TW202003048A

TW202003048A - 用抗體-藥物偶聯物及flt3抑制劑之組合治療

Info

Publication number: TW202003048A
Application number: TW108116625A
Authority: TW
Inventors: 羅素沃克; 克莉斯朵沃特金; 馬凱派翠克氏威德
Original assignee: 美商伊繆諾金公司
Priority date: 2018-05-15
Filing date: 2019-05-14
Publication date: 2020-01-16
Also published as: WO2019222130A1; WO2019222130A8

Abstract

本發明提供一種治療受試者之癌症之方法，其包括向該受試者投與治療有效量之靶向CD33之抗體-藥物偶聯物(ADC)及治療有效量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽。還提供了醫藥組合物，其包含治療有效量之靶向CD33之ADC及治療有效量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽。

Description

用抗體-藥物偶聯物及FLT3抑制劑之組合治療

無

急性髓性白血病(AML)與骨髓中異常胚細胞之積聚有關。急性髓性白血病(AML)係成人中最常見之白血病類型之一。僅在美國，每年就有超過18,000例新AML病例被發現，且超過10,000例死亡與AML有關。儘管對化療之初始反應率很高，但許多急性髓性白血病(AML)患者未能達成完全緩解。事實上，大多數AML患者在診斷後3-5年內復發。特別地，攜帶FLT3內部串聯重複(FLT3-ITD)之AML患者在用標準藥劑治療後診斷較差且復發率高。

白血球分化抗原CD33係364個胺基酸之跨膜醣蛋白，其與唾液酸黏附素家族成員具有序列同源性，包括髓磷脂相關醣蛋白及CD22，以及唾液酸黏附素本身(S. Peiper, 2002, Leucocyte Typing VII, White Cell Differentiation, Antigens, Proceedings of the Seventh International Workshop and Conference, Oxford University Press，第777頁)。

CD33之表現似乎對造血細胞室具有高度特異性，並且具有藉由骨髓前體細胞之強表現(S. Peiper，2002)。它由骨髓祖細胞諸如CFU-GEMM、CFU-GM、CFU-G及BFU-E、單核細胞/巨噬細胞、粒細胞前體諸如前骨髓細胞及骨髓細胞表現，但是在成熟及分化時表現降低，然而成熟粒細胞具有低水準之表現(S. Peiper，2002)。抗CD33單株抗體已顯示CD33在大於80%之人類病例中由成株、急性髓性白血病(AML)細胞表現(LaRussa, V. F. 等人, 1992, Exp. Hematol. 20:442-448)。相反，在活體外產生「胚細胞集落」(Leary, A. G. 等人, 1987, Blood 69:953)並誘導造血長期骨髓培養物(Andrews R. G. 等人, 1989, J. Exp. Med. 169:1721；Sutherland, H. J. 等人, 1989, Blood 74:1563)之多能造血幹細胞似乎缺乏CD33之表現。

由於CD33之選擇性表現，已經提出將細胞毒性藥物與特異性識別及結合CD33之單株抗體組合之抗體-藥物偶聯物(下文稱為「ADC」)用於選擇性靶向AML細胞。預計此等療法會使幹細胞及原始造血祖細胞不受影響。最近，已經報道了利用新型DNA烷化劑DGN462之靶向CD33之ADC，其包含含有單亞胺部分之吲哚啉-苯并二氮呯二聚體(參見，例如，美國專利第8,765,740號、第8,889,669號、第9,169,272號及第9,434,748號)，在活體外及活體內血液癌模型中顯示出抗癌活性。儘管該ADC顯示出巨大希望，但仍然需要在治療患有癌症，尤其血液系統癌症，例如AML之患者中使用ADC之改進之方法。

現已令人驚訝地發現，與單獨之ADC及單獨之奎紮替尼相比，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)與含有吲哚啉-苯并二氮呯二聚體細胞毒性有效負載之靶向CD33之ADC之組合在活體外及活體內對白血病細胞具有累加或協同作用(參見實例1-4)。

奎紮替尼，也稱為AC220，係一種小分子FLT3受體酪胺酸激酶抑制劑，目前正在臨床試驗中針對治療復發/難治性急性髓性白血病(AML)進行評估。奎紮替尼可以係其中性形式或游離鹼形式(如下所示之結構)或鹽形式，例如醫藥學上可接受之鹽形式。例如，奎紮替尼之二鹽酸鹽可用於本發明之方法中。

在一個實施例中，本發明提供治療受試者之癌症之方法，包括向受試者投與治療有效量之奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及治療有效量之式(I)之ADC：

(I)，或其醫藥學上可接受之鹽。N與C之間之該雙線

表示單鍵或雙鍵，其限制條件為，當其為雙鍵時，X不存在且Y為氫；且當其為單鍵時，X為氫且Y為-SO₃ H。術語「Ab」係抗CD33抗體或其抗原結合片段。或者，「Ab」係抗CD33抗體或抗原結合片段，其包含SEQ ID NO:1之重鏈可變區(V_H )互補決定區(CDR)1序列、SEQ ID NO:2之V_H CDR2序列及SEQ ID NO:3之V_H CDR3序列，及SEQ ID NO:4之輕鏈可變區(V_L )CDR1序列、SEQ ID NO:5之V_L CDR2序列及SEQ ID NO:6之V_L CDR3序列。術語「r」係1至10之整數。

本發明還提供式(I)之ADC或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療患有癌症之受試者，與奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)組合。

本發明還提供式(I)之ADC或其醫藥學上可接受之鹽與奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)組合在製備用於治療患有癌症之受試者之藥物中之用途。

在一個實施例中，在投與ADC之前將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者。在另一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC同時投與受試者。在另一個實施例中，在投與ADC後將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者。

在一個實施例中，本發明之ADC(例如，IMGN779)以WO2018/213430中揭示之劑量及給藥方案投與受試者，該文獻以引用之方式整體併入本文。

如本文所用，本發明之ADC(例如，IMGN779)之劑量「mg/kg」基於抗體。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.39-0.7 mg/kg之本發明之ADC(例如，IMGN779)。在另一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.39 mg/kg、0.54 mg/kg或0.7 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.3 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.35 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.39 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.4 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.45 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.50 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.54 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.55 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.60 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.65 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.70 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一個實施例中，約每週一次向受試者投與約0.75 mg/kg本發明之ADC(例如，IMGN779)，例如在28天週期之第1、8、15及22天。

在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致外周血胚細胞之減少。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致第一劑量之3-8天內外周血胚細胞減少。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致第二劑量後外周血胚細胞減少。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致第二劑量後外周血胚細胞減少至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)實現約5%、4%、3%、2%、1%或小於1%之外周血胚細胞百分比。

在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少至少40%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少至少45%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少至少48%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少至少50%、55%、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%或100%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少至少59%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)導致骨髓胚細胞減少至少96%。在一些實施例中，投與本發明之ADC(例如，IMGN779)實現約5%、4%、3%、2%、1%或小於1%之骨髓胚細胞百分比。

在一個實施例中，奎紮替尼二鹽酸鹽用於本發明之方法中。

在一個實施例中，向受試者投與總日劑量為20-60 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，17.7-53.1 mg之奎紮替尼游離鹼)。在一個實施例中，向受試者投與總日劑量為30-60 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，26.5-53.1 mg之奎紮替尼游離鹼)。在一個實施例中，向受試者投與總日劑量為60 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，53.1 mg奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，向受試者投與總日劑量為40 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，35.4 mg奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，向患者投與總日劑量為20 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，17.7 mg之奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，向患者投與總日劑量為30 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，26.5 mg奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，每日給受試者投與奎紮替尼或其二鹽酸鹽。

在一個實施例中，用奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及抗體-藥物偶聯物治療受試者5天、一週、10天、2週、3週、1個月、2個月、3個月、6個月、8個月、10個月或1年。

在一個實施例中，對於本發明之方法，每天(例如每天一次)用奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽治療受試者持續14天。在另一個實施例中，每天(例如每天一次)用奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽治療受試者持續28天。

在一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC之組合用作治療合適之AML患者中之AML之一線療法。在另一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC之組合用作治療不適合之AML患者之AML之一線療法。

在一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC之組合用作治療合適之AML患者中之AML之二線療法。在另一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC之組合用作治療不適合之AML患者中之AML之二線療法。

在一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC之組合用作治療合適之AML患者中之難治性或復發性AML之二線療法。在另一個實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC之組合用作治療不適合之AML患者中之難治性或復發性AML之二線療法。

在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，該方法進一步包括向受試者投與治療有效量之另外之化學治療劑或療法。在一個實施例中，另外之化學治療劑係阿糖胞苷、伊達比星、柔紅黴素或其組合。

在某些實施例中，本發明之方法進一步包括向受試者投與100-200 mg/m² /天之阿糖胞苷持續7天及12 mg/m² /天之伊達比星或60-90 mg/m² /天之柔紅黴素持續3天。在一個實施例中，在第1天至第7天投與阿糖胞苷，並在第1天至第3天投與伊達比星或柔紅黴素(7 + 3給藥方案)。在另一個實施例中，在第8天至第21天每天一次給受試者投與奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，奎紮替尼二鹽酸鹽)。

在某些實施例中，本發明之方法進一步包括每隔一天向受試者投與3000 mg/m² /天之阿糖胞苷(高劑量方案)。在一個實施例中，在第1、3及5天向受試者投與阿糖胞苷。在另一個實施例中，在第6天至第19天每天一次向受試者投與奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，奎紮替尼二鹽酸鹽)。

在一個實施例中，本文描述之本發明之方法用於治療適合之FLT3-ITD AML患者，並且該方法進一步包括向患者投與100-200 mg/m² /天之阿糖胞苷持續7天及12 mg/m² /天之伊達比星或60-90 mg/m² /天之柔紅黴素持續3天。在一個實施例中，在第1天至第7天投與阿糖胞苷，並在第1天至第3天投與伊達比星或柔紅黴素(7 + 3給藥方案)。在另一個實施例中，本文描述之本發明之方法用於治療適合之FLT3-ITD患者，並且該方法進一步包括每隔一天向患者投與3000 mg/m² /天之阿糖胞苷(高劑量方案)。在一個實施例中，在第1、3及5天向受試者投與阿糖胞苷。

在某些實施例中，本發明之方法進一步包括向受試者投與治療有效量之阿紮胞苷。在某些實施例中，本發明之方法進一步包括向受試者投與阿紮胞苷以治療不適合之FLT3-ITD AML患者群體。在某些實施例中，阿紮胞苷每日以75 mg/m² 之總日劑量投與受試者。在某些實施例中，藉由靜脈內輸注或皮下注射將阿紮胞苷投與受試者。在某些實施例中，每天將阿紮胞苷投與患者持續7天。在一個實施例中，本文描述之本發明之方法用於治療不適合之FLT3-ITD AML患者，並且該方法進一步包括向患者投與治療有效量之阿紮胞苷。在一個實施例中，向患者投與75 mg/m² 阿紮胞苷之每日總量。在某些實施例中，每天將阿紮胞苷投與患者持續7天。

在某些實施例中，對於上述方法，該方法進一步包括向受試者投與幹細胞移植。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，癌症選自由白血病、淋巴瘤及骨髓瘤組成之群。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，癌症選自由急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性淋巴胚細胞白血病(ALL)、B細胞譜系急性淋巴胚細胞白血病(B ALL)、T細胞譜系急性淋巴胚細胞白血病(T-ALL)、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、毛細胞白血病(HCL)、骨髓增生異常症候群(MDS)、基礎漿細胞樣DC腫瘤(BPDCN)白血病、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、套細胞淋巴瘤、嗜伊紅性白血病、B骨髓單核球性白血病及霍奇金白血病(HL)組成之群。在一個實施例中，癌症係化療敏感的。在另一個實施例中，癌症係化療抗性的。在另一個實施例中，癌症係急性髓性白血病(AML)。在另一個實施例中，AML係難治性或復發性急性髓性白血病。在又一個實施例中，AML係新診斷的。在一個實施例中，AML之特徵在於P-醣蛋白之過表現，EVIl之過表現，p53改變，DNwIT3A突變，FLT3內部串聯重複(ITD)，複雜核型，BRCA1、BRCA2或PALB2中之表現降低，或BRCA1、BRCA2或PALB2中之突變。在一個實施例中，用本文描述之方法治療之受試者係合適之AML受試者。在另一個實施例中，用本文描述之方法治療之受試者係不適合之AML受試者。在另一個實施例中，AML之特徵在於FLT3-ITD。在某些實施例中，AML之特徵在於P-醣蛋白之過表現，EVIl之過表現，p53改變，DNwIT3A突變，FLT3內部串聯重複，複雜核型，BRCA1、BRCA2或PALB2中之表現降低，或BRCA1、BRCA2或PALB2中之突變。

在一個實施例中，MDS係高風險MDS。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，已在從受試者獲得之樣品中檢測到純合之rs12459419C基因型。在一個實施例中，本發明之方法進一步包括檢測從受試者獲得之樣品中之純合rs12459419C基因型。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，已在從受試者獲得之樣品中檢測到雜合之rs12459419C基因型。在一個實施例中，本發明之方法進一步包括檢測從受試者獲得之樣品中之雜合rs12459419C基因型。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，已在從受試者獲得之樣品中檢測到純合之rs12459419T基因型。在一個實施例中，本發明之方法進一步包括檢測從受試者獲得之樣品中之純合rs12459419T基因型。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，已在從受試者獲得之樣品中檢測到雜合之rs12459419T基因型。在一個實施例中，本發明之方法進一步包括檢測從受試者獲得之樣品中之雜合rs12459419T基因型。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，從受試者/患者獲得之樣品係血液樣品或口腔拭子。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，藉由流式細胞術測量，來自癌症之至少20%之胚細胞係CD33陽性的。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，投與導致游離-CD33飽和。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，投與導致外周血胚細胞減少。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，投與導致骨髓胚細胞減少。

在某些實施例中，對於本文描述之方法，受試者係人。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，癌症藉由RAS突變來表徵。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，癌症藉由TP53突變來表徵。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，癌症藉由IDH突變來表徵。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，癌症藉由FLT3突變來表徵。

在某些實施例中，對於本文所述之方法，抗CD33抗體或其抗原結合片段包含重鏈可變區，其包含與SEQ ID NO:7或9之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。在一個實施例中，抗CD33抗體或其抗原結合片段包含輕鏈可變區，其包含與SEQ ID NO:8或10之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。在另一個實施例中，抗體或其抗原結合片段包含重鏈可變區及輕鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO:9之序列，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO:10之序列。在另一個實施例中，抗CD33抗體包含具有SEQ ID NO:11所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:12所示胺基酸序列之輕鏈。在另一個實施例中，抗體係huMy9-6。在另一個實施例中，抗體係CDR移植或表面重構之抗體。

ADC1、ADC2、IMGN779(下文定義)及其醫藥學上可接受之鹽係可用於所揭示之治療方法之ADC之具體實例。

(ADC1)

(ADC2) 「Ab」如式(I)所定義。術語「r」係1至10之整數。製備ADC1、ADC2及IMGN779之方法在美國專利第8,765,740號及第9,353,127號中提供，其全部教導以引用之方式併入本文。

醫藥學上可接受之鹽係適用於人及動物，沒有過度之毒性、刺激及過敏反應之鹽。用於式(I)之ADC、ADC1、ADC2及IMGN779之合適之鹽之實例揭示在美國專利第8,765,740號中，其全部教導以引用之方式併入本文。在一個實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2及IMGN779之醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽或鉀鹽。

在某些實施例中，式(I)之ADC由下式表示：

(ADC2’)

本發明之第四個實施例係醫藥組合物，其包含：i)治療有效量之奎紮替尼；ii)治療有效量之式(I)之ADC、ADC1、ADC2或IMGN779或其醫藥學上可接受之鹽；及iii)醫藥學上可接受之載體或稀釋劑。在一個實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2及IMGN779之醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽或鉀鹽。在另一個實施例中，式(I)之ADC係ADC2'。

相關申請案

本申請案根據35 U.S.C. §119(e)主張2018年5月15日申請之美國臨時申請案第62/671,617號之申請日之權益，該案之全部內容以引用之方式併入本文。

本發明之特徵在於藉由投與含有吲哚啉-苯并二氮呯二聚體細胞毒性有效負載之靶向CD33之ADC，尤其式(I)之ADC與奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之組合來治療患有癌症(例如血液癌症，諸如AML)之患者之方法。

本發明至少部分基於以下發現：與單獨之個體藥劑相比，奎紮替尼及IMGN779之組合在活體內對抗AML異種移植物之活性顯著更高。定義

「IMGN779」係靶向CD33之ADC，其包含huMy9-6抗體，也稱為Z4681A抗體(即，包含分別具有SEQ ID NO:1-3序列之重鏈CDR1-3及具有SEQ ID NO:4-6序列之輕鏈CDR1-3之抗體；包含具有SEQ ID NO:9序列之重鏈可變區及具有SEQ ID NO:10序列之輕鏈可變區之抗體；或包含具有SEQ ID NO:11序列之重鏈序列及具有SEQ ID NO:12序列之輕鏈序列之抗體)，該抗體藉由可切割之二硫鍵接頭與DGN462偶聯。IMGN779可以表示為ADC3，如下所示：

(ADC3) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中包含ADC3之組合物中r之平均值在2.4與3.0之間；或IMGN779也可以表示為ADC4，如下所示：

(ADC4) 或其醫藥學上可接受之鹽，其中包含ADC4之組合物中r之平均值在2.4與3.0之間；或IMGN779可以係ADC3與ADC4之組合或其醫藥學上可接受之鹽。

在某些實施例中，IMGN779係ADC3之鈉鹽並且由下式表示，其中包含ADC3之鈉鹽之組合物中r之平均值在2.4與3.0之間：

。

「P-醣蛋白」係指與NCBI登錄號NP_001035830提供之人序列具有至少約85%胺基酸序列同一性並且對於表現它之細胞賦予多藥抗性之多肽或其片段。以下提供示例性人P-醣蛋白之序列：

「CD33蛋白」係指與NCBI登錄號CAD36509提供之人序列具有至少約85%胺基酸序列同一性並且具有抗-CD33抗體結合活性之多肽或其片段。以下提供示例性人CD33胺基酸序列：

「FLT3蛋白」、「FLT3多肽」、「FLT3」、「FLT-3受體」或「FLT-3R」係指與NCBI登錄號NP_004110提供之FLT3酪胺酸激酶受體，也稱為FLK-2及STK-1之人序列具有至少約85%、90%、95%、99%或100%胺基酸序列同一性，並且具有酪胺酸激酶活性，包括受體酪胺酸激酶活性之多肽或其片段。在一個實施例中，FLT3胺基酸序列係下文提供之人FLT3胺基酸序列：

「FLT3-ITD」係指具有內部串聯重複之FLT3多肽，包括但不限於簡單之串聯重複及/或具有插入之串聯重複。在各種實施例中，具有內部串聯重複之FLT3多肽係活化之FLT3變體(例如，組成型自身磷酸化)。在一些實施例中，FLT3-ITD包括串聯重複及/或在任何外顯子或內含子中具有插入之串聯重複，包括例如外顯子11、外顯子11至內含子11及外顯子12、外顯子14、外顯子14至內含子14及外顯子15。內部串聯重複突變(FLT3-ITD)係最常見之FLT3突變，存在於約20-25%之AML病例中。與野生型(WT)FLT3患者預後相比，FLT3-ITD AML患者預後較差，復發率增加，對化療反應持續時間較短。

「類似物」係指不相同但具有類似功能或結構特徵之分子。例如，多肽類似物保留相應之天然存在之多肽之生物活性，同時具有相對於天然存在之多肽增強類似物功能之某些生物化學修飾。此等生物化學修飾可以增加類似物之蛋白酶抗性、膜滲透性或半衰期，而不改變例如配體結合。類似物可包括非天然胺基酸。

在本發明中，「包含(comprises)」、「包含(comprising)」、「含有」及「具有」及其類似術語可以具有美國專利法中賦予它們之含義，並且可以表示「包括(includes)」、「包括(including)」及其類似含義；「基本上由......組成(consisting essentially of)」或「基本上由...組成(consists essentially)」同樣具有美國專利法中賦予之含義，並且該術語係開放式的，允許存在所提及項目以外之項目，只要所提及項目之基本或新穎特徵不因存在所提及項目以外之項目而改變，但不包括先前技術實施例。

「基本上相同」係指與參考胺基酸序列(例如，本文所述之任何一種胺基酸序列)或核酸序列(例如，本文所述之任何一種核酸序列)具有至少50%同一性之多肽或核酸分子。較佳地，此序列在胺基酸水準或核酸上與用於比較之序列至少60%、更佳80%或85%、更佳90%、95%或甚至99%相同。

序列同一性通常使用序列分析軟體(例如，Sequence Analysis Software Package of the Genetics Computer Group, University of Wisconsin Biotechnology Center, 1710 University Avenue, Madison, Wis. 53705、BLAST、BESTFIT、GAP或PILEUP/PRETTYBOX程式)來測量。藉由對於各種取代、缺失及/或其他修飾指派同源性程度，此類軟體匹配相同或相似之序列。保守取代通常包括以下組內之取代：甘胺酸、丙胺酸；纈胺酸、異白胺酸、白胺酸；天冬胺酸、麩胺酸、天冬醯胺、麩胺醯胺；絲胺酸、蘇胺酸；離胺酸、精胺酸；及苯丙胺酸、酪胺酸。在確定同一性程度之示例性方法中，可以使用BLAST程式，其中e^-3 與e^-100 之間之概率評分表示密切相關之序列。

「抗CD33抗體或其抗原結合片段」係指特異性結合CD33之抗體或其抗原結合片段。

「特異性結合」係指識別並結合目標多肽但基本上不識別及結合天然包含本發明多肽之樣品，例如生物樣品中之其他分子之抗體或其片段。

「受試者」係哺乳動物，較佳人，但也可以係需要獸醫治療之動物，例如伴侶動物(例如，狗、貓及類似者)，農場動物(例如，牛、羊、豬、馬及類似者)及實驗動物(例如，大鼠、小鼠、豚鼠及類似者)。

術語「治療有效量」係指有效「治療」受試者或哺乳動物中之疾病或病症之ADC或奎紮替尼或其他藥物之量。在癌症之情況下，治療有效量之藥物可以減少癌細胞之數量；減少腫瘤之大小或負荷；抑制(即，在一定程度上減緩並且在某些實施例中，停止)癌細胞浸潤到外周器官中；抑制(即，在一定程度上減緩並且在某些實施例中，停止)腫瘤轉移；在一定程度上抑制腫瘤生長；在某種程度上緩解一種或多種與癌症相關之症狀；及/或導致有利之反應，如無進展存活(PFS)、無病存活(DFS)或總存活(OS)、完全反應(CR)、部分反應(PR)，或在一些情況中，穩定疾病(SD)、進行性疾病(PD)減少、進展時間(TTP)縮短或其任何組合。參見本文「治療」之定義。就該藥物可預防生長及/或殺死現有癌細胞而言，其可為細胞抑制性及/或細胞毒性的。

諸如「治療(treating)」或「治療(treatment)」或「治療(to treat)」或「減輕(alleviating)」或「減輕(to alleviate)」之術語係指治癒、減緩所診斷之病理狀況或病症，減輕其症狀及/或停止其進展之治療措施。因此，需要治療之彼等包括已經診斷患有或懷疑患有該病症之彼等。在某些實施例中，如果患者顯示以下中之一或多者，則根據本發明之方法成功地「治療」受試者之癌症：癌細胞之數量減少或完全不存在；腫瘤大小減少；抑制或不存在癌細胞浸潤到外周器官中，包括例如癌症擴散到軟組織及骨中；抑制或不存在腫瘤轉移；抑制或不存在腫瘤生長；減輕與特定癌症相關之一種或多種症狀；降低發病率及死亡率；提高生活品質；降低腫瘤之致瘤性、致瘤頻率或致瘤能力；減少腫瘤中癌症幹細胞之數量或頻率；將致瘤細胞分化為非致瘤狀態；無進展存活(PFS)、無病存活(DFS)或總存活(OS)、完全反應(CR)、部分反應(PR)、穩定疾病(SD)、進行性疾病(PD)減少、進展時間(TTP)縮短或其任何組合。

PFS、DFS及OS可以根據國家癌症研究所及美國食品及藥物管理局為了批準新藥所制定之標準來測量。參見Johnson等人，(2003) J. Clin. Oncol. 21(7):1404-1411

「無進展存活」(PFS)係指從登記到疾病進展或死亡之時間。通常使用Kaplan-Meier方法及實體瘤反應評估標準(RECIST)1.1標準來測量PFS。通常，無進展存活係指患者保持存活而癌症不會惡化之情況。

「腫瘤進展時間」(TTP)定義為從登記到疾病進展之時間。通常使用RECIST 1.1標準測量TTP。

「完全反應」或「完全緩解」或「CR」表示回應於治療之所有腫瘤或癌症跡象之消失。這不總是意指癌症已治癒。

「具有不完全血液學恢復之完全緩解」或「CRi」係指患者反應，其特徵在於骨髓中之胚細胞＜5%但具有不在正常範圍內之血球計數(例如，嗜中性球及血小板)。

「部分反應」或「PR」係指體內一或多個腫瘤或病變之大小或體積、或癌症之程度回應於治療而減小。

「穩定疾病」係指沒有進展或復發之疾病。在穩定之疾病中，既沒有足夠之腫瘤縮小以適合作為部分反應，也沒有足夠之腫瘤增加以定性為進行性疾病。

「進行性疾病」係指一或多個新病變或腫瘤之出現及/或現有非靶病變之明確進展。進行性疾病也可以指自治療開始以來腫瘤生長超過20%，此歸因於腫塊之增加或腫瘤之擴散。

「無病存活」(DFS)係指治療期間及之後患者保持無疾病之時間長度。

「總體存活」(OS)係指從患者登記到死亡或在最後一次活著之日期被審查之時間。與未經治療或未經治療之個體或患者相比，OS包括延長壽命。總存活係指患者自診斷或治療之時間維持活著，持續限定之一段時間，諸如1年、5年等。在一群患者中，總存活以平均總存活(mOS)來衡量。

「難治性」癌症為即使向癌症患者投與抗腫瘤劑(諸如化療)亦進展之癌症。

「復發」患者為在緩解之後具有癌症之徵象或症狀的患者。視情況，患者在輔助或新輔助療法之後復發。

術語「治療法」或「療法」係指治療方案，其可包括但不限於手術、放射療法、化學療法、分化療法、生物療法、免疫療法或投與一種或多種抗癌劑(例如，細胞毒劑、抗增殖化合物及/或血管生成抑制劑)。

術語「一線治療」、「一線療法」及「前線療法」係指針對特定病症(例如，給定類型及階段之癌症)之較佳及標準初始治療。此等治療方法不同於「二線」療法，當一線療法不能充分發揮作用時，會嘗試此等療法。當一線療法及二線療法不能充分發揮作用時，嘗試「三線」療法。

術語「維持療法」係指用於幫助防止癌症在初始治療後消失後恢復之療法。

如本文所用，術語「投與(administer)」、「投與(administering)」、「投與(administration)」及其類似術語係指可用於使ADC或奎紮替尼遞送至所需生物作用位點之方法。此等方法包括但不限於關節內(在關節中)、靜脈內、肌肉內、瘤內、皮內、腹膜內、皮下、口服、局部、鞘內、吸入、透皮、直腸及其類似方法。可與本文所述之藥劑及方法一起使用之投與技術見於例如Goodman及Gilman，The Pharmacological Basis of Therapeutics ，當前版本；Pergamon；及Remington's，Pharmaceutical Sciences (當前版本)，Mack Publishing Co.，Easton，Pa。在一個態樣，AD係靜脈內投與。

「適合AML」係指患有適宜於強化治療之AML之受試者。用於確定患有適合AML之受試者之度量包括例如運動機能(例如，藉由東部合作腫瘤學組機能狀態(ECOG PS)、Karnofsky機能狀態(KPS)及簡易運動機能量表(SPPB)確定)，合併症(藉由Charlson合併症指數(CCI)或造血細胞移植特異性合併症指數(HCT-CI)確定)，認知功能或預後模型(包括但不限於細胞遺傳學組、年齡、白血球計數、LDH、AML類型)。在某些情況下，合適之AML受試者係60歲或60歲以下之受試者。

「不適合之AML」係指患有不適宜於強化治療之AML之受試者。用於確定患有不適合AML之受試者之度量包括例如運動機能(例如，藉由東部合作腫瘤學組機能狀態(ECOG PS)、Karnofsky機能狀態(KPS)及簡易運動機能量表(SPPB)確定)，合併症(藉由Charlson合併症指數(CCI)或造血細胞移植特異性合併症指數(HCT-CI)確定)，認知功能或預後模型(包括但不限於細胞遺傳學組、年齡、白血球計數、LDH、AML類型)。在某些情況下，不適合之AML受試者係60歲以上之受試者。

除非特別說明或從上下文中顯而易見，否則如本文所用，術語「或」應理解為包括性的。除非特別說明或從上下文中顯而易見，否則如本文所用，術語「一」、「一個」及「該」應理解為單數或複數。

除非特別說明或從上下文中顯而易見，否則如本文所用，術語「約」應理解為在此項技術之正常容差範圍內，例如在平均值之2個標準偏差內。約可以理解為在所述值之10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、0.5%、0.1%、0.05%或0.01%內。除非從上下文另外顯而易見，否則本文提供之所有數值均由術語「約」修飾。

本文中對變數之任何定義中之化學基團列表之敘述包括該變數作為任何單個基團或所列基團之組合之定義。本文對變數或態樣之實施例之敘述包括作為任何單個實施例或與任何其他實施例或其部分組合之實施例。

本文提供之任何組合物或方法可以與本文提供之任何其他組合物及方法中之一或多者組合。抗 CD33 抗體

在一個實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2或ADC2'中之抗體係抗CD33抗體，尤其huMy9-6抗體。

「My9-6」、「鼠My9-6」及「muMy9-6」係產生huMy9-6之鼠抗CD33抗體。My9-6藉由輕鏈及重鏈可變區之種系胺基酸序列、輕鏈及重鏈可變區之胺基酸序列、CDR之鑑定、表面胺基酸之鑑定及其以重組形式來表現之手段來完全表徵。參見，例如，美國專利第7,557,189號；第7,342,110號；第8,119,787號；第8,337,855號及美國專利公開案第20120244171號，其中之每一者以引用之方式整體併入本文。muMy9-6之胺基酸序列也顯示在下表1中。My9-6抗體也已在功能上表徵並顯示以高親和力結合CD33陽性細胞表面上之CD33。

術語「可變區」在本文中用於描述抗體重鏈及輕鏈之某些部分，其在抗體之間之序列不同並且在每種特定抗體對其抗原之結合及特異性方面相互配合。可變性通常不均勻地分佈在整個抗體可變區中。它通常集中在稱為互補決定區(CDR)或高變區之可變區之三個區段內，皆在輕鏈及重鏈可變區中。可變域之更高度保守部分稱作構架區。重鏈及輕鏈之可變區包含四個框架區，該等框架區主要採用β-折疊構型，每個框架區藉由三個CDR連接，該等CDR形成連接β-折疊結構之環，並且在一些情況下形成β-折疊結構之一部分。各鏈中之CDR由構架區且與來自另一鏈之CDR保持緊密鄰近，促進形成抗體之抗原結合位點(E. A. Kabat等人 Sequences of Proteins of Immunological Interest，第五版，1991，NIH)。「恆定」區未直接牽涉於抗體與抗原之結合中，但展現多種效應子功能，諸如使抗體參與抗體依賴性細胞毒性。表1

還描述了人源化形式之My9-6，在此不同地稱為「huMy9-6」及「人源化My9-6」。

人源化之目標係降低異種抗體(例如鼠抗體)之免疫原性，以便引入人體，同時保持抗體之完整抗原結合親和力及特異性。可以使用幾種技術，例如表面重構及CDR移植來產生人源化抗體。如本文所用，表面重構技術使用分子建模、統計分析及誘變之組合來改變抗體可變區之非CDR表面以類似於靶宿主之已知抗體之表面。

用於對抗體進行表面重構之策略及方法以及用於降低不同宿主內之抗體之免疫原性之其他方法揭示於美國專利第5,639,641號(Pedersen等人)中，其全部內容以引用之方式併入本文。簡而言之，在較佳之方法中，(1)產生抗體重鏈及輕鏈可變區庫之位置比對，以給出一組重鏈及輕鏈可變區框架表面暴露位置，其中所有可變區之比對位置至少約98%相同；(2)對齧齒動物抗體(或其片段)定義一組重鏈及輕鏈可變區框架表面暴露之胺基酸殘基；(3)鑑定一組重鏈及輕鏈可變區框架表面暴露之胺基酸殘基，其與齧齒動物表面暴露之胺基酸殘基之集合最密切相同；(4)步驟(2)中定義之重鏈及輕鏈可變區框架表面暴露之胺基酸殘基之集合被步驟(3)中鑑定之一組重鏈及輕鏈可變區框架表面暴露之胺基酸殘基取代，除了在齧齒動物抗體之互補決定區之任何殘基之任何原子之5埃範圍內之彼等胺基酸殘基以外；及(5)產生具有結合特異性之人源化齧齒動物抗體。

可以使用多種其他技術將抗體人源化，包括CDR-移植(EP 0 239 400；WO 91/09967；美國專利第5,530,101號；及第5,585,089號)，飾面或表面重構(EP 0 592 106；EP 0 519 596；Padlan E. A., 1991, Molecular Immunology 28(4/5):489-498; Studnicka G. M. 等人, 1994, Protein Engineering 7(6):805-814; Roguska M. A. 等人, 1994, PNAS 91:969-973)及鏈改組(美國專利第5,565,332號)。人抗體可藉由此項技術中已知之多種方法製備，包括噬菌體展示方法。亦參見美國專利第4,444,887號、第4,716,111號、第5,545,806號及第5,814,318號；以及國際專利申請公開案第WO 98/46645號、第WO 98/50433號、第WO 98/24893號、第WO 98/16654號、第WO 96/34096號、第WO 96/33735號及第WO 91/10741號(該等參考文獻全部以引用方式併入本文)。

如本文進一步描述的，藉由建模來鑑定My9-6之CDR並預測其分子結構。然後製備人源化之My9-6抗體，並如例如在美國專利第7,342,110號及第7,557,189號中所述進行了充分表徵，此等專利以引用之方式併入本文。許多huMy9-6抗體之輕鏈及重鏈之胺基酸序列描述於例如美國專利第8,337,855號及美國專利公開案第8,765,740號中，其各自以引用之方式併入本文。表2中所示之胺基酸序列描述了本發明之huMy9-6抗體。表2

儘管本文將鼠My9-6抗體及人源化My9-6抗體之表位結合片段與鼠My9-6抗體及其人源化形式分開論述，但應理解術語本發明之「抗體(antibody)」或「抗體(antibodies)」可包括全長muMy9-6及huMy9-6抗體以及此等抗體之表位結合片段。

在進一步之實施例中，提供了抗體或其表位結合片段，其包含至少一個互補決定區，該互補決定區具有選自由SEQ ID NO:1-6組成之群之胺基酸序列，並且具有結合CD33之能力。

在進一步之實施例中，提供了包含至少一個重鏈可變區及至少一個輕鏈可變區之抗體或其表位結合片段，其中該重鏈可變區包含三個具有分別由SEQ ID NO:1-3表示之胺基酸序列之互補決定區，並且其中該輕鏈可變區包含三個具有分別由SEQ ID NO:4-6表示之胺基酸序列之互補決定區。

在進一步之實施例中，提供了具有重鏈可變區之抗體，該重鏈可變區具有與SEQ ID NO:7所代表之胺基酸序列共有至少90%序列同一性之胺基酸序列，更佳與SEQ ID NO:7之95%序列同一性，最佳與SEQ ID NO:7之100%序列同一性。

類似地，提供了具有輕鏈可變區之抗體，該輕鏈可變區具有與SEQ ID NO:8代表之胺基酸序列共有至少90%序列同一性之胺基酸序列，更佳與SEQ ID NO:8之95%序列同一性，最佳與SEQ ID NO:8之100%序列同一性。

在進一步之實施例中，提供了具有人源化(例如，表面重構、CDR移植)重鏈可變區之抗體，其與SEQ ID NO:9所代表之胺基酸序列共有至少90%序列同一性，更佳與SEQ ID NO:9之95%序列同一性，最佳與SEQ ID NO:9之100%序列同一性。

類似地，提供具有人源化(例如，表面重構、CDR移植)輕鏈可變區之抗體，其與對應於SEQ ID NO:10之胺基酸序列共有至少90%序列同一性，更佳與SEQ ID NO:10之95%序列同一性，最佳與SEQ ID NO:10之100%序列同一性。在特定實施例中，抗體包括CDR外部框架區中之保守突變。

如本文所用，「抗體片段」包括保留結合CD33之能力之抗體之任何部分，通常稱為「表位結合片段」。抗體片段之實例較佳包括但不限於Fab、Fab'及F(ab')₂ 、Fd、單鏈Fv(scFv)、單鏈抗體、二硫鍵連接之Fv(sdFv)及包含V_L 或V_H 域之片段。表位結合片段，包括單鏈抗體，可以包含單獨或者與以下全部或部分組合之可變區：鉸鏈區、C_H1 、C_H2 及C_H3 結構域。此類片段可含有一個或兩個Fab片段或F(ab')₂ 片段。較佳地，抗體片段含有完整抗體之所有六個CDR，但是含有少於所有此等區域，例如三個、四個或五個CDR之片段也係有功能的。此外，功能等效物可以係或可以組合以下免疫球蛋白類別中之任何一者之成員：IgG、IgM、IgA、IgD或IgE及其亞類。Fab及F(ab')₂ 片段可以藉由蛋白水解切割產生，使用酶諸如木瓜蛋白酶(Fab片段)或胃蛋白酶(F(ab')₂ 片段)。單鏈FV(scFv)片段係表位結合片段，其含有與抗體輕鏈可變區(V_L )之至少一個片段連接之抗體重鏈可變區(V_H )之至少一個片段。接頭可以係短的柔性肽，其被選擇以確保一旦它們連接就發生(V_L )及(V_H )區域之適當三維折疊，從而維持產生單鏈抗體片段之整個抗體之靶分子結合特異性。(V_L )或(V_H )序列之羧基末端可以藉由接頭共價連接到互補(V_L )及(V_H )序列之胺基酸末端。單鏈抗體片段可以藉由分子選殖、抗體噬菌體展示文庫或熟習此項技術者熟知之類似技術產生。此等蛋白質可以在例如真核細胞或原核細胞(包括細菌)中產生。

還可以使用此項技術中已知之各種噬菌體展示方法產生本發明之表位結合片段。在噬菌體展示方法中，功能性抗體結構域在攜帶編碼它們之多核苷酸序列之噬菌體顆粒之表面上展示。特別地，此噬菌體可用於展示從庫或組合抗體文庫(例如人或鼠)表現之表位結合結構域。表現結合至特定抗原之表位結合域之噬菌體可使用抗原來選擇或識別，例如，使用經標記CD33或結合或捕獲至固體表面或珠粒上之CD33。在此等方法中使用之噬菌體通常係絲狀噬菌體，包括從噬菌體表現之Fd及M13結合結構域，其中Fab、Fv或二硫鍵穩定之Fv抗體結構域與噬菌體基因III或基因VIII蛋白重組融合。

可用於製備本發明之表位結合片段之噬菌體展示方法之實例包括在以下文獻中揭示之方法：Brinkman等人, 1995, J. Immunol. Methods 182:41-50；Ames等人, 1995, J. Immunol. Methods 184:177-186；Kettleborough等人, 1994, Eur. J. Immunol. 24:952-958；Persic等人, 1997, Gene 187:9-18；Burton等人, 1994, Advances in Immunology 57:191-280；PCT公開案第PCT/GB91/01134號；PCT公開案WO 90/02809；WO 91/10737；WO 92/01047；WO 92/18619；WO 93/11236；WO 95/15982；WO 95/20401；及美國專利第5,698,426號；第5,223,409號；第5,403,484號；第5,580,717號；第5,427,908號；第5,750,753號；第5,821,047號；第5,571,698號；第5,427,908號；第5,516,637號；第5,780,225號；第5,658,727號；第5,733,743號及第5,969,108號；其全部內容以引用之方式併入本文。

噬菌體選擇後，可以分離編碼片段之噬菌體區域，並藉由使用例如如下面詳細描述之重組DNA技術在選定之宿主(包括哺乳動物細胞、昆蟲細胞、植物細胞、酵母及細菌)中表現來產生表位結合片段。例如，重組產生Fab、Fab'及F(ab')₂ 片段之技術也可以使用此項技術中已知之方法，例如PCT公開案WO 92/22324；Mullinax等人, 1992, BioTechniques 12(6):864-869; Sawai等人, 1995, AJRI34:26-34; 及Better等人, 1988, Science 240:1041-1043中揭示之方法；該等參考文獻以引用之方式整體併入。可用於產生單鏈Fv及抗體之技術之實例包括美國專利第4,946,778號及第5,258,498號；Huston等人, 1991, Methods in Enzymology 203:46-88; Shu等人, 1993, PNAS 90:7995-7999; Skerra等人, 1988, Science 240:1038-1040中所述之彼等。

My9-6抗體及人源化My9-6抗體之功能等效物也包括在本發明範圍內。術語「功能等效物」包括例如具有同源序列之抗體、嵌合抗體、修飾之抗體及人工抗體，其中每個功能等效物由其結合CD33之能力限定。技藝人士將理解，稱為「抗體片段」之分子組與稱為「功能等效物」之組中存在重疊。

具有同源序列之抗體係具有與本發明之鼠My9-6及人源化My9-6抗體之胺基酸序列具有序列同一性或同源性之胺基酸序列之抗體。較佳地，同一性係相對於本發明之鼠My9-6及人源化My9-6抗體之可變區之胺基酸序列。應用於本文胺基酸序列之「序列同一性」及「序列同源性」定義為與另一個胺基酸序列具有至少約90%、91%、92%、93%或94%序列同一性，更佳至少約95%、96%、97%、98%或99%序列同一性之序列，例如根據Pearson及Lipman，Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85, 2444-2448 (1988)藉由FASTA搜索方法來測定。

如本文所用，嵌合抗體係其中抗體之不同部分衍生自不同動物物種之抗體。例如，具有與人免疫球蛋白恆定區配對之衍生自鼠單株抗體之可變區之抗體。產生嵌合抗體之方法係此項技術中已知的。參見，例如，Morrison, 1985, Science 229:1202；Oi等人, 1986, BioTechniques 4:214；Gillies等人, 1989, J. Immunol. Methods 125:191-202；美國專利第5,807,715號；第4,816,567號；及第4,816,397號，該等文獻以引用之方式整體併入本文。

CDR對於表位識別及抗體結合係最重要的。然而，可以對構成CDR之殘基進行改變而不干擾抗體識別及結合其同源表位之能力。例如，可以進行不影響表位識別但增加抗體對表位之結合親和力之變化。

因此，鼠及人源化抗體之改進形式也包括在本發明範圍內，該等抗體也特異性地識別及結合CD33，較佳具有增加之親和力。

基於原發性抗體序列及其諸如結合及表現水準之性質之知識，一些研究調查了在抗體序列之不同位置引入一個或多個胺基酸變化之影響(Yang, W. P. 等人, 1995, J. Mol. Biol., 254, 392-403; Rader, C. 等人, 1998, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 95, 8910-8915; Vaughan, T. J. 等人, 1998, Nature Biotechnology, 16, 535-539)。

在此等研究中，藉由使用諸如寡核苷酸介導之定點誘變、盒式誘變、易錯PCR、DNA改組或大腸桿菌之增變菌株之方法改變CDR1、CDR2、CDR3或框架區中重鏈及輕鏈基因之序列，產生了原發性抗體之等效物(Vaughan, T. J. 等人, 1998, Nature Biotechnology, 16, 535-539; Adey, N. B. 等人, 1996, 第16章, 第277-291頁, "Phage Display of Peptides and Proteins", Kay, B. K. 等人編, Academic Press)。此等改變原發性抗體序列之方法導致二級抗體之親和力提高(Gram, H. 等人, 1992, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 3576-3580; Boder, E. T. 等人, 2000, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97, 10701-10705; Davies, J. 及Riechmann, L., 1996, Immunotechnology, 2, 169-179; Thompson, J. 等人, 1996, J. Mol. Biol., 256, 77-88; Short, M. K. 等人, 2002, J. Biol. Chem., 277, 16365-16370; Furukawa, K. 等人, 2001, J. Biol. Chem., 276, 27622-27628)。

藉由改變抗體之一個或多個胺基酸殘基之類似定向策略，本文所述之抗體序列(例如，表1及2中)可用於開發具有改良功能之抗CD33抗體，包括改良之對CD33之親和力。改進之抗體還包括具有改進特徵之彼等抗體，其藉由動物免疫、雜交瘤形成及選擇具有特定特徵之抗體之標準技術來製備。靶向 CD33 之抗體 - 藥物偶聯物

在某些實施例中，本發明提供治療受試者中之癌症(例如血液癌症)之方法，其包括向受試者投與治療有效量之奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及治療有效量之式(I)之ADC：

(I)，或其醫藥學上可接受之鹽。N與C之間之該雙線

表示單鍵或雙鍵，其限制條件為，當其為雙鍵時，X不存在且Y為氫；且當其為單鍵時，X為氫且Y為-SO₃ H。術語「Ab」係抗CD33抗體或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO:1之重鏈可變區(V_H )互補決定區(CDR)1序列、SEQ ID NO:2之V_H CDR2序列、SEQ ID NO:3之V_H CDR3序列、SEQ ID NO:4之輕鏈可變區(V_L )CDR1序列、SEQ ID NO:5之V_L CDR2序列及SEQ ID NO:6之V_L CDR3序列。術語「r」係1至10之整數。

ADC1、ADC2、ADC2'、IMGN779及其醫藥學上可接受之鹽係可用於所揭示之治療方法之ADC之具體實例。

(ADC1)

(ADC2)，

(ADC2’)。「Ab」如式(I)所定義。術語「r」係1至10之整數。製備ADC1、ADC2、ADC2'及IMGN779之方法在美國專利第8,765,740號及第9,353,127號中提供，其全部教導以引用之方式併入本文。

在一些實施例中，對於式(I)之ADC、ADC1、ADC2或ADC2'或其醫藥學上可接受之鹽，抗CD33抗體或其抗原結合片段包含重鏈可變區，其包含與SEQ ID NO:7或9之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。在另一個實施例中，抗CD33抗體或其抗原結合片段包含輕鏈可變區，其包含與SEQ ID NO:8或10之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。

在其他實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2或ADC2'之抗體部分係抗CD33抗體，其包含與SEQ ID NO:9具有至少約90%、91%、92%、93%或94%序列同一性，更佳至少約95%、96%、97%、98%或99%序列同一性之重鏈可變區，及與SEQ ID NO:10具有至少約90%、91%、92%、93%或94%序列同一性，更佳至少約95%、96%、97%、98%或99%序列同一性之輕鏈可變區。

在一些實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2或ADC2'之抗體部分包含重鏈可變區及輕鏈可變區，該重鏈可變區包含SEQ ID NO:9之序列，該輕鏈可變區包含SEQ ID NO:10之序列。在一些實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2或ADC2'之抗體部分係抗CD33抗體，其包含具有SEQ ID NO:11所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:12所示胺基酸序列之輕鏈。

在一些實施例中，式(I)之ADC、ADC1、ADC2或ADC2'之抗體部分係huMy9-6抗體，也稱為「Z4681A」。在一個實施例中，抗體係CDR移植或表面重構之抗體。

在具體之實施例中，靶向CD33之ADC係IMGN779。IMGN779包含藉由可切割之二硫鍵接頭與DGN462偶聯之huMy9-6抗體，也稱為Z4681A抗體。IMGN779可以如下所示表示為ADC3：

(ADC3) 或其醫藥學上可接受之鹽(例如鈉鹽)；或者IMGN779也可以在下面表示為ADC4：

(ADC4) 或其醫藥學上可接受之鹽；或IMGN779也可以係ADC3與ADC4之組合。

在某些實施例中，本文所述之偶聯物可包含1-10種細胞毒性苯并二氮呯二聚體化合物、2-9種細胞毒性苯并二氮呯二聚體化合物、3-8種細胞毒性苯并二氮呯二聚體化合物、4-7種細胞毒性苯并二氮呯二聚體化合物或5-6種細胞毒性苯并二氮呯二聚體化合物。

在某些實施例中，包含本文所述偶聯物之組合物可包含每抗體分子平均1-10個細胞毒性苯并二氮呯二聚體分子。每個抗體分子之細胞毒性苯并二氮呯二聚體分子之平均比率在本文中稱為藥物抗體比率(DAR)。在一個實施例中，DAR在2-8、3-7、3-5、2.5-3.5或2.4-3.0之間。在一個實施例中，DAR係2.4、2.5、2.6、2.7、2.8、2.9、3.0、3.1、3.2、3.3、3.4或3.5。在另一個實施例中，DAR係2.8。

本文所述之細胞毒性苯并二氮呯二聚體化合物及偶聯物可根據美國專利第8,765,740號及第9,353,127號中描述之方法製備，例如但不限於美國專利第8,765,740號之段落[0395]-[0397]及[0598]-[0607]，圖1、15、22、23、38-41、43、48、55及60，以及實例1、6、12、13、20、21、22、23、26-30及32及美國專利第9,353,127號之段落[0007]-[0105]、[0197]-[0291]，圖1-11、16、28及實例1-7、9-13、15及16。

術語「陽離子」係指帶正電之離子。陽離子可為單價(例如，Na⁺ 、K⁺ 等)、二價(例如，Ca²⁺ 、Mg²⁺ 等)、或多價(例如，Al³⁺ 等)。較佳的是，陽離子為單價。

短語「醫藥學上可接受之」表示物質或組合物必須與構成調配物之其他成分及/或用其治療之哺乳動物在化學上及/或毒理學上相容。

如本文所使用之片語「醫藥學上可接受之鹽」係指本發明化合物之醫藥學上可接受之有機或無機鹽。示範性鹽包括但不限於硫酸鹽、檸檬酸鹽、乙酸鹽、草酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、硝酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異菸鹼酸鹽、乳酸鹽、柳酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、油酸鹽、丹寧酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、順丁烯二酸鹽、龍膽酸鹽(gentisinate)、反丁烯二酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、蔗糖酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、麩胺酸鹽、甲烷磺酸鹽「甲磺酸鹽」、乙烷磺酸鹽、苯磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、帕莫酸鹽(pamoate) (亦即，1,1'-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘酸鹽))、鹼金屬(例如，鈉及鉀)鹽、鹼土金屬(例如，鎂)鹽、及銨鹽。醫藥學上可接受之鹽可涉及包括另一分子，諸如乙酸根離子、琥珀酸根離子或其他相對離子。該相對離子可為使母體化合物上之電荷穩定的任何有機或無機部分。此外，醫藥學上可接受之鹽之結構中可具有一個以上帶電原子。多個帶電原子為醫藥學上可接受之鹽之一部分的情形可具有多個相對離子。因此，醫藥學上可接受之鹽可具有一或多個帶電原子及/或一或多個相對離子。在特定實施例中，醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽或鉀鹽。

若本發明之化合物為鹼，則所要醫藥學上可接受之鹽可藉由此項技術中可用之任何合適方法製備，例如用諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、甲烷磺酸、磷酸及其類似酸之無機酸或用諸如乙酸、順丁烯二酸、琥珀酸、扁桃酸、反丁烯二酸、丙二酸、丙酮酸、草酸、乙醇酸、水楊酸、哌喃糖苷酸(pyranosidyl acid)(諸如葡糖醛酸或半乳糖醛酸)、α羥基酸(諸如檸檬酸或酒石酸)、胺基酸(諸如天冬胺酸或麩胺酸)、芳族酸(諸如苯甲酸或肉桂酸)、磺酸(諸如對甲苯磺酸或乙烷磺酸)、或其類似酸之有機酸處理遊離鹼。

若本發明之化合物為酸，則所要醫藥學上可接受之鹽可藉由任何合適之方法製備，例如用諸如胺(一級、二級或三級胺)、鹼金屬氫氧化物或鹼土金屬氫氧化物或其類似鹼之無機或有機鹼處理遊離酸。合適之鹽之說明性實例包括但不限於衍生自胺基酸(諸如甘胺酸及精胺酸)、氨、第一胺、第二胺、及第三胺、及環狀胺(諸如哌啶、嗎啉、及哌嗪)之有機鹽，以及衍生自鈉、鈣、鉀、鎂、錳、鐵、銅、鋅、鋁、及鋰之無機鹽。 奎紮替尼

奎紮替尼，也稱為AC220，係治療急性髓性白血病(AML)之臨床開發中之化學治療劑。它可以口服給藥。或者，它可以藉由靜脈內輸注或其他合適之投與途徑投與。

在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)可用作新診斷之FLT3-ITD陽性AML之維持治療。

在某些實施例中，奎紮替尼之醫藥學上可接受之鹽用於本文所述之本發明之方法中。在某些實施例中，奎紮替尼二鹽酸鹽用於本文所述之本發明之方法中。

在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)可以12-200 mg、12-100 mg、15-90 mg或15-60 mg之總日劑量投與受試者。在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，奎紮替尼二鹽酸鹽可以以12-200 mg、12-100 mg、20-90 mg、20-60 mg、30-60 mg、20 mg、30 mg、40 mg、50 mg、60 mg或90 mg之總日劑量投與受試者。在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，可以以30 mg、40 mg或60 mg之總日劑量將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者。

在一個實施例中，向受試者投與總日劑量為30-60 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，26.5-53.1 mg之奎紮替尼游離鹼)。在一個實施例中，向受試者投與總日劑量為60 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，53.1 mg奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，向受試者投與總日劑量為40 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，35.4 mg奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，向患者投與總日劑量為30 mg之奎紮替尼二鹽酸鹽或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽(例如，26.5 mg奎紮替尼游離鹼)。在另一個實施例中，每日給受試者投與奎紮替尼或其二鹽酸鹽。

如本文所用，在奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之情形中之「總日劑量」係指可以在一天內投與受試者之奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之總量。

在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)可以每天(例如，每天一次)投與受試者持續21天週期(即治療方案)中之7天、28天週期中之7天、28天週期中之14天、14天週期中之14天、28天週期中之28天。在某些實施例中，可以將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者持續2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12個週期，其中具有視情況之休息期。在某些實施例中，休息期可以係1、2、3、4、5、6、7天、一週、2週、3週或1個月。在某些實施例中，休息期係14天。在某些實施例中，休息期係28天

在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，可以每天(例如每天一次)向受試者投與奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)持續約1週、約2週、約3週、約4週、約6週、約9週、約12週、約15週、約18週、約26週、5天至1個月、14天至32天、7天、14天或28天，

在某些實施例中，對於本文所述之本發明之方法，可以每天(例如，每次一天)向受試者投與30 mg、40 mg或60 mg之奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)持續28天週期(即治療方案)中之7天、28天週期中之14天，或28天週期中之28天。 其他化學治療劑或療法

在某些實施例中，上述本發明之方法進一步包括向受試者投與治療有效量之一種或多種另外之化學治療劑或療法。

在某些實施例中，一種或多種另外之化學治療劑或療法係阿糖胞苷、伊達比星、柔紅黴素、自體幹細胞移植、同種異體幹細胞移植或其組合。

在某些實施例中，上述本發明之方法進一步包括向受試者投與治療有效量之阿糖胞苷、伊達比星、柔紅黴素或其組合。

在某些實施例中，上述本發明之方法進一步包括以20-3000 mg/m² 、20-50 mg/m² 、50-200 mg/m² 、200-500 mg/m² 、500-1000 mg/m² ，或1000-3000 mg/m² 之總日劑量向受試者投與阿糖胞苷。

在某些實施例中，阿糖胞苷可以每天或每隔一天投與受試者。在某些實施例中，阿糖胞苷可以投與5天、6天、一週、8天、9天、10天、2週、3週、4週、2個月、3個月等。

在某些實施例中，阿糖胞苷可以每天110 mg/m² 之總日劑量投與受試者持續7天(例如，在治療方案之第1-7天)。

在某些實施例中，可以每隔一天(例如，在治療方案之第1、3及5天)向受試者投與高劑量(例如，3,000 mg/m² 總日劑量)之阿糖胞苷。

在某些實施例中，可以每天向受試者投與低劑量(例如，20 mg/m² 或30 mg/m² 總日劑量)之阿糖胞苷持續10天，例如，在治療方案之第1-10天。在一個實施例中，低劑量係20 mg/m² 總日劑量。在另一個實施例中，低劑量係30 mg/m² 總日劑量。

在某些實施例中，中間劑量(例如，100-200 mg/m² 總日劑量、100 mg/m² 總日劑量或200 mg/m² 總日劑量)之阿糖胞苷可以每天投與受試者持續7天，例如，在治療方案之第1-7天。

在某些實施例中，上述本發明之方法進一步包括向受試者投與12 mg/m² /天之伊達比星。在某些實施例中，上述本發明之方法進一步包括向受試者投與45-60 mg/m² /天或60-90 mg/m² /天之柔紅黴素。在某些實施例中，伊達比星或柔紅黴素可以每天投與受試者持續3天(例如，在治療方案之第1-3天)。

在某些實施例中，本發明之靶向CD33之ADC及奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之組合可以與標準誘導療法及/或鞏固療法組合用於治療AML。

在某些實施例中，AML誘導療法包括向受試者投與(a)100-200 mg/m² 之阿糖胞苷7天，及(b)12 mg/m² /天之伊達比星3天或60-90 mg/m² /天之柔紅黴素3天。在一個實施例中，在第1天至第7天投與阿糖胞苷，並在第1天至第3天投與伊達比星或柔紅黴素(也稱為7 + 3治療方案)。

在一個實施例中，本文描述之本發明之方法用於治療適合之FLT3-ITD AML患者，並且該方法進一步包括向患者投與100-200 mg/m² /天之阿糖胞苷7天及12 mg/m² /天之伊達比星或60-90 mg/m² /天之柔紅黴素3天。在一個實施例中，在第1天至第7天投與阿糖胞苷，並在第1天至第3天投與伊達比星或柔紅黴素(7 + 3給藥方案)。在另一個實施例中，本文描述之本發明之方法用於治療適合之FLT3-ITD患者，並且該方法進一步包括每隔一天向患者投與3000 mg/m² /天之阿糖胞苷(高劑量方案)。在一個實施例中，在第1、3及5天向受試者投與阿糖胞苷。

在某些實施例中，本發明之方法包括在第1天至第3天向受試者投與(a)100或200 mg/m² 之阿糖胞苷，(b)在第1天至第3天投與12 mg/m² /天之伊達比星或在第1天至第3天，投與60-90 mg/m² /天(例如，60 mg/m² /天)之柔紅黴素，(c)在第8天至第21天，投與奎紮替尼或奎紮替尼二鹽酸鹽，總日劑量為40 mg(或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽，例如35.4 mg奎紮替尼游離鹼)；(d)治療有效量之IMGN779。

在某些實施例中，AML鞏固療法包括每隔一天向受試者投與3000 mg/m² 之阿糖胞苷，例如在第1、3或5天。

在某些實施例中，本發明之方法包括在第1、3或5天投與受試者(a)3000 mg/m² 阿糖胞苷，(b)在第6天至第19天，投與奎紮替尼或奎紮替尼二鹽酸鹽，總日劑量為40 mg(或等效劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽，例如35.4 mg 奎紮替尼游離鹼)。

在一個實施例中，受試者已接受同種異體幹細胞移植。

在某些實施例中，本發明之靶向CD33之ADC及奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之組合可用作治療AML之維持療法。在某些實施例中，本發明之靶向CD33之ADC及奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之組合可用作治療新診斷之FLT3-ITD陽性AML之維持療法。在一個實施例中，將總日劑量為30-60 mg之奎紮替尼或奎紮替尼二鹽酸鹽投與受試者持續28天。

在某些實施例中，本發明之方法進一步包括向受試者投與治療有效量之阿紮胞苷。在某些實施例中，本發明之方法進一步包括向受試者投與阿紮胞苷以治療不適合之FLT3-ITD AML患者群體。在某些實施例中，阿紮胞苷每日以75 mg/m² 之總日劑量投與受試者。在某些實施例中，藉由靜脈內輸注或皮下注射將阿紮胞苷投與受試者。在某些實施例中，每天將阿紮胞苷投與患者7天。在一個實施例中，本文描述之本發明之方法用於治療不適合之FLT3-ITD AML患者，並且該方法進一步包括向患者投與治療有效量之阿紮胞苷。在一個實施例中，向患者投與每日總共75 mg/m² 阿紮胞苷。在某些實施例中，每天將阿紮胞苷投與患者7天。 治療應用

本發明提供了藉由投與靶向CD33之ADC及奎紮替尼之組合來治療患有癌症，尤其血液癌症(例如AML)之患者之方法。如本文所用，「血液學癌症」係在血液形成組織(例如骨髓)或免疫系統細胞中開始之癌症。血液學癌症之實例係白血病、淋巴瘤及多發性骨髓瘤。

可以使用所揭示之方法治療之癌症包括白血病、淋巴瘤及骨髓瘤。癌症可能對化療敏感；或者，癌症可以係化療抗性的。更具體地，可以使用所揭示之方法治療之癌症包括急性淋巴胚細胞白血病(ALL)，急性髓性白血病(AML)，慢性淋巴細胞白血病(CLL)，慢性髓性白血病(CML)，急性前髓細胞白血病(APL)，骨髓增生異常症候群(MDS)，急性單核細胞白血病(AMOL)，毛細胞白血病(HCL)，T細胞幼淋巴細胞白血病(T-PLL)，大顆粒淋巴細胞白血病，成人T細胞白血病，小淋巴細胞淋巴瘤(SLL)，霍奇金淋巴瘤(結節性硬化，混合細胞型，淋巴細胞豐富，淋巴細胞耗竭或未耗竭，結節性淋巴細胞為主之霍奇金淋巴瘤)，非霍奇金淋巴瘤(所有亞型)，慢性淋巴細胞白血病/小淋巴細胞淋巴瘤，B細胞幼淋巴細胞白血病、淋巴漿細胞性淋巴瘤(如Waldenström巨球蛋白血症)，脾邊緣區淋巴瘤，漿細胞腫瘤(漿細胞性骨髓瘤，漿細胞瘤，單株免疫球蛋白沉積疾病，重鏈疾病)，結外邊緣區B細胞淋巴瘤(MALT淋巴瘤)，淋巴結邊緣區B細胞淋巴瘤(NMZL)，濾泡性淋巴瘤，套細胞淋巴瘤，彌漫性大B細胞淋巴瘤，縱隔(胸腺)大B細胞淋巴瘤，血管內大B細胞淋巴瘤，原發性滲出性淋巴瘤，伯基特淋巴瘤/白血病，T細胞幼淋巴細胞白血病，T細胞大顆粒淋巴細胞白血病，侵襲性NK細胞白血病，成人T細胞白血病/淋巴瘤，結外NK/T細胞淋巴瘤(鼻型)，腸病型T型細胞淋巴瘤，肝脾T細胞淋巴瘤，胚性NK細胞淋巴瘤，蕈樣真菌病/ sezary症候群，原發性皮膚CD30陽性T細胞淋巴增生性疾病，原發性皮膚間變性大細胞淋巴瘤，淋巴瘤樣丘疹病，血管免疫胚細胞性T細胞淋巴瘤，外周T細胞淋巴瘤(未指明)，間變性大細胞淋巴瘤)及多發性骨髓瘤(漿細胞性骨髓瘤Kahler氏病)。

在另一個實施例中，癌症選自急性髓性白血病(AML)，慢性髓性白血病(CML)，急性淋巴胚細胞白血病(ALL)，B細胞譜系急性淋巴胚細胞白血病(B-ALL)，T細胞譜系急性淋巴胚細胞白血病(T-ALL)，慢性淋巴細胞白血病(CLL)，毛細胞白血病(HCL)，骨髓增生異常症候群(MDS)，基礎漿細胞樣DC腫瘤(BPDCN)白血病，非霍奇金淋巴瘤(NHL)，套細胞淋巴瘤，嗜伊紅性白血病，B骨髓單核球性白血病及霍奇金白血病(HL)。在另一個實施例中，癌症係急性髓性白血病(AML)。在某些實施例中，受試者係合適之AML受試者；而在其他實施例中，受試者係不適合之AML受試者。在另一個實施例中，急性髓性白血病係難治性或復發性急性髓性白血病。在其他實施例中，本發明提供了患有多重耐藥性AML之患者之治療。P-醣蛋白(PGP)，也稱為MDR1，係一種170 kD之ATP依賴性藥物外排泵。它係ABC超家族之成員，並且在多藥抗性(MDR)細胞中大量表現並由ABCB1 基因產生。表現PGP之AML細胞至少在某種程度上對用常規化學治療劑治療具有抗性。因此，本發明還提供了治療表現PGP之AML之方法。

本發明還提供了治療具有至少一種陰性預後因子之血液學癌症之方法，該預後因子例如P-醣蛋白之過表現、EVIl之過表現、p53改變、DNMT3A突變、FLT3內部串聯重複(FLT3-ITD)，及/或複雜核型。在其他實施例中，本發明還提供了治療BRCA1、BRCA2或PALB2中表現降低或BRCA1、BRCA2或PALB2突變之血液癌症之方法。在投與本文所述之CD33靶向ADC及奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之組合之前，選擇具有至少一種陰性預後因子及/或BRCA1、BRCA2或PALB2之表現降低或突變之患者也係在本發明之範圍內。

在一個實施例中，本發明提供了治療FLT3-ITD突變患者之AML之方法。在一個實施例中，AML係難治性或復發性AML。在投與本文所述之CD33靶向ADC及奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)之組合之前，選擇具有FLT3-ITD突變之患者也在本發明之範圍內。在一個實施例中，患者係AML適合患者。在另一個實施例中，患者係AML不適合之患者。

在特定之實施例中，將靶向CD33之ADC以醫藥學上可接受之劑型投與受試者。ADC可以作為推注靜脈內投與或藉由肌肉內、皮下、關節內、滑膜內、鞘內、口服、局部或吸入途徑連續輸注一段時間。含有ADC之醫藥組合物藉由腫瘤內、腫瘤周圍、病灶內或病灶周圍途徑投與，以發揮局部及全身治療作用。

醫藥學上可接受之劑型通常包括醫藥學上可接受之藥劑，例如載體、稀釋劑及賦形劑。此等藥劑係眾所周知的，並且熟習此項技術者可以根據臨床情況確定最合適之藥劑。合適之載劑、稀釋劑、及/或賦形劑之實例包括：(1)杜貝卡氏磷酸鹽緩衝鹽水(Dulbecco's phosphate buffered saline)，pH為約7.4，含有約1 mg/ml/mL至25 mg/ml/mL人類血清白蛋白；(2) 0.9%鹽水(0.9% w/v NaCl)；及(3) 5% (w/v)右旋糖。

在揭示之方法中，ADC及奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)組合投與。組合療法意在包括向單個受試者投與兩種或更多種治療劑，並且意欲包括其中藥劑藉由相同或不同之投與途徑投與或在相同或不同時間投與之治療方案。此等術語包括向受試者投與兩種或更多種藥劑，使得藥劑及/或其代謝物同時存在於受試者中。它們包括在單獨之組合物中同時投與，在同一組合物中同時給藥及在不同組合物中在不同時間投與。

在某些實施例中，可以同時向受試者投與奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC。

在某些實施例中，在投與ADC(例如，IMGN779)之前將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者。在某些實施例中，在投與ADC(例如，IMGN779)後將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者。在某些實施例中，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)在同一天投與受試者。在其他實施例中，在投與ADC(例如，IMGN779)之前1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者。在某些實施例中，在投與ADC(例如，IMGN779)後，將奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)投與受試者，例如在投與ADC(例如，IMGN779)後之1天、2天、3天、4天、5天、6天或7天。

在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用作治療合適AML受試者中之AML之一線療法。在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用作治療合適AML受試者中之AML之二線療法。在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用於治療合適之AML受試者中之復發或難治性AML。在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用作治療適合AML受試者中復發或難治性AML之二線療法。

在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用作治療不適合之AML受試者中之AML之一線療法。在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用作治療不適合之AML受試者中之AML之二線療法。在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用於治療不適合之AML受試者中之復發或難治性AML。在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用作治療不適合AML受試者中復發或難治性AML之二線療法。

在某些實施例中，奎紮替尼(或其醫藥學上可接受之鹽，例如二鹽酸鹽)及ADC(例如IMGN779)之組合可用於治療FLT3-ITD陽性之AML受試者。

在所揭示之方法及醫藥組合物中使用之ADC可以作為溶液或凍乾粉末提供，針對該溶液或凍乾粉末之無菌性及內毒素水準來進行測試。合適之醫藥學上可接受之載劑、稀釋劑、及賦形劑為熟知的且可由一般熟習此項技術者依據臨床狀況許可確定。

合適之載劑、稀釋劑、及/或賦形劑之實例包括：(1)杜貝卡氏磷酸鹽緩衝鹽水(Dulbecco's phosphate buffered saline)，pH為約7.4，含有或不含約1 mg/ml/mL至25 mg/ml/mL人類血清白蛋白；(2) 0.9%鹽水(0.9% w/v NaCl)；及(3) 5% (w/v)右旋糖；且亦可含有抗氧化劑諸如色胺、及穩定劑諸如Tween 20。

揭示了醫藥組合物，其包括ADC、奎紮替尼，並且通常包含至少一種另外之物質，例如醫藥學上可接受之載體或稀釋劑。本發明之醫藥組合物經調配以與其意欲投與途徑相容。在一個實施例中，根據常規程序將組合物配製成適合於對人類進行靜脈內、皮下、肌肉內、口服、鼻內或局部投與之醫藥組合物。

提供以下實例以便向一般熟習此項技術者提供如何製備及使用本發明之檢定、篩選及治療方法之完全揭露及描述，且以下實例不意欲限制被發明者視為其發明之事物之範疇。實例所有播散性異種移植模型之資料收集及分析 ：

每週對小鼠稱重兩次，並在整個研究期間監測臨床徵象。測量之終點係存活率。當存在後腿麻痹、體重減少＞治療前體重之20%、出現可見腫瘤或者可見任何窘迫徵象時，對動物實施安樂死。當發現自然死亡時，記錄自然死亡。

對於播散性模型，腫瘤生長延遲計算為T-C，其中T係治療組之中位存活時間(以天計)，且C係媒劑對照組之中位存活時間(以天計)。使用以下公式計算播散性模型之壽命增加百分比(%ILS)：%ILS = (T-C) / C × 100%。根據播散性模型之NCI標準來評估抗腫瘤活性：ILS ＜25%係無活性，ILS≥25%係最低活性，ILS＞ 40%係活性的，且ILS≥50%係高活性的。所有皮下異種移植模型之資料收集及分析 ：

每週對小鼠稱重兩次，並在整個研究期間監測臨床徵象。當存在後腿麻痹、體重減少＞治療前體重之20%、發生腫瘤潰瘍或者可見任何窘迫徵象時，對動物實施安樂死。

每週使用卡尺在三維中測量一至兩次腫瘤體積。腫瘤體積使用公式V =長度×寬度×高度×1/2以mm³ 來表示(Tomayko及Reynolds，Cancer Cancer Chemother. Pharmacol. 24 : 148-54 (1989))。如Bissery等人，Cancer Res. 51: 4845-52 (1991)中所述評估活性。

還使用以下公式評估腫瘤生長抑制(T/C值)： T/C(%)=(治療組中位腫瘤體積/對照組中位腫瘤體積)×100%。

當媒劑對照之腫瘤體積達到預定大小時，同時測定治療(T)組及媒劑對照(C)組之腫瘤體積(Bissery等人，Cancer Res. 51: 4845-52 (1991))。測定每個治療組之每日中位腫瘤體積，包括無腫瘤小鼠(0 mm³ )。根據NCI標準，T/C≤42%係抗腫瘤活性之最低水準。T/C ＜10%被認為係高抗腫瘤活性水準。實例 1. IMGN779( 單劑量 ) 及奎紮替尼 (QD x 5) 之組合在 MV4-11 皮下模型中之活體內功效

為了測試IMGN779、奎紮替尼或此等兩種藥劑之組合在活體內降低腫瘤負荷能力之功效，如下面之方案中所述使用播散性腫瘤模型。

雌性C.B17 SCID小鼠各自在右腹皮下接種100 μl之50%基質膠:50%無血清培養基(v/v)中之1×10⁷ 個MV4-11細胞(人AML細胞株)。在第15天，即接受偶聯物治療(單獨或與奎紮替尼組合)之組之偶聯物投與前24 h，將此等治療組中之所有小鼠腹膜內注射400 mg/kg非靶向chKTI抗體以阻斷Mv4-11 AML細胞上之Fc受體，阻止偶聯物之非特異性吸收。另外，在細胞接種後第20天，接受偶聯物之所有小鼠再次接受第二次注射100 mg/kg chKTI抗體以阻斷Fc受體。在MV4-11接種後第15天，基於腫瘤體積將小鼠隨機分入研究組。

在MV4-11接種後第16天，小鼠在側尾靜脈接受單次靜脈注射之媒劑，或5 μg/kg(按DGN462計；0.253 mg/kg，按huCD33 Ab計)，或10 μg/kg(按DGN462計；0.506 mg/kg，按huCD33Ab計)IMGN779，或5 μg/kg(按DGN462計；0.289 mg/kg，按Ab計)Ab-DGN462非靶向對照偶聯物，或10 μg/kg(按DGN462計；0.577 mg/kg，按Ab計)Ab-DGN462非靶向對照偶聯物。奎紮替尼投與也在第16天開始；並且接受奎紮替尼之小鼠在細胞移植後第16、17、18、19及20天之每一天給予單次口服劑量之5 mg/kg奎紮替尼。在組合組中，小鼠接受如上所述之IMGN779及奎紮替尼之投與。

結果如表3(下文)及圖1所示。

在該研究中，單劑量之5 μg/kg或10 μg/kg之IMGN779分別具有活性及高活性，分別導致17%及0%之T/C值；及在研究結束時(第120天)分別為0/6及4/6長期完全消退(CR)。相反，單劑量之5 μg/kg或10 μg/kg之Ab-DGN462無活性，分別導致101%及81%之T/C值；及在研究結束時(第120天)，在此等兩個治療組之每一者中之0/6長期完全消退(CR)。每天一次(QD)5 mg/kg奎紮替尼持續5天(×5)之方案具有活性，導致第120天之T/C為11%及0/6 CR。單次劑量之5 μg/kg IMGN779及奎紮替尼QDx5方案之組合係高度活性的，導致T/C為0%及第120天之6/6 CR，比相應之IMGN779單個藥劑方案高6個CR，證明了藉由該組合獲得之額外益處。單次劑量10 μg/kg IMGN779及奎紮替尼QDx5方案之組合也具有高活性，導致T/C為0%及第120天之6/6 CR，比相應之IMGN779單個藥劑方案高兩個CR，證明了藉由該組合獲得之額外益處。表 3.

實例 2. IMGN779(QW x 3) 及奎紮替尼 (QD x 14) 之組合在 MV4-11 播散模型中之活體內功效

用150 mg/kg環磷醯胺預治療雌性NOD SCID小鼠以部分消融骨髓，以改良MV4-11細胞之植入。將環磷醯胺(Sigma，C0768，批號MKBX1822V)溶解在0.9%NaCl中，並在MV4-11細胞接種前第-3天及第-2天腹膜內投與小鼠。

在如上所述之環磷醯胺治療之後，在研究之第0天，將小鼠各自在側尾靜脈中靜脈內注射100 μl無血清培養基中之3×10⁶ 個MV4-11細胞(人AML細胞株)。在MV4-11接種後第21天，將小鼠基於體重隨機分入研究組。在接受偶聯物治療(單獨或與奎紮替尼組合)之所有組之每次偶聯物投與之前24 h，給小鼠腹膜內注射150 mg/kg非靶向chKTI抗體以阻斷MV4-11 AML細胞上之Fc受體，防止偶聯物之非特異性吸收。

根據單獨或與奎紮替尼組合之兩種不同IMGN779給藥時程，小鼠每週一次(QW)接受藉由DGN462計為1 μg/kg(藉由抗-hCD33抗體計為0.0534 mg/kg)之劑量之IMGN779以獲得三次劑量(x3)。此等兩種不同之IMGN779給藥時程係：i)第21天、第28天及第35天(對於IMGN779稱為「第21天」)；或ii)第25天、第32天及第39天(對於IMGN779稱為「第25天」)；其中在研究時間線中，IMGN779治療之所述開始日從第0天(MV4-11接種當天)開始逐漸移動。根據兩種不同之奎紮替尼給藥時程，單獨或與IMGN779組合，奎紮替尼每天一次(QD)以1 mg/kg之劑量給予，連續14天(x14)。此等兩種不同之奎紮替尼給藥時程係：i)第21至34天(對於奎紮替尼稱為「第21天」)；或ii)第25至38天(對於奎紮替尼稱為「第25天」)。

包括單一藥劑組，根據對應於IMGN779之兩個不同給藥時程之兩個不同給藥時程，該等單一藥劑組接受藉由DGN462計為1 μg/kg(藉由抗體計為0.0556 mg/kg)之非靶向對照偶聯物Ab-DGN462之QW x 3給藥方案。此等兩種不同之Ab-DGN462給藥時程係：i)第21天、第28天及第35天(對於Ab-DGN462，稱為「第21天」，I組)；或ii)第25天、第32天及第39天(對於Ab-DGN462，稱為「第25天」，J組)。

根據將兩種藥物之組合三種不同給藥時程之一，用IMGN779(QW×3)及1 mg/kg奎紮替尼(QD×14)之組合方案來治療小鼠：i)IMGN779之第21天時程及奎紮替尼之第21天時程(F組)，或ii)IMGN779之第21天時程及奎紮替尼之第25天時程(G組)，或iii)IMGN779之第25天時程及奎紮替尼之第21天時程(H組)。

結果如表4(下文)及圖2所示。

根據第21天時程(B組)或第25天時程(C組)，以1 mg/kg，QD×14投與之奎紮替尼單一藥劑在該研究中具有最低活性，導致與媒劑治療相比，每種奎紮替尼單一藥劑方案之腫瘤生長延遲(T-C值)為17天，ILS(增加壽命)為39.5%。單一藥劑IMGN779之兩種不同治療時程中之每一者在該研究中都係最低活性的，導致以下T-C值及%ILS：i)第21天時程(D組)產生17天之T-C及39.5%之ILS ；ii)第25天時程(E組)產生11天之T-C及25.6%之ILS。

以上概述之三種不同之奎紮替尼加IMGN779組合治療方案產生以下抗腫瘤活性：i)IMGN779第21天時程加上奎紮替尼第21天時程之組合(F組)之T-C值為57.5天，ILS為133.7%(高活性) ；ii)IMGN779第21天時程加上奎紮替尼第25天時程之組合(G組)之T-C值為56天，ILS為130.2%(高活性)；iii)IMGN779第25天時程加上奎紮替尼第21天時程之組合(H組)之T-C值為31天，ILS為72%(高活性)。三種組合治療方案中之每一種都相對於相應之單一藥劑治療組獲得了明顯之存活益處。

在第21天(I組)開始治療之使用1 μg/kg(藉由DGN462計)之非靶向Ab-DGN462對照偶聯物之QWx3方案之單一藥劑治療導致T-C值為9.5天，ILS為22.1%，其為無活性的。在第25天(J組)開始治療之使用1 μg/kg(藉由DGN462計)之A-DGN462之QWx3方案之單一藥劑治療具有最低活性，導致T-C值為11天及ILS為25.6%。表 4.

實例 3. IMGN779(QW x 3) 及奎紮替尼 (QD x 14) 之組合在 Molm-13 播散模型中之活體內功效

雌性NOD SCID小鼠用150 mg/kg環磷醯胺預治療以部分消融骨髓，以改良Molm-13細胞之植入。將環磷醯胺(Sigma，C0768，批號MKBX1822V)溶解在0.9%NaCl中，並在第0天接種Molm-13細胞之前第-2天腹膜內投與小鼠。

在如上所述之環磷醯胺治療之後，在研究之第0天，將小鼠各自在側尾靜脈中靜脈內注射100 μl無血清培養基中之2x10⁵ 個Molm-13細胞(人AML細胞株)。在Molm-13接種後第6天，將小鼠基於體重隨機分入研究組。對於接受偶聯物治療(單獨或與奎紮替尼組合)之所有組，在每次偶聯物投與前24 h，給小鼠腹膜內注射150 mg/kg非靶向chKTI抗體以阻斷Molm-13 AML細胞上之Fc受體，防止偶聯物之非特異性吸收。

根據單獨或與奎紮替尼組合之兩種不同IMGN779給藥時程，小鼠每週一次(QW)接受藉由DGN462計為0.2 μg/kg(藉由抗-hCD33抗體計為0.011 mg/kg)之劑量之IMGN779以獲得三次劑量(x3)。此等兩種不同之IMGN779給藥時程係：i)第7天、第14天及第21天(對於IMGN779稱為「第7天」)；或ii)第10天、第17天及第24天(對於IMGN779稱為「第10天」)；其中在研究時間線中，IMGN779治療之所述開始日從第0天(Molm-13接種當天)開始逐漸移動。根據兩種不同之奎紮替尼給藥時程，單獨或與IMGN779組合，奎紮替尼每天一次(QD)以3 mg/kg之劑量給予，連續14天(x14)。此等兩種不同之奎紮替尼給藥時程係：i)第7至20天(對於奎紮替尼稱為「第7天」)；或ii)第10至23天(對於奎紮替尼稱為「第10天」)。

包括單一藥劑組，根據對應於IMGN779之兩個不同給藥時程之兩個不同給藥時程，該等單一藥劑組接受藉由DGN462計為0.2 μg/kg(藉由抗體計為0.011 mg/kg)之非靶向對照偶聯物Ab-DGN462之QW x 3給藥方案。此等兩種不同之Ab-DGN462給藥時程係：i)第7天、第14天及第21天(對於Ab-DGN462，稱為「第7天」，I組)；或ii)第10天、第17天及第24天(對於Ab-DGN462，稱為「第10天」，J組)。

根據將兩種藥物之組合三種不同給藥方案之一，用IMGN779(QW×3)及3 mg/kg奎紮替尼(QD×14)之組合方案來治療小鼠：i)IMGN779之第7天時程及奎紮替尼之第7天時程(F組)，或ii)IMGN779之第7天時程及奎紮替尼之第10天時程(G組)，或iii)IMGN779之第10天時程及奎紮替尼之第7天時程(H組)。

結果如表5(下文)及圖3所示。

根據第7天時程(B組)或第10天時程(C組)，以3 mg/kg，QD×14投與之奎紮替尼單一藥劑在該研究中分別具有高活性或活性，導致與媒劑治療相比，腫瘤生長延遲(T-C值)分別為11.5或9天，ILS(增加壽命)分別為54.8或42.9%。在該研究中分別具有高度活性或最低活性之單一藥劑IMGN779之兩種不同治療時程，導致以下T-C值及%ILS：i)第7天時程(D組)產生15天之T-C及71.4%之ILS(高度活性)；ii)第10天時程(E組)產生6.5天之T-C及31%之ILS(最低活性)。

以上概述之三種不同之奎紮替尼加IMGN779組合治療方案產生以下抗腫瘤活性：i)對於IMGN779第7天時程加上奎紮替尼第7天時程之組合(F組)，T-C值＞ 105天且ILS ＞ 500%(高活性)；ii)IMGN779第7天時程加上奎紮替尼第10天時程之組合(G組)之T-C值為20.5天，ILS為97.6%(高活性)；iii)對於IMGN779第10天時程加上奎紮替尼第7天時程之組合(H組)，T-C值為24天，ILS為114.3%(高活性)。

在第7天(I組)開始治療之使用0.2 μg/kg(藉由DGN462計)之非靶向Ab-DGN462對照偶聯物之QWx3方案之單一藥劑治療導致T-C值為0天，ILS為0%，其為無活性的。在第10天(J組)開始治療之使用0.2 μg/kg(藉由DGN462計)之A-DGN462之QWx3方案之單一藥劑治療係無活性的，導致1天之T-C值及4.8%之ILS。表 5.

實例 4. IMGN779 與奎紮替尼之組合在 FLT3-ITD 陽性 AML 模型中之活體外研究

在活體外FLT3-ITD陽性AML模型中研究了IMGN779及奎紮替尼之抗白血病活性背後之機制。藉由免疫印跡技術及流式細胞術進行機制研究。

如圖4所示，隨著FLT3-ITD-陽性細胞株(MV4-11)中之奎紮替尼濃度之增加，抗凋亡蛋白Mcl-1、促存活/增殖蛋白p-Stat5及p-Erk以及DNA修復蛋白Rad51之表現水準降低。藉由奎紮替尼治療，凋亡蛋白，亦即切割之半胱天冬酶3(cCasp3)及切割之PARP1(cPARP)以劑量依賴性方式增加。此等實驗之結果證實，奎紮替尼下調由組成型FLT3磷酸化誘導之多種途徑，並且此下調與細胞凋亡一致。此與文獻中報道之結果一致。

還評估了用奎紮替尼、IMGN779以及奎紮替尼及IMGN779之組合治療之細胞中之抗凋亡、促存活/增殖及DNA修復信號傳導。用治療媒劑或IMGN779(32 pM)或奎紮替尼(3 nM)或IMGN779及奎紮替尼之組合治療Molm-13細胞72小時。用治療媒劑或IMGN779(77 pM)或奎紮替尼(4.5 nM)或IMGN779及奎紮替尼之組合治療MV4-11細胞72小時。在24、48及72小時藉由流式細胞術測量Mcl-1、p-Stat5、p-ERK1/2及Rad51之表現水準。在Molm-13(圖5A)及MV4-11細胞(圖5B)中用奎紮替尼治療降低了Mcl-1、p-Stat5、p-ERK1/2及Rad51之表現。用IMGN779治療增加了Molm-13(圖5A)及MV4-11(圖5B)細胞中之Mcl-1水準。用奎紮替尼及IMGN779之組合治療(圖5A；5B)以類似於單獨之奎紮替尼之方式降低Mcl-1、p-Stat5、p-ERK1/2及Rad 51。至關重要地，儘管用IMGN779治療，但用組合治療之細胞未顯示抗凋亡蛋白Mcl-1之上調。奎紮替尼治療之AML細胞不能以抗凋亡信號傳導對同時IMGN779治療作出反應，此提示誘導細胞凋亡之互補機制具有增強之細胞毒性潛力。

IMGN779及奎紮替尼在Molm-13及MV4-11 FLT3-ITD陽性細胞株中之活體外組合導致凋亡蛋白質，亦即切割之半胱天冬酶3及切割之PARP1之增加，如圖6A-6C所示，以及死亡(胺活性染料陽性)細胞之增加，如圖7A-7C所示。用治療媒劑或IMGN779(32 pM)或奎紮替尼(3 nM)或IMGN779及奎紮替尼之組合治療Molm-13細胞72小時。用治療媒劑或IMGN779(77 pM)或奎紮替尼(4.5 nM)或IMGN779及奎紮替尼之組合治療MV4-11細胞72小時。在24、48及72小時藉由流式細胞術在具有活力染料(LIVE/DEAD Aqua Fixable Dye)之FSC/SSC閘控細胞中測量活力。在24、48及72小時藉由流式細胞術在活細胞中測量切割之PARP(cPARP)及切割之半胱天冬酶3(cCaspase3)陽性細胞之百分比。用IMGN779或奎紮替尼或IMGN779及奎紮替尼之組合治療之Molm-13細胞(圖6A；7A；7C)及MV4-11細胞(圖6B；7B；7C)各自顯示凋亡標誌物cCaspase3及cPARP陽性之活細胞比例增加，以及每個樣品中死細胞比例之增加。在兩種細胞株中，與單一藥劑相比，IMGN779及奎紮替尼之組合導致凋亡標誌物增加及細胞死亡增加。單獨IMGN779治療後抗凋亡Mcl-1之增加，加上組合治療細胞中之奎紮替尼驅動之Mcl-1抑制，為組合治療之FLT3-ITD陽性AML細胞中觀察到之細胞凋亡標誌物及細胞死亡之增加提供了令人信服之機制理論基礎。

圖1顯示IMGN779(單劑量)及奎紮替尼(QDx5)之組合在MV4-11皮下模型中之活體內功效。

圖2顯示IMGN779(QWx3)及奎紮替尼(QDx14)之組合在MV4-11播散模型中之活體內功效。

圖3顯示IMGN779(QWx3)及奎紮替尼(QDx14)之組合在Molm-13播散模型中之活體內功效。

圖4顯示了用遞增劑量之奎紮替尼治療之MV4-11細胞中之活體外劑量依賴性反應。

圖5A-5B顯示用IMGN779及奎紮替尼之組合治療之Molm-13細胞(圖5A)及MV4-11(圖5B)中之抗凋亡、促存活/增殖及DNA修復信號傳導。

圖6A-6C顯示用IMGN779及奎紮替尼之組合治療之Molm-13細胞(圖6A及6C)及MV4-11(圖6B及6C)中細胞凋亡增加。

圖7A-7C顯示用IMGN779及奎紮替尼之組合治療之Molm-13細胞(圖7A及7C)及MV4-11(圖7B及7C)中之死細胞增加。

Claims

一種治療受試者之癌症之方法，其包括向該受試者投與治療有效量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽及治療有效量之式(I)之抗體-藥物偶聯物：
或其醫藥學上可接受之鹽，其中： N與C之間的雙線
表示單鍵或雙鍵，其限制條件為，當其為雙鍵時，X不存在且Y為氫，當其為單鍵時，X為氫且Y為-SO₃ H； Ab係抗CD33抗體或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO:1之重鏈可變區(V_H )互補決定區(CDR) 1序列、SEQ ID NO:2之V_H CDR2序列及SEQ ID NO:3之V_H CDR3序列、以及SEQ ID NO:4之輕鏈可變區(V_L ) CDR1序列、SEQ ID NO:5之V_L CDR2序列及SEQ ID NO:6之V_L CDR3序列；且 r係1至10之整數。
如申請專利範圍第1項之方法，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC1) 或為其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第1項之方法，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC2) 或為其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第1項至第3項中任一項之方法，其中式(I)、(ADC1)或(ADC2)之該醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽或鉀鹽。
如申請專利範圍第1項至第3項中任一項之方法，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC2’)。
如申請專利範圍第1項至第5項中任一項之方法，其中該抗CD33抗體或其抗原結合片段包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含與SEQ ID NO:7或9之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。
如申請專利範圍第1項至第6項中任一項之方法，其中該抗CD33抗體或其抗原結合片段包含輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含與SEQ ID NO:8或10之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。
如申請專利範圍第1項至第7項中任一項之方法，其中該抗CD33抗體或其抗原結合片段包含有包含SEQ ID NO:9之序列之重鏈可變區及包含SEQ ID NO:10之序列之輕鏈可變區。
如申請專利範圍第1項至第7項中任一項之方法，其中Ab係抗CD33抗體，其包含具有SEQ ID NO:11所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:12所示胺基酸序列之輕鏈。
如申請專利範圍第1項至第7項中任一項之方法，其中該抗體係CDR移植或表面重構之抗體。
如申請專利範圍第1項之方法，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC3)，或為其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第11項之方法，其中(ADC3)之該醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽。
如申請專利範圍第1項之方法，其中該抗體-藥物偶聯物係IMGN779。
如申請專利範圍第1項至第13項中任一項之方法，其中奎紮替尼之該醫藥學上可接受之鹽係二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第1項至第14項中任一項之方法，其中該癌症選自由白血病、淋巴瘤及骨髓瘤組成之群。
如申請專利範圍第15項之方法，其中該癌症選自由急性髓性白血病(AML)、慢性髓性白血病(CML)、急性淋巴胚細胞白血病(ALL)、B細胞譜系急性淋巴胚細胞白血病(B-ALL)、T細胞譜系急性淋巴胚細胞白血病(T-ALL)、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、毛細胞白血病(HCL)、骨髓增生異常症候群(MDS)、基礎漿細胞樣DC腫瘤(BPDCN)白血病、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、套細胞淋巴瘤、嗜伊紅性白血病、B骨髓單核球性白血病及霍奇金白血病(HL)組成之群。
如申請專利範圍第16項之方法，其中該癌症係急性髓性白血病(AML)。
如申請專利範圍第17項之方法，其中該急性髓性白血病(AML)係難治性或復發性急性髓性白血病。
如申請專利範圍第17項之方法，其中該AML係新診斷的。
如申請專利範圍第17項至第19項之方法，其中該AML之特徵在於P-醣蛋白之過表現，EVIl之過表現，p53改變，DNwIT3A突變，FLT3內部串聯重複，複雜核型，BRCA1、BRCA2或PALB2中之表現降低，或BRCA1、BRCA2或PALB2中之突變。
如申請專利範圍第16項至第20項中任一項之方法，其中該受試者係適合之AML受試者。
如申請專利範圍第16項至第20項中任一項之方法，其中該受試者係不適合之AML受試者。
如申請專利範圍第17項至第22項中任一項之方法，其中該方法用作第一線療法。
如申請專利範圍第17項至第22項中任一項之方法，其中該方法用作第二線療法。
如申請專利範圍第16項至第24項中任一項之方法，其中該急性髓性白血病(AML)之特徵在於FLT3內部串聯重複(FLT3-ITD)。
如申請專利範圍第16項之方法，其中該MDS係高風險MDS。
如申請專利範圍第14項至第26項之方法，其中該癌症係化療敏感的。
如申請專利範圍第14項至第26項之方法，其中該癌症係化療抗性的。
如申請專利範圍第1項至第28項中任一項之方法，其中如藉由流式細胞術測量，來自該癌症之至少20%之胚細胞係CD33陽性的。
如申請專利範圍第1項至第29項中任一項之方法，其中該投與導致外周血胚細胞減少。
如申請專利範圍第1項至第30項中任一項之方法，其中投與導致骨髓胚細胞減少。
如申請專利範圍第1項至第31項中任一項之方法，其中該受試者為人。
如申請專利範圍第1項至第32項中任一項之方法，其中該癌症之特徵在於RAS突變、TP53突變、IDH突變或FLT3突變。
如申請專利範圍第1項至第33項中任一項之方法，其中約每週一次向該受試者投與約0.39 mg/kg、約0.54 mg/kg或約0.7 mg/kg之該抗體-藥物偶聯物。
如申請專利範圍第1項至第34項中任一項之方法，其中向該受試者投與20-60 mg之總日劑量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第35項之方法，其中每日向該受試者投與奎紮替尼二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第35項或第36項之方法，其中向該受試者投與30 mg、40 mg或60 mg之總日劑量之奎紮替尼二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第37項之方法，其中向該受試者投與30 mg之總日劑量之奎紮替尼二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第37項之方法，其中向該受試者投與60 mg之總日劑量之奎紮替尼二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第1項至第39項中任一項之方法，其中該受試者用奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽及該抗體-藥物偶聯物治療5天、1周、10天、2周、3周或1個月。
如申請專利範圍第40項之方法，其中該受試者每天一次用奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽治療持續7天。
如申請專利範圍第40項之方法，其中該受試者每天一次用奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽治療持續14天。
如申請專利範圍第40項之方法，其中該受試者每天一次用奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽治療持續28天。
如申請專利範圍第1項至第43項中任一項之方法，其中該方法進一步包括向該受試者投與另外之化學治療劑或療法。
如申請專利範圍第44項之方法，其中該另外之化學治療劑係阿糖胞苷、伊達比星、柔紅黴素、阿紮胞苷或其組合。
如申請專利範圍第45項之方法，其中該方法進一步包括向該受試者投與100或200 mg/m² /天之阿糖胞苷持續7天及12 mg/m² /天之伊達比星或60-90 mg/m² /天之柔紅黴素持續3天。
如申請專利範圍第46項之方法，其中在第1天至第7天投與阿糖胞苷，並在第1天至第3天投與伊達比星或柔紅黴素。
如申請專利範圍第47項之方法，其中在第8天至第21天每天一次向該受試者投與奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第48項之方法，其中向該受試者投與40 mg之奎紮替尼或奎紮替尼二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第44項至第49項中任一項之方法，其中該方法進一步包括每隔一天向該受試者投與3000 mg/m² /天之阿糖胞苷。
如申請專利範圍第50項之方法，其中該阿糖胞苷在第1天、第3天及第5天投與該受試者。
如申請專利範圍第50項或第51項之方法，其中奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽在第6天至第19天每天一次投與該受試者。
如申請專利範圍第52項之方法，其中向該受試者投與40 mg之奎紮替尼或奎紮替尼二鹽酸鹽。
如申請專利範圍第45項之方法，其中該方法進一步包括每天向該受試者投與20 mg/m² 或30 mg/m² 之阿糖胞苷持續10天。
如申請專利範圍第45項之方法，其中該方法進一步包括向該受試者投與75 mg/m² 之日劑量之阿紮胞苷。
如申請專利範圍第44項至第55項中任一項之方法，其中該受試者已接受同種異體幹細胞移植。
一種醫藥組合物，其包含：i)治療有效量之奎紮替尼或其醫藥學上可接受之鹽；ii)治療有效量之式(I)之抗體-藥物偶聯物：
(I) 或其醫藥學上可接受之鹽；及iii)醫藥學上可接受之載體或稀釋劑；其中： N與C之間的雙線
表示單鍵或雙鍵，其限制條件為，當其為雙鍵時，X不存在且Y為氫，當其為單鍵時，X為氫，Y為-SO₃ H； Ab係抗CD33抗體或其抗原結合片段，其包含SEQ ID NO:1之重鏈可變區(V_H )互補決定區(CDR)1序列、SEQ ID NO:2之V_H CDR2序列及SEQ ID NO:3之V_H CDR3序列、以及SEQ ID NO:4之輕鏈可變區(V_L )CDR1序列、SEQ ID NO:5之V_L CDR2序列及SEQ ID NO:6之V_L CDR3序列；且 r係1至10之整數。
如申請專利範圍第57項之醫藥組合物，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC1) 或為其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第57項之醫藥組合物，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC2) 或為其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第57項至第59項中任一項之醫藥組合物，其中式(I)、(ADC1)或(ADC2)之醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽或鉀鹽。
如申請專利範圍第57項至第59項中任一項之醫藥組合物，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC2’)。
如申請專利範圍第57項至第61項中任一項之醫藥組合物，其中該抗CD33抗體或其抗原結合片段包含重鏈可變區，該重鏈可變區包含與SEQ ID NO:7或9之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。
如申請專利範圍第57項至第62項中任一項之醫藥組合物，其中該抗CD33抗體或其抗原結合片段包含輕鏈可變區，該輕鏈可變區包含與SEQ ID NO:8或10之胺基酸序列具有至少95%同一性之胺基酸序列。
如申請專利範圍第57項至第63項中任一項之醫藥組合物，其中該抗CD33抗體或其抗原結合片段包含有包含SEQ ID NO:9之序列之重鏈可變區及包含SEQ ID NO:10之序列之輕鏈可變區。
如申請專利範圍第57項至第63項中任一項之醫藥組合物，其中Ab係抗CD33抗體，其包含具有SEQ ID NO:11所示胺基酸序列之重鏈及具有SEQ ID NO:12所示胺基酸序列之輕鏈。
如申請專利範圍第57項至第63項中任一項之醫藥組合物，其中該抗體係CDR移植或表面重構之抗體。
如申請專利範圍第57項至第66項中任一項之醫藥組合物，其中該抗體-藥物偶聯物由下式表示：
(ADC3)，或為其醫藥學上可接受之鹽。
如申請專利範圍第67項之醫藥組合物，其中式(ADC3)之該醫藥學上可接受之鹽係鈉鹽。
如申請專利範圍第57項至第68項中任一項之醫藥組合物，其中該醫藥組合物包含奎紮替尼二鹽酸鹽。