TW201929880A - 甲羥戊酸代謝途徑抑制劑和α病毒用於製備抗腫瘤藥物的用途 - Google Patents

甲羥戊酸代謝途徑抑制劑和α病毒用於製備抗腫瘤藥物的用途 Download PDF

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Abstract

本發明屬於生物醫藥領域，涉及甲羥戊酸代謝途徑抑制劑和α病毒用於製備抗腫瘤藥物的用途。本發明首次發現甲羥戊酸代謝途徑抑制劑可以用於製備α病毒抗腫瘤增效劑。本發明同時涉及一種包含甲羥戊酸代謝途徑抑制劑以及α病毒的藥物組合物，包含甲羥戊酸代謝途徑抑制劑及α病毒的藥品套組，以及甲羥戊酸代謝途徑抑制劑與α病毒用於治療腫瘤，特別是對所述α病毒不敏感的腫瘤中的用途。

Description

甲羥戊酸代謝途徑抑制劑和α病毒用於製備抗腫瘤藥物的用途
本發明屬於生物醫藥領域，涉及甲羥戊酸代謝途徑抑制劑與α病毒的組合用於製備抗腫瘤藥物中的用途。
溶瘤病毒(oncolytic virus)是一類選擇性的感染並殺傷腫瘤細胞，而不損傷正常細胞的可複製病毒。溶瘤病毒療法(oncolytic virotherapy)是一種創新的腫瘤靶向治療策略，它利用天然的或經基因工程改造的病毒選擇性的感染腫瘤細胞，並在腫瘤細胞中複製，達到靶向性溶解、殺傷腫瘤細胞的作用，但是對正常細胞沒有損傷。
M1病毒(Alphavirus M1)屬於α病毒屬(Alphavirus)。M1病毒能選擇性引起腫瘤細胞死亡而不影響正常細胞存活，其在抗腫瘤方面具有非常好的應用前景。然而，不同腫瘤對M1病毒的敏感性不一，對於某些腫瘤，M1病毒單獨用藥時，溶瘤作用還不夠理想。例如中國大陸發明專利申請號：201410425510.3的專利所記載的，M1作為抗腫瘤藥物使用時，對於結直腸癌、肝癌、膀胱癌和乳腺癌的效果不如胰腺癌、鼻咽癌、前列腺癌和黑色素瘤明顯；而膠質瘤、子宮頸癌、肺癌則更其次；而胃癌則最不顯著。
篩選增加溶瘤病毒腫瘤治療效果的化合物有望增加溶瘤病毒的抗瘤譜及抗瘤強度。發明人先前申請的中國大陸發明專利申請號：201510990705.7的專利中，將大黃酚及其衍生生物作為溶瘤病毒的抗瘤增效劑，二者組合可以將腫瘤細胞的存活率降低至39.6%，但其抗癌強度存在很大的進步空間，此外，這種聯合應用的作用機制尚不明確。
甲羥戊酸代謝途徑是脂質合成代謝系統的其中一個分支。它的上游起始於乙醯乙醯輔酶A，在HMG-CoA合成酶(HMGCS1)的作用下生成3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A(HMG-CoA)，3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A(HMG-CoA)被限速酶HMG-CoA還原酶還原至甲羥戊酸，甲羥戊酸在一系列酶的作用下生成金合歡基焦磷酸(farnesyl pyrophosphate，FPP)。其下游存在三條主要的代謝途徑，包括膽固醇合成途徑、參與膜蛋白的金合歡基化(Farnesylation)修飾的蛋白金合歡基修飾途徑和蛋白質二香葉基化(geranylgeranylation)修飾途徑。甲羥戊酸代謝途徑的示意圖可參見第9圖。
HMG-CoA還原酶抑制劑是目前廣泛用於臨床的降脂藥，它不但可以降低血漿膽固醇水平，還可以防止動脈粥狀硬化。
金合歡基轉移酶是細胞訊號傳導系統中Ras蛋白轉譯後修飾的關鍵酶。Ras蛋白轉譯後，在金合歡基轉移酶的催化下，將膽固醇合成途徑中的中間體-金合歡基焦磷酸酯(FPP)上的金合歡基轉到Ras蛋白的CAAX四肽結構。金合歡基轉移酶抑制劑能夠有效抑制Ras蛋白的金合歡基修飾，從而抑制由於Ras基因活化起主導作用的腫瘤的生長。
二香葉基轉移酶是膜蛋白轉譯後修飾的關鍵酶。蛋白轉譯後，在二香葉基轉移酶I/II的催化下，將甲羥戊酸途徑中的中間體-二香葉基焦磷酸(GGPP)上的二香葉基轉到蛋白的CAAX四肽結構，其中二型二香葉基轉移酶特異性地催化RAB蛋白的二香葉基化。
已有文獻報導，甲羥戊酸代謝途徑對多種病毒的複製發揮重要的促進作用。如上游HMG-CoA還原酶的抑制劑，如他汀類藥物能夠抑制多種病毒的複製，包括HCMV[1]、HIV[2]、WNV[3]。下游的金合歡基轉移酶抑制劑能透過抑制RAS的金合歡基化修飾，從而抑制多種病毒的複製或其溶瘤作用，如HSV-1[4]。
參考文獻：
[1]. Ponroy, N., et al., Statins demonstrate a broad anti-cytomegalovirus activity in vitro in ganciclovir-susceptible and resistant strains. J Med Virol, 2015. 87(1): p. 141-53。
[2]. Amet, T., et al., Statin-induced inhibition of HIV-1 release from latently infected U1 cells reveals a critical role for protein prenylation in HIV-1 replication. Microbes Infect, 2008. 10(5): p. 471-80。
[3]. Mackenzie, J.M., A.A. Khromykh and R.G. Parton, Cholesterol manipulation by West Nile virus perturbs the cellular immune response. Cell Host Microbe, 2007. 2(4): p. 229-39。
[4]. Farassati, F., A.D. Yang and P.W. Lee, Oncogenes in Ras signalling pathway dictate host-cell permissiveness to herpes simplex virus 1. Nat Cell Biol, 2001. 3(8): p. 745-50。
本發明的目的之一在於提供一種甲羥戊酸代謝途徑的抑制劑用於製備溶瘤病毒α病毒抗瘤增效劑方面的用途。
本發明的另一個目的在於提供一種抗瘤藥物組合物，其可以使得α病毒發揮更好的抗瘤效果。
本發明的另一個目的在於提供一種針對α病毒不敏感的腫瘤，安全有效的α病毒增效藥物。
本發明透過以下技術方案實現上述目的： 發明人透過研究、篩選發現，甲羥戊酸代謝途徑抑制劑出人意料地可以增強α病毒的溶瘤效果。
發明人透過用甲羥戊酸代謝途徑干擾片段(siRNA)抑制3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶(3-Hydroxy-3-Methylglutaryl Coenzyme A Reductase，HMGCR)的基因或金合歡基轉移酶基因的表現，降低相應蛋白的表現量，結果發現，單獨干擾甲羥戊酸代謝途徑和未干擾並未引起細胞形態病變，同時單獨應用M1病毒也不引起細胞形態病變，只有干擾甲羥戊酸代謝途徑聯合應用M1病毒組引起了顯著細胞形態病變。
發明人推測，透過抑制甲羥戊酸代謝途徑可以顯著增強α病毒的溶瘤效應。針對該推測，發明人採用了抑制甲羥戊酸代謝途徑活性的化合物替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀、阿伐他汀協同α病毒 尤其是M1病毒作用於腫瘤細胞，實驗結果發現，替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀、阿伐他汀，均可以促進α病毒M1的複製，從而促進細胞死亡。
所述的甲羥戊酸代謝途徑抑制劑為抑制甲羥戊酸代謝途徑中的代謝起始物、或中間產物或最終產物生成或者活性的物質、或降解甲羥戊酸代謝途徑中代謝起始物、或中間產物或最終產物的物質、或降低甲羥戊酸代謝途徑代謝起始物、或中間產物或最終產物水平的基因工具。
甲羥戊酸代謝途徑是脂質合成代謝系統的其中一個分支。它的上游起始於乙醯乙醯輔酶A，在HMG-CoA合成酶(HMGCS1)的作用下生成3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A(HMG-CoA)，3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A(HMG-CoA)被限速酶HMG-CoA還原酶還原至甲羥戊酸。甲羥戊酸在一序列酶的作用下生成金合歡基焦磷酸(FPP)。金合歡基焦磷酸下游分成三條主要的代謝途徑，包括在環氧酶的作用下合成膽固醇、在金合歡基轉移酶的作用下參與膜蛋白的金合歡基化(Farnesylation)修飾和在二香葉基轉移酶的作用下參與二香葉基化(geranylgeranylation)修飾，以幫助蛋白質發揮正常功能。
進一步地，本發明中的甲羥戊酸代謝途徑抑制劑包括上游途徑抑制劑及/或下游途徑抑制劑。
其中，所述的上游途徑為從乙醯乙醯輔酶A起始至金合歡基焦磷酸為止的途徑； 具體地，乙醯乙醯CoA與乙醯CoA分子在HMG-CoA合成酶催化下縮合成HMG-CoA，經過HMG-CoA還原酶催化還原成甲羥戊酸；甲羥戊酸經過甲羥戊酸激酶和磷酸甲羥戊酸激酶催化成3-磷酸-5-焦磷酸甲羥戊酸，然後透過甲羥戊酸二磷酸脫羧酶轉化成異戊烯基焦磷酸或其異構體二甲烯丙焦磷酸。異戊烯基焦磷酸和二甲烯丙焦磷酸在異戊二烯轉移酶的作用下形成香葉基焦磷酸，進一步在異戊二烯轉移酶的作用下生成金合歡基焦磷酸。
所述的上游途徑抑制劑既包括抑制上游途徑中的代謝起始物和產物(中間產物、最終產物)如乙醯乙醯輔酶A、乙醯輔酶A、3-羥-3-甲基戊二醯輔酶A、甲羥戊酸、磷酸甲羥戊酸、焦磷酸甲羥戊酸、異戊烯基焦磷酸、二甲基丙烯二磷酸酯(DMAPP)、香葉基焦磷酸(GPP)和金合歡基焦磷酸(FPP)中的任意一種或幾種的活性或生成的物質；也包括抑制上游代謝途徑中酶如HMG-CoA合成酶(HMGCS1)、HMG-CoA還原酶(HMGCR)、甲羥戊酸激酶(MVK)、磷酸甲羥戊酸激酶(PMVK)、甲羥戊酸二磷酸脫羧酶(MVD)和法尼醯二磷酸合成酶(FDPS)中的任意一種或幾種的活性或者生成的物質。(當然，能降解或敲低上述目標物的物質，也屬於上述所說的抑制劑)。
其中，所述的下游途徑抑制劑為蛋白金合歡基修飾途徑抑制劑及/或二香葉基化(geranylgeranylation)修飾途徑抑制劑。進一步地，所述的二香葉基化(geranylgeranylation)修飾途徑抑制劑為二型蛋白質二香葉基化(geranylgeranylation)修飾途徑抑制劑。
更進一步地，所述蛋白金合歡基修飾抑制劑為金合歡基轉移酶抑制劑。
更進一步地，所述的二型蛋白質二香葉基化(geranylgeranylation)修飾途徑抑制劑為二香葉基焦磷酸抑制劑；或者優選地，所述的二型蛋白質二香葉基化(geranylgeranylation)修飾途徑抑制劑為香葉基焦磷酸合成酶1(GGPS1)抑制劑及/或二型二香葉基轉移酶(RABGGTB)抑制劑。
甲羥戊酸代謝途徑抑制劑可以是一種物質(例如化合物、胺基酸序列或核苷酸序列)，該種物種抑制甲羥戊酸代謝途徑中的任何一個環節，這些環節可以是代謝起始物、中間產物或者最終產物，也可以是甲羥戊酸代謝途徑中的酶；或者是降解甲羥戊酸代謝途徑中的產物(包括中間產物和最終產物)，例如、尤其是酶；或是一種能夠剔除或影響甲羥戊酸代謝途徑中蛋白的表現量或者蛋白活性的工具(物質)。本領域的技術人員能夠修飾、替換及/或改變這些抑制化合物、序列或基因工具。如果透過上述方式獲得的物質具有抑制甲羥戊酸代謝途徑的作用，那麼該物質就屬本發明所述的甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，並且屬於本發明中上述物質、化合物和工具的同質替換。
本發明首次發現，甲羥戊酸代謝途徑抑制劑可以作為α病毒的抗瘤增效劑/耐藥逆轉劑。
耐藥逆轉劑是指，當採用一些α病毒作為抗腫瘤藥物用於治療腫瘤時，存在著一些腫瘤對α病毒並不太敏感，或者說這些腫瘤對α病 毒具有抗性，此時，可以採用與甲羥戊酸代謝途徑抑制劑(作為耐藥逆轉劑)聯用α病毒的方式，以逆轉腫瘤對所述α病毒的抗性。
本發明提供了甲羥戊酸代謝途徑抑制劑用於製備α病毒抗瘤增效劑方面的用途。
作為優選的實施方式，所述的甲羥戊酸代謝途徑抑制劑為甲羥戊酸代謝途徑中酶的抑制劑。
在本發明的一個優選的實施例中，用以與α病毒聯用以作為α病毒抗腫瘤增效劑的物質，選自HMG-CoA還原酶抑制劑、金合歡基轉移酶抑制劑和二香葉基轉移酶抑制劑中的至少一種。
所述二香葉基轉移酶抑制劑選自二型二香葉基轉移酶抑制劑。
本發明提供了HMG-CoA還原酶抑制劑、金合歡基轉移酶抑制劑和二香葉基轉移酶抑制劑中的一種或幾種在製備α病毒抗瘤增效劑方面的應用。
其中，所述的HMG-CoA還原酶抑制劑、金合歡基轉移酶抑制劑、二香葉基轉移酶抑制劑為抑制HMG-CoA還原酶、金合歡基轉移酶、二香葉基轉移酶活性的物質、或降解HMG-CoA還原酶、金合歡基轉移酶、二香葉基轉移酶的物質、或降低HMG-CoA還原酶及/或、金合歡基轉移酶、二香葉基轉移酶水平的基因工具； 作為一種可選的實施方式，所述的抑制HMG-CoA還原酶 酶活性的物質選自他汀類化合物。現有技術中已經公知，他汀類化合物為HMG-CoA還原酶的抑制劑，目前廣泛用於臨床的降脂藥，它不但可以降低血漿膽固醇水平，還可以防止動脈粥狀硬化。本發明首次發現了他汀類化合物作為HMG-CoA還原酶抑制劑，可以增效α病毒的抗瘤作用。
作為示範性的例子，所述的他汀類化合物選自但不限於以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、匹伐他汀鈣中； 作為本發明中優選的實施方式，所述的他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：氟伐他汀、阿伐他汀； 作為本發明的一種實施方式，所述的氟伐他汀的結構式如式I所示：
作為本發明的一種實施方式，所述的阿伐他汀的結構式如式II所示：
其中，金合歡基轉移酶抑制劑是一種已知的抗過度增生試劑。截至目前，已知的抗過度增生試劑有非常多種。例如：5-氟尿嘧啶、組蛋白去乙醯化酶(HDAC)抑制劑、順鉑、長春鹼、雌激素受體結合試劑等等。當嘗試將已知的抗過度增生試劑用於與α病毒聯用時，其結果往往是不可預期的。例如，發明人發現另一些抗過度增生試劑如乙醯化酶(HDAC)抑制劑無法與α病毒產生增效效果。而對於金合歡基轉移酶抑制劑，其與α病毒產生了協同性抗腫瘤效果，這是不可預期的。
在本發明的一種實施方式中，所採用的金合歡基轉移酶活性的物質選自選自喹啉酮類，如R115777；或苯并二氮類，如BMS214662；或芳基吡咯類，如LB42908等中的一或幾種。上述這些均為現有技術中的金合歡基轉移酶的非競爭性抑制劑。
或者，所述的金合歡基轉移酶活性的物質選自但不限於以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：L-70472、J-104135、 A-166120、曼怒黴素(Manumycin)、毛殼孢酸等金合歡基轉移酶的競爭性抑制劑。
作為優選的實施方式，本發明中的所述的金合歡基轉移酶抑制劑選自替吡法尼(Tipifarnib)及/或FTI277，或它們藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物。
作為本發明的一種實施方式，所述的替吡法尼(Tipifarnib)的結構式如式III所示：
作為本發明的一種實施方式，所述的FTI277的結構式如式IV所示：
在本發明一些實施例中，甲羥戊酸代謝途徑抑制劑還包括針 對甲羥戊酸代謝途徑基因表現抑制工具；優選為甲羥戊酸代謝途徑中酶基因表現的抑制工具；更優選為HMG-CoA還原酶、金合歡基轉移酶、或二香葉基轉移酶基因表現抑制工具。包括但不限於基因干擾以及基因編輯、基因沉默或基因剔除等工具手段。
其中，所述的二香葉基轉移酶為二型二香葉基轉移酶。相應的，所述的二香葉基轉移酶基因表現抑制工具為二型二香葉基轉移酶基因表現抑制工具。
作為一種可選的實施方式，所述的甲羥戊酸代謝途徑中酶基因表現的抑制工具，例如HMG-CoA還原酶、金合歡基轉移酶、或二香葉基轉移酶基因表現抑制工具，其選自DNA、RNA、PNA或DNA-RNA-雜合體。它們可以是單鏈的或雙鏈的。
這些抑制劑可包括一些小的抑制核酸分子，例如短干擾RNA(siRNA)，雙鏈RNA(dsRNA)，微小RNA(miRNA)，核酶，以及小髮夾RNA(shRNA)，這些都能減弱或消除甲羥戊酸代謝途徑中蛋白的表現，尤其是酶的表現，更尤其是HMG-CoA還原酶、金合歡基轉移酶、二香葉基轉移酶的表現。
這些小的抑制核酸分子可能包括第一、第二鏈，二者雜交彼此形成一個或多個雙鏈區，每條鏈大約18~28個核苷酸的長度，大約18~23個核苷酸的長度，或者18，19，20，21，22個核苷酸的長度。另外，單鏈也可能包含能夠相互雜交形成雙鏈的區域，例如在shRNA分子中。
這些小的抑制核酸分子在保持這種減弱或消除甲羥戊酸代謝途徑中蛋白尤其是酶的表現的能力時，可能包括修飾性核苷酸。修飾性核苷酸可用於改善體外或體內特性，如穩定性、活性及/或生物利用度。這些修飾性核苷酸可能含有脫氧核苷酸、2’-甲基核苷酸、2’-脫氧-2’-氟核苷酸、4’-三核苷酸、鎖核酸(LNA)核苷酸及/或2’-O-甲氧乙基核苷酸等。小的抑制核酸分子，如短干擾RNA(siRNA)，也可能含有5’-及/或3’-帽結構，以此來防止核酸外切酶對其降解。
在本發明另一優選的實施例中，甲羥戊酸代謝途徑抑制劑為甲羥戊酸代謝途徑的干擾RNA片段；作為示範性的實施方式，其具有如下的序列：干擾HMG-CoA還原酶基因：SEQ ID No：1：AACCCAAUGCCCAUGUUCCdTdT
干擾金合歡基轉移酶基因：SEQ ID No：2：ACGACTCGGTGGAAACAGT
SEQ ID No：3：CGAGTTCTTTCACCTACTA
干擾二型二香葉基轉移酶：SEQ ID No：4：SASI-HS01-00112524(購買於Sigma公司)
在一些實施例中，小抑制核酸分子組成的雙鏈核酸含有兩端鈍、或懸垂的核苷酸。其他核苷酸可能包括會導致錯位、凸起、循環、或 擺動鹼基對的核苷酸。小抑制核酸分子可以設計配方以便施用，例如，透過脂質體包裹，或摻入其他載體(如可生物降解聚合物水凝膠，或環糊精)。
在本發明另一些實施例中，所述的抑制劑還包括抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種。優選為抑制HMG-CoA還原酶、金合歡基轉移酶或二香葉基轉移酶的抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種。
其中，所述的抗體可以是單株抗體(monoclonal antibody)，多株抗體(polyclonal antibody)，多價抗體，多特異性抗體(例如：雙特異性抗體)。該抗體可以是嵌合抗體、人類化抗體、CDR移植抗體或人型抗體。抗體片段可以是，例如，Fab，Fab’，F(ab’)2，Fv，Fd，單鏈Fv(scFv)，具二硫鍵的FV(sdFv)，或VL、VH結構域。抗體可能是一個共軛的形式，例如，結合一個標籤、一個可檢測標記，或一種細胞毒性劑。抗體可能是同型IgG(例如：IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)、IgA、IgM、IgE或IgD。
其中，作為本發明一種實施方式，所述抑制金合歡基轉移酶的肽類抑制劑選自短肽；更優選地，所述的短肽為三肽、四肽、五肽、六肽、七肽或八肽；更進一步地，所述肽類抑制劑選自如CVFM或CIFM等等中的一種。所述的抑制金合歡基轉移酶的擬肽類抑制劑為，例如，在肽類抑制劑基礎上，經過一些改造，如肽鍵轉化、基團的取代等技術改善肽類抑制劑的缺點，提高在細胞內的活性和對肽酶的穩定性。
所述的α病毒M1病毒、給塔病毒(Getah Virus)或者它們的組合。
本發明所說的α病毒(例如M1病毒、給塔病毒等)可以尤其地指目前已有的α病毒，但也不排除一些自然變異或者進行了突變(自然突變、強制性突變、或選擇性突變)、基因修飾、序列增加、序列增加或刪除或部分替換的病毒。例如說同源性在99.8%或以上、99.5%或以上、99%或以上、98%或以上、甚至97%或以上的α病毒。這裡所述的α病毒也包括已經進行了上述改變的病毒。最好是上述改變並不影響所說的α病毒發揮本發明所述的作用。所說的抑制甲羥戊酸代謝途徑蛋白抑制劑為能起到敲低或影響甲羥戊酸代謝途徑基因表現或者蛋白量或蛋白活性的物質(例如化合物、或胺基酸序列、核苷酸序列等)或工具等。本發明所屬技術領域中具有通常知識者可以對其抑制化合物或者基因工具進行修飾、替換、改變等，但只要起到上述抑制甲羥戊酸代謝途徑的作用的，則屬於本發明的甲羥戊酸代謝途徑蛋白抑制劑，屬於上述物質、化合物或工具等的等同替換。
在一些實施例中，α病毒是保藏編號CCTCC V201423(保藏於中國典型培養物保藏中心，保藏日期：2014年7月17日)的M1病毒。作為很可能源於同一毒株的病毒，基因資料庫登錄碼EF011023(Genbank Accession No.EF011023)記錄了一株M1的序列。給塔病毒作為與M1病毒具有高達97.8%(Wen et al.Virus Genes.2007；35(3)：597-603)同源性的病毒，兩者具有很高的同一性，M1病毒也被一些文獻歸類為類給塔病毒(Getah-like virus)。可以預期兩者將具有較為相似的性質。
單個α病毒株也可以施用。在其他實施方案中，也可使用多 種病毒株及/或類型的α病毒。
本發明還提供一種用於治療腫瘤的藥物組合物，其包含甲羥戊酸代謝途徑抑制劑以及α病毒。
本發明還提供用於治療腫瘤的藥品套組，其包含甲羥戊酸代謝途徑抑制劑或其衍生物或它們的組合，以及α病毒。
藥品套組區別於組合物的地方在於，在藥品套組中，甲羥戊酸代謝途徑抑制劑、與α病毒製劑，這兩者獨立包裝(例如：藥丸、或膠囊、或藥片或安瓿瓶中，含有甲羥戊酸代謝途徑抑制劑；另外的藥丸、或膠囊、或藥片或安瓿瓶中，含有α病毒)。在一些實施例中，α病毒、甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，以及α病毒和甲羥戊酸代謝途徑抑制劑的組合，也可含一種或多種佐劑。所述的佐劑是指在藥物組成中，可輔助藥物療效的成分。藥品套組也可以包含獨立包裝的甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，以及獨立包裝的α病毒。藥物套組中甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，以及α病毒的施用，可以是同時施用或者是以任意的前後順序施用，例如在α病毒之前施用甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，或者在α病毒之後施用甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，或者兩者同時施用。在各種實施例中，患者可以是哺乳動物。在一些實施例中，哺乳動物可以是人。
作為優選的實施方式，所述的甲羥戊酸代謝途徑抑制劑選自氟伐他汀(式I)、阿伐他汀(式II)、替吡法尼(Tipifarnib)(式III)、FTI277(式IV)等抑制甲羥戊酸代謝途徑活性的化合物。或者針對甲羥戊酸代謝途徑基因表現抑制工具，包括但不限於基因干擾、基因沉默、以及基因編 輯或剔除等工具手段。
所述的α病毒選自M1病毒、給塔病毒或他們的組合。
在組合物或藥品套組中，所述的抑制劑(例如，替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀)與α病毒的配比可選地為：0.01~200mg：103~109PFU；優選0.1~200mg：104~109PFU；進一步優選0.1~100mg：105~109PFU； 優選使用劑量為：抑制劑(例如，替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀)使用範圍為0.01mg/kg至200mg/kg，同時α病毒使用力價為感染複數(MOI)從103至109(PFU/kg)；在一些實施例中，α病毒的使用力價為MOI 103~104或104~105或105~106或106~107或107~108或108~109PFU/kg。優選抑制劑(例如，替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀)使用範圍為0.1mg/kg至200mg/kg，同時α病毒使用力價為MOI從104至109(PFU/kg)；更優選抑制劑(例如，替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀)使用範圍為0.1mg/kg至100mg/kg，同時α病毒使用力價為MOI從105至109(PFU/kg)。
在一個實施方式中，所述腫瘤為實體瘤或血液瘤。在一個實施方式中，所述實體瘤為肝癌、結直腸癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮頸癌、前列腺癌、膠質瘤、黑色素瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌、或胃癌。在優選的實施方式中，所述腫瘤為對α病毒不敏感的腫瘤。在更優選的實施方式中，所述腫瘤為對M1病毒不敏感的腫瘤。
作為可選的實施方案，本發明所提供的抑制劑(例如，替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀或其組合)可以是注射劑、片劑、膠囊、貼劑等。作為優選的實施方案，本發明的增效藥物是注射劑；優選地，可採用靜脈注射。
本發明發現了甲羥戊酸代謝途徑抑制劑，尤其是替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀可以增加α病毒的複製及抗腫瘤效應，以提高α病毒作為抗腫瘤藥物時的治療有效性。細胞學實驗證明M1病毒分別和替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277聯合應用，可顯著引起腫瘤細胞的形態學病變，從而顯著增強對腫瘤細胞的抑制作用。生物分子學實驗證明M1病毒分別和氟伐他汀或阿伐他汀聯合應用，或者干擾HMGCR、金合歡基轉移酶亞基FNTB或二型二香葉基轉移酶RABGGTB可顯著增加M1病毒的蛋白表現，從而增強M1病毒對腫瘤細胞的抑制作用。
本發明利用siRNA靶向甲羥戊酸代謝途徑的HMGCR基因，在亂序干擾片段處理下，結直腸癌細胞HCT-116，胰腺癌細胞Capan-1和SW1990細胞貼壁生長，生長狀態良好；干擾HMGCR後並無對腫瘤細胞的細胞形態產生影響；單獨感染M1病毒的情況下，鏡下觀察發現有少量細胞死亡；但是，HMGCR干擾組細胞在M1感染48小時後，明顯出現大量細胞死亡現象。利用MTT法檢測細胞的存活率，在HCT-116細胞中，單獨感染M1病毒能引起約20%細胞死亡；但在干擾HMG-CoA還原酶後，M1病毒感染能引起超過70%的細胞死亡。M1病毒殺傷腫瘤的作用明顯增強。
本發明聯合替吡法尼(Tipifarnib)或FTI277和M1病毒作用於人腸癌細胞HCT-116株，出人意料的發現抗病毒化合物替吡法尼(Tipifarnib)或FTI277和M1病毒聯合應用時，顯著增加腫瘤細胞形態病變，顯著降低腫瘤細胞存活率。例如在本發明的一個實施例中，當M1病毒(MOI=1)單獨處理腸癌細胞時，腫瘤細胞存活率為97.0%，而當以50nM的替吡法尼(Tipifarnib)與同樣MOI的M1病毒聯用時，腫瘤細胞存活率大幅下降至38%。與單用M1病毒的抗腫瘤效果相比，替吡法尼(Tipifarnib)與M1聯用時，溶瘤效果顯著提升。
本發明發現，替吡法尼(Tipifarnib)或FTI277與α病毒聯合應用處理腫瘤細胞，對腫瘤細胞殺傷作用顯著優於單用相同濃度的替吡法尼(Tipifarnib)或FTI277，例如當同樣例如以50nM的替吡法尼(Tipifarnib)處理腫瘤細胞時，腫瘤細胞存活率仍高達80%，當以50nM的替吡法尼(Tipifarnib)與M1病毒聯用時，腫瘤細胞存活率大幅下降至38%。可見，替吡法尼(Tipifarnib)與M1聯用時大幅提升的溶瘤效果，是得益於替吡法尼(Tipifarnib)與M1病毒之間的協同性機制，並非透過替吡法尼(Tipifarnib)的抗腫瘤機制發揮作用。
第1圖為靶向3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶HMGCR的siRNA與M1病毒顯著增加人腸癌和胰腺癌細胞株的形態學病變
第2圖為靶向3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶HMGCR的siRNA與M1病毒聯合處理顯著降低人腸細胞癌株存活率。
第3圖為他汀類藥物與M1病毒顯著增加人腸細胞癌株形態學病變及促進M1病毒的複製；其中(A)為人腸細胞癌株在氟伐他汀與M1處理後的相差圖；(B)為氟伐他汀和阿伐他汀促進M1病毒蛋白的表現。
第4圖為靶向金合歡基轉移酶的亞基FNTB的siRNA與M1病毒聯合處理顯著增加人腸細胞癌株和胰腺癌細胞株形態學病變。
第5圖為金合歡基轉移酶抑制劑替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277與M1病毒顯著增加人腸細胞癌株和胰腺癌細胞株形態學病變。
第6圖為金合歡基轉移酶抑制劑替吡法尼(Tipifarnib)與M1病毒聯合處理顯著降低人腸細胞癌株和胰腺癌細胞株存活率。
第7圖為干擾甲羥戊酸途徑上游及下游四個分支篩選出下游分支中的金合歡基化途徑和香葉醯香葉醯化途徑被阻斷後M促進M1病毒的複製。
第8圖為金合歡基轉移酶抑制劑替吡法尼(Tipifarnib)與M1病毒聯合應用顯著抑制人腸和胰腺細胞癌株移植瘤生長；其中(A)為人腸細胞癌株移植瘤生長曲線；(B)為人胰腺細胞癌株移植瘤生長曲線。
第9圖為甲羥戊酸代謝途徑圖。第9圖中涉及的酶的英文縮寫所對應的全稱如下：HMGCR：3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase)；HMGCS1：3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A合成酶1HM(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase 1 HM)；MVK：甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)；PMVK：磷酸甲羥戊酸 激酶(phosphomevalonate kinase)；MVD：甲羥戊酸二磷酸脫羧酶(mevalonate diphosphate decarboxylase)；IDI1：異戊二烯基二磷酸δ異構酶1(isopentenyl-diphosphate delta isomerase 1)；FDPS：法尼醯二磷酸合成酶(farnesyl diphosphate synthase)；GGPS1：香葉基焦磷酸合成酶1(geranylgeranyl diphosphate synthase 1)；DHCR7：7-脫氫膽固醇還原酶(7-dehydrocholesterol reductase)；RAGBBTβ：Rab二香葉基轉移酶β次單元(Rab geranylgeranyltransferase beta subunit)；PGGT1β：蛋白質二香葉基轉移酶I型次單元β(protein geranylgeranyltransferase type I subunit beta)；FNTβ：金合歡基轉移酶，CAAX盒，β(farnesyltransferase,CAAX box,beta)；SQLE：鯊烯環氧化酶(squalene epoxidase)。
以下實施方式是對本發明作進一步說明，但本發明的實施方式不局限於以下的實施例介紹，凡依照本發明的原理或理念所作的等同的變化或變通都應視為本發明保護的範疇。
在沒有特別指明的情況下，本發明採用的材料及實驗方法為常規材料及方法。
說明書中的「選自」連接著所選對象，可以理解為，例如：「X選自：A、B、C、......、E」或「X選自：A、B、C、......和E中的一種或多種」，等等，均可理解為，X包括了A、B、C、......E中的一種、或者兩者的任意組合、或者多者的任意組合。此時不排除X還包括了一些其他類別的物質。
除了上述提及的特定酶抑制劑，本發明的抑制劑還可以選自現有技術中已經公知的特定酶抑制劑、或者經後續研究發現具備特定酶抑制作用的物質。例如，對於金合歡基轉移酶抑制劑，本發明的金合歡基轉移酶抑制劑還可以選自現有技術中已經公知的金合歡基轉移酶抑制劑、或者經後續研究發現具備金合歡基轉移酶抑制作用的物質。對於HMG-CoA還原酶抑制劑、二香葉基轉移酶或是其他特定酶抑制劑，也是相同的道理。
本發明列舉的多種甲羥戊酸代謝途徑的相關酶類如下，並隨附其已知的序列(記錄於NCBI，以下為NCBI Gene ID)。
HMGCR：3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA reductase)，ID：3156。
HMGCS1：3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A合成酶1HM(3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoA synthase 1HM)，ID：3157。
MVK：甲羥戊酸激酶(mevalonate kinase)，ID：4598。
PMVK：磷酸甲羥戊酸激酶(phosphomevalonate kinase)，ID：10654。
MVD：甲羥戊酸二磷酸脫羧酶(mevalonate diphosphate decarboxylase)，ID：4597。
IDI1：異戊二烯基二磷酸δ異構酶1(isopentenyl-diphosphate delta isomerase 1)，ID：3422。
FDPS：法尼醯二磷酸合成酶(farnesyl diphosphate synthase)，ID：2224。
GGPS1：香葉基焦磷酸合成酶1(geranylgeranyl diphosphate synthase 1)，ID：9453。
DHCR7：7-脫氫膽固醇還原酶(7-dehydrocholesterol reductase)，ID：1717。
RAGBBTβ：Rab二香葉基轉移酶β次單元(Rab geranylgeranyltransferase beta subunit)，ID：5876。
PGGT1β：蛋白質二香葉基轉移酶I型次單元β(protein geranylgeranyltransferase type I subunit beta)，ID：5229。
FNTβ：金合歡基轉移酶，CAAX盒，β(farnesyltransferase,CAAX box,beta)，ID：2342。
SQLE：鯊烯環氧化酶(squalene epoxidase)，ID：6713。
當然，上述的序列並不作為限制性的條件。因為，不排除新發現的其他實現類似功能、或者其他類似物等，它們可能在胺基酸序列或核算序列上有所變化，例如說，與上述胺基酸序列具有至少80%，至少85%，至少90%，至少91%，至少92%，至少93%，至少94%，至少95%，至少96%，至少97%，至少98%，或至少99%、或至少99.5%、或至少99.8%序列同一性的蛋白，它們可能被後續發現實現類似的功能，屬於上述的類似物，針對它們而設計的抑制劑也在本發明的保護範圍之內。
實施例1 靶向3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶HMGCR 的siRNA與M1病毒顯著增加人腸癌和胰腺癌細胞株的形態學病變
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，人胰腺細胞癌Capan-1(購於ATCC)、SW1990(購於ATCC)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)，倒置相差顯微鏡。
方法：
將細胞接種於35mm培養皿中，待細胞匯合度至60%時進行以下干擾處理；首先，用優化培養基(Opti-MEM)配製Lipofectamine RNAiMAX溶液，按照每培養皿2μL：198μL稀釋，混勻；其次，用優化培養基(Opti-MEM)配製siRNA溶液，按照每培養皿1.8μL：198μL稀釋，siRNA最終濃度為25nM，輕輕混勻；最後，將稀釋好的Lipofectamine RNAiMAX和siRNA混合，室溫靜置15min；將混合液加入至裝有1.5mL無血清培養基的培養皿中；24小時後，將培養基更換成完全培養基，並感染M1病毒(1 MOI)。48小時後在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態學的變化。
siRNA的序列為：SEQ ID No：1：AACCCAAUGCCCAUGUUCCdTdT
結果：
如第1圖顯示，在亂序干擾片段處理下，結直腸癌細胞HCT-116，胰腺癌細胞Capan-1和SW1990細胞貼壁生長，生長狀態良好； 干擾HMGCR後並無對腫瘤細胞的細胞形態產生影響；單獨感染M1病毒的情況下，鏡下觀察發現有少量細胞發生皺縮，變圓，折光性增強；但是，HMGCR干擾組細胞在M1感染48小時後，明顯出現大量折光性增強的死細胞，漂浮或者貼於培養皿中。
實施例2 靶向3-羥基-3-甲基戊二醯輔酶A還原酶HMGCR的siRNA與M1病毒聯合處理顯著降低人腸細胞癌株存活率。
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)。
方法：
(a)細胞的培養：人腸細胞癌HCT-116生長在含10%FBS、100U/ml青黴素及0.1mg/ml鏈黴素的DMEM完全培養基中；所有細胞株均置於5% CO2，37℃恒溫密閉式孵箱(相對濕度95%)內培養傳代，倒置顯微鏡觀察生長情況。大約2-3天傳代一次，取處於對數生長期的細胞用於正式實驗。
(b)將細胞接種於24孔盤中，30，000細胞/孔；細胞經過干擾HMGCR處理24小時後，感染M1病毒(MOI=1)；感染72小時後，進行MTT實驗檢測細胞存活率，方法如下：加入MTT溶液，100μL/孔；37℃孵育3小時後，吸除上清液，並加入DMSO溶液，1mL/孔；搖勻後，將孔盤置於酵素免疫分析測讀儀中，以570nm波長檢測吸光度。
結果：
如第2圖所示，在HCT-116細胞中，單獨感染M1病毒能引起約20%細胞死亡；但在干擾HMG-CoA還原酶基因(HMCGR)後，M1病毒感染能引起超過70%的細胞死亡。
siRNA的序列為：SEQ ID No：1：AACCCAAUGCCCAUGUUCCdTdT
實施例3 他汀類藥物與M1病毒顯著增加人腸細胞癌株形態學病變及促進M1病毒的複製。
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)，倒置相差顯微鏡。
方法：
(a)細胞的培養：人腸細胞癌HCT-116生長在含10% FBS、100U/ml青黴素及0.1mg/ml鏈黴素的DMEM完全培養基中；所有細胞株均置於5% CO2，37℃恒溫密閉式孵箱(相對濕度95%)內培養傳代，倒置顯微鏡觀察生長情況。大約2-3天傳代一次，取處於對數生長期的細胞用於正式實驗。
(b)細胞處理和形態學觀察：選擇對數生長期細胞，DMEM 完全培養液(含10%胎牛血清、1%雙抗)製成細胞懸液，細胞以4×105/孔的密度接種在24孔培養盤內。用M1病毒(MOI=1)感染細胞、M1病毒(MOI=1)聯合氟伐他汀、阿伐他汀(1、10μM)處理細胞，24小時後收集細胞蛋白並進行免疫墨點檢測。
(c)將細胞接種於24孔盤中，30,000細胞/孔；細胞加入氟伐他汀(2μM)處理後，感染M1病毒(MOI=1)；48小時後在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態學的變化。
結果：
如第3圖A顯示單獨使用M1對細胞形態無明顯影響，單獨使用氟伐他汀誘導少量細胞發生病變，同時使用兩種藥物處理時，細胞發生明顯的病變；如3B顯示，在藥物濃度為1μM時，M1病毒蛋白有輕微的上調；當他汀類藥物的濃度增加至10μM時，M1病毒蛋白(結構蛋白E1和非結構蛋白NS3)的表現與未加藥物組相比顯著地上調。結果證明，他汀類藥物促進M1病毒蛋白表現。
實施例4 靶向金合歡基轉移酶的亞基FNTB的siRNA與M1病毒聯合處理顯著增加人腸細胞癌株和胰腺癌細胞株形態學病變。
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，人胰腺細胞癌Capan-1(購於ATCC)、SW1990(購於ATCC)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)，倒置相差顯微鏡。
方法：
將細胞接種於35mm培養皿中，待細胞匯合度至60%時進行以下干擾處理；首先，用優化培養基(Opti-MEM)配製Lipofectamine RNAiMAX溶液，按照每培養皿2μL：198μL稀釋，混勻；其次，用優化培養基(Opti-MEM)配製siRNA溶液，按照每培養皿1.8μL：198μL稀釋，siRNA最終濃度為10或2nM，輕輕混勻；最後，將稀釋好的Lipofectamine RNAiMAX和siRNA混合，室溫靜置15min；將混合液加入至裝有1.5mL無血清培養基的培養皿中；24小時後，將培養基更換成完全培養基，並感染M1病毒(1 MOI)。48小時後在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態學的變化。
siRNA的序列為：SEQ ID No：2：ACGACTCGGTGGAAACAGT
SEQ ID No：3：CGAGTTCTTTCACCTACTA
結果：
如第4圖顯示，在亂序干擾片段處理下，結直腸癌細胞HCT-116，胰腺癌細胞Capan-1和SW1990細胞貼壁生長，生長狀態良好；干擾FNTB後並無對腫瘤細胞的細胞形態產生影響；單獨感染M1病毒的情況下，鏡下觀察發現有少量細胞發生皺縮，變圓，折光性增強；但是，FNTB干擾組細胞在M1感染48小時後，明顯出現大量折光性增強的死細胞，漂浮或者貼於培養皿中。
實施例5 金合歡基轉移酶抑制劑替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277與M1病毒顯著增加人腸細胞癌株形態學病變
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)，倒置相差顯微鏡。
方法：
(a)細胞的培養：人腸細胞癌HCT-116生長在含10%FBS、100U/ml青黴素及0.1mg/ml鏈黴素的DMEM完全培養基中；所有細胞株均置於5% CO2，37℃恒溫密閉式孵箱(相對濕度95%)內培養傳代，倒置顯微鏡觀察生長情況。大約2-3天傳代一次，取處於對數生長期的細胞用於正式實驗。
(b)細胞處理和形態學觀察：選擇對數生長期細胞，DMEM完全培養液(含10%胎牛血清、1%雙抗)製成細胞懸液，細胞以2.5×104/孔的密度接種在24孔培養盤內。用替吡法尼(Tipifarnib)(1，0.1μM)單獨處理、FTI277(10，1μM)單獨處理、M1病毒(MOI=1)感染細胞、M1病毒(MOI=1)聯合替吡法尼(Tipifarnib)(1，0.1μM)處理、M1病毒(MOI=1)聯合FTI277(10，1μM)處理細胞，以不加M1病毒、FTI277和替吡法尼(Tipifarnib)為對照，48時後在倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態學的變化。
結果：
如第5圖所示，相差顯微鏡下觀察細胞形態，HCT-116細胞是單層貼壁生長，並且細胞緊密排列，表型一致。而FTI1277或替吡法尼(Tipifarnib)(50nM)與M1病毒(MOI=1)處理48小時後，細胞的形態發生了明顯改變，較對照組細胞，與M1單獨處理組與單獨處理組比較，聯合處理組細胞數目明顯減少，胞體收縮成球狀，折光率明顯增強，呈死亡病變樣。
實施例6 金合歡基轉移酶抑制劑替吡法尼(Tipifarnib)與M1病毒聯合處理顯著降低人腸癌和人胰腺癌細胞株存活率
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，人胰腺癌細胞株SW1990(購於ATCC)，人正常肝細胞株L-02(購於中國科學院細胞庫)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)，自動酶聯檢測酵素免疫分析測讀儀。
方法：
接種細胞、給藥處理：選擇對數生長期細胞，DMEM完全培養液(含10%胎牛血清、1%雙抗)製成細胞懸液，以每孔4×103/孔的密度接種在96孔培養盤內。12小時後見細胞完全貼壁，實驗分對照組，單獨替吡法尼(Tipifarnib)組，M1感染組和替吡法尼(Tipifarnib)/M1聯用組。所用劑量為：所用劑量為：M1病毒(MOI=1)感染細胞；替吡法尼 (Tipifarnib)(50nM)。
MTT與細胞內的琥珀酸脫氫酶反應：培養至48小時，每孔加入MTT 20μl(5mg/ml)，繼續孵育4小時，此時鏡檢可觀察到、活細胞內形成的顆粒狀藍紫色甲臢結晶。
溶解甲臢顆粒：小心吸去上清液，加DMSO 100μl/孔溶解形成的結晶，在微型振盪器上震盪5min，然後在酶聯檢測儀上用波長570nm檢測各孔的光密度(OD值)。每組實驗重複3次。細胞存活率=(藥物處理組OD值/對照組OD值)×100%。
結果：
如第6圖所示，M1病毒單獨處理對腫瘤細胞HCT-116具有較小的存活率抑制作用，腫瘤細胞存活率達到97.0%，50nM的替吡法尼(Tipifarnib)處理組腫瘤細胞存活率仍高達80%，然而，當使用50nM的替吡法尼(Tipifarnib)與同樣MOI的M1病毒聯用(替吡法尼(Tipifarnib)+M1)時，腫瘤細胞存活率大幅下降至38%；M1病毒單獨處理對腫瘤細胞SW190具有較小的存活率抑制作用，腫瘤細胞存活率達到90.0%，50nM的替吡法尼(Tipifarnib)處理組腫瘤細胞存活率仍高達90%，然而，當使用50nM的替吡法尼(Tipifarnib)與同樣MOI的M1病毒聯用(替吡法尼(Tipifarnib)+M1)時，腫瘤細胞存活率大幅下降至40%左右；而聯合應用對正常細胞L02沒有明顯的殺傷效應。因此在細胞水平說明了甲羥戊酸代謝途徑蛋白抑制劑可以增強M1病毒的溶瘤效應，而對正常細胞沒有殺傷作用。
實施例7 干擾甲羥戊酸途徑上游及下游四個分支篩選出下游分支中的金合歡基化途徑和二香葉基化途徑被阻斷後促進M1病毒的複製。
材料：
人腸細胞癌HCT-116(購於中國科學院細胞庫)，M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)，高糖DMEM培養基(購於Corning)，倒置相差顯微鏡。
方法：
將細胞接種於35mm培養皿中，待細胞匯合度至60%時進行以下干擾處理；首先，用優化培養基(Opti-MEM)配製Lipofectamine RNAiMAX溶液，按照每培養皿2μL：198μL稀釋，混勻；其次，用優化培養基(Opti-MEM)配製siRNA溶液，按照每培養皿1.8μL：198μL稀釋，干擾HMGCR、SQLE、FNTB、PGGT1B、RABGGTB(具體見第9圖及其附圖說明)的siRNA最終濃度分別為25，25，4，20，20nM，輕輕混勻；最後，將稀釋好的Lipofectamine RNAiMAX和siRNA混合，室溫靜置15min；將混合液加入至裝有1.5mL無血清培養基的培養皿中；24小時後，將培養基更換成完全培養基，並感染M1病毒(1MOI)。24小時後收集細胞的蛋白裂解液並進行免疫印跡檢測。
siRNA如下：
干擾HMG-CoA還原酶基因(HMGCR)
SEQ ID No：1：AACCCAAUGCCCAUGUUCCdTdT
干擾金合歡基轉移酶亞基FNTB
SEQ ID No：2：ACGACTCGGTGGAAACAGT
SEQ ID No：3：CGAGTTCTTTCACCTACTA
干擾二型二香葉基轉移酶
SEQ ID No：4：SASI-HS01-00112524(購買於Sigma公司)
結果：
干擾HMGCR、金合歡基轉移酶亞基FNTB和二香葉基轉移酶RABGGTB後病毒的結構蛋白E1和非結構蛋白NS3的表現顯著增加，而干擾膽固醇合成途徑SQLE和PGGT1B後對病毒蛋白無明顯作用(第7圖)。
實施例8 替吡法尼(Tipifarnib)與M1病毒聯合應用顯著抑制人腸和胰腺細胞癌株移植瘤生長。
材料：
M1病毒(保藏編號CCTCC V201423)、人肝癌細胞株HCT-116(購於ATCC)、人胰腺癌細胞株SW1990(購於ATCC)、4周齡雌性BALB/c裸鼠。
方法：
本實驗採用隨機的、單盲的設計。將5×106 HCT-116或者 SW1990細胞注入到4周齡BALB/c裸鼠背側皮下。
當腫瘤大小達到50mm3時分組，包括不處理的對照組、單獨應用替吡法尼(Tipifarnib)組(腹腔注射500μg/kg/d)、單獨應用M1感染組(尾靜脈注射M1病毒2*109PFU/kg/d)和替吡法尼(Tipifarnib)/M1聯用組(相同方式給予相同劑量的替吡法尼(Tipifarnib)和M1病毒)，連續注射6次。每兩天測量腫瘤的長寬和體重，腫瘤的體積依據公式為(長×寬2)/2。測量腫瘤體積後進行One way ANOVA統計，***表示p<0.001。
結果：如第8圖所示，在兩種腫瘤細胞移植瘤動物體內，病理解剖測定腫瘤體積表明，和對照組比較，單獨應用替吡法尼(Tipifarnib)組和單獨M1感染組只能引起腫瘤體積輕微的縮小，而替吡法尼(Tipifarnib)/M1聯用組能引起腫瘤體積顯著地縮小，並且One way ANOVA統計表明具有統計學差異。
本發明所記載的實施方式僅為闡釋性例子，本發明的實施方式並不受上述的限制，其他的任何未背離本發明的精神實質與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡化，均應為等同的置換方式，都包含在本發明的保護範圍之內。
<110> 廣州威溶特醫藥科技有限公司
<120> 甲羥戊酸代謝途徑抑制劑和α病毒用於製備抗腫瘤藥物的用途
<130> 3200-WHD-TW
<160> 3
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 23
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列
<400> 1
<210> 2
<211> 19
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列
<400> 2
<210> 3
<211> 19
<212> DNA/RNA
<213> 人工序列
<400> 3

Claims (10)

  1. 一種甲羥戊酸代謝途徑抑制劑用於製備α病毒抗腫瘤增效劑或耐藥逆轉劑的用途；優選地，該甲羥戊酸代謝途徑抑制劑為抑制該途徑中代謝起始物、或中間物、或最終產物生成或者活性的物質；優選地，該抑制劑為酶抑制劑；優選地，該甲羥戊酸代謝途徑抑制劑包括上游途徑抑制劑及/或下游途徑抑制劑；優選地，該上游途徑為從乙醯乙醯輔酶A起始至金合歡基焦磷酸為止的途徑；優選地，該上游途徑抑制劑為抑制乙醯乙醯輔酶A、乙醯輔酶A、3-羥-3-甲基戊二醯輔酶A、甲羥戊酸、磷酸甲羥戊酸、焦磷酸甲羥戊酸、異戊烯基焦磷酸、二甲基丙烯二磷酸酯、香葉基焦磷酸和金合歡基焦磷酸中的任意一種或幾種的活性或生成的物質；或者優選地，該上游途徑抑制劑為抑制HMG-CoA合成酶、HMG-CoA還原酶、甲羥戊酸激酶、磷酸甲羥戊酸激酶、甲羥戊酸二磷酸脫羧酶和法尼醯二磷酸合成酶中的任意一種或幾種的活性或者生成的物質；優選地，該下游途徑抑制劑為蛋白金合歡基修飾途徑抑制劑和/二香葉基化修飾途徑抑制劑；該二香葉基化修飾途徑抑制劑為二型蛋白質二香葉基化修飾途徑抑制劑；優選地，該蛋白金合歡基修飾抑制劑為金合歡基轉移酶抑制劑；優選地，該二型蛋白質二香葉基化修飾途徑抑制劑為二香葉基焦磷酸抑制劑；或者優選地，該二型蛋白質二香葉基化修飾途徑抑制劑為香葉基焦磷酸合成酶1抑制劑及/或二型二香葉基轉移酶抑制劑； 優選地，該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種。
  2. 一種HMG-CoA還原酶抑制劑用於製備α病毒抗腫瘤增效劑或耐藥逆轉劑的用途；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為抑制HMG-CoA還原酶活性的物質、或降解HMG-CoA還原酶的物質、或降低HMG-CoA還原酶水平的基因工具、或它們的任意組合；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑的物質選自化合物；更優選地，該化合物選自他汀類化合物；優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、匹伐他汀鈣；更優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：氟伐他汀、阿伐他汀；更優選地，該氟伐他汀的結構式如式I所示： 更優選地，該阿伐他汀的結構式如式II所示： 或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種； 還更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑具有如下所示的序列：SEQ ID No：1；優選地，該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種。
  3. 一種金合歡基轉移酶抑制劑用於製備α病毒抗腫瘤增效劑或耐藥逆轉劑的用途；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為抑制金合歡基轉移酶活性的物質、或降解金合歡基轉移酶的物質、或降低金合歡基轉移酶水平的基因工具；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自喹啉酮類、苯并二氮罩類、芳基吡咯類中的一或幾種；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：L-70472、J-104135、A-166120、曼怒黴素(Manumycin)、毛殼孢酸；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；更優選地，該肽類抑制劑為短肽；更優選地，該短肽為三肽、四肽、五肽、六肽、七肽或八肽；還更優選地，該肽類抑制劑選自CVFM及/或CIFM；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277； 優選地，該替吡法尼(Tipifarnib)的結構式如式III所示： 優選地，該FTI277的結構式如式IV所示： 或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA、核酶中的一種或幾種；更優選地，所說的金合歡基轉移酶抑制劑選擇金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑；還更優選地，該金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑具有如下所示的序列 之一：SEQ ID No：2和SEQ ID No：3；優選地，該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種。
  4. 一種二香葉基轉移酶抑制劑用於製備α病毒抗腫瘤增效劑或耐藥逆轉劑的用途；該二香葉基轉移酶為二型二香葉基轉移酶；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為抑制二香葉基轉移酶活性的物質、或降解二香葉基轉移酶的物質、或降低二香葉基轉移酶水平的基因工具、或它們的任意組合；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑的選自化合物，或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該二香葉基轉移酶選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；優選地，該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種。
  5. 一種治療腫瘤的藥物組合物，包含： (a)甲羥戊酸代謝途徑抑制劑；優選地，該甲羥戊酸代謝途徑抑制劑選自HMG-CoA還原酶抑制劑、金合歡基轉移酶抑制劑、二香葉基轉移酶抑制劑中的至少一種；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為抑制HMG-CoA還原酶活性的物質、或降解HMG-CoA還原酶的物質、或降低HMG-CoA還原酶水平的基因工具、或它們的任意組合；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自化合物；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自他汀類化合物；優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、匹伐他汀鈣；更優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：氟伐他汀、阿伐他汀；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA、 DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA、核酶中的一種或幾種；還更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑具有如下所示的序列：SEQ ID No：1；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為抑制金合歡基轉移酶活性的物質、或降解金合歡基轉移酶的物質、或降低金合歡基轉移酶水平的基因工具；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑物質選自喹啉酮類，苯并二氮 類，芳基吡咯類，中的一或幾種；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：L-70472、J-104135、A-166120、曼怒黴素(Manumycin)、毛殼孢酸；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；更優選地，該肽類抑制劑為短肽；更優選地，該短肽為三肽、四肽、五肽、六肽、七肽或八肽；還更優選地，該肽類抑制劑選自CVFM及/或CIFM；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑 化物、互變異構物、同分異構物：替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA、DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA、核酶中的一種或幾種；更優選地，所說的金合歡基轉移酶抑制劑選擇金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑；還更優選地，該金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑具有如下所示的序列之一：SEQ ID No：2和SEQ ID No：3；該二香葉基轉移酶為二型二香葉基轉移酶；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為抑制二香葉基轉移酶活性的物質、或降解二香葉基轉移酶的物質、或降低二香葉基轉移酶水平的基因工具、或它們的任意組合；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑的選自化合物；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料； 或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該二香葉基轉移酶選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；(b)α病毒；優選地，該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種。
  6. 一種藥品套組，包含：(a)甲羥戊酸代謝途徑抑制劑；優選地，該甲羥戊酸代謝途徑抑制劑選自HMG-CoA還原酶抑制劑、金合歡基轉移酶抑制劑、二香葉基轉移酶抑制劑中的至少一種；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為抑制HMG-CoA還原酶活性的物質、或降解HMG-CoA還原酶的物質、或降低HMG-CoA還原酶水平的基因工具、或它們的任意組合；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自化合物；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自他汀類化合物；優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、匹伐他汀鈣；更優選地， 該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：氟伐他汀、阿伐他汀；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；還更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑具有如下所示的序列：SEQ ID No：1；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為抑制金合歡基轉移酶活性的物質、或降解金合歡基轉移酶的物質、或降低金合歡基轉移酶水平的基因工具；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自喹啉酮類，苯并二氮 類和芳基吡咯類中的一或幾種；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：L-70472、J-104135、A-166120、曼 怒黴素(Manumycin)、毛殼孢酸；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；更優選地，該肽類抑制劑為短肽；更優選地，該短肽為三肽、四肽、五肽、六肽、七肽或八肽；還更優選地，該四肽抑制劑選自CVFM及/或CIFM；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物之一、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；更優選地，所說的金合歡基轉移酶抑制劑選擇金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑；還更優選地，該金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑具有如下所示的序列之一：SEQ ID No：2和SEQ ID No：3；該二香葉基轉移酶為二型二香葉基轉移酶；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為抑制二香葉基轉移酶活性的物質、或降解二香葉基轉移酶的物質、或降低二香葉基轉移酶水平的基因工具、或它們的任意組合； 優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑的選自化合物，或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該二香葉基轉移酶選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；(b)α病毒；優選地，該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種；優選地，該藥物組合物包含獨立包裝的甲羥戊酸代謝途徑蛋白抑制劑及獨立包裝的α病毒；優選地，該藥物組合物還包含藥學上可接受的載體；更優選地，該載體優選地選自凍乾粉針、注射劑、片劑、膠囊、試劑盒或貼劑。
  7. 一種甲羥戊酸代謝途徑抑制劑及α病毒的組合用於製備治療腫瘤藥物的用途；該α病毒選自M1病毒和給塔病毒中的至少一種；優選地，該甲羥戊酸代謝途徑抑制劑選自HMG-CoA還原酶抑制劑、金合歡基轉移酶抑制劑、二香葉基轉移酶中的至少一種；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為抑制HMG-CoA還原酶活性的物質、或降解HMG-CoA還原酶的物質、或降低HMG-CoA還原酶水平的 基因工具、或它們的任意組合；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自化合物；優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自他汀類化合物；優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：普伐他汀、氟伐他汀、洛伐他汀、辛伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、羅伐他汀、匹伐他汀鈣；更優選地，該他汀類化合物選自以下化合物中的至少一種或其具有HMG-CoA還原酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：氟伐他汀、阿伐他汀；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑選自siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；還更優選地，該HMG-CoA還原酶抑制劑具有如下所示的序列之一：SEQ ID No：1；優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為抑制金合歡基轉移酶活性的物質、或降解金合歡基轉移酶的物質、或降低金合歡基轉移酶水平的基因工具； 優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自喹啉酮類、苯并二氮 類、芳基吡咯類中的一或幾種；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：L-70472、J-104135、A-166120、曼怒黴素(Manumycin)、毛殼孢酸；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；更優選地，該肽類抑制劑為短肽；更優選地，該短肽為三肽、四肽、五肽、六肽、七肽或八肽；還更優選地，該肽類抑制劑選自CVFM及/或CIFM；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自以下化合物中的至少一種或其具有金合歡基轉移酶抑制作用的衍生物、或其藥學上可接受的鹽、溶劑化物、互變異構物、同分異構物：替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因剔除材料；或者優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該金合歡基轉移酶抑制劑選自siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種；更優選地，所說的金合歡基轉移酶抑制劑選擇金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑； 還更優選地，該金合歡基轉移酶亞基FNTB抑制劑具有如下所示的序列之一：SEQ ID No：2和SEQ ID No：3；該二香葉基轉移酶為二型二香葉基轉移酶；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為抑制二香葉基轉移酶活性的物質、或降解二香葉基轉移酶的物質、或降低二香葉基轉移酶水平的基因工具、或它們的任意組合；優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑的選自化合物，或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自抗體、抗體功能性片段、肽類、和擬肽類中的一種或幾種；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑為基因干擾、基因編輯、基因沉默或基因敲除材料；或者優選地，該二香葉基轉移酶抑制劑選自：DNA、RNA、PNA和DNA-RNA-雜合體中的一種或幾種；更優選地，該二香葉基轉移酶選自：siRNA、dsRNA、miRNA、shRNA和核酶中的一種或幾種。
  8. 如請求項1至7中任一項所述之用途/組合物/藥品套組，其中該甲羥戊酸代謝途徑抑制劑為替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀和阿伐他汀中的一種或幾種。
  9. 如請求項1至7中任一項所述之用途/組合物/藥品套組，其中該腫瘤為實體瘤或血液瘤；優選地，該實體瘤為肝癌、結直腸癌、膀胱癌、乳腺癌、子宮頸癌、前列腺癌、膠質瘤、黑色素瘤、胰腺癌、鼻咽癌、肺癌或胃 癌；更優選地，該腫瘤為對α病毒不敏感的腫瘤。
  10. 如請求項5或6任一項所述之組合物/藥品套組，其中該替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀與α病毒的配比為：0.01~200mg：10 3~10 9PFU；優選0.1~200mg：10 4~10 9PFU；進一步優選0.1~100mg：10 5~10 9PFU；進一步優選地，使用劑量為：替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀使用範圍為0.01mg/kg至200mg/kg，同時α病毒使用力價為感染複數(MOI)從10 3至10 9(PFU/kg)；優選替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀使用範圍為0.1mg/kg至200mg/kg，同時α病毒使用力價為MOI從10 4至10 9(PFU/kg)；更優選替吡法尼(Tipifarnib)、FTI277、氟伐他汀或阿伐他汀使用範圍為0.1mg/kg至100mg/kg，同時α病毒使用力價為MOI從10 5至10 9(PFU/kg)。
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