TW202124408A - 胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物 - Google Patents

胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物 Download PDF

Info

Publication number
TW202124408A
TW202124408A TW109131061A TW109131061A TW202124408A TW 202124408 A TW202124408 A TW 202124408A TW 109131061 A TW109131061 A TW 109131061A TW 109131061 A TW109131061 A TW 109131061A TW 202124408 A TW202124408 A TW 202124408A
Authority
TW
Taiwan
Prior art keywords
group
protected
peptide compound
terminus
peptide
Prior art date
Application number
TW109131061A
Other languages
English (en)
Inventor
吉光佑二
Original Assignee
日商富士軟片股份有限公司
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 日商富士軟片股份有限公司 filed Critical 日商富士軟片股份有限公司
Publication of TW202124408A publication Critical patent/TW202124408A/zh

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
    • C07K1/061—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/06—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents
    • C07K1/061—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups
    • C07K1/062—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length using protecting groups or activating agents using protecting groups for alpha- or omega-carboxy functions
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C243/00—Compounds containing chains of nitrogen atoms singly-bound to each other, e.g. hydrazines, triazanes
    • C07C243/24—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids
    • C07C243/26—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms
    • C07C243/28—Hydrazines having nitrogen atoms of hydrazine groups acylated by carboxylic acids with acylating carboxyl groups bound to hydrogen atoms or to acyclic carbon atoms to hydrogen atoms or to carbon atoms of a saturated carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/02—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length in solution
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/55—Design of synthesis routes, e.g. reducing the use of auxiliary or protecting groups

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Abstract

本發明提供一種包括使用由式(1)表示之肼衍生物之步驟之胜肽化合物之製造方法、包含上述化合物之保護基形成用試劑及肼衍生物。式(1)中，環A表示芳香族烴環或芳香族雜環，R表示氫原子、胺基保護基、胺基酸殘基或胜肽殘基，k表示1～5的整數，n表示1或2，RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團。

Description

胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物
本發明係關於一種胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物。
作為胜肽的製造方法，有固相法及液相法等。 固相法有利於僅藉由樹脂的清洗進行反應之後的隔離及純化之方面。但是，本質上為不均勻相的反應，為了補償較低的反應性而需要使用過量的反應試劑或試劑。又，很難進行反應的追蹤及載置於載體之狀態下的反應產物的解析。 另一方面，液相法反應性良好，且能夠在縮合反應之後，藉由抽取清洗及單離等來進行中間物胜肽的純化。但是，液相法在偶合反應及脫保護的各步驟中還存在課題。
作為習知之胜肽合成中所使用之分離用載體，已知有專利文獻1中所記載之分離用載體。 又，作為先前的保護基形成用試劑，已知有專利文獻2中所記載之具有二苯基甲烷結構之化合物及專利文獻3中所記載之具有茀結構之化合物。
[專利文獻1]國際公開第2007/034812號 [專利文獻2]國際公開第2010/113939號 [專利文獻3]國際公開第2010/104169號
本發明的一實施形態欲要解決之課題在於提供一種脫保護時的產率優異之胜肽化合物之製造方法。 又，本發明的另一實施形態欲要解決之課題在於提供一種脫保護時的產率優異之保護基形成用試劑。 又，本發明的又一實施形態欲要解決之課題在於提供一種新型肼衍生物。
用於解決上述課題之機構中，包括以下態樣。 ＜1＞一種胜肽化合物之製造方法，其係包括使用由下述式(1)表示之肼衍生物之步驟。
Figure 02_image003
式(1)中，環A表示芳香族烴環或芳香族雜環，R表示氫原子、胺基保護基、胺基酸殘基或胜肽殘基，k表示1～5的整數，n表示1或2，RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團，k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
＜2＞如＜1＞所述之胜肽化合物之製造方法，其中 使用由上述式(1)表示之肼衍生物之步驟係藉由由上述式(1)表示之肼衍生物保護胺基酸化合物或胜肽化合物的羧基之C末端保護步驟。 ＜3＞如＜2＞所述之胜肽化合物的製造方法，其中 上述C末端保護步驟中之胺基酸化合物或胜肽化合物為N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物。 ＜4＞如＜3＞所述之胜肽化合物的製造方法，其係還包括： N末端脫保護步驟，係對在上述C末端保護步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護；及 胜肽鏈延長步驟，係使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物與在上述N末端脫保護步驟中所獲得之C末端被保護的胺基酸化合物或C末端被保護的胜肽化合物的N末端縮合。 ＜5＞如＜4＞所述之胜肽化合物的製造方法，其係還包括使在上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物沉澱之沉澱步驟。 ＜6＞如＜4＞所述之胜肽化合物之製造方法，其係還包括向上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物添加水並且將雜質萃取分離至水層之萃取步驟。 ＜7＞如＜5＞或＜6＞所述之胜肽化合物的製造方法，其係在上述沉澱步驟或萃取步驟之後，依序還包括1次以上的如下步驟： 對所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護之步驟； 使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物縮合至所獲得之C末端被保護的胜肽化合物的N末端中之步驟；及 沉澱所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物之步驟。 ＜8＞如＜1＞至＜7＞之任一項所述之胜肽化合物的製造方法，其係還包括將C末端保護基脫保護之C末端脫保護步驟。 ＜9＞如＜1＞至＜8＞之任一項所述之胜肽化合物之製造方法，其中 上述環A係苯環、萘環或吡啶環。 ＜10＞如＜1＞至＜9＞之任一項所述之胜肽化合物之製造方法，其中 上述式(1)中，k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。 ＜11＞如＜1＞至＜10＞之任一項所述之胜肽化合物之製造方法，其中 上述n係1。 ＜12＞如＜1＞至＜11＞之任一項所述之胜肽化合物之製造方法，其中 上述k係1。 ＜13＞一種保護基形成用試劑，其包含由下述式(1a)表示之肼衍生物。
Figure 02_image005
式(1a)中，環A表示芳香族烴環或芳香族雜環，R表示氫原子或胺基保護基，k表示1～5的整數，n表示1或2，RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團，k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
＜14＞如＜13＞所述之保護基形成用試劑，其中 上述保護基形成用試劑係羧基的保護基形成用試劑。 ＜15＞如＜13＞或＜14＞所述之保護基形成用試劑，其中 上述保護基形成用試劑係胺基酸化合物的羧基或胜肽化合物的C末端保護基形成用試劑。 ＜16＞如＜13＞至＜15＞之任一項所述之保護基形成用試劑，其中 上述環A係苯環、萘環或吡啶環。 ＜17＞如＜13＞至＜16＞之任一項所述之保護基形成用試劑，其中 上述式(1a)中，k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。 ＜18＞如＜13＞至＜17＞之任一項所述之保護基形成用試劑，其中 上述n係1。 ＜19＞如＜13＞至＜18＞之任一項所述之保護基形成用試劑，其中 上述k係1。 ＜20＞一種肼衍生物，其係由下述式(1b)表示。
Figure 02_image007
式(1b)中，環A表示芳香族烴環或芳香族雜環，R表示氫原子或胺基保護基，k表示1～5的整數，n表示1或2，RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團，k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。
＜21＞如＜20＞所述之肼衍生物，其中 上述環A係苯環、萘環或吡啶環。 ＜22＞如＜20＞或＜21＞所述之肼衍生物，其中 上述n係1。 ＜23＞如＜20＞至＜22＞之任一項所述之肼衍生物，其中 上述k係1。 [發明之效果]
依據本發明的一實施形態，能夠提供一種脫保護時的產率優異之胜肽化合物之製造方法。 又，依據本發明的另一實施形態，能夠提供一種脫保護時的產率優異之保護基形成用試劑。 又，依據本發明的又一實施形態，能夠提供一種新型肼衍生物。
[用以實施發明的形態]
以下，對本發明的內容進行詳細說明。以下所記載之構成要件的說明有時基於本發明的代表性實施態樣來進行，但是本發明並不限定於該等實施態樣者。 又，本說明書中，使用“～”表示之數值範圍係指將“～”前後所記載之數值作為下限值及上限值而包含之範圍。 在本說明書中階段性記載之數值範圍中，一個數值範圍內所記載之上限值或下限值可以替換成其他階段性記載的數值範圍內的上限值或下限值。又，在本說明書中所記載之數值範圍中，其數值範圍的上限值或下限值可以替換成實施例中所示之值。 在本說明書中，“步驟”的術語不僅為獨立之步驟，而且即使在無法與其他步驟明確區分之情況下，亦實現步驟的所期望的目的，則包含在本術語中。 關於本說明書中的基團(原子團)的標記，未記述經取代及未經取代之標記係同時包含不具有取代基者和具有取代基者。例如，“烷基”不僅包含不具有取代基之烷基(未經取代烷基)，還包含具有取代基之烷基(取代烷基)。 又，本說明書中的化學結構式亦有時記載為省略了氫原子之簡化結構式。 本發明中，“質量%”的定義與“重量%”相同，“質量份”的定義與“重量份”相同。 又，本發明中，2個以上的較佳態樣的組合係更佳的態樣。
本說明書中，“具有脂肪族烴基之有機基團”為在其分子結構中具有脂肪族烴基之一價(具有一個鍵結鍵)的有機基團。 “脂肪族烴基”係直鏈狀、支鏈狀或環狀的飽和或不飽和的碳數5以上的脂肪族烴基為較佳，碳數(亦稱為“碳數”。)5～60的脂肪族烴基為更佳，碳數5～40的脂肪族烴基為進一步較佳，碳數10～30的脂肪族烴基為特佳。 具有脂肪族烴基之有機基團中之脂肪族烴基的部位並無特別限定，可以存在於末端(一價基團)，亦可以存在於除此以外的部位(例如，二價基團)。 作為“脂肪族烴基”，可舉出烷基、環烷基、烯基、炔基等的一價的基團及由該等衍生之二價的基團(從上述一價的基團去除1個氫原子之二價的基團)、從各種固醇基去除羥基等之基團等。 作為“烷基”，例如碳數1～30的烷基等為較佳，例如可舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、二級丁基、異丁基、三級丁基、戊基、異戊基、2-甲基丁基、2-戊基、3-戊基、己基、辛基、2-乙基己基、癸基、十六烷基、十八烷基、二十基、二十二基、二十四基、月桂基、十三烷基、肉豆蔻基、異硬脂基等。 作為上述脂肪族烴基中的烷基，十八烷基、二十基、二十二基或二十四基為較佳，二十基、二十二基或二十四基為更佳。 又，作為上述脂肪族烴基中的烷基，碳數5～40的烷基為較佳，碳數10～30的烷基為更佳。 又，除非另有說明，本發明中的“烷基”可以為直鏈烷基，亦可以為支鏈烷基。又，關於烯基及炔基，亦與烷基相同。 作為“環烷基”，例如碳數3～30的環烷基等為較佳，例如可舉出環戊基、環己基、異莰基及三環癸基等。又，該等可以反覆連結，亦可以為2環以上的縮環結構。 又，作為上述脂肪族烴基中的環烷基，碳數5～30的環烷基為更佳。 作為“烯基”，例如碳數2～30的烯基等為較佳，例如可舉出戊烯基、己烯基及油烯基等。又，作為“烯基”，碳數5～30的烯基為更佳。 作為“炔基”，例如碳數2～30的炔基等為較佳，例如可舉出4-戊炔基及5-己烯基等。又，作為“炔基”，碳數5～30的炔基為更佳。 作為“甾基”，例如，具有膽固醇結構之基團或具有雌二醇結構之基團等為較佳。 作為“芳基”例如為碳數6～14的芳基等為較佳，例如可舉出苯基、1-萘基、2-萘基、聯苯基及2-蒽基等。
作為“胺基保護基(胺基的保護基)”，例如可舉出甲醯基、碳數1～6的醯基(例如，乙醯基、丙醯基)、碳數2～6的烷氧羰基(例如，甲氧基羰基、乙氧基羰基、三級丁氧基羰基(Boc基))、苯甲醯基、碳數8～20的芳基烷氧基羰基(例如，苄基氧羰基、9-芴基甲氧基羰基(Fmoc基))、三苯甲基、單甲氧基三苯甲基、1-(4,4-Dimethyl-2,6-dioxocyclohex-1-ylidene)-3-methylbutyl基 (1-(4,4-二甲基-2,6-二氧代環己基-1-亞烷基)-3-甲基丁基)、鄰苯二甲醯基、N,N-二甲基胺基亞甲基、甲矽烷基(例如，三甲基矽烷基、三乙基甲矽烷基、二甲基苯基甲矽烷基、三級丁基二甲基甲矽烷基、三級丁基二乙基甲矽烷基)、碳數2～6的烯基等。該等基團可以經選自包括鹵素原子(例如，氟原子、氯原子、溴原子、碘原子)、碳數1～6的烷氧基(例如，甲氧基、乙氧基、丙氧基)及硝基之群組中之1個～3個取代基取代。 作為胺基保護基，碳數1～6的烷氧羰基及碳數7～20的芳基烷氧基羰基為較佳。
作為“羥基的保護基”，例如可舉出碳數1～6的烷基、苯基、三苯甲基、甲醯基、碳數1～6的醯基、苯甲醯基、碳數7～10的芳基烷基羰基、2-四氫吡喃基、2-四氢呋喃基、甲矽烷基、碳數2～6的烯基等。該等基團可以經選自包括鹵素原子、碳數1～6的烷基、碳數1～6的烷氧基及硝基之群組中之1個～3個取代基取代。
作為“羧基的保護基”，例如可舉出碳數1～6的烷基、碳數7～10的芳基烷基、苯基、三苯甲基、甲矽烷基、碳數2～6的烯基等。該等基團可以經選自包括鹵素原子、碳數1～6的烷氧基及硝基之群組中的1個～3個取代基取代。
作為“羰基的保護基”，例如可舉出環狀縮醛(例如，1,3-二㗁烷)及非環狀縮醛(例如，二(碳數1～6的烷基)縮醛)等。 作為“胍基的保護基”，例如可舉出2,2,4,6,7-五甲基二氫苯并呋喃-5-磺醯基、2,3,4,5,6-五甲基苯磺醯基、甲苯磺醯基及硝基等。 作為“巰基(硫醇基)的保護基”，例如可舉出三苯甲基、4-甲基苄基、乙醯胺基甲基、三級丁基及三級丁硫基等。
(胜肽化合物的製造方法) 本發明之胜肽化合物之製造方法包括使用由下述式(1)表示之肼衍生物之步驟。
Figure 02_image003
式(1)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子、胺基保護基、胺基酸殘基或胜肽殘基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
作為如專利文獻1～3中所記載的用作習知之胺基酸或胜肽的保護基之化合物，由上述式(1)表示之肼衍生物是完全未知的。 由上述式(1)表示之肼衍生物具有與芳香族烴環或芳香族雜環鍵結的肼基，因此脫保護時不會使反應系中成為酸性條件，而是能夠藉由氧化反應而進行脫保護，又，能夠輕易地進行以往難以進行的均勻系的脫保護，基於親核試劑之取代反應的產率優異，因此認為脫保護時的產率優異。又，肼結構的親核性高，因此認為加載產率(保護時的產率)優異，又，與胜肽化合物中的C末端的鍵結係穩定的醯胺鍵結，因此認為能夠抑制後述之二酮哌𠯤化合物的副生。
又，由上述式(1)表示之肼衍生物係k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上，因此完成縮合之後，藉由變更溶劑的組成，能夠沉澱及隔離縮合物，並且所獲得之胜肽化合物的產率亦優異。 另外，藉由本發明之由式(1)表示之肼衍生物係上述結構，能夠抑制副反應並且以高產率合成胜肽化合物。 另外，藉由使用本發明之由式(1)表示之肼衍生物，即使容易產生副反應之如包含非天然胺基酸之非天然胜肽的難合成胜肽化合物，亦能夠抑制副反應並且以高純度來合成。尤其，即使有副生後述之二酮哌𠯤化合物之可能性之情況下，亦能夠抑制二酮哌𠯤化合物的副生，並且能夠以高產率獲得胜肽化合物。
以下，對本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法進行詳細地說明。
本發明之胜肽化合物之製造方法中，由式(1)表示之肼衍生物不僅用於保護基的形成，而且亦能夠用於胜肽化合物的改質、對水或有機溶劑等的溶解度的調整、結晶化性的改良、多聚體化等。 其中，由式(1)表示之肼衍生物用於保護基的形成為較佳，用於胺基酸化合物或胜肽化合物中的C末端保護基的形成為更佳。
＜由式(1)表示之肼衍生物＞ 以下示出本發明中的由式(1)表示之肼衍生物(以下，簡稱為“由式(1)表示之化合物”。)。
Figure 02_image003
式(1)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子、胺基保護基、胺基酸殘基或胜肽殘基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
式(1)中的環A表示芳香族烴環或芳香族雜環，又，環A除了RA 及-NH-NHR以外，還可以具有取代基。 環A中的芳香族烴環及芳香族雜環可以為單環，亦可以為2環以上的稠環。作為上述稠環，可舉出2環以上的縮合多環芳香族烴環、2環以上的縮合多環芳香族雜環、1環以上的芳香族烴環與1環以上的芳香族雜環的稠環。 從脫保護速度、二酮哌𠯤化合物的副生抑制性、胜肽化合物合成時的產率及脫保護時的產率的觀點考慮，環A係單環或2環為更佳，單環為特佳。 又，從晶析性、脫保護速度及脫保護時的產率的觀點考慮，環A係芳香族烴環為較佳。 作為環A，從脫保護速度、二酮哌𠯤化合物的副生抑制性、胜肽化合物合成時的產率及脫保護時的產率的觀點考慮，苯環、萘環、蒽環、菲環、并四苯環、聯三伸苯(triphenylene)環、芘環、䓛(chrysene)環、吡啶環、喹啉環、異喹啉環、苯并噻吩環、呋喃環、苯并呋喃環、吡咯環、吲哚環、咔唑環、吡唑環、吲唑環或噻吩環為較佳，苯環、萘環或吡啶環為更佳，苯環或吡啶環為進一步較佳，苯環為特佳。 另外，環A如後述那樣亦可以2以上的取代基鍵結而形成環結構，還可以為使脂肪族烴環、脂肪族雜環等與環A縮環而成之結構。
作為除了RA 及-NH-NHR亦可以在環A上具有之取代基，並無特別限制，可舉出碳數1～10的烷基(較佳之碳數係1～4)、碳數1～10的烷氧基、碳數6～20的芳氧基、鹵素原子、碳數1～10的鹵化烷基、碳數6～20的芳基、碳數1～20的醯基、碳數6～20的醯氧基、碳數1～10的烷氧羰基、碳數6～20的芳基氧羰基、碳數6～20的烷硫基、碳數6～20的芳硫基、Rst -CO-NRst -、-CON(Rst )2 、碳數1～10的二烷胺基、碳數6～20的烷基芳胺基、碳數12～30的二芳胺基及組合2以上該等而成之基團等。另外，Rst 表示氫原子、碳數1～10的烷基或碳數6～20的芳基。
作為R亦即胺基保護基，能夠使用上述之胺基保護基，碳數2～6的烷氧羰基及碳數8～20的芳基烷氧基羰基為較佳。 作為R亦即胺基酸殘基或胜肽殘基，係指從胺基酸或胜肽去除羥基而能夠與-NH-NH-鍵結者。又，R係胺基酸殘基或胜肽殘基之情況下，亦有時為經保護之胺基酸化合物或胜肽化合物。胺基酸殘基及胜肽殘基的種類並無特別限定，實施例中所記載者為較佳。 又，作為胺基酸殘基，可較佳地舉出後述之C末端保護步驟中所記載的胺基酸殘基，作為胜肽殘基，可較佳地舉出後述之C末端保護步驟中所記載的從胜肽化合物去除羥基之殘基。 其中，從合成適合性的觀點考慮，作為R，氫原子、Boc基、Fmoc基、苄基氧羰基(Cbz基)、2,2,2-三氯乙氧基羰基(Troc基)或烯丙基氧羰基(Alloc基)為較佳，從保存穩定性的觀點考慮，Boc基、Fmoc基、Cbz基、Troc基或Alloc基為更佳，Boc基或Fmoc基為進一步較佳，Boc基為特佳。 又，從反應性的觀點考慮，作為R，氫原子為特佳。
從晶析性、溶劑溶解性的觀點考慮，式(1)中的k係1～4的整數為較佳，1～3的整數為更佳，1為特佳。 從胜肽化合物合成時的產率及脫保護時的產率的觀點考慮，式(1)中的n係1為較佳。
RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團，k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。 其中，從晶析性及溶解性的觀點考慮，RA 分別獨立地為具有脂肪族烴基之有機基團為較佳，具有兩個以上碳數13以上的脂肪族烴基之有機基團為更佳，具有兩個～六個碳數13以上的脂肪族烴基之有機基團為更佳，具有兩個或三個碳數13以上的脂肪族烴基之有機基團為特佳。
又，從溶劑溶解性、結晶性及產率的觀點考慮，上述碳數13以上的脂肪族烴基為碳數13以上為較佳，碳數14以上為更佳，碳數16以上為進一步較佳，碳數18以上為特佳。 上述有機基團可以進一步經甲矽烷基、具有矽烷氧基結構之烴基及具有全氟烷基結構之有機基團取代。
作為上述甲矽烷基，三烷基甲矽烷基為較佳，具有三個碳數1～6的烷基之甲矽烷基為更佳。 作為上述具有矽烷氧基結構之烴基中之矽烷氧基結構，三烷基矽烷氧基結構為較佳，具有三個碳數1～6的烷基之矽烷氧基結構為更佳。 又，上述具有矽烷氧基結構之烴基具有1～6個矽烷氧基結構為較佳。 進而，上述具有矽烷氧基結構之烴基的碳數為10以上為較佳，10～100為更佳，16～50為特佳。
作為上述具有矽烷氧基結構之烴基，可較佳地舉出由下述式(Si)表示之基團。
Figure 02_image011
式(Si)中，Rsi1 表示單鍵或碳數1～3的伸烷基，Rsi2 表示碳數1～3的伸烷基，Rsi3 及Rsi4 分別獨立地表示氫原子、碳數1～6的烷基或-OSiRsi5 Rsi6 Rsi7 ，Rsi5 ～Rsi7 分別獨立地表示碳數1～6的烷基或芳基。
式(Si)中的Rsi5 ～Rsi7 分別獨立地為碳數1～6的烷基或苯基為較佳，碳數1～6的烷基為更佳。
上述具有全氟烷基結構之有機基團中之全氟烷基結構為碳數1～20的全氟烷基結構為較佳，碳數5～20的全氟烷基結構為更佳，碳數7～16的全氟烷基結構為特佳。又，上述全氟烷基結構可以為直鏈狀，亦可以具有支鏈，還可以具有環結構。 上述具有全氟烷基結構之有機基團為全氟烷基、具有全氟烷基結構之烷基或在全氟烷基結構及烷鏈中具有醯胺鍵之烷基為較佳。 上述具有全氟烷基結構之有機基團的碳數為5以上為較佳，10以上為更佳，10～100為進一步較佳，16～50為特佳。 作為上述具有全氟烷基結構之有機基團，例如可較佳地舉出下述所示之基團。
Figure 02_image013
具有脂肪族烴基之有機基團中的除了脂肪族烴基以外的部位能夠任意地設定。例如亦可以具有醚鍵、硫醚鍵、酯鍵、磺醯胺鍵、醯胺鍵、除了“脂肪族烴基”以外的烴基(一價的基或二價的基團)等部位。 作為除了脂肪族烴基以外的烴基，例如可舉出碳數1～4的脂肪族烴基及芳香族烴基等，具體而言，例如可以使用碳數1～4的烷基及芳基等一價的基團以及從它們衍生之二價的基團。其中，碳數6～10的芳基為更佳，苯基為特佳。 又，上述脂肪族烴基及除了上述脂肪族烴基以外的烴基可以經選自鹵素原子、氧代基等之取代基取代。
上述RA 中，具有脂肪族烴基之有機基團與環A的鍵結(取代)可以為經由存在於上述RA 中之脂肪族烴基或上述烴基者亦即直接以碳-碳鍵而鍵結者，亦可以為經由存在於上述RA 中之醚鍵、硫醚鍵、酯鍵、醯胺鍵、磺醯胺鍵等的部位者。其中，從化合物的合成的容易性的觀點考慮，具有脂肪族烴基之有機基團至少具有酯鍵、醯胺鍵或磺醯胺鍵為較佳，至少具有酯鍵或醯胺鍵為更佳。
又，從合成適合性、晶析性及溶解性的觀點考慮，上述具有脂肪族烴基之有機基團具有由下述式(A1)～式(A5)表示之基團為較佳，具有由下述式(A1)～式(A4)表示之基團為更佳，具有由下述式(A1)或式(A2)表示之基團為進一步較佳，具有由下述式(A1)表示之基團為特佳。 又，從晶析性及溶解性的觀點考慮，由下述式(A5)表示之基團係由下述式(A6)或式(A7)表示之基團為較佳。
Figure 02_image015
式(A1)～式(A7)中，RA1 分別獨立地表示碳數13以上的脂肪族烴基，nA表示1～5的整數，Rs 分別獨立地表示取代基，ns1及ns2分別獨立地表示0～4的整數，ns3表示0～6的整數，ns4表示0～3的整數，ns5表示0～(5-nA)的整數，ns6表示0～3的整數，ns7表示0～2的整數，波線部分表示與其他結構的鍵結位置。
從胜肽化合物合成時的產率及原料獲得性的觀點考慮，式(A1)～式(A7)中的RA1 分別獨立地為碳數16～40的脂肪族烴基為較佳，碳數18～36的脂肪族烴基為更佳，碳數18～32的烷基為進一步較佳，碳數18～22的直鏈烷基為特佳。 又，從合成適合性的觀點考慮，式(A1)～式(A7)中的RA1 均為相同的基團為較佳。 從溶解性及晶析性的觀點考慮，式(A5)中的nA係1～4的整數為較佳，2～4的整數為更佳，2或3為特佳。
作為式(A1)～式(A7)中的Rs ，可較佳地舉出與上述“可在環A上具有之取代基”相同的取代基。 式(A1)或式(A2)中的ns1及ns2分別獨立地為0～2的整數為較佳，0或1為更佳，0為特佳。 式(A3)中的ns3係0～4的整數為較佳，0～2的整數為更佳，0為特佳。 式(A4)中的ns4係0～2的整數為較佳，0或1為更佳，0為特佳。 式(A5)～式(A7)中的ns5～ns7分別獨立地為0或1為較佳，0為更佳。
由式(1)表示之肼衍生物中，溶劑從溶解性、晶析性、脫保護速度、二酮哌𠯤化合物的副生抑制性、胜肽化合物合成時的產率及脫保護時的產率的觀點考慮，所有RA 所具有之所有脂肪族烴基的總計碳數係26以上為較佳，26～200為更佳，32～100為進一步較佳，34～80為特佳，44～66為最佳。 又，由式(1)表示之肼衍生物係k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係碳數13以上之化合物，從溶劑溶解性、晶析性的觀點考慮，k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上為較佳，具有一個以上具有兩個以上的碳數13以上的脂肪族烴基之RA 為更佳。 例如，“k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上”之情況下，由式(1)表示之肼衍生物可以為具有一個以上具有兩個以上的碳數13以上的脂肪族烴基之RA 之態樣，亦可以為具有兩個以上僅具有一個碳數13以上的脂肪族烴基之RA 之態樣，還可以為該兩者的態樣。 另外，從溶解性及晶析性的觀點考慮，由式(1)表示之肼衍生物至少具有一個碳數13～100的脂肪族烴基之化合物為更佳，至少具有一個碳數18～40的脂肪族烴基之化合物為進一步較佳，至少具有一個碳數20～36的脂肪族烴基之化合物為特佳。 若由式(1)表示之肼衍生物的k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數較佳為14以上、更佳為16以上、進一步較佳為18以上、特佳為20以上，則發揮更優異之效果。認為其原因係因為，由於碳數增加而使疏水性在分子整體中所佔之貢獻率變大，從而變得容易溶解於疏水性溶劑中，並且對於親水性溶劑，藉由碳數增加而聚集力進一步增加，從而變得容易進行結晶。 另外，從晶析性的觀點考慮，上述脂肪族烴基係烷基為較佳，直鏈烷基為更佳。 又，從溶劑溶解性、晶析性的觀點考慮，1個RA 的碳數分別獨立地為13～200為較佳，18～150為更佳，18～100為進一步較佳，20～80為特佳。
在式(1)中，從溶劑溶解性、結晶性及產率的觀點考慮，至少一個RA 為由下述式(f1)、式(a1)、式(b1)或式(e1)中的任一個表示之基團為較佳，由下述式(f1)或式(a1)表示之基團為更佳，由下述式(f1)表示之基團為特佳。
Figure 02_image017
式(f1)中，波線部分表示與其他結構的鍵結位置，m9表示1～3的整數，X9 分別獨立地表示單鍵、-O-、-S-、-COO-、-OCO-、-OCONH-、-NHCONH-、-NHCO-或-CONH-，R9 分別獨立地表示二價的脂肪族烴基，Ar1 表示(m10+1)價的芳香族基或(m10+1)價的雜芳族基團，m10表示1～3的整數，X10 分別獨立地表示單鍵、-O-、-S-、-COO-、-OCO-、-OCONH-、-NHCONH-、-NHCO-或-CONH-，R10 分別獨立地表示一價的脂肪族烴基，R10 中的至少一個為碳數5以上的一價的脂肪族烴基。
Figure 02_image019
式(a1)中，波線部分表示與其他結構的鍵結位置，m20表示1～10的整數，X20 分別獨立地表示單鍵、-O-、-S-、-COO-、-OCO-、-OCONH-、-NHCONH-、-NHCO-或-CONH-，R20 分別獨立地表示二價的脂肪族烴基，R20 中的至少一個為碳數5以上的二價的脂肪族烴基。
Figure 02_image021
式(b1)中，波線部分表示與其他結構的鍵結位置，mb表示1或2，b1～b4分別獨立地表示0～2的整數，Xb1 ～Xb4 分別獨立地表示單鍵、-O-、-S-、-COO-、-OCONH-或-CONH-，Rb2 及Rb4 分別獨立地表示氫原子、甲基或碳數5以上的脂肪族烴基，Rb3 表示碳數5以上的脂肪族烴基。
Figure 02_image023
式(e1)中，波線部分表示與其他結構的鍵結位置，Xe1 表示單鍵、-O-、-S-、-NHCO-或-CONH-，me表示0～15的整數，e1表示0～11的整數，e2表示0～5的整數，Xe2 分別獨立地表示單鍵、-O-、-S-、-COO-、-OCONH-、-NHCO-或-CONH-，Re2 分別獨立地表示氫原子、甲基、具有碳數5以上的脂肪族烴基之有機基團。
式(f1)中的m9為1或2為較佳，1為更佳。 式(f1)中的X9 及X10 分別獨立地為-O-、-S-、-COO-、-OCONH-或-CONH-為較佳，-O-為更佳。 式(f1)中的R9 分別獨立地為碳數1～10的伸烷基為較佳，碳數1～4的伸烷基為更佳，亞甲基為特佳。 式(f1)中的R10 分別獨立地為碳數5～60的一價的脂肪族烴基為較佳，碳數12～50的一價的脂肪族烴基為更佳，碳數18～40的一價的脂肪族烴基為進一步較佳，碳數20～32的一價的脂肪族烴基為特佳。又，R10 分別獨立地為直鏈烷基或支鏈烷基為較佳，直鏈烷基為更佳。 式(f1)中的m10為2或3為較佳，2為更佳。 式(f1)中的Ar1 為(m10+1)價的芳香族基為較佳，從苯去除(m10+1)個氫原子而獲得之基團或從萘去除(m10+1)個氫原子而獲得之基團為更佳，從苯去除(m10+1)個氫原子而獲得之基團為特佳。
又，從溶劑溶解性、結晶性及產率的觀點考慮，由上述式(f1)表示之基團為由下述式(f2)表示之基團為較佳。
Figure 02_image025
式(f2)中，波線部分表示與其他結構的鍵結位置，m10表示1～3的整數，m11表示1～3的整數，X10 分別獨立地表示單鍵、-O-、-S-、-COO-、-OCO-、-OCONH-、-NHCONH-、-NHCO-或-CONH-，R10 分別獨立地表示碳數5以上的一價的脂肪族烴基。
式(f2)中的m10、X10 及R10 分別與式(f1)中的m10、X10 及R10 的含義相同，較佳態樣亦相同。 式(f2)中的m11為1或2為較佳，1為更佳。
式(a1)中的m20為1或2為較佳。 式(a1)中的X20 分別獨立地為-O-、-S-、-COO-、-OCONH-或-CONH-為較佳，-O-為更佳。 式(a1)中的R20 為碳數5以上的二價的脂肪族烴基為較佳，碳數5～60的二價的脂肪族烴基為更佳，碳數8～40的二價的脂肪族烴基為進一步較佳，碳數12～32的二價的脂肪族烴基為特佳。又，R20 為直鏈伸烷基為較佳。
式(b1)中的mb為1為較佳。 式(b1)中的b1～b4分別獨立地為1或2為較佳，1為更佳。 式(b1)中的Xb1 ～Xb4 分別獨立地為-O-、-S-、-COO-、-OCONH-或-CONH-為較佳，-O-為更佳。 式(b1)中的Rb2 及Rb4 分別獨立地為氫原子、甲基或碳數5～60的脂肪族烴基為較佳，氫原子、甲基或碳數8～40的烷基為較佳，氫原子、甲基或碳數12～32的烷基為特佳。 式(b1)中的Rb3 為碳數5～60的一價的脂肪族烴基為較佳，碳數5～60的一價的脂肪族烴基為更佳，碳數8～40的一價的脂肪族烴基為進一步較佳，碳數12～32的一價的脂肪族烴基為特佳。又，Rb3 為直鏈烷基為較佳。
又，從溶劑溶解性的觀點考慮，本發明之由式(1)表示之化合物作為上述具有脂肪族烴基之有機基團，可較佳地舉出含有具有支鏈之脂肪族烴基之有機基團，可更佳地舉出以下所示之基團。再者，波線部分表示與其他結構的鍵結位置，nt2表示3以上的整數，nt3表示設定成下述基團的總碳數成為14～300之整數。
Figure 02_image027
又，從合成適合性及脫保護時的產率的觀點考慮，由式(1)表示之肼衍生物係由下述式(B1)～式(B5)中的任一個表示之化合物為較佳，由式(B1)～式(B4)中的任一個表示之化合物為更佳，由式(B1)表示之化合物為特佳。
Figure 02_image029
式(B1)～式(B5)中，RB1 分別獨立地表示碳數13以上的脂肪族烴基，ZB 表示羰基或磺醯基，RsB 分別獨立地表示取代基，nB1分別獨立地表示0～4的整數，nB2表示0～6的整數，nB3表示0～3的整數，nB41表示0～4的整數，nB42表示1～5的整數，nB5表示1～5的整數，LB5 表示二價的連結基，R表示氫原子、胺基保護基、胺基酸殘基或胜肽殘基，ns51表示0～4的整數，ns52表示0～4的整數，滿足nB5+ns52=1～5的整數。
式(B1)～式(B5)中的R的含義分別與式(1)中的R的含義相同，較佳之態樣亦相同。 從胜肽化合物合成時的產率及原料獲得性的觀點考慮，式(B1)～式(B5)中的RB1 分別獨立地為碳數16～40的脂肪族烴基為較佳，碳數18～36的脂肪族烴基為更佳，碳數18～32的烷基為進一步較佳，碳數18～22的直鏈烷基為特佳。 又，從合成適合性的觀點考慮，式(B1)～式(B5)中的RB1 均為相同的基團為較佳。 從溶解性及晶析性的觀點考慮，式(B5)中的nB5係1～4的整數為較佳，2～4的整數為更佳，2或3為特佳。 作為式(B1)～式(B5)中的RsB ，可較佳地舉出與在上述環A上具有之取代基相同的取代基。 式(B1)中的nB1分別獨立地為0～2的整數為較佳，0或1為更佳，0為特佳。 式(B2)中的nB2係0～4的整數為較佳，0～2的整數為更佳，0為特佳。 式(B3)中的nB3係0～2的整數為較佳，0或1為更佳，0為特佳。 式(B4)中的nB41係0或1為較佳，0為更佳。 式(B4)中的nB42係2～5的整數為較佳，2～4為更佳，2或3為特佳。
從合成適合性及晶析性的觀點考慮，式(B5)中的LB5 的碳數係碳數1～30為較佳，碳數1～20為更佳，碳數1～8為特佳。 從合成適合性及晶析性的觀點考慮，式(B5)中的LB5 係組合一個以上伸烷基或選自包括酯鍵、醯胺鍵、磺醯胺鍵、醚鍵、胺甲酸乙酯鍵及脲鍵之群組中之至少1種鍵與一個以上伸烷基而成之基團為較佳， 組合一個以上選自包括酯鍵、醯胺鍵、磺醯胺鍵、醚鍵、胺甲酸乙酯鍵及脲鍵之群組中之至少1種鍵與一個以上伸烷基而成之基團為更佳， 組合一個以上選自包括酯鍵、醯胺鍵及磺醯胺鍵之群組中之至少1種鍵與一個以上伸烷基而成之基團為進一步較佳， 組合一個或兩個選自包括酯鍵、醯胺鍵及磺醯胺鍵之群組中之至少1種鍵與一個或兩個伸烷基而成之基團為特佳。 另外，式(B5)中的-ORB1 的苯環上的取代位置並無特別限制，相對於LB5 的取代位置(1位)係3位～5位為較佳。 式(B5)中的ns51係0～2的整數為較佳，0或1為更佳，0為特佳。 式(B5)中的ns52係0～2的整數為較佳，0或1為更佳，0為特佳。
由式(1)表示之肼衍生物的分子量並無特別限制，從脫保護速度、晶析性、溶劑溶解性、二酮哌𠯤化合物的副生抑制性、胜肽化合物合成時的產率及脫保護時的產率的觀點考慮，340～3,000為較佳，400～2,000為更佳，500～1,500為進一步較佳，800～1,300為特佳。又，若分子量係3,000以下，則目標物中所佔之由式(1)表示之肼衍生物的比例適當，且對由式(1)表示之肼衍生物進行脫保護而獲得之化合物的比例不會變少，因此生產性優異。
作為由式(1)表示之肼衍生物的具體例，可較佳地舉出下述所示之化合物，當然不限定於該等。
Figure 02_image031
Figure 02_image033
Figure 02_image035
Figure 02_image037
Figure 02_image039
Figure 02_image041
Figure 02_image043
Figure 02_image045
Figure 02_image047
Figure 02_image049
＜由式(1)表示之肼衍生物之製造方法＞ 作為由式(1)表示之肼衍生物之製造方法，並無特別限定，能夠參閱公知的方法來製造。 用於製造由式(1)表示之肼衍生物之原料化合物只要無特別說明，亦可以使用市售者，亦能夠按照本身公知的方法或基於該等之方法來進行製造。例如，藉由向如三級丁氧基羰基肼苯甲酸的芳香族肼衍生物導入具有碳數13以上的脂肪族烴基之基團，能夠適當地製作由式(1)表示之肼衍生物。 又，依據需要，可以藉由公知的純化方法來純化所製造之由式(1)表示之肼衍生物。例如，能夠進行藉由再結晶、管柱層析法等來進行單離及純化之方法及藉由改變溶液溫度之方法或改變溶液組成之方法等來進行再沉澱純化之方法等。
本發明之胜肽化合物之製造方法中，使用由上述式(1)表示之肼衍生物之步驟係藉由由上述式(1)表示之肼衍生物保護胺基酸化合物或胜肽化合物的羧基之C末端保護步驟為較佳。 又，從胜肽化合物的合成容易性及產率的觀點考慮，本發明之胜肽化合物之製造方法除了包括藉由由上述式(1)表示之肼衍生物保護胺基酸化合物或胜肽化合物的羧基之C末端保護步驟以外，還包括對上述C末端保護步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護之N末端脫保護步驟及使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物與上述N末端脫保護步驟中所獲得之C末端被保護的胺基酸化合物或C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行縮合之胜肽鏈延長步驟為更佳， 還包括使上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物沉澱之沉澱步驟或向上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物添加水並且將雜質萃取分離至水層之萃取步驟為進一步較佳， 還包括在上述沉澱步驟或上述萃取步驟之後依序進行1次以上對所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護之步驟、使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物與所獲得之C末端被保護的胜肽化合物的N末端縮合之步驟及沉澱所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物之步驟為特佳。 又，本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法還包括將C末端保護基脫保護之C末端脫保護步驟為較佳。 另外，本發明之胜肽化合物之製造方法還包括在上述C末端保護步驟之前將由上述式(1)表示之肼衍生物溶解於溶劑中之溶解步驟為較佳。 另外，由上述式(1)表示之肼衍生物中的R係胺基酸殘基或胜肽殘基之情況下，能夠較佳地用作上述N末端脫保護步驟或上述胜肽鏈延長步驟中的反應基質。 以下，對上述各步驟等進行詳細地說明。
＜溶解步驟＞ 本發明之胜肽化合物之製造方法包括在上述C末端保護步驟之前將由上述式(1)表示之肼衍生物溶解於溶劑中之溶解步驟為較佳。 作為溶劑，能夠將通常的有機溶劑用於反應中，但是上述溶劑中的溶解度愈高，愈能夠期待優異之反應性，因此選擇由式(1)表示之肼衍生物的溶解度高的溶劑為較佳。具體而言，可舉出氯仿、二氯甲烷等鹵化烴類；1,4-二㗁烷、四氫呋喃、環戊基甲醚、4-甲基四氢哌喃等非極性有機溶劑等。該等溶劑可以以適當比例混合2種以上並進行使用。又，只要由式(1)表示之肼衍生物能夠溶解，上述鹵化烴類或非極性有機溶劑中可以以適當的比例混合並使用苯、甲苯、二甲苯等芳香族烴類；乙腈、丙腈等腈類；丙酮、2-丁酮等酮類；N,N-二甲基甲醯胺、N-甲基吡咯啶酮等醯胺類；二甲基亞碸等亞碸類、乙酸異丙酯、乙酸乙酯等酯類。 又，可以使用Organic Process Research & Development、2017、21、3、365-369所述之溶劑。
＜肼基上的胺基保護基脫保護步驟＞ 本發明之胜肽化合物之製造方法中，使用由上述式(1)表示之肼衍生物中的R係胺基保護基之化合物之情況下，包括對由式(1)表示之肼衍生物中的R的胺基保護基進行脫保護之肼基上的胺基保護基脫保護步驟為較佳。 又，上述肼基上的胺基保護基脫保護步驟可以在後述之C末端保護步驟之前進行，亦可以同時進行。 另外，上述胺基保護基被脫保護之R係氫原子之由式(1)表示之肼衍生物可以被隔離，亦可以不進行隔離而直接用於後述之C末端保護步驟。
脫保護條件依據上述胺基保護基的種類適當選擇，但是能夠依據與後述之N末端中的保護基的去除不同之條件進行脫保護之基團為較佳。例如，在為Fmoc基的情況下，藉由鹼處理來進行，且在為Boc基的情況下，藉由酸處理來進行。該反應在不影響反應之溶劑中進行。 作為鹼，可舉出二甲胺、二乙胺等二級胺或1,8-二氮雜雙環[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)、1,4-二氮雜雙環[2.2.2]辛烷(DABCO)、1,5-二氮雜雙環[4.3.0]-5-壬烯(DBN)等沒有親核性之有機鹼等。 作為溶劑，能夠較佳地使用在上述溶解步驟中所述之溶劑。
＜C末端保護步驟＞ 本發明之胜肽化合物之製造方法包括藉由由上述式(1)表示之肼衍生物對胺基酸化合物或胜肽化合物的羧基進行保護之C末端保護步驟為較佳。 作為在上述C末端保護步驟中所使用之胺基酸化合物或胜肽化合物，並無特別限制，能夠使用公知者，但是N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物為較佳，Fmoc保護胺基酸化合物或Fmoc保護胜肽化合物為更佳。 從為了能夠抑制二酮哌𠯤化合物的副生而進一步發揮上述效果之觀點考慮，本發明之胜肽化合物之製造方法使用容易副生二酮哌𠯤化合物之胜肽化合物亦即具有選自包括脯氨酸殘基、甘氨酸殘基、N-烷基胺基酸殘基、類胜肽及D-胺基酸殘基之群組中之至少1種殘基之胜肽化合物為較佳，使用具有脯氨酸殘基或甘氨酸殘基之胜肽化合物為更佳，具有脯氨酸殘基之胜肽化合物為特佳。 又，上述胜肽化合物中的上述脯氨酸殘基、甘氨酸殘基、N-烷基胺基酸殘基、類胜肽及D-胺基酸殘基的位置及數量並無特別限制，C末端的胺基酸殘基或C末端胺基酸殘基相鄰之胺基酸殘基至少係脯氨酸殘基、甘氨酸殘基、N-烷基胺基酸殘基、類胜肽或D-胺基酸殘基為較佳，C末端的胺基酸殘基至少係脯氨酸殘基、甘氨酸殘基、N-甲基胺基酸殘基或D-胺基酸殘基為更佳。 又，除了在上述C末端保護步驟中所使用之胺基酸化合物或胜肽化合物中之C末端部分以外的羥基、胺基、羰基、醯胺基、咪唑基、吲哚基、胍基、巰基等藉由上述之公知的保護基進行保護為較佳。 作為反應基質之胺基酸化合物或胜肽化合物的使用量相對於上述式(1)所表示之肼衍生物1莫耳當量為1莫耳當量～10莫耳當量為較佳，1莫耳當量～5莫耳當量為更佳，1莫耳當量～2莫耳當量為進一步較佳，1莫耳當量～1.5莫耳當量為特佳。
又，上述C末端保護步驟中，可較佳地舉出對反應沒有影響之溶劑中在縮合添加劑(縮合活化劑)存在下添加縮合劑或在酸觸媒中進行反應。 縮合添加劑的使用量相對於由上述式(1)表示之肼衍生物1莫耳當量係0.05莫耳當量～1.5莫耳當量為較佳。
作為縮合劑，在胜肽合成中通常使用之縮合劑在本發明中亦能夠不受限制地使用，且並不限定於此，但是例如可舉出4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三-2-基)-4-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉氯化物(DMTMM)、O-(苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸酯(HBTU)、O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸酯(HATU)、O-(6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓六氟磷酸酯(HBTU(6-Cl))、O-(苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(TBTU)、O-(6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲四氟硼酸鹽(TCTU)、(1-氰基-2-乙氧基-2-氧代基亞乙基胺氧基)二甲基胺基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉代碳鎓六氟磷酸鹽(COMU)、二環己碳二醯亞胺(DCC)、二異丙基碳二醯亞胺(DIC)、1-乙基-3-(3-二甲基胺基丙基)碳二亞胺(EDC)、其鹽酸鹽(EDC・HCl)、六氟磷酸(7-氮雜苯並三唑-1-醯氧基)三吡咯啶基鏻(PyAop)及六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯啶基鏻(PyBop)等。 其中，DIC、EDC、EDC・HCl、DMT-MM、HBTU、HATU、COMU或PyAOP為較佳。 縮合劑的使用量相對於由上述式(1)表示之肼衍生物1莫耳當量係1莫耳當量～10莫耳當量為較佳，1莫耳當量～5莫耳當量為更佳。
作為用於縮合反應之酸觸媒，能夠不受限制地使用在胜肽合成中通常使用之酸觸媒，例如能夠舉出三氟乙酸(TFA)、鹽酸、三氟乙醇(TFE)、六氟異丙醇(HFIP)、乙酸、甲烷磺酸、三氟甲烷磺酸、對甲苯磺酸等。 其中，三氟乙酸為較佳。 酸觸媒的使用量相對於由上述式(1)表示之肼衍生物1莫耳當量係超過0莫耳當量且4.0莫耳當量為較佳，0.05莫耳當量～1.5莫耳當量為更佳，0.1莫耳當量～0.3莫耳當量為進一步較佳。
在上述C末端保護步驟中，為了促進反應或抑制消旋反應(racemization)等副反應，添加縮合活化劑為較佳。 本發明中之縮合活化劑為藉由與縮合劑共存而將胺基酸引導至相對應之活性酯、對稱酸酐等中來使其易於形成胜肽鍵結(醯胺鍵)之試劑。 作為縮合活化劑，能夠不受限制地使用在胜肽合成中通常使用之縮合活化劑，例如可舉出4-二甲基胺基吡啶、N-甲基咪唑、硼酸衍生物、1-羥基苯并三唑(HOBt)、乙基1-羥基三唑-4-羧酸酯(HOCt)、1-羥基-7-氮雜苯并三唑(HOAt)、3-羥基-1,2,3-苯并三𠯤-4(3H)-酮(HOOBt)、N-羥基丁二醯亞胺(HOSu)、N-羥基琥珀醯亞胺(HOPht)、N-羥基-5-降莰烯-2,3-二羧基醯亞胺(HONb)、五氟苯酚及乙基(羥亞胺基)氰基乙酸酯(Oxyma)等。其中，4-二甲基胺基吡啶、HOBt、HOCt、HOAt、HOOBt、HOSu、HONb或Oxyma為較佳。 活化劑的使用量相對於胺基酸化合物或胜肽化合物為超過0莫耳當量且4.0莫耳當量為較佳，0.1莫耳當量～1.5莫耳當量為更佳。
作為鹼，能夠不受限制地使用在胜肽合成中通常使用之鹼，例如可舉出二異丙基乙胺等三級胺等。 作為溶劑，能夠較佳地使用在上述溶解步驟中所述之溶劑。 反應溫度並無特別限制，但是-10℃～80℃為較佳，0℃～40℃為更佳。反應時間並無特別限制，但是1小時～30小時為較佳。 關於反應的進行的確認，能夠適用與通常的液相有機合成反應相同的方法。亦即，能夠使用薄層矽膠層析法、高效液相層析法及NMR等來追蹤反應。
又，藉由上述C末端保護步驟所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物可以進行純化。 例如，為了使所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物溶解於溶劑中，並在進行所期望的有機合成反應之後對所獲得之產物進行單離，可較佳地舉出使溶解有N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物之溶劑改變(例如，溶劑組成的變更、溶劑種類的變更)並使其再沉澱之方法。 具體而言，例如，在如N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物溶解的條件下進行反應，並在反應後蒸餾去除溶劑之後進行溶劑取代，或者在反應後不蒸餾去除溶劑而向反應系統添加極性溶劑，藉此沉澱聚集物並去除雜質。作為取代溶劑，單獨或混合使用甲醇、乙腈、水等極性有機溶劑。亦即，在如N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物溶解的條件下進行反應，並在反應後作為溶劑取代，例如對於溶解使用鹵化溶劑、THF等而對於沉澱化使用甲醇、乙腈或水等極性有機溶劑或該等的混合溶劑。
＜N末端脫保護步驟＞ 本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法包括對在上述C末端保護步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護之N末端脫保護步驟為較佳。 作為N末端的保護基，能夠使用在胜肽化學等技術領域中通常使用之上述胺基的保護基，但是本發明中可較佳地使用Boc基、Cbz基或Fmoc基。
脫保護條件依據該臨時保護基的種類適當選擇，但是能夠藉由與來自於由上述式(1)表示之肼衍生物的保護基的去除(肼基上的胺基保護基脫保護步驟)不同之條件進行脫保護之基團為較佳。例如，在為Fmoc基的情況下，藉由鹼處理來進行，且在為Boc基的情況下，藉由酸處理來進行。該反應在不影響反應之溶劑中進行。 作為鹼，在上述肼基上的胺基保護基脫保護步驟中能夠較佳地使用上述之鹼。 作為溶劑，能夠較佳地使用在上述溶解步驟中所述之溶劑。
＜胜肽鏈延長步驟＞ 本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法包括使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物縮合至在上述N末端脫保護步驟中所獲得之C末端被保護的胺基酸化合物或C末端被保護的胜肽化合物的N末端中之胜肽鏈延長步驟為較佳。 在上述胜肽鏈延長步驟中使用上述縮合劑及縮合添加劑等，且在胜肽化學領域中通常使用之胜肽合成條件下較佳地進行。 作為N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物，並無特別限制，能夠使用所期望者，但是能夠較佳地使用Fmoc保護胺基酸化合物或Fmoc保護胜肽化合物。 又，除了N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物中之C末端部分以外的羥基、胺基、羰基、醯胺基、咪唑基、吲哚基、胍基、巰基等藉由後述之保護基等公知的保護基進行保護為較佳。
＜沉澱步驟＞ 本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法包括使在上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物沉澱之沉澱步驟為較佳。 上述沉澱步驟能夠以與上述之可以在上述C末端保護步驟之後進行之純化中之沉澱方法相同的方法進行。
＜萃取步驟＞ 本發明之胜肽化合物之製造方法還包括向上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物添加水並且將雜質萃取分離至水層之萃取步驟為較佳。 上述萃取步驟中，例如向上述胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物或向其添加有機溶劑者添加水並且進行分液操作，將雜質萃取至水層，分離水層與油層或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物，依據需要從油層去除有機溶劑，能夠獲得經純化之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物。 作為有機溶劑，在上述溶解步驟中能夠使用上述之有機溶劑。 作為上述萃取步驟中的萃取條件及萃取操作，並無特別限制，能夠使用公知的萃取條件及萃取操作來進行。
＜鏈延長＞ 本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法在上述沉澱步驟之後依序還包括1次以上的如下步驟為較佳，亦即，對所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護之步驟、使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物縮合至所獲得之C末端被保護的胜肽化合物的N末端中之步驟及沉澱所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物之步驟。 藉由反覆進行上述3步驟，能夠容易地進行所獲得之胜肽化合物的鏈延長。 上述3步驟中之各步驟能夠以與上述相對應之各步驟相同的方式進行。
＜C末端脫保護步驟＞ 本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法還包含將C末端保護基脫保護之C末端脫保護步驟為較佳。 在上述C末端脫保護步驟中，去除具有所期望的胺基酸殘基數之C末端被保護的胜肽化合物中之藉由上述式(1)所表示之肼衍生物所形成之C末端保護基，從而能夠獲得作為最終目標物之胜肽化合物。 作為C末端保護基的去除方法，可較佳地舉出使用氧化劑之脫保護方法。 作為氧化劑，能夠使用無機氧化劑、有機氧化劑中的任一個，並且能夠使用公知的氧化劑。 作為無機氧化劑，金屬鹽氧化劑為較佳，銅鹽氧化劑為更佳，二價的銅鹽為特佳。 作為二價的銅鹽，例如能夠舉出溴化銅、氯化銅、氟化銅、氫氧化銅、燐酸銅、乙酸銅、二甲基二硫卡巴胺酸銅、甲氧基銅、乙氧基銅、異丙氧基銅、乙酸乙酯醋酸銅、2-乙基己酸銅、葡萄糖酸銅、六氟乙醯丙酮銅、異丁酸銅、鄰苯二甲酸銅、三氟乙醯丙酮銅、三氟甲烷磺酸銅等。 作為有機氧化劑，醌類、超原子價碘、有機過氧化物或具有氮-鹵素鍵之化合物為較佳。 作為N-鹵化含氮化合物，能夠舉出N-氯代丁二醯亞胺、N-溴代丁二醯亞胺、N-碘丁二醯亞胺、N-氯代鄰苯二甲醯亞胺、N-溴代鄰苯二甲醯亞胺、N-碘鄰苯二甲醯亞胺、N-氯乙醯氧基醯亞胺、N-溴代乙醯氧基醯亞胺、N-碘乙醯氧基醯亞胺等醯亞胺化合物、1,3-二氯-2,5-二甲基乙內醯脲、1,3-二溴-2,5-二甲基乙內醯脲、1,3-二碘-2,5-二甲基乙內醯脲等乙內醯脲化合物、1,3,5-三氯異三聚氰酸、1,3,5-三溴代異三聚氰酸、1,3,5-三碘異三聚氰酸等異三聚氰酸化合物等。 其中，作為氧化劑，二價的銅鹽、醌類或N-鹵化含氮化合物為較佳，二價的鹵化銅、二價的羧酸銅鹽、苯醌、N-鹵化醯亞胺化合物為更佳，二價的乙酸銅、1,4-苯醌或、N-溴代丁二醯亞胺為特佳。
作為溶劑，在上述溶解步驟中能夠較佳地使用上述之溶劑以及水、醇化合物及乙腈等極性溶劑以及該等的混合溶劑。 反應溫度並無特別限制，但是-10℃～80℃為較佳，0℃～40℃為更佳。反應時間並無特別限制，但是0.1小時～30小時為較佳。
關於藉由本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法所獲得之作為最終目標物之胜肽化合物，能夠按照胜肽化學中常用之方法來進行單離純化。例如，藉由對反應混合物進行抽取清洗、結晶、層析等，能夠對作為最終目標物之胜肽化合物進行單離純化。
藉由本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法所製造之胜肽的種類並無特別限定，但是胜肽化合物的胺基酸殘基數例如為數十以下左右為較佳。與現有的或未知的合成胜肽或天然胜肽相同地，藉由本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法所獲得之胜肽能夠利用於各種各樣的領域，例如能夠利用於藥劑、食品、化妝品、電子材料及生物感測器等領域，但是並不限定於此。
本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法亦能夠在不影響下一步驟的反應之範圍內適當省略上述沉澱步驟。
在本發明所涉及之胜肽化合物的製造方法中所使用之胺基酸化合物及胜肽化合物具有羥基、胺基、羧基、羰基、胍基及巰基等之情況下，在該等基團中可以導入有如在胜肽化學等中通常使用的保護基，並在反應後依據需要去除保護基，藉此能夠獲得目標化合物。 作為該等保護基，可舉出上述者。
又，該等保護基的去除方法只要基於本身公知的方法例如Greene‘s Protective Groups in Organic Synthesis(2014)中所記載之方法等進行即可。例如可利用使用酸、鹼、紫外光、肼、苯基肼、N-甲基二硫卡巴胺酸鈉、四丁基氟化銨、乙酸鈀、三烷基矽烷基鹵化物(例如，三烷基矽烷基碘化物、三烷基矽烷基溴化物等)等之方法、還元法等。
(保護基形成用試劑) 本發明之保護基形成用試劑包含由下述式(1a)表示之肼衍生物。
Figure 02_image051
式(1a)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子或胺基保護基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
本發明所涉及之保護基形成用試劑為羧基的保護基形成用試劑為較佳，胺基酸化合物或胜肽化合物的C末端保護基形成用試劑為更佳。
本發明之保護基形成用試劑中的由式(1a)表示之肼衍生物的較佳之態樣除了R係氫原子或胺基保護基以外，與本發明之胜肽化合物之製造方法中上述之由式(1)表示之肼衍生物的較佳之態樣相同。 又，本發明之保護基形成用試劑中的由式(1a)表示之肼衍生物的R的較佳之態樣與從本發明之胜肽化合物之製造方法中上述之由式(1)表示之肼衍生物的R的較佳之態樣去除胺基酸殘基及胜肽殘基之態樣相同。 本發明所涉及之保護基形成用試劑可以為固體狀試劑，亦可以為液體狀試劑。 本發明之保護基形成用試劑中的由式(1a)表示之肼衍生物的含量並無特別限制，相對於保護基形成用試劑的總質量係0.1質量%～100質量%為較佳，1質量%～100質量%為更佳，3質量%～100質量%為進一步較佳。
本發明之保護基形成用試劑可以包含除了由式(1a)表示之肼衍生物以外的其他成分。 作為其他成分，能夠包含公知的成分。例如可舉出水、有機溶劑、抗氧化劑及pH調節劑等。
(由式(1b)表示之肼衍生物) 本發明之化合物係由下述式(1b)表示之肼衍生物。
Figure 02_image053
式(1b)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子或胺基保護基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。
作為本發明之化合物之由式(1b)表示之肼衍生物係新型化合物，能夠較佳地用於製造胜肽化合物。其中，能夠較佳地用作保護基形成用試劑，能夠更佳地用作羧基的保護基形成用試劑，能夠特佳地用作胺基酸化合物或胜肽化合物的C末端保護基形成用試劑。
本發明之化合物中的由式(1b)表示之肼衍生物中，R係氫原子或胺基保護基並且k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上，除此以外與在本發明之胜肽化合物之製造方法中上述之由式(1)表示之肼衍生物相同，較佳之態樣亦相同。 又，本發明之化合物中的R的較佳之態樣與從上述之本發明之由式(1)表示之肼衍生物的R的較佳之態樣去除胺基酸殘基及胜肽殘基之態樣相同。
又，由上述式(1b)表示之肼衍生物能夠與由上述式(1)表示之肼衍生物相同地進行合成。 [實施例]
以下，舉出實施例對本發明的實施形態進行進一步具體地說明。關於以下的實施例所示之材料、使用量、比例、處理內容及處理順序等，只要不脫離本發明的實施形態的宗旨，則能夠進行適當地變更。從而，本發明的實施形態的範圍並不限定於以下所示之具體例。再者，除非另有說明，則“份”、“%”為質量基準。
除非另有說明，則基於二氧化矽凝膠管柱層析法之純化使用自動純化裝置ISOLERA(Biotage公司製)或中壓液相層析法YFLC-Wprep2XY.N(YAMAZEN CORPORATION製)。 除非另有說明，基於高效液相層析法(HPLC)之純化藉由Agilent公司製1260Infinity二元式LC系統、管柱：Agilent公司製PREP-C18(50mm×21.2mm)、梯度條件：H2 O(0.1%HCO2 H)/乙腈(0.1%HCO2 H)= 90/10→30/70、流速：20.0ml/min)進行了純化。 除非另有說明，則二氧化矽管柱層析法中之載體使用SNAPKP-Sil Cartridge(Biotage公司製)、HI-FLASH COLUMNSW001、W002、W003、W004或W005(YAMAZEN CORPORATION.製)。 關於MS光譜，使用ACQUITY SQD LC/MS System(Waters Corporation.製)或LC-MS2020(Shimadzu Corporation製)、離子化法：ESI(ElectroSpray Ionization、電噴灑離子化)法進行了測定。 關於NMR光譜，使用四甲矽烷作為內部基準，且使用Bruker AV300(Bruker Corporation製、300MHz)或Bruker AV400(Bruker Corporation製、400MHz)進行測量，並將所有δ值均以ppm表示。
＜3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨酸的合成＞
Figure 02_image055
向(3,5-雙(二十二烷氧基)苯基)甲醇(600mg、0.792mmol)的四氫呋喃(THF)溶液(15.9mL)加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]甘氨酸(Fmoc-Gly-OH、353mg、1.188mmol)、N,N’-二異丙基碳化二醯亞胺(DIC、186μL、1.188mmol)及N,N-二甲基-4-胺基吡啶(DMAP、19.4mg、0.159mmol)，在室溫(25℃，以下同樣)下攪拌了1小時。藉由添加乙腈濾取所析出之固體，並且進行減壓乾燥，藉此獲得了3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨酸(741mg、0.715mmol)。1 H-NMR(CDCl3 )δ：7.76(2H，d，J=7.9Hz)，7.60(2H，d，J=7.9Hz)，7.46-7.30(4H，m)，6.47(2H，d，J=2.0Hz)，6.40(1H，s)，5.11(2H，s)，4.41(2H，d，J=6.6Hz)，4.29-4.18(1H，m)，4.06(2H，d，J=5.3Hz)，3.96-3.85(4H，m)，1.83-1.19(80H，m)，0.88(6H，t，J=6.6Hz).
＜三級丁基=2-(4-((2-(3,5-雙(二十二烷氧基)苄氧基)-2-氧代乙基)胺甲醯基)苯基)肼-1-羧酸酯的合成＞
Figure 02_image057
向3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨酸(741mg、0.715mmol)的四氫呋喃溶液(14.3mL)加入二吖雙環十一烯(DBU、215μL、1.43mmol)，在室溫下攪拌了1小時。加入N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(NMM、158μL、1.43mmol)、甲烷磺酸(MsOH、96.1μL、1.47mmol)，在室溫下攪拌了10分鐘。加入4-(2-(三級丁氧基羰基)肼)苯甲酸(225mg、0.894mmol)及7-氮雜苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基鏻六氟磷酸酯(PyAOP、466mg、0.894mmol)，在室溫下攪拌了2小時30分鐘。藉由添加乙腈濾取所析出之固體，並且進行減壓乾燥，藉此獲得了三級丁基=2-(4-((2-(3,5-雙(二十二烷氧基)苄氧基)-2-氧代乙基)胺甲醯基)苯基)肼-1-羧酸酯(356mg、0.340mmol)。1 H-NMR(CDCl3 )δ：7.71(2H，d，J=8.6Hz)，6.82(2H，d，J=8.6Hz)，6.63-6.33(5H，m)，6.04-5.94(1H，m)，5.13(2H，s)，4.27(2H，t，J=4.6Hz)，3.92(4H，t，J=6.6Hz)，1.86-1.19(89H，m)，0.88(6H，t，J=6.6Hz).
(實施例1) ＜(9H-茀-9-基)甲基=(S)-2-(2-(4-((2-((3,5-雙(二十二烷氧基)苄基)氧基)-2-氧代乙基)胺甲醯基)苯基)苯基)肼)-1-羰基)吡咯啶-1-羧酸酯的合成＞
Figure 02_image059
向三級丁基=2-(4-((2-(3,5-雙(二十二烷氧基)苄氧基)-2-氧代乙基)胺甲醯基)苯基)肼-1-羧酸酯(356mg、0.340mmol)的二氯甲烷溶液(DCM、6.6mL)加入三氟乙酸(TFA、6.6mL)，在室溫下攪拌了1小時30分鐘。在減壓下蒸餾溶劑，向所獲得之白色固體添加了四氫呋喃(6.8mL)。向混合物加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸(Fmoc-Pro-OH、172mg、0.509mmol)、7-氮雜苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基鏻六氟磷酸酯(266mg、0.509mmol)、N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(337μL、3.06mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。藉由添加乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了(9H-茀-9-基)甲基=(S)-2-(2-(4-((2-((3,5-雙(二十二烷氧基)苄基)氧基)-2-氧代乙基)胺甲醯基)苯基肼)-1-羰基)吡咯啶-1-羧酸酯(282mg、0.222mmol)。 ESI-MS(-)=1,266.00 另外，縮合時未觀察到原料的殘留。
＜3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯的合成＞
Figure 02_image061
向(9H-茀-9-基)甲基=(S)-2-(2-(4-((2-((3,5-雙(二十二烷氧基)苄基)氧基)-2-氧代乙基)胺甲醯基)苯基肼)-1-羰基)吡咯啶-1-羧酸酯(280mg、0.221mmol)的四氫呋喃溶液(7.4mL)加入二吖雙環十一烯(101μL、0.674mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。加入N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(48.7μL、0.442mmol)、甲烷磺酸(44.2μL、0.674mmol)，在室溫下攪拌了10分鐘。向混合物加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-甘氨酸(125mg、0.420mmol)、氰基-2-乙氧基-2-氧代亞乙基胺氧基)二甲基胺基-
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉基-六氟磷酸鈣(180mg、0.42mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。藉由添加乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯(293mg、0.220mmol)。 ESI-MS(-)=1,322.85
＜3,5-雙(二十二烷氧基)苄基(4-(2-((三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯的合成＞
Figure 02_image063
向3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯(290mg、0.219mmol)的四氫呋喃溶液(5.0mL)加入二吖雙環十一烯(65.8μL、0.438mmol)，在室溫下攪拌了40分鐘。加入N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(48.3μL、0.438mmol)、甲烷磺酸(29.4μL、0.449mmol)，在室溫下攪拌了10分鐘。向混合物加入N-(三級丁氧基羰基)-L-苯基丙胺酸(Boc-Phe-OH、72.6mg、0.274mmol)、氰基-2-乙氧基-2-氧代亞乙基胺氧基)二甲基胺基-
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉基-六氟磷酸鈣(COMU、117mg、0.274mmol)，在室溫下攪拌了50分鐘。藉由添加乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯(216mg、0.160mmol)。 另外，未確認到DBU處理時的二酮哌𠯤化合物的產生。 ESI-MS(-)=1,347.85
＜三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(苄基胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯的合成(脫保護反應)＞
Figure 02_image065
向3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯(25.0mg、0.0185mmol)的四氫呋喃溶液(740μL)加入苄基胺(benzylamine、3.30μL)、吡啶(pyridine、15μL、0.185mmol)、乙酸銅一水合物(Cu(OAc)2 、0.37mg、0.00185mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離去除藉由添加甲醇而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於二氧化矽焊墊之前處理、基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(3.57mg、0.00683mmol)。 ESI-MS(+)=509.3
(實施例2) ＜(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸的合成＞
Figure 02_image067
向3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯(25.0mg、0.0185mmol)的四氫呋喃溶液(740μL)加入水(74μL)、吡啶(15μL、0.185mmol)、乙酸銅一水合物(0.37mg、0.00185mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離去除藉由添加甲醇而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於二氧化矽焊墊之前處理、基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(3.44mg、0.00820mmol)。 ESI-MS(+)=420.3
(實施例3) ＜三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(((S)-1-(((S)-1-((S)-1-((S)2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯的合成＞
Figure 02_image069
向3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(4-(2-((三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨醯)肼)苯甲醯)甘氨酸酯(25.0mg、0.0185mmol)的四氫呋喃溶液(740μL)加入(S)-1-(L-亮氨醯-L-苯丙胺醯-L-丙胺醯)吡咯啶-2-羧醯胺的TFA鹽(12.0mg、0.0215mmol)、吡啶(15μL、0.185mmol)、N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(10.2μL、0.0244mmol)、乙酸銅一水合物(0.37mg、0.00185mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離沉澱去除藉由添加甲醇而析出之固體，藉此獲得了包含目標胜肽之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(((S)-1-(((S)-1-((S)-1-((S)2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(2.19mg、0.00259mmol)。 ESI-MS(-)=845.4
(比較例1：二酮哌𠯤化合物的產生) ＜1-((9H-茀-9-基)甲基)=2-(3,5-雙(二十二烷氧基)苄基)=(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸鹽的合成＞
Figure 02_image071
向(3,5-雙(二十二烷氧基)苯基)甲醇(25.0mg、0.0330mmol)的四氫呋喃溶液(660μL)加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸(16.7mg、0.0495mmol)、N,N’-二異丙基碳化二醯亞胺(7.75μL、0.0495mmol)及N,N-二甲基-4-胺基吡啶(0.81mg、0.0066mmol)，在室溫下攪拌了一夜。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體，從而獲得了1-((9H-茀-9-基)甲基)=2-(3,5-雙(二十二烷氧基)苄基)=(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸鹽(33.3mg、0.0309mmol)。目標物的含有率以NMR換算計為約95莫耳%，未導入脯氨酸且混入了約5莫耳%的所殘留之原料。
＜3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨酸的合成＞
Figure 02_image073
向1-((9H-茀-9-基)甲基)=2-(3,5-雙(二十二烷氧基)苄基)=(S)-吡咯啶-1,2-二羧酸鹽(30.0mg、0.0279mmol)的四氫呋喃溶液(557μL)加入二吖雙環十一烯(65.8μL、0.438mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。加入N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(6.15μL、0.0557mmol)、甲烷磺酸(3.74μL、0.0571mmol)，在室溫下攪拌了10分鐘。向混合物加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]甘氨酸(10.4mg、0.0348mmol)、氰基-2-乙氧基-2-氧代亞乙基胺氧基)二甲基胺基-
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉基-六氟磷酸鈣(14.9mg、0.0348mmol)，在室溫下攪拌了1小時。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體，從而獲得了3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨酸(23.0mg、0.0203mmol)。
＜3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=甘氨醯基-L-脯氨酸的合成(獲得了(S)-六氫吡咯并[1,2-a]吡𠯤-1,4-二酮。)＞
Figure 02_image075
向3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨酸(23.0mg、0.0203mmol)的四氫呋喃溶液(405μL)加入二吖雙環十一烯(6.10μL、0.0406mmol)，在室溫下攪拌了1小時。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體之結果，獲得了藉由3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=甘氨醯基-L-脯氨酸的環化反應(二酮哌𠯤形成)產生之(3,5-雙(二十二烷氧基)苯基)甲醇(14.2mg、0.0188mmol)，且未獲得作為目標之3,5-雙(二十二烷氧基)苄基=甘氨醯基-L-脯氨酸。
(比較例2：基於固相中的胜肽之親核取代反應) ＜在(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸的C末端上鍵結有樹脂之hydrazinobenzoyl AM NovaGel的合成＞
Figure 02_image077
使用胜肽自動合成裝置(SYRO I，Biotage Ltd.製)進行了胜肽固相合成(SPPS)。合成裝置中準備4-Fmoc-hydrazinobenzoyl AM NovaGel(246mg、0.61mmol/g、另外，黑球表示與固相的鍵結位置。)、Fmoc胺基酸(0.5mol/L)的N-甲基吡咯啶酮(NMP)溶液、氰基-羥基亞胺基-乙酸乙基酯(1.0mol/L)的NMP溶液、二異丙基碳化二醯亞胺(1.0mol/L)的NMP溶液、哌啶(40%v/v)的NMP溶液，按照手册進行了合成。將Fmoc脫保護(室溫、20分鐘)、基於NMP之清洗、Fmoc胺基酸的縮合(40℃、1小時)、基於NMP之清洗設為1個週期，反覆該週期，藉此使胜肽鏈伸長。完成伸長之後，藉由二氯甲烷清洗樹脂之後，在減壓下蒸餾溶劑，從而獲得了265mg的樹脂。
＜三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(((S)-1-(((S)-1-((S)-1-((S)-2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯的合成＞
Figure 02_image079
向在(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸的C末端上鍵結有樹脂之hydrazinobenzoyl AM NovaGel(32.7mg、0.0185mmol、based on resin loading)加入四氫呋喃(740μL)、(S)-1-(L-亮氨醯-L-苯丙胺醯-L-丙胺醯)吡咯啶-2-羧醯胺的TFA鹽(12.0mg、0.0215mmol)、吡啶(15μL、0.185mmol)、N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(10.2μL、0.0244mmol)、乙酸銅一水合物(0.37mg、0.00185mmol)，在室溫下攪拌了2小時。濾出樹脂，藉由甲醇清洗2次樹脂，回收了胜肽溶液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(((S)-1-(((S)-1-((S)-1-((S)-2-胺甲醯基吡咯啶-1-基)-1-氧代丙烷-2-基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基)-4-甲基-1-氧代戊烷-2-基)胺甲醯基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(0.33mg、0.00039mmol)。
(比較例3：胺基酸加載於茀型連接基中) ＜2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-L-脯氨酸的合成＞
Figure 02_image081
使用了藉由國際公開第2010/104169號說明書中所記載之方法來合成之9-溴-2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀。 在室溫下向9-溴-2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀(100mg、0.118mmol)的二氯甲烷溶液(590μL)加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸(59.7mg、0.177mmol)、二異丙基乙胺(DIEA、61.7μL、0.354mmol)之後，在室溫下攪拌了一夜。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體，確認到NMR之結果，未看到作為目標物之2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-L-脯氨酸的產生。
(比較例4：胺基酸加載於茀型連接基中、加熱條件、試劑增量) ＜2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-L-脯氨酸的合成＞
Figure 02_image081
在室溫下向9-溴-2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀(500mg、0.59mmol)的二氯甲烷溶液(6.0mL)加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸(398mg、1.18mmol)、二異丙基乙胺(206μL、1.18mmol)之後，在50℃下攪拌了3小時30分鐘。在室溫下加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-L-脯氨酸(199mg、0.59mmol)、二異丙基乙胺(103μL、0.59mmol)之後，在50℃下攪拌了4小時。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體，確認到NMR之結果，看到了作為目標物之2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-L-脯氨酸的產生，但是亦觀察到原料及被認為是其分解體之化合物。因此，進行基於矽膠管柱層析之分離，從而獲得了2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-L-脯氨酸(73.0mg)。
＜2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨酸的合成＞
Figure 02_image084
向2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)-L-脯氨酸(55.7mg、0.0504mmol)的四氫呋喃溶液(504μL)加入二吖雙環十一烯(15.2μL、0.101mmol)，在室溫下攪拌了20分鐘。加入N-甲基
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉(11.1μL、0.101mmol)、甲烷磺酸(6.78μL、0.103mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。向混合物加入N-[(9H-茀-9-基甲氧基)羰基]-甘氨酸(18.7mg、0.0630mmol)、氰基-2--乙氧基-2--氧代亞乙基胺氧基)二甲基胺基-
Figure 109131061-A0304-12-0020-6
啉基-六氟磷酸鈣(27.0mg、0.0630mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體，藉此獲得了2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨酸(24.3mg、0.0209mmol)。
Figure 02_image086
向2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=(((9H-茀-9-基)甲氧基)羰基)甘氨醯基-L-脯氨酸(18.5mg、0.0159mmol)的四氫呋喃溶液(320μL)加入二吖雙環十一烯(4.8μL、0.0319mmol)，在室溫下攪拌了20分鐘。藉由離心分離回收藉由添加乙腈而析出之固體之結果，僅獲得了藉由2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-基=甘氨醯基-L-脯氨酸的環化反應(二酮哌𠯤形成)產生之2-((12-(二十二烷氧基)十二烷)氧基)-9-(3-氟苯基)-9H-茀-9-醇(8.5mg、0.0108mmol)。
(實施例4) ＜三級丁基=2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羧酸鹽的合成＞
Figure 02_image088
在室溫下向二十八基胺(2.61g、5.00mmol)及4-(2-(三級丁氧基羰基)肼)苯甲酸(2.52g、10.0mmol)的氯仿溶液(50mL)加入六氟磷酸(7-氮雜苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(PyAOP、5.21g、10.0mmol)及DIEA(3.49mL、20.0mmol)，攪拌了1.5小時。藉由添加乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了三級丁基=2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羧酸鹽(3.78g、4.914mmol)。
＜(9H-茀-9-基)甲基=(S)-2-(1-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼)吡咯啶-2-基)-2-氧代乙酸酯的合成＞
Figure 02_image090
在室溫下向三級丁基=2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羧酸鹽(1.25g、1.436mmol)加入水(623μL)、氯仿(12.5mL)及氯化氫的乙酸乙酯溶液(4mol/L、18.7mL)，攪拌30分鐘去除了Boc基。在減壓下蒸餾溶劑，從而獲得了白色固體。加入四氫呋喃(28.7mL)、Fmoc-Pro-OH(606mg、1.80mmol)、NMM(317μL、2.87mmol)及COMU(769mg、1.80mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。藉由添加乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了(9H-茀-9-基)甲基=(S)-2-(1-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼)吡咯啶-2-基)-2-氧代乙酸酯(1.56g、1.28mmol)。
＜(9H-茀-9-基)甲基=(S)-(2-(2-(2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基甲酸酯的合成＞
Figure 02_image092
向(9H-茀-9-基)甲基=(S)-2-(1-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼)吡咯啶-2-基)-2-氧代乙酸酯(688mg、0.633mmol)的四氫呋喃溶液(12.7mL)加入二吖雙環十一烯(190μL、1.27mmol)，在室溫下攪拌了20分鐘。加入NMM(140μL、1.27mmol)、甲烷磺酸(85μL、1.30mmol)，在室溫下攪拌了10分鐘。向混合物加入Fmoc-Gly-OH(235mg、0.791mmol)及COMU(339mg、0.791mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。藉由添加5%含水乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了(9H-茀-9-基)甲基=(S)-(2-(2-(2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基甲酸酯(668mg、0.584mmol)。
＜三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯的合成＞
Figure 02_image094
向(9H-茀-9-基)甲基=(S)-(2-(2-(2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基甲酸酯(1.25g、1.09mmol)的四氫呋喃溶液(14.6mL)加入DBU(329μL、2.19mmol)，在室溫下攪拌了20分鐘。加入NMM(241μL、2.19mmol)、甲烷磺酸(147μL、2.24mmol)，在室溫下攪拌了10分鐘。向混合物加入Boc-Phe-OH(362mg、1.37mmol)及COMU(585mg、1.37mmol)，在室溫下攪拌了30分鐘。藉由添加乙腈濾取經析出之固體，藉此獲得了三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(1.20g、1.02mmol)。
＜(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸的合成＞
Figure 02_image096
向三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(100mg、0.0854mmol)的四氫呋喃溶液(3.4mL)加入水(340μL)、吡啶(69.1μL、0.855mmol)、乙酸銅一水合物(Cu(OAc)2 、1.62mg、0.00855mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離去除藉由添加甲醇而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(6.33mg)。 ESI-MS(+)=420.3
Figure 02_image098
向三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(50mg、0.0427mmol)的四氫呋喃溶液(1.7mL)加入水(170μL)、N-溴代丁二醯亞胺(NBS、15.2mg、0.0855mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離去除藉由添加甲醇而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(0.72mg)。 ESI-MS(+)=420.3
Figure 02_image100
向三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(50mg、0.0427mmol)的四氫呋喃溶液(1.7mL)加入水(170μL)、苯基碘二乙酸酯(PIDA、27.5mg、0.0855mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離去除藉由添加甲醇而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(6.57mg)。 ESI-MS(+)=420.3
Figure 02_image102
向三級丁基=((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(50mg、0.0427mmol)的四氫呋喃溶液(1.7mL)加入水(170μL)、N-溴碘丁二醯亞胺(NIS、19.2mg、0.0855mmol)，在室溫下攪拌了2小時。藉由離心分離去除藉由添加甲醇而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(4.82mg)。 ESI-MS(+)=420.3
Figure 02_image104
向三級丁基((S)-1-((2-((S)-2-(2-(4-(雙二十二烷基胺甲醯基)苯基)肼-1-羰基)吡咯啶-1-基)-2-氧代乙基)胺基)-1-氧代-3-苯基丙烷-2-基)胺基甲酸酯(100mg、0.0854mmol)的四氫呋喃溶液(3.4mL)加入水(340μL)、苯醌(11.1mg、0.103mmol)，在室溫下攪拌了2小時。添加亞硫酸鈉(4.9mg)之後，藉由離心分離去除藉由添加10%含水乙腈而析出之固體，從而獲得了包含目標胜肽化合物之上清液。在減壓下蒸餾溶劑，進行基於HPLC之純化，藉此獲得了(三級丁氧基羰基)-L-苯丙胺醯甘氨醯-L-脯氨酸(3.78mg)。 ESI-MS(+)=420.3
如上述所示，與比較例的胜肽化合物之製造方法相比，使用由式(1)表示之肼衍生物之本實施例中的胜肽化合物之製造方法的脫保護時的產率優異。 又，如上述所示，使用由式(1)表示之肼衍生物之本實施例中的胜肽化合物之製造方法在保護時及胜肽鏈延長時亦能夠以高產率合成胜肽化合物，又，能夠抑制二酮哌𠯤化合物的副生。又，能夠確認到C末端胺基酸的保護亦以沒有原料的殘留且產率良好地進行。
關於在2019年9月12日申請之日本專利申請第2019-165967號的揭示，將其整體藉由參閱而編入本說明書中。 關於說明書中所記載之所有的文獻、專利申請及技術規格，與將藉由參閱編入各文獻、專利申請及技術規格之情況具體地且各自記載之情況相同程度地藉由參閱而編入本說明書中。
無。
無。
Figure 109131061-A0101-11-0001-1
無。

Claims (16)

  1. 一種胜肽化合物之製造方法，其係包括使用由下述式(1)表示之肼衍生物之步驟，
    Figure 03_image106
    式(1)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子、胺基保護基、胺基酸殘基或胜肽殘基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
  2. 如請求項1之胜肽化合物之製造方法，其中 使用由該式(1)表示之肼衍生物之步驟，係藉由由該式(1)表示之肼衍生物來保護胺基酸化合物或胜肽化合物的羧基之C末端保護步驟。
  3. 如請求項2之胜肽化合物之製造方法，其中 該C末端保護步驟中的胺基酸化合物或胜肽化合物，係N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物。
  4. 如請求項3之胜肽化合物之製造方法，其係還包括： N末端脫保護步驟，係對在該C末端保護步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護；及 胜肽鏈延長步驟，係使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物與該N末端脫保護步驟中所獲得之C末端被保護的胺基酸化合物或C末端被保護的胜肽化合物的N末端縮合。
  5. 如請求項4之胜肽化合物之製造方法，其係還包括：使在該胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物沉澱之沉澱步驟。
  6. 如請求項4之胜肽化合物之製造方法，其係還包括：對該胜肽鏈延長步驟中所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物添加水並且將雜質萃取分離至水層之萃取步驟。
  7. 如請求項5之胜肽化合物之製造方法，其係在該沉澱步驟或萃取步驟之後，依序還包括1次以上的如下步驟： 對所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物的N末端進行脫保護之步驟； 使N末端被保護的胺基酸化合物或N末端被保護的胜肽化合物，與所獲得之C末端被保護的胜肽化合物的N末端縮合之步驟；及 沉澱所獲得之N末端被保護且C末端被保護的胜肽化合物之步驟。
  8. 如請求項1或2之胜肽化合物之製造方法，其係還包括：將C末端保護基脫保護之C末端脫保護步驟。
  9. 如請求項1或2之胜肽化合物之製造方法，其中 該環A係苯環、萘環或吡啶環。
  10. 如請求項1或2之胜肽化合物之製造方法，其中 該式(1)中，k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。
  11. 一種保護基形成用試劑，其包含由下述式(1a)表示之肼衍生物，
    Figure 03_image108
    式(1a)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子或胺基保護基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少1個脂肪族烴基的碳數係13以上。
  12. 如請求項11之保護基形成用試劑，其中 該保護基形成用試劑係羧基的保護基形成用試劑。
  13. 如請求項11或12之保護基形成用試劑，其中 該保護基形成用試劑係胺基酸化合物的羧基或胜肽化合物的C末端保護基形成用試劑。
  14. 如請求項11或12之保護基形成用試劑，其中 該環A係苯環、萘環或吡啶環。
  15. 如請求項11或12之保護基形成用試劑，其中 該式(1a)中，k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。
  16. 一種肼衍生物，其係由下述式(1b)表示，
    Figure 03_image110
    式(1b)中， 環A表示芳香族烴環或芳香族雜環， R表示氫原子或胺基保護基， k表示1～5的整數， n表示1或2， RA 分別獨立地表示脂肪族烴基或具有脂肪族烴基之有機基團， k個RA 中的至少2個脂肪族烴基的碳數係13以上。
TW109131061A 2019-09-12 2020-09-10 胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物 TW202124408A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2019165967 2019-09-12
JP2019-165967 2019-09-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TW202124408A true TW202124408A (zh) 2021-07-01

Family

ID=74866988

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TW109131061A TW202124408A (zh) 2019-09-12 2020-09-10 胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物

Country Status (5)

Country Link
US (1) US20220185841A1 (zh)
EP (1) EP4011902A4 (zh)
JP (1) JP7459121B2 (zh)
TW (1) TW202124408A (zh)
WO (1) WO2021049552A1 (zh)

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4204870A (en) * 1978-07-25 1980-05-27 Eastman Kodak Company Photographic products and processes employing novel nondiffusible heterocyclyazonaphthol dye-releasing compounds
CA1196912A (en) * 1982-05-21 1985-11-19 Eastman Kodak Company Photographic products and processes employing novel nondiffusible magenta dye-releasing compounds and precursors thereof
RU2073011C1 (ru) * 1993-10-20 1997-02-10 Российско-германское совместное предприятие "Константа" Линкер для твердофазного синтеза пептидов
JP2005148108A (ja) 2003-11-11 2005-06-09 Konica Minolta Medical & Graphic Inc 熱現像画像記録材料
AU2006293180A1 (en) 2005-09-20 2007-03-29 Jitsubo Co., Ltd. Carrier for separation, method for separation of compound, and method for synthesis of peptide using the carrier
JP2008127331A (ja) 2006-11-21 2008-06-05 Fujifilm Corp タンパク質を固定化した粒子
US8569453B2 (en) 2009-03-12 2013-10-29 Ajinomoto Co., Inc. Fluorene compound
JP5768712B2 (ja) 2009-03-30 2015-08-26 味の素株式会社 ジフェニルメタン化合物
EP2716649A1 (en) * 2011-05-31 2014-04-09 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing peptide
JP7109050B2 (ja) 2018-03-23 2022-07-29 株式会社サンセイアールアンドディ 遊技機
WO2020175472A1 (ja) * 2019-02-28 2020-09-03 富士フイルム株式会社 ペプチド化合物の製造方法、保護基形成用試薬、及び、縮合多環芳香族炭化水素化合物
CA3131774A1 (en) * 2019-02-28 2020-09-03 Fujifilm Corporation Method for producing peptide compound, protecting group-forming reagent, and aromatic heterocyclic compound

Also Published As

Publication number Publication date
JPWO2021049552A1 (zh) 2021-03-18
EP4011902A4 (en) 2022-10-26
US20220185841A1 (en) 2022-06-16
JP7459121B2 (ja) 2024-04-01
EP4011902A1 (en) 2022-06-15
WO2021049552A1 (ja) 2021-03-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210380633A1 (en) Method for producing peptide compound, protective group-forming reagent, and aromatic heterocyclic compound
KR102668387B1 (ko) 펩타이드 화합물의 제조 방법, 보호기 형성용 시약, 및 축합 다환 방향족 탄화 수소 화합물
JP7238123B2 (ja) ペプチド化合物の製造方法、保護基形成用試薬、及び、縮合多環芳香族炭化水素化合物
WO2019047941A1 (zh) 鹅膏毒肽类抗体偶联物
JPWO2019198834A1 (ja) リュープロレリンの製造方法
JP7301965B2 (ja) ペプチド化合物の製造方法、保護基形成用試薬、及び、縮合多環化合物
JP5985534B2 (ja) グアニジル基およびアミノ基の保護のためのインドールスルホニル保護基
TW202124408A (zh) 胜肽化合物之製造方法、保護基形成用試劑及肼衍生物
WO2023033017A1 (ja) ガニレリクス又はその塩の製造法
WO2022196797A1 (ja) アミノ酸又はペプチドの製造方法、保護基形成用試薬、及び、化合物
WO2023106356A1 (ja) ペプチド化合物の製造方法、保護基形成用試薬、及び置換ベンジル化合物
WO2022138605A1 (ja) ペプチドの製造方法、保護基形成用試薬、及び、縮合多環化合物
KR20240096774A (ko) 펩타이드 화합물의 제조 방법, 보호기 형성용 시약, 및 치환 벤질 화합물