TW201841918A - 作為tnf活性調節劑之稠合五環咪唑衍生物 - Google Patents

Abstract

本發明係關於如本文中所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其為人類TNFα活性之強效調節劑，因此有利於各種人類疾病之治療及/或預防，包括自體免疫及發炎病症；神經及神經退化性病症；疼痛及感受傷害性病症；心臟血管病症；代謝病症；眼病；及腫瘤病症。

Description

作為TNF活性調節劑之稠合五環咪唑衍生物

本發明係關於特定類別之稠合五環咪唑衍生物及其於療法中之用途。更特定言之，本發明係關於藥理學活性經取代之融合五環苯并咪唑衍生物。此等化合物發揮TNFα之信號傳導調節劑之作用，且因此可有利地作為藥劑，尤其用於治療有害炎症及自身免疫病症、神經及神經退化性病症、疼痛及感受傷害性病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病及腫瘤病症。

TNFα為共享調節細胞存活期及細胞死亡之主要功能的蛋白質之腫瘤壞死因子(TNF)超家族之原型成員。TNF超家族之所有已知成員常見之一個結構性特徵為形成結合於且活化特定TNF超家族受體之三聚複合物。作為實例，TNFα以可溶及跨膜形式存在且經由稱為TNFR1及TNFR2之具有不同功能性端點之兩種受體傳遞信號。 能夠調節TNFα活性之各種產品已可商購。所有皆已批准用於治療發炎性及自體免疫性病症，諸如類風濕性關節炎及克羅恩氏病(Crohn's disease)。所有當前已批准之產品為大分子且藉由抑制人類TNFα與其受體之結合來起作用。典型大分子TNFα抑制劑包括抗TNFα抗體；及可溶性TNFα受體融合蛋白。市售抗TNFα抗體之實例包括完全人類抗體，諸如阿達木單抗(adalimumab)(Humira®)及戈利木單抗(golimumab) (Simponi®)；嵌合抗體，諸如英利昔單抗(infliximab)(Remicade®)，及聚乙二醇化Fab'片段，諸如聚乙二醇化賽妥珠單抗(certolizumab pegol) (Cimzia®)。市售可溶性TNFα受體融合蛋白之實例為依那西普(etanercept)(Enbrel®)。 TNF超家族成員，包括TNFα本身，與多種生理學及病理學功能有關，咸信該等生理學及病理學功能在具有顯著醫學重要性的多種病狀中起作用(參見例如M.G. Tansey及D.E. Szymkowski,Drug Discovery Today , 2009, 14, 1082-1088；及F.S. Carneiro等人,J. Sexual Medicine , 2010, 7, 3823-3834)。

因此，作為人類TNFα活性之強效調節劑之本發明之化合物有利於治療及/或預防各種人類疾病。此等疾病包括自體免疫性及發炎性病症；神經及神經退化病症；疼痛及感受傷害性病症；心臟血管病症；代謝病症；眼病；及腫瘤病症。 除作為人類TNFα信號傳導之強效調節劑之活性以外，本發明之化合物亦在其針對不良心臟血管副作用之可靠性方面具有顯著優點(如本文中所描述之標準hERG分析法中之弱活性證明)。本發明之化合物亦顯示低代謝清除率，及最小的誘導藥物-藥物相互作用之傾向(如由細胞色素P450酶(包括CYP3A4)之弱抑制證明)。 此外，本發明之化合物之益處可為作為藥理學標準用於研發新穎生物測試及找尋新穎藥理學藥劑。因此，在一個實施例中，本發明之化合物可適用作用於偵測藥理學活性化合物之分析法中之放射性配位體。在一個替代性實施例中，本發明之某些化合物可適用於與螢光團偶合以提供可用於偵測藥理學活性化合物之分析法(例如螢光極化分析法)中之螢光結合物。 WO 2013/186229係關於經取代之苯并咪唑衍生物，其為TNFα之信號傳導之調節劑。 WO 2015/086525係關於融合三環咪唑衍生物，其為TNFα之信號傳導之調節劑。 WO 2016/050975係關於融合五環咪唑衍生物，其為TNFα之信號傳導之調節劑。 本發明提供式(I)化合物，或其醫藥學上可接受之鹽：其中 X表示N或C-F； R¹ 表示氫或甲基； R² 表示氫、甲基或三氟甲基；及 R³ 表示氫、氰基、羥基或羥基甲基。 本發明之化合物涵蓋於WO 2016/050975之一般範疇內。然而，其中無如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之特定揭示內容。 本發明亦提供如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於療法。 本發明亦提供如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其用於治療及/或預防指示投與TNFα功能之調節劑之病症。 在另一態樣中，本發明提供如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療及/或預防發炎性或自體免疫性病症、神經或神經退化性病症、疼痛或感受傷害性病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病或腫瘤病症。 本發明亦提供如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療及/或預防指示投與TNFα功能之調節劑的病症之藥劑。 在另一態樣中，本發明提供一種如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造適用以治療及/或預防發炎性或自體免疫性病症、神經或神經退化性病症、疼痛或感受傷害性病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病或腫瘤病症之藥劑。 本發明亦提供一種用於治療及/或預防指示投與TNFα功能之調節劑之病症之方法，其包含向需要此類治療之患者投與有效量之如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 在另一態樣中，本發明提供一種用於治療及/或預防發炎性或自體免疫性病症、神經或神經退化性病症、疼痛或感受傷害性病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病或腫瘤病症之方法，其包含向需要此類治療之患者投與有效量之如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。 對於藥品，式(I)化合物之鹽將為醫藥學上可接受之鹽。然而，其他鹽可適用於製備式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。關於醫藥學上可接受之鹽之選擇及製備之標準原理描述於例如Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use , P.H. Stahl & C.G. Wermuth編, Wiley-VCH, 2002中。 在式(I)化合物具有一或多個不對稱中心之情況下，其可相應地以對映異構體之形式存在。在本發明之化合物具有兩個或更多個不對稱中心之情況下，其可另外以非對映異構體之形式存在。應理解，本發明擴大所有此類對映異構體及非對映異構體及其任何比例之混合物(包括外消旋體)之用途。除非另有規定或展示，否則式(I)及下文所示之式意欲表示所有個別立體異構體及其所有可能之混合物。 應理解，式(I)或下文所示之式中所存在之各個別原子實際上可以其天然存在之同位素中之任一者形式存在，其中最豐富之同位素較佳。因此，作為實例，在式(I)或下文所示之式中所存在之各個別氫原子可以¹ H、² H (氘；D)或³ H (氚；T)原子，較佳¹ H之形式存在，。類似地，作為實例，式(I)或下文所示之式中所存在之各個別碳原子可以¹² C、¹³ C或¹⁴ C原子，較佳¹² C之形式存在。

在第一實施例中，X表示N。在第二實施例中，X表示C-F。 在第一實施例中，R¹ 表示氫。在第二實施例中，R¹ 表示甲基。 在第一實施例中，R² 表示氫。在第二實施例中，R² 表示甲基。在第三實施例中，R² 表示三氟甲基。 適合地，R² 表示氫或甲基。 適合地，R² 表示氫或三氟甲基。 在第一實施例中，R³ 表示氫。在第二實施例中，R³ 表示氰基。在第三實施例中，R³ 表示羥基。在第四實施例中，R³ 表示羥基甲基(包括 -CD₂ OH)。 適合地，R² 及R³ 皆表示氫。 適合地，R² 表示甲基，且R³ 表示氫。 適合地，R² 表示甲基，且R³ 表示氰基。 適合地，R² 表示甲基，且R³ 表示羥基。 適合地，R² 表示甲基，且R³ 表示羥基甲基(包括-CD₂ OH)。 適合地，R² 表示三氟甲基，且R³ 表示羥基。 本發明之化合物之特定子類包括式(IIA)及(IIB)之化合物，及其醫藥學上可接受之鹽： 其中X、R¹ 、R² 及R³ 如上文所定義。 本發明之特定新穎化合物包括在隨附實例中描述製備的化合物及其醫藥學上可接受之鹽中之每一者。 本發明之化合物有利於治療及/或預防多種人類疾病。此等疾病包括自體免疫性及發炎性病症；神經及神經退化病症；疼痛及感受傷害性病症；心臟血管病症；代謝病症；眼病；及腫瘤病症。 發炎性及自體免疫性病症包括全身性自體免疫性病症、自體免疫性內分泌病症及器官特異性自體免疫性病症。全身性自體免疫性病症包括全身性紅斑性狼瘡症(SLE)、牛皮癬、牛皮癬性關節病、脈管炎、發炎性肌病(包括多發性肌炎、皮肌炎及包涵體肌炎)、硬皮病、多發性硬化、全身性硬化症、僵直性脊椎炎、類風濕性關節炎、非特異性發炎性關節炎、青少年發炎性關節炎、青少年特發性關節炎(包括其少關節及多關節形式)、慢性疾病貧血(ACD)、斯蒂爾病(Still's disease)(青少年及/或成年人發作)、貝西氏病(Behçet's disease)及休格連氏症候群(Sjögren's syndrome)。自體免疫性內分泌病症包括甲狀腺炎。器官特異性自體免疫性病症包括阿狄森氏病(Addison's disease)、溶血性或惡性貧血、急性腎損傷(AKI；包括順鉑誘導之AKI)、糖尿病腎病變(DN)、阻塞性尿路病(包括順鉑誘導之阻塞性尿路病)、絲球體腎炎(包括古巴士德氏症候群(Goodpasture's syndrome)、免疫複合體介導之絲球體腎炎及抗中性白血球細胞質抗體(ANCA)相關絲球體腎炎)、狼瘡性腎炎(LN)、微小改變疾病(minimal change disease)、格雷夫氏病(Graves' disease)、特發性血小板減少性紫癜、發炎性腸病(包括克羅恩氏病、潰瘍性結腸炎、不確定性結腸炎及儲袋炎)、天疱瘡、異位性皮膚炎、自體免疫肝炎、原發性膽汁性肝硬化、自體免疫性肺炎、自體免疫性心臟炎、重症肌無力、自發性不孕症、骨質疏鬆、骨質減少、腐蝕性骨病、軟骨炎、軟骨變性及/或破壞、纖維化病症(包括肝及肺纖維化之各種形式)、哮喘、鼻炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、呼吸窘迫症候群、敗血症、發熱、肌肉萎縮症(包括杜氏肌營養不良(Duchenne muscular dystrophy))、器官移植排斥(包括腎臟同種異體移植排斥反應)、鞏膜炎(包括巨大細胞動脈炎鞏膜炎)、高安氏動脈炎(Takayasu arteritis)、化膿性汗腺炎、壞疽性膿皮病、類肉瘤病、多肌痛風濕病及軸脊椎關節炎。 神經及神經退化性病症包括阿茲海默氏病(Alzheimer's disease)、帕金森氏病(Parkinson's disease)、亨廷頓氏病(Huntington's disease)、局部缺血、中風、肌肉萎縮性側索硬化、脊髓損傷、頭部損傷、癲癇發作及癲癇症。 心臟血管病症包括血栓、心肥大、高血壓、心臟之不規則收縮性(例如在心臟衰竭期間)及性功能障礙(包括勃起功能障礙及女性性功能障礙)。TNFα功能之調節劑亦可用於治療及/或預防心肌梗塞(參見J.J. Wu等人,JAMA , 2013, 309, 2043-2044)。 代謝病症包括糖尿病(包括胰島素依賴型糖尿病及青少年糖尿病)、血脂異常及代謝症候群。 眼病包括視網膜病(包括糖尿病性視網膜病變、增生性視網膜病、非增生性視網膜病及早產兒視網膜病)、黃斑水腫(包括糖尿病性黃斑水腫)、老年性黃斑變性(ARMD)、血管形成(包括角膜血管形成及新血管生成)、視網膜靜脈栓塞及各種形式之葡萄膜炎(包括虹膜炎)及角膜炎。 腫瘤病症，其可為急性或慢性的，包括增生性病症，尤其癌症及癌症相關之併發症(包括骨胳併發症、惡病體質及貧血)。特定癌症類別包括血液惡性病(包括白血病及淋巴瘤)及非血液惡性病(包括硬瘤癌症、肉瘤、腦膜瘤、多形性膠質母細胞瘤、神經母細胞瘤、黑素瘤、胃癌及腎細胞癌)。慢性白血病可為骨髓或淋巴性的。白血病種類包括淋巴母細胞性T細胞白血病、慢性骨髓性白血病(CML)、慢性淋巴球性/淋巴性白血病(CLL)、毛細胞白血病、急性淋巴母細胞性白血病(ALL)、急性骨髓性白血病(AML)、骨髓發育不良症候群、慢性嗜中性白血病、急性淋巴母細胞性T細胞白血病、漿細胞瘤、免疫母細胞大細胞白血病、套細胞白血病、多發性骨髓瘤、急性巨核母細胞白血病、急性巨核細胞白血病、前髓細胞白血病及紅白血病。淋巴瘤種類包括惡性淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、淋巴母細胞性T細胞淋巴瘤、伯基特氏淋巴瘤(Burkitt's lymphoma)、濾泡性淋巴瘤、MALT1淋巴瘤及邊緣區淋巴瘤。非血液惡性病之種類包括前列腺癌、肺癌、乳腺癌、直腸癌、結腸癌、淋巴結癌、膀胱癌、腎癌、胰腺癌、肝癌、卵巢癌、子宮癌、子宮頸癌、腦癌、皮膚癌、骨癌、胃癌及肌肉癌。TNFα功能之調節劑亦可用於提供TNF之強效抗癌作用之安全性(參見F.V. Hauwermeiren等人,J. Clin. Invest. , 2013, 123, 2590-2603)。 本發明亦提供一種醫藥組合物，其包含如上文所定義之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及一或多種醫藥學上可接受之載劑。 本發明之醫藥組合物可呈適用於經口、經頰、非經腸、經鼻、局部、經眼或經直腸投與之形式或適於藉由吸入或吹入投與之形式。 對於口服投藥，醫藥組合物可呈例如錠劑、口含錠或膠囊形式，其用醫藥學上可接受之賦形劑藉由習知方法製備，該等賦形劑諸如結合劑(例如預膠凝化玉米澱粉、聚乙烯吡咯啶酮或羥丙基甲基纖維素)；填充劑(例如乳糖、微晶纖維素或磷酸氫鈣)；潤滑劑(例如硬脂酸鎂、滑石或二氧化矽)；崩解劑(例如馬鈴薯澱粉或乙醇酸鈉)；或濕潤劑(例如月桂基硫酸鈉)。錠劑可藉由此項技術中熟知之方法包覆包衣。用於口服投藥之液體製劑可呈例如溶液、糖漿劑或懸浮液形式，或其可呈現為乾燥產品，在使用之前用水或其他適合媒劑復原。此類液體製劑可用醫藥學上可接受之添加劑，諸如懸浮劑、乳化劑、非水性媒劑或防腐劑，藉由習知方法製備。製劑亦可視需要含有緩衝鹽、調味劑、著色劑或甜味劑。 可適當調配用於口服投藥之製劑以得到活性化合物之控制釋放。 對於經頰給藥，組合物可呈以習知方式調配之錠劑或口含錠的形式。 式(I)化合物可經調配用於藉由注射，例如藉由快速注射或輸注非經腸投與。用於注射之調配物可以單位劑型呈現，例如玻璃安瓿或多劑量容器，例如玻璃瓶。用於注射之組合物可呈如油性或水性媒劑中之懸浮液、溶液或乳液之形式，且可含有調配劑，諸如懸浮劑、穩定劑、保持劑及/或分散劑。或者，活性成分可呈在使用之前用適合媒劑(例如無菌無熱原質水)復原之粉末形式。 除上述調配物以外，式(I)化合物亦可調配為儲槽式製劑。此類長效調配物可藉由植入或藉由肌肉內注射投與。 用於經鼻投與或藉由吸入投與，本發明之化合物宜以用於加壓封裝或噴霧器之氣霧劑噴霧呈現形式遞送，其中使用適合推進劑，例如二氯二氟甲烷、氟三氯甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他適合氣體或氣體混合物。 若需要，組合物可於可含有一或多個含有活性成分之單位劑型的封裝或分配器裝置中提供。封裝或分配裝置可隨附投藥說明書。 對於局部投與，用於本發明中之化合物宜可在含有懸浮或溶解於一或多種醫藥學上可接受之載劑中之活性組分之適合軟膏中調配。特定載劑包括例如礦物油、液體石油、丙二醇、聚氧乙烯、聚氧丙烯、乳化蠟及水。或者，用於本發明中之化合物可在含有懸浮或溶解於一或多種醫藥學上可接受之載劑中之活性組分之適合洗劑中調配。特定載劑包括例如礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、聚山梨醇酯60、鯨蠟酯蠟、鯨蠟硬脂醇、苯甲醇、2-辛基十二醇和水。 對於經眼投與，用於本發明中之化合物宜可在有或無防腐劑之情況下調配為於pH值調節之等張無菌生理食鹽水中之微粉化懸浮液，該防腐劑為諸如殺菌或殺真菌劑，例如硝酸苯汞、苯紮氯銨或乙酸氯己定。或者，對於經眼投與，化合物可在諸如礦脂之軟膏中調配。 對於經直腸投與，用於本發明中之化合物宜可調配為栓劑。此等栓劑可藉由將活性組分與適合的非刺激性賦形劑混合來製備，該賦形劑在室溫下為固體但在直腸溫度下為液體，且因此將在直腸中熔融以釋放活性組分。此類物質包括例如可可脂、蜂臘及聚乙二醇。 用於本發明中預防或治療特定病狀所需之化合物之數量將視所選化合物及待治療之患者之健康狀況而改變。然而，一般而言，對於經口或經頰投與，日劑量可在每公斤體重約10 ng至1000 mg，通常100 ng至100 mg，例如約0.01 mg至40 mg，對於非經腸投與，每公斤體重約10 ng至50 mg，且對於經鼻投與或藉由吸入或吹入投與，約0.05 mg至約1000mg，例如約0.5 mg至約1000mg之範圍內。 若需要，本發明之化合物可與另一種醫藥活性劑(例如消炎分子)共同投與。 以上式(I)化合物可藉由包含使式(III)化合物與式(IV)化合物反應之方法來製備：其中X、R¹ 、R² 及R³ 如上文所定義，L¹ 表示適合的脫離基，M¹ 表示酸部分-B(OH)₂ 或其由有機二醇(例如四甲基乙二醇、1,3-丙-二醇或新戊二醇)形成之環狀酯，且R^p 表示N- 保護基；在過渡金屬催化劑存在下；視需要接著移除N- 保護基R^p 。 脫離基L¹ 通常為鹵素原子，例如溴。N- 保護基R^p 宜表示第三丁氧基羰基(BOC)。或者，N- 保護基R^p 宜表示第三丁基亞磺醯基。 化合物(III)與(IV)之間的反應中使用之過渡金屬催化劑宜為參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)，或[1,1'-雙(二苯膦基)-二茂鐵]二氯鈀(II)，或氯(2-二環己基膦基- 2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯二苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯二苯)]鈀(II)(XPhos Pd G2)。過渡金屬催化劑可典型地與2-二環己基膦基- 2',4',6'-三異丙基聯二苯(XPhos)或四氟硼酸三環己基鏻結合使用。反應宜在磷酸鉀或碳酸鉀存在下進行。反應宜在適合的溶劑(例如環醚，諸如1,4-二噁烷，視情況與水混合)中，在高溫下進行。 當N- 保護基R^p 為Boc或第三丁基亞磺醯基時，其後續移除宜藉由用酸(例如無機酸，諸如鹽酸，或有機酸，諸如三氟乙酸)處理來實現。 以上式(IV)之中間物，其中M¹ 表示由四甲基乙二醇形成之酸部分-B(OH)₂ 之環狀酯，可藉由使雙-(頻哪醇根基)二硼與式(V)化合物反應來製備：其中L² 表示適合的脫離基；在過渡金屬催化劑存在下。 脫離基L² 典型地為鹵素原子，例如氯。 雙(頻哪醇根基)二硼與化合物(V)之間的反應中使用之過渡金屬催化劑宜為參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)，其可與2-二環己基膦基- 2',4',6'-三異丙基聯二苯(XPhos)或四氟硼酸三環己基鏻結合使用。反應宜在乙酸鉀存在下進行。反應宜在適合的溶劑(例如環醚，諸如1,4-二噁烷)中，在高溫下進行。 以上式(V)之中間物，其中R¹ 為甲基，可由相應的其中R¹ 為氫之式(V)化合物藉由與甲基鹵化物(例如碘甲烷)反應來製備。甲基化反應通常在鹼存在下進行，例如矽烷基醯胺鹼，諸如鉀雙(三甲基矽烷基)醯胺。反應宜在適合的溶劑(例如環醚溶劑，諸如四氫呋喃)中進行。 以上式(V)之中間物，其中R¹ 為氫且L² 表示氯，特定揭示於WO 2016/050975中，亦為以上式(IV)之中間物，其中R¹ 為氫且M¹ 表示4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基。 當其不可商購時，式(III)之起始物質可藉由與隨附實例中描述之方法類似之方法或藉由此項技術中熟知的標準方法製備。 當由上述任一種用於製備本發明之化合物之方法獲得產物混合物時，所需產物可在適當階段藉由諸如製備型HPLC；或管柱層析之習知方法利用例如二氧化矽及/或氧化鋁以及適當溶劑系統自其分離。 當上述方法產生立體異構體之混合物時，此等異構體可藉由習知技術分離。特定言之，當需要獲得特定對映異構體時，此可使用用於解析對映異構體之任何適合的習知程序由對映異構體之相應混合物產生。因此，舉例而言，非對映異構衍生物，例如鹽，可藉由對映異構體(例如外消旋體)之混合物與適合的對掌性化合物(例如對掌性酸或鹼)之反應產生。接著，非對映異構體可藉由任何適宜方式分離，例如藉由結晶，且在非對映異構體為鹽之情況下例如藉由用酸處理來回收所需對映異構體。在另一種解析過程中，可使用對掌性HPLC分離外消旋體。此外，若需要，特定對映異構體可藉由在上述方法中之一者中使用適當對掌性中間物獲得。或者，特定對映異構體可藉由進行對映異構體特異性酶促生物轉化，例如使用酯酶之酯水解，且接著由未反應酯對映體純化僅對映異構純之水解之酸而獲得。當需要獲得特定幾何異構體時，亦可使用層析、再結晶及其他習知分離程序。或者，非所需對映異構體可根據熟習此項技術者已知之方法或根據隨附實例中所述之方法在酸或鹼存在下消旋化為所需對映異構體。 在任何以上合成序列期間，可能必需及/或需要保護任何相關分子上之敏感性或反應性基團。此可借助於習知保護基來實現，諸如Protective Groups in Organic Chemistry , J.F.W. McOmie編, Plenum Press, 1973；及T.W. Greene & P.G.M. Wuts,Protective Groups in Organic Synthesis , John Wiley & Sons, 第3版, 1999中所描述之保護基。可在任何適宜後續階段利用此項技術已知之方法移除保護基。 本發明之化合物強力中和稱為HEK-Blue™ CD40L之市售HEK-293衍生之報導子細胞株中TNFα之活性。此為在與五個NF-κB結合位點融合之IFNβ最小啟動子控制下表現SEAP (分泌胚胎鹼性磷酸酶)之穩定的HEK-293轉染細胞株。藉由此等細胞分泌SEAP係藉由TNFα以濃度依賴性方式來刺激。當在HEK-293生物分析法(在本文中亦稱為報導基因分析法)中測試時，本發明之化合物呈現10 nM或更好的IC₅₀ 值(熟習此項技術者將瞭解，更低的 IC₅₀ 數值表示活性更高的 化合物)。 當在本文中所描述之標準hERG分析法中測試時，本發明之化合物顯示弱活性(其指示針對不良心臟血管副作用之可靠性)。實情為，當在該分析法中測試時，本發明之化合物呈現至少5 μM之IC₅₀ 值(熟習此項技術者將瞭解，在hERG分析法中，較高的 IC₅₀ 數值表示優良的 化合物，亦即化合物不大可能引起不良心臟血管副作用)。報導基因分析法 抑制 TNFα 誘導之 NF-κB 活化 藉由TNFα刺激HEK-293細胞可引起NF-κB路徑活化。用於測定TNFα活性之報導子細胞株購自InvivoGen。HEK-Blue™ CD40L為在與五個NF-κB結合位點融合之IFNβ最小啟動子控制下表現SEAP (分泌胚胎鹼性磷酸酶)之穩定的HEK-293轉染細胞株。藉由此等細胞分泌SEAP係藉由TNFα以濃度依賴性方式來刺激，其中人類TNFα之EC₅₀ 為0.5 ng/mL。由10 mM DMSO儲備液稀釋化合物(最終分析濃度0.3% DMSO)，產生10點3倍連續稀釋曲線(例如30,000 nM至2 nM最終濃度)。用TNFα預培育經稀釋之化合物60分鐘，隨後添加至384孔微量滴定盤中且培育18小時。分析盤中之最終TNFα濃度為0.5 ng/mL。使用比色受質(例如QUANTI-Blue™或HEK-Blue™偵測培養基(InvivoGen))，在上清液中測定SEAP活性。化合物稀釋物之抑制百分比經計算在DMSO對照且最大抑制(藉由過量對照化合物)與使用ActivityBase中之XLfit™ (4參數對數模型)計算之IC₅₀ 值之間。 當在報導基因分析法中測試時，發現隨附實例之化合物皆呈現10 nM或更好的IC₅₀ 值。 當在報導基因分析法中測試時，隨附實例之化合物呈現通常在0.01 nM至10 nM範圍內之IC₅₀ 值。hERG 分析法 使用自動平坦膜片鉗電生理學工作台，在功能上評估化合物在心肌hERG通道(Kv11.1)處之藥理學活性。穩定表現人類hERG通道之CHO細胞根據製造商說明在適合的選擇抗生素之永久性壓力下生長(hERG-Duo細胞，B'SYS GmbH, Switzerland)。在低於80%匯合時收集細胞，懸浮於無血清培養基中且自動分配至多孔記錄盤以用於QPatch HTX工作台(Sophion, BiolinScientific AB, Denmark)上之全細胞電壓夾記錄。細胞外記錄緩衝液之組成為(mM)：NaCl，150；KCl，4；CaCl₂ ，2；MgCl₂ ，1；HEPES，10；及葡萄糖，10；用NaOH調節至pH 7.4。細胞內緩衝液含有(mM)：KCl，120；CaCl₂ ，5；MgCl₂ ，2；EGTA，10；HEPES，10；及Mg-ATP，4；用KOH調節至pH 7.2。用於激活hERG電流之電壓方案由以下組成：歷時5秒之自-80 mV保持點位至+20 mV之第一去極化步驟，接著達到-50 mV之第二再極化步驟。循環時間為15秒，在室溫下進行記錄且用由第二再極化步驟引發之峰尾電流評估藥物作用。關於藥理學，在DMSO中製備測試物品之儲備溶液(10 mM)。藉由首先在DMSO中以1:3連續稀釋起始10 mM儲備液，且接著在含有0.06% Pluronic F-68 (Gibco/Thermofischer, France)之細胞外記錄培養基中以1:333稀釋6種中間工作溶液中之每一者來在聚丙烯微滴定盤中製備6點濃度範圍。測試物品之最終濃度(亦即0.12 µM、0.37 µM、1.1 µM、3.3 µM、10 µM及30 µM)以遞增順序累積施用於細胞。在各記錄序列結束時添加陽性對照(特非那定(terfenadine)，10 µM)。離線分析hERG尾電流振幅之時程，視需要進行視情況選用之漏電流減法及電流衰減之補償。藉由擬合在各暴露週期結束時量測之電流幅度且用四參數S形方程式相對於前藥物基線正規化來獲得半最大抑制濃度(IC₅₀ )。 當在hERG分析法測試時，發現隨附實例之化合物皆呈現至少5 μM之IC₅₀ 值。特定言之，實例6之化合物呈現約8 μM之IC₅₀ 值；實例9之化合物呈現約20 μM之IC₅₀ 值；且實例1-5、7、8及10-16之化合物皆呈現＞30 μM之IC₅₀ 值。 以下實例說明本發明之化合物之製備方法。實例 縮寫 DCM：二氯甲烷 EtOAc：乙酸乙酯 MeOH：甲醇 THF：四氫呋喃 DMSO：二甲亞碸 DMF：N, N- 二甲基甲醯胺 TBAF：氟化四-正丁基銨 LDA：二異丙胺基鋰 戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)：1,1,1-參(乙醯氧基)-1,1-二氫-1,2-苯并碘氧雜環戊-3-(1H )-酮 XPhos：2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基聯二苯 XPhos Pd G2：氯(2-二環己基膦基-2',4',6'-三異丙基-1,1'-聯二苯)[2-(2'-胺基-1,1'-聯二苯)]鈀(II) r.t.：室溫 h：小時 M：質量 RT：滯留時間 HPLC：高效液相層析 LCMS：液相層析質譜 ES+：電噴霧正電離分析條件 所有NMR譜圖係在250 MHz、300 MHz、400 MHz或500 MHz下獲得。 涉及空氣或水分敏感性試劑之所有反應係在氮氣氛圍下使用無水溶劑及玻璃器皿進行。 LCMS 資料測定 方法 1 管柱：X-Bridge C18 Waters 2.1 × 20 mm，2.5 μm管柱 移動相A：含10 mM甲酸銨之水 + 0.1%氨溶液 移動相B：乙腈 + 5%水 + 0.1%氨溶液 梯度程式：流動速率泵1:1 mL/min；流動速率泵2：0.5 mL/min 泵1： 泵2： 時間 A% B% 時間 A% B% 0.00 95.10 4.90 0.10 5.00 95.00 4.00 5.00 95.00 1.00 5.00 95.00 5.00 5.00 95.00 1.10 95.00 5.00 5.10 95.10 4.90 方法 2 管柱：X-Bridge C18 Waters 2.1 × 20 mm，2.5 μm管柱 移動相A：含10 mM甲酸銨之水 + 0.1%甲酸 移動相B：乙腈 + 5%水 + 0.1%甲酸 梯度程式：流動速率泵1:1 mL/min；流動速率泵2：0.5 mL/min 泵1： 泵2： 時間 A% B% 時間 A% B% 0.00 95.00 5.00 0.10 5.00 95.00 4.00 5.00 95.00 1.00 5.00 95.00 5.00 5.00 95.00 1.10 95.00 5.00 5.10 95.00 5.00 方法 3 管柱：X-Bridge C18 Waters 2.1 × 20 mm，2.5 μm管柱 移動相A：含10 mM甲酸銨之水 + 0.1%氨溶液 移動相B：乙腈 + 5%水 + 0.1%氨溶液 梯度程式：流動速率1 mL/min 時間 A% B% 0.00 96.00 4.00 1.50 5.00 95.00 2.25 5.00 95.00 2.50 96.00 4.00 方法 4 管柱：X-Bridge C18 Waters 2.1 × 20 mm，2.5 μm管柱 移動相A：含10 mM甲酸銨之水 + 0.1%氨溶液 移動相B：乙腈 + 5%水 + 0.1%氨溶液 梯度程式：流動速率1 mL/min 時間 A% B% 0.00 96.00 4.00 4.00 5.00 95.00 5.00 5.00 95.00 5.10 96.00 4.00 方法 5 管柱：X-Bridge C18 Waters 2.1 × 20 mm，2.5 μm管柱 移動相A：含10 mM甲酸銨之水 + 0.1%氨溶液 移動相B：乙腈 + 5%水 + 0.1%氨溶液 梯度程式：流動速率1 mL/min 時間 A% B% 0.00 94.00 6.00 1.50 5.00 95.00 2.25 5.00 95.00 2.50 94.00 6.00 方法 6 Agilent Technologies 1260 Infinity 零件 型號 LC/MSD G6130B 脫氣器 G4225A BinPump G1312B HiP ALS (自動取樣器) G1367E 閥驅動器 G1170A TCC G1316A DAD VL G1315D 界面 5900E裝置 Agilent 1260二元泵：G1312B，脫氣器；自動取樣器，ColCom。DAD：Agilent G1315D，220-320 nm。MSD：Agilent LC/MSD G6130B ESI，正/負100-800，ELSD Alltech 3300。 氣體流動速率：1.5毫升/分鐘；氣體溫度：40℃；管柱：Waters XSelect^TM C18，30 × 2.1 mm,3.5 µm；溫度：35℃；流動速率：1毫升/分鐘；梯度：t₀ =5% A，t_1.6min =98% A，t_3.0min =98% A；後處理時間：1.3分鐘；溶離劑A：含0.1%甲酸之乙腈；溶離劑B：含0.1%甲酸之水。 方法 7 Agilent Technologies 1260 Infinity 零件 型號 LC/MSD G6130B 脫氣器 G4225A BinPump G1312B HiP ALS (自動取樣器) G1367E 閥驅動器 G1170A TCC G1316A DAD VL G1315D 界面 5900E裝置 Agilent 1260二元泵：G1312B，脫氣器；自動取樣器，ColCom。DAD：安捷倫G1315D，220-320 nm。MSD：Agilent LC/MSD G6130B ESI，正/負100-800，ELSD Alltech 3300。 氣體流動速率1.5 毫升/分鐘；氣體溫度：40℃；管柱：Waters XSelect^TM C18，50 × 2.1 mm，3.5 µm；溫度：35℃；流動速率：0.8毫升/分鐘；梯度：t₀ =5% A，t_3.5min =98% A，t_6.0min =98% A；後處理時間：2.0分鐘；溶離劑A：含0.1%甲酸之乙腈；溶離劑B：含0.1%甲酸之水。 方法 8 管柱：Kinetex Core-Shell C18，50 × 2.1 mm，由Phenomenex 『SecurityGuard』管柱保護之5 µm管柱 移動相A：含0.1%甲酸之水 移動相B：含0.1%甲酸之乙腈 梯度程式：流動速率1.2 mL/min 管柱溫度：40℃ 時間 A% B% 0.00 95 5 1.20 0 100 1.30 0 100 1.31 95 5 方法 9 管柱：Phenomenex Kinetex Core-Shell C8，50 × 2.1 mm，由Phenomenex 『SecurityGuard』管柱保護之5 µm管柱 移動相A：含0.1%甲酸之水 移動相B：含0.1%甲酸之乙腈 梯度程式：流動速率1.2 mL/min 管柱溫度：40℃ 時間 A% B% 0.00 95 5 1.83 0 100 2.25 0 100 2.26 95 5 方法 10 管柱：Phenomenex Gemini C18，2.0 mm × 50 mm，3 µm管柱 移動相A：2 mM碳酸氫銨，pH 10 移動相B：乙腈 梯度程式：流動速率1.0毫升/分鐘 管柱溫度：60℃ 時間 A% B% 0.00 99 1 1.80 0 100 2.10 0 100 2.30 99 1 方法 11 管柱：Phenomenex Kinetex-XB C18，2.1 mm ×100 mm，1.7 µm管柱 移動相A：含0.1%甲酸之水 移動相B：含0.1%甲酸之乙腈 梯度程式：流動速率0.6 mL/min 管柱溫度：40℃ 時間 A% B% 0.00 95 0 5.30 0 100 5.80 0 100 5.82 95 5 GCMS 資料測定 方法 12 Agilent Technologies 零件 型號 5973 MSD G2577A 自動取樣器 G2614A 7683B注射器 G2913A 6890N GC系統 G1530N 儀器：GC：Agilent 6890N，FID：偵測溫度：300℃及MS：5973 MSD，EI-正性，偵測溫度：280℃；質量範圍：50-550；管柱：RXi-5MS 20 m，ID 180 µm，df 0.18 µm；平均速度：50 cm/s；注射體積：1 µL；注射器溫度：250℃；裂解率：20/1；載氣：He；初始溫度：100℃；初始時間：1.5分鐘；溶劑延遲：1.3分鐘；速率：75℃/分鐘；最終溫度：250℃；最終時間：2.5分鐘。中間物 1 (R )-N -(3- 氰基 -3- 甲基環亞丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 向溶解於THF (35 mL)中之1-甲基-3-側氧基丁烷甲腈(532 mg，4.63 mmol)中相繼添加(R)-(+)-2-甲基-2-丙烷亞磺醯胺(570 mg，4.61 mmol)及乙醇鈦(IV)(1.8 mL，8.7 mmol)。在氮氣下，在攪拌下，在75℃下加熱反應混合物隔夜，接著冷卻至室溫。添加飽和碳酸氫鈉水溶液(50 mL)。反應混合物經由矽藻土過濾，用EtOAc洗滌。分離有機層且依序用水(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌。分離有機層且經由相分離器過濾，接著在真空中濃縮有機層。所得橙色油藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100%異己烷至100% EtOAc進行梯度溶離)純化。所得稻草色油在靜置時固化，得到呈灰白色固體狀之標題化合物 (863 mg，88%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 3.95-3.59 (m, 2H), 3.60-3.36 (m, 1H), 3.25 (ddt,J 17.6, 9.8, 3.3 Hz, 1H), 1.58 (d,J 1.4 Hz, 3H), 1.16 (d,J 1.2 Hz, 9H)。中間物 2 (R )-N -[1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 )-3- 氰基 -3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使5-溴-2-碘嘧啶(1.6 g，5.62 mmol)之兩份單獨批料溶解於DCM (50 mL)及DCM (100 mL)中。單獨的反應混合物在氮氣下冷卻至-78℃，接著經5分鐘向各反應混合物中逐滴添加2.5 M正丁基鋰(2.26 mL，5.65 mmol)。在-78℃下，在氮氣下攪拌反應混合物2分鐘，隨後經由注射器向各反應混合物中緩慢添加溶解於DCM (5 mL)中之中間物 1 (1 g，4.71 mmol)。在-78℃下攪拌反應混合物2小時。在冰浴中攪拌較大(100 mL)批料3小時，而在乾冰/丙酮浴中攪拌較小(50 mL)批料3小時。合併反應混合物且用飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅，接著分離有機層，經由相分離器過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100%異己烷至100%EtOAc進行梯度溶離)純化所得粗黃色油，得到呈黃色膠狀之標題化合物 (530 mg，14%)(反式:順式異構體之60:40混合物)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 371.0，RT 1.66及1.69分鐘，純度68.1% (方法 4 )。中間物 3 (7R ,14R )-11- 氯 -1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -7,14- 甲橋 (methano)- 苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 (diazocin)-5(14H )- 酮 經15分鐘向在氮氣下冷卻至-78℃之(7R ,14R )-11-氯-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，實例11 )(10 g，26.6 mmol)於無水THF (135 mL)中之溶液中逐滴添加鉀雙(三甲基矽烷基)醯胺(1 M於THF中，30 mL，30 mmol)。在-78℃下攪拌所得混合物1小時，隨後經5分鐘逐滴添加碘甲烷(2.5 mL，40 mmol)。在-78℃下攪拌反應混合物1小時，接著使其緩慢升溫至環境溫度隔夜。將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(600 mL)中且用EtOAc (2 × 800 mL)萃取。將有機萃取物乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟層析(用5% MeOH/DCM溶離)純化，得到呈米色固體狀之標題化合物 (9.12 g，88%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 8.33-8.21 (m, 1H), 7.87-7.33 (m, 5H), 7.22 (dd,J 8.7, 2.1 Hz, 1H), 6.23 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.22 (d,J 7.1 Hz, 1H), 3.55-3.41 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.81 (d,J 13.8 Hz, 1H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 390.0, RT 1.10分鐘(方法 3 )。中間物 4 (7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -11-(4,4,5,5- 四甲基 -1,3,2- 二氧雜硼戊環 (dioxaborolan)-2- 基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 含中間物 3 (4 g，10.3 mmol)之1,4-二噁烷(42 mL)用雙-(頻哪醇根基)二硼(3.9 g，15 mmol)及乙酸鉀(3 g，30.6 mmol)處理。使反應混合物脫氣且用氮氣沖洗。添加參(二苯亞甲基丙酮)-二鈀(0)(484 mg，0.51 mmol)及四氟硼酸三環己基鏻(390 mg，1.03 mmol)，接著使反應混合物脫氣且用氮氣沖洗，隨後在140℃下加熱隔夜。再添加雙(頻哪醇根基)二硼(2.6 g，10.3 mmol)。在140℃下加熱反應混合物24小時，接著分配於EtOAc與鹽水之間。分離有機相且在真空中濃縮，接著藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-10% EtOAc/MeOH進行梯度溶離)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物 (2.5 g，50%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 482.2, RT 2.40分鐘(方法 4 )。中間物 5 (R )-N -(3- 氰基 -1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 向磷酸三鉀(171 mg，0.80 mmol)、四氟硼酸三環己基鏻(18.8 mg，0.050 mmol)、參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(16.7 mg，0.018 mmol)及中間物 4 (126 mg，0.263 mmol)中添加溶解於經脫氣之1,4-二噁烷(1.5 mL)中之中間物 2 (83 mg，0.225 mmol)。添加經脫氣之水(0.04 mL)且反應混合物在真空及氮氣之三個循環下脫氣，接著轉移至密封管中且置放於110℃預加熱組(pre-heated block)中3小時。使反應混合物冷卻至環境溫度，接著用EtOAc (20 mL)及水(20 mL)稀釋。分離有機層且再用EtOAc (20 mL)萃取水層。合併有機層且用鹽水(20 mL)洗，接著乾燥(Na₂ SO₄ )且過濾。在真空中移除溶劑。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100%異己烷至100%EtOAc，接著100%DCM至25%MeOH/DCM梯度溶離)純化所得褐色油，得到呈褐色油之標題化合物 (178 mg，92%)(反式及順式異構體之混合物)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 646.2, RT 1.11分鐘(方法 3 )。中間物 6 (R )-N -(3- 氰基 -1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-3- 甲基 - 環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在氮氣下，向磷酸三鉀(80 mg，0.377 mmol)，中間物 2 (50 mg，0.121 mmol)及(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H ) -酮(WO 2016/050975，中間物 171 )(60mg，0.128 mmol)之混合物中添加四氟硼酸三環己基鏻(5 mg，0.013 mmol)及參-(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(6 mg，0.0064 mmol)。使試劑溶解於1,4-二噁烷(3 mL)中且添加水(0.2 mL)，接著反應混合物在真空及氮氣中脫氣，隨後在回流加熱隔夜。反應混合物用EtOAc (20 mL)及水(20 mL)稀釋。分離有機層且再用EtOAc (20 mL)萃取水層。分離有機層且經相分離器過濾，隨後在真空中濃縮。所得粗褐色油藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-100% DCM/EtOAc，接著1-10% MeOH/EtOAc梯度溶離)純化，得到呈黃色固體之標題化合物 (51 mg，57%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 632.0, RT 1.85分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 632.1, RT 1.81分鐘(方法 2 )。中間物 7 (R )-N -[ 反 -1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-3- 氰基 -3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基 - 丙烷 -2- 亞磺醯胺 使2,5-二溴-3-氟吡啶(536 mg，2.11 mmol)溶解於DCM (100 mL)中且在氮氣下冷卻至-78℃。逐滴添加正丁基鋰(2.5 M，0.9 mL，2 mmol)，且在-78℃下，在氮氣下攪拌反應混合物5分鐘，隨後經由注射器緩慢添加溶解於DCM (10 mL)中之中間物 1 (390 mg，1.84 mmol)。在-78℃下攪拌反應混合物1小時，接著在冰浴中攪拌2小時。反應混合物用飽和氯化銨水溶液(50 mL)淬滅，接著分離有機層且用鹽水(50 mL)洗滌。分離有機層且經由相分離器過濾，接著在真空中移除溶劑。所得粗暗紅色/褐色油藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100%異己烷至100% EtOAc進行梯度溶離)純化，得到標題化合物 (220 mg，28%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 388.0/390.0, RT 0.961分鐘(方法 3 )。中間物 8 (R )-N -( 順 -3- 氰基 -1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 向中間物 4 (113 mg，0.241 mmol)及磷酸三鉀(167 mg，0.773 mmol)之混合物中添加中間物 7 (75 mg，0.193 mmol)於1,4-二噁烷(3 mL)中之溶液。使反應混合物脫氣且用氮氣沖洗。添加含參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(9.1 mg，0.0097 mmol)及四氟硼酸三環己基鏻(8.8 mg，0.023 mmol)之1,4-二噁烷及若干滴水。在120℃下，在微波照射下加熱反應混合物4小時，接著在EtOAc與鹽水之間分離。有機層經由相分離器過濾且在真空中濃縮有機相。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100%異己烷至100%EtOAc，接著1-15% MeOH/DCM進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體狀之標題化合物 (102 mg，81%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 663, RT 1.32分鐘(方法 5 )。中間物 9 (R )-N -( 順 -3- 氰基 -1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 甲基 - 環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 (7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮用磷酸三鉀(441 mg，2.04 mmol)處理(WO 2016/050975，中間物 171 )(297 mg，0.636 mmol)，接著相機添加中間物 7 (220 mg，0.510毫莫耳)及1,4-二噁烷(3 mL)。使反應混合物脫氣且用氮氣沖洗。添加參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(24 mg，0.025 mmol)及四氟硼酸三環己基鏻(23 mg，0.061 mmol)以及若干滴水。在120℃下，在微波照射下加熱混合物4小時。向反應混合物中添加EtOAc及鹽水，攪拌，隨後經由相分離器過濾。在真空中濃縮有機相。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100%異己烷至100%EtOAc，接著含1-15% MeOH之DCM進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈灰白色固體狀之標題化合物(189 mg，54%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 649.2, RT 1.32分鐘(方法 5 )。中間物 10 (S )-2- 甲基 -N -(2- 甲基環亞丁基 ) 丙烷 -2- 亞磺醯胺 使2-甲基環丁-1-酮(1.00 g，11.3 mmol)溶解於THF (30 mL)中且相繼添加(S)-2-甲基-2-丙烷亞磺醯胺(1.20 g，9.60 mmol)及乙醇鈦(IV)(4.0 mL，19 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物48小時。添加水(5 mL)且攪拌混合物，接著相繼添加EtOAc (100 mL)及Na₂ SO₄ (10 g)。在15分鐘之後，過濾混合物且固體用EtOAc (3 × 15 mL)洗滌。在真空中濃縮合併之有機層。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-40% EtOAc之異己烷進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈無色油狀之標題化合物 (1.55 g，86%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 188.2, RT 1.37分鐘及1.41分鐘(方法 4 )。中間物 11 N -[(1S ,2R )-1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-2- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺或 N -[(1R ,2S )-1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-2- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使2,5-二溴-3-氟吡啶(2.34 g，8.81 mmol)溶解於DCM (30 mL)中且在氮氣下冷卻至-78℃，接著添加正丁基鋰(2.5 M，3.5 mL，8.8 mmol)。攪拌反應混合物10分鐘，隨後添加中間物 10 (1.50 g，8.01 mmol)於DCM (3 mL)中之溶液。在-78℃下攪拌混合物2小時，接著用飽和氯化銨水溶液(30 mL)淬滅且攪拌5分鐘。分離有機層且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-45% EtOAc之異己烷進行梯度溶離)純化所得粗殘餘物，得到標題化合物 (800 mg，27%；順式異構體)，加主要反式異構體與其他順式異構體之3:1混合物(650 mg，22%)。標題化合物： δ_H (300 MHz, CDCl₃ ) 8.49-8.39 (m, 1H), 7.54 (dd,J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 2.92 (dtt,J 12.3, 9.0, 1.6 Hz, 1H), 2.71 (h,J 7.4 Hz, 1H), 2.45-2.32 (m, 1H), 2.11-1.97 (m, 1H), 1.86-1.69 (m, 1H), 1.28-1.23 (m, 12H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 363.0及365.0, RT 2.28分鐘(方法 4 )。中間物 12 N -[(1S ,2R )-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-2- 甲基 - 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺或 N -[(1R ,2S )-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-2- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在氮氣下，向含中間物 11 (187 mg，0.51 mmol)、(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )(200 mg，0.43 mmol)、四氟硼酸三環己基鏻(16 mg，0.042 mmol)及參-(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(20 mg，0.021 mmol)之1,4-二噁烷(5 mL)中添加含磷酸三鉀(278 mg，1.28 mmol)之水(1 mL)。在氮氣下使反應混合物脫氣，接著在壓力管中密封且在105℃下加熱3小時。使反應混合物冷卻至室溫，接著分配於DCM與水之間。分離有機層且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-10% MeOH之DCM進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物 (145 mg，54%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 624.2, RT 2.44分鐘(方法 4 )。中間物 13 N -( 環亞丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使環丁酮(100 g，1.43 mol)於THF (722 mL)中之溶液冷卻至15-20℃。添加冷卻至15-20℃之2-甲基-2-丙烷亞磺醯胺(144 g，1.19 mol)，接著添加異丙醇鈦(IV)(847 g，2.98 mol)。在60℃下加熱反應混合物16小時，隨後在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(梯度溶離，0-20% EtOAc/石油醚)純化粗殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物(來自19份批料之組合產率：2.14 kg，55%)。δ_H (400 MHz, DMSO-d₆ ) 3.37-3.17 (m, 1H), 3.14-3.07 (m, 3H), 2.06-1.99 (m, 2H), 1.14 (s, 9H)。中間物 14 N -[1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使5-溴-2-碘嘧啶(345 g，1.21 mol)冷卻至15-20℃且溶解於無水DCM (6 L)中。使反應混合物冷卻至-60℃與-70℃之間，接著逐滴添加2.5 M正丁基鋰(450 mL，1.13 mol)。在-60℃與-70℃之間的溫度下攪拌反應混合物2小時，接著添加中間物 13 (150 g，866 mmol)於無水DCM (150 mL)中之溶液。在攪拌下，溫度保持在-60℃與-70℃之間2小時，隨後升溫至15-20℃。再攪拌反應混合物12小時，接著用水(100 mL)淬滅。合併十一份批料且用DCM (2 × 3330 mL)萃取。有機層用鹽水(1650 mL)洗滌，分離且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用1:0:10至1:1:3 EtOAc/DCM/石油醚進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈黃色固體狀之標題化合物 (來自11份批料之組合產率：1.38 kg，44%)。δ_H (400 MHz, DMSO-d₆ ) 9.00 (s, 2H), 2.65-2.45 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.99-1.94 (m, 1H), 1.73-1.70 (m, 1H), 1.07 (s, 9H)。中間物 15 1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 ) 環丁胺鹽酸鹽 在六份單獨的批料中，在15-20℃下使中間物 14 (302 g，909 mmol)溶解於MeOH (1.2 L)中。向混合物中添加MeOH/鹽酸(600 mL)，且在15-20℃下攪拌反應混合物2小時。合併六份批料且濃縮。向粗殘餘物中添加異丙基醚(9 L)及MeOH (1 L)。在15-20℃下攪拌混合物1小時。過濾固體，用DCM (3 L)沖洗且乾燥，得到呈黃色固體狀之標題化合物 (1.21 kg，84%)。δ_H (400 MHz, CD₃ OD) 9.02 (s, 2H), 2.84-2.82 (m, 2H), 2.81-2.78 (m, 2H), 2.60-2.27 (m,2H)。中間物 16 N -[1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 ) 環丁基 ] 胺基甲酸第三丁酯 向在冰浴上冷卻之中間物15 (202 g，764 mmol)於THF (400 mL)中之懸浮液中添加二碳酸二-第三丁酯(183 g，832 mmol)及三乙胺(154 g，212 mL，1.51 mol)。在0-5℃下攪拌混合物30分鐘，接著移除冰浴且使反應混合物達到環境溫度。將反應混合物分配於EtOAc(1000 mL)與水(600 mL)之間。分離水相，接著有機相依序用水(600 mL)及鹽水(2 × 200 mL)洗滌。乾燥(Na₂ SO₄ )有機相，過濾且在真空中濃縮。所得粗固體在50℃下，在真空中乾燥隔夜，得到呈灰白色固體狀之標題化合物 (254 g，定量)。LCMS (ES+) [M+Na]⁺ 350.0, RT 2.20分鐘(方法 4 )。中間物 17 (1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 } 環丁基 )- 胺基甲酸第三丁酯 在氮氣下，將中間物 3 (13.3 g，34.0 mmol)、參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(1.61 g，1.71 mmol)、XPhos (1.63 g，3.43 mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(9.85 g，38.8 mmol)及乙酸鉀(8.5 g，87 mmol)裝入配備有回流冷凝器之經火焰乾燥之燒瓶中，接著添加1,4-二噁烷(136 mL)。在100℃下攪拌所得混合物22小時，隨後添加中間物 16 (12.3 g，37.4 mmol)及磷酸三鉀水溶液(1.27 mol/L，40 mL，50.8 mmol)。在回流下加熱反應混合物3小時，隨後再裝入參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(500 mg，0.53 mmol)、XPhos (510 mg，1.07 mmol)及磷酸三鉀水溶液(1.27 mol/L，20 mL，25.4 mmol)。攪拌混合物1小時，接著冷卻至室溫，用DCM (600 mL)稀釋且用鹽水 (400 mL)洗滌。水相用DCM (500 mL)萃取，接著經合併之有機萃取物通過相分離器且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟層析(用0-5% MeOH/DCM)純化，得到呈灰白色固體狀之標題化合物 (18.0 g，88%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 8.93 (s, 2H), 8.49 (dd,J 8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.84 (dd,J 8.5, 0.7 Hz, 1H), 7.74-7.63 (m, 1H), 7.48-7.38 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 6.84 (t,J 72.8 Hz, 1H), 6.31 (d,J 7.2 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.01 (d,J 7.1 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.51-3.43 (m, 1H), 2.90 (d,J 13.6 Hz, 1H), 2.84-2.57 (m, 3H), 2.22-2.07 (m, 3H), 1.43 (s, 9H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 603.2, RT 1.25分鐘(方法 3) 。中間物 18 3- 苯甲氧基 -1- 甲基環丁醇 藉由向鎂(20.7 g，851 mmol)於乙醚(500 mL)中之混合物中緩慢添加碘甲烷(42.6 mL，681 mmol)來製備碘化甲基鎂。在溫熱的水浴上加熱混合物30分鐘。碘化物甲基鎂之溶液在乾冰/丙酮浴中冷卻至-25℃之內部溫度，接著緩慢添加3-苯甲氧基環丁-1-酮(94 mL，567 mmol)於乙醚(100 mL)中之溶液，保持內部溫度低於-10℃。在添加完成之後，在-10℃下攪拌混合物，經30分鐘升溫至15℃。使反應混合物冷卻至0℃，接著用乙醚稀釋且用飽和氯化銨水溶液淬滅。分離有機層且用乙醚(2 × 300 mL)萃取水層。過濾合併之有機層且用飽和氯化銨水溶液洗滌，接著乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾且在真空中濃縮，得到呈黃色油狀之標題化合物 (109 g，100%)(立體異構體之約3:1混合物)。GCMS:主要異構體 RT 3.664 (74.6%), [M-C₇ H₇ ]⁺ 101, [M-C₅ H₉ O₂ ]⁺ 91;次要異構體 RT 3.630 (25.4%), [M-C₇ H₇ ]⁺ 101, [M-C₅ H₉ O₂ ]⁺ 91 (方法 12 )。中間物 19 (3- 苯甲氧基 -1- 甲基環丁氧基 )- 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷 向中間物 18 (107 g，558 mmol)於DMF (1 L)中之溶液中添加咪唑(190 g，2.79 mol)。添加第三丁基(氯)二甲基矽烷(252 g，1.67 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，接著倒入冰水中。用乙醚(3 × 500 mL)萃取水相。合併有機層且用水洗滌，接著乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(庚烷，接著含2% EtOAc之庚烷)純化所得粗黃色油(291 g)，得到標題化合物(121 g，46%)(立體異構體之約3:1混合物)。主要異構體 : δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 7.38-7.24 (m, 5H), 4.40 (s, 2H), 3.70-3.62 (m, 1H), 2.41-2.33 (m, 2H), 2.18-2.09 (m, 2H), 1.28 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.07 (s, 6H)。中間物 20 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 -3- 甲基環丁醇 中間物 19 (121 g，257 mmol)於乙醇(500 mL)中之混合物用Norit (或活性炭)(13 g)處理且攪拌1小時。混合物經矽藻石過濾且用乙醇(500 mL)沖洗。將濾液轉移至3頸圓底燒瓶(4 L)中且將混合物抽成真空，且用氬氣回填三次。添加鈀/活性碳(10%，6.1 g，5.73 mmol)於水中之漿料且將混合物抽成真空，且用氬氣回填。將混合物抽成真空且用氫氣回填三次，接著在室溫下攪拌隔夜。混合物在氮氣流下經由矽藻石過濾，接著用乙醇沖洗。在真空中濃縮濾液。組合粗殘餘物(68 g)與其他批料(62 g及63 g)，接著藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含10-20% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化，得到呈無色油狀之標題化合物 (164 g，85%)(異構體之約8:2混合物)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 4.52-4.43 (m, 0.2H), 3.98-3.87 (m, 0.8H), 2.50-2.40 (m, 2H), 2.10-2.02 (m, 1.6H), 1.98-1.91 (m, 0.4H), 1.64-1.58 (m, 0.8H), 1.58-1.52 (m, 0.2H), 1.44 (s, 0.6H), 1.28 (s, 2.4H), 0.88 (s, 7H), 0.87 (s, 2H), 0.07 (s, 6H)。中間物 21 3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 -3- 甲基環丁酮 在5℃下，向中間物 20 (192 g，887 mmol)於DCM (2 L)中之溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(452 g，1.07 mmol)。在10℃下攪拌懸浮液1小時，接著經1小時升溫至室溫。將反應混合物倒入飽和碳酸氫鈉水溶液(約1 L)中且攪拌直至氣體逸出停止。添加硫代硫酸鈉水溶液(10%)，且攪拌混合物1小時。分離各層且用DCM萃取水相。合併有機層且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。T藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-20% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得粗黃色油，得到呈無色油狀之標題化合物 (186 g，98%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.25-3.13 (m, 2H), 3.03-2.90 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.11 (s, 6H)。中間物 22 (S )-N- {3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 -3- 甲基環亞丁基 }-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 向中間物 21 (186 g，0.87 mol)於THF (2 L)中之溶液中相繼添加(S)-(-)-第三丁基亞磺醯胺(126 g，1.04 mol)及乙醇鈦(IV)(367 mL，1.74 mol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，隨後在真空中濃縮。用乙腈稀釋殘餘物。添加水(47 mL)且攪拌反應混合物10分鐘，接著經矽藻石過濾且用乙腈沖洗。在真空中濃縮濾液。藉由二氧化矽急驟管柱層析(含10% EtOAc之庚烷)純化所得粗黃色油(264 g)，得到呈無色油狀之標題化合物 (223 g，81%)(異構體之約1:1混合物)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.59-3.41 (m, 1H), 3.34-3.11 (m, 2H), 3.05-2.92 (m, 1H), 1.52-1.41 (m, 3H), 1.21 (s, 9H), 0.85 (s, 9H), 0.06 (s, 6H)。LCMS [M+H]⁺ 318, RT 2.34分鐘(方法 6 )。中間物 23 (S )-N -{ 順 -1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 -3- 甲基環丁基 }-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將2,5-二溴-3-氟吡啶(26.9 g，106 mmol)及DCM (750 mL)裝入三頸圓底燒瓶(2 L)中。所得溶液用乾冰/異丙醇冷卻至-70℃，接著逐滴添加正丁基鋰(2.5 M於己烷中；46 mL，115 mmol)，在-50℃下得到深色溶液。使溫度降低至-66℃且逐滴添加中間物 22 (30.5 g，96 mmol)於DCM (150 mL)中之溶液。在添加之後，攪拌混合物1.5小時，此時溫度上升至-30℃。反應混合物用飽和氯化銨水溶液淬滅，且添加水以溶解所沈澱之鹽。分離各層且用DCM萃取水層。合併之有機層用鹽水洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含10-60% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得粗深褐色油(49.7 g)，得到標題化合物 (9.71 g，21%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 8.47-8.41 (m, 1H), 7.56 (dd,J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.35 (dd,J 12.6, 3.6 Hz, 1H), 2.97-2.87 (m, 1H), 2.73 (d,J 12.6 Hz, 1H), 2.54 (d,J 12.6 Hz, 1H), 1.15 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.10 (s, 6H)。LCMS [M+H]⁺ 493/495 (Br模式), RT 2.50分鐘(方法 6 )。中間物 24 (S )-N -( 順 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 -1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將中間物 3 (25.6 g，65.7 mmol)、乙酸鉀(16.1 g，164 mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(20.0 g，79 mmol)及無水1,4-二噁烷(400 mL)裝入三頸圓底燒瓶(2 L)中。將反應混合物抽成真空且用氬氣回填三次。添加參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(5 mol%，3.01 g，3.28 mmol)及XPhos (10 mol%，3.13 g，6.57 mmol)。將裝置抽成真空且用氬氣回填兩次，接著在110℃下置放於經預加熱之油槽中2.5小時。使反應混合物冷卻至室溫且添加溶解於1,4-二噁烷(400 mL)中之中間物 23 (32.4 g，65.7 mmol)。添加磷酸三鉀(20.9 g，99 mmol)及水(200 mL)，接著添加[1,1'-雙(二苯膦基)-二茂鐵]二氯鈀(II)(5 mol%，2.40 g，3.28 mmol)。將反應混合物抽成真空且用氬氣回填兩次，接著在115℃下置放於經預加熱之油槽中1小時。使反應混合物冷卻至室溫，接著添加三聚硫氰酸(5.24 g，29.6 mmol)及活性炭(12 g)。攪拌混合物隔夜，接著經由矽藻石墊過濾。濾墊用EtOAc及MeOH沖洗。用水(600 mL)稀釋濾液且分離各層。用EtOAc (2×400 ml)萃取水層。合併之有機層用鹽水洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-20% MeOH之EtOAc進行梯度溶離)純化所得粗深色黏稠半固體(約130 g)，接著藉由二氧化矽急驟管柱層析(含0-10% MeOH之EtOAc)再純化，得到標題化合物 (44.6 g，88%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 8.63 (t,J 1.5 Hz, 1H), 8.52-8.48 (m, 1H), 7.79 (d,J 8.5 Hz, 1H), 7.69 (d,J 1.3 Hz, 1H), 7.56 (dd,J 11.9, 1.7 Hz, 1H), 7.46 (dd,J 8.5, 1.7 Hz, 1H), 7.43 (t,J 8.2 Hz, 1H), 7.35 (d,J 8.1 Hz, 1H), 6.88 (t,J 72.7 Hz, 1H), 6.28 (d,J 7.2 Hz, 1H), 4.98 (d,J 7.1 Hz, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.51-3.40 (m, 1H), 3.07-2.99 (m, 1H), 2.89 (d,J 13.6 Hz, 1H), 2.78 (d,J 12.5 Hz, 1H), 2.62 (d,J 12.6 Hz, 1H), 1.63 (s, 1H), 1.17 (s, 9H), 1.16 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.12 (s, 6H)。LCMS [M+H]⁺ 768, RT 2.44分鐘(方法 6 )。中間物 25 (S )-N -( 順 -3-[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 -1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )(1.3 g，2.78 mmol)、中間物 23 (900 mg，1.82 mmol)及磷酸三鉀(1.58 g，7.29 mmol)懸浮於1,4-二噁烷(22 mL)及水(2 mL)之混合物中。反應混合物用氮氣脫氣三次，接著添加參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(90 mg，0.095 mmol)。反應混合物再用氮氣脫氣且在120℃下加熱2.5小時。混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。合併有機相且乾燥(硫酸鈉)，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-100% EtOAc/己烷，接著0-10% MeOH/DCM進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到標題化合物 (930 mg，65%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 754.2, RT 3.26分鐘(方法 4 )。中間物 26 3,3- 二甲氧基環丁烷甲酸 甲 酯 在MeOH (500 mL)中組合3-側氧基丁烷甲酸甲酯(45 g，394 mmol)、原甲酸三甲酯(259 mL，2.37 mol)及單水合對甲苯磺酸(7.50 g，39.4 mmol)。在回流下攪拌溶液2小時，接著冷卻至室溫且在真空中濃縮。使殘餘物溶解於乙醚(500 mL)中且用飽和碳酸氫鈉水溶液(500 mL)洗滌。用乙醚(500 mL)萃取水相。合併之有機層用鹽水洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮，得到標題化合物 (74.4 g)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.70 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.94-2.83 (m, 1H), 2.48-2.34 (m, 4H)。中間物 27 3,3- 二甲氧基 -1- 甲氧環丁烷甲酸甲酯 在-78℃下，向二異丙胺(56 mL，398 mmol)於THF (1 L)中之冷卻溶液中添加含正丁基鋰之己烷(2.5 M，133 mL，332 mmol)。攪拌混合物15分鐘，隨後逐滴添加含中間物 26 (68 g，332 mmol)之THF (50 mL)。攪拌反應混合物30分鐘，隨後逐滴添加碘甲烷(41 mL，664 mmol)，其引起內部溫度升高至-60℃。在-78℃下攪拌反應混合物30分鐘，接著升溫至環境溫度。將反應混合物倒入飽和氯化銨水溶液(1 L)中且用乙醚(2 × 500 mL)萃取。合併之有機層用鹽水洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含10-40% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化粗殘餘物(64.7 g)，得到標題化合物 (52.5 g)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.71 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.67-2.58 (m, 2H), 2.10-2.01 (m, 2H), 1.44 (s, 3H)。中間物 28 (3,3- 二甲氧基 -1- 甲基環丁基 ) 甲醇 向在冰浴中冷卻之中間物 27 (42 g，224 mmol)於THF (800 mL)中之溶液中添加含2.4M氫化鋰鋁溶液之THF (94 mL，235 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物60分鐘。逐滴添加水(8 ml)，接著添加10%氫氧化鈉水溶液(8 mL)。向懸浮液中添加水(24 mL)且攪拌混合物。添加硫酸鈉且過濾顆粒狀懸浮液。用乙醚沖洗濾液，且在真空中濃縮合併之濾液，得到呈輕質油狀之標題化合物 (38 g，15%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.50 (d,J 5.6 Hz, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 2.11 (d,J 13.2 Hz, 2H), 1.94-1.82 (m, 2H), 1.19 (s, 3H)。GCMS [M-CH₃ O]⁺ 129, RT 2.325 (90.2%) (方法 12 )。中間物 29 3-( 羥基甲基 )-3- 甲基環丁酮 向中間物 28 (44.8 g，280 mmol)於丙酮(600 mL)及水(200 mL)中之攪拌溶液中添加單水合對甲苯磺酸(53.2 g，280 mmol)。在65℃下加熱反應混合物1小時，接著冷卻至室溫。藉由在真空中濃縮來移除丙酮。所得混合物用DCM稀釋且用碳酸氫鈉水溶液洗滌。用DCM再萃取水層三次。乾燥(MgSO₄ )合併之有機層，接著過濾且在真空中濃縮，得到標題化合物 (30.8 g，78%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.69 (d,J 5.1 Hz, 2H), 3.09-2.97 (m, 2H), 2.76-2.64 (m, 2H), 1.36 (s, 3H)。中間物 30 3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-3- 甲基環丁酮 向中間物 29 (10.6 g，55.0 mmol)於DMF (150 mL mL中之溶液中添加咪唑(0.63 g，9.29 mmol)，接著添加第三丁基(氯)二甲基矽烷(24.9 g，165 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜。添加乙醚，接著添加鹽水。分離有機層且用鹽水洗滌三次。乾燥有機層且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-10% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化粗殘餘物(62 g)，得到呈黃色油狀之標題化合物 (59.5 g)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.59 (s, 2H), 3.08-2.98 (m, 2H), 2.66-2.56 (m, 2H), 1.30 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H)。中間物 31 (S )-N -[3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-3- 甲基環亞丁基 ]-2- 甲基 - 丙烷 -2- 亞磺醯胺 向中間物 30 (54.5 g，205 mmol)於THF (500 mL)中之溶液中添加(S)-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(29.8 g，246 mmol)及乙醇鈦(IV)(87 mL，410 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物隔夜，隨後在真空中濃縮。用乙腈稀釋殘餘物，接著添加水(47 mL)。攪拌混合物10分鐘，接著經矽藻石過濾且用乙腈沖洗。在真空中濃縮濾液。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-20% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得粗黃色油(71.5 g)，得到呈黃色油狀之標題化合物 (66.9 g，98%)(異構體之約1:1混合物)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 3.50 (d,J 1.6 Hz, 2H), 3.46-3.38 (m, 0.5H), 3.24-3.00 (m, 2H), 2.92-2.82 (m, 0.5H), 2.71-2.55 (m, 1H), 1.29-1.19 (m, 12H), 0.90-0.88 (m, 9H), 0.05 (s, 6H)。中間物 32 (S )-N -[ 順 -1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 )-3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使5-溴-2-碘嘧啶(58.6 g，206 mmol)於DCM (500 mL)中之溶液冷卻至-78℃。經10分鐘逐滴添加正丁基鋰(2.5M於己烷中，90 mL，226 mmol)，產生黏稠的懸浮液。在-78℃下攪拌混合物40分鐘。逐滴添加中間物 31 (56.8 g，171 mmol)於DCM (500 mL)中之溶液。在-78℃下攪拌反應混合物2.5小時，接著升溫至室溫且攪拌1小時。將混合物倒入飽和氯化銨水溶液中且攪拌5分鐘。在用水稀釋之後，分離各層。用DCM萃取水層兩次。合併有機層，用鹽水洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用1:1至0:1庚烷:EtOAc進行梯度溶離)純化粗殘餘物，接著再藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含20-80% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化，得到標題化合物 (16 g，17%)。δ_H (400 MHz, CDCl₃ ) 8.76 (s, 2H), 4.40 (s, 1H), 3.58 (d,J 9.6 Hz, 1H), 3.52 (d,J 9.5 Hz, 1H), 2.84 (d,J 12.7 Hz, 1H), 2.54-2.38 (m, 2H), 2.30 (d,J 12.3 Hz, 1H), 1.20 (s, 9H), 1.04 (s, 3H), 0.91 (s, 9H), 0.07 (s, 6H)。LCMS [M+H]⁺ 490/492 (Br模式), RT 2.49分鐘(方法 6 )。中間物 33 (S )-N -[ 順 -3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟 - 甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將中間物 3 (11.1 g，28.4 mmol)、乙酸鉀(6.97 g，71.0 mmol)、雙(頻哪醇根基)二硼(8.65 g，34.1 mmol)及1,4-二噁烷(170 mL)裝入圓底燒瓶(2 L)中。裝置用氬氣沖洗三次，接著添加參-(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(1.30 g，1.42 mmol)及XPhos (1.35 g，2.84 mmol)。將裝置抽成真空且用氬氣回填兩次，接著在115℃下加熱3小時。使反應混合物冷卻至室溫。添加溶解於1,4-二噁烷(170 mL)中之中間物 32 (16.2 g，28.4 mmol)，接著添加水(70 mL)及無水磷酸三鉀(9.04 g，42.6 mmol)。裝置再用氬氣脫氣兩次，接著添加[1,1'-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯-鈀(II)(1.04 g，1.42 mmol)。在115℃下加熱反應混合物5小時，接著在室溫下攪拌隔夜。添加三聚硫氰酸(2.27 g，12.78 mmol)及活性炭(5.19 g)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著用水及EtOAc稀釋且過濾，用EtOAc洗滌固體。分離各層且用EtOAc萃取水層兩次。合併有機層且用鹽水洗滌，接著乾燥(Na₂ SO₄ )，過濾且攪拌隔夜。在真空中濃縮有機層，且藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-10% MeOH之EtOAc進行梯度溶離)純化殘餘物，得到標題化合物 (17.5 g，81%)。LCMS [M+H]⁺ 765, RT 2.46分鐘(方法 6 )。中間物 34 (S )-N -[ 順 -1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使2,5-二溴-3-氟吡啶(2.4 g，9.23 mmol)溶解於DCM (120 mL)中，且使反應混合物在丙酮-乾冰浴中冷卻至-65℃。逐滴添加正丁基鋰(2.5M於己烷中，3.8 mL，9.5 mmol)且在-65℃下攪拌混合物15分鐘。添加含中間物 31 (2.4 g，7.2 mmol)之DCM (20 mL)。在-65℃下攪拌反應混合物1小時，接著升溫至室溫且攪拌2小時。在0℃下，反應混合物用氯化銨水溶液淬滅且用DCM萃取兩次。合併有機相且在真空中濃縮，接著藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-50% EtOAc/己烷進行梯度溶離)純化，得到標題化合物 (1.15 g，31%)。δ_H (300 MHz, CDCl₃ ) 8.47 (dd,J 1.9, 1.2 Hz, 1H), 7.56 (dd,J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.60-3.46 (m, 2H), 2.87-2.73 (m, 1H), 2.54-2.47 (m, 2H), 2.47-2.38 (m, 1H), 1.16 (s, 9H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 9H), 0.09 (s, 6H)。中間物 35 (S )-N -[ 順 -3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟 - 甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 使(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )(405 mg，0.87 mmol)、中間物 34 (400 mg，0.79 mmol)、磷酸三鉀(734 mg，3.39 mmol)及四氟硼酸三環己基膦(40 mg，0.11 mmol)懸浮於1,4-二噁烷(10 mL)及水(1 mL)之混合物中。混合物用氮氣脫氣三次，隨後添加參(二苯亞甲基丙酮)二鈀(0)(40 mg，0.042 mmol)。混合物再用氮氣脫氣且在110℃下加熱2.5小時。反應混合物用水稀釋且用EtOAc萃取兩次。乾燥(Na₂ SO₄ )合併之有機相，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-100% EtOAc/己烷，接著0-10% MeOH/DCM進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到標題化合物 (280 mg，46%)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 768.2, RT 3.42分鐘(方法 4 )。中間物 36 3-( 苯甲氧基 )-1-( 三氟甲基 ) 環丁 -1- 醇 在0℃下(外部溫度)，向3-(苯甲氧基)環丁-1-酮(5 g，28.4 mmol)及三甲基(三氟甲基)矽烷(5.03 mL，34.1 mmol)於THF (50 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加含TBAF之THF (1 M，2.84 mL)。在0℃下攪拌所得混合物2小時，接著在室溫下攪拌隔夜。再添加含TBAF之THF (25.5 mL)且在室溫下攪拌混合物2小時。添加水(50 mL)且將混合物倒於鹽水(50 mL)上。用EtOAc (3 × 75 mL)萃取殘餘物。合併之有機相用鹽水(25 mL)洗滌且乾燥(MgSO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-100% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得粗橙色油，得到呈淡橙色油狀之標題化合物 (6.5 g，92%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 7.42-7.27 (m, 5H), 4.44 (s, 2H), 3.88 (p,J 6.7 Hz, 1H), 2.91-2.74 (m, 2H), 2.56 (s, 1H), 2.32-2.15 (m, 2H)。中間物 37 [3-( 苯甲氧基 )-1-( 三氟甲基 ) 環丁氧基 ]( 第三丁基 ) 二甲基矽烷 在-78℃下，向中間物 36 (6 g，24.4 mmol)及2,6-二甲基-吡啶(8.16 mL，70 mmol)於DCM (60 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加三氟甲磺酸第三丁基二甲基矽烷酯(6.16 mL，30 mmol)。在-78℃下攪拌混合物30分鐘，接著使其緩慢升溫至室溫隔夜。用飽和碳酸氫鈉水溶液(60 mL)處理混合物且分離各層。再用DCM (60 mL)萃取水相。乾燥(MgSO₄ )經合併之有機相，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-100% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化殘餘物，得到呈淡黃色油狀之標題化合物 (8.14 g，93%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 7.45-7.27 (m, 5H), 4.43 (s, 2H), 3.82 (p,J 6.8 Hz, 1H), 2.92-2.74 (m, 2H), 2.35-2.17 (m, 2H), 0.90 (s, 9H), 0.14 (s, 6H)。中間物 38 3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁 -1- 醇 將中間物 37 (8.14 g，22.6 mmol)及10%鈀/碳(50%於水中，2.41 g，11.3 mmol)於乙醇(163 mL)中之攪拌混合物置放於氫氣氛圍下。在室溫下攪拌反應混合物24小時，接著經由矽藻土過濾。用MeOH (3 × 50 mL)洗滌濾餅。在真空中濃縮濾液。所得深色殘餘物經矽藻土過濾，且用MeOH (3 × 50 mL)洗滌濾餅。在真空中濃縮濾液，得到呈不透明的淺黃色蠟狀之標題化合物 (6.2 g，98%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 4.21-4.01 (m, 1H), 2.99-2.84 (m, 2H), 2.34-2.14 (m, 2H), 1.89 (s, 1H), 0.90 (s, 9H), 0.14 (s, 6H)。中間物 39 3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁 -1- 酮 在室溫下，向中間物 38 (6.2 g，22.2 mmol)於DCM (175 mL)中之攪拌溶液中添加戴斯-馬丁高碘烷(11.3 g，26.9 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著用DCM (50 mL)稀釋且經矽藻土墊過濾。濾餅再用DCM (25 mL)洗滌，且將濾液倒於飽和碳酸氫鈉水溶液(100 mL)上。分離各層，且再用DCM (50 mL)萃取水相。乾燥(MgSO₄ )合併之有機相，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-100% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得蠟狀結晶固體，得到呈淡黃色油狀之標題化合物 (5.71 g，86%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 3.61-3.40 (m, 2H), 3.31-3.15 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.20-0.13 (m, 6H)。中間物 40 (R )-N -(3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-3-( 三氟甲基 ) 環亞丁基 )-2- 甲基 - 丙烷 -2- 亞磺醯胺 在氮氣下，在室溫下向中間物 39 (5 g，18.6 mmol)於THF (100 mL)中之攪拌溶液中添加乙醇鈦(IV)(24.4 mL，38.1 mmol)。攪拌混合物10分鐘，接著添加(R )-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺 (4.52 g，37.3 mmol)。在65℃下加熱混合物1.5小時，接著冷卻至室溫。混合物用鹽水(70 mL)、EtOAc (200 mL)及水(35 mL)稀釋，接著劇烈攪拌15分鐘。傾析有機層且經濾紙過濾剩餘乳液。再用EtOAc (100 mL)萃取濾液。合併之有機相用鹽水(50 mL)洗滌且乾燥(MgSO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-50% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得粗黃色糊漿，得到呈淺黃色油狀之標題化合物 (5.5 g，80%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 4.18-3.11 (m, 4H), 1.29-1.20 (m, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.15 (s, 6H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 372.15, RT 1.52分鐘(方法 8 )。中間物 41 (R )-N -[1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在-70℃下(內部溫度)，向2,5-二溴-3-氟吡啶(2.17 g，8.51 mmol)於DCM (140 mL)中之攪拌溶液中逐滴添加含正丁基鋰之己烷(2.5 M，3.47 mL，8.66 mmol)。在攪拌15分鐘之後，逐滴添加中間物 40 (2.75 g，7.4 mmol)於DCM (14 mL)中之溶液。在-70℃下保持攪拌2小時。使混合物經約1.5小時緩慢升溫至室溫，接著再冷卻至0℃。添加飽和氯化銨水溶液(100 mL)且劇烈攪拌混合物10分鐘。分離各層且再用DCM (2 × 100 mL)萃取水相。乾燥(MgSO₄ )合併之有機相，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-50% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈淡橙色膠狀之標題化合物 (1.68 g，42%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 8.46 (d,J 6.7 Hz, 1H), 7.65-7.50 (m, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.50-3.33 (m, 1H), 3.13-2.89 (m, 2H), 2.88-2.59 (m, 1H), 1.19-1.11 (m, 9H), 0.95-0.69 (m, 9H), 0.24-0.07 (m, 6H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 547.2, RT 1.91分鐘(方法 9 )。中間物 42 (R )-N -[3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在可密封壓力容器中，在室溫下，向中間物 41 (840 mg，1.53 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之攪拌溶液中添加中間物 4 (886 mg，1.84 mmol)。混合物用2 M碳酸鉀水溶液(2.3 mL)處理且用氮氣沖洗15分鐘。添加XPhos (73 mg，0.15 mmol)及XPhos Pd G2 (121 mg，0.15 mmol)且密封容器，在100℃下攪拌混合物4小時，接著冷卻至室溫。用EtOAc (30 mL)稀釋深色混合物且倒於鹽水(50 mL)上。分離各層且再用EtOAc (2 × 25 mL)萃取水相。合併之有機相用鹽水(25 mL)洗滌且乾燥(MgSO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-10% MeOH之DCM進行梯度溶離)純化所得深色殘餘物。再藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-100% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得粗淡褐色發泡體，得到呈灰白色發泡體狀之標題化合物 (1.00 g，76%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 8.64 (dd,J 3.4, 1.7 Hz, 1H), 8.49 (d,J 8.1 Hz, 1H), 7.82-7.30 (m, 6H), 7.19-6.53 (m, 1H), 6.35-6.21 (m, 1H), 5.04-4.94 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.49-3.39 (m, 1H), 3.17-2.67 (m, 4H), 1.30-1.22 (m, 1H), 1.22-1.12 (m, 9H), 1.00-0.63 (m, 9H), 0.25-0.05 (m, 6H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 822.4, RT 2.22/2.26分鐘(方法 10 )。中間物 43 (R )-N -[1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在室溫下，向中間物 42 (1 g，1.16 mmol)於THF (15 mL)中之攪拌溶液中添加含TBAF之THF (1 M，2.33 mL，2.32 mmol)。使混合物升溫且在35℃下攪拌2小時。在冷卻至室溫後，將混合物倒於水(25 mL)上且用EtOAc (3 × 25 mL)萃取。合併之有機相用鹽水(30 mL)洗滌且乾燥(MgSO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。使所得灰白色固體(0.9 g)懸浮於DMSO-MeOH (1:1；6 mL)中。在真空中濃縮所得黏稠漿料，得到呈灰白色固體狀之粗標題化合物(0.82 g)，其未經進一步純化即使用。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 708.4, RT 3.11分鐘(方法 11 )。中間物 44 (R )-N -[1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 )-3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將正丁基鋰於己烷中(2.5 M，5.09 mL，12.7 mmol)逐滴添加入5-溴-2-碘嘧啶(3.56 g，12.51 mmol)於DCM (230 mL)中在-70℃(內部溫度)之攪拌溶液中。在攪拌15分鐘之後，逐滴添加中間物 40 (4.04 g，10.9 mmol)於DCM (20 mL)中之溶液。在-70℃保持攪拌2小時。同時在此溫度，用飽和氯化銨水溶液(150 mL)淬滅混合物且使所得漿料緩慢升溫至室溫。分離各層且再用DCM (100 mL)萃取水相。乾燥(MgSO₄ )合併之有機相，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-100% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得深褐色油/固體。再藉由逆相二氧化矽急驟管柱層析(用摻有0.1%甲酸之含10-100%乙腈之水進行梯度溶離)進一步純化所得部分純化之黃色油，得到呈淡橙色油之標題化合物 (0.51 g，9%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 8.81-8.74 (m, 2H), 4.48 (d,J 33.1 Hz, 1H), 3.90-2.64 (m, 4H), 1.23-1.15 (m, 9H), 0.97-0.70 (m, 9H), 0.22-0.05 (m, 6H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 530/532, RT 1.53分鐘(方法 8 )。中間物 45 (R )-N -[3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]- 嘧啶 -2- 基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 將中間物 4 (552 mg，1.15 mmol)添加入中間物 44 (507 mg，0.96 mmol)於1,4-二噁烷(7 mL)中在室溫在可密封壓力容器中之攪拌溶液中。用2 M碳酸鉀水溶液(1.44 mL)處理混合物且用氮氣沖洗混合物15分鐘。添加XPhos (46 mg，0.1 mmol)及XPhos Pd G2 (75 mg，0.1 mmol)且密封容器。在100℃攪拌混合物4小時，接著冷卻至室溫。用EtOAc (30 mL)稀釋深色混合物且倒於鹽水(50 mL)上。分離各層且再用EtOAc (2 × 25 mL)萃取水相。合併之有機相用鹽水(25 mL)洗且乾燥(MgSO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-100% EtOAc之庚烷進行梯度溶離)純化所得深色殘餘物(1.18 g)。再藉由逆相二氧化矽管柱層析(用摻有0.1%甲酸之含10-100%乙腈之水進行梯度溶離)進一步純化所得粗淡橙色發泡體，得到呈灰白色玻璃狀之標題化合物 (0.61 g，79%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 9.04-8.87 (m, 2H), 8.50 (d,J 8.1 Hz, 1H), 7.92-7.79 (m, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.56-7.31 (m, 3H), 6.89 (t,J 72.7 Hz, 1H), 6.31 (d,J 7.2 Hz, 1H), 5.04 (d,J 7.2 Hz, 1H), 4.66-4.40 (m, 1H), 3.64 (d,J 14.8 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.20-2.70 (m, 5H), 1.36-1.14 (m, 9H), 1.02-0.66 (m, 9H), 0.26-0.11 (m, 6H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 805.4, RT 1.54分鐘(方法 8 )。中間物 46 (R )-N -[1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在室溫下，向中間物 45 (0.61 g，0.76 mmol)於THF (10 mL)中之攪拌溶液中添加含TBAF之THF (1 M，1.52 mL)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著倒於水(35 mL)上。用EtOAc (3 × 35 mL)萃取殘餘物。合併之有機相用水(30 mL)及鹽水(30 mL)洗滌，接著乾燥(MgSO₄ )，過濾且在真空中濃縮，得到呈灰白色固體狀之標題化合物 (0.474 g，90%)。δ_H (250 MHz, CD₃ OD) 9.14-9.04 (m, 2H), 8.47-8.35 (m, 1H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.82 (d,J 8.5 Hz, 1H), 7.65 (dd,J 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.63-7.03 (m, 3H), 6.49 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d,J 7.1 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.73-3.57 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.10-2.87 (m, 3H), 2.75 (d,J 14.4 Hz, 1H), 1.33-1.19 (m, 9H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 691.25, RT 1.10 & 1.13分鐘(方法 8 )。中間物 47 (R )-N -[3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 }-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二 氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟 - 吡啶 -2- 基 }-3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 向中間物 41 (400 mg，0.73 mmol)及(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )(383 mg，0.8 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之攪拌溶液中添加2 M碳酸鉀水溶液(1.1 mL)。反應混合物用氮氣脫氣，接著添加XPhos (35 mg，0.07 mmol)及XPhos Pd G2 (57 mg，0.07 mmol)。反應混合物在密封管中，在100℃下加熱2.5小時。使反應混合物冷卻，接著用EtOAc (50 mL)稀釋且用鹽水(2 × 25 mL)洗滌。乾燥(Na₂ SO₄ )有機層，過濾且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-100% EtOAc/庚烷接著0-20% MeOH/EtOAc進行梯度溶離)，接著藉由逆相二氧化矽管柱層析(用10-100%乙腈/水+0.1%甲酸進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物(469 mg，72%)(順式/反式異構體之4:5混合物)。δ_H (500 MHz, CDCl₃ ) 8.62 (dd,J 7.2, 1.6 Hz, 1H), 8.42 (dt,J 7.9, 1.8 Hz, 1H), 7.79 (dd,J 8.3, 6.6 Hz, 1H), 7.66 (dd,J 5.3, 1.4 Hz, 1H), 7.61-7.52 (m, 1H), 7.49-7.36 (m, 3H), 7.09 (t,J 5.9 Hz, 1H), 6.87 (t,J 72.6 Hz, 1H), 6.37 (dd,J 7.2, 4.2 Hz, 1H), 4.99-4.87 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.91-3.83 (m, 0.56H,主要 ), 3.55-3.48 (m, 2H), 3.14-3.05 (m, 1H), 3.03-2.99 (m, 0.44H,次要 ), 2.90-2.86 (m, 1H), 2.86-2.69 (m, 1H), 1.18 (s, 4H,次要 ), 1.17 (s, 5H,主要 ), 0.94 (s, 4H,次要 ), 0.70 (s, 5H,主要 ), 0.19 (d,J 11.3 Hz, 2.67H,次要 ), -0.01 (d,J 11.3 Hz, 3.33H,主要 )。中間物 48 (R )-N -[1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋 - 苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 向中間物 47 (469 mg，0.56 mmol)於THF (6 mL)中之溶液中添加含TBAF之THF (1 M，1.11 mL)。在35℃下攪拌反應混合物2小時，接著冷卻，用鹽水(50 mL)稀釋且用EtOAc (2 × 50 mL)萃取。合併之有機層用鹽水(3×50 mL)洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且在真空中濃縮，得到呈灰白色粉末狀之粗標題化合物 (440 mg，定量)，其未經進一步純化即使用。δ_H (500 MHz, CDCl₃ ) 8.49 (d,J 23.5 Hz, 1H), 8.41-8.28 (m, 1H), 7.67 (dd,J 31.2, 8.5 Hz, 1H), 7.57 (dd,J 13.3, 1.4 Hz, 1H), 7.47 (ddd,J 12.0, 6.2, 1.8 Hz, 1H), 7.39-7.26 (m, 3H), 7.10-7.00 (m, 1H), 6.78 (td,J 72.7, 4.2 Hz, 1H), 6.28 (d,J 7.2 Hz, 1H), 4.86 (t,J 6.5 Hz, 1H), 4.43-4.04 (m, 1H), 3.52-3.33 (m, 3H), 3.06-2.55 (m, 4H), 1.11 (d,J 4.1 Hz, 9H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 694.3, RT 1.35及1.40分鐘(方法 9 )。中間物 49 3,3- 二甲氧基環丁烷甲酸甲酯 在甲醇(500 mL)中組合3-側氧基丁烷甲酸乙酯(53 g，372.8 mmol)、原甲酸三甲酯(200 mL，1830 mmol)及4-甲基苯磺酸水合物(1:1)(7.09 g，37.3 mmol)且在攪拌下，在回流下加熱1小時。使反應混合物冷卻至室溫且在減壓下濃縮。使殘餘物溶解於乙醚(500 mL)中且用飽和NaHCO₃ 水溶液(400 mL)洗滌。用乙醚(500 mL)萃取水相。乾燥(MgSO₄ )合併之有機相，過濾且在真空中濃縮。使殘餘物與庚烷共沸，以移除剩餘的原甲酸三甲酯，得到呈淺米色油狀之標題化合物(71.5 g，99%)。δ_H (500 MHz, CDCl₃ ) 3.69 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.88 (m, 1H), 2.48-2.32 (m, 4H)。中間物 50 3,3- 二甲氧基 -1- 甲氧環丁烷甲酸甲酯 在氮氣氛圍下，在-78℃下，向THF (300 mL)中添加2 M LDA溶液(108.5 mL，217 mmol於THF中)。經25分鐘逐滴添加中間物 49 (90%，35 g，180.8 mmol)於THF (50 mL)中之溶液，保持內部溫度為-78℃。在完成添加之後，攪拌混合物30分鐘，接著逐滴添加碘甲烷(15 mL，241 mmol)。在-78℃下攪拌混合物30分鐘，接著經1小時升溫至室溫。將混合物倒入飽和NH₄ Cl水溶液(300 mL)中且用乙醚(2 × 500 mL)萃取。合併之有機相用鹽水洗滌且乾燥(Na₂ SO₄ )，接著過濾且蒸發至乾燥。藉由急驟管柱層析(含40% EtOAc之庚烷)純化殘餘物，得到呈淺黃色油狀之標題化合物 (23 g，57%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 3.70 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.68-2.55 (m, 2H), 2.13-1.99 (m, 2H), 1.43 (s, 3H)。中間物 51 二氘 (3,3- 二甲氧基 -1- 甲基環丁基 ) 甲醇 在氮氣氛圍下，在0℃下(冰浴)，向LiAlD₄ (5 g，119 mmol)於THF (400 mL)中之懸浮液中逐滴添加中間物 50 (27.2 g，118.5 mmol)於THF (100 mL)中之溶液。當添加完成時，在室溫下攪拌反應混合物隔夜，接著在冰浴中冷卻。在攪拌下逐滴添加水(5 mL)。用THF (150 mL)稀釋所形成之懸浮液，接著添加15%NaOH水溶液(5 mL)及水(15 mL)。向所得懸浮液中添加Na₂ SO₄ (40 g)，且攪拌混合物30分鐘。過濾顆粒狀懸浮液且用乙醚沖洗，接著在減壓下濃縮經合併之濾液，得到呈淺黃色油狀之標題化合物(23.8 g，99%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 3.22-3.07 (m, 6H), 2.17-2.03 (m, 2H), 1.93-1.78 (m, 2H), 1.18 (s, 3H)。中間物 52 3-[ 二氘 ( 羥基 ) 甲基 ]-3- 甲基環丁酮 向中間物 51 (23.8 g，117.3 mmol)於丙酮(240 mL)及水(80 mL)中之攪拌溶液中添加4-甲基苯磺酸水合物(1:1)(5 g，26.3 mmol)。在65℃下加熱反應混合物2小時，接著使其在室溫下靜置隔夜。在減壓下移除丙酮。用固體NaHCO₃ 將所得混合物鹼化至pH 8且用DCM (5 × 130 mL)萃取。合併之有機層經Na₂ SO₄ 乾燥且經由燒結漏斗過濾，接著在減壓下濃縮，得到呈淺褐色油狀之標題化合物 (16 g，94%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 3.12-2.92 (m, 2H), 2.79-2.57 (m, 2H), 1.69 (s, 1H), 1.36 (s, 3H)。中間物 53 3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 ( 二氘 ) 甲基 }-3- 甲基環丁酮 向中間物 52 (16 g，110 mmol)於DMF (100 mL)中之溶液中添加1H- 咪唑(15 g，220 mmol)及第三丁基(氯)二甲基矽烷(22 g，146 mmol)。在室溫下攪拌混合物隔夜，接著用乙醚(250 mL)及水(200 mL)稀釋。分離各層，接著用乙醚(250 mL)萃取水層。合併之有機相用鹽水(3 × 80 mL)洗滌且經MgSO₄ 乾燥，接著過濾且在真空中濃縮，得到呈淺褐色油狀之標題化合物 (30 g，97%)。δ_H (250 MHz, CDCl₃ ) 3.13-2.94 (m, 2H), 2.70-2.51 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H)。中間物 54 N -(3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 ( 二氘 ) 甲基 }-3- 甲基環亞丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在氮氣氛圍下，向中間物 53 (30 g，107 mmol)於無水THF (250 mL)中之溶液中相繼添加(R )-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(15.53 g，128.1 mmol)及乙醇鈦(IV)(50 mL，202.7 mmol)。在室溫下攪拌混合物24小時。向反應混合物中添加其他份之(R )-2-甲基丙烷-2-亞磺醯胺(2.8 g，23.1 mmol)及乙醇鈦(IV)(5 mL，20.27 mmol)，接著在65℃下攪拌4小時。使反應混合物冷卻至室溫且相繼添加水(13 mL)及EtOAc (200 mL)。反應混合物經矽藻土過濾且用EtOAc充分洗滌固體。濾液經Na₂ SO₄ 乾燥，接著過濾且在真空中蒸發。藉由管柱層析(含5-20% EtOAc之庚烷)純化粗殘餘物，得到呈黃色油狀之標題化合物 (31.5 g，84%)。δ_H (500 MHz, CDCl₃ ) 3.47-3.16 (m, 1H), 3.13-2.83 (m, 2H), 2.71-2.55 (m, 1H), 1.25-1.21 (m, 12H), 0.91-0.87 (m, 9H), 0.05 (s, 6H) (E /Z 異構體之1:1混合物)。中間物 55 N -[1-(5- 溴嘧啶 -2- 基 )-3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 ( 二氘 ) 甲基 }-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 在氮氣氛圍下，使5-溴-2-碘嘧啶(71.2 g，250 mmol)於無水DCM (1.25 L)中之溶液冷卻至-78℃。經由插管向溶液中添加2.5 M丁基鋰溶液(100 mL，250 mmol於己烷中)，保持內部溫度低於-68℃。在-78℃下攪拌黏稠懸浮液20分鐘。添加中間物 54 (24 g，68.3 mmol)於無水DCM (100 mL)中之溶液，保持內部溫度低於-68℃。在添加之後，攪拌混合物10分鐘，接著添加飽和NH₄ Cl水溶液(400 mL)及水(100 mL)。使混合物升溫至室溫，接著分離有機相且用DCM (2 × 300 mL)萃取水相。合併之有機相經Na₂ SO₄ 乾燥，接著過濾且在真空中蒸發。藉由急驟管柱層析(含20-100% EtOAc之庚烷)純化粗殘餘物，接著自庚烷再結晶。藉由急驟管柱層析(含20-35% EtOAc之庚烷)進一步純化殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物 (0.93 g)。δ_H (500 MHz, CDCl₃ ) 8.70 (s, 2H), 4.34 (s, 1H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 1H), 1.13 (s, 9H), 0.97 (s, 3H), 0.86-0.83 (m, 9H), 0.00 (s, 6H)。中間物 56 N -( 順 -3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 ( 二氘 ) 甲基 }-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟 - 甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 中間物 55 (1.36 g，2.51 mmol)、(7R ,14R )-1-(二氟-甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋-苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )(1.32 g，2.51 mmol)及磷酸三鉀(2.13 g，10 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)及水(1.5 mL)中之溶液用氮氣脫氣，接著添加參(二苯亞甲基丙酮)-二鈀(0)(0.12 g，0.13 mmol)及四氟硼酸三環己基鏻(0.11 g，0.3 mmol)。在100℃下加熱反應混合物16小時，接著用水(5 mL)稀釋且用EtOAc (3 × 15 mL)萃取。合併有機相，用飽和鹽水(10 mL)洗滌且經Na₂ SO₄ 乾燥，接著過濾且在真空中蒸發。使用55 g KP-NH管柱藉由管柱層析(含50-100% EtOAc之庚烷，接著含0-15%MeOH之EtOAc)純化所得褐色油，，得到呈黃色粉末狀之標題化合物 (1.68 g，94%)。δ_H (500 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.8 Hz, 1H), 9.08 (s, 2H), 8.23 (dd,J 7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.84-7.67 (m, 3H), 7.64 (dd,J 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.55-7.47 (m, 2H), 6.37 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.90 (t,J 6.8 Hz, 1H), 3.54-3.45 (m, 1H), 2.75 (d,J 13.3 Hz, 1H), 2.70 (d,J 12.3 Hz, 1H), 2.46-2.40 (m, 3H), 1.07 (s, 9H), 0.94 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.07 (d,J 0.8 Hz, 6H)。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 753.4, RT 1.87分鐘(方法 1 )。中間物 57 N -[ 順 -3-({[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 } 甲基 )-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]- 嘧啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 根據關於中間物 56 所描述之實驗程序，由中間物 32 及(7R,14R)-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H)-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )製備。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 751.2, RT 3.20分鐘(方法 1 )。中間物 58 N -[1-(5- 溴 -3- 氟吡啶 -2- 基 )-3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 ( 二氘 )- 甲基 }-3- 甲基環丁基 ]-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 根據關於中間物 55 所描述之實驗程序，由中間物 54 及2,5-二溴-3-氟吡啶製備。δ_H (500 MHz, CDCl₃ ) 8.41-8.35 (m, 1H), 7.47 (dd,J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.76 (s, 1H), 2.70 (d,J 12.9 Hz, 1H), 2.48-2.38 (m, 2H), 2.37-2.30 (m, 1H), 1.07 (s, 9H), 0.87 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.00 (s, 6H)。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 509.05, RT 1.67分鐘(方法 1 )。中間物 59 N -( 順 -3-{[ 第三丁基 ( 二甲基 ) 矽烷基 ] 氧基 ( 二氘 ) 甲基 }-1-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟 - 甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-3- 甲基環丁基 )-2- 甲基丙烷 -2- 亞磺醯胺 根據關於中間物 56 所描述之實驗程序，由中間物 58 及(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-11-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊環-2-基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮(WO 2016/050975，中間物 171 )製備。δ_H (500 MHz, DMSO-d₆ ) 9.14 (d,J 6.8 Hz, 1H), 8.73-8.62 (m, 1H), 8.23 (dd,J 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.89 (dd,J 12.2, 1.8 Hz, 1H), 7.86-7.54 (m, 4H), 7.54-7.47 (m, 2H), 6.36 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.89 (t,J 6.8 Hz, 1H), 3.49 (dt,J 13.4, 6.9 Hz, 1H), 2.74 (d,J 13.3 Hz, 1H), 2.68-2.57 (m, 2H), 2.48-2.41 (m, 2H), 1.04 (s, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.87 (s, 3H), 0.07 (d,J 1.2 Hz, 6H)。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 770.3, RT 1.60分鐘(方法 1 )。實例 1 順 -3- 胺基 -3-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-1- 甲基 - 環丁烷甲腈 向溶解於MeOH (5 mL)中之中間物 5 (178 mg，0.24 mmol)中添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(0.31 mL)。在室溫下攪拌反應混合物90分鐘，接著在真空中移除溶劑。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用100% DCM至25% MeOH/DCM進行梯度溶離)純化所得褐色玻璃。藉由製備型HPLC純化所得順式及反式異構體之混合物，得到呈白色固體狀之標題化合物 (9 mg，7%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.07 (s, 2H), 8.32-8.20 (m, 1H), 7.96-7.40 (m, 6H), 6.31 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d,J 7.1 Hz, 1H), 3.52 (dt,J 14.1, 7.4 Hz, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.88-2.75 (m, 3H), 2.64-2.57 (m, 2H), 1.46 (s, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 542.0, RT 1.766分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 542.2, RT 1.43分鐘(方法 2 )。實例 2 順 -3- 胺基 -3-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ] 嘧啶 -2- 基 }-1- 甲基 - 環丁烷甲腈 向溶解於1,4-二噁烷(5 mL)中之中間物 6 (50 mg，0.079 mmol)中添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(5 mL)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，接著分離於EtOAc (10 mL)與0.5M鹽酸水溶液(10 mL)之間。水層用DCM (2 × 10 mL)洗滌，接著用碳酸鈉水溶液鹼化且萃取至DCM中。在真空中濃縮有機層。藉由製備型HPLC純化所得粗白色固體(順式及反式異構體之混合物)，得到標題化合物 (12 mg，29%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.8 Hz, 1H), 9.07 (s, 2H), 8.23 (dd,J 5.7, 3.7 Hz, 1H), 7.97-7.43 (m, 6H), 6.36 (d,J 6.9 Hz, 1H), 4.90 (t,J 6.8 Hz, 1H), 3.59-3.39 (m, 1H), 2.85-2.68 (m, 3H), 2.65-2.57 (m, 2H), 1.46 (s, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 528.0, RT 1.69分鐘(方法 1 )。實例 3 順 -3- 胺基 -3-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-1- 甲基環丁烷甲腈 使中間物 8 (120 mg，0.181 mmol)溶解於含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(5 mL)中。攪拌反應混合物1小時。添加乙醚且過濾沈澱物，得到呈白色固體狀之標題化合物 (82 mg，81%)(含有7%的反式異構體)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 8.99 (s, 3H), 8.84 (t,J 1.8 Hz, 1H), 8.28 (p,J 4.3 Hz, 1H), 8.20 (dd,J 12.3, 1.8 Hz, 1H), 7.95-7.43 (m, 6H), 6.31 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.28 (d,J 7.0 Hz, 1H), 3.61-3.49 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.33-3.13 (m, 4H), 2.86 (d,J 13.8 Hz, 1H), 1.29 (s, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 559.0, RT 1.93分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 559.0, 1.71分鐘(方法 2 )。實例 4 順 -3- 胺基 -3-{5-[(7R ,14R )-1-( 二氟甲氧基 )-5- 側氧基 -5,6,7,14- 四氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -11- 基 ]-3- 氟吡啶 -2- 基 }-1- 甲基 - 環丁烷甲腈 使中間物 9 (102 mg，0.157 mmol)溶解於1,4-二噁烷(5 mL)中且用含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(5 mL)處理。攪拌反應混合物1小時。添加乙醚，且過濾所形成之沈澱物。藉由製備型HPLC純化粗殘餘物(順式及反式異構體之混合物，81 mg)，得到標題化合物 (11 mg，13%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.9 Hz, 1H), 8.62 (t,J 1.8 Hz, 1H), 8.23 (dd,J 6.4, 3.0 Hz, 1H), 7.99-7.44 (m, 7H), 6.35 (d,J 7.1 Hz, 1H), 4.89 (t,J 6.7 Hz, 1H), 3.49 (dt,J 13.4, 7.2 Hz, 1H), 2.85-2.71 (m, 3H), 2.68-2.59 (m, 2H), 2.38 (s, 2H), 1.35 (s, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 545.0, RT 1.79分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 545.2, RT 1.38分鐘(方法 2 )。實例 5 (7R ,14R )-11-{6-[(1S ,2R )-1- 胺基 -2- 甲基環丁基 ]-5- 氟吡啶 -3- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮或 (7R ,14R )-11-{6-[(1R ,2S )-1- 胺基 -2- 甲基環丁基 ]-5- 氟吡啶 -3- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 向溶解於乙腈(10 mL)中之中間物 12 (135 mg，0.22 mmol)中添加2 M鹽酸水溶液(10 mL)。在真空中濃縮反應混合物且用2 M氫氧化鈉水溶液(30 mL)處理。用DCM (3 × 20 mL)萃取混合物。合併有機層且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用含0-20% MeOH之DCM進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物 (112 mg，100%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.8 Hz, 1H), 8.60 (t,J 1.9 Hz, 1H), 8.23 (dd,J 6.5, 3.0 Hz, 1H), 7.95-7.42 (m, 7H), 6.36 (d,J 7.1 Hz, 1H), 4.89 (t,J 6.8 Hz, 1H), 3.48 (dq,J 13.9, 7.0 Hz, 1H), 2.83-2.67 (m, 2H), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.01-1.82 (m, 4H), 1.80-1.63 (m, 1H), 1.14 (d,J 6.8 Hz, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 520.0, RT 1.68分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 520.2, RT 1.45分鐘(方法 2 )。實例 6 (7R ,14R )-11-[2-(1- 胺基環丁基 ) 嘧啶 -5- 基 ]-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 向中間物 17 (18.0 g，29.9 mmol)於1,4-二噁烷(25 mL)中之溶液中添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(40 mL)。在室溫下攪拌所得混合物1小時，隨後在真空中濃縮。使殘餘物溶解於水(500 mL)中且用EtOAc (2 × 300 mL)洗滌。用2 N氫氧化鈉水溶液將水層鹼化至pH 9，引起固體沈澱。添加EtOAc (500 mL)且攪拌混合物直至所有固體溶解。分配殘餘物，接著再用EtOAc (500 mL)萃取水層。合併之有機層經Na₂ SO₄ 乾燥且過濾，隨後在真空中濃縮且在高真空中乾燥隔夜。使泡沫狀殘餘物懸浮於乙醚及己烷之混合物(150 mL)中，接著攪拌且劇烈振盪，隨後在真空中濃縮，得到呈白色非晶形固體狀之標題化合物 (12.4 g，83%)。δ_H (400 MHz, DMSO-d₆ ) 9.05 (s, 2H), 8.32-8.22 (m, 1H), 7.91-7.66 (m, 3H), 7.62 (dd,J 8.5, 1.8 Hz, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 6.31 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d,J 7.2 Hz, 1H), 3.52 (dt,J 14.2, 7.3 Hz, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.84 (d,J 13.8 Hz, 1H), 2.63 (dtd,J 11.5, 5.6, 2.5 Hz, 2H), 2.38 (s, 2H), 2.16-2.05 (m, 2H), 2.04-1.91 (m, 1H), 1.87-1.73 (m, 1H)。LCMS (ES+APCI) [M-NH₂ ]^- 486.0, RT 1.66分鐘(方法 2 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 503.0, RT 1.71分鐘(方法 1 )。實例 7 (7R ,14R )-11-[6-( 順 -1- 胺基 -3- 羥基 -3- 甲基環丁基 )-5- 氟吡啶 -3- 基 ]-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 向中間物 24 (44.6 g，58.1 mmol)於MeOH (290 mL)中之攪拌溶液中添加含鹽酸之1,4-二噁烷(4.0 M，100 mL，400 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物3小時，接著用DCM (400 mL)稀釋。添加水(400 mL)，接著分離各層。用2 N鹽酸水溶液(2 × 200 mL)萃取有機層。合併水性提取物且用DCM洗滌兩次。用固體碳酸鉀使水層呈鹼性，且添加額外的水。用DCM/MeOH混合物(約1:1)萃取水性懸浮液三次。乾燥(Na₂ SO₄ )經合併之有機萃取物，過濾且在真空中濃縮。用乙醚濕磨粗殘餘物且攪拌混合物60小時。藉由過濾收集米色固體，接著用乙醚洗滌且經氣流乾燥，得到標題化合物 (26.5 g，83%)。δ_H (400 MHz, DMSO-d₆ ) 8.62 (s, 1H), 8.31-8.23 (m, 1H), 7.92-7.86 (m, 1H), 7.77-7.72 (m, 2H), 7.70 (t,J 71.9 Hz, 1H), 7.60 (d,J 9.3 Hz, 1H), 7.52-7.48 (m, 2H), 6.30 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.25 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 3.56-3.47 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.86 (t,J 13.3 Hz, 3H), 2.26-2.18 (m, 4H), 1.00 (s, 3H)。LCMS [M+H]⁺ 550, RT 2.37分鐘(方法 7 )。實例 8 (7R ,14R )-11-[6-( 順 -1- 胺基 -3- 羥基 -3- 甲基環丁基 )-5- 氟吡啶 -3- 基 ]-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 使中間物 25 (930 mg，1.23 mmol)溶解於乙醇(20 mL)中，且在0℃下添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(5 mL)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜，隨後在真空中濃縮。使殘餘物再溶解於1 M鹽酸水溶液中且用DCM洗滌兩次。水層用2 M氫氧化鈉水溶液鹼化至pH 10且用三份DCM萃取。合併有機相且在真空中濃縮。藉由二氧化矽急驟管柱層析(用0-100% EtOAc/己烷，接著0-20% MeOH/[含10% 7 N氨之MeOH/DCM]進行梯度溶離)純化粗殘餘物，得到標題化合物 (580 mg，88%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.8 Hz, 1H), 8.62 (d,J 2.3 Hz, 1H), 8.23 (dd,J 6.7, 2.8 Hz, 1H), 7.98-7.80 (m, 1H), 7.79-7.65 (m, 3H), 7.64-7.38 (m, 3H), 6.36 (d,J 7.0 Hz, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.89 (t,J 6.7 Hz, 1H), 3.49 (dt,J 13.4, 7.1 Hz, 1H), 2.87 (d,J 11.7 Hz, 2H), 2.75 (d,J 13.3 Hz, 1H), 2.22 (t,J 6.0 Hz, 4H), 1.00 (s, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 536.0, RT 1.52分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 536.2, RT 1.26分鐘(方法 2 )。實例 9 (7R ,14R )-11-{2-[ 順 -1- 胺基 -3-( 羥基甲基 )-3- 甲基環丁基 ] 嘧啶 -5- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 向中間物 33 (17.5 g，22.9 mmol)於MeOH (114 mL)中之攪拌溶液中添加含鹽酸之1,4-二噁烷(4.0 M，34.3 mL，137 mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時，接著添加DCM (200 mL)及水(200 mL)。分離各層且用2 N鹽酸水溶液(2 × 100 mL)萃取有機層。經合併之水相用DCM (2 × 100 mL)洗滌，接著用固體碳酸鉀使其呈鹼性。用DCM/MeOH混合物(約1:1；4 × 150 mL)萃取水性懸浮液。乾燥(Na₂ SO₄ )經合併之有機萃取物，過濾且在真空中濃縮。粗殘餘物用乙醚濕磨且攪拌隔夜。過濾懸浮液且風乾，得到呈淡米色固體狀之標題化合物 (11.3 g，90%)。δ_H (400 MHz, DMSO-d₆ ) 9.06 (s, 2H), 8.30-8.25 (m, 1H), 7.78 (d,J 8.5 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.69 (t,J 73.3 Hz, 1H), 7.63 (d,J 8.5 Hz, 1H), 7.50 (d,J 5.7 Hz, 2H), 6.31 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d,J 7.1 Hz, 1H), 3.57-3.48 (m, 1H), 3.45 (s, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.84 (d,J 13.8 Hz, 1H), 2.46 (d,J 12.6 Hz, 2H), 2.09 (d,J 12.8 Hz, 2H), 1.07 (s, 3H)。LCMS [M+H]⁺ 547, RT 2.45分鐘(方法 7 )。實例 10 (7R ,14R )-11-{6-[ 順 -1- 胺基 -3-( 羥基甲基 )-3- 甲基環丁基 ]-5- 氟吡啶 -3- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 使中間物 35 (347 mg，0.45 mmol)溶解於乙醇(10 mL)中，且在0℃下添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(2.5 mL)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜。在真空中濃縮反應混合物，再溶解於1 M鹽酸水溶液中且用DCM洗滌兩次。水層用2 M氫氧化鈉水溶液鹼化至pH 10且用三份DCM萃取。合併有機相且在真空中濃縮。在二氧化矽上純化粗殘餘物(用0-100% EtOAc/己烷，接著0-50% DCM/[含10% 7 N氨之MeOH]進行梯度溶離)，得到標題化合物 (194 mg，78%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.8 Hz, 1H), 8.62 (t,J 1.8 Hz, 1H), 8.23 (dd,J 6.5, 2.8 Hz, 1H), 7.96-7.39 (m, 7H), 6.36 (d,J 7.1 Hz, 1H), 4.89 (t,J 6.8 Hz, 1H), 3.57-3.45 (m, 1H), 3.43 (s, 2H), 2.75 (d,J 13.2 Hz, 1H), 2.49-2.43 (m, 2H), 2.14 (d,J 12.6 Hz, 2H), 0.94 (s, 3H)。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 550.0, RT 1.68分鐘(方法 1 )。LCMS (ES+) [M+H]⁺ 550.2, RT 1.46分鐘(方法 2 )。實例 11 (7R ,14R )-11-{6-[ 順 -1- 胺基 -3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-5- 氟吡啶 -3- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 在室溫下，向中間物 43 (823 mg，1.16 mmol)於1,4-二噁烷(15 mL)中之攪拌溶液中添加含鹽酸之1,4-二噁烷(4 M，8.72 mL)。攪拌混合物0.5小時，隨後在真空中濃縮。使所得灰白色固體溶解於MeOH (10 mL)中且裝載至用MeOH (2 × 15 mL)洗滌之離子交換筒(SCX-2)上。用含2.0 M氨之MeOH (3 × 15 mL)溶離材料。在真空中濃縮濾液。對粗殘餘物(反式及順式異構體之混合物，642 mg)進行逆相二氧化矽急驟管柱層析(用摻有0.1%甲酸之含10-23%乙腈之水進行梯度溶離)，得到呈不透明膠狀之第一溶離份(反式異構體，295 mg)，使其懸浮於1:1乙腈-水(4 mL)中且用1 M鹽酸水溶液(538 μL)處理。冷凍乾燥所得溶液，得到呈無色固體狀之反式異構體(298 mg，42%)。在真空中濃縮第二溶離份(順式異構體)且經由製備型HPLC (用摻有0.1%甲酸之含0-100%乙腈之水溶離)再純化。使所得灰白色固體(單甲酸鹽)溶解於MeOH (15 mL)中且裝載至離子交換柱(SCX-2)上。材料用MeOH (2 × 15 mL)洗滌且用含2.0 M氨之MeOH (3 × 15 mL)溶離。在真空中濃縮濾液。使所得不透明玻璃(游離鹼，147 mg)懸浮於1:1乙腈-水(4 mL)中且用1 M鹽酸水溶液(268 μL)處理。冷凍乾燥所得溶液，得到呈無色固體狀之標題化合物(順式異構體，144 mg，21%)。δ_H (500 MHz, CD₃ OD) 8.84 (d,J 1.5 Hz, 1H), 8.46-8.39 (m, 1H), 8.07 (dd,J 12.1, 1.8 Hz, 1H), 8.04 (d,J 1.3 Hz, 1H), 7.90 (d,J 8.6 Hz, 1H), 7.83 (dd,J 8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.57-7.52 (m, 2H), 7.51-7.21 (m, 1H), 6.64 (d,J 7.2 Hz, 1H), 5.48 (d,J 7.2 Hz, 1H), 3.75-3.65 (m, 1H), 3.58 (d,J 15.1 Hz, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.05 (d,J 13.9 Hz, 1H), 2.76 (d,J 15.3 Hz, 2H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 604.2, RT 2.04分鐘(方法 11 )。實例 12 (7R ,14R )-11-{2-[ 順 -1- 胺基 -3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ] 嘧啶 -5- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6- 甲基 -6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 在環境溫度下，向中間物 46 (474 mg，0.69 mmol)於1,4-二噁烷(10 mL)中之攪拌溶液中添加含鹽酸之1,4-二噁烷(4 M，5.15 mL)。攪拌混合物2小時，隨後在真空中濃縮。使所得粗灰白色固體溶解於MeOH (10 mL)中且裝載至用MeOH (2 × 25 mL)洗滌之離子交換柱(SCX-2)上。用含2.0 M氨之MeOH (3 × 15 mL)溶離材料。在真空中濃縮濾液。藉由製備型HPLC (用含0-100%甲酸之乙腈溶離)純化粗殘餘物(反式及順式異構體之混合物，396 mg)，得到第一溶離份(反式異構體)，其在真空中濃縮，接著溶解於MeOH (5 mL)中且裝載至離子交換柱(SCX-2)上。用MeOH (2 × 15 mL)洗滌管柱且用含2.0 M氨之MeOH (3 × 15 mL)溶離材料。在真空中濃縮濾液。使所得不透明玻璃(游離鹼，215 mg)懸浮於1:1乙腈-水(4 mL)中且用1 M鹽酸水溶液(400 μL)處理。冷凍乾燥所得溶液，得到呈無色固體狀之反式異構體(203 mg，47%)。在真空中濃縮第二溶離份(順式異構體)，接著溶解於MeOH (5 mL)中且裝載至離子交換柱(SCX-2)上。用MeOH (2 × 15 mL)洗滌管柱且用含2.0 M氨之MeOH (3 × 15 mL)溶離材料。在真空中濃縮濾液。使所得不透明玻璃(游離鹼，118 mg)懸浮於1:1乙腈-水(2 mL)中且用1 M鹽酸水溶液(222 μL)處理。冷凍乾燥所得溶液，得到呈無色固體狀之標題化合物(順式異構體，118 mg，24%)。δ_H (500 MHz, CD₃ OD) 9.19 (s, 2H), 8.44-8.36 (m, 1H), 8.00 (d,J 1.2 Hz, 1H), 7.89 (d,J 8.6 Hz, 1H), 7.81-7.72 (m, 1H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.49-7.21 (m, 1H), 6.59 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.42 (d,J 7.2 Hz, 1H), 3.72-3.64 (m, 1H), 3.58-3.53 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.01 (d,J 13.9 Hz, 1H), 2.67-2.59 (m, 2H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 587.2, RT 1.95分鐘(方法 11 )。實例 13 (7R ,14R )-11-{6-[ 順 -1- 胺基 -3- 羥基 -3-( 三氟甲基 ) 環丁基 ]-5- 氟吡啶 -3- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 向中間物 48 (440 mg，0.55 mmol)於1,4-二噁烷(8 ml)中之溶液中添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(4.14 mL)。在室溫下攪拌反應混合物1小時，隨後在真空中濃縮。將粗殘餘物裝載至DCM/MeOH中之離子交換柱(SCX-2)上。用MeOH (50 mL)洗滌管柱，且用含2 M氨之MeOH (50 mL)溶離產物。藉由製備型HPLC純化粗物質(反式及順式異構體之混合物，350 mg)。使含有順式異構體之溶離份懸浮於1:1乙腈-水(4 mL)中且用含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(300 μL)處理。冷凍乾燥溶液，得到呈灰白色粉末狀之標題化合物 (鹽酸鹽，132 mg，38%)。δ_H (500 MHz, CD₃ OD) 8.82 (t,J 1.6 Hz, 1H), 8.36 (dd,J 7.2, 2.2 Hz, 1H), 8.04 (dd,J 12.2, 1.8 Hz, 1H), 7.95 (d,J 1.3 Hz, 1H), 7.82 (d,J 8.5 Hz, 1H), 7.70 (dd,J 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.58-7.17 (m, 3H), 6.60 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.15-5.05 (m, 1H), 3.66-3.53 (m, 3H), 2.93 (d,J 13.5 Hz, 1H), 2.79-2.71 (m, 2H)。LCMS (ESI) [M+H]⁺ 590.1, RT 1.65分鐘(方法 11 )。實例 14 (7R ,14R )-11-(2-{ 順 -1- 胺基 -3-[ 羥基 ( 二氘 ) 甲基 ]-3- 甲基環丁基 }- 嘧啶 -5- 基 )-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5]- 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 向中間物 56 (500 mg，0.66 mmol)於1,4-二噁烷(5 mL)中之攪拌溶液中添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(0.66 mL)。在室溫下攪拌反應混合物18小時，接著在減壓下濃縮。使用20 g SCX-2濾筒(用含2 M氨之甲醇溶離)純化所得灰白色固體。藉由逆相管柱層析(含10-60%乙腈之水(+0.1%甲酸))進一步純化所得灰白色固體。合併相關溶離份且在減壓下移除溶劑。使所得無色膠狀物懸浮於1:1乙腈:水中且添加1 M HCl (1.3當量)。冷凍乾燥所得溶液，得到呈白色粉末狀之標題化合物 ，鹽酸鹽(199 mg)。δ_H (500 MHz, DMSO-d₆ ) 9.22 (s, 2H), 9.19 (d,J 6.9 Hz, 1H), 8.77 (s, 3H), 8.26-8.20 (m, 1H), 7.87-7.54 (m, 4H), 7.55-7.49 (m, 2H), 6.40 (d,J 7.1 Hz, 1H), 4.96 (t,J 6.9 Hz, 1H), 3.54-3.48 (m, 1H), 2.78 (d,J 13.3 Hz, 1H), 2.62 (d,J 14.0 Hz, 2H), 2.53-2.51 (m, 2H), 1.21 (s, 3H)。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 535.3, RT 2.25分鐘(方法 1 )。實例 15 (7R ,14R )-11-{2-[ 順 -1- 胺基 -3-( 羥基甲基 )-3- 甲基環丁基 ] 嘧啶 -5- 基 }-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ][2,5] 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 在0℃下，向中間物 57 (180 mg，0.24 mmol)於乙醇(12 mL)中之溶液中添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(2.5 mL，10 mmol)。使反應混合物升溫至室溫且攪拌隔夜，隨後在真空中濃縮。使殘餘物再溶解於1 M HCl水溶液中且用DCM (2 × 2.5 mL)洗滌。用2 M NaOH水溶液將水層鹼化至pH 10且用DCM (2 × 2.5 mL)萃取。合併有機相且在真空中濃縮。藉由管柱層析(含0-100% EtOAc之己烷，接著含0-20% MeOH及10% 7 N氨之DCM)純化粗殘餘物，得到呈白色固體狀之標題化合物(62 mg，49%)。δ_H (300 MHz, DMSO-d₆ ) 9.15 (d,J 6.8 Hz, 1H), 9.05 (s, 2H), 8.23 (dd,J 5.9, 3.6 Hz, 1H), 7.81-7.66 (m, 2H), 7.77 (t,J 48 Hz, 1H), 7.61 (dd,J 8.5, 1.8 Hz, 1H), 7.55-7.41 (m, 2H), 6.37 (d,J 7.1 Hz, 1H), 5.50 (br s, 1H), 4.90 (t,J 6.7 Hz, 1H), 3.50 (dd,J 13.6, 6.9 Hz, 1H), 3.45 (s, 2H), 2.75 (d,J 13.5 Hz, 1H), 2.44 (d,J 12.9 Hz, 2H), 2.09 (d,J 12.9 Hz, 2H), 1.07 (s, 3H)。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 533, RT 1.51分鐘(方法 1 )。實例 16 (7R ,14R )-11-(6-{ 順 -1- 胺基 -3-[ 羥基 ( 二氘 ) 甲基 ]-3- 甲基環丁基 }-5- 氟吡啶 -3- 基 )-1-( 二氟甲氧基 )-6,7- 二氫 -7,14- 甲橋苯并咪唑并 [1,2-b ]-[2,5] 苯并二氮㖕 -5(14H )- 酮 使中間物 59 (130 mg，0.17 mmol)溶解於1,4-二噁烷(3 mL)中且添加含4 M鹽酸之1,4-二噁烷(0.9 mL)。攪拌混合物10分鐘，接著用甲醇(3 mL)稀釋且攪拌2小時。在真空中濃縮混合物且在10 g SCX濾筒上純化殘餘物(用含2 M氨之甲醇溶離)。使殘餘物溶解於1:1乙腈:水(約5 mL)中，接著用HCl水溶液(1.2當量)處理且冷凍乾燥，得到呈灰白色固體狀之標題化合物 ，鹽酸鹽(80 mg，79%)。δ_H (500 MHz, DMSO-d₆ ) 9.16 (d,J 6.9 Hz, 1H), 8.85-8.77 (m, 1H), 8.67 (s, 3H), 8.24 (dd,J 6.3, 3.1 Hz, 1H), 8.15 (dd,J 12.7, 1.8 Hz, 1H), 7.87-7.54 (m, 4H), 7.54-7.48 (m, 2H), 6.37 (d,J 7.1Hz, 1H), 4.93 (t,J 6.8 Hz, 1H), 3.53-3.48 (m, 1H), 2.77 (d,J 13.3 Hz, 1H), 2.75-2.69 (m, 2H), 2.57 (d,J 13.5 Hz, 2H), 1.08 (s, 3H)。LCMS (ESI+) [M+H]⁺ 552.5, RT 1.99分鐘(方法 1 )。

Claims (13)

1. 一種式(I)化合物，或其醫藥學上可接受之鹽：其中 X表示N或C-F； R¹ 表示氫或甲基； R² 表示氫、甲基或三氟甲基；及 R³ 表示氫、氰基、羥基或羥基甲基。
2. 如請求項1之化合物，其由式(IIA)表示，或其醫藥學上可接受之鹽：其中X、R¹ 、R² 及R³ 係如請求項1中所定義。
3. 如請求項1之化合物，其由式(IIB)表示，或其醫藥學上可接受之鹽：其中X、R¹ 、R² 及R³ 係如請求項1中所定義。
4. 如請求項1之化合物，其選自以下： 順-3-胺基-3-{5-[(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-5-側氧基(oxo)-5,6,7,14-四氫-7,14-甲橋(methano)苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕 (diazocin)-11-基]嘧啶-2-基}-1-甲基-環丁烷甲腈； 順-3-胺基-3-{5-[(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-5-側氧基-5,6,7,14-四氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-11-基]嘧啶-2-基}-1-甲基-環丁烷甲腈； 順-3-胺基-3-{5-[(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-5-側氧基-5,6,7, 14-四氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-11-基]-3-氟吡啶-2-基}-1-甲基環丁烷甲腈； 順-3-胺基-3-{5-[(7R ,14R )-1-(二氟甲氧基)-5-側氧基-5,6,7,14-四氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-11-基]-3-氟吡啶-2-基}-1-甲基-環丁烷甲腈； (7R ,14R )-11-{6-[(1S ,2R )-1-胺基-2-甲基環丁基]-5-氟吡啶-3-基}-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{6-[(1R ,2S )-1-胺基-2-甲基環丁基]-5-氟吡啶-3-基}-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-[2-(1-胺基環丁基)嘧啶-5-基]-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-[6-(順-1-胺基-3-羥基-3-甲基環丁基)-5-氟吡啶-3-基]-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-[6-(順-1-胺基-3-羥基-3-甲基環丁基)-5-氟吡啶-3-基]-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{2-[順-1-胺基-3-(羥基甲基)-3-甲基環丁基]嘧啶-5-基}-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{6-[順-1-胺基-3-(羥基甲基)-3-甲基環丁基]-5-氟吡啶-3-基}-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{6-[順-1-胺基-3-羥基-3-(三氟甲基)環丁基]-5-氟吡啶-3-基}-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{2-[順-1-胺基-3-羥基-3-(三氟甲基)環丁基]嘧啶-5-基}-1-(二氟甲氧基)-6-甲基-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{6-[順-1-胺基-3-羥基-3-(三氟甲基)環丁基]-5-氟吡啶-3-基}-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-(2-{順-1-胺基-3-[羥基(二氘)甲基]-3-甲基環丁基}-嘧啶-5-基)-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]-苯并二氮㖕-5(14H )-酮； (7R ,14R )-11-{2-[順-1-胺基-3-(羥基甲基)-3-甲基環丁基]嘧啶-5-基}-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ][2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮；及 (7R ,14R )-11-(6-{順-1-胺基-3-[羥基(二氘)甲基]-3-甲基環丁基}-5-氟吡啶-3-基)-1-(二氟甲氧基)-6,7-二氫-7,14-甲橋苯并咪唑并[1,2-b ]-[2,5]苯并二氮㖕-5(14H )-酮。
5. 如請求項1之式(I)化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於療法。
6. 如請求項1之式(I)化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療及/或預防指示投與TNFα功能調節劑之病症。
7. 如請求項1之式(I)化合物，或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療及/或預防發炎或自體免疫病症、神經或神經退化性病症、疼痛或感受傷害性(nociceptive)病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病或腫瘤病症。
8. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與醫藥學上可接受之載劑組合。
9. 如請求項8之醫藥組合物，其進一步包含其他醫藥活性成分。
10. 一種如請求項1之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療及/或預防指示投與TNFα功能調節劑的病症之藥劑。
11. 一種如請求項1之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製造用以治療及/或預防以下之藥劑：發炎或自體免疫病症、神經或神經退化性病症、疼痛或感受傷害性病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病或腫瘤病症。
12. 一種用於治療及/或預防指示投與TNFα功能調節劑的病症之方法，其包含向需要此治療之患者投與有效量之如請求項1之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
13. 一種治療及/或預防發炎或自體免疫病症、神經或神經退化性病症、疼痛或感受傷害性病症、心臟血管病症、代謝病症、眼病或腫瘤病症之方法，其包含向需要此治療之患者投與有效量之如請求項1之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。