來執行。 •  硬脂酸 •  肉豆蔻酸 •  棕櫚酸 •  肉豆蔻酸異丙酯 •  棕櫚酸異丙酯 •  1-壬醇 •  沉香醇 •  丁香酚 •  反式肉桂醛 •  乙酸沉香酯 •  對大茴香醛 •  四甘醇

測試油或脂質皆未充分溶解化合物1A 。化合物1A 在某種程度上僅可溶於反式肉桂醛中。

實例 20 使用去溶劑化方法，將諸如乙醇、丙酮或N -甲基吡咯啶酮之有機溶劑緩慢添加至白蛋白水溶液中。此舉使白蛋白沈澱。可使用戊二醛或轉麩醯胺酸酶使所沈澱之蛋白質交聯。藉由離心來純化蛋白質粒子且再懸浮，接著透析。

實例 21 藉由將脲添加至白蛋白溶液中產生白蛋白奈米粒子。此舉使蛋白質之三級結構去穩定，從而使蛋白質之疏水域暴露於水相，引起粒子形成。可使用戊二醛或轉麩醯胺酸酶使所沈澱之蛋白質交聯。藉由離心來純化蛋白質粒子且再懸浮，接著透析。

實例 22 如實例21中所描述但替代地在高溫下，使蛋白質去穩定。此舉亦誘導一定量之蛋白質交聯。

實例 23 使用與實例20-22中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於蛋白質為絲蛋白。

實例 24 使用與實例20-22中所描述之程序相同之程序用於此實例，不同之處在於蛋白質為明膠。

實例 25 對於實例20-24中之任一個，化合物1A自於N-甲基吡咯啶酮或DMSO中之溶液膨脹至奈米粒子中。 其他實施例

在不背離本發明之範疇及精神之情況下，對於熟習此項技術者，所描述發明之各種修改及變化將變得顯而易見。儘管已結合特定實施例描述本發明，但應理解如所主張之本發明不限於該等特定實施例。

圖1為顯示經薰煙色麴菌(Aspergillus fumigatus ) AF91攻毒且未經治療或經1.0 mg/kg化合物1A 、0.5 mg/kg化合物1A 、7.5 mg/kg安畢黴(AmBisome)、3.5 mg/kg安畢黴、7.5 mg/kg伏立康唑(voriconazole)、1.0 mg/kg卡泊芬淨(caspofungin)或媒劑(含有5%水性葡萄糖之5% DMSO)治療之小鼠的存活分析的圖表。 圖2為顯示經薰煙色麴菌AF91攻毒且未經治療或經1.0 mg/kg化合物1A 、0.5 mg/kg化合物1A 、1.0 mg/kg安畢黴或0.5 mg/kg安畢黴治療之小鼠的存活分析的圖表。 圖3為顯示經白色念珠菌(Candida albicans ) SC5314攻毒且未經治療或經0.7 mg/kg化合物1A 、0.35 mg/kg化合物1A 、5.4 mg/kg安畢黴、2.7 mg/kg安畢黴、4 mg/kg伏立康唑、0.35 mg/kg卡泊芬淨、6 mg/kg氟康那唑(fluconazole)或媒劑(含有5%水性葡萄糖之5% DMSO)治療之小鼠的存活分析的圖表。 圖4為顯示經白色念珠菌SC5314攻毒且未經治療或經0.7 mg/kg化合物1A 、0.35 mg/kg化合物1A 、0.7 mg/kg安畢黴或0.35 mg/kg安畢黴治療之小鼠的存活分析的圖表。 圖5為顯示包括1.8% (w/w)化合物1A 之調配物45之LC-UV跡線的圖表。LC-UV跡線展現滯留時間為17-19 min之化合物1A 與聚(氰基丙烯酸烷酯) (PACA)聚合物之間的不合需要之反應。 圖6為顯示包括2.4% (w/w)化合物1A 之調配物49之LC-UV跡線的圖表。LC-UV跡線顯示，調配過程中尚未發生化合物1A 之降解或反應。19.5 min時之雜質亦存在於用於調配物之材料中。 圖7為顯示包括0.68% (w/w)化合物1A 之調配物73之LC-UV跡線的圖表。LC-UV跡線顯示，調配過程中尚未發生化合物1A 之降解或反應。

Claims (94)

1. 一種包含複數個奈米粒子的醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

   

   ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
2. 如請求項1之醫藥組合物，其中該活性醫藥成分為

   

   ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
3. 如請求項1或2之醫藥組合物，其進一步包含醫藥學上可接受之聚合物賦形劑。
4. 如請求項3之醫藥組合物，其中該複數個奈米粒子包含該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑。
5. 如請求項4之醫藥組合物，其中該活性醫藥成分經奈米囊封。
6. 如請求項3至5中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯)或聚磷腈。
7. 如請求項6之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯)。
8. 如請求項7之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸乙基己酯)、聚(氰基丙烯酸乙酯)、聚(氰基丙烯酸正己酯)、聚(氰基丙烯酸4-甲基戊酯)、聚(氰基丙烯酸乙基丁酯)、聚(氰基丙烯酸丁酯)或聚(氰基丙烯酸辛酯)。
9. 如請求項8之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸乙基己酯)。
10. 如請求項3至5中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(乳酸-共-乙醇酸)。
11. 如請求項3至5中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為蛋白質。
12. 如請求項11之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為作為酪蛋白、白蛋白、絲蛋白、明膠或其組合之蛋白質。
13. 一種包含複數個奈米粒子的醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含聚(氰基丙烯酸乙基己酯)及活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
14. 一種包含複數個奈米粒子的醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含聚(乳酸-共-乙醇酸)及活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
15. 一種包含複數個奈米粒子的醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含酪蛋白、白蛋白、絲蛋白、明膠或其組合及活性醫藥成分，該活性醫藥成分為具有以下結構之化合物：

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
16. 如請求項12或15之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為酪蛋白。
17. 如請求項12或15之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為白蛋白。
18. 如請求項12或15之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為絲蛋白。
19. 如請求項12或15之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為明膠。
20. 如請求項1至19中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物為經凍乾組合物。
21. 如請求項1至19中任一項之醫藥組合物，其進一步包含複數個微氣泡。
22. 一種包含複數個微氣泡及複數個奈米粒子的醫藥組合物，該複數個奈米粒子包含具有以下結構之化合物：

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
23. 如請求項22之醫藥組合物，其中該化合物為

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
24. 如請求項22或23之醫藥組合物，其中該等奈米粒子包含聚(氰基丙烯酸烷酯)、聚磷腈或聚(乳酸-共-乙醇酸)。
25. 如請求項22或23之醫藥組合物，其中該等奈米粒子包含酪蛋白、白蛋白、絲蛋白、明膠或其組合。
26. 如請求項21至25中任一項之醫藥組合物，其中該等微氣泡包含全氟碳、烴、氟化硫氣體、空氣、空氣組分或其混合物。
27. 如請求項26之醫藥組合物，其中該等微氣泡包含氮氣(N₂ )、氧氣(O₂ )、氬氣(Ar)、二氧化碳(CO₂ )、氦氣(He)、氖氣(Ne)、甲烷(CH₄ )或其混合物。
28. 如請求項26之醫藥組合物，其中該等微氣泡包含全氟碳。
29. 如請求項26之醫藥組合物，其中該等微氣泡包含空氣或其組分。
30. 如請求項21至29中任一項之醫藥組合物，其中該複數個奈米粒子之至少一部分與微氣泡表面締合。
31. 如請求項21至30中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物進一步包含表面活性蛋白。
32. 如請求項31之醫藥組合物，其中該表面活性蛋白為白蛋白。
33. 如請求項1至32中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之界面活性劑。
34. 如請求項33之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之界面活性劑為非離子界面活性劑。
35. 如請求項33之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之界面活性劑為聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪酸酯、山梨糖醇酯、聚山梨糖醇酯、聚乙氧基化蓖麻油、聚氧乙烯/聚氧丙烯嵌段共聚物或其組合。
36. 如請求項35之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之界面活性劑為聚氧乙烯醚、聚氧乙烯脂肪酸酯或其組合。
37. 如請求項35或36之醫藥組合物，其中該聚氧乙烯脂肪酸酯為聚氧乙基化12-羥硬脂酸。
38. 如請求項35或36之醫藥組合物，其中該聚氧乙烯醚為聚氧乙烯月桂醚。
39. 如請求項1至38中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之穩定劑。
40. 如請求項39之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之穩定劑為香草精、丁基化羥基甲苯、丁基化羥基甲氧苯或維生素E。
41. 如請求項40之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之穩定劑為香草精。
42. 如請求項39至41中任一項之醫藥組合物，其中相對於粒子質量而言，該醫藥組合物包含0.1%-10% (w/w)醫藥學上可接受之穩定劑。
43. 如請求項31至33中任一項之醫藥組合物，其中相對於粒子質量而言，該醫藥組合物包含0.5%-8% (w/w)醫藥學上可接受之穩定劑。
44. 如請求項31至33中任一項之醫藥組合物，其中相對於粒子質量而言，該醫藥組合物包含1%-5% (w/w)醫藥學上可接受之穩定劑。
45. 如請求項1至44中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物進一步包含醫藥學上可接受之油。
46. 如請求項45之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之油選自由以下組成之群：中鏈三酸甘油酯、長鏈三酸甘油酯及其組合。
47. 如請求項46之醫藥組合物，其中該醫藥學上可接受之油為一或多種中鏈三酸甘油酯。
48. 如請求項47之醫藥組合物，其中該一或多種中鏈三酸甘油酯選自由以下組成之群：米格列醇(Miglyol)、卡普特(Captex)及克利索夫(Kollisolv)。
49. 如請求項45至48中任一項之醫藥組合物，其中相對於該粒子質量而言，該醫藥組合物包含0.5%-5% (w/w)醫藥學上可接受之油。
50. 如請求項1至49中任一項之醫藥組合物，其中如藉由動態光散射所量測，該複數個奈米粒子具有20-200 nm之平均數目平均直徑。
51. 如請求項1至49中任一項之醫藥組合物，其中如藉由動態光散射所量測，該複數個奈米粒子具有40-100 nm之平均數目平均直徑。
52. 如請求項1至49中任一項之醫藥組合物，其中如藉由奈米粒子追蹤分析所量測，該複數個奈米粒子具有30-150 nm之平均數目平均直徑。
53. 如請求項1至49中任一項之醫藥組合物，其中如藉由奈米粒子追蹤分析所量測，該複數個奈米粒子具有80-100 nm之平均數目平均直徑。
54. 如請求項1至53中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物為水性組合物。
55. 如請求項54之醫藥組合物，其中該醫藥組合物之pH為4.0至8.0。
56. 如請求項55之醫藥組合物，其中該pH為5.0至7.0。
57. 如請求項1至56中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物進一步包含作為極性有機溶劑之共溶劑。
58. 如請求項57之醫藥組合物，其中該極性有機溶劑為二甲亞碸、N-甲基-2-吡咯啶酮、N,N-二甲基甲醯胺或其組合。
59. 如請求項1至56中任一項之醫藥組合物，其中如藉由液相層析所量測，該醫藥組合物包含1%-15% (乾重/乾重)該活性醫藥成分。
60. 如請求項1至56中任一項之醫藥組合物，其中如藉由液相層析所量測，該醫藥組合物包含2%-15% (乾重/乾重)該活性醫藥成分。
61. 如請求項1至56中任一項之醫藥組合物，其中如藉由液相層析所量測，該醫藥組合物包含3%-10% (乾重/乾重)該活性醫藥成分。
62. 如請求項1至56中任一項之醫藥組合物，其中如藉由液相層析所量測，該醫藥組合物包含3.5%-10% (乾重/乾重)該活性醫藥成分。
63. 如請求項1至56中任一項之醫藥組合物，其中如藉由液相層析所量測，該醫藥組合物包含5%-10% (乾重/乾重)該活性醫藥成分。
64. 如請求項1至63中任一項之醫藥組合物，其中如藉由液相層析所量測，該醫藥組合物包含3%-6% (乾重/乾重)該活性醫藥成分。
65. 一種治療有需要之個體之方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之如請求項1至64中任一項之醫藥組合物。
66. 如請求項65之方法，其中該個體患有由以下造成之真菌感染：念珠菌(Candida )屬、隱球菌(Cryptococcus )屬、麴菌(Aspergillus )屬、炭疽刺盤孢菌(Colletotrichum )屬、地絲菌(Geotrichum )屬、黑酵母樣真菌(Hormonema )屬、油瓶黴(Lecythophora )屬、擬青黴(Paecilomyces )屬、青黴菌(Penicillium )屬、紅酵母(Rhodotorula )屬、鐮菌(Fusarium )屬、酵母菌(Saccharomyces )屬、木黴(Trichoderma )屬、髮癬菌(Trichophyton )屬、小帚樣黴菌(Scopularilopsis )屬、組織漿菌(Histoplasma )屬、芽生菌(Blastomyces )屬或球孢子菌(Cocciodioides )屬。
67. 如請求項66之方法，其中該個體患有由以下造成之真菌感染：念珠菌屬、麴菌屬或隱球菌屬。
68. 如請求項67之方法，其中該個體患有由唑類抗性麴菌屬造成之真菌感染。
69. 如請求項65至67中任一項之方法，其中該醫藥組合物係靜脈內、藉由吸入、鼻內、經口、舌下、經頰、經皮、皮內、肌內、陰道內、非經腸、動脈內、顱內、鞘內、皮下、眼眶內、心室內、脊椎內、腹膜內或局部投與。
70. 一種向個體之目標部位遞送治療有效量之化合物1 、化合物1A 或其醫藥學上可接受之鹽的方法，該方法包含向該個體投與如請求項1至64中任一項之醫藥組合物。
71. 如請求項70之方法，其中該醫藥組合物係靜脈內投與。
72. 如請求項70或71之方法，其中該目標部位為該個體之肺。
73. 一種產生複數個奈米粒子之方法，該複數個奈米粒子包含醫藥學上可接受之聚合物賦形劑及具有以下結構之化合物：

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽； 該方法包含使於一液體中之該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑之單體前驅體與該化合物或其醫藥學上可接受之鹽聚合，該液體包含該單體前驅體，其中該聚合步驟產生該複數個奈米粒子。
74. 如請求項73之方法，其中該化合物具有以下結構：

    

    ， 或其醫藥學上可接受之鹽。
75. 如請求項73或74之方法，其中該液體進一步包含醫藥學上可接受之界面活性劑。
76. 如請求項75之方法，其中該醫藥學上可接受之界面活性劑為非離子界面活性劑。
77. 如請求項73至76中任一項之方法，其中該液體進一步包含醫藥學上可接受之穩定劑。
78. 如請求項73至77中任一項之方法，其中該液體進一步包含醫藥學上可接受之油。
79. 如請求項73至78中任一項之方法，其中該單體前驅體為氰基丙烯酸烷酯，且該醫藥學上可接受之聚合物賦形劑為聚(氰基丙烯酸烷酯)。
80. 如請求項73至79中任一項之方法，其中如藉由動態光散射所量測，該複數個奈米粒子具有20-200 nm之平均數目平均直徑。
81. 如請求項73至79中任一項之方法，其中如藉由動態光散射所量測，該複數個奈米粒子具有40-100 nm之平均數目平均直徑。
82. 如請求項73至79中任一項之方法，其中如藉由奈米粒子追蹤分析所量測，該複數個奈米粒子具有30-150 nm之平均數目平均直徑。
83. 如請求項73至79中任一項之方法，其中如藉由奈米粒子追蹤分析所量測，該複數個奈米粒子具有80-100 nm之平均數目平均直徑。
84. 如請求項73至83中任一項之方法，其中該液體為水性組合物。
85. 如請求項84之方法，其中該液體之pH為0.5至8.0。
86. 如請求項84之方法，其中該液體之pH為0.5至3.0。
87. 如請求項84之方法，其中該液體之pH為2.0至8.0。
88. 如請求項84之方法，其中該液體之pH為3.0至7.0。
89. 如請求項73至88中任一項之方法，其中該方法進一步包含添加複數個微氣泡。
90. 如請求項73至89中任一項之方法，其中該方法進一步包含對該複數個奈米粒子進行凍乾。
91. 如請求項73至90中任一項之方法，其中該方法進一步包含用去離子水對該複數個奈米粒子進行透析。
92. 如請求項73至91中任一項之方法，其中該方法進一步包含將該液體之該pH調整至在4.0至8.0範圍內。
93. 如請求項73至92中任一項之方法，其中該方法進一步包含將該液體之該pH調整至在5.0至7.0範圍內。
94. 如請求項92或93之方法，其中調整該pH之步驟係在聚合步驟期間執行。

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