TW202126683A - Ｔ細胞調節多肽及其使用方法 - Google Patents

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Abstract

本發明提供T細胞調節多肽(T-cell modulatory polypeptides，TMP)，其包含免疫調節多肽、I類人類白血球抗原(human leukocyte antigen，HLA)多肽(I類HLA重鏈多肽及β2微球蛋白多肽)及向T細胞受體呈現抗原決定基之KRAS肽(例如，包含癌症相關突變之KRAS肽)。TMP可用於調節T細胞之活性，且用於調節個體之免疫反應。

Description

T細胞調節多肽及其使用方法
本發明係有關於一種包含免疫調節多肽且包含抗原決定基呈現肽之T細胞調節多肽。
適應性免疫反應涉及存在於T細胞表面上之T細胞受體(T-cell receptor，TCR)與由主要組織相容性複合物(major histocompatibility complex，MHC；在人類中亦稱作人類白血球抗原(human leukocyte antigen，HLA)複合物)在抗原呈現細胞(antigen presenting cell，APC)表面上非共價呈現之小肽抗原的嚙合。此嚙合代表免疫系統之靶向機制且為T細胞調節(活化或抑制)及效應功能所必需之分子相互作用。在抗原決定基特異性細胞靶向之後，經由在APC上發現之共刺激蛋白與T細胞之對應共刺激蛋白嚙合來活化所靶向之T細胞。兩種信號-抗原決定基/TCR結合及APC共刺激蛋白與T細胞共刺激蛋白嚙合-為驅動T細胞特異性及活化或抑制所必需。APC上之共刺激蛋白亦稱作「免疫調節」蛋白，此係因為當該等共刺激蛋白結合T細胞上之共刺激蛋白時將調節T細胞之活性，其中特異性調節取決於APC上之哪種免疫調節蛋白結合至T細胞上之哪種共刺激蛋白。TCR對給定抗原決定基具有特異性；然而，T細胞之共刺激蛋白並非抗原決定基特異性的，而一般在所有T細胞上或大T細胞子組上表現。
本發明提供異二聚及單鏈T細胞調節多肽(T-cell modulatory polypeptides，TMP)及其二聚體，該等TMP及其二聚體包含免疫調節多肽、I類 HLA多肽(I類HLA重鏈多肽及β2微球蛋白多肽)及向T細胞受體呈現抗原決定基之KRAS肽(例如，包含癌症相關突變之KRAS肽)。TMP可用於調節T細胞之活性，且用於調節個體之免疫反應。
定義
本文中可互換使用之術語「多核苷酸」及「核酸」係指任何長度之核苷酸之聚合形式，亦即，核糖核苷酸或去氧核糖核苷酸。因此，此術語包括但不限於單股、雙股或多股去氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid，DNA)或核糖核酸(ribonucleic acid，RNA)、基因體DNA、互補去氧核糖核酸(complementary deoxyribonucleic acid，cDNA)、DNA-RNA雜交體，或包含嘌呤及嘧啶鹼基或者其他天然、化學或生物化學修飾、非天然或衍生之核苷酸鹼基的聚合物。
術語「肽」、「多肽」及「蛋白質」在本文中可互換使用，並且係指任何長度之胺基酸之聚合形式，其可包括編碼及非編碼之胺基酸、化學或生物化學修飾或衍生之胺基酸，及具有經修飾之肽骨架之多肽。此外，如本文所用，「多肽」係指包括對原生序列之修飾，諸如缺失、添加及取代(如熟習此項技術者所知，性質上一般為保守的)之蛋白質，只要該蛋白質保持所需活性即可。此等修飾可為故意的，如經由定點誘變，或可為偶然的，諸如經由產生蛋白質之宿主突變或因聚合酶鏈反應(polymerase chain reaction，PCR)擴增或其他重組DNA方法引起之錯誤。本文中對已知多肽中之特定殘基或殘基編號之提及應理解為指代野生型多肽中彼位置處之胺基酸。就藉由一或多個胺基酸之添加或缺失而改變野生型多肽之序列而言，一般熟習此項技術者將瞭解，對特定殘基或殘基編號之提及將相應地改變以指代所改變之多肽中相同之特定胺基酸，該特定胺基酸應理解為位於所改變之位置編號處。舉例而言，若藉由在N端處添加一個胺基酸而改變I類MHC多肽，則對位置84或位置84處之特定殘基之提及應理解為指示在所改變之多肽上之位置85處之胺基酸。同樣地，本文中對特定位置處之特定胺基酸之取代(例如Y84)之提及應理解為指代用胺基酸取代野生型多肽中位置84處之胺基酸。因此，Y84C取代應理解為用Cys殘基取代存在於野生型序列中之Tyr殘基。 若例如改變野生型多肽以將位置84處之胺基酸自其野生型胺基酸變為替代性胺基酸，則對位置84處胺基酸之取代應理解為指代對替代性胺基酸之取代。若在此種情況下，亦藉由一或多個胺基酸之添加或缺失而改變多肽，則對取代之提及應理解為指代對所改變之位置編號處之替代性胺基酸之取代。對多肽，例如I類MHC多肽中之「非天然存在之Cys殘基」之提及意指該多肽在相應野生型多肽中無Cys之位置處包含Cys殘基。此可經由常規蛋白質工程改造來實現，其中用半胱胺酸取代野生型序列中出現之胺基酸。
多核苷酸或多肽與另一多核苷酸或多肽具有一定百分比之「序列一致性」，此意謂當比較兩個序列時，在比對時彼百分比之鹼基或胺基酸為相同的且處於相同之相對位置處。序列一致性可用許多不同方式確定。為確定序列一致性，可使用各種便利方法及電腦程式(例如BLAST、T-COFFEE、MUSCLE、MAFFT等)對序列進行比對，該等電腦程式在全球資訊網之以下網站上可得：包括ncbi.nlm.nili.gov/BLAST、ebi.ac.uk/Tools/msa/tcoffee/、ebi.ac.uk/Tools/msa/muscle/、mafft.cbrc.jp/alignment/software/。參見例如Altschul等人(1990),J.Mol.Bioi.215：403-10。除非另有規定，否則如Altschul等人(1990)J.Mol.Biol. 215：403中所述，藉由BLAST(基本局部比對搜索工具)確定如本文所提及之「序列一致性」。
術語「保守胺基酸取代」係指蛋白質中具有相似側鏈之胺基酸殘基之可互換性。舉例而言，一組具有脂族側鏈之胺基酸由甘胺酸、丙胺酸、纈胺酸、白胺酸及異白胺酸組成；一組具有脂族-羥基側鏈之胺基酸由絲胺酸及蘇胺酸組成；一組具有含醯胺側鏈之胺基酸由天冬醯胺及麩醯胺組成；一組具有芳族側鏈之胺基酸由苯丙胺酸、酪胺酸及色胺酸組成；一組具有鹼性側鏈之胺基酸由離胺酸、精胺酸及組胺酸組成；一組具有酸性側鏈之胺基酸由麩胺酸及天冬胺酸組成；且一組具有含硫側鏈之胺基酸由半胱胺酸及甲硫胺酸組成。示例性保守胺基酸取代組為：纈胺酸-白胺酸-異白胺酸、苯丙胺酸-酪胺酸、離胺酸-精胺酸、丙胺 酸-纈胺酸-甘胺酸及天冬醯胺-麩醯胺。
如本文所用，術語「免疫學突觸」或「免疫突觸」一般係指適應性免疫反應之兩個相互作用免疫細胞之間的天然界面，包括例如抗原呈現細胞(APC)或靶細胞與效應細胞之間的界面，該效應細胞為例如淋巴細胞、效應T細胞、天然殺傷細胞及類似細胞。APC與T細胞之間的免疫學突觸一般由T細胞抗原受體與主要組織相容性複合物分子之相互作用來起始，例如，如Bromley等人，Annu Rev Immunol.2001；19：375-96中所述；其揭示內容以全文引用之方式併入本文中。
「T細胞」包括表現CD3之所有類型之免疫細胞，包括T輔助細胞(CD4+ 細胞)、細胞毒性T細胞(CD8+ 細胞)、T調控細胞(Trcg)及NK-T細胞。
如本文所用，術語「免疫調節多肽」(本文中亦稱作「immunomodulatory polypeptide，MOD」)意指特異性地結合T細胞上之同源共刺激多肽之多肽，從而提供信號，該信號加之由例如TCR/CD3複合物與負載有肽之主要組織相容性複合物(MHC)多肽之結合提供之初級信號，介導T細胞反應，包括但不限於增殖、活化、分化及類似反應。如本文所論述，免疫調節多肽可包括但不限於野生型或野生型多肽之變異體，諸如細胞激素(例如IL-2)、CD7、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)、PD-L1、PD-L2、4-1BBL、OX40L、Fas配位體(FasL)、可誘導性共刺激配位體(ICOS-L)、細胞間黏附分子(ICAM)、CD30L、CD40、CD70、CD83、HLA-G、MICA、MICB、HVEM、淋巴毒素β受體、3/TR6、ILT3、ILT4、HVEM、結合Toll配位體受體之促效劑或抗體，及與B7-H3特異性結合之配位體。本發明之TMP之免疫調節結構域或「MOD」可結合存在於靶T細胞上之同源共刺激多肽。
如本文使用，術語「活體內 」係指在體內發生之任何過程或程序。
如本文所用，「活體外 」係指在體外發生之任何過程或程序。
如本文所用，「異源」意指分別在原生核酸或蛋白質中未發現之核苷酸或多肽。
如本文所用，「重組」意指特定核酸(DNA或RNA)為選殖、限制、聚合酶鏈反應(PCR)及/或接合步驟之各種組合之產物，得到具有與天然系統中發現之內源核酸可區分之結構編碼或非編碼序列之構築體。可自cDNA片段或自一系列合成寡核苷酸組裝編碼多肽之DNA序列，以提供能夠自細胞中或無細胞轉錄及轉譯系統中所含之重組轉錄單元表現之合成核酸。
術語「重組表現載體」或「DNA構築體」在本文中可互換使用以指代包含載體及至少一個插入物之DNA分子。通常產生重組表現載體用於表現及/或繁殖一或多個插入物之目的，或用於構築其他重組核苷酸序列。一或多個插入物可能或可能不操作性地連接至啟動子序列，且可能或可能不操作性地連接至DNA調控序列。
如本文所用，術語「親和力」係指兩種劑(例如抗體與抗原)之可逆結合之平衡常數且以解離常數(KD )表示。親和力可比抗體對無關胺基酸序列之親和力至少高1倍、至少高2倍、至少高3倍、至少高4倍、至少高5倍、至少高6倍、至少高7倍、至少高8倍、至少高9倍、至少高10倍、至少高20倍、至少高30倍、至少高40倍、至少高50倍、至少高60倍、至少高70倍、至少高80倍、至少高90倍、至少高100倍或至少高1,000倍或更多倍。抗體對靶蛋白之親和力可為例如約100奈莫耳(nM)至約0.1nM、約100nM至約1皮摩爾(pM)，或約100nM至約1飛莫耳(fM)，或更多。如本文所用，術語「親合力」係指兩種或更多種劑之複合物在稀釋後對解離之抗性。關於抗體及/或抗原結合片段，術語「免疫反應性」及「優先結合」在本文中可互換使用。
如本文所用(例如，關於TMP與T細胞上之多肽(例如T細胞受體)之結合)，術語「結合」係指兩個分子之間的非共價相互作用。非共價結合係指兩個分子之間的直接締合，此係歸因於例如靜電、疏水、離子及/或氫鍵相互作用，包括諸如鹽橋及水橋之相互作用。非共價結合相互作用之特徵一般在於解離常 數(KD )小於10-6 M、小於10-7 M、小於10-8 M、小於10-9 M、小於10-10 M、小於10-11 M、小於10-12 M、小於10-13 M、小於10-14 M或小於10-15 M。「親和力」係指非共價結合之強度，增加之結合親和力與較低之KD 相關聯。「特異性結合」一般係指以至少約10-7 M或更高，例如 5×10-7 M、10-8 M、5×10-8 M、10-9 M及更高之親和力結合。「非特異性結合」一般係指以小於約10-7 M之親和力結合(例如，以10-6 M、10-5 M、10-4 M之親和力結合)(例如，配位體與除其指定結合位點或受體以外之部分的結合)。然而，在一些情形中，例如，TCR與肽/MHC複合物之間的結合，「特異性結合」可在1μM至100μM或100μM至1mM之範圍內。如本文所用，「共價結合」或「共價鍵」係指在兩個不同分子之間形成一或多個共價化學結合。
如本文所用，「磷酸鹽緩衝鹽水」或「phosphate buffered saline，PBS」意指水基緩衝溶液，典型地以濃溶液可得。除非另有規定，否則本發明中使用之PBS溶液含有氯化鈉(500mM)、磷酸氫二鈉(10mM)、磷酸二氫鉀(2mM)、氯化鉀(2.7mM)且其餘為水。PBS之pH值為7.5±0.15。用18.2兆歐DNA酶及不含RNA酶之水製備緩衝液，且經0.22微米過濾器過濾。
本文所用之術語「治療(名詞)」、「治療(動詞)」及類似術語一般意指獲得所需藥理及/或生理作用。就完全或部分預防疾病或其症狀而言，作用可為預防性的；及/或就部分或完全治癒疾病及/或由該疾病引起之不良影響而言，作用可為治療性的。如本文所用，「治療」涵蓋對哺乳動物之疾病或症狀之任何治療，且包括：(a)預防疾病或症狀在可能易患該疾病或症狀但尚未診斷為患有該疾病或症狀之個體中出現；(b)抑制疾病或症狀，亦即，遏制其發展；及/或(c)緩解疾病，亦即，使疾病消退。可在疾病或損傷發作之前、期間或之後投與治療劑。對進行中之疾病的治療尤其引人關注，其中該治療穩定或減輕患者之不良臨床症狀。期望在受影響組織中之功能完全喪失之前進行此種治療。期望在疾病之 症狀階段期間及在一些情況下在疾病之症狀階段之後投與主題療法。
術語「個人」、「個體」、「宿主」及「患者」在本文中可互換使用，且係指需要診斷、治療或療法之任何哺乳動物個體。哺乳動物包括例如人類、非人類靈長類動物、囓齒動物(例如大鼠、小鼠)、兔類動物(例如兔)、有蹄類動物(例如乳牛、綿羊、豬、馬、山羊及類似動物)等。
除非另有指示，否則術語「實質上」欲涵蓋「完全」及「基本上但並非完全」。舉例而言，「實質上不誘導細胞溶解」之Ig Fc意指完全不誘導細胞溶解或基本上不誘導細胞溶解之Ig Fc。
如本文所用，與量結合使用之術語「約」指示該量可在規定量之10%之間變化。舉例而言，「約100」意指90-110之量。在範圍之情形中使用約時，關於範圍之較低量使用之「約」意謂該較低量包括比該範圍之較低量低10%之量，且關於範圍之較高量使用之「約」意謂該較高量包括比該範圍之較高量高10%之量。舉例而言，約100至約1000意謂範圍自90延伸至1100。
如本文所用，術語「MHC重鏈多肽」統指存在於TMP中之MHC重鏈多肽之結構域。舉例而言，如圖17及18中所說明，MHC重鏈多肽可包含α1、α2及α3結構域。
在進一步描述本發明之前，應瞭解，本發明不限於所描述之特定實施例，因為此類實施例當然可有所變化。亦應瞭解，本文中使用之術語僅用於描述特定實施例之目的，且不欲具有限制性，此係因為本發明之範疇將僅受隨附申請專利範圍限制。
在提供值之範圍的情況下，應瞭解，在彼範圍之上限與下限之間的各中間值(除非上下文另有明確指示，否則直至下限單位之十分之一)及在彼規定範圍內之任何其他規定值或中間值皆涵蓋於本發明中。此等較小範圍之上限及下限可獨立地包括於較小範圍內且亦涵蓋於本發明中，受規定範圍內任何明確 排除之界限所限制。在規定範圍包括界限中之一或兩者之情況下，排除彼等所包括之界限中之任一者或兩者之範圍亦包括於本發明中。
除非另有定義，否則本文中使用之所有技術及科學術語具有與一般熟習本發明所屬技術者通常所理解之含義相同的含義。儘管類似於或等效於本文所述之彼等方法及材料之任何方法及材料皆可用於本發明之實踐或測試中，但現在描述較佳方法及材料。本文中提及之所有公開案皆以引用之方式併入本文中，以揭示及描述與所引用之公開案相關聯之方法及/或材料。
必須注意，除非上下文另有明確指示，否則如本文中及隨附申請專利範圍中所使用，單數形式「一個」、「一種」及「該」包括複數指示物。因此，舉例而言，對「T細胞調節多肽」之提及包括複數個此類多肽，且對「免疫調節多肽」之提及包括對熟習此項技術者已知之一或多個免疫調節多肽及其等效物之提及，等等。進一步應注意，申請專利範圍可草擬為排除任何視情況存在之要素。因而，此陳述欲作為與技術方案要素之敘述結合使用「唯一」、「僅」及諸如此類之排他性術語，或使用「否定」限制的先行基礎。
應瞭解，為清楚起見在獨立實施例之情形中描述之本發明之某些特徵亦可在單個實施例中組合提供。反之，為簡潔起見在單個實施例之情形中描述之本發明之各種特徵亦可獨立地或以任何適合之子組合提供。與本發明有關之實施例之所有組合皆由本發明明確涵蓋且在本文中揭示，正如各個及每個組合個別地及明確地揭示一般。另外，各種實施例及其要素之所有子組合亦由本發明明確涵蓋且在本文中揭示，正如各個及每個此種子組合在本文中個別地及明確地揭示一般。
本文中論述之公開案僅關於其在本申請案之申請日期之前的揭示內容而提供。本文中之任何內容皆不應解釋為承認本發明無權早於此類公開案。此外，所提供之公開日期可與實際公開日期不同，實際公開日期可能需要獨立確認。
圖1A-1F 為本發明之各種示例性TMP之示意圖。
圖2A-2F 為本發明之各種二硫鍵連接之TMP之示意圖。
圖3A-3G 提供免疫球蛋白Fc多肽之胺基酸序列。序列在SEQ ID NO 19-30中列出。
圖4 提供來自智人(Homo sapiens )(NP_004039.1；SEQ ID NO：31)、黑猩猩(Pan troglosytes )(NP_001009066.1；SEQ ID NO：31)、恆河獼猴(Macaca mulatta )(NP_001040602.1；SEQ ID NO：32)、歐洲牛(Bos taurus )(NP_776318.1；SEQ ID NO：33)及小家鼠(Mus musculus )(NP_033865.2；SEQ ID NO：34)之β-2微球蛋白(β2M)前體(亦即，包括前導序列)之多個胺基酸序列比對。胺基酸1-20為信號肽。
圖5A-5C 提供對偶基因A*0101(SEQ ID NO：35)、A*1101(SEQ ID NO：36)、A*2402(SEQ ID NO：37)及A*3303(SEQ ID NO：38)之全長人類HLA重鏈之胺基酸序列(圖7A)；對偶基因B*0702之全長人類HLA重鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：39)(圖7B)；及全長人類HLA-C重鏈之胺基酸序列(SEQ ID NO：40)(圖7C)。
圖6 提供無前導序列、跨膜結構域及細胞內結構域之十一個成熟I類MHC重鏈胺基酸序列之比對。該等序列自上至下列出如下：SEQ ID NO：41-51。
圖7A-7B 提供HLA-A重鏈胺基酸序列(圖7A；分別為SEQ ID NO：52-60)與共有序列(圖7B；SEQ ID NO：61)之比對。
圖8A-8B 提供HLA-B重鏈胺基酸序列(圖8A；分別為SEQ ID NO：62-68)與共有序列(圖8B；SEQ ID NO：69)之比對。
圖9A-9B 提供HLA-C重鏈胺基酸序列(圖9A；分別為SEQ ID NO：70-78)與共有序 列(圖9B；SEQ ID NO：79)之比對。
圖10 提供HLA-E、HLA-F及HLA-G重鏈中之每一者之共有胺基酸序列(分別為SEQ ID NO：80-82)。可變胺基酸(aa)位置以依序編號之「X」殘基指示；胺基酸84、139及236之位置加雙下劃線。
圖11 提供HLA-A(SEQ ID No：83)、HLA-B(SEQ ID NO：84)、HLA-C(SEQ ID NO：85)、HLA-E(SEQ ID NO：86)、HLA-F(SEQ ID NO：87)及HLA-G(SEQ ID NO：88)之共有胺基酸序列之比對。
圖12A-12D 提供本發明之多個二硫鍵連接之TMP之示意圖。
圖13A-13L 提供適合包含於本發明之TMP中之多肽之實例的胺基酸序列。圖13A-13F中之序列在SEQ ID NO：255-260中列出。圖13G-13L中之序列在SEQ ID NO：339-344中列出。
圖14A-14JJ 提供適合包含於本發明之TMP中之多肽之實例的胺基酸序列。該等序列在SEQ ID NO：261-296中列出。
圖15A-15JJ 提供適合包含於本發明之TMP中之多肽之實例的胺基酸序列。該等序列在SEQ ID NO：297-332中列出。
圖16A-16C 提供本發明之二硫鍵連接之TMP之構型之實例的示意圖。
圖17 提供本發明之「分裂鏈」TMP中之免疫調節多肽之位置之實例的示意圖。
圖18 提供本發明之「單鏈」TMP中之免疫調節多肽之位置之實例的示意圖。
圖19A-19P 提供本發明之單鏈TMP之一些實例之胺基酸序列。該等序列在SEQ ID NO：333-338及593-602中列出。
圖20 描繪KRAS G12V(7-16)HLA-A11 TMP對活體外KRAS G12V(7-16)特異性CD8+ T細胞擴充之影響。
圖21A-21JJ 提供本發明之TMP之HLA-A重鏈胺基酸序列及β2M胺基酸序列之胺基酸序列。
圖22A-22BB 提供本發明之TMP之HLA-A重鏈胺基酸序列之胺基酸序列。
 交叉引用
本申請案主張2019年9月20日申請之美國臨時專利申請案第62/903,441號、2020年3月17日申請之美國臨時專利申請案第62/990,693號及2020年7月6日申請之美國臨時專利申請案第63/048,561號之權益，該等申請案中之每一者以全文引用之方式併入本文中。
本發明提供包含免疫調節多肽且包含抗原決定基呈現肽之T細胞調節多肽。TMP可用於調節T細胞之活性，且用於調節個體之免疫反應。
T細胞調節多肽
本發明提供一種T細胞調節多肽(TMP)，其包含：a)第一多肽；及b)第二多肽，其中該TMP包含：i)KRAS肽，該KRAS肽當結合至主要組織相容性複合物(MHC)多肽時，向T細胞受體(TCR)呈現抗原決定基；ii)第一MHC多肽；iii)第二MHC多肽；及iv)一或多個免疫調節多肽；及視情況存在之免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架。包含第一多肽及第二多肽之TMP在本文中亦可稱作「分裂鏈TMP」或「異二聚TMP」。如本文所論述，此類TMP之第一多肽及第二多肽通常將由一或多個二硫鍵彼此共價連接，此可為TMP提供穩定性及/或改善之表現。
然而，在一些情況下，本發明之TMP可包含連接在一起以形成單個多肽鏈之多個不同多肽。此種單鏈TMP可包含例如i)KRAS肽，該KRAS肽當結合至主要組織相容性複合物(MHC)多肽時，向T細胞受體(TCR)呈現抗原決定基；ii)第一MHC多肽及第二MHC多肽；及iii)一或多個免疫調節多肽；及視情況存在之免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架。如下文所論述，異二聚TMP及單鏈TMP可自組裝成二聚體，例如，當TMP包含Ig Fc，例如IgG1 Fc時。在此類情況下，二硫鍵將自發形成以鍵結兩個TMP。
如本文所用，術語「KRAS肽」意指長度為至少4個胺基酸之肽，例 如，4個胺基酸至約25個胺基酸(例如，4個胺基酸(aa)、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa、10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa，包括長度在4至20個胺基酸、6至18個胺基酸、8至15個胺基酸、8至12個胺基酸、5至10個胺基酸、10至20個胺基酸及15至25個胺基酸之範圍內)，當該KRAS肽結合至MHC複合物時，向TCR呈現KRAS抗原決定基。如本文所用，術語「KRAS抗原決定基」係指在KRAS蛋白上發現之抗原決定基。如本文所用，術語「KRAS」及「KRAS蛋白」為同義的，且意指具有在以下各項之一中存在之胺基酸序列的蛋白質：(i)KRAS4A多肽；(ii)KRAS4B；及(iii)在人類癌症中出現之(i)及(ii)之變異體，包括例如突變形式。如本文所用，術語「KRAS多肽」意指具有在KRAS蛋白之全部或一部分中發現之胺基酸序列之多肽，或在指定情況下，與在人類癌症中出現之KRAS蛋白或變異體之全部或一部分中發現之胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之多肽，包括例如突變形式。
KRAS(亦稱為「KRAS原癌基因，GTPase」、「克爾斯滕大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(Kirsten rat sarcoma viral oncogene homolog)」及「K-Ras P21蛋白」)為控制細胞增殖之GTPase。當突變時，KRAS可能無法控制細胞增殖，從而導致癌症。
野生型(正常；非癌症相關)KRAS多肽可具有以下胺基酸序列：
Figure 109132369-A0304-12-0012-63
Figure 109132369-A0304-12-0012-64
(SEQ ID NO：1)。
野生型(正常；非癌症相關)KRAS多肽可具有以下胺基酸序列：
Figure 109132369-A0304-12-0013-61
Figure 109132369-A0304-12-0013-62
(SEQ ID NO：2)。
KRAS之突變形式與某些癌症相關；且KRAS突變形式之至少一部分存在於某些癌細胞之表面上。參見例如Prior等人(2012)Cancer Res. 72：2457；及Warren與Holt(2010)Human Immunology 71：245。在SEQ ID NO：1及SEQ ID NO：2中，胺基酸G12、G13、T35、I36、E49、Q61、K127及A156為粗體且加下劃線；此等殘基中之一或多者之取代可依KRAS多肽之癌症相關形式存在。癌症相關之KRAS多肽可包括以下一或多項：i)G12之取代(例如G12C、G12V、G125、G12A、G12R、G12F或G12D)；ii)G13之取代(例如G13C、G13D、G13R、G13V、G13S或G13A)；iii)T35之取代(例如T35I)；iv)I36之取代(例如I36L或136M)；v)E49之取代(例如E49K)；vi)Q61之取代(例如Q61H、Q61R、Q61P、Q61E、Q61K、Q61L或Q61K)；vii)K117之取代(例如K117N)；及viii)A146之取代(例如A146T或A146V)；其中胺基酸編號如SEQ ID NO：1及SEQ ID NO：2中列出。參見例如U.S.2019/0194192。
舉例而言，與SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽之癌症相關突變形式可具有一或多個胺基酸取代。在一些情況下，與SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽之癌症相關突變形式僅具有單個胺基酸取代。在一些情況下，與SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽之癌症相關突變形式僅具有兩個胺基酸取代。在一些情況下，與SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽之癌症相關突變形式僅具有三個胺基酸取代。在一些情況下，與SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽之癌症相關突變形 式僅具有四個胺基酸取代。在一些情況下，與SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽之癌症相關突變形式僅具有五個胺基酸取代。
舉例而言，KRAS(G12D)(基於SEQ ID NO：1中列出之胺基酸編號，在胺基酸位置12處具有G至D取代之KRAS多肽)與胰管腺癌(pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC)相關。KRAS(G12V)(基於SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸編號，在胺基酸位置12處具有G至V取代之KRAS多肽)亦與胰臟癌相關。KRAS(G12R)(基於SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸編號，在胺基酸位置12處具有G至R取代之KRAS多肽)亦與胰臟癌相關。參見例如Waters及Der(2018)Cold Spring Harb.Perspect.Med. 8：(9).pii：a031435.doi：10.1101/cshperspect.a031435。作為另一個實例，KRAS(G12C)(基於SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸編號，在胺基酸位置12處具有G至C取代之KRAS多肽)與肺癌，例如非小細胞肺癌相關。參見例如Román等人(2018)Mol.Cancer 17：33。KRAS之其他突變形式(例如G12A；G12C；G12D；G12R：G12S；G12V；G13A；G13C；G13D；G13R；G13S；G13V)與各種癌症相關；其中此類癌症包括例如膽管癌、膽囊癌、腺癌、直腸腺癌、子宮內膜癌、造血組織腫瘤及肺癌。 參見例如Prior等人(20120Cancer Res. 72：2457。
作為另一個實例，KRAS多肽之癌症相關突變形式可在KRAS多肽(例如，具有SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2中列出之胺基酸序列之KRAS多肽)之胺基酸61處具有胺基酸取代。舉例而言，KRAS多肽之癌症相關突變形式可具有胺基酸取代，諸如Q61H、Q61L、Q61E、Q61R或Q61K。
如上文所論述，在一些情況下，本發明提供一種包含異二聚體之TMP，其中該異二聚體包含：a)包含第一MHC多肽之第一多肽；及b)包含第二MHC多肽之第二多肽，其中第一多肽或第二多肽包含KRAS肽(例如，包含癌症相關突變之KRAS肽；其中KRAS肽之長度為至少4個胺基酸(例如，4個胺基酸至約25個胺 基酸)；其中KRAS肽當結合至MHC複合物時，向T細胞受體呈現抗原決定基)；其中第一多肽及/或第二多肽包含一或多個彼此可相同或不同之免疫調節多肽；及視情況存在之Ig Fc多肽或非Ig支架。在一些情況下，一或多個免疫調節多肽中之至少一者為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對同源共刺激多肽之親和力相比，該變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽展現降低之親和力。
存在於本發明之TMP中之KRAS肽/MHC複合物以至少100μM(例如，至少10μM、至少1μM、至少100nM、至少10nM或至少1nM)之親和力結合至T細胞上之T細胞受體(TCR)。一般而言，本發明之TMP結合至具有同源共刺激多肽及TCR之T細胞，該TCR結合TMP之KRAS肽/MHC複合物之親和力比相同TMP結合具有相同同源共刺激多肽但具有實質上不結合KRAS肽/MHC複合物之TCR(例如，KRAS肽/MHC複合物以小於10-7 M之親和力結合至TCR)之第二T細胞的親和力更高，例如高25%。
本發明提供一種TMP，其中該TMP為異二聚體，其包含：a)包含第一MHC多肽之第一多肽；及b)包含第二MHC多肽之第二多肽，其中第一多肽或第二多肽包含KRAS肽；其中第一多肽及/或第二多肽包含一或多個可相同或不同之免疫調節多肽，且其中一或多個免疫調節多肽中之至少一者可為野生型免疫調節多肽或野生型免疫調節多肽之變異體，其中與相應野生型免疫調節多肽之胺基酸序列相比，變異體免疫調節多肽包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代；且其中第一多肽或第二多肽視情況包含Ig Fc多肽或非Ig支架。在一些情況下，一或多個免疫調節結構域中之至少一者為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對同源共刺激多肽之親和力相比，該變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽展現降低之親和力，例如，當藉由生物層干涉術量測時，(i)野生型免疫調節多肽對同源共刺 激多肽之結合親和力與(ii)野生型免疫調節多肽之變異體對同源共刺激多肽之結合親和力的比率在1.5：1至106 ：1之範圍內；且其中與相應野生型免疫調節多肽之胺基酸序列相比，變異體免疫調節多肽包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代；且其中第一多肽或第二多肽視情況包含Ig Fc多肽或非Ig支架。
在一些情況下，本發明之異二聚TMP可包含：a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)第二MHC多肽；及ii)視情況存在之免疫球蛋白(Ig)Fc多肽或非Ig支架，其中TMP包含一或多個可相同或不同之免疫調節結構域，其中一或多個免疫調節結構域中之至少一者：A)在第一多肽之C端；B)在第二多肽之N端；C)在第二多肽之C端；或D)在第一多肽之C端及第二多肽之N端，且其中一或多個免疫調節結構域中之至少一者可為野生型免疫調節多肽或野生型免疫調節多肽之變異體，其中與相應野生型免疫調節多肽之胺基酸序列相比，變異體免疫調節多肽包含1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19或20個胺基酸取代。
本發明提供一種TMP，該TMP包含以下各物作為基本支架：a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)第二MHC多肽；及ii)視情況存在之Ig Fc多肽或非Ig支架。本發明之TMP進一步包含一或多個免疫調節多肽，其中一或多個免疫調節多肽中之至少一者：A)在第一多肽之C端；B)在第二多肽之N端；C)在第二多肽之C端；或D)在第一多肽之C端及第二多肽之N端。在一些情況下，一或多個免疫調節多肽中之至少一者為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對同源共刺激多肽之親和力相比，該變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽展現降低之親和力。
存在於本發明之TMP中之KRAS肽/MHC複合物以至少100μM(例如，至少10μM、至少1μM、至少100nM、至少10nM或至少1nM)之親和力結合至T細胞上之T細胞受體(TCR)。
如上文所提及，在一些情況下，本發明之TMP包含單個多肽鏈。本發明之此類單鏈TMP包含：i)第一MHC多肽；ii)第二MHC多肽；iii)KRAS肽，該KRAS肽當結合至MHC多肽時，向TCR呈現抗原決定基；及iv)一或多個免疫調節多肽；及視情況存在之Ig Fc多肽或非Ig支架。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；iii)第二MHC多肽；iv)一或多個免疫調節多肽；及v)Ig Fc多肽。在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；iv)一或多個免疫調節多肽；及v)Ig Fc多肽。組分之此排列在圖18中稱作MOD位置2。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；iii)第二MHC多肽；iv)Ig Fc多肽；及v)一或多個免疫調節多肽。在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；iv)Ig Fc多肽；及v)一或多個免疫調節多肽。組分之此排列在圖18中稱作MOD位置3。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)一或多個免疫調節多肽；ii)KRAS肽；iii)第一MHC多肽；iv)第二MHC多肽；及v)Ig Fc多肽。在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)一或多個免疫調節多肽；ii)KRAS肽；iii)第一I類MHC多肽；iv)第二I類MHC多肽；及v)Ig Fc多肽。在一些情況下，本發明之單鏈TMP自N端至C端依次包含：i)一或多個免疫調節多肽：ii)KRAS肽；iii)β2M多肽；iv)I類MHC重鏈多肽；及v)Ig Fc多肽。組分之此排列在圖18中稱作MOD位置4。
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之KRAS肽/MHC複合物以約10-4 M至約5 x 10-4 M、約5 x 10-4 M至約10-5 M、約10-5 M至5 x 10-5 M、約5 x 10-5 M至10-6 M、約10-6 M至約5 x 10-6 M、約5 x 10-6 M至約10-7 M、約10-7 M至約5 x 10-7 M、約5 x 10-7 M至約10-8 M或約10-8 M至約10-9 M之親和力結合至T細胞上之TCR。以另一種方式表述，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之KRAS肽/MHC複合物以約1nM至約5nM、約5nM至約10nM、約10nM至約50nM、約50nM至約100nM、約0.1μM至約0.5μM、約0.5μM至約1μM、約1μM至約5μM、約5μM至約10μM、約10μM至約25μM、約25μM至約50μM、約50μM至約75μM、約75μM至約100μM之親和力結合至T細胞上之TCR。
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之免疫調節多肽結合至其同源共刺激多肽之親和力比相應野生型免疫調節多肽對同源共刺激多肽之親和力至少低10%、至少低15%、至少低20%、至少低25%、至少低30%、至少低35%、至少低40%、至少低45%、至少低50%、至少低55%、至少低60%、至少低65%、至少低70%、至少低75%、至少低80%、至少低85%、至少低90%、至少低95%或低95%以上。
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽之結合親和力為1nM至100nM或100nM至100μM。舉例而言，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽之結合親和力為約100nM至150nM、約150nM至約200nM、約200nM至約250nM、約250nM至約300nM、約300nM至約350nM、約350nM至約400nM、約400nM至約500nM、約500nM至約600nM、約600nM至約700nM、約700nM至約800nM、約800nM至約900nM、約900nM至約1μM、約1μM至約5μM、約5μM至約10μM、約10μM至約15μM、約15μM至約20μM、約20μM至約25μM、約25μM至約50μM、約50μM至約75μM或約75μM至約100μM。在一些情況下， 存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽之結合親和力為約1nM至約5nM、約5nM至約10nM、約10nM至約50nM、約50nM至約100nM。
免疫調節多肽對其同源共刺激多肽降低之親和力與KRAS肽對TCR之親和力的組合為本發明之TMP提供增強之選擇性。舉例而言，與結合至展示i)對除存在於TMP中之抗原決定基以外之抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽的第二T細胞相比，本發明之TMP選擇性地結合至展示以下兩者之第一T細胞：i)對存在於TMP中之KRAS肽具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽。舉例而言，本發明之TMP結合至第一T細胞之親和力比其結合第二T細胞之親和力高至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少2倍、至少2.5倍、至少5倍、至少10倍、至少15倍、至少20倍、至少25倍、至少50倍、至少100倍或100倍以上。
在一些情況下，本發明之TMP當向有需要之個體投與時，誘導抗原決定基特異性T細胞反應及抗原決定基非特異性T細胞反應。換言之，在一些情況下，本發明之TMP當向有需要之個體投與時，藉由調節展示以下兩者之第一T細胞之活性來誘導抗原決定基特異性T細胞反應：i)對存在於TMP中之KRAS抗原決定基具有特異性之TCR；ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽；且藉由調節展示以下之第二T細胞之活性來誘導抗原決定基非特異性T細胞反應：i)對除存在於TMP中之KRAS抗原決定基以外之抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽。抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1或至少100：1。抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為約2：1至約5：1、約5：1至約 10：1、約10：1至約15：1、約15：1至約20：1、約20：1至約25：1、約25：1至約50：1或約50：1至約100：1或大於100：1。「調節T細胞之活性」可包括以下一或多項：i)活化細胞毒性(例如CD8+ )T細胞；ii)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞之細胞毒性活性；iii)誘導由細胞毒性(例如CD8+ )T細胞產生及釋放細胞毒素(例如穿孔素；顆粒酶；顆粒溶素)；iv)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞之增殖；v)抑制自體反應性T細胞之活性；及類似作用。
免疫調節多肽對其同源共刺激多肽降低之親和力與KRAS抗原決定基對TCR之親和力的組合為本發明之TMP提供增強之選擇性。因此，舉例而言，與結合至展示i)對除存在於TMP中之抗原決定基以外之抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽的第二T細胞之親合力相比，本發明之TMP以更高親合力結合至展示以下兩者之第一T細胞：i)對存在於TMP中之KRAS抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽。
免疫調節多肽與其同源共刺激多肽之間的結合親和力可藉由生物層干涉術(bio-layer interferometry，BLI)使用經純化之免疫調節多肽及經純化之同源共刺激多肽來確定。TMP與其同源共刺激多肽之間的結合親和力可藉由BLI使用經純化之TMP及同源共刺激多肽來確定。BLI方法為熟習此項技術者所熟知。參見例如Lad等人(2015)J.Biomol.Screen. 20(4)：498-507；及Shah與Duncan(2014)J.Vis.Exp. 18：e51383。
可使用Octet RED 96(Pal FortéBio)儀器或類似儀器如下進行BLI檢定。將TMP(例如，本發明之TMP：對照TMP(其中對照TMP包含野生型免疫調節多肽))固定至不溶性支撐物(「生物感測器」)上。經固定之TMP為「標靶」。可藉由將捕獲抗體固定至不溶性支撐物上來實現固定，其中捕獲抗體固定TMP。舉例而言，可藉由將抗Fc(例如抗人IgG Fc)抗體固定至不溶性支撐物上來實現固定， 其中經固定之抗Fc抗體結合並固定TMP(其中TMP包含Ig Fc多肽)。將共刺激多肽以若干不同濃度施加至經固定之TMP，且記錄儀器之反應。在包含25mM HEPES pH 6.8、5%聚(乙二醇)6000、50mM KCl、0.1%牛血清白蛋白及0.02% Tween 20非離子清潔劑之液體介質中進行檢定。在30℃下進行共刺激多肽與經固定之TMP之結合。作為結合親和力之陽性對照，可使用抗I類MHC單株抗體。舉例而言，可使用抗I類HLA單株抗體W6/32(美國典型培養物保藏中心編號HB-95；Parham等人(1979)J.Immunol. 123：342)，其具有7nM之KD 。可使用抗I類MHC單株抗體之連續稀釋液生成標準曲線。共刺激多肽或抗I類MHC mAb為「分析物」。BLI分析自兩個表面反射之白光的干涉圖案：i)來自經固定之多肽(「標靶」)；及ii)內部參考層。結合至生物感測器尖端之分子(「分析物」；例如，共刺激多肽；抗HLA抗體)之數目變化會引起干擾圖案之位移；可即時量測干擾圖案之此位移。描述標靶/分析物相互作用之親和力的兩個動力學術語為締合常數(k a )及解離常數(k d )。此兩個術語之比率(k d /a )得到親和常數KD 。
在多孔盤中進行BLI檢定。為運作檢定，定義盤佈局，定義檢定步驟，且在Octet資料擷取軟體中指定生物感測器。使生物感測器組合件水合。在Octet儀器上使經水合之生物感測器組合件及檢定盤平衡10分鐘。一旦擷取資料，即將所擷取之資料加載至Octet資料分析軟體中。藉由指定用於參考扣除、y軸對齊、步間校正及Savitzky-Golay濾波之方法，在處理窗口中處理資料。藉由指定分析步驟(締合及解離)，選擇曲線擬合模型(1：1)、擬合方法(全局)及關注窗口(以秒為單位)，在分析窗口中分析資料。評估擬合品質。若在3倍範圍內，則可取各資料跡線(分析物濃度)之KD 值的平均值。KD 誤差值應在親和常數值之一個數量級內；R2 值應高於0.95。參見例如Abdiche等人(2008)J.Anal.Biochem. 377：209。
除非本文另有規定，否則如上文所述，使用BLI確定本發明之TMP對同源共刺激多肽之親和力，或對照TMP(其中對照TMP包含野生型免疫調節多肽) 對同源共刺激多肽之親和力。
在一些情況下，當藉由BLI(如上文所述)量測時，i)對照TMP(其中對照包含野生型免疫調節多肽)對同源共刺激多肽之結合親和力與ii)包含野生型免疫調節多肽變異體之本發明之TMP對同源共刺激多肽之結合親和力的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。在一些情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP(其中對照包含野生型免疫調節多肽)對同源共刺激多肽之結合親和力與ii)包含野生型免疫調節多肽變異體之本發明之TMP對同源共刺激多肽之結合親和力的比率在1.5：1至106 ：1，例如1.5：1至10：1、10：1至50：1、50：1至102 ：1、102 ：1至103 ：1、103 ：1至104 ：1、104 ：1至105 ：1或105 ：1至106 ：1之範圍內。
作為一個實例，在對照TMP包含野生型IL-2多肽之情況下，及在本發明之TMP包含變異體IL-2多肽(相對於野生型IL-2多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)，例如包含本文所述之H16A及F42A取代之IL-2變異體作為免疫調節多肽之情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP對IL-2受體(亦即，同源共刺激多肽)之結合親和力與ii)本發明之TMP對IL-2受體之結合親和力的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。在一些情況下，在對照TMP包含野生型IL-2多肽之情況下，及在本發明之TMP包含變異體IL-2多肽(相對於野生型IL-2多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調節多肽之情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP對IL-2受體(亦即，同源共刺激多肽)之結合親和力與ii)本發明之TMP對IL-2受體之結合親和力的比率在1.5：1至106 ：1，例如1.5：1至10：1、10：1至50：1、50：1至102 ：1、102 ：1至103 ：1、103 ：1至104 ：1、104 ：1至105 ：1或105 ：1至106 ：1之範圍內。
作為另一個實例，在對照TMP包含野生型CD80多肽之情況下，及在本發明之TMP包含變異體CD80多肽(相對於野生型CD80多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調節多肽之情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP對CTLA4多肽(亦即，同源共刺激多肽)之結合親和力與ii)本發明之TMP對CTLA4多肽之結合親和力的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。
作為另一個實例，在對照TMP包含野生型CD80多肽之情況下，及在本發明之TMP包含變異體CD80多肽(相對於野生型CD80多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調節多肽之情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP對CD28多肽(亦即，同源共刺激多肽)之結合親和力與ii)本發明之TMP對CD28多肽之結合親和力的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。
作為另一個實例，在對照TMP包含野生型4-1BBL多肽之情況下，及在本發明之TMP包含變異體4-1BBL多肽(相對於野生型4-1BBL多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調節多肽之情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP對4-1BB多肽(亦即，同源共刺激多肽)之給合親和力與ii)本發明之TMP對4-1BB多肽之結合親和力的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。
作為另一個實例，在對照TMP包含野生型CD86多肽之情況下，及在本發明之TMP包含變異體CD86多肽(相對於野生型CD86多肽之胺基酸序列包含1至10個胺基酸取代)作為免疫調節多肽之情況下，當藉由BLI量測時，i)對照TMP 對CD28多肽(亦即，同源共刺激多肽)之結合親和力與ii)本發明之TMP對CD28多肽之結合親和力的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。
本發明之TMP對靶T細胞之結合親和力可用以下方式量測：A)使本發明之TMP與靶T細胞接觸，該靶T細胞在其表面上表現：i)結合親本野生型免疫調節多肽之同源共刺激多肽；及ii)實質上結合至抗原決定基之T細胞受體，其中TMP包含抗原決定基標籤，使得TMP結合至靶T細胞；B)使結合靶T細胞之TMP與結合至抗原決定基標籤之螢光標記結合劑(例如，螢光標記抗體)接觸，產生TMP/靶T細胞/結合劑複合物；C)使用流式細胞術量測TMP/靶T細胞/結合劑複合物之平均螢光強度(mean fluorescence intensity，MFI)。抗原決定基標籤可為例如FLAG標籤、血球凝集素標籤、c-myc標籤、聚(組胺酸)標籤等。在一定範圍之TMP濃度下量測之MFI提供親和力之量度。在一定範圍之TMP濃度下量測之MFI提供TMP之半最大有效濃度(EC50 )。在一些情況下，本發明之TMP對靶T細胞之EC50 在nM範圍內；且TMP對對照T細胞(其中對照T細胞在其表面上表現：i)結合親本野生型免疫調節多肽之同源共刺激多肽；及ii)不結合至存在於TMP中之抗原決定基之T細胞受體)之EC50 在μM範圍內。在一些情況下，本發明之TMP對對照T細胞之EC50 與TMP對靶T細胞之EC50 的比率為至少1.5：1、至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1、至少100：1、至少500：1、至少102 ：1、至少5 x 102 ：1、至少103 ：1、至少5 x 103 ：1、至少104 ：1、至少105 ：1或至少106 ：1。本發明之TMP對對照T細胞之EC50 與TMP對靶T細胞之EC50 的比率表達TMP之選擇性。
在一些情況下，當如前段中所述進行量測時，與TMP與包含)結合親本野生型MOD之同源共刺激多肽；及ii)實質上結合至除存在於TMP中之抗原決 定基以外之抗原決定基之T細胞受體的對照T細胞之結合相比，包含親和力降低MOD之本發明之TMP對靶T細胞展現選擇性結合。
KRAS肽
如上文所論述，本發明之TMP包含KRAS肽，該KRAS肽之長度典型地為至少約4個胺基酸，且當呈MHC/肽複合物(例如，HLA/肽複合物)時向T細胞呈現KRAS抗原決定基。
存在於本發明之TMP中之KRAS肽的長度可為至少4個胺基酸，例如，長度為4個胺基酸至約25個胺基酸(例如，4個胺基酸(aa)、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa、10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa，包括長度在9-10個胺基酸、4至20個胺基酸、6至18個胺基酸、8至15個胺基酸、8至12個胺基酸、5至10個胺基酸、10至20個胺基酸及15至25個胺基酸之範圍內)。在一些情況下，KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸。
存在於本發明之TMP中之KRAS抗原決定基為由T細胞特異性結合之肽，亦即，該抗原決定基由抗原決定基特異性T細胞，亦即，具有對KRAS抗原決定基具有特異性之TCR的T細胞特異性結合。抗原決定基特異性T細胞結合具有參考胺基酸序列之抗原決定基，但實質上不結合與參考胺基酸序列不同之抗原決定基。舉例而言，抗原決定基特異性T細胞結合具有參考胺基酸序列之抗原決定基，且以小於10-6 M、小於10-5 M或小於10-4 M之親和力結合與參考胺基酸序列不同之抗原決定基(若發生結合)。抗原決定基特異性T細胞以至少10-7 M、至少10-8 M、至少10-9 M或至少10-10 M之親和力可結合特異性針對之抗原決定基。
在一些情況下，適合之KRAS肽為至少4個胺基酸長度之肽，例如，4個胺基酸至約25個胺基酸(例如，4個胺基酸(aa)、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa、10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、 21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa，包括長度在9-10個胺基酸、4至20個胺基酸、6至18個胺基酸、8至15個胺基酸、8至12個胺基酸、5至10個胺基酸、10至20個胺基酸及15至25個胺基酸之範圍內)之KRAS多肽包含與以下KRAS胺基酸序列中之一者具有至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%或至少99%胺基酸序列一致性之胺基酸序列： (A)
Figure 109132369-A0304-12-0026-48
Figure 109132369-A0304-12-0026-49
(SEQ ID NO：1)，其中與SEQ ID NO：1中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽包含一或多個(例如1、2、3、4或5個)胺基酸取代，且其中一或多個胺基酸取代可包括與癌症相關之取代；例如，在癌細胞中之KRAS多肽中發現之取代； (B)
Figure 109132369-A0304-12-0026-50
Figure 109132369-A0304-12-0026-51
Figure 109132369-A0304-12-0026-52
(SEQ ID NO：2)，其中與SEQ ID NO：1中列出之胺基酸序列相比，KRAS多肽包含一或多個(例如1、2、3、4或5個)胺基酸取代，且其中一或多個胺基酸取代可包括與癌症相關之取代；例如，在癌細胞中之KRAS多肽中發現之取代；及 (C)
Figure 109132369-A0304-12-0026-53
Figure 109132369-A0304-12-0026-54
Figure 109132369-A0304-12-0026-55
(SEQ ID NO：89)，其中X1為Lys、Phe或Leu；X2為Val或Leu；X3為 Val或Thr；X4為Val或Thr；X5為Gly、Asp、Cys、Val或Ser；且X6為Gly、Cys或Asp；其中X5及X6中之一或兩者不為Cys。
適合之KRAS肽之非限制性實例包括包含選自由以下組成之群之序列的肽：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)、VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)、VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)、VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)及VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
適合之KRAS肽之額外非限制性實例包括包含選自由以下組成之群之序列的肽：VVVGAGDVGK(SEQ ID NO：188)；VVGAGDVGK(SEQ ID NO：189)；VVVGARGVGK(SEQ ID NO：190)；及VVGARGVGK(SEQ ID NO：191)；其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
適合之KRAS肽之非限制性實例包括包含選自由以下組成之群之序列的肽：LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)、KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)、KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)、LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)、LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)、LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)、FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)、FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)及FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)：其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基 酸。
適合之KRAS肽之額外非限制性實例包括包含選自由以下組成之群之序列的肽：KLVVVGAGDV(SEQ ID NO：204)；及KLVVVGARGV(SEQ ID NO：205)；其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
適合之KRAS肽之額外非限制性實例包括包含選自由以下組成之群之序列的肽：GAGDVGKSAL(SEQ ID NO：206)；AGDVGKSAL(SEQ ID NO：207)；DVGKSALTI(SEQ ID NO：208)；GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)；AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)；YKLVVVGAV(SEQ ID NO：211)；ARGVGKSAL(SEQ ID NO：212)；GARGVGKSAL(SEQ ID NO：213)；EYKLVVVGAR(SEQ ID NO：214)；RGVGKSALTI(SEQ ID NO：215)；LVVVGARGV(SEQ ID NO：216)：GADGVGKSAL(SEQ ID NO：217)；ACGVGKSAL(SEQ ID NO：218)；及GACGVGKSAL(SEQ ID NO：219)；其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸；或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
在一些情況下，如上文所述，本發明之TMP調節包含對KRAS多肽之G12V形式具有特異性之TCR的T細胞之活性。在此類情況下，存在於本發明之TMP中之KRAS肽可包含例如以下胺基酸序列中之一者：VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VGAVGVGKS(SEQ ID NO：222)、VGAVGVGKSA(SEQ ID NO：223)、AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)、AVGVGKSALT(SEQ ID NO：225)、GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)、GAVGVGKSA(SEQ ID NO：227)、LVVVGAVGVG(SEQ ID NO：228)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)及KLVVVGAVG(SEQ ID NO：231)；其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基 酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之KRAS肽呈現對HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-E、HLA-F或HLA-G對偶基因具有特異性之抗原決定基。在一個實施例中，存在於TMP中之KRAS肽呈現限於HLA-A*0101、A*0201、A*0203、A*0301、A*1101、A*2301、A*2402、A*2407、A*3101、A*3303、A*3401及/或A*6801之抗原決定基。在一個實施例中，存在於TMP中之KRAS抗原決定基肽呈現限於HLA-B*0702、B*0801、B*1502、B*2705、B*3802、B*3802、B*3901、B*3902、B*4001、B*4601、B*5101及/或B*5301之抗原決定基。在一個實施例中，存在於TMP中之KRAS抗原決定基肽呈現限於C*0102、C*0303、C*0304、C*0401、C*0602、C*0701、C*702、C*0801及/或C*1502之抗原決定基。
作為非限制性實例，KRAS肽包含選自由以下組成之群的肽：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)、VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)、VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)、VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)、VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)、VVVGAGDVGK(SEQ ID NO：188)、VVGAGDVGK(SEQ ID NO：189)、VVVGARGVGK(SEQ ID NO：190)及VVGARGVGK(SEQ ID NO：191)，其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸，該等KRAS肽當結合至包含β2M多肽及A*1101 HLA-A重鏈之HLA複合物時呈現抗原決定基。此類肽亦可與包含β2M多肽及A*6801 HLA-A重鏈之HLA複合物複合存在。
作為非限制性實例，KRAS肽包含選自由以下組成之群的肽： LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)、KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)、KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)、LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)、LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)、LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)、FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)、FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)及FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)，其中KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸，該等KRAS肽當結合至包含β2M多肽及A*0201 HLA-A重鏈之HLA複合物時呈現抗原決定基。
作為額外實例，以下KRAS肽當結合至包含β2M多肽及如下HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基：GAGDVGKSAL(SEQ ID NO：206)，其當結合至包含β2M多肽及B*3801 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；AGDVGKSAL(SEQ ID NO：207)，其當結合至包含β2M多肽及B0702、B*3801或B*3901 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；DVGKSALTI(SEQ ID NO：208)，其當結合至包含β2M多肽及B*5101 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)，其當結合至包含β2M多肽及B*0702或B*3801 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)，其當結合至包含β2M多肽及B*0702 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；YKLVVVGAV(SEQ ID NO：211)，其當結合至包含β2M多肽及A*0203或B*3902 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；ARGVGKSAL(SEQ ID NO：212)，其當結合至包含β2M多肽及B*0702、B*2705或B*3901 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；GARGVGKSAL(SEQ ID NO：213)，其當結合至包含β2M多肽及B*0702 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；EYKLVVVGAR(SEQ ID NO：214)，其當結合至包含β2M多肽 及A*3101 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；RGVGKSALTI(SEQ ID NO：215)，其當結合至包含β2M多肽及B*0702 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；LVVVGARGV(SEQ ID NO：216)，其當結合至包含β2M多肽及A*0203 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；GADGVGKSAL(SEQ ID NO：217)，其當結合至包含β2M多肽及B*3801 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；ACGVGKSAL(SEQ ID NO：218)，其當結合至包含β2M多肽及B*0702 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基；及GACGVGKSAL(SEQ ID NO：219)，其當結合至包含β2M多肽及B*3801 HLA-A重鏈之HLA複合物時可呈現抗原決定基。
MHC多肽
如上文所提及，本發明之TMP包括MHC多肽。出於本發明之目的，術語「主要組織相容性複合物(MHC)多肽」意欲包括各種物種之MHC多肽，包括人類MHC(亦稱作人類白血球抗原(HLA))多肽、囓齒動物(例如小鼠、大鼠等)MHC多肽，及其他哺乳動物物種(例如兔類動物、非人類靈長類動物、犬科動物、貓科動物、有蹄類動物(例如馬、牛、綿羊、山羊等)之MHC多肽，及類似MHC多肽。術語「MHC多肽」意欲包括I類MHC多肽(例如，β-2微球蛋白及I類MHC重鏈)。
在一些情況下，第一MHC多肽為I類MHC β2M(β2M)多肽，且第二MHC多肽為I類MHC重鏈(H鏈)(「MHC-H」))。在其他情況下，第一MHC多肽為I類MHC重鏈多肽；且第二MHC多肽為β2M多肽。在一些情況下，β2M及MHC-H鏈均來源於人類；亦即，MHC-H鏈為HLA重鏈或其變異體。除非另有明確規定，否則本發明之TMP不包括I類MHC重鏈之膜錨定結構域(跨膜區)，或足以將所得TMP錨定至表現其之細胞(例如真核細胞，諸如哺乳動物細胞)之I類MHC重鏈部分。在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈不包括與原生I類MHC 重鏈相關之信號肽、跨膜結構域或細胞內結構域(胞質尾)。因此，舉例而言，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈僅包括I類MHC重鏈之α1、α2及α3結構域。在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈的長度為約270個胺基酸(aa)至約290 aa。在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈的長度為270 aa、271 aa、272 aa、273 aa、274 aa、275 aa、276 aa、277 aa、278 aa、279 aa、280 aa、281 aa、282 aa、283 aa、284 aa、285 aa、286 aa、287 aa、288 aa、289 aa或290 aa。
在一些情況下，TMP之MHC多肽為人類MHC多肽，其中人類MHC多肽亦稱作「人類白血球抗原」(「HLA」)多肽。在一些情況下，TMP之MHC多肽為I類HLA多肽，例如，β2-微球蛋白多肽或I類HLA重鏈多肽。I類HLA重鏈多肽包括HLA-A重鏈多肽、HLA-B重鏈多肽、HLA-C重鏈多肽、HLA-E重鏈多肽、HLA-F重鏈多肽及HLA-G重鏈多肽。
I類MHC重鏈
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈多肽包含與圖7-13 中所描繪之人類HLA重鏈多肽中之任一者之胺基酸序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性的胺基酸序列。在一些情況下，I類MHC重鏈之長度為270 aa、271 aa、272 aa、273 aa、274 aa、275 aa、276 aa、277 aa、278 aa、279 aa、280 aa、281 aa、282 aa、283 aa、284 aa、285 aa、286 aa、287 aa、288 aa、289 aa或290 aa。在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈多肽包含圖7-13 中所描繪之胺基酸序列中之任一者的1-30、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代(除指示為在重鏈共有序列中可變之彼等位置以外)。在一些情況下，I類MHC重鏈不包括跨膜或胞質結構域。作為一個實例，本發明之TMP之I類MHC重 鏈多肽可包含與圖5A、5B及5C 中之任一者中所描繪之人類HLA-A重鏈多肽之胺基酸25-300(缺少所有或實質上所有前導序列、跨膜序列及胞質序列)或胺基酸25-365(缺少前導序列)具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性的胺基酸序列。
圖5A、5B及5C提供I類人類白血球抗原(HLA)重鏈多肽之胺基酸序列。信號序列(胺基酸1-24)為粗體且加下劃線。圖5A條目：3A.1為HLA-A重鏈(HLA-A*01：01：01：01或A*0101)(NCBI寄存號NP_001229687.1)，SEQ ID NO：35；條目3A.2來自HLA-A*1101 SEQ ID NO：36；條目3A.3來自HLA-A*2402 SEQ ID NO：37；且條目3A.4來自HLA-A*3303 SEQ ID NO：38。圖5B提供序列HLA-B*07：02：01(HLA-B*0702)NCBI GenBank寄存號NP_005505.2(亦參見GenBank寄存號AUV50118.1.)。圖5C提供序列HLA-C*0701(GenBank寄存號NP_001229971.1)(HLA-C*07：01：01：01或HLA-Cw*070101、HLA-Cw*07，參見GenBank寄存號CAO78194.1)。
如上文所提及，異二聚TMP之第一多肽及第二多肽典型地將包含一或多個二硫鍵以提供具有改善之穩定性及/或改善之表現的TMP。可在同一多肽中提供之Cys殘基之間形成一或多個二硫鍵，亦即，鏈內二硫鍵。替代地或除此類鏈內二硫鍵以外，可在第一多肽及第二多肽中提供之Cys殘基之間形成一或多個鏈間二硫鍵，例如，(i)可在I類MHC多肽中之兩者，亦即，β2M多肽及I類MHC重鏈多肽中提供非天然存在之Cys殘基，及/或(ii)可在第一多肽及第二多肽兩者中提供包含Cys殘基之連接子，及/或(iii)可在第一多肽及第二多肽中之一者中(例如，在第一多肽中之抗原決定基與β2M之間)提供包含Cys殘基之連接子，且可在另一個I類MHC多肽中(例如，在I類MHC重鏈多肽中)提供非天然存在之Cys殘基。下文論述示例性構型。
圖6 提供無前導序列或跨膜結構域或細胞內結構域之十一個成熟I類 MHC重鏈胺基酸序列之比對。比對之序列為人類HLA-A、HLA-B及HLA-C、小鼠H2K蛋白序列、HLA-A之三個變異體(變異體1、變異體2C及變異體2CP)及3個人類HLA-A變異體(HLA-A*1101；HLA-A*2402；及HLA-A*3303)。在比對中指示位置(成熟蛋白之84及139)，在該等位置處可引入半胱胺酸殘基(例如，藉由取代)用於形成二硫鍵以穩定MHCH鏈-β2M複合物。在比對中亦顯示可由半胱胺酸殘基取代之位置236(成熟多肽之位置236)，該半胱胺酸殘基可與β2M(例如 ，在aa 12處)形成鏈間二硫鍵。箭頭出現在彼等位置中之每一者上方且殘基為粗體。比對中所示之第七個HLA-A序列(變異體2c)顯示在位置84、139及236處經C殘基取代之變異體2之序列。在殘基84、139及236兩側之框顯示由五個殘基組成之彼六個組之任一側上之五個胺基酸之組，表示為aac1(對於「胺基酸簇1」)、aac2(對於「胺基酸簇2」)、aac3(對於「胺基酸簇3」)、aac4(對於「胺基酸簇4」)、aac5(對於「胺基酸簇5」)及aac6(對於「胺基酸簇6」)，其可由獨立地選自以下之1至5個胺基酸置換：(i)任何天然存在之胺基酸，或(ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸。
關於圖6 ，在一些情況下：i)aac1(胺基酸簇1)可為胺基酸序列GTLRG(SEQ ID NO：98)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如 ，L由I、V、A或F置換)之彼序列；ii)aac2(胺基酸簇2)可為胺基酸序列YNQSE(SEQ ID NO：99)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，N由Q置換，Q由N置換，及/或E由D置換)之彼序列；iii)aac3(胺基酸簇3)可為胺基酸序列TAADM(SEQ ID NO：100)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，T由S置換，A由G置換，D由E置換，及/或M由L、V或I置換)之彼序列；iv)aac4(胺基酸簇4)可為胺基酸序列AQTTK(SEQ ID NO：101)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，A由G置換，Q由N置換，或T由S置換，及/或K由R或Q置換)之彼序列；v)aac5(胺基酸簇5)可 為胺基酸序列VETRP(SEQ ID NO：102)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，V由I或L置換，E由D置換，T由S置換，及/或R由K置換)之彼序列；及/或vi)aac6(胺基酸簇6)可為胺基酸序列GDGTF(SEQ ID NO：103)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，D由E置換，T由S置換，或F由L、W或Y置換)之彼序列。
圖7-9 提供成熟I類HLA重鏈胺基酸序列(無前導序列或跨膜結構域或細胞內結構域)之比對。圖7A 中比對之胺基酸序列為以下對偶基因之I類HLA-A重鏈：A*0101、A*0201、A*0301、A*1101、A*2301、A*2402、A*2407、A*3303及A*3401。圖8A 中比對之胺基酸序列為以下對偶基因之I類HLA-B重鏈：B*0702、B*0801、B*1502、B*3802、B*4001、B*4601及B*5301。圖9A 中比對之胺基酸序列為以下對偶基因之I類HLA-C重鏈：C*0102、C*0303、C*0304、C*0401、C*0602、C*0701、C*0801及C*1502。在比對中指示位置(成熟蛋白之84及139)，在該等位置處可引入半胱胺酸殘基(例如，藉由取代)用於形成二硫鍵以穩定HLA H鏈-β2M複合物。在比對中亦顯示可由半胱胺酸殘基取代之位置236(成熟多肽之位置236)，該半胱胺酸殘基可與β2M(例如 ，在aa 12處)形成鏈間二硫鍵。在殘基84、139及236兩側之框顯示由五個殘基組成之彼六個組之任一側上之五個胺基酸之組，表示為aac1(對於「胺基酸簇1」)、aac2(對於「胺基酸簇2」)、aac3(對於「胺基酸簇3」)、aac4(對於「胺基酸簇4」)、aac5(對於「胺基酸簇5」)及aac6(對於「胺基酸簇6」)，其可由獨立地選自以下之1至5個胺基酸置換：(i)任何天然存在之胺基酸，或(ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸。
圖7A、8A及9A 分別提供成熟I類HLA-A、HLA-B及HLA-C重鏈之胺基酸序列之比對。提供成熟蛋白之細胞外部分之序列(無前導序列或跨膜結構域或細胞內結構域)。如圖6 中所述，亦示出aa殘基84、139及236之位置及其側翼殘基(aac1至aac6)，該等側翼殘基可由1至5個獨立地選自以下之胺基酸置換：(i)任 何天然存在之胺基酸，或(ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸。圖7B、8B及9B 提供圖7A、8A及9A中分別提供之HLA-A、HLA-B及HLA-C序列之共有胺基酸序列。共有序列以依序編號之「X」殘基示出可變胺基酸位置且胺基酸84、139及236之位置加雙下劃綫。
關於圖7A ，在一些情況下：i)aac1(胺基酸簇1)可為胺基酸序列GTLRG(SEQ ID NO：98)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，L由I、V、A或F置換)之彼序列；ii)aac2(胺基酸簇2)可為胺基酸序列YNQSE(SEQ ID NO：99)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，N由Q置換，Q由N置換，及/或E由D置換)之彼序列；iii)aac3(胺基酸簇3)可為胺基酸序列TAADM(SEQ ID NO：100)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，T由S置換，A由G置換，D由E置換，及/或M由L、V或I置換)之彼序列；iv)aac4(胺基酸簇4)可為胺基酸序列AQTTK(SEQ ID NO：101)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，A由G置換，Q由N置換，或T由S置換，及或K由R或Q置換)之彼序列；v)aac5(胺基酸簇5)可為胺基酸序列VETRP(SEQ ID NO：102)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，V由I或L置換，E由D置換，T由S置換，及/或R由K置換)之彼序列；及/或vi)aac6(胺基酸簇6)可為胺基酸序列GDGTF(SEQ ID NO：103)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，D由E置換，T由S置換，或F由L、W或Y置換)之彼序列。
關於圖8A ，在一些情況下：i)aac1(胺基酸簇1)可為胺基酸序列RNLRG(SEQ ID NO：104)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，N由T或I置換；及/或L由A置換；及/或第二個R由L置換；及/或G由R置換)之彼序列；ii)aac2(胺基酸簇2)可為胺基酸序列YNQSE(SEQ ID NO：99)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，N由Q置換，Q 由N置換，及/或E由D置換)之彼序列；iii)aac3(胺基酸簇3)可為胺基酸序列TAADT(SEQ ID NO：105)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，第一個T由S置換；及/或A由G置換；及/或D由E置換；及/或第二個T由S置換)之彼序列；iv)aac4(胺基酸簇4)可為胺基酸序列AQITQ(SEQ ID NO：106)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，A由G置換；及/或第一個Q由N置換；及/或I由L或V置換；及/或T由S置換；及/或第二個Q由N置換)之彼序列；v)aac5(胺基酸簇5)可為胺基酸序列VETRP(SEQ ID NO：102)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，V由I或L置換，E由D置換，T由S置換，及/或R由K置換)之彼序列；及/或vi)aac6(胺基酸簇6)可為胺基酸序列GDRTF(SEQ ID NO：107)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，D由E置換；及/或T由S置換；及/或R由K或H置換；及/或F由L、W或Y置換)之彼序列。
關於圖9A ，在一些情況下：i)aac1(胺基酸簇1)可為胺基酸序列RNLRG(SEQ ID NO：104)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，N由K置換；及/或L由A或I置換；及/或第二個R由H置換；及/或G由T或S置換)之彼序列；ii)aac2(胺基酸簇2)可為胺基酸序列YNQSE(SEQ ID NO：99)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，N由Q置換，Q由N置換，及/或E由D置換)之彼序列；iii)aac3(胺基酸簇3)可為胺基酸序列TAADT(SEQ ID NO：105)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，第一個T由S置換；及/或A由G置換；及/或D由E置換；及/或第二個T由S置換)之彼序列；iv)aac4(胺基酸簇4)可為胺基酸序列AQITQ(SEQ ID NO：106)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，A由G置換；及/或第一個Q由N置換；及/或I由L置換；及/或第二個Q由N或K置換)之彼序列；v)aac5(胺基酸簇5)可為胺基酸序列VETRP(SEQ ID NO：102)或其中一 或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，V由I或L置換，E由D置換，T由S置換，及/或R由K或H置換)之彼序列；及/或vi)aac6(胺基酸簇6)可為胺基酸序列GDGTF(SEQ ID NO：103)或其中一或兩個胺基酸缺失或經其他天然存在之胺基酸取代(例如，D由E置換；及/或T由S置換；及/或F由L、W或Y置換)之彼序列。
HLA-A
在一些情況下，本發明之TMP包含HLA-A重鏈多肽。可併入本發明之TMP中之HLA-A重鏈肽序列或其部分包括但不限於對偶基因：A*0101、A*0201、A*0301、A*1101、A*2301、A*2402、A*2407、A*3303及A*3401，該等對偶基因在圖7A 中在無所有或實質上所有前導序列、跨膜序列及胞質序列之情況下進行比對。彼等對偶基因中之任一者可在位置84、139及/或236(如圖7A 中所示)中之一或多者處包含選自以下之突變：在位置84處酪胺酸至丙胺酸(Y84A)；在位置84處酪胺酸至半胱胺酸(Y84C)；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸(A139C)；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。另外，亦可採用與彼等HLA-A對偶基因之序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%(例如，至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列一致性的HLA-A序列(例如 ，其可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代)。本發明之TMP可包含I類MHC重鏈，該I類MHC重鏈包含圖21A-21AA、21DD-21FF、21HH及22A-22BB中之任一者中所描繪之胺基酸序列。
在一些情況下，本發明之TMP包含HLA-A重鏈多肽，該HLA-A重鏈多肽包含圖21II(SEQ ID NO：61)中所示之HLA-A共有胺基酸序列，其中X1為F、Y、S或T；X2為K或R；X3為Q、G、E或R；X4為N或E；X5為R或G；X6為N或K；X7為M或V；X8為H或Q；X9為T或I；X10為D或H；X11為A、V或E；X12為 N或D；X13為G或R；X14為T或I；X15為L或A；X16為R或L；X17為G或R；X18為A或D；X19為I、L或V；X20為I、R或M；X21為F或Y；X22為S或P；X23為W或G；X24為R、H或Q；X25為D或Y；X26為N或K；X27為T或I；X28為K或Q；X29為R或H；X30為A或T；X31為A或V；X32為H或R；X33為R、L、Q或W；X34為V或A；X35為D或E；X36為R或T；X37為D或E；X38為W或G；X39為P或A；X40為P或A；X41為V或I；X42為S或G；X43為A或S；X44為Q或E；且X45為P或L。
作為一個實例，TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21A(SEQ ID NO：108)或21B(SEQ ID NO：109)中所示之人類HLA-A重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。圖21B之HLA-A重鏈多肽亦稱作「HLA-A*0201」或簡稱「HLA-A02」。在一些情況下，C端脯胺酸不包括於本發明之TMP中。舉例而言，在一些情況下，適合包含於本發明之TMP中之HLA-A02多肽與圖21C(SEQ ID NO：110)中所示之胺基酸序列包含至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性。
HLA-A(Y84A；A236C)
在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含Y84A及A236C取代。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21D(SEQ ID NO：111)中所示之人類HLA-A重鏈(Y84A；A236C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，Cys-236與包含R12C取代之變異體β2M多肽之Cys-12形成鏈間二硫鍵。
在一些情況下，適合包含於本發明之TMP中之HLA-A重鏈多肽為包含圖21E(SEQ ID NO：112)中之胺基酸序列之HLA-A02(Y84A；A236C)多肽。在 一些情況下，適合包含於本發明之TMP中之HLA-A重鏈多肽為包含圖21F(SEQ ID NO：113)中所示之胺基酸序列之HLA-A02(Y84A；A236C)多肽。
HLA-A(Y84A；A139C)
在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含Y84C及A139C取代。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21G(SEQ ID NO：114)中所示之人類HLA-A重鏈(Y84C；A139C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸139為Cys。在一些情況下，Cys-84與Cys-139形成鏈內二硫鍵。
HLA-A(Y84C；A139C；A236C)
在一些情況下，適合包含於本發明之TMP中之I類MHC重鏈多肽包含與圖21H(SEQ ID NO：120)中所示之人類HLA-A重鏈(Y84C；A139C；A236C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys，胺基酸139為Cys，且胺基酸236為Cys。在一些情況下，Cys-84與Cys-139形成鏈內二硫鍵。在胺基酸236處之Cys可與第二多肽鏈中之Cys殘基形成二硫鍵。舉例而言，在胺基酸236處之Cys可與包含R12C取代之β2M多肽中之Cys-12殘基形成二硫鍵。
在一些情況下，適合包含於本發明之TMP中之HLA-A重鏈多肽為包含圖21I(SEQ ID NO：232)中所示之胺基酸序列之HLA-A02(Y84C；A139C；A236C)多肽。
HLA-A11(HLA-A *1101)
作為一個非限制性實例，TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21J(SEQ ID NO：115)中所示之人類HLA-A11重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列 一致性之胺基酸序列。此種I類MHC重鏈可主要處於亞洲人群(包括亞裔個體人群)中。
HLA-A11(Y84A；A236C)
作為一個非限制性實例，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽為包含Y84A及A236C取代之HLA-A11對偶基因。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21K(SEQ ID NO：116)中所示之人類HLA-AA11重鏈(Y84A；A236C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，如圖21L(SEQ ID NO：233)中所示，Cys-236與包含R12C取代之變異體β2M多肽之Cys-12形成鏈間二硫鍵，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
HLA-A24(HLA-A *2402)
作為一個非限制性實例，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21M(SEQ ID NO：117)中所示之人類HLA-A24重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。此種I類MHC重鏈可主要處於亞洲人群(包括亞裔個體人群)中。在一些情況下，胺基酸84為Ala。在一些情況下，胺基酸84為Cys。在一些情況下，胺基酸236為Cys。在一些情況下，胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
作為一個非限制性實例，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21N(SEQ ID NO：586)中所示之人類HLA-A24(亦稱作HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。此種I類MHC重鏈可主要處於亞洲人群(包括亞裔個體人群)中。在一些情況下，在位置84處之胺基酸X1為Ala。 在一些情況下，胺基酸84為Cys。在一些情況下，在位置236處之胺基酸X2為Cys。在一些情況下，胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
在一些情況下，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與以下圖式中之一者所示之人類HLA-A24(亦稱作HLA-A*2402)重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列：(i)圖21O(SEQ ID NO：235)，其中胺基酸84為Tyr且胺基酸236為Ala(胺基酸84及236為粗體且加下劃線)；且其中I類MHC重鏈之長度為約275個胺基酸；(ii)TMP圖21P(SEQ ID NO：236)，其中胺基酸84為Ala且胺基酸236為Ala(胺基酸84及236為粗體且加下劃線)；且其中I類MHC重鏈之長度為約275個胺基酸；(iii)TMP圖21Q(SEQ ID NO：237)，其中胺基酸84為Tyr且胺基酸236為Cys(胺基酸84及236為粗體且加下劃線)；且其中I類MHC重鏈之長度為約275個胺基酸；(iv)TMP圖21R(SEQ ID NO：238)，其中胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys(胺基酸84及236為粗體且加下劃線)；且其中I類MHC重鏈之長度為約275個胺基酸；(v)TMP圖21S(SEQ ID NO：239)，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Ala(胺基酸84及236為粗體且加下劃線)；且其中I類MHC重鏈之長度為約275個胺基酸；及(vi)TMP圖21T(SEQ ID NO：240)，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys(胺基酸84及236為粗體且加下劃線)；且其中I類MHC重鏈之長度為約275個胺基酸。
HLA-A33(HLA-A *3303)
作為一個非限制性實例，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21U(SEQ ID NO：118)中所示之人類HLA-A33重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。此種I類MHC重鏈可主要處於亞洲人群(包括亞裔個 體人群)中。在一些情況下，胺基酸84為Ala。在一些情況下，胺基酸84為Cys。在一些情況下，胺基酸236為Cys。在一些情況下，胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
HLA-B
在一些情況下，本發明之TMP包含HLA-B重鏈多肽。可併入本發明之TMP中之HLA-B重鏈肽序列或其部分包括但不限於對偶基因：B*0702、B*0801、B*1502、B*3802、B*4001、B*4601及B*5301，該等對偶基因在圖8A 中在無所有或實質上所有前導序列、跨膜序列及胞質序列之情況下進行比對。彼等對偶基因中之任一者可在位置84、139及/或236(如圖8A 中所示)中之一或多者處包含選自以下之突變：在位置84處酪胺酸至丙胺酸(Y84A)；在位置84處酪胺酸至半胱胺酸(Y84C)；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸(A139C)；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。另外，亦可採用包含與彼等HLA-B對偶基因之序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%(例如，至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列的HLA-B多肽(例如 ，其可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代)。
在一些情況下，本發明之TMP包含HLA-B重鏈多肽，該HLA-B重鏈多肽包含圖21 JJ(SEQ ID NO：69)中所示之HLA-B共有胺基酸序列，其中X1為H、Y或D；X2為A或S；X3為M或V；X4為A、S或T；X5為Q或L；X6為A或T；X7為E、MK或T；X8為A或T；X9為E或N；X10為I或K；X11為Y、F、S或C；X12為N或Q；X13為A或T；X14為D或Y；X15為E或V；X16為S或N；X17為T、N或I；X18為A或L；X19為L或R；X20為R或G；X21為T或I；X22為L或I；X23為R或S；X24為R或S；X25為S或T；X26為L或W；X27為E或V；X28為R、D、L或W；X29為A或T；X30為L、E或T；X31為E或D；X32為K或T；X33為E或Q；且X34為I或 V。
作為一個實例，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21V(SEQ ID NO：119)中所示之人類HLA-B重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
HLA-B(Y84A；A236C)
作為一個非限制性實例，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽為包含Y84A及A236C取代之HLA-B多肽。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21W(SEQ ID NO：121)中所示之人類HLA-B重鏈(Y84A；A236C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，Cys-236與包含R12C取代之變異體β2M多肽之Cys-12形成鏈間二硫鍵。
HLA-B(Y84C；A139C)
在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含Y84C及A139C取代。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21X(SEQ ID NO：122)中所示之人類HLA-B重鏈(Y84C；A139C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸139為Cys。在一些情況下，Cys-84與Cys-139形成鏈內二硫鍵。
HLA-B *0702
作為一個實例，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈多肽包含圖8A 中之HLA-B*0702(SEQ ID NO：62)之胺基酸序列，或與彼序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%(例 如，至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列一致性之序列(例如 ，其可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代)。在一些情況下，在本發明之TMP之HLA-B重鏈多肽與圖6 中標記為HLA-B或圖8A 中標記為「B*0702」之序列具有小於100%一致性之情況下，其可在位置84、139及/或236中之一或多者處包含選自以下之突變：在位置84處酪胺酸至丙胺酸取代(Y84A)；在位置84處酪胺酸至半胱胺酸取代(Y84C)；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸(A139C)；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。在一些情況下，本發明之TMP之HLA-B重鏈多肽包含Y84A及A236C取代。在一些情況下，本發明之TMP之HLA-B*0702重鏈多肽包含Y84C及A139C取代。在一些情況下，本發明之TMP之HLA-B重鏈多肽包含Y84C、A139C及A236C取代。
HLA-C
在一些情況下，本發明之TMP包含HLA-C重鏈多肽。可併入本發明之TMP中之HLA-C重鏈多肽或其部分包括但不限於對偶基因：C*0102、C*0303、C*0304、C*0401、C*0602、C*0701、C*0801及C*1502，該等對偶基因在圖9A 中在無所有或實質上所有前導序列、跨膜序列及胞質序列之情況下進行比對。彼等對偶基因中之任一者可在位置84、139及/或236(如圖9A 中所示)中之一或多者處包含選自以下之突變：在位置84處酪胺酸至丙胺酸取代(Y84A)；在位置84處酪胺酸至半胱胺酸取代(Y84C)；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸取代(A139C)；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。另外，亦可採用包含與彼等HLA-C對偶基因之序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%(例如，至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列的HLA-C多肽(例如 ，其可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代)。
在一些情況下，本發明之TMP包含HLA-C重鏈多肽，該HLA-C重鏈多肽包含以下HLA-C共有胺基酸序列：
Figure 109132369-A0304-12-0046-46
Figure 109132369-A0304-12-0046-47
(SEQ ID NO：79)，其中X1為C或G；X2為R或 K；X3為F、Y、S或D；X4為R或W；X5為H或R；X6為A或S；X7為Q或R；X8為A或E；X9為N或K；X10為T或A；X11為S或N；X12為N或K；X13為A或D；X14為G或R；X15為T或I；XI6為L或I；X17為W或R；X18為C、Y、F或S；X19為L或V；X20為Y或H；X21為D或N；X22為Y、F、S或L；X23為L或W；X24為E、A或T；X25為R、L或W；X26為L或T；X27為E或K；X28為E或K；X29為H或P；X30為R或V；X31為W或R；X32為V或M；X33為E或Q；X34為M或V；X35為P或Q；X36為R或S；且X37為P或G。
作為一個實例，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽可包含與圖21Y(SEQ ID NO：123)中所示之人類HLA-C重鏈胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
HLA-C(Y84A；A236C)
作為一個非限制性實例，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽為包含Y84A及A236C取代之HLA-C多肽。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21Z(SEQ ID NO：124)中所示之人類HLA-C重鏈(Y84A；A236C)胺基酸 序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Ala且胺基酸236為Cys。在一些情況下，Cys-236與包含R12C取代之變異體β2M多肽之Cys-12形成鏈間二硫鍵。
HLA-C(Y84C；A139C)
在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含Y84C及A139C取代。舉例而言，在一些情況下，I類MHC重鏈多肽包含與圖21AA(SEQ ID NO：125)中所示之人類HLA-C重鏈(Y84C；A139C)胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸139為Cys。在一些情況下，Cys-84與Cys-139形成鏈內二硫鍵。
HLA-C *0701
在一些情況下，本發明之TMP之I類MHC重鏈多肽包含圖9A 之HLA-C*0701(圖6中 標記為HLA-C)之胺基酸序列，或與彼序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%(例如，至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列(例如 ，其可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代)。在一些情況下，在本發明之TMP之HLA-C重鏈多肽與圖9A 中標記為HLA-C*0701之序列具有小於100%一致性之情況下，其可在位置84、139及/或236中之一或多者處包含選自以下之突變：在位置84處酪胺酸至丙胺酸取代(Y84A)；在位置84處酪胺酸至半胱胺酸取代(Y84C)；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸(A139C)；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。在一些情況下，本發明之TMP之HLA-C重鏈多肽包含Y84A及A236C取代。在一些情況下，T細胞MMP之HLA-C*0701重鏈多肽或其抗原決定基接合物包含Y84C及A139C取代。 在一些情況下，本發明之TMP之HLA-C重鏈多肽包含Y84C、A139C及A236C取代。
非典型I類HLA-E、HLA-F及HLA-G MHC重鏈
在一些情況下，本發明之TMP包含非典型I類MHC重鏈多肽。在可併入本發明之TMP中之非典型HLA重鏈多肽或其部分當中包括但不限於HLA-E、HLA-F及HLA-G對偶基因之彼等。HLA-E、HLA-F及HLA-G重鏈多肽(及HLA-A、HLA-B及HLA-C對偶基因)之胺基酸序列可在全球資訊網hla.alleles.org/nomenclature/index.html、歐洲生物資訊研究所(www(dot)ebi(dot)ac(dot)uk)(其為歐洲分子生物學實驗室(European Molecular Biology Laboratory，EMBL)之一部分)及國家生物技術資訊中心(www(dot)ncbi(dot)nlm(dot)nih(dot)gov)找到。
適合之HLA-E對偶基因之非限制性實例包括但不限於HLA-E*0101(HLA-E*01：01：01：01)、HLA-E*01：03(HLA-E*01：03：01：01)、HLA-E*01：04、HLA-E*01：05、HLA-E*01：06、HLA-E*01：07、HLA-E*01：09及HLA-E*01：10。適合之HLA-F對偶基因之非限制性實例包括但不限於HLA-F*0101(HLA-F*01：01：01：01)、HLA-F*01：02、HLA-F*01：03(HLA-F*01：03：01：01)、HLA-F*01：04、HLA-F*01：05及HLA-F*01：06。適合之HLA-G對偶基因之非限制性實例包括但不限於HLA-G*0101(HLA-G*01：01：01：01)、HLA-G*01：02、HLA-G*01：03(HLA-G*01：03：01：01)、HLA-G*01：04(HLA-G*01：04：01：01)、HLA-G*01：06、HLA-G*01：07、HLA-G*01：08、HLA-G*01：09：HLA-G*01：10、HLA-G*01：10、HLA-G*01：11、HLA-G*01：12、HLA-G*01：14、HLA-G*01：15、HLA-G*01：16、HLA-G*01：17、HLA-G*01：18：HLA-G*01：19、HLA-G*01：20及HLA-G*01：22。無所有或實質上所有前導序列、跨膜序列及胞質序列之彼等HLA-E、HLA-F及HLA-G對偶基因之共有序列在圖10 中提供，且在圖11 中與上文所提及之HLA-A、HLA-B及HLA-C對偶基因之共有序列進行比對。
圖1 -提供HLA-E、HLA-F及HLA-G中之每一者之共有序列，其中可變aa位置以依序編號之「X」殘基指示且aa 84、139及236之位置加雙下劃線。
圖11 提供圖7-11中給出之HLA-A、HLA-B、HLA-C、HLA-E、HLA-F及HLA-G之共有胺基酸序列之比對。各序列中之可變殘基以「X」列出，其中去除依序編號。如圖6中所指示，亦示出aa 84、139及236之位置以其側翼五個胺基酸之簇指示，該等簇可由1至5個獨立地選自以下之胺基酸置換：(i)任何天然存在之胺基酸，或(ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸。
上文所提及之HLA-E、HLA-F及/或HLA-G對偶基因中之任一者可在如圖11 中對於共有序列所示之位置84、139及/或236中之一或多者處包含取代。在一些情況下，取代可選自：在位置84處酪胺酸至丙胺酸(Y84A)或半胱胺酸(Y84C)，或在HLA-F之情況下為R84A或R84C取代；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸(A139C)，或在HLA-F之情況下為V139C；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。另外，亦可採用與圖11 中所列之共有序列中之任一者之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%(例如，至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%)或100%胺基酸序列一致性的HLA-E、HLA-F及/或HLA-G序列(例如 ，除其中列出之可變殘基之變化以外，序列可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸插入、缺失及/或取代)。
小鼠H2K
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之I類MHC重鏈多肽包含小鼠H2K(SEQ ID NO：45)(圖6 中之小鼠H2K)之胺基酸序列，或與彼序列之全部或部分(例如，50、75、100、150、200或250個相連胺基酸)具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之序列(例如 ，其可包含1-25、1-5、5-10、10-15、15-20、20-25或25-30個胺基酸 插入、缺失及/或取代)。在一些情況下，在本發明之TMP之小鼠H2K重鏈多肽與圖6 中標記為小鼠H2K之序列具有小於100%一致性之情況下，其可在位置84、139及/或236中之一或多者處包含選自以下之突變：在位置84處酪胺酸至丙胺酸(Y84A)；在位置84處酪胺酸至半胱胺酸(Y84C)；在位置139處丙胺酸至半胱胺酸(A139C)；及在位置236處丙胺酸至半胱胺酸取代(A236C)。在一些情況下，本發明之TMP之小鼠H2K重鏈多肽包含Y84A及A236C取代。在一些情況下，本發明之TMP之小鼠H2K重鏈多肽包含Y84C及A139C取代。在一些情況下，本發明之TMP之小鼠H2K重鏈多肽包含Y84C、A139C及A236C取代。
示例性組合
下表1展示可併入本發明之TMP中之I類MHC重鏈序列修飾之各種組合。
Figure 109132369-A0304-12-0050-2
Figure 109132369-A0304-12-0051-3
Figure 109132369-A0304-12-0052-4
Figure 109132369-A0304-12-0052-60
序列一致性範圍為併入TMP中之MHC-H多肽序列相對於圖6-11中列出之序列之相應部分之序列一致性的允許範圍，不計入共有序列中之可變殘基。
β-2微球蛋白
本發明之TMP之β2-微球蛋白(β2M)多肽可為人類β2M多肽、非人類靈長類動物β2M多肽、鼠類β2M多肽，及類似多肽。在一些情況下，β2M多肽包含與圖4中所描繪之β2M胺基酸序列具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些情況下，β2M多肽包含與圖4中所描繪之β2M胺基酸序列之胺基酸21至119具有至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
在一些情況下，適合之β2M多肽包含圖21CC(SEQ ID NO：126)之胺基酸序列；且I類HLA重鏈多肽包含圖21HH(SEQ ID NO：127)之胺基酸序列，其中以{C}指示之半胱胺酸殘基在α1與α2-1螺旋之間形成二硫鍵且殘基與位置12處之β2M多肽半胱胺酸形成二硫鍵。在上述序列中，「aa1」為「胺基酸簇1」；「aa2」為「胺基酸簇2」；「aa3」為「胺基酸簇3」；「aa4」為「胺基酸簇4」；「aa5」為「胺基酸簇5」；且「aa6」為「胺基酸簇6」。參見例如圖8。每次出現之aa1、aa2、aa3、aa4、aa5及aa6獨立地選為1-5個胺基酸殘基，其中該等胺基酸殘基)獨立地選自任何天然存在(例如，經編碼)之胺基酸，或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸。
在一些情況下，相對於參考MHC多肽(其中參考MHC多肽可為野生型MHC多肽)，MHC多肽包含單個胺基酸取代，其中該單個胺基酸取代用半胱胺 酸(Cys)殘基取代胺基酸。當存在於本發明之異二聚TMP之第一多肽之MHC多肽中或單鏈TMP之MHC多肽中時，此類非天然存在之半胱胺酸殘基可與存在於本發明之TMP之第二多肽鏈中或單鏈TMP之另一個MHC多肽中之半胱胺酸殘基形成二硫鍵。
在一些情況下，本發明之異二聚TMP之第一多肽中之第一MHC多肽及/或本發明之異二聚TMP之第二多肽中之第二MHC多肽包括胺基酸取代以用半胱胺酸取代胺基酸，其中第一MHC多肽中之非天然存在之半胱胺酸與第二MHC多肽中之半胱胺酸形成二硫鍵，其中第一MHC多肽中之半胱胺酸與第二MHC多肽中之非天然存在之半胱胺酸形成二硫鍵，或其中第一MHC多肽中之非天然存在之半胱胺酸與第二MHC多肽中之非天然存在之半胱胺酸形成二硫鍵。類似地，本發明之單鏈TMP中之MHC多肽中之一者包括胺基酸取代以用半胱胺酸取代胺基酸，其中MHC多肽中之非天然存在之半胱胺酸與TMP中之不同MHC多肽中之天然存在或非天然存在之半胱胺酸形成二硫鍵。
舉例而言，在一些情況下，HLA β2-微球蛋白及I類HLA重鏈中之以下殘基對中之一者經半胱胺酸取代(其中殘基編號為成熟多肽之彼等殘基編號)：1)β2M殘基12、I類HLA重鏈殘基236；2)β2M殘基12、I類HLA重鏈殘基237；3)β2M殘基8、I類HLA重鏈殘基234；4)β2M殘基10、I類HLA重鏈殘基235；5)β2M殘基24、I類HLA重鏈殘基236；6)β2M殘基28、I類HLA重鏈殘基232；7)β2M殘基98、I類HLA重鏈殘基192；8)β2M殘基99、I類HLA重鏈殘基234；9)β2M殘基3、I類HLA重鏈殘基120；10)β2M殘基31，I類HLA重鏈殘基96；11)β2M殘基53、I類HLA重鏈殘基35；12)β2M殘基60、I類HLA重鏈殘基96；13)β2M殘基60、I類HLA重鏈殘基122；14)β2M殘基63、I類HLA重鏈殘基27；15)β2M殘基Arg3、I類HLA重鏈殘基Gly120；16)β2M殘基His31、I類HLA重鏈殘基Gln96；17)β2M殘基Asp53、I類HLA重鏈殘基Arg35；18)β2M殘基Trp60、I類HLA重鏈殘基Gln96； 19)β2M殘基Trp60、I類HLA重鏈殘基Asp122；20)β2M殘基Tyr63、I類HLA重鏈殘基Tyr27；21)β2M殘基Lys6、I類HLA重鏈殘基Glu232；22)β2M殘基Gln8、I類HLA重鏈殘基Arg234；23)β2M殘基Tyr10、I類HLA重鏈殘基Pro235；24)β2M殘基Ser11、I類HLA重鏈殘基Gln242；25)β2M殘基Asn24、I類HLA重鏈殘基Ala236；26)β2M殘基Ser28、I類HLA重鏈殘基Glu232；27)β2M殘基Asp98、I類HLA重鏈殘基His192；及28)β2M殘基Met99、I類HLA重鏈殘基Arg234。I類MHC/HLA重鏈之胺基酸編號係參考無信號肽之成熟I類MHC/HLA重鏈。舉例而言，在一些情況下，成熟HLA-A胺基酸序列之殘基236經Cys取代。在一些情況下，成熟HLA-B胺基酸序列之殘基236經Cys取代。在一些情況下，成熟HLA-C胺基酸序列之殘基236經Cys取代。在一些情況下，圖4中所描繪之胺基酸序列之殘基32(對應於成熟β2M之Arg-12)經Cys取代。
在一些情況下，β2M多肽包含圖21BB(SEQ ID NO：128)或圖21CC(SEQ ID NO：129)中所示之胺基酸序列。
在一些情況下，I類HLA重鏈多肽包含圖21DD(SEQ ID NO：130)、21EE(SEQ ID NO：131)或21FF(SEQ ID NO：132)中所示之胺基酸序列。
在一些情況下，本發明之TMP之β2M多肽包含圖21CC(SEQ ID NO：133)之胺基酸序列且TMP之I類HLA重鏈多肽包含圖21EE(SEQ ID NO：134)之胺基酸序列，其中加下劃線且為粗體之Cys殘基在TMP中彼此形成二硫鍵。
在一些情況下，β2M多肽包含圖21GG(SEQ ID NO：135)之胺基酸序列。
在一些情況下，本發明之異二聚或單鏈TMP中之MHC多肽經以下殘基彼此二硫鍵連接：i)存在於連接肽抗原決定基與β2M多肽之連接子中之Cys殘基；及ii)存在於I類MHC重鏈中之Cys殘基。在一些情況下，存在於I類MHC重鏈中之Cys殘基為作為Y84C取代引入之Cys。在一些情況下，連接肽抗原決定基與 β2M多肽之連接子為GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：583)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8或9。舉例而言，在一些情況下，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：137)。作為另一個實例，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：138)。本發明之異二聚TMP之二硫鍵連接之第一多肽及第二多肽之實例在圖2A-2F中示意性地描繪。
多個二硫鍵鍵結之TMP
在一些情況下，本發明之異二聚TMP之第一多肽及第二多肽係由至少兩個二硫鍵(亦即，兩個鏈間二硫鍵)彼此連接。此種多個二硫鍵連接之TMP之實例在圖12A及12B中以及圖16C中示意性地描繪。另外，在本發明之異二聚或單鏈TMP包含Ig Fc多肽之情況下，異二聚TMP可二聚，使得二硫鍵連接兩個異二聚TMP中之Ig Fc多肽。此種排列在圖12C及12D中示意性地描繪，其中二硫鍵由虛線表示。除非另有規定，否則此章節中多個二硫鍵連接之TMPP中所述之至少兩個二硫鍵並非係指連接二聚TMP中之Ig Fc多肽之二硫鍵。
舉例而言，在一些情況下，本發明之異二聚TMP之第一多肽及第二多肽係由2個鏈間二硫鍵彼此連接。作為另一個實例，在一些情況下，本發明之TMP之第一多肽及第二多肽係由3個鏈間二硫鍵彼此連接。作為另一個實例，在一些情況下，本發明之TMP之第一多肽及第二多肽係由4個鏈間二硫鍵彼此連接。
在一些情況下，在本發明之異二聚或單鏈TMP之肽抗原決定基係由包含Cys之連接子連接至β2M多肽之情況下，至少兩個二硫鍵中之至少一者將連接子中之Cys鍵結至TMP中之I類MHC重鏈中之Cys。在一些情況下，在本發明之TMP之肽抗原決定基係由連接子連接至I類MHC重鏈多肽之情況下，至少兩個二硫鍵中之至少一者將連接子中之Cys連接至存在於TMP中之β2M多肽中之Cys。
在一些情況下，與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)展現增加之穩定 性及/或改善之表現。在一些情況下，與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)展現增加之活體外穩定性。舉例而言，在一些情況下，與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)展現高至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍之活體外穩定性。
藉由量測在指定溫度下於溶液中指定時間後溶液中剩餘之TMP百分比來確定穩定性。與在異二聚體之第一多肽與第二多肽之間缺少至少一個二硫鍵之對照TMMP相比，可活體外經指定時間段及在指定溫度下於含有500mM NaCl之PBS緩衝溶液(上文所述)中(例如，在37℃至42℃之溫度下於溶液中保持1小時至28天之時間段；例如，在37℃下1小時；在37℃下1天；在37℃下5天；在42℃下1小時；在42℃下1天；在42℃下5天；在37℃下5天；在37℃下10天；在37℃下14天；在37℃下28天；及類似條件)量測穩定性。TMMP可依0.1mg/mL至10mg/mL之濃度存在於PBS緩衝溶液中，例如，約1mL、約2mL、約3mL、約4mL、約5mL、約6mL、約7mL、約8mL、約9mL或約10mL，且緩衝溶液可在37℃或42℃下保持1小時、5天、10天、14天、21天或28天。
與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP是否展現增加之活體外穩定性可藉由量測存在於如上文所論述之樣品中之各TMP之量來確定，該等樣品例如在37℃及/或42℃下保持1小時、5天、10天、14天、21天或28天。
舉例而言，在一些情況下，當在37℃下將TMP儲存一定時間段(例如，約1週至約2週、約2週至約4週或約4週至約2個月之時間段)時，與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)展現高至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、 至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍之活體外穩定性。舉例而言，在一些情況下，與在37℃下將對照TMP(僅包含存在於多個二硫鍵連接之TMP中之至少兩個二硫鍵中之一者之TMP)活體外儲存28天後剩餘之二硫鍵連接之異二聚TMP的量相比，在37℃下將本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)活體外儲存28天後剩餘之二硫鍵連接之異二聚TMP的量高至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍。
在一些情況下，與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP展現增加之活體內穩定性。舉例而言，在一些情況下，與僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP展現高至少5%、至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少50%、至少2倍、至少5倍或至少10倍之活體內穩定性。
在一些情況下，與當TMP為僅包含至少兩個二硫鍵中之一者之對照TMP時產生之二硫鍵連接之異二聚TMP之量相比，本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)中兩個二硫鍵之存在提供增加之二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP產生。舉例而言，可在活體外細胞培養中在哺乳動物細胞中產生本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)，其中在液體細胞培養基中培養哺乳動物細胞。TMP可分泌至細胞培養基中。可使細胞溶解，產生細胞溶解產物，且TMP可存在於細胞溶解產物中。可自細胞培養基及/或細胞溶解產物中純化TMP。舉例而言，在TMP包含IgG1 Fc多肽之情況下，可使細胞培養基及/或細胞溶解產物與經固定之蛋白A接觸(例如，可將細胞培養基及/或細胞溶解產物施加至蛋白A管柱，其中蛋白A固定至珠粒上)。存在於細胞培養基及/或細胞溶解產物中之TMP結合至經固定之蛋白A。在洗滌管柱以移除未結合之物質後，使所結合之TMP溶離，產生蛋白A溶離物。與當TMP為僅包含存在於多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)中之至少兩個二硫鍵中之 一者之對照TMP時存在於蛋白A溶離物中之二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP的量相比，存在於蛋白A溶離物中之二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP之量高至少0.5%、至少1%、至少2%、至少3%、至少4%、至少5%、至少6%、至少7%、至少8%、至少9%或至少10%。在一些情況下，溶離物中作為非聚集之二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP之總TMP蛋白之百分比為至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%或至少99%。可對蛋白A溶離物進行粒徑篩析層析(SEC)及/或一或多個其他額外純化步驟。
在一些情況下，本發明之T細胞調節多肽包含至少一個異二聚體，該至少一個異二聚體包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽，其中該KRAS肽之長度為至少4個胺基酸，例如，4個胺基酸至約25個胺基酸(例如，4個胺基酸(aa)、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa、10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa，及長度在4至20個胺基酸、6至18個胺基酸、8至15個胺基酸、8至12個胺基酸、5至10個胺基酸、10至20個胺基酸及15至25個胺基酸範圍內之肽)；及ii)第一MHC多肽；b)包含第二MHC多肽之第二多肽；及c)至少一個免疫調節多肽，其中第一多肽及/或第二多肽包含免疫調節多肽，且其中異二聚體在第一多肽與第二多肽之間包含至少兩個二硫鍵(例如，兩個二硫鍵)(例如，異二聚體包含：i)連接第一多肽與第二多肽之第一個二硫鍵；及ii)連接第一多肽與第二多肽之第二個二硫鍵)。以另一種方式表述，第一多肽包含與第二多肽中之第一Cys殘基形成二硫鍵(第一個二硫鍵)之第一Cys殘基；且第一多肽包含與第二多肽中之第二Cys殘基形成二硫鍵(第二個二硫鍵)之第二Cys殘基。
在一些情況下，本發明之TMP包含：a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)肽連接子；及iii)β2M多肽；及b)包含I類MHC重鏈多肽之第二多肽，其中第一多肽及第二多肽中之一或兩者包含至少一個免疫調節多肽， 其中TMP包含：a)在以下兩者之間的第一個二硫鍵：i)存在於KRAS肽與β2M多肽之間的連接子中之Cys；及ii)引入I類MHC重鏈多肽中之第一Cys；及b)在第一多肽與第二多肽之間的至少第二個二硫鍵，其中至少第二個二硫鍵在以下兩者之間：i)第一多肽中在存在於連接子中之Cys C端之Cys；及ii)第二多肽中在引入I類MHC重鏈多肽之第一Cys C端之Cys。
一般而言，異二聚或單鏈TMP中二硫鍵之潛在位置為TMP之不同多肽中之殘基間隔5埃或更短之距離處。此類位置代表Cys殘基(若非天然存在)可取代存在於多肽中之殘基的潛在位置。舉例而言，異二聚TMP之第一多肽及第二多肽潛在地可經由兩個Cys殘基之間的二硫鍵連接，該兩個Cys殘基在異二聚體中一般彼此相隔不超過約5埃。在一些情況下，Cys殘基中之一或兩者為非天然存在的。異二聚或單鏈TMP之β2M及MHC重鏈中彼此之間不超過5埃之胺基酸代表當經Cys取代時可在本發明之TMP中形成二硫鍵之胺基酸。類似地，可在連接子中之Cys殘基與MHC重鏈中之天然存在或非天然存在之Cys殘基之間形成二硫鍵，其中兩個Cys殘基彼此相隔不超過約5埃。然而，值得注意地，並非所有間隔約5埃或更短之殘基對皆適合於形成二硫鍵或提供使所得TMP穩定或提供增強表現之二硫鍵。
本發明之多個二硫鍵連接之異二聚TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)可包含例如：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽(例如，長度為4個胺基酸至約25個胺基酸之KRAS肽，當該肽與MHC多肽複合時由TCR結合)；及ii)第一MHC多肽，其中第一多肽在KRAS肽與第一MHC多肽之間包含肽連接子，其中該肽連接子包含Cys殘基，且其中第一MHC多肽為包含引入Cys殘基之胺基酸取代之β2M多肽；b)及包含第二MHC多肽之第二多肽，其中第二MHC多肽為基於HLA-A*0201之胺基酸編號(圖7A中所描繪)或在另一個I類重鏈對偶基因之相應位置處包含Y84C取代及A236C取代之I類重鏈，其中TMP在肽連接子中之Cys殘基與I 類重鏈之胺基酸位置84或另一個I類重鏈對偶基因之相應位置處之Cys殘基之間包含二硫鍵，且其中TMP在β2M多肽中引入之Cys殘基與在I類重鏈之胺基酸位置236或另一個I類重鏈對偶基因之相應位置處之Cys之間包含二硫鍵；及c)至少一個免疫調節多肽，其中第一多肽及/或第二多肽包含至少一個免疫調節多肽。實例在圖12A及圖12B中示意性地描繪。
在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：139)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；例如，1、2或3。
在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(SEQ ID NO：141)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10；例如，1、2或3。
在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GGCGS(SEQ ID NO：587)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GGCGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：592)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，例如，1、2或3。
在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GGGCS(SEQ ID NO：588)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GGGCS(GGGGS)n(SEQ ID NO：589)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，例如，1、2或3。
在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GGGGC(SEQ ID NO：590)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GGGGC(GGGGS)n(SEQ ID NO：591)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，例如，1、2或3。
以下為基於HLA-A*0201之胺基酸編號(圖7A中所描繪)或在另一個I類重鏈對偶基因中之相應位置處包含Y84C取代及A236C取代之I類MHC重鏈之非限制性實例。
HLA-A
在一些情況下，本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含：i)KRAS肽(例如，長度為4個胺基酸至25個胺基酸之KRAS肽，當該肽與MHC多肽複合時由TCR結合；例如，其中KRAS肽包含癌症相關突變)；ii)第一MHC多肽；iii)在該肽與第一MHC多肽之間的肽連接子，其中該肽連接子包含Cys殘基，且其中第一MHC多肽為包含引入Cys殘基之胺基酸取代之β2M多肽；及iv)包含I類HLA-A MHC重鏈之第二MHC多肽，該I類HLA-A MHC重鏈包含與圖22A(SEQ ID NO：143)中所示之胺基酸序列具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；且其中TMP包含至少一個免疫調節多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：139)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1至10之整數，例如，1、2或3。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。舉例而言，β2M多肽可包含與圖21CC(SEQ ID NO：144)之胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸12為Cys。至少一個免疫調節多肽可為免疫調節多肽之野生型或變異體，例如，選自由細胞激素(例如IL-2)、4-1BBL多肽、CD80多肽、CD86多肽或其組合組成之群。在一些情況下，至少一個免疫調節多肽為親和力降低變異體，例如IL-2之親和力降低變異體，如本文別處所述。在一些情況下，TMP包含Ig Fc多肽，例如，實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc，諸如圖3G中所示。
在一些情況下，本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含I類HLA-A重鏈多肽。在一些情況下，存在於本發明之多個二硫鍵連接之TMP中之HLA-A重鏈多肽(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含與圖7A中所描繪之HLA-A*0101、HLA-A*0201、HLA-A*0202、HLA-A*1101、HLA- A*2301、HLA-A*2402、HLA-A*2407、HLA-A*3303或HLA-A*3401胺基酸序列具有至少95%、至少98%或至少99%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中HLA-A重鏈多肽包含Y84C及A236C取代。
在一些情況下，存在於本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP中之HLA-A重鏈多肽(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含與以下序列中之一者具有至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列：(i)圖22B(SEQ ID NO：145)中所示之HLA-A*0101(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(ii)圖22C(SEQ ID NO：146)中所示之HLA-A*0201(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(iii)圖22D(SEQ ID NO：147)中所示之HLA-A*0202(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(iv)圖22E(SEQ ID NO：148)中所示之HLA-A*1101(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(v)圖22F(SEQ ID NO：149)中所示之HLA-A*2301(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(vi)圖22G(SEQ ID NO：150)中所示之HLA-A*2402(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(vii)圖22H(SEQ ID NO：151)中所示之HLA-A*2407(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(viii)圖22I(SEQ ID NO：152)中所示之HLA-A*3303(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(ix)圖22J(SEQ ID NO：153)中所示之HLA-A*3401(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
HLA-B
在一些情況下，本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含i)KRAS肽，當該肽與TMP之MHC多肽複合時由TCR結合，ii)包含非天然存在之Cys殘基之β2M多肽，iii)在KRAS肽與β2M多肽之間的肽連接子，及iv)I類HLA-B MHC重鏈多肽，其包含與圖22K(SEQ ID NO：154)中所示之以下胺基酸序列具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：139)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1至10之整數，例如，1、2或3。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。舉例而言，β2M多肽可包含與圖21CC(SEQ ID NO：155)之胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸12為Cys。TMP之至少一個免疫調節多肽可為野生型或變異體免疫調節多肽，例如，選自由細胞激素(例如IL-2)、4-1BBL、CD80、CD86及其組合組成之群。在一些情況下，至少一個免疫調節多肽為親和力降低變異體，諸如IL-2變異體，如本文別處所述。在一些情況下，TMP包含Ig Fc多肽，例如，實質上不誘導細胞溶解之變異體人類IgG1 Fc多肽。
在一些情況下，本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP包含I類HLA-B重鏈多肽。在一些情況下，存在於本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)中之HLA-B重鏈多肽包含與圖8A中所描繪之HLA-B*0702、HLA-B*0801、HLA-B*1502、HLA-B*3802、HLA-B*4001、HLA-B*4601或HLA-B*5301胺基酸序列具有至少95%、至少98%或至少99%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中HLA-B重鏈多肽包含Y84C及A236C取代。
HLA-B *0702(Y84C；A236C)
在一些情況下，存在於本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)中之HLA-B重鏈多肽包含與以下序列中之一者具有至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列：(i)圖22L(SEQ ID NO：156)中所示之HLA-B*0702(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(ii)圖22M(SEQ ID NO：157)中所示之HLA-B*0801(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(iii)圖22N(SEQ ID NO：158)中所示之HLA-B*1502(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(iv)圖22O(SEQ ID NO：159)中所示之HLA-B*3802(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(v)圖22P(SEQ ID NO：160)中所示之HLA-B*4001(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(vi)圖22Q(SEQ ID NO：161)中所示之HLA-B*4601(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(vii)圖22R(SEQ ID NO：162)中所示之HLA-B*5301(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
HLA-C
在一些情況下，本發明之多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含i)KRAS肽，當該肽與TMP之MHC多肽複合時由TCR結合，ii)包含非天然存在之Cys殘基之β2M多肽，iii)在KRAS肽與β2M多肽之間的肽連接子，及iv)I類HLA-C MHC重鏈，其包含與圖22S(SEQ ID NO：163)中所示之胺基酸序列具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且 胺基酸236為Cys；及c)至少一個免疫調節多肽，其中第一多肽及/或第二多肽包含至少一個免疫調節多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(SEQ ID NO：139)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1至10之整數，例如，1、2或3。在一些情況下，β2M多肽包含R12C取代。舉例而言，β2M多肽可包含與圖21CC(SEQ ID NO：164)中所示之以下胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中胺基酸12為Cys。至少一個免疫調節多肽可為野生型或變異體多肽免疫調節多肽，例如，選自由細胞激素(例如IL-2)、4-1BBL多肽、CD80多肽、CD86多肽或其組合組成之群。在一些情況下，至少一個免疫調節多肽為親和力降低變異體，例如IL-2之親和力降低變異體，如本文別處所述。在一些情況下，TMP包含Ig Fc多肽，例如，實質上不誘導細胞溶解之變異體人類IgG1 Fc多肽。
在一些情況下，本發明之多個二硫鍵連接之TMP(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含I類HLA-C重鏈多肽。在一些情況下，存在於本發明之多個二硫鍵連接之TMP中之HLA-C重鏈多肽(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含與圖9A中所描繪之HLA-C*0102、HLA-C*0303、HLA-C*0304、HLA-C*0401、HLA-C*0602、HLA-C*0701、HLA-C*0702、HLA-C*0801或HLA-C*1502胺基酸序列具有至少95%、至少98%或至少99%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中HLA-C重鏈多肽包含Y84C及A236C取代。
在一些情況下，存在於本發明之多個二硫鍵連接之TMP中之HLA-C重鏈多肽(例如，雙二硫鍵連接之TMP)包含與以下序列中之一者具有至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列：(i)圖22T(SEQ ID NO：165)中所示之HLA-C*01：02(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys； (ii)圖22U(SEQ ID NO：166)中所示之HLA-C*03：03(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(iii)圖22V(SEQ ID NO：167)中所示之HLA-C*03：04(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(iv)圖22W(SEQ ID NO：168)中所示之HLA-C*04：01(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(v)圖22X(SEQ ID NO：169)中所示之HLA-C*06：02(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(vi)圖22Y(SEQ ID NO：170)中所示之HLA-C*07：01(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(vii)圖22Z(SEQ ID NO：171)中所示之HLA-C*07：02(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；(viii)圖22AA(SEQ ID NO：172)中所示之HLA-C*08：01(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys；及(ix)圖22BB(SEQ ID NO：173)中所示之HLA-C*15：02(Y84C；A236C)胺基酸序列，其中胺基酸84為Cys且胺基酸236為Cys。
抗原呈現、二硫鍵連接之TMP(亦即，無MOD之TMP)
本發明提供一種包含異二聚體或單鏈多肽(或兩個此種多肽之同二聚體)之抗原呈現多肽(antigen-presenting polypeptide，APP)，其中該APP包含：i)KRAS肽，當該肽與TMP之MHC多肽複合時由TCR結合，ii)β2M多肽，視情況包含非天然存在之Cys殘基，iii)在KRAS肽與β2M多肽之間的肽連接子，其中該連接子視情況包含Cys殘基，及iv)I類HLA-C MHC重鏈，其包含與圖21A-21AA、21DD-21FF、21HH-21JJ或22A-22BB中所示之胺基酸序列中之任一者具有至少60%、至少70%、至少80%、至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺 基酸序列一致性之胺基酸序列。異二聚或單鏈APP可具有與上述單個或多個二硫鍵連接之異二聚或單鏈TMP中之任一者相同之構型且可依相同方式經單個或多個二硫鍵連接；唯一差異在於，與上文所論述之TMP不同，APP不含MOD。如上文所論述，此處提及之二硫鍵連接不欲指代APP之Ig Fc多肽，例如實質上不誘導細胞溶解之Ig Fc多肽，諸如圖3G之人類IgG1 Fc多肽之間的二硫鍵。
異二聚APP之實例包括：a)包含以下之APP：i)圖19O中所描繪之「4027」多肽；及ii)圖14Q中所描繪之「4030」多肽；b)包含以下之APP：i)圖19O中所描繪之「4027」多肽；及ii)圖14K中所描繪之「4029」多肽。單鏈APP之實例包括稱作「4238」(圖19G)、「4241」(圖19H)及「4334」(圖19I)之多肽。
本發明之APP可用於診斷應用及治療應用。如下文所論述，當用於診斷應用時，APP亦可包含可偵測標記，使得藉由偵測可偵測標記來偵測APP與靶T細胞之結合。
因此，本發明提供一種偵測抗原特異性T細胞之方法。該方法包括使T細胞與本發明之APP接觸；及偵測APP與T細胞之結合。本發明提供一種偵測抗原特異性T細胞之方法，該方法包括使T細胞與本發明之APP接觸，其中APP與T細胞之結合指示該T細胞對存在於APP中之抗原決定基具有特異性。
在一些情況下，APP包含可偵測標記。適合之可偵測標記包括但不限於放射性同位素、螢光多肽或產生螢光產物之酶及產生有色產物之酶。在APP包含可偵測標記之情況下，藉由偵測可偵測標記來偵測APP與T細胞之結合。
在一些情況下，本發明之APP包含適用於活體內成像之可偵測標記，例如，適用於正電子發射斷層攝影術(positron emission tomography，PET)、單光子發射斷層攝影(single photon emission computed tomography，SPECT)、近紅外(near infrared，NIR)光學成像、x射線成像、電腦輔助斷層攝影(computer-assisted tomography，CAT)或磁共振造影(magnetic resonance imaging，MRI)，或其他活 體內成像方法。用於活體內成像之適合標記之實例包括釓螯合物(例如，與DTPA(二伸乙基三胺五乙酸)、DTPA-雙甲醯胺(BMA)、DOTA(十二烷四乙酸)或HP-DO3A(1,4,7-參(羧甲基)-10-(2'-羥丙基)-1,4,7,10-四氮雜環十二烷)之釓螯合物)、鐵螯合物、鎂螯合物、錳螯合物、銅螯合物、鉻螯合物、基於碘之物質及放射性核種。適合之放射性核種包括但不限於123 I、125 I、130 I、131 I、133 I、135 I、47 Sc、72 As、72 Se、90 Y、88 Y、97 Ru、100 Pd、101 mRh、119 Sb、128 Ba、197 Hg、211 At、212 Bi、212 Pb、109 Pd、111 In、67 Ga、68 Ga、64 Cu、67 Cu、75 Br、77 Br、99 mTc、14 C、13 N、15 O、32 P、33 P及18 F。在一些情況下，可偵測標記為正電子發射同位素，諸如11 C、13 N、15 O、18 F、64 Cu、68 Ga、78 Br、82 Rb、86 Y、90 Y、22 Na、26 Al、40 K、83 Sr、89 Zr或124 I。在一些情況下，可偵測標記為64 Cu。參見例如Woodham,Andrew等人，In vivo detection of antigen-specific CD8 +T cells by immuno-positron emission tomography,Nature Methods Articles(2020) https：//doi.org/10.1038/s41592-020-0934-5。
適合之螢光蛋白包括但不限於綠色螢光蛋白(green fluorescent protein，GFP)或其變異體、GFP之藍色螢光變異體(blue fluorescent variant of GFP，BFP)、GFP之青色螢光變異體(cyan fluorescent variant of GFP，CFP)、GFP之黃色螢光變異體(yellow fluorescent variant of GFP，YFP)、增強型GFP(enhanced GFP，EGFP)、增強型CFP(enhanced CFP，ECFP)、增強型YFP(enhanced YFP，EYFP)、GFPS65T、Emerald、Topaz(TYFP)、Venus、Citrine、mCitrine、GFPuv、去穩定化EGFP(destabilised EGFP，dEGFP)、去穩定化ECFP(destabilized ECFP，dECFP)、去穩定化EYFP(destabilized EYFP，dEYFP)、mCFPm、Cerulean、T-Sapphire、CyPet、YPet、mKO、HcRed、t-HcRed、DsRed、DsRed2、DsRed單體、J-Red、dimer2、t-dimer2(12)、mRFP1、pocilloporin、Renilla GFP、Monster GFP、paGFP、Kaede蛋白及點燃蛋白、藻膽蛋白及藻膽蛋白接合物，包括B-藻紅蛋白、R-藻紅蛋白及別藻藍蛋白。螢光蛋白之其他實例包括mHoneydew、mBanana、mOrange、dTomato、 tdTomato、mTangerine、mStrawberry、mCherry、mGrape1、mRaspberry、mGrape2、mPlum(Shaner等人(2005)Nat.Methods 2：905-909)，及類似物。舉例而言，如Matz等人(1999)Nature Biotechnol. 17：969-973中所述，來自珊瑚蟲物種之多種螢光及有色蛋白中之任一者適合使用。
適合之酶包括但不限於辣根過氧化酶(horse radish peroxidase，HRP)、鹼性磷酸酶(alkaline phosphatase，ALP)、β-半乳糖苷酶(beta-galactosidase，GAL)、葡萄糖-6-磷酸去氫酶、β-N-乙醯胺基葡糖苷酶、β-葡萄醣醛酸苷酶、轉化酶、黃嘌呤氧化酶、螢火蟲螢光素酶、葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GO)及類似物。
在一些情況下，使用對APP具有特異性之經可偵測標記之抗體來偵測APP與T細胞之結合。對APP具有特異性之抗體可包含可偵測標記，例如放射性同位素、螢光多肽或產生螢光產物之酶或產生有色產物之酶。
在一些情況下，所偵測之T細胞存在於包含多個T細胞之樣品中。舉例而言，所偵測之T細胞可存在於包含10至109 個T細胞，例如10至102 、102 至104 、104 至106 、106 至107 、107 至108 或108 至109 個或多於109 個T細胞之樣品中。
HLA/肽結合檢定
給定之肽(例如，包含KRAS抗原決定基之KRAS肽)是否結合I類HLA(包含HLA重鏈及β2M多肽)且當結合至HLA複合物時是否可有效地向TCR呈現抗原決定基可使用許多熟知方法中之任一者來確定。檢定包括結合檢定及T細胞活化檢定，包括基於細胞之結合檢定、生物化學結合檢定、T細胞活化檢定、ELISPOT檢定、細胞毒性檢定及用肽-HLA四聚體偵測抗原特異性T細胞。此類檢定在公開之科學文獻中以及公開之PCT申請案WO2020132138A1中描述，其關於特異性結合檢定之揭示內容以引用之方式明確併入本文中，具體而言包括段落[00217]-[00225]。
作為另一個實例，產生具有螢光或重金屬標籤之肽-HLA複合物之多 聚體(例如，四聚體)。多聚體接著可用於經由流式細胞術(flow cytometry，FACS)或大規模細胞術(mass cytometry，CyTOF)鑑定及定量特異性T細胞。對抗原決定基特異性T細胞之偵測提供結合肽之HLA分子能夠結合至抗原特異性T細胞子組上之特異性TCR的直接證據。參見例如Klenerman等人(2002)Nature Reviews Immunol. 2：263。
免疫調節多肽
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之免疫調節多肽或「MOD」為野生型免疫調節多肽。在其他情況下，存在於本發明之TMP中之免疫調節多肽為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對共刺激多肽之親和力相比，該變異體免疫調節多肽對共刺激多肽具有降低之親和力。對共刺激結構域展現降低之親和力的適合免疫調節結構域與野生型免疫調節結構域可具有1個胺基酸(aa)至20 aa之差異。舉例而言，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽與相應野生型免疫調節多肽就胺基酸序列而言相差1 aa、2 aa、3 aa、4 aa、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa或10 aa。作為另一個實例，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽與相應野生型免疫調節多肽就胺基酸序列而言相差11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa或20 aa。
免疫調節多肽及其同源共刺激多肽之示例對包括但不限於下表1中所列之彼等：
Figure 109132369-A0304-12-0070-5
Figure 109132369-A0304-12-0071-6
在一些情況下，存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽具有100nM至100μM之結合親和力。舉例而言，在一些情況下，存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽之結合親和力為約100nM至150nM、約150nM至約200nM、約200nM至約250nM、約250nM至約300nM、約300nM至約350nM、約350nM至約400nM、約400nM至約500nM、約500nM至約600nM、約600nM至約700nM、約700nM至約800nM、約800nM至約900nM、約900nM至約1μM、約1μM至約5μM、約5μM至約10μM、約10μM至約15μM、約15μM至約20μM、約20μM至約25μM、約25μM至約50μM、約50μM至約75μM或約75μM至約100μM。
存在於本發明之TMP中之變異體免疫調節多肽對同源共刺激多肽展現降低之親和力。類似地，包含變異體免疫調節多肽之本發明之TMP對同源共刺激多肽展現降低之親和力。因此，舉例而言，包含變異體免疫調節多肽之本發明之TMP對同源共刺激多肽具有100nM至100μM之結合親和力。舉例而言，在一些情況下，包含變異體免疫調節多肽之本發明之TMP對同源共刺激多肽之結合親和力為約100nM至150nM、約150nM至約200nM、約200nM至約25OnM、約250nM至約300nM、約300nM至約350nM、約350nM至約400nM、約400nM至 約500nM、約500nM至約600nM、約600nM至約700nM、約700nM至約800nM、約800nM至約900nM、約900nM至約1μM、至約1μM至約5μM、約5μM至約10μM、約10μM至約15μM、約15μM至約20μM、約20μM至約25μM、約25μM至約50μM、約50μM至約75μM或約75μM至約100μM。
如圖17中示意性地描繪，免疫調節多肽(亦即，一或多個免疫調節多肽)可存在於本發明之異二聚TMP中之多個位置中之任一者處。圖17描繪變異體IL-2多肽之兩個複本之位置；然而，如本文所述，免疫調節多肽可為任何數目之免疫調節多肽及多種免疫調節多肽中之任一者。如圖17中所描繪，免疫調節多肽可：1)在I類MHC重鏈之N端；2)在I類MHC重鏈之C端及Ig Fc多肽之N端；換言之，在I類MHC重鏈與Ig Fc多肽之間；3)在Ig Fc多肽之C端；4)在肽抗原決定基之N端；或5)在β2M多肽之C端。
如圖18中示意性地描繪，免疫調節多肽(亦即，一或多個免疫調節多肽)可存在於本發明之單鏈TMP中之多個位置中之任一者處。圖18描繪變異體IL-2多肽之兩個複本之位置；然而，如本文所述，免疫調節多肽可為任何數目之免疫調節多肽及多種免疫調節多肽中之任一者。如圖18中所描繪，免疫調節多肽可：1)在I類MHC重鏈之C端及Ig Fc多肽之N端；2)在Ig Fc多肽之C端；或3)在肽抗原決定基之N端。
免疫調節多肽及變異體，包括親和力降低變異體，諸如PD-L1、CD80、CD86、4-1BBL及IL-2，在公開之文獻，例如公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091中描述，其關於PD-L1、CD80、CD86、4-1BBL、IL-2之免疫調節多肽及特異性變異體免疫調節多肽之揭示內容以引用之方式明確併人本文中，具體而言包括WO2020132138A1之段落[00260]-[00455]及WO2019/051091之段落[00157]-[00352]。
特別關注作為細胞激素IL-2變異體之MOD。野生型IL-2結合至T細胞 表面上之IL-2受體(IL-2R)。野生型IL-2對IL-2R具有強親和力且將結合以活化大多數或實質上所有CD8+ T細胞。出於此原因，已知野生型Il-2之合成形式，諸如藥物阿地介白素(Aldesleukin)(商標名Proleukin®)當向人類投與以治療癌症時，由於IL-2不加區別地活化靶T細胞及非靶T細胞而具有嚴重副作用
在一些情況下，IL-2受體為包含α鏈(IL-2Rα；亦稱作CD25)，β鏈(IL-2Rβ；亦稱作CD122)及γ鏈(IL-2Rγ；亦稱作CD132)之異三聚多肽。已知人類IL-2(SEQ ID NO：15)、人類IL-2Rα(SEQ ID NO：16)、IL2Rβ(SEQ ID NO：17)及IL-2Rγ(SEQ ID NO：18)之胺基酸序列。參見例如公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091，如上文所論述。
在一些情況下，本發明之IL-2變異體MOD對IL-2Rα展現實質上降低之結合或無結合，從而最小化或實質上減少IL-2變異體對Tregs之活化。在一些情況下，本發明之IL-2變異體MOD對IL-2Rβ及/或IL-2Rγ具有降低之親和力，使得IL-2變異體MOD對II-2R展現總體降低之親和力。在一些情況下，本發明之IL-2變異體MOD展現兩種特性，亦即，其對IL-2Rα展現實質上降低之結合或無結合，而且對IL-2Rβ及/或IL-2Rγ具有降低之親和力，使得IL-2變異體多肽對IL-2R展現總體降低之親和力。包含此類變異體(包括實質上不結合IL-2Rα且對IL-2Rβ具有降低之親和力的變異體)之TMP已顯示出優先結合並活化含有對TMP上之肽抗原決定基具有特異性之靶TCR之T細胞上之IL-2受體的能力，且因此不太可能將IL-2遞送至非靶T細胞，亦即，不含特異性地結合TMP上之肽抗原決定基之TCR的T細胞。亦即，IL-2變異體MOD與其在T細胞上之共刺激多肽之結合實質上由MHC-抗原決定基部分之結合而非Il-2之結合來驅動。
因此，適合之IL-2變異體MOD包括針對IL-2R之包含對SEQ ID NO：15中列出之胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%胺基酸序列一致性之胺基酸序列的多肽。在一些情況下，與包含SEQ ID NO：15中列出之胺 基酸序列之IL-2多肽之結合親和力相比，本發明之此種變異體IL-2多肽對IL-2R展現降低之結合親和力。舉例而言，在一些情況下，當在相同條件下檢定時，變異體IL-2多肽結合IL-2R之結合親和力比包含SEQ ID NO：15中列出之胺基酸序列之IL-2多肽對IL-2R(例如，包含有包含SEQ ID NO：16-18中列出之胺基酸序列之多肽的IL-2R)之結合親和力至少低10%、至少低15%、至少低20%、至少低25%、至少低30%、至少低35%、至少低40%、至少低45%、至少低50%、至少低55%、至少低60%、至少低65%、至少低70%、至少低75%、至少低80%、至少低85%、至少低90%、至少低95%或低95%以上。在一些情況下，此種變異體IL-2多肽對IL-2R具有100nM至100μM之結合親和力。作為另一個實例，在一些情況下，變異體IL-2多肽對IL-2R(例如，包含有包含SEQ ID NO：16-18中列出之胺基酸序列之多肽的IL-2R)之結合親和力為約100nM至150nM、約150nM至約200nM、約200nM至約250nM、約250nM至約300nM、約300nM至約350nM、約350nM至約400nM、約400nM至約500nM、約500nM至約600nM、約600nM至約700nM、約700nM至約800nM、約800nM至約900nM、約900nM至約1μM、至約1μM至約5μM、約5μM至約10μM、約10μM至約15μM、約15μM至約20μM、約20μM至約25μM、約25μM至約50μM、約50μM至約75μM或約75μM至約100μM。
在一些情況下，適合之變異體IL-2多肽包含與以下胺基酸序列具有至少90%、至少95%、至少98%、至少99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列：
Figure 109132369-A0304-12-0074-58
Figure 109132369-A0304-12-0074-59
(SEQ ID NO：241)，亦即，變異 體IL-2多肽具有野生型IL-2之胺基酸序列，但具有H16A及F42A取代(以粗體示出)。或者，可採用前述序列，但在H16及/或F42處具有除Ala以外之取代，例如，可採用H16T替代H16A。
支架多肽
本發明之TMP可包含Fc多肽或可包含另一種適合之支架多肽。
適合之支架多肽包括基於抗體之支架多肽及非基於抗體之支架。非基於抗體之支架包括例如白蛋白、XTEN(延伸重組)多肽、轉鐵蛋白、Fc受體多肽、彈性蛋白樣多肽(參見例如Hassouneh等人(2012)Methods Enzymol. 502：215；例如，包含(Val-Pro-Gly-X-Gly；SEQ ID NO：561)之五肽重複單元之多肽，其中X為除脯胺酸以外之任何胺基酸)、白蛋白結合多肽、絲樣多肽(參見例如Valluzzi等人(2002)Philos Trans R Soc Lond B Biol Sci. 357：165)、絲彈性蛋白樣多肽(SELP；參見例如Megeed等人(2002)Adv Drug Deliv Rev. 54：1075)，及類似物。適合之XTEN多肽包括例如WO 2009/023270、WO 2010/091122、WO 2007/103515、US 2010/0189682及US 2009/0092582中所揭示之彼等多肽；亦參見Schellenberger等人(2009)Nat Biotechnol. 27：1186)。適合之白蛋白多肽包括例如人血清白蛋白。
在一些情況下，適合之支架多肽將為延長半衰期之多肽。因此，在一些情況下，與缺乏支架多肽之對照TMP相比，適合之支架多肽增加TMP之活體內半衰期(例如，血清半衰期)。舉例而言，在一些情況下，與缺乏支架多肽之對照TMP相比，支架多肽使TMP之活體內半衰期(例如，血清半衰期)增加至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約2倍、至少約2.5倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約25倍、至少約50倍、至少約100倍或100倍以上。作為一個實例，在一些情況下，與缺乏Fc多肽之對照TMP相比，Fc多肽使TMP之活體內半衰期(例如，血清半衰期)增加至少約10%、至少約15%、至少約20%、至少約25%、至少約50%、至少約2倍、至少約2.5倍、至少約5倍、至少約10倍、至少約25倍、至少約50倍、至少約100倍或100倍以上。
Fc多肽
在一些情況下，本發明之TMP之第一多肽鏈及/或第二多肽鏈包含Fc 多肽。本發明之TMP之Fc多肽可為人類IgG1 Fc、人類IgG2 Fc、人類IgG3 Fc、人類IgG4 Fc等。在一些情況下，Fc多肽包含與圖3A-3G中所描繪之Fc區之胺基酸序列具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc區包含與圖3A中所描繪之人類IgG1 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，該人類IgG1 Fc多肽視情況包含N77之取代；例如，Fc多肽包含N77A取代。在一些情況下，Fc多肽包含與圖3A中所描繪之人類IgG2 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；例如，Fc多肽包含與圖3A中所描繪之人類IgG2 Fc多肽之胺基酸99-325具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖3A中所描繪之人類IgG3 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；例如，Fc多肽包含與圖3A中所描繪之人類IgG3 Fc多肽之胺基酸19-246具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖3B中所描繪之人類IgM Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；例如，Fc多肽包含與圖3B中所描繪之人類IgM Fc多肽之胺基酸1-276具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些 情況下，Fc多肽包含與圖3C中所描繪之人類IgA Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；例如，Fc多肽包含與圖3C中所描繪之人類IgA Fc多肽之胺基酸1-234具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
在一些情況下，Fc多肽包含與圖3C中所描繪之人類IgG4 Fc多肽具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些情況下，Fc多肽包含與圖3C中所描繪之人類IgG4 Fc多肽之胺基酸100至327具有至少約70%、至少約75%、至少約80%、至少約85%、至少約90%、至少約95%、至少約98%、至少約99%或100%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
在一些情況下，IgG4 Fc多肽包含以下胺基酸序列：
Figure 109132369-A0304-12-0077-56
Figure 109132369-A0304-12-0077-57
(SEQ ID NO：175)。
典型地，TMP中所採用之Ig Fc將包含野生型序列中之胺基酸之一或多個取代，使得Ig Fc「實質上不誘導細胞溶解」。舉例而言，在一些情況下，存在於TMP中之Fc多肽包含圖3A中所描繪之胺基酸序列(人類IgG1 Fc)，不同之處為L234(圖3A中所描繪之胺基酸序列之L14)經除白胺酸以外之胺基酸取代，或L235(圖3A中所描繪之胺基酸序列之L15)經除白胺酸以外之胺基酸取代。
在一些情況下，存在於TMP中之Fc多肽包含圖3G中所描繪之胺基酸 序列(對應於圖3G中所描繪之胺基酸序列之位置14及15，包含L234A取代及L235A取代之人類IgG1 Fc)。在一些情況下，存在於TMP中之Fc多肽包含圖3A中所描繪之胺基酸序列(人類IgG1 Fc)，不同之處為在L234及L235(圖3A中所描繪之胺基酸序列之L14及L15)處經除白胺酸以外之胺基酸取代。在一些情況下，存在於TMP中之Fc多肽包含圖3A中所描繪之胺基酸序列(人類IgG1 Fc)，不同之處為在L234及L235(圖3A中所描繪之胺基酸序列之L14及L15)處經除白胺酸以外之胺基酸取代，及P331(圖3A中所描繪之胺基酸序列之P111)經除脯胺酸以外之胺基酸取代。在一些情況下，存在於TMP中之Fc多肽包含圖3E中所描繪之胺基酸序列(對應於圖3E中所描繪之胺基酸序列之胺基酸位置14、15及111，包含L234F、L235E及P331S取代之人類IgG1 Fc)。在一些情況下，如圖3G中所描繪，存在於TMP中之Fc多肽為包含L234A及L235A取代(圖3A中所描繪之胺基酸序列之L14及L15經Ala取代)之IgG1 Fc多肽。
連接子
本發明之TMP可包括一或多個連接子，其中該一或多個連接子介於以下一或多者之間：i)I類MHC多肽與Ig Fc多肽，其中此種連接子在本文中稱作「L1」；ii)免疫調節多肽與I類MHC多肽，其中此種連接子在本文中稱作「L2」；iii)第一免疫調節多肽與第二免疫調節多肽，其中此種連接子在本文中稱作「L3」；iv)肽抗原(「抗原決定基」)與I類MHC多肽；v)I類MHC多肽與二聚多肽(例如，二聚對之第一成員或第二成員)；vi)二聚多肽(例如，二聚對之第一成員或第二成員)與Ig Fc多肽。
適合之連接子(亦稱作「間隔子」)可容易地選擇，且可具有許多適合長度中之任一者，諸如1個胺基酸至25個胺基酸、3個胺基酸至20個胺基酸、2個胺基酸至15個胺基酸、3個胺基酸至12個胺基酸，包括4個胺基酸至10個胺基酸、5個胺基酸至9個胺基酸、6個胺基酸至8個胺基酸或7個胺基酸至8個胺基酸。適合 連接子之長度可為1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24或25個胺基酸。在一些情況下，連接子之長度為25個胺基酸至50個胺基酸，例如，長度為25至30個、30至35個、35至40個、40至45個或45至50個胺基酸。
示例性連接子包括甘胺酸聚合物(G)n 、甘胺酸-絲胺酸聚合物(包括例如(GS)n 、(GSGGS)n (SEQ ID NO：366)及(GGGS)n (SEQ ID NO：367)，其中n為至少1之整數)、甘胺酸-丙胺酸聚合物、丙胺酸-絲胺酸聚合物及此項技術中已知之其他可撓性連接子。可使用甘胺酸及甘胺酸-絲胺酸聚合物；Gly及Ser兩者均相對非結構化，且因此可充當組分之間的中性紐帶。可使用甘胺酸聚合物；甘胺酸甚至比丙胺酸顯著更接近phi-psi空間，且比具有更長側鏈之殘基所受限制小得多(參見Scheraga,Rev.Computational Chem. 11173-142(1992))。示例性連接子可包含胺基酸序列，包括但不限於GGSG(SEQ ID NO：368)、GGSGG(SEQ ID NO：369)、GSGSG(SEQ ID NO：370)、GSGGG(SEQ ID NO：371)、GGGSG(SEQ ID NO：372)、GSSSG(SEQ ID NO：373)，及類似序列。示例性連接子可包括例如Gly(Ser4 )n(SEQ ID NO：374)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GSSSS)n(SEQ ID NO：375)，其中n為4。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GSSSS)n(SEQ ID NO：376)，其中n為5。
示例性連接子可包括例如(GGGGS)n(SEQ ID NO：377)；亦稱作「G4S」連接子)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：377)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10。在一些情況下，連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：387)。具有胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：387)之連接子亦為適合的。在本發明之單鏈TMP中，β2M多肽可由(GGGGS)n(SEQ ID NO：377)連接子連接至MHC重鏈多肽，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，例如，其中n=3或7。
在一些情況下，存在於本發明之TMP之第一多肽中之連接子多肽包括可與存在於本發明之TMP之第二多肽中之半胱胺酸殘基形成二硫鍵之半胱胺酸殘基。在一些情況下，舉例而言，適合之連接子包含胺基酸序列G C GGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：388)。作為另一個實例，適合之連接子可包含胺基酸序列GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：389)，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8或9。舉例而言，在一些情況下，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：390)。作為另一個實例，連接子包含胺基酸序列GCGGSGGGGSGGGGS(SEQ ID NO：391)。
二聚TMP
在一些情況下，本發明之單鏈及異二聚TMP可形成二聚體；亦即，本發明提供包含本發明之TMP之二聚體的多肽。本發明提供例如包含以下之蛋白質(本發明之二聚TMP)：A)第一異二聚體，其包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；及b)包含以下之第二多肽：i)第二MHC多肽，其中第一異二聚體包含一或多個免疫調節多肽；及B)第二異二聚體，其包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；及b)包含以下之第二多肽：i)第二MHC多肽，其中第二異二聚體包含一或多個免疫調節多肽，且其中第一異二聚體及第二異二聚體彼此共價連接。或者，二聚TMP可包含彼此共價連接之兩個單鏈TMP。二聚體之共價鍵可為第一單鏈或異二聚TMP中之Ig Fc多肽與第二單鏈或異二聚TMP中之Ig Fc多肽之間的二硫鍵。當TMP包含實質上不誘導細胞溶解之Ig Fc多肽，例如人類IgG1 Fc多肽(例如，圖3G之多肽)時，TMP典型地將藉由與另一TMP之IgG1 Fc多肽自發形成二硫鍵而自組裝成二聚體。因此，舉例而言，第一單鏈或異二聚TMP及第二單鏈或異二聚體中之Ig Fc多肽可由一或多個二硫鍵彼此連接。在一些情況下，兩個TMP就胺基酸序列而言彼此一致。在一些情況下，第一異二聚體及第二異二聚體係經由第一異二聚體之第二多肽之C端 區域及第二異二聚體之第二多肽之C端區域彼此共價連接。在一些情況下，第一異二聚體及第二異二聚體係經由第一異二聚體之第二多肽之C端胺基酸及第二異二聚體之第二多肽之C端區域彼此共價連接；舉例而言，在一些情況下，第一異二聚體之第二多肽之C端胺基酸及第二異二聚體之第二多肽之C端區域直接或經由連接子彼此連接。連接子可為肽連接子。肽連接子之長度可為1個胺基酸至200個胺基酸(例如，1個胺基酸(aa)至5 aa、5 aa至10 aa、10 aa至25 aa、25 aa至50 aa、50 aa至100 aa、100 aa至150 aa或150 aa至200 aa)。在一些情況下，第一異二聚體之肽抗原決定基及第二異二聚體之肽抗原決定基包含相同胺基酸序列。在一些情況下，第一異二聚體及第二異二聚體之第一MHC多肽為I類MHC β2-微球蛋白，且其中第一異二聚體及第二異二聚體之第二MHC多肽為I類MHC重鏈。在一些情況下，第一異二聚體之免疫調節多肽及第二異二聚體之免疫調節多肽包含相同胺基酸序列。在一些情況下，第一異二聚體之免疫調節多肽及第二異二聚體之免疫調節多肽為與相應親本野生型免疫調節多肽相比包含1至10個胺基酸取代之變異體免疫調節多肽，且其中1至10個胺基酸取代使得變異體免疫調節多肽與同源共刺激多肽之親和力結合降低。在一些情況下，第一異二聚體之免疫調節多肽及第二異二聚體之免疫調節多肽係各自獨立地選自由IL-2、4-1BBL、PD-L1、CD80、CD86、ICOS-L、OX-40L、FasL、JAG1(CD339)、TGFβ、CD70及ICAM之野生型及變異體多肽組成之群。本文描述適合之MHC多肽、免疫調節多肽及肽抗原決定基之實例。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP經二聚。因此，本發明提供包含以下之蛋白質：a)本發明之第一單鏈TMP；b)本發明之第二單鏈TMP，其中第一單鏈TMP及第二單鏈TMP彼此共價連接。共價鍵可為第一單鏈TMP中之Ig Fc多肽與第二單鏈TMP中之Ig Fc多肽之間的二硫鍵。
額外多肽
除上文所述之彼等以外，本發明之TMP之多肽鏈可包括一或多個多肽及接合物藥物。如上文所論述，適合之額外多肽(包括抗原決定基標籤及親和結構域)及藥物接合物在公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091中描述，其關於抗原決定基標籤、親和結構域及藥物接合物之揭示內容以引用之方式明確併入本文中，具體而言包括WO2020132138A1之段落[00498]-[00508]及WO2019/051091之段落[00353]-[00363]。一或多個額外多肽可包括於TMP之多肽鏈之N端、TMP之多肽鏈之C端或TMP之多肽鏈內部。
示例性TMP
在一些情況下，本發明之TMP包含至少一個異二聚體，該至少一個異二聚體包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；b)包含第二MHC多肽之第二多肽；及c)至少一個免疫調節多肽，其中第一多肽及/或第二多肽包含免疫調節多肽，且視情況包含Ig Fc。因此，在一些情況下，本發明之TMP包含至少一個異二聚體，該至少一個異二聚體包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；及b)包含第二MHC多肽且視情況包含Ig Fc之第二多肽。在其他情況下，本發明之TMP包含至少一個異二聚體，該至少一個異二聚體包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；及b)包含以下之第二多肽：i)第二MHC多肽；及ii)至少一個免疫調節多肽，且視情況包含Ig Fc。在一些情況下，本發明之TMP包含至少一個異二聚體，該至少一個異二聚體包含：a)包含以下之第一多肽：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；及b)包含以下之第二多肽：i)第二MHC多肽；及ii)至少一個免疫調節多肽，且視情況包含Ig Fc。在一些情況下，至少一個免疫調節多肽為野生型免疫調節多肽。在其他情況下，至少一個免疫調節多肽為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對共刺激多肽之親和力相比，該變異體免疫調節多肽對共刺激多肽展現降低之親和力。
如上文所提及且如圖17中示意性地描繪，免疫調節多肽(亦即，一或多個免疫調節多肽)可存在於本發明之TMP中之多個位置中之任一者處。圖17描繪變異體IL-2多肽之兩個複本之位置；然而，如本文所述，免疫調節多肽可為任何數目之免疫調節多肽及多種免疫調節多肽中之任一者。如圖17中所描繪，免疫調節多肽可：1)在I類MHC重鏈之N端(位置1)；2)在I類MHC重鏈之C端及Ig Fc多肽之N端；換言之，在I類MHC重鏈與Ig Fc多肽之間(位置2)；3)在Ig Fc多肽之C端(位置3)；4)在肽抗原決定基之N端(位置4)；或5)在β2M多肽之C端(位置5)。因此，在一些情況下，本發明之TMP包含具有所定義之組分排列之以下支架中之一者，其中第一MHC多肽為β2M多肽；且第二MHC多肽為HLA重鏈多肽：a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)第二MHC多肽；及iii)Ig Fc多肽(此排列稱作MOD位置1)；a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)第二MHC多肽；ii)至少一個免疫調節多肽；及iii)Ig Fc多肽(此排列稱作MOD位置2)；TMP a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；及ii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)第二MHC多肽；ii)Ig Fc多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽(此排列稱作MOD位置3)。
a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)KRAS肽；及iii)第一MHC多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)第二MHC多肽；及ii)Ig Fc多肽(此排列稱作MOD位置4)；a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)第一MHC多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；及b)第二多肽，其自N端至C端依次包含：i)第二MHC多肽；及ii)Ig Fc多肽(此排列稱作MOD位置5)； 在上述支架中，第一多肽及第二多肽之組分中之任一者可視情況由連接子連接至多肽中之下一個組分。在一些情況下，肽連接子介於以下一或多者之間：i)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；ii)抗原決定基與第一MHC多肽；iii)第一MHC多肽與免疫調節多肽；及(在TMP包含第一多肽鏈上之兩個免疫調節多肽之情況下)iv)介於兩個免疫調節多肽之間；v)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；vi)第一MHC多肽與免疫調節多肽。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：387)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n，其中n為1至10之整數(例如，其中n為2、3或4)。
在上述支架中之任一者中，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
在上述支架中，在一些情況下，第二MHC多肽為HLA重鏈，該HLA重鏈包含與HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽或HLA-A24多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。在一些情況下，HLA重鏈多肽為HLA-A*0201 多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽為包含A236C取代之HLA-A*0201多肽。在一些情況下，HLA重鏈多肽為包含A236C取代之HLA-A*1101多肽。
在一些情況下，支架包含兩個免疫調節多肽，其中兩個免疫調節多肽具有相同胺基酸序列，例如，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代之變異體IL-2多肽，或包含H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。
在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽之變異體，例如，包含L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽，諸如圖3G中所示。
在一些情況下，第一多肽及第二多肽彼此二硫鍵連接。
在一些情況下，本發明之TMP包含具有MOD位置1或位置3排列之支架，其中HLA重鏈多肽為野生型或變異體HLA-A*0201多肽，例如，包含A236C取代或如圖22C中所示之序列的HLA-A*0201多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一多肽及第二多肽彼此二硫鍵連接。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)； LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
在一些情況下，本發明之TMP包含具有MOD位置1或位置3排列之支架，其中HLA重鏈多肽為野生型或變異體IILA-A24多肽(亦稱作HLA-A*2402)，例如，包含A236C取代或圖21O、21P、21Q、21R、21S或21T中之任一者中所示之胺基酸序列的HLA-A*0201多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一多肽及第二多肽彼此二硫鍵連接。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及E42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
在一些情況下，本發明之TMP包含具有MOD位置1或位置3排列之支 架，其中HLA重鏈多肽為如本文所揭示之野生型或變異體HLA-A*1101多肽，例如，包含A236C取代或具有如圖21J或21K中之一者中所示之胺基酸序列的HLA-A*1101多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一多肽及第二多肽彼此二硫鍵連接。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
在一些情況下，本發明之TMP包含具有MOD位置1或位置3排列之支架，其中HLA重鏈多肽為如本文所揭示之野生型或變異體HLA-A*1101多肽，例如，包含A236C取代或具有如圖21J或21K中之一者中所示之胺基酸序列的HLA-A*1101多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，第一多肽及第二多肽彼此二硫鍵連接。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。在MOD位置1排列中，在一些情況下，一或多個獨立選擇之肽連接子位於以下一或多者之間：i)KRAS肽與第一MHC多肽；ii)免疫調節多肽與第二MHC多肽(及在TMP包含第二多肽鏈上之兩個免疫調節多肽之情況下，介於兩個免疫調節多肽之間)；及/或iii)第二MHC多肽與Ig Fc多肽。在MOD位置3之排列中，在一些情況下，一或多個獨立選擇之肽連接子位於以下一或多者之間：i)KRAS肽與第一MHC多肽；ii)第二MHC多肽與Ig Fc多肽；及iii)Ig Fc與免疫調節多肽(及在TMP包含第二多肽鏈上之兩個免疫調節多肽之情況下，介於兩個免疫調節多肽之間)TMP。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列AAAGG(SEQ ID NO：387)。在一些情況下，肽連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n(SEQ ID NO：377)，其中n為1至10之整數(例如，其中n為2、3或4)。
此外，如上文所論述且如圖16A-16C中示意性地描繪，本發明之TMP之第一多肽鏈及第二多肽鏈可由一或多個二硫鍵連接。舉例而言，本發明之TMMP可包含：a)包含具有R12C取代之β2M多肽之第一多肽鏈；及b)包含具有A236C取代之I類MHC重鏈多肽之第二多肽鏈；從而在第一多肽鏈中之β2M多肽之位置12處之Cys與第二多肽鏈中之I類MHC重鏈多肽之位置236處之Cys之間形成二硫鍵。作為另一個實例，本發明之TMMP可包含：a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)肽抗原決定基；ii)包含GCGGS(GGGGS)n (SEQ ID NO：582)序列之肽連接子，其中n為1、2或3；及iii)β2M多肽；及b)包含具有Y84C取代之I類MHC重鏈多肽之第二多肽，從而在第一多肽鏈中之肽連接子中之Cys與第二多肽鏈中之I類MHC重鏈多肽之位置84處之Cys之間形成二硫鍵。在其他實例中，本發明之TMP可包含：a)第一多肽，其自N端至C端依次包含：i)肽抗原決定基；ii)包含GCGGS(GGGGS)n (SEQ ID NO：582)序列之肽連接子，其中n為1、2或3；及iii)具有R12C取代之β2M多肽；及b)包含具有Y84C取代及A236C取代之I類MHC重鏈多肽之第二多肽，從而：i)在第一多肽鏈中之肽連接子中之Cys與第二多肽鏈中之I類MHC重鏈多肽之位置84處之Cys之間形成第一個二硫鍵；及ii)在第一多肽鏈中之β2M多肽之位置12處之Cys與第二多肽鏈中之I類MHC重鏈多肽之位置236處之Cys之間形成第二個二硫鍵。為簡單起見，第一個二硫鍵稱作「G2C/Y84C」；且第二個二硫鍵稱作「R12C/A236C」。本發明之TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵；b)R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵；或c)G2C/Y84C二硫鍵及R12C/A236C二硫鍵。
本發明之TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵；及b)在位置1或3處之至少一個免疫調節多肽。本發明之TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵；及b)在位置2、4或5處之至少一個免疫調節多肽。
本發明之TMP可包括：a)R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵； 及在位置1或3處之至少一個免疫調節多肽。本發明之TMP可包括：a)R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵；及在位置2、4或5處之至少一個免疫調節多肽。
本發明之TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵及R12C/A236C二硫鍵；及b)及在位置1或3處之至少一個免疫調節多肽。本發明之TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵及R12C/A236C二硫鍵；及b)及在位置2、4或5處之至少一個免疫調節多肽。
在一些情況下，本發明之TMP包含第二多肽，該第二多肽包含(i)在位置84處包含Ala及在位置236處包含Cys之HLA-A0201(Y84A；A236C)多肽，或(ii)在位置84及139處包含Cys之HLA-A0201(Y84C；A139C)多肽，或(iii)在位置84處包含Cys及在位置236處包含丙胺酸之HLA-A0201(Y84C；A236)多肽，例如，分別如圖13A、13B或13C中所描繪。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP包含I類MHC重鏈多肽，該I類MHC重鏈多肽包含(i)在位置84處包含Ala及在位置236處包含Cys之HLA-A*1101(Y84A；A236C)多肽，或(ii)在位置84及236處包含Cys之HLA-A*1101(Y84C；A236C)多肽，或(iii)在位置84處包含Cys及在位置236處包含丙胺酸之HLA-A*1101(Y84C；A236)多肽，例如，分別如圖13D、圖13E或圖13F中所描繪。
在一些情況下，本發明之TMP包含第二多肽，該第二多肽包含(i)在位置84處包含Ala及在位置236處包含Cys之HLA-A24(Y84A；A236C)多肽，或(ii)在位置84及236處包含Cys之HLA-A24(Y84C；A236C)多肽，或(iii)在位置84處包含Cys及在位置236處包含丙胺酸之HLA-A24(Y84C；A236)多肽，例如，如圖13G、圖13H或圖13I中所描繪。
作為非限制性實例，本發明之TMP可包含下表2中所列出之第一多肽及第二多肽之組合中之一者：
Figure 109132369-A0304-12-0091-7
Figure 109132369-A0304-12-0092-8
作為非限制性實例，本發明之TMP可包含下表3中所列出之第一多肽及第二多肽之組合中之一者：
Figure 109132369-A0304-12-0092-9
Figure 109132369-A0304-12-0093-10
在一些情況下，本發明之異二聚TMP包含I類MHC重鏈，該I類MHC重鏈包含鏈內二硫鍵。舉例而言，在一些情況下，本發明之異二聚TMP包含I類MHC重鏈，該I類MHC重鏈包含由Y84C及A139C取代產生之Cys殘基之間形成的鏈內二硫鍵。在一些情況下，此種異二聚TMP亦包含I類MHC重鏈，該I類MHC重鏈包含A236C取代，其中Cys-236可與第二多肽鏈形成二硫鍵，該第二多肽鏈包含：i)肽抗原決定基；ii)包含R12C取代之β2M多肽，使得Cys-12與I類MHC重鏈中之Cys-236形成二硫鍵；及iii)肽抗原決定基與β2M多肽之間的肽連接子，其中該連接子包含胺基酸序列(GGGGS)n，其中n為1至9之整數(例如，n為1、2或3)。
作為實例，本發明之TMP可包含下表4中所列出之第一多肽及第二多肽之組合中之一者，以提供包含具有Y84C、A139C及A236C取代之I類MHC A02重對偶基因之異二聚TMP；且其中免疫調節多肽在如圖17中所描繪之位置1或位置3處。
Figure 109132369-A0304-12-0093-11
Figure 109132369-A0304-12-0094-12
作為另一個實例，本發明之異二聚TMP可包含：a)包含圖13L中所描繪之胺基酸序列之第一多肽；且第二多肽包含圖14K中所描繪之胺基酸序列。作為另一個實例，本發明之異二聚TMP可包含：a)包含圖13L中所描繪之胺基酸序列之第一多肽；且第二多肽包含圖14Q中所描繪之胺基酸序列。
如上文所提及，在一些情況下，本發明之TMP為包含第一多肽及第二多肽之異二聚TMP，其中第一多肽及第二多肽係由一或多個二硫鍵，例如單個二硫鍵或兩個二硫鍵連接。舉例而言，如上文所論述，本發明之TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵；b)R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵；或c)G2C/Y84C二硫鍵及R12C/A236C二硫鍵。在一些情況下，例如，在本發明之TMP包括G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵之情況下，β2M多肽不包括R12C取代(而在位置12處具有Arg)，且I類MHC重鏈多肽不包括A236C取代(而在位置236處具有Ala)；換言之，β2M多肽及I類MHC重鏈多肽在β2M之位置12處及I類MHC重鏈多肽之位置236處不包括「游離」(未配對)Cys殘基。類似地，在一些情況下，例如，在本發明之TMP包括R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵之情況下，肽抗原決定基與β2M多肽之間的連接子不包括Cys取代(而連接子為(GGGGS)n連接子，其中n為1至5之整數)，且I類MHC多肽不包括Y84C取代(而在位置84處具有Tyr)；換言之，肽抗原決定基與β2M多肽抑或I類MHC多肽之間的連接子在連接子中或在I類MHC多肽之位置84處均不包括「游離」(未配對)Cys殘基。
單鏈TMP
如上文所提及且如圖18中示意性地描繪，免疫調節多肽(亦即，一或 多個免疫調節多肽)可存在於本發明之單鏈TMP中之多個位置中之任一者處。圖18描繪變異體IL-2多肽之兩個複本之位置；然而，如本文所述，免疫調節多肽可為任何數目之免疫調節多肽及多種免疫調節多肽中之任一者。如圖18中所描繪，免疫調節多肽可：1)在I類MHC重鏈之C端及Ig Fc多肽之N端；2)在Ig Fc多肽之C端；或3)在肽抗原決定基之N端。
根據本發明之單鏈TMP之I類MHC多肽(亦即，β2M及重鏈多肽)、免疫調節多肽、Ig Fc組分及連接子與上文針對異二聚TMP所述之彼等一致。此外，單鏈TMP可包括與異二聚TMP中相同之二硫鍵，亦即，鏈內在I類MHC重鏈多肽中，例如，如上文所論述在兩個Cys殘基之間(例如，在重鏈之Cys-84與Cys-139之間)，鏈間在β2M與重鏈多肽之間(例如，在β2M之R12C與重鏈之殘基236處之Cys之間)，及/或將I類MHC重鏈中之Cys連接至抗原決定基與β2M多肽之間的連接子中之Cys殘基之二硫鍵。在一些情況下，I類MHC重鏈為A02對偶基因I類MHC重鏈。在一些情況下，I類MHC重鏈包含Y84C及A139C取代，從而在Cys-84與Cys-139之間形成鏈內二硫鍵。在一些情況下，I類MHC重鏈為A02對偶基因I類MHC重鏈。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP包含具有如圖18中所示之MOD位置2或位置3排列之支架，其中HLA重鏈多肽為野生型或變異體HLA-A*0201多肽，例如，包含A236C取代或如圖22C中所示之序列的HLA-A*0201多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，單鏈TMP包含鏈內二硫鍵，該鏈內二硫鍵(i)在I類MHC重鏈多肽中之兩個Cys殘基之間，(ii)在β2M與重鏈多肽之間，及/或在I類MHC重鏈中之Cys與在KRAS抗原決定基與β2M多肽之間的連接子中之Cys之間。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況 下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
在一些情況下，本發明之單鏈TNMP包含具有如圖18中所示之MOD位置2或位置3排列之支架，其中HLA重鏈多肽為野生型或變異體HLA-A24多肽(亦稱作HLA-A*2402)，例如，包含A236C取代或圖21O、21P、21Q、21R、21S或21T中之任一者中所示之胺基酸序列的HLA-A*0201多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，單鏈TMP包含鏈內二硫鍵，該鏈內二硫鍵(i)在I類MHC重鏈多肽中之兩個Cys殘基之間，(ii)在β2M與重鏈多肽之間，及/或在I類MHC重鏈中之Cys與在KRAS抗原決定基與β2M多肽之間的連接子中之Cys之間。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)；VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LIVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
在一些情況下，本發明之TMP包含具有如圖18中所示之MOD位置2或位置3排列之支架，其中HLA重鏈多肽為如本文所揭示之野生型或變異體HLA-A*1101多肽，例如，包含A236C取代或具有如圖21J或21K中之一者所示之胺基酸序列的HLA-A*1101多肽，或其變異體。在一些情況下，Ig Fc多肽為實質上不引起細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，例如，包含如圖3G中所示之L234A及L235A取代之人類IgG1 Fc多肽。在一些情況下，單鏈TMP包含鏈內二硫鍵，該鏈內二硫鍵(i)在I類MHC重鏈多肽中之兩個Cys殘基之間，(ii)在β2M與重鏈多肽之間，及/或在I類MHC重鏈中之Cys與在KRAS抗原決定基與β2M多肽之間的連接子中之Cys之間。在一些情況下，免疫調節多肽為包含H16A及F42A取代或H16T及F42A取代之變異體IL-2多肽。在一些情況下，KRAS肽具有選自下群之胺基酸序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)；VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)；VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)；VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)；VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)；VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)； VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)；VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)；VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)；VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)；VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)；VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)；LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)；LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)；KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)；KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)；KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)；LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)；LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)；LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)；FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)；FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)；FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)。
如上文所論述，單鏈TMP之多肽可由一或多個二硫鍵連接。舉例而言，本發明之TMP可包含具有R12C取代之β2M多肽及具有A236C取代之I類MHC重鏈多肽；從而在β2M多肽之位置12處之Cys與I類MHC重鏈多肽之位置236處之Cys之間形成二硫鍵。作為另一個實例，本發明之單鏈TMP可包含i)由包含GCGGS(GGGGS)n (SEQ ID NO：582)序列之肽連接子連接之KRAS抗原決定基及β2M多肽，其中n為1、2或3，及ii)具有Y84C取代之I類MHC重鏈多肽，從而在肽連接子中之Cys與I類MHC重鏈多肽之位置84處之Cys之間形成二硫鍵。在其他實例中，本發明之單鏈TMP可包含i)由包含GCGGS(GGGGS)n (SEQ ID NO：582)序列之肽連接子連接之KRAS抗原決定基及β2M多肽，其中n為1、2或3，且其中β2M多肽包含R12C取代；及ii)具有Y84C取代及A236C取代之I類MHC重鏈多肽，從而a)在肽連接子中之Cys與I類MHC重鏈多肽之位置84處之Cys之間形成第一個二硫鍵，及b)在β2M多肽之位置12處之Cys與I類MHC重鏈多肽之位置236處之Cys之間形成第二個二硫鍵。為簡單起見，第一個二硫鍵稱作「G2C/Y84C」；且第二個二硫鍵稱作「R12C/A236C」。本發明之單鏈TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵；b)R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵；或c) G2C/Y84C二硫鍵及R12C/A236C二硫鍵。在一些情況下，I類MHC重鏈在位置84處包含非天然存在之Cys且在位置139處包含非天然存在之殘基，從而在Cys-84與Cys-139之間形成鏈內二硫鍵。
本發明之單鏈TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵而非R12C/A236C二硫鍵；及b)在位置2或3處之至少一個免疫調節多肽。本發明之單鏈TMP可包括：a)R12C/A236C二硫鍵而非G2C/Y84C二硫鍵；及在位置2或3處之至少一個免疫調節多肽。本發明之單鏈TMP可包括：a)G2C/Y84C二硫鍵及R12C/A236C二硫鍵；及b)及在位置2或3處之至少一個免疫調節多肽。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP包含I類MHC重鏈多肽，該I類MHC重鏈多肽包含(i)在位置84處包含Ala及在位置236處包含Cys之HLA-A0201(Y84A；A236C)多肽，或(ii)在位置84及139處包含Cys之HLA-A0201(Y84C；A139C)多肽，或(iii)在位置84處包含Cys及在位置236處包含丙胺酸之HLA-A0201(Y84C；A236)多肽，例如，分別如圖13A、13B或13C中所描繪。
在一些情況下，本發明之單鏈TMP包含I類MHC重鏈多肽，該I類MHC重鏈多肽包含(i)在位置84處包含Ala及在位置236處包含Cys之HLA-A*1101(Y84A；A236C)多肽，或(ii)在位置84及236處包含Cys之HLA-A*1101(Y84C；A236C)多肽，或(iii)在位置84處包含Cys及在位置236處包含丙胺酸之HLA-A*1101(Y84C；A236)多肽，例如，分別如圖13D、圖13E或圖13F中所描繪。
在一些情況下，本發明之TMP包含第二多肽，該第二多肽包含(i)在位置84處包含Ala及在位置236處包含Cys之HLA-A24(Y84A；A236C)多肽，或(ii)在位置84及236處包含Cys之HLA-A24(Y84C；A236C)多肽，或(iii)在位置84處包含Cys及在位置236處包含丙胺酸之HLA-A24(Y84C；A236)多肽，例如，分別如圖13G、圖13H或圖13I中所描繪。
作為一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19A中所描繪之 胺基酸序列(TMP「4095」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19B中所描繪之胺基酸序列(TMP「4073」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19C中所描繪之胺基酸序列(TMP「4074」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19D中所描繪之胺基酸序列(TMP「4333」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19E中所描繪之胺基酸序列(TMP「4335」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19F中所描繪之胺基酸序列。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19G中所描繪之胺基酸序列(TMP「4238」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19H中所描繪之胺基酸序列(TMP「4241」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19I中所描繪之胺基酸序列(TMP「4334」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19J中所描繪之胺基酸序列(TMP「4144」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19K中所描繪之胺基酸序列(TMP「4145」)。作為另一個非限制性實例，本發明之單鏈TMP可包含圖19L中所描繪之胺基酸序列(TMP「4146」)。
產生多聚T細胞調節多肽之方法
如上文所論述，獲得包含與相應親本野生型免疫調節多肽對共刺激多肽之親和力相比，對同源共刺激多肽展現較低親和力之一或多個變異體免疫調節多肽之TMP的方法在公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091中揭示，其關於產生TMP之方法的揭示內容以引用之方式明確併入本文中，具體而言包括WO2020132138A1之段落[00560]-[00583]及WO2019/051091之段落[00364]-[00387]。
核酸
本發明提供一種包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列的核酸。本發明提供一種包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列的核酸。
本發明提供包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列的核酸。在一些情況下，本發明之異二聚TMP之個別多肽鏈在獨立之核酸中編碼。在一些情況下，本發明之異二聚或單鏈TMP之所有多肽鏈皆在單個核酸中編碼。在一些情況下，第一核酸包含編碼本發明之異二聚TMP之第一多肽之核苷酸序列；且第二核酸包含編碼本發明之異二聚TMP之第二多肽之核苷酸序列。在一些情況下，單個核酸包含編碼本發明之TMP之第一多肽及本發明之異二聚TMP之第二多肽的核苷酸序列。
編碼多肽之個別多肽鏈之獨立核酸
上文所提及之TMPA，在一些情況下，本發明之異二聚TMP之個別多肽鏈在獨立之核酸中編碼。在一些情況下，編碼本發明之TMP之獨立多肽鏈之核苷酸序列可操作地連接至轉錄控制元件，例如啟動子，諸如在真核細胞中發揮功能之啟動子，其中該啟動子可為組成型啟動子或誘導型啟動子。
因此，舉例而言，本發明提供第一核酸及第二核酸，其中第一核酸包含編碼異二聚TMP之第一多肽的獨立核苷酸序列，且第二核酸包含編碼本發明之異二聚TMP之第二多肽的獨立核苷酸序列。舉例而言，在上文針對異二聚TMP所論述之MOD位置1中(參見圖17)，其中第一MHC多肽包含β2M多肽且第二多肽包含HLA重鏈多肽，第一核酸編碼第一多肽，該第一多肽自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；及ii)β2M多肽，且第二核酸編碼第二多肽，該第二多肽自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)HLA重鏈多肽；及iii)Ig Fc多肽。如上文所提及，連接子視情況可包括在第一多肽及第二多肽兩者之個別組分之間。類似地，舉例而言，對於MOD位置3，第一核酸編碼第一多肽，該第一多肽自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；及ii)β2M多肽，且第二核酸編碼第二多肽，該第二多肽自N端至C端依次包含：i)HLA重鏈多肽；ii)Ig Fc多肽；及iii)i)至少一個免疫調節多肽。再次地，連接子視情況可包括在第一多肽及第二多肽兩者之個別 組分之間。
在一些情況下，編碼第一多肽及第二多肽之核苷酸序列可操作地連接至轉錄控制元件。在一些情況下，轉錄控制元件為在真核細胞中發揮功能之啟動子。在一些情況下，核酸存在於獨立之表現載體中。
編碼存在於多肽中之兩個或更多個多肽之核酸
本發明亦提供包含編碼本發明之異二聚或單鏈TMP之至少第一多肽及第二多肽之核苷酸序列的單個核酸。使用單個核酸製備異二聚TMP之TMP方法在公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091中揭示，其關於編碼TMP之核酸的揭示內容以引用之方式明確併入本文中，具體而言包括WO2020132138A1之段落[00507]-[00514]及WO2019/051091之段落[00393]-[00400]。
重組表現載體
本發明提供包含本發明之核酸的重組表現載體。在一些情況下，重組表現載體為非病毒載體。在一些情況下，重組表現載體為病毒構築體，例如重組腺相關病毒構築體(參見例如美國專利第7,078,387號)、重組腺病毒構築體、重組慢病毒構築體、重組反轉錄病毒構築體、非整合型病毒載體等。
適合之表現載體在公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091中揭示，其關於此類表現載體之揭示內容以引用之方式明確併入本文中，具體而言包括WO2020132138A1之段落[00515]-[00520]及WO2019/051091之段落[00401]-[00406]。
遺傳修飾之宿主細胞
本發明提供遺傳修飾之宿主細胞，其中該宿主細胞經本發明之核酸遺傳修飾。
適合之宿主細胞包括真核細胞，諸如酵母細胞、昆蟲細胞及哺乳動 物細胞。在一些情況下，宿主細胞為哺乳動物細胞株之細胞。適合之哺乳動物細胞株包括人類細胞株、非人類靈長類動物細胞株、囓齒動物(例如小鼠、大鼠)細胞株，及類似細胞株。適合之哺乳動物細胞株包括但不限於HeLa細胞(例如，美國典型培養物保藏中心(American Type Culture Collection，ATCC)編號CCL-2)、CHO細胞(例如，ATCC編號CRL9618、CCL61、CRL9096)、293細胞(例如，ATCC編號CRL-1573)、Vero細胞、NIH 3T3細胞(例如，ATCC編號CRL-1658)、Huh-7細胞、BHK細胞(例如，ATCC編號CCL10)、PC12細胞(ATCC編號CRL1721)、COS細胞、COS-7細胞(ATCC編號CRL1651)、RAT1細胞、小鼠L細胞(ATCC編號CCLI.3)、人胚腎(human embryonic kidney，HEK)細胞(ATCC編號CRL1573)、HLHepG2細胞，及類似細胞。
在一些情況下，宿主細胞為已遺傳修飾之哺乳動物細胞，使得其不合成內源性MHC β2-M。
在一些情況下，宿主細胞為已遺傳修飾之哺乳動物細胞，使得其不合成內源性I類MHC重鏈。在一些情況下，宿主細胞為已遺傳修飾之哺乳動物細胞，使得其不合成內源性MHC β2-M，且使得其不合成內源性I類MHC重鏈。
如上文所提及，在一些情況下，TMP為單鏈多肽(例如，由單個多肽鏈組成；或為單個多肽鏈之同二聚體)。觀測到產生完整及全長之單鏈TMP，亦即，多肽鏈無裂解。在一些情況下，可產生比異二聚TMP更大量之單鏈TMP。
組合物
本發明提供包含本發明之TMP(synTac)之組合物，包括醫藥組合物。本發明提供包含本發明之TMP之組合物，包括醫藥組合物。本發明提供包含本發明之核酸或重組表現載體之組合物，包括醫藥組合物。
包含TMP之組合物
除本發明之TMP以外，本發明之組合物亦可包含以下一或多者：鹽， 例如NaCl、MgCl2 、KCl、MgSO4 等；緩衝劑、增溶劑；清潔劑，例如非離子型清潔劑，諸如Tween-20等；蛋白酶抑制劑；甘油；及類似物。組合物亦可包含醫藥學上可接受之賦形劑，其中多種在此項技術中為已知的且在本文中無需詳細論述。醫藥學上可接受之鹽、緩衝劑、賦形劑、調配物、劑型等之實例在公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091中揭示，其關於包含本發明之TMP之組合物的揭示內容以引用之方式明確併入本文中，具體而言包括WO2020132138A1之段落[00526]-[00536]及WO2019/051091之段落[00412]-[00422]。
在本發明之TMP作為可注射劑(例如皮下、腹膜內、肌內及/或靜脈內)直接向組織投與之情況下，調配物可呈即用劑型提供，可將該即用劑型直接注射或輸註至患者中或與鹽水溶液混合以供輸注，或可能呈非水性形式(例如，可複原之儲存穩定粉末)或水性形式，諸如由醫藥學上可接受之載劑及賦形劑組成之液體。亦可提供調配物以增長投與後TMP之血清半衰期。舉例而言，TMP可在脂質體調配物中提供，製備成膠體，或用於延長血清半衰期之其他常規技術製備。多種方法可用於製備脂質體，如例如Szoka等人1980Ann.Rev.Biophys.Bioeng. 9：467、美國專利第4,235,871號、第4,501,728號及第4,837,028號製劑亦可呈控釋或緩釋形式提供。
本發明之TMP在液體組合物調配物中之濃度可在寬範圍內變化(例如，以重量計小於約0.1%，通常2%或至少約2%至高達20%至50%或更高)。包括在此範圍內之濃度為約5至約15mg/mL，包括約5mg/mL、約6mg/mL、約7mg/mL、約8mg/mL、約9mg/mL、約10mg/mL、約11mg/mL、約12mg/mL、約13mg/mL、約14mg/mL及約15mg/mL。濃度可視眾多因素而定，包括液體組合物中TMP之穩定性。
在一些情況下，本發明之TMP存在於液體組合物中。在一些情況下， 本發明之TMP組合物包含：a)本發明之TMP；及b)鹽水(例如0.9% NaCl)。在一些情況下，組合物為無菌的且適合於向人類個體投與。
包含核酸或重組表現載體之組合物
本發明提供包含本發明之核酸或重組表現載體之組合物，例如醫藥組合物。公開之PCT申請案WO2020132138A1及WO2019/051091揭示如何製備此類組合物。參見WO2020132138A1之段落[00537]-[00546]及WO2019/051091之段落[00423]-[00432]，其揭示內容以引用之方式明確併入本文中。
調節T細胞活性之方法
本發明提供一種選擇性地調節抗原決定基特異性T細胞(例如，對KRAS抗原決定基具有特異性之T細胞，該KRAS抗原決定基諸如包含癌症相關突變之KRAS肽)之活性的方法，該方法包括使T細胞與本發明之TMP接觸，其中使T細胞與本發明之TMP接觸選擇性地調節抗原決定基特異性T細胞之活性。在一些情況下，接觸在活體外發生。在一些情況下，接觸在活體內發生。
在本發明之TMP包括作為活化多肽之免疫調節多肽之情況下，使T細胞與TMP接觸會活化抗原決定基特異性T細胞。在一些情況下，抗原決定基特異性T細胞為對存在於癌細胞上之抗原決定基具有特異性之T細胞，且使抗原決定基特異性T細胞與TMP接觸會增加T細胞對癌細胞之細胞毒性活性及/或增加抗原決定基特異性T細胞之數目。
本發明提供一種調節個體之免疫反應之方法，該方法包括向該個體投與有效量之本發明之TMP。投與TMP會誘導抗原決定基特異性T細胞反應(例如，癌症抗原決定基特異性T細胞反應)及抗原決定基非特異性T細胞反應，其中抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少2：1。在一些情況下，抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少5：1。在一些情況下，抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定 基非特異性T細胞反應之比率為至少10：1。在一些情況下，抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少25：1。在一些情況下，抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少50：1。在一些情況下，抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少100：1。在一些情況下，個體為人類。在一些情況下，調節增加對癌細胞之細胞毒性T細胞反應，該癌細胞為例如表現呈現由存在於TMP中之KRAS抗原決定基呈現之相同抗原決定基之抗原的癌細胞，及/或增加對KRAS抗原決定基具有特異性之T細胞之數目。在一些情況下，投與為靜脈內、皮下、肌內、全身、淋巴內、在治療部位遠端、局部或在治療部位處或附近。
本發明提供一種將免疫調節多肽選擇性地遞送至靶T細胞之方法，該方法包括使混合T細胞群體與本發明之TMP接觸，其中該混合T細胞群體包含靶T細胞及非靶T細胞，其中靶T細胞對存在於TMP內之抗原決定基具有特異性(例如，其中靶T細胞對存在於TMP內之抗原決定基具有特異性)，且其中接觸步驟將存在於TMP內之一或多個免疫調節多肽遞送至靶T細胞。在一些情況下，T細胞群體在活體外。在一些情況下，T細胞群體在活體內個體中。在一些情況下，該方法包括向個體投與TMP。在一些情況下，T細胞為細胞毒性T細胞。在一些情況下，混合T細胞群體為獲自個體之活體外混合T細胞群體，且接觸步驟使得靶T細胞活化及/或增殖，產生活化及/或增殖之靶T細胞群體；在此等情況中之一些情況下，該方法進一步包括向個體投與活化及/或增殖之靶T細胞群體。
本發明提供一種在獲自個體之混合T細胞群體中偵測結合所關注之抗原決定基(例如，癌症抗原決定基；包含癌症相關突變之KRAS肽)之靶T細胞之存在的方法，該方法包括：a)使混合T細胞群體活體外與本發明之TMP接觸，其中該TMP包含所關注之KRAS抗原決定基；及b)偵測對該接觸作出反應之T細胞活化及/或增殖，其中活化及/或增殖之T細胞指示靶T細胞之存在。
治療方法
本發明提供一種治療個體之方法，該方法包括向該個體投與有效治療個體之量的本發明之TMP或一或多個編碼TMP之核酸。亦提供用於治療人類或非人類動物體之方法中之本發明之TMP。在一些情況下，本發明之治療方法包括向有需要之個體投與包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列的一或多個重組表現載體。在一些情況下，本發明之治療方法包括向有需要之個體投與包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列的一或多個mRNA分子。在一些情況下，本發明之治療方法包括向有需要之個體投與本發明之TMP。如上文所述，可治療之疾患包括例如癌症，諸如表現KRAS多肽，例如突變體KRAS多肽之癌症。
在一些情況下，本發明之TMP當向有需要之個體投與時，誘導抗原決定基特異性T細胞反應及抗原決定基非特異性T細胞反應。換言之，在一些情況下，本發明之TMP當向有需要之個體投與時，藉由調節呈現以下兩者之第一T細胞之活性來誘導抗原決定基特異性T細胞反應：i)對存在於TMP中之抗原決定基具有特異性之TCR；ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽；且藉由調節呈現以下兩者之第二T細胞之活性來誘導抗原決定基非特異性T細胞反應：i)對除存在於TMP中之抗原決定基以外之抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽。抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少2：1、至少5：1、至少10：1、至少15：1、至少20：1、至少25：1、至少50：1或至少100：1。抗原決定基特異性T細胞反應與抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為約2：1至約5：1、約5：1至約10：1、約10：1至約15：1、約15：1至約20：1、約20：1至約25：1、約25：1至約50：1或約50：1至約100：1或大於100：1。「調節T細胞之活性」可包括以下一或多項：i)活化細胞毒性(例如CD8+ )T細胞；ii)誘導細胞毒性(例如CD8+ )T細胞之細胞毒性活性；iii)誘導由細胞毒性(例如CD8+ )T細胞產生及釋放細胞毒素(例如穿孔素；顆粒酶；顆粒 溶素)；及iv)增加細胞毒性(例如CD8+ )T細胞之數目。
在MOD為野生型MOD之親和力降低變異體之情況下，MOD對其同源共刺激多肽降低之親和力與抗原決定基對TCR之親和力的組合為本發明之TMP提供增強之選擇性。因此，舉例而言，與本發明之TMP結合至呈現i)對除存在於TMP中之抗原決定基以外之抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽之第二T細胞的親合力相比，本發明之TMP以更高親合力結合至呈現以下兩者之第一T細胞：i)對存在於TMP中之抗原決定基具有特異性之TCR；及ii)結合至存在於TMP中之免疫調節多肽之共刺激多肽。
因此，本發明提供一種選擇性地調節個體中抗原決定基特異性T細胞之活性的方法，該方法包括向個體投與有效量之本發明之TMP或一或多個包含編碼TMP之核苷酸序列之核酸(例如，表現載體；mRNA等)，其中TMP選擇性地調節個體中抗原決定基特異性T細胞之活性。選擇性地調節抗原決定基特異性T細胞之活性可治療個體之疾病或病症。因此，本發明提供一種治療方法，該治療方法包括向有需要之個體投與有效量之本發明之TMP。
在一些情況下，免疫調節多肽(「MOD」)為活化多肽，且TMP活化抗原決定基特異性T細胞。在一些情況下，TMP增加對KRAS抗原決定基具有特異性之T細胞之活性。在一些情況下，MOD為活化多肽，且TMP活化抗原決定基特異性T細胞(例如，對KRAS抗原決定基具有特異性之T細胞)。在一些情況下，T細胞為T輔助細胞(CD4+ 細胞)、細胞毒性T細胞(CD8+ 細胞)或NK-T細胞。在一些情況下，抗原決定基為癌症抗原決定基，且TMP增加對表現KRAS癌症抗原決定基之癌細胞具有特異性之T細胞(例如，T輔助細胞(CD4+ 細胞)、細胞毒性T細胞(CD8+ 細胞)及/或NK-T細胞)之活性。CD4+ T細胞之活化可包括增加CD4+ T細胞之增殖及/或誘導或增強由CD4+ T細胞釋放細胞激素。NK-T細胞及/或CD8+細胞 之活化可包括：增加NK-T細胞及/或CD8+細胞之增殖；及/或誘導由NK-T細胞及/或CD8+細胞釋放細胞激素，諸如干擾素γ。
可向有需要之個體投與本發明之TMP以治療該個體之癌症，其中該癌症表現存在於TMP中之KRAS肽。舉例而言，癌症可為癌細胞表現或過表現如上文所述之KRAS(例如，KRAS之突變形式)之癌症。本發明提供一種治療個體之癌症的方法，該方法包括向該個體投與有效量之本發明之TMP或一或多個包含編碼TMP之核苷酸序列之核酸(例如，表現載體；mRNA等)，其中TMP包含作為KRAS抗原決定基之T細胞抗原決定基，且其中TMP包含刺激性免疫調節多肽。在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體投與時，減少該個體中癌細胞之數目的量。舉例而言，在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體投與時，使該個體中癌細胞之數目與投與TMP之前或未投與TMP之個體中癌細胞之數目相比減少至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%之量。在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體投與時，減少個體中癌細胞之數目，包括減至實質上不可偵測之水準的量。
在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體投與時，減少該個體之腫瘤質量的量。舉例而言，在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體(患有腫瘤之個體)投與時，使該個體之腫瘤質量與投與TMP之前或未投與TMP之個體之腫瘤質量相比減少至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%之量。在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體(患有腫瘤之個體)投與時，減少該個體之腫瘤體積的量。舉例而言，在一些情況下，本發明之 TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體(患有腫瘤之個體)投與時，使該個體之腫瘤體積與投與TMP之前或未投與TMP之個體之腫瘤體積相比減少至少10%、至少15%、至少20%、至少25%、至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少80%、至少90%或至少95%之量。在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體投與時，增加該個體之存活時間的量。舉例而言，在一些情況下，本發明之TMP之「有效量」為當以一或多個劑量向有需要之個體投與時，使該個體之存活時間與未投與TMP之個體之預期存活時間相比增加至少1個月、至少2個月、至少3個月、3個月至6個月、6個月至1年、1年至2年、2年至5年、5年至10年或超過10年之量。
可用本發明之方法治療之癌症包括癌細胞表現KRAS之突變形式的癌症。實例包括腺癌及血液惡性病。可用本發明之方法治療之癌症的實例包括多發性骨髓瘤；B細胞淋巴瘤；乳癌；肺癌；卵巢癌；胰臟癌；結腸直腸癌；前列腺癌；腎癌；急性骨髓性白血病；間皮瘤；甲狀腺癌；頭頸癌；胃癌；尿路上皮癌；子宮頸癌；及卵巢子宮內膜癌。
如上文所提及，在一些情況下，在實施主題治療方法中，作為TMP本身，向有需要之個體投與本發明之TMP。在其他情況下，在實施主題治療方法中，向有需要之個體投與一或多個包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列的核酸。因此，在其他情況下，向有需要之個體投與本發明之一或多個核酸，例如，本發明之一或多個重組表現載體。
如上文所論述，在需要嚙合對APP之KRAS肽具有特異性之T細胞之TCR的彼等情況下，亦可出於治療目的向患者投與本發明之APP。在此類情況下，當APP與TCR嚙合時，患者中天然存在之免疫調節多肽的存在可影響T細胞之調節。
調配物
上文描述適合之調配物，其中適合之調配物包括醫藥學上可接受之賦形劑。在一些情況下，適合之調配物包含：a)本發明之TMP；及b)醫藥學上可接受之賦形劑。在一些情況下，適合之調配物包含：a)包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列之核酸；及b)醫藥學上可接受之賦形劑；在一些情況下，核酸為mRNA。在一些情況下，適合之調配物包含：a)包含編碼本發明之TMP之第一多肽之核苷酸序列之第一核酸；b)包含編碼本發明之TMP之第二多肽之核苷酸序列之第二核酸；及c)醫藥學上可接受之賦形劑。在一些情況下，適合之調配物包含：a)包含編碼本發明之TMP之核苷酸序列之重組表現載體；及b)醫藥學上可接受之賦形劑。在一些情況下，適合之調配物包含：a)包含編碼本發明之TMP之第一多肽之核苷酸序列之第一重組表現載體；b)包含編碼本發明之TMP之第二多肽之核苷酸序列之第二重組表現載體；及c)醫藥學上可接受之賦形劑。上文描述適合之醫藥學上可接受之賦形劑。
劑量
適合之劑量可由主治醫師或其他合格之醫療人員基於各種臨床因素來確定。如醫學技術中所熟知，用於任何一名患者之劑量視許多因素而定，該等因素包括患者之體型、體表面積、年齡，有待投與之特定多肽或核酸，患者之性別，投與之時間及途徑，一般健康狀況，及同時投與之其他藥物。本發明之TMP可按以下量投與：每劑介於0.1毫克/公斤體重與20毫克/公斤體重之間，例如介於0.1毫克/公斤體重至10毫克/公斤體重之間，例如介於0.5毫克/公斤體重至5毫克/公斤體重之間；介於1毫克/公斤體重至5毫克/公斤體重之間；介於5毫克/公斤體重至10毫克/公斤體重之間；介於10毫克/公斤體重至15毫克/公斤體重之間；介於15毫克/公斤體重至20毫克公斤體重之間，然而，尤其考慮到上述因素，可設想高於此示例性範圍之劑量。若方案為連續輸注，則劑量亦可在1微克至10毫克/公斤體重/分鐘之範圍內。本發明之TMP可按以下量投與：約1毫克/公斤體重至50 毫克/公斤體重，例如約1毫克/公斤體重至約5毫克/公斤體重、約5毫克/公斤體重至約10毫克/公斤體重、約10毫克/公斤體重至約15毫克/公斤體重、約15毫克/公斤體重至約20毫克/公斤體重、約20毫克/公斤體重至約25毫克/公斤體重、約25毫克/公斤體重至約30毫克/公斤體重、約30毫克/公斤體重至約35毫克/公斤體重、約35毫克/公斤體重至約40毫克/公斤體重、或約40毫克/公斤體重至約50毫克/公斤體重。
一般熟習此項技術者可基於所量測之滯留時間及所投與之劑在體液或組織中之濃度來容易地估算給藥之重複率。在成功治療後，可能需要使患者經歷維持療法以預防疾病狀態複發，其中本發明之TMP以維持劑量投與，該等維持劑量在約1毫克/公斤體重至約5毫克/公斤體重、約5毫克/公斤體重至約10毫克/公斤體重、約10毫克/公斤體重至約15毫克/公斤體重、約15毫克/公斤體重至約20毫克/公斤體重之範圍內，或為超過20毫克/公斤體重之量。
熟習此項技術者將易於瞭解，劑量水準可隨特異性TMP、症狀之嚴重性及個體對副作用之敏感度而變化。給定化合物之較佳劑量可由熟習此項技術者藉由多種方式容易地確定。
在一些情況下，投與本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體之多個劑量。本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體之投與頻率可視多種因素中之任一者而變化，該等因素為例如症狀之嚴重性等。舉例而言，在一些情況下，本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體每月一次、每月兩次、每月三次、每隔一週(qow)、每週一次(qw)、每兩週一次、每三週一次、每四週一次、每週兩次(biw)、每週三次(tiw)、每週四次、每週五次、每週六次、每隔一天(qod)、每天(qd)、每天兩次(qid)或每天三次(tid)投與。
本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體之投與持續時間，例如投與本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體之時間段 可視多種因素中之任一者而變化，該等因素為例如患者反應等。舉例而言，本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體可經一定時間段投與，該時間段在約一天至約一週、約兩週至約四週、約一個月至約兩個月、約兩個月至約四個月、約四個月至約六個月、約六個月至約八個月、約八個月至約1年、約1年至約2年、或約2年至約4年之範圍內，或更長時間。
投與途徑
使用適合於藥物遞送之任何可用方法及途徑，包括活體內及活體外方法以及全身及局部投與途徑，向個體投與活性劑(本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體)。
本發明之TMP典型地將經由靜脈內投與來遞送，但可使用其他常規及醫藥學上可接受之投與途徑，包括腫瘤內、腫瘤周圍、肌內、淋巴管內、氣管內、顱內、皮下、皮內、局部施用、動脈內、經直腸、經鼻、經口及其他經腸及非經腸投與途徑。若需要，則投與途徑可組合，或視TMP及/或所需作用而作調整。本發明之TMP或本發明之核酸或重組表現載體可單劑量或多劑量投與。
可使用適合於遞送常規藥物之任何可用常規方法及途徑，包括全身或局部途徑，向宿主投與本發明之TMP、本發明之核酸或本發明之重組表現載體。一般而言，預期用於本發明之方法中之投與途徑包括但不一定限於經腸、非經腸及吸入途徑。
組合療法
本發明之TMP可與一或多種額外治療劑或治療性處理組合，向有需要之個體投與。TMP之適合劑量將與使用APP之單一療法之劑量(上文所述)相同，或可小於或大於單一療法劑量。適合之額外治療劑包括例如：i)免疫檢查點抑制劑；ii)癌症化學治療劑；iii)抑制KRAS之癌症相關突變形式之劑；及iv)一或多個額外TMP。適合之額外治療性處理包括例如放射線、手術(例如腫瘤之手術切除) 及類似處理。
在一些情況下，方法包括向有需要之個體投與：a)包含本發明之TMP之第一組合物；及b)包含免疫檢查點抑制劑之第二組合物。在一些情況下，方法包括向有需要之個體投與：a)包含本發明之TMP之第一組合物；及b)包含抑制KRAS之癌症相關突變形式，諸如KRAS(G12C)之劑的第二組合物。在一些情況下，方法包括向有需要之個體投與：a)包含本發明之TMP之第一組合物；及b)包含第二TMP之第二組合物。
可與投與一或多種額外治療劑同時或在不同時間，向有需要之個體投與本發明之TMP。
因此，舉例而言，本發明之治療方法可包括共同投與本發明之TMP及至少一種額外治療劑。「共同投與」意指向個體投與本發明之TMP及至少一種額外治療劑兩者，但不一定同時投與，以達成治療作用，該治療作用為已投與TMP及至少一種額外治療劑兩者之結果。TMP及至少一種額外治療劑之投與可實質上同時進行，例如，在投與至少一種額外治療劑約1分鐘至約24小時內(例如，約1分鐘內、約5分鐘內、約15分鐘內、約30分鐘內、約1小時內、約4小時內、約8小時內、約12小時內或約24小時內)向個體投與TMP。在一些情況下，向正在經歷至少一種額外治療劑治療或已經歷該治療之個體投與本發明之TMP。TMP及至少一種額外治療劑之投與可在不同時間及/或以不同頻率進行。
作為另一個實例，本發明之治療方法可包括共同投與本發明之TMP及免疫檢查點抑制劑，諸如對免疫檢查點具有特異性之抗體。「共同投與」意指向個體投與本發明之TMP及對免疫檢查點具有特異性之抗體兩者，但不一定同時投與，以達成治療作用，該治療作用為已投與TMP及免疫檢查點抑制劑兩者之結果。TMP及對免疫檢查點具有特異性之抗體之投與可實質上同時進行，例如，在投與對免疫檢查點具有特異性之抗體約1分鐘至約24小時內(例如，約1分鐘內、 約5分鐘內、約15分鐘內、約30分鐘內、約1小時內、約2小時、約4小時內、約8小時內、約12小時內或約24小時內)向個體投與TMP。在一些情況下，向正在經歷對免疫檢查點具有特異性之抗體治療或已經歷該治療之個體投與本發明之TMP。TMP及對免疫檢查點具有特異性之抗體之投與可在不同時間及/或以不同頻率進行。
示例性免疫檢查點抑制劑包括靶向以下免疫檢查點多肽之抑制劑：諸如CD27、CD28、CD40、CD122、CD96、CD73、CD47、OX40、GITR、CSF1R、JAK、PI3K δ、PI3K γ、TAM、精胺酸酶、CD137(亦稱為4-1BB)、ICOS、A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、LAG3、TIM3、VISTA、CD96、TIGIT、CD122、PD-1、PD-L1及PD-L2。在一些情況下，免疫檢查點多肽為選自CD27、CD28、CD40、ICOS、OX40、GITR、CD122及CD137之刺激性檢查點分子。在一些情況下，免疫檢查點多肽為選自A2AR、B7-H3、B7-H4、BTLA、CTLA-4、IDO、KIR、LAG3、PD-1、TIM3、CD96、TIGIT及VISTA之抑制性檢查點分子。
在一些情況下，免疫檢查點抑制劑為對免疫檢查點具有特異性之抗體。適合之抗免疫檢查點抗體包括但不限於納武單抗(nivolumab)(Bristol-Myers Squibb)、派姆單抗(pembrolizumab)(Merck)、匹利珠單抗(pidilizumab)(Curetech)、AMP-224(GlaxoSmithKline/Amplimmune)、MPDL3280A(Roche)、MDX-1105(Medarex,Inc./Bristol Myer Squibb)、MEDI-4736(Medimmune/AstraZeneca)、阿瑞魯單抗(arelumab)(Merck Serono)、伊匹單抗(ipilimumab)(YERVOY,(Bristol-Myers Squibb)、曲美目單抗(tremelimumab)(Pfizer)、匹利珠單抗(CureTech,Ltd.)、IMP321(Immutep S.A.)、MGA271(Macrogenics)、BMS-986016(Bristol-Meyers Squibb)、利利單抗(lirilumab)(Bristol-Myers Squibb)、烏瑞魯單抗(urelumab)(Bristol-Meyers Squibb)、PF-05082566(Pfizer)、IPH2101(Innate Pharma/Bristol-Myers Squibb)、MEDI-6469(MedImmune/AZ)、CP-870,893(Genentech)、莫加珠 單抗(Mogamulizumab)(Kyowa Hakko Kirin)、瓦利魯單抗(Varlilumab)(CelIDex Therapeutics)、阿維魯單抗(Avelumab)(EMD Serono)、加利昔單抗(Galiximab)(Biogen Idec)、AMP-514(Amplimmune/AZ)、AUNP 12(Aurigene與Pierre Fabre)、因多西莫(Indoximod)(NewLink Genetics)、NLG-919(newLink Genetics)、INCB024360(Incyte)；KN035；及其組合。舉例而言，在一些情況下，免疫檢查點抑制劑為抗PD-1抗體。適合之抗PD-1抗體包括例如納武單抗、派姆單抗(亦稱為MK-3475)、匹利珠單抗、SHR-1210、PDR001及AMP-224。在一些情況下，抗PD-1單株抗體為納武單抗、派姆單抗或PDR001。適合之抗PD1抗體描述於美國專利公開案第2017/0044259號中。對於匹利珠單抗，參見例如Rosenblatt等人(2011)J.Immunother. 34：409-18。在一些情況下，免疫檢查點抑制劑為抗CTLA-4抗體。在一些情況下，抗CTLA-4抗體為伊匹單抗或曲美目單抗。對於曲美目單抗，參見例如Ribas等人(2013)J.Clin.Oncol. 31：616-22。在一些情況下，免疫檢查點抑制劑為抗PD-L1抗體。在一些情況下，抗PD-L1單株抗體為BMS-935559、MEDI4736、MPDL3280A(亦稱為RG7446)、KN035或MSB0010718C。在一些實施例中，抗PD-L1單株抗體為MPDL3280A(阿替珠單抗(atezolizumab))或MEDI4736(德瓦魯單抗(durvalumab))。對於德瓦魯單抗，參見例如WO 2011/066389。對於阿替珠單抗，參見例如美國專利第8,217,149號。
在一些情況下，至少一種額外治療劑為選擇性地抑制KRAS之突變形式，諸如KRAS(G12C)、KRAS(K117A)及類似形式之劑。選擇性地抑制KRAS之突變形式之劑的實例包括ARS-1620；AMG510；KRA-533；及MRTX849。
AMG150具有以下結構：
Figure 109132369-A0304-12-0117-13
ARS-1620具有以下結構：
Figure 109132369-A0304-12-0117-14
在一些情況下，至少一種額外治療劑包括一或多種額外TMP。在一些情況下，方法包括向有需要之個體投與：a)包含第一TMP之第一組合物，其中第一TMP為本發明之TMP；及b)包含第二TMP之第二組合物，其中第二TMP為與本發明之第一TMP不同之本發明之TMP，例如，包含不同KRAS抗原決定基及/或一或多個不同MOD。另外或替代地，一或多個額外TMP可包含抗原決定基，該抗原決定基為除KRAS肽抗原決定基以外之癌症相關肽。
適合於治療之個體
適合於用本發明之方法治療之個體包括患有癌症之個體，包括已診斷為患有癌症之個體，已進行癌症治療但對治療無反應之個體，及已進行癌症治療且最初有反應但隨後對治療而言變得難治之個體。適合於用本發明之方法治療之個體包括患有癌症之個體，在該癌症中癌細胞表現KRAS之突變形式，其中KRAS之突變形式為癌症相關突變形式。適合於用本發明之方法治療之個體包括 患有以下癌症之個體：諸如多發性骨髓瘤；B細胞淋巴瘤；乳癌；肺癌；卵巢癌；胰臟癌；結腸直腸癌；前列腺癌；腎癌；急性骨髓性白血病；間皮瘤；甲狀腺癌；頭頸癌；胃癌；尿路上皮癌；子宮頸癌；及卵巢子宮內膜癌。
在一些情況下，個體為正在經歷免疫檢查點抑制劑治療之個體。在一些情況下，個體為已經歷免疫檢查點抑制劑治療，但儘管已接受此種治療，其疾病仍進展之個體。在一些情況下，個體為正在經歷癌症化學治療劑治療或已經歷該治療之個體。在一些情況下，個體為準備經歷免疫檢查點抑制劑治療，正在經歷該治療，或已經歷該治療之個體。在一些情況下，個體為準備經歷癌症化學治療劑治療、放射線治療、手術及/或另一種治療劑治療，正在經歷該治療，或已經歷該治療之個體。
本發明之非限制性態樣之實例
上文所述之本發明主題之態樣(包括實施例)單獨或與一或多個其他態樣或實施例組合可為有益的。在不限制前述描述之情況下，下文提供本發明之某些非限制性態樣。如熟習此項技術者在閱讀本發明後將顯而易見，可使用個別編號之態樣中之每一者或與之前或之後個別編號之態樣中之任一者組合。此旨在為態樣之所有此類組合提供支持，且不限於下文明確提供之態樣之組合：
態樣1.一種T細胞調節多肽(TMP)，其包含：i)包含於癌細胞上表現之KRAS抗原決定基之KRAS肽，其中該KRAS肽之長度為至少4個胺基酸；ii)第一主要組織相容性複合物(MHC)多肽；iii)第二MHC多肽；及iv)至少一個免疫調節多肽。
態樣2.根據態樣1之T細胞調節多肽，其進一步包含Ig Fc多肽。
態樣3.根據態樣2之T細胞調節多肽，其中該Ig Fc多肽為實質上不誘 導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽。
態樣4.態樣2或3之T細胞調節多肽，其中IgG1 Fc多肽包含一或多個選自N297A、L234A、L235A、L234F、L235E及P331S之胺基酸取代。
態樣5.態樣4之T細胞調節多肽，其中該IgG1 Fc多肽包含圖3G之胺基酸序列。
態樣6.態樣1-5中任一項之T細胞調節多肽，其中該第一主要組織相容性複合物(MHC)多肽為β2-微球蛋白多肽；且其中該第二MHC多肽為I類MHC重鏈多肽。
態樣7.態樣5之T細胞調節多肽，其中該β2-微球蛋白多肽係由第一連接子連接至該KRAS肽。
態樣8.態樣1-7中任一項之T細胞調節多肽，其中該β2-微球蛋白多肽及該I類MHC重鏈多肽彼此共價連接。
態樣9.態樣8之T細胞調節多肽，其中該共價連接係經由一或多個二硫鍵。
態樣10.態樣9之T細胞調節多肽，其中該β2M多肽及該MHC重鏈多肽係由二硫鍵連接，該二硫鍵將該β2M多肽中之Cys殘基與該MHC重鏈多肽中之Cys殘基連接。
態樣11.態樣10之T細胞調節多肽，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys。
態樣12.態樣7-11中任一項之T細胞調節多肽，其中該第一連接子包含Cys，且其中二硫鍵將存在於該第一連接子中之Cys與存在於該MHC重鏈多肽中之Cys連接。
態樣13.態樣12之T細胞調節多肽，其中該第一連接子包含序列CGGGS(SEQ ID NO：141)、GCGGS(SEQ ID NO：139)、GGCGS(SEQ ID NO：587)、 GGGCS(SEQ ID NO：588)或GGGGC(SEQ ID NO：590)，且二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接。
態樣14.態樣13之T細胞調節多肽，其中該第一連接子包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1-10之整數，例如2或3，且二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接。
態樣15.態樣9-14之T細胞調節多肽，其中該TMP包含(i)在該β2M多肽中之Cys殘基與該MHC重鏈多肽中之Cys殘基之間的第一個二硫鍵，及(ii)將存在於該第一連接子中之Cys與存在於該MHC重鏈多肽中之Cys連接之第二個二硫鍵。
態樣16.態樣15之T細胞調節多肽，其中(i)該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，及(ii)該第一連接子包含序列CGGGS(SEQ ID NO：141)、GCGGS(SEQ ID NO：139)、GGCGS(SEQ ID NO：587)、GGGCS(SEQ ID NO：588)或GGGGC(SEQ ID NO：590)，且二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接。
態樣17.態樣16之T細胞調節多肽，其中該第一連接子包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1-10之整數，例如2或3。
態樣18.態樣1-17中任一項之T細胞調節多肽，其中二硫鍵將存在於該MHC重鏈多肽中之兩個Cys殘基連接。
態樣19.態樣1-18中任一項之T細胞調節多肽，其中該MHC重鏈多肽包含：a)與圖7A中所描繪之HLA-A*0101、HLA-A*0201、HLA-A*1101、HLA-A*2301、HLA-A*2402、HLA-A*2407、HLA-A*3303或HLA-A*3401胺基酸序列具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；或 b)與圖8A中所描繪之HLA-B*0702、HLA-B*0801、HLA-B*1502、HLA-B*3802、HLA-B*4001、HLA-B*4601或HLA-B*5301胺基酸序列具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；或c)與圖9A中所描繪之HLA-C*0102、HLA-C*0303、HLA-C*0304、HLA-C*0401、HLA-C*0602、HLA-C*0701、HLA-C*0702、HLA-C*0801或HLA-C*1502具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣20.態樣19之T細胞調節多肽，其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣21.態樣1-20中任一項之T細胞調節多肽，其中該至少一個免疫調節多肽為活化免疫調節多肽之野生型或變異體。
態樣22.態樣1-21中任一項之T細胞調節多肽，其中該至少一個免疫調節多肽為選自由IL-2多肽、4-1BBL多肽、CD80多肽、CD86多肽或其組合組成之群的活化免疫調節多肽之野生型或變異體。
態樣23.態樣1-22中任一項之T細胞調節多肽，其中該至少一個免疫調節多肽中之至少一者為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對同源共刺激多肽之親和力相比，該變異體免疫調節多肽對該同源共刺激多肽展現降低之親和力。
態樣24.態樣21-23中任一項之T細胞調節多肽，其中該至少一個免疫調節多肽為實質上不結合至IL-2Rα且對IL-2Rβ具有降低之親和力的IL-2變異體。
態樣25.態樣24之T細胞調節多肽，其中該變異體IL-2多肽包含：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
態樣26.態樣1-25中任一項之T細胞調節多肽，其中該多肽包含至少兩個免疫調節多肽，且其中該等免疫調節多肽中之至少兩者為相同的。
態樣27.態樣25或26中任一項之T細胞調節多肽，其中該2種或更多種免疫調節多肽為串聯的。
態樣28.態樣27之T細胞調節多肽，其包含兩個串聯之變異體IL-2多肽，每一者包含i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
態樣29.態樣1-28中任一項之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為至少4個胺基酸長度之肽，例如，4個胺基酸至約25個胺基酸(例如，4個胺基酸(aa)、5 aa、6 aa、7 aa、8 aa、9 aa、10 aa、11 aa、12 aa、13 aa、14 aa、15 aa、16 aa、17 aa、18 aa、19 aa、20 aa、21 aa、22 aa、23 aa、24 aa或25 aa，包括長度在4至20個胺基酸、6至18個胺基酸、8至15個胺基酸、8至12個胺基酸、5至10個胺基酸、9-10個胺基酸、10至20個胺基酸及15至25個胺基酸之範圍內)。
態樣30.態樣29之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組成之群的序列：VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)、VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)、VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)、VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)及VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；且其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
態樣31.態樣29之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組成之群的序列：VVVGAGDVGK(SEQ ID NO：188)；VVGAGDVGK(SEQ ID NO：189)；VVVGARGVGK(SEQ ID NO：190)；及VVGARGVGK(SEQ ID NO：191)；且其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
態樣32.態樣29之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組成之群的序列：LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)、KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)、KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)、LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)、LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)、LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)、FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)、FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)及FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)；且其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
態樣33.態樣29之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組成之群的序列：KLVVVGAGDV(SEQ ID NO：204)；及KLVVVGARGV(SEQ ID NO：205)；其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
態樣34.態樣29之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組成之群的序列：GAGDVGKSAL(SEQ ID NO：206)；AGDVGKSAL(SEQ ID NO：207)；DVGKSALTI(SEQ ID NO：208)；GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)；AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)；YKLVVVGAV(SEQ ID NO：211)；ARGVGKSAL(SEQ ID NO：212)；GARGVGKSAL(SEQ ID NO：213)；EYKLVVVGAR(SEQ ID NO：214)；RGVGKSALTI(SEQ ID NO：215)；LVVVGARGV(SEQ ID NO：216)；GADGVGKSAL(SEQ ID NO：217)；ACGVGKSAL(SEQ ID NO：218)；及GACGVGKSAL(SEQ ID NO：219)；其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
態樣35.態樣29之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組 成之群的序列：VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VGAVGVGKS(SEQ ID NO：222)、VGAVGVGKSA(SEQ ID NO：223)、AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)、AVGVGKSALT(SEQ ID NO：225)、GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)、GAVGVGKSA(SEQ ID NO：227)、LVVVGAVGVG(SEQ ID NO：228)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)及KLVVVGAVG(SEQ ID NO：231)；其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
態樣36.態樣29-35中任一項之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為9或10個胺基酸長度之肽。
態樣37.態樣36之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)或VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且長度為9個胺基酸。
態樣38.態樣36之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)或VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)，且長度為10個胺基酸。
態樣39.態樣36之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)或VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)，且長度為9個胺基酸。
態樣40.態樣36之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)或VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)，且長度為10個胺基酸。
態樣41.態樣32之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A*0201多肽 具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣42.態樣32之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣43.態樣37之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣44.根據態樣1-43中任一項之異二聚T細胞調節多肽，其包含：a)包含以下之第一多肽：i)包含於癌細胞上表現之KRAS抗原決定基之KRAS肽，其中該KRAS肽之長度為至少4個胺基酸；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b)I類MHC重鏈多肽，及c)至少一個免疫調節多肽，其中該第一多肽及/或該第二多肽包含該免疫調節多肽。
態樣45.態樣44之異二聚T細胞調節多肽，其中：a1)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b1)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)I類MHC重鏈多肽；及iii)Ig Fc多肽；或a2)該第一多肽自N端至C端依次包含： i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b2)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)至少一個免疫調節多肽；及iii)免疫球蛋白(Ig)Fc多肽；或a3)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b3)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；或a4)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)該KRAS肽；及iii)β2-微球蛋白多肽；及b4)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽；或a5)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；ii)β2-微球蛋白多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；及 b5)該第二多肽包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽。
態樣46.態樣45之異二聚T細胞調節多肽，其中：a1)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b1)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)I類MHC重鏈多肽；及iii)Ig Fc多肽；或a3)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b3)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；且其中該Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，視情況包含圖3G之胺基酸序列，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)之第一連接子連接至該KRAS肽，其中n為1-10之整數，例如2或3，其中該MHC重鏈多肽包含殘基84處之Cys及殘基236處之Cys， 其中該β2M多肽包含殘基12處之Cys，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，其中二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接，其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中該至少一個免疫調節多肽為包含以下之IL-2變異體：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代，且其中該多肽包含兩個相同、串聯且包含IL-2變異體之免疫調節多肽，該IL-2變異體包含i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
態樣47.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)或VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且長度為9個胺基酸。
態樣48.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)或VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)，且長度為10個胺基酸。
態樣49.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)或VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)，且長度為9個胺基酸。
態樣50.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)或VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)，且長度為10個胺基酸。
態樣51.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為 KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A*0201多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣52.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣53.態樣46之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣54.根據態樣1-43中任一項之單鏈T細胞調節多肽，其包含：i)包含於癌細胞上表現之KRAS抗原決定基之KRAS肽，其中該KRAS肽之長度為至少4個胺基酸；ii)β2-微球蛋白多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；及iv)至少一個免疫調節多肽。
態樣55.態樣54之單鏈T細胞調節多肽，其自N端至C端依次包含：A)i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；iv)一或多個免疫調節多肽；及v)Ig Fc多肽；或B)i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；iv)Ig Fc多肽；及v)一或多個免疫調節多肽；或C)i)一或多個免疫調節多肽；ii)KRAS肽；iii)β2M多肽；iv)I類MHC重鏈多肽；及v)Ig Fc多肽。
態樣56.態樣55之單鏈T細胞調節多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；iv)Ig Fc多肽；及v)一或多個免疫調節多肽， 其中該Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，視情況包含圖3G之胺基酸序列，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)之第一連接子連接至該KRAS肽，其中n為1-10之整數，例如2或3，其中該MHC重鏈多肽包含殘基84處之Cys及殘基236處之Cys，其中該β2M多肽包含殘基12處之Cys，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，其中二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接，其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中該β2M多肽係由(GGGGS)n(SEQ ID NO：377)連接子連接至該MHC重鏈多肽，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，例如n=3或7，其中該至少一個免疫調節多肽為包含以下之IL-2變異體：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代，且其中該多肽包含兩個相同、串聯且包含IL-2變異體之免疫調節多肽，該IL-2變異體包含i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
態樣57.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)或VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且長度為9個胺基酸。
態樣58.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)或 VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)，且長度為10個胺基酸。
態樣59.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)或VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)，且長度為9個胺基酸。
態樣60.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽具有胺基酸序列VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)或VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)，且長度為10個胺基酸。
態樣61.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A*0201多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣62.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣63.態樣56之異二聚T細胞調節多肽，其中該KRAS肽為VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣64.一種T細胞調節多肽，其中該TMP為包含態樣44-53中任一項之第一異二聚體及第二異二聚體之同二聚體，其中該第一異二聚體及該第二異二聚體為相同的且由該第一異二聚體及該第二異二聚體之該等Ig Fc多肽之間的一或多個二硫鍵共價結合。
態樣65.一種T細胞調節多肽，其中該TMP為包含態樣54-63中任一項之第一單鏈TMP及第二單鏈TMP之同二聚體，其中該第一單鏈TMP及該第二單鏈TMP為相同的且由該第一TMP及該第二TMP之該等Ig Fc多肽之間的一或多個二硫鍵共價結合。
態樣66.一種核酸，其包含編碼態樣44-53中任一項之第一多肽或第二多肽之核苷酸序列。
態樣67.一種核酸，其包含編碼態樣54-63中任一項之單鏈TMP之核苷酸序列。
態樣68.一種表現載體，其包含態樣66或67之核酸。
態樣69.一種選擇性地調節對KRAS肽抗原決定基具有特異性之T細胞之活性的方法，該方法包括使該T細胞與根據態樣1-65中任一項之T細胞調節多肽接觸，其中該接觸選擇性地調節該抗原決定基特異性T細胞之活性。
態樣70.一種在患有KRAS相關癌症之患者中治療該癌症之方法，該方法包括向該患者投與有效量之包含根據態樣1-65中任一項之T細胞調節多肽之醫藥組合物。
態樣71.態樣70之方法，其中該癌症為非小細胞肺癌、肺腺癌、黏液腺瘤、胰臟導管癌、結腸直腸癌或白血病。
態樣72.態樣70或71之方法，其中該投與為靜脈內。
態樣73.態樣70-72中任一項之方法，該方法進一步包括向該患者共同投與免疫檢查點抑制劑。
態樣74.態樣73之方法，其中該免疫檢查點抑制劑為對PD-L1、PD-1或CTLA4具有特異性之抗體。
態樣75.態樣70-74中任一項之方法，該方法進一步包括投與KRAS(G12C)抑制劑。
態樣76.一種調節個體之免疫反應之方法，該方法包括向該個體投與有效量之態樣1-65中任一項之T細胞調節多肽，其中該投與誘導抗原決定基特異性T細胞反應及抗原決定基非特異性T細胞反應，其中該抗原決定基特異性T細胞反應與該抗原決定基非特異性T細胞反應之比率為至少2：1。
態樣77.一種將免疫調節多肽選擇性地遞送至靶T細胞之方法，該方法包括使混合T細胞群體與態樣1-65中任一項之T細胞調節多肽接觸，其中該混合T細胞群體包含該靶T細胞及非靶T細胞，其中該靶T細胞對存在於該T細胞調節多肽內之該KRAS抗原決定基具有特異性，且其中該接觸將存在於該T細胞調節多肽內之該一或多個免疫調節多肽遞送至該靶T細胞。
態樣78.一種在獲自個體之混合T細胞群體中偵測結合包含癌症相關突變之KRAS肽之靶T細胞之存在的方法，該方法包括：a)使該混合T細胞群體活體外與態樣1-65中任一項之T細胞調節多肽接觸，其中該T細胞調節多肽包含該肽抗原決定基；及b)偵測對該接觸作出反應之T細胞活化及/或增殖，其中活化及/或增殖之T細胞指示該靶T細胞之存在。
態樣79.一種偵測KRAS特異性T細胞之存在的方法，該方法包括以下步驟：A)使KRAS特異性T細胞與抗原呈現多肽(APP)接觸，該抗原呈現多肽包含：i)包含對KRAS特異性T細胞上之TCR具有特異性之KRAS抗原決定基的KRAS肽；ii)第一主要組織相容性複合物(MHC)多肽；iii)第二MHC多肽；及iv)可偵測標記，及B)偵測該標記之存在。
態樣80.態樣79之方法，其中該接觸步驟在活體內進行。
態樣81.態樣79之方法，其中該接觸步驟在活體外進行。
態樣82.根據態樣79-81中任一項之方法，其中該APP為包含第一多肽及第二多肽之異二聚體，且其中：a1)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及 ii)β2-微球蛋白多肽；及b1)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽；或a3)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b3)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽，其中該Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，視情況包含圖3G之胺基酸序列。
態樣83.根據態樣82之方法，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)之第一連接子連接至該KRAS肽，其中n為1-10之整數，例如2或3，其中該MHC重鏈多肽包含殘基84處之Cys及殘基236處之Cys，其中該β2M多肽包含殘基12處之Cys，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，其中二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接，且其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
態樣84.根據態樣79-81中任一項之方法，其中該APP為包含以下之單鏈多肽：i)KRAS肽；ii)β2-微球蛋白多肽；及iii)I類MHC重鏈多肽。
態樣85.根據態樣84之方法，其中該單鏈APP自N端至C端依次包含：A)i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；及iv)Ig Fc多肽，其中該Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，視情況包含圖3G之胺基酸序列。
態樣86.根據態樣85之方法，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)之第一連接子連接至該KRAS肽，其中n為1-10之整數，例如2或3，其中該MHC重鏈多肽包含殘基84處之Cys及殘基236處之Cys，其中該β2M多肽包含殘基12處之Cys，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，其中二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接，且其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
實例
提出以下實例以便向一般熟習此項技術者提供關於如何製作及使用本發明之完整揭示及描述，而不欲限制本發明者認為其發明之範疇，亦不欲表示 以下實驗為進行之所有或僅有實驗。已盡力確保所用數值(例如量、溫度等)之準確性，但應考慮到一些實驗誤差及偏差。除非另有指示，否則份為重量份，分子量為重量平均分子量，溫度為攝氏度，且壓力為大氣壓或接近大氣壓。可使用標準縮寫，例如，bp，鹼基對；kb，千鹼基；pl，皮升；s或sec，秒；min，分鐘；h或hr，小時；aa，胺基酸；kb，千鹼基；bp，鹼基對；nt，核苷酸；i.m.，肌內；i.p.，腹膜內；s.c.，皮下(ly)；及類似縮寫。
實例1：產生KRAS G12V特異性HLA-A11+T細胞及評估其對KRAS G12V HLA-A11 TMP作出反應之擴充
自HLA-A11+供體產生T細胞受體(TCR)轉導之初級人類T細胞。TCR對KRAS G12V(7-16)肽作出反應。評估包含KRAS G12V(7-16)及HLA-A11之TMP擴充KRAS G12V(7-16)特異性、TCR轉導之CD8+ T細胞之能力。
材料與方法
使用以下TMP：(i)TMP 4074(單鏈；包含G12V(7-16)作為肽抗原決定基)；(ii)TMP 4073(單鏈；包含G12D(7-16)作為肽抗原決定基)；(iii)TMP 4072-4030(分裂鏈，包含構築體4072及構築體4030之異二聚體；且包含G12V(7-16)作為肽抗原決定基)；及(iv)TMP 4072-4029(分裂鏈，包含構築體4072及構築體4029之異二聚體；且包含G12D(7-16)作為肽抗原決定基)。TMP包括HLA-A*11：01對偶基因重鏈；β2M多肽；KRAS G12V(7-16)或KRAS G12D(7-16)作為肽抗原決定基；親和力減弱之IL-2變異體(IL-2(H16A；F42A))；及人類免疫球蛋白G1(IgG1)片段可結晶(Fc)多肽。
G12D(7-16)肽抗原決定基具有胺基酸序列：VVVGAD GVGK(SEQ ID NO：179)。G12V(7-16)肽抗原決定基具有胺基酸序列：VVVGAV GVGK(SEQ ID NO：180)。
4072-4029 TMP為兩個異二聚體之同二聚體，各異二聚體包含：a) 4029多肽(圖14K)，其為包括以下之「輕鏈」多肽：i)G12D(7-16)肽；ii)GCGGS(GGGS)2)(SEQ ID NO：584)連接子；及iii)包含R12C取代之β2M多肽；及b)4072多肽(圖13L)，其為包括以下之「重鏈」多肽：i)具有Y84C及A236C取代之HLA-A*11：01對偶基因重鏈；ii)具有L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽；及iii)IL2(H16A；E42A)之兩個複本。重鏈及輕鏈多肽係由在以下兩者之間形成的兩個二硫鍵連接：i)GCGGS(GGGGS)2(SEQ ID NO：585)連接子中之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之Y84C取代形成之Cys；及ii)由β2M多肽中之R12C取代形成之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之A236C取代形成之Cys。4072-4029 TMP為由各別IgG1 Fc區之間形成之二硫鍵連接的異二聚體之兩個複本之同二聚體。4072-4029 TMP在圖20中稱作「分鏈鏈G12D TMP」。
4072-4030 TMP為兩個異二聚體之同二聚體，各異二聚體包含：a)4030多肽(圖14Q)，其包括：i)G12V(7-16)肽；ii)GCGGS(GGGS)2)(SEQ ID NO：584)連接子；及iii)包含R12C取代之β2M多肽；及b)4072多肽(圖13L)，其為包括以下之「重鏈」多肽：i)具有Y84C及A236C取代之HLA-A*11：01對偶基因重鏈；ii)具有L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽；及iii)IL2(H16A；F42A)之兩個複本。重鏈及輕鏈多肽係由在以下兩者之間形成的兩個二硫鍵連接：i)GCGGS(GGGGS)2(SEQ ID NO：585)連接子中之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之Y84C取代形成之Cys；及ii)由β2M多肽中之R12C取代形成之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之A236C取代形成之Cys。4072-4030 TMP為由各別IgG1 Fc區之間形成之二硫鍵連接的異二聚體之兩個複本之同二聚體。4072-4030 TMP在圖20中稱作「分裂鏈G12V TMP」。
4073 TMP為兩個單鏈多肽之同二聚體，各單鏈多肽(圖19B中所描繪)包含：i)G12D(7-16)肽；ii)GCGGS(GGGGS)2(SEQ ID NO：585)連接子；iii)β2M(R12C)多肽；iv)具有Y84C及A236C取代之HLA-A*11：01對偶基因重鏈；v)具有 L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽；及vi)IL2(H16A；F42A)之兩個複本。兩個單鏈多肽中之每一個可包括在以下兩者之間形成的鏈內二硫鍵：i)GCGGS(GGGGS)2(SEQ ID NO：585)連接子中之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之Y84C取代形成之Cys；及ii)由β2M多肽中之R12C取代形成之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之A236C取代形成之Cys。兩個單鏈多肽係經由在各別單鏈多肽中之IgG1 Fc多肽之間形成的二硫鍵彼此經二硫鍵鍵結。4073 TMP在圖20中稱作「單鏈G12D TMP」。
4074 TMP為兩個單鏈多肽之同二聚體，各單鏈多肽(圖19C中所描繪)包含：i)G12V(7-16)肽；ii)GCGGS(GGGGS)2(SEQ ID NO：585)連接子；iii)β2M(R12C)多肽；iv)具有Y84C及A236C取代之HLA-A*11：01對偶基因重鏈；v)具有L234A及L235A取代之IgG1 Fc多肽；及vi)IL2(H16A；F42A)之兩個複本。兩個單鏈多肽中之每一個可包括在以下兩者之間形成的鏈內二硫鍵：i)GCGGS(GGGGS)2(SEQ ID NO：585)連接子中之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之Y84C取代形成之Cys；及ii)由β2M多肽中之R12C取代形成之Cys與由HLA-A*11.01重鏈多肽中之A236C取代形成之Cys。兩個單鏈多肽係經由在各別單鏈多肽中之IgG1 Fc多肽之間形成的二硫鍵彼此經二硫鍵鍵結。4074 TMP在圖20中稱作「單鏈G12V TMP」。
用對KRAS G12V(7-16)具有特異性之TCR轉導HLA-A11+ 人類健康供體CD8+ T細胞。在自體周邊血液單核細胞(PBMC)作為飼養細胞存在下，用含有KRAS G12V(7-16)作為肽抗原決定基或含有KRAS G12D(7-16)作為肽抗原決定基之TMP刺激經轉導之CD8+ T細胞。使用對TCR(工程改造為TCR)之小鼠恆定區具有特異性之抗體監測TCR轉導之T細胞之擴充，且藉由流式細胞術進行評估。
結果
如圖20 中所描繪，在10天活體外檢定中，KRAS G12V(7-16)HLA-A11 TMP可依劑量依賴性方式擴充KRAS G12V(7-16)特異性CD8+ T細胞，呈CD8+ T細胞之百分比(上圖)及呈抗原特異性細胞之總數(下圖)。作用為抗原決定基特異性的，此係因為包含KRAS G12D(7-16)之對照TMP不依劑量依賴性方式誘導擴充。
儘管已參考本發明之特定實施例來描述本發明，但熟習此項技術者應瞭解，在不脫離本發明之真正精神及範疇之情況下，可作出各種改變且可用等效物替代。另外，可作出許多修改以使特定情形、材料、物質組成、過程、一或多個過程步驟適於本發明之目的、精神及範疇。所有此類修改意欲處於隨附申請專利範圍之範疇內。
<110> 美商庫爾生物製藥有限公司(Cue Biopharma,Inc.)
<120> T細胞調節多肽及其使用方法
<130> CUEB-126W0
<140> TW109132369
<141> 2020-09-18
<150> US 62/903,441
<151> 2019-09-20
<150> US 62/990,693
<151> 2020-03-17
<150> US 63/048,561
<151> 2020-07-06
<160> 602
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 188
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
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<211> 189
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
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<213> 智人(Homo sapiens)
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 4
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Figure 109132369-A0304-12-0145-22
Figure 109132369-A0304-12-0146-23
<210> 5
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 5
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<210> 6
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 6
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 7
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Figure 109132369-A0304-12-0149-29
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<213> 智人(Homo sapiens)
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<213> 智人(Homo sapiens)
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<213> 智人(Homo sapiens)
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 11
Figure 109132369-A0304-12-0153-36
Figure 109132369-A0304-12-0154-37
<210> 12
<211> 175
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 12
Figure 109132369-A0304-12-0154-38
Figure 109132369-A0304-12-0155-40
<210> 13
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<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 13
Figure 109132369-A0304-12-0155-39
Figure 109132369-A0304-12-0156-41
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<213> 智人(Homo sapiens)
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Figure 109132369-A0304-12-0156-42
Figure 109132369-A0304-12-0157-43
Figure 109132369-A0304-12-0158-44
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<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 15
Figure 109132369-A0304-12-0158-45
Figure 109132369-A0304-12-0159-225
<210> 16
<211> 251
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 16
Figure 109132369-A0304-12-0159-224
Figure 109132369-A0304-12-0160-226
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<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 17
Figure 109132369-A0304-12-0160-227
Figure 109132369-A0304-12-0161-228
Figure 109132369-A0304-12-0162-229
Figure 109132369-A0304-12-0163-230
<210> 18
<211> 347
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 18
Figure 109132369-A0304-12-0164-231
Figure 109132369-A0304-12-0165-232
<210> 19
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 19
Figure 109132369-A0304-12-0166-233
Figure 109132369-A0304-12-0167-235
<210> 20
<211> 325
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
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Figure 109132369-A0304-12-0167-234
Figure 109132369-A0304-12-0168-236
Figure 109132369-A0304-12-0169-237
<210> 21
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 21
Figure 109132369-A0304-12-0170-238
Figure 109132369-A0304-12-0171-239
<210> 22
<211> 383
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 22
Figure 109132369-A0304-12-0171-240
Figure 109132369-A0304-12-0172-241
Figure 109132369-A0304-12-0173-242
<210> 23
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 23
Figure 109132369-A0304-12-0174-243
Figure 109132369-A0304-12-0175-244
<210> 24
<211> 353
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 24
Figure 109132369-A0304-12-0175-245
Figure 109132369-A0304-12-0176-246
Figure 109132369-A0304-12-0177-247
<210> 25
<211> 222
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 25
Figure 109132369-A0304-12-0178-248
Figure 109132369-A0304-12-0179-249
<210> 26
<211> 327
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 26
Figure 109132369-A0304-12-0179-250
Figure 109132369-A0304-12-0180-251
Figure 109132369-A0304-12-0181-252
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
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<223> 合成序列
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Figure 109132369-A0304-12-0181-253
Figure 109132369-A0304-12-0182-254
Figure 109132369-A0304-12-0183-255
<210> 28
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 28
Figure 109132369-A0304-12-0183-256
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<210> 29
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 29
Figure 109132369-A0304-12-0185-258
Figure 109132369-A0304-12-0186-259
<210> 30
<211> 227
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 30
Figure 109132369-A0304-12-0186-260
Figure 109132369-A0304-12-0187-261
<210> 31
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<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 31
Figure 109132369-A0304-12-0188-262
<210> 32
<211> 119
<212> PRT
<213> 恆河獼猴(Macaca mulatta)
<400> 32
Figure 109132369-A0304-12-0189-264
<210> 33
<211> 118
<212> PRT
<213> 歐洲牛(Bos Taurus)
<400> 33
Figure 109132369-A0304-12-0189-263
Figure 109132369-A0304-12-0190-265
<210> 34
<211> 119
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<213> 小鼠(Mus musculus)
<400> 34
Figure 109132369-A0304-12-0190-266
Figure 109132369-A0304-12-0191-267
<210> 35
<211> 365
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 35
Figure 109132369-A0304-12-0191-268
Figure 109132369-A0304-12-0192-269
Figure 109132369-A0304-12-0193-270
<210> 36
<211> 365
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 36
Figure 109132369-A0304-12-0194-271
Figure 109132369-A0304-12-0195-272
Figure 109132369-A0304-12-0196-273
<210> 37
<211> 365
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 37
Figure 109132369-A0304-12-0196-274
Figure 109132369-A0304-12-0197-275
Figure 109132369-A0304-12-0198-276
<210> 38
<211> 365
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 38
Figure 109132369-A0304-12-0198-277
Figure 109132369-A0304-12-0199-278
Figure 109132369-A0304-12-0946-2430
Figure 109132369-A0304-12-0947-2431
Figure 109132369-A0304-12-0200-279
<210> 39
<211> 362
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 39
Figure 109132369-A0304-12-0200-280
Figure 109132369-A0304-12-0201-281
Figure 109132369-A0304-12-0202-282
<210> 40
<211> 366
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 40
Figure 109132369-A0304-12-0203-283
Figure 109132369-A0304-12-0204-284
Figure 109132369-A0304-12-0205-285
<210> 41
<211> 275
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 41
Figure 109132369-A0304-12-0205-286
Figure 109132369-A0304-12-0206-287
<210> 42
<211> 275
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 42
Figure 109132369-A0304-12-0207-288
Figure 109132369-A0304-12-0208-289
<210> 43
<211> 275
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 43
Figure 109132369-A0304-12-0208-290
Figure 109132369-A0304-12-0209-291
Figure 109132369-A0304-12-0210-292
<210> 44
<211> 276
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 44
Figure 109132369-A0304-12-0210-293
Figure 109132369-A0304-12-0211-294
Figure 109132369-A0304-12-0212-295
<210> 45
<211> 274
<212> PRT
<213> 小鼠(Mus musculus)
<400> 45
Figure 109132369-A0304-12-0212-296
Figure 109132369-A0304-12-0213-297
<210> 46
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 46
Figure 109132369-A0304-12-0214-298
Figure 109132369-A0304-12-0215-299
<210> 47
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 47
Figure 109132369-A0304-12-0216-300
Figure 109132369-A0304-12-0217-301
<210> 48
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 48
Figure 109132369-A0304-12-0218-302
Figure 109132369-A0304-12-0219-303
<210> 49
<211> 276
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 49
Figure 109132369-A0304-12-0219-304
Figure 109132369-A0304-12-0220-305
Figure 109132369-A0304-12-0221-306
<210> 50
<211> 276
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 50
Figure 109132369-A0304-12-0221-307
Figure 109132369-A0304-12-0222-308
Figure 109132369-A0304-12-0223-309
<210> 51
<211> 276
<212> PRT
<213> 智人(Homo sapiens)
<400> 51
Figure 109132369-A0304-12-0223-310
Figure 109132369-A0304-12-0224-311
<210> 52
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 52
Figure 109132369-A0304-12-0225-312
Figure 109132369-A0304-12-0226-313
<210> 53
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 53
Figure 109132369-A0304-12-0227-314
Figure 109132369-A0304-12-0228-315
<210> 54
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 54
Figure 109132369-A0304-12-0229-316
Figure 109132369-A0304-12-0230-317
<210> 55
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 55
Figure 109132369-A0304-12-0230-318
Figure 109132369-A0304-12-0231-319
Figure 109132369-A0304-12-0232-320
<210> 56
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 56
Figure 109132369-A0304-12-0232-321
Figure 109132369-A0304-12-0233-322
Figure 109132369-A0304-12-0234-323
<210> 57
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 57
Figure 109132369-A0304-12-0234-324
Figure 109132369-A0304-12-0235-325
Figure 109132369-A0304-12-0236-326
<210> 58
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 58
Figure 109132369-A0304-12-0236-327
Figure 109132369-A0304-12-0237-328
Figure 109132369-A0304-12-0238-329
<210> 59
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 59
Figure 109132369-A0304-12-0238-330
Figure 109132369-A0304-12-0239-331
<210> 60
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 60
Figure 109132369-A0304-12-0240-332
Figure 109132369-A0304-12-0241-333
<210> 61
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> Misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> X為苯丙胺酸、酪胺酸、絲胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (44)..(44)
<223> X為離胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (62)..(62)
<223> X為麩醯胺、甘胺酸、麩胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (63)..(63)
<223> X為天冬醯胺或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (65)..(65)
<223> X為精胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> X為天冬醯胺或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (67)..(67)
<223> X為甲硫胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> X為組胺酸或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (73)..(73)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (74)..(74)
<223> X為天冬胺酸或組胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (76)..(76)
<223> X為丙胺酸、纈胺酸或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> X為天冬醯胺或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (79)..(79)
<223> X為甘胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (80)..(80)
<223> X為蘇胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (81)..(81)
<223> X為白胺酸或丙胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> X為精胺酸或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (83)..(83)
<223> X為甘胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (90)..(20)
<223> X為丙胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> X為異白胺酸、白胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> X為異白胺酸、精胺酸或甲硫胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> X為苯丙胺酸或酪胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (105)..(105)
<223> X為絲胺酸或脯胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (107)..(107)
<223> X為色胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (114)..(114)
<223> X為精胺酸、組胺酸或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (116)..(116)
<223> X為天冬胺酸或酪胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> X為天冬醯胺或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (142)..(142)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (144)..(144)
<223> X為離胺酸或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (145)..(145)
<223> X為精胺酸或組胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (149)..(149)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (150)..(150)
<223> X為丙胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (151)..(151)
<223> X為組胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (156)..(156)
<223> X為精胺酸、白胺酸、麩醯胺或色胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (158)..(158)
<223> X為纈胺酸或丙胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (161)..(161)
<223> X為天冬胺酸或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> X為精胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (166)..(166)
<223> X為天冬胺酸或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (167)..(167)
<223> X為色胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (184)..(184)
<223> X為脯胺酸或丙胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (193)..(193)
<223> X為脯胺酸或丙胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (194)..(194)
<223> X為纈胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (207)..(207)
<223> X為絲胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (246)..(246)
<223> X為丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (253)..(253)
<223> X為麩醯胺或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (276)..(276)
<223> X為脯胺酸或白胺酸
<400> 61
Figure 109132369-A0304-12-0247-334
Figure 109132369-A0304-12-0248-335
<210> 62
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 62
Figure 109132369-A0304-12-0249-336
Figure 109132369-A0304-12-0250-337
<210> 63
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 63
Figure 109132369-A0304-12-0250-338
Figure 109132369-A0304-12-0251-339
Figure 109132369-A0304-12-0252-340
<210> 64
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 64
Figure 109132369-A0304-12-0252-341
Figure 109132369-A0304-12-0253-342
Figure 109132369-A0304-12-0254-343
<210> 65
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 65
Figure 109132369-A0304-12-0254-344
Figure 109132369-A0304-12-0255-345
Figure 109132369-A0304-12-0256-346
<210> 66
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 66
Figure 109132369-A0304-12-0256-347
Figure 109132369-A0304-12-0257-348
Figure 109132369-A0304-12-0258-349
<210> 67
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 67
Figure 109132369-A0304-12-0258-350
Figure 109132369-A0304-12-0259-351
<210> 68
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 68
Figure 109132369-A0304-12-0260-352
Figure 109132369-A0304-12-0261-353
<210> 69
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> Misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> X為組胺酸、酪胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (11)..(11)
<223> X為丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (12)..(12)
<223> X為甲硫胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> X為丙胺酸、絲胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (32)..(32)
<223> X為麩醯胺或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (41)..(41)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> X為麩胺酸、甲硫胺酸、離胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (46)..(46)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (63)..(63)
<223> X為麩胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> X為異白胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (67)..(67)
<223> X為酪胺酸、苯丙胺酸、絲胺酸或胱胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> X為天冬醯胺或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (71)..(71)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (74)..(74)
<223> X為天冬胺酸或酪胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (76)..(76)
<223> X為麩胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> X為絲胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (80)..(80)
<223> X為蘇胺酸、天冬醯胺或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (81)..(81)
<223> X為丙胺酸或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> X為白胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (83)..(83)
<223> X為精胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (94)..(94)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> X為白胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> X為精胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> X為精胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (143)..(143)
<223> X為S或T
<220>
<221> Misc_feature
<222> (147)..(147)
<223> X為L或W
<220>
<221> misc_feature
<222> (152)..(152)
<223> Xaa為E或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (156)..(156)
<223> Xaa為R、D、L
<220>
<221> misc_feature
<222> (158)..(158)
<223> Xaa A或T
<220>
<221> Misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> X為白胺酸、麩胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (177)..(177)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (178)..(178)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (180)..(180)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (194)..(194)
<223> X為異白胺酸或纈胺酸
<400> 69
Figure 109132369-A0304-12-0265-354
Figure 109132369-A0304-12-0266-355
Figure 109132369-A0304-12-0267-356
<210> 70
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 70
Figure 109132369-A0304-12-0267-357
Figure 109132369-A0304-12-0268-358
Figure 109132369-A0304-12-0269-359
<210> 71
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 71
Figure 109132369-A0304-12-0269-360
Figure 109132369-A0304-12-0270-361
Figure 109132369-A0304-12-0271-362
<210> 72
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 72
Figure 109132369-A0304-12-0271-363
Figure 109132369-A0304-12-0272-364
Figure 109132369-A0304-12-0273-365
<210> 73
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 73
Figure 109132369-A0304-12-0273-366
Figure 109132369-A0304-12-0274-367
Figure 109132369-A0304-12-0275-368
<210> 74
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 74
Figure 109132369-A0304-12-0275-369
Figure 109132369-A0304-12-0276-370
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<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 75
Figure 109132369-A0304-12-0277-371
Figure 109132369-A0304-12-0278-372
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<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
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Figure 109132369-A0304-12-0279-373
Figure 109132369-A0304-12-0280-375
<210> 77
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
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Figure 109132369-A0304-12-0280-374
Figure 109132369-A0304-12-0281-376
Figure 109132369-A0304-12-0282-377
<210> 78
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 78
Figure 109132369-A0304-12-0282-378
Figure 109132369-A0304-12-0283-379
Figure 109132369-A0304-12-0284-380
<210> 79
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> Misc_feature
<222> (1)..(1)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (6)..(6)
<223> X為精胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> X為苯丙胺酸、酪胺酸、絲胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (14)..(14)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (21)..(21)
<223> X為組胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (24)..(24)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (35)..(35)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (49)..(49)
<223> X為丙胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (66)..(66)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (73)..(73)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> X為絲胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (80)..(80)
<223> X為天冬醯胺或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> X為丙胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> X為甘胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (94)..(94)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> X為白胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> X為色胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> X為半胱胺酸、酪胺酸、苯丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (103)..(103)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (113)..(113)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (114)..(114)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (116)..(116)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (147)..(147)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (152)..(152)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (156)..(156)
<223> X為精胺酸、白胺酸或色胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> X為白胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (173)..(173)
<223> X為麩胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (177)..(177)
<223> X為麩胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (184)..(184)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (194)..(194)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (219)..(219)
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<220>
<221> Misc_feature
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (253)..(253)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (261)..(261)
<223> X為甲硫胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (267)..(267)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (273)..(273)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (275)..(275)
<223> X為脯胺酸或甘胺酸
<400> 79
Figure 109132369-A0304-12-0288-381
Figure 109132369-A0304-12-0289-382
Figure 109132369-A0304-12-0290-383
<210> 80
<211> 284
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (89)..(89)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (107)..(107)
<223> Xaa為R或G
<220>
<221> misc_feature
<222> (157)..(157)
<223> Xaa為R或G
<220>
<221> misc_feature
<222> (158)..(158)
<223> Xaa為A或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (255)..(255)
<223> Xaa為Q或P
<220>
<221> misc_feature
<222> (267)..(267)
<223> Xaa為P或S
<400> 80
Figure 109132369-A0304-12-0291-384
Figure 109132369-A0304-12-0292-385
<210> 81
<211> 284
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(7)
<223> Xaa為Y或F
<220>
<221> misc_feature
<222> (50)..(50)
<223> Xaa為P或Q
<220>
<221> misc_feature
<222> (251)..(251)
<223> Xaa為S或P
<220>
<221> misc_feature
<222> (278)..(278)
<223> Xaa為P或L
<400> 81
Figure 109132369-A0304-12-0293-386
Figure 109132369-A0304-12-0294-387
Figure 109132369-A0304-12-0295-388
<210> 82
<211> 284
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (13)..(13)
<223> Xaa為S或F
<220>
<221> misc_feature
<222> (27)..(27)
<223> Xaa為Y或H
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa為T、S或M
<220>
<221> misc_feature
<222> (34)..(34)
<223> Xaa為L或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa為Q或R
<220>
<221> misc_feature
<222> (81)..(81)
<223> Xaa為P或L
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為G或D
<220>
<221> misc_feature
<222> (104)..(104)
<223> Xaa為G或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (105)..(105)
<223> Xaa為S或C
<220>
<221> misc_feature
<222> (110)..(110)
<223> Xaa為L或I
<220>
<221> misc_feature
<222> (159)..(159)
<223> Xaa為Y或H
<220>
<221> misc_feature
<222> (169)..(169)
<223> Xaa為H或R
<220>
<221> misc_feature
<222> (171)..(171)
<223> Xaa為Y或H
<220>
<221> misc_feature
<222> (178)..(178)
<223> Xaa為M或T
<220>
<221> misc_feature
<222> (185)..(185)
<223> Xaa為P或A
<220>
<221> misc_feature
<222> (219)..(219)
<223> Xaa為R、W或Q
<220>
<221> misc_feature
<222> (258)..(258)
<223> Xaa為T或M
<220>
<221> misc_feature
<222> (275)..(275)
<223> Xaa為K或E
<400> 82
Figure 109132369-A0304-12-0297-389
Figure 109132369-A0304-12-0298-390
Figure 109132369-A0304-12-0299-391
<210> 83
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> Misc_feature
<222> (9)..(9)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (44)..(44)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (62)..(62)
<223> X為麩醯胺、甘胺酸、麩胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (63)..(63)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (65)..(65)
<223> X為精胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> X為天冬醯胺或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (67)..(67)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> X為組胺酸或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (73)..(73)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (74)..(74)
<223> X為天冬胺酸或組胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (76)..(76)
<223> X為丙胺酸、纈胺酸或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> X為天冬醯胺或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (79)..(79)
<223> X為甘胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (80)..(80)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (81)..(81)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> X為精胺酸或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (83)..(83)
<223> X為甘胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (90)..(90)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (95)..(95)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> X為異白胺酸、精胺酸或甲硫胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (99)..(99)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (105)..(105)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (107)..(107)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (114)..(114)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (116)..(116)
<223> X為天冬胺酸或酪胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (127)..(127)
<223> X為天冬醯胺或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (142)..(142)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (144)..(144)
<223> X為離胺酸或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (145)..(145)
<223> X為精胺酸或組胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (149)..(149)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (150)..(150)
<223> X為丙胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (151)..(151)
<223> X為組胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (156)..(156)
<223> X為精胺酸、白胺酸、麩醯胺或色胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (158)..(158)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (161)..(161)
<223> X為天冬胺酸或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> X為精胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (166)..(166)
<223> X為天冬胺酸或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (167)..(167)
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<220>
<221> Misc_feature
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (193)..(193)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (194)..(194)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (207)..(207)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (246)..(246)
<223> X為丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (253)..(253)
<223> X為麩醯胺或麩胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (276)..(276)
<223> X為脯胺酸或白胺酸
<400> 83
Figure 109132369-A0304-12-0304-392
Figure 109132369-A0304-12-0305-393
Figure 109132369-A0304-12-0306-394
<210> 84
<211> 552
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> Misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> X為組胺酸、酪胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (11)..(11)
<223> X為丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (12)..(12)
<223> X為甲硫胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> X為丙胺酸、絲胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (32)..(32)
<223> X為麩醯胺或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (41)..(41)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> X為麩胺酸、甲硫胺酸、離胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (46)..(46)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (63)..(63)
<223> X為麩胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> X為異白胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (67)..(67)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> X為天冬醯胺或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (71)..(71)
<223> X為丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (74)..(74)
<223> X為天冬胺酸或酪胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (76)..(76)
<223> X為麩胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> X為絲胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (80)..(80)
<223> X為蘇胺酸、天冬醯胺或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (81)..(81)
<223> X為丙胺酸或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (82)..(82)
<223> X為白胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (83)..(83)
<223> X為精胺酸或甘胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (94)..(94)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> X為白胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> X為精胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> X為精胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (143)..(143)
<223> X為S或T
<220>
<221> Misc_feature
<222> (147)..(147)
<223> X為L或W
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> X為白胺酸、麩胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (177)..(177)
<223> X為麩胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (178)..(178)
<223> X為離胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (180)..(180)
<223> X為麩胺酸或麩醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (194)..(194)
<223> X為異白胺酸或纈胺酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (285)..(285)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (287)..(288)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (300)..(300)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (308)..(308)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (317)..(317)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (321)..(322)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (339)..(339)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (342)..(343)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (346)..(347)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (350)..(350)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (352)..(353)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (356)..(359)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (370)..(371)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (373)..(373)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (407)..(407)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (419)..(419)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (423)..(423)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (428)..(428)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (432)..(432)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (434)..(434)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (439)..(439)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (453)..(454)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> misc_feature
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<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 84
Figure 109132369-A0304-12-0313-395
Figure 109132369-A0304-12-0314-396
Figure 109132369-A0304-12-0315-397
Figure 109132369-A0304-12-0316-398
<210> 85
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> Misc_feature
<222> (1)..(1)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (6)..(6)
<223> X為精胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (9)..(9)
<223> X為苯丙胺酸、酪胺酸、絲胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (14)..(14)
<223> X為精胺酸或色胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (21)..(21)
<223> X為組胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> X為丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (35)..(35)
<223> X為麩醯胺或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (49)..(49)
<223> X為丙胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (66)..(66)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (73)..(73)
<223> X為蘇胺酸或丙胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> X為絲胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (80)..(80)
<223> X為天冬醯胺或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (90)..(90)
<223> X為丙胺酸或天冬胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> X為甘胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (94)..(94)
<223> X為蘇胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (95)..(95)
<223> X為白胺酸或異白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (97)..(97)
<223> X為色胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (99)..(99)
<223> X為半胱胺酸、酪胺酸、苯丙胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (103)..(103)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (113)..(113)
<223> X為酪胺酸或組胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (114)..(114)
<223> X為天冬胺酸或天冬醯胺
<220>
<221> Misc_feature
<222> (116)..(116)
<223> X為酪胺酸、苯丙胺酸、絲胺酸或白胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (147)..(147)
<223> X為白胺酸或色胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (152)..(152)
<223> X為麩胺酸、丙胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (156)..(156)
<223> X為精胺酸、白胺酸或色胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (163)..(163)
<223> X為白胺酸或蘇胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (173)..(173)
<223> X為麩胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (177)..(177)
<223> X為麩胺酸或離胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (184)..(184)
<223> X為組胺酸或脯胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (194)..(194)
<223> X為精胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (219)..(219)
<223> X為色胺酸或精胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (248)..(248)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (253)..(253)
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<220>
<221> Misc_feature
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<223> X為甲硫胺酸或纈胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (267)..(267)
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<220>
<221> Misc_feature
<222> (273)..(273)
<223> X為精胺酸或絲胺酸
<220>
<221> Misc_feature
<222> (275)..(275)
<223> X為脯胺酸或甘胺酸
<400> 85
Figure 109132369-A0304-12-0320-1290
Figure 109132369-A0304-12-0321-1291
Figure 109132369-A0304-12-0322-1292
<210> 86
<211> 284
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
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<220>
<221> misc_feature
<222> (107)..(107)
<223> Xaa為R或G
<220>
<221> misc_feature
<222> (157)..(157)
<223> Xaa為R或G
<220>
<221> misc_feature
<222> (158)..(158)
<223> Xaa為A或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (255)..(255)
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<220>
<221> misc_feature
<222> (267)..(267)
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<400> 86
Figure 109132369-A0304-12-0323-1293
Figure 109132369-A0304-12-0324-1294
<210> 87
<211> 284
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (7)..(7)
<223> Xaa為Y或F
<220>
<221> misc_feature
<222> (50)..(50)
<223> Xaa為P或Q
<220>
<221> misc_feature
<222> (251)..(251)
<223> Xaa為S或P
<220>
<221> misc_feature
<222> (278)..(278)
<223> Xaa為P或L
<400> 87
Figure 109132369-A0304-12-0325-1295
Figure 109132369-A0304-12-0326-1296
Figure 109132369-A0304-12-0327-1297
<210> 88
<211> 284
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (13)..(13)
<223> Xaa為S或F
<220>
<221> misc_feature
<222> (27)..(27)
<223> Xaa為Y或H
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa為T、S或M
<220>
<221> misc_feature
<222> (34)..(34)
<223> Xaa為L或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa為Q或R
<220>
<221> misc_feature
<222> (81)..(81)
<223> Xaa為P或L
<220>
<221> misc_feature
<222> (100)..(100)
<223> Xaa為G或D
<220>
<221> misc_feature
<222> (104)..(104)
<223> Xaa為G或V
<220>
<221> misc_feature
<222> (105)..(105)
<223> Xaa為S或C
<220>
<221> misc_feature
<222> (110)..(110)
<223> Xaa為L或I
<220>
<221> misc_feature
<222> (159)..(159)
<223> Xaa為Y或H
<220>
<221> misc_feature
<222> (169)..(169)
<223> Xaa為H或R
<220>
<221> misc_feature
<222> (171)..(171)
<223> Xaa為Y或H
<220>
<221> misc_feature
<222> (178)..(178)
<223> Xaa為M或T
<220>
<221> misc_feature
<222> (185)..(185)
<223> Xaa為P或A
<220>
<221> misc_feature
<222> (219)..(219)
<223> Xaa為R、W或Q
<220>
<221> misc_feature
<222> (258)..(258)
<223> Xaa為T或M
<220>
<221> misc_feature
<222> (275)..(275)
<223> Xaa為K或E
<400> 88
Figure 109132369-A0304-12-0329-1298
Figure 109132369-A0304-12-0330-1299
Figure 109132369-A0304-12-0331-1300
<210> 89
<211> 188
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (5)..(5)
<223> Xaa為Lys、Phe或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (7)..(7)
<223> Xaa為Val或Leu
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為Val或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (9)..(9)
<223> Xaa為Val或Thr
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (12)..(12)
<223> Xaa為Gly、Asp、Cys、Val或Ser，其中位置12處之Xaa及位置13處之Xaa中之一或兩者不為Cys
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (13)..(13)
<223> Xaa為Gly、Cys或Asp，其中位置12處之Xaa及位置13處之Xaa中之一或兩者不 為Cys
<400> 89
Figure 109132369-A0304-12-0332-1301
Figure 109132369-A0304-12-0333-1302
<210> 90
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 90
Figure 109132369-A0304-12-0333-1303
<210> 91
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 91
Figure 109132369-A0304-12-0334-1305
<210> 92
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 92
Figure 109132369-A0304-12-0334-1304
<210> 93
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 93
Figure 109132369-A0304-12-0335-1306
<210> 94
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 94
Figure 109132369-A0304-12-0335-1307
<210> 95
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 95
Figure 109132369-A0304-12-0335-1308
Figure 109132369-A0304-12-0336-1311
<210> 96
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 96
Figure 109132369-A0304-12-0336-1310
<210> 97
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 97
Figure 109132369-A0304-12-0336-1309
<210> 98
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 98
Figure 109132369-A0304-12-0337-1312
<210> 99
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 99
Figure 109132369-A0304-12-0337-1313
<210> 100
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 100
Figure 109132369-A0304-12-0337-1314
<210> 101
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 101
Figure 109132369-A0304-12-0338-1317
<210> 102
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 102
Figure 109132369-A0304-12-0338-1316
<210> 103
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 103
Figure 109132369-A0304-12-0338-1315
<210> 104
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 104
Figure 109132369-A0304-12-0339-1318
<210> 105
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 105
Figure 109132369-A0304-12-0339-1319
<210> 106
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 106
Figure 109132369-A0304-12-0339-1320
<210> 107
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 107
Figure 109132369-A0304-12-0340-1322
<210> 108
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 108
Figure 109132369-A0304-12-0340-1321
Figure 109132369-A0304-12-0341-1323
<210> 109
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 109
Figure 109132369-A0304-12-0342-1324
Figure 109132369-A0304-12-0343-1325
<210> 110
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 110
Figure 109132369-A0304-12-0344-1326
Figure 109132369-A0304-12-0345-1327
<210> 111
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 111
Figure 109132369-A0304-12-0345-1328
Figure 109132369-A0304-12-0346-1329
Figure 109132369-A0304-12-0347-1330
<210> 112
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 112
Figure 109132369-A0304-12-0347-1331
Figure 109132369-A0304-12-0348-1332
Figure 109132369-A0304-12-0349-1333
<210> 113
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 113
Figure 109132369-A0304-12-0349-1334
Figure 109132369-A0304-12-0350-1335
Figure 109132369-A0304-12-0351-1336
<210> 114
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 114
Figure 109132369-A0304-12-0351-1337
Figure 109132369-A0304-12-0352-1338
Figure 109132369-A0304-12-0353-1339
<210> 115
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 115
Figure 109132369-A0304-12-0353-1340
Figure 109132369-A0304-12-0354-1341
Figure 109132369-A0304-12-0355-1342
<210> 116
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 116
Figure 109132369-A0304-12-0355-1343
Figure 109132369-A0304-12-0356-1344
<210> 117
<211> 341
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 117
Figure 109132369-A0304-12-0357-1345
Figure 109132369-A0304-12-0358-1346
Figure 109132369-A0304-12-0359-1347
<210> 118
<211> 341
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 118
Figure 109132369-A0304-12-0359-1348
Figure 109132369-A0304-12-0360-1349
Figure 109132369-A0304-12-0361-1350
<210> 119
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 119
Figure 109132369-A0304-12-0361-1351
Figure 109132369-A0304-12-0362-1352
Figure 109132369-A0304-12-0363-1353
<210> 120
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 120
Figure 109132369-A0304-12-0363-1354
Figure 109132369-A0304-12-0364-1355
Figure 109132369-A0304-12-0365-1356
<210> 121
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 121
Figure 109132369-A0304-12-0365-1357
Figure 109132369-A0304-12-0366-1358
<210> 122
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 122
Figure 109132369-A0304-12-0367-1359
Figure 109132369-A0304-12-0368-1360
<210> 123
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 123
Figure 109132369-A0304-12-0369-1361
Figure 109132369-A0304-12-0370-1362
<210> 124
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 124
Figure 109132369-A0304-12-0370-1363
Figure 109132369-A0304-12-0371-1364
Figure 109132369-A0304-12-0372-1365
<210> 125
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 125
Figure 109132369-A0304-12-0372-1366
Figure 109132369-A0304-12-0373-1367
Figure 109132369-A0304-12-0374-1368
<210> 126
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 126
Figure 109132369-A0304-12-0374-1369
Figure 109132369-A0304-12-0375-1370
<210> 127
<211> 246
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (78)..(79)
<223> 1-5個胺基酸殘基存在於殘基之間，其中胺基酸殘基i)獨立地選自任何天然存在(例如編碼)之胺基酸或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (79)..(80)
<223> 1-5個胺基酸殘基存在於殘基之間，其中胺基酸殘基i)獨立地選自任何天然存在(例如編碼)之胺基酸或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (123)..(124)
<223> 1-5個胺基酸殘基存在於殘基之間，其中胺基酸殘基i)獨立地選自任何天然存在(例如編碼)之胺基酸或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (124)..(125)
<223> 1-5個胺基酸殘基存在於殘基之間，其中胺基酸殘基i)獨立地選自任何天然存在(例 如編碼)之胺基酸或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (210)..(211)
<223> 1-5個胺基酸殘基存在於殘基之間，其中胺基酸殘基i)獨立地選自任何天然存在(例如編碼)之胺基酸或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (211)..(212)
<223> 1-5個胺基酸殘基存在於殘基之間，其中胺基酸殘基i)獨立地選自任何天然存在(例如編碼)之胺基酸或ii)除脯胺酸或甘胺酸以外之任何天然存在之胺基酸
<400> 127
Figure 109132369-A0304-12-0376-1371
Figure 109132369-A0304-12-0377-1372
<210> 128
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 128
Figure 109132369-A0304-12-0378-1374
<210> 129
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 129
Figure 109132369-A0304-12-0378-1373
Figure 109132369-A0304-12-0379-1375
<210> 130
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 130
Figure 109132369-A0304-12-0379-1376
Figure 109132369-A0304-12-0380-1377
Figure 109132369-A0304-12-0381-1378
<210> 131
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 131
Figure 109132369-A0304-12-0381-1379
Figure 109132369-A0304-12-0382-1380
Figure 109132369-A0304-12-0383-1381
<210> 132
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 132
Figure 109132369-A0304-12-0383-1382
Figure 109132369-A0304-12-0384-1383
Figure 109132369-A0304-12-0385-1384
<210> 133
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 133
Figure 109132369-A0304-12-0385-1385
<210> 134
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 134
Figure 109132369-A0304-12-0386-1386
Figure 109132369-A0304-12-0387-1387
<210> 135
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 135
Figure 109132369-A0304-12-0388-1389
<210> 136
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 136
Figure 109132369-A0304-12-0388-1388
<210> 137
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 137
Figure 109132369-A0304-12-0389-1390
<210> 138
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 138
Figure 109132369-A0304-12-0389-1391
<210> 139
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 139
Figure 109132369-A0304-12-0390-1394
<210> 140
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次
<400> 140
Figure 109132369-A0304-12-0390-1393
<210> 141
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 141
Figure 109132369-A0304-12-0390-1392
<210> 142
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次
<400> 142
Figure 109132369-A0304-12-0391-1395
<210> 143
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 143
Figure 109132369-A0304-12-0391-1396
Figure 109132369-A0304-12-0392-1397
Figure 109132369-A0304-12-0393-1398
<210> 144
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 144
Figure 109132369-A0304-12-0393-1399
<210> 145
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 145
Figure 109132369-A0304-12-0394-1400
Figure 109132369-A0304-12-0395-1401
<210> 146
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 146
Figure 109132369-A0304-12-0396-1402
Figure 109132369-A0304-12-0397-1403
<210> 147
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 147
Figure 109132369-A0304-12-0398-1404
Figure 109132369-A0304-12-0399-1405
<210> 148
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 148
Figure 109132369-A0304-12-0399-1406
Figure 109132369-A0304-12-0400-1407
Figure 109132369-A0304-12-0401-1408
<210> 149
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 149
Figure 109132369-A0304-12-0401-1409
Figure 109132369-A0304-12-0402-1410
Figure 109132369-A0304-12-0403-1411
<210> 150
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 150
Figure 109132369-A0304-12-0403-1412
Figure 109132369-A0304-12-0404-1413
Figure 109132369-A0304-12-0405-1414
<210> 151
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 151
Figure 109132369-A0304-12-0405-1415
Figure 109132369-A0304-12-0406-1416
Figure 109132369-A0304-12-0407-1417
<210> 152
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 152
Figure 109132369-A0304-12-0407-1418
Figure 109132369-A0304-12-0408-1419
<210> 153
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 153
Figure 109132369-A0304-12-0409-1420
Figure 109132369-A0304-12-0410-1421
<210> 154
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 154
Figure 109132369-A0304-12-0411-1422
Figure 109132369-A0304-12-0412-1423
<210> 155
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 155
Figure 109132369-A0304-12-0412-1424
Figure 109132369-A0304-12-0413-1426
<210> 156
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 156
Figure 109132369-A0304-12-0413-1425
Figure 109132369-A0304-12-0414-1427
Figure 109132369-A0304-12-0415-1428
<210> 157
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 157
Figure 109132369-A0304-12-0415-1429
Figure 109132369-A0304-12-0416-1430
Figure 109132369-A0304-12-0417-1431
<210> 158
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 158
Figure 109132369-A0304-12-0417-1432
Figure 109132369-A0304-12-0418-1433
Figure 109132369-A0304-12-0419-1434
<210> 159
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 159
Figure 109132369-A0304-12-0419-1435
Figure 109132369-A0304-12-0420-1436
<210> 160
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 160
Figure 109132369-A0304-12-0421-1437
Figure 109132369-A0304-12-0422-1438
<210> 161
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 161
Figure 109132369-A0304-12-0423-1439
Figure 109132369-A0304-12-0424-1440
<210> 162
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 162
Figure 109132369-A0304-12-0424-1441
Figure 109132369-A0304-12-0425-1442
Figure 109132369-A0304-12-0426-1443
<210> 163
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 163
Figure 109132369-A0304-12-0426-1444
Figure 109132369-A0304-12-0427-1445
Figure 109132369-A0304-12-0428-1446
<210> 164
<211> 99
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 164
Figure 109132369-A0304-12-0428-1447
Figure 109132369-A0304-12-0429-1449
<210> 165
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 165
Figure 109132369-A0304-12-0429-1448
Figure 109132369-A0304-12-0430-1450
Figure 109132369-A0304-12-0431-1451
<210> 166
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 166
Figure 109132369-A0304-12-0431-1452
Figure 109132369-A0304-12-0432-1453
<210> 167
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 167
Figure 109132369-A0304-12-0433-1454
Figure 109132369-A0304-12-0434-1455
<210> 168
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 168
Figure 109132369-A0304-12-0435-1456
Figure 109132369-A0304-12-0436-1457
<210> 169
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 169
Figure 109132369-A0304-12-0437-1458
Figure 109132369-A0304-12-0438-1459
<210> 170
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 170
Figure 109132369-A0304-12-0438-1460
Figure 109132369-A0304-12-0439-1461
Figure 109132369-A0304-12-0440-1462
<210> 171
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 171
Figure 109132369-A0304-12-0440-1463
Figure 109132369-A0304-12-0441-1464
Figure 109132369-A0304-12-0442-1466
<210> 172
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 172
Figure 109132369-A0304-12-0442-1465
Figure 109132369-A0304-12-0443-1467
Figure 109132369-A0304-12-0444-1468
<210> 173
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 173
Figure 109132369-A0304-12-0444-1469
Figure 109132369-A0304-12-0445-1470
Figure 109132369-A0304-12-0446-1471
<210> 174
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 174
Figure 109132369-A0304-12-0446-1473
<210> 175
<211> 223
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 175
Figure 109132369-A0304-12-0446-1472
Figure 109132369-A0304-12-0447-1474
<210> 176
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 176
Figure 109132369-A0304-12-0448-1475
<210> 177
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 177
Figure 109132369-A0304-12-0448-1476
<210> 178
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 178
Figure 109132369-A0304-12-0448-1477
<210> 179
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 179
Figure 109132369-A0304-12-0449-1478
<210> 180
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 180
Figure 109132369-A0304-12-0449-1479
<210> 181
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 181
Figure 109132369-A0304-12-0449-1480
<210> 182
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 182
Figure 109132369-A0304-12-0450-1483
<210> 183
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 183
Figure 109132369-A0304-12-0450-1482
<210> 184
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 184
Figure 109132369-A0304-12-0450-1481
<210> 185
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 185
Figure 109132369-A0304-12-0451-1484
<210> 186
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 186
Figure 109132369-A0304-12-0451-1486
<210> 187
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 187
Figure 109132369-A0304-12-0451-1485
<210> 188
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 188
Figure 109132369-A0304-12-0452-1487
<210> 189
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 189
Figure 109132369-A0304-12-0452-1488
<210> 190
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 190
Figure 109132369-A0304-12-0452-1489
<210> 191
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 191
Figure 109132369-A0304-12-0453-1492
<210> 192
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 192
Figure 109132369-A0304-12-0453-1490
<210> 193
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 193
Figure 109132369-A0304-12-0453-1491
<210> 194
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 194
Figure 109132369-A0304-12-0454-1494
<210> 195
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 195
Figure 109132369-A0304-12-0454-1495
<210> 196
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 196
Figure 109132369-A0304-12-0454-1496
<210> 197
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 197
Figure 109132369-A0304-12-0454-1493
<210> 198
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 198
Figure 109132369-A0304-12-0455-1498
<210> 199
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 199
Figure 109132369-A0304-12-0455-1499
<210> 200
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 200
Figure 109132369-A0304-12-0455-1497
<210> 201
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 201
Figure 109132369-A0304-12-0456-1500
<210> 202
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 202
Figure 109132369-A0304-12-0456-1501
<210> 203
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 203
Figure 109132369-A0304-12-0456-1502
<210> 204
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 204
Figure 109132369-A0304-12-0457-1505
<210> 205
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 205
Figure 109132369-A0304-12-0457-1504
<210> 206
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 206
Figure 109132369-A0304-12-0457-1503
<210> 207
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 207
Figure 109132369-A0304-12-0458-1508
<210> 208
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 208
Figure 109132369-A0304-12-0458-1507
<210> 209
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 209
Figure 109132369-A0304-12-0458-1506
<210> 210
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 210
Figure 109132369-A0304-12-0459-1511
<210> 211
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 211
Figure 109132369-A0304-12-0459-1510
<210> 212
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 212
Figure 109132369-A0304-12-0459-1509
<210> 213
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 213
Figure 109132369-A0304-12-0460-1514
<210> 214
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 214
Figure 109132369-A0304-12-0460-1513
<210> 215
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 215
Figure 109132369-A0304-12-0460-1512
<210> 216
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 216
Figure 109132369-A0304-12-0461-1516
<210> 217
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 217
Figure 109132369-A0304-12-0461-1518
<210> 218
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 218
Figure 109132369-A0304-12-0461-1517
<210> 219
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 219
Figure 109132369-A0304-12-0461-1515
<210> 220
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 220
Figure 109132369-A0304-12-0462-1519
<210> 221
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 221
Figure 109132369-A0304-12-0462-1521
<210> 222
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 222
Figure 109132369-A0304-12-0462-1520
<210> 223
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 223
Figure 109132369-A0304-12-0463-1524
<210> 224
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 224
Figure 109132369-A0304-12-0463-1523
<210> 225
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 225
Figure 109132369-A0304-12-0463-1522
<210> 226
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 226
Figure 109132369-A0304-12-0464-1527
<210> 227
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 227
Figure 109132369-A0304-12-0464-1526
<210> 228
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 228
Figure 109132369-A0304-12-0464-1525
<210> 229
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 229
Figure 109132369-A0304-12-0465-1530
<210> 230
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 230
Figure 109132369-A0304-12-0465-1529
<210> 231
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 231
Figure 109132369-A0304-12-0465-1528
<210> 232
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 232
Figure 109132369-A0304-12-0466-1531
Figure 109132369-A0304-12-0467-1532
<210> 233
<211> 276
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 233
Figure 109132369-A0304-12-0467-1533
Figure 109132369-A0304-12-0468-1534
Figure 109132369-A0304-12-0469-1535
<210> 234
<211> 341
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 234
Figure 109132369-A0304-12-0469-1536
Figure 109132369-A0304-12-0470-1537
Figure 109132369-A0304-12-0471-1538
<210> 235
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 235
Figure 109132369-A0304-12-0472-1539
Figure 109132369-A0304-12-0473-1540
<210> 236
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 236
Figure 109132369-A0304-12-0473-1541
Figure 109132369-A0304-12-0474-1542
Figure 109132369-A0304-12-0475-1543
<210> 237
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 237
Figure 109132369-A0304-12-0475-1544
Figure 109132369-A0304-12-0476-1545
Figure 109132369-A0304-12-0477-1546
<210> 238
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 238
Figure 109132369-A0304-12-0477-1547
Figure 109132369-A0304-12-0478-1548
Figure 109132369-A0304-12-0479-1549
<210> 239
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 239
Figure 109132369-A0304-12-0479-1550
Figure 109132369-A0304-12-0480-1551
Figure 109132369-A0304-12-0481-1552
<210> 240
<211> 275
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 240
Figure 109132369-A0304-12-0481-1553
Figure 109132369-A0304-12-0482-1554
<210> 241
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 241
Figure 109132369-A0304-12-0483-1555
<210> 242
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 242
Figure 109132369-A0304-12-0484-1556
<210> 243
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 243
Figure 109132369-A0304-12-0484-1557
<210> 244
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 244
Figure 109132369-A0304-12-0484-1558
Figure 109132369-A0304-12-0485-1561
<210> 245
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 245
Figure 109132369-A0304-12-0485-1560
<210> 246
<211> 30
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 246
Figure 109132369-A0304-12-0485-1559
<210> 247
<211> 35
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 247
Figure 109132369-A0304-12-0486-1562
<210> 248
<211> 40
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 248
Figure 109132369-A0304-12-0486-1563
<210> 249
<211> 45
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 249
Figure 109132369-A0304-12-0487-1564
<210> 250
<211> 50
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 250
Figure 109132369-A0304-12-0487-1565
<210> 251
<211> 55
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 251
Figure 109132369-A0304-12-0488-1567
<210> 252
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (6)..(10)
<223> 胺基酸可重複1、2或3次。
<400> 252
Figure 109132369-A0304-12-0488-1566
<210> 253
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 253
Figure 109132369-A0304-12-0489-1568
<210> 254
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(5)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
<400> 254
Figure 109132369-A0304-12-0489-1569
<210> 255
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 255
Figure 109132369-A0304-12-0490-1570
Figure 109132369-A0304-12-0491-1571
Figure 109132369-A0304-12-0492-1572
Figure 109132369-A0304-12-0493-1573
Figure 109132369-A0304-12-0494-1574
<210> 256
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 256
Figure 109132369-A0304-12-0495-1575
Figure 109132369-A0304-12-0496-1576
Figure 109132369-A0304-12-0497-1577
Figure 109132369-A0304-12-0498-1578
Figure 109132369-A0304-12-0499-1579
<210> 257
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 257
Figure 109132369-A0304-12-0499-1580
Figure 109132369-A0304-12-0500-1581
Figure 109132369-A0304-12-0501-1582
Figure 109132369-A0304-12-0502-1583
Figure 109132369-A0304-12-0503-1584
Figure 109132369-A0304-12-0504-1585
<210> 258
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 258
Figure 109132369-A0304-12-0504-1586
Figure 109132369-A0304-12-0505-1587
Figure 109132369-A0304-12-0506-1588
Figure 109132369-A0304-12-0507-1589
Figure 109132369-A0304-12-0508-1590
Figure 109132369-A0304-12-0509-1591
<210> 259
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 259
Figure 109132369-A0304-12-0509-1592
Figure 109132369-A0304-12-0510-1593
Figure 109132369-A0304-12-0511-1594
Figure 109132369-A0304-12-0512-1595
Figure 109132369-A0304-12-0513-1596
Figure 109132369-A0304-12-0514-1597
<210> 260
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 260
Figure 109132369-A0304-12-0514-1598
Figure 109132369-A0304-12-0515-1599
Figure 109132369-A0304-12-0516-1600
Figure 109132369-A0304-12-0517-1601
Figure 109132369-A0304-12-0518-1602
Figure 109132369-A0304-12-0519-1603
<210> 261
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 261
Figure 109132369-A0304-12-0519-1604
Figure 109132369-A0304-12-0520-1605
<210> 262
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 262
Figure 109132369-A0304-12-0520-1606
<210> 263
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 263
Figure 109132369-A0304-12-0521-1607
<210> 264
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 264
Figure 109132369-A0304-12-0522-1608
<210> 265
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 265
Figure 109132369-A0304-12-0523-1609
<210> 266
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 266
Figure 109132369-A0304-12-0524-1610
<210> 267
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 267
Figure 109132369-A0304-12-0525-1611
<210> 268
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 268
Figure 109132369-A0304-12-0526-1612
<210> 269
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 269
Figure 109132369-A0304-12-0527-1614
<210> 270
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 270
Figure 109132369-A0304-12-0527-1613
Figure 109132369-A0304-12-0528-1615
<210> 271
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 271
Figure 109132369-A0304-12-0528-1616
Figure 109132369-A0304-12-0529-1618
<210> 272
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 272
Figure 109132369-A0304-12-0529-1617
Figure 109132369-A0304-12-0530-1619
<210> 273
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 273
Figure 109132369-A0304-12-0530-1620
Figure 109132369-A0304-12-0531-1622
<210> 274
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 274
Figure 109132369-A0304-12-0531-1621
Figure 109132369-A0304-12-0532-1623
<210> 275
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 275
Figure 109132369-A0304-12-0532-1624
Figure 109132369-A0304-12-0533-1626
<210> 276
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 276
Figure 109132369-A0304-12-0533-1625
Figure 109132369-A0304-12-0534-1627
<210> 277
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 277
Figure 109132369-A0304-12-0534-1628
Figure 109132369-A0304-12-0535-1630
<210> 278
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 278
Figure 109132369-A0304-12-0535-1629
Figure 109132369-A0304-12-0536-1631
<210> 279
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 279
Figure 109132369-A0304-12-0536-1632
Figure 109132369-A0304-12-0537-1634
<210> 280
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 280
Figure 109132369-A0304-12-0537-1633
Figure 109132369-A0304-12-0538-1635
<210> 281
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 281
Figure 109132369-A0304-12-0538-1636
Figure 109132369-A0304-12-0539-1638
<210> 282
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 282
Figure 109132369-A0304-12-0539-1637
Figure 109132369-A0304-12-0540-1639
<210> 283
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 283
Figure 109132369-A0304-12-0540-1640
Figure 109132369-A0304-12-0541-1642
<210> 284
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 284
Figure 109132369-A0304-12-0541-1641
<210> 285
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 285
Figure 109132369-A0304-12-0542-1643
<210> 286
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 286
Figure 109132369-A0304-12-0543-1644
<210> 287
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 287
Figure 109132369-A0304-12-0544-1645
<210> 288
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 288
Figure 109132369-A0304-12-0545-1646
<210> 289
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 289
Figure 109132369-A0304-12-0546-1647
<210> 290
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 290
Figure 109132369-A0304-12-0547-1648
<210> 291
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 291
Figure 109132369-A0304-12-0548-1649
<210> 292
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 292
Figure 109132369-A0304-12-0548-1650
Figure 109132369-A0304-12-0549-1651
<210> 293
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 293
Figure 109132369-A0304-12-0549-1652
Figure 109132369-A0304-12-0550-1654
<210> 294
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 294
Figure 109132369-A0304-12-0550-1653
Figure 109132369-A0304-12-0551-1655
<210> 295
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 295
Figure 109132369-A0304-12-0551-1656
Figure 109132369-A0304-12-0552-1658
<210> 296
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 296
Figure 109132369-A0304-12-0552-1657
Figure 109132369-A0304-12-0553-1659
<210> 297
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 297
Figure 109132369-A0304-12-0553-1660
Figure 109132369-A0304-12-0554-1662
<210> 298
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 298
Figure 109132369-A0304-12-0554-1661
Figure 109132369-A0304-12-0555-1663
<210> 299
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 299
Figure 109132369-A0304-12-0555-1664
Figure 109132369-A0304-12-0556-1666
<210> 300
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 300
Figure 109132369-A0304-12-0556-1665
Figure 109132369-A0304-12-0557-1667
<210> 301
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 301
Figure 109132369-A0304-12-0557-1668
Figure 109132369-A0304-12-0558-1670
<210> 302
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 302
Figure 109132369-A0304-12-0558-1669
Figure 109132369-A0304-12-0559-1671
<210> 303
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 303
Figure 109132369-A0304-12-0559-1672
Figure 109132369-A0304-12-0560-1674
<210> 304
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 304
Figure 109132369-A0304-12-0560-1673
Figure 109132369-A0304-12-0561-1675
<210> 305
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 305
Figure 109132369-A0304-12-0561-1676
Figure 109132369-A0304-12-0562-1678
<210> 306
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 306
Figure 109132369-A0304-12-0562-1677
<210> 307
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 307
Figure 109132369-A0304-12-0563-1679
<210> 308
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 308
Figure 109132369-A0304-12-0564-1680
<210> 309
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 309
Figure 109132369-A0304-12-0565-1681
<210> 310
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 310
Figure 109132369-A0304-12-0566-1682
<210> 311
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 311
Figure 109132369-A0304-12-0567-1683
<210> 312
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 312
Figure 109132369-A0304-12-0568-1684
<210> 313
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 313
Figure 109132369-A0304-12-0569-1686
<210> 314
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 314
Figure 109132369-A0304-12-0569-1685
Figure 109132369-A0304-12-0570-1687
<210> 315
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 315
Figure 109132369-A0304-12-0570-1688
Figure 109132369-A0304-12-0571-1690
<210> 316
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 316
Figure 109132369-A0304-12-0571-1689
Figure 109132369-A0304-12-0572-1691
<210> 317
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 317
Figure 109132369-A0304-12-0572-1692
Figure 109132369-A0304-12-0573-1694
<210> 318
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 318
Figure 109132369-A0304-12-0573-1693
Figure 109132369-A0304-12-0574-1695
<210> 319
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 319
Figure 109132369-A0304-12-0574-1696
Figure 109132369-A0304-12-0575-1698
<210> 320
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 320
Figure 109132369-A0304-12-0575-1697
Figure 109132369-A0304-12-0576-1699
<210> 321
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 321
Figure 109132369-A0304-12-0576-1700
Figure 109132369-A0304-12-0577-1702
<210> 322
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 322
Figure 109132369-A0304-12-0577-1701
Figure 109132369-A0304-12-0578-1703
<210> 323
<211> 123
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 323
Figure 109132369-A0304-12-0578-1704
Figure 109132369-A0304-12-0579-1706
<210> 324
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 324
Figure 109132369-A0304-12-0579-1705
Figure 109132369-A0304-12-0580-1707
<210> 325
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 325
Figure 109132369-A0304-12-0580-1708
Figure 109132369-A0304-12-0581-1710
<210> 326
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 326
Figure 109132369-A0304-12-0581-1709
Figure 109132369-A0304-12-0582-1711
<210> 327
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 327
Figure 109132369-A0304-12-0582-1712
Figure 109132369-A0304-12-0583-1714
<210> 328
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 328
Figure 109132369-A0304-12-0583-1713
<210> 329
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 329
Figure 109132369-A0304-12-0584-1715
<210> 330
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 330
Figure 109132369-A0304-12-0585-1716
<210> 331
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 331
Figure 109132369-A0304-12-0586-1717
<210> 332
<211> 124
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 332
Figure 109132369-A0304-12-0587-1718
<210> 333
<211> 946
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 333
Figure 109132369-A0304-12-0588-1719
Figure 109132369-A0304-12-0589-1720
Figure 109132369-A0304-12-0590-1721
Figure 109132369-A0304-12-0591-1722
Figure 109132369-A0304-12-0592-1723
Figure 109132369-A0304-12-0593-1724
<210> 334
<211> 946
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 334
Figure 109132369-A0304-12-0593-1725
Figure 109132369-A0304-12-0594-1726
Figure 109132369-A0304-12-0595-1727
Figure 109132369-A0304-12-0596-1728
Figure 109132369-A0304-12-0597-1729
Figure 109132369-A0304-12-0598-1730
Figure 109132369-A0304-12-0599-1731
<210> 335
<211> 946
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 335
Figure 109132369-A0304-12-0599-1732
Figure 109132369-A0304-12-0600-1733
Figure 109132369-A0304-12-0601-1734
Figure 109132369-A0304-12-0602-1735
Figure 109132369-A0304-12-0603-1736
Figure 109132369-A0304-12-0604-1737
<210> 336
<211> 966
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 336
Figure 109132369-A0304-12-0605-1738
Figure 109132369-A0304-12-0606-1739
Figure 109132369-A0304-12-0607-1740
Figure 109132369-A0304-12-0608-1741
Figure 109132369-A0304-12-0609-1742
Figure 109132369-A0304-12-0610-1743
<210> 337
<211> 956
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 337
Figure 109132369-A0304-12-0610-1744
Figure 109132369-A0304-12-0611-1745
Figure 109132369-A0304-12-0612-1746
Figure 109132369-A0304-12-0613-1747
Figure 109132369-A0304-12-0614-1748
Figure 109132369-A0304-12-0615-1749
Figure 109132369-A0304-12-0616-1750
<210> 338
<211> 976
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 338
Figure 109132369-A0304-12-0616-1751
Figure 109132369-A0304-12-0617-1752
Figure 109132369-A0304-12-0618-1753
Figure 109132369-A0304-12-0619-1754
Figure 109132369-A0304-12-0620-1755
Figure 109132369-A0304-12-0621-1756
Figure 109132369-A0304-12-0622-1757
<210> 339
<211> 878
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 339
Figure 109132369-A0304-12-0622-1758
Figure 109132369-A0304-12-0623-1759
Figure 109132369-A0304-12-0624-1760
Figure 109132369-A0304-12-0625-1761
Figure 109132369-A0304-12-0626-1762
Figure 109132369-A0304-12-0627-1763
<210> 340
<211> 878
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 340
Figure 109132369-A0304-12-0627-1764
Figure 109132369-A0304-12-0628-1765
Figure 109132369-A0304-12-0629-1766
Figure 109132369-A0304-12-0630-1767
Figure 109132369-A0304-12-0631-1768
Figure 109132369-A0304-12-0632-1769
<210> 341
<211> 878
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 341
Figure 109132369-A0304-12-0632-1770
Figure 109132369-A0304-12-0633-1771
Figure 109132369-A0304-12-0634-1772
Figure 109132369-A0304-12-0635-1773
Figure 109132369-A0304-12-0636-1774
Figure 109132369-A0304-12-0637-1775
<210> 342
<211> 807
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 342
Figure 109132369-A0304-12-0638-1776
Figure 109132369-A0304-12-0639-1777
Figure 109132369-A0304-12-0640-1778
Figure 109132369-A0304-12-0641-1779
Figure 109132369-A0304-12-0642-1780
<210> 343
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 343
Figure 109132369-A0304-12-0642-1781
Figure 109132369-A0304-12-0643-1782
Figure 109132369-A0304-12-0644-1783
Figure 109132369-A0304-12-0645-1784
Figure 109132369-A0304-12-0646-1785
Figure 109132369-A0304-12-0647-1786
<210> 344
<211> 807
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 344
Figure 109132369-A0304-12-0647-1787
Figure 109132369-A0304-12-0648-1788
Figure 109132369-A0304-12-0649-1789
Figure 109132369-A0304-12-0650-1790
Figure 109132369-A0304-12-0651-1791
Figure 109132369-A0304-12-0652-1792
<210> 345
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 345
Figure 109132369-A0304-12-0652-1793
<210> 346
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 346
Figure 109132369-A0304-12-0653-1795
<210> 347
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 347
Figure 109132369-A0304-12-0653-1794
<210> 348
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 348
Figure 109132369-A0304-12-0654-1796
<210> 349
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 349
Figure 109132369-A0304-12-0654-1797
<210> 350
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 350
Figure 109132369-A0304-12-0655-1800
<210> 351
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 351
Figure 109132369-A0304-12-0655-1799
<210> 352
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 352
Figure 109132369-A0304-12-0655-1798
<210> 353
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 353
Figure 109132369-A0304-12-0656-1801
<210> 354
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 354
Figure 109132369-A0304-12-0656-1802
<210> 355
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 355
Figure 109132369-A0304-12-0657-1804
<210> 356
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 356
Figure 109132369-A0304-12-0657-1803
<210> 357
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 357
Figure 109132369-A0304-12-0658-1805
<210> 358
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 358
Figure 109132369-A0304-12-0658-1806
<210> 359
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 359
Figure 109132369-A0304-12-0659-1807
<210> 360
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 360
Figure 109132369-A0304-12-0659-1808
<210> 361
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 361
Figure 109132369-A0304-12-0660-1811
<210> 362
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 362
Figure 109132369-A0304-12-0660-1810
<210> 363
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 363
Figure 109132369-A0304-12-0660-1809
<210> 364
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 364
Figure 109132369-A0304-12-0661-1812
<210> 365
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 365
Figure 109132369-A0304-12-0661-1813
<210> 366
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(5)
<223> 殘基可重複
<400> 366
Figure 109132369-A0304-12-0662-1814
<210> 367
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (1)..(4)
<223> 殘基可重複
<400> 367
Figure 109132369-A0304-12-0662-1815
<210> 368
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 368
Figure 109132369-A0304-12-0663-1816
<210> 369
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 369
Figure 109132369-A0304-12-0663-1817
<210> 370
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 370
Figure 109132369-A0304-12-0663-1818
<210> 371
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 371
Figure 109132369-A0304-12-0664-1821
<210> 372
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 372
Figure 109132369-A0304-12-0664-1820
<210> 373
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 373
Figure 109132369-A0304-12-0664-1819
<210> 374
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (2)..(5)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
<400> 374
Figure 109132369-A0304-12-0665-1823
<210> 375
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 375
Figure 109132369-A0304-12-0665-1822
<210> 376
<211> 25
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 376
Figure 109132369-A0304-12-0665-1824
<210> 377
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 377
Figure 109132369-A0304-12-0666-1825
<210> 378
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 378
Figure 109132369-A0304-12-0666-1826
<210> 379
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 379
Figure 109132369-A0304-12-0667-1827
<210> 380
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 380
Figure 109132369-A0304-12-0667-1828
<210> 381
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 381
Figure 109132369-A0304-12-0668-1830
<210> 382
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 382
Figure 109132369-A0304-12-0668-1829
<210> 383
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 383
Figure 109132369-A0304-12-0669-1832
<210> 384
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 384
Figure 109132369-A0304-12-0669-1833
<210> 385
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 385
Figure 109132369-A0304-12-0669-1831
<210> 386
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 386
Figure 109132369-A0304-12-0670-1834
<210> 387
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 387
Figure 109132369-A0304-12-0670-1835
<210> 388
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 388
Figure 109132369-A0304-12-0671-1836
<210> 389
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8或9次。
<400> 389
Figure 109132369-A0304-12-0671-1837
<210> 390
<211> 20
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 390
Figure 109132369-A0304-12-0671-1838
<210> 391
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 391
Figure 109132369-A0304-12-0672-1839
<210> 392
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 392
Figure 109132369-A0304-12-0672-1840
<210> 393
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 393
Figure 109132369-A0304-12-0673-1842
<210> 394
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 394
Figure 109132369-A0304-12-0673-1841
<210> 395
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 395
Figure 109132369-A0304-12-0674-1844
<210> 396
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 396
Figure 109132369-A0304-12-0674-1845
<210> 397
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 397
Figure 109132369-A0304-12-0674-1843
<210> 398
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (8)..(8)
<223> Xaa為除天冬胺酸以外之任何胺基酸。
<400> 398
Figure 109132369-A0304-12-0675-1846
Figure 109132369-A0304-12-0676-1847
<210> 399
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (36)..(36)
<223> Xaa為除異白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 399
Figure 109132369-A0304-12-0677-1848
Figure 109132369-A0304-12-0678-1849
<210> 400
<211> 219
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (54)..(54)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 400
Figure 109132369-A0304-12-0678-1850
Figure 109132369-A0304-12-0679-1851
<210> 401
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<400> 401
Figure 109132369-A0304-12-0680-1852
Figure 109132369-A0304-12-0681-1854
<210> 402
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (63)..(63)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<400> 402
Figure 109132369-A0304-12-0681-1853
Figure 109132369-A0304-12-0682-1855
<210> 403
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (67)..(67)
<223> Xaa可為除異白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 403
Figure 109132369-A0304-12-0683-1856
Figure 109132369-A0304-12-0684-1858
<210> 404
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (86)..(86)
<223> Xaa可為除離胺酸以外之任何胺基酸
<400> 404
Figure 109132369-A0304-12-0684-1857
Figure 109132369-A0304-12-0685-1859
Figure 109132369-A0304-12-0686-1860
<210> 405
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (157)..(157)
<223> 除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 405
Figure 109132369-A0304-12-0686-1861
Figure 109132369-A0304-12-0687-1862
<210> 406
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (158)..(158)
<223> 除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 406
Figure 109132369-A0304-12-0688-1863
Figure 109132369-A0304-12-0689-1864
<210> 407
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 407
Figure 109132369-A0304-12-0689-1865
Figure 109132369-A0304-12-0690-1866
<210> 408
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 408
Figure 109132369-A0304-12-0691-1867
Figure 109132369-A0304-12-0692-1869
<210> 409
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (33)..(33)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 409
Figure 109132369-A0304-12-0692-1868
Figure 109132369-A0304-12-0693-1870
<210> 410
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (38)..(38)
<223> Xaa可為除甲硫胺酸以外之任何胺基酸
<400> 410
Figure 109132369-A0304-12-0694-1871
Figure 109132369-A0304-12-0695-1872
<210> 411
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (39)..(39)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 411
Figure 109132369-A0304-12-0695-1873
Figure 109132369-A0304-12-0696-1874
<210> 412
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (49)..(49)
<223> Xaa可為除異白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 412
Figure 109132369-A0304-12-0697-1875
Figure 109132369-A0304-12-0698-1877
<210> 413
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (53)..(53)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 413
Figure 109132369-A0304-12-0698-1876
Figure 109132369-A0304-12-0699-1878
<210> 414
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (60)..(60)
<223> 除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 414
Figure 109132369-A0304-12-0700-1879
Figure 109132369-A0304-12-0701-1881
<210> 415
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (108)..(108)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 415
Figure 109132369-A0304-12-0701-1880
Figure 109132369-A0304-12-0702-1882
Figure 109132369-A0304-12-0703-1883
<210> 416
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (156)..(156)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 416
Figure 109132369-A0304-12-0703-1884
Figure 109132369-A0304-12-0704-1885
<210> 417
<211> 208
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (111)..(111)
<223> Xaa可為除脯胺酸以外之任何胺基酸
<400> 417
Figure 109132369-A0304-12-0705-1886
Figure 109132369-A0304-12-0706-1887
<210> 418
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(61)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<400> 418
Figure 109132369-A0304-12-0706-1888
Figure 109132369-A0304-12-0707-1889
<210> 419
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 419
Figure 109132369-A0304-12-0708-1890
Figure 109132369-A0304-12-0709-1892
<210> 420
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> Xaa可為除色胺酸以外之任何胺基酸
<400> 420
Figure 109132369-A0304-12-0709-1891
Figure 109132369-A0304-12-0710-1893
Figure 109132369-A0304-12-0711-1894
<210> 421
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 421
Figure 109132369-A0304-12-0711-1895
Figure 109132369-A0304-12-0712-1896
<210> 422
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(61)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<400> 422
Figure 109132369-A0304-12-0713-1897
<210> 423
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 423
Figure 109132369-A0304-12-0714-1898
<210> 424
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> Xaa可為除色胺酸以外之任何胺基酸
<400> 424
Figure 109132369-A0304-12-0715-1899
<210> 425
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 425
Figure 109132369-A0304-12-0716-1900
<210> 426
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (41)..(41)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 426
Figure 109132369-A0304-12-0717-1901
Figure 109132369-A0304-12-0718-1902
<210> 427
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (41)..(41)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 427
Figure 109132369-A0304-12-0718-1903
Figure 109132369-A0304-12-0719-1905
<210> 428
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (35)..(35)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 428
Figure 109132369-A0304-12-0719-1904
Figure 109132369-A0304-12-0720-1906
<210> 429
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (35)..(35)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 429
Figure 109132369-A0304-12-0721-1907
<210> 430
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (33)..(33)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 430
Figure 109132369-A0304-12-0722-1908
Figure 109132369-A0304-12-0723-1909
<210> 431
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (33)..(33)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 431
Figure 109132369-A0304-12-0724-1910
<210> 432
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (72)..(72)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 432
Figure 109132369-A0304-12-0725-1911
Figure 109132369-A0304-12-0726-1912
<210> 433
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (72)..(72)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 433
Figure 109132369-A0304-12-0726-1913
Figure 109132369-A0304-12-0727-1914
<210> 434
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (59)..(59)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 434
Figure 109132369-A0304-12-0727-1915
Figure 109132369-A0304-12-0728-1916
<210> 435
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (59)..(59)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 435
Figure 109132369-A0304-12-0729-1917
<210> 436
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(61)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 436
Figure 109132369-A0304-12-0730-1918
Figure 109132369-A0304-12-0731-1919
<210> 437
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(61)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 437
Figure 109132369-A0304-12-0732-1920
<210> 438
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 438
Figure 109132369-A0304-12-0733-1921
Figure 109132369-A0304-12-0734-1922
<210> 439
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 439
Figure 109132369-A0304-12-0735-1923
<210> 440
<211> 224
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(61)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 440
Figure 109132369-A0304-12-0736-1924
Figure 109132369-A0304-12-0737-1925
<210> 441
<211> 110
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (61)..(61)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (91)..(91)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 441
Figure 109132369-A0304-12-0738-1926
<210> 442
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (47)..(47)
<223> Xaa可為除離胺酸以外之任何胺基酸
<400> 442
Figure 109132369-A0304-12-0739-1927
Figure 109132369-A0304-12-0740-1928
<210> 443
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (147)..(147)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 443
Figure 109132369-A0304-12-0740-1929
Figure 109132369-A0304-12-0741-1931
<210> 444
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (11)..(11)
<223> Xaa可為除甲硫胺酸以外之任何胺基酸
<400> 444
Figure 109132369-A0304-12-0741-1930
Figure 109132369-A0304-12-0742-1932
<210> 445
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (12)..(12)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 445
Figure 109132369-A0304-12-0743-1933
Figure 109132369-A0304-12-0744-1934
<210> 446
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (14)..(14)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 446
Figure 109132369-A0304-12-0744-1935
Figure 109132369-A0304-12-0745-1937
<210> 447
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 447
Figure 109132369-A0304-12-0745-1936
Figure 109132369-A0304-12-0746-1938
<210> 448
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 448
Figure 109132369-A0304-12-0747-1939
Figure 109132369-A0304-12-0748-1940
<210> 449
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (18)..(18)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 449
Figure 109132369-A0304-12-0748-1941
Figure 109132369-A0304-12-0749-1942
<210> 450
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (19)..(19)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<400> 450
Figure 109132369-A0304-12-0750-1943
<210> 451
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 451
Figure 109132369-A0304-12-0751-1944
Figure 109132369-A0304-12-0752-1946
<210> 452
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (21)..(21)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 452
Figure 109132369-A0304-12-0752-1945
Figure 109132369-A0304-12-0753-1947
<210> 453
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (22)..(22)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 453
Figure 109132369-A0304-12-0754-1948
Figure 109132369-A0304-12-0755-1949
<210> 454
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (23)..(23)
<223> Xaa可為除異白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 454
Figure 109132369-A0304-12-0755-1950
Figure 109132369-A0304-12-0756-1951
<210> 455
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (24)..(24)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 455
Figure 109132369-A0304-12-0756-1952
Figure 109132369-A0304-12-0757-1953
<210> 456
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (25)..(25)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 456
Figure 109132369-A0304-12-0758-1954
Figure 109132369-A0304-12-0759-1956
<210> 457
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (26)..(26)
<223> Xaa可為除脯胺酸以外之任何胺基酸
<400> 457
Figure 109132369-A0304-12-0759-1955
Figure 109132369-A0304-12-0760-1957
<210> 458
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (27)..(27)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 458
Figure 109132369-A0304-12-0760-1958
Figure 109132369-A0304-12-0761-1959
<210> 459
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (28)..(28)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 459
Figure 109132369-A0304-12-0762-1960
Figure 109132369-A0304-12-0763-1962
<210> 460
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (29)..(29)
<223> Xaa可為除色胺酸以外之任何胺基酸
<400> 460
Figure 109132369-A0304-12-0763-1961
Figure 109132369-A0304-12-0764-1963
<210> 461
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (30)..(30)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 461
Figure 109132369-A0304-12-0765-1964
<210> 462
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (31)..(31)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 462
Figure 109132369-A0304-12-0766-1965
Figure 109132369-A0304-12-0767-1967
<210> 463
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (32)..(32)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 463
Figure 109132369-A0304-12-0767-1966
Figure 109132369-A0304-12-0768-1968
<210> 464
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (33)..(33)
<223> Xaa可為除脯胺酸以外之任何胺基酸
<400> 464
Figure 109132369-A0304-12-0769-1969
Figure 109132369-A0304-12-0770-1970
<210> 465
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (34)..(34)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 465
Figure 109132369-A0304-12-0770-1971
Figure 109132369-A0304-12-0771-1973
<210> 466
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (35)..(35)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 466
Figure 109132369-A0304-12-0771-1972
Figure 109132369-A0304-12-0772-1974
<210> 467
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (37)..(37)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 467
Figure 109132369-A0304-12-0773-1975
Figure 109132369-A0304-12-0774-1976
<210> 468
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (38)..(38)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 468
Figure 109132369-A0304-12-0774-1977
Figure 109132369-A0304-12-0775-1979
<210> 469
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (39)..(39)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 469
Figure 109132369-A0304-12-0775-1978
Figure 109132369-A0304-12-0776-1980
<210> 470
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (40)..(40)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 470
Figure 109132369-A0304-12-0777-1981
Figure 109132369-A0304-12-0778-1982
<210> 471
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (41)..(41)
<223> Xaa可為除蘇胺酸以外之任何胺基酸
<400> 471
Figure 109132369-A0304-12-0778-1983
Figure 109132369-A0304-12-0779-1984
<210> 472
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 472
Figure 109132369-A0304-12-0780-1985
<210> 473
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (43)..(43)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 473
Figure 109132369-A0304-12-0781-1986
Figure 109132369-A0304-12-0782-1988
<210> 474
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (44)..(44)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 474
Figure 109132369-A0304-12-0782-1987
Figure 109132369-A0304-12-0783-1989
<210> 475
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 475
Figure 109132369-A0304-12-0784-1990
Figure 109132369-A0304-12-0785-1991
<210> 476
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (46)..(46)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 476
Figure 109132369-A0304-12-0785-1992
Figure 109132369-A0304-12-0786-1994
<210> 477
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (48)..(48)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 477
Figure 109132369-A0304-12-0786-1993
Figure 109132369-A0304-12-0787-1995
<210> 478
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (49)..(49)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 478
Figure 109132369-A0304-12-0788-1996
Figure 109132369-A0304-12-0789-1997
<210> 479
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (50)..(50)
<223> Xaa可為除蘇胺酸以外之任何胺基酸
<400> 479
Figure 109132369-A0304-12-0789-1998
Figure 109132369-A0304-12-0790-2000
<210> 480
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (51)..(51)
<223> Xaa可為除離胺酸以外之任何胺基酸
<400> 480
Figure 109132369-A0304-12-0790-1999
Figure 109132369-A0304-12-0791-2001
<210> 481
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (52)..(52)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 481
Figure 109132369-A0304-12-0792-2002
Figure 109132369-A0304-12-0793-2003
<210> 482
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (64)..(64)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 482
Figure 109132369-A0304-12-0793-2004
Figure 109132369-A0304-12-0794-2005
<210> 483
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (65)..(65)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 483
Figure 109132369-A0304-12-0795-2006
<210> 484
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (66)..(66)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 484
Figure 109132369-A0304-12-0796-2007
Figure 109132369-A0304-12-0797-2009
<210> 485
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (67)..(67)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 485
Figure 109132369-A0304-12-0797-2008
Figure 109132369-A0304-12-0798-2010
<210> 486
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (68)..(68)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 486
Figure 109132369-A0304-12-0799-2011
Figure 109132369-A0304-12-0800-2012
<210> 487
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (69)..(69)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 487
Figure 109132369-A0304-12-0800-2013
Figure 109132369-A0304-12-0801-2015
<210> 488
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (70)..(70)
<223> Xaa可為除精胺酸以外之任何胺基酸
<400> 488
Figure 109132369-A0304-12-0801-2014
Figure 109132369-A0304-12-0802-2016
<210> 489
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (71)..(71)
<223> Xaa可為除精胺酸以外之任何胺基酸
<400> 489
Figure 109132369-A0304-12-0803-2017
Figure 109132369-A0304-12-0804-2018
<210> 490
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (72)..(72)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 490
Figure 109132369-A0304-12-0804-2019
Figure 109132369-A0304-12-0805-2021
<210> 491
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (73)..(73)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 491
Figure 109132369-A0304-12-0805-2020
Figure 109132369-A0304-12-0806-2022
<210> 492
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (75)..(75)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 492
Figure 109132369-A0304-12-0807-2023
Figure 109132369-A0304-12-0808-2024
<210> 493
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (76)..(76)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 493
Figure 109132369-A0304-12-0808-2025
Figure 109132369-A0304-12-0809-2026
<210> 494
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (77)..(77)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 494
Figure 109132369-A0304-12-0810-2027
<210> 495
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (78)..(78)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 495
Figure 109132369-A0304-12-0811-2028
Figure 109132369-A0304-12-0812-2030
<210> 496
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (104)..(104)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 496
Figure 109132369-A0304-12-0812-2029
Figure 109132369-A0304-12-0813-2031
<210> 497
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (105)..(105)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 497
Figure 109132369-A0304-12-0814-2032
Figure 109132369-A0304-12-0815-2033
<210> 498
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (106)..(106)
<223> Xaa可為除脯胺酸以外之任何胺基酸
<400> 498
Figure 109132369-A0304-12-0815-2034
Figure 109132369-A0304-12-0816-2036
<210> 499
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (109)..(109)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 499
Figure 109132369-A0304-12-0816-2035
Figure 109132369-A0304-12-0817-2037
<210> 500
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (110)..(110)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 500
Figure 109132369-A0304-12-0818-2038
Figure 109132369-A0304-12-0819-2039
<210> 501
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (111)..(111)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 501
Figure 109132369-A0304-12-0819-2040
Figure 109132369-A0304-12-0820-2041
<210> 502
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (113)..(113)
<223> Xaa可為除精胺酸以外之任何胺基酸
<400> 502
Figure 109132369-A0304-12-0820-2042
Figure 109132369-A0304-12-0821-2043
<210> 503
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (114)..(114)
<223> Xaa可為除天冬醯胺以外之任何胺基酸
<400> 503
Figure 109132369-A0304-12-0822-2044
Figure 109132369-A0304-12-0823-2046
<210> 504
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (115)..(115)
<223> Xaa可為除絲胺酸以外之任何胺基酸
<400> 504
Figure 109132369-A0304-12-0823-2045
Figure 109132369-A0304-12-0824-2047
<210> 505
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (117)..(117)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 505
Figure 109132369-A0304-12-0825-2048
<210> 506
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (130)..(130)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 506
Figure 109132369-A0304-12-0826-2049
Figure 109132369-A0304-12-0827-2051
<210> 507
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (131)..(131)
<223> Xaa可為除精胺酸以外之任何胺基酸
<400> 507
Figure 109132369-A0304-12-0827-2050
Figure 109132369-A0304-12-0828-2052
<210> 508
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (132)..(132)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 508
Figure 109132369-A0304-12-0829-2053
Figure 109132369-A0304-12-0830-2054
<210> 509
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (133)..(133)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 509
Figure 109132369-A0304-12-0830-2055
Figure 109132369-A0304-12-0831-2057
<210> 510
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (134)..(134)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 510
Figure 109132369-A0304-12-0831-2056
Figure 109132369-A0304-12-0832-2058
<210> 511
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (135)..(135)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 511
Figure 109132369-A0304-12-0833-2059
Figure 109132369-A0304-12-0834-2061
<210> 512
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (136)..(136)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 512
Figure 109132369-A0304-12-0834-2060
Figure 109132369-A0304-12-0835-2062
<210> 513
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (137)..(137)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 513
Figure 109132369-A0304-12-0835-2063
Figure 109132369-A0304-12-0836-2064
<210> 514
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (138)..(138)
<223> Xaa可為除蘇胺酸以外之任何胺基酸
<400> 514
Figure 109132369-A0304-12-0837-2065
Figure 109132369-A0304-12-0838-2066
<210> 515
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (139)..(139)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 515
Figure 109132369-A0304-12-0838-2067
Figure 109132369-A0304-12-0839-2068
<210> 516
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (141)..(141)
<223> Xaa可為除精胺酸以外之任何胺基酸
<400> 516
Figure 109132369-A0304-12-0840-2069
<210> 517
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (143)..(143)
<223> Xaa可為除精胺酸以外之任何胺基酸
<400> 517
Figure 109132369-A0304-12-0841-2070
Figure 109132369-A0304-12-0842-2072
<210> 518
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (144)..(144)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 518
Figure 109132369-A0304-12-0842-2071
Figure 109132369-A0304-12-0843-2073
<210> 519
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (146)..(146)
<223> Xaa可為除色胺酸以外之任何胺基酸
<400> 519
Figure 109132369-A0304-12-0844-2074
Figure 109132369-A0304-12-0845-2075
<210> 520
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (148)..(148)
<223> Xaa可為除白胺酸以外之任何胺基酸
<400> 520
Figure 109132369-A0304-12-0845-2076
Figure 109132369-A0304-12-0846-2078
<210> 521
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (149)..(149)
<223> Xaa可為除蘇胺酸以外之任何胺基酸
<400> 521
Figure 109132369-A0304-12-0846-2077
Figure 109132369-A0304-12-0847-2079
<210> 522
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (150)..(150)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 522
Figure 109132369-A0304-12-0848-2080
Figure 109132369-A0304-12-0849-2081
<210> 523
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (151)..(151)
<223> Xaa可為除甘胺酸以外之任何胺基酸
<400> 523
Figure 109132369-A0304-12-0849-2082
Figure 109132369-A0304-12-0850-2084
<210> 524
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (153)..(153)
<223> Xaa可為除蘇胺酸以外之任何胺基酸
<400> 524
Figure 109132369-A0304-12-0850-2083
Figure 109132369-A0304-12-0851-2085
<210> 525
<211> 174
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (154)..(154)
<223> Xaa可為除纈胺酸以外之任何胺基酸
<400> 525
Figure 109132369-A0304-12-0852-2086
Figure 109132369-A0304-12-0853-2087
<210> 526
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (1)..(8)
<223> Xaa可為任何天然存在之胺基酸
<400> 526
Figure 109132369-A0304-12-0853-2088
<210> 527
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 527
Figure 109132369-A0304-12-0854-2089
<210> 528
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<400> 528
Figure 109132369-A0304-12-0855-2090
Figure 109132369-A0304-12-0856-2092
<210> 529
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<400> 529
Figure 109132369-A0304-12-0856-2091
Figure 109132369-A0304-12-0857-2093
<210> 530
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 530
Figure 109132369-A0304-12-0857-2094
Figure 109132369-A0304-12-0858-2096
<210> 531
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<400> 531
Figure 109132369-A0304-12-0858-2430
Figure 109132369-A0304-12-0859-2097
<210> 532
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 532
Figure 109132369-A0304-12-0860-2098
<210> 533
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 533
Figure 109132369-A0304-12-0861-2099
<210> 534
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 534
Figure 109132369-A0304-12-0862-2100
Figure 109132369-A0304-12-0863-2101
<210> 535
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 535
Figure 109132369-A0304-12-0863-2102
Figure 109132369-A0304-12-0864-2103
<210> 536
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (15)..(15)
<223> Xaa可為除麩胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 536
Figure 109132369-A0304-12-0865-2104
<210> 537
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<400> 537
Figure 109132369-A0304-12-0866-2105
Figure 109132369-A0304-12-0867-2106
<210> 538
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 538
Figure 109132369-A0304-12-0868-2107
<210> 539
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 539
Figure 109132369-A0304-12-0869-2108
Figure 109132369-A0304-12-0870-2110
<210> 540
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<400> 540
Figure 109132369-A0304-12-0870-2109
Figure 109132369-A0304-12-0871-2111
<210> 541
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 541
Figure 109132369-A0304-12-0872-2112
Figure 109132369-A0304-12-0873-2113
<210> 542
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (20)..(20)
<223> Xaa可為除天冬胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (45)..(45)
<223> Xaa可為除酪胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 542
Figure 109132369-A0304-12-0874-2114
<210> 543
<211> 133
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> misc_feature
<222> (16)..(16)
<223> Xaa可為除組胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (42)..(42)
<223> Xaa可為除苯丙胺酸以外之任何胺基酸
<220>
<221> misc_feature
<222> (126)..(126)
<223> Xaa可為除麩醯胺以外之任何胺基酸
<400> 543
Figure 109132369-A0304-12-0875-2115
Figure 109132369-A0304-12-0876-2118
<210> 544
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 544
Figure 109132369-A0304-12-0876-2117
<210> 545
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 545
Figure 109132369-A0304-12-0876-2116
<210> 546
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 546
Figure 109132369-A0304-12-0877-2121
<210> 547
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 547
Figure 109132369-A0304-12-0877-2120
<210> 548
<211> 6
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 548
Figure 109132369-A0304-12-0877-2119
<210> 549
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 549
Figure 109132369-A0304-12-0878-2124
<210> 550
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 550
Figure 109132369-A0304-12-0878-2123
<210> 551
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 551
Figure 109132369-A0304-12-0878-2122
<210> 552
<211> 9
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 552
Figure 109132369-A0304-12-0879-2127
<210> 553
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 553
Figure 109132369-A0304-12-0879-2126
<210> 554
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 554
Figure 109132369-A0304-12-0879-2125
<210> 555
<211> 17
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 555
Figure 109132369-A0304-12-0880-2130
<210> 556
<211> 8
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 556
Figure 109132369-A0304-12-0880-2128
<210> 557
<211> 7
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 557
Figure 109132369-A0304-12-0880-2129
<210> 558
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 558
Figure 109132369-A0304-12-0881-2131
<210> 559
<211> 4
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 559
Figure 109132369-A0304-12-0881-2132
<210> 560
<211> 22
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 560
Figure 109132369-A0304-12-0881-2133
<210> 561
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (4)..(4)
<223> Xaa為除脯胺酸以外之任何胺基酸
<400> 561
Figure 109132369-A0304-12-0882-2134
<210> 562
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複1次
<400> 562
Figure 109132369-A0304-12-0882-2135
<210> 563
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複2次
<400> 563
Figure 109132369-A0304-12-0883-2136
<210> 564
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複3次
<400> 564
Figure 109132369-A0304-12-0883-2137
<210> 565
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複4次
<400> 565
Figure 109132369-A0304-12-0884-2139
<210> 566
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複5次
<400> 566
Figure 109132369-A0304-12-0884-2138
<210> 567
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複6次
<400> 567
Figure 109132369-A0304-12-0885-2142
<210> 568
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複7次
<400> 568
Figure 109132369-A0304-12-0885-2141
<210> 569
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複8次
<400> 569
Figure 109132369-A0304-12-0885-2140
<210> 570
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複9次
<400> 570
Figure 109132369-A0304-12-0886-2144
<210> 571
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複10次
<400> 571
Figure 109132369-A0304-12-0886-2143
<210> 572
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複1次
<400> 572
Figure 109132369-A0304-12-0887-2146
<210> 573
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複2次
<400> 573
Figure 109132369-A0304-12-0887-2145
<210> 574
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複3次
<400> 574
Figure 109132369-A0304-12-0888-2147
<210> 575
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複4次
<400> 575
Figure 109132369-A0304-12-0888-2148
<210> 576
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複5次
<400> 576
Figure 109132369-A0304-12-0889-2150
<210> 577
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複6次
<400> 577
Figure 109132369-A0304-12-0889-2149
<210> 578
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複7次
<400> 578
Figure 109132369-A0304-12-0890-2151
<210> 579
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複8次
<400> 579
Figure 109132369-A0304-12-0890-2152
<210> 580
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複9次
<400> 580
Figure 109132369-A0304-12-0890-2153
<210> 581
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基重複10次
<400> 581
Figure 109132369-A0304-12-0891-2155
<210> 582
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2或3次
<400> 582
Figure 109132369-A0304-12-0891-2154
<210> 583
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8或9次
<400> 583
Figure 109132369-A0304-12-0892-2156
<210> 584
<211> 13
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 584
Figure 109132369-A0304-12-0892-2157
<210> 585
<211> 15
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 585
Figure 109132369-A0304-12-0892-2158
<210> 586
<211> 341
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (84)..(84)
<223> 在一些情況下，位置84處之胺基酸X1為Ala。在一些情況下，胺基酸84為Cys。
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (236)..(236)
<223> 在一些情況下，位置236處之胺基酸X2為Cys。
<400> 586
Figure 109132369-A0304-12-0893-2159
Figure 109132369-A0304-12-0894-2160
Figure 109132369-A0304-12-0895-2161
<210> 587
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 587
Figure 109132369-A0304-12-0895-2162
<210> 588
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 588
Figure 109132369-A0304-12-0896-2164
<210> 589
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
<400> 589
Figure 109132369-A0304-12-0896-2431
<210> 590
<211> 5
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 590
Figure 109132369-A0304-12-0896-2432
<210> 591
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次。
<400> 591
Figure 109132369-A0304-12-0897-2166
<210> 592
<211> 10
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<220>
<221> MISC_FEATURE
<222> (6)..(10)
<223> 殘基可重複1、2、3、4、5、6、7、8、9或10次
<400> 592
Figure 109132369-A0304-12-0897-2167
<210> 593
<211> 945
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 593
Figure 109132369-A0304-12-0898-2168
Figure 109132369-A0304-12-0899-2169
Figure 109132369-A0304-12-0900-2170
Figure 109132369-A0304-12-0901-2171
Figure 109132369-A0304-12-0902-2172
Figure 109132369-A0304-12-0903-2173
<210> 594
<211> 966
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<400> 594
Figure 109132369-A0304-12-0903-2174
Figure 109132369-A0304-12-0904-2175
Figure 109132369-A0304-12-0905-2176
Figure 109132369-A0304-12-0906-2177
Figure 109132369-A0304-12-0907-2178
Figure 109132369-A0304-12-0908-2179
Figure 109132369-A0304-12-0909-2180
<210> 595
<211> 945
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 595
Figure 109132369-A0304-12-0909-2181
Figure 109132369-A0304-12-0910-2182
Figure 109132369-A0304-12-0911-2183
Figure 109132369-A0304-12-0912-2184
Figure 109132369-A0304-12-0913-2185
Figure 109132369-A0304-12-0914-2186
<210> 596
<211> 946
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 596
Figure 109132369-A0304-12-0915-2187
Figure 109132369-A0304-12-0916-2188
Figure 109132369-A0304-12-0917-2189
Figure 109132369-A0304-12-0918-2190
Figure 109132369-A0304-12-0919-2191
Figure 109132369-A0304-12-0920-2192
<210> 597
<211> 946
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 597
Figure 109132369-A0304-12-0920-2193
Figure 109132369-A0304-12-0921-2194
Figure 109132369-A0304-12-0922-2195
Figure 109132369-A0304-12-0923-2196
Figure 109132369-A0304-12-0924-2197
Figure 109132369-A0304-12-0925-2198
Figure 109132369-A0304-12-0926-2199
<210> 598
<211> 946
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 598
Figure 109132369-A0304-12-0926-2200
Figure 109132369-A0304-12-0927-2201
Figure 109132369-A0304-12-0928-2202
Figure 109132369-A0304-12-0929-2203
Figure 109132369-A0304-12-0930-2204
Figure 109132369-A0304-12-0931-2205
<210> 599
<211> 645
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 599
Figure 109132369-A0304-12-0932-2206
Figure 109132369-A0304-12-0933-2207
Figure 109132369-A0304-12-0934-2208
Figure 109132369-A0304-12-0935-2209
<210> 600
<211> 645
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 600
Figure 109132369-A0304-12-0936-2210
Figure 109132369-A0304-12-0937-2211
Figure 109132369-A0304-12-0938-2212
Figure 109132369-A0304-12-0939-2213
<210> 601
<211> 506
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 601
Figure 109132369-A0304-12-0940-2214
Figure 109132369-A0304-12-0941-2215
Figure 109132369-A0304-12-0942-2216
<210> 602
<211> 812
<212> PRT
<213> 人工序列(Artificial sequence)
<220>
<223> 合成序列
<400> 602
Figure 109132369-A0304-12-0943-2217
Figure 109132369-A0304-12-0944-2218
Figure 109132369-A0304-12-0945-2219

Claims (20)

  1. 一種T細胞調節多肽(T-cell modulatory polypeptides，TMP)，其包含：i)包含於癌細胞上表現之KRAS抗原決定基之KRAS肽，其中該KRAS肽之長度為至少4個胺基酸；ii)第一主要組織相容性複合物(major histocompatibility complex，MHC)多肽；iii)第二MHC多肽；及iv)至少一個免疫調節多肽，其中該第一主要組織相容性複合物(MHC)多肽為β2-微球蛋白多肽；且其中該第二MHC多肽為I類MHC重鏈多肽。
  2. 如請求項1之T細胞調節多肽，其進一步包含實質上不誘導細胞溶解之Ig Fc多肽，視情況，IgG1 Fc多肽包含一或多個選自N297A、L234A、L235A、L234F、L235E及P331S之胺基酸取代。
  3. 如請求項1或2之T細胞調節多肽，其中該β2M多肽及該MHC重鏈多肽係由將該β2M多肽中之Cys殘基與該MHC重鏈多肽中之Cys殘基連接之二硫鍵連接，視情況其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys。
  4. 如請求項1-3之T細胞調節多肽，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含Cys之第一連接子連接至該KRAS肽，且其中二硫鍵將存在於該第一連接子中之Cys與存在於該MHC重鏈多肽中之Cys連接，視情況其中該第一連接子包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)，其中n為1-10之整數，例如2或3，且二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接。
  5. 如請求項4之T細胞調節多肽，其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
  6. 如請求項1-5中任一項之T細胞調節多肽，其中該至少一個免疫調節多肽為選自由IL-2、4-1BBL、CD80、CD86或其組合組成之群的活化免疫調節多肽之野生型或變異體，視情況其中該至少一個免疫調節多肽中之至少一者為變異體免疫調節多肽，與相應野生型免疫調節多肽對同源共刺激多肽之親和力相比，該異體免疫調節多肽對該同源共刺激多肽展現降低之親和力。
  7. 如請求項6之T細胞調節多肽，其中該至少一個免疫調節多肽為實質上不結合至IL-2Rα且對IL-2Rβ具有降低之親和力的IL-2變異體，視情況其中該變異體IL-2多肽包含i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
  8. 如請求項1-7中任一項之T細胞調節多肽，其中該KRAS肽包含選自由以下組成之群的序列：A)VVGADGVGK(SEQ ID NO：176)、VVGACGVGK(SEQ ID NO：177)、VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VVVGACGVGK(SEQ ID NO：181)、VTGADGVGK(SEQ ID NO：182)、VTGAVGVGK(SEQ ID NO：183)、VTGACGVGK(SEQ ID NO：184)、VTVGADGVGK(SEQ ID NO：185)、VTVGAVGVGK(SEQ ID NO：186)及VTVGACGVGK(SEQ ID NO：187)；且其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸； B)VVVGAGDVGK(SEQ ID NO：188)；VVGAGDVGK(SEQ ID NO：189)；VVVGARGVGK(SEQ ID NO：190)；及VVGARGVGK(SEQ ID NO：191)；且其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸；C)LVVVGADGV(SEQ ID NO：192)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、LVVVGACGV(SEQ ID NO：194)、KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)、KLVVVGACGV(SEQ ID NO：197)、LLVVGADGV(SEQ ID NO：198)、LLVVGAVGV(SEQ ID NO：199)、LLVVGACGV(SEQ ID NO：200)、FLVVVGADGV(SEQ ID NO：201)、FLVVVGAVGV(SEQ ID NO：202)及FLVVVGACGV(SEQ ID NO：203)；且其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸；D)KLVVVGAGDV(SEQ ID NO：204)；及KLVVVGARGV(SEQ ID NO：205)；其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸；E)GAGDVGKSAL(SEQ ID NO：206)；AGDVGKSAL(SEQ ID NO：207)；DVGKSALTI(SEQ ID NO：208)；GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)；AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)；YKLVVVGAV(SEQ ID NO：211)；ARGVGKSAL(SEQ ID NO：212)；GARGVGKSAL(SEQ ID NO：213)；EYKLVVVGAR(SEQ ID NO：214)；RGVGKSALTI(SEQ ID NO：215)；LVVVGARGV(SEQ ID NO：216)；GADGVGKSAL(SEQ ID NO：217)；ACGVGKSAL(SEQ ID NO：218)；及GACGVGKSAL(SEQ ID NO：219)；其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸；及 F)VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)、VVVGAVGVGK(SEQ ID NO：180)、VGAVGVGKS(SEQ ID NO：222)、VGAVGVGKSA(SEQ ID NO：223)、AVGVGKSAL(SEQ ID NO：210)、AVGVGKSALT(SEQ ID NO：225)、GAVGVGKSAL(SEQ ID NO：209)、GAVGVGKSA(SEQ ID NO：227)、LVVVGAVGVG(SEQ ID NO：228)、LVVVGAVGV(SEQ ID NO：193)、KLVVVGAVGV(SEQ ID NO：196)及KLVVVGAVG(SEQ ID NO：231)；其中該KRAS肽之長度為9個胺基酸或10個胺基酸，或長度為至少9個胺基酸或10個胺基酸。
  9. 如請求項1-8中任一項之T細胞調節多肽，其中：A)該KRAS肽為KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A*0201多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；或B)該KRAS肽為VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)或VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
  10. 如請求項1-9中任一項之T細胞調節多肽，其中該TMP包含異二聚體，且其中該異二聚體包含：a1)該第一多肽自N端至C端依次包含：i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b1)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)至少一個免疫調節多肽；ii)I類MHC重鏈多肽；及iii)Ig Fc多肽；或a3)該第一多肽自N端至C端依次包含： i)該KRAS肽；及ii)β2-微球蛋白多肽；及b3)該第二多肽自N端至C端依次包含：i)I類MHC重鏈多肽；及ii)Ig Fc多肽；及iii)至少一個免疫調節多肽；及其中該Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，視情況包含圖3G之胺基酸序列。
  11. 如請求項10之異二聚T細胞調節多肽，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)之第一連接子連接至該KRAS肽，其中n為1-10之整數，例如2或3，其中該MHC重鏈多肽包含殘基84處之Cys及殘基236處之Cys，其中該β2M多肽包含殘基12處之Cys，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，其中二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接，其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中該至少一個免疫調節多肽為包含以下之IL-2變異體：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代，且其中該多肽包含兩個相同、串聯且包含IL-2變異體之免疫調節多肽，該 IL-2變異體包含i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
  12. 如請求項10或11之異二聚T細胞調節多肽，其中A)該KRAS肽為KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A*0201多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；或B)該KRAS肽為VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)或VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
  13. 如請求項1-9中任一項之T細胞調節多肽，其中該TMP為包含以下之單個多肽鏈：i)包含於癌細胞上表現之KRAS抗原決定基之KRAS肽，其中該KRAS肽之長度為至少4個胺基酸；ii)β2-微球蛋白多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；及iv)至少一個免疫調節多肽。
  14. 如請求項13之單鏈T細胞調節多肽，其自N端至C端依次包含：i)KRAS肽；ii)β2M多肽；iii)I類MHC重鏈多肽；iv)Ig Fc多肽；及v)一或多個免疫調節多肽，其中該Ig Fc多肽為實質上不誘導細胞溶解之人類IgG1 Fc多肽，視情況包含圖3G之胺基酸序列。
  15. 如請求項14之單鏈T細胞調節多肽，其中該β2-微球蛋白多肽係由包含序列CGGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：142)或GCGGS(GGGGS)n(SEQ ID NO：140)之第一連接子連接至該KRAS肽，其中n為1-10之整數，例如2或3， 其中該MHC重鏈多肽包含殘基84處之Cys及殘基236處之Cys，其中該β2M多肽包含殘基12處之Cys，其中該β2M多肽之胺基酸殘基12處之Cys經二硫鍵鍵結至該MHC重鏈多肽之胺基酸殘基236處之Cys，其中二硫鍵將該連接子中之Cys與取代該MHC重鏈多肽之Tyr84之Cys連接，其中該β2M多肽係由(GGGGS)n連接子連接至該MHC重鏈多肽，其中n為1、2、3、4、5、6、7、8、9或10，例如n=3或7，其中該MHC重鏈多肽包含與選自由HLA-A*0201多肽、HLA-A*1101多肽、HLA-A*3303多肽及HLA-A*2401多肽組成之群的HLA-A多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列，其中該至少一個免疫調節多肽為包含以下之IL-2變異體：i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代，且其中該多肽包含兩個相同、串聯且包含IL-2變異體之免疫調節多肽，該IL-2變異體包含i)H16A取代及F42A取代；或ii)H16T取代及F42A取代。
  16. 如請求項15之單鏈T細胞調節多肽，其中A)該KRAS肽為KLVVVGADGV(SEQ ID NO：195)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A*0201多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列；或B)該KRAS肽為VVVGADGVGK(SEQ ID NO：179)或VVGAVGVGK(SEQ ID NO：178)，且該MHC重鏈多肽包含與HLA-A11*01多肽具有至少95%胺基酸序列一致性之胺基酸序列。
  17. 一種T細胞調節多肽，其中該TMP為包含如請求項10-12中任一項之第一異二聚TMP及第二異二聚TMP或如請求項13-16中任一項之第一單鏈TMP及第二單鏈TMP之同二聚體，其中該第一異二聚體及該第二異 二聚體為相同的且係由該第一異二聚體及該第二異二聚體之該等Ig Fc多肽之間的一或多個二硫鍵共價結合。
  18. 一種核酸，其包含編碼如請求項10-12中任一項之異二聚TMP之第一多肽或第二多肽，或如請求項13-16中任一項之單鏈TMP之核苷酸序列。
  19. 一種選擇性地調節對KRAS肽抗原決定基具有特異性之T細胞之活性的方法，該方法包括使該T細胞與如態樣1-17中任一項之T細胞調節多肽接觸，其中該接觸選擇性地調節該抗原決定基特異性T細胞之活性。
  20. 一種在患有KRAS相關癌症之患者中治療該癌症之方法，該方法包括向該患者投與有效量之包含如請求項1-17中任一項之T細胞調節多肽之醫藥組合物，視情況進一步包括向該患者共同投與免疫檢查點抑制劑，視情況其中該免疫檢查點抑制劑為對PD-L1、PD-1或CTLA4具有特異性之抗體。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN116970060A (zh) 2016-12-22 2023-10-31 库尔生物制药有限公司 T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法
EP3596118A4 (en) 2017-03-15 2021-04-07 Cue Biopharma, Inc. PROCESSES FOR MODULATING AN IMMUNE RESPONSE
MX2022013208A (es) 2020-05-12 2022-11-14 Cue Biopharma Inc Polipeptidos multimericos moduladores de linfocitos t y metodos de uso de estos.
US11421015B2 (en) 2020-12-07 2022-08-23 Think Therapeutics, Inc. Method of compact peptide vaccines using residue optimization
US11058751B1 (en) * 2020-11-20 2021-07-13 Think Therapeutics, Inc. Compositions for optimized RAS peptide vaccines
WO2022140759A2 (en) * 2020-12-23 2022-06-30 Janssen Biotech, Inc. Neoantigen peptide mimics
CN116981470A (zh) * 2021-03-19 2023-10-31 Cue生物制药股份有限公司 T细胞调节多肽和其使用方法
US11464842B1 (en) 2021-04-28 2022-10-11 Think Therapeutics, Inc. Compositions and method for optimized peptide vaccines using residue optimization
WO2023196896A2 (en) * 2022-04-07 2023-10-12 Cue Biopharma, Inc. Immune cell binding polypeptides

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113248623A (zh) * 2014-06-18 2021-08-13 阿尔伯特爱因斯坦医学院 Syntac多肽及其用途
CA2980292A1 (en) * 2015-03-23 2016-09-29 The Johns Hopkins University Hla-restricted epitopes encoded by somatically mutated genes
RU2018130525A (ru) * 2016-01-27 2020-02-27 Цсл Беринг Ленгнау Аг РЕКОМБИНАНТНЫЕ Fc-МУЛЬТИМЕРЫ IgG
CA3014458A1 (en) * 2016-03-02 2017-09-08 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
CN109414498A (zh) * 2016-03-03 2019-03-01 Cue生物制药公司 T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法
US11505591B2 (en) * 2016-05-18 2022-11-22 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
CN116970060A (zh) * 2016-12-22 2023-10-31 库尔生物制药有限公司 T细胞调节性多聚体多肽及其使用方法
US11851471B2 (en) * 2017-01-09 2023-12-26 Cue Biopharma, Inc. T-cell modulatory multimeric polypeptides and methods of use thereof
EP3596118A4 (en) * 2017-03-15 2021-04-07 Cue Biopharma, Inc. PROCESSES FOR MODULATING AN IMMUNE RESPONSE
KR20200064085A (ko) * 2017-09-07 2020-06-05 큐 바이오파마, 인크. 접합 부위를 갖는 t-세포 조절 다량체 폴리펩타이드 및 이의 사용 방법
EP3737689A4 (en) * 2018-01-09 2021-12-01 Cue Biopharma, Inc. MULTIMERIC T CELL-MODULATING POLYPEPTIDES AND METHOD OF USING THEREOF

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