TW202038965A - L718及/或l792突變型治療抗性egfr抑制劑 - Google Patents

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Abstract

(3)將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽投予一惡性腫瘤患者之一步驟，該惡性腫瘤患者是在步驟(2)中已被預測極可能充分回應於使用一抗腫瘤劑之該化學療法，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分。

Description

L718及/或L792突變型治療抗性EGFR抑制劑
發明領域
本發明關於針對包含外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變型表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，下文稱作“EGFR”)之癌症的抗腫瘤劑。
發明背景
EGFR是一受體型酪胺酸激酶，藉由結合至作為配體的表皮生長因子(Epidermal Growth Factor，下文亦稱作EGF)而在正常組織中發揮其生理功能，並促進上皮組織的生長和凋亡抑制(非專利文獻1)。再者，已知EGFR基因的體細胞突變是致癌基因；例如，外顯子19中的第746位至第750位密碼子係缺失的EGFR(下文亦稱作「外顯子19缺失突變」)和外顯子21中由第858位密碼子編碼的白胺酸突變為精胺酸的EGFR(下文亦稱作L858R突變」)不斷地誘導EGF依賴性激酶活性，並促進癌細胞的生長和存活(非專利文獻2)。例如，該等突變在東亞的30至50%的非小細胞肺癌中被觀察到。在歐洲和美國，該突變在大約10%的非小細胞肺癌該突變中也觀察到了，被認為是引起癌症的原因之一(非專利文獻3)。
因此，已經積極地進行了EGFR抑制劑作為抗腫瘤劑的研究和開發，並將其引進各種EGFR突變陽性肺癌的治療(非專利文獻2和非專利文獻4)。已將吉非替尼(Gefitinib)、厄洛替尼(erlotinib)和阿法替尼(afatinib)用作針對外顯子19缺失突變型和L858R突變型EGFR陽性肺癌的治療劑。外顯子19缺失突變和L858R突變佔EGFR突變的90%。再者，已知在使用該些藥劑的治療過程中出現後天獲得抗性(acquired resistance)，其50%是由抗性突變EGFR所導致，其中外顯子20的第790位密碼子從蘇胺酸變成甲硫胺酸(下文亦稱作「T790M突變」)。為了治療具有此突變的肺癌，已將奧西替尼(osimertinib)用作治療劑。因此，對於具有主要EGFR突變的肺癌患者，使用EGFR抑制劑的治療係正在建立的過程當中。 [引證列表] [專利文獻]
[專利文獻1] WO2015/175632A1 [專利文獻2] WO2015/025936A1 [非專利文獻]
[非專利文獻1] Nat. Rev. Cancer, vol. 6, pp. 803-812 (2006) [非專利文獻2] Nature Medicine, vol. 19, pp. 1389-1400 (2013) [非專利文獻3] Nat. Rev. Cancer, vol. 7, pp. 169-181 (2007) [非專利文獻4] Clin. Cancer Res., vol. 24, pp. 3097-3107 (2018)
發明概要 [技術課題]
對於具有主要EGFR突變的肺癌患者，使用EGFR抑制劑的治療係正在建立的過程當中。反之，亦已知存在對於奧西替尼治療有抗性的患者。據報導，其中若干原因是EGFR基因突變(非專利文獻4)。已經證實，例如，除了外顯子19缺失突變或L858R突變(兩者均為原發突變)和T790M突變(其為後天獲得抗性突變)以外，還具有外顯子18中由第718位密碼子編碼的白胺酸被一任意胺基酸取代的點突變(下文亦稱作「L718X突變」)或外顯子20中由第792位密碼子編碼的白胺酸被一任意胺基酸取代的點突變(下文亦稱作「L792X」)突變」)的肺癌對奧西替尼治療有抗性。據推論，由L718X突變或L792X突變造成的胺基酸取代會引發立體阻礙，並減少疏水性結合，藉此阻止EGFR與奧西替尼結合(非專利文獻4)。據此，有需要開發對具有原發活性突變、T790M後天獲得抗性突變和L718X突變或L792X突變的複合突變的EGFR具有高抑制活性的抑制劑。
因此，針對具有含有L718X或L792X的複合突變的EGFR具有高抑制活性的藥物之開發被假定有可能展現出對奧西替尼治療有抗性的肺癌的抗腫瘤效果，並預期有助於尚未建立療法之突變型EGFR陽性癌症患者的壽命延長和QOL改善。再者，預期對於針對使用EGFR抑制劑的治療而於後天獲得抗性突變之T790M具有高抑制活性的藥物是在使用針對原發突變之外顯子19或外顯子21突變型EGFR的EGFR抑制劑之治療期間降低了後天獲得抗性的表現頻率；因此被預期有助於延長癌症患者的壽命。
在此類情況下，本發明的目的是提供一種針對奧西替尼治療抗性突變之L718和L792突變型EGFR具有高抑制活性的抑制劑，而先前已知的EGFR抑制劑對該突變的治療功效不足。 [課題的解決方案]
本發明的發明人進行了廣泛的研究，發現到除了活性突變和T790M後天獲得抗性突變以外，常規引入治療的EGFR抑制劑針對含有L718和L792突變的複合突變型EGFR的抑制活性也很差。再者，發明人從比對化合物的共晶結構開始進行了廣泛的研究，也發現本發明的化合物針對具有L718和L792突變的EGFR展現出優異的抑制活性，並且針對上述複合突變型EGFR更展現出優異的抑制活性。藉此發現，發明人已完成了本發明。
本發明涵蓋下列實施方案。
項目1. 一種用於治療一惡性腫瘤患者的抗腫瘤劑，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR，其中X代表一任意胺基酸殘基，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺(化合物(A))或其鹽。
項目2. 如項目1的抗腫瘤劑，其中該EGFR更具有選自於由下列所構成之群組的至少一突變：外顯子19缺失突變、L858R、L861Q、G719X、E709X和外顯子20插入突變。
項目3. 如項目2的抗腫瘤劑，其中該EGFR更具有T790M突變。
項目4. 如項目1至3中任一項目的抗腫瘤劑，其中該L718X突變為L718Q突變。
項目5. 如項目1至4中任一項目的抗腫瘤劑，其中該L792X突變為L792H、L792F或L792Y。
項目6. 一種用於治療一惡性腫瘤患者的方法，包含將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽投予一惡性腫瘤患者之步驟，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
項目7. 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽，係用於治療一惡性腫瘤患者，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
項目8. 一種將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽用於治療一惡性腫瘤患者的用途，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
項目9. 一種將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽用以製造用於治療一惡性腫瘤患者之一藥劑的用途，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
項目10. 一種藥學組成物，包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽及藥學上可接受之一載劑，係用於治療一惡性腫瘤患者，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR，其中X代表一任意胺基酸殘基。
項目11. 一種用於預測在一惡性腫瘤患者中使用一抗腫瘤劑之化學療法的治療功效的方法，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分，該方法包含以下步驟(1)及(2)： (1)偵測從該患者獲得的一生物樣本中所含有的EGFR基因存在或不存在突變之一步驟；及 (2)當步驟(1)中的偵測結果發現EGFR基因具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變，且其中X代表一任意胺基酸殘基時，則預測該化學療法對於該患者極可能展現出充足治療功效之一步驟。
項目12. 一種用於治療一惡性腫瘤患者的方法，包含以下步驟(1)至(3)： (1)偵測從該患者獲得的一生物樣本中所含有的EGFR基因存在或不存在突變之一步驟； (2)當步驟(1)中的偵測結果發現EGFR基因具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變，且其中X代表一任意胺基酸殘基時，則預測使用一抗腫瘤劑之化學療法對於該患者極可能展現出充足治療功效之一步驟，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分 ；及 (3)將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽投予一惡性腫瘤患者之一步驟，該惡性腫瘤患者是在步驟(2)中已被預測極可能充分回應於使用一抗腫瘤劑之該化學療法，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分。 [發明的有利功效]
本發明的抗腫瘤劑針對具有L718和L792突變的EGFR發揮了高抑制活性。因此，依據提供對表現具有L718和L792突變的EGFR的惡性腫瘤患者發揮卓越治療功效的抗腫瘤劑，本發明的抗腫瘤劑是有益的。
就提供用於治療表現具有L718和L792突變的EGFR的惡性腫瘤患者的方法而言，本發明也是有益的。
在存在外顯子20區中的後天獲得抗性突變的T790M突變或存在L718和L792突變的情況下，常規EGFR抑制劑的EGFR抑制活性顯著降低。於是，難以發揮充足的治療功效。反之，本發明的抗腫瘤劑針對具有L718及/或L792突變以及具有活性突變，例如Ex19del或L858R突變的EGFR具有高抑制活性；於是，本發明的抗腫瘤劑可對表現具有該等複雜突變的EGFR的惡性腫瘤患者發揮卓越的治療功效。本發明的抗腫瘤劑針對具有L718及/或L792突變且即使除上述突變以外還具有T790M突變的EGFR具有高抑制活性；於是，本發明的抗腫瘤劑可對表現複雜地具有該等突變的EGFR的惡性腫瘤患者發揮卓越的治療功效。
再者，即使存在外顯子20區中的後天獲得抗性突變之T790M突變，本發明的抗腫瘤劑亦有益於降低在使用針對原發突變之外顯子18或外顯子21突變型EGFR的EGFR抑制劑治療期間的後天獲得抗性的表現頻率，因為其針對外顯子18和外顯子20治療抗性突變型EGFR的高抑制活性使然。
[實施方式的說明]
下文詳細解釋在本說明書中使用的本發明範疇內的各種定義的較佳例子。
在本說明書中，“EGFR”是指人類表皮生長因子受體蛋白，也稱作ErbB-1或HER1。
在本說明書中，「野生型EGFR」是指沒有體細胞突變的EGFR，其係一包含由SEQ ID NO: 1代表的胺基酸序列(GenBank登錄號: NP_005219.2)的蛋白質。
在本說明書中，「外顯子18」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的胺基酸序列中的688-728區。
在本說明書中，「外顯子18治療抗性突變」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的外顯子18區中胺基酸的點突變或缺失突變。  較佳的外顯子18治療抗性突變是在外顯子18區中具有1個胺基酸取代的點突變。更佳地，該外顯子18治療抗性突變是點突變L718X(X代表在構成由遺傳資訊所編碼之蛋白質的胺基酸當中，除白胺酸以外的一任意胺基酸殘基)，其中外顯子18中由第718位密碼子編碼的白胺酸被一任意胺基酸取代。更明確地，L718X的較佳例子包括點突變L718Q，其中外顯子18區中由第718位密碼子編碼的白胺酸被麩醯胺酸取代；以及點突變L718V，其中第718位密碼子編碼的白胺酸被纈胺酸取代。
在本說明書中，「外顯子18治療抗性突變」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的外顯子18區中胺基酸的點突變或缺失突變。較佳的外顯子18活性突變是在外顯子18區中具有1個胺基酸取代的點突變。更佳地，外顯子18活性突變是點突變E709X其中外顯子18中由第709位密碼子編碼的麩胺酸被一任意胺基酸取代；或點突變G719X，其中外顯子18中由第719位密碼子編碼的甘胺酸被一任意胺基酸取代。更明確地，E709X的較佳例子包括點突變E709K，其中外顯子18區中由第709位密碼子編碼的麩胺酸被離胺酸取代；以及點突變E709A，，其中外顯子18區中由第709位密碼子編碼的麩胺酸被丙胺酸取代。G719X的較佳例子包括點突變G719A，其中外顯子18區中由第719位密碼子編碼的甘胺酸被丙胺酸取代；點突變G719S，其中外顯子18區中由第719位密碼子編碼的甘胺酸被絲胺酸取代；以及點突變G719C，其中外顯子18區中由第719位密碼子編碼的甘胺酸被半胱胺酸取代。
在本說明書中，「外顯子20」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的胺基酸序列中的824-875區。
在本說明書中，「外顯子20治療抗性突變」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的外顯子20區中胺基酸的點突變或缺失突變。較佳的外顯子20治療抗性突變是在外顯子20區中具有1個胺基酸取代的點突變。更佳地，該外顯子20治療抗性突變是點突變L792X(X代表在構成由遺傳資訊所編碼之蛋白質的胺基酸當中，除白胺酸以外的一任意胺基酸殘基)，，其中外顯子20區中由第792位密碼子編碼的白胺酸被一任意胺基酸取代。特定例子包括點突變L792H，其中外顯子20區中由第792位密碼子編碼的白胺酸被組胺酸取代；點突變L792F其中第792位密碼子編碼的白胺酸被苯丙胺酸取代；點突變L792Y其中第792位密碼子編碼的白胺酸被酪胺酸取代；點突變L792R其中第792位密碼子編碼的白胺酸被精胺酸取代；點突變L792V其中第792位密碼子編碼的白胺酸被纈胺酸取代；以及點突變L792P其中第792位密碼子編碼的白胺酸被脯胺酸取代。在該等當中，較佳的是L792F、L792H和L792Y。
在本說明書中，「外顯子20插入突變」是指一個或多個(較佳1至7個，更佳1至4個)胺基酸插入EGFR的外顯子20區(SEQ ID NO: 1中的第761至823個胺基酸序列)的突變。較佳的例子包括在外顯子20區中第763個丙胺酸和第764個酪胺酸之間插入胺基酸序列FQEA(從N端側起依次為苯丙胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸和丙胺酸)的突變(A763_Y764insFQEA)，在外顯子20區中第769個纈胺酸和第770個天冬胺酸之間插入胺基酸序列ASV(從N端側起依次為丙胺酸、絲胺酸和纈胺酸)的突變(V769_D770insASV)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸序列SVD(從N端側起依次為絲胺酸、纈胺酸和天冬胺酸)的突變(D770_N771insSVD)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸序列NPG(從N端側起依次為絲胺酸、纈胺酸和天冬胺酸)的突變(D770_N771insNPG)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸G(甘胺酸)的突變(D770_N771insG)，在外顯子20區中缺失第770個天冬胺酸之後插入胺基酸序列GY(從N端側起依次為甘胺酸和酪胺酸)的突變(D770>GY)，在外顯子20區中第771個天冬醯胺酸和第772個脯胺酸之間插入胺基酸N(天冬醯胺酸)的突變(N771_P772insN)，在外顯子20區中第772個脯胺酸和第773個組胺酸之間插入胺基酸序列PR(從N端側起依次為脯胺酸和天冬醯胺酸)的突變(P772_R773insPR)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列NPH(從N端側起依次為天冬醯胺酸、脯胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774insNPH)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列PH(從N端側起依次為脯胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774insPH)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列AH(從N端側起依次為丙胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774insAH)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸H(組胺酸)的突變(H773_V774insH)，在外顯子20區中第774個纈胺酸和第775個半胱胺酸之間插入胺基酸序列HV(從N端側起依次為組胺酸和纈胺酸)的突變(V774_C774insHV)，在外顯子20區中第761個丙胺酸和第762個麩胺酸之間插入胺基酸序列EAFQ(從N端側起依次為麩胺酸、丙胺酸、苯丙胺酸和麩醯胺酸)的突變(A761_E762insEAFQ)等等。更佳的例子包括在外顯子20區中第769個纈胺酸和第770個天冬胺酸之間插入胺基酸序列ASV(從N端側起依次為丙胺酸、絲胺酸和纈胺酸)的突變(V769_D770insASV)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸序列SVD(從N端側起依次為絲胺酸、纈胺酸和天冬胺酸)的突變(D770_N771insSVD)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸G(甘胺酸)的突變(D770_N771insG)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列NPH(從N端側起依次為天冬醯胺酸、脯胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774insNPH)，以及在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列PH(從N端側起依次為脯胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774insPH)。特佳的例子包括在外顯子20區中第763個丙胺酸和第764個酪胺酸之間插入胺基酸序列FQEA(從N端側起依次為苯丙胺酸、麩醯胺酸、麩胺酸和丙胺酸)的突變(A763_Y764insFQEA)，在外顯子20區中第769個纈胺酸和第770個天冬胺酸之間插入胺基酸序列ASV(從N端側起依次為丙胺酸、絲胺酸和纈胺酸)的突變(V769_D770insASV)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸序列SVD(從N端側起依次為絲胺酸、纈胺酸和天冬胺酸)的突變(D770_N771insSVD)，在外顯子20區中第770個天冬胺酸和第771個天冬醯胺酸之間插入胺基酸G(甘胺酸)的突變(D770_N771insG)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列NPH(從N端側起依次為天冬醯胺酸、脯胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774inchsNPH)，在外顯子20區中第773個組胺酸和第774個纈胺酸之間插入胺基酸序列PH(從N端側起依次為脯胺酸和組胺酸)的突變(H773_V774insPH)等等。
在本說明書中，「外顯子21」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的胺基酸序列中的824-875區。
在本說明書中，「外顯子21活性突變」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的外顯子21區中胺基酸的點突變或缺失突變。較佳的外顯子21活性突變是在外顯子21區中具有1個胺基酸取代的點突變。更佳地，外顯子21活性突變是點突變L858X，其中外顯子21區中由第858位密碼子編碼的白胺酸被一任意胺基酸取代；點突變L861X，其中外顯子21區中由第861位密碼子編碼的白胺酸被一任意胺基酸取代(X代表在構成由遺傳資訊所編碼之蛋白質的胺基酸當中，除白胺酸以外的一任意胺基酸殘基)。更明確地，較佳例子包括點突變L858R，其中外顯子21區中由第858位密碼子編碼的白胺酸突變成天冬醯胺酸；以及點突變L861Q，其中外顯子21區中由第861位密碼子編碼的白胺酸被麩醯胺酸取代。
在本發明中，「外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變」涵蓋「外顯子18治療抗性突變」、「外顯子20治療抗性突變」以及「外顯子18和外顯子20治療抗性突變」。
在本發明中，「點突變」是指造成一個或多個(譬如，約1至10個，較佳地約1至5個，更佳地約1、2或3個)胺基酸殘基的取代、插入或缺失的突變；並且可包括如同核酸的框內插入及/或缺失突變。
「具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR」涵蓋「具有外顯子18治療抗性突變的EGFR」、「具有外顯子20治療抗性突變的EGFR」以及「具有外顯子18和外顯子21治療抗性突變的EGFR」。
在本說明書中，「具有外顯子18治療抗性突變的EGFR」是指具有外顯子18中至少上述L718X突變作為外顯子18治療抗性突變的EGFR。該EGFR可另具有L718X以外的外顯子18突變，但較佳具有單一L718X突變作為外顯子18治療抗性突變。此外，該EGFR可具有外顯子18治療抗性突變以外的突變(譬如，外顯子19缺失突變、L858R突變和L790M突變)。
在本說明書中，「具有外顯子20治療抗性突變的EGFR」是指具有外顯子20中至少上述L792X突變作為外顯子20治療抗性突變的EGFR。該EGFR可具有L792X突變以外的突變，但較佳具有單一L718X突變作為外顯子20治療抗性突變。此外，該EGFR可具有外顯子20治療抗性突變以外的突變(譬如，外顯子19缺失突變、L858R突變和L790M突變)。
在本說明書中，「外顯子19」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的胺基酸序列中的729-823區。
在本說明書中，「外顯子19缺失突變」是指野生型EGFR (SEQ ID NO: 1)的外顯子19區中缺失一個或多個胺基酸的突變。除了此區內的缺失以外，也包括插入一個或多個任意胺基酸的突變。外顯子19缺失突變的例子包括在外顯子19區中從第746個麩胺酸到第750個丙胺酸缺失5個胺基酸的突變(Del E746-A750)，在外顯子19區中從第747個白胺酸到第753個脯胺酸插入7個胺基酸的突變(Del 747-P753insS)，在外顯子19區中從第747個白胺酸到第751個蘇胺酸缺失5個胺基酸的突變(Del L747-T751)，在外顯子19區中從第747個白胺酸到第750個丙胺酸缺失4個胺基酸之後插入脯胺酸的突變(Del 747-A750insP)，等等。較佳的例子包括在外顯子19區中從第746個麩胺酸到第750個丙胺酸缺失5個胺基酸的突變(Del E746-A750)。
而且，具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR可更具有選自於由下列所構成之群組的至少一突變：外顯子19缺失突變、L858R、L861Q、G719X、E709X和外顯子20插入突變。特定例子包括在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有外顯子19缺失突變、在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有外顯子19缺失突變、在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有L858R、在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有L858R、在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有L861Q、在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有L861Q、在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有G719X、在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有G719X、在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有E709X、在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有E709X、在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有外顯子20插入突變以及在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有外顯子20插入突變。在該等當中較佳的是在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有外顯子19缺失突變、在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有外顯子19缺失突變、在外顯子18區中具有L718X突變的EGFR更具有L858R以及在外顯子20區中具有L792X突變的EGFR更具有L858R。
再者，除了上述外顯子19缺失突變、L858R、L861Q、G719X、E709X和外顯子20插入突變之外，具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR可更具有T790M突變。T790M是外顯子20區中的後天獲得抗性突變。已知使用現有的EGFR抑制劑會產生T790M。T790M的後天獲取通常會降低現有藥物對惡性腫瘤患者的功效。
在本發明中，例子包括在外顯子18區中具有L718X突變且具有外顯子19缺失突變的EGFR更具有T790M突變、在外顯子20區中具有L792X突變且具有外顯子19缺失突變的EGFR更具有T790M突變、在外顯子18區中具有L718X突變且具有L858R的EGFR更具有T790M突變、在外顯子20區中具有L792X突變且具有L858R的EGFR更具有T790M突變、在外顯子18區中具有L718X突變且具有L861Q的EGFR更具有T790M突變、在外顯子20區中具有L792X突變且具有L861Q的EGFR更具有T790M突變、在外顯子18區中具有L718X突變且具有G719X的EGFR更具有T790M突變、在外顯子20區中具有L792X突變且具有G719X的EGFR更具有T790M突變、在外顯子18區中具有L718X突變且具有E709X的EGFR更具有T790M突變、在外顯子20區中具有L792X突變且具有E709X的EGFR更具有T790M突變、在外顯子18區中具有L718X突變且具有外顯子20插入突變的EGFR更具有T790M突變以及在外顯子20區中具有L792X突變且具有外顯子20插入突變的EGFR更具有T790M突變。在該等當中較佳的是在外顯子18區中具有L718X突變且具有外顯子19缺失突變的EGFR更具有T790M突變、在外顯子20區中具有L792X突變且具有外顯子19缺失突變的EGFR更具有T790M突變、在外顯子18區中具有L718X突變且具有L858R的EGFR更具有T790M突變以及在外顯子20區中具有L792X突變且具有L858R的EGFR更具有T790M突變。
在具有上述複合突變的EGFR中，在外顯子18區中具有L718Q突變的EGFR、在外顯子20區中具有L792F突變的EGFR、具有L792H突變的EGFR以及具有L792Y突變的EGFR是特別較佳的。
在本發明中，用於偵測由一惡性腫瘤患者表現的EGFR突變的方法並無特別限制，只要該方法能夠偵測該突變即可，可使用任何習知的偵測方法。
用於偵測EGFR突變的樣本並無特別限制，只要該樣本是從惡性腫瘤患者中分離的生物樣本，特別是從惡性腫瘤患者獲得並含有惡性腫瘤細胞的樣本即可。生物樣本的例子包括體液(譬如血液、尿液等)、組織、其提取物以及所獲得組織的培養物。可取決於生物樣本的類型來適當地選擇用於獲得生物樣本的方法。
藉由根據測量方法適當地處理來製備生物樣本。再者，包含用於偵測的引子或探針的試劑可根據其測量方法藉由常規方法製備。
在本發明的一個實施方案中，偵測由一惡性腫瘤患者表現的EGFR存在本發明的突變之一步驟可在將一抗腫瘤劑投予該惡性腫瘤患者之前進行。
惡性腫瘤可包括兩個或更多個不同種類的惡性腫瘤細胞。再者，在單一患者中可產生兩個或更多個惡性腫瘤。因此，單一患者可同時具有不同的EGFR突變(例如，外顯子18突變是L718Q和L718V外顯子18突變；以及外顯子20突變是L792F、L792H、L792Y、L792R、L792V和L792P外顯子20突變；然而，不限於此)。
本發明的抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺(化合物(A))或其鹽作為一活性成分。化合物(A)由下列化學式表示。
[化學式1]
Figure 02_image001
下文解釋本發明化合物的製造方法。 本發明的化合物A可以例如經由WO2015/025936A1揭露的製造方法、實施例所述方法等等來製造。然而，本發明化合物的製造方法不限於該些反應實施例。
當本發明的化合物A具有諸如光學異構物、立體異構物和互變異構物的異構物時，任何異構物及其混合物皆包括在本發明化合物的範疇內，除非另有指明。例如，當本發明的化合物具有光學異構物時，消旋混合物和從消旋混合物分離的光學異構物也包括在本發明化合物的範疇內，除非另有指明。
化合物A的鹽是指任何藥學上可接受的鹽；例子包括鹼式加成鹽和酸式加成鹽。
鹼式加成鹽的例子包括鹼金屬鹽，例如鈉鹽和鉀鹽；鹼土金屬鹽，例如鈣鹽和鎂鹽；銨鹽；以及有機胺鹽，例如三甲胺鹽、三乙胺鹽、二環己基胺鹽、乙醇胺鹽、二乙醇胺鹽、三乙醇胺鹽、普魯卡因鹽和N,N’-苯甲基二乙二胺鹽。
酸式加成鹽的例子包括無機酸鹽，例如氫氯酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽和過氯酸鹽；有機酸鹽，例如乙酸鹽、甲酸鹽、馬來酸鹽、延胡索酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、抗壞血酸鹽和三氟乙酸鹽；以及磺酸鹽，例如甲磺酸鹽、羥乙磺酸鹽、苯磺酸鹽和對甲苯磺酸鹽。
本發明的化合物或其鹽也涵蓋其前驅物。前驅物是指可在體內生理條件下經由與酶、胃酸或類似物反應而轉換成本發明之化合物或其鹽的化合物，即可藉由酶解氧化、還原、水解或類似作用轉換成本發明之化合物或鹽的化合物；或者可藉由以胃酸或類似物水解或類似作用而轉換成本發明之化合物或其鹽的化合物。再者，前驅物可以是在生理條件下能轉換成本發明之化合物或其鹽的化合物，例如在Hirokawa Shoten Co.於1990年發表的“Iyakuhin no Kaihatsu [Development of Pharmaceuticals],” Vol. 7, Molecular Design，pp. 163-198中描述的那些。
疾病的說明 本發明所靶向的腫瘤的特定例子包括但不限於頭頸癌、胃腸道癌(食道癌、胃癌、十二指腸癌、肝癌、膽道癌(譬如，膽囊癌和膽管癌)、胰臟癌、結腸直腸癌(譬如，結腸癌和直腸癌)等)、肺癌(譬如，非小細胞肺癌、小細胞肺癌和間皮瘤)、乳癌、生殖器癌(卵巢癌、子宮癌(譬如，子宮頸癌和子宮內膜癌)等)、泌尿系統癌(譬如，腎癌、膀胱癌、前列腺癌和睾丸腫瘤)、造血系統腫瘤(譬如，白血病、惡性淋巴瘤和多發性骨髓瘤)、骨肉瘤、軟組織肉瘤、皮膚癌、腦瘤等等。較佳的例子包括肺癌、乳癌、頭頸癌、腦瘤、子宮癌、胃腸道癌、造血系統腫瘤和皮膚癌。肺癌是特別較佳的。
當本發明的化合物或其鹽用作藥劑時，若有需要，可添加藥學載劑，藉此根據預防和治療目的形成適宜的劑型。劑型的例子包括口服製劑、注射液、栓劑、軟膏、貼片等等。口服製劑是較佳的。此類劑型可藉由本領域技術人員常規習知的方法形成。
作為藥學上可接受的載體，可將用作製備材料的各種常規的有機或無機載劑材料作為固體製劑中的賦形劑、黏結劑、崩解劑、潤滑劑或著色劑；或作為液體製劑中的溶劑、增溶劑、助懸劑、等滲劑、緩衝劑或舒緩劑來混摻。而且，若有需要，也可使用藥學製劑添加劑，例如抗菌劑(antiseptics)、抗氧化劑、著色劑、甜味劑和安定劑。
口服固體製劑係如下製備。在將賦形劑，任擇地連同賦形劑、黏結劑、崩解劑、潤滑劑、著色劑、掩味劑或矯味劑等添加至本發明的化合物之後，藉由常規方法將所得混合物調配成錠劑、包衣錠劑、粒劑、粉劑、膠囊或等等。
賦形劑的例子包括乳糖、蔗糖、D-甘露醇、葡萄糖、澱粉、碳酸鈣、高嶺土、微晶纖維素和矽酸酐。黏結劑的例子包括水、乙醇、1-丙醇、2-丙醇、單糖漿、液體葡萄糖、液體α-澱粉、液體明膠、D-甘露醇、羧甲基纖維素、羥丙基纖維素、羥丙基澱粉、甲基纖維素、乙基纖維素、蟲膠、磷酸鈣、聚乙烯吡咯烷酮等等。崩解劑的例子包括乾燥澱粉、藻酸鈉、洋菜粉、碳酸氫鈉、碳酸鈣、月桂基硫酸鈉、硬脂酸單甘油酯、乳糖等等。潤滑劑的例子包括純化滑石、硬脂酸鈉、硬脂酸鎂、硼砂、聚乙二醇等等。著色劑的例子包括氧化鈦、氧化鐵等等。掩味劑或矯味劑的例子包括蔗糖、苦橙皮、檸檬酸、酒石酸等等。
在製備用於口服投予的液體製劑時，可將掩味劑、緩衝劑、安定劑、矯味劑等等添加到本發明的化合物中；並可按照慣常方法將所得混合物調配成口服液體製劑、糖漿、酏劑等等。
在製備注射劑時，可將pH調節劑、緩衝劑、安定劑、等滲劑、局部麻醉劑等等添加到本發明的化合物中；並可按照慣常方法將混合物調配成皮下、肌內或靜脈內注射液。
本案使用的pH調節劑和緩衝劑的例子包括檸檬酸鈉、乙酸鈉和磷酸鈉。安定劑的例子包括焦亞硫酸鈉、EDTA、硫代羥乙酸和硫代乳酸。局部麻醉劑的例子包括普魯卡因氫氯酸鹽和利多卡因氫氯酸鹽。等滲劑的例子包括氯化鈉、葡萄糖、D-甘露糖醇和甘油。
在製備栓劑時，可將相關領域中已知的藥學上可接受的載劑，例如聚乙二醇、羊毛脂、可可脂和脂肪酸甘油三酸酯；以及視需要之表面活性劑，例如Tween 80 (註冊商標)添加到化合物A中，並可按照慣常方法將所得混合物調配成栓劑。
在製備軟膏時，可視需要將常用的基質、安定劑、濕潤劑、防腐劑等等混摻到化合物A中；並按照慣常方法將所得混合物混合並調配成軟膏。
基質的例子包括液體石蠟、白凡士林、白蜂蠟、辛基十二烷醇和石蠟。
防腐劑的例子包括對氧苯甲酸甲酯、對氧苯甲酸乙酯和對氧苯甲酸丙酯。
在製備貼片時，可按照慣常方法將上述軟膏、乳霜、凝膠、糊劑等等施用於慣常基材。
基材的例子包括了包含棉、短纖維或化學纖維的機織布或不織布；也可使用軟氯乙烯、聚乙烯、聚胺基甲酸酯等構成的膜或發泡片。
欲併入此類劑量單位形式之各者中的化合物A的量取決於經投予該化合物的患者的狀況、其劑型等。一般而言，在口服劑的情況下，每劑量單位形式的化合物量較佳為0.05至1000 mg。在注射液的情況下，每劑量單位形式的化合物量較佳為0.01至500 mg；在栓劑的情況下，每劑量單位形式的化合物量較佳為1至1000 mg。
再者，此劑型中的藥品的每日劑量取決於患者的狀況、體重、年齡、性別等，因此不能一概而論。通常，成人(體重：50 kg)的本發明化合物的每日劑量一般可為0.05至5000 mg，較佳為0.1至1000 mg；並且較佳每天投予一劑或分成兩至三劑。
本發明亦提供一種用於治療一惡性腫瘤患者的方法，包含將化合物A或其鹽投予一惡性腫瘤患者之一步驟，該惡性腫瘤患者係表現具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR。
本發明亦提供一種用於治療一惡性腫瘤患者的化合物A或其鹽，該惡性腫瘤患者係表現具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR。
本發明亦提供一種將化合物A或其鹽用於治療一惡性腫瘤患者的用途，該惡性腫瘤患者係表現具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR。
本發明亦提供一種將化合物A或其鹽用以製造用於治療一惡性腫瘤患者之一藥劑的用途，該惡性腫瘤患者係表現具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變的EGFR。
本發明亦提供一種用於預測在一惡性腫瘤患者中使用一抗腫瘤劑之化學療法的治療功效的方法，該抗腫瘤劑包含化合物A或其鹽作為一活性成分，該方法包含以下步驟(1)及(2)： (1)偵測從該患者獲得的一生物樣本中所含有的EGFR基因存在或不存在突變之一步驟；及 (2)當步驟(1)中的偵測結果發現EGFR基因具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變時，則預測該化學療法對於該患者極可能展現出充足治療功效之一步驟。
本發明亦提供一種用於治療一惡性腫瘤患者的方法，包含以下步驟(1)至(3)： (1)偵測從該患者獲得的一生物樣本中所含有的EGFR基因存在或不存在突變之一步驟；及 (2)當步驟(1)中的偵測結果發現EGFR基因具有外顯子18及/或外顯子20治療抗性突變時，則預測使用一抗腫瘤劑之化學療法對於該患者極可能展現出充足治療功效之一步驟，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分；以及 (3)將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽投予一惡性腫瘤患者之一步驟，該惡性腫瘤患者是在步驟(2)中已被預測極可能充分回應於使用一抗腫瘤劑之該化學療法，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分。
EGFR基因的鹼基序列是眾所周知的。cDNA的鹼基序列的GenBank登錄號為NM_005228.4。
「治療功效」可藉由腫瘤縮小功效、抑制復發功效、延長壽命功效等等來評估。復發抑制功效可顯示為非復發期的延長程度或復發率的改善程度；而延長壽命功效可顯示為總生存時間的程度或無進展生存的中位數的延長程度等等。使用包含化合物A或其鹽作為活性成分之一抗腫瘤劑的化學療法的「充足的治療功效」的意思是，舉例來說，與不投予相比，投予包含化合物A或其鹽作為活性成分之該抗腫瘤劑獲得卓越的治療功效，例如延長生存時間，抑制復發等等。 [實施例]
下文參照下列測試實施例更詳細地說明本發明。然而，本發明不限於此實施例(測試實施例)。
[測試實施例1] 體外藥效測試 使用HEK293細胞評估突變型EGFR強制表現系統中的細胞內磷酸化的結果(抑制活性) 化合物的細胞內目標抑制活性是基於下列作為指標來評估：使用Jump-In(商標) Grip(商標) HEK293細胞(Thermo Fisher Scientific Inc.) (下文亦稱作「 HEK293細胞」)在突變型EGFR強制表現系統中的細胞內EGFR磷酸化。使HEK293細胞維持在帶有GlutaMAX(商標)-I (高葡萄糖)(Thermo Fisher Scientific Inc.)的D-MEM中，其含有10%透析的FBS。將HEK293細胞接種在96孔平底微孔盤的每個孔中，俾使每個孔的細胞計數為10,000，並在含5% CO2 氣體的培育箱中於37°C培育過夜。然後，使用ViaFect (商標)轉染試劑(Promega Corporation)將編碼人類EGFR基因(Del E746-A750 (下文亦稱作“Ex19del”)、Ex19del+T790M (符號“+”表示兩個突變均包含在內)、Ex19del+T790M+L718Q、Ex19del+T790M+L792H、Ex19del+T790M+L792F、Ex19del+T790M+L792Y、L858R、L858R+T790M、L858R+T790M+L718Q、L858R+T790M+L792H、L858R+T790M+L792F或L858R+T790M+L792Y)的pcDNATM 6.2/V5-DEST載體連同Opti-MEM (商標) I (Thermo Fisher Scientific Inc.)一起引進。使該細胞再次在含5% CO2 氣體的培育箱中於37°C培育過夜。隔天，將化合物A、厄洛替尼、阿法替尼和奧西替尼(厄洛替尼、阿法替尼和奧西替尼在下文可各自稱作「比較化合物」)個別地溶於DMSO，並以DMSO或培養基稀釋。然後將該溶液個別地添加到細胞培養盤的每個孔中，並使細胞在含5% CO2 氣體的培育箱中於37°C培育6小時。培育後，該細胞是使用20%中性緩衝福馬林(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)固定，並用Odyssey(商標)封閉緩衝液(PBS) (M&S TechnoSystems Inc.)封閉。然後使該細胞與經Odyssey(商標)封閉緩衝液(PBS)稀釋的一級抗體(EGFR抗體混合物#AHR5062 (Thermo Fisher Scientific Inc.)與磷酸化EGFR受體(Tyr1068)抗體#2234L (CST))反應至1/200，並使該細胞於4°C靜置過夜。隔天，使該細胞與經Odyssey(商標)封閉緩衝液(PBS)稀釋的二級抗體(IRDye 800CW Goat aRabbit #926-32211與IRDye 680RD Goat aMouse #926-68070 (M&S TechnoSystems Inc.))反應至1/800，然後使該細胞於室溫靜置1小時。螢光強度(下文亦稱作“FI”)是用Odyssey(商標) CLx紅外線成像系統(LI-COR Bioscience)在800 nm和700 nm的螢光波長下偵測。
從在800 nm或700 nm螢光波長偵測到的FI減掉不含一級抗體的孔的FI所獲得的值被稱作FI (800, EGFR)-空白(於800 nm)和FI (700, p-EGFR)-空白(於700 nm)。各孔的FI (700, p-EGFR)-空白除以FI (800, EGFR)-空白所獲得的值係測定為FI (p-EGFR/EGFR)。使用下式計算磷酸化EGFR比率，以測定EGFR被磷酸化50%時測試化合物的濃度(IC50 (μM))。表1例示了結果。
磷酸化EGFR率(%) = T/C × 100 T:添加測試化合物的孔的FI (p-EGFR/EGFR)。 C:未添加測試化合物的孔的FI (p-EGFR/EGFR)。
從表1清楚可見，化合物A針對含有L718Q和L792X的複合突變EGFR的細胞內磷酸化展現出高抑制活性；而且活性高於厄洛替尼、阿法替尼和奧西替尼的活性。
[表1]
  本發明的化合物A 奧西替尼 阿法替尼 厄洛替尼
Ex19del 11.2±6.4 52.1±23.6 18.5±10.2 201±6
Ex19del+T790M 16.9±5.9 69.7±15.6 250±64 >1000
Ex19del+T790M+L718Q 82.5±9.0 5800±2940 >10000 >10000
Ex19del+T790M+L792H 11.1±5.6 513±280 8190±560 >10000
Ex19del+T790M+L792F 6.25±1.83 65.7±15.5 692±325 >10000
Ex19del+T790M+L792Y 6.54±1.49 111±38 508±218 >10000
L858R 13.8±3.8 53.3±11.0 17.9±3.0 167±22
L858R+T790M 16.0±2.6 59.0±10.9 162±38 >1000
L858R+T790M+L718Q 104±40 7880±950 3670±1690 >10000
L858R+T790M+L792H 15.3±5.0 441±161 2190±1310 >10000
L858R+T790M+L792F 9.07±4.74 124±40 538±274 >10000
L858R+T790M+L792Y 11.3±5.8 273±72 512±269 >10000
圖1：圖解使用HEK293細胞的突變型EGFR強制表現系統中的磷酸化(抑制活性)的評估結果。
Figure 12_A0101_SEQ_0001
Figure 12_A0101_SEQ_0002
Figure 12_A0101_SEQ_0003
Figure 12_A0101_SEQ_0004
Figure 12_A0101_SEQ_0005
Figure 12_A0101_SEQ_0006
Figure 12_A0101_SEQ_0007
Figure 108148114-A0101-11-0002-1
(無)

Claims (12)

  1. 一種用於治療一惡性腫瘤患者的抗腫瘤劑，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR，其中X代表一任意胺基酸殘基，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺(化合物(A))或其鹽。
  2. 如請求項1的抗腫瘤劑，其中該EGFR更具有選自於由下列所構成之群組的至少一突變：外顯子19缺失突變、L858R、L861Q、G719X、E709X和外顯子20插入突變。
  3. 如請求項2的抗腫瘤劑，其中該EGFR更具有T790M突變。
  4. 如請求項1至3中任一項的抗腫瘤劑，其中該L718X突變為L718Q突變。
  5. 如請求項1至4中任一項的抗腫瘤劑，其中該L792X突變為L792H、L792F或L792Y。
  6. 一種用於治療一惡性腫瘤患者的方法，包含將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽投予一惡性腫瘤患者之步驟，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
  7. 一種(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽，係用於治療一惡性腫瘤患者，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
  8. 一種將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽用於治療一惡性腫瘤患者的用途，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
  9. 一種將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽用以製造用於治療一惡性腫瘤患者之一藥劑的用途，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR。
  10. 一種藥學組成物，包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽及藥學上可接受之一載劑，係用於治療一惡性腫瘤患者，該惡性腫瘤患者係表現具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變的EGFR，其中X代表一任意胺基酸殘基。
  11. 一種用於預測在一惡性腫瘤患者中使用一抗腫瘤劑之化學療法的治療功效的方法，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分，該方法包含以下步驟(1)及(2)： (1)偵測從該患者獲得的一生物樣本中所含有的EGFR基因存在或不存在突變之一步驟；及 (2)當步驟(1)中的偵測結果發現EGFR基因具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變，且其中X代表一任意胺基酸殘基時，則預測該化學療法對於該患者極可能展現出充足治療功效之一步驟。
  12. 一種用於治療一惡性腫瘤患者的方法，包含以下步驟(1)至(3)： (1)偵測從該患者獲得的一生物樣本中所含有的EGFR基因存在或不存在突變之一步驟；及 (2)當步驟(1)中的偵測結果發現EGFR基因具有選自於由外顯子18中的L718X突變與外顯子20中的L792X突變所構成之群組的至少一突變，且其中X代表一任意胺基酸殘基時，則預測使用一抗腫瘤劑之化學療法對於該患者極可能展現出充足治療功效之一步驟，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分；及 (3)將(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽投予一惡性腫瘤患者之一步驟，該惡性腫瘤患者是在步驟(2)中已被預測極可能充分回應於使用一抗腫瘤劑之該化學療法，該抗腫瘤劑包含(S)-N-(4-胺基-6-甲基-5-(喹啉-3-基)-8,9-二氫嘧啶并[5,4-b]吲哚嗪-8-基)丙烯醯胺或其鹽作為一活性成分。
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