TW201841655A - 毛囊幹細胞之增生方法 - Google Patents

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布拉德里 泰特
雷賈許 曼查達
威爾 麥克廉
梅根 哈里森
莎拉 史崔克
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Abstract

本發明關於包含音蝟(Shh)途徑活化劑與Wnt促效劑之組成物及使用彼等組成物來誘導毛囊幹細胞自我更新的方法，包括誘導毛囊幹細胞增生同時於子細胞中維持分化成毛囊上皮細胞之能力。

Description

毛囊幹細胞之增生方法
本發明關於使用一或多種音猬(sonic hedgehog；Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt途徑活化劑來誘導、促進、或增強毛囊中幹細胞的生長、增生及/或再生，同時在子細胞中維持分化成毛囊上皮細胞的能力之方法。於一種具體實施例中，毛囊中的幹細胞是皮乳突(dermal papilla)中的皮乳突幹細胞。於一些具體實施例中，一或多種Wnt活化劑為一或多種肝醣合成酶(glycogen synthase；GSK)抑制劑。於一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為一或多種1H-吡咯-2,5-二酮化合物。
幹細胞展現出在體內產生多種細胞類型的非凡能力。除了胚胎幹細胞之外，組織特異性幹細胞在發育期間以及在成體內穩態及損傷修復中扮演關鍵角色。幹細胞通過增生而自我更新，並通過分化而產生組織特異性細胞類型。不同幹細胞的特性因組織而異，並且由彼等內在的遺傳及表觀遺傳狀態決定。然而，不同幹細胞的自我更新與分化之間的平衡都受到嚴格控制。不受控制的自我更新可能導致幹細胞的過度生長及可能的腫瘤形成，而不受控制的分化可能耗盡幹細胞池，導致支撐組織體內平衡的能力受損。因此，幹細胞不斷感知它們的環境並且適當地回應以增生、分化或細胞凋亡。可能所欲者為藉由控制幹細胞增生及分化的時機及程度來驅動再生。以因時間會被清除的小分子來控制增生將允許控制幹細胞增生及分化的時機及程度。值得注意的是，儘管以非常依賴前後狀況(context dependent)的方式，來自不同組織的組織幹細胞仍共享有限數目之調節彼等自我更新及分化的傳訊途徑。這些途徑中的一些是Wnt及GSK3途徑。
掉髮，如禿髮，是一種由身體毛髮生成循環中斷造成的疾病。掉髮可以發生在身體的任何地方，但最常見的是影響頭皮。平均而言，頭皮有100,000根通過生長期、休息期、脫落期及再生期循環的頭髮。雖然不是威脅生命的狀況，且主要是一種‘美容’問題，但掉髮會影響生活質量。在一個以形象為導向的社會中，掉髮對個人的情緒狀態有重大影響。掉髮可能與人的遺傳學有關，儘管許多醫療及行為條件可能會中斷生長循環並造成掉髮。
對於掉髮，沒有治愈性療法。目前的治療涉及局部藥品，諸如抗高血壓血管舒張劑米諾地爾(minoxidil)或免疫抑制類固醇霜劑。皮質類固醇療法也可藉由注射投予。也使用口服處方藥品，諸如非那斯特萊(finasteride)、抗雄性素(antiandrogens)及抗真菌藥品。然而，這些治療可能伴隨著藥品的不良作用，且如果治療間斷，患者可能會復發。掉髮也可藉由皮膚美容 (dermatography)及假髮而美容治療，但這些美容解決方案也不能提供治愈。
因此，仍有長期以來對於可保持/促進毛囊中的細胞功能以對抗掉髮的新化合物的需求。
本揭露提供一種使用一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑來誘導毛囊中幹細胞自我更新的方法。本揭露也提供包含一或多種Shh途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑的醫藥組成物。這些組成物有用於，例如治療與掉髮(hair loss)相關之疾病，諸如禿髮(alopecia)。
於一種態樣中，本揭露提供一種擴大毛囊的幹細胞族群的方法，該方法包含使幹細胞與一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑接觸。
於另一種態樣中，本揭露提供一種促進毛囊上皮細胞的產生的方法，該方法包含以一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑處理毛囊的幹細胞。
於一種具體實施例中，幹細胞為皮乳突幹細胞。於另一種具體實施例中，幹細胞為毛囊幹細胞。於一些具體實施例中，幹細胞包含角質細胞、黑色素細胞、皮乳突細胞、隆起細胞(bulge cells)、或其組合。於一些具體實施例中，幹細胞於個體中。於本文中所述方法的一些具體實施例中，毛囊中之Gli1、Krt15、CD34、Lgr5、Lgr6、Lrig1、Sox2、CD133、波形蛋白(Vimentin)、多功能蛋白聚糖(Versican)及/或鹼性磷酸酶的表現增加。
於另一種態樣中，本揭露提供一種治療患有或有風險發展成與不存在或缺乏毛囊上皮細胞相關之疾病的個體的方法，該方法包含對該個體投予一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑。於一些具體實施例中，該疾病係選自休止期脫髮、生長期脫髮、雄性禿、斑禿、髮癬、扁平毛髮苔癬(lichen planopilaris)、瘢痕性禿髮、圓盤狀紅斑狼瘡(discoid lupus erythematosus)、禿性毛囊炎、頭皮切割性蜂窩組織炎、前額纖維化禿髮、中央離心瘢痕性禿髮、拔毛癖、牽引性禿髮、及稀毛症。
於另一種態樣中，本揭露提供一種治療患有或有風險發展成禿髮的個體的方法，該方法包含對該個體投予一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑。
於一些具體實施例中，與未投予一或多種Shh途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑之個體相比，經投予一或多種Shh途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑之個體具有改善之毛髮生長、改善之毛髮密度及/或改善之毛囊再生性循環。
於又一種態樣中，本揭露提供一種醫藥組成物，其包含：醫藥上可接受之載劑以及(i) Wnt促效劑、或其醫藥上可接受之鹽，及(ii)音猬(Shh)途徑活化劑、或其醫藥上可接受之鹽。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約5倍至約1000倍。於某些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約10倍至約100倍。於一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約20倍至約50倍。於某些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約5倍至約1000倍。於一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約10倍至約100倍。於一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約20倍至約50倍。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白(Smoothened)促效劑。於其他具體實施例中，Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白纖毛堆積增進劑(ciliary accumulation enhancer)。於本文中所揭示方法及組成物的某些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑係選自表 1 或表 2 。於本文中所揭示方法及組成物的其他具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺(Purmorphamine)、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑係選自表 3 。於本文中所揭示方法及組成物的某些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為GSK3-α抑制劑或GSK3-β抑制劑。於本文中所揭示方法及組成物的其他具體實施例中，GSK3-α抑制劑係選自表 5 。於本文中所揭示方法及組成物的其他具體實施例中，GSK3-β抑制劑係選自表 4 。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為式(I)化合物，及其醫藥上可接受之鹽及互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、 C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、 -NH2 、-NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： -Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：-CORX1 、-SO2 RX1 、雜芳基、及-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)，其中-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、 -[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、 -[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、-CONHC1 -C4 烷基、-COH、-CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、 -[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，式I化合物具有一或多種下列特徵： 　　a) 限制條件為該化合物不是或 　　b) 限制條件為當Ar是 時，則RX1 既不是也不是；
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為式Ia化合物，及其醫藥上可接受之鹽及互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ；其中Ar視需要經氘、鹵基、烷基、烷氧基、及CN取代； 　　Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：氫、RX1 、-CORX1 、-SO2 RX1 、-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、-[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、-C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、NHCOC1 -C4 烷基、CONHC1 -C4 烷基、COH、-CO2 H、 -[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基；及 　　m為0、1、或2。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為式Ib化合物，及其醫藥上可接受之鹽及互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N；且限制條件為當Q1 為CH且Q3 為C時，Q2 不是N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ；其中Ar視需要經氘、鹵基、烷基、烷氧基、及CN取代； 　　各Q6 獨立選自CRQ6 及N；其中RQ6 為氫、鹵基、-CN、低級烷基、或經取代之烷基； 　　Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：氫、RX1 、-CORX1 、-SO2 RX1 、-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、-[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、 -NHCOC1 -C4 烷基、CONHC1 -C4 烷基、COH、-CO2 H、 -[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑係選自表 6 。於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12，而一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為CHIR99021而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為CHIR99021而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為CHIR99021而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為CHIR99021而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為LY2090314而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為LY2090314而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為LY2090314而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為LY2090314而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為AZD1080而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為AZD1080而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為AZD1080而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為AZD1080而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-6而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-6而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-6而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-6而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-7而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，化合物I-7而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-7而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-7而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-12而一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。於一些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-12而一或多種Shh途徑活化劑為SAG。於一些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-12而一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。於一些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑為化合物I-12而一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。於一些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
其他目的及特徵部分將為顯而易見，且部分將在後文中指出。定義
於此申請案中，除非另行指明，使用“或”意指“及/或”。如於此申請案中使用者，用語“包含(comprise)”及該用語的變化型，諸如“包含(comprising)”及“包含(comprises)”不是意圖排除其他添加劑、組分、整數或步驟。如於此申請案中使用者，用語“約”及“大約”作為等效物使用。此申請案中所用之具有或不具有約/大約的任何數字，意指涵蓋相關技術領域中具有通常知識者了解的任何正常波動。於某些具體實施例中，除非另行指明或從上下文中可以明顯看出另有所指，用語“大約”或“約”是指落在以任一方向(大於或小於)距所稱參考值的25%、20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、或更少內之值的範圍(除非該數字超過可能值的100%)。
“加成性作用”是指其中組合使用二或更多種物質或動作產生與個別作用的算術總和相同的總作用。
“投予”是指將物質引入個體中。於一些具體實施例中，投予是皮內注射、局部、透皮、或口服。於一些具體實施例中，投予是直接投予到頭皮。於一些具體實施例中，投予是經由植入物遞送系統直接投予到皮膚。於某些具體實施例中，“造成投予”是指在已經投予第一組分之後第二組分的投予(如，在不同的時間及/或由不同的施作者)。
“抗體”是指具有免疫原結合能力的免疫球蛋白多肽或其片段。
如本文中所使用者，“促效劑”是分別造成靶基因、蛋白或途徑的表現或活性增加的試劑。因此，促效劑可以以一些方式結合並活化其同源受體，其直接或間接地於靶基因或蛋白上產生此生理作用。促效劑也可以通過調制途徑組分的活性來增加途徑的活性，例如通過抑制途徑的負調節劑的活性。因此，可以將“Wnt促效劑”定義為增加Wnt途徑活性的試劑，其可以藉由增加細胞中TCF/LEF介導的轉錄來測量。因此，“Wnt促效劑”可以是結合並活化捲曲蛋白(Frizzled)受體家族成員(包括任何及所有Wnt家族蛋白)的真正Wnt促效劑、細胞內β-連環蛋白降解的抑制劑、及TCF/LEF的活化劑。
“拮抗劑”是指結合受體或蛋白，其進而降低或消除被其他分子結合的試劑。
“反義”是指與核酸序列的編碼股或mRNA互補的核酸序列(不論長度如何)。可將反義RNA引入個別細胞、組織或胞器。反義核酸可含有經修飾骨架，例如硫代磷酸鹽、二硫代磷酸鹽、或本技術領域已知的其他經修飾骨架，或可含有非天然的核苷間聯結。
如本文中所用，“生物相容性基質”是可接受用於向人投予以釋放治療劑之聚合性載劑。生物相容性基質可以是生物相容性凝膠或泡沫。
如本文中與特定細胞類型相關使用，“細胞密度”是代表性顯微鏡樣品中每面積該細胞類型的平均數目。細胞類型可以包括但不限於毛囊幹細胞、皮乳突幹細胞、角質細胞、黑色素細胞、及隆起細胞。細胞密度可以用給定器官或組織(包括但不限於毛囊)中給定細胞類型來評估。
“互補核酸序列”是指能夠與另一個由互補核苷酸鹼基對構成的核酸序列雜交之核酸序列。"雜交"意指在合適的嚴格條件下配對以在互補核苷酸鹼基之間形成雙股分子(如腺嘌呤(A)與胸腺嘧啶(T)形成鹼基對，如同DNA中鳥嘌呤(G)與胞嘧啶(C)形成鹼基對)。(參見，如Wahl, G.M.and S.L.Berger (1987) Methods Enzymol. 152:399; Kimmel, A.R.(1987) Methods Enzymol. 152:507)。
如本文中與特定細胞類型相關使用，“橫截面細胞密度”是代表性顯微鏡樣品中橫截通過組織的每橫截面面積該細胞類型的平均數目。給定組織的橫截面也可以用來判定給定平面中的細胞數目。一般，橫截面細胞密度將藉由分析給定組織的全覆式製備物(whole mount preparation)並且計算在沿著一部分上皮截取的橫截面中跨越給定距離之給定特定細胞類型數目來測量，如代表性顯微鏡樣品中所述。
“降低(decreasing)”或“降低(decreases)”是指例如，與參考水平相比，降低至少5%，例如5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、99或100%。
“降低(decreases)”也意指例如，與參考水平相比，降低至少1倍，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、1000倍或更多。
“皮乳突毛囊培養試驗”或“DP毛囊培養試驗”是指當在試驗終點測量時使用完整毛囊定量毛囊內皮乳突(DP)細胞的數目或DP區域的尺寸的方法。DP細胞是表現鹼性磷酸酶(AP)及/或多功能蛋白聚醣、及/或波形蛋白、及/或Sox2、及/或CD133的細胞。簡言之，使用顯微切割從試樣移出完整的毛囊。將每根毛髮修剪至靠近毛囊頂端，並使約3-5個毛囊分佈在孔中。將具有生長因子及/或小分子的培養基添加到孔中，並在37℃下培養毛囊。於一或多個所欲時間段監測生長。可在一或多個所欲時間段拍攝EVOS® 透射光影像。可以對毛囊進行鹼性磷酸酶染色、5-乙炔基-2'-脫氧尿苷(EdU)染色及/或用以偵測標記物(諸如波形蛋白、Sox2、多功能蛋白聚醣、CD133等)之免疫螢光。可分析DP標記物毛囊染色陽性的總面積，並可監測隨著時間的毛幹生長。該實驗流程的細節在本揭露的實施例部分提供。
“皮乳突幹細胞”或“DP幹細胞”或“DP細胞”是指具有自我更新能力的毛囊皮乳突中的細胞。
如本文中所用，“分化期”其中有有效幹性驅動子濃度(Effective Stemness Driver Concentration)之持續時間。
“有效濃度”可為幹性驅動子的“有效幹性驅動子濃度”、Shh途徑活化劑的“有效Shh濃度”、或Wnt促效劑的“有效Wnt促效劑濃度”。
“有效Shh濃度”是指與不存在Shh途徑活化劑但所有其他組分以相同濃度存在下，在使用皮乳突的幹細胞增生試驗終點所測量之於細胞培養中皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目各自的增加相比，當Shh途徑活化劑與幹性驅動子組合時創造在使用皮乳突的幹細胞增生試驗終點所測量之於細胞培養中皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目上有＞50%增加之Shh途徑活化劑的最小濃度。“有效活體外Shh途徑活化濃度”是指活體外“有效Shh濃度”。
“有效Wnt促效劑濃度”是指與不存在Wnt途徑促效劑但所有其他組分以相同濃度存在下，在使用皮乳突的幹細胞增生試驗終點所測量之於細胞培養中皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目各自的增加相比，Wnt途徑促效劑創造在使用皮乳突的幹細胞增生試驗終點所測量之於細胞培養中皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目上有＞50%增加之Wnt途徑促效劑的最小濃度。“有效活體外Wnt促效劑濃度”是指活體外“有效Wnt促效劑濃度”。
如本文中所用，“有效釋放率”(質量/時間)為有效濃度(質量/體積)*30 µL/1小時。
“有效幹性驅動子濃度”是指與沒有幹性驅動子但所有其他組分以相同濃度存在下進行幹細胞增生試驗之給定細胞類型的細胞數目相比，幹細胞增生試驗中給定細胞類型的細胞數目上誘導出至少50%增加之幹性驅動子的最小濃度。於某些情況中，‘有效幹性驅動子濃度”可能是“有效Wnt促效劑濃度”。
“消除”意指降低到不可偵測水平。
“植入(engraft)”或“植入(engraftment)”是指幹細胞或祖細胞通過與組織的現存細胞接觸而活體內併入到感興趣組織中的過程。“上皮祖細胞”是指一種多潛能細胞，其有潛力變成限於導致上皮細胞的細胞譜系。
“上皮幹細胞”是指有潛力變成致力於多種細胞譜系的多潛能細胞，包括導致上皮細胞的細胞譜系。
“片段”是指多肽或核酸分子的一部分。此部分含有，較佳地，參考核酸分子或多肽的整個長度的至少10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%、80%、或90%。片段可含有10、20、30、40、50、60、70、80、90、或100、200、300、400、500、600、700、800、900、或1000個核苷酸或胺基酸。
“GSK3抑制劑”是抑制GSK3、GSK-3阿爾法(GSK3-α)、及/或GSK-3貝他的活性的組成物。
如本文中可交互使用之“GSK3貝他”、“GSK3β”及“GSK3B”是肝醣合成酶激酶3貝他的縮略詞。
“GSK3貝他抑制劑”是抑制GSK3貝他的活性的組成物。
“毛囊幹細胞”是指於與皮乳突不同的毛囊區域中的多潛能細胞，其具有自我更新並分化為多個細胞譜系的能力。
"雜交"是指在合適的嚴格條件下配對以在互補核苷酸鹼基之間形成雙股分子(如腺嘌呤(A)與胸腺嘧啶(T)形成鹼基對，如同DNA中鳥嘌呤(G)與胞嘧啶(C)形成鹼基對)。(參見，如Wahl, G.M.and S.L.Berger (1987) Methods Enzymol. 152:399; Kimmel, A.R.(1987) Methods Enzymol. 152:507)。
“抑制劑”是指分別造成靶基因或蛋白的表現或活性降低的試劑。“拮抗劑”可以是抑制劑，但是更具體地是與受體結合，且進而降低或消除被其他分子結合的試劑。
如本文中所使用者，“抑制性核酸”是當投予到哺乳動物細胞時導致靶基因表現降低的雙股RNA、RNA干擾(RNA interference)、miRNA、siRNA、shRNA、或反義RNA或其部分或其模擬物。一般，核酸抑制劑包含靶核酸分子或其異種同源物(ortholog)的至少一部分，或包含靶核酸分子的互補鏈的至少一部分。一般，靶基因的表現減少10%、25%、50%、75%、或甚至90-100%。
“增加(Increases)”也意指例如，與參考標準品水平相比，增加至少1倍，例如1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70、80、90、100、200、500、1000倍或更多。
“增加(Increasing)”是指例如，與參考水平相比，增加至少5%，例如5、6、7、8、9、10、15、20、25、30、35、40、45、50、55、60、65、70、75、80、85、90、95、99、100%或更多。
“皮內投予”是指將藥品、醫藥組成物或化合物投予到表皮正下方的真皮中。
“經單離(isolated)”是指材料沒有與通常伴隨它以天然狀態發現時的各種不同程度的組分。“單離(isolate)”表示與原始來源或周圍環境的分離程度。
如本文中所用，“譜系追蹤”是使用能夠對任何在報告子誘導時表現靶基因的細胞進行命運追踪的小鼠品系。例子包括Gli1、Krt15、CD34、Lgr5、Lgr6、Lrig1、Sox2、CD133、波形蛋白、多功能蛋白聚糖及/或鹼性磷酸酶。
“哺乳動物”是指任何哺乳動物，包括但不限於人、小鼠、大鼠、綿羊、猴、山羊、兔、倉鼠、馬、牛或豬。
如本文中所用，“平均釋放時間”是在釋放試驗中一半藥劑從載劑釋放到磷酸鹽緩衝鹽水中的時間。
如本文中所用，”天然形態”意指組織(tissue)的結構(organization)大幅反應健康組織中的結構。
“非人哺乳動物”，如本文中所使用者，是指不是人的任何哺乳動物。
如本文中相關內文所使用者，用語細胞的“數目”可為0、1、或更多個細胞。
“胞器”或“上皮胞器”是指類似器官、或器官的一部分，並具有與該特定器官相關的細胞類型的細胞簇或聚集體。
細胞“族群(population)”是指任何數目大於1的細胞，但較佳至少1×103 個細胞、至少1×104 個細胞、至少至少1×105 個細胞、至少1×106 個細胞、至少1×107 個細胞、至少1×108 個細胞、至少1×109 個細胞、或至少1×1010 個細胞。
如本文中所用，“祖細胞”是指像幹細胞一樣具有分化為特定類型細胞傾向，但已經比幹細胞更具特異性並被推動分化成其"靶"細胞的細胞。
“參考”意指標準或對照條件(如，未以測試試劑或測試試劑的組合處理)。
如本文中所用，“釋放試驗”是一種測試，其中通過透析膜試劑從生物相容性基質釋放到鹽水環境的速率。例示性釋放試驗可藉由將30微升組成物放到在具有合適截留的鹽水透析袋內之1 ml磷酸鹽緩衝鹽水中，並將該透析袋放到37℃的10 mL磷酸鹽緩衝鹽水內進行。透析膜尺寸可基於試劑尺寸進行選擇，以便使被評估試劑從膜出去。對於小分子釋放，可以使用3.5-5 kDa的截斷。組成物的釋放速率可能會隨時間而改變，並可能以1小時為增量進行測量。
如本文中所用，“代表性顯微鏡樣品”描述在細胞培養系統、萃取組織的一部分或整個萃取器官內，如果所有相關的視野被測量，則所測量的平均特徵尺寸或數目可合理地稱為代表平均特徵尺寸或數目之足夠數目的視野。代表性顯微鏡樣品可以包括視野內的度量衡，其可以按照給定距離的細胞來測量。代表性顯微鏡樣品可用於評估形態學，例如細胞間連結(cell-cell contacts)、毛囊結構、及細胞組件(如束、突觸)。
如本文中所用，化合物的“SAG”意指鑑定為CAS 912545-86-9的化合物結構。
如本文中所用，化合物的“SAG HCl”意指呈鹽酸鹽之鑑定為CAS 912545-86-9的化合物結構。
用語“樣品”是指分析所獲得、分析所提供及/或歷經分析之體積或質量。於一些具體實施例中，樣品為或包含組織樣品、細胞樣品、流體樣品等。於一些具體實施例中，樣品係取自(或為)個體(如人或動物個體)。於一些具體實施例中，組織樣品為或包含腦、毛髮(包括根)、口腔拭子、血液、唾液、精液、肌肉、或來自任何內臟器官、或癌症、癌前病變、或與這些中的任何一種相關的腫瘤細胞。流體可為但不限於尿液、血液、腹水、胸膜液、脊髓液等。身體組織可包括但不限於腦、皮膚、肌肉、子宮內膜、子宮及宮頸的組織或癌症、癌前病變、或與這些中的任何一種相關的腫瘤細胞。在一具體實施例中，身體組織是腦組織或腦腫瘤或癌症。本技術領域中具有通常知識者將認識到，於一些具體實施例中，“樣品”為“初級樣品”，因為它是從來源(例如個體)獲得；於一些具體實施例中，“樣品”是初級樣品加工後的結果，例如移除某些可能污染的組分及/或單離或純化某些感興趣的組分。
“自我更新”是指藉其而幹細胞分裂產生一個(不對稱分裂)或兩個(對稱分裂)具有與母細胞所具者無法區分之發育潛能的子細胞的程序。自我更新涉及增生及維持未分化的狀態。
“siRNA”是指雙股RNA。理想的是，siRNA長度為18、19、20、21、22、23或24個核苷酸，並且在其3'端具有2個鹼基突出臂。這些dsRNA可被引入個別細胞或培養系統。這些siRNA係用於下調mRNA水平或啟動子活性。
“音猬(Shh)途徑活化劑”或“音猬(Shh)活化劑”是指活化音猬傳訊途徑的化合物或因子。音猬(Shh)途徑活化劑可以是SMO促效劑、Ptch1抑制劑、SUFU抑制劑、GLI1轉錄的活化劑、或使得音猬途徑或其相互作用增加的其它組分，如VEGF、FLk1、MEK、ERK、Notch/Hes、NANOG、SOX2、MYC、MYCN。
“幹細胞”是指具有自我更新及分化成多種細胞譜系能力的多潛能細胞。“毛囊的幹細胞”是指於毛囊的皮乳突找到的幹細胞(“皮乳突幹細胞”、“DP幹細胞”或“DP細胞”)及於毛囊的另一區域找到的幹細胞(“毛囊幹細胞”)二者。
如本文中所用，“幹細胞分化試驗”為測定幹細胞分化能力的試驗。
如本文中所用，“幹細胞試驗”是一種對細胞或細胞族群進行一系列條件的測試以測定細胞或細胞族群是否為幹細胞或富含幹細胞或幹細胞標記物的試驗。在幹細胞試驗中，測試細胞/細胞族群的幹細胞特性，諸如幹細胞標記物的表現，並視需要地進一步測試幹細胞功能，包括自我更新及分化的能力。
如本文中所用，“幹細胞增生子”是誘導具有自我更新及分化能力的細胞族群增加的化合物或因子。
如本文中所用，“幹細胞增生試驗”是一種測定試劑(等)從起始細胞族中誘導產生幹細胞能力的試驗。使用皮乳突之幹細胞增生試驗是指各自與幹細胞增生試驗開始時的皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目相比，在幹細胞增生試驗終點皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目的增加。DP細胞是指表現鹼性磷酸酶(AP)及/或多功能蛋白聚醣、及/或波形蛋白、及/或Sox2、及/或CD133的細胞。簡言之，使用顯微切割從試樣移除完整的毛囊。以細胞分離酶(cell dissociation enzyme)處理毛囊細胞並使其受應力以獲得單細胞的懸浮液。接著將單細胞懸浮在具有生長因子的培養基中、以給定細胞密度接種到孔中並在37℃下培養。於一或多個所欲時間段監測生長。可拍攝EVOS® 透射光影像。可以收集球狀體以供免疫點墨、qPCR、流式細胞術、及/或施加到玻璃底盤上以供鹼性磷酸酶染色、5-乙炔基-2'-脫氧尿苷(EdU)染色及/或免疫螢光，以偵測標記物，諸如波形蛋白、Sox2、多功能蛋白聚醣、CD133等。該實驗流程的細節在本揭露的實施例部分提供。
如本文中所用，“幹細胞標記物”可以定義為在幹細胞中特異性表現的基因產物(例如蛋白、RNA等)。一類幹細胞標記物是直接並特異性支持幹細胞身份維持的基因產物。實例包括Gli1、Krt15、CD34、Lgr5、Lgr6、Lrig1、Sox2、CD133、波形蛋白、多功能蛋白聚糖及/或鹼性磷酸酶。可以使用文獻中描述的試驗來識別額外的幹細胞標記物。為了判定一基因是否為維持幹細胞身份所需者，可以使用功能獲得及功能喪失研究。在功能獲得研究中，特定基因產物(幹細胞標記物)的過表現將有助於維持幹細胞的身份。在功能喪失的研究中，移除幹細胞標記物會導致喪失幹細胞的身份或誘導幹細胞的分化。另一類幹細胞標記物是僅在幹細胞中表現但不必具有維持幹細胞身份的特定功能的基因。這類型的標記物可以藉由諸如微陣列及qPCR來比較分選的幹細胞與非幹細胞的基因表現記號(signature)來識別。這類幹細胞標記物可以在文獻中找到。(如Liu Q.et al.,Int J Biochem Cell Biol . 2015 60:99-111.www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/25582750)。潛在的幹細胞標記物包括Ccdc121、Gdf10、Opcm1、Phex等。在給定細胞或細胞族群中，幹細胞標記物諸如CD133或Sox2的表現可以使用諸如qPCR、免疫組織化學、西方點墨、及RNA雜交測量。幹細胞標記物的表現也可以使用轉基因細胞表現報導子來測量，所述報導子可以指示給定幹細胞標記物(如，多功能蛋白聚醣-GFP、CD133-GFP或Sox2-GFP)的表現。接著可以使用流式細胞術分析來測量報導子表現的活性。螢光顯微鏡也可以用來直接觀察報導子的表現。幹細胞標記物的表現可以進一步使用全基因表現譜分析的微陣列分析來判定。可以將給定細胞族群或純化細胞族群的基因表現譜與幹細胞的基因表現譜進行比較以確定2個細胞族群之間的相似性。幹細胞功能可以藉由群落形成試驗或球體形成試驗、自我更新試驗及分化試驗來測量。在群落(或球體)形成試驗中，當在適當的培養基中培養時，幹細胞應該能夠在細胞培養表面(例如細胞培養皿)上形成群落或者包埋在細胞培養底質(如Matrigel)中形成群落或能夠在懸浮培養時形成球體。在群落/球體形成試驗中，將單幹細胞以適當的培養基中低細胞密度接種並允許增生一段給定的時間(7-10天)。接著對形成的群落進行計數並對作為原始細胞幹性指標的幹細胞標記物表現進行評分。視需要地，接著挑取所形成的群落並傳代以測試其自我更新及分化潛能。在自我更新試驗中，當在適當的培養基中培養時，細胞應該維持幹細胞標記物(如CD133)表現超過至少一次(例如1、2、3、4、5、10、20等)細胞分裂。在幹細胞分化試驗中，當在適當的分化培養基中培養時，細胞應該能夠產生毛髮細胞，其可藉由qPCR、免疫染色西方點墨、RNA雜交或流式細胞術測量毛髮細胞標記物表現而加以識別。
如本文中所用，“幹性驅動子”是一種組成物，其誘導給定細胞類型的細胞增生、上調細胞中的基因(等)或生物標誌物(等)、或維持細胞中的基因或生物標記物表現，同時維持自我更新的潛力及分化成給定細胞類型(例如毛囊上皮細胞)細胞的潛力。通常，幹性驅動子上調至少一種出生後幹細胞的生物標記物。幹性驅動子包括但不限於Wnt促效劑及GSK3抑制劑。
“個體”包括人及哺乳動物(如小鼠、大鼠、豬、貓、狗及馬)。於許多具體實施例中，個體是哺乳動物，特別是靈長類動物，尤其是人。於一些具體實施例中，個體是家畜，諸如牛、綿羊、山羊、牛、豬等；家禽諸如雞、鴨、鵝、火雞等；以及家養動物，特別是寵物諸如狗及貓。於一些具體實施例中(如特別是在研究背景下)，個體哺乳動物將是例如囓齒動物(例如小鼠、大鼠、倉鼠)、兔子、靈長類動物或豬諸例如近交豬等。
“協同性”或“協同作用”是一種大於每個單獨作用的總和之作用，大於加成作用之作用。
如本文中所用，“TGF貝他抑制劑”是降低TGF貝他的活性的組成物。
如本文中所用，“BMP抑制劑”是降低BMP活性的組成物。
如本文中所用，“切口蛋白(Notch)活化劑”是增加切口蛋白途徑活性的組成物。
如本文中所用，“mTOR”抑制劑”是降低雷帕黴素的機制靶(mTOR)活性的組成物。
“組織”是來自相同來源的類似細胞的集合，它們一起執行特定功能。
如本文中與細胞族群一起使用之“治療”意指將物質遞送給族群以產生結果。在活體外族群的情況下，該物質可能直接(或甚至間接)遞送給族群。在活體內族群的情況下，該物質可以藉由投予宿主個體而遞送。
如本文中所用，“Wnt活化”是Wnt傳訊途徑的活化。
如本文中所用，“Wnt促效劑”是活化Wnt傳訊途徑的任何化合物、蛋白、肽或試劑。
如本文中所用，用語“烷基”是指直鏈或支鏈飽和烴。例如，烷基可以具有1至8個碳原子(即，(C1 -C8 )烷基)或1至6個碳原子(即，(C1 -C6 烷基)或1至4個碳原子。
如本文中所用，用語“烯基”是指具有自2至約15個碳原子之包括一或多個雙鍵的直鏈或支鏈烴基，並且可以包括二價基團。烯基的實例包括但不限於乙烯基，丙烯基、丁烯基及更高級的同系物及異構體。
如本文中所用，用語“炔基”是指具有自2至約15個碳原子之包括一或多個參鍵的直鏈或支鏈烴基，並且可以包括二價基團。炔基的實例包括但不限於乙炔基，丙炔基、丁炔基及更高級的同系物及異構體。
如本文中所用之用語“鹵基”或“鹵素”是指氟基、氯基、溴基及碘基。
如本文中所用，用語“芳基”，是指單個全碳芳族環或其中至少一個環是芳族之多重縮合全碳環系統。例如，芳基可以具有6-20個碳原子、6-14個碳原子、或6-12個碳原子。芳基包括苯基。芳基也包括具有約9至20個碳原子的多重縮合環系統(如包含2、3或4個環的環系統)，其中至少一個環是芳族並且其中其他環可以是芳族或非芳族(即，碳環)。此等多重縮合環系統可視需要地在多重縮合環系統的任何碳環部分上經一或多個(如1、2或3個)側氧基取代。在化合價要求允許下，多重縮合環系統的環可經由稠合、螺接及橋接鍵彼此連接。應該理解，如上所定義的多重縮合環系統的附接點可以在環系統的任何位置，包括環的芳香環或碳環部分上。
如本文中所用，用語“雜芳基”是指在環中具有至少一個碳以外的原子的單個芳族環，其中該碳以外的原子選自下列所組成群組：氧、氮及硫；該用語也包括具有至少一個此種芳族環的多重縮合環系統，下面進一步描述多重縮合環系統。因此，該用語包括環中具有約1至6個碳原子及約1至4個選自選自氧、氮及硫所組成群組的雜原子的單一芳族環。硫及氮原子也可以以氧化形式存在，限制條件為環是芳族。該用語也包括多重縮合環系統(如，包含2、3或4個環的環系統)，其中如上定義的雜芳基可以與選自下列的一或多種環縮合：雜芳基(以形成例如啶基諸如1,8-啶基)、雜環(以形成例如1,2,3,4-四氫啶基諸如1,2,3,4-四氫-1,8-啶基)、碳環(以形成例如5,6,7,8-四氫喹啉基)及芳基(以形成例如吲唑基)以形成多重縮合環系統。故，雜芳基(單芳環或多重縮合環系統)在雜芳環內具有約1-20個碳原子及約1-6個雜原子。此等多重縮合環系統可視需要地在縮合環的碳環或雜環部分上經一或多個(如1、2、3或4個)側氧基取代。在化合價要求允許下，多重縮合環系統的環可經由稠合、螺接及橋接鍵彼此連接。應該理解，多重縮合環系統的個別環可以相對於彼此以任何的順序連接。也應該理解，多重縮合環系統的附接點(如上對雜芳基之定義)可以在多重縮合環系統的任何位置，包括多重縮合環系統的雜芳基、雜環、芳基或碳環部分上及在多重縮合環系統的任何合適原子，包括碳原子及雜原子(如氮)上。
如本文中所用，用語“環烷基”是指具有約3至約8個環成員的飽和或部分飽和的環結構，其僅具有碳原子作為環原子並且可包含二價基團。環烷基的實例包括但不限於環丙基、環丁基、環戊基、環己基、環己烯、環戊烯基、環己烯基。
用語“雜環基”或“雜環”是指含有碳及選自氧、磷、氮或硫的雜原子的單環或多環之3至24員環，並且其中環碳或雜原子之間不共享非定域的π電子(芳香性)。雜環基環包括但不限於氧雜環丁烷基、氮雜環丁烷基、四氫呋喃基、吡咯啶基、噁唑啉基、噁唑啶基、噻唑啉基、噻唑啶基、哌喃基、噻喃基、四氫哌喃基、二氧雜環戊烷基(dioxalinyl)、哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、硫代嗎啉基S-氧化物(thiomorpholinyl S-oxide)、硫代嗎啉基S-二氧化物(thiomorpholinyl S-dioxide)、哌嗪基、氮呯基(azepinyl)、氧呯基(oxepinyl)、二氮呯基(diazepinyl)、托品烷基(tropanyl)及高托品烷基(homotropanyl)。雜環基環或雜環烷基環也可以稠合或橋接，例如可以是雙環。
除非另行指明，使用“或”意指“及/或”。如於此申請案中使用者，用語“包含(comprise)”及該用語的變化型，諸如“包含(comprising)”及“包含(comprises)”不是意圖排除其他添加劑、組分、整數或步驟。如於此申請案中使用者，用語“約”及“大約”作為等效物使用。此申請案中所用之具有或不具有約/大約的任何數字，意指涵蓋相關技術領域中具有通常知識者了解的任何正常波動。於某些具體實施例中，除非另行指明或從上下文中可以明顯看出另有所指，用語“大約”或“約”是指落在以任一方向(大於或小於)距所稱參考值的25%、20%、19%、18%、17%、16%、15%、14%、13%、12%、11%、10%、9%、8%、7%、6%、5%、4%、3%、2%、1%、或更少內之值的範圍(除非該數字超過可能值的100%)。
本文中，短語“醫藥上可接受”係用以指稱在合理的醫學判斷範圍內，適合用於與人類及動物的組織接觸，沒有過度的毒性、刺激性、過敏反應或其他問題或併發症，而與合理的利益/風險比相稱那些化合物、材料、組成物、及/或劑型。
如本文中所用，“醫藥上可接受之載劑、稀釋劑或賦形劑”包括但不限於任何已被美國品藥品監督管理局核准為可接受用於人或家養動物的佐劑、載體、賦形劑、助流劑、甜味劑、稀釋劑、防腐劑、染料/著色劑、調味劑、表面活性劑、濕潤劑、分散劑、懸浮劑、穩定劑、等滲劑、溶劑、表面活性劑、或乳化劑。例示性的醫藥上可接受之載劑包括但不限於糖，諸如乳糖、葡萄糖及蔗糖；澱粉，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；纖維素及其衍生物，諸如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及乙酸纖維素；黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石；可可脂、蠟、動物及植物脂肪、石蠟、矽酮、膨潤土、矽酸(silicic acid)、氧化鋅；油類，諸如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；甘醇，諸如丙二醇；多元醇，諸如甘油、山梨糖醇、甘露糖醇及聚乙二醇；酯，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；瓊脂；緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；藻酸；無熱原水；等滲鹽水；林格氏液；乙醇；磷酸鹽緩衝溶液；以及醫藥製劑(pharmaceutical formulation)中使用的任何其他相容性物質。
“醫藥上可接受之鹽”包括鹼加成鹽及酸加成鹽二者。
“醫藥上可接受之酸加成鹽”是指保留其游離鹼的生物學有效性及性質，在生物學或其它方面不是非所欲者，並且是與無機酸(諸如但不限於氫氯酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等)以及與有機酸(諸如但不限於乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗壞血酸、天冬胺酸、苯磺酸、苯甲酸、4-乙醯胺基苯甲酸、樟腦酸、樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、碳酸、肉桂酸、檸檬酸、環拉酸(cyclamic acid)、十二烷基硫酸、乙烷-1,2-二磺酸、乙磺酸、2-羥基乙磺酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡萄庚酸、葡萄糖酸、葡萄醣醛酸、麩胺酸、戊二酸、2-側氧基-戊二酸、甘油磷酸、乙醇酸、馬尿酸、異丁酸、乳酸、乳糖酸、月桂酸、馬來酸、蘋果酸、丙二酸、扁桃酸、甲磺酸、黏酸、萘-1,5-二磺酸、萘-2-磺酸、1-羥基-2-萘甲酸、菸鹼酸、油酸、乳清酸、草酸、棕櫚酸、撲酸(pamoic acid)、丙酸、焦麩胺酸、丙酮酸、水楊酸、4-胺基水楊酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、酒石酸、硫氰酸、/甲苯磺酸、三氟乙酸、十一碳烯酸等)所形成的鹽。
"醫藥上可接受之鹼加成鹽"是指保留其游離酸的生物學有效性及性質，在生物學或其它方面不是非所欲者的鹽。這些鹽是從向游離酸添加無機鹼或有機鹼來製備。衍生自無機鹼的鹽包括但不限於鈉、鉀、鋰、銨、鈣、鎂、鐵、鋅、銅、錳、鋁鹽等。例如，無機鹽包括但不限於銨鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽及鎂鹽。衍生自有機鹼的鹽包括但不限於下列者的鹽：一級胺、二級胺、三級胺、經取代之胺，包括天然存在之經取代之胺、環狀胺及鹼性離子交換樹脂，諸如氨、異丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、二乙醇胺、乙醇胺、二甲基乙醇胺(deanol)、2-二甲基胺基乙醇、2-二乙基胺基乙醇、二環己胺、離胺酸、精胺酸、組胺酸、咖啡因、普魯卡因、海巴明(hydrabamine)、膽鹼、甜菜鹼、苯乙苄胺(benethamine)、比西林(benzathine)、乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡萄糖胺、可可鹼、三乙醇胺、胺基丁三醇(tromethamine)、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺樹脂等。用於某些具體實施例的例示有機鹼包括異丙胺、二乙胺、乙醇胺、三甲胺、二環己胺、膽鹼及咖啡因。
濕潤劑、乳化劑及潤滑劑，諸如月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂、以及著色劑、脫模劑、包衣劑、甜味、調味及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑也可以出現於組成物中。
醫藥上可接受之抗氧化劑的實例包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、偏亞硫酸鈉、亞硫酸鈉等；(2)油溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基羥基甲氧苯(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚等；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。
本文所述的化合物或組成物可以以適合所欲遞送路徑的任何方式製劑，如，經鼓室(transtympanic)注射，經鼓室置芯管(transtympanic wick)及導管以及可注射貯庫(injectable depot)。一般，製劑包括所有生理上可接受的組成物(該組成物包括其衍生物或前藥、溶劑合物、立體異構體、外消旋體或互變異構體)與任何生理上可接受的載體、稀釋劑及/或賦形劑。
以下是對本揭露的例示性具體實施例的說明。
本揭露關於一種擴大毛囊的幹細胞族群的方法，該方法包含使幹細胞與一或多種幹細胞增生子接觸，該一或多種幹細胞增生子為一或多種音猬途徑(Shh)活化劑及一或多種Wnt促效劑。
於另一種態樣中，本揭露關於一種促進毛囊上皮細胞的產生的方法，該方法包含以一或多種音猬途徑(Shh)活化劑及一或多種Wnt促效劑處理毛囊的幹細胞。
於一種具體實施例中，幹細胞為皮乳突幹細胞。於另一種具體實施例中，該幹細胞為毛囊幹細胞。於一些具體實施例中，幹細胞包含角質細胞、黑色素細胞、皮乳突細胞、隆起細胞、或其組合。於一些具體實施例中，幹細胞於個體中。
因此，於某些具體實施例中，本揭露提供藉由活化Shh途徑及Wnt途徑而誘導毛囊中幹細胞族群自我更新的方法。較佳地，該等途徑係用小分子或蛋白活化。例如，一化合物當活體外施加到毛囊中皮乳突(DP)幹細胞時，會誘導DP幹細胞在使用皮乳突細胞的幹細胞增生試驗中以高純度增生到高水平，且也允許在DP毛囊培養試驗中增加毛囊內的DP細胞數目及/或DP面積。於一個此種具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑藉由產生可分裂並維持使高比例的所得細胞分化成毛囊細胞的能力之幹細胞而誘導並維持幹細胞性質。又者，增生幹細胞表現幹細胞標記物，其可包括一或多種的Gli1、Krt15、CD34、Lgr5、Lgr6、Lrig1、Sox2、CD133、波形蛋白、多功能蛋白聚糖及/或鹼性磷酸酶。
於另一種態樣中，本揭露提供一種治療患有或有風險發展成與不存在或缺乏毛囊上皮細胞相關之疾病的個體的方法，該方法包含對該個體投予一或多種音猬途徑(Shh)活化劑及一或多種Wnt促效劑。於一些具體實施例中，該疾病選自休止期脫髮、生長期脫髮、雄性禿、斑禿、髮癬、扁平毛髮苔癬、瘢痕性禿髮、圓盤狀紅斑狼瘡、禿性毛囊炎、頭皮切割性蜂窩組織炎、前額纖維化禿髮、中央離心瘢痕性禿髮、拔毛癖、牽引性禿髮、及稀毛症。
於另一種態樣中，本揭露提供一種治療患有或有風險發展成禿髮的個體的方法，該方法包含對該個體投予一或多種音猬途徑(Shh)活化劑及一或多種Wnt促效劑。
於又一種態樣中，本揭露提供一種醫藥組成物，其包含：醫藥上可接受之載劑以及(i)Wnt促效劑、或其醫藥上可接受之鹽，及(ii)音猬(Shh)途徑活化劑、或其醫藥上可接受之鹽。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約5倍至約1000倍。於某些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約10倍至約100倍。於一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約20倍至約50倍。於某些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約5倍至約1000倍。於一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約10倍至約100倍。於一些具體實施例中，一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約20倍至約50倍。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白促效劑。於其他具體實施例中，Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白纖毛堆積增進劑。於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑係選自SAG、氧基固醇(oxysterol)、嘌嗎啡胺類似物、GSA-10類似物、虎杖苷(polydatin)、糖皮質素、刺猬蛋白多肽(hedgehog polypeptides)、肌醇衍生物、固醇、過氧化物還原酶2(peroxiredoxin 2)、RACK1、Dhh、及Ihh所組成群組。於一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑係選自表 1 。於一些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑係選自表 2 。於某些具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺(CAS 483367-10-8)。於本文中所揭示方法及組成物的其他具體實施例中，一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺(Purmorphamine)、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種SAG化合物為式II化合物：
其中R獨立為一或多個-H、鹵素、-C1 -C10 烷基、-C3 -C10 環烷基、-OC1 -C10 烷基、-CN、芳基、經取代之芳基、雜芳基、經取代之雜芳基；其中該取代可為一或多個-H、鹵素、-OH、-OC1 -C6 烷基、-C1 -C6 烷基、-CN、NH2 、-NHSO2 -C1 -C6 烷基、-NHCO-C1 -C6 烷基、-SO2 -C1 -C6 烷基、-CONH2 、-CONH-C1 -C6 烷基、COOH、-COO-C1 -C6 烷基；
其中R1 獨立為一或多個-H、鹵素、-C1 -C3 烷基、-OH、-O-C1 -C3 烷基。
用於本文中所揭示組成物及方法的各種具體實施例的Wnt促效劑(Wnt活化劑)類別包括但不限於列於表 3 欄A中的那些。用於本文中所揭示組成物及方法的各種具體實施例的具體Wnt促效劑包括但不限於列於表 3 欄B中的那些。應能理解，所有列於表 3 欄B中的試劑為包括其衍生物或醫藥上可接受之鹽。應能理解，所有列於表 3 欄A中的類別包括構成該類別之試劑及其衍生物或醫藥上可接受之鹽二者。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt活化劑或促效劑為一或多種GSK抑制劑。於某些具體實施例中，GSK抑制劑為GSK3-β抑制劑。用於本文中所揭示組成物及方法的各種具體實施例的GSK3-β抑制劑類別包括但不限於列於表 4欄A中的那些。用於本文中所揭示組成物及方法的各種具體實施例的具體GSK3-β抑制劑包括但不限於列於表 4欄B中的那些。應能理解，所有列於表 4欄B中的試劑為包括其衍生物或醫藥上可接受之鹽。應能理解，所有列於表 4欄A中的類別為包括構成該類別之試劑及其衍生物或醫藥上可接受之鹽二者。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種Wnt活化劑或促效劑為一或多種GSK抑制劑。於某些具體實施例中，GSK抑制劑為GSK3-α抑制劑。用於本文中所揭示組成物及方法的各種具體實施例的抑制劑類別包括但不限於列於表 5 欄A中的那些。用於本文中所揭示組成物及方法的各種具體實施例的具體GSK3-α抑制劑包括但不限於列於表 5 欄B中的那些。應能理解，所有列於表 5 欄B中的試劑為包括其衍生物或醫藥上可接受之鹽。應能理解，所有列於表 5 欄A中的類別為包括構成該類別之試劑及其衍生物或醫藥上可接受之鹽二者。
在本文中所述的方法及組成物的某些具體實施例中，GSK3抑制劑選自下列所組成群組：丙戊酸鈉鹽、CT20026、CHIR99021 (CT99021)、CHIR98014 (CT98014)、CHIR98023 (CT98023)、CHIR98024 (CT98024)、TCS 2002、化合物39、化合物29、化合物33、TCS 21311、LY2090314、603281-31-8、化合物34、化合物14d、化合物15b、化合物20x、AZD-1080、肯保羅酮、凱茲保羅酮、GSK-3抑制劑XXII、化合物4a、化合物4t、化合物4z、吡唑并吡啶9、化合物14、化合物23、化合物14、化合物18、及化合物19。
在本文中所述的方法及組成物的某些具體實施例中，GSK3抑制劑選自下列所組成群組：丙戊酸鈉鹽、CHIR99021 (CT99021)、CHIR98014 (CT98014)、CHIR98023 (CT98023)、CHIR98024 (CT98024)、化合物39、化合物29、LY2090314、603281-31-8、化合物34、化合物14d、化合物15b、化合物20x、AZD-1080、凱茲保羅酮、GSK-3抑制劑XXII、化合物4t、化合物4z、吡唑并吡啶9、化合物14、化合物23、化合物14、化合物18、及化合物19。
在本文中所述的方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為式(I)化合物，及其醫藥上可接受之鹽及互變異構體，其中，Q1 、Q2 、Q3 、R1 、R2 、R3 、Ar、-Z-W-X-Y-及m係如上面針對式I般定義。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，式I化合物具有一或多種下列特徵： 　　a) 限制條件為該化合物不是 或； 　　b) 限制條件為當Ar是 時，則RX1 既不是也不是；
於某些具體實施例中，本揭露提供一種用於本文中所述方法且不是WO 2003/076442 (PCT/US03/ 05050)所揭示者的式(I)化合物，將WO 2003/076442以引用的方式併入本文中。
於式(I)的某些具體實施例中，RX 為-CORX1 或-SO2 RX1 。
於式(I)的某些具體實施例中，RX 係選自，
於某些具體實施例中，RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個為鹵基之取代基取代。於某些具體實施例中，RX1 為氘化雜環基。於某些具體實施例中，雜環基為單環或雙環。於某些具體實施例中，雜環基含有一至三個氮(亦即，1、2、或3個氮)及/或一至三個氧(亦即，1、2、或3個氧)。於某些具體實施例中，雜環基含有一個氮及/或一個氧。於某些具體實施例中，雜環基含有一個氮。於某些具體實施例中，雜環基含有二個氮。於某些具體實施例中，雜環基含有一個氮及一個氧。
於某些具體實施例中，RX1 是哌啶或8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷，二者都視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、-(CH2 )p -NH2 ；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 是哌啶，視需要經1至2個鹵基取代基取代。於某些具體實施例中，RX1 是哌啶，視需要經 -(CH2 )p -OH取代。
於式(I)的某些具體實施例中，雜環基視需要經C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、或-(CH2 )p -NH2 取代；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 為經C1 -C4 烷基取代的雜環基。於某些具體實施例中，RX1 為經-(CH2 )p -OH取代的雜環基；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 為經-CH2 -OH取代的雜環基。於某些具體實施例中，RX1 為經-(CH2 )p -NH2 取代的雜環基；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 為經-CH2 -NH2 取代的雜環基。
於式(I)的某些具體實施例中，RX1 是雜環基，其中雜環基視需要經-[C(RX1a )2 ]p -CN取代。於某些具體實施例中，RX1 為經-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、-CONHC1 -C4 烷基、COH、 -CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、或-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 取代的雜環基。於某些具體實施例中，RX1 為雜環基，其中雜環基視需要經-CONHC1 -C4 烷基、-COH、-CO2 H、或-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基取代。
於式(I)的某些具體實施例中，各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。於某些具體實施例中，二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
於式(I)的某些具體實施例中，RX 為雜芳基。於某些具體實施例中，該雜芳基為單環或雙環。於某些具體實施例中，雜芳基含有一至三個氮(亦即，1、2、或3個氮)及/或一至三個氧(亦即，1、2、或3個氧)。於某些具體實施例中，雜芳基含有一個氮及/或一個氧。於某些具體實施例中，雜芳基含有一個氮。於某些具體實施例中，雜芳基含有二個氮。於某些具體實施例中，雜芳基含有一個氮及一個氧。於某些具體實施例中，RX 為
於式(I)的某些具體實施例中，RX 為-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)。於某些具體實施例中，-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)經1至2個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上。於某些具體實施例中，C3 -C8 環烷基為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。於某些具體實施例中，RX 為-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)，其中-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)視需要經一或二個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上，且其中C3 -C8 環烷基為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。於某些具體實施例中，RX 為
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為式(Ia)化合物，及其醫藥上可接受之鹽及互變異構體，其中Q1 、Q2 、Q3 、R1 、R2 、R3 、Ar、-Z-W-X-Y-及m係如上面針對式(Ia)般定義。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為式(Ib)化合物，及其醫藥上可接受之鹽及互變異構體，其中，Q1 、Q2 、Q3 、R1 、R2 、R3 、Ar、-Z-W-X-Y-及m係如上面針對式(Ib)般定義。
於某些具體實施例中，Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C。於某些具體實施例中，Q1 為N；Q2 為C；及Q3 為N。於某些具體實施例中，Q1 為CH；Q2 為C；及Q3 為N。於某些具體實施例中，Q1 為N；Q2 為N；及Q3 為C。
於某些具體實施例中，選自下列所組成群組：及。
於某些具體實施例中，R1 為氫或鹵基。於某些具體實施例中，R1 為C1 -C4 烷基，其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH。於某些具體實施例中，R1 為C1 -C4 炔基、-CN、-OH、或-S(O)2 NH2 。於某些具體實施例中，R1 為-NH2 或-NHC(O)R1a ，其中R1a 為C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，R1 為C1 -C4 烯基。於某些具體實施例中，R1 為-O-C1 -C4 烷基。
於某些具體實施例中，R2 為氫或鹵基。於某些具體實施例中，R2 為C1 -C4 烷基，其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH。於某些具體實施例中，R2 為C1 -C4 炔基、-CN、-OH、或-S(O)2 NH2 。於某些具體實施例中，R2 為-NH2 或-NHC(O)R2a ，其中R2a 為C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，R2 為-S(O)2 NH2 。
於某些具體實施例中，R2 為C1 -C4 烯基。於某些具體實施例中，R2 為-O-C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，R2 為-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、或-N(C1 -C4 烷基)2 。
於某些具體實施例中，R2 選自下列所組成群組：鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、 -OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、-NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，R2 選自下列所組成群組：鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-NH2 、-NHC(O)R2a 、及-S(O)2 NH2 ；其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，R2 不為氫。
於某些具體實施例中，R3 為氫或鹵基。於某些具體實施例中，R3 為C1 -C4 烷基，其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列的取代基取代：鹵基及-OH。於某些具體實施例中，R3 為C1 -C4 炔基、-CN、-OH、或-S(O)2 NH2 ，於某些具體實施例中，R3 為-NH2 或-NHC(O)R3a ，其中R3a 為C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，R3 為C1 -C4 烯基。於某些具體實施例中，R3 為-O-C1 -C4 烷基。
於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。於某些具體實施例中，Ar為。
於式(Ia)的某些具體實施例中，Ar為。於式(Ia)的某些具體實施例中，Ar為。於式(Ia)的某些具體實施例中，Ar為或，其中Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基。
於式(Ib)的某些具體實施例中，Ar為於式(Ib)的某些具體實施例中，Ar為。於式(Ib)的某些具體實施例中，Ar為或，其中Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基。於式(Ib)的某些具體實施例中，Ar為、，其中Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基。於式(Ib)的某些具體實施例中，Ar為，其中各Q6 獨立選自CRQ6 及N；其中RQ6 為氫、鹵基、-CN、低級烷基、或經取代之烷基。
於某些具體實施例中，-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -。於某些具體實施例中，-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -。於某些具體實施例中，-Z-W-X-Y-為-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -。
於某些具體實施例中，各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。於某些具體實施例中，二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。於某些具體實施例中，二個RZ 基一起形成側氧基。於某些具體實施例中，RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
於某些具體實施例中，各RW 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。於某些具體實施例中，二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。於某些具體實施例中，二個RW 基一起形成側氧基。於某些具體實施例中，RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
於某些具體實施例中，各RY 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。於某些具體實施例中，二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。於某些具體實施例中，二個RY 基一起形成側氧基。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX 為H。於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX 為RX1 ，其為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、-CONHC1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX 為 -CORX1 或-SO2 RX1 。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX 係選自 及。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX 為 -(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上。於某些具體實施例中， -(C1 -C4 伸烷基)-RX1 經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上。於某些具體實施例中，-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 經1或2個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上。於某些具體實施例中，RX 為-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1或2個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上，且其中RX1 為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。於某些具體實施例中，RX 為。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX1 為C3 -C8 環烷基。於某些具體實施例中，RX1 為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個為鹵基之取代基取代。於某些具體實施例中，RX1 為氘化雜環基。於某些具體實施例中，雜環基為單環或雙環。於某些具體實施例中，雜環基含有一至三個氮(亦即，1、2、或3個氮)及/或一至三個氧(亦即，1、2、或3個氧)。於某些具體實施例中，雜環基含有一個氮及/或一個氧。於某些具體實施例中，雜環基含有一個氮。於某些具體實施例中，雜環基含有二個氮。於某些具體實施例中，雜環基含有一個氮及一個氧。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX1 為雜環基，其中雜環基為視需要經C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、或-(CH2 )p -NH2 取代之雜環基；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 為經C1 -C4 烷基取代之雜環基。於某些具體實施例中，RX1 為經-(CH2 )p -OH取代之雜環基；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 為經 -(CH2 )-OH取代之雜環基。於某些具體實施例中，RX1 為經 -(CH2 )p -NH2 取代之雜環基；其中p為1、2、或3。於某些具體實施例中，RX1 為經-(CH2 )-NH2 取代之雜環基。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX1 為雜環基，其中雜環基為視需要經取代-[C(RX1a )2 ]p -CN。於某些具體實施例中，RX1 為經-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、 -[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、或-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 取代之雜環基。於某些具體實施例中，RX1 為雜環基，其中雜環基視需要經-CONHC1 -C4 烷基、-COH、-CO2 H、或 -[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基取代。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。於某些具體實施例中，二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基，諸如環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX1 為雜芳基。於某些具體實施例中，該雜芳基為單環或雙環。於某些具體實施例中，雜芳基含有一至三個氮(亦即，1、2、或3個氮)及/或一至三個氧(亦即，1、2、或3個氧)。於某些具體實施例中，雜芳基含有一個氮及/或一個氧。於某些具體實施例中，雜芳基含有一個氮。於某些具體實施例中，雜芳基含有二個氮。於某些具體實施例中，雜芳基含有一個氮及一個氧。於某些具體實施例中，RX1 為。
於式(Ia)及(Ib)的某些具體實施例中，RX 為 -CON(RX2 )2 。於某些具體實施例中，RX 為-CON(RX2 )2 ，其中RX2 為氫或甲基。於某些具體實施例中，RX 為-CONH2 。於某些具體實施例中，RX 為-CON(RX2 )2 ，其中RX2 為C1 -C4 烷基。於某些具體實施例中，RX 為-CON(RX2 )2 ，其中RX2 為甲基。
於某些具體實施例中，m為0。於某些具體實施例中，m為1。於某些具體實施例中，m為2。
於本文中所揭示化合物的一種變形中，Ar為且Q1 為CH；Q2 為N；Q3 為C；Q4 為C；及Q5 為C。
於本文中所揭示化合物的一種變形中，Ar為且Q1 為CH；Q2 為N；Q3 為C；Q4 為C；及Q5 為C。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為下式：該式具有一、二、三或更多個下列特徵： 　　a) Ar為； 　　b) Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C； 　　c) R2 為氫或鹵基； 　　d) -Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -； 　　e) RX 為-CORX1 。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為下式：該式具有一、二、三或更多個下列特徵： 　　a) Ar為； 　　b) Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C； 　　c) R2 為C1 -C4 烷基，其中烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH； 　　d) -Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -； 　　e) RX 為-CORX1 。
於本文中所揭示方法及組成物的一些具體實施例中，一或多種GSK抑制劑為下式：該式具有一、二、三或更多個下列特徵： 　　a) Ar為； 　　b) Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C； 　　c) R2 為C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-S(O)2 NH2 、-NH2 或-NHC(O)R2a ； 　　d) -Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -； 　　e) RX 為-CORX1 。
用於本揭露方法之GSK抑制劑的非限制性實例係於表 6 中表示。
本揭露也提供用於本文中所揭示之方法及組成物的下列化合物及其醫藥上可接受之鹽。
除非另行指明，本文中所繪製之結構也意指包括差異僅在於含有一或多個同位素富集原子的化合物。例如，除了改用氘或氚替代氫原子、或改用13 C或14 C替代碳原子、或改用15 N替代氮原子、或改用17 O或18 O替代氧原子之外之具有本結構的化合物係落在本揭露之範疇內。此等同位素標記的化合物係有用於作研究或診斷工具。於某些具體實施例中，氘化可用於減慢代謝，從而潛在地改善化合物的半衰期。化合物中的任何或全部氫可以用氘替代。
於某些具體實施例中，GSK抑制劑為化合物I-7 [3-(2-(4,4-二氟哌啶-1-羰基)-9-氟-1,2,3,4-四氫-[1,4]二氮呯并[6,7,1-hi]吲哚-7-基)-4-(咪唑并[1,2-a]吡啶-3-基)-1H-吡咯-2,5-二酮]。
於某些具體實施例中，Wnt傳訊途徑靶(例如，用於抑制)選自下列所組成群組：AES (TLE/格勞喬蛋白(TLE/groucho))、腺瘤性結腸瘜肉(APC)、ARHU、ARHV、軸蛋白1、軸蛋白2、β-連環蛋白、BMP4、BTRC (b-TrCP)、CCND1、CCND2、CCND3、CD44、CDX1、CLD N l (水間蛋白-1(claudin-1))、COL1A1、CTBP1、CTBP2、CTNNBI、CTNNB1P1 (ICAT)、DKK l、DKK2、DKK3、DKK4、Dsh、DVL2、EGR1、EFNBl (肝配蛋白B l (ephrinB l))、ENPP2 (自分泌運動蛋白(autotaxin))、EP300、FBXW1B、FGF4、FO SL l (Fra-1)、FRATl、FRAT2、FRZB (FRP-3)、FST (抑濾泡素)、FZD1、FZD2、FZD3、FZD4、FZD5、FZD6、FZD7、FZD8、FZD9、FZD10、GAS (胃泌素)、GIPC2、GIPC3、GJAl (連結蛋白43(connexin43))、GSK3A、肝醣合成酶激酶-3B (GSK-313)、ICAM1、ID2、ID3、JUN、LEFI、LRP5、LRP6、MFRP、MMP7、MMP26、MSX1、MSX2、MYC、N K D l、NKD2、NOS2A (iNOS)、PITX2、PLAUR (uPAR)、絲胺酸/蘇胺酸蛋白磷酸酶2A (PP2A)、PPN、PPP2R5D (B56 PP2A)、PTGS2 (Cox-2)、RET、SFRP1 (分泌之捲曲蛋白相關蛋白-1，包括SFRP1抑制劑)、SFRP2 (FRP-2)、SFRP4 (FRP-4)、SFRP5、SMOH、SOX17、T (短尾(brachyury))、TCF、VANGL1、VEGF、WIF1、WISP1、WISP2、WISP3、Wnt蛋白、Wnt受體、及任何其之類似物或同系物。
除此之外，本文提出的方法有用於製備用於預防及/或治療與不存在或缺乏毛囊上皮細胞相關疾病之醫藥製劑，諸如非瘢痕性禿髮(例如，休止期脫髮、生長期脫髮、雄性禿、及斑禿)、瘢痕性禿髮(例如髮癬、扁平毛髮苔癬、瘢痕性禿髮、圓盤狀紅斑狼瘡、禿性毛囊炎、頭皮切割性蜂窩組織炎、前額纖維化禿髮及中央離心瘢痕性禿髮)、拔毛癖、牽引性禿髮、及稀毛症。
當毛囊中幹細胞經處理本揭露之Shh途徑活化劑及Wnt促效劑時，不論是該族群是處於活體內或活體外，經處理細胞展現似幹細胞行為，因為經處理細胞具有增生及分化的能力，更具體地，分化成毛囊上皮細胞。較佳地，Shh途徑活化劑及Wnt促效劑誘導並維持細胞產生可分裂多代的子幹細胞並維持使高比例的所得細胞分化成毛囊上皮細胞的能力。於某些具體實施例中，增生幹細胞表現幹細胞標記物，其可包括Gli1、Krt15、CD34、Lgr5、Lgr6、Lrig1、Sox2、多功能蛋白聚糖、鹼性磷酸酶(AP)、波形蛋白、CD133、CD200、ID2、DKK3、WIF1、FZD1、FZD2、PHLDA1、抑濾泡素及/或DIO2。AP活性已用來作為偵測DP (皮乳突)出現之標記物且將其視為頭髮誘導性的指標。Handjiski等人(Br J Dermatol (1994) 131(3): 303-310)顯示在整個毛髮週期中，小鼠的毛髮DP表現出強且持久的AP活性。CD133 (prominin1)是已知的造血iPSC標記物。CD133在早期生長期小鼠皮膚的DP細胞中表現。CD133的表現與毛髮誘導性質相關(Yang and Cotsarelis.J Dermatol Sci (2010) 57(1): 2-11)。波形蛋白是存在於DP和真皮纖維母細胞中的間充質標記物(Rendl et al.PLOS Biol (2005) 3(11): e331)。多功能蛋白聚糖在生長期毛囊中的DP細胞中表現。多功能蛋白聚醣的表現與毛髮誘導性質相關(Yang and Cotsarelis.J Dermatol Sci (2010) 57(1): 2-11)。Sox2是幹細胞的常見標記物。Sox2-表現細胞對於在毛髮重建試驗中形成錐形/蒴果毛囊是必需的(Driskell et al.Development (2009) 136(16): 2815-2823)。
於一些具體實施例中，本揭露之方法可用於在顯著毛囊細胞形成之前維持或甚至瞬時增加毛囊中預先存在的幹細胞的幹性(即，自我更新)。於一些具體實施例中，毛囊中預先存在的幹細胞包含角質細胞、黑色素細胞、皮乳突細胞及/或隆起細胞。可使用免疫染色(包括細胞計數)的形態學分析及跨越代表性顯微鏡樣品的譜系追踪來證實一或多種這些細胞類型的增生。
有利地，本揭露之方法在無需使用遺傳操作下達成這些目標。生殖系操縱(Germ-line manipulation)並不是治療掉髮的治療上所欲方法。通常，療法較佳涉及投予未伴隨基因療法的小分子、肽、抗體或其他非核酸分子或核酸遞送載體。於某些具體實施例中，療法涉及投予小有機分子。較佳，通過使用，例如皮內、透皮、局部或口服投予，的(非基因)治療劑來實現毛髮的維持或恢復。
除了擴大毛囊的幹細胞外，本揭露之方法還具有，在子細胞中，維持分化成許多毛囊上皮細胞譜系的能力。於活體內族群中，此能力的維持可間接藉由個體毛髮密度、毛髮生長或毛囊歷經再生性循環能力的改善觀察。於活體外族群中，此能力的維持可直接藉由DP細胞數目相對於起族群的增加觀察或間接藉由測量一或多種DP幹細胞標記物的活性觀察。
於某些具體實施例中，幹細胞族群為活體內個體之幹細胞族群，且方法為對於掉髮的治療(如，其中從擴大之幹細胞族群產生毛囊上皮細胞導致部分或完全修復掉髮)。
於某些具體實施例中，本揭露係針對一種促進皮乳突細胞的產生之方法，該方法包含投予本揭露之組成物以擴大皮乳突細胞族群。於某些具體實施例中，該等化合物於哺乳動物中可再生毛髮。於某些具體實施例中，皮乳突細胞族群為活體內個體之幹細胞族群。於某些具體實施例中，皮乳突細胞族群為禿髮治療之活體內個體之皮乳突細胞族群。於某些具體實施例中，本揭露提供一種產生皮乳突細胞的方法其，使用本揭露之組成物以於活體內於起始族群中增生皮乳突細胞，而導致擴大皮乳突細胞族群。
於某些具體實施例中，投予步驟藉由對真皮實施一或多次注射進行(如皮內投予)。於一些具體實施例中，投予為局部且針對展現掉髮的皮膚區域。於一些具體實施例中，投予為口服。於一些具體實施例中，投予為透皮並針對展現掉髮的皮膚區域。
於一些具體實施例中，在投予療法前，皮膚已變粗糙或受傷。於一些具體實施例中，在施加療法前，有對皮膚施加一或多次針。
於某些具體實施例中，投予步驟包含以持續方式投予一或多種Shh途徑活化劑、一或多種Wnt促效劑、或一或多種Shh途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑的組合。
於一些具體實施例中，幹細胞為DP幹細胞。於某些具體實施例中，幹細胞為毛囊幹細胞。於一些具體實施例中，幹細胞胞含角質細胞、黑色素細胞、皮乳突細胞及/或隆起細胞。
於某些具體實施例中，方法進一步包含使用所產生的毛囊上皮細胞實施高通量篩選。於某些具體實施例中，方法包含使用所產生的毛囊上皮細胞來篩選對毛囊上皮細胞有毒性的分子。於某些具體實施例中，方法包含使用所產生的毛囊上皮細胞來篩選具有改善毛囊上皮細胞(如，暴露於分子的毛囊上皮細胞)之存活能力的分子。
於某些具體實施例中，方法進一步包含使用所產生的擴大之幹細胞族群實施高通量篩選。於某些具體實施例中，方法進一步包含使用所產生的幹細胞來篩選對所產生的幹細胞及/或彼等的後代有毒性的分子。於某些具體實施例中，方法包含使用所產生的幹細胞來篩選具有改善幹細胞及/或彼等的後代之存活能力的分子。
於另一種態樣中，本揭露係針對一種產生毛囊上皮細胞的方法，方法包含增生毛囊的幹細胞(如，活體外、離體、或活體內之樣品/個體毛囊的幹細胞)，得到擴大之毛囊的幹細胞族群(如，使得擴大之族群為比起始幹細胞族群大至少1.25、1.5、1.75、2、3、5、10或20倍的因子)，及促進從擴大之毛囊幹細胞族群產生毛囊上皮細胞。
於另一種態樣中，本揭露係針對一種產生毛囊上皮細胞的方法，方法包含對個體的一或多個毛囊中的細胞族群投予本文中所提供之化合物或組成物，進而促進毛囊上皮細胞產生。
於另一種態樣中，本揭露提供一種醫藥組成物，其包含：醫藥上可接受之載劑以及(i)Wnt促效劑、或其醫藥上可接受之鹽、及(ii)音蝟(Shh)活化劑、或其醫藥上可接受之鹽。於一些具體實施例中，Wnt促效劑包含GSK3-α抑制劑。於其他具體實施例中，Wnt促效劑包含GSK3-β抑制劑。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白(Smoothened)促效劑。於某些具體實施例中，Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白纖毛堆積增進劑。於一些具體實施例中，該組成物適於投予到皮膚。
某些具體實施例關於醫藥組成物，其包含醫藥上可接受之載劑，以及(i)Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑，及(ii)音蝟活化劑、平滑化蛋白促效劑、平滑化蛋白纖毛堆積增進劑、或其醫藥上可接受之鹽。於一些具體實施例中，該組成物適於投予到皮膚。
在本文中所述的方法及組成物的一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12。
於某些具體實施例中，Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺(Purmorphamine)、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑的濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至1000 mM、約1 µM至100 mM、約10 µM至10 mM、約1 µM至10 µM、約10 µM至100 µM、約100 µM至1000 µM、約1 mM至10 mM、或約10 mM至100 mM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於進一步之具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於又進一步之具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑的濃度為約0.01 nM至1000 µM、約0.1 nM至1000 µM、約1 nM至100 µM、約10 nM至10 µM、約1 nM至10 nM、約10 nM至100 nM、約100 nM至1000 nM、約1 µM至10 µM、或約10 µM至100 µM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為CHIR99021，其濃度為約1 µM至1000 mM、約10 µM至100 mM、約100 µM至100 mM、約1 mM至10 mM、或約10 mM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為CHIR99021，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為CHIR99021，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為CHIR99021，其濃度為約1 nM至1000 µM、約10 nM至100 µM、約100 nM至100 µM、約100 nM至1 µM、約1 µM至10 µM、或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10 µM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為LY2090314，其濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至10 mM、約1 µM至1 mM、約10 µM、約20 µM、約30 µM、約40 µM、或約50 µM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為LY2090314，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為LY2090314，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為LY2090314，其濃度為約0.01 nM至1000 µM、約0.1 nM至10 µM、約1 nM至1 µM、約1 nM至100 nM、約1 nM至50 nM、或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為AZD1080，其濃度為約0.1 µM至1000 mM、約1 µM至1000 mM、約10 µM至100 mM、約100 µM至10 mM、約1 mM至10 mM、或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10 mM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為AZD1080，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為AZD1080，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為AZD1080，其濃度為約1 nM至1000 µM、約10 nM至1000 µM、約100 nM至100 µM、約1 µM至10 µM、或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10 µM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為GSK3抑制劑XXII，其濃度為約0.1 µM至1000 mM、約1 µM至100 mM、約10 µM至10 mM、約100 µM至10 mM、約100 µM至1 mM、或約1、2、3、4、5、6、7、8、9、或10 mM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為GSK3抑制劑XXII，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為GSK3抑制劑XXII，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑、GSK3-α抑制劑、或GSK3-β抑制劑為GSK3抑制劑XXII，其濃度為約0.1 nM至1000 µM、約1 nM至100 µM、約10 nM至10 µM、約100 nM至1 µM、或約0.5 µM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-6，其濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至10 mM、約1 µM至1 mM、約10 µM至1 mM、約125 µM、約250 µM、約500 µM、或約750 µM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-6，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-6，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-6，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-6，其濃度為約0.01 nM至1000 µM、約0.1 nM至10 µM、約1 nM至1 µM、約10 nM至100 nM、約25 nM、約25 nM、或約75 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-7，其濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至10 mM、約1 µM至1 mM、約10 µM、約20 µM、約30 µM、約40 µM、或約50 µM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-7，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-7，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-7，其濃度為約0.01 nM至1000 µM、約0.1 nM至10 µM、約1 nM至1 µM、約1 nM至100 nM、約5 nM、約10 nM或約20 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-12，其濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至10 mM、約1 µM至1 mM、約10 µM至1 mM、約125 µM、約250 µM、約500 µM、或約750 µM。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-12，其相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.01至1,000,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約0.1至100,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約1至10,000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至5000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約50至2000倍、或相對於其有效幹性驅動子濃度的濃度比為約100至1000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-12，其相對於其有效幹性驅動子濃度為約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Wnt促效劑為化合物I-12，其濃度為約0.01 nM至1000 µM、約0.1 nM至10 µM、約1 nM至1 µM、約10 nM至100 nM、約25 nM約50 nM或約75 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，音蝟(Shh)活化劑的濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至1000 mM、約1 µM至100 mM、約0.1 µM至1 µM、約1 µM至10 µM、約10 µM至100 µM、約100 µM至1 mM、約1 mM至10 mM、或約100 mM至1000 mM、或約10 mM至100 mM、或約100 mM至1000 mM。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑相對於其有效Shh濃度的濃度比為約0.1至1,000,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1至100,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約10至10,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約100至1000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為相對於其有效Shh濃度的約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑的濃度為約0.01 nM至1000 µM、或約0.1 nM至1000 µM、約1 nM至100 µM、約10 nM至10 µM、約1 nM至10 nM、約10 nM至100 nM、約100 nM至1000 nM、約1 µM至10 µM、約10 µM至100 µM、或約100 µM至1000 µM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)，其濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至10 mM、約1 µM至1 mM、約10 µM至100 µM、約10 µM、約20 µM、約25 µM、約50 µM。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)，其相對於其有效Shh濃度的濃度比為約0.1至1,000,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1至100,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約10至10,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約100至1000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)，其為相對於其有效Shh濃度的約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)，其濃度為約0.001 nM至1000 µM、約0.01 nM至10 µM、約0.1 nM至1 µM、約1 nM至100 nM, 1 nM至10 nM、約1 nM、約2 nM、約3 nM、約4 nM、約5 nM、約6 nM、約7 nM、約9 nM、或約10 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇，其濃度為約0.01 µM至1000 mM、約0.1 µM至100 mM、約1 µM至10 mM、約10 µM至1 mM、約125 µM、約250 µM、約500 µM、或約1000 µM。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇，其相對於其有效Shh濃度的濃度比為約0.1至1,000,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1至100,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約10至10,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約100至1000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇，其為相對於其有效Shh濃度的約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇，其濃度為約0.01 nM至1000 µM、約0.1 nM至100 µM、約1 nM至10 µM、約10 nM至1 µM、約25 nM、約50 nM、約100 nM、約200 nM、或約500 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG HCl (CAS 912545-86-9)，其濃度為約1 µM至1000 mM、或約10 µM至1000 mM、或約100 µM至10 mM、或約1 mM。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG HCl，其於其有效Shh濃度的濃度比為約0.1至1,000,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1至100,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約10至10,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約100至1000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG HCl，其為相對於其有效Shh濃度的約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG HCl，其濃度為約1 nM至1000 µM、約10 nM至100 µM、約100 nM至10 µM、約125 nM、約250 nM、或約500 nM、或約750 nM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺，其濃度為約1 µM至1000 mM、或約10 µM至1000 mM、或約100 µM至10 mM、或約2 mM。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺，其於其有效Shh濃度的濃度比為約0.1至1,000,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1至100,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約10至10,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約100至1000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺，其為相對於其有效Shh濃度的約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺，其濃度為約1 nM至1000 µM、約10 nM至100 µM、約100 nM至10 µM、約1 µM至10 µM、約1 µM、約2 µM、約3 µM、約4 µM、約5 µM、或約6 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM且組合濃度為約100 nM至約10 µM的嘌嗎啡胺。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM且組合濃度為約1 nM至約100 nM的SAG。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM且組合的濃度為約1 µM至約100 µM的20-α-羥基膽固醇。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM且組合濃度為約10 nM至約1 µM的SAG HCl。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM組合上SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM組合上SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM組合上SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM組合上SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至10 µM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM組合上SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM組合上SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM組合上SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM組合上SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM組合上SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM組合上SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所述的組成物及方法的某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM組合上嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM組合上SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM組合上20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。於某些具體實施例中，化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM組合上SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
於本文中所提供的組成物及方法的某些具體實施例中，Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)或SAG-HCl組合上選自一或多種下列之Wnt促效劑：SFRP1抑制劑(例如，WAY-316606)、SFRP2抑制劑、SFRP3抑制劑、SFRP4抑制劑、SFRP5抑制劑、環孢菌素或其類似物(例如，環孢菌素A (CsA)、PSC833 (伐司撲達(Valspodar)))、DKK1抑制劑(例如，WAY-262611)、及WIF1抑制劑。於一些具體實施例中，SAG的濃度為約1 µM至1000 mM、或約10 µM至1000 mM、或約100 µM至10 mM、或約1 mM。於一些具體實施例中，SAG HCl 相對於其有效Shh濃度的濃度比為約0.1至1,000,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1至100,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約10至10,000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約100至1000倍、或相對於其有效Shh濃度的濃度比為約1000倍。於一些具體實施例中，SAG HCl為相對於其有效Shh濃度的約1倍、3倍、10倍、30倍、100倍、300倍、1000倍、3000倍、5000倍。於一些具體實施例中，SAG HCl的濃度為約1 nM至1000 µM、約10 nM至100 µM、約100 nM至10 µM、約125 nM、約250 nM、或約500 nM、或約750 nM
毛囊生長
毛囊通過複雜的形態發生過程發展，此過程是由於胚胎發育期間上皮與下方間質間交互的分子交互作用導致的。每個毛囊歷經再生性循環。毛髮循環由生長階段(生長期)、退化階段(退化期)及休息階段(休止期)所組成。在退化期中，毛囊幹細胞保持在隆起中。接著當提供適當的分子訊號時，休息毛囊重新進入生長期(再生)。在晚期休止期至早期生長期轉換期間，來自皮乳突(DP)的訊號刺激毛髮胚及靜止的隆起幹細胞變得活化。在生長期中，隆起中的幹細胞產生毛髮胚，接著新毛囊基質中的瞬時增生細胞迅速增生而形成新的毛髮絲。退化期後，毛囊歷經細胞凋亡。毛髮絲留在休止期毛囊中，成為棒狀毛髮，其隨後在外生(exogen)期間脫離。這些再生性循環在生物體的整個生命週期中都會重複地持續。
蝟途徑
進化上保守的蝟(Hh)途徑對於正常胚胎發育是必要的，並在成體組織維持、更新及再生中扮演關鍵角色。分泌之Hh蛋白以濃度依賴性及時間依賴性方式作動，以起始從存活及增生到細胞命運指定及分化範圍的一系列細胞回應。合適的Hh傳訊水平需要Hh配體之受調節的生產、加工、分泌及運輸-於哺乳動物中，這包括音蝟(Shh)、印度刺蝟(Ihh)及沙漠刺猬(Dhh)。所有Hh配體均合成為前體蛋白(其歷經羧基端的自催化裂解及伴隨的膽固醇修飾以及胺基端的棕櫚醯化，而得到分泌之雙重脂化蛋白)。Hh配體通過Dispatched及Scube2的組合作用從細胞表面釋出，並隨後通過與細胞表面蛋白LRP2及硫酸肝素蛋白多醣(heparan sulfate proteoglycan；GPC1-6)的磷脂酸肌醇蛋白聚糖(Glypican)家族的交互作用在多個細胞上被運輸。Hh蛋白通過結合到典型(canonical)受體Patched(PTCH1)及共同受體GAS1、CDON及BOC來起始傳訊。Hh與PTCH1的結合導致GPCR樣蛋白平滑化蛋白(SMO)的去抑制，導致SMO在纖毛中積聚並使其胞質尾部磷酸化。SMO介導下游訊號轉導，這包括來自驅動蛋白家族蛋白Kif7的GLI蛋白(Hh途徑的轉錄效應子)與關鍵細胞內Hh途徑調節劑SUFU的解離。GLI蛋白也通過纖毛運輸並且在沒有Hh傳訊時被SUFU及Kif7封存，允許PKA、GSK3β及CK1對GLI磷酸化，並且隨後加工成轉錄抑制子(通過切割羧基-端粒)或靶向降解(由E3泛素連接酶(ubiquitin ligase)β-TrCP介導)。回應Hh傳訊的活化，GLI蛋白被差異地磷酸化並加工成轉錄活化劑，其誘導Hh靶基因的表現，其中許多是該途徑的組分(例如PTCH1和GLI1)。反饋機制包括干擾Hh配體功能的Hh途徑拮抗劑(PTCH1、PTCH2及Hhip1)的誘導，以及由E3泛素連接酶銜接蛋白SPOP介導的GLI蛋白降解。除了在正常胚胎發育及成體組織穩態期間的重要角色之外，異常Hh傳訊還負責越來越多癌症的起始，包括基底細胞癌、成神經管細胞瘤及橫紋肌肉瘤；最近過度活躍的Hh傳訊已牽連到胰腺癌、肺癌、前列腺癌、卵巢癌及乳腺癌中。製作化合物的方法
本文中所述之化合物可從市售起始材料製作或使用已知有機、無機及/或酵素程序合成。
本發明之化合物可用有機合成技術領域中具有通常知識者已知的多種方式製備。舉例來說，本揭露的化合物可以使用下面描述的方法，連同合成有機化學領域中已知的合成方法或者本技術領域中具有通常知識者所理解對其的變化來合成。這些方法包括但不限於下面描述的那些方法。
標題化合物的代表性合成係顯示在方案1中。方案 1. 式 (I) 之例示性化合物的通用合成
於方案1中，化合物I-11為其中Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C；R2 為溴；Ar為；及-Z-W-X-Y-為之具體實施例。式1化合物及烯丙型醛(allylic aldehyde)為市售起始材料。替代地，式1化合物及烯丙型醛可經由各種不同合成路徑使用市售起始材料及/或藉由常規合成方法所製備之起始材料來合成。
繼續參考方案1，式1化合物與烯丙型醛反應而在例如自約40℃至100℃之溫度下，於適當溶劑(諸如乙腈)之縮合反應中形成化合物2。化合物2與氨反應而在例如自0℃至室溫範圍之溫度下，於適當溶劑(諸如甲醇)中形成化合物3。化合物3可用於將於下討論之偶合反應。
繼續參考方案1，化合物5可從烷化化合物4製備，其係在鹼(諸如鹼金屬氫化物，諸如氫化鈉)的存在下以烷基鹵化物烷化化合物4。反應可在例如自0℃至室溫範圍之溫度下，於合適的溶劑(諸如二甲基甲醯胺(DMF))中運行。
化合物6可從還原化合物5製備。合適的還原試劑包括硼烷吡啶複合物(Borane pyridine complex)。反應係在例如自0℃至室溫範圍之溫度下，於合適的溶劑(諸如乙酸)中運行。
化合物7可從化合物6反應製備。反應係在酸(諸如硫酸及乙酸)的存在下，以甲醛進行。
化合物8可從保護化合物7的胺基製備。合適的試劑包括BOC酐。反應可在例如自0℃至室溫範圍之溫度下，於合適的溶劑(諸如四氫呋喃(THF))中運行。
芯1可從化合物8的脫氫製備。合適的試劑包括DDQ (2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌)。反應可在例如自0℃至室溫範圍之溫度下，於合適的溶劑(諸如四氫呋喃(THF))中運行。
化合物10可藉由去保護胺基及接著與醯基鹵化物之後續反應而從芯1製備。若保護基是BOC，則去保護胺基可在酸性條件下實施。接著與醯基鹵化物反應可得到化合物10。反應可在例如自0℃至室溫範圍之溫度下，於合適的溶劑(諸如二甲基甲醯胺(DMF))中運行。
化合物11可藉由醯化反應，諸如夫夸醯化反應從化合物10製備。於此反應中，醯基鹵化物與化合物10在例如自30℃至100℃範圍之溫度下，於合適的溶劑(諸如二氯甲烷)中反應。接著產物與醇及鹼反應而形成酯，如化合物11中者。
化合物11與化合物3反應而形成1H-吡咯-2,5-二酮化合物。反應係在惰性有機溶劑(諸如二甲基甲醯胺、四氫呋喃等)中且在鹼(諸如第三丁醇鉀)的存在下進行。合成方案 合成方案 1 合成方案 2 合成方案 3 合成方案 4 合成方案 5 合成方案 6 合成方案 7 合成方案 8 合成方案 9 合成方案 10 合成方案 11 合成方案 12 實驗程序 中間產物 2 的合成 .
對中間產物1 (20 g，213 mmol)的MeCN (540 mL)溶液添加(E)-4-側氧基-丁酸乙酯(28.6 g，223 mmol)。將反應混合物加熱到80 ℃並攪拌6 hrs。於減壓下濃縮反應混合物，藉由快速管柱層析(以自1:0至200:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈棕色固體之粗製中間產物2 (25 g)。中間產物 3 的合成 .
對粗製中間產物2 (25 g)的MeOH (100 mL)溶液添加NH3 /MeOH (6 M，100 mL)。反應混合物於室溫攪拌過夜。將混合物倒到EtOAc (500 mL)中，且接著過濾。於真空乾燥濾餅而給出呈棕色固體之中間產物3 (13 g，35%，對兩步驟而言)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 8.30 (d, J=6.8Hz, 1H), 7.60 (s br, 1H), 7.54 (d, J=5.2Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.19-7.23 (m, 1H), 7.06 (s br, 1H), 6.89-6.93 (m, 1H), 3.80 (s, 2H)。中間產物 5 的合成 .
在0℃，對中間產物4 (100 g，0.51 mol)的DMF (1000 mL)溶液添加NaH (60%，61 g，1.53 mol)。混合物於室溫攪拌20分鐘。在0℃，將2-氯乙胺鹽酸鹽(89.2 g，0.77 mol)分批添加到混合物中。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。混合物倒到冰水中並以EtOAc (600 mL×3)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮而給出呈黃色油之中間產物5 (110 g，90 %)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.74-7.75 (d, 1H, J=1.2 Hz), 7.21-7.29 (m, 2H), 7.13-7.14 (d, 1H.J=3.2Hz), 6.44-6.45 (d, 1H, J=2.8Hz), 4.14-4.17 (t, 2H, J=6 Hz), 3.08-3.11(t, 2H, J=6 Hz)。中間產物 6 的合成 .
在N2 及室溫下，對中間產物5 (150 g，0.63 mol)的AcOH (720 mL)溶液添加硼烷吡啶複合物(9.3 M，135.5 mL，1.26 mol)。混合物於室溫攪拌過夜。接著以NaOH水溶液調整混合物的pH = 9-10，以EtOAc (800 mL×3)萃取。合併的有機相於真空濃縮而給出粗製化合物。將水(720 mL)添加到粗製化合物，接下來緩慢添加濃HCl (240 mL)。混合物於室溫攪拌30分鐘、以NaOH水溶液調整pH = 10-11、以EtOAc (800 mL×3)萃取、濃縮而給出粗製化合物。於室溫，對粗製化合物的甲基第三丁基醚(500 mL)溶液添加AcOH (28 mL)。混合物於室溫攪拌30分鐘，接著過濾，濾餅以甲基第三丁基醚清洗、乾燥而給出呈白色固體之中間產物6 (120 g，63.5 %)。
1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ (ppm) 7.14 (s, 1H), 7.09-7.12 (d, 1H, J=8.4 Hz), 6.43-6.45 (d, 1H, J=8.4 Hz), 3.33-3.37 (t, 2H, J=8.4 Hz), 3.06-3.09 (t, 2H, J=6.6 Hz), 2.87-2.92 (t, 2H, J=8.4 Hz), 2.76-2.79 (t, 2H, J=6.6 Hz)。中間產物 7 的合成 .
於室溫，對H2 SO4 (12.6 mL)的AcOH (80 mL)及HCHO (37%水性，660 mL)溶液分批添加中間產物6 (100 g，0.33 mol)。混合物於50℃攪拌20分鐘。接著以NaOH水溶液調整混合物的pH = 9-10，以EtOAc (800 mL×3)萃取，濃縮而給出呈黃色固體之粗製中間產物7 (100 g)，其在未純化下直接用於下一步驟。中間產物 8 的合成 .
於室溫，對中間產物7 (100 g，粗製)與水性K2 CO3 (300 mL, 1 M)於THF (700 mL)的混合物添加(Boc)2 O (94.4 g)。混合物於室溫攪拌過夜。TLC (二氯甲烷/MeOH=10/1)顯示反應完成。接著添加H2 O，以EtOAc (500 mL×3)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自50:1至5:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物8 (75 g，64.6%，對於兩步驟而言)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.11 (bs, 1H), 6.99 (bs, 1H), 4.30-4.37 (m, 2H), 3.68 (m, 2H), 3.36-3.40 (m, 2H), 2.96-3.01 (m, 4H), 1.41 (s, 9H)。芯 1 的合成 .
在N2 及0℃下，對中間產物8 (49 g，0.14 mol)的THF (490 mL)溶液添加DDQ (37.9 g，0.17 mol)的THF (490 mL)溶液。混合物於0 ℃攪拌15分鐘。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到Na2 CO3 水溶液中並以EtOAc (400 mL ×2)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自50:1至10:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之芯 1 (24 g，49%)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.63 (bs, 1H), 7.04-7.15 (m, 2H), 6.46-6.47 (d, 1H, J=3.2 Hz), 4.76-4.83 (m, 2H), 4.25 (m, 2H), 3.92 (m, 2H), 1.42-1.45 (m, 9H)。中間產物 10 的合成
於室溫，對芯 1 (10 g，28.5 mmol)的二氯甲烷(100 mL)溶液添加HCl/二噁烷(7 M，50 mL)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。溶劑於真空濃縮而給出白色固體。
於低於5 ℃下，對白色固體與1-哌啶羰基氯(4.6 g，31.3mmol)的DMF(100 mL)溶液添加Et3 N (8.6 g，85.5 mmol)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=10/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EA (200 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自20:1至1:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物10 (7.5 g，72.8%)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.86 (d,J =1.6Hz, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.02 (t,J =1.6Hz, 1H), 6.47 (d,J =3.2Hz, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.22-4.20 (t,J = 4.8Hz, 2H), 3.98-4.00 (t,J = 4.8Hz, 2H), 3.18-3.19 (m, 4H), 1.58-1.40 (m, 6H)。中間產物 11 的合成 .
在N2 及0℃下，對中間產物10 (10 g，27.6 mmol)的二氯甲烷(100 mL)溶液添加(COCl)2 (8.8 g，69 mmol)。混合物於40 ℃攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著在N2 及-60℃下，添加NaOMe (3.7 g，69 mmol)的MeOH (10 mL)溶液。混合物於室溫攪拌1 hr。添加水，以二氯甲烷(100 mL×3)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自5:1至1:2之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物11 (6 g，48.5%)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 8.70 (d, J = 1.6Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 4.67 (s, 2H), 4.41-4.39 (m, 2H), 4.01-3.98 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.15-3.01 (m, 4H), 1.60-1.40 (m, 6H)。芯 2 的合成 .
於0-10 ℃，對中間產物11 (10 g，22.3 mmol)與中間產物3 (3.9 g，22.3 mmol)的DMF (180 mL)溶液添加t-BuOK (6.4 g，19.0 mmol)的THF (100 mL)溶液。混合物於0-10 ℃攪拌15分鐘。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自10:5:1至1:1:1之石油醚/EtOAc/THF溶析)純化殘質而給出呈橘色固體之芯 2 (6.5 g，50.7%)。
1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.25 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.65-7.68 (d, J = 6.8Hz, 1H), 7.59-7.61 (d, J = 6.8Hz, 1H), 7.19-7.23 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.55-6.58 (t, J = 6.4 Hz, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.50-4.62 (m, 2H), 3.82-3.86 (m, 2H), 2.94-3.06 (m, 4H), 1.40-1.60 (m, 6H)。
LC/MS M+1=573.1中間產物 12 的合成 .
在N2 及室溫下，對芯 1 (10 g, 28.5 mmol)的DMF (200 mL)溶液添加CuI (5.4 g, 28.5 mmol)及2,2-二氟-2-(氟磺醯基)乙酸甲酯(19.2 g, 100 mmol)。混合物於80℃攪拌2.5 hrs。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。將混合物冷卻到室溫並過濾。對濾液添加水並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自20:1至5:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物12 (5.5 g, 56.7%)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.81 (s, 1H), 7.13-7.28 (m, 2H), 6.62 (s, 1H), 4.92-4.84 (m, 2H), 4.22 (s, 2H), 3.98-3.97 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)。中間產物 13 的合成 .
在N2 下，對中間產物12 (5.0 g, 14.7 mmol)的二氯甲烷(75 mL)溶液添加(COCl)2 (4.6 g, 36.7 mmol)。混合物於40 ℃攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著在N2 及-60℃下，添加NaOMe (1.98 g, 36.7 mmol)的MeOH (10 mL)溶液。混合物於室溫攪拌1 hr。添加水，以二氯甲烷(100 mL×3)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自10:1至5:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物13 (3.8g, 60.7%)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 8.64 (s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.40-7.31 (m, 1H), 4.98-4.88 (m, 2H), 4.51-4.50 (m, 2H), 4.04-4.01 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 1.40 (s, 9H)。中間產物 14 的合成 .
於0-10℃，對中間產物13 (5.5 g, 12.9 mmol)與中間產物3 (2.25 g, 12.9 mmol)的DMF (110 mL)溶液添加tBuOK (3.6 g, 32.2 mmol)的THF (10 mL)溶液。混合物於0-10℃攪拌15分鐘。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自100:1至30:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈橘色固體之中間產物14 (3.5 g, 58.3%)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 8.16 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.35 (s, 1H), 7.27 (s, 1H), 7.12-7.08 (m, 2H)), 6.40-6.38 (m, 2H, 4.89-4.77 (m, 2H), 4.50 (s, 2H), 4.04 (s, 2H), 1.48-1.37 (m, 9H)。化合物 I-1 的合成 .
於室溫，對中間產物14 (5 g, 9.1 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液添加HCl/二噁烷(50 mL, 7M)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。溶劑於真空濃縮而給出白色固體。
於室溫，對白色固體及1-哌啶羰基氯(1.8 g, 12.3mmol)的DMF (40 mL)溶液添加Et3 N (2.49 g, 24.6 mmol)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=10/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自20:1至10:1之二氯甲烷/THF溶析)純化殘質而給出呈紅色固體之化合物 I-1 (3.0 g, 70%)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.30 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.64-7.60 (m, 2H), 7.19 (s, 1H), 6.56 (m, 1H), 6.31 (s, 1H), 4.77-4.69 (m, 2H), 4.68-4.60 (m, 2H), 3.95-3.85 (m, 2H), 3.10-2.90 (m, 4H), 1.55-1.35 (m, 6H)。
LC/MS M+1 563.1化合物 I-2 的合成 .
於室溫，對芯 2 (5 g, 8.7 mmol)的N-甲基-2-吡咯啶酮(50 mL)溶液添加CuCN (2.5 g, 28 mol)。在N2 下，混合物於150℃攪拌6 hr。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自1:0至50:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈橘色固體之化合物 I-2 (2.2 g, 49%)。
1 H NMR (DMSO-d 6 ): δ (ppm) 11.30 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.66-7.68 (d, 1H，J = 9.2 Hz), 7.54-7.56 (d, 1H, J = 6.8 Hz), 7.29 (s, 1H), 7.19-7.23 (t, J = 8 Hz, 1H), 6.53-6.57 (t, 1H, J = 6.8 Hz), 6.44 (s, 1H), 4.68 (S, 4H), 4.60-4.63 (m, 4H), 3.84-3.88 (m, 2H), 2.96-3.05 (m, 4H), 1.43-1.47 (m, 6H)。
LC/MS M+1 520.1中間產物 15 的合成 .
對芯 1 (50 g, 0.14 mol)的1,4-二噁烷(500 mL)溶液添加NaI (42.7 g, 0.28 mol)及CuI (2.7g)及2-二甲基胺基乙胺(2.5g)。在N2 下，混合物於140℃攪拌過夜。過濾混合物，濾餅以二氯甲烷清洗。合併的有機相於真空濃縮。以甲基第三丁基醚清洗殘質而給出呈黃色固體之中間產物15 (50 g, 88.0%)。中間產物 16 的合成 .
於室溫，對中間產物15 (10 g, 25.1mmol)的Et3 N (120 mL)溶液添加THF (60mL)，接著在N2 下添加Pd(PPh3 )2 Cl2 (1.2g, 2.4mmol)及CuI (1.2g, 2.4mmol)。接著滴加乙炔基三甲基矽烷(4.75g, 48.4mmol)。混合物於60℃攪拌過夜。混合物於真空濃縮以移除Et3 N。接著將混合物倒到冰水中並以CH2 Cl2 (300 mL ×2) 萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自100:1至50:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物16 (6 g, 64.8 %)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.63-7.67 (m, 1H), 7.04-7.41 (m, 2H), 6.46-6.49 (m, 1H), 4.77-4.84 (m, 2H), 4.23-4.29 (m, 2H), 3.90-3.97 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 0.26 (s, 9H)。中間產物 17 的合成 .
在N2 及0℃下，對中間產物16 (10 g, 27 mmol)的二氯甲烷(110 mL)溶液添加(COCl)2 (8.5 g, 67.4 mmol)。混合物於40℃攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。接著在N2 及-60℃下，添加NaOMe (3.64 g, 67.4 mmol)的MeOH (10 mL)溶液。混合物於室溫攪拌1 hr。添加水，以二氯甲烷(100 mL×3)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自100:1至5:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物17 (7 g, 56.7%)。中間產物 18 的合成 .
於0-10℃，對中間產物17 (8 g, 17.6 mmol)與中間產物3 (3.1 g, 17.6 mmol)的DMF (80 mL)溶液添加tBuOK (4.9 g, 44 mmol)的THF (30 mL)溶液。混合物於0-10℃攪拌15分鐘。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自100:1至50:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈橘色固體之中間產物18 (5 g, 49%)。中間產物 19 的合成 .
於室溫，對中間產物18 (5 g, 8.6 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液添加HCl/二噁烷(50 mL, 7M)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。溶劑於真空濃縮而給出白色固體。
於室溫，對白色固體及1-哌啶羰基氯(1.4 g, 9.5mmol)的DMF (50 mL)溶液添加Et3 N (2.6 g, 25.8 mmol)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=10/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮而給出粗製中間產物19 (5.2 g)，其在未純化下直接用於下一步驟。化合物 I-3 的合成 .
對粗製中間產物19 (5.2 g)的DMF (100mL)溶液添加K2 CO3 (2 g)。將反應混合物加熱到50℃並攪拌1 hr。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自100:1至30:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈紅色固體之化合物 I-3 (3 g, 18.6%，對於兩步驟而言)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.26 (s, 1H), 8.02 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.65-7.59 (m, 2H), 7.20 (t, 1H,J = 8Hz), 6.97 (s, 1H), 6.58-6.55 (t, J = 6.8Hz, 1H), 6.18 (s, 1H), 4.63 (s, 2H), 4.50-4.60 (m, 2H), 3.80-3.90 (m, 2H), 3.75 (s, 1H), 2.95-3.05 (m, 4H), 1.46-1.35 (m, 6H)。
LC/MS M+1 519.2化合物 I-10 的合成 .
在N2 及RT下，對芯 2 (5 g, 8.8 mmol)的二噁烷(50 mL)溶液添加乙醯胺(3.1 g, 53.3 mmol)、CuI (1.1 g, 5.8 mmol)、K3 PO3 (5.5 g, 26.4 mmol)。混合物於室溫攪拌20分鐘。添加N1 ,N2 -二甲基乙烷-1,2-二胺(1.56 g, 17.8 mmol)，且接著混合物在N2 及115 ℃下攪拌5 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc/THF (3/1, 100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自200:1至50:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈紅色固體之化合物 I-10 (3 g, 62%)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.21 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.58-7.64 (m, 2H), 7.17-7.21 (t, 1H,J = 8.0 Hz), 7.00 (s, 1H), 6.77 (s, 1H), 6.56-6.58 (t, 1H,J = 7.2 Hz), 4.60 (s, 2H), 4.40-4.50 (m, 2H), 3.80-3.88 (m, 2H) , 2.88-3.12 (m, 4H), 1.85 (s, 3H) , 1.15-1.20 (m, 6H)。
LC/MS M+1 552.2化合物 I-4 的合成 .
於室溫，對化合物I-10 (3 g, 5.4 mmol)的EtOH (10 mL)溶液添加HCl (28 mL, 6 N)。混合物於80 ℃攪拌3 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以二氯甲烷(100 mL ×2)萃取，接著以Na2 CO3 水溶液調整水相的pH = 9-10，以二氯甲烷(100 mL ×6)萃取，於真空濃縮。殘質以甲基第三丁基醚清洗、過濾。於真空乾燥濾餅而給出呈紅色固體之化合物 I-4 (2.1 g, 75 %)。
1 H NMR (DMSO-d6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.19 (s, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.62 (bs, 2H), 7.18-7.22 (t, 1H,J = 7.2 Hz), 6.57-6.61 (t, 1H,J = 6.8 Hz), 6.24 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 4.50 (s, 2H), 4.36-4.39 (m, 2H), 4.14-4.17 (m, 2H), 3.75-3.78 (m, 2H), 2.88-3.05 (m, 4H), 1.44-1.48 (m, 6H)。
MS/LC M+1 511.1中間產物 22 的合成 .
於室溫，對中間產物21 (100 g, 0.59 mol)的乾甲苯(890 mL)溶液添加n-BuOH (131.6 g, 1.78 mol)及TsOH (10 g)。混合物於120 ℃攪拌過夜，並使用迪安斯塔克(Dean-stark)儀器移除水。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。混合物於真空濃縮而給出粗製中間產物22 。藉由快速管柱層析(以自100:1至20:1之石油醚/EtOAc溶析)純化粗製中間產物22 而給出呈黃色油之中間產物22 (120 g, 67.8%)。
1 H NMR (CDCl3 , 400 MHz): δ (ppm) 7.89-7.92 (dd, 1H,J =4.8Hz, 8.8 Hz), 7.51-7.54 (dd, 1H,J =2.8Hz, 9.6Hz), 7.09-7.14 (m, 1H), 6.04 (s, 1H), 3.50-3.56 (m, 4H), 1.55-1.62 (m, 4H), 1.33-1.42 (m, 4H), 0.83-0.93 (m, 6H)。中間產物 23 的合成 .
於-40℃，對中間產物22 (50 g, 0.17 mol)的乾THF (1500 mL)溶液滴加乙烯基溴化鎂溶液(1 M, 668.8 mL, 668.8 mmol)。混合物於-40℃攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到水性NH4 Cl中，以EtOAc (300 mL ×3)萃取，將有機相濃縮而給出粗製化合物。藉由快速管柱層析(以自100:1至20:1之石油醚/EtOAc溶析)純化粗製化合物而給出呈黃色油之化合物(24 g)。於室溫，對化合物(24 g)的THF (100 mL)溶液滴加HCl (0.5 N, 80 mL)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=5/1)顯示反應完成。以NaOH水溶液調整混合物的pH =10，以EtOAc (300 mL ×3)萃取，於真空濃縮而給出呈黃色固體之中間產物23 (16 g, 58.8 %)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 10.06 (s, 1H), 7.62 (dd, 1H,J =2Hz, 9.2Hz), 7.38-7.41 (m, 2H), 6.60(t, 1H,J =2.4Hz)。中間產物 24 的合成 .
在N2 及室溫下，對中間產物23 (140 g, 0.86 mol)的MeOH (2100 mL)溶液添加2-胺基乙醇(78 g, 1.3 mol)及Pd/C (14 g)。混合物在N2 及室溫下攪拌2 hrs。接著混合物在N2 及室溫下攪拌過夜。將混合物過濾，濃縮而給出呈黃色油之中間產物24 (200 g，粗製)，其在未純化下直接用於下一步驟。中間產物 25 的合成 .
於室溫，對中間產物24 (90 g，粗製)及K2 CO3 (467 mL, 1 M)的THF (1300 mL)溶液添加Boc2 O (141 g)。混合物於室溫攪拌過夜。TLC (二氯甲烷/MeOH=10/1)顯示反應完成。接著添加H2 O，以EtOAc (500 mL ×3)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自10:1至1:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色油之中間產物25 (66.6 g, 56%，對兩步驟而言)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 10.17 (s, 1H), 7.23-7.26 (m, 2H), 6.78-6.82 (dd, 1H, J = 9.2 Hz, J=2 Hz), 6.48-6.50 (t, 1H, J=2.4Hz), 4.67 (s, 2H), 3.66-3.71 (m, 2H), 3.25-35 (m, 2H), 1.40 (s, 9H)。中間產物 26 的合成 .
在N2 及0℃下，對中間產物25 (50 g, 0.26 mol)的THF (1000 mL)溶液添加Et3 N (79 g, 0.79 mol)及Ms2 O (55 g, 0.32 mol)。混合物於0℃攪拌2 hrs。TLC (石油醚/EtOAc=3/1)顯示反應完成。接著將其倒到冰水中並以EtOAc (400 mL ×2)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮而給出呈黃色油之中間產物26 (50 g, 79%)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 10.08 (bs, 1H), 7.24-7.29 (m, 2H), 6.81-6.84 (m, 1H), 6.49-6.50 (d, 1H, J=2.4Hz), 4.67 (s, 2H), 4.28-4.31 (m, 2H), 3.48-3.52 (m, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.51 (s, 9H)。中間產物 27 的合成 .
於0℃，對中間產物26 (65 g, 0.19 mol)的DMF (722 mL)溶液添加NaH (60%, 11.5 g, 0.29 mol)。混合物在N2 及0℃下攪拌1 hr。TLC (石油醚/EtOAc=3/1) 顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (500 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自50:1至10:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈黃色固體之中間產物27 (26 g, 53.2%)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 7.14-7.16 (d, 1H, J=8Hz), 7.07 (s, 1H), 6.72-6.83 (m, 1H), 6.48-6.49 (d, 1H, J=2.8Hz), 4.84 4.76 (s, 2H), 4.24-4.25 (m, 2H), 3.94 (m, 2H), 1.45-1.48 (m, 9H)。中間產物 28 的合成 .
在N2 及0℃下，對中間產物27 (27.5 g, 95.0 mmol)的二氯甲烷(900 mL)溶液添加(COCl)2 (18 g, 142 mmol)。混合物在0℃攪拌2 hr。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著在N2 及-60℃下添加NaOMe (13.4 g, 247 mmol)的MeOH (40.8 mL)溶液。混合物於室溫攪拌1 hr。添加水，以二氯甲烷(200 mL ×3)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自20:1至1:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈白色固體之中間產物28 (20 g, 56%)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 8.37 (s, 1H), 8.02-8.04 (d, 1H, J=8.4Hz), 6.84-6.91 (m, 1H), 4.80-4.90 (m, 2H), 4.44 (bs, 2H), 3.91-3.98 (m, 5H), 1.41-1.46 (m, 9H)。中間產物 29 的合成 .
於0-10℃，對中間產物28 (10 g, 26.5 mmol)與中間產物3 (4.6 g, 26.5 mmol)的DMF (120 mL)溶液添加tBuOK (7.4 g, 66.2 mmol)的THF (100 mL)溶液。混合物於0-10℃攪拌15分鐘。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自20:1至1:1之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈紅色固體之中間產物29 (7 g, 52.5%)。
1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ (ppm) 11.07 (s, 1H), 8.02-8.01 (d, 1H, J=4Hz), 8.96 (s, 1H), 7.61-7.63 (t, 1H, J=8.8Hz), 7.45 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.57-6.64 (m, 1H), 6.47-6.49 (d, 1H, J=8Hz), 5.77-5.80 (d, 1H J =8.4Hz), 4.73 4.78 (2H), 4.52 (bs, 2H), 3.96 (bs, 2H), 1.25-1.44 (m, 9H)。芯 3 的合成 .
於室溫，對中間產物29 (5 g, 9.9 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液添加HCl/二噁烷(50 mL, 7M)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。溶劑於真空濃縮。殘質以甲基第三丁基醚清洗、過濾。於真空乾燥濾餅而給出呈橘色固體之芯 3 (4 g, 91.9%)。
1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ (ppm) 11.59 (s, 1H), 10.46 (bs, 2H), 8.49 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.08-8.12 (m, 2H, J=14Hz), 7.88-7.92 (t, 1H, J=8.0Hz), 7.25-7.29 (t, 1H, J=6.8Hz), 7.04-7.07 (m, 1H), 6.22-6.25 (m, 1H), 4.76 (bs, 2H), 4.62 (bs, 2H), 3.68 (bs, 2H)。中間產物 31 的合成 .
於室溫，對中間產物30 (20 g, 94 mmol)的二噁烷(100 mL)溶液添加HCl/二噁烷(100 mL, 7M)。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (石油醚/EtOAc=3/1)顯示反應完成。將混合物倒到甲基第三丁基醚(300 mL)上、並過濾。於真空乾燥濾餅而給出呈白色固體之中間產物31 鹽酸鹽(8 g, 57%)。中間產物 32 的合成 .
於室溫，對中間產物31 鹽酸鹽(7 g, 47 mmol)的二氯甲烷(180 mL)溶液添加Et3 N (14.2 g, 141 mmol)。混合物於室溫攪拌10分鐘。接著於0 ℃～10 ℃，將三光氣(5.6 g, 19 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液添加到混合物。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH=10/1)顯示反應完成。接著混合物以NaHCO3 水溶液、水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。於真空中蒸餾粗製產物而給出呈無色油之中間產物32 (2.5 g, 30.5%)。化合物 I-5 的合成 .
於室溫，對芯 3 (5 g, 11.45 mmol)的DMF (70 mL)溶液添加Et3 N (3.5 g, 34.35 mmol)。混合物於室溫攪拌10分鐘。接著於0 ℃～10 ℃，將中間產物32 (3.6 g, 20.5 mmol)的DMF(5 mL)溶液添加到混合物。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH =15/1)顯示反應完成。將混合物倒到冰水中並以甲基第三丁基醚萃取以移除雜質，接著，以EtOAc (100 mL×5)萃取。組合之EtOAc相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮而給出呈橘色固體之粗製化合物I-5 (4.5 g，粗製)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.3 (s, 1H), 9.58 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.65 (d, 1H,J =8.8Hz ), 7.60 (d, 1H,J =6.8Hz ), 7.21 (t, 1H,J =8Hz), 6.78 (d, 1H,J =9.6Hz), 6.58 (t, 1H,J =6.8Hz), 5.62 (d, 1H,J =2Hz), 4.64 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.21-3.37 (m, 2H), 2.73-2.76 (m, 2H), 1.75-1.76 (m, 2H), 1.33-1.47 (m, 3H)。化合物 I-6 的合成 .
於低於5 ℃下，對粗製中間產物33 (4.5 g)的THF(100 mL)溶液分批添加NaBH4 (0.16 g, 4.2 mmol)。添加後，反應混合物於低於5 ℃攪拌0.5 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH =15/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自200:1至30:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈橘色固體之化合物 I-6 (3 g, 48%，對於兩步驟而言)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.24 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.64-7.66 (d, 1H, J=8.8Hz ), 7.59-7.61 (d, 1H, J=6.4Hz ), 7.18-7.22 (t, 1H J=8Hz), 6.78-6.80 (d, 1H, J=9.6Hz), 6.56-6.59 (t, 1H J=6.8Hz), 5.62-5.65 (d,d, 1H J=2Hz J=10Hz), 4.63 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 4.45-4.47 (t, 2H, J=5.2Hz), 3.85 (s, 2H), 3.40-3.43 (d, 2H J=12.4Hz), 3.23-3.26 (t, 2H, J=4.8Hz), 2.58-2.65 (t, 2H, J=12Hz), 1.55-1.58 (d, 2H J=12.8Hz), 1.47-1.48 (d, 1H J=6.4Hz), 1.05-1.13 (m, 2H)。
LC/MS M+1 543.1中間產物 35 的合成 .
於室溫，對中間產物34 鹽酸鹽(8.6 g, 55.0 mmol)的二氯甲烷(240 mL)溶液添加Et3 N (16.7g, 165.0mmol)。混合物於室溫攪拌10分鐘。接著於0 ℃～10 ℃，將三光氣(6.5g 22.0 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液添加到混合物。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH =10/1)顯示反應完成。接著混合物以NaHCO3 水溶液、水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。於真空中蒸餾粗製產物而給出呈無色油之中間產物35 (4.2 g, 42%)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 3.80-3.85 (bs, 2H), 3.71-3.75 (bs, 2H), 2.01-2.11 (m, 4H)。化合物 I-7 的合成 .
於室溫，對芯 3 (3 g, 6.8 mmol)的DMF (40 mL)溶液添加Et3 N (2.1 g, 20.6 mmol)。混合物於室溫攪拌10分鐘。接著於0 ℃～10 ℃，將中間產物35 (1.4 g 7.5 mmol)的DMF(5 mL)溶液添加到混合物。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH =10/1)顯示反應完成。將混合物倒到冰水中並以甲基第三丁基醚萃取以移除雜質，過濾。濾餅以水(100 mL × 3)清洗，以二氯甲烷(200 mL)溶解，以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮而給出呈橘色固體之化合物 I-7 (2.2 g, 58%)。
1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ (ppm) 11.24 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.91 (s, 1H), 7.62-7.66 (m, 2H), 7.19-7.23 (t, 1H,J =8Hz), 6.84-6.86 (d, 1H,J =8.0Hz), 6.58-6.61 (t, 1H,J =6.4Hz), 5.63-5.66 (d, 1H,J =8.0Hz), 4.70 (s, 2H), 4.58 (bs, 2H), 3.90 (bs, 2H), 3.15 (bs, 4H), 1.93-1.96 (m, 4H)。
LC/MS M+1 549.1中間產物 37 的合成 .
於室溫，對中間產物36 鹽酸鹽(15 g, 100 mmol)的二氯甲烷(430 mL)溶液添加Et3 N (30.6g, 300 mmol)。混合物於室溫攪拌10分鐘。接著於0 ℃～10 ℃，將三光氣(11.9 g 40 mmol)的二氯甲烷(20 mL)溶液添加到混合物。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH =10/1)顯示反應完成。接著混合物以NaHCO3 水溶液、水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。於真空中蒸餾粗製產物而給出呈無色油之中間產物37 (9.2 g, 52%)。
1 H NMR (CDCl3, 400 MHz): δ (ppm) 4.40 (s, 2H), 3.90-3.94 (d, 2H, J=13.2Hz), 3.41-3.44 (d, 1H,J =13.2Hz), 3.23-3.36 (d, 1H,J =12.8Hz), 1.90-2.04 (m, 2H), 1.80-1.86 (m, 2H)。化合物 I-8 的合成 .
於室溫，對芯 3 (3 g, 6.8 mmol)的DMF (40 mL)溶液添加Et3 N (2.1 g, 20.6 mmol)。混合物於室溫攪拌10分鐘。接著於0 ℃～10 ℃，將中間產物37 (1.3g 7.5 mmol)的DMF(5 mL)溶液添加到混合物。混合物於室溫攪拌2 hrs。TLC (二氯甲烷/MeOH =10/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自200:1至50:1之二氯甲烷/MeOH溶析)純化殘質而給出呈橘色固體之化合物 I-8 (2.3 g, 62%)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.24 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.60-7.66 (m, 2H), 7.20-7.24 (t, 1H,J =7.6Hz), 6.80-6.82 (d, 1H, J =9.2Hz), 6.57-6.59 (t, 1HJ =6.8Hz), 5.64-5.67 (d, 1HJ =10Hz), 4.60 (s, 2H), 4.54 (bs, 2H), 4.19 (s, 2H), 3.84 (bs, 2H), 3.20-3.24 (d, 2HJ =12.8Hz), 3.01-3.04 (d, 2H,J =12Hz), 1.74 (s, 4H)。
LC/MS M+1 541.1中間產物 39 的合成 .
對中間產物38 (20 g, 113 mmol)的MeOH (100 mL)溶液添加HCl/MeOH (4 M, 100 mL)，接著於室溫攪拌過夜。混合物於真空濃縮。對殘質添加水(500 mL)，接著以EtOAc (200 mL ×4)萃取。合併的有機相以鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮而給出呈棕色固體之粗製中間產物39 (21 g)，其在未純化下直接用於下一步驟。中間產物 40 的合成 .
對中間產物39 (21 g)的MeOH (100 mL)溶液添加NH3 /MeOH (6 M, 100 mL)。反應混合物於室溫攪拌過夜。將混合物倒到EtOAc (500 mL)中，且接著過濾。於真空乾燥濾餅而給出呈淺白色固體之中間產物40 (8 g, 40%，對兩步驟而言)。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 7.86 (d, J=8.0Hz, 1H), 7.80 (s br, 1H), 7.72 (d, J=8.4Hz, 1H), 7.62-7.66 (m, 1H), 7.37-7.41 (m, 1H), 7.22 (s br, 1H), 3.88 (s, 2H)。中間產物 41 的合成 .
於0-10℃，對中間產物28 (10 g, 26.5 mmol)與中間產物40 (4.6 g, 26.5 mmol)的DMF (120 mL)溶液添加tBuOK (7.4 g, 66.2 mmol)的THF (100 mL)溶液。混合物於0-10℃攪拌15分鐘。TLC (石油醚/EtOAc=1/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。藉由快速管柱層析(以自10:5至1:2之石油醚/EtOAc溶析)純化殘質而給出呈紅色固體之中間產物41 (5 g, 37.5%)。
1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ (ppm) 11.07 (s, 1H), 8.02-8.01 (d, 1H, J=4Hz), 8.96 (s, 1H), 7.61-7.63 (t, 1H, J=8.8Hz), 7.45(s, 1H), 7.17 (s, 1H), 6.57-6.64 (m, 1H), 6.47-6.49 (d, 1H, J=8Hz), 5.77-5.80 (d, 1H, J=8.4Hz), 4.73-4.78 (d, 2H), 4.52 (bs, 2H), 3.96 (bs, 2H), 1.25-1.44 (m, 9H)。中間產物 42 的合成 .
於室溫，對中間產物41 (5 g, 9.9 mmol)的二氯甲烷(50 mL)溶液添加HCl/二噁烷(50 mL, 7M)。混合物於室溫攪拌1 hr。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。溶劑於真空濃縮而給出呈橘色固體之中間產物42 (4 g, 92%)。
1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ (ppm) 11.59 (s, 1H), 10.46 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.08-8.12 (m, 2H, J=14Hz), 7.88-7.92 (t, 1H, J=8.4Hz), 7.25-7.29 (t, 1H, J=13.6Hz), 7.04-7.07 (t, 1H, J=10 Hz), 6.22-6.25 (m, 1H), 4.76 (s, 2H), 4.62 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.68 (s, 2H)。化合物 I-9 的合成 .
於室溫，對中間產物42 (2 g, 4.9 mmol)及1-哌啶羰基氯(1.1 g, 7.4 mmol)的DMF (20 mL)溶液添加Et3 N (1.5 g, 14.9 mmol)。混合物於室溫攪拌30分鐘。TLC (二氯甲烷/MeOH=15/1)顯示反應完成。接著將混合物倒到冰水中並以EtOAc (100 mL ×4)萃取。合併的有機相以水、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥並於真空濃縮。殘質以甲基第三丁基醚清洗、過濾。於真空乾燥濾餅而給出呈橘色固體之化合物 I-9 (1.1 g, 43.1%)。
1 H NMR (DMSO-d 6, 400 MHz): δ (ppm) 11.48 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.83-7.86 (d, 1H, J=8.8 Hz), 7.68-7.76 (m, 1H), 7.35-7.39 (t, 1H, J=7.6 Hz), 6.89-6.92 (m, 1H), 6.04-6.07 (m, 1H), 4.66 (s, 2H), 4.57-4.65 (bs, 2H), 3.83-3.90 (m, 2H), 3.01-3.05 (m, 4H), 1.46-1.49 (m, 6H)。
LC/MS M+514.1
化合物 I-12 的合成.
化合物 I-12 可用與化合物 I-7 所用相同之方式使用3,3-二氟哌啶作為起始材料合成。
1 H NMR (DMSO-d 6 , 400 MHz): δ (ppm) 11.25 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.93 (s, 1H), 7.58-7.66 (m, 2H), 7.18-7.23 (t, 1H, J=8Hz), 6.81-6.79 (d, 1H, J=8.0Hz), 6.58-6.61 (t, 1H, J=6.4Hz), 5.65-5.67 (d, 1H, J=8.0Hz), 4.66 (s, 2H), 4.56 (bs, 2H), 3.88 (bs, 2H), 3.31-3.64 (bs, 2H), 3.07 (bs, 2H), 1.96-2.01 (bs, 2H), 1.69 (bs, 2H)。
LC/MS M+1 549.1
化合物 I-13 的合成.
化合物 I-13 如合成方案9所示。
中間產物44 的合成為與中間產物47 所用相似之方式，產率43.1 %。
1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ1.47 (9H, s), 1.91-1.94 (2H, m), 3.37-3.56 (4H, m), 4.40-4.70 (1H, m), 4.71-4.74 (1H, m)
中間產物45 的合成：
中間產物45 的合成為與中間產物48 所用相似之方式，粗製。
化合物 I-13 的合成：
化合物 I-13 的合成為與化合物 I-19 所用相似之方式，產率20.7 %，對兩步驟而言。
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ1.45-1.48 (1H, d, J = 9.2 Hz), 1.54-1.56 (1H, d, J = 9.2 Hz), 2.71-2.73 (1H, d, J = 9.2 Hz), 2.88-2.90 (1H, d, J = 8.4 Hz), 2.97-2.99 (1H, d, J = 9.6 Hz), 3.35-3.37 (1H, d, J = 8.0 Hz), 3.49 (1H, s), 3.75-3.76 (1H, m), 3.90-3.92 (1H, m), 4.04 (1H, s), 4.46-4.50 (1H, m), 4.58-4.74 (3H, m), 5.60-5.62 (1H, d, J = 8.4 Hz), 6.60-6.63 (1H, m), 6.78-6.80 (1H, d, J = 9.6 Hz), 7.20-7.24 (1H, m), 7.63-7.66 (2H, m), 7.90 (1H, s), 8.06 (1H, s)。
LCMS純度為＞ 95%，Rt = 2.55分鐘；MS計算：525.5；MS實測：526.2 [M+1]+。
化合物 I-14 的合成：
化合物 I-14 可用與化合物 I-8 所用相似之方式合成。
LC/MS M+1 548.2
化合物I-15的合成.
化合物 I-15 可用與化合物 I-7 所用相似之方式合成。
LC/MS M+1 556.2
化合物 I-16 的合成.
化合物 I-16 可用與化合物 I-7 所用相似之方式合成。
LC/MS M+1 556.2
化合物 I-17 的合成.
化合物 I-17 可用與化合物 I-7 所用相似之方式合成。
LC/MS M+1 599.2
化合物 I-18 的合成.
化合物 I-18 可用與化合物 I-8 所用相似之方式合成。
LC/MS M+1 591.2
化合物 I-19 的合成.
對中間產物46 (1.0 g, 4.67 mmol)的DCM (25 mL)溶液添加Et3 N (1.41 g, 14.0 mmol)。攪拌懸浮液並於0～10 ℃以三光氣(0.55 g, 1.87 mmol)的DCM (5 mL)溶液滴加處理之。添加完成後，於室溫攪拌懸浮液2 hrs。將反應混合物倒到冰水(20 mL)中，以DCM萃取，且有機層以NaHCO3 (aq)、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥、過濾並於真空濃縮。藉由矽膠管柱層析純化殘質而給出呈無色油之中間產物47 (0.6 g, 46.5 %)。
1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ 1.20-1.27 (2H, m), 1.41 (9H, s), 1.72-1.79 (3H, m), 2.84-2.90 (1H, m), 3.03-3.09 (3H, m), 4.32-4.35 (2H, m), 4.66 (1H, br s)。
化合物 I-19 的合成：
對芯 3 (1.0 g, 2.29 mmol)的DMF (13 mL)溶液添加Et3 N (0.70 g, 6.87 mmol)。攪拌懸浮液並於0～10 ℃以中間產物47 (0.70 g, 2.52 mmol)的DMF (2 mL)溶液滴加處理之。添加完成後，於室溫攪拌懸浮液2 hrs。將反應混合物倒到冰水(60 mL)中、過濾並於真空濃縮而給出呈紅色固體之中間產物48 (1.0 g，粗製)。
化合物 I-19 的合成
於室溫，對中間產物48 (1.0 g，粗製)的DCM (30 mL)溶液添加HCl/二噁烷(10 mL，8 mol/L)，且混合物於室溫攪拌2 hrs。過濾反應混合物，且濾餅溶解在水中，以Na2 CO3 (aq)調整pH=8～9，並再次過濾，以水清洗並於真空濃縮而給出呈紅色固體之化合物 I-19 (130 mg, 10.5 %，兩步驟)。
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ1.03-1.11 (2H, m), 1.13-1.62 (3H, m), 2.44-2.82 (4H, m), 3.41-3.44 (2H, m), 3.85 (2H, m), 4.54 (2H, m), 4.64 (2H, m), 5.64-5.66 (1H, d,J = 9.6 Hz), 6.56-6.58 (1H, m), 6.78-6.81 (1H, m), 7.19-7.23 (1H, m), 7.60-7.66 (2H, m), 7.92 (1H, s), 8.06 (1H, s)。
LCMS的純度是＞ 95%，Rt = 2.77分鐘；MS計算：541.6；MS實測：542.2([M+1]+
化合物 I-20 的合成.
對中間產物49 (15 g, 130.2 mmol)的DCM (1.5 L)溶液添加Et3 N (19.8 g, 195.3 mmol)及DMAP (0.8 g, 6.5 mmol)。攪拌懸浮液並於0～10 ℃以第三丁基氯基二苯基矽烷(53.7 g, 195.3 mmol)滴加處理之。添加完成後，於室溫攪拌懸浮液5 hrs。將反應混合物倒到冰水(500 mL)中，以DCM (300 mL×2)萃取，且有機層以鹽水(300 mL×2)清洗，以Na2 SO4 乾燥，過濾並於真空濃縮而給出呈黃色油之中間產物 50 (30 g，粗製)。
中間產物51 的合成：
對中間產物50 (30 g，粗製，84.8 mmol)的DCM (900 mL)溶液添加Et3 N (25.8 g, 254.5 mmol)。攪拌懸浮液並於0～10 ℃以三光氣(10.1 g, 33.9 mmol)的DCM (50 mL)溶液滴加處理之。添加完成後，於室溫攪拌懸浮液2 hrs。將反應混合物倒到冰水(300 mL)中，以DCM萃取，且有機層以NaHCO3 (aq)、鹽水清洗，以Na2 SO4 乾燥、過濾並於真空濃縮。藉由矽膠管柱層析純化殘質而給出呈無色油之中間產物51 (3.1 g, 8.8 %)。
1 H NMR (400 MHz, CDCl3 ) δ1.05 (9H, s), 1.22-1.29 (2H, m), 1.78-1.83 (3H, m), 2.84-2.90 (1H, m), 3.01-3.07 (1H, m), 3.50-3.51 (2H, d,J = 5.6 Hz), 4.30-4.34 (2H, m), 7.36-7.45 (6H, m), 7.62-7.64 (4H, m)
中間產物52 的合成：
對馬來醯亞胺 芯 (1.6 g, 3.28 mmol)的DMF (15 mL)溶液添加Et3 N (1.0 g, 9.84 mmol)。攪拌懸浮液並於0～10 ℃以中間產物51 (1.5 g, 3.60 mmol)的DMF (5 mL)溶液滴加處理之。添加完成後，於室溫攪拌懸浮液2 hrs。將反應混合物倒到冰水(80 mL)中，過濾且濾餅以水及MTBE清洗，於真空濃縮而給出呈紅色固體之中間產物52 (0.98 g，粗製)。
化合物 I-20 的合成：
於室溫，對中間產物52 (0.98 g，粗製)的THF (20 mL)溶液添加TBAF (0.56 g, 1.77 mmol)的THF (10 mL)溶液，且混合物於室溫攪拌2 hr。反應混合物倒到冰水(40 mL)中，過濾，且濾餅於真空濃縮，藉由矽膠管柱層析純化而給出呈橘色固體之化合物 I-20 (160 mg, 22.8 %)。
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ1.05-1.13 (2H, m), 1.48-1.58 (3H, m), 2.54-2.67 (2H, m), 3.23-3.26 (2H, m), 3.40-3.44 (2H, m), 3.87-3.90 (2H, m) 4.44-4.47 (1H, m) 4.62-4.69 (2H, m), 4.72 (2H, s), 6.31 (1H, s), 6.53-6.56 (1H, m), 7.14-7.20 (2H, m), 7.60-7.64 (2H, m), 7.92 (1H, s), 8.16 (1H, s), 11.29 (1H, s)。
LCMS的純度是＞ 95%，Rt = 2.87分鐘；MS計算：592.6；MS實測：593.2([M+1]+ 。
化合物 I-21 的合成.
中間產物53 的合成為與中間產物52 相似之方式，粗製。
化合物 I-21 的合成：
化合物 I-21 的合成為與化合物 I-20 所用相同之方式，產率28.6 %。
1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6 ) δ1.08-1.13 (2H, m), 1.47-1.56 (1H, m), 1.56-1.59 (2H, m), 2.58-2.65 (2H,m), 3.23-3.26 (2H, m), 3.40-3.43 (2H, m), 3.86 (2H, s), 4.45-4.61 (1H, m), 4.61(2H, s), 4.68 (2H, s), 6.44 (1H, s), 6.53-6.57 (1H, m), 7.19-7.24 (1H, m), 7.28 (1H, s), 7.54-7.56 (1H, d,J = 6.8 Hz), 7.67-7.69 (2H, d,J = 9.2 Hz), 7.98 (1H,s), 8.08 (1H, s), 11.32 (1H, s)。
LCMS純度為＞ 95%，Rt = 3.41分鐘；MS計算：549.6；MS實測：550.2 [M+1]+ 。
化合物 I-22 、 23 、 24 、 25 、 27 的合成可用與化合物 I-7 所用相似之方式合成。
化合物 I-26 的合成.
化合物 I-26 可如合成方案11所示般合成。
化合物 I-28 的合成.
化合物 I-28 可如合成方案12所示般合成。
化合物 I-29 、 30 的合成可藉由使用適當的氘化起始材料，而以與未氘化材料所用相似之方式合成。投予
於某些具體實施例中，使醫藥製劑適於將藥物局部投予到發生掉髮的皮膚區域。可以使用液體，凝膠或泡沫製劑。也可以局部施加活性成分或採用遞送方法的組合。
注射方法包括藉由滲透泵，或者藉由與植入的生物材料組合，且更佳藉由注射或輸注(infusion)。可以幫助控制釋放動力學及藥物分佈的生物材料包括水凝膠材料，可降解材料。最佳的一類所用材料包括原位凝膠化材料。其他材料包括膠原蛋白或其他天然材料，包括纖維蛋白，明膠及脫細胞組織(decelluarized tissues)。明膠海綿(gelfoam)也可能為合適。
遞送也可以經由替代手段增強，所述手段包括但不限於添加到所遞送的組成物中的試劑，諸如滲透促進劑，或者可以通過經由超聲波，電穿孔或高速噴射之裝置。
關於人及獸醫治療，所投予具體試劑(等)的量可取決於各種因子，包括所治療的疾患及疾患的嚴重程度；所用具體試劑(等)的活性；患者的年齡，體重，一般健康狀況，性別及飲食；投予時間，投予路徑及所用具體試劑(等)的排泄速率；治療持續時間；與具體試劑(等)組合使用或同時使用的藥物；處方醫生或獸醫的判斷；以及醫學及獸醫領域已知的類似因子。
本文中所述的試劑可以以治療有效量投予需要治療的個體。投予本文中所述的化合物可以是經由任何合適的投予路徑，特別是皮內，口服或局部投予。其他路徑包括攝入、或胃腸外，例如靜脈內、動脈內、腹膜內、鞘內、心室內、尿道內、腦池內、顱內、肌肉內、鼻內、皮下、舌下、經皮或藉由吸入或吹入，或局部以通過皮膚吸收。此投予可以採單次或多次口服劑量、限定數量的滴耳劑、或團注(bolus injection)、多次注射，或採短期或長期輸注。可植入裝置(如，可植入輸注泵)也可以用於隨著時間的等效或變化劑量的特定製劑的周期性腸胃外遞送。對於這種腸胃外投予，化合物較佳製劑成無菌之水中或其他合適的溶劑或溶劑混合物中的溶液。溶液可含有其他物質，諸如鹽，糖(特別是葡萄糖或甘露糖醇)，以使溶液與血液等滲，緩衝劑諸如乙酸、檸檬酸及/或磷酸及彼等的鈉鹽，及防腐劑。
本文中所述的化合物及組成物可以藉由多種足以將化合物遞送至有掉髮的皮膚區域的方法投予。
如本文中針對投予本揭露之組成物所用之“接觸”，是指，於一些具體實施例中，使皮膚(於一個具體實施例中，頭皮、眉毛等)與一或多種化合物、因子、細胞等接觸。於另一種具體實施例中，該用語是指使一或多種化合物、因子、細胞等嵌入到感興趣的皮膚區域中。於另一種具體實施例中，該用語是指使一或多種化合物、因子、細胞等注射到感興趣的皮膚區域中。於另一種具體實施例中，該用語是指任何其他種技術領域中已知的接觸。使一或多種化合物、因子、細胞等注射到感興趣的皮膚區域中。每種可能代表本揭露的個別實施例。
於另一種具體實施例中，在投予本揭露一種或多種化合物的方法中的接觸步驟包含使感興趣的皮膚區域與化合物、RNA、蛋白等直接接觸。於另一種具體實施例中，該接觸步驟包含經由接觸個體的另一個位置或組織而間接接觸感興趣的皮膚區域，之後化合物、RNA、蛋白等藉由生物學程序(如，主動運輸、或在諸如血液、淋巴液、間質液等液體中循環)被運輸到感興趣的皮膚區域。每種可能代表本揭露的個別實施例。
於特別的具體實施例中，本揭露的化合物、組成物及製劑是局部投予的，意味著它們不是全身投予。
於一些具體實施例中，本文中所提供的組成物投予到有此需要的個體一次。於一些具體實施例中，本文中所提供的組成物投予到有此需要的個體不止一次。於一些具體實施例中，第一次投予本文中所提供的組成物，接著第二次、第三次、第四次、或第五次投予本文中所提供的組成物。
化合物投予到有此需要的個體的次數取決於醫學專業人員的判斷力、疾患(disorder)、疾患的嚴重程度以及個體對製劑的回應。於一些具體實施例中，文中所揭示的化合物投予患有輕度急性病症(condition)之有此需要的個體一次。於一些具體實施例中，本文中所揭示的化合物投予患有中度或嚴重急性病症之有此需要的個體不止一次。在其中個體的病症沒有改善的情況下，根據醫生的判斷，化合物可以慢性投予，即長時間投予，包括在個體的整個壽命持續期間，以減輕(ameliorate)或以其他方式控制或限制個體疾病或病症的症狀。
在其中個體的狀態確實改善的情況下，根據醫生的判斷，化合物可以繼續投予；替代地，可以暫時減少或暫時停用所投予藥物的劑量某時間長度(亦即“藥物假期”)。藥物假期的長度在2天與1年之間變化，包括(僅作為例示用)2天、3天、4天、5天、6天、7天、10天、12天、15天、20天、28天、35天、50天、70天、100天、120天、150天、180天、200天、250天、280天、300天、320天、350天及365天。在藥物假期期間減少的劑量可以從10%至100%，包括(僅作為例示用)10%、15%、20%、25%、30%、35%、40%、45%、50%、55 %、60%、65%、70%、75%、80%、85%、90%、95%和100%。
一旦個體的毛髮密度或毛髮生長得到改善，如果需要，可以投予維持劑量。視需要地，隨後作為症狀的函數，將投予的劑量或頻率或兩者降低成保持改善疾病、疾患或病症的水平。於某些具體實施例中，一旦症狀復發，個體需要長期間歇性治療。
於某些具體實施例中，醫藥製劑也可含有選自Notch活化劑、HDAC抑制劑、BMP4 拮抗劑、Noggin (抑制BMP4)、Sox2、維生素D (骨化三醇)、維生素B (菸鹼醯胺)、維生素A、維生素C (pVc).Lgr4、p38/MAPK抑制、ROCK抑制、及/或Alk4/7抑制的額外試劑。於某些具體實施例中，醫藥製劑也可含有表皮生長因子(EGF)、纖維母細胞生長因子(FGF)、胰島素樣生長因子(IGF)、或其組合。醫藥組成物
本揭露提供了包含本發明化合物的醫藥製劑。本發明化合物可以方便地用生物學上可接受的介質諸如水、緩衝鹽水、多元醇(例如，甘油、丙二醇、液體聚乙二醇等)或其合適的混合物製劑以供投予。根據藥用化學家熟知的程序，可以憑經驗確定所選介質中活性成分(等)的最佳濃度。如本文中所使用者，"生物學上可接受的介質"包括可適合醫藥製劑的所欲投予路徑的任何及所有溶劑、分散介質等。此種用於醫藥活性物質之介質在本領域中是已知的。除了與本發明化合物活性不相容的任何常規介質或試劑之外，其在本發明的醫藥製劑中的用途也被考慮。例如，在Remington's Pharmaceutical Sciences一書(Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Company, Easton, Pa., USA 1985)中描述了合適的媒劑及彼等之包括其他蛋白的製劑。這些媒劑包括可注射"存放製劑(deposit formulations)"。
本發明的醫藥製劑也可以包括獸醫組成物，如適用於獸醫用途的本發明化合物的醫藥製劑，如用於治療家畜，諸如山羊、馬、綿羊等，或家養動物，諸如，狗、貓、兔子等，或其他動物，諸如猿猴、猴子及黑猩猩。
可以將本發明化合物製劑成以任何方便的方式投予以用於人或獸醫藥學。於某些具體實施例中，包括在醫藥製劑中的化合物可為本身是活性的，或者可以是前藥，例如能夠在生理環境中轉化成活性化合物。
本揭露提供了醫藥上可接受之組成物，其包含與一種或多種醫藥上可接受之載劑(添加劑) 及/或稀釋劑一起製劑的治療有效量的一種或多種上述化合物。如下文中所描述詳細者，本發明的醫藥組成物可以特別製劑成以固體或液體形式投予，包括適用於以下的那些：(1)口服投予，例如，投予到舌頭的灌注劑(drenches)(水溶液或非水溶液或懸浮液)、片劑、團劑(bolus)、粉劑、顆粒劑、糊劑；(2)胃腸外投予，例如呈例如無菌溶液或懸浮液而藉由皮下、肌內或靜脈內注射；(3)局部施加，例如呈施加到皮膚的霜劑、軟膏劑或噴霧劑；或(4)陰道內或直腸內，例如呈陰道栓劑、霜劑或泡沫劑。然而，於某些具體實施例中，本發明的化合物可以簡單地溶解或懸浮在無菌水中。於某些具體實施例中，該醫藥製劑是無熱原性的，亦即不會提高患者的體溫。如本文所用的短語"治療有效量"是指化合物、材料或包含本發明化合物的組成物的量，係以適用於任何醫學治療的合理的利益/風險比率，有效地在至少動物中的細胞的亞族群中產生某些所欲的治療作用，從而阻止經處理細胞中該途徑的生物學後果。
於本文中，短語"醫藥上可接受"係用來指在合理的醫學判斷範圍內適用於與人類及動物的組織接觸，沒有過度的毒性、刺激性、過敏反應、或其他問題或併發症，而與合理的利益/風險比相稱的那些化合物、材料、組成物、及/或劑型。
如本文中所用的短語"醫藥上可接受之載劑"是指有用於製備本發明化合物的醫學或治療學上有用之組成物的醫藥上可接受之材料、組成物或媒劑，諸如液體或固體填料、稀釋劑、賦形劑、溶劑或封裝材料。各載劑在與製劑的其他成分相容且對病人無害的意義上必須是"可接受的"。可作為醫藥上可接受之載劑的材料的一些實例包括：(1)糖，諸如乳糖，葡萄糖及蔗糖；(2)澱粉，諸如玉米澱粉及馬鈴薯澱粉；(3)纖維素及其衍生物，諸如羧甲基鈉纖維素，乙基纖維素及乙酸纖維素；(4)黃蓍膠粉；(5)麥芽；(6)明膠；(7)滑石粉；(8)賦形劑，諸如可可脂及栓劑蠟；(9)油，諸如花生油，棉籽油，紅花油，芝麻油，橄欖油，玉米油及大豆油；(10)二醇，諸如丙二醇；(11)多元醇，諸如甘油，山梨糖醇，甘露醇及聚乙二醇；(12)酯，諸如油酸乙酯及月桂酸乙酯；(13)瓊脂；(14)緩衝劑，諸如氫氧化鎂及氫氧化鋁；(15)藻酸；(16)無熱原水；(17)等滲鹽水；(18)林格氏液；(19)乙醇；(20)磷酸鹽緩衝溶液；及(21)其他於醫藥製劑中使用的無毒相容物質。
如上所述，本發明化合物的某些具體實施例可含有鹼性官能團，諸如胺基或烷基胺基，因此能夠與醫藥上可接受之酸形成醫藥上可接受之鹽。在這方面，用語"醫藥上可接受之鹽"是指本發明化合物相對無毒的無機及有機酸加成鹽。這些鹽可以在本發明化合物的最終單離和純化期間原位製備，或者分開地藉由將游離鹼形式的本發明經純化化合物與合適的有機或無機酸反應，並單離如是形成的鹽所製備。代表性的鹽包括氫溴酸鹽、氫氯酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、戊酸鹽、油酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、萘酸鹽(naphthylate)、甲磺酸鹽(mesylate)、葡萄庚酸鹽、乳糖醛酸鹽(lactobionate)及月桂基磺酸鹽等。(參見，例如Berge et al.(1977) "Pharmaceutical Salts", J.Pharm.Sci.66:1-19)
本發明化合物的醫藥上可接受之鹽包括該化合物的常規無毒鹽或季銨鹽，如來自無毒有機或無機酸者。例如，此等常規的無毒鹽包括衍生自無機酸(諸如氫氯酸、氫溴酸、硫酸、胺基磺酸、磷酸、硝酸等)的那些；及從有機酸(諸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、棕櫚酸、馬來酸、羥基馬來酸、苯乙酸、麩胺酸、苯甲酸、水楊酸、對胺基苯磺酸、2-乙醯氧基苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、2-羥乙磺酸(isothionic)等)製備的鹽。
在其他情況下，本揭露化合物可含有一或多個酸性官能團，因此能夠與醫藥上可接受之鹼形成醫藥上可接受之鹽。在這些情況下，用語"醫藥上可接受之鹽"是指本發明化合物相對無毒的無機及有機鹼加成鹽。這些鹽同樣可以在化合物的最終單離及純化期間原位製備，或者分開地藉由將游離酸形式的經純化化合物與合適的鹼(諸如醫藥上可接受之金屬陽離子的氫氧化物、碳酸鹽或碳酸氫鹽)、與氨、或與醫藥上可接受之有機一級、二級或三級胺反應製備。代表性的鹼金族或鹼土族鹽包括鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鎂鹽及鋁鹽等。可用於形成鹼加成鹽的代表性有機胺包括乙胺、二乙胺、乙二胺、乙醇胺、二乙醇胺、哌嗪等。(參見例如Berge et al.,同上)
濕潤劑、乳化劑及潤滑劑，諸如十二烷基硫酸鈉及硬脂酸鎂，以及著色劑、脫模劑、包衣劑、甜味、調味及芳香劑、防腐劑及抗氧化劑也可以存在於組成物中。醫藥上可接受之抗氧化劑的實例包括：(1)水溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸、半胱胺酸鹽酸鹽、硫酸氫鈉、偏亞硫酸鈉、亞硫酸鈉等；(2)油溶性抗氧化劑，諸如抗壞血酸棕櫚酸酯、丁基羥基甲氧苯(BHA)、二丁基羥基甲苯(BHT)、卵磷脂、沒食子酸丙酯、α-生育酚等；及(3)金屬螯合劑，諸如檸檬酸、乙二胺四乙酸(EDTA)、山梨糖醇、酒石酸、磷酸等。
本揭露製劑包括適用於口服、鼻腔、局部(包括口腔及舌下)、直腸、陰道及/或腸胃外投予的那些。製劑可以方便地以單位劑型存在，且可以藉由醫藥學領域眾所周知的任何方法製備。可以與載劑材料組合以產生單一劑型的活性成分的量將取決待治療的宿主、特定的投予模式而變化。可以與載劑材料組合以產生單一劑型的活性成分的量通常是產生治療效果的化合物的量。通常，以百分比計，此數量範圍為約1%至約99%的活性成分，較佳約5%至約70%，最佳約10%至約30%。
製備這些製劑或組成物的方法包括使本揭露的化合物與載劑以及視需要之一種或多種輔助成分結合的步驟。一般而言，藉由將本揭露的化合物與液體載劑或精細分散的固體載劑或兩者均勻且緊密地結合，接著如果需要使產物成形來製備製劑。
適用於口服投予之本揭露的製劑可以是膠囊劑、扁囊劑、丸劑、片劑、錠劑(使用調味基質，通常為蔗糖及阿拉伯膠或黃蓍膠)、粉劑、顆粒劑形式，或呈在水性或非水性液體中的溶液或懸浮液形式，或呈水包油或油包水液體乳液形式，或呈酏劑或糖漿形式，或呈軟錠劑(使用惰性基質，如明膠及甘油、或蔗糖及阿拉伯膠)形式及/或呈漱口水等形式，各自含有預定量的本發明的化合物作為活性成分。本揭露的化合物也可呈團劑、沖泡劑(electuary)或糊劑投予。
在用於口服投予之本揭露的固體劑型(膠囊劑、片劑、丸劑、糖錠劑、粉劑、顆粒劑等)中，活性成分可與一種或多種醫藥上可接受之載劑混合，諸如檸檬酸鈉或磷酸二鈣，及/或任何以下物質：(1)填料或填充劑，例如澱粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露糖醇及/或矽酸；(2)黏合劑，例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及/或阿拉伯膠；(3)保濕劑，例如甘油；(4)崩解劑，諸如瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸、某些矽酸鹽及碳酸鈉；(5)溶液阻滯劑，諸如石蠟；(6)吸收促進劑，諸如季銨化合物；(7)濕潤劑，諸如鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯；(8)吸收劑，諸如高嶺土和膨潤土；(9)潤滑劑，諸如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉及其混合物；及(10)著色劑。在膠囊劑、片劑及丸劑的情況下，醫藥組成物也可以包含緩衝劑。類似類型的固體組成物也可作為軟及硬的經填充明膠膠囊(使用諸如乳糖或牛乳的糖的賦形劑以及高分子量聚乙二醇等)中的填料。
片劑可以藉由壓製或模製來製作，視需要地使用一種或多種輔助成分。可以使用黏合劑(例如明膠或羥丙基甲基纖維素)、潤滑劑、惰性稀釋劑、防腐劑、崩解劑(例如澱粉羥乙酸鈉或交聯羧甲基纖維素鈉)、表面活性劑或分散劑來製備壓製片劑。模製片劑可以藉由在合適的機器中模製用惰性液體稀釋劑濕潤的粉狀化合物的混合物來製作。片劑、及本發明醫藥組成物的其它固體劑型，諸如糖錠劑、膠囊劑、丸劑及顆粒劑，可以視需要地刻痕或用包衣及外殼製備，諸如腸溶包衣和醫藥製劑中公知的其它包衣技術。也可以將它們製劑，以便提供其中活性成分的緩慢或控制釋放，例如使用不同比例的羥丙基甲基纖維素以提供所欲的釋放曲線、其它聚合物基質、脂質體及/或微球體。它們可以藉由例如通過保留細菌的過濾器過濾、或藉由以無菌固體組成物的形式在使用前方併入可溶於無菌水中、或一些其它無菌可注射介質中的滅菌劑來滅菌。這些組成物也可視需要地含有不透明劑並且可以具有下列組成：其僅僅釋放活性成分、或較佳地，在胃腸道的某個部分釋放活性成分，視需要地以延遲方式釋放。可使用的嵌入組成物的實例包括聚合物質及蠟。活性成分還可以採微膠囊化形式，如果合適的話，與一種或多種上述賦形劑一起。
用於本發明化合物之口服投予的液體劑型包括醫藥上可接受之乳劑、微乳劑、溶液、懸浮劑、糖漿及酏劑。除了含有活性成分之外，液體劑型還可以含有本領域常用的惰性稀釋劑諸如水或其它溶劑，增溶劑及乳化劑，諸如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫呋喃醇、聚乙二醇及脫水山梨糖醇脂肪酸酯，以及它們的混合物。
除惰性稀釋劑外，口服組成物也可包含佐劑，諸如濕潤劑、乳化及懸浮劑、甜味、調味、著色、芳香及防腐劑。
除了含有活性化合物之外，懸浮液可以含有懸浮劑，例如乙氧基化異硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇及脫水山梨糖醇酯、微晶纖維素、偏氫氧化鋁(aluminum metahydroxide)、膨潤土、瓊脂及黃蓍膠及其混合物。
用於直腸或陰道投予的本揭露醫藥組成物的製劑可以呈栓劑形式存在，其可以藉由將一種或多種本發明化合物與包含例如可可脂、聚乙二醇、栓劑蠟或水楊酸鹽之一種或多種合適的非刺激性且其在室溫下是固體但在體溫下是液體並因此將在直腸或陰道腔中融化並釋放本發明活性化合物之賦形劑或載劑混合來製備。
有用於陰道投予的本揭露製劑也包括含有本領域已知適合的載劑的陰道栓劑、棉條、霜劑、凝膠、糊劑、泡沫或噴霧劑製劑。
用於本發明化合物局部或透皮投予的劑型包括粉劑、噴霧劑、軟膏劑、糊劑、霜劑、洗劑、凝膠、溶液、貼劑及吸入劑。活性化合物可以在無菌條件下與醫藥上可接受之載劑，以及予可能需要的任何防腐劑、緩衝劑或推進劑混合。
除了含有本發明的活性化合物以外，軟膏劑、糊劑、霜劑及凝膠還可以含有賦形劑，諸如動物及植物脂肪、油、蠟、石蠟、澱粉、黃蓍膠、纖維素衍生物、聚乙二醇、聚矽烷、膨潤土、矽酸、滑石及氧化鋅、或其混合物。除了含有本發明的化合物之外，粉劑及噴霧劑還可含有賦形劑，諸如乳糖、滑石、矽酸、氫氧化鋁、矽酸鈣及聚醯胺粉劑或這些物質的混合物。噴霧劑可額外含有慣用推進劑，諸如氯氟烴及揮發性未經取代之烴，諸如丁烷及丙烷。
透皮貼劑具有提供將本發明的化合物向身體受控遞送的附加優點。此等劑型可以藉由將本發明化合物溶解或分散在合適的介質中來製作。吸收促進劑也可用於增加本發明化合物穿過皮膚的通量。此種通量的速率可以藉由提供速率控制膜或將化合物分散在聚合物基質或凝膠中來控制。
可用於本揭露醫藥組成物的合適的水性及非水性載劑的實例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、及其合適的混合物、植物，諸如橄欖油、及可注射的有機酯，諸如油酸乙酯。例如，藉由使用包衣材料諸如卵磷脂、在分散體的情況下藉由維持所需的粒徑、及藉由使用表面活性劑，可以保持適當的流動性。這些組成物也可含有佐劑諸如防腐劑、濕潤劑、乳化劑及分散劑。藉由含括各種抗細菌劑及抗真菌劑，例如對羥基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚山梨酸等可以確保防止微生物的作用。將等滲劑，諸如糖、氯化鈉等含括到組成物中也可能是所欲的。另外，可藉由含括延遲吸收的試劑例如單硬脂酸鋁及明膠來給出可注射醫藥形式的延長吸收。
在一些情況下，為了延長藥物的作用，所欲為減緩從皮下或肌內注射之藥物的吸收。這可以藉由使用具有差的水溶性的結晶或無定形材料的液體懸浮液來完成。則藥物的吸收速率將取決於其溶解速率，而溶解速率又取決於晶體大小及晶型。替代地，腸胃外投予藥物型式的延遲吸收是藉由將藥物溶解或懸浮於油性媒劑中來完成。
可藉由在可生物降解的聚合物諸如聚丙交酯-聚乙交酯(polylactide-polyglycolide)中形成本發明化合物的微膠囊化基質來製作可注射貯庫形式。取決於藥物與聚合物的比例以及所用特定聚合物的性質，可以控製藥物釋放的速率。其他生物可降解聚合物的實例包括聚(原酸酯)(poly(orthoesters))及聚(酸酐)。貯庫可注射製劑也可以藉由將藥物截留在與身體組織相容的脂質體或微乳液中來製備。
當本揭露化合物可作為醫藥品投予到人及動物時，它們可以其本身投予或作為含有例如約0.1至99.5%(更佳約0.5至90%)的活性成分組合上醫藥上可接受之載劑的醫藥組成物投予。
將本揭露的一種或多種化合物添加在動物飼料中乃可藉由製備含有有效量的活性化合物的適當飼料預混料並將預混料加入到完全口糧(complete ration)中來實現。
替代地，可以將含有活性成分的中間產物濃縮物或飼料補充品混拌到飼料中。已於參考書中描述有此種飼料預混料及完全口糧的可能製備及投予方式(諸如"Applied Animal Nutrition", W.H.Freedman and CO., San Francisco, U.S.A., 1969或"Livestock Feeds and Feeding" O and B books, Corvallis, Ore., U.S.A., 1977)。具有泊咯沙姆 (poloxamer) 之組成物
於某些具體實施例中，本揭露提供醫藥組成物，其包含：a)本揭露之化合物及b)泊咯沙姆。
於某些具體實施例中，醫藥組成物的pH在約5與約9之間。於某些具體實施例中，醫藥組成物的pH在約5、6、7、8、或9。
於某些具體實施例中，在泊咯沙姆的存在下化合物的溶解度與相同pH下不存在泊咯沙姆時化合物的濃度相比高約3倍。於某些具體實施例中，在泊咯沙姆的存在下化合物的溶解度與相同pH下不存在泊咯沙姆時化合物的濃度相比高約2、3、4或5倍。
於某些具體實施例中，醫藥製劑也可含有泊咯沙姆。泊咯沙姆是由兩側接有兩個聚氧乙烯(聚(環氧乙烷))的親水鏈之聚氧丙烯(聚(環氧丙烷))的中央疏水鏈所組成的非離子三嵌段共聚物。泊咯沙姆通常被認為是“功能性賦形劑”，因為它們是必要組分，並在製劑中扮演重要角色。
於一些具體實施例中，泊咯沙姆包含下列中之至少一者：泊咯沙姆124、泊咯沙姆188、泊咯沙姆237、泊咯沙姆338或泊咯沙姆407。於一些具體實施例中，泊咯沙姆包含下列中之二或更多者之混合物：泊咯沙姆124、泊咯沙姆188、泊咯沙姆237、泊咯沙姆338或泊咯沙姆407。於一些具體實施例中，二或更多種泊咯沙姆的混合物包含泊咯沙姆407及泊咯沙姆124。於另一具體實施例中，泊咯沙姆包含下列中之至少一者：泊咯沙姆188及泊咯沙姆407或其混合物。於一些具體實施例中，泊咯沙姆為泊咯沙姆407。
於一些具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為約5 wt%與約25 wt%之間。於一些具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為約10 wt%與約23 wt%之間。於一些具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為約15 wt%與約20 wt%之間。於一些具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為大約17 wt%。於一些具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為大約21 wt%。
於一些具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度可為21 wt%與40 wt%之間。於另一具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為21 wt%與30 wt%之間。於另一具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為23 wt%與29 wt%之間。於另一具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為23 wt%與27 wt%之間。於另一具體實施例中，相對於組成物，泊咯沙姆的濃度為25 wt%。
於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為大於約10℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約11℃與約32℃之間。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約15℃與約30℃之間。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約20℃與約28℃之間。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約24℃與約26℃之間。
於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約15℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約20℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約24℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約26℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約28℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約30℃。於一些具體實施例中，醫藥組成物的膠凝溫度為約32℃。實施例
材料與方法
使用皮乳突之幹細胞增生試驗
皮乳突(DP)增生細胞培養試驗是指定量細胞培養中皮乳突(DP)球狀體數目、DP球狀體尺寸、或DP細胞數目(在試驗終點測量)的細胞培養方法。DP細胞是指表現鹼性磷酸酶(AP)及/或多功能蛋白聚醣、及/或波形蛋白、及/或Sox2、及/或CD133的細胞。
使用皮乳突之幹細胞增生試驗的實驗流程(protocol)如下：
基礎培養基：補充有N2 1X、B27 1X、硫酸鏈黴素(100 µg/ml)、兩性黴素B (2.5 µg/ml)、及1mM Hepes之DMEM /高葡萄糖培養基及F12。
使用顯微切割(microdissection)從試樣中移出完整的毛囊。在含有1 mg/ml 1型膠原酶(使用0.2μm注射器過濾器滅菌)的TrypLE™ (Thermo Fisher Scientific)中，將完整毛囊在37℃培育40分鐘。然後使用200μl尖口吸量管將經處理的毛囊研磨＞ 30X。用1X PBS將體積調節到高達1ml。接著使處理的毛囊穿通過40μm細胞過濾器以獲得單細胞懸浮液。
將20µl 施加到細胞計數器以確定每1ml細胞的數目。將剩餘的細胞懸液在4℃以1,000xg離心5分鐘。
製備補充有生長因子(50 ng/ml的IGF、EGF及FGF2)的標準培養基。將細胞以120,000個細胞/ml懸浮於具有的生長因子的標準培養基中，並且將250 µl (30,000個細胞)施加至24孔板(Corning Costar, 3534)的每個孔。
以2X濃度製備各處理條件，其最終稀釋1倍在500 µl中而足夠250 µl/孔。所有的最終DMSO濃度為約0.2%。
對各孔施加250 µl 2X處理培養基以具有每孔最終500 µl培養基體積。每孔最終處理濃度為1X。每孔最終細胞密度為30,000個細胞。
細胞在37℃培育並監測生長10天。
EVOS® 透射光影像在培養0、5、7及10天時拍攝。
在培養第10天收集球狀體，以用於免疫點墨、qPCR、或流式細胞術。替代地，可以將球狀體施加到塗覆有聚L-離胺酸的玻璃底的盤中，以用於鹼性磷酸酶(AP)染色、5-乙炔基-2'-脫氧尿苷(EdU)染色及/或DP標記物的免疫螢光(如波形蛋白、Sox2、多功能蛋白聚糖、CD133)，以供顯微術。
替代地，可使用顯微鏡來評估細胞或群落，以比較條件之間的DP性質。
DP 毛囊培養試驗
皮乳突(DP)毛囊培養試驗是指當在試驗終點測量時使用完整毛囊定量毛囊內皮乳突(DP)細胞的數目或DP區域的尺寸的方法。DP細胞是表現鹼性磷酸酶(AP)及/或多功能蛋白聚醣、及/或波形蛋白、及/或Sox2、及/或CD133的細胞。
DP 毛囊培養試驗的實驗流程如下：
基礎培養基：補充有N2 1X、B27 1X、硫酸鏈黴素(100 µg/ml)、兩性黴素B (2.5 µg/ml)、及1mM Hepes之DMEM /高葡萄糖培養基及F12。
使用顯微切割(microdissection)從試樣中移出完整的毛囊。將每根毛髮修剪至靠近毛囊頂端，並轉移到具有HBSS之乾淨碟中。施加200 µl 1X PBS到24孔盤的孔中。使用200 µl切大孔徑吸量管，小心地以每孔有3-5個毛囊將毛囊分佈在孔中。
藉由吸量小心地從孔中移除PBS，留下完整的毛囊。施加補充有生長因子(50ng/ml的IGF、EGF及FGF2)及所欲的小分子的0.5ml培養基到各孔。
細胞在37℃培育並監測生長7天。
EVOS® 透射光影像在0 DIV及7 DIV時拍攝。
毛囊在7 DIV歷經鹼性磷酸酶(AP)染色、5-乙炔基-2'-脫氧尿苷(EdU染色)及/或DP標記物 (如波形蛋白、Sox2、多功能蛋白聚糖、CD133)的免疫螢光，以供顯微術。
可以分析DP標記物染色陽性的總面積，並且可以監測隨時間毛幹生長。
實施例1
使用皮乳突的幹細胞增生試驗如以上材料及方法中所述般進行，並藉由光學顯微鏡分析DP群落。圖 1A- 圖 1D 所顯示之DP細胞係培養8天。對照條件中經處理之DP細胞顯示小且少的群落(圖 1A )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1µM)處理之DP細胞顯示與對照條件中經處理之DP細胞相比稍大且更豐沛的群落(圖 1B )。以Wnt活化劑(CHIR99021，4 µM)處理之DP細胞顯示與對照條件中經處理之DP細胞相比更豐沛的群落。Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(CHIR99021，4 µM)之組合顯示許多大的DP群落。因此，Shh與Wnt活化促進皮乳突(DP)生長及毛髮生長誘導。
實施例2
使用皮乳突的幹細胞增生試驗如以上材料及方法中所述般進行，並藉由光學顯微鏡分析DP群落。圖 2A- 圖 2D 所顯示之DP細胞係培養10天。對照條件中經處理之DP細胞顯示小且少的群落(圖 2A )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)處理之DP細胞顯示與對照條件中經處理之DP細胞相比稍大且更豐沛的群落(圖 2B )。以Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)處理之DP細胞顯示與對照條件中經處理之DP細胞相比更豐沛的群落( 圖 2C )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)之組合處理之DP細胞顯示許多大的DP群落( 圖 2D )。因此，Shh途徑活化與多種Wnt活化分子促進皮乳突(DP)生長及毛髮生長誘導(參見實施例1及此實施例)。
實施例3
使用皮乳突的幹細胞增生試驗如以上材料及方法中所述般進行，並藉由光學顯微鏡分析DP群落。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)單獨處理之DP細胞形成群落(圖 3A )。以GSK3抑制劑(化合物I-7，10 nM)與Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)處理之DP細胞與以嘌嗎啡胺單獨處理之群落相比形成更多群落並更大(圖 3D )。以Shh途徑活化劑(SAG，3 nM)單獨處理之DP細胞形成群落(圖 3B )。以GSK3抑制劑(化合物I-7，10 nM)與Shh途徑活化劑(SAG，3 nM)處理之DP細胞形成更多與以SAG單獨處理之群落相比更大的群落(圖 3E )。以Shh途徑活化劑(SAG HCl，500 nM)單獨處理之DP細胞形成群落(圖 3 C )。以GSK3抑制劑(化合物I-7，10 nM)與Shh途徑活化劑(SAG HCl)處理之DP細胞形成更多與以SAG HCl單獨處理之群落相比更大的群落(圖 3F )。因此，多種Shh分子與Wnt活化促進DP生長及毛髮生長誘導。
實施例4
使用皮乳突的幹細胞增生試驗如以上材料及方法中所述般進行，並藉由鹼性磷酸酶(AP)染色分析DP群落。鹼性磷酸酶為DP細胞的標記物並用以顯示具有毛髮誘導能力之DP細胞。圖 4A- 圖 4D 所顯示之DP細胞係培養10天。對照條件中經處理之DP細胞顯示小且少的鹼性磷酸酶(Alp)群落(圖 4A )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)處理之DP細胞顯示少的Alp群落(圖 4B )。以Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)處理之DP細胞顯示少的Alp群落(圖 4C )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)之組合處理之DP細胞顯示大且許多的Alp群落( 圖 4D )。因此，Shh及Wnt活化促進皮乳突(DP)生長及毛髮生長誘導。
實施例5
使用皮乳突的幹細胞增生試驗如以上材料及方法中所述般進行，並藉由針對DP細胞標記物表現之免疫螢光及藉由針對細胞分裂之EdU染色來分析DP群落。圖 5A- 圖 5D 所顯示之DP細胞係培養10天。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑之組合處理之DP細胞產生表現DP標記物波形蛋白之群落(圖 5A )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)之組合處理之DP細胞產生表現毛髮誘導之DP標記物波形蛋白之群落，且EdU (5-乙炔基-2'-脫氧尿苷)染色證實在這些條件下，群落積極分裂(圖 5B )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)之組合處理之DP細胞產生表現DP及幹細胞標記物Sox2之群落( 圖 5C )。以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)之組合處理之DP細胞產生表現毛髮誘導之DP標記物CD133之群落( 圖 5D )。因此，Shh與Wnt活化促進皮乳突(DP)生長及毛髮生長誘導。
實施例6
如以上材料及方法中所述般進行DP毛囊細胞培養試驗，並藉由鹼性磷酸酶(AP)染色分析DP毛囊。鹼性磷酸酶為DP細胞的標記物並用以顯示具有毛髮誘導能力之DP細胞。圖 6A- 圖 6B 所顯示之DP毛囊係培養7天。以對照處理之毛囊顯示在毛囊基底的鹼性磷酸酶(Alp) (圖 6 A )。以Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)及Shh途徑活化劑 (嘌嗎啡胺，1 µM)處理之毛囊顯示較大的DP(圖 6B )。因此，Shh與Wnt活化促進皮乳突(DP)生長及毛髮生長誘導。
實施例7
用於局部遞送的製劑
母液(stock solution)的製備：
成分A之製備
20% 泊咯沙姆407成分 A 媒劑母液的製備。
為了製備1.5 L於蒸餾水中的20% 泊咯沙姆407，將300g的泊咯沙姆407溶解在1L蒸餾水中。於冷房中以300 rpm攪拌溶液過夜。將量筒及蒸餾水預冷。加入蒸餾水使最終體積為1.5L，並將溶液儲存在4℃。
泊咯沙姆407媒劑母液：
用於TA0-TA7之媒劑PP5：
以800 ml之媒劑PP5(用於5%最終DMSO製劑之泊咯沙姆407/PEG媒劑)來說，將720 ml於蒸餾水中的20% 泊咯沙姆407、16 ml PEG及24 ml的蒸餾水組合。製備於1.5 ml卡扣帽管中的1.425 ml分裝品。
用於TA8之媒劑PP1：
以200 ml之媒劑PP1(用於1%最終DMSO製劑的泊咯沙姆407/PEG媒劑)來說，將180 ml於蒸餾水中的20% 泊咯沙姆407、4 ml PEG及14 ml的蒸餾水組合。製備於1.5 ml卡扣帽管中的1.485 ml分裝品。
用於TA9及TA10之媒劑PP0.2：
以200 ml之媒劑PP0.2來說(用於0.2%最終DMSO製劑之泊咯沙姆407/PEG媒劑)，將180 ml於蒸餾水中的20% 泊咯沙姆407、4 ml PEG及15.6 ml的蒸餾水組合。製備於1.5 ml卡扣帽管中的1.497 ml分裝品。
用於TA11及TA12的Lubriderm：
製備於5 ml卡扣帽管中的2.85 ml分裝品。
藥物母液：
100 mM化合物I-7之製備。將109.7 mg的化合物I-7溶解在5 ml卡扣帽管中的2ml的DMSO中。於攪拌水浴(熱板設成80℃)中將溶液加熱。將溶液渦旋以充分溶解化合物I-7。
10 mM嘌嗎啡胺之製備。將125 mg的嘌嗎啡胺溶解在50 ml錐形管中的25 ml的DMSO中。使溶液避光。
50 mM化合物I-7與10 mM嘌嗎啡胺之混合物之製備。將274.3 mg的化合物I-7溶解在10 ml的10 mM嘌嗎啡胺中。於攪拌水浴(熱板設成80℃)中將溶液加熱並渦旋以充分溶解。使溶液避光。
100 mM化合物I-7與10 mM嘌嗎啡胺之混合物之製備。將109.7 mg的化合物I-7溶解在2 ml的10 mM嘌嗎啡胺中。於攪拌水浴(熱板設成80℃)中將溶液加熱並渦旋以充分溶解。使溶液避光。
成分B之製備
以TA0來說，將3.5 ml的DMSO吸量到5 ml卡扣帽管中。
以TA1來說，為了製備於DMSO中之50 mM化合物I-7，將1.75 ml的100 mM化合物I-7添加到於5 ml卡扣帽管中的1.75 ml DMSO。製備100 µl的分裝品。
以TA2來說，為了製備於DMSO中之10 mM嘌嗎啡胺，將3.5 ml的10 mM嘌嗎啡胺添加到5 ml卡扣帽管中。製備100 µl的分裝品。
以TA3來說，為了製備於DMSO中之0.2 µM化合物I-7及20 µM嘌嗎啡胺，將7 µl的0.1 mM化合物I-7與7 µl的10 mM嘌嗎啡胺添加到於5 ml卡扣帽管中的3.493 ml DMSO。製備100 µl的分裝品。
以TA4來說，為了製備於DMSO中之2 µM化合物I-7及200 µM嘌嗎啡胺，將70 µl的0.1 mM化合物I-7與70 µl的10 mM嘌嗎啡胺添加到於5 ml卡扣帽管中的3.429 ml DMSO。製備100 µl的分裝品。
以TA5來說，為了製備於DMSO中之20 µM化合物I-7及2 mM嘌嗎啡胺，將700 µl的0.1 mM化合物I-7與700 µl的10 mM嘌嗎啡胺添加到於5 ml卡扣帽管中的2.799 ml DMSO。製備100 µl的分裝品。
以TA6來說，為了製備於DMSO中之200 µM化合物I-7及10 mM嘌嗎啡胺，將7 µl的100 mM化合物I-7添加到於5 ml卡扣帽管中的3.5 ml的10 mM嘌嗎啡胺。製備100 µl的分裝品。
以TA7來說，為了製備於DMSO中之50 mM化合物I-7及10 mM嘌嗎啡胺，將3.5 ml之50 mM化合物I-7與10 mM嘌嗎啡胺的混合物添加到5 ml卡扣帽管中。製備100 µl的分裝品。
以TA8來說，為了製備於DMSO中之100 mM化合物I-7及10 mM嘌嗎啡胺，將1 ml之100 mM化合物I-7與10 mM嘌嗎啡胺的混合物添加到1.5 ml卡扣帽管中。製備100 µl的分裝品。
以TA9來說，為了製備於DMSO中之10 µM化合物I-7及1 mM嘌嗎啡胺，將50 µl的0.1 mM化合物I-7及50 µl的10 mM嘌嗎啡胺添加到1.5 ml卡扣帽管的0.449 mlDMSO中。製備100 µl的分裝品。
以TA10來說，為了製備於DMSO中之100 mM化合物I-7及10 mM嘌嗎啡胺，將0.5 ml之100 mM化合物I-7與10 mM嘌嗎啡胺的混合物添加到1.5 ml卡扣帽管中。製備100 µl的分裝品。
以TA11來說，為了製備於DMSO中之2 µM化合物I-7及200 µM嘌嗎啡胺，將120 µl的0.1 mM化合物I-7及120 µl的10 mM嘌嗎啡胺添加到15 ml錐形管中的5.879 ml DMSO中。製備200 µl的分裝品。
以TA12來說，為了製備於DMSO中之50 mM化合物I-7及10 mM嘌嗎啡胺，6 ml之50 mM化合物I-7與10 mM嘌嗎啡胺的混合物添加到15 ml錐形管中。製備200 µl的分裝品。
製劑之製備
TA0
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一份DMSO分裝品，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的分裝品渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將分裝品短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將75 µl的DMSO添加到1.425 ml媒劑PP5中並保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA0放在室溫(RT)。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA1
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之50 mM化合物I-7，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的分裝品渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將分裝品短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將75 µl於DMSO中之50 mM化合物I-7添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上(可能在冰上變得霧霧的，但在RT將澄清)。施加前約5分鐘，將TA1放在室溫(RT)。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA2
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之10 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將75 µl之10mM嘌嗎啡胺DMSO添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA2放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA3
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之0.2 µM化合物I-7與20 µM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將75 µl於DMSO中之0.2 µM化合物I-7/20 µM嘌嗎啡胺添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA3放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA4
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之2 µM化合物I-7/200 µM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將75 µl於DMSO中之0.2 µM化合物I-7/200 µM嘌嗎啡胺添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA4放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA5
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之20 µM化合物I-7/2 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將於DMSO中之20 µM化合物I-7/2 mM嘌嗎啡胺添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA5放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA6
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之200 µM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將於DMSO中之200 µM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA6放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA7
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之50 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP5。將媒劑PP5保持在冰上，將於DMSO中之50 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺添加到1.425 ml媒劑PP5中並渦旋。將管保持在冰上(可能在冰上變得霧霧的，但在RT將澄清)。施加前約5分鐘，將TA7放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA8
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之100 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP1。將媒劑PP1保持在冰上，將15 µl於DMSO中之100 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺添加到1.485 ml媒劑PP1中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA8放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA9
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之10 µM化合物I-7/1 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP0.2。將媒劑PP0.2保持在冰上，將3 µl於DMSO中之10 µM化合物I-7/1 mM嘌嗎啡胺添加到1.497 ml媒劑PP0.2中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA9放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA10
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之100 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍(～30分鐘)。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
從4℃移除一管媒劑PP0.2。將媒劑PP0.2保持在冰上，將3 µl於DMSO中之100 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺添加到1.497 ml媒劑PP0.2中並渦旋。將管保持在冰上。施加前約5分鐘，將TA10放在室溫。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA11
一天的供應是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之2 µM化合物I-7/200 µM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
將150 µl於DMSO中之2 µM化合物I-7/200 µM嘌嗎啡胺添加到2.85 ml Lubriderm。將溶液渦旋。使用正壓式移液吸量管將底部未混合部分吸量至頂部，並將溶液渦旋並離心。重複該過程直到混合。藉由輕敲管或者短暫離心來移除管側的材料。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
TA12
一天量的(夠5隻動物)TA12是在施用當天準備的。從-20℃取出一管於DMSO中之50 mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啡胺，並使其在RT解凍。如果有可見的沉澱物，將解凍的管渦旋來混合並加熱(60℃)。如果需要，將管短暫離心。
將一根Lubriderm放在旁邊。
將150μl在DMSO中的50mM化合物I-7/10 mM嘌嗎啉胺添加到2.85ml Lubriderm中。將溶液渦旋。使用正壓式移液吸量管(positive displacement pipette)將底部未混合部分吸量至頂部，並將溶液渦旋並離心。重複該過程直到混合。藉由輕敲管或者短暫離心來移除管側的材料。使用正壓式移液吸量管分注，而對各動物施加200μl。
額外的製劑方法包括但不限於：霜劑、凝膠、油、液體、噴霧劑、粉劑、納米顆粒、水凝膠、乳劑、及乳膠劑(參見下面參考文獻)。
關於製劑的參考文獻：
Ashni Verma, Sukhdev Singh, Rupinder Kaur, Upendra K Jain. Topical Gels as Drug Delivery Systems: A Review.Int.J.Pharm.Sci.Rev.Res., 23(2), 2013, 60, 374-382。
Sonam Vats, Charu Saxena, TS Easwari, VK Shukla. Emulsion Based Gel Technique: Novel Approach for Enhancing Topical Drug Delivery of Hydrophobic Drugs.International Journal for Pharmaceutical Research Scholars (2014), 3(2), 649-660。
Loveleenpreetkaur Prabhjotkaur and MU. Khan. Topical formulations and Hydro-gel: An overview. International Journal of Advances in Pharmacy, Biology and Chemistry (2013), 2(1), 201-206。
Christian Wischke Eckart Rühl Andreas Lendlein. Dermal Drug Delivery by Nanocarriers.Journal of Controlled Release 242 (2016) 1-2。
William Wei Lim Chin, Johannes Parmentier, Michael Widzinski, En Hui Tan, Rajeev Gokhale.A Brief Literature and 專利 Review of Nanosuspensions to a Final Drug Product.Journal of Pharmaceutical Sciences, October 2014, Vol.103(10), pp.2980-2999。
從前面的描述中，顯而易見的是，可以對本文中描述的揭示內容進行變化及修改，以使其適用於各種用途及條件。本文中描述了用於本揭露的方法及材料；也可以使用本領域已知的其他合適的方法及材料。材料、方法及實施例僅是說明性的而不是限制性的。此等具體實施例也在以下申請專利範圍的範疇內。在本文變量的任何定義中的元素列表的敘述包括將該變量定義為所列元素的任何單個元素或組合(或子組合)。本文中的具體實施例的敘述包括呈任何單一具體實施例的具體實施例或與任何其他具體實施例或其部分的組合。本文引用的所有專利、公開的申請案及參考文獻的教示都藉由引用經彼等之整體內容併入。儘管已經特別參考例示性具體實施例示出並描述本揭露，但是本領域技術人員將理解，可以在其中進行各種形式的變化而不脫離本發明所附申請專利範圍的範疇。
圖 1A- 圖 1D 顯示Shh及Wnt活化會促進DP生長及毛髮生長誘導(hair growth induction)。圖 1A ：以對照條件處理之DP細胞顯示小且少的群落。圖 1B ：以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)處理之DP細胞顯示比圖 1A 稍微較大且更豐沛的群落。圖 1C ：以Wnt活化劑(CHIR99021，4 µM)處理之DP細胞顯示比圖 1A 更豐沛的群落。圖 1D ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(CHIR99021，4 µM)的組合顯示許多大的DP群落。8天的培養。比例尺1000 µm。
圖 2A- 圖 2D 顯示Shh途徑活化與多重Wnt活化分子會促進DP (皮乳突)生長及毛髮生長誘導。圖 2A ：以對照條件處理之DP細胞顯示小且少的群落。圖 2B ：以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)處理之DP細胞顯示比圖 2A 稍微較大且更豐沛的群落。圖 2C ：以Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)處理之DP細胞顯示比圖 2A 更豐沛的群落。圖 2D ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7 10 nM)的組合顯示許多大的DP群落。10天的培養。所有圖中的比例尺相同；見圖2D中的比例尺，200 µm。
圖 3A- 圖 3F 顯示多重Shh分子與Wnt活化會促進DP生長及毛髮生長誘導。圖 3A ：單獨以嘌嗎啡胺(1 µM)處理之DP細胞形成群落。圖 3D ：以GSK3抑制劑(化合物I-7，10 nM)及嘌嗎啡胺 (1 µM)處理之DP細胞形成比單獨以嘌嗎啡胺處理更多且更大的群落。圖 3B ：單獨以SAG (3 nM)處理之DP細胞形成群落。圖 3E ：以GSK3抑制劑(化合物I-7，10 nM)及SAG (3 nM)處理之DP細胞形成更多比單獨以SAG處理更大的群落。圖 3C ：單獨以SAG HCl (500 nM)處理之DP細胞形成群落。圖 3F ：以GSK3抑制劑(化合物I-7，10 nM)及SAG HCl (500 nM)處理之DP細胞形成更多比單獨以SAG HCl處理更大的群落。比例尺1000 µm。
圖 4A- 圖 4D 顯示Shh與Wnt活化會促進DP生長及毛髮生長誘導。圖 4A ：以對照條件處理之DP細胞顯示小且少的鹼性磷酸酶(Alp)群落。圖 4B ：以Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)處理之DP細胞顯示少的Alp群落。圖 4C ：以Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)處理之毛囊顯示小的Alp群落。圖 4D ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)的組合顯示大且許多的Alp群落。鹼性磷酸酶為DP細胞的標記物並用以顯示具有毛髮誘導能力之DP細胞。10天的培養。比例尺，0.5 mm。
圖 5A- 圖 5D 顯示Shh與Wnt活化會促進DP生長及毛髮生長誘導。圖 5A ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)的組合產生表現DP標記物波形蛋白的群落。圖 5B ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)的組合產生表現毛髮誘導DP標記物多功能蛋白聚糖的群落。EdU證實在這些條件下群落正積極分裂。圖 5C ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)的組合產生表現DP與幹細胞標記物Sox2的群落。圖 5D ：Shh途徑活化劑(嘌嗎啡胺，1 µM)與Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)的組合產生表現毛髮誘導DP標記物CD133的群落。10天的培養。比例尺，50 µm。
圖 6A- 圖 6B 顯示Shh與Wnt活化會促進DP生長及毛髮生長誘導。圖 6 A ：以對照處理之毛囊顯示於毛囊基底的鹼性磷酸酶(Alp)。圖6B ：以Wnt活化劑(化合物I-7，10 nM)與Shh途徑(嘌嗎啡胺，1 µM)活化劑處理之毛囊顯示較大DP。鹼性磷酸酶為DP細胞的標記物並用以顯示具有毛髮誘導能力之DP細胞。7天的培養。比例尺，1 mm。

Claims (292)

  1. 一種擴大毛囊的幹細胞族群之方法，該方法包含使幹細胞與一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑接觸。
  2. 一種促進毛囊上皮細胞的產生之方法，該方法包含以一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑處理毛囊的幹細胞。
  3. 一種治療患有或有風險發展成與不存在或缺乏毛囊上皮細胞相關之疾病的個體之方法，該方法包含對該個體投予一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑。
  4. 一種治療患有或有風險發展成禿髮的個體的方法，該方法包含對該個體投予一或多種音猬(Shh)途徑活化劑及一或多種Wnt促效劑。
  5. 如請求項1或2之方法，其中該幹細胞為皮乳突幹細胞。
  6. 如請求項1或2之方法，其中該幹細胞為毛囊幹細胞。
  7. 如請求項1或2之方法，其中該幹細胞包含角質細胞、黑色素細胞、皮乳突細胞、隆起細胞、或其組合。
  8. 如請求項1或2之方法，其中該幹細胞於個體中。
  9. 如請求項3之方法，其中該疾病選自休止期脫髮、生長期脫髮、雄性禿、斑禿、髮癬、扁平毛髮苔癬、瘢痕性禿髮、圓盤狀紅斑狼瘡、禿性毛囊炎、頭皮切割性蜂窩組織炎、前額纖維化禿髮、中央離心瘢痕性禿髮、拔毛癖、牽引性禿髮、及稀毛症。
  10. 如請求項3或4之方法，其中與未投予該一或多種Shh途徑活化劑及該一或多種Wnt促效劑之個體相比，經投予該一或多種Shh途徑活化劑及該一或多種Wnt促效劑之該個體具有改善之毛髮生長、改善之毛髮密度及/或改善之毛囊再生性循環。
  11. 如請求項1-10中任一項之方法，其中該一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約5倍至約1000倍。
  12. 如請求項1-11中任一項之方法，其中該一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約10倍至約100倍。
  13. 如請求項1-12中任一項之方法，其中該一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh途徑活化濃度的約20倍至約50倍。
  14. 如請求項1-13中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約5倍至約1000倍。
  15. 如請求項1-14中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約10倍至約100倍。
  16. 如請求項1-15中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約20倍至約50倍。
  17. 如請求項1-16中任一項之方法，其中該一或多種Shh途徑活化劑係選自表 1 或表 2 。
  18. 如請求項1-17中任一項之方法，其中該一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺(Purmorphamine)、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
  19. 如請求項1-18中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑係選自表 3 。
  20. 如請求項1-19中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3-α抑制劑或GSK3-β抑制劑。
  21. 如請求項20之方法，其中該GSK3-α抑制劑係選自表 5 。
  22. 如請求項20之方法，其中該GSK3-β抑制劑係選自表 4 。
  23. 如請求項1-18及20中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為式I化合物，或其醫藥上可接受之鹽或互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、-NH (C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： -Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：-CORX1 、-SO2 RX1 、雜芳基、及-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)，其中-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、 -[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、 -[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、-CONHC1 -C4 烷基、-COH、-CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、 -[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2； 　　限制條件為該化合物不是或。
  24. 如請求項23之方法，其中RX 為-CORX1 。
  25. 如請求項24之方法，其中RX1 是哌啶或8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷，二者都視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-(CH2 )p -NH2 ；其中p為1、2、或3。
  26. 如請求項25之方法，其中RX1 是哌啶，視需要經1至2個鹵基取代基取代。
  27. 如請求項26之方法，其中該哌啶視需要經-(CH2 )p -OH取代。
  28. 如請求項23之方法，其中RX 為雜芳基。
  29. 如請求項28之方法，其中該雜芳基為單環或雙環。
  30. 如請求項28之方法，其中該雜芳基含有1至3個氮。
  31. 如請求項23之方法，其中RX 為-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)。
  32. 如請求項31之方法，其中-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)經1或2個鹵素取代在C1 -C4 伸烷基上。
  33. 如請求項31之方法，其中C3 -C8 環烷基為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
  34. 如請求項1-18及20中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為式Ia化合物，或其醫藥上可接受之鹽或互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ；其中Ar視需要經氘、鹵基、烷基、烷氧基、及CN取代； 　　Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：氫、RX1 、-CORX1 、-SO2 RX1 、-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、-[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、CONHC1 -C4 烷基、COH、-CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2。
  35. 如請求項1-18及20中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為式Ib化合物，或其醫藥上可接受之鹽或互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N；且限制條件為當Q1 為CH且Q3 為C時，Q2 不是N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ；其中Ar視需要經氘、鹵基、烷基、烷氧基、及CN取代； 　　各Q6 獨立選自CRQ6 及N；其中RQ6 為氫、鹵基、-CN、低級烷基、或經取代之烷基； 　　Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：氫、RX1 、-CORX1 、-SO2 RX1 、-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，及其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、-[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、CONHC1 -C4 烷基、COH、-CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2。
  36. 如請求項23-34中任一項之方法，其中Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C。
  37. 如請求項23-35中任一項之方法，其中Q1 為N；Q2 為C；及Q3 為N。
  38. 如請求項23-35中任一項之方法，其中Q1 為CH；Q2 為C；及Q3 為N。
  39. 如請求項23-35中任一項之方法，其中Q1 為N；Q2 為N；及Q3 為C。
  40. 如請求項23-39中任一項之方法，其中R1 為氫或鹵基。
  41. 如請求項23-40中任一項之方法，其中R2 為鹵基。
  42. 如請求項23-40中任一項之方法，其中R2 選自下列所組成群組：鹵基、-CF3 、-CN、-C≡CH、-NH2 、及 -NHC(O)CH3 。
  43. 如請求項23-42中任一項之方法，其中R3 為氫或鹵基。
  44. 如請求項23及25-43中任一項之方法，其中Ar為。
  45. 如請求項23-44中任一項之方法，其中-Z-W-X-Y-為 -C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -。
  46. 如請求項23-44中任一項之方法，其中-Z-W-X-Y-為 -C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -。
  47. 如請求項45或46之方法，其中各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。
  48. 如請求項45或46之方法，其中二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基。
  49. 如請求項23-46中任一項之方法，其中RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基。
  50. 如請求項23-44中任一項之方法，其中-Z-W-X-Y-為-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -。
  51. 如請求項23-50中任一項之方法，其中各RW 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。
  52. 如請求項23-50中任一項之方法，其中二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基。
  53. 如請求項23-52中任一項之方法，其中各RY 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。
  54. 如請求項23-52中任一項之方法，其中二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基。
  55. 如請求項34-54中任一項之方法，其中RX 為RX1 ，其中RX1 為雜芳基。
  56. 如請求項34-54中任一項之方法，其中RX 為-CORX1 。
  57. 如請求項34-54中任一項之方法，其中RX 為-SO2 RX1 。
  58. 如請求項34-54中任一項之方法，其中RX 為-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 。
  59. 如請求項56-58中任一項之方法，其中RX1 為C3 -C8 環烷基。
  60. 如請求項56-58中任一項之方法，其中RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個為鹵基之取代基取代。
  61. 如請求項1-18及20中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑係選自表 6 。
  62. 如請求項1-18及20中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12。
  63. 如請求項1-18及20中任一項之方法，其中該一或多種Wnt促效劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
  64. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  65. 如請求項64之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  66. 如請求項64之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  67. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  68. 如請求項67之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  69. 如請求項67之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  70. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  71. 如請求項70之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  72. 如請求項70之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  73. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  74. 如請求項73之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  75. 如請求項73之方法，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  76. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  77. 如請求項76之方法，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  78. 如請求項76之方法，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  79. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  80. 如請求項79之方法，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  81. 如請求項79之方法，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  82. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  83. 如請求項82之方法，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  84. 如請求項82之方法，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  85. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  86. 如請求項85之方法，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  87. 如請求項85之方法，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  88. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  89. 如請求項88之方法，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  90. 如請求項88之方法，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  91. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  92. 如請求項91之方法，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  93. 如請求項91之方法，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  94. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  95. 如請求項94之方法，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  96. 如請求項94之方法，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  97. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  98. 如請求項97之方法，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  99. 如請求項97之方法，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  100. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  101. 如請求項100之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  102. 如請求項100之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  103. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  104. 如請求項103之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  105. 如請求項103之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  106. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  107. 如請求項106之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  108. 如請求項106之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  109. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  110. 如請求項109之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  111. 如請求項109之方法，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  112. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  113. 如請求項112之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  114. 如請求項112之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  115. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  116. 如請求項115之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  117. 如請求項115之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  118. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  119. 如請求項118之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  120. 如請求項118之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  121. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  122. 如請求項121之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  123. 如請求項121之方法，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  124. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  125. 如請求項124之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  126. 如請求項124之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  127. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  128. 如請求項127之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  129. 如請求項127之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  130. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  131. 如請求項130之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  132. 如請求項130之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  133. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  134. 如請求項133之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  135. 如請求項133之方法，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  136. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  137. 如請求項136之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  138. 如請求項136之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  139. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  140. 如請求項139之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  141. 如請求項139之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  142. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  143. 如請求項142之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  144. 如請求項142之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  145. 如請求項63之方法，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  146. 如請求項145之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  147. 如請求項145之方法，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  148. 如請求項1-147中任一項之方法，其中毛囊中之Gli1、Krt15、CD34、Lgr5、Lgr6、Lrig1、Sox2、CD133、波形蛋白、多功能蛋白聚糖及/或鹼性磷酸酶的表現增加。
  149. 一種醫藥組成物，其包含：醫藥上可接受之載劑；及(i) Wnt促效劑、或其醫藥上可接受之鹽，及(ii)音猬(Shh)途徑活化劑、或其醫藥上可接受之鹽。
  150. 如請求項149之醫藥組成物，其中該一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh活化濃度的約5倍至約1000倍。
  151. 如請求項149或150之醫藥組成物，其中該一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh活化濃度的約10倍至約100倍。
  152. 如請求項149-151中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Shh途徑活化劑的濃度為有效活體外Shh活化濃度的約20倍至約50倍。
  153. 如請求項149-152中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約5倍至約1000倍。
  154. 如請求項149-153中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約10倍至約100倍。
  155. 如請求項149-154中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑的濃度為有效活體外Wnt促效劑濃度的約20倍至約50倍。
  156. 如請求項149-155中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Shh途徑活化劑係選自表 1 或表 2 。
  157. 如請求項149-156中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺(Purmorphamine)、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
  158. 如請求項149-157中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑係選自表 3 。
  159. 如請求項149-158中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3-α抑制劑或GSK3-β抑制劑。
  160. 如請求項159之醫藥組成物，其中該GSK3-α抑制劑係選自表 5 。
  161. 如請求項159之醫藥組成物，其中該GSK3-β抑制劑係選自表 4 。
  162. 如請求項149-157及159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為式I化合物，或其醫藥上可接受之鹽或互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、-NH (C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：-CORX1 、-SO2 RX1 、雜芳基、及-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)，其中-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、 -[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -OH、 -[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、-CONHC1 -C4 烷基、-COH、-CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、 -[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2； 　　限制條件為該化合物不是或。
  163. 如請求項162之醫藥組成物，其中RX 為-CORX1 。
  164. 如請求項163之醫藥組成物，其中RX1 是哌啶或8-氧雜-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷，二者視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-(CH2 )p -NH2 ；其中p為1、2、或3。
  165. 如請求項164之醫藥組成物，其中RX1 是哌啶，視需要經1至2個鹵基取代基取代。
  166. 如請求項165之醫藥組成物，其中該哌啶視需要經 -(CH2 )p -OH取代。
  167. 如請求項162之醫藥組成物，其中RX 為雜芳基。
  168. 如請求項167之醫藥組成物，其中 該雜芳基為單環或雙環。
  169. 如請求項167之醫藥組成物，其中該雜芳基含有1至3個氮。
  170. 如請求項162之醫藥組成物，其中RX 為-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)。
  171. 如請求項170之醫藥組成物，其中-(C1 -C4 伸烷基)-(C3 -C8 環烷基)經1或2個鹵素取代在C1 -C4 伸烷基上。
  172. 如請求項170之醫藥組成物，其中C3 -C8 環烷基為環丙基、環丁基、環戊基、或環己基。
  173. 如請求項149-157及159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為式Ia化合物，或其醫藥上可接受之鹽或互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ；其中Ar視需要經氘、鹵基、烷基、烷氧基、及CN取代； 　　Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：氫、RX1 、-CORX1 、-SO2 RX1 、-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、-[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、CONHC1 -C4 烷基、COH、-CO2 H、-[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2。
  174. 如請求項149-157及159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為式Ib化合物，或其醫藥上可接受之鹽或互變異構體，其中： 　　Q1 為CH或N； 　　Q2 為C或N； 　　Q3 為C或N； 　　　　其中Q1 、Q2 、及Q3 中之至少一者為N；且限制條件為當Q1 為CH且Q3 為C時，Q2 不是N； 　　R1 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R1a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R1a 為C1 -C4 烷基； 　　R2 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NH(C1 -C4 烷基)、-N(C1 -C4 烷基)2 、-NHC(O)R2a 、及 -S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R2a 為C1 -C4 烷基； 　　R3 選自下列所組成群組：氫、鹵基、C1 -C4 烷基、C1 -C4 烯基、C1 -C4 炔基、-CN、-OH、-O-C1 -C4 烷基、-NH2 、 -NHC(O)R3a 、及-S(O)2 NH2 ；其中該烷基視需要經1至3個獨立選自下列所組成群組的取代基取代：鹵基及-OH；及其中R3a 為C1 -C4 烷基； 　　Ar選自下列所組成群組： ；其中Ar視需要經氘、鹵基、烷基、烷氧基、及CN取代； 　　各Q6 獨立選自CRQ6 及N；其中RQ6 為氫、鹵基、-CN、低級烷基、或經取代之烷基； 　　Q7 選自S、O、CH2 、及NRQ7 ；其中RQ7 為氫或視需要經取代之C1 -C4 烷基； 　　-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -、-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -、或-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -； 　　各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　各RW 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基； 　　或RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基； 　　RX 選自下列所組成群組：氫、RX1 、-CORX1 、-SO2 RX1 、-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 ，其中-(C1 -C4 伸烷基)-RX1 視需要經1至4個鹵基取代在C1 -C4 伸烷基上； 　　其中RX1 為C3 -C8 環烷基、雜芳基或雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個獨立選自下列所組成群組之取代基取代：氘、鹵基、-[C(RX1a )2 ]p -CN、-CF3 、C1 -C4 烷基、 -(CH2 )p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -OH、-[C(RX1a )2 ]p -O-C1 -C4 烷基、-NHCOC1 -C4 烷基、CONHC1 -C4 烷基、COH、-CO2 H、 -[C(RX1a )2 ]p -COO-C1 -C4 烷基、-(CH2 )p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH2 、-[C(RX1a )2 ]p -NH-C1 -C4 烷基、-[C(RX1a )2 ]p -N-(C1 -C4 烷基)2 ；其中p為0、1、2、或3；其中各RX1a 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RX1a 基一起形成C3 -C6 環烷基； 　　各RY 獨立選自下列所組成群組：氫、氘、鹵基、及C1 -C4 烷基，或二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基或側氧基；及 　　m為0、1、或2。
  175. 如請求項162-173中任一項之醫藥組成物，其中Q1 為CH；Q2 為N；及Q3 為C。
  176. 如請求項162-174中任一項之醫藥組成物，其中Q1 為N；Q2 為C；及Q3 為N。
  177. 如請求項162-174中任一項之醫藥組成物，其中Q1 為CH；Q2 為C；及Q3 為N。
  178. 如請求項162-174中任一項之醫藥組成物，其中Q1 為N；Q2 為N；及Q3 為C。
  179. 如請求項162-178中任一項之醫藥組成物，其中R1 為氫或鹵基。
  180. 如請求項162-179中任一項之醫藥組成物，其中R2 為鹵基。
  181. 如請求項162-179中任一項之醫藥組成物，其中R2 選自下列所組成群組：鹵基、-CF3 、-CN、-C≡CH、-NH2 、及-NHC(O)CH3 。
  182. 如請求項162-181中任一項之醫藥組成物，其中R3 為氫或鹵基。
  183. 如請求項162及164-182中任一項之醫藥組成物，其中Ar為。
  184. 如請求項162-183中任一項之醫藥組成物，其中-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -N(RX )-C(RY )2 -。
  185. 如請求項162-183中任一項之醫藥組成物，其中-Z-W-X-Y-為-C(RZ )2 -C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -。
  186. 如請求項184或185之醫藥組成物，其中各RZ 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。
  187. 如請求項184或185之醫藥組成物，其中二個RZ 基一起形成C3 -C6 環烷基。
  188. 如請求項162-185中任一項之醫藥組成物，其中RZ 與RW 與彼等所附接之碳一起形成C3 -C6 環烷基。
  189. 如請求項162-183中任一項之醫藥組成物，其中-Z-W-X-Y-為-C(RW )2 -CH(RX )-C(RY )2 -。
  190. 如請求項162-189中任一項之醫藥組成物，其中各RW 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。
  191. 如請求項162-189中任一項之醫藥組成物，其中二個RW 基一起形成C3 -C6 環烷基。
  192. 如請求項162-191中任一項之醫藥組成物，其中各RY 獨立選自下列所組成群組：氫及鹵基。
  193. 如請求項162-191中任一項之醫藥組成物，其中二個RY 基一起形成C3 -C6 環烷基。
  194. 如請求項173-193中任一項之醫藥組成物，其中RX 為RX1 ，其中RX1 為雜芳基。
  195. 如請求項173-193中任一項之醫藥組成物，其中RX 為 -CORX1 。
  196. 如請求項173-193中任一項之醫藥組成物，其中RX 為 -SO2 RX1 。
  197. 如請求項173-193中任一項之醫藥組成物，其中RX 為 -(C1 -C4 伸烷基)-RX1 。
  198. 如請求項195-197中任一項之醫藥組成物，其中RX1 為C3 -C8 環烷基。
  199. 如請求項195-197中任一項之醫藥組成物，其中RX1 為雜環基，其中該雜環基視需要經1至12個為鹵基之取代基取代。
  200. 如請求項149-157及159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑係選自表 6 。
  201. 如請求項149-157及159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12。
  202. 如請求項149-157及159中任一項之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑係選自CHIR99021、LY2090314、AZD1080、GSK3抑制劑XXII、化合物I-6、化合物I-7、及化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑係選自嘌嗎啡胺、SAG、20-α-羥基膽固醇、及SAG HCl。
  203. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  204. 如請求項203之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  205. 如請求項203之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  206. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  207. 如請求項206之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  208. 如請求項206之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  209. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  210. 如請求項209之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  211. 如請求項209之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  212. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為CHIR99021，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  213. 如請求項212之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  214. 如請求項212之醫藥組成物，其中CHIR99021的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  215. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  216. 如請求項215之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  217. 如請求項215之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  218. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  219. 如請求項218之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  220. 如請求項218之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  221. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  222. 如請求項221之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  223. 如請求項221之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  224. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為LY2090314，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  225. 如請求項224之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  226. 如請求項224之醫藥組成物，其中LY2090314的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  227. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  228. 如請求項227之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  229. 如請求項227之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  230. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  231. 如請求項230之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  232. 如請求項230之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  233. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  234. 如請求項233之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  235. 如請求項233之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  236. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為AZD1080，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  237. 如請求項236之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  238. 如請求項236之醫藥組成物，其中AZD1080的濃度為約1 mM至約100 mM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  239. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  240. 如請求項239之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  241. 如請求項239之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  242. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  243. 如請求項242之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  244. 如請求項242之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  245. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  246. 如請求項245之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  247. 如請求項245之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  248. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為GSK3抑制劑XXII，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  249. 如請求項248之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 nM至約10 µM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  250. 如請求項248之醫藥組成物，其中GSK3抑制劑XXII的濃度為約100 µM至約10 mM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  251. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  252. 如請求項251之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  253. 如請求項251之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  254. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  255. 如請求項254之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  256. 如請求項254之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  257. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  258. 如請求項257之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  259. 如請求項257之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  260. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-6，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  261. 如請求項260之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  262. 如請求項260之醫藥組成物，其中化合物I-6的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  263. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  264. 如請求項263之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  265. 如請求項263之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  266. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  267. 如請求項266之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  268. 如請求項266之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  269. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  270. 如請求項269之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  271. 如請求項269之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  272. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-7，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  273. 如請求項272之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 nM至約100 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  274. 如請求項272之醫藥組成物，其中化合物I-7的濃度為約1 µM至約100 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  275. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為嘌嗎啡胺。
  276. 如請求項275之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 nM至約10 µM。
  277. 如請求項275之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而嘌嗎啡胺的濃度為約100 µM至約10 mM。
  278. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG。
  279. 如請求項278之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而SAG的濃度為約1 nM至約100 nM。
  280. 如請求項278之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而SAG的濃度為約1 µM至約100 µM。
  281. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為20-α-羥基膽固醇。
  282. 如請求項281之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 µM至約100 µM。
  283. 如請求項281之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而20-α-羥基膽固醇的濃度為約1 mM至約100 mM。
  284. 如請求項202之醫藥組成物，其中該一或多種Wnt促效劑為化合物I-12，而該一或多種Shh途徑活化劑為SAG HCl。
  285. 如請求項284之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 nM至約1000 nM，而SAG HCl的濃度為約10 nM至約1 µM。
  286. 如請求項284之醫藥組成物，其中化合物I-12的濃度為約10 µM至約1000 µM，而SAG HCl的濃度為約10 µM至約1 mM。
  287. 如請求項149之醫藥組成物，其中該Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白(Smoothened)促效劑。
  288. 如請求項149之醫藥組成物，其中該Shh途徑活化劑包含平滑化蛋白纖毛堆積增進劑。
  289. 如前述請求項中任一項之方法，其中該Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)或SAG-HCl，並組合選自下列之一或多者的Wnt促效劑：SFRP1抑制劑(例如，WAY-316606)、SFRP2抑制劑、SFRP3抑制劑、SFRP4抑制劑、SFRP5抑制劑、環孢菌素或其類似物(例如，環孢菌素A (CsA)、PSC833 (伐司撲達(Valspodar)))、DKK1抑制劑(例如，WAY-262611)、及WIF1抑制劑。
  290. 如前述請求項中任一項之醫藥組成物，其中該Shh途徑活化劑為SAG (CAS 912545-86-9)或SAG-HCl，並組合選自下列之一或多者的Wnt促效劑：SFRP1抑制劑(例如，WAY-316606)、SFRP2抑制劑、SFRP3抑制劑、SFRP4抑制劑、SFRP5抑制劑、環孢菌素或其類似物(例如，環孢菌素A (CsA)、PSC833 (伐司撲達(Valspodar)))、DKK1抑制劑(例如，WAY-262611)、及WIF1抑制劑。
  291. 如前述請求項中任一項之方法，其中在投予療法前，皮膚已變粗糙或受傷。
  292. 如前述請求項中任一項之方法，其中在施加療法前，有對皮膚施加一或多次針。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP7109446B2 (ja) * 2016-12-30 2022-07-29 フリークエンシー セラピューティクス インコーポレイテッド 幹細胞／前駆支持細胞の自己複製を誘導するための１ｈ－ピロール－２，５－ジオン化合物およびその使用方法
WO2020211772A1 (en) * 2019-04-16 2020-10-22 Versitech Limited Purmorphamine as a small compound positive allosteric modulator of secretin receptor for the treatment of hypertension
CN112390794B (zh) * 2019-08-19 2023-05-26 鲁南制药集团股份有限公司 一种米诺膦酸关键中间体的制备方法
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4813734B2 (ja) * 2000-03-31 2011-11-09 ザ ジェネラル ホスピタル コーポレイション 毛の成長を調節する方法
KR100974770B1 (ko) 2002-03-05 2010-08-06 일라이 릴리 앤드 캄파니 키나제 억제제로서의 퓨린 유도체
ES2641528T3 (es) * 2006-06-27 2017-11-10 Shiseido Company, Limited Masa celular capaz de servir como estructura de tipo órgano primitivo compuesta por una diversidad de tipos de células de origen somático
JPWO2010021245A1 (ja) * 2008-08-22 2012-01-26 学校法人慶應義塾 毛乳頭細胞の培養方法
US20120165270A1 (en) * 2009-04-27 2012-06-28 Yeon Sook Choi Inhibition of hair follicle growth by the wnt inhibitor dkk1
KR20140056990A (ko) * 2012-11-02 2014-05-12 경북대학교 산학협력단 바이칼린을 유효성분으로 포함하는 탈모 예방 또는 치료, 또는 발모 촉진용 조성물
KR101618349B1 (ko) * 2014-01-17 2016-05-04 주식회사 엘지생활건강 디하이드로안드로그라폴라이드를 포함하는 모발 성장 촉진용 화장료 또는 약학 조성물

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